WO2017170637A1 - ペプチド誘導体及びその用途 - Google Patents

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WO2017170637A1
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reaction
group
derivative
peptide derivative
compound
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幸博 西尾
慎也 横坂
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東レ株式会社
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link

Definitions

  • the present invention relates to peptide derivatives and uses thereof.
  • a plurality of types of peptide derivatives having cytotoxicity have been isolated from sea snails present in the ocean.
  • Dolastatin 10 is known as one of these peptide derivatives and a compound having extremely strong cytotoxicity (Patent Document 1 and Non-Patent Document 1).
  • Patent Documents 2 and 3 and Non-Patent Document 2 Another peptide derivative having a similar tubulin polymerization inhibitory action is monomethyl auristatin (Patent Documents 4 and 5), and this compound binds to a specific amino acid of an antibody via a specific structure called a linker. It is known to be used as an antibody drug complex.
  • the drug that can be used in the antibody drug complex needs to have a specific substituent (for example, an amino group, a sulfhydryl group, or a hydroxy group) that can be linked to a linker or an antibody.
  • a specific substituent for example, an amino group, a sulfhydryl group, or a hydroxy group
  • the use of a plurality of types of substituents has been reported so far because the binding method greatly affects the drug efficacy of the complex (Non-Patent Documents 3 to 5).
  • a derivative having a functional group that can be used in a conjugate with a tubulin inhibitor the above-mentioned monomethyl auristatin or PF-063801010 (non-patent document 6) having an amino group at the N-terminus or at the C-terminus can be used.
  • Auristatin F derivatives having an amino group, hydroxy group, carboxylic acid, hydroxylamine or alkyne (Patent Document 6 and Non-Patent Documents 7 to 9) have been reported.
  • Non-patent Document 10 a derivative having ethyl ester, ethylamide or thiazoleamide has been reported.
  • an object of the present invention is to provide a dolastatin 10 derivative having a functional group that can be used for forming a complex at the C-terminus.
  • the present inventors have found that a novel peptide derivative having a specific functional group at the C-terminus or a pharmacologically acceptable salt thereof can be used against a plurality of cancer cells.
  • the inventors have found that it exhibits high cytotoxicity, and have completed the present invention.
  • the present invention provides a peptide derivative represented by the following general formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • X represents an oxygen atom or NR
  • Y represents NH 2 , N (Me) H, SH, OH or a phenyl group in which any one hydrogen atom is substituted with NH 2 or OH
  • R represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.
  • a derivative in which X is NH and Y is NH 2 and a derivative in which X is NH and Y is N (Me) H are excluded.
  • X is preferably an oxygen atom.
  • X is an oxygen atom
  • Y is NH 2 , N (Me) H, SH or OH. Is more preferable.
  • X is preferably NR.
  • X is preferably NR, and R is more preferably an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.
  • X is more preferably NR and R is more preferably a methyl group.
  • the present invention also provides a complex comprising the peptide derivative represented by the above general formula (I) and a targeting ligand or polymer, or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • the present invention provides the peptide derivative represented by the above general formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or the above complex or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • a cytotoxic agent is provided.
  • the peptide derivative of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof has high cytotoxicity, it can be used as a cytotoxic agent.
  • the peptide derivative of the present invention has various functional groups at the C-terminus, the peptide derivative or a prodrug thereof and a targeting ligand or polymer can be complexed. Acceptable salts can be used as cytotoxic agents.
  • the peptide derivative of the present invention is characterized by being represented by the following general formula (I).
  • X represents an oxygen atom or NR
  • Y represents NH 2 , N (Me) H, SH, OH or a phenyl group in which any one hydrogen atom is substituted with NH 2 or OH
  • R represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.
  • a derivative in which X is NH and Y is NH 2 and a derivative in which X is NH and Y is N (Me) H are excluded.
  • a phenyl group in which any one hydrogen atom is substituted with NH 2 or OH means 2-aminophenyl group, 3-aminophenyl group, 4-aminophenyl group, 2-hydroxyphenyl group, 3-hydroxy A phenyl group or a 4-hydroxyphenyl group is meant.
  • Alkyl group having 1 to 3 carbon atoms means a methyl group, an ethyl group, a propyl group, or an isopropyl group.
  • the compounds described in Table 1 also include pharmacologically acceptable salts thereof.
  • the peptide derivative represented by the above general formula (I) contains a conformer, a rotational isomer, a tautomer, an optical isomer, a diastereomer, an epimer, or the like. In some cases, either isomer or mixture is included in the peptide derivative (I). Furthermore, when the peptide derivative (I) has an optical isomer, the optical isomer resolved from the racemate is also included in the peptide derivative (I).
  • the configuration of the peptide derivative (I) is preferably the following formula (II).
  • the present invention also includes a prodrug of the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • the prodrug of the peptide derivative (I) is a compound that is enzymatically or chemically converted into the peptide derivative (I) in vivo.
  • the active substance of the prodrug of peptide derivative (I) is peptide derivative (I), but the prodrug itself of peptide derivative (I) may have activity.
  • Examples of the prodrug of the peptide derivative (I) include compounds in which the hydroxy group of the peptide derivative (I) is esterified, carbonated, carbamated, alkylated, phosphorylated or borated. These compounds can be synthesized from the peptide derivative (I) or a synthetic intermediate thereof according to a known method.
  • Examples of the prodrug of the peptide derivative (I) include compounds in which the amino group of the peptide derivative (I) is carbamate- ed or amidated. These compounds can be synthesized from the peptide derivative (I) or a synthetic intermediate thereof according to a known method.
  • Examples of the prodrug of the peptide derivative (I) include a compound in which the sulfhydryl group of the peptide derivative (I) forms a disulfide bond. These compounds can be synthesized from the peptide derivative (I) or a synthetic intermediate thereof according to a known method.
  • prodrug of the above peptide derivative (I) are shown in Table 2, but the present invention is not limited thereto.
  • the compounds described in Table 2 also include their salts.
  • Q is a known method (for example, Ellen M. Sletten et al., Agewante Chimie International Edition, 2009, Vol. 48, p. 6974-6998, Greg T. Hermanson., “Bioconjugate Tech”, “Bioconjugate Tech,” , Xi Chem et al., Organic & Biomolecular Chemistry, 2016, Vol. 14, p.
  • the “spacer” represents a peptide derivative (I) or a structure connecting a prodrug of the peptide derivative (I) and Q.
  • “Straight or branched alkyl group having 1 to 12 carbon atoms” means, for example, — (CH 2 ) n —, —CH (Me) —, —C (Me) 2 —, — (CH 2 ) o CH (Me)-, -CH (Me) (CH 2 ) o -,-(CH 2 ) p C (Me) 2 -or -C (Me) 2 (CH 2 ) p- .
  • n represents an integer of 1 to 12
  • o represents an integer of 1 to 10
  • p represents an integer of 1 to 9.
  • PEG represents a linear polyethylene glycol having a number average molecular weight of 200 to 2,000 represented by a repeating structure of — (CH 2 CH 2 O) m —, and m represents an integer of 5 to 45.
  • amino acids and the like are indicated by abbreviations, they are based on abbreviations by IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature or conventional abbreviations in the field, and examples thereof are described below.
  • L forms are indicated (for example, “Lys” is L form Lys).
  • D- indicates D form (eg, “D-Lys” indicates D form Lys)
  • DL- indicates D form and L form racemates.
  • DL-Lys is a racemic form of D-form Lys and L-form Lys).
  • Amino acid means DL-Ala, DL-Arg, DL-Asn, DL-Asp, DL-Cit, DL-Cys, DL-Gln, DL-Glu, DL-Gly, DL-His, DL-Ile, DL -One selected from Leu, DL-Lys, DL-Met, DL-Phe, DL-Pro, DL-Ser, DL-Thr, DL-Trp, DL-Tyr or DL-Val, but A 1 Lys, A 2 and A 3 are absent, A 1 is Cit or Lys, A 2 is Val or Phe, A 3 is absent, or A 1 is Asp Yes, A 2 and A 3 are preferably Ala.
  • a 1 described in Table 2 is bonded to NH of the phenyl group at the carbonyl terminal, and A 1 , A 2 and A 3 are each bonded to the main chain via an amide bond.
  • Table 3 shows preferred structures of the prodrug of the peptide derivative (I) described in No. 6 in Table 2, but the present invention is not limited thereto.
  • the compounds listed in Table 3 also include their salts.
  • Alk 1 and Alk 2 each independently represent a linear or branched alkyl group having 1 to 12 carbon atoms, and E is absent or —C ( ⁇ O) N (Z) — or —N (Z) C ( ⁇ O) — is represented, and other symbols are the same as defined above.
  • Alk 1 is more preferably — (CH 2 ) 2 —, X is NR, and Alk 1 is — (CH 2 ) 2. More preferably, E is —N (Z) C ( ⁇ O) —, PEG is — (CH 2 CH 2 O) 12 —, and Q is a maleimide group, The present invention is not limited to these.
  • J is -Alk 1 -E-Alk 2 -or -Alk 1 -E-PEG- (CH 2 ) 2 -E-Alk 2 It is preferable that J is — (CH 2 ) 2 —N (Z) C ( ⁇ O) —Alk 2 — or — (CH 2 ) 2 —N (Z) C ( ⁇ O) — (CH 2 CH 2 O) 12 — (CH 2 ) 2 —N (Z) C ( ⁇ O) —Alk 2 — and Q is more preferably a maleimide group, but the present invention is not limited thereto. is not.
  • prodrugs of the peptide derivative (I) are known in the literature (“Development of Pharmaceuticals”, Hirokawa Shoten, 1990, Vol. 7, p.163-198, and Progress in Medicine, Vol. 5, 1985, p. 2157 to 2161) may be converted to the peptide derivative (I) under the physiological conditions described in 2157-2161).
  • the peptide derivative (I) may be labeled with an isotope.
  • the labeled isotope include 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 15 O, 17 O, and 18 O. And / or 125 I.
  • Examples of the “pharmacologically acceptable salt” of the peptide derivative (I) include inorganic acid salts such as hydrochloride, sulfate, nitrate, hydrobromide, hydroiodide or phosphate, or Oxalate, malonate, citrate, fumarate, lactate, malate, succinate, tartrate, acetate, trifluoroacetate, maleate, gluconate, benzoate, Ascorbate, glutarate, mandelate, phthalate, methanesulfonate, ethanesulfonate, benzenesulfonate, p-toluenesulfonate, camphorsulfonate, aspartate, glutamate or Organic acid salts such as cinnamate are exemplified, and hydrochloride, sulfate, hydrobromide, maleate, benzoate or methanesulfonate is preferable.
  • inorganic acid salts such as hydrochlor
  • the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof may be an anhydride, or may form a solvate such as a hydrate.
  • the solvate is preferably a pharmacologically acceptable solvate.
  • the pharmacologically acceptable solvate may be either a hydrate or a non-hydrate, but a hydrate is preferable.
  • the solvent constituting the solvate include alcohol solvents such as methanol, ethanol, and n-propanol, N, N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, and water.
  • the peptide derivative (I) can be produced by an appropriate method based on characteristics derived from the basic skeleton and the type of substituent.
  • the starting materials and reagents used in the production of these compounds can be generally purchased, or can be produced by a known method or a method analogous thereto.
  • the peptide derivative (I) and intermediates and starting materials used for the production thereof can be isolated and purified by known means.
  • Known means for isolation and purification include, for example, solvent extraction, recrystallization or chromatography.
  • each isomer can be obtained as a single compound by a known method.
  • Known methods include, for example, crystallization, enzyme resolution, or chiral chromatography.
  • a protective group may be introduced into these groups, and protection is performed as necessary after the reaction.
  • the target compound can be obtained by deprotecting the group.
  • Examples of the protective group for the hydroxy group include a trityl group, a tetrahydropyranyl group, an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, a benzyl group) or a substituted silyl group (for example, a trimethylsilyl group, a triethylsilyl group, or tert-butyldimethyl). Silyl group).
  • amino-protecting group examples include an alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms (for example, acetyl group), a benzoyl group, an alkyloxycarbonyl group having 2 to 8 carbon atoms (for example, tert-butoxycarbonyl group or benzyloxy group) Carbonyl group), an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, benzyl group) or a phthaloyl group.
  • alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms for example, acetyl group
  • benzoyl group an alkyloxycarbonyl group having 2 to 8 carbon atoms (for example, tert-butoxycarbonyl group or benzyloxy group) Carbonyl group)
  • an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms for example, benzyl group
  • a phthaloyl group examples include an alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms (for example
  • Examples of the protecting group for the sulfhydryl group include a trityl group, a 2-mercaptopyridyl group, and a 2-mercapto-5-nitropyridyl group.
  • Examples of the protecting group for the carboxyl group include an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms (for example, a methyl group, an ethyl group, or a tert-butyl group) or an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, a benzyl group).
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the peptide derivative (I) can be obtained, for example, by deprotecting the protected peptide derivative (III) as shown in Scheme 1.
  • PG represents a protecting group
  • X is NR
  • Y represents NH 2 or SH
  • Y ′ represents NH or S.
  • X is an oxygen atom
  • Y represents NH 2 , SH, OH, or a phenyl group in which any one hydrogen atom is substituted with NH 2 or OH
  • Y ′ represents NH, S, O, or any one of It represents a phenyl group in which a hydrogen atom is substituted with NH or O.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the protected peptide derivative (III) can be obtained, for example, by a condensation reaction of a carboxylic acid derivative (IV) and a nucleophile (V) as shown in Scheme 2. [Wherein each symbol is the same as defined above. ]
  • the amount of the nucleophile (V) used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 1 to 3 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include ethyl chloroformate, oxalyl chloride, 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, hexafluorophosphoric acid 2- (7-aza-1H-benzotriazole- 1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N′N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate, 1H-benzo Examples include triazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, ethyl chloroformate, hexafluorophosphate 2- (7-aza-1H-benzotriazole -1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium or 2-methyl-6- Toro benzoic anhydr
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (IV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the nucleophilic agent (V) can be purchased or synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the peptide derivative (I) can also be obtained, for example, by a condensation reaction between a carboxylic acid derivative (IV) and a nucleophile (VI) as shown in Scheme 3.
  • X represents NR
  • Y represents OH or a phenyl group in which any one hydrogen atom is substituted with NH 2 or OH, and other symbols are the same as defined above].
  • the amount of the nucleophile (VI) used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 1 to 3 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include ethyl chloroformate, oxalyl chloride, 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, hexafluorophosphoric acid 2- (7-aza-1H-benzotriazole- 1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N′N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate or 1H-benzo Triazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, such as ethyl chloroformate or hexafluorophosphate 2- (7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3 3-tetramethyluronium is preferred.
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (IV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the nucleophilic agent (VI) can be purchased or synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the carboxylic acid derivative (IV) can be obtained, for example, by deprotecting the ester derivative (VII) as shown in Scheme 4. [Wherein each symbol is the same as defined above. ]
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the ester derivative (VII) can be synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the protected phenoxycarbamate derivative (IX) can be obtained, for example, by a condensation reaction of a phenol derivative (Ia) and an electrophile (VIII-a) or (VIII-b) as shown in Scheme 5. it can. [Wherein each symbol is the same as defined above. ]
  • the amount of the electrophile (VIII-a) or (VIII-b) used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 1 to 3 equivalents, relative to the phenol derivative (Ia).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone, pyridine or dimethylsulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • a chlorinated solvent such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, a nitrile solvent such as acetonitrile or propionitrile, or a mixed solvent thereof, but a chlorinated solvent such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine or pyridine, or mixtures thereof, and organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine or pyridine.
  • a base is preferred.
  • the amount of the base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the phenol derivative (Ia).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the phenol derivative (Ia) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the electrophile (VIII-a) or (VIII-b) can be generated from a known amine derivative or carboxylic acid derivative by a known method or a method analogous thereto or in a reaction system.
  • the protected polyethylene glycol derivative (XI) can be used, for example, as shown in Scheme 6 from basic to medium deprotection of the protected phenoxycarbamate derivative (IX) followed by carboxylic acid derivative (X). Coupling reaction (when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group) or a condensation reaction (when G is a hydrogen atom). [Wherein G represents a hydrogen atom, a succinimidyl group or a p-nitrophenyl group, and other symbols are the same as defined above. ]
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (X) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (X) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (X).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (X).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (X) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the carboxylic acid derivative (X) can be purchased or synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the prodrug (XIII) of the peptide derivative (I) is prepared by, for example, deprotection of the protected phenoxycarbamate derivative (IX) followed by the basic reaction with the carboxylic acid derivative (XII) as shown in Scheme 7.
  • a coupling reaction under neutral conditions when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group
  • a condensation reaction when G is a hydrogen atom.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XII) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XII) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XII).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XII).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XII) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the carboxylic acid derivative (XII) can be purchased, or can be synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the prodrug (XIII) of the peptide derivative (I) is a basic compound of the protected polyethylene glycol derivative (XI) followed by the deprotection reaction with the carboxylic acid derivative (XIV) as shown in Scheme 8, for example.
  • a coupling reaction under neutral conditions when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group
  • a condensation reaction when G is a hydrogen atom.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XIV) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the protected polyethylene glycol derivative (XI).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of base used in the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the protected polyethylene glycol derivative (XI).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably from 0.1 to 100 equivalents, more preferably from 0.3 to 30 equivalents, based on the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of the base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the carboxylic acid derivative (XIV) can be purchased or synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the prodrug (XV) of the peptide derivative (I) is a basic compound of the protected phenoxycarbamate derivative (IX) followed by the deprotection reaction with the carboxylic acid derivative (XIV), for example, as shown in Scheme 9.
  • a coupling reaction under neutral conditions when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group
  • a condensation reaction when G is a hydrogen atom.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XIV) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the protected phenoxycarbamate derivative (IX).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably from 0.1 to 100 equivalents, more preferably from 0.3 to 30 equivalents, based on the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of the base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the disulfide derivative (XVII) can be obtained, for example, by a condensation reaction between a carboxylic acid derivative (IV) and a nucleophile (XVI) as shown in Scheme 10.
  • W represents a 2-mercaptopyridyl group, a 2-mercapto-5-nitropyridyl group or -Alk 1 -N (Z) (PG), and other symbols are the same as defined above.
  • the amount of the nucleophile (XVI) used for the condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 1 to 3 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include ethyl chloroformate, oxalyl chloride, 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, hexafluorophosphoric acid 2- (7-aza-1H-benzotriazole- 1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N′N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate, 1H-benzo Examples include triazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate or 2-methyl-6-nitrobenzoic acid anhydride, such as ethyl chloroformate, hexafluorophosphate 2- (7-aza-1H-benzotriazole -1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, 1H-benzotria Lum
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (IV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (IV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the nucleophile (XVI) can be purchased or synthesized by a known method or a method analogous thereto.
  • the protected polyethylene glycol derivative (XVIII) can be obtained, for example, from basic to neutral conditions by deprotection of the disulfide derivative (XVII-a) and subsequent carboxylic acid derivative (X) as shown in Scheme 11. It can be obtained by a coupling reaction (when G is a succinimidyl group or a p-nitrophenyl group) or a condensation reaction (when G is a hydrogen atom). [Wherein each symbol is the same as defined above. ]
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (X) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (X) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (X).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (X).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (X) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the prodrug (XIX) of the peptide derivative (I) can be obtained from a basic to medium deprotection reaction of the disulfide derivative (XVII-a) followed by the carboxylic acid derivative (XII). Coupling reaction (when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group) or a condensation reaction (when G is a hydrogen atom). [Wherein each symbol is the same as defined above. ]
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XII) used in the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XII) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably 0.1 to 100 equivalents, more preferably 0.3 to 30 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XII).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XII).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XII) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the prodrug (XIX) of the peptide derivative (I) is prepared by, for example, deprotection of a protected polyethylene glycol derivative (XVIII) followed by a basic reaction with a carboxylic acid derivative (XIV) as shown in Scheme 13.
