WO2018084321A1 - Ｅｇｆｒ阻害及び腫瘍治療に有用な新規化合物 - Google Patents

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彰夫 王子田
眞弓 小野
公佑 渡
直哉 進藤
大和 渕田
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国立大学法人九州大学
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    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Definitions

  • the present invention relates to a novel compound useful for EGFR inhibition and tumor treatment. Specifically, it relates to a novel compound with improved target specificity as a covalent inhibitor for EGFR.
  • covalent drugs that irreversibly inhibit protein function through covalent bond formation have been developed so far in drug discovery research.
  • the most representative covalent drugs are known as aspirin and ⁇ -lactam antibiotics.
  • compounds targeting various receptors and enzymes have been developed as drugs. Used in disease areas.
  • a covalent drug has excellent advantages such as the formation of a covalent bond that enables the expression of a sustained and strong inhibitory ability. So far, the development of covalent drugs has generally tended to be avoided by pharmaceutical companies due to concerns about side effects based on non-specific reactions (off-target labeling).
  • Non-Patent Document 1 Cravatt, BF et al., Nature Chem. Biol., Vol.10, p.760-767, 2014).
  • the present invention has been made in view of the above situation, and the following compounds, or pharmacologically acceptable salts, pharmaceutical compositions or reagents, EGFR inhibitors, tumor treatment kits, and The present invention provides a method for treating tumors.
  • L 1 represents a linker part
  • R 1 represents a hydrogen atom or an optionally substituted hydrocarbon group, and optionally may form a ring structure with a part of L 1
  • R 2 and R 3 each independently represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted
  • m and n each independently represents an integer of 0 to 2.
  • the linker moiety is a single bond, or —R L1 —NH— or —R L1 —CO—NH— (wherein R L1 represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted. Or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • L 2 represents a linker portion
  • R 4 represents a hydrogen atom or an optionally substituted hydrocarbon group, and optionally may form a ring structure with a part of L 2
  • R 5 each independently represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted
  • p represents an integer of 0-2.
  • the linker portion represents a single bond or —R L2 —NH— (wherein R L2 represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted), (3 ) Or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • the compound represented by the formula (I) is at least one selected from the group consisting of compounds represented by the following structural formula, or the compound described in (1) or (2), or a pharmacologically thereof Acceptable salt.
  • the compound represented by the formula (II) is at least one selected from the group consisting of compounds represented by the following structural formulas, or a pharmacological compound thereof: Acceptable salt.
  • a pharmaceutical composition comprising as an active ingredient the compound according to any one of (1) to (6) above, or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a hydrate or solvate thereof. Product or reagent.
  • the tumor is lung cancer, breast cancer, prostate cancer, head cancer, neck cancer, skin cancer, ovarian cancer, endometrial cancer, thyroid cancer, colon cancer, rectal cancer, Said (8), which is at least one selected from the group consisting of esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer.
  • the pharmaceutical composition or reagent described is at least one selected from the group consisting of esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer.
  • the pharmaceutical composition or reagent described The pharmaceutical composition or reagent described.
  • the pharmaceutical composition or reagent according to (8) or (9) above, wherein the tumor is non-small cell lung cancer.
  • EGFR inhibition comprising as an active ingredient the compound according to any one of (1) to (6) above, or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a hydrate or solvate thereof
  • the tumor is lung cancer, breast cancer, prostate cancer, head cancer, neck cancer, skin cancer, ovarian cancer, endometrial cancer, thyroid cancer, colon cancer, rectal cancer, Said (13), which is at least one selected from the group consisting of esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer. ) Use as described.
  • a tumor treatment kit comprising the compound according to any one of (1) to (6) above, or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a hydrate or solvate thereof.
  • the tumor is lung cancer, breast cancer, prostate cancer, head cancer, neck cancer, skin cancer, ovarian cancer, endometrial cancer, thyroid cancer, colon cancer, rectal cancer, Said (16), which is at least one selected from the group consisting of esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer.
  • a method for treating a tumor. (20) The tumor is lung cancer, breast cancer, prostate cancer, head cancer, neck cancer, skin cancer, ovarian cancer, endometrial cancer, thyroid cancer, colon cancer, rectal cancer,
  • the aforementioned (19) which is at least one selected from the group consisting of esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer. ) Described method.
  • L 1 represents a linker moiety.
  • the structure of the linker portion an arbitrary structure can be adopted, and preferably a single bond, or —R L1 —NH— or —R L1 —CO—NH— is exemplified.
  • R L1 is not limited, for example, an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted is preferable. Particularly preferred are a portion corresponding to L 1 in the structures of various compounds listed in Table A in Example 1 described later, or a portion optionally substituted.
  • R 1 represents a hydrogen atom or an optionally substituted hydrocarbon group, and may optionally form a ring structure with a part of L 1 .
  • Particularly preferable examples include a portion corresponding to R 1 in the structures of various compounds listed in Table A in Example 1, which will be described later, or a portion optionally substituted.
  • R 2 independently represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted, and preferably —NH—R 21 is exemplified.
  • R 21 there is no limitation, and for example, an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted is preferable, and an aryl group (for example, phenyl) which may be optionally substituted is more preferable. Group) and a heterocyclic group.
  • R 3 each independently represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted, and preferably —O—R 31 is exemplified.
  • R 31 there is no limitation, and for example, an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted is preferable, more preferably an optionally substituted hydrocarbon group or heterocarbon. Examples thereof include a hydrogen group, or a part of which forms a ring structure.
  • L 2 represents a linker moiety.
  • the structure of the linker moiety an arbitrary structure can be adopted, and preferably a single bond or —R L2 —NH— is exemplified.
  • R L2 is not limited, for example, an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted is preferable.
  • Particularly preferable examples include a portion corresponding to L 2 in the structures of various compounds listed in Table B in Example 2 described later, or a portion optionally substituted.
  • R 4 represents a hydrogen atom or an optionally substituted hydrocarbon group, and may optionally form a ring structure with a part of L 2 .
  • Particularly preferable examples include a portion corresponding to R 4 in the structures of various compounds listed in Table B in Example 2 described later, or a portion optionally substituted.
  • R 5 each independently represents an organic group having an arbitrary structure which may be optionally substituted, and is preferably a halogen group, an optionally substituted hydrocarbon group, or an optionally substituted A heterocyclic group (for example, an indole group) and an aryl group.
  • Particularly preferable examples include a portion corresponding to R 5 in the structures of various compounds listed in Table B in Example 2 described later, or a portion optionally substituted.
  • p represents an integer of 0 to 2, and is preferably 1 or 2.
  • specific examples of the compound represented by the formula (I) are not limited, but preferred examples include compounds represented by the following structural formula.
  • the compound currently listed by Table A in Example 1 mentioned later can also be referred.
  • a compound having the following structural formula an NS-062 compound in this example
  • specific examples of the compound represented by the formula (II) are not limited, but preferred examples include compounds represented by the following structural formula.
  • the compound currently listed by Table B in Example 2 mentioned later can also be referred.
  • a compound having the following structural formula (NSP-037 compound in this example) is preferable.
  • the compound of the present invention may be in the form of a pharmacologically acceptable salt of each compound described above.
  • the pharmacologically acceptable salt of the compound of the present invention is not limited, and examples thereof include hydrohalide salts (for example, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, etc.), inorganic Acid salts (eg, sulfate, nitrate, perchlorate, phosphate, carbonate, bicarbonate, etc.), organic carboxylates (eg, acetate, trifluoroacetate, maleate, tartrate) , Fumarate, and citrate), organic sulfonates (eg, methanesulfonate, trifluoromethanesulfonate, ethanesulfonate, benzenesulfonate, toluenesulfonate, and camphorsulfonate) Amino acid salts (for example, aspartate and glutamate), quaternary amine salts, alkali metal salts (for example, sodium salt and potassium salt), alkali Earth metal salts (such as magnesium and
  • the compounds of the present invention also include derivatives thereof.
  • the derivative is not particularly limited as long as it is considered as a derivative of the compound of the present invention based on the common general knowledge of those skilled in the art, such as having a chemical structure derived from the compound of the present invention, and examples thereof include EGFR inhibitory activity and It is preferable that the therapeutic effect of the tumor is comparable to that of the compound of the present invention.
  • the compounds and derivatives thereof of the present invention include, for example, those that undergo metabolism such as oxidation, reduction, hydrolysis, or conjugation in vivo, as well as those that undergo metabolism such as oxidation, reduction, or hydrolysis in vivo. Also included are compounds that form dasatinib and its derivatives (so-called prodrugs).
  • a prodrug refers to a compound that is pharmacologically acceptable and is obtained by modifying a parent compound with a group that is usually used in a prodrug. For example, it has properties such as improved stability and durability. It refers to a compound that can be expected to be converted into a parent compound in the intestinal tract and the like to exert its effect.
  • a prodrug of the compound of the present invention can be converted into a prodrug-forming group (for example, a hydroxyl group, an amino group, other group) in the compound by a conventional method using a corresponding prodrug reagent such as a halide.
  • a group constituting a prodrug is appropriately introduced into one or more arbitrary groups selected from (Group), and then, if necessary, it can be produced by isolation and purification.
  • the group constituting the prodrug is not limited, but examples thereof include lower alkyl-CO-, lower alkyl-O-lower alkylene-CO-, lower alkyl-OCO-lower alkylene-CO-, and lower alkyl.
  • Preferred examples include -OCO- and lower alkyl-O-lower alkylene-OCO-.
  • the compound of the present invention includes all isomers (for example, geometric isomers, optical isomers based on asymmetric carbon, rotational isomers, stereoisomers, tautomers, etc.) It includes a mixture of two or more of these isomers and is not limited to the description of the structural formula for convenience.
  • the compound of the present invention may be any of S-form, R-form and RS-form, and is not limited.
