WO2019156583A1 - Способ получения средства для лечения ран - Google Patents

Способ получения средства для лечения ран Download PDF

Info

Publication number
WO2019156583A1
WO2019156583A1 PCT/RU2018/000072 RU2018000072W WO2019156583A1 WO 2019156583 A1 WO2019156583 A1 WO 2019156583A1 RU 2018000072 W RU2018000072 W RU 2018000072W WO 2019156583 A1 WO2019156583 A1 WO 2019156583A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
water
mixture
soluble
aqueous mixture
alginic acid
Prior art date
Application number
PCT/RU2018/000072
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Вадим Борисович ГАВРИЛЮК
Иван Борисович ГАВРИЛЮК
Никита Вадимович ГАВРИЛЮК
Original Assignee
Вадим Борисович ГАВРИЛЮК
Иван Борисович ГАВРИЛЮК
Никита Вадимович ГАВРИЛЮК
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Вадим Борисович ГАВРИЛЮК, Иван Борисович ГАВРИЛЮК, Никита Вадимович ГАВРИЛЮК filed Critical Вадим Борисович ГАВРИЛЮК
Priority to PCT/RU2018/000072 priority Critical patent/WO2019156583A1/ru
Publication of WO2019156583A1 publication Critical patent/WO2019156583A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/18—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing inorganic materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/22—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
    • A61L15/28—Polysaccharides or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Definitions