  • a coupling reaction under neutral conditions when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group
  • a condensation reaction when G is a hydrogen atom.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction or the condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the protected polyethylene glycol derivative (XVIII).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents with respect to the protected polyethylene glycol derivative (XVII).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably from 0.1 to 100 equivalents, more preferably from 0.3 to 30 equivalents, based on the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of the base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the prodrug (XX) of the peptide derivative (I) can be obtained from a basic to medium deprotection reaction of the disulfide derivative (XVII-a) followed by the carboxylic acid derivative (XIV).
  • Coupling reaction when G is a succinimidyl group or p-nitrophenyl group
  • a condensation reaction when G is a hydrogen atom.
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the amount of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction or condensation reaction is preferably 0.5 to 10 equivalents, more preferably 0.5 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can be adjusted with a base.
  • the base to be used include organic bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, inorganic bases such as sodium hydrogencarbonate or potassium carbonate, metal hydride compounds such as sodium hydride, potassium hydride or calcium hydride, methyllithium or butyllithium.
  • lithium amides such as lithium hexamethyldisilazide or lithium diisopropylamide or a mixture thereof
  • an inorganic base such as sodium hydrogen carbonate or potassium carbonate or an organic base such as triethylamine or diisopropylethylamine is preferred.
  • the amount of the base used for the coupling reaction is preferably 0.001 to 10 equivalents, more preferably 0.001 to 4 equivalents, relative to the disulfide derivative (XVII-a).
  • the pH of the coupling reaction can also be adjusted with a buffer solution.
  • the buffer used include a phosphate buffer, a citrate buffer, a citrate phosphate buffer, a borate buffer, a tartrate buffer, or a Tris buffer, and have a pH of 7.0 to 8.0.
  • a buffer is preferred.
  • the concentration of the buffer used for the coupling reaction is preferably 10 mmol / L to 1 mol / L.
  • the reaction solvent used in the coupling reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethyl Aprotic polar solvents such as acetamide, N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate
  • Examples include chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, water or mixed solvents thereof, but chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane.
  • nitrile solvents such as acetonitrile or propion
  • the reaction temperature of the coupling reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the coupling reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the coupling reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • Examples of the condensing agent used in the condensation reaction include carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimide, or 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, ethyl chloroformate, oxalyl chloride, hexafluorophosphate 2- ( 7-aza-1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyl
  • Examples include uronium hexafluorophosphate, 1H-benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, or 2-methyl-6-nitrobenzoic anhydride, but dicyclohexylcarbodiimide, diisopropylcarbodiimi
  • the amount of the condensing agent used in the condensation reaction is preferably from 0.1 to 100 equivalents, more preferably from 0.3 to 30 equivalents, based on the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction solvent used for the condensation reaction is appropriately selected depending on the type of reagent used, but is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide Aprotic polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone or dimethyl sulfoxide, ether solvents such as diethyl ether, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or 1,4-dioxane, ester solvents such as ethyl acetate or propyl acetate, dichloromethane , Chlorinated solvents such as chloroform or 1,2-dichloroethane, nitrile solvents such as acetonitrile or propionitrile, or mixed solvents thereof, including chlorinated solvents such as dichloromethane, chloroform or 1,2-dichloroethane, or N , - dimethylformamide, N, N- dimethylacetamide, apro
  • a base may be used if desired.
  • the base to be used include inorganic bases such as sodium hydride, sodium bicarbonate or potassium carbonate, organic bases such as triethylamine, diisopropylethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine, or a mixture thereof.
  • organic bases such as ethylamine, 4-dimethylaminopyridine or pyridine or mixtures thereof are preferred.
  • the amount of the base used in the condensation reaction is preferably 0.5 to 20 equivalents, more preferably 1 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid derivative (XIV).
  • the reaction temperature of the condensation reaction is preferably ⁇ 40 ° C. to 200 ° C., more preferably ⁇ 20 ° C. to 150 ° C.
  • the reaction time of the condensation reaction is appropriately selected according to the reaction temperature and other conditions, but is preferably 30 minutes to 30 hours.
  • the concentration of the carboxylic acid derivative (XIV) used for the condensation reaction at the start of the reaction is preferably 1 mmol / L to 1 mol / L.
  • the complex of the present invention is characterized by containing the peptide derivative (I) and a targeting ligand or polymer.
  • the “targeting ligand” is a substance for transporting a physiologically active compound including the peptide derivative (I) to a specific cell, and examples thereof include an antigen-binding protein, a cytokine, or a low molecular weight ligand.
  • an “antigen-binding protein” is a protein having the property of binding to a specific protein present on the cell surface, such as an immunoglobulin molecule, a single chain antibody, a scFv, a Fab fragment, or an F (ab ′) fragment.
  • an immunoglobulin molecule such as an immunoglobulin molecule, a single chain antibody, a scFv, a Fab fragment, or an F (ab ′) fragment.
  • Cytokine refers to interleukin, chemokine, interferon, cell growth factor, cytotoxic factor, or modified proteins thereof, such as interleukin-2, interleukin-2 fusion protein, interleukin-3, Interleukin-4, Interleukin-6, Interleukin-8, Interleukin-12, Interleukin-17, CCL1 to 28, CXCL1 to 17, XCL1, XCL2, CX3CL1 Interferon ⁇ , Interferon ⁇ , Interferon ⁇ , Interferon ⁇ , Interferon ⁇ , consensus interferon, granule colony-stimulating factor (GCSF), granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GMCSF), CD-40 ligand, luteinizing hormone release Hormone (LHRH), insulin-like growth factor (IGF), macrophage colony stimulating factor (M-CSF), nerve growth factor (NGF), platelet-derived growth factor, tissue growth factor, transforming growth factor-1, vascular endo
  • “Small molecule ligand” refers to an organic compound or peptide derivative having a property of binding to a specific protein present on the cell surface and having a molecular weight of less than 1000, for example, biotin, folic acid, integrin inhibitor, cRGD, RGD , PSMA inhibitors or VEGF inhibitors, but are not limited to these.
  • Polymer means a high molecular weight organic compound having a number average molecular weight of 1,000 to 1,000,000 composed of a constant repeating structure, and examples thereof include polyethylene glycol, polyglutamic acid, polyamino acid or polysaccharide. Alternatively, polyglutamic acid is preferable, and polyethylene glycol having a number average molecular weight of 20000 to 100,000 or polyglutamic acid having a number average molecular weight of 20000 to 100,000 is more preferable.
  • the antigen binding proteins, cytokines and peptide derivatives described above are, for example, their chemically synthesized, their recombinant, their natural products, their glycosylated or non-glycosylated forms, non-natural to them.
  • the form in which an amino acid is introduced the form in which a functional group (for example, an aldehyde group or a sulfhydryl group) is introduced by chemical reaction or enzymatic reaction such as oxidation or reduction, and biologically active fragments thereof are also included.
  • an “unnatural amino acid” is an amino acid that exists in nature and is not included in the amino acids that make up a protein (natural amino acids), and is naturally occurring or produced by chemical synthesis, ie, naturally occurring It means an amino acid that exists and does not constitute a protein, an amino acid obtained by chemically modifying a natural amino acid, or an amino acid that is not included in a natural amino acid and that is produced by chemical synthesis.
  • D-amino acid, citrulline, ornithine (S) -2-amino-3- (3-methyl-3H-diazilin-3-yl) propanoic acid ((S) -2-amino-3- ( 3-methyl-3H-diazirin-3-yl) propanoic acid, also referred to as photo-L-leucine), (S) -2-amino-4- (3-methyl-3H-diazilin-3-yl) butanoic acid ( (S) -2-amino-4- (3-methyl-3H-diazirin-3-yl) butanoic acid, also referred to as photo-L-methionine), (S) -3- (4-acetylphenyl) -2- Aminopropanoic acid ((S) -3- (4-acetylphenyl) -2-aminopropanoic acid, 4-acetyl-L-fu Nylalanine) or
  • the above-mentioned low-molecular-weight ligands appropriately include analogs thereof, derivatives thereof, agonists thereof, antagonists thereof, inhibitors thereof, isomers thereof, and the like.
  • “Complex” means a substance containing peptide derivative (I) or a prodrug thereof and the above targeting ligand, a substance containing peptide derivative (I) or a prodrug thereof and the above polymer, or a peptide derivative. (I) or a prodrug thereof, a substance containing the above targeting ligand and the above polymer (hereinafter collectively referred to as a complex containing the peptide derivative (I)), each of which is directly bound or other The substance is indirectly bonded via a substance (hereinafter referred to as a linker).
  • Examples of the complex containing the peptide derivative (I) include an antibody drug complex in which the peptide derivative (I) or a prodrug thereof and an immunoglobulin molecule are directly bound or indirectly bound via a linker. Is mentioned.
  • Examples of the complex containing the peptide derivative (I) include a low molecule in which the peptide derivative (I) or a prodrug thereof and a low molecular ligand are directly bonded or indirectly bonded via a linker.
  • a pharmaceutical complex is mentioned.
  • a complex containing the peptide derivative (I) for example, a polymer pharmaceutical complex in which the peptide derivative (I) or a prodrug thereof and the polymer are directly bonded or indirectly bonded via a linker.
  • the body is mentioned.
  • the complex containing the peptide derivative (I) includes, for example, the peptide derivative (I) or a prodrug thereof, each of which is independently bonded to the polymer and the targeting ligand or via a linker. And indirectly bound substances.
  • the complex containing the peptide derivative (I) is, for example, that the peptide derivative (I) or a prodrug thereof and the targeting ligand are directly bonded to the polymer or via a linker. And indirectly bound substances.
  • the complex containing the peptide derivative (I) includes, for example, the above-described targeting ligand, wherein the peptide derivative (I) or a prodrug thereof and the polymer are directly bonded to each other or via a linker. And indirectly bound substances.
  • “Containing peptide derivative (I)” means that peptide derivative (I) or a prodrug thereof is a known method (for example, Ellen M. Sletten et al., Angelwante Chimie International Edition, 2009, Vol. 48, p. 6974). -6998, Greg T. Hermanson., "Bioconjugate Technique", Elsevier, Xi Chem et al., Organic & Biomolecular Chemistry, 2016, Vol. 14, p. 5417-5439, or the corresponding method. Or it is directly bonded to the polymer by a covalent bond or indirectly linked via a linker. .
  • covalent bond examples include, for example, a bond by addition of a sulfhydryl group to a maleimide group, a disulfide bond, a bond by condensation of an amino group or a hydroxy group and a carboxyl group, a bond by a click reaction of an alkyne group and an azide group, Examples include a bond by condensation of an aminooxy group and a carbonyl group or a bond by an ene-type reaction of a diazo group and a phenol group, a bond by addition of a sulfhydryl group to a maleimide group, a disulfide bond, an amino group or a hydroxy group and a carboxyl group.
  • a bond by condensation or a bond by condensation of an aminooxy group and a carbonyl group is preferred, but is not limited thereto.
  • Linker means peptide derivative (I) or a prodrug thereof, the above targeting ligand and the above polymer and a functional group (eg, maleimide group, carboxyl group, activated carboxyl group, carbonyl group, aminooxy group, hydrazide group) , A diazo group, an alkyne group, or a hydroxy group).
  • a functional group eg, maleimide group, carboxyl group, activated carboxyl group, carbonyl group, aminooxy group, hydrazide group
  • Examples of compounds having these functional groups include N-succinimidyl 4- (maleimidomethyl) cyclohexanecarboxylate (SMCC), sulfosuccinimidyl-4- (N-maleimidomethyl) -cyclohexane-1-carboxylate ( Sulfo-SMCC), N-succinimidyl-4- (N-maleimidomethyl) -cyclohexane-1-carboxy- (6-amidocaproate) (LC-SMCC), ⁇ -maleimidoundecanoic acid N-succinimidyl ester (KMUA) ), ⁇ -maleimidobutyric acid N-succinimidyl ester (GMBS), ⁇ -maleimidocaproic acid N-hydroxysuccinimide ester (EMCS), m-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide ester (MBS), N- ( ⁇ -male Imidoacetoxy)
  • the “specific protein present on the cell surface” is a protein whose expression on the cell surface increases in cancer, autoimmune disease or infection, for example, CD19, CD22, CD30, CD33, CD37, CD56, CD66e, CD70, CD74, CD79b, DLL-3, PSMA, GPNMB, Her2, CA6, CA9, Mesothelin, Nectin-4, SLC44A4, Cripto, Folate receptor, STEAP-1, MUC16, NaPi2b, GCC, EGFRViii, 5T4, TROP-2, LIV-1, SLITRK6, Tissue Factor, Guanylyl Cycle C, CEACAM5, integrin receptor, interleukin receptor, PSMA, chemokine receptor, inter Ferron receptor, although cell growth factor receptors or cytotoxic factor receptors include, but are not limited thereto.
  • Examples of the pharmacologically acceptable salt of the complex containing the peptide derivative (I) include the same salts as the pharmacologically acceptable salts of the peptide derivative (I).
  • the complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof may be an anhydride, or may form a solvate such as a hydrate.
  • the solvate is preferably a pharmacologically acceptable solvate.
  • the pharmacologically acceptable solvate may be either a hydrate or a non-hydrate, but a hydrate is preferable.
  • the solvent constituting the solvate include alcohol solvents such as methanol, ethanol, and n-propanol, N, N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, and water.
  • the compounds described in Table 4 also include pharmacologically acceptable salts thereof.
  • r represents an integer of 1 to 50
  • L represents a targeting ligand, a polymer, or a polymer and a targeting ligand, and other symbols are the same as defined above.
  • a 4 are left (the side bonded to the amino group) is carbonyl end, the right (the side bound to a carbonyl group) is an amino terminus. Also, when A 4 is Lys, Glu and Asp can be attached from the amino group or carboxyl group of the side chain.
  • X is NR
  • Alk 1 is — (CH 2 ) 2 —
  • PEG is — (CH 2 CH 2 O) 12 —.
  • a 4 is more preferably Glu bonded with a main chain
  • X is NR
  • R and Z are methyl groups
  • Alk 1 and Alk 2 are — (CH 2 ) 2 —.
  • PEG is — (CH 2 CH 2 O) 12 —
  • a 4 is Glu bonded with a main chain.
  • X is N (Me)
  • Alk 1 is — (CH 2 ) 2 —
  • PEG is — (CH 2 CH 2 O) 12. More preferably, A 4 is Glu bonded by a main chain
  • X is N (Me)
  • Z is a methyl group
  • Alk 1 and Alk 2 are — (CH 2 ) 2 -
  • PEG is - (CH 2 CH 2 O) 12 -
  • a 4 is more preferably a Glu bound in the main chain.
  • the complex containing the peptide derivative (I) can be produced by an appropriate method based on characteristics derived from the basic skeleton and the type of substituent.
  • the starting materials and reagents used in the production of these compounds can be generally purchased, or can be produced by a known method or a method analogous thereto.
  • the complex containing the peptide derivative (I) and the intermediates and starting materials used for the production thereof can be isolated and purified by known means.
  • Known means for isolation and purification include, for example, solvent extraction, recrystallization or chromatography.
  • each isomer can be obtained as a single compound by a known method.
  • Known methods include, for example, crystallization, enzyme resolution, or chiral chromatography.
  • a protective group may be introduced into these groups, and the protective group may be removed as necessary after the reaction. By protecting, the target compound can be obtained.
  • Examples of the protective group for the hydroxy group include a trityl group, a tetrahydropyranyl group, an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, a benzyl group) or a substituted silyl group (for example, a trimethylsilyl group, a triethylsilyl group, or tert-butyldimethyl). Silyl group).
  • amino-protecting group examples include an alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms (for example, acetyl group), a benzoyl group, an alkyloxycarbonyl group having 2 to 8 carbon atoms (for example, tert-butoxycarbonyl group or benzyloxy group) Carbonyl group), an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, benzyl group) or a phthaloyl group.
  • alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms for example, acetyl group
  • benzoyl group an alkyloxycarbonyl group having 2 to 8 carbon atoms (for example, tert-butoxycarbonyl group or benzyloxy group) Carbonyl group)
  • an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms for example, benzyl group
  • a phthaloyl group examples include an alkylcarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms (for example
  • Examples of the protecting group for the sulfhydryl group include a trityl group, a 2-mercaptopyridyl group, and a 2-mercapto-5-nitropyridyl group.
  • Examples of the protecting group for the carboxyl group include an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms (for example, a methyl group, an ethyl group, or a tert-butyl group) or an aralkyl group having 7 to 10 carbon atoms (for example, a benzyl group).
  • the deprotection of the protecting group varies depending on the type of the protecting group, but is performed according to a known method (for example, Greene, TW, “Green's Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley-Interscience) or a method equivalent thereto. be able to.
  • the complex containing the peptide derivative (I) is obtained by subjecting the peptide derivative (I) or a prodrug thereof or a salt thereof to the above targeting ligand and / or the above polymer or a salt thereof by a known method (for example, Ellen).
  • a known method for example, Ellen.
  • the complex containing the peptide derivative (I) may be labeled with an isotope, and examples of the labeled isotope include 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 15 O, 17 O, 18 O and / or 125 I.
  • Examples of the peptide derivative (I) or a prodrug thereof, the targeting ligand, or the salt of the polymer used for the above-mentioned conjugation include, for example, hydrochloride, sulfate, nitrate, hydrobromide, hydroiodide, Inorganic acid salts such as phosphate, oxalate, malonate, citrate, fumarate, lactate, malate, succinate, tartrate, acetate, trifluoroacetate, maleate , Gluconate, benzoate, ascorbate, glutarate, mandelate, phthalate, methanesulfonate, ethanesulfonate, benzenesulfonate, p-toluenesulfonate, camphorsulfonate Salt, organic acid salt such as aspartate, glutamate or cinnamate, triethylamine salt, diisopropylethylamine salt, ethanol A salt with an organic
  • the peptide derivative (I) or a prodrug thereof, the targeting ligand or the polymer salt may be an anhydride or may form a solvate such as a hydrate.
  • the solvent constituting the solvate include alcohol solvents such as methanol, ethanol or n-propanol, N, N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide or water.
  • the cytotoxic agent of the present invention is effective for peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof. It is characterized by containing as a component.
  • “Cytotoxic agent” means a composition containing, as an active ingredient, a compound that causes cell death by impairing cell function or inhibiting cell proliferation or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • the “cytotoxic agent” includes a complex containing a compound that causes cell death by impairing cell function or inhibiting cell proliferation, or a prodrug thereof, and the above targeting ligand or the above polymer, or the like
  • a composition containing a pharmacologically acceptable salt as an active ingredient is also included.
  • the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof can be used in mammals (eg, mouse, rat, hamster, Rabbits, cats, dogs, monkeys, cows, sheep or humans), particularly when administered to humans, can be used as useful cytotoxic agents.
  • mammals eg, mouse, rat, hamster, Rabbits, cats, dogs, monkeys, cows, sheep or humans
  • the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof is used as it is or a pharmacologically acceptable carrier. It can be formulated and administered as a cytotoxic agent to the above mammals orally or parenterally.
  • parenteral administration examples include injection administration, nasal administration, pulmonary administration, transdermal administration, sublingual administration, and rectal administration, and injection administration is preferable.
  • injection administration refers to administration of a cytotoxic agent systemically or locally by injection or infusion, and examples of the administration site include intravenous, intramuscular, intraperitoneal, and subcutaneous.
  • a cytotoxic agent containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient is a pharmaceutical technique. It can be produced by a known method generally used in the field (for example, Remington's Pharmaceutical Science, latest edition, Mark Publishing Company, Easton, USA). In addition, the cytotoxic agent of the present invention can be prepared by using excipients, binders, disintegrants, lubricants, sweeteners, surfactants, suspending agents, emulsifiers, which are usually used in the pharmaceutical field, if necessary.
  • additives such as colorants, preservatives, fragrances, flavoring agents, stabilizers, thickeners, buffering agents, tonicity agents, fluidity promoters, and the like can be appropriately contained.
  • pharmacologically acceptable carriers include these additives.