  • the compound of the present invention may exist in the form of a hydrate or a solvate depending on the type, and in the present invention, the hydrate and solvate are also included in the compound of the present invention.
  • compositions and reagent of the present invention can be used as a pharmaceutical composition and reagent of the present invention, which will be described later, or as an active ingredient of an EGFR inhibitor.
  • an EGFR inhibitor for example, the solvate with ethanol etc. are mentioned.
  • Pharmaceutical composition, EGFR inhibitor, etc. As described above, the pharmaceutical composition or reagent of the present invention and the EGFR inhibitor of the present invention are the compound of the present invention, or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a salt thereof.
  • a hydrate or solvate (hereinafter sometimes referred to as “the compound of the present invention”) is contained as an active ingredient.
  • the reagent include a research reagent.
  • the “pharmaceutical composition of the present invention” may include the reagent. Although it does not limit as a pharmaceutical composition of this invention, The pharmaceutical composition for treatment of a tumor is preferable.
  • the present invention also relates to (i) a method for treating a tumor or a method for inhibiting EGFR, comprising using the compound of the present invention, specifically, for example, administering an effective amount of the compound of the present invention to a subject. , (Ii) use of a compound of the present invention for producing a drug for treating the tumor or an EGFR inhibitor, (iii) use of a compound of the present invention for treating the tumor or inhibiting EGFR, etc. And (iv) the compound of the present invention for treating the tumor or inhibiting EGFR.
  • the treatment of the tumor specifically includes, for example, suppression of progression of treatment of the tumor, improvement of prognosis, and / or prevention of recurrence.
  • the tumor to be treated is not limited, but lung cancer, breast cancer, prostate cancer, head cancer, neck cancer, skin cancer, ovarian cancer, endometrial cancer, thyroid gland. Selected from the group consisting of cancer, colon cancer, rectal cancer, esophageal cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, bladder cancer, pancreatic cancer, brain tumor, spinal cord tumor, blood cancer, and bone cancer Preferably at least one selected from the above.
  • examples of lung cancer include non-small cell lung cancer and small cell lung cancer, but non-small cell lung cancer is more preferable.
  • the content ratio of the compound of the present invention as an active ingredient is not limited and can be appropriately set.
  • the pharmaceutical composition and EGFR inhibitor It can be in the range of 0.01 to 99% by weight, preferably 0.01 to 30% by weight, more preferably 0.05 to 20% by weight, and still more preferably 0.1 to 99% by weight. It may be within the range of 10% by weight.
  • the pharmaceutical composition and the EGFR inhibitor of the present invention can sufficiently exhibit the tumor therapeutic effect and EGFR inhibitory ability.
  • the pharmaceutical composition and EGFR inhibitor of the present invention may contain other components in addition to the compound of the present invention and the like as long as the effects of the present invention are not significantly impaired.
  • a general chemotherapeutic agent such as cisplatin and paclitaxel
  • an anti-EGFR monoclonal antibody such as cetuximab and panitumumab
  • a MEK inhibitor such as cobimetinib and trametinib
  • an AKT inhibitor such as AZD5356
  • anti-HER3 monoclonal antibody, anti-ErbB3 monoclonal antibody, and anti-IGF-1R monoclonal antibody known as or being developed as an anti-IGF-1R monoclonal antibody can be used in combination .
  • the pharmaceutical composition and EGFR inhibitor of the present invention can include, for example, those generally used in the manufacture of drugs described below.
  • the pharmaceutical composition and EGFR inhibitor of the present invention can be administered in various ways to human or non-human mammals (eg, rats, rabbits, sheep, pigs, cows, cats, dogs, monkeys, etc.) as test subjects. It can be administered by the route, specifically oral or parenteral (for example, intravenous injection (intravenous injection), intramuscular injection, intraperitoneal injection, subcutaneous injection, rectal administration, transdermal administration). Therefore, the compound of the present invention used in the present invention can be used alone, but can be formulated into an appropriate dosage form using a pharmaceutically acceptable carrier by a method commonly used depending on the administration route. Can be used.
  • Examples of the dosage form include oral tablets, such as tablets, powders, fine granules, granules, coated tablets, capsules, liquids for internal use, suspensions, emulsions, syrups, and lozenges.
  • oral preparations include injections (including drops), inhalants, ointments, nasal drops, and liposomes.
  • the pharmaceutical composition and EGFR inhibitor of this invention can also be utilized as a supplement agent (for example, corresponds to a functional food) depending on the case.
  • Carriers that can be used to formulate these preparations include, for example, commonly used excipients, binders, disintegrants, lubricants, colorants, and flavoring agents, as well as stabilizers and emulsifiers as necessary. , Absorption enhancers, surfactants, pH adjusters, preservatives, antioxidants, extenders, wetting agents, surface activators, dispersants, buffers, preservatives, solubilizers, soothing agents, etc. It is possible to formulate by a conventional method by blending known ingredients that can be used as raw materials for pharmaceutical preparations.
  • Non-toxic substances that can be used as the component include, for example, animal and vegetable oils such as soybean oil, beef tallow and synthetic glycerides; hydrocarbons such as liquid paraffin, squalane and solid paraffin; octyldodecyl myristate and isopropyl myristate Ester oils such as: cetostearyl alcohol and higher alcohols such as behenyl alcohol; silicone resins; silicone oils; polyoxyethylene fatty acid esters, sorbitan fatty acid esters, glycerin fatty acid esters, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, and Surfactants such as polyoxyethylene-polyoxypropylene block copolymers; hydroxyethyl cellulose, polyacrylic acid, carboxyvinyl polymer, polyethylene glycol, polyethylene Water-soluble polymers such as vinylpyrrolidone and methylcellulose; lower alcohols such as ethanol and isopropanol; polyhydric alcohols (
  • excipients include lactose, fructose, corn starch, sucrose, glucose, mannitol, sorbitol, crystalline cellulose, and silicon dioxide.
  • binders include polyvinyl alcohol, polyvinyl ether, methyl cellulose, ethyl cellulose, and gum arabic.
  • xylcellulose hydroxypropylcellulose
  • polyvinylpyrrolidone polypropylene glycol polyoxyethylene block polymer, meglumine, etc.
  • disintegrants for example, starch, agar, gelatin powder, crystalline cellulose
  • lubricants include calcium carbonate, sodium bicarbonate, calcium citrate, dextrin, pectin, and carboxymethylcellulose / calcium.
  • the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention and the EGFR inhibitor is generally determined in consideration of the mixing ratio of the active ingredient (such as the compound of the present invention) in the preparation, and the age, weight, A wide range can be appropriately set in consideration of the disease type / progression, administration route, administration frequency (/ day), administration period, and the like.
  • the case where the pharmaceutical composition of the present invention and the EGFR inhibitor are used as a parenteral or oral preparation will be specifically described below.
  • the form is generally not limited, but in the case of various injections, for example, the state of a unit dose ampoule or a multi-dose container, or the state of a lyophilized powder that is redissolved in a solution at the time of use Can be provided at.
  • the parenteral agent may contain various known shaping materials and additives in a range that does not impair the effect of the active ingredient, depending on various forms. it can.
  • water, glycerol, propylene glycol, aliphatic polyalcohols such as polyethylene glycol, and the like can be mentioned.
  • the dose (per day) of the parenteral agent is not limited.
  • the weight of the subject of application (subjects, patients, etc.)
  • the amount can be taken 0.01 to 1000 mg, 0.05 to 500 mg, or 0.1 to 50 mg per kg, or the amount that can be taken 0.5 to 20 mg or the amount that can be taken 1 to 10 mg. it can.
  • its form is generally not limited, and any of the above-mentioned dosage forms may be used, or a dry product which is redissolved when used.
  • the oral preparation can contain various known shaping materials and additives according to various forms, as long as the effect of the active ingredient is not impaired. .
  • binder for example, binder (syrup, gum arabic, gelatin, sorbitol, tragacanth, polyvinylpyrrolidone, etc.), filler (lactose, sugar, corn starch, potato starch, calcium phosphate, sorbitol, glycine, etc.), lubricant (magnesium stearate, talc, Polyethylene glycol, silica, etc.), disintegrating agents (various starches, etc.), and wetting agents (sodium lauryl sulfate, etc.).
  • the dosage of oral preparation (per day) is generally 0.05 to 5000 mg, 0.1 to 1000 mg per kg body weight of the subject of application (subject, patient, etc.).
  • kits containing the compound of the present invention or the like are used. be able to.
  • the form of the compound of the present invention in the kit is not limited, but may be provided in a dissolved state, for example, in view of stability (storage stability) and ease of use.
  • the kit can appropriately contain other components in addition to the compound of the present invention.
  • the kit only needs to include at least the compound of the present invention described above as a constituent element. Therefore, all of the components essential for the treatment of the tumor may be provided together with the compound of the present invention, etc., or may be provided separately, without limitation. .
  • the present invention will be described more specifically with reference to examples. However, the present invention is not limited to these examples.
  • compound NS-058 having D-proline as a linker showed strong cell growth inhibitory activity against H1975 cells expressing EGFR having a T790M / L858R double mutation.
  • the activity of NS-067 as a linker with L-proline was very weak.
  • the selectivity of protein labeling was evaluated using NS-058 alkyne derivative and afatinib alkyne derivative which showed strong activity (FIG. 1). As a result, it was found that the NS-058 derivative having an ⁇ -chlorofluoroacetamide group reacts with EGFR very specifically.
  • afatinib derivatives with Michael acceptors were found to be non-specifically labeled against other proteins.
  • the results of the activities of NS-061 and NS-062 with improved water solubility of NS-058 and afatinib are summarized in FIG. 2 and Table 3.
  • NS-061 and NS-062 both had strong growth inhibitory activity against H1975 cells expressing EGFR having the T790M ⁇ L858R double mutation, and their IC50 values were almost the same as that of afatinib.