  • the invention relates to medicine, including cosmetology, and is intended to obtain funds in the form of a gel based on water-soluble polysaccharides of plant origin, used to treat wounds and eliminate skin defects.
  • Such gels may also include antibiotics, antiseptic substances, anesthetics, vitamins, substances that affect cell regeneration, proteolytic substances (RU 2180856, 2194535), vegetable oils, glycerin (RU 2242217), plant extracts or a mixture of these substances, in an amount that provides therapeutic effect.
  • the method for producing such gel-based agents consists in preparing an aqueous solution of a water-soluble cellulose derivative, for example, methyl cellulose, or carboxymethyl cellulose, or a mixture of these components, into which, with constant stirring, water-soluble plant-derived polysaccharides containing anionic groups and forming polyanions in solution are introduced, for example, alginic acid, or a water-soluble salt of alginic acid, or carrageenan, or fucoidin, or zosterin, or pectin, or a mixture thereof in any combination x and ratios. If necessary, the desired drug is simultaneously administered.
  • the mixture is Packed in pre-prepared bottles or tubes and sterilized (RU 2180856, 2194535, RU 2454242, published 27.06. 2012).
  • the technical problem to which the invention is directed is to provide an opportunity during wound healing to better restore the internal structure of the skin and reduce the possibility of the formation of a rough scar by enhancing the healing properties of the gel.
  • Another challenge is to accelerate wound healing.
  • a method for producing a wound treatment in the form of a gel based on water-soluble polysaccharides of plant origin includes preparing an aqueous mixture of a cellulose derivative and a water-soluble polysaccharide containing anionic groups, followed by sterilization of the resulting mixture, in which, according to the invention, an aqueous a mixture of a water-soluble cellulose derivative is prepared separately, and an aqueous mixture of a water-soluble anion containing polysaccharide is also separately prepared s group, and only then the resulting mixture are combined in a common mixture, and for the preparation of an aqueous mixture of a water-soluble polysaccharide containing anionic groups take magnetized water, and as the polysaccharide containing anionic groups, charge, at least, alginic acid or a salt thereof.
  • water-soluble cellulose derivative As the water-soluble cellulose derivative, it is predominantly methyl cellulose or carboxymethyl cellulose or hydroxyethyl cellulose or a mixture thereof.
  • polysaccharide containing anionic groups and forming polyanions in solution at least one component selected from the group consisting of carrageenan, pectin, fucoidin, zosterin, gum arabic, red and / or brown algae extract, xanthan gum, tragacanth is additionally taken chitosan.
  • the polysaccharide containing anionic groups and forming polyanions in the solution one can also take any other water-soluble polysaccharides of plant origin, which are capable of forming non-toxic polyanions in the solution that can be used in medical practice.
  • the components for the implementation of the method can be taken in any ratio, resulting in a gel of any desired density, for example, in the following ratio, wt.%:
  • alginic acid or its water-soluble salt or a mixture of alginic acid or its water-soluble salt with another polysaccharide forming polyanions in the solution, 0.1-15.0,
  • At least one component selected from the group consisting of antibiotics, antiseptic substances, anesthetics, antioxidants, vitamins, provitamins, substances that affect cell regeneration, proteolytic substances, glycerin, vegetable oils, plant extracts, or a mixture of these substances in an amount that provides a therapeutic effect.
  • antibiotic you can enter, but not limited to, for example, lincomycin or gentamicin.
  • an antiseptic for example, miramistin, or chlorhexidine, or dioxidine, or colloidal silver, or a silver salt can be added, but not limited to.
  • ascorbic acid or aevit can be added, but not limited to.
  • methyluracil can be added, but not limited to this.
  • proteolytic substance for example, trypsin or chemotrypsin can be added, but not limited to.
  • Fragrance and / or preservative and / or surfactant may be added to the polysaccharide mixture, which are approved for use in medical practice.
  • the sterilization of the gel can be carried out, for example, by gamma radiation at a dose of 2.5 Mrad, or by autoclaving for 1 h at a temperature of 112 ° C and a pressure of 0.5 atm., Or under other acceptable conditions.
  • the gel obtained by the proposed method can also be used in cosmetology to eliminate skin defects.
  • the essence of the invention lies in the fact that experimentally it was found that the separate preparation of an aqueous mixture of a water-soluble derivative of cellulose and an aqueous mixture of alginic acid or its salt, and only after that combining them into a common mixture, leads to an increase in the possibility of restoring the internal structures of the skin, mainly cut wounds when using a polysaccharide gel for wound healing.
  • This wound healing property is enhanced by using magnetized water to prepare at least an aqueous mixture of alginic acid or its salt. At the same time, faster and more complete healing of the wound was found when using the gel obtained by the proposed method.
  • Fig. l A shows a photograph of a histological preparation (with an increase in x OO), which shows a cross-section of the scar area on the 28th day of treatment of a cut wound using a gel obtained in a known manner, as described in example 1;
  • Fig.l B also for another experimental individual;
  • Fig. 2 A is a photograph of a histological preparation (with an increase in x OO), which shows a cross-section of the scar area on the 28th day of treatment of a cut wound using a gel obtained as described in example 2; Fig.2 B - also for another experimental individual;
  • Fig.3 is a photograph of a histological preparation (with an increase in x OO), which shows a transverse section of the scar area on the 28th day of treatment of a cut wound using a gel obtained by the proposed method, as described in example 3; Fig.3 B - also for another experimental individual;
  • Fig. 4 is a photograph of a histological preparation (with an increase of c 100), which shows a cross section of a healed portion of the burn surface on the 28th day of treatment using a gel obtained by the proposed method as described in example 3; Fig. 4B - also for another experimental individual.
  • FIG. 5 shows photographs of a freshly applied “fresh” wound
  • Fig.6 is a photograph of this wound, showing its condition on the 7th day of healing using Levomekol ointment;
  • Fig.7 is a photograph of the same wound, showing its condition on the 7th day of healing using a gel obtained in a known manner, as described in example 1;
  • Fig. 8 is a photograph of a wound showing its condition on the 7th day when using a gel obtained for its healing, obtained as described in example 2;
  • Fig. 9 is a photograph of a wound showing its state on the 7th day when a gel obtained as described in Example 3 was used for its healing.
  • Fucoidin, F5631 (Reference “Reagents for Biochemistry and Research in the Field of Natural Sciences” SIGMA, 1999, p. 465);