  • a cytotoxic agent comprising the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient is Based on the mechanism, it can be used as a therapeutic agent for diseases that can be expected to improve pathological conditions or relieve symptoms, such as cancer, autoimmune diseases, or infectious diseases.
  • Cancer is a disease caused by an uncontrolled and abnormally growing cell population, such as pharyngeal cancer, laryngeal cancer, tongue cancer, non-small cell lung cancer, breast cancer, esophageal cancer, stomach cancer, colon cancer, uterus.
  • Cancer endometrial cancer, ovarian cancer, liver cancer, pancreatic cancer, gallbladder cancer, bile duct cancer, kidney cancer, renal pelvic and ureteral cancer, bladder cancer, prostate cancer, malignant melanoma, thyroid cancer, neuroosteosarcoma, chondrosarcoma, Rhabdomyosarcoma, hemangiosarcoma, fibrosarcoma, glioma, leukemia, malignant lymphoma, neuroblastoma, myeloma or brain tumor.
  • autoimmune disease is a disease caused by an abnormal immune response to a substance or cells in a living body, such as active chronic hepatitis, Addison's disease, ankylosing spondylitis, antiphospholipid syndrome, arthritis, atopic Allergy, Behcet's disease, cardiomyopathy, celiac disease, Kogan syndrome, cold coagulopathy, Crohn's disease, Cushing's syndrome, dermatomyositis, discoid lupus erythematosus, erythema, fibromyalgia, glomerulonephritis, Goodpasture's syndrome, graft pair Host disease, Graves' disease, Guillain-Barre syndrome, Hashimoto's disease, idiopathic adrenal atrophy, idiopathic pulmonary fibrosis, IgA nephropathy, inflammatory bowel disease, insulin-dependent diabetes, juvenile arthritis, Lambert-Eaton myasthenia syndrome, Lichen planus,
  • infectious disease is a disease caused by infection with bacteria, fungi, pathogenic protozoa, yeast or virus, and the causes thereof include, for example, staphylococci, streptococci, enterococci, corynebacterium, bacillus, Listeria, Peptococcus, Peptostreptococcus, Clostridium, Eubacterium, Propionibacterium, Lactobacillus, Neisseria, Blanchamella, Hemophilus, Bordetella, Escherichia coli, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Hafnia, Proteus, Morganella, Providencia, Yersinia, Campylobacter, Vibrio, Aeromonas, Pseudomonas, Xanthomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Brucella, Legionella, Beironella, Ba Teloides, Fusobacterium, Mycoplasm
  • the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, or a complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof is cytotoxic using an in vitro test. Can be evaluated. Examples of in vitro tests include the trypan blue dye exclusion method, lactate dehydrogenase (LDH) activity method, [ 3 H] thymidine incorporation method, propidium iodide, which measures the number of dead cells or viable cells after compound treatment.
  • LDH lactate dehydrogenase
  • ATP using a nuclear staining method a method using a dye such as MTT, MTS and WST (Current Protocol in Toxicology, 2000, 2.6.1-2.26) or CellTiter-Glow (product of Promega) Examples include a method of measuring the amount, and the method of measuring the number of viable cells after treatment with the compound using the MTS method and determining the cytotoxicity value at that time by the 50% working concentration (EC 50 ) is preferable.
  • the cytotoxicity of the complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof the cells are treated with a medium containing the compound for a certain period of time, and then the medium is removed.
  • a method of measuring the number of viable cells after changing and further culturing for a certain time is preferable (Bioconjugate Chemistry. 2014, Vol. 25, p. 560-568).
  • human ovarian cancer cell SKOV-3 cell human alveolar basal epithelial adenocarcinoma cell A549 cell, mouse lymphocytic leukocyte L1210 cell and the like are used.
  • the permeability of the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof through the cell membrane can be measured using an in vitro cell membrane permeability evaluation method.
  • an in vitro cell membrane permeability evaluation method for example, a method using a single-layer cell membrane system such as Caco-2 or Madin-Darby canine kidney (MDCK), or a Parallel Artificial Membrane Permeation using an artificial lipid membrane holding a lipid or the like in a filter.
  • Assay PAMPA (Japanese Patent Laid-Open No. 2007-11803) and the like.
  • LC / MS liquid chromatograph mass spectrometer
  • combined by the commercially available or well-known method or a method according to it was used.
  • the solvent name shown in the NMR data indicates the solvent used for the measurement.
  • the 400 MHz NMR spectrum was measured using a JNM-AL400 type nuclear magnetic resonance apparatus (manufactured by JEOL Ltd.) or a JNM-ECS400 type nuclear magnetic resonance apparatus (manufactured by JEOL Ltd.).
  • the chemical shift is represented by ⁇ (unit: ppm) based on tetramethylsilane, and the signals are s (single line), d (double line), t (triple line), q (quadruplex line), m, respectively.
  • ⁇ unit: ppm
  • the signals are s (single line), d (double line), t (triple line), q (quadruplex line), m, respectively.
  • the proton NMR spectrum which cannot be confirmed by broad such as OH or NH proton is not described in the data.
  • the molecular weight is Agilent Technologies 1200 Series, 6130A (manufactured by Agilent Technologies) (hereinafter LC / MS-1) or Agilent Technologies 1260 Infinity II Series, 6130B (manufactured by Agilent Technologies) (hereinafter LC / MS-2).
  • ESI electrospray ionization
  • HRMS Accurate mass spectrometry
  • t R The retention time (hereinafter referred to as t R ) was measured by high performance liquid chromatography (hereinafter referred to as HPLC).
  • HATU -1,1,3,3-tetramethyluronium
  • Example 1 2-((S) -1-(((2S, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2- ( (S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2- Synthesis of methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N- (2-mercaptoethyl) thiazole-4-carboxamide: To the compound of Reference Example 2 (25 mg, 0.022 mmol) was added 0.02M triethylsilane-containing trifluoroacetic acid (hereinafter TFA) / dichloromethane (volume ratio 1: 1) solution (4.5 mL), and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour.
  • TFA triethylsilane
  • Example 2 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl
  • the compound of Reference Example 3 was used instead of the compound of Reference Example 2, and the rest was synthesized in the same manner as in Example 1, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 2) was synthesized as a white solid (32 mg, Yield 83%).
  • Reference Example 5 Synthesis of N-methyl-2- (tritylthio) ethan-1-amine: To a dichloromethane solution (4.0 ml) of Reference Example 4 (150 mg, 0.35 mmol) was added 4N hydrogen chloride-dioxane (3.0 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 4 hours. To the reaction solution, an excessive amount of 5% by volume of methanol-containing dichloromethane was added, washed with saturated sodium bicarbonate, dehydrated with anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The title compound (hereinafter referred to as the compound of Reference Example 5) was obtained as an oily substance (15 mg, yield 40%). The obtained oily substance was used in the next reaction without purification.
  • Example 3 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl
  • propanamide) -2-phenylethyl) -N- (2-mercaptoethyl) -N-methylthiazole-4-carboxamide The compound of Reference Example 6 was used in place of the compound of Reference Example 2, and the others were synthesized in the same manner as in Example 1, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 3) was converted into a white amorphous (27 mg, Yield 77%).
  • the solvent of the obtained reaction solution was distilled off under reduced pressure, ethyl acetate was added, and the mixture was washed with a saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution and saturated brine.
  • the organic layer was dehydrated with anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure.
  • Reference Example 8 (2- (2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S)- 2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy -2-Methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N-methylthiazole-4-carboxamido) ethyl) Synthesis of tert-butyl carbamate: The title compound (hereinafter referred to as Reference Example) was synthesized in the same manner as in Reference Example 2 except that tert-butyl (2- (methylamino) ethyl) carbamate was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine.
  • Example 5 N- (2-aminoethyl) -2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4- ((S) -2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl ) -3-Methoxy-2-methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N-methylthiazole-4-carboxamide dihydrochloride: A 4N hydrogen chloride-dioxane solution (126 ⁇ L, 0.50 mmol) was added to a methanol solution (1.0 mL) of the compound of Reference Example 8 (33 mg, 0.033 mmol), and the mixture was stirred at room temperature for 15 hours.
  • Example 6 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl Propanamido) -2-phenylethyl) -N-methyl-N- (2- (methylamino) ethyl) thiazole-4-carboxamide dihydrochloride Synthesis: The compound of Reference Example 9 was used in place of the compound of Reference Example 8, and the others were synthesized in the same manner as in Example 5.
  • Example 7 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl
  • propanamide) -2-phenylethyl) -N- (2-hydroxyethyl) thiazole-4-carboxamide Synthesis was performed in the same manner as in Reference Example 2 except that 2-aminoethanol was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 7) was synthesized as a white solid (26 mg, Yield, quantitative).
  • Example 8 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl Propanamido) -2-phenylethyl) thiazole-4-carboxylic acid Synthesis of 2-hydroxyethyl: P-Toluenesulfonic acid monohydrate (7.2 mg) was added to an ethanol solution (1.0 mL) of the compound of Reference Example 10 (36 mg, 0.038 mmol), and the mixture was stirred at room temperature for 18 hours.
  • the solvent of the obtained reaction solution was distilled off under reduced pressure, diluted with dichloromethane, saturated aqueous potassium carbonate solution was added, and the mixture was extracted 3 times with chloroform.
  • the organic layer was dehydrated with anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure.
  • Example 9 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl
  • propanamide) -2-phenylethyl) -N- (2-hydroxyethyl) -N-methylthiazole-4-carboxamide The title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 9) was synthesized in the same manner as in Reference Example 2, except that 2- (methylamino) ethan-1-ol was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine.
  • Example 10 N- (4-aminophenethyl) -2-((S) -1-(((2S, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4 -((S) -2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidine-2- Yl) -3-methoxy-2-methylpropanamide) -2-phenylethyl) thiazole-4-carboxamide: Synthesis was performed in the same manner as in Reference Example 2 except that 4- (2-aminoethyl) aniline was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 10) was obtained.
  • Example 11 2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-(( S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methyl
  • propanamide) -2-phenylethyl) -N- (4-hydroxyphenethyl) thiazole-4-carboxamide Synthesis was performed in the same manner as in Reference Example 2 except that 4- (2-aminoethyl) phenol was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Example 11) was prepared.
  • Reference Example 13 (2- (2-((S) -1-(((2S, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S)) -2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3- Synthesis of tert-butyl methoxy-2-methylpropanamide) -2-phenylethyl) thiazole-4-carboxamido) ethyl) (methyl) carbamate: The title compound (hereinafter referred to as Reference Example) was synthesized in the same manner as in Reference Example 2 except that tert-butyl (2-aminoethyl) (methyl) carbamate was used instead of 2- (tritylthio) ethanamine.
  • Reference Example 14 2-((S) -1-(((2S, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2- ( (S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2- Synthesis of methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N- (2- (methylamino) ethyl) thiazole-4-carboxamide dihydrochloride: The compound of Reference Example 13 was used in place of the compound of Reference Example 8, and the others were synthesized in the same manner as in Example 5.
  • Reference Example 16 2-((S) -1-(((2S, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2- ( (S) -2- (Dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2- Synthesis of methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N- (2- (3-mercaptopropanamido) ethyl) thiazole-4-carboxamide: The compound of Reference Example 15 was used in place of the compound of Reference Example 2, and the others were synthesized in the same manner as in Example 1, and the title compound (hereinafter referred to as the compound of Reference Example 16) was synthesized as a white solid (7.
  • THF diethylamine-tetrahydrofuran
  • Reference Example 18 tert-butyl N5-((S) -5- (tert-butoxy) -1,5-dioxo-1-((2- (tritylthio) ethyl) amino) pentan-2-yl) -L -Glutamate synthesis: Reference Example 17 (480 mg, 0.53 mmol) was dissolved in 20% by volume diethylamine-THF solution (5.0 ml) and stirred overnight at room temperature, and then the reaction solution was concentrated under reduced pressure.
  • the obtained residue (7.5 mg) was dissolved in dehydrated pyridine (1.0 ml) and ice-cooled, and then a dehydrated pyridine solution (3.0 ml) of the compound of Example 11 (25 mg, 0.03 mmol) was added, The mixture was stirred overnight while returning to room temperature. After adding an excess amount of ethyl acetate, the mixture was washed three times with water and once with a saturated aqueous ammonium chloride solution and saturated brine, and the organic layer was dehydrated over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure.
  • Example 12 N2- (4-(((2-Amino-4-oxo-4,8-dihydropteridin-6-yl) methyl) amino) benzoyl) -N5-((2S) -4-carboxy- 1-((2-((1- (1- (4- (2-((S) -1-((2R, 3R) -3-((S) -1-((3R, 4R , 5S) -4-((S) -2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethylbutanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl ) Pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methylpropanamide) -2-phenylethyl) thiazole-4-carboxamide) ethyl) phenoxy) -2,9-dimethyl-1,10,50-trioxo-13 16, 19, 22, 25, 28, 31, 34,
  • LC / MS-1 The analysis conditions of LC / MS-1 are as follows.
  • LC / MS-1) Liquid chromatograph system: LC1200 (manufactured by Agilent Technologies) Mass spectrometer: 6130A (manufactured by Agilent Technologies)
  • Mobile phase A 0.1% by volume formic acid-distilled water
  • HPLC mobile phase B 0.1% by volume formic acid-acetonitrile
  • HPLC gradient condition mobile bed B% by volume 0-1.5 min: 20% -95% 1.5-3.0 min: 95%
  • Flow rate 0.5 mL / min
  • Injection volume 2.0 ⁇ L
  • Column temperature 40 ° C
  • LC / MS-2 The analysis conditions of LC / MS-2 are as follows.
  • LC / MS-2 Liquid chromatograph system: LC1260 Infinity II (manufactured by Agilent Technologies) Mass spectrometer: 6130B (manufactured by Agilent Technologies)
  • Mobile phase A 0.1% by volume formic acid-distilled water
  • HPLC mobile phase B 0.1% by volume formic acid-acetonitrile
  • HPLC gradient condition mobile bed B% by volume 0-1.5 min: 20% -95% 1.5-3.0 min: 95%
  • Flow rate 0.5 mL / min
  • Injection volume 2.0 ⁇ L
  • Column temperature 40 ° C
  • ODS column purification condition column Yamazen high flash column ODS size M Flow rate: 10 ml / min Column temperature: Room temperature Detection wavelength: 254 nm Moving bed A: 0.05% by volume TFA in H 2 O Moving layer B: 0.05% by volume TFA in CH 3 CN Gradient: moving bed B volume% 0-5 min: 5.0% 5-20 min: Increase from 5% to 95% 20-25 min: 95%
  • HPLC HPLC
  • Example 14 In vitro cytotoxicity evaluation of peptide derivative (I): The compounds of Examples 1 to 11, the compound of Reference Example 1, the compound of Reference Example 12, the compound of Reference Example 14, the compound of Reference Example 16 and 2-((S) -1-(((2S, 3R) -3 -((S) -1-((3R, 4S, 5S) -4-((S) -2-((S) -2- (dimethylamino) -3-methylbutanamide) -N, 3-dimethyl Butanamide) -3-methoxy-5-methylheptanoyl) pyrrolidin-2-yl) -3-methoxy-2-methylpropanamide) -2-phenylethyl) -N-ethylthiazole-4-carboxamide (hereinafter, comparison) The cytotoxicity of Example Compound) against SKOV-3 cells, A549 cells and L1210 cells was measured using the MTS method.
  • Table 5 shows the cytotoxicity of each test substance.
  • EC 50 means 50% effective concentration, which represents 50% of the maximum response from the lowest value of the pharmacological action exhibited by the drug
  • SKOV-3 represents SKOV-3 cells
  • L1210 represents L1210 cells.
  • test substance was dissolved in DMSO to 10 mmol / L and then diluted to 200 ⁇ mol / L with PBS containing 20% methanol as a standard solution.
  • the pre-coated PAMPA Plate System that was stored frozen was left at room temperature for 30 minutes or more.
  • 320 ⁇ L of the standard solution was added to the Donor side plate of the pre-coated PAMPA Plate System, 200 ⁇ L of PBS containing 20% methanol was added to the Acceptor side plate, both plates were set, and allowed to stand at room temperature for 5 hours.
  • the reaction solution in each well of the Donor side and Acceptor side plates was subjected to LC / MS analysis (hereinafter, LC / MS-3), and the compound concentration in each well was calculated.
  • LC / MS analysis hereinafter, LC / MS-3
  • the membrane permeation coefficient (Pe) (cm / s) was calculated from the following equation using the compound concentration of the reaction solution obtained in each well.
  • C equilibrium equilibrium concentration of Donor side and Acceptor side plate wells
  • CD concentration after 5 hours of Donor side plate wells (mmol / L)
  • VD Volume of standard solution added to Donor side plate well (0.32 mL)
  • CA concentration (mmol / L) after 5 hours in the acceptor side plate well
  • VA volume of PBS containing 20% methanol added to the acceptor side plate well (0.2 mL)
  • Table 6 shows the artificial membrane permeability of each test substance.
  • Example 16 In Vitro Cytotoxicity Evaluation of Complex Containing Peptide Derivative (I): The cytotoxicity of the compound of Example 12 and the compound of Example 13 against SKOV-3 cells, A549 cells and L1210 cells was measured using the MTS method.
  • the compound of Example 12 is a complex obtained by conjugating the prodrug of the compound of Example 11 with folic acid as a targeting ligand by an appropriate method.
  • the evaluation method of the compound of Example 12 is as follows. Each cell cultured in a medium not containing folic acid was treated with the compound of Example 12 for 2 hours, then changed to a new medium containing no compound, and continued to culture for 48 hours. The number of viable cells after 48 hours was measured using the MTS method.
  • the compound of Example 13 is a complex obtained by complexing the prodrug of the compound of Example 3 with folic acid as a targeting ligand by an appropriate method.
  • the method for evaluating the compound of Example 13 is as follows. Each cell cultured in a medium containing no folic acid was treated with the compound of Example 13 for 6 hours, then changed to a new medium containing no compound, and continued to culture for 48 hours. The number of viable cells after 48 hours was measured using the MTS method.
  • SKOV-3 cells and L1210 cells have been reported to express medium to high folate receptors on the cell surface.
  • A549 cells have been reported to be expressed to the extent that folate receptors are lowly expressed or not detected on the cell surface (Analytical Biochemistry, 2005, 338, 284-293, Molecular Cancer Therapeutics, 2015. , Vol. 14, pp. 1605-13).
  • Table 7 shows the cytotoxicity of each test substance.
  • EC 50 means 50% effective concentration, which represents 50% of the maximum response from the lowest pharmacological action exhibited by the drug
  • SKOV-3 represents SKOV-3 cells
  • L1210 represents L1210 cells.
  • the complex containing the peptide derivative (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof is selectively used against cancer cells in which the folate receptor is expressed on the cell surface. It was shown to have high cytotoxicity.
  • the peptide derivative (I) Since the peptide derivative (I) has various functional groups at the C-terminal, it is converted into a complex by conjugating the peptide derivative (I) or a prodrug thereof with a targeting ligand or polymer by an appropriate method. It was shown that it can be done.
  • the complex obtained by conjugating the peptide derivative (I) or its prodrug and the targeting ligand by an appropriate method is a cell that is selectively high for specific cells by the action of the targeting ligand. It was shown to have toxicity.
  • the peptide derivative (I) of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof has high cytotoxicity, it can be used as a cytotoxic agent. Moreover, since the peptide derivative (I) of the present invention has various functional groups at the C-terminus, the peptide derivative (I) or a prodrug thereof can be complexed with a targeting ligand or polymer. The body or a pharmacologically acceptable salt thereof can be used as a cytotoxic agent.