  • the growth inhibitory activity against A431 cells expressing NS-061 and NS-062 wild-type EGFR was weaker than that of afatinib.
  • Afatinib is known to have side effects such as diarrhea and skin disorders because of its inhibitory activity against wild-type EGFR. Therefore, NS-061 and NS-062 having a high activity ratio of A431 / H1975 may be able to reduce side effects more than afatinib.
  • NS-061 and NS-062 having a high activity ratio of A431 / H1975 may be able to reduce side effects more than afatinib.
  • NS-062 When H1975 cells were transplanted into nude mice and an oral administration test of NS-062 and afatinib (20 mg / kg, twice a day) was performed (FIG. 4), NS-062 was significantly compared with the control group. The tumor growth inhibitory effect was shown. The effect was afatinib and identification. Moreover, the weight loss rate of the mouse
  • a covalent drug having a third-generation pyridimine skeleton represented by osmeltinib is also being developed. So far, we have synthesized derivatives with various amino acids introduced as linkers between the chlorofluoroacetamide group and the pyrimidine ring and derivatives with various substituents introduced at the 5-position of the pyrimidine ring using the structure of osimertinib as a template. Structure activity relationships were performed.
  • each compound was evaluated based on the growth inhibitory activity against H1975 cells expressing T790M ⁇ L858R double mutant EGFR and A431 and H292 cells expressing wild type EGFR.
  • the compounds synthesized for use in the assay and evaluation in this example are listed in Table B at the end of Example 2.
  • the synthesis method of these compounds the synthesis method of the NSP-037 compound shown in Example 4 mentioned later is referred suitably.
  • a compound having L-alanine at the linker site shows high activity (Table 4)
  • a compound having a trifluoroacetyl group at the 5-position of the pyrimidine ring shows strong activity (Table). 5).
  • the compound NSP-037 finally obtained as a development candidate compound has a growth inhibitory activity against H1975 cells expressing T790M / L858R double mutant EGFR, while it is equivalent to Osimertinib, while against H292 cells expressing wild-type EGFR
  • the inhibitory activity was weak compared to Osimertinib. Therefore, NSP-037 with a high activity ratio of H292 / H1975 has the potential to reduce side effects more than osmeltinib.
  • Table B below shows a list of compounds synthesized for use in the assay / evaluation in this Example (some compounds have evaluation results).
  • the aqueous layer was extracted three times with ethyl acetate, and the collected organic layer was washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine. The organic layer was dried over sodium sulfate and filtered, and then the solvent was distilled off under reduced pressure.
  • the crude product was purified by silica gel column chromatography (5: 1 ethyl acetate-methanol) to give a yellow solid. This solid was dissolved in 200 mL of ethanol, 5.67 g (29.9 mmol) of tin (II) chloride was added, and the mixture was heated to reflux overnight.
  • Boc-D-proline (306 mg, 1.42 mmol), T3P (50% ethyl acetate solution, 1.15 mL, 2.82 mmol) and diisopropylethylamine (1.0 mL, 5.75 mmol) were added, and another 3 hours at room temperature. Stir. To this reaction solution, 20 mL of 4N hydrochloric acid-ethyl acetate solution was added and stirred at room temperature for 1 hour. After neutralization with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, the aqueous layer was extracted three times with ethyl acetate, and the collected organic layer was washed with saturated brine.
  • NS-062 (1.01 g, 1.62 mmol) was dissolved in 50 mL of ethyl acetate and 5 mL of methanol, 4N hydrochloric acid-ethyl acetate solution (1.6 mL, 6.4 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 15 min. After the solvent was distilled off under reduced pressure, diethyl ether was added. The precipitated solid was collected by suction filtration and dried by heating at 60 ° C. under vacuum to obtain 1.006 g of NS-062 dihydrochloride as a pale yellow solid in a 94% yield.
  • NSP-037 An NSP-037 compound (see also Table B above) was synthesized according to the following scheme. This will be described in detail below, including the procedure for synthesizing each intermediate.
  • NSP-037 compound (see also Table B above) was synthesized according to the following scheme. This will be described in detail below, including the procedure for synthesizing each intermediate.
  • the residue was purified by silica gel column chromatography (150: 10: 1 chloroform-methanol-24% aqueous ammonia) to obtain a yellow oily substance. This was dissolved in 1 mL of ethyl acetate, 4N hydrochloric acid-ethyl acetate solution (1.5 mL) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 30 min. The solution was basified with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, extracted twice with a mixed solvent of dichloromethane and isopropanol (4: 1), and the collected organic layer was washed with saturated brine.
  • the residue was purified by silica gel column chromatography (150: 10: 1 chloroform-methanol-24% aqueous ammonia), and the obtained oily substance was filtered through a PTFE membrane filter. This was dissolved in a small amount of ethyl acetate, hexane was added, and the precipitated solid was collected by filtration and dried under vacuum to obtain 20.0 mg of NSP-037 as a white solid in a 58% yield.
  • NSP-037 is a mixture of stereoisomers, and several peaks were observed in duplicate.
  • the present invention it is possible to provide a novel compound useful as a safe covalent drug with less side effects, so that the compound of the present invention is excellent as an EGFR inhibitor and as an active ingredient of a tumor therapeutic agent. And practicality.

Abstract

本発明は、マイケルアクセプターに代わる、より穏やかな反応性を有する反応基を探索し、これを用いて薬剤分子をデザインすることで、副作用の懸念の少ない安全なコバレントドラッグを開発することを目的とする。本発明は、例えば、下記式（Ｉ）：で示される化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩等に係るものである。

Description

ＥＧＦＲ阻害及び腫瘍治療に有用な新規化合物
　本発明は、ＥＧＦＲ阻害及び腫瘍治療に有用な新規化合物に関する。詳しくは、ＥＧＦＲに対するコバレント阻害剤として標的特異性が向上した新規化合物に関する。
　タンパク質機能を共有結合形成により不可逆的に阻害するコバレントドラッグは、長い創薬研究の中でこれまでに数多く開発されている。コバレントドラッグの最も代表的なものとしては、アスピリンやβ−ラクタム系抗生物質などが知られているが、その他にも様々な受容体や酵素を標的とした化合物が薬として開発されており、幅広い疾患領域で用いられている。コバレントドラッグは、通常の分子間相互作用に基づいた可逆的阻害剤とは異なり、共有結合の形成により持続的かつ強力な阻害能の発現が可能となるなどの優れた利点を有する。これまでコバレントドラッグの開発は、非特異的反応（オフターゲットラベリング）に基づく副作用の懸念から、製薬企業では一般に避けられる傾向にあった。しかしながら、近年では、上記の利点に着目したコバレントドラッグ開発が、主にがん（腫瘍）に対する創薬研究において積極的に進められている。
　コバレントドラッグに用いる反応基として最も重要な特性は、非特異的な反応を起こさない制御された穏やかな反応性である。現在、この制御された穏やかな反応性を有するＴＣＩ（ｔａｒｇｅｔｅｄ　ｃｏｖａｌｅｎｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）の開発が盛んであるが、アファチニブも含めて、これらのＴＣＩのほとんどは、タンパク質中のシステインに対する反応基としてマイケルアクセプター（α，β−不飽和ケトン）を有している。しかしながら、このマイケルアクセプターは、比較的反応性が高く、ＴＣＩの構造に依存して他のタンパク質と非特異的な反応を起こしやすい（すなわち副作用の危険性が高い）事が報告されている（非特許文献１：Ｃｒａｖａｔｔ，Ｂ．Ｆ．ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ　Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，ｖｏｌ．１０，ｐ．７６０−７６７，２０１４）。
　このような状況下において、マイケルアクセプターに代わる、より穏やかな反応性を有する反応基を探索し、これを用いて薬剤分子をデザインすることで、副作用の懸念の少ない安全なコバレントドラッグの開発が望まれている。