  • Vitamins and provitamins - the Register of medicines of Russia, M., 1999;
  • the proposed method is as follows.
  • an aqueous mixture is prepared, at least alginic acid or its salt.
  • an aqueous mixture of a cellulose derivative is prepared - methyl cellulose, or carboxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, or a mixture of these components, for which distilled water or also magnetized distilled water is used. Then, with vigorous stirring, both mixtures are combined into a common one.
  • the calculated amount of other water-soluble plant-derived polysaccharides containing anionic groups and forming polyanions for example, carrageenan, or fucoidin, or zosterol, or pectin, or gum arabic, or red and / or red extract, is introduced into the aqueous mixture of alginic acid or its salt or brown algae, or a mixture of these polysaccharides in any combinations and ratios.
  • the desired therapeutic and / or cosmetological components are simultaneously administered.
  • the resulting product is Packed in pre-prepared bottles or tubes and sterilized, for example by gamma radiation at a dose of 2.5 Mrad, or by autoclaving for 1 hour at a temperature of 112 ° C and a pressure of 0.5 ATM.
  • a polysaccharide gel was prepared as described in example 1 of patent RU 2194535 - prototype, for which 1 liter of distilled water was taken, in which 50 g of carboxymethyl cellulose was dissolved. 1.5 g of sodium alginate was added to this mixture and mixed thoroughly to obtain a uniform aqueous mixture.
  • the resulting mass was Packed in sterile vials and sterilized by autoclaving for 1 hour at a temperature of 112 ° C and a pressure of 0.5 ATM.
  • a polysaccharide gel was prepared as follows: 1 liter of distilled water was taken, in about half of which 50 g of carboxymethyl cellulose was dissolved and thoroughly mixed to obtain a homogeneous aqueous mixture. 1.5 g of sodium alginate was added to the second half of the water and also thoroughly mixed to obtain a homogeneous aqueous mixture. Then, the resulting mixtures were combined with thorough stirring into a common mixture. The resulting mass was Packed and sterilized as described in example 1.
  • Example 1 a gel prepared as described in Example 1 (control 1) was applied to a cruciform wound of 4 experimental animals. Also, a gel prepared as described in Example 2 (control 2) was applied to a cruciform cut wound of the other 4 experimental animals. On the cut (4 individuals) and burn wounds (4 individuals) of the experimental animals, a gel was prepared, prepared by the proposed method, as described in example 3.
  • tissue samples were taken from all animals in the area of the scar formed at the wound healing site, from which histological preparations were prepared. All histological preparations were stained traditionally according to the well-known technique - Romeis B. Microscopic technique. M. Publ. Foreign literature, 1983, - 719s.
  • a scar was formed without the formation of an obvious tissue growth with complete restoration of the epidermis in the wound area.
  • the dermis in the scar region is represented by two layers, while the reticular dermis consists of cords of collagen fibers parallel to the skin surface. Hair follicles and sebaceous glands are absent.
  • Fig. 2A, B it is also seen that a scar has formed, which is poorly expressed and poorly visible, with a complete restoration of the epidermis in the wound area.
  • the dermis in the scar region is represented by two layers, while the reticular dermis consists of cords of collagen fibers parallel to the skin surface. Hair follicles are absent. Sebaceous glands are rare.
  • FIG. 7-9 show the state of the wound (Fig. 5) on the 7th day of healing using the gels obtained as described in examples 1-3 for its healing.
  • Levomekol ointment was used as a control sample (Fig. 6) of wound healing.
  • Example 3 About half of the water was treated in a magnetic field as described in Example 3. The indicated amounts of sodium alginate, zosporin, carrageenan, pectin were added to magnetized water and mixed thoroughly to obtain a homogeneous aqueous mixture.
  • methyl cellulose was added to the second half of the water and also thoroughly mixed to obtain a homogeneous aqueous mixture. Then, the resulting mixtures were combined with thorough stirring into a common mixture. The resulting mass was packaged in sterile vials and sterilized with gamma radiation at a dose of 2.5 Mrad.
  • a gel was prepared in a known manner, as described in example 1, for which 30 g of methyl cellulose was dissolved in 1 liter of distilled water, and the indicated amounts of sodium alginate, zosporin, carrageenan, and pectin were also added thereto. The resulting mass was also thoroughly mixed to obtain a homogeneous aqueous mixture, then it was packaged in sterile vials and sterilized with gamma radiation at a dose of 2.5 Mrad.
  • the obtained gel samples were tested on laboratory rats - males of the Wistar strain (4 individuals in total), which were inflicted with a cruciform cut wound as described above.
  • Example 3 About half of the water was treated in a magnetic field as described in Example 3. The indicated amounts of alginic acid and fucoidin were added to magnetized water and mixed thoroughly to obtain a homogeneous aqueous mixture.
  • a gel was prepared in a known manner: for which 20 g of hydroxyethyl cellulose was dissolved in 1 liter of distilled water, and the indicated amounts of alginic acid and fucoidin were also added thereto. The resulting mass was thoroughly mixed to obtain a homogeneous aqueous mixture, then it was Packed in sterile vials and sterilized by autoclaving, as described in example 1.
  • the obtained gel samples were tested on laboratory rats - males of the Wistar line (4 individuals in total), which were inflicted with a cruciform cut wound as described above.
  • wound healing occurred on the 7th day.
  • control animals on the wounds of which were applied a gel obtained in a known manner, wound healing occurred on the 10th day.
  • the gel obtained by the proposed method provides, on the one hand, the best results in the restoration of newly formed inner layers of the dermis, which become almost completely complete.
  • the maximum restoration of the inner layers of the dermis is especially necessary in open areas of the body, for example on the face of patients.
  • the use of the gel obtained by the proposed method allows to accelerate wound healing.
  • the method improves the wound healing properties of the gel, which ensures the restoration of the newly formed inner layers of the dermis, which become almost completely full, and allows to accelerate wound healing.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины и косметологии. Предложен способ получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, который заключается в том, что отдельно готовят водную смесь водорастворимого производного целлюлозы и также отдельно готовят водную смесь водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, затем полученные смеси соединяют в общую смесь, причем для приготовления водной смеси полисахарида, содержащего анионные группы берут омагниченную воду, а в качестве такого полисахарида берут, по меньшей мере, альгиновую кислоту или ее соль. Способ позволяет получить гель, имеющий более высокую ранозаживляющую активность и обеспечивающий более быстрое заживление раны и восстановление внутренних структур кожи в области рубца.