Abstract

本発明は、Ｃ末端に複合体の形成に利用可能な官能基を有し、細胞毒性を有する化合物を提供することを目的としている。本発明は、下式に代表されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。

Description

ペプチド誘導体及びその用途
　本発明は、ペプチド誘導体及びその用途に関する。
　海洋に存在するタツナミガイからは、細胞毒性を有する複数種類のペプチド誘導体が単離されている。それらペプチド誘導体の一種であり、極めて強力な細胞毒性を有する化合物として、ドラスタチン１０が知られている（特許文献１及び非特許文献１）。
　ドラスタチン１０の細胞毒性は、チューブリン重合阻害作用によって発揮されることが明らかになっており、これまでにその構造活性相関について報告されている（特許文献２及び３並びに非特許文献２）。また、同様のチューブリン重合阻害作用を有するペプチド誘導体として、他にモノメチルアウリスタチン（特許文献４及び５）があり、この化合物はリンカーと呼ばれる特定の構造を介して抗体の特定のアミノ酸と結合した抗体医薬複合体として利用されていることが知られている。
　抗体医薬複合体に利用できる医薬品としては、リンカー又は抗体との結合が可能な特定の置換基（例えば、アミノ基、スルフヒドリル基又はヒドロキシ基）を有していることが必要である。また、複合体の薬効に、その結合方法が大きな影響を与えるために、これまで複数種類の置換基の利用が報告されている（非特許文献３～５）。
　これまでに、チューブリン阻害薬で複合体に利用可能な官能基を有する誘導体としては、Ｎ末端にアミノ基を有する、上記のモノメチルアウリスタチン若しくはＰＦ－０６３８０１０１０（非特許文献６）又はＣ末端にアミノ基、ヒドロキシ基、カルボン酸、ヒドロキシルアミン若しくはアルキンを有するアウリスタチンＦ誘導体（特許文献６及び非特許文献７～９）が報告されている。
　一方、ドラスタチン１０のＣ末端からの展開として、エチルエステル、エチルアミド若しくはチアゾールアミドを有する誘導体が報告されている（非特許文献１０）。
特開平２－１６７２７８号公報 国際公開第１９９３／００３０５４号 国際公開第１９９５／００９８６４号 国際公開第２００２／０８８１７２号 国際公開第２００４／０１０９５７号 国際公開第２０１２／１７１０２０号
Ｐｅｔｔｉｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ、１９８７年、第１０９巻、ｐ．６８８３－６８８５ Ｍｉｙａｚａｋｉら、Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｂｕｌｌｅｎｔｉｎ、１９９５年、第４３巻、ｐ．１７０６－１７１８ Ｊａｉｎら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０１５年、第３２巻、ｐ．３５２６－３５４０ Ｔｒａｉｓら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、２０１３年、第２巻、ｐ．１１３－１２９ Ｋｅｒｎら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ、２０１６年、第１３８巻、ｐ．１４３０－１４４５ Ｍａｅｒｎａら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ、２０１４年、第５７巻、ｐ．１０５２７－４３ Ｄｏｒｏｎｉａら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００８年、第１９巻、ｐ．１９６０－１９６３ Ａｘｕｐら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃｅｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、２０１２年、第１０９巻、ｐ．１６１０１－１６１０６ ＶａｎＢｒｕｎｔら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０１５年、第２６巻、ｐ．２２４９－２２６０ Ｍｉｙａｚａｋｉら、Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９３年、ｐ．８５－８８
　しかしながら、これまでにＣ末端に複合体の形成に利用可能な官能基を有するドラスタチン１０誘導体は報告されていない。
　また、同一の骨格に基づいて異なる種類の置換基を有する誘導体は、新たな複合体の創出や複合体の構成が細胞毒性に与える影響の検証に有用であると考えられるが、これまでにその様な誘導体は報告されていない。
　そこで、本発明は、Ｃ末端に複合体の形成に利用可能な官能基を有するドラスタチン１０誘導体を提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、Ｃ末端に特定の官能基を有する新規なペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩が、複数のがん細胞に対して高い細胞毒性を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
　すなわち、本発明は以下の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 ［式中、Ｘは、酸素原子又はＮＲを表し、Ｙは、ＮＨ２、Ｎ（Ｍｅ）Ｈ、ＳＨ、ＯＨ又は任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基を表し、Ｒは、水素原子又は炭素数１～３のアルキル基を表す。但し、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、ＮＨ２である誘導体、及び、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、Ｎ（Ｍｅ）Ｈである誘導体を除く。］
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、酸素原子であることが好ましい。
　この場合、高い細胞毒性が期待できる。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、酸素原子であり、Ｙは、ＮＨ２、Ｎ（Ｍｅ）Ｈ、ＳＨ又はＯＨであることがより好ましい。
　この場合、より高い細胞毒性が期待できる。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、ＮＲであることが好ましい。
　この場合、高い細胞毒性が期待できる。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、ＮＲであり、Ｒは、炭素数１～３のアルキル基であることがより好ましい。
　この場合、より高い細胞毒性が期待できる。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、ＮＲであり、Ｒは、メチル基であることがさらに好ましい。
　この場合、さらに高い細胞毒性が期待できる。
　また、本発明は、上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体と、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。
　また、本発明は、上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、上記の複合体若しくはその薬理学的に許容される塩、を有効成分として含有する、細胞毒性剤を提供する。
　本発明のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩は、高い細胞毒性を有するため、細胞毒性剤として使用できる。
　また、本発明のペプチド誘導体は、Ｃ末端に種々の官能基を有するため、ペプチド誘導体又はそのプロドラッグと、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を複合化することができ、当該複合体又はその薬理学的に許容される塩は、細胞毒性剤として使用できる。
　本発明のペプチド誘導体は、以下の一般式（Ｉ）で示されることを特徴としている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 ［式中、Ｘは、酸素原子又はＮＲを表し、Ｙは、ＮＨ２、Ｎ（Ｍｅ）Ｈ、ＳＨ、ＯＨ又は任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基を表し、Ｒは、水素原子又は炭素数１～３のアルキル基を表す。但し、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、ＮＨ２である誘導体、及び、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、Ｎ（Ｍｅ）Ｈである誘導体を除く。］
　本明細書で使用する次の用語は、特に断りがない限り、下記の定義のとおりである。
　「任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基」とは、２－－アミノフェニル基、３－アミノフェニル基、４－アミノフェニル基、２－ヒドロキシフェニル基、３－ヒドロキシフェニル基又は４－ヒドロキシフェニル基を意味する。
　「炭素数１～３のアルキル基」とは、メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基を意味する。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体の好ましい化合物の具体例を表１に示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　表１に記載される化合物は、その薬理学的に許容される塩も包含する。
　上記の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体（以下、ペプチド誘導体（Ｉ））が、配座異性体、回転異性体、互変異性体、光学異性体、ジアステレオマー又はエピマー等を含有する場合には、いずれか一方の異性体も混合物もペプチド誘導体（Ｉ）に包含される。さらに、ペプチド誘導体（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体もペプチド誘導体（Ｉ）に包含される。
　ペプチド誘導体（Ｉ）の立体配置は、以下の式（ＩＩ）であることが好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
　また、本発明は、ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ又はその薬理学的に許容される塩が含まれる。ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグとは、生体内で酵素的又は化学的に、ペプチド誘導体（Ｉ）に変換される化合物である。ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグの活性本体は、ペプチド誘導体（Ｉ）であるが、ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグそのものが活性を有していてもよい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）のヒドロキシ基が、エステル化、カルボネート化、カルバメート化、アルキル化、リン酸化又はホウ酸化された化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、ペプチド誘導体（Ｉ）又はその合成中間体から合成することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）のアミノ基が、カルバメート化又はアミド化された化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、ペプチド誘導体（Ｉ）又はその合成中間体から合成することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）のスルフヒドリル基が、ジスルフィド結合を形成した化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、ペプチド誘導体（Ｉ）又はその合成中間体から合成することができる。
　上記のペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグの具体例を表２に示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　表２に記載される化合物は、その塩も包含する。
　表２中、Ｑは、公知の方法（例えば、Ｅｌｌｅｎ　Ｍ．　Ｓｌｅｔｔｅｎら、Ａｎｇｅｗａｎｔｅ　Ｃｈｉｍｉｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、２００９年、第４８巻、ｐ．６９７４―６９９８、Ｇｒｅｇ　Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ．，「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ」、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ社、Ｘｉ　Ｃｈｅｍら、Ｏｒｇａｎｉｃ　＆　Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０１６年、第１４巻、ｐ．５４１７―５４３９）又はそれに準ずる方法で複合化可能な官能基（例えば、マレイミド基、カルボキシル基、活性化されたカルボキシル基、カルボニル基、アミノオキシ基、ヒドラジド基、ジアゾ基、アルキン基又はヒドロキシ基）を表し、Ｊは、存在しない又はスペーサーを表し、Ａ１、Ａ２及びＡ３はアミノ酸を表し、Ｚは、水素原子又はメチル基を表し、それ以外の記号は上記定義に同じである。
　「スペーサー」とは、ペプチド誘導体（Ｉ）又はペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグとＱを繋ぐ構造を表し、例えば、直鎖若しくは分岐した炭素数１～１２のアルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｚ）－若しくは－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－、ＰＥＧ、ジスルフィド結合又はこれらの組み合わせで構成された構造が挙げられ、これらの組み合わせで構成された構造が好ましい。
　「直鎖若しくは分岐した炭素数１～１２のアルキル基」とは、例えば、－（ＣＨ２）ｎ－、－ＣＨ（Ｍｅ）－、－Ｃ（Ｍｅ）２－、－（ＣＨ２）ｏＣＨ（Ｍｅ）－、－ＣＨ（Ｍｅ）（ＣＨ２）ｏ－、－（ＣＨ２）ｐＣ（Ｍｅ）２－又は－Ｃ（Ｍｅ）２（ＣＨ２）ｐ－が挙げられる。ｎは、１～１２の整数を表し、ｏは、１～１０の整数を表し、ｐは、１～９の整数を表す。
　「ＰＥＧ」は、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ－の繰返し構造で表される数平均分子量２００～２，０００の直鎖のポリエチレングリコールを表し、ｍは、５～４５の整数を表す。
　本明細書において、アミノ酸等を略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ　Ｃｏｍｍｉｓｉｏｎ　ｏｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ　による略号若しくは当該分野における慣用略号に基づくものであり、その例を下記する。またアミノ酸に関し光学異性体があり得る場合は、特記しない限り、明示しなければＬ体を示すものとする（例えば、「Ｌｙｓ」はＬ体のＬｙｓ）。また、「Ｄ－」と示される場合はＤ体を示し（例えば、「Ｄ－Ｌｙｓ」はＤ体のＬｙｓ）、「ＤＬ－」と示される場合はＤ体及びＬ体のラセミ体を示すものとする（例えば、「ＤＬ－Ｌｙｓ」はＤ体のＬｙｓ及びＬ体のＬｙｓのラセミ体）。
　「アミノ酸」は、ＤＬ－Ａｌａ、ＤＬ－Ａｒｇ、ＤＬ－Ａｓｎ、ＤＬ－Ａｓｐ、ＤＬ－Ｃｉｔ、ＤＬ－Ｃｙｓ、ＤＬ－Ｇｌｎ、ＤＬ－Ｇｌｕ、ＤＬ－Ｇｌｙ、ＤＬ－Ｈｉｓ、ＤＬ－Ｉｌｅ、ＤＬ－Ｌｅｕ、ＤＬ－Ｌｙｓ、ＤＬ－Ｍｅｔ、ＤＬ－Ｐｈｅ、ＤＬ－Ｐｒｏ、ＤＬ－Ｓｅｒ、ＤＬ－Ｔｈｒ、ＤＬ－Ｔｒｐ、ＤＬ－Ｔｙｒ又はＤＬ－Ｖａｌからいずれか一つが選ばれるが、Ａ１が、Ｌｙｓであり、Ａ２及びＡ３は、存在しない、Ａ１が、Ｃｉｔ若しくはＬｙｓであり、Ａ２が、Ｖａｌ若しくはＰｈｅであり、Ａ３は、存在しない、又は、Ａ１が、Ａｓｐであり、Ａ２及びＡ３が、Ａｌａであることが好ましい。
　表２中記載のＡ１は、フェニル基のＮＨとカルボニル末端で結合しており、Ａ１、Ａ２及びＡ３は、それぞれアミド結合を介して主鎖で結合している。
　表２中の番号６に記載のペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグの好ましい構造を、表３に示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　表３に記載される化合物は、その塩も包含する。
　表３中、Ａｌｋ１及びＡｌｋ２は、それぞれ独立して、直鎖又は分岐した炭素数１～１２のアルキル基を表し、Ｅは、存在しない又は－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｚ）－若しくは－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－を表し、それ以外の記号は上記定義に同じである。
　表３に記載のペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグは、Ａｌｋ１が、－（ＣＨ２）２－であることがより好ましく、Ｘが、ＮＲであり、Ａｌｋ１が、－（ＣＨ２）２－であり、Ｅが、－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－であり、ＰＥＧが、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－であり、Ｑが、マレイミド基であることがさらに好ましいが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　表２中の番号８に記載のペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグは、Ｊが、－Ａｌｋ１－Ｅ－Ａｌｋ２－又は－Ａｌｋ１－Ｅ－ＰＥＧ－（ＣＨ２）２－Ｅ－Ａｌｋ２－であることが好ましく、Ｊが、－（ＣＨ２）２－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－Ａｌｋ２－又は－（ＣＨ２）２－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－（ＣＨ２）２－Ｎ（Ｚ）Ｃ（＝Ｏ）－Ａｌｋ２－であり、Ｑがマレイミド基であることがさらに好ましいが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　表２中の番号９～１１に記載のペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグは、Ｊが、－Ｃ（＝Ｏ）－Ａｌｋ１－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＰＥＧ－（ＣＨ２）２－Ｅ－Ａｌｋ１－又は－Ｃ（＝Ｏ）－Ａｌｋ１－Ｅ－ＰＥＧ－（ＣＨ２）２－Ｅ－Ａｌｋ１－であることが好ましく、Ｊが、－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＰＥＧ－（ＣＨ２）２－Ｅ－（ＣＨ２）ｎ－又は－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－Ｅ－ＰＥＧ－（ＣＨ２）２－Ｅ－（ＣＨ２）ｎ－であり、Ａ１が、Ｃｉｔ又はＬｙｓであり、Ａ２が、Ｖａｌ又はＰｈｅであり、Ａ３は、存在せず、Ｑがマレイミド基又はアミノオキシ基であることがより好ましいが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグは、公知文献（「医薬品の開発」、広川書店、１９９０年、第７巻、ｐ．１６３～１９８及びＰｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第５巻、１９８５年、ｐ．２１５７～２１６１）に記載の生理的条件で、ペプチド誘導体（Ｉ）に変化するものであってもよい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）は、同位元素で標識されていてもよく、標識される同位元素としては、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ及び／又は１２５Ｉが挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）の「薬理学的に許容される塩」としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩若しくはリン酸塩等の無機酸塩又はシュウ酸塩、マロン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、グルコン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、グルタル酸塩、マンデル酸塩、フタル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩若しくはケイ皮酸塩等の有機酸塩が挙げられるが、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩又はメタンスルホン酸塩が好ましい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、無水物であってもよいし、水和物等の溶媒和物を形成していても構わない。ここで溶媒和物としては、薬理学的に許容される溶媒和物が好ましい。薬理学的に許容される溶媒和物は、水和物又は非水和物のいずれであっても構わないが、水和物が好ましい。溶媒和物を構成する溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール若しくはｎ－プロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド又は水が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）は、その基本骨格や置換基の種類に由来する特徴に基づいた適切な方法で製造することができる。なお、これらの化合物の製造に使用する出発物質と試薬は一般に購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法で製造することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）並びにその製造に使用する中間体及び出発物質は、公知の手段によって単離精製することができる。単離精製のための公知の手段としては、例えば、溶媒抽出、再結晶又はクロマトグラフィーが挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）が、光学異性体又は立体異性体を含有する場合には、公知の方法により、それぞれの異性体を単一化合物として得ることができる。公知の方法としては、例えば、結晶化、酵素分割又はキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
　以下に記載する製造方法の各反応において、原料化合物がヒドロキシ基、アミノ基、スルフヒドリル基又はカルボキシル基を有する場合、これらの基に保護基が導入されていてもよく、反応後に必要に応じて保護基を脱保護することにより目的化合物を得ることができる。
　ヒドロキシ基の保護基としては、例えば、トリチル基、テトラヒドロピラニル基、炭素数７～１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又は置換シリル基（例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基又はｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル基）が挙げられる。
　アミノ基の保護基としては、例えば、炭素数２～６のアルキルカルボニル基（例えば、アセチル基）、ベンゾイル基、炭素数２～８のアルキルオキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基）、炭素数７～１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又はフタロイル基が挙げられる。
　スルフヒドリル基の保護基としては、例えば、トリチル基、２－メルカプトピリジル基又は２－メルカプト－５－ニトロピリジル基が挙げられる。
　カルボキシル基の保護基としては、例えば、炭素数１～６のアルキル基（例えば、メチル基、エチル基又はｔｅｒｔ－ブチル基）又は炭素数７～１０アラルキル基（例えば、ベンジル基）が挙げられる。
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）は、例えば、スキーム１に示すように、保護されたペプチド誘導体（ＩＩＩ）の脱保護反応により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
 ［式中、ＰＧは、保護基を表し、ＸがＮＲの場合、Ｙは、ＮＨ２又はＳＨを表し、Ｙ’はＮＨ又はＳを表す。Ｘが酸素原子の場合、Ｙは、ＮＨ２、ＳＨ、ＯＨ又は任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基を表し、Ｙ’はＮＨ、Ｓ、Ｏ又は任意の一つの水素原子がＮＨ又はＯで置換されたフェニル基を表す。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　保護されたペプチド誘導体（ＩＩＩ）は、例えば、スキーム２に示すように、カルボン酸誘導体（ＩＶ）と求核剤（Ｖ）との縮合反応により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　縮合反応に用いる求核剤（Ｖ）の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～１０当量が好ましく、１～３当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、クロロギ酸エチル、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　求核剤（Ｖ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）は、例えば、スキーム３に示すように、カルボン酸誘導体（ＩＶ）と求核剤（ＶＩ）との縮合反応により得ることもできる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
 ［式中、Ｘは、ＮＲを表し、Ｙは、ＯＨ又は任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基を表し、その他の記号は、上記定義に同じである。］
　縮合反応に用いる求核剤（ＶＩ）の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～１０当量が好ましく、１～３当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート又は１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファートが挙げられるが、クロロギ酸エチル又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　求核剤（ＶＩ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　カルボン酸誘導体（ＩＶ）は、例えば、スキーム４に示すように、エステル誘導体（ＶＩＩ）の脱保護反応により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　エステル誘導体（ＶＩＩ）は、公知の方法又はそれに準ずる方法で合成することができる。
　保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）は、例えば、スキーム５に示すように、フェノール誘導体（Ｉ－ａ）と求電子剤（ＶＩＩＩ－ａ）又は（ＶＩＩＩ－ｂ）との縮合反応により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　縮合反応に用いる求電子剤（ＶＩＩＩ－ａ）又は（ＶＩＩＩ－ｂ）の量は、フェノール誘導体（Ｉ－ａ）に対して０．５～１０当量が好ましく、１～３当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ピリジン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ピリジン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン若しくはピリジン等の有機塩基が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、フェノール誘導体（Ｉ－ａ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるフェノール誘導体（Ｉ－ａ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　求電子剤（ＶＩＩＩ－ａ）又は（ＶＩＩＩ－ｂ）は、公知のアミン誘導体又はカルボン酸誘導体から公知の方法又はそれに準ずる方法により合成又は反応系中で発生させることができる。
　保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＩ）は、例えば、スキーム６に示すように、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（Ｘ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
 ［式中、Ｇは、水素原子、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基を表し、それ以外の各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（Ｘ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（Ｘ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カルボン酸誘導体（Ｘ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＩＩＩ）は、例えば、スキーム７に示すように、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＩＩＩ）は、例えば、スキーム８に示すように、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＩ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の量は、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＩ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＩ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＶ）は、例えば、スキーム９に示すように、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、保護されたフェノキシカルバメート誘導体（ＩＸ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ）は、例えば、スキーム１０に示すように、カルボン酸誘導体（ＩＶ）と求核剤（ＸＶＩ）との縮合反応により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
 ［式中、Ｗは、２－メルカプトピリジル基、２－メルカプト－５－ニトロピリジル基又は‐Ａｌｋ１－Ｎ（Ｚ）（ＰＧ）を表し、その他の記号は、上記定義に同じである。］
　縮合反応に用いる求核剤（ＸＶＩ）の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～１０当量が好ましく、１～３当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、クロロギ酸エチル、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　求核剤（ＸＶＩ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