　本発明は、上記状況を考慮してなされたもので、以下に示す、化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、医薬組成物又は試薬、ＥＧＦＲ阻害剤、腫瘍の治療用キット、並びに、腫瘍の治療方法等を提供するものである。
（１）下記式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000012
〔式（Ｉ）中、
　Ｌ１はリンカー部を表し、
　Ｒ１は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ１の一部と環構造を形成していてもよく、
　Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、
　ｍ及びｎは、それぞれ独立して、０~２の整数を表す。〕
で示される化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
（２）前記リンカー部は、単結合、又は、−ＲＬ１−ＮＨ−若しくは−ＲＬ１−ＣＯ−ＮＨ−（ここで、ＲＬ１は任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表す。）を表す、前記（１）記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
（３）下記式（ＩＩ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000013
〔式（ＩＩ）中、Ｌ２はリンカー部を表し、
　Ｒ４は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ２の一部と環構造を形成していてもよく、
　Ｒ５は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、
　ｐは、０~２の整数を表す。〕
で示される化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
（４）前記リンカー部は、単結合、又は、−ＲＬ２−ＮＨ−（ここで、ＲＬ２は任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表す。）を表す、前記（３）記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
（５）式（Ｉ）で示される化合物が、下記構造式で示される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つである、前記（１）又は（２）記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000014
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000015
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000016
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000017
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000018
（６）式（ＩＩ）で示される化合物が、下記構造式で示される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つである、前記（３）又は（４）記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000019
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000020
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000021
（７）前記（１）~（６）のいずれか１つに記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含む、医薬組成物又は試薬。
（８）腫瘍の治療用のものである、前記（７）記載の医薬組成物又は試薬。
（９）腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、前記（８）記載の医薬組成物又は試薬。
（１０）腫瘍が、非小細胞肺がんである、前記（８）又は（９）記載の医薬組成物又は試薬。
（１１）前記（１）~（６）のいずれか１つに記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含む、ＥＧＦＲ阻害剤。
（１２）コバレント阻害剤である、前記（１１）記載の阻害剤。
（１３）腫瘍の治療用の薬剤を製造するための前記（１）~（６）のいずれか１つに記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物の使用。
（１４）腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、前記（１３）記載の使用。
（１５）腫瘍が、非小細胞肺がんである、前記（１３）又は（１４）記載の使用。
（１６）前記（１）~（６）のいずれか１つに記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を含む、腫瘍の治療用キット。
（１７）腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、前記（１６）記載のキット。
（１８）腫瘍が、非小細胞肺がんである、前記（１６）又は（１７）記載のキット。
（１９）前記（１）~（６）のいずれか１つに記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を被験対象に投与することを特徴とする、腫瘍の治療方法。
（２０）腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、前記（１９）記載の方法。
（２１）腫瘍が、非小細胞肺がんである、前記（１９）又は（２０）記載の方法。
　発明の効果
　本発明によれば、副作用の懸念の少ない安全なコバレントドラッグとして有用な新規化合物を提供することができる。
　本発明の化合物は、ＥＧＦＲ阻害剤として、また腫瘍治療剤の有効成分として優れた有用性及び実用性を有するものである。
ゲル蛍光アッセイによるタンパク質ラベル化特異性の評価結果（Ａ４３１細胞）を示す図である。 細胞増殖阻害活性の評価結果（Ｓ４３１，Ｈ１９７５，ＰＣ９細胞）を示す図である。 ＮＳ−０６２化合物のＥＧＦＲに対するリン酸化阻害活性の評価結果（Ｈ１９７５細胞）を示す図である。左図は、ＮＳ−０６２処理後にすぐに解析した結果であり、右図は、ＮＳ−０６２処理後、洗浄８時間後に解析した結果である。 ｉｎ　ｖｉｖｏ抗腫瘍試験（Ｈ１９７５　ｃｅｌｌ，５ｘ１０６ｃｅｌｌ／ｍｏｕｓｅ，２０ｍｇ／ｋｇ，ｂｉｄ，ｐｏ）の結果を示す図である。 投与期間終了後におけるマウスの体重変化を示す図である。
　以下、本発明を詳細に説明する。本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない範囲で適宜変更し実施することができる。
　なお、本明細書は、本願優先権主張の基礎となる特願２０１６−２１５５２０号明細書（２０１６年１１月２日出願）の全体を包含する。また、本明細書において引用された全ての刊行物、例えば先行技術文献、及び公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込まれる。
１．本発明の化合物
　本発明は、前述したとおり、下記式（Ｉ）、及び下記式（ＩＩ）で示される化合物に係るものである。以下、下記式（Ｉ）、及び下記式（ＩＩ）で示される化合物を合わせて「本発明の化合物」という。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000022
　上記式（Ｉ）においては、
　Ｌ１はリンカー部を表す。リンカー部の構造としては、任意の構造を採り得るが、好ましくは、単結合、又は、−ＲＬ１−ＮＨ−若しくは−ＲＬ１−ＣＯ−ＮＨ−が挙げられる。ここで、ＲＬ１としては、限定はされないが、例えば、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基が好ましい。特に好ましくは、後述する実施例１中の表Ａでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｌ１に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　Ｒ１は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ１の一部と環構造を形成していてもよい。特に好ましくは、後述する実施例１中の表Ａでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｒ１に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　Ｒ２は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、好ましくは、−ＮＨ−Ｒ２１が挙げられる。ここで、Ｒ２１としては、限定はされず、例えば、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基が好ましく、より好ましくは、任意に置換されていてもよいアリール基（例えば、フェニル基等）及び複素環基などである。特に好ましくは、後述する実施例１中の表Ａでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｒ２又はＲ２１に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　Ｒ３は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、好ましくは、−Ｏ−Ｒ３１が挙げられる。ここで、Ｒ３１としては、限定はされず、例えば、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基が好ましく、より好ましくは、任意に置換されていてもよい炭化水素基、ヘテロ炭化水素基、又はこれらの一部が環構造を形成しているものが挙げられる。特に好ましくは、後述する実施例１中の表Ａでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｒ３又はＲ３１に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　ｍ及びｎは、それぞれ独立して、０~２の整数を表し、好ましくは１又は２である。
　上記式（ＩＩ）においては、
　Ｌ２はリンカー部を表す。リンカー部の構造としては、任意の構造を採り得るが、好ましくは、単結合、又は、−ＲＬ２−ＮＨ−が挙げられる。ここで、ＲＬ２としては、限定はされないが、例えば、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基が好ましい。特に好ましくは、後述する実施例２中の表Ｂでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｌ２に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　Ｒ４は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ２の一部と環構造を形成していてもよい。特に好ましくは、後述する実施例２中の表Ｂでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｒ４に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　Ｒ５は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、好ましくは、ハロゲン基、任意に置換されていてもよい炭化水素基、任意に置換されていてもよい複素環基（例えば、インドール基等）及びアリール基などである。特に好ましくは、後述する実施例２中の表Ｂでリストアップされている各種化合物の構造中の、Ｒ５に相当する部分、又は任意に置換されていてもよい当該部分などが挙げられる。
　ｐは、０~２の整数を表し、好ましくは１又は２である。
　本発明においては、上記式（Ｉ）で示される化合物の具体例としては、限定はされないが、下記構造式で示される化合物などが好ましく挙げられる。なお、これら化合物については、後述する実施例１中の表Ａでリストアップされている化合物も参照することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000023
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000024
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000025
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000026
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000027
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000028
なかでも、上記式（Ｉ）で示される化合物の具体例としては、下記構造式の化合物（本実施例でいうＮＳ−０６２化合物）が好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000029
　また、本発明においては、上記式（ＩＩ）で示される化合物の具体例としては、限定はされないが、下記構造式で示される化合物などが好ましく挙げられる。なお、これら化合物については、後述する実施例２中の表Ｂでリストアップされている化合物も参照することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000030
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000031
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000032
　なかでも、上記式（ＩＩ）で示される化合物の具体例としては、下記構造式の化合物（本実施例でいうＮＳＰ−０３７化合物）が好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000033
　本発明の化合物は、上述した各化合物の薬理学的に許容し得る塩の形態であってもよい。
　本発明の化合物の薬理学的に許容し得る塩としては、限定はされないが、例えば、ハロゲン化水素酸塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、及びヨウ化水素酸塩など）、無機酸塩（例えば、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、及び重炭酸塩など）、有機カルボン酸塩（例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、及びクエン酸塩など）、有機スルホン酸塩（例えば、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、及びカンファースルホン酸塩など）、アミノ酸塩（例えば、アスパラギン酸塩、及びグルタミン酸塩など）、四級アミン塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、及びカリウム塩など）、アルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩、及びカルシウム塩など）などが好ましく挙げられる。