Description

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАН
Область техники
Изобретение относится к медицине, в том числе и косметологической, и предназначено для получения средства в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, используемого для лечения ран и устранения дефектов кожи.
- Предшествующий уровень техники
В медицине давно стоит проблема получения искусственных материалов, которые можно использовать в качестве временных раневых покрытий, достаточно дешевых и простых в изготовлении, обладающих необходимыми физико-химическими свойствами - хорошо адгезирующими к свежей и мокнущей ране, и образующими непосредственно на ране эластичное паропроницаемое покрытие, не требующее дополнительной фиксации.
В настоящее время наиболее удачно решают эту проблему покрытия, выполненные в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, включающие, по меньшей мере, водорастворимое производное целлюлозы, водорастворимый полисахарид растительного происхождения, содержащий анионные группы и образующий в растворе полианионы, и воду (патенты RU 2180856, опубликованный 27.03.2002, RU 2194535, опубликованный 20.12.2002, RU 2242217, опубликованный 20.12.2004). Такие гели могут также включать антибиотики, антисептические вещества, анестетики, витамины, вещества, воздействующие на регенерацию клеток, протеолитические вещества (RU 2180856, 2194535), растительные масла, глицерин (RU 2242217), растительные экстракты или смесь этих веществ, в количестве, обеспечивающем терапевтическое действие. Способ получения таких средств в виде геля заключается в том, что готовят водный раствор водорастворимого производного целлюлозы, например, метилцеллюлозы, или карбоксиметилцеллюлозы или смеси этих компонентов, в который при постоянном перемешивании вводят водорастворимые полисахариды растительного происхождения, содержащие анионные группы и образующие в растворе полианионы, например, альгйновую кислоту, или водорастворимую соль альгиновой кислоты, или каррагенан, или фукоидин, или зостерин, или пектин, или их смесь в любых сочетаниях и соотношениях. При необходимости одновременно вводят желаемое лекарственное средство. Смесь фасуют в заранее подготовленные флаконы или тубы и стерилизуют (RU 2180856, 2194535, RU 2454242, опубликованный 27.06. 2012).
Другой способ получения таких средств заключается в том, что необходимые полисахариды, включающие водорастворимое производное целлюлозы и водорастворимый полисахарид растительного происхождения, содержащий анионные группы и образующий в растворе полианионы, смешивают при постоянном перемешивании с небольшим количеством воды до их растворения. В полученный раствор при постоянном перемешивании вводят, при необходимости, остальные компоненты и оставшееся количество воды. Смесь фасуют в заранее подготовленные флаконы или тубы и стерилизуют (RU 2242217).
Получаемые этими способами гели хорошо зарекомендовали себя при лечении ран (патент RU 2386436, опубликованный 20.04.2010).
Тем не менее, было установлено, что в случае наличия раны, преимущественно резаной, затрагивающей внутренние структуры кожи, такие как сосочковый слой дермы, фолликулы и сальные железы, гели, получаемые известными способами, не обеспечивают полного восстановления внутренней структуры кожи. На гистологических образцах наблюдается сплошной массив соединительной ткани, а внутренние структуры кожи отсутствуют, или их очень мало. Это свидетельствует о том, что вновь образованные внутренние слои не являются полноценными. Раскрытие изобретения
Техническая задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в обеспечении возможности при заживлении раны более качественного восстановления внутренней структуры кожи и уменьшения возможности образования грубого рубца, путем усиления заживляющих свойств геля.
Другая задача состоит в ускорении заживления раны.
Поставленные задачи решаются тем, что предлагается способ получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, включающий приготовление водной смеси производного целлюлозы и водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, с последующей стерилизацией полученной смеси, в котором, согласно изобретения, водную смесь водорастворимого производного целлюлозы готовят отдельно, и также отдельно готовят водную смесь водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, и только затем полученные смеси соединяют в общую смесь, причем для приготовления водной смеси водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, берут омагниченную воду, а в качестве полисахарида, содержащего анионные группы, берут, по меньшей мере, альгиновую кислоту или ее соль.
В качестве водорастворимого производного целлюлозы берут, преимущественно, метилцеллюлозу, или карбоксиметилцеллюлозу, или гидроксиэтилцеллюлозу, или их смесь.
Возможно использование омагниченной воды для приготовления водной смеси водорастворимого производного целлюлозы.
В качестве полисахарида, содержащего анионные группы и образующего в растворе полианионы, дополнительно берут, по меньшей мере, один компонент, выбранный из группы, включающей, каррагинан, пектин, фукоидин, зостерин, гуммиарабик, экстракт красных и/или бурых водорослей, ксантангам, трагакант, хитозан. В качестве полисахарида, содержащего анионные группы и образующего в растворе полианионы, можно также брать любые другие водорастворимые полисахариды растительного происхождения, обладающие свойством образовывать в растворе полианионы, нетоксичные, которые можно применять в медицинской практике.
Компоненты для осуществления способа можно брать в любом соотношении, приводящем к получению геля любой желаемой плотности, например, в следующем соотношении, мас.%:
водорастворимое производное целлюлозы - 1,0-15,0,
альгиновая кислота или ее водорастворимая соль, или смесь альгиновой кислоты или ее водорастворимой соли с иным полисахаридом, образующим в растворе полианионы, - 0,1-15,0,
дополнительный терапевтический и/или косметологический компонент - 0-10,0,
вода - остальное.
Возможна предварительная обработка полисахаридов этиловым спиртом, предпочтительно в концентрации 32-96% в течение 5-50 мин.
В смесь полисахаридов можно дополнительно вносить, по меньшей мере, один компонент, выбранный из группы, включающей антибиотики, антисептические вещества, анестетики, антиоксиданты, витамины, провитамины, вещества, воздействующие на регенерацию клеток, протеолитические вещества, глицерин, растительные масла, растительные экстракты или смесь этих веществ, в количестве, обеспечивающем терапевтическое действие.
В качестве антибиотика можно вносить, но не ограничиваться ими, например, линкомицин или гентамицин.
В качестве антисептика можно вносить, например, мирамистин, или хлоргексидин, или диоксидин, или коллоидное серебро, или соль серебра, но не ограничиваться ими.