　保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＶＩＩＩ）は、例えば、スキーム１１に示すように、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（Ｘ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（Ｘ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（Ｘ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（Ｘ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＩＸ）は、例えば、スキーム１２に示すように、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＩ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＩＸ）は、例えば、スキーム１３に示すように、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＶＩＩＩ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の量は、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＶＩＩＩ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、保護されたポリエチレングリコール誘導体（ＸＶＩＩ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）のプロドラッグ（ＸＸ）は、例えば、スキーム１４に示すように、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）の脱保護反応とそれに続く、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）との、塩基性から中性条件下でのカップリング反応（Ｇが、スクシンイミジル基又はｐ－ニトロフェニル基の場合）又は縮合反応（Ｇが、水素原子の場合）により得ることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
 ［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　カップリング反応又は縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．５～１０当量が好ましく、０．５～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、塩基によって調整できる。用いる塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、水素化ナトリウム、水素化カリウム若しくは水素化カルシウム等の水素化金属化合物、メチルリチウム若しくはブチルリチウム等のアルキルリチウム、リチウムヘキサメチルジシラジド若しくはリチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド又はそれらの混合物が挙げられるが、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基又はトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基が好ましい。
　カップリング反応に用いる塩基の量は、ジスルフィド誘導体（ＸＶＩＩ－ａ）に対して０．００１～１０当量が好ましく、０．００１～４当量がより好ましい。
　カップリング反応のｐＨは、緩衝液によっても調整できる。用いる緩衝液としては、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液又はトリス緩衝液が挙げられるが、ｐＨ７．０～８．０の緩衝液が好ましい。
　カップリング反応に用いる緩衝液の濃度は、１０ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　カップリング反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒、水又はそれらの混合溶媒が好ましい。
　カップリング反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　カップリング反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　カップリング反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、ヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド若しくは塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド又はヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムが好ましい。
　縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．１～１００当量が好ましく、０．３～３０当量がより好ましい。
　縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２－ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
　縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
　縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＸＩＶ）に対して０．５～２０当量が好ましく、１～５当量がより好ましい。
　縮合反応の反応温度は、－４０℃～２００℃が好ましく、－２０℃～１５０℃がより好ましい。
　縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間～３０時間が好ましい。
　縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＸＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
　また、本発明の複合体は、ペプチド誘導体（Ｉ）と、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を含有することを特徴としている。
　「ターゲッティングリガンド」とは、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む生理活性化合物を特定の細胞へと輸送するための物質のことであり、例えば、抗原結合性タンパク質、サイトカイン又は低分子リガンドが挙げられる。
　「抗原結合性タンパク質」とは、細胞表面に存在する特定のタンパク質に結合する性質を有するタンパク質のことであり、例えば、免疫グロブリン分子、単鎖抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｄｉａｂｏｄｙ、Ｔｒｉｂｏｄｙ、Ａｆｆｉｂｏｄｙ、Ａｆｆｉｌｉｎ、Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ、Ａｔｒｉｍｅｒ、Ａｖｉｍｅｒ、Ｂｉｃｙｃｌｉｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ、Ｃｙｓ－ｋｎｏｔ、ＤＡＲＰｉｎ、ＦＮ３、Ｆｙｎｏｍｅｒ、Ｋｕｎｉｔｚ　ｄｏｍａｉｎ又はＯＢｏｄｙが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　「サイトカイン」とは、インターロイキン、ケモカイン、インターフェロン、細胞増殖因子、細胞傷害因子又はそれらの改変タンパク質等のことであり、例えば、インターロイキン－２、インターロイキン－２融合タンパク質、インターロイキン－３、インターロイキン－４，インターロイキン－６、インターロイキン－８，インターロイキン－１２、インターロイキン－１７、ＣＣＬ１から２８、ＣＸＣＬ１から１７、ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、ＣＸ３ＣＬ１インターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターフェロンω、インターフェロンτ、コンセンサスインターフェロン、顆粒求コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、ＣＤ－４０リガンド、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、血小板誘導成長因子、組織成長因子、形質転換成長因子－１、血管内皮細胞増殖因子、白血病阻害因子、ケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）、グリア成長因子（ＧＧＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、単球化学誘引タンパク質－１又は内皮細胞増殖因子が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　「低分子リガンド」とは、細胞表面に存在する特定のタンパク質に結合する性質を有する分子量が１０００未満の有機化合物又はペプチド誘導体のことであり、例えば、ビオチン、葉酸、インテグリン阻害薬、ｃＲＧＤ、ＲＧＤ、ＰＳＭＡ阻害剤又はＶＥＧＦ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　「ポリマー」とは、一定の繰返し構造で構成された数平均分子量が１０００～１００００００の高分子有機化合物のことであり、例えば、ポリエチレングリコール、ポリグルタミン酸、ポリアミノ酸又は多糖類が挙げられ、ポリエチレングリコール又はポリグルタミン酸であることが好ましく、数平均分子量が２００００～１０００００であるポリエチレングリコール又は数平均分子量が２００００～１０００００であるポリグルタミン酸がより好ましい。
　上記の抗原結合性タンパク質、サイトカイン及びペプチド誘導体は、例えば、それらの化学合成体、それらの組換え体、それらの天然物、それらのグリコシル化された又は非グリコシル化された形態、それらに非天然アミノ酸が導入された形態、それらに酸化若しくは還元等の化学反応又は酵素反応により官能基（例えば、アルデヒド基又はスルフヒドリル基）が導入された形態及びそれらの生物活性断片も包含する。
　「非天然アミノ酸」とは、天然に存在し、タンパク質を構成するアミノ酸（天然アミノ酸）には含まれないアミノ酸であって、天然に存在するか又は化学合成によって製造されたアミノ酸、すなわち、天然に存在し、タンパク質を構成しないアミノ酸、天然アミノ酸を化学修飾したアミノ酸又は天然アミノ酸には含まれないアミノ酸であって、化学合成によって製造されたアミノ酸等を意味する。具体例としては、Ｄ－アミノ酸、シトルリン、オルニチン、（Ｓ）－２－アミノ－３－（３－メチル－３Ｈ－ジアジリン－３－イル）プロパン酸（（Ｓ）－２－ａｍｉｎｏ－３－（３－ｍｅｔｈｙｌ－３Ｈ－ｄｉａｚｉｒｉｎ－３－ｙｌ）ｐｒｏｐａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ、フォト－Ｌ－ロイシンとも言う）、（Ｓ）－２－アミノ－４－（３－メチル－３Ｈ－ジアジリン－３－イル）ブタン酸（（Ｓ）－２－ａｍｉｎｏ－４－（３－ｍｅｔｈｙｌ－３Ｈ－ｄｉａｚｉｒｉｎ－３－ｙｌ）ｂｕｔａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ、フォト－Ｌ－メチオニンとも言う）、（Ｓ）－３－（４－アセチルフェニル）－２－アミノプロパン酸（（Ｓ）－３－（４－ａｃｅｔｙｌｐｈｅｎｙｌ）－２－ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ、４－アセチル－Ｌ－フェニルアラニンとも言う）又は（Ｓ）－２－アミノ－３－（４－アジドフェニル）プロパン酸（（Ｓ）－２－ａｍｉｎｏ－３－（４－ａｚｉｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｐｒｏｐａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ、４－アジド－Ｌ－フェニルアラニンとも言う）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　上記の低分子リガンドは、適宜、その類似物、その誘導体、そのアゴニスト、そのアンタゴニスト、その阻害物質、その異性体等も包含する。
　「複合体」とは、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと、上記ターゲッティングリガンドと、を含む物質、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと、上記ポリマーと、を含む物質、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと、上記ターゲッティングリガンド及び上記ポリマーと、を含む物質（以下、総称してペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体）のことであり、それぞれが直接結合しているか又は他の物質（以下、リンカー）を介して間接的に結合している。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと免疫グロブリン分子とが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合している抗体医薬複合体が挙げられる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと低分子リガンドとが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合している低分子医薬複合体が挙げられる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと上記ポリマーとが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合しているポリマー医薬複合体が挙げられる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグに、それぞれが独立して、上記ポリマーと上記ターゲッティングリガンドとが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合している物質が挙げられる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、上記ポリマーに、それぞれが独立して、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと上記ターゲッティングリガンドとが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合している物質が挙げられる。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体としては、例えば、上記ターゲッティングリガンドに、それぞれが独立して、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグと上記ポリマーとが直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合している物質が挙げられる。
　「ペプチド誘導体（Ｉ）を含む」とは、ペプチド誘導体（Ｉ）又はそのプロドラッグが、公知の方法（例えば、Ｅｌｌｅｎ　Ｍ．　Ｓｌｅｔｔｅｎら、Ａｎｇｅｗａｎｔｅ　Ｃｈｉｍｉｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、２００９年、第４８巻、ｐ．６９７４―６９９８、Ｇｒｅｇ　Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ．，「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ」、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ社、Ｘｉ　Ｃｈｅｍら、Ｏｒｇａｎｉｃ　＆　Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０１６年、第１４巻、ｐ．５４１７―５４３９）又はそれに準ずる方法によって、上記ターゲッティングリガンド及び／又は上記ポリマーと共有結合によって直接結合しているか又はリンカーを介して間接的に結合していることを意味する。当該共有結合の具体例としては、例えば、マレイミド基へのスルフヒドリル基の付加による結合、ジスルフィド結合、アミノ基若しくはヒドロキシ基とカルボキシル基との縮合による結合、アルキン基とアジド基のクリック反応による結合、アミノオキシ基とカルボニル基の縮合による結合又はジアゾ基とフェノール基のエン型反応による結合が挙げられ、マレイミド基へのスルフヒドリル基の付加による結合、ジスルフィド結合、アミノ基若しくはヒドロキシ基とカルボキシル基との縮合による結合又はアミノオキシ基とカルボニル基の縮合による結合が好ましいが、これらに限定されるものではない。
　「リンカー」とは、ペプチド誘導体（Ｉ）又はそのプロドラッグ、上記ターゲッティングリガンド及び上記ポリマーと官能基（例えば、マレイミド基、カルボキシル基、活性化されたカルボキシル基、カルボニル基、アミノオキシ基、ヒドラジド基、ジアゾ基、アルキン基又はヒドロキシ基）を有する化合物との反応によって得られた構造のことを意味する。それらの官能基を有する化合物としては、例えば、Ｎ－スクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）、スルホスクシイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシレート（Ｓｕｌｆｏ－ＳＭＣＣ）、Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）（ＬＣ－ＳＭＣＣ）、κ－マレイミドウンデカン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＫＭＵＡ）、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）、ε－マレイミドカプロン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）、Ｎ－（α－マレイミドアセトキシ）－スクシンイミドエステル（ＡＭＡＳ）、スクシンイミジル－６－（β－マレイミドプロピオンアミド）ヘキサノエート（ＳＭＰＨ）、Ｎ－スクシンイミジル４－（ｐ－マレイミドフェニル）－ブチレート（ＳＭＰＢ）、およびＮ－（ｐ－マレイミドフェニル）イソシアネート（ＰＭＰＩ）、Ｎ－スクシンイミジル４（２－ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）、Ｎ－スクシンイミジル（４－イオド－アセチル）アミノ安息香酸エステル（ＳＩＡＢ）、６－マレイミドカプロイル（ＭＣ）、マレイミドプロパノイル（ＭＰ）、ｐ－アミノベンジルオキシカルボンイル（ＰＡＢ）及びＮ－スクシンイミジル４（２－ピリジルチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、上記に挙げたリンカーをそれぞれ適時組み合わせて使用してもよい。
　「細胞表面に存在する特定のタンパク質」とは、がん、自己免疫疾患又は感染症において、細胞表面での発現が増加するタンパク質のことであり、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９ｂ、ＤＬＬ－３、ＰＳＭＡ、ＧＰＮＭＢ、Ｈｅｒ２、ＣＡ６、ＣＡ９、Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ、Ｎｅｃｔｉｎ－４、ＳＬＣ４４Ａ４、Ｃｒｉｐｔｏ、葉酸受容体、ＳＴＥＡＰ－１、ＭＵＣ１６、ＮａＰｉ２ｂ、ＧＣＣ、ＥＧＦＲｖｉｉｉ、５Ｔ４、ＴＲＯＰ－２、ＬＩＶ－１、ＳＬＩＴＲＫ６、Ｔｉｓｓｕｅ　Ｆａｃｔｏｒ、Ｇｕａｎｙｌｙｌ　Ｃｙｃｌａｓｅ　Ｃ、ＣＥＡＣＡＭ５、インテグリン受容体、インターロイキン受容体、ＰＳＭＡ、ケモカイン受容体、インターフェロン受容体、細胞増殖因子受容体又は細胞傷害因子受容体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体の薬理学的に許容される塩としては、例えば、上記のペプチド誘導体（Ｉ）の薬理学的に許容される塩と同様の塩が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩は、無水物であってもよいし、水和物等の溶媒和物を形成していても構わない。ここで溶媒和物としては、薬理学的に許容される溶媒和物が好ましい。薬理学的に許容される溶媒和物は、水和物又は非水和物のいずれであっても構わないが、水和物が好ましい。溶媒和物を構成する溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール若しくはｎ－プロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド又は水が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体の具体例を表４に示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000022
　表４に記載される化合物は、その薬理学的に許容される塩も包含する。
　表４中、ｒは、１～５０の整数を表し、Ｌは、ターゲッティングリガンド、ポリマー、又は、ポリマー及びターゲッティングリガンドを表し、それ以外の記号は上記定義に同じである。
　表４中の番号６に記載の複合体の好ましい例を以下の一般式（ＸＸＩ）で示すが、本発明はこれに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
 ［式中、Ａ４はアミノ酸を表し、それ以外の記号は上記定義に同じである。］
　Ａ４は、左側（アミノ基と結合する側）がカルボニル末端であり、右側（カルボニル基と結合する側）がアミノ末端である。また、Ａ４がＬｙｓ，Ｇｌｕ及びＡｓｐである場合は、側鎖のアミノ基やカルボキシル基から結合していてもよい。
　上記の一般式（ＸＸＩ）で示される複合体は、Ｘが、ＮＲであり、Ａｌｋ１が、－（ＣＨ２）２－であり、ＰＥＧが、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－であり、Ａ４が、主鎖で結合したＧｌｕであることがより好ましく、Ｘが、ＮＲであり、Ｒ及びＺが、メチル基であり、Ａｌｋ１及びＡｌｋ２が、－（ＣＨ２）２－であり、ＰＥＧが、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－であり、Ａ４が、主鎖で結合したＧｌｕであることがさらに好ましい。
　表４中の番号８に記載の複合体の好ましい例を以下の一般式（ＸＸＩＩ）で示すが、本発明はこれに限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
 ［式中、各記号は上記定義に同じである。］
　上記の一般式（ＸＸＩＩ）で示される複合体は、Ｘが、Ｎ（Ｍｅ）であり、Ａｌｋ１が、－（ＣＨ２）２－であり、ＰＥＧが、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－であり、Ａ４が、主鎖で結合したＧｌｕであることがより好ましく、Ｘが、Ｎ（Ｍｅ）であり、Ｚが、メチル基であり、Ａｌｋ１及びＡｌｋ２が、－（ＣＨ２）２－であり、ＰＥＧが、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２－であり、Ａ４が、主鎖で結合したＧｌｕであることがより好ましい。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体は、その基本骨格や置換基の種類に由来する特徴に基づいた適切な方法で製造することができる。なお、これらの化合物の製造に使用する出発物質と試薬は一般に購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法で製造することができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体並びにその製造に使用する中間体及び出発物質は、公知の手段によって単離精製することができる。単離精製のための公知の手段としては、例えば、溶媒抽出、再結晶又はクロマトグラフィーが挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体が、光学異性体又は立体異性体を含有する場合には、公知の方法により、それぞれの異性体を単一化合物として得ることができる。公知の方法としては、例えば、結晶化、酵素分割又はキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
　上記の一般式（ＸＸＩ）で示される複合体の立体配置は、以下の式（ＸＸＩＩＩ）であることが好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
　上記の一般式（ＸＸＩＩ）で示される複合体の立体配置は、以下の式（ＸＸＩＶ）であることが好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
　以下に記載する製造方法において、原料化合物がヒドロキシ基、アミノ基、スルフヒドリル基又はカルボキシル基を有する場合、これらの基に保護基が導入されていてもよく、反応後に必要に応じて保護基を脱保護することにより目的化合物を得ることができる。
　ヒドロキシ基の保護基としては、例えば、トリチル基、テトラヒドロピラニル基、炭素数７～１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又は置換シリル基（例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基又はｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル基）が挙げられる。
　アミノ基の保護基としては、例えば、炭素数２～６のアルキルカルボニル基（例えば、アセチル基）、ベンゾイル基、炭素数２～８のアルキルオキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基）、炭素数７～１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又はフタロイル基が挙げられる。
　スルフヒドリル基の保護基としては、例えば、トリチル基、２－メルカプトピリジル基又は２－メルカプト－５－ニトロピリジル基が挙げられる。
　カルボキシル基の保護基としては、例えば、炭素数１～６のアルキル基（例えば、メチル基、エチル基又はｔｅｒｔ－ブチル基）又は炭素数７～１０アラルキル基（例えば、ベンジル基）が挙げられる。
　保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体は、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグ又はそれらの塩と、上記のターゲッティングリガンド及び／若しくは上記のポリマー又はそれらの塩と、を公知の方法（例えば、Ｅｌｌｅｎ　Ｍ．　Ｓｌｅｔｔｅｎら、Ａｎｇｅｗａｎｔｅ　Ｃｈｉｍｉｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、２００９年、第４８巻、ｐ．６９７４―６９９８、Ｇｒｅｇ　Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ．，「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ」、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ社、Ｘｉ　Ｃｈｅｍら、Ｏｒｇａｎｉｃ　＆　Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０１６年、第１４巻、ｐ．５４１７―５４３９）又はそれに準ずる方法で、直接的に又はリンカーを介して間接的に複合化することにより得ることができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体は、同位元素で標識されていてもよく、標識される同位元素としては、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ及び／又は１２５Ｉが挙げられる。
　上記の複合化に用いる、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグ、上記ターゲッティングリガンド又は上記ポリマーの塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩若しくはリン酸塩等の無機酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、グルコン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、グルタル酸塩、マンデル酸塩、フタル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩若しくはケイ皮酸塩等の有機酸塩、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルエチルアミン塩、エタノールアミン塩、モルホリン塩、ピペリジン塩若しくはジシクロヘキシルアミン塩等の有機塩基との塩、アルギニン若しくはリジン等の塩基性アミノ酸との塩又はリチウム塩、カルシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩若しくは亜鉛塩等の無機塩基との塩が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはそのプロドラッグ、上記ターゲッティングリガンド又は上記ポリマーの塩は、無水物であってもよいし、水和物等の溶媒和物を形成していても構わない。溶媒和物を構成する溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール若しくはｎ－プロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド又は水等が挙げられる。
　また、本発明の細胞毒性剤は、ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩、を有効成分として含有することを特徴としている。
　「細胞毒性剤」とは、細胞機能を障害する若しくは細胞増殖を阻害することによって細胞死を引き起こす化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する組成物を意味する。
　また、「細胞毒性剤」には、細胞機能を障害する若しくは細胞増殖を阻害することによって細胞死を引き起こす化合物又はそのプロドラッグと、上記のターゲッティングリガンド又は上記のポリマーと、を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する組成物も含まれる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩は、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、サル、ウシ、ヒツジ又はヒト）、特にヒトに対して投与した場合に、有用な細胞毒性剤として用いることができる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩は、そのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、細胞毒性剤として上記の哺乳動物に経口的又は非経口的に投与することができる。
　「非経口的な投与」としては、例えば、注射投与、経鼻投与、経肺投与、経皮投与、舌下投与又は直腸投与が挙げられ、注射投与が好ましい。
　「注射投与」とは、注射又は点滴によって細胞毒性剤を全身又は局部的に投与することであり、投与する部位としては、例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩、を有効成分とする細胞毒性剤は、製剤技術分野で一般的に用いられている公知の方法（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　ｌａｔｅｓｔ　ｅｄｉｔｉｏｎ，　Ｍａｒｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ，　Ｅａｓｔｏｎ，　Ｕ．Ｓ．Ａ）により製造することができる。また、本発明の細胞毒性剤は、必要に応じて、製剤分野において通常用いられている賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤、着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤、緩衝剤、等張化剤、流動性促進剤等の添加剤を適宜、適量含有させることができる。薬理学的に許容される担体としては、これらの添加剤が挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩、を有効成分とする細胞毒性剤は、当該作用メカニズムに基づき病態の改善又は症状の寛解が期待できる疾患、例えば、がん、自己免疫疾患又は感染症に対する治療薬として利用できる。
　「がん」とは、制御されない異常な増殖を行なう細胞集団によって引き起こされる疾患であり、例えば、咽頭癌、喉頭癌、舌癌、非小細胞肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、大腸癌、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、肝臓癌、膵臓癌、胆嚢癌、胆管癌、腎臓癌、腎盂尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、悪性黒色腫、甲状腺癌、神経骨肉腫、軟骨肉腫、横紋筋肉腫、血管肉腫、繊維肉腫、神経膠腫、白血病や悪性リンパ腫、神経芽細胞種、骨髄腫又は脳腫瘍が挙げられる。