　また、本発明の化合物としては、その誘導体も含まれる。誘導体としては、本発明の化合物由来の化学構造を有する等、当業者の技術常識に基づいて本発明の化合物の誘導体と考えられるものであればよく、限定はされないが、例えば、ＥＧＦＲ阻害活性や腫瘍の治療効果が本発明の化合物と同程度ものが好ましい。
　本発明の化合物やその誘導体としては、例えば、生体内で酸化、還元、加水分解、又は抱合などの代謝を受けるものも包含するほか、生体内で酸化、還元、又は加水分解などの代謝を受けてダサチニブやその誘導体を生成する化合物（いわゆるプロドラッグ）も含まれる。本発明において、プロドラッグとは、薬理学的に許容し得る、通常プロドラッグにおいて使用される基で親化合物を修飾した化合物をいい、例えば、安定性や持続性の改善等の特性が付与され、腸管内等で親化合物に変換されて効果を発現することが期待できる化合物をいう。例えば、本発明の化合物のプロドラッグは、対応するハロゲン化物等のプロドラッグ化試薬を用いて、常法により、当該化合物中のプロドラッグ化の可能な基（例えば、水酸基、アミノ基、その他の基）から選択される１以上の任意の基に、常法に従い適宜プロドラッグを構成する基を導入した後、必要に応じ、単離精製することにより製造することができる。ここで、上記プロドラッグを構成する基としては、限定はされないが、例えば、低級アルキル−ＣＯ−、低級アルキル−Ｏ−低級アルキレン−ＣＯ−、低級アルキル−ＯＣＯ−低級アルキレン−ＣＯ−、低級アルキル−ＯＣＯ−、及び低級アルキル−Ｏ−低級アルキレン−ＯＣＯ−等が好ましく挙げられる。
　さらに、本発明の化合物は、化合物の構造上生じ得るすべての異性体（例えば、幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、回転異性体、立体異性体、及び互変異性体等）及びこれら異性体の２種以上の混合物をも包含し、便宜上の構造式の記載等に限定されるものではない。また、本発明の化合物は、Ｓ−体、Ｒ−体又はＲＳ−体のいずれであってもよく、限定はされない。さらに、本発明の化合物は、その種類により水和物や溶媒和物の形で存在する場合もあり、本発明においては当該水和物及び溶媒和物も本発明の化合物に含まれるものとし、後述する本発明の医薬組成物及び試薬や、ＥＧＦＲ阻害剤の有効成分として用いることができる。当該溶媒和物としては、限定はされないが、例えば、エタノールとの溶媒和物等が挙げられる。
２．医薬組成物、ＥＧＦＲ阻害剤等
　本発明の医薬組成物又は試薬、及び、本発明のＥＧＦＲ阻害剤は、前述したとおり、本発明の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物（以下、「本発明の化合物等」ということがある。）を有効成分として含むことを特徴とするものである。上記試薬としては、例えば研究用試薬なども含まれる。本明細書においては、「本発明の医薬組成物」には当該試薬も包含され得るものとする。
　本発明の医薬組成物としては、限定はされないが、腫瘍の治療用の医薬組成物が好ましい。
　なお、本発明は、（ｉ）本発明の化合物等を用いること、具体的には例えば本発明の化合物等の有効量を被験対象に投与することを含む、腫瘍の治療方法、又はＥＧＦＲ阻害方法、（ｉｉ）当該腫瘍の治療用の薬剤、又はＥＧＦＲ阻害剤を製造するための本発明の化合物等の使用、（ｉｉｉ）当該腫瘍の治療用、又はＥＧＦＲ阻害用の本発明の化合物等の使用、並びに、（ｉｖ）当該腫瘍の治療用、又はＥＧＦＲ阻害用の本発明の化合物等も含むものである。
　本発明において、当該腫瘍の治療としては、具体的には、例えば、当該腫瘍の治療の進行抑制、予後改善、及び／又は再発防止等も含まれる。
　本発明において、治療対象となる腫瘍は、限定はされないが、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種が好ましく挙げられる。なかでも、肺がんとしては、非小細胞肺がん、及び小細胞肺がんが挙げられるが、非小細胞肺がんがより好ましい。
　本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤において、有効成分としての本発明の化合物等の含有割合は、限定はされず、適宜設定することができるが、例えば、医薬組成物やＥＧＦＲ阻害剤の全体に対して、０．０１~９９重量％の範囲内とすることができ、好ましくは、０．０１~３０重量％、より好ましくは０．０５~２０重量％、さらに好ましくは０．１~１０重量％の範囲内としてもよい。有効成分の含有割合が上記範囲内であることにより、本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤は、腫瘍の治療効果、ＥＧＦＲ阻害能を十分に発揮することができる。
　本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤は、本発明の化合物等以外にも、本発明の効果が著しく損なわれない範囲で他の成分を含んでいてもよい。例えば、本発明においては、本発明の化合物等と共に、シスプラチン及びパクリタキセル等の一般的な化学療法剤、セツキシマブ及びパニツムマブ等の抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体、コビメチニブ及びトラメチニブ等のＭＥＫ阻害剤、ＡＺＤ５３５６等のＡＫＴ阻害剤、パトリツマブ等の抗ＨＥＲ３モノクローナル抗体、抗ＥｒｂＢ３モノクローナル抗体、並びに、抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体として公知の又は開発中の薬剤・抗体等のうちの１種又は２種以上を、併用することもできる。さらに、本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤は、例えば、後述する薬剤製造上一般に用いられるもの等を含むことができる。
　本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤は、被験対象としてのヒト又は非ヒト哺乳動物（例えば、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して、種々の投与経路、具体的には、経口、又は非経口（例えば静脈内注射（静注）、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射、直腸投与、経皮投与）で投与することができる。従って、本発明に使用する本発明の化合物等は、単独で用いることも可能であるが、投与経路に応じて慣用される方法により薬学的に許容し得る担体を用いて適当な剤形に製剤化して用いることができる。
　剤形としては、経口剤では、例えば、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、被覆錠剤、カプセル剤、内用水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、及びトローチ剤等が挙げられ、非経口剤では、例えば、注射剤（点滴剤を含む）、吸入剤、軟膏剤、点鼻剤、及びリポソーム剤等が挙げられる。なお、上述した各種経口剤とする場合、本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤は、場合によりサプリメント剤（例えば機能性食品に該当する）として利用することもできる。
　これら製剤の製剤化に用い得る担体としては、例えば、通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、及び矯味矯臭剤のほか、必要に応じ、安定化剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、抗酸化剤、増量剤、湿潤化剤、表面活性化剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、溶解補助剤、及び無痛化剤等が挙げられ、医薬品製剤の原料として用いることができる公知の成分を配合して常法により製剤化することが可能である。
　当該成分として使用可能な無毒性のものとしては、例えば、大豆油、牛脂、及び合成グリセライド等の動植物油；流動パラフィン、スクワラン、及び固形パラフィン等の炭化水素；ミリスチン酸オクチルドデシル、及びミリスチン酸イソプロピル等のエステル油；セトステアリルアルコール、及びベヘニルアルコール等の高級アルコール；シリコン樹脂；シリコン油；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、及びポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー等の界面活性剤；ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリル酸、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、及びメチルセルロース等の水溶性高分子；エタノール、及びイソプロパノール等の低級アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ソルビトール、及びポリエチレングリコール等の多価アルコール（ポリオール）；グルコース、及びショ糖等の糖；無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、及びケイ酸アルミニウム等の無機粉体；塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム等の無機塩；精製水等が挙げられ、いずれもその塩またはその水和物であってもよい。
　賦形剤としては、例えば、乳糖、果糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビット、結晶セルロース、及び二酸化ケイ素等が、結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコール・ポリオキシエチレン・ブロックポリマー、及びメグルミン等が、崩壊剤としては、例えば、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、及びカルボキシメチルセルロース・カルシウム等が、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、及び硬化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、例えば、ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、及び桂皮末等が、それぞれ好ましく挙げられ、いずれもその塩又はそれらの水和物であってもよい。
　本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤の投与量は、一般には、製剤中の有効成分（本発明の化合物等）の配合割合を考慮した上で、投与対象（患者）の年齢、体重、病気の種類・進行状況や、投与経路、投与回数（／１日）、投与期間等を勘案し、適宜、広範囲に設定することができる。
　本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤を、非経口剤又は経口剤として用いる場合について、以下に具体的に説明する。
　非経口剤として用いる場合、一般にその形態は限定されないが、各種注射剤の場合は、例えば、単位投与量アンプル又は多投与量容器の状態や、使用時に溶解液に再溶解させる凍結乾燥粉末の状態で提供され得る。当該非経口剤には、有効成分となる本発明の化合物等のほかに、各種形態に応じ、公知の各種賦形材や添加剤を上記有効成分の効果が損なわれない範囲で含有することができる。例えば、各種注射剤の場合は、水、グリセロール、プロピレングリコールや、ポリエチレングリコール等の脂肪族ポリアルコール等が挙げられる。
　非経口剤の投与量（１日あたり）は、限定はされないが、例えば各種注射剤であれば、一般には、有効成分となる本発明の化合物等を、適用対象（被験者、患者等）の体重１ｋｇあたり、０．０１~１０００ｍｇ、０．０５~５００ｍｇ、又は０．１~５０ｍｇ服用できる量とすることができ、あるいは０．５~２０ｍｇ服用できる量や１~１０ｍｇ服用できる量とすることもできる。
　経口剤として用いる場合、一般にその形態は限定されず、前述した剤形のいずれであってもよいし、使用する際に再溶解させる乾燥生成物にしてもよい。当該経口剤には、有効成分となる本発明の化合物等のほかに、各種形態に応じ、公知の各種賦形材や添加剤を上記有効成分の効果が損なわれない範囲で含有することができる。例えば、結合剤（シロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン等）、充填材（乳糖、糖、コーンスターチ、馬鈴薯でんぷん、リン酸カルシウム、ソルビトール、グリシン等）、潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ等）、崩壊剤（各種でんぷん等）、および湿潤剤（ラウリル硫酸ナトリウム等）等が挙げられる。
　経口剤の投与量（１日あたり）は、一般には、有効成分となる本発明の化合物等を、適用対象（被験者、患者等）の体重１ｋｇあたり、０．０５~５０００ｍｇ、０．１~１０００ｍｇ、又は０．１~１００ｍｇ服用できる量とすることができ、あるいは０．５~５０ｍｇ服用できる量や１~１０ｍｇ服用できる量とすることもできる。また、経口剤中の有効成分の配合割合は、限定はされず、１日あたりの投与回数等を考慮して、適宜設定することができる。
３．キット
　腫瘍の治療を行うに当たっては、又はＥＧＦＲの阻害を行うに当たっては、本発明の化合物等を含むキット（具体例として、前述した本発明の医薬組成物、及びＥＧＦＲ阻害剤を含むキット）を用いることができる。
　当該キットにおける本発明の化合物等の形態は、限定はされないが、安定性（保存性）及び使用容易性等を考慮し、例えば溶解した状態で備えられていてもよい。
　当該キットは、本発明の化合物等以外にも、適宜、他の構成要素を含むことができる。
　当該キットは、構成要素として少なくとも前述した本発明の化合物等を備えているものであればよい。従って、前記腫瘍の治療などに必須となる構成要素の全てを、当該本発明の化合物等と共に備えているものであってもよいし、別々に備えているものであってもよく、限定はされない。
　以下に、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　化合物の反応性を簡便にスクリーニングできるペプチドを用いた独自の蛍光アッセイ系を構築し、コバレントドラッグに適した反応性基の探索から研究を開始した。α−ハロアセチル基を中心とした様々な反応性基について検討した結果（Ｔａｂｌｅ　１）、システイン残基と反応する穏やかな反応性基として「α−クロロフルオロアセタミド基」を新たに見出した。α−クロロフルオロアセタミド基は、穏やかな反応性と同時に、阻害剤の機能を阻害しにくい小さな分子サイズ、水溶液中での高い化学的安定性など、コバレントドラッグ開発に適した特徴を有する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000034
　次に、ＥＧＦＲ受容体阻害剤であるキナゾリン型の抗がん剤に、α−クロロフルオロアセタミド基の有用性を組み込んだコバレントドラッグ開発を進めた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000035
　α−クロロフルオロアセタミド基とキナゾリン誘導体の間のリンカーに様々な構造を持つアミノ酸を用いて構造活性相関を行った。アッセイは、がん細胞（ＰＣ９，Ｈ１９７５，Ａ４３１など）に対する細胞増殖阻害活性で評価を行った（Ｔａｂｌｅ　２）。なお、本実施例におけるアッセイ・評価に用いるために合成した化合物を、実施例１の末尾の表Ａにリストアップした。また、これら化合物の合成方法については、後述する実施例３に示したＮＳ−０６２（二塩酸塩）化合物の合成方法が、適宜、参照される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000036
　その結果、リンカーとしてＤ−プロリンを有する化合物ＮＳ−０５８がＴ７９０Ｍ・Ｌ８５８Ｒ二重変異を持つＥＧＦＲを発現するＨ１９７５細胞に対して強い細胞増殖阻害活を示した。興味あることにＬ−プロリンを持つリンカーとして持つＮＳ−０６７の活性は極めて弱かった。