В качестве витамина можно вносить, например, аскорбиновую кислоту или аевит, но не ограничиваться ими. В качестве вещества, воздействующего на регенерацию клеток, можно вносить, например, метилурацил, но не ограничиваться этим.
В качестве протеолитического вещества можно вносить, например, трипсин или хемотрипсин, но не ограничиваться ими.
В смесь полисахаридов можно дополнительно вносить отдушку, и/или консервант, и/или поверхностно-активное вещество, разрешенные для применения в медицинской практике.
Стерилизацию геля можно проводить, например, гамма-излучением дозой 2,5 Мрад, или автоклавированием в течение 1 ч при температуре 112°С и давлении 0,5 атм., или при других приемлемых условиях.
Получаемый предлагаемым способом гель возможно использовать также и в косметологии для устранения дефектов кожи.
Сущность изобретения заключается в том, что экспериментальным путем было установлено, что раздельное приготовление водной смеси водорастворимого производного целлюлозы и водной смеси альгиновой кислоты или ее соли, и только после этого объединение их в общую смесь, приводит к увеличению возможности восстановления внутренних структур кожи, преимущественно резаных ран, при использовании полисахаридного геля для заживления ран. Это ранозаживляющее свойство усиливается при использовании омагниченной воды для приготовления, по меньшей мере, водной смеси альгиновой кислоты или ее соли. При этом неожиданным оказалось более быстрое и полноценное заживление раны при использовании геля, полученного предлагаемым способом.
Краткое описание иллюстраций.
Для лучшего понимания изобретения ниже приведены примеры конкретного осуществления предлагаемого способа со ссылками на прилагаемые иллюстрации, где: на Fig. l А приведена фотография гистологического препарата (при увеличении х ЮО), на которой представлен поперечный срез области рубца на 28-ые сутки лечения резаной раны с помощью геля, полученного известным способом, как описано в примере 1 ; Fig.l В - тоже для другой экспериментальной особи;
на Fig.2 А - фотография гистологического препарата (при увеличении х ЮО), на которой представлен поперечный срез области рубца на 28-ые сутки лечения резаной раны с помощью геля, полученного, как описано в примере 2; Fig.2 В - тоже для другой экспериментальной особи;
на Fig.3 - фотография гистологического препарата (при увеличении х ЮО), на которой представлен поперечный срез области рубца на 28-ые сутки лечения резаной раны с помощью геля, полученного предлагаемым способом, как описано в примере 3; Fig.3 В - тоже для другой экспериментальной особи;
на Fig.4- фотография гистологического препарата (при увеличении c 100), на которой представлен поперечный срез зажившего участка ожоговой поверхности на 28-ые сутки лечения с помощью геля, полученного предлагаемым способом как описано в примере 3; Fig.4 В - тоже для другой экспериментальной особи.
Все гистологические препараты окрашены традиционно по известной методике - Ромейс Б. Микроскопическая техника. М. Изд. Иностранной литературы, 1983, - 719с.
на Fig.5 - представлены фотографии только что нанесенной, «свежей» раны;
на Fig.6 - фотография этой раны, показывающая её состояние на 7-ой день заживления с использованием мази Левомеколь;
на Fig.7 - фотография такой же раны, показывающая её состояние на 7- ой день заживления при использовании геля, полученного известным способом, как описано в примере 1 ; на Fig.8 - представлена фотография раны, показывающая её состояние на 7-ой день при использовании для её заживления геля, полученного, как описано в примере 2;
на Fig.9 - представлена фотография раны, показывающая её состояние на 7-ой день при использовании для её заживления геля, полученного, как описано в примере 3.
Примеры осуществления изобретения.
Для осуществления предлагаемого способа и получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения можно брать следующие компоненты:
- Метилцеллюлозу водорастворимую, М0262 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.694;
- Метилцеллюлозу водоростворимую марки МЦ-100, выпускаемую Производственным объединением "Химпром", г. Усолье-Сибирское (ТУ 6- 01-717-72 изм. 1,2,3);
- Карбоксиметилцеллюлозу, С5672 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.22;
- Альгиновую кислоту, А7003 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 2004-2005, с.116;
- Альгинат натрия, медицинский (ВФС 42-1680-87) или альгинат натрия, пищевой (ТУ 6-09-10-535), получаемые из бурых водорослей на Архангельском водорослевом комбинате;
- Альгинат натрия, А2033 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 2004-2005, с.116;
- Альгинат кальция (Thomas, S. "Use of calcium alginate dressing", Pharm. J., 1985, 235, p. 188).
- Каррагинан, Cl 263 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 2004-2005, с.388; - Пектин, P9135 (из цитрусовых) - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.790;
- Гуммиарабик (GUM ARABIC), G9752 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.526;
Ксантангам (GUM XANTHAN), G1253 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.526;
- Трагакант (TRAGACANTH), G1128 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с.526;
Фукоидин, F5631 (Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с. 465);
Приемлемые лекарственные средства - Регистр лекарственных средств России, М., 1999;
- Глицерин (Glycerol), G7757 - Справочник "Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук" SIGMA, 1999, с. 509;
Витамины и провитамины - Регистр лекарственных средств России, М., 1999;
Растительные масла, разрешенные к медицинскому применению.
Приведенный выше список компонентов не является исчерпывающим. Для осуществления способа могут быть использованы и другие водорастворимые полисахариды растительного происхождения, и другие полисахариды, образующие в растворе полианионы, разрешенные к применению в медицинской практике, а также другие терапевтические компоненты.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
Готовят навески полисахаридов, количество которых рассчитывают исходя из желаемой плотности геля. Готовят омагниченную (намагниченную, то есть обработанную в магнитном поле) дистиллированную воду любым способом, например, в постоянном магнитном поле магнитотрона, путем пропускания её через магнитную воронку (http://andreybobkov.com/svoimi- rukami/magnitnaya-voronka-dlya-vody-svojstva-vody.html). Можно также использовать безреагентный магнитный умягчитель А032
(https://www.filter.ru/index.php?act=show&prod id=184), постоянные магниты с индукцией В = 150-200 мТл, или прибор для омагничивания воды МУМ-50 ЭДМА