　「自己免疫疾患」とは、生体内の物質又は細胞に対する異常な免疫応答によって引き起こされる疾患であり、例えば、活動性慢性肝炎、アディソン病、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、関節炎、アトピー性アレルギー、ベーチェット病、心筋症、セリアック病、コーガン症候群、寒冷凝血素症、クローン病、クッシング症候群、皮膚筋炎、円板状エリテマトーデス、紅斑、線維筋痛、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、移植片対宿主病、グレーブス病、ギラン-バレー症候群、橋本病、特発性副腎萎縮、特発性肺線維症、ＩｇＡ腎症、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、若年性関節炎、Ｌａｍｂｅｒｔ－Ｅａｔｏｎ筋無力症候群、扁平苔癬、ルポイド肝炎、狼瘡、リンパ球減少症、メニエール病、混合結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血、多内分泌腺機能低下症候群、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象、ライター症候群、関節リウマチ、シュミット症候群、強皮症、シェーグレン症候群、スティフマン症候群、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎、甲状腺亢進、Ｂ型インスリン抵抗性、Ｉ型糖尿病、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、白斑又はウェゲナー肉芽腫症が挙げられる。
　「感染症」とは、細菌、真菌、病原性原虫、酵母又はウィルス等による感染によって引き起こされる疾患であり、その原因としては、例えば、ブドウ球菌、レンサ球菌、腸球菌、コリネバクテリウム、バシラス、リステリア、ペプトコッカス、ペプトストレプトコッカス、クロストリジウム、ユーバクテリウム、プロピオニバクテリウム、乳酸桿菌、ナイセリア、ブランハメラ、ヘモフィルス、ボルデテラ、大腸菌、シトロバクター、サルモネラ、赤痢菌、クレブシエラ菌、エンテロバクター、セラチア、ハフニア、プロテウス、モルガネラ、プロビデンシア、エルシニア、キャンピロバクター、ビブリオ、エロモナス、シュードモナス、キサントモナス、アシネトバクター、フラボバクテリウム、ブルセラ、レジオネラ、ベイロネラ、バクテロイデス、フゾバクテリウム、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア、アスペルギルス、ワリプトコッカス、カンジダ、ムコール、スポロトリクム、皮膚糸状菌、マラリア原虫、赤痢アメーバ、膣トリコモナス、ニューモチスカリニ、エキノコックス、肺炎双球菌、インフルエンザ菌、結核菌、破傷風菌、アデノウィルス、ヘルペスウィルス、パピローマウィルス、エイズウィルス、フィロウィルス、日本脳炎ウィルス、狂犬病ウィルス、ポリオウィルス、ライノウィルス、インフルエンザウィルス、Ｂ型肝炎ウィルス又はＣ型肝炎ウィルスが挙げられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体若しくはその薬理学的に許容される塩が細胞毒性を有することは、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験を用いて評価することができる。ｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験としては、例えば、化合物処置後の死細胞数又は生存細胞数を測定する、トリパンブルー色素排除法、乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）活性法、［３Ｈ］チミジン取り込み法、プロピジウムイオダイド核染色法、ＭＴＴ，ＭＴＳ及びＷＳＴ等の色素を用いる方法（Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌ　ｉｎ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，　２０００年，２．６．１－２．６．２７）又はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製品）等を用いてＡＴＰ量を測定する方法等が挙げられるが、化合物処置後の生細胞数をＭＴＳ法を用いて測定し、その時の細胞毒性の値を５０％作用濃度（ＥＣ５０）によって求める方法が好ましい。また、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩の細胞毒性の評価においては、一定時間化合物を含んだ培地で細胞を処置した後に、化合物を含まない培地へと変更し、更に一定時間培養を行なった後の生細胞数を測定する方法が好ましい（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．　２０１４年，　第２５巻，　ｐ．５６０?５６８）。ｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験には、ヒト卵巣がん細胞ＳＫＯＶ－３細胞、ヒト肺胞基底上皮腺がん細胞Ａ５４９細胞、マウスリンパ球性白血球Ｌ１２１０細胞等が用いられる。
　ペプチド誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩の細胞膜の透過性は、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ細胞膜透過性評価方法を用いて測定することができる。ｉｎ　ｖｉｔｒｏ細胞膜透過性評価方法としては、例えば、Ｃａｃｏ－２やＭａｄｉｎ－Ｄａｒｂｙ　ｃａｎｉｎｅ　ｋｉｄｎｅｙ（ＭＤＣＫ）等の単層細胞膜系を用いる方法やフィルターに脂質等を保持した人工脂質膜を用いるＰａｒａｌｌｅｌ　Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　Ｍｅｍｂｒａｎｅ　Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　Ａｓｓａｙ（ＰＡＭＰＡ）（特開２００７－１１８００３）等が挙げられる。より具体的には、ペプチド誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩の細胞膜の透過性を評価する方法としては、例えば、Ｐｒｅ－ｃｏａｔｅｄ　ＰＡＭＰＡ　ＰｌａｔｅＳｙｓｔｅｍ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）のＤｏｎｏｒ側からＡｃｃｅｐｔｏｒ側に透過した化合物量を定量し、計算により求める方法が挙げられる。透過した化合物量は、例えば、液体クロマトグラフ質量分析計（以下、ＬＣ／ＭＳ）、吸光度又は蛍光標識により定量する事ができる。
　以下、実施例及び参考例を用いて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　なお、実施例化合物の合成に使用される化合物で合成法の記載のないものについては、市販又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法で合成した化合物を使用した。ＮＭＲデータ中に示される溶媒名は、測定に使用した溶媒を示す。また、４００ＭＨｚＮＭＲスペクトルは、ＪＮＭ－ＡＬ４００型核磁気共鳴装置（日本電子社製）又はＪＮＭ－ＥＣＳ４００型核磁気共鳴装置（日本電子社製）を用いて測定した。ケミカルシフトは、テトラメチルシランを基準として、δ（単位：ｐｐｍ）で表し、シグナルはそれぞれｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（幅広）、ｄｄ（二重二重線）、ｄｔ（二重三重線）、ｄｄｄ（二重二重二重線）、ｄｑ（二重四重線）又はｔｔ（三重三重線）で表した。プロトンＮＭＲスペクトルで、ＯＨやＮＨプロトン等ブロードで確認できないものについてはデータに記載していない。分子量は、Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　１２００　Ｓｅｒｉｅｓ、６１３０Ａ（アジレント・テクノロジー社製）（以下、ＬＣ／ＭＳ－１）又はＡｇｉｌｅｎｔ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　１２６０　Ｉｎｆｉｎｉｔｙ　ＩＩ　Ｓｅｒｉｅｓ、６１３０Ｂ（アジレント・テクノロジー社製）（以下、ＬＣ／ＭＳ－２）を用いて、エレクトロスプレーイオン化（以下、ＥＳＩ）法により測定した。精密質量分析（ＨＲＭＳ）は、ＮｅｘｅｒａＸ２、ＬＣＭＳ－ＩＴ－ＴＯＦ質量分析計（島津製作所製）を用いて、ＥＳＩにより行なった。保持時間（以下、ｔＲ）は、高速液体クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣ）により測定した。溶媒は全て市販のものを用いた。精製は、ＹＦＬＣ　Ｗ－ｐｒｅｐ２ＸＹ（山善社製）を用いて、シリカゲルカラムクロマトグラフィーには、ハイフラッシュカラム　シリカゲル（山善社製）を用い、アミンシリカゲルカラムクロマトグラフィーには、ハイフラッシュカラム　アミノ（山善社製）を用い、ＯＤＳカラムには、ハイフラッシュカラム　オクタデシルＣ１８スタンダード（山善社製）を用いた。ＬＣ／ＭＳ－１、ＬＣ／ＭＳ－２及びＨＰＬＣの分析条件並びにＯＤＳカラムによる精製条件は後段に記す。以下の実施例及び参考例の記載中、以下の略号を用いる。
　Ｔｒｔ：トリフェニルメチル基；　Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基；　ＴＨＰ：テトラヒドロピラニル基。
（参考例１）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸の合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
 　２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸エチル（１５ｍｇ，０．０１７ｍｍｏｌ）のエタノール（１．０ｍＬ）溶液に、１．０Ｎ水酸化ナトリウム（１９μＬ、０．０１９ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。得られた反応液に１．０Ｎ塩酸（１９μＬ）を加えた後、水で希釈してクロロホルムで３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮し、表題化合物（以下、参考例１の化合物）を白色固体（１４ｍｇ，収率９９％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９７（１Ｈ，ｓ），７．７０－７．４２（１Ｈ，ｍ），７．３０－７．１５（５Ｈ，ｍ），７．１３－７．０９（１Ｈ，ｍ），５．６２－５．５５（１Ｈ，ｍ），４．８７－４．６７（２Ｈ，ｍ），４．１１－３．１０（７Ｈ，ｍ），３．３２（３Ｈ×２，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．７０－２．２８（４Ｈ，ｍ），２．５３（６Ｈ，ｓ），２．１９－２．０６（２Ｈ，ｍ），１．９８－１．５５（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１８－０．６９（２３Ｈ，ｍ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８２９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例２）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－（トリチルチオ）エチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
 　参考例１の化合物（２５ｍｇ，０．０３０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦ）溶液（０．５ｍＬ）にヘキサフルオロリン酸２－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム（以下、ＨＡＴＵ）（１７ｍｇ，０．０４５ｍｍｏｌ）と２－（トリチルチオ）エタンアミン（１５ｍｇ，０．０４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５０ｍＬ）及びジイソプロピルエチルアミン（１３μＬ，０．０７５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。得られた反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／１９）にて精製し、表題化合物（以下、参考例２の化合物）を白色固体（２３ｍｇ，収率８８％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９２（１Ｈ，ｓ），７．４５－７．１３（２０Ｈ，ｍ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５４－５．４７（１Ｈ，ｍ），４．８７－４．７３（２Ｈ，ｍ），４．１６－４．０９（１Ｈ，ｍ），４．０８－４．０３（１Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），３．４６－３．１８（６Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．５１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．４５－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．１０－１．９０（２Ｈ，ｍ），１．８１－１．５５（４Ｈ，ｍ），１．２７－１．１９（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０７－０．８９（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：１１３０．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例１）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－メルカプトエチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成： 
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
 　参考例２の化合物（２５ｍｇ，０．０２２ｍｍｏｌ）に０．０２Ｍトリエチルシラン含有トリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡ）／ジクロロメタン（体積比１：１）溶液（４．５ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。得られた反応液の溶媒を減圧下留去し、飽和炭酸ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／９）にて精製し、表題化合物（以下、実施例１の化合物）を白色固体（１８ｍｇ，収率９２％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９７（１Ｈ，ｓ），７．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），７．４９（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２９－７．１２（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．５４－５．４８（１Ｈ，ｍ），４．８２－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．１４－４．０３（２Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．６３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），３．５１－３．１６（４Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．８１－２．７４（２Ｈ，ｍ），２．４８－２．３３（４Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．１１－１．９２（２Ｈ，ｍ），１．８５－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），１．４０－１．２２（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．０５－０．９０（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８８８．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例３）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－（トリチルチオ）エチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
 　参考例１の化合物（３９ｍｇ，０．０４７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．０ｍＬ）溶液に、４－ジメチルアミノピリジン（以下、ＤＭＡＰ）（１．２ｍｇ，９．４μｍｏｌ）、トリエチルアミン（１４μＬ，０．１０ｍｍｏｌ）と２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物（１９ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した後、２－（トリチルチオ）エタノール（１８ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０時間撹拌した。得られた反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→２／２５）にて精製し、表題化合物（以下、参考例３の化合物）を白色固体（４９ｍｇ，収率９２％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．００（１Ｈ，ｓ），７．４４－７．４０（６Ｈ，ｍ），７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．３０－７．１０（１４Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．５５－５．４６（１Ｈ，ｍ），４．７９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４８．０Ｈｚ），４．１５－４．０７（１Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），４．０５－４．００（１Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），３．８０－３．１５（４Ｈ，ｍ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．６１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．４５－２．２８（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１２－１．９６（２Ｈ，ｍ），１．９０－１．５０（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０３－０．８９（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：１１３１．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例２）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－メルカプトエチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
 　参考例２の化合物の代わりに参考例３の化合物を用いて、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例２の化合物）を白色固体（３２ｍｇ，収率８３％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．０７（１Ｈ，ｓ），７．４１（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３０－７．１１（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５５－５．４９（１Ｈ，ｍ），４．８３－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．４７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），４．１３－３．１１（７Ｈ，ｍ），３．３２（６Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．４７－２．２８（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１１－１．９８（２Ｈ，ｍ），１．９８－１．５５（４Ｈ，ｍ），１．４１－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０５－０．９１（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８８９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例４）メチル（２－（トリチルチオ）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
 　（２－（トリチルチオ）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチル（５５０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍｌ）を氷冷し、水素化ナトリウム（５５重量％鉱油分散物）（６３ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）を複数回に分けて加えた。１５分間攪拌した後に、ヨウ素化メチル（０．０８７ｍｌ，１．４ｍｍｏｌ）を加えて、室温に戻しながら一晩攪拌した。過剰量の酢酸エチルを加えた後に、飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ－ヘキサン／酢酸エチル＝１／０→４／１）にて精製し、表題化合物（以下、参考例４の化合物）を白色固体（４２０ｍｇ，収率９６％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，６Ｈ），７．２９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｂｒｓ，３Ｈ），２．３３（ｂｒｓ，２Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｎａ］＋：４５６．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例５）Ｎ－メチル－２－（トリチルチオ）エタン－１－アミンの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
 　参考例４（１５０ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（４．０ｍｌ）に４Ｎの塩化水素－ジオキサン（３．０ｍｌ）を加え、室温で４時間撹拌した。反応溶液に過剰量の５体積％メタノール含有ジクロロメタンを加え、飽和炭酸水素ナトリウムを加えて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。表題化合物（以下、参考例５の化合物）を油状物質（１５ｍｇ，収率４０％）として得た。得られた油状物質を精製することなく次反応に用いた。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４４（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，４．８Ｈｚ，６Ｈ），７．３２－７．２６（ｍ，６Ｈ），７．２４－７．１９（ｍ，３Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０７（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），２．５１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３６（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，４．８Ｈｚ，１Ｈ），２．２９（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），１．５０（ｓ，２Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｔｒｔ］＋：２４３．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例６）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチル－Ｎ－（２－（トリチルチオ）エチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに参考例５の化合物を用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例６の化合物）を白色アモルファス（４５ｍｇ，収率８５％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８４（１Ｈ，ｓ），７．８２－７．７６（１Ｈ，ｍ），７．３０－７．００（５Ｈ，ｍ），６．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５６－５．４８（１Ｈ，ｍ），５．０７（１Ｈ，ｂｒｓ），４．８７－４．７０（２Ｈ，ｍ），４．１８－３．２０（１７Ｈ，ｍ），３．１０（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．４５－２．２０（４Ｈ，ｍ），２．２３（６Ｈ，ｓ），２．１１－１．８９（２Ｈ，ｍ），１．８７－１．４７（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０５－０．８６（１７Ｈ，ｍ），０．８０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：１１４４．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例３）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－メルカプトエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
 　参考例２の化合物の代わりに参考例６の化合物を用いて、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例３の化合物）を白色アモルファス（２７ｍｇ，収率７７％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９０（１Ｈ，ｓ），７．６０－７．４５（１Ｈ，ｍ），７．２８－７．０２（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５８－５．５１（１Ｈ，ｍ），４．８２－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．２０－３．２０（９Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．１１（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．９１－２．７７（２Ｈ，ｍ），２．４５－２．３１（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１０－１．８９（２Ｈ，ｍ），１．８６－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４３－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０５－０．９０（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９０２．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例７）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
 　参考例１の化合物（３８ｍｇ，０．０４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５０ｍＬ）にＨＡＴＵ（２１ｍｇ，０．０５５ｍｍｏｌ）と（２－ヒドロキシエチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチル（８．９ｍｇ，０．０５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５０ｍＬ）及びジイソプロピルエチルアミン（７．５μＬ，０．０６９ｍｍｏｌ）を室温で加え、同温度で２６時間撹拌した。得られた反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→７／９３）にて精製し、表題化合物（以下、参考例７の化合物）を白色固体（１４ｍｇ，収率３２％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．０７（１Ｈ，ｓ），７．４４（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３０－７．１２（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５５－５．４９（１Ｈ，ｍ），５．０２（１Ｈ，ｂｒｓ），４．８２－４．７０（２Ｈ，ｍ），４．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），４．１８－４．０８（１Ｈ，ｍ），４．０５－４．００（１Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．７０－３．１４（６Ｈ，ｍ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．４８－２．３３（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１３－１．８７（２Ｈ，ｍ），１．８０－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４３（９Ｈ，ｓ），１．３５－１．１６（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０５－０．８７（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９７２．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例４）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－アミノエチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
 　参考例７の化合物（１４ｍｇ，０．０１４ｍｍｏｌ）のメタノール（１．０ｍＬ）溶液に、４Ｎの塩化水素－ジオキサン溶液（５４μＬ，０．２２ｍｍｏｌ）を加え、室温で２４時間撹拌した。得られた反応液の溶媒を減圧下留去し、酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をアミンシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／１９）にて精製し、表題化合物（以下、実施例４の化合物）を白色固体（６．８ｍｇ，収率５０％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９８（１Ｈ，ｓ），７．７８（２Ｈ，ｂｒｓ），７．５４（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３２－７．００（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５１－５．４５（１Ｈ，ｍ），４．８０－４．７０（２Ｈ，ｍ），４．１８－４．００（２Ｈ，ｍ），３．８２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．８０－３．１０（７Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０５（３Ｈ，ｓ），２．５２－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１４－１．９２（２Ｈ，ｍ），１．８６－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．１９（１Ｈ，ｍ），１．１５－０．９１（２０Ｈ，ｍ），０．８２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８７２．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例８）（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミド）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに（２－（メチルアミノ）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例８の化合物）を白色固体（３３ｍｇ，収率９６％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８８－７．７５（１Ｈ，ｍ），７．７０－７．６０（１Ｈ，ｍ），７．３４－７．００（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），６．４２－６．３５（１Ｈ，ｍ），５．６３－５．４８（１Ｈ，ｍ），４．８６－４．７０（２Ｈ，ｍ），４．１８－４．００（２Ｈ，ｍ），３．９０－３．１７（９Ｈ，ｍ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０９（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．４５－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２３（６Ｈ，ｓ），２．１７－１．８５（２Ｈ，ｍ），１．８０－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．３５（９Ｈ，ｓ），１．３０－１．１５（１Ｈ，ｍ），１．１０－０．８６（２０Ｈ，ｍ），０．８０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９８５．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例５）Ｎ－（２－アミノエチル）－２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミド　二塩酸塩の合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000039