　次に強い活性を示したＮＳ−０５８のアルキン誘導体とアファチニブのアルキン誘導体を用いてタンパク質ラベル化の選択性について評価を行った（図１）。その結果、α−クロロフルオロアセタミド基を持つＮＳ−０５８誘導体は、極めて特異的にＥＧＦＲと反応することがわかった。一方で、マイケルアクセプターを持つアファチニブ誘導体は、他のタンパク質に対する非特異的なラベル化が認められた。
　ＮＳ−０５８の水溶性を改善したＮＳ−０６１，ＮＳ−０６２と、アファチニブとの活性の結果を、図２及びＴａｂｌｅ　３にまとめた。ＮＳ−０６１，ＮＳ−０６２はともにＴ７９０Ｍ・Ｌ８５８Ｒ二重変異を持つＥＧＦＲを発現するＨ１９７５細胞に対して強い増殖阻害活性を持ち、そのＩＣ５０値はアファチニブとほぼ同様であった。一方で、ＮＳ−０６１およびＮＳ−０６２の野生型のＥＧＦＲを発現するＡ４３１細胞に対する増殖阻害活性は、アファチニブよりも弱かった。アファチニブは野生型のＥＧＦＲに対する阻害活性を持つため下痢や皮膚障害などの副作用を持つことが知られている。したがって、
Ａ４３１／Ｈ１９７５の活性比の高いＮＳ−０６１およびＮＳ−０６２は、アファチニブよりも副作用が軽減できる可能がある。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000037
　ＮＳ−０６２を用いてＨ１９７５細胞におけるリン酸化阻害活性をウェスタンブロッティングを用いて評価したところ、ＥＧＦＲに対する濃度依存的なリン酸化阻害活性が認められた（図３　左）。また、このリン酸化阻害活性は、Ｈ１９７５細胞をＮＳ−０６２で処理して洗浄した８時間後にも持続していた（図３　右）。この結果は、ＮＳ−０６２がＥＧＦＲと共有結合を形成して不可逆的な阻害をしていることを意味する。
　ヌードマウスにＨ１９７５細胞を移植して、ＮＳ−０６２およびアファチニブの経口投与試験（２０ｍｇ／ｋｇ、１日２回）を行ったところ（図４）、ＮＳ−０６２は、コントロール群との比較で有意に腫瘍増殖抑制効果を示した。その効果はアファチニブと同定度であった。また、投与期間２５日後のマウスの体重減少率は、アファチニブと比較してＮＳ−０６２の方が軽度であった（図５）。
　以下の表Ａに、本実施例におけるアッセイ・評価に用いるために合成した化合物のリスト（一部の化合物について評価結果あり）を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000038
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000039
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000040
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000041
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000042
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000043
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000044
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000045
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000046
　ＮＳ−０６２などのキナゾリン骨格を有する第二世代型のＥＧＦＲ阻害剤と並行して、オシメルチニブに代表される第三世代型のピリジミン骨格をもつコバレントドラッグの開発も合わせて行っている。これまでにオシメルチニブの構造を鋳型として、クロロフルオロアセタミド基とピリミジン環の間に様々なアミノ酸をリンカーとして導入した誘導体およびピリミジン環の５位に様々な置換基を導入した誘導体を合成して構造活性相関を行った。各化合物に活性は、Ｔ７９０Ｍ・Ｌ８５８Ｒ二重変異ＥＧＦＲを発現するＨ１９７５細胞および野生型のＥＧＦＲを発現するＡ４３１ならびにＨ２９２細胞に対する増殖阻害活性により評価を行った。なお、本実施例におけるアッセイ・評価に用いるために合成した化合物を、実施例２の末尾の表Ｂにリストアップした。また、これら化合物の合成方法については、後述する実施例４に示したＮＳＰ−０３７化合物の合成方法が、適宜、参照される。
　その結果、リンカー部位にＬ−アラニンをもつ化合物が高い活性を示すこと（Ｔａｂｌｅ　４）、ピリミジン環５位にはトリフルオアセチル基をもつ化合物の活性が強い活性を示すことが明らかとなった（Ｔａｂｌｅ　５）。最終的に開発候補化合物として得られた化合物ＮＳＰ−０３７は、Ｔ７９０Ｍ・Ｌ８５８Ｒ二重変異ＥＧＦＲを発現するＨ１９７５細胞に対する増殖阻害活性はオシメルチニブと同等である一方で、野生型ＥＧＦＲを発現するＨ２９２細胞に対する阻害活性は、オシメルチニブに比べて弱かった。したがって、Ｈ２９２／Ｈ１９７５の活性比の高いＮＳＰ−０３７は、オシメルチニブよりも副作用が軽減できる可能を有する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000047
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000048
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000049
　以下の表Ｂに、本実施例におけるアッセイ・評価に用いるために合成した化合物のリスト（一部の化合物について評価結果あり）を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000050
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000051
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000052
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000053
ＮＳ−０６２二塩酸塩の合成
　下記スキームにより、ＮＳ−０６２化合物（前記表Ａも参照）の二塩酸塩を合成した。
　各中間体の合成手順も含めて、以下に詳しく説明する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000054
［中間体２］（Ｄｅｎｎｙ，Ｗ．Ａ．ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，９１８−９２８．参照）
　４−フルオロアントラニル酸（１２．５ｇ，８０．４ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのホルムアミドに溶解し、１５０度で６時間加熱撹拌した。室温に放冷したのち、２００ｍＬの氷水で希釈した。析出した固体を吸引濾取し、冷水とエーテルで洗浄したのち真空下６０度にて加熱乾燥させ、中間体２を淡褐色の固体として１０．６ｇ、８１％収率で得た。
［中間体３］
　氷冷下、発煙硝酸４０ｍＬに対し濃硫酸４０ｍＬを滴下した。引き続き氷冷下、この混合物に対し中間体２（１０．６ｇ，６４．６ｍｍｏｌ）を徐々に加えたのち、１１０度で３時間加熱撹拌した。室温に放冷したのち、反応混合物を１リットルの氷水に滴下した。析出した固体を吸引濾取し、冷水とエーテルで洗浄したのち真空下乾燥させ、中間体３を淡黄色の固体として１１．４ｇ、８５％収率で得た。
［中間体４］
　中間体３（１１．４ｇ，５４．６ｍｍｏｌ）と五塩化リン（１７．１ｇ，８２．１ｍｍｏｌ）を３００ｍＬのナスフラスコに加えて還流冷却器と塩化カルシウム管を装着し、予め１６０度に加熱した油浴中で４時間加熱撹拌した。油浴を外し、反応混合物が固化するまで撹拌しながら約３０分放冷した。２００ｍＬのヘキサンを加えて固体をガラス棒で粉砕し、懸濁液を室温で１時間撹拌した。固体を吸引濾取し、２００ｍＬのヘキサンに再懸濁させた。再び固体を吸引濾取し、ヘキサンで入念に洗浄したのちに真空下５０度で加熱乾燥させ、中間体４を淡黄色固体として８．８０ｇ、７１％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　８．７５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ）．
［中間体５］
　中間体５（８．８０ｇ，３８．７ｍｍｏｌ）と３−クロロ−４−フルオロアニリン（５．８６ｇ，４０．３ｍｍｏｌ）を２−イソプロパノール２００ｍＬとジクロロメタン１００ｍＬの混合溶媒に懸濁し、室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧留去したのち、酢酸エチルと飽和重曹水を加えた。水層を酢酸エチルで３回抽出したのち、集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１ヘキサン−酢酸エチル）によって精製し、中間体５を橙色固体として８．００ｇ、６２％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１０．４９（ｓ，１Ｈ），９．５７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），８．１４−８．１１（ｍ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８２−７．７８（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）．
［中間体６］
　窒素雰囲気下中間体５（３．３７ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）とトリメチルシラノールカリウム塩（３．２１ｇ，２５．０ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解し、室温で１０分間撹拌した。これに４−（３−ヒドロキシプロピル）モルホリン（３．４６ｍＬ，２５．０ｍｍｏｌ）を加え、６０度で５時間加熱撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水を加えた。水層を酢酸エチルで３回抽出したのち、集めた有機層を飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５：１酢酸エチル−メタノール）によって精製し、黄色固体を得た。この固体を２００ｍＬのエタノールに溶解し、塩化スズ（ＩＩ）５．６７ｇ（２９．９ｍｍｏｌ）を加えて終夜加熱還流した。室温まで放冷したのち、２００ｍＬの飽和重曹水を加えて室温で２０分間撹拌した。クロロホルム−イソプロパノール混合溶媒（５：１）で希釈し、固形物をセライトで濾別した。有機層を分離し、水層をクロロホルム−イソプロパノール混合溶媒（５：１）でさらに２回抽出した。集めた有機層を飽和食塩水で洗浄したのち硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。生じた固体を真空下乾燥させ、中間体６を１．４１ｇ、３３％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　９．３５（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｄｄ，Ｊ＝６．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８１−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．３６（ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｓ，１Ｈ），７．０６（ｓ，１Ｈ），５．３２（ｓ，２Ｈ），４．１７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，４Ｈ），２．５１−２．４６（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｂｓ，４Ｈ），１．９６（ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）．
［中間体７］
　窒素雰囲気下、中間体６（１．２２ｇ，２．８３ｍｍｏｌ）とＢｏｃ−Ｄ−プロリン（９３６ｍｇ，４．３５ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのジクロロメタンに溶解した。これにプロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ、５０％酢酸エチル溶液，２．３０ｍＬ，５．６３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２．０ｍＬ，１１．５ｍｍｏｌ）、および４−ジメチルアミノピリジン（７８．０ｍｇ，０．６３８ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で５時間撹拌した。Ｂｏｃ−Ｄ−プロリン（３０６ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ）、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル溶液，１．１５ｍＬ，２．８２ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ，５．７５ｍｍｏｌ）を追加し、さらに３時間室温で撹拌した。この反応溶液に対し２０ｍＬの４規定塩酸−酢酸エチル溶液を加え、室温で１時間撹拌した。飽和重曹水で中和したのち水層を酢酸エチルで３回抽出し、集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１　クロロホルム−メタノール）によって精製し、中間体７を淡褐色固体として１．２７ｇ、８５％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１０．６２（ｓ，１Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ），９．０７（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．０８−８．０４（ｍ，１Ｈ），７．７７−７．７３（ｍ，１Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８５−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．５７（ｔ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，４Ｈ），３．４３（ｂｓ，１Ｈ），３．０５−２．９７（ｍ，１Ｈ），２．８６−２．７９（ｍ，１Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４０（ｂｓ，４Ｈ），２．１３−２．０５（ｍ，１Ｈ），２．０２−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．８２（ｍ，１Ｈ），１．７１−１．６０（ｍ，２Ｈ）．
［ＮＳ−０６２二塩酸塩］