http ://apteka.potrebitel .ru/?action=model_item&num_id=50&cat_id=473 &gud_id= 5860. С использованием омагниченной (намагниченной) воды готовят водную смесь, по меныней мере, альгиновой кислоты или её соли. Отдельно готовят водную смесь производного целлюлозы - метилцеллюлозы, или карбоксиметилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, или смеси этих компонентов, для чего используют дистиллированную воду или также омагниченную дистиллированную воду. Затем при интенсивном перемешивании обе смеси соединяют в общую. При необходимости, в водную смесь альгиновой кислоты или её соли вводят расчитанное количество других водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, содержащих анионные группы и образующих в растворе полианионы, например, каррагенана, или фукоидина, или зостерина, или пектина, или гуммиарабика, или экстракта красных и/или бурых водоросле, или смеси этих полисахаридов в любых сочетаниях и соотношениях. При необходимости одновременно вводят желаемые терапевтические и/или косметологические компоненты. Полученное средство фасуют в заранее подготовленные флаконы или тубы и стерилизуют, например гамма-излучением дозой 2,5 Мрад, или автоклавированием в течение 1 часа при температуре 112°С и давлении 0,5 атм.
Приводим примеры конкретного осуществления предлагаемого способа получения средства для лечения ран в виде геля.
Пример 1. (контроль 1)
Полисахаридный гель готовили, как описано в примере 1 патента RU 2194535 - прототип, для чего брали 1 л дистиллированной воды, в которой растворяли 50 г карбоксиметилцеллюлозы. В эту смесь вносили 1,5 г альгината натрия и тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси.
Полученную массу фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали автоклавированием в течение 1 часа при температуре 112°С и давлении 0,5 атм.
Пример 2. (контроль 2)
Полисахаридный гель готовили следующим образом: брали 1 л дистиллированной воды, в примерно половине которой растворяли 50 г карбоксиметилцеллюлозы и тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси. Во вторую половину воды вносили 1,5 г альгината натрия и также тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси. Затем полученные смеси соединяли при тщательном перемешивании в общую смесь. Полученную массу фасовали и стерилизовали, как описано в примере 1.
Пример 3.
Для осуществления предлагаемого способа брали 1 л дистиллированной воды. Примерно половину воды обрабатывали в магнитном поле в течение 1,5 часа в колбе, размещенной на плоском постоянном магните индукцией 200 мТл., при толщине слоя воды около 1см. В омагниченную воду вносили 1,5 г альгината натрия и тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси.
Во вторую половину воды вносили 50 г карбоксиметилцеллюлозы и также тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси. Затем полученные смеси соединяли при тщательном перемешивании в общую смесь. Полученную массу фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали, как описано в примере 1.
Для изучения заживления раны при использовании полисахаридных гелей были проведены эксперименты на крысах-самцах (всего 24 особи) линии Wistar возраст примерно 2 месяца, массой около 200 грамм, которым перед нанесением раны удаляли шерсть в области спины и обрабатывали место нанесения раны 0,05% раствором хлоргексидина. Рану наносили в стерильных условиях, под эфирным наркозом.
Все манипуляции с животными проводили согласно правилам, принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для исследований и других научных целей.
На спине 20-х особей в зоне между лопаток наносили скальпелем крестообразную резаную рану размером 2,0 х 1,5 см на глубину, соответствующую толщине кожного покрова. А на спине 4-х особей наносили ожоговую рану 2,0 х1,5 см.
Затем на крестоообразную резаную рану 4 - х экспериментальных животных накладывали гель, приготовленный как описано в примере 1 (контроль 1). Также на крестоообразную резаную рану других 4 - х экспериментальных животных накладывали гель, приготовленный, как описано в примере 2 (контроль 2). На резаные (4 особей) и ожоговые раны (4 особей) экспериментальных животных накладывали гель, приготовленный предлагаемым способом, как описано в примере 3.
На 28-ые сутки у всех животных в области рубца, образующегося в месте заживления раны, брали образцы ткани, из которых готовили гистологические препараты. Все гистологические препараты окрашивали традиционно по известной методике - Ромейс Б. Микроскопическая техника. М. Изд. Иностранной лит-ры, 1983, - 719с.
Фотографии типичных для каждой группы животных гистологических препаратов представлены на Fig. 1 -4.
Как видно на фото фиг. 1А, В, произошло образование рубца без образования явного нарастания ткани с полным восстановлением эпидермиса в раневой области. Дерма в области рубца представлена двумя слоями, при этом сетчатый слой дермы состоит из тяжей коллагеновых волокон, расположенных параллельно поверхности кожи. Волосяные фолликулы и сальные железы отсутствуют. На следующем фото Fig. 2 А, В также видно, что произошло образование рубца, который слабо выражен и плохо заметен, с полным восстановлением эпидермиса в раневой области. Дерма в области рубца представлена двумя слоями при этом сетчатый слой дермы состоит из тяжей коллагеновых волокон, расположенных параллельно поверхности кожи. Волосяные фолликулы отсутствуют. Сальные железы редки.
На фото Fig.3 А, В - можно заметить только отдельные слабовыраженные фрагменты рубца. Эпидермис в раневой области восстановлен, дерма представлена уплотненной соединительной тканью. Волокна параллельны поверхности кожи. Область рубцевания небольшая. В поле зрения в области рубца присутствуют волосяные фолликулы и сальные железы. Сосочковый слой дермы слабо выражен. Определяются новообразованные сосуды различного диаметра.
На фото Fig.4 А, В)- практически отсутствуют следы рубца, эпидермис восстановлен, дерма представлена разрыхленной соединительной тканью. Волокна ориентированы в разных направлениях. В поле зрения в области рубца присутствуют волосяные фолликулы и сальные железы. Сосочковый слой дермы хорошо выражен. Определяются новообразованные сосуды различного диаметра.
Фотографии (Fig. 7-9) показывают состояние раны (Fig. 5) на 7 - ой день заживления с использованием для её заживления гелей, полученных, как описано в примерах 1-3.
В качестве контрольного образца (Fig. 6) заживления раны использовали мазь левомеколь. Левомеколь
(htps://www.stada.ru/products/levomekol.html) известен в медицинской практике как наружное средство для лечения гнойных ран и язв на коже, инфицированных патогенной микрофлорой, травматических повреждений кожи, ожогов, трофических язв.
Таким образом, приведенные фактические материалы наглядно демонстрируют преимущества предлагаемого способа получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, позволяющего получить гель, имеющий более высокую ранозаживляющую активность и обеспечивающий более быстрое заживление, по сравнению с гелем, получаемым известным способом.
Пример 4.