 　参考例８の化合物（３３ｍｇ，０．０３３ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（１．０ｍＬ）に、４Ｎの塩化水素－ジオキサン溶液（１２６μＬ，０．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。得られた反応液の溶媒を減圧下留去して、表題化合物（以下、実施例５の化合物）を白色固体（２９ｍｇ，収率９０％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．９８－８．６０（１Ｈ，ｍ），８．１４－７．９２（１Ｈ，ｍ），７．３７－７．１８（５Ｈ，ｍ），５．６６－５．５７（１Ｈ，ｍ），４．８５－４．６３（２Ｈ，ｍ），４．２０－３．０７（２０Ｈ，ｍ），３．１６（３Ｈ，ｓ），２．９２（３Ｈ，ｓ），２．９１（３Ｈ，ｓ），２．４８－１．３９（１０Ｈ，ｍ），１．３０－０．９８（２１Ｈ，ｍ），０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｎａ］＋：９０７．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例９）（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミド）エチル）（メチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000040
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりにメチル（２－（メチルアミノ）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例９の化合物）を白色アモルファス（３８ｍｇ，収率９０％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．７８（１Ｈ，ｓ），７．７０－７．４０（１Ｈ，ｂｒｍ），７．３０－７．１１（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），５．５７－５．４８（１Ｈ，ｍ），４．８５－４．７３（２Ｈ，ｍ），４．１８－４．００（２Ｈ，ｍ），３．９０－２．６２（１２Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．１３（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．４５－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１３－１．９０（２Ｈ，ｍ），１．８０－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ），１．３８－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．１６－０．９１（２０Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９９９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例６）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチル－Ｎ－（２－（メチルアミノ）エチル）チアゾール－４－カルボキサミド　二塩酸塩の合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000041
 　参考例８の化合物の代わりに参考例９の化合物を用いて、それ以外は実施例５と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例６の化合物）を白色固体（３４ｍｇ，収率９２％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．１５－８．０２（１Ｈ，ｍ），７．３７－７．１８（５Ｈ，ｍ），５．６６－５．５７（１Ｈ，ｍ），４．８５－４．６３（２Ｈ，ｍ），４．２０－３．０７（２０Ｈ，ｍ），３．２７（３Ｈ，ｓ），３．１５（３Ｈ，ｓ），２．９１（３Ｈ，ｓ），２．８９（３Ｈ，ｓ），２．５１－１．３９（１０Ｈ，ｍ），１．３０－０．８７（２１Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８９９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例７）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000042
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに２－アミノエタノールを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例７の化合物）を白色固体（２６ｍｇ，収率，定量的）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９６（１Ｈ，ｓ），７．８５－７．７５（１Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３０－７．０７（５Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），５．５０－５．４３（１Ｈ，ｍ），４．８３－４．７２（２Ｈ，ｍ），４．１６－４．０９（１Ｈ，ｍ），４．０５－４．０１（１Ｈ，ｍ），３．８４－３．７８（３Ｈ，ｍ），３．６５－３．２０（６Ｈ，ｍ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．４８－２．３２（４Ｈ，ｍ），２．２３（６Ｈ，ｓ），２．１６－１．６３（６Ｈ，ｍ），１．４０－１．２５（１Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０４－０．８８（１７Ｈ，ｍ），０．８０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８７２．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１０）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000043
 　２－（トリチルチオ）エタノールの代わりに２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エタノールを用いて、それ以外は参考例３と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１０の化合物）を白色固体（３６ｍｇ，収率７３％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．０５（１Ｈ，ｓ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），７．３０－７．１１（５Ｈ，ｍ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．５５－５．４８（１Ｈ，ｍ），４．８３－４．７５（２Ｈ，ｍ），４．６９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），４．６０－４．４６（２Ｈ，ｍ），４．１８－４．０８（１Ｈ，ｍ），４．０７－４．００（２Ｈ，ｍ），３．９１－３．８４（２Ｈ，ｍ），３．８２－３．７５（１Ｈ，ｍ），３．５５－３．２５（５Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．４６－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１３－１．９７（２Ｈ，ｍ），１．９３－１．５１（１０Ｈ，ｍ），１．４２－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０５－０．８７（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９５７．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例８）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボン酸　２－ヒドロキシエチルの合成：
　参考例１０の化合物（３６ｍｇ，０．０３８ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（１．０ｍＬ）にｐ－トルエンスルホン酸一水和物（７．２ｍｇ）を加え、室温で１８時間撹拌した。得られた反応液の溶媒を減圧下留去し、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸カリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／９）にて精製し、表題化合物（以下、実施例８の化合物）を白色固体（３１ｍｇ，収率９５％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．１０（１Ｈ，ｓ），７．４９－７．４４（１Ｈ，ｍ），７．３０－７．１３（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５５－５．４８（１Ｈ，ｍ），４．８２－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．５０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），４．２０－３．２６（９Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．４６－２．３４（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１１－１．９０（２Ｈ，ｍ），１．８４－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４３－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０３－０．８９（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８７３．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例９）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000045
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに２－（メチルアミノ）エタン－１－オールを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例９の化合物）を白色アモルファス（３１ｍｇ，収率８５％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８４（１Ｈ，ｓ），７．８２－７．７６（１Ｈ，ｍ），７．３０－７．００（５Ｈ，ｍ），６．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５６－５．４８（１Ｈ，ｍ），５．０７（１Ｈ，ｂｒｓ），４．８７－４．７０（２Ｈ，ｍ），４．１８－３．２０（１７Ｈ，ｍ），３．１０（３Ｈ，ｓ），３．０２（３Ｈ，ｓ），２．４５－２．２０（４Ｈ，ｍ），２．２３（６Ｈ，ｓ），２．１１－１．８９（２Ｈ，ｍ），１．８７－１．４７（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．３０（１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０５－０．８６（１７Ｈ，ｍ），０．８０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８８６．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例１０）Ｎ－（４－アミノフェネチル）－２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000046
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに４－（２－アミノエチル）アニリンを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例１０の化合物）を白色固体（３７ｍｇ，収率７４％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９５（１Ｈ，ｓ），７．４３－７．３６（２Ｈ，ｍ），７．３０－７．１７（５Ｈ，ｍ），７．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），６．６５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．５３－５．４６（１Ｈ，ｍ），４．８３－４．７２（２Ｈ，ｍ），４．１５－４．０９（１Ｈ，ｍ），４．０８－４．０３（１Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），３．７０－３．１８（６Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．８２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），２．４５－２．３５（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１８－１．８９（２Ｈ，ｍ），１．８４－１．６４（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０３－０．９０（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９４７．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（実施例１１）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（４－ヒドロキシフェネチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000047
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに４－（２－アミノエチル）フェノールを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例１１の化合物）を白色固体（３３ｍｇ，収率，定量的）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９３（１Ｈ，ｓ），７．４１－７．３０（２Ｈ，ｍ），７．２７－７．１０（５Ｈ，ｍ），７．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．９５－６．８５（１Ｈ，ｍ），６．８２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．４９－５．４４（１Ｈ，ｍ），４．８５－４．７２（２Ｈ，ｍ），４．１４－３．１５（９Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．８２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．５１－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２３（６Ｈ，ｓ），２．１７－１．９４（２Ｈ，ｍ），１．９０－１．６０（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１５－０．８８（２０Ｈ，ｍ），０．８０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）． 
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９４９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１１）ｔｅｒｔ－ブチル　（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメイルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド）エチル）カーバメートの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000048
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに（２－アミノエチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１１の化合物）を白色固体（５５ｍｇ，収率９８％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：７．９６（１Ｈ，ｓ），７．６９（１Ｈ，ｂｒｓ），７．５０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３４－７．０９（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５５－５．４４（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｂｒｓ），４．８９－４．６７（２Ｈ，ｍ），４．２０－３．２０（１１Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．５０－２．３３（４Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．１０－１．９２（２Ｈ，ｍ），１．８５－１．６６（４Ｈ，ｍ），１．４２（９Ｈ，ｓ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１５－０．７９（２３Ｈ，ｍ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９７１．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１２）Ｎ－（２－アミノエチル）－２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド　二塩酸塩の合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000049
 　参考例８の化合物の代わりに参考例１１の化合物を用いて、それ以外は実施例５と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１２の化合物）を白色固体（４１ｍｇ，収率９６％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．６５（１Ｈ，ｂｒｓ），［８．１９（０．５Ｈ，ｓ），８．１６（０．５Ｈ，ｓ）］，７．３２－７．１６（５Ｈ，ｍ），５．６９－５．５６（１Ｈ，ｍ），４．８０－４．６３（２Ｈ，ｍ），４．１５－３．０５（１４Ｈ，ｍ），３．３３（６Ｈ，ｓ），２．９１（６Ｈ，ｓ），２．５１－１．３８（１０Ｈ，ｍ），１．３０－０．９１（２１Ｈ，ｍ），０．８５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８７１．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１３）（２－（２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド）エチル）（メチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000050
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりに（２－アミノエチル）（メチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１３の化合物）を白色固体（３２ｍｇ，収率４０％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９４（１Ｈ，ｓ），７．７９（１Ｈ，ｂｒｓ），７．４７（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２６－７．０９（５Ｈ，ｍ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），５．５３－５．４６（１Ｈ，ｍ），４．８２－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．１５－３．１１（１１Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．９２（３Ｈ，ｓ），２．４７－２．３４（４Ｈ，ｍ），２．２４（６Ｈ，ｓ），２．１２－１．９４（２Ｈ，ｍ），１．７７－１．６５（４Ｈ，ｍ），１．４３（９Ｈ，ｓ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１２－０．７８（２３Ｈ，ｍ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９８５．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１４）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－（メチルアミノ）エチル）チアゾール－４－カルボキサミド　二塩酸塩の合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000051
 　参考例８の化合物の代わりに参考例１３の化合物を用いて、それ以外は実施例５と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１４の化合物）を白色固体（２５ｍｇ，収率８８％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．６３（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２２－８．１４（１Ｈ，ｍ），７．３５－７．１５（５Ｈ，ｍ），５．７０－５．５２（１Ｈ，ｍ），４．８３－４．６３（２Ｈ，ｍ），４．１７－３．０４（２０Ｈ，ｍ），２．９１（３Ｈ，ｓ），２．９０（３Ｈ，ｓ），２．７４（３Ｈ，ｓ），２．５１－１．９８（６Ｈ，ｍ），１．９１－１．５０（４Ｈ，ｍ），１．４２－０．８０（２４Ｈ，ｍ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：８８５．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１５）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－（３－（トリチルチオ）プロパンアミド）エチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000052
 　３－（トリチルチオ）プロパン酸（１２ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５０ｍＬ）に、ＨＡＴＵ（１２ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）、参考例１２の化合物（２０ｍｇ，０．０２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５０ｍＬ）及びジイソプロピルエチルアミン（１３μＬ，０．０７４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。得られた反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／９）にて精製し、表題化合物（以下、参考例１５の化合物）を白色固体（２０ｍｇ，収率７７％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９１（１Ｈ，ｓ），７．６９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），７．４６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．４２－７．１０（２０Ｈ，ｍ），６．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），６．１６（１Ｈ，ｂｒｓ），５．５１－５．４５（１Ｈ，ｍ），４．８８－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．１３－４．０９（１Ｈ，ｍ），４．０７－４．０２（１Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．６０－３．１８（８Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．５０－２．３２（６Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．０９－１．９６（４Ｈ，ｍ），１．９０－１．６３（４Ｈ，ｍ），１．４０－１．２０（１Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．０５－０．８８（１７Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：１２０１．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１６）２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（２－（３－メルカプトプロパンアミド）エチル）チアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000053
 　参考例２の化合物の代わりに参考例１５の化合物を用いて、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１６の化合物）を白色固体（７．３ｍｇ，収率８９％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９７（１Ｈ，ｓ），７．７８（１Ｈ，ｂｒｓ），７．５１（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３２－７．１０（５Ｈ，ｍ），７．００－６．８５（１Ｈ，ｍ），６．５８（１Ｈ，ｂｒｓ），５．５３－５．４５（１Ｈ，ｍ），４．８２－４．７４（２Ｈ，ｍ），４．１５－４．０８（１Ｈ，ｍ），４．０６－４．００（１Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．６４－３．１８（８Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．８２－２．７５（２Ｈ，ｍ），２．５０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．４８－２．３７（４Ｈ，ｍ），２．２６（６Ｈ，ｓ），２．１２－１．９２（２Ｈ，ｍ），１．８３－１．５７（４Ｈ，ｍ），１．２７－１．１９（１Ｈ，ｍ），１．１１－０．８６（２０Ｈ，ｍ），０．８１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：９５９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１７）ｔｅｒｔ－ブチル　Ｎ２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｎ５－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－１，５－ジオキソ－１－（（２－（トリチルチオ）エチル）アミノ）ペンタン－２－イル）－Ｌ－グルタミナートの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000054
 　（Ｓ）－４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－５－オキソ－５－（（２－（トリチルチオ）エチル）アミノ）ペンタン酸　ｔｅｒｔ－ブチル（１．５ｇ，２．１ｍｍｏｌ）を２０体積％ジエチルアミン－テトラヒドロフラン（以下、ＴＨＦ）溶液（２０ｍｌ）に溶かし、室温で一晩攪拌した後に、反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣、ＨＡＴＵ（９４２ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）とＮ－α－（９－フルオレニルメトキシカルボニル）－Ｌ－グルタミン酸　α－ｔ－ブチル　エステル（８７８ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（３０ｍｌ）に、ジイソプロピルエチルアミン（３２０ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩攪拌した。過剰量の酢酸エチルを加えた後に、飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ－ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１→２／１）にて精製し、表題化合物（以下、参考例１７の化合物）を白色アモルファス（１．８１ｇ，収率９６％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．７６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｔｄ，Ｊ＝４．９，２．９Ｈｚ，７Ｈ），７．３０（ｄｄｔ，Ｊ＝１９．７，８．５，３．３Ｈｚ，９Ｈ），７．２２－７．１８（ｍ，２Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），５．５９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｄｔ，Ｊ＝１６．６，６．１Ｈｚ，２Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ＝９．８，６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．３９（ｄｔ，Ｊ＝１８．８，６．６Ｈｚ，３Ｈ），２．２５（ｄｔ，Ｊ＝２３．０，６．６Ｈｚ，３Ｈ），２．０１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），１．８７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．１３（ｄｔ，Ｊ＝１３．３，５．７Ｈｚ，２Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｎａ］＋：９３４．（ＬＣ／ＭＳ－２）
（参考例１８）ｔｅｒｔ－ブチル　Ｎ５－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－１，５－ジオキソ－１－（（２－（トリチルチオ）エチル）アミノ）ペンタン－２－イル）－Ｌ－グルタミナートの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000055