　窒素雰囲気下、中間体７（１．２３ｇ，２．３２ｍｍｏｌ）およびクロロフルオロ酢酸ナトリウム（６９２ｍｇ，５．１４ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。これにＴ３Ｐ（５０％酢酸エチル溶液，１．８９ｍＬ，４．６３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．６２ｍＬ，９．３０ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。クロロフルオロ酢酸ナトリウム塩（３１２ｍｇ，２．３２ｍｍｏｌ）、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル溶液，０．９５ｍＬ，２．３２ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．８１ｍＬ，４．６４ｍｍｏｌ）を追加し、室温で終夜撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水を加え水層を酢酸エチルで３回抽出したのち集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１酢酸エチル−メタノール）によって精製し、ＮＳ−０６２を淡褐色非晶質として１．０１ｇ、７０％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ａ　ｐａｉｒ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｓ）δ　９．８８　ａｎｄ　９．８７（ｓ，１Ｈ），９．７６　ａｎｄ　９．５０（ｓ，１Ｈ），８．８０　ａｎｄ　８．７１（ｓ，１Ｈ），８．１４　ａｎｄ　８．１３（ｓ，１Ｈ），８．１５−８．０６（ｍ，１Ｈ），７．８３−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．４６−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．３０　ａｎｄ　７．２８（ｓ，１Ｈ），７．２０　ａｎｄ　７．１５（ｄ，Ｊ＝４８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．８６−４．７１（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．２０（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．７０（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．５０（ｍ，６Ｈ），２．４０（ｂｓ，４Ｈ），２．２９−２．１７（ｍ，１Ｈ），２．１５−１．９０（ｍ，６Ｈ）．
　ＮＳ−０６２（１．０１ｇ，１．６２ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの酢酸エチルと５ｍＬのメタノールに溶解し、４規定塩酸−酢酸エチル溶液（１．６ｍＬ，６．４ｍｍｏｌ）を加え室温で１５分間撹拌した。溶媒を減圧留去したのち、ジエチルエーテルを加えた。析出した固体を吸引を濾取したのち真空下６０度で加熱乾燥させ、ＮＳ−０６２二塩酸塩を淡黄色固体として１．０６ｇ、９４％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ａ　ｐａｉｒ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｓ）δ　１１．５１（ｂｓ，１Ｈ），１１．４０（ｂｓ，１Ｈ），９．９６　ａｎｄ　９．９４（ｓ，１Ｈ），９．１２　ａｎｄ　９．０７（ｓ，１Ｈ），８．８９（ｓ，１Ｈ），８．００−７．９４（ｍ，１Ｈ），７．７０−７．６３（ｍ，１Ｈ），７．５７−７．４９（ｍ，２Ｈ），７．２７　ａｎｄ　７．１９（ｄ，Ｊ＝４８．５Ｈｚ，１Ｈ），５．１０−４．９２（ｍ，１Ｈ），４．４−５４．３５（ｍ，２Ｈ），４．０１−３．４０（ｍ，１３Ｈ），２．４８−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．３９−２．２０（ｍ，１Ｈ），２．１２−１．９５（ｍ，２Ｈ），
ＮＳＰ−０３７の合成
　下記スキームにより、ＮＳＰ−０３７化合物（前記表Ｂも参照）を合成した。
　各中間体の合成手順も含めて、以下に詳しく説明する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000055
［中間体９］
　５−フルオロ−２−ニトロアニソール（８）（５．０３ｇ，２９．４ｍｍｏｌ）を３２ｍＬのアセトンと４ｍＬの蒸留水に溶解し、亜鉛粉末（８．１０ｇ，１２４ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下、塩化アンモニウム１７．０ｇを徐々に注意深く加え、室温で終夜撹拌した。セライトで固形物を吸引濾過したのち溶媒を減圧留去し、残渣を水と酢酸エチルで希釈した。有機層を水と飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧留去したのちシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５：１~３：１ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、中間体９を淡褐色油状物質として２．０３ｇ、５０％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　７．６９−７．６３（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｔｄ，Ｊ＝８．４，１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ）．
［中間体１０］
　中間体９（２．０ｇ，１４．２ｍｍｏｌ）に１５ｍＬの濃硫酸を滴下したのち、氷冷下硝酸カリウム（１．５２ｇ，１５．０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。終夜室温で撹拌したのちに反応混合液を氷水に加え、水酸化ナトリウム水溶液で塩基性とした。析出した固体を濾取し、濾液をジクロロメタンで２回抽出した。濾取した固体も有機層に溶解させ、飽和食塩水で洗浄したのち硫酸ナトリウムで乾燥させた。これを濾過し、濾液にシリカゲルを加えて溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１~２：１ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、中間体１０を黄色固体として１．９０ｇ、７２％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ）．
［中間体１２］
　窒素雰囲気下、インドール（１３２ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）を脱水１，２−ジクロロエタンに溶解し、氷冷下メチルマグネシウムブロミド（３Ｍジエチルエーテル溶液，５．８５ｍＬ，１７．６ｍｍｏｌ）を滴下した。氷冷下３０分間撹拌したのち、３ｍＬのジクロロメタンに溶解した２，４−ジクロロ−５−トリフルオロメチルピリミジン（１１）（１２２ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）を滴下した。室温で２時間、次いで６０度で４時間撹拌し、反応溶液を水と酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出して集めた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧留去したのち残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（４：１~３：１ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、中間体１２を黄色固体として７９．２ｍｇ、４７％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１２．２２（ｂｓ，１Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．２９（ｍ，２Ｈ）．
［中間体１３］
　中間体１２（７８．０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、中間体１０（５１．０ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）、およびパラトルエンスルホン酸一水和物（５５．０ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）を１５ｍＬの２−ペンタノールに溶解し、終夜加熱還流させた。室温に放冷後、ヘキサンを加えて析出した固体を吸引濾取し、真空下乾燥させて中間体１３を黄色固体として８４．０ｍｇ、７２％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．８４（ｂｓ，１Ｈ），９．２６（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｂｓ，１Ｈ），７．４６−７．４８（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｂｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ）．
［中間体１４］
　中間体１３（８１．０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ，Ｎ’−トリメチルエチレンジアミン（０．１０ｍＬ，０．７７０ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解し、１．５時間１２０度で加熱撹拌した。室温に放冷したのち飽和重曹水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。集めた有機層を飽和食塩水で洗浄したのち硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過ののち溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５０：１０：１クロロホルム−メタノール−２４％アンモニア水）で精製し、中間体１４を赤色非晶質として５６．３ｍｇ，５９％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．７９（ｓ，１Ｈ），９．０４（ｓ，１Ｈ），８．６５（ｓ，１Ｈ），８．０８−７．９９（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０２−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｓ，１Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．３５−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．８５（ｓ，３Ｈ），２．４９−２．４５（ｍ，２Ｈ），２．１４（ｓ，６Ｈ）．
［中間体１５］
　中間体１４（５５．０ｍｇ，０．１０４ｍｍｏｌ）を９ｍＬのエタノールと３ｍＬの水に溶解し、鉄粉末（２９．０ｍｇ，０．５１９ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（５．６ｍｇ，０．１０４ｍｍｏｌ）を加え２．５時間加熱還流した。溶媒を減圧留去したのち、３０ｍＬのクロロホルムと３ｍＬのメタノールを加え室温で３０分間撹拌した。溶液を濾過し、濾液を硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過ののち溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００：１０：１クロロホルム−メタノール−２４％アンモニア水）で精製した。得られた非晶質をジエチルエーテルに溶解し、ＰＴＦＥメンブレンフィルターで濾過したのち溶媒を減圧留去することで中間体１５を黄色固体として３０．０ｍｇ、５９％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．７６（ｓ，１Ｈ），８．７９（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｂｓ，１Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｂｓ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），２．９２（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２，２２（ｓ，６Ｈ）．
［中間体１６］
　窒素雰囲気下、中間体１５（２９．０ｍｇ，０．０５８１ｍｍｏｌ）とＢｏｃ−Ｌ−アラニン（２２．０ｍｇ，０．１１６ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解した。これにプロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ、５０％酢酸エチル溶液，６８．４μＬ，０．１１６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３０．０μＬ，０．１７４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応溶液に飽和重曹水を加え、ジクロロメタン−イソプロパノール混合溶媒（４：１）で２回抽出し、集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５０：１０：１クロロホルム−メタノール−２４％アンモニア水）によって精製し、黄色油状物質を得た。
　これを１ｍＬの酢酸エチルに溶解し、４規定塩酸−酢酸エチル溶液（１．５ｍＬ）を加え室温で３０分間撹拌した。飽和重曹水で溶液を塩基性にしたのち、ジクロロメタン−イソプロパノール混合溶媒（４：１）で２回抽出し、集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去し、中間体１６を黄色非晶質として３０．０ｍｇ，９１％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．７４（ｓ，１Ｈ），１０．１７（ｂｓ，１Ｈ），９．０７（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｂｓ，１Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．９３（ｂｓ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．４０−３．３５（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．１４（ｓ，６Ｈ），１．２１（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，３Ｈ）．
［ＮＳＰ−０３７］
　窒素雰囲気下、中間体１６（２９．０ｍｇ，０．０５０８ｍｍｏｌ）とクロロフルオロ酢酸ナトリウム（２１．０ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解した。これにプロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ、５０％酢酸エチル溶液，９０．０μＬ，０．１５３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２７．０μＬ，０．１５３ｍｍｏｌ）、および４−ジメチルアミノピリジン（３．１ｍｇ，０．０２５４ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４．５時間撹拌した。反応溶液に飽和重曹水を加え、酢酸エチルで２回抽出し、集めた有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過したのちに溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５０：１０：１クロロホルム−メタノール−２４％アンモニア水）によって精製したのち、得られた油状物質をＰＴＦＥメンブレンフィルターで濾過した。これを少量の酢酸エチルに溶解し、ヘキサンを加えて析出した固体を濾取し、真空下乾燥させることでＮＳＰ−０３７を白色固体として２０．０ｍｇ、５８％収率で得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．７７（ｓ，１Ｈ），９．７８（ｓ，１Ｈ），９．０９（ｓ，１Ｈ），９．００（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｂｓ，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｓ，１Ｈ），６．９６（ｂｓ，１Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝４７．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５３−４．４８（ｍ，１Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），３．００−２．９１（ｍ，２Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），２．３７−２．３５（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｓ，６Ｈ），１．３４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．