Для осуществления предлагаемого способа брали 1 л дистиллированной воды ЗОг метилцеллюлозы, 20г альгината натрия, 2 г зоспорина, 2г каррагинана, 2г пектина
Примерно половину воды обрабатывали в магнитном поле также, как описано в примере 3. В омагниченную воду вносили указанные количества альгината натрия, зоспорина, каррагинана, пектина и тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси.
Во вторую половину воды вносили 30 г метилцеллюлозы и также тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси. Затем полученные смеси соединяли при тщательном перемешивании в общую смесь. Полученную массу фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали гамма- излучением дозой 2,5 Мрад.
Для контроля готовили гель известным способом, как описано в примере 1, для чего в 1 л дистиллированной воды растворяли 30 г метилцеллюлозы и сюда же вносили указанные количества альгината натрия, зоспорина, каррагинана, пектина. Полученную массу также тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси, затем её фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали гамма-излучением дозой 2,5 Мрад.
Полученные образцы гелей испытывали на лабораторных крысах - самцах линии Wistar (всего 4 особи) которым наносили крестообразную резаную рану также, как описано выше.
Наблюдение за заживлением ран показало, что у животных (2 особи), на раны которых наносили гель, полученный предлагаемым способом, заживление раны произошло на 8-ые сутки. У контрольных животных (2 особи), на раны которых наносили гель, полученный известным способом, заживление раны произошло на 1 1-ые сутки.
Пример 5
Для осуществления предлагаемого способа брали 1 л дистиллированной воды 20г гидроксиэтилцеллюлозы, Юг альгиновой кислоты и 0.8 г. фукоидина.
Примерно половину воды обрабатывали в магнитном поле также, как описано в примере 3. В омагниченную воду вносили указанные количества альгиновой кислоты и фукоидина, и тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси.
Во вторую половину воды вносили 20 г гидроксиэтилцеллюлозы и также тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси. Затем полученные смеси соединяли при тщательном перемешивании в общую смесь. Полученную массу фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали автоклавированием, как описано в примере 1.
Для контроля готовили гель известным способом: для чего в 1 л дистиллированной воды растворяли 20 г гидроксиэтилцеллюлозы и сюда же вносили указанные количества альгиновой кислоты и фукоидина. Полученную массу тщательно перемешивали для получения однородной водной смеси, затем её фасовали в стерильные флаконы и стерилизовали автоклавированием, как описано в примере 1.
Полученные образцы гелей испытывали на лабораторных крысах - самцах линии Wistar (всего 4 особи), которым наносили крестообразную резаную рану также, как описано выше.
Наблюдение за заживлением ран показало, что у животных (2 особи), на раны которых наносили гель, полученный предлагаемым способом, заживление раны произошло на 7-ые сутки. У контрольных животных (2 особи), на раны которых наносили гель, полученный известным способом, заживление раны произошло на 10-ые сутки.
Использовали средство, полученное предлагаемым способом (примеры 3, 4, 5), для устранения дефектов кожи, в частности, лечения телеангиоэктазий и устранения морщин на лице путем регулярного нанесения геля на кожу лица в течение 2-х месяцев. Отмечено стойкое улучшение внешнего вида кожи лица, капиллярная сетка стала практически невидимой, сгладились глубокие морщины.
Как видно из представленных материалов полученный предлагаемым способом гель обеспечивает, с одной стороны, наилучшие результаты восстановления вновь образующихся внутренних слоёв дермы, которые становятся практически полностью полноценными. Максимальное восстановление внутренних слоёв дермы особенно необходимо на открытых участках тела, например на лице пациентов. Кроме того применение геля, получаемого предлагаемым способом, позволяет ускорить заживление раны.
Промышленная применимость
Приведенные примеры конкретного выполнения подтверждают, что предлагаемый способ получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения является осуществимым в соответствии с описанием.
Способ позволяет улучшить ранозаживляющие свойства геля, что обеспечивает восстановление вновь образующихся внутренних слоёв дермы, которые становятся практически полностью полноценными, и позволяет ускорить заживление раны.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ получения средства для лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения, включающий приготовление водной смеси производного целлюлозы и водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, и стерилизацию полученной смеси, отличающийся тем, что отдельно готовят водную смесь водорастворимого производного целлюлозы и также отдельно готовят водную смесь водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, затем полученные смеси соединяют в общую смесь, причем для приготовления водной смеси водорастворимого полисахарида, содержащего анионные группы, берут омагниченную воду, а в качестве полисахарида, содержащего анионные группы, берут, по меньшей мере, альгиновую кислоту или ее соль.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве водорастворимого производного целлюлозы берут преимущественно метилцеллюлозу, или гидроксиэтилцеллюлозу, или карбоксиметилцеллюлозу, или их смесь.
3. Способ по п.1 , отличающийся тем, что в водную смесь альгиновой кислоты или ее соли дополнительно вносят компонент, выбранный из группы, включающей, каррагинан, пектин, фукоидин, зостерин, гуммиарабик, экстракт красных и/или бурых водорослей, ксантангам, трагакант, хитозан, или их смесь в любом сочетании и соотношении.
4. Способ по п.1 , отличающийся тем, что в смесь полисахаридов дополнительно вносят, по меньшей мере, один терапевтический компонент, выбранный из группы, включающей антибиотики, антисептические вещества, анестетики, витамины, антиоксиданты, вещества, воздействующие на регенерацию клеток, протеолитические вещества, растительные масла, растительные экстракты, в количестве, обеспечивающем терапевтическое действие.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что компоненты для осуществления способа берут, например, в следующем соотношении, мас.%:
водорастворимое производное целлюлозы - 1,0-15,0, альгиновая кислота или ее водорастворимая соль, или смесь альгиновой кислоты или ее водорастворимой соли с иным полисахаридом, образующим в растворе полианионы, - 0,1-15,0, дополнительный терапевтический и/или косметологический компонент -
0-10,0,
вода - остальное
PCT/RU2018/000072 2018-02-07 2018-02-07 Способ получения средства для лечения ран WO2019156583A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2018/000072 WO2019156583A1 (ru) 2018-02-07 2018-02-07 Способ получения средства для лечения ран