 　参考例１７（４８０ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）を２０体積％ジエチルアミン－ＴＨＦ溶液（５．０ｍｌ）に溶かし、室温で一晩攪拌した後に、反応溶液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／９）にて精製し、表題化合物（以下、参考例１８の化合物）を白色アモルファス（２８４ｍｇ，収率７８％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４１（ｔ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，６Ｈ），７．２９（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，５．０Ｈｚ，７Ｈ），７．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．４，６．１Ｈｚ，３Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３６－４．３１（ｍ，１Ｈ），３．３１－３．２６（ｍ，１Ｈ），３．１２－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，６．３Ｈｚ，１Ｈ），２．４５－２．２２（ｍ，７Ｈ），２．１０－２．０１（ｍ，３Ｈ），１．９５－１．８７（ｍ，７Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４３（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１２Ｈ），１．３０－１．２４（ｍ，２Ｈ），１．１６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），１．１１（ｔ，Ｊ＝７．２　Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：６９０．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例１９）ｔｅｒｔ－ブチル　Ｎ２－（４－（Ｎ－（（２－アミノ－４－オキソ－４，８－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）－２，２，２－トリフルオロアセトアミド）ベンゾイル）－Ｎ５－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－１，５－ジオキソ－１－（（２－（トリチルチオ）エチル）アミノ）ペンタン－２－イル）－Ｌ－グルタミナートの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000056
 　４－（Ｎ－（（２－アミノ－４－オキソ－４，８－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）－２，２，２－トリフルオロアセトアミド）安息香酸（１７７ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）とＨＡＴＵ（１８８ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ／ジメチルスルホキシド（以下、ＤＭＳＯ）溶液（１０ｍｌ／１．０ｍｌ）にジイソプロピルエチルアミン（７５ｍｇ，０．５８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で５分攪拌した。得られた反応溶液に参考例１８（２８５ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５．０ｍｌ）を加えて、室温で一晩攪拌した。過剰量の１体積％メタノール－クロロホルムを加えた後に、飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水で２回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／５）にて精製し、表題化合物（以下、参考例１９の化合物）を黄色固体（２７０ｍｇ，収率６１％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．６７（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，３Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄｄ，Ｊ＝５．２，３．４Ｈｚ，６Ｈ），７．２７－７．２３（ｍ，６Ｈ），７．１８（ｔｄ，Ｊ＝５．７，２．９Ｈｚ，３Ｈ），４．４０（ｄｄ，Ｊ＝９．５，４．５Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，５．７Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ＝１３．４，６．６Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，４．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２８（ｄｔ，Ｊ＝１７．２，５．０Ｈｚ，４Ｈ），２．０５－１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８２（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，８．４Ｈｚ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），１．２８（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｈ］－：１０７９．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例２０）Ｎ２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－４，８－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ５－（（Ｓ）－４－カルボキシ－１－（（２－メルカプトエチル）アミノ）－１－オキソブタン－２－イル）－Ｌ－グルタミンの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000057
 　参考例１９（１２０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン懸濁溶液（５．０ｍｌ）に７Ｎのアンモニア－メタノール溶液（５．０ｍｌ）を加えて均一な溶液として、室温で一晩攪拌した。減圧下で溶媒を留去して得られた固体に過剰量のジエチルエーテルを加えて洗浄し、沈殿した固体をろ過によって回収した（中間体１、１０５ｍｇ）。中間体１（１０５ｍｇ）に、ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン／Ｈ２Ｏ／エタンジチオール（９２．５／２．５／２．５／２．５体積％）（１０ｍｌ）を加えて、室温で一晩攪拌した。減圧下で溶媒を留去して得られた残渣に過剰量のジエチルエーテルを加えて攪拌し、生じた沈殿をろ過によって回収、得られた固体をジクロロメタンで洗浄し、表題化合物（以下、参考例２０の化合物）を緑黄色固体（６５ｍｇ，収率９２％，純度８０％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：８．６６（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），４．５０（ｓ，２Ｈ），４．２８（ｔ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｄｄ，Ｊ＝１３．１，８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．２３－３．１３（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２２（ｄｄ，Ｊ＝１６．５，７．５Ｈｚ，５Ｈ），２．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９０（ｄｄ，Ｊ＝２４．７，１０．２Ｈｚ，３Ｈ），１．７０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），１．２５（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：６３０．（ＬＣ／ＭＳ－２）
ｔＲ＝１２．２１　ｍｉｎ．（ＨＰＬＣ）
（参考例２１）（２－（（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）ジスルファネイル）エチル）（メチル）カルバミン酸　４－（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド）エチル）フェニルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000058
 　トリホスゲン（１７ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．０ｍｌ）を氷冷し、脱水ピリジン（２５ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を添加後、２０分攪拌した。その溶液に、メチル（２－（（２－（メチルアミノ）エチル）ジスルファネイル）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチル（１５ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２．０ｍｌ）をゆっくりと滴下して、室温に戻して１時間攪拌した。過剰量のジクロロメタンを加えて、水で３回洗浄した後に、有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。得られた残渣（７．５ｍｇ）を脱水ピリジン（１．０ｍｌ）に溶解させ氷冷した後に、実施例１１の化合物（２５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）の脱水ピリジン溶液（３．０ｍｌ）を加えて、室温に戻しながら一晩攪拌した。過剰量の酢酸エチルを加えた後に、水で３回、飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水で一回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後に、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミンシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／２０）にて精製し、表題化合物（以下、参考例２１の化合物）を白色アモルファス（２５ｍｇ，収率７６％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９６（１Ｈ，ｓ），７．４１－７．３０（２Ｈ，ｍ），７．２７－７．１０（５Ｈ，ｍ），７．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．４９－５．４４（１Ｈ，ｍ），４．８５－４．７７（２Ｈ，ｍ），４．１３－３．６４（９Ｈ，ｍ），３．６０－３．２９（１５Ｈ，ｍ），３．１３（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），２．５１－２．３０（４Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．１７－１．９８（２Ｈ，ｍ），１．７８（１２Ｈ，ｓ），１．１１－０．８８（２４Ｈ，ｍ），０．８２（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｂｏｃ］２＋：５７７．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例２２）（５０－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－７－メチル－８，４８－ジオキソ－１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４－ドデカオキサ－３，４－ジチア－７，４７－ジアザペンタコンチル）（メチル）カルバミン酸　４－（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド）エチル）フェニルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000059
 　参考例２１（２０ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．０ｍｌ）に、４Ｎの塩化水素－ジオキサン溶液（０．５ｍｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応溶液を減圧下濃縮した後に、減圧乾燥した。得られた残渣に、ＨＡＴＵ（７．３ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（０．５ｍｌ）を加え、その反応溶液に１－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０－ドデカオキサ－４－アザトリテトラコンタン－４３－酸（１２ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．０ｍｌ）とジイソプロピルエチルアミン（１０μｌ）を添加し、室温で一晩攪拌した。反応溶液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝０／１→１／５）にて精製し、表題化合物（以下、参考例２２の化合物）を油状物質（１５ｍｇ，収率４０％）として得た。
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］３＋：６３５．（ＬＣ／ＭＳ－１）
ｔＲ＝１７．１１　ｍｉｎ．（ＨＰＬＣ）
（実施例１２）Ｎ２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－４，８－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ５－（（２Ｓ）－４－カルボキシ－１－（（２－（（１－（１－（４－（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－カルボキサミド）エチル）フェノキシ）－２，９－ジメチル－１，１０，５０－トリオキソ－１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６－ドデカオキサ－５，６－ジチア－２，９，４９－トリアザドペンタコンタン－５２－イル）－２，５－ジオキソピロリジン－３－イル）チオ）エチル）アミノ）－１－オキソブタン－２－イル）－Ｌ－グルタミンの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000060
 　参考例２２（６．８ｍｇ，０．００３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル／メタノール溶液（１．０ｍｌ／０．５ｍｌ）に、参考例２０（３．０ｍｇ，０．００５ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（１．０ｍｌ）とｐＨ７．２のリン酸バッファー（以下、ＰＢＳ）（５０ｍＭ，１．０ｍｌ）を加えて、室温で一晩攪拌した。得られた反応混合物をＯＤＳカラムによる逆相精製を行ない、表題化合物（以下、実施例１２の化合物）を油状物質（６．０ｍｇ，収率６７％）として得た。
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｈ］２－：１２６６．（ＬＣ／ＭＳ－１）
ＨＲＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｈ］－：２５３２．１７５４．
Ｃ１１８Ｈ１８０Ｎ２０Ｏ３３Ｓ４の計算精密質量：２５３２．１８３２．
ｔＲ＝１６．４０　ｍｉｎ．（ＨＰＬＣ）
（参考例２３）（２－（（２－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミド）エチル）ジスルファネイル）エチル）（メチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000061
 　２－（トリチルチオ）エタンアミンの代わりにメチル（２－（（２－（メチルアミノ）エチル）ジスルファネイル）エチル）カルバミン酸　ｔｅｒｔ－ブチルを用いて、それ以外は参考例２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例２３の化合物）を白色固体（２６ｍｇ，収率９２％）として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．０１（１Ｈ，ｓ），７．８７（１Ｈ，ｂｒｓ），７．４６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２６－７．１５（５Ｈ，ｍ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．５６（１Ｈ，ｂｒｓ），４．８１－４．７７（２Ｈ，ｍ），４．１２（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０５（１Ｈ，ｂｒｓ），３．９７（１Ｈ，ｂｒｓ），３．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．８０（２Ｈ，ｍ），３．５１－３．１６（４Ｈ，ｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３２（３Ｈ，ｓ），３．１３（３Ｈ，ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．９６（３Ｈ，ｓ），２．８１－２．７４（２Ｈ，ｍ），２．８９（３Ｈ，ｓ），２．４６－２．３４（３Ｈ，ｍ），２．２５（６Ｈ，ｓ），２．１２－１．９７（２Ｈ，ｍ），１．６６（１５Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），１．４５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），１．１０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．０５－０．９０（１２Ｈ，ｍ），０．８２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］＋：１０９２．（ＬＣ／ＭＳ－１）
（参考例２４）２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－（５０－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－７－メチル－８，４８－ジオキソ－１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４－ドデカオキサ－３，４－ジチア－７，４７－ジアザペンタコンチル）－Ｎ－メチルチアゾール－４－カルボキサミドの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000062
 　参考例２１の代わりに参考例２３を用いて、それ以外は参考例２２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例２４の化合物）を油状物質（１７ｍｇ，収率３１％）として得た。
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｈ］２＋：８７１．（ＬＣ／ＭＳ－１）
ｔＲ＝１６．６６　ｍｉｎ．（ＨＰＬＣ）
（実施例１３）Ｎ２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－４，８－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ５－（（２Ｓ）－４－カルボキシ－１－（（２－（（１－（１－（２－（（Ｓ）－１－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）チアゾール－４－イル）－２，９－ジメチル－１，１０，５０－トリオキソ－１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６－ドデカオキサ－５，６－ジチア－２，９，４９－トリアザドペンタコンタン－５２－イル）－２，５－ジオキソピロリジン－３－イル）チオ）エチル）アミノ）－１－オキソブタン－２－イル）－Ｌ－グルタミンの合成：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000063
 　参考例２２の代わりに参考例２４を用いて、それ以外は実施例１２と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例１３の化合物）を油状物質（８．４ｍｇ，収率７１％）として得た。
ＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｈ］２－：１１８４．（ＬＣ／ＭＳ－１）
ＨＲＭＳ　ｍ／ｚ　（ＥＳＩ）［Ｍ－Ｈ］－：２３６９．１１６２．
Ｃ１０９Ｈ１７１Ｎ１９Ｏ３１Ｓ４の計算精密質量：２３６９．１１９８．
ｔＲ＝１５．８５　ｍｉｎ．（ＨＰＬＣ）
　ＬＣ／ＭＳ－１の分析条件は以下の通りである。
（ＬＣ／ＭＳ－１）
液体クロマトグラフシステム：ＬＣ１２００（アジレント・テクノロジー社製）
質量分析計：６１３０Ａ（アジレント・テクノロジー社製）
分析条件
カラム：ラピッドレゾリューションＨＴカートリッジ
移動相Ａ：０．１体積％ギ酸－蒸留水、ＨＰＬＣ用
移動相Ｂ：０．１体積％ギ酸－アセトニトリル、ＨＰＬＣ用
グラジエント条件：移動層Ｂ体積％
０－１．５　ｍｉｎ：２０％－９５％
１．５－３．０　ｍｉｎ：９５％
流速：０．５　ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２．０μＬ
カラム温度：４０℃
　ＬＣ／ＭＳ－２の分析条件は以下の通りである。
（ＬＣ／ＭＳ－２）
液体クロマトグラフシステム：ＬＣ１２６０　Ｉｎｆｉｎｉｔｙ　ＩＩ（アジレント・テクノロジー社製）
質量分析計：６１３０Ｂ（アジレント・テクノロジー社製）
分析条件
カラム：ラピッドレゾリューションＨＴカートリッジ
移動相Ａ：０．１体積％ギ酸－蒸留水、ＨＰＬＣ用
移動相Ｂ：０．１体積％ギ酸－アセトニトリル、ＨＰＬＣ用
グラジエント条件：移動層Ｂ体積％
０－１．５　ｍｉｎ：２０％－９５％
１．５－３．０　ｍｉｎ：９５％
流速：０．５　ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２．０μＬ
カラム温度：４０℃
　ＨＲＭＳの分析条件は以下の通りである。
液体クロマトグラフシステム：ＮｅｘｅｒａＸ２（島津製作所製）
質量分析計：ＬＣＭＳ－ＩＴ－ＴＯＦ質量分析計（島津製作所製）
分析条件
移動相：メタノール
流速：０．１　ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２．０μＬ
　ＯＤＳカラムでの精製条件は以下の通りである。
ＯＤＳカラム精製条件
カラム：山善ハイフラッシュカラム　ＯＤＳ　サイズＭ
流速：１０　ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：室温
検出波長：２５４　ｎｍ
移動層Ａ：０．０５体積％ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ２Ｏ
移動層Ｂ：０．０５体積％ＴＦＡ　ｉｎ　ＣＨ３ＣＮ
グラジエント：移動層Ｂ体積％
０－５　ｍｉｎ：５．０％
５－２０　ｍｉｎ：５％から９５％まで上昇
２０－２５　ｍｉｎ：９５％
　ＨＰＬＣでの分析条件は以下の通りである。
（ＨＰＬＣ）
カラム：ＣＯＳＭＯＳＩＬ　５Ｃ１８－ＡＲ－ＩＩｌ，　４．６ｍｍＩ．Ｄ．　ｘ　１５０ｍｍ
流速：１．０　ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出波長：２５４　ｎｍ
移動層Ａ：０．０５体積％ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ２Ｏ
移動層Ｂ：０．０５体積％ＴＦＡ　ｉｎ　ＣＨ３ＣＮ
グラジエント：移動層Ｂ体積％
０－５ｍｉｎ：５．０％
５－２０ｍｉｎ：５％から９５％まで上昇
２０－２５ｍｉｎ：９５％
（実施例１４）ペプチド誘導体（Ｉ）のｉｎ　ｖｉｔｒｏ細胞毒性評価：
　実施例１～１１の化合物、参考例１の化合物、参考例１２の化合物、参考例１４の化合物、参考例１６の化合物及び２－（（Ｓ）－１－（（（２Ｓ，３Ｒ）－３－（（Ｓ）－１－（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）－３－メチルブタンアミド）－Ｎ，３－ジメチルブタンアミド）－３－メトキシ－５－メチルヘプタノイル）ピロリジン－２－イル）－３－メトキシ－２－メチルプロパンアミド）－２－フェニルエチル）－Ｎ－エチルチアゾール－４－カルボキサミド（以下、比較例化合物）のＳＫＯＶ－３細胞、Ａ５４９細胞及びＬ１２１０細胞に対する細胞毒性をＭＴＳ法を用いて測定した。
　各被験物質の細胞毒性を表５に示す。表５中、ＥＣ５０は、５０％効果濃度を意味し、薬物が示す薬理作用の最低値からの最大反応の５０％を示す濃度を表し、ＳＫＯＶ－３は、ＳＫＯＶ－３細胞を表し、Ａ５４９は、Ａ５４９細胞を表し、Ｌ１２１０は、Ｌ１２１０細胞を表す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000064
　表５の結果から明らかな通り、ペプチド誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、複数のがん細胞に対して高い細胞毒性を有することが示された。
（実施例１５）ペプチド誘導体（Ｉ）の人工膜透過性試験（ＰＡＭＰＡ）：
　実施例１～１１の化合物、参考例１の化合物、参考例１２の化合物、参考例１４の化合物、参考例１６の化合物及び比較例化合物の人工膜透過性をＰｒｅ－ｃｏａｔｅｄ　ＰＡＭＰＡ　ＰｌａｔｅＳｙｓｔｅｍ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）を使用し、評価した。
　被験物質は１０ｍｍｏｌ／ＬになるようＤＭＳＯに溶解した後、２０％メタノールを含むＰＢＳで２００μｍｏｌ／Ｌになるよう希釈したものを標準溶液とした。冷凍保存したＰｒｅ－ｃｏａｔｅｄ　ＰＡＭＰＡ　Ｐｌａｔｅ　Ｓｙｓｔｅｍを３０分間以上室温に放置した。次いで、Ｐｒｅ－ｃｏａｔｅｄ　ＰＡＭＰＡ　Ｐｌａｔｅ　ＳｙｓｔｅｍのＤｏｎｏｒ側のプレートに標準溶液３２０μＬを添加し、Ａｃｃｅｐｔｏｒ側のプレートに２０％メタノール含むＰＢＳ２００μＬを添加して、両プレートをセットし、室温で５時間静置した。Ｄｏｎｏｒ側及びＡｃｃｅｐｔｏｒ側のプレートの各ウェルの反応液を、ＬＣ／ＭＳ分析（以下、ＬＣ／ＭＳ－３）に供し、各ウェルの化合物濃度を算出した。
　ＬＣ／ＭＳ－３の分析条件は以下の通りである。
液体クロマトグラフシステム：Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ社製）
質量分析計：Ｗａｔｅｒｓ　ＳＱＤ　Ｄｅｔｅｃｔｏｒ（Ｗａｔｅｒｓ社製）
カラム：Ａｓｃｅｎｔｉｓ　Ｅｘｐｒｅｓｓ　Ｃ１８，２．７ μｍ，２．１ ｍｍ ＩＤ×２０ｍｍ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）
移動相Ａ：０．１体積％ ギ酸水溶液
移動相Ｂ：アセトニトリル
流速：０．６ ｍＬ／ｍｉｎ
グラジエント：移動層Ｂ体積％
０．０～２．０　ｍｉｎ：３．０→１００％
２．０～２．４　ｍｉｎ：１００％
２．４～２．５　ｍｉｎ：１００→３．０％
　得られた各ウェルの反応液の化合物濃度を用いて、膜透過係数（Ｐｅ）（ｃｍ／ｓ）を以下の式より算出した 。
Ｃｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ＝（ＣＤ×ＶＤ－ＣＡ×ＶＡ）／（ＶＤ－ＶＡ）
Ｐｅ＝［－ｌｎ（１－ＣＡ／Ｃｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ）］／Ｓ×（１／ＶＤ＋１／ＶＡ）×ｔ
Ｃｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ：Ｄｏｎｏｒ側及びＡｃｃｅｐｔｏｒ側プレートウェルの平衡濃度
ＣＤ：Ｄｏｎｏｒ側プレートウェルの５時間後の濃度（ｍｍｏｌ／Ｌ）
ＶＤ：Ｄｏｎｏｒ側プレートウェルに添加した標準溶液の容積（０．３２ ｍＬ）
ＣＡ：Ａｃｃｅｐｔｏｒ側プレートウェルの５時間後の濃度（ｍｍｏｌ／Ｌ）
ＶＡ：Ａｃｃｅｐｔｏｒ側プレートウェルに添加した２０％メタノール含むＰＢＳの容積（０．２ ｍＬ）
Ｓ：膜表面積（０．３ ｃｍ２）
ｔ：静置時間１８，０００ ｓ（＝５ ｈｒ）
　各被験物質の人工膜透過性を表６に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000065
　表６中、Ｎ．Ｄ．は、Ａｃｃｅｐｔｏｒ側のプレートウェルの濃度が定量下限未満であったため、膜透過係数を算出できなかったことを意味する。
（実施例１６）ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体のｉｎ　ｖｉｔｒｏ細胞毒性評価：
　実施例１２の化合物及び実施例１３の化合物のＳＫＯＶ－３細胞、Ａ５４９細胞及びＬ１２１０細胞に対する細胞毒性をＭＴＳ法を用いて測定した。
　実施例１２の化合物は、葉酸をターゲッティングリガンドとして実施例１１の化合物のプロドラッグと適切な方法で複合化する事で得られた複合体である。
　実施例１２の化合物の評価方法は、次の通りである。葉酸を含有しない培地で培養している各細胞に、実施例１２の化合物を２時間処置した後に、化合物を含まない新しい培地へと変更し、そのまま継続して４８時間培養した。４８時間後の生細胞数をＭＴＳ法を用いて測定した。
　実施例１３の化合物は、葉酸をターゲッティングリガンドとして実施例３の化合物のプロドラッグと適切な方法で複合化する事で得られた複合体である。
　実施例１３の化合物の評価方法は、次の通りである。葉酸を含有しない培地で培養している各細胞に、実施例１３の化合物を６時間処置した後に、化合物を含まない新しい培地へと変更し、そのまま継続して４８時間培養した。４８時間後の生細胞数をＭＴＳ法を用いて測定した。
　ＳＫＯＶ－３細胞とＬ１２１０細胞は細胞表面に葉酸受容体が中～高発現していることが報告されている。Ａ５４９細胞は細胞表面に葉酸受容体が低発現若しくは検出されない程度に発現していることが報告されている（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００５年、第３３８巻、ｐ．２８４-２９３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、２０１５年、第１４巻、ｐ．１６０５-１３）。
　各被験物質の細胞毒性を表７に示す。表７中、ＥＣ５０は、５０％効果濃度を意味し、薬物が示す薬理作用の最低値からの最大反応の５０％を示す濃度を表し、ＳＫＯＶ－３は、ＳＫＯＶ－３細胞を表し、Ａ５４９は、Ａ５４９細胞を表し、Ｌ１２１０は、Ｌ１２１０細胞を表す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000066
　表７の結果から明らかな通り、ペプチド誘導体（Ｉ）を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩は、葉酸受容体が細胞表面に発現しているがん細胞に対して選択的に高い細胞毒性を有することが示された。
　ペプチド誘導体（Ｉ）は、Ｃ末端に種々の官能基を有するため、ペプチド誘導体（Ｉ）又はそのプロドラッグと、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を適切な方法で複合化することで複合体へと変換できることが示された。
　また、ペプチド誘導体（Ｉ）又はそのプロドラッグと、ターゲッティングリガンドと、を適切な方法で複合化することで得られた複合体は、ターゲッティングリガンドによる作用で特定の細胞に対して選択的に高い細胞毒性を有することが示された。
　本発明のペプチド誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、高い細胞毒性を有するため、細胞毒性剤として利用できる。また、本発明のペプチド誘導体（Ｉ）は、Ｃ末端に種々の官能基を有するため、ペプチド誘導体（Ｉ）又はそのプロドラッグと、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を複合化する事ができ、当該複合体又はその薬理学的に許容される塩は、細胞毒性剤として利用できる。
 

Claims (8)

  1. 　以下の一般式（Ｉ）で示されるペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     ［式中、Ｘは、酸素原子又はＮＲを表し、Ｙは、ＮＨ２、Ｎ（Ｍｅ）Ｈ、ＳＨ、ＯＨ又は任意の一つの水素原子がＮＨ２若しくはＯＨで置換されたフェニル基を表し、Ｒは、水素原子又は炭素数１～３のアルキル基を表す。但し、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、ＮＨ２である誘導体、及び、Ｘが、ＮＨであり、Ｙが、Ｎ（Ｍｅ）Ｈである誘導体を除く。］
  2. 　Ｘは、酸素原子である、請求項１記載のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
  3. 　Ｙは、ＮＨ２、Ｎ（Ｍｅ）Ｈ、ＳＨ又はＯＨである、請求項２記載のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
  4. 　Ｘは、ＮＲである、請求項１記載のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
  5. 　Ｒは、炭素数１～３のアルキル基である、請求項４記載のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
  6. 　Ｒは、メチル基である、請求項５記載のペプチド誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
  7. 　請求項１～６のいずれか一項記載のペプチド誘導体と、ターゲッティングリガンド又はポリマーと、を含む複合体又はその薬理学的に許容される塩。
  8. 　請求項１～６のいずれか一項記載のペプチド誘導体若しくはその薬理学的に許容される塩、又は、請求項７記載の複合体若しくはその薬理学的に許容される塩、を有効成分として含有する、細胞毒性剤。
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