ＮＳＰ−０３７は立体異性体の混合物であり、いくつかのピークは二重に重なって観測された。
　本発明によれば、副作用の懸念の少ない安全なコバレントドラッグとして有用な新規化合物を提供することができるため、本発明の化合物は、ＥＧＦＲ阻害剤として、また腫瘍治療剤の有効成分として優れた有用性及び実用性を有するものである。
　配列番号１：ペプチド

Claims (21)

  1. 　下記式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
    〔式（Ｉ）中、
    　Ｌ１はリンカー部を表し、
    　Ｒ１は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ１の一部と環構造を形成していてもよく、
    　Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、
    　ｍ及びｎは、それぞれ独立して、０~２の整数を表す。〕
    で示される化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
  2. 　前記リンカー部は、単結合、又は、−ＲＬ１−ＮＨ−若しくは−ＲＬ１−ＣＯ−ＮＨ−（ここで、ＲＬ１は任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表す。）を表す、請求項１記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
  3. 　下記式（ＩＩ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000002
    〔式（ＩＩ）中、Ｌ２はリンカー部を表し、
    　Ｒ４は、水素原子、又は任意に置換されていてもよい炭化水素基を表し、場合によりＬ２の一部と環構造を形成していてもよく、
    　Ｒ５は、それぞれ独立して、任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表し、
    　ｐは、０~２の整数を表す。〕
    で示される化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
  4. 　前記リンカー部は、単結合、又は、−ＲＬ２−ＮＨ−（ここで、ＲＬ２は任意に置換されていてもよい任意の構造の有機基を表す。）を表す、請求項３記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
  5. 　式（Ｉ）で示される化合物が、下記構造式で示される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つである、請求項１又は２記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000003
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000004
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000005
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000006
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000007
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000008
  6. 　式（ＩＩ）で示される化合物が、下記構造式で示される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つである、請求項３又は４記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000009
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000010
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000011
  7. 　請求項１~６のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含む、医薬組成物又は試薬。
  8. 　腫瘍の治療用のものである、請求項７記載の医薬組成物又は試薬。
  9. 　腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項８記載の医薬組成物又は試薬。
  10. 　腫瘍が、非小細胞肺がんである、請求項８又は９記載の医薬組成物又は試薬。
  11. 　請求項１~６のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を有効成分として含む、ＥＧＦＲ阻害剤。
  12. 　コバレント阻害剤である、請求項１１記載の阻害剤。
  13. 　腫瘍の治療用の薬剤を製造するための請求項１~６のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物の使用。
  14. 　腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１３記載の使用。
  15. 　腫瘍が、非小細胞肺がんである、請求項１３又は１４記載の使用。
  16. 　請求項１~６のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を含む、腫瘍の治療用キット。
  17. 　腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１６記載のキット。
  18. 　腫瘍が、非小細胞肺がんである、請求項１６又は１７記載のキット。
  19. 　請求項１~６のいずれか１項に記載の化合物、又はその薬理学的に許容し得る塩、あるいはそれらの水和物若しくは溶媒和物を被験対象に投与することを特徴とする、腫瘍の治療方法。
  20. 　腫瘍が、肺がん、乳がん、前立腺がん、頭部がん、頸部がん、皮膚がん、卵巣がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、結腸がん、直腸がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、肝臓がん、膀胱がん、膵臓がん、脳腫瘍、脊髄腫瘍、血液がん、及び骨がんからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１９記載の方法。
  21. 　腫瘍が、非小細胞肺がんである、請求項１９又は２０記載の方法。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020109039A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Basf Se Pesticidal compounds
CN112409192A (zh) * 2020-11-26 2021-02-26 启东东岳药业有限公司 一种4-氟-2-甲氧基苯胺的纯化方法
CN113278012A (zh) * 2020-02-19 2021-08-20 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 用作激酶抑制剂的化合物及其应用
WO2021219513A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Basf Se Pesticidal compounds
WO2023022231A1 (ja) * 2021-08-20 2023-02-23 国立大学法人九州大学 ウイルス感染症を処置または予防するための可逆的共有結合阻害物質

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS545956A (en) * 1977-06-16 1979-01-17 Du Pont Novel compound * production and use thereof
JP2006515871A (ja) * 2003-01-23 2006-06-08 ティー．ケイ． シグナル リミテッド 上皮増殖因子受容体チロシンキナーゼの不可逆阻害剤ならびにその使用
US20080056990A1 (en) * 2005-09-06 2008-03-06 T.K. Signal Ltd. Polyalkylene glycol derivatives of inhibitors of epidermal growth factor receptor tyrosine kinase
JP2008525522A (ja) * 2004-12-29 2008-07-17 ハンミ ファーム． シーオー．， エルティーディー． 癌細胞の成長を阻害するキナゾリン誘導体及びその製造方法
JP2009518450A (ja) * 2005-12-12 2009-05-07 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 二環式複素環化合物、その化合物を含む薬剤、その使用及び製造方法
JP2013515786A (ja) * 2009-12-29 2013-05-09 アビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド ヘテロアリール化合物およびそれらの使用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS545956A (en) * 1977-06-16 1979-01-17 Du Pont Novel compound * production and use thereof
JP2006515871A (ja) * 2003-01-23 2006-06-08 ティー．ケイ． シグナル リミテッド 上皮増殖因子受容体チロシンキナーゼの不可逆阻害剤ならびにその使用
JP2008525522A (ja) * 2004-12-29 2008-07-17 ハンミ ファーム． シーオー．， エルティーディー． 癌細胞の成長を阻害するキナゾリン誘導体及びその製造方法
US20080056990A1 (en) * 2005-09-06 2008-03-06 T.K. Signal Ltd. Polyalkylene glycol derivatives of inhibitors of epidermal growth factor receptor tyrosine kinase
JP2009518450A (ja) * 2005-12-12 2009-05-07 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 二環式複素環化合物、その化合物を含む薬剤、その使用及び製造方法
JP2013515786A (ja) * 2009-12-29 2013-05-09 アビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド ヘテロアリール化合物およびそれらの使用

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MIURA, CHIZURU ET AL.: "Building a covalent drug library and application to search for enzyme inhibitors", PROCEEDINGS OF THE 32ND PHARMACEUTICAL SOCIETY OF JAPAN KYUSHU CULTURE COMPETITION, 16 November 2015 (2015-11-16), pages 38 *
OJIDA, AKIRA: "Drug applications in protein organic chemistry", EXTENDED ABSTRACTS OF THE 97TH ANNUAL CHEMICAL SOCIETY OF JAPAN MEETING, 3 March 2017 (2017-03-03) *
SATO, MAMI ET AL.: "Applications to search for enzyme inhibitors and develop EGFR inhibitors", EXTENDED ABSTRACTS OF THE 97TH ANNUAL CHEMICAL SOCIETY OF JAPAN MEETING, 3 March 2017 (2017-03-03) *
SHINDO NAOYA ET AL.: "Search for new polymides to improve target specificity of covalent drugs and applications for EGFR drugs", PROCEEDINGS OF THE 34TH MEDICINAL CHEMISTRY SYMPOSIUM, 11 November 2016 (2016-11-11), pages 91 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020109039A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Basf Se Pesticidal compounds
CN113278012A (zh) * 2020-02-19 2021-08-20 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 用作激酶抑制剂的化合物及其应用
WO2021164793A1 (zh) * 2020-02-19 2021-08-26 郑州同源康医药有限公司 用作激酶抑制剂的化合物及其应用
CN113278012B (zh) * 2020-02-19 2022-07-12 郑州同源康医药有限公司 用作激酶抑制剂的化合物及其应用
WO2021219513A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Basf Se Pesticidal compounds
CN112409192A (zh) * 2020-11-26 2021-02-26 启东东岳药业有限公司 一种4-氟-2-甲氧基苯胺的纯化方法
WO2023022231A1 (ja) * 2021-08-20 2023-02-23 国立大学法人九州大学 ウイルス感染症を処置または予防するための可逆的共有結合阻害物質

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