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2018/000072 WO2019156583A1 (ru) 2018-02-07 2018-02-07 Способ получения средства для лечения ран

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2019156583A1 true WO2019156583A1 (ru) 2019-08-15

Family

ID=67549011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2018/000072 WO2019156583A1 (ru) 2018-02-07 2018-02-07 Способ получения средства для лечения ран

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2019156583A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110229755A (zh) * 2019-06-17 2019-09-13 昆明理工大学 一种利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2145496C1 (ru) * 1997-10-06 2000-02-20 Девятов Валентин Александрович Мазь девятова в.а. для лечения ран
RU2194535C2 (ru) * 2001-02-08 2002-12-20 Гаврилюк Борис Карпович Средство для лечения ран

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2145496C1 (ru) * 1997-10-06 2000-02-20 Девятов Валентин Александрович Мазь девятова в.а. для лечения ран
RU2194535C2 (ru) * 2001-02-08 2002-12-20 Гаврилюк Борис Карпович Средство для лечения ран

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110229755A (zh) * 2019-06-17 2019-09-13 昆明理工大学 一种利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8524271B2 (en) Skin wound dressing and preparing method thereof
CN103394116B (zh) 一种可促进伤口愈合的水凝胶敷料及其制备方法
CN102600494B (zh) 一种多糖组合物及其制备方法和用途
JPH05503733A (ja) メチルピロリジノンキトーサン、その生産方法および使用
CN104368031A (zh) 一种医用抗菌敷料及其制备方法
KR20120022930A (ko) 은 설파디아진 및 키토산을 사용하여 제조한 약용 크림 및 이의 제조 방법
Khorasani et al. The effects of Aloe Vera cream on split-thickness skin graft donor site management: a randomized, blinded, placebo-controlled study
JP2020138956A (ja) 魚類受精卵抽出物を含有する医薬組成物、皮膚コラーゲン増殖促進剤、薬用化粧品、傷口ドレッシング剤及び抗酸化剤、ならびに魚類受精卵抽出物の用途
CN111481735A (zh) 一种医用抗菌护创水凝胶敷料及其制备方法
CN113520896A (zh) 一种具有祛痘和修复痘印功能的组合物及制备方法
RU2454242C1 (ru) Способ получения средства для устранения дефектов кожи и лечения ран в виде геля на основе водорастворимых полисахаридов растительного происхождения
WO2007091801A1 (en) A sheet device comprising bio-cellulose for alleviating skin damage and relieving skin problem
CN108686103B (zh) 一种止血中药组合物以及多功能紧急止血复合材料
RU2699362C2 (ru) Композиция на основе наночастиц диоксида церия и полисахаридов бурых водорослей для лечения ран
WO2020180202A1 (ru) Композиция на основе наночастиц диоксида церия и полисахаридов бурых водорослей для лечения ран
CN1194777C (zh) 一种人工皮肤及其制备方法和用途
CN109700747A (zh) 一种具有皮肤修复功能的护肤组合物及其制备方法
WO2019156583A1 (ru) Способ получения средства для лечения ран
CN1327828A (zh) 一种消炎、收敛、生肌创可贴及其制作方法
KR101904196B1 (ko) 피부 상처 치료 조성물
CN103191163B (zh) 一种皮肤创面修复药物组合物
KR101576244B1 (ko) 알로인을 함유하는 하이드로겔 기반의 창상피복제용 조성물과 이의 제조방법
RU2647458C1 (ru) Ранозаживляющая, противовоспалительная мазь на основе чайного гриба (medusomyces gisevii lindau)
CN114452435B (zh) 一种能够快速生效的高亲和液体敷料
TWI754279B (zh) 用以產生人工痂皮的傷口修復套組

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 18905592

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 04.12.2020)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 18905592

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1