WO2017159759A1 - 魚類寄生虫症防除剤及び飼料 - Google Patents

魚類寄生虫症防除剤及び飼料 Download PDF

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feed
mannobiose
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mannan
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健介 福井
石丸　克也
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不二製油グループ本社株式会社
不二製油株式会社
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    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
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    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/889—Arecaceae, Palmae or Palmaceae (Palm family), e.g. date or coconut palm or palmetto

Definitions

  • the present invention relates to a control agent and feed for controlling parasites during fish farming.
  • seawater white spot worms belonging to the protozoan ciliate class have a very wide host range and parasitize many kinds of marine fish.
  • closures such as aquariums and onshore tanks were supposed to occur in the breeding environment, but in recent years they have also occurred frequently in fish farms, which has become a hindrance to the sea surface aquaculture industry.
  • the infection ring of seawater white spotted worms is a trophon that infests the fish body and kills the host, and when it grows, it leaves the fish from itself and sinks into the water to form cysts. It repeats the stage of unequal division in the inside, and after the division, it becomes a parasite Seronto that has migrated from the cyst and this infects the fish body.
  • Non-Patent Document 1 As a countermeasure against these parasitic diseases, Cryptocaryon irritans is relatively weak in low salinity, and it is effective to perform a low salt water bath (1%) for 3 hours 4 times every 3 days. It is also effective to simply transfer white sea urchin-free seawater to the aquarium.
  • Non-patent Document 2 As a countermeasure against infectious diseases other than parasites, it is known that palm kernel meal, copra meal, coffee lees, guar meal, etc. are rich in mannan containing mannose as a constituent of mannobiose.
  • Patent Document 1 discloses that an aquaculture feed characterized by containing ⁇ -1,4-mannobiose improves the growth and can obtain a feed having no problem in the influence of the human body due to the residue. Are listed.
  • An object of the present invention is to provide an additive and feed for controlling diseases caused by parasites of fish, characterized by containing ⁇ -1,4-mannobiose in fish culture.
  • Patent Document 1 which is a conventional technique, mentions that an aquaculture feed characterized by containing ⁇ -1,4-mannobiose improves growth performance. There was no clarification about the control of the worms and the effect of reducing the number of deaths at the time of occurrence.
  • the present inventor has found that ⁇ -- without stress on fish, problems of adverse effects or residuals of drugs on fish, and complicated work of fishermen.
  • the present inventors have found that by using a control agent containing 1,4-mannobiose, the effect of suppressing cyst production at the time of parasite infection and drastic improvement in mortality due to parasites have been found, and the present invention has been completed.
  • the control agent and feed for fish parasites according to the present invention can reduce the number of parasite cysts and improve disease caused by parasites by adding it to the feed or using it as it is. It is possible to control parasites without the stress on the fish, the adverse effects of the drugs on the fish, the problems of residuals, and the troublesome work of the fishermen such as low salt baths and chemical baths. Can be realized.
  • FIG. 1 is a graph showing the survival rate of a rearing test using red sea bream fry. Seven to eleven days after the start of breeding, 39 fish were annihilated in the control tank and the survival rate was 0%, whereas only one fish died in the test 4% tank. There was no death in the water tank of% ward, and the survival rate was 100%.
  • control agent and feed for fish parasites of the present invention are characterized by containing ⁇ -1,4-mannobiose.
  • the control agent and feed for fish parasites according to the present invention is ⁇ -1,4-mannobiose (hereinafter also simply referred to as mannobiose), which is formed by two ⁇ -1,4-glycosidic bonds of two mannose molecules. .
  • the ⁇ -1,4-mannobiose used in the present invention can be obtained, for example, by a method of synthesizing mannose or a method of decomposing ⁇ -1,4-mannan (hereinafter also simply referred to as mannan).
  • the method for decomposing ⁇ -1,4-mannan is more preferable from the viewpoint of the raw material resource and reaction efficiency, and ⁇ -1,4-mannobiose can be obtained more easily.
  • mannan-degrading enzymes are allowed to act on mannan-containing natural products such as palm kernel meal, copra meal, coffee bean meal, guar gum, locust bean gum and the like, which are rich in mannan, or mannan extracted from these natural products. , ⁇ -1,4-mannobiose can be obtained.
  • the mannan degrading enzyme used in this method may be any mannanase, mannosidase, hemicellulase, etc., as long as it has an activity of degrading mannan to produce mannobiose, derived from Aspergillus niger, Commercially available products (for example, hemicellulase GM “Amano” (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.), Sumiteam ACH (manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.), cellulosin GM5 (Hankyu Bioindustry Co., Ltd.) and the like can be preferably used.
  • those having the hydrolysis activity can be used, for example, cellulase Y-NC (manufactured by Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.), in particular mannosidase. (Exo type) Low activity, mannanase (endo type) Highly active hemicellulase GM “Amano” (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) and Sumiteam ACH (manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) are preferred because they can suppress the production of mannose and can produce a large amount of mannobiose.
  • cellulase Y-NC manufactured by Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.
  • mannosidase Exo type
  • mannanase endo type
  • Highly active hemicellulase GM “Amano” manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.
  • Sumiteam ACH manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.
  • the mannan degrading enzyme is allowed to act on mannan-containing natural products or mannan extracted therefrom as an enzyme solution dissolved or dispersed in water.
  • the amount of water added for water adjustment is preferably 50 to 10,000 parts by weight, more preferably 50 to 1500 parts by weight, and still more preferably 50 to 500 parts by weight with respect to 100 parts by weight of mannan.
  • the enzyme reaction tends to be difficult to proceed.
  • the enzyme reaction efficiency tends to decrease.
  • the reaction time can be adjusted by selecting an enzyme so that as much mannobiose as possible is produced.
  • an enzyme having a high mannanase (endo type) activity usually also has a mannosidase (exo type) activity, if the enzymatic reaction time is too long, mannobiose is decomposed and the amount of mannose increases. Therefore, the reaction time is preferably not longer than necessary.
  • These enzyme reaction conditions are appropriately set so that the amount of mannobiose produced is as large as possible. In this case, it is preferable to set so that ⁇ -1,4-mannobiose is contained more than mannose.
  • the ratio of mannose to ⁇ -1,4-mannobiose is preferably 60% by weight or less, more preferably 20% by weight or less.
  • the amount of mannobiose depends on the type, amount, and time of the enzyme used. It is possible to produce up to about 5 to 15 parts by weight with respect to 100 parts by weight of the raw material.
  • the enzyme-treated product ( ⁇ -1,4-mannobiose-containing composition) containing mannobiose produced in this way can be used as a control agent for fish parasites by increasing the mannobiose concentration, for example, by removing insoluble matter. Although it is good, since the cost for concentration is required, it is better not to remove the insoluble matter, but to use the control agent as it is or after drying as necessary.
  • the control agent preferably contains 3% by weight or more of mannobiose. More preferably, it is 5 weight% or more, More preferably, it is 7 weight% or more, More preferably, it is 9 weight% or more. This control agent can be used by mixing with feed.
  • a water extract of mannobiose or the like from an enzyme-treated product can be used as a control agent to be added to a feed as it is.
  • the water extract contains mannose and mannooligosaccharides in addition to mannobiose, but it is not particularly necessary to extract and purify only mannobiose, but it is preferable that these are contained.
  • the fish parasite control agent of the present invention is preferably mixed so that the content in the blended feed is 0.001 to 2.00% by weight as mannobiose. More preferably, it is added in an amount of 0.005 to 1.00%, most preferably 0.01 to 0.50%.
  • Such feed can control parasites by feeding fish in solid form (DP) or in a dumpling form containing water (MP). Moreover, you may mix an aqueous solution directly with the seawater of the sea area which cultures. When mixed with seawater, the amount of mannobiose equivalent to that added to the feed can be used as a guide according to the number of fish cultured and the amount of food consumed.
  • (Fish) Fish are vertebrates that live in water, breathe mainly on gills, and have fins, and are collectively called jawless, cartilaginous fish, teleosts, etc. Can be used for any fish. That is, as fish that can be used for the parasite control agent and feed of the fish of the present invention, matai, yellowtail, puffer fish, flounder, eel, loach, salmon, tuna, horse mackerel, salmon trout, sweetfish, amberjack, grouper And carp. As the stage of feeding the control agent and feed of the present invention, the fry after hatching may be fed for a certain period of time, or may be used throughout all of the subsequent cultivation stages leading to adult fish.
  • the control agents and feeds for fish parasites of the present invention are intended for any parasitic diseases that are caused by fish parasites that occur in the field of aquaculture and for which appropriate control is desired.
  • ciliate white spotted insects (Cryptocaryon irritans, Ichthyophthirius multifiliis), trichodina (Trichodina spp., Etc.), kilodonella (Chilodonella piscicola, etc.), and monopods of beetles (Benedenia seriolae, Neobenedenia girellae, etc.), heterocerca, Bivagina tai, Heterobothrium okamotoi, Neoheterobothrium hirame, etc.), crustaceans such as Caligus (Caligus spinosus etc.), and fluke fish bloodworms (Paradeontacylix spp., Cardicola spp.
  • white spot worms that are a problem in the aquaculture industry are effective against both seawater white spot worms (Cryptocaryon irritans) and freshwater white spot worms (Ichthyophthirius multifiliis).
  • control agent of the present invention When the control agent of the present invention is used by mixing with feed, it may be freely blended with other materials used as normal feed materials.
  • various additives are used for the purpose of preventing the deterioration of the quality of the feed, supplementing the nutrients and other active ingredients of the feed, and promoting the effective use of the nutrients contained in the feed.
  • nutritional ingredients such as amino acids, vitamins, minerals, fatty acids, enzymes, live fungi, fungicides, antioxidants, emulsifiers, etc. can be freely added to the extent that they do not impair the effectiveness of this control agent. Is fine.
  • Example 1 150 parts of an enzyme solution prepared by dissolving 0.25 parts of the enzyme hemicellulase GM “Amano” (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) in 100 parts of copra meal (mannan content 30%, moisture 4.4%) at 60 ° C. for 12 hours. After the action, it was dried to a moisture content of 9.3% using a fluidized bed drying apparatus (manufactured by Okawara Seisakusho) to obtain 106 parts of a dry powder. When the mannobiose content and mannose content of the dried powder were measured by ion exchange chromatography, 12.7 parts of ⁇ -1,4-mannobiose and 1.41 parts of mannose were produced.
  • Example 2 Parasite control test 1 using red sea bream fry, evaluation by suppression of cyst number by artificial parasitism
  • 120 red sea bream larvae (average weight 6.8 g) were accommodated in 20 200 pairs of weights in 6 200 L aquariums.
  • 4420 worms raised from white spot disease cysts kept refrigerated in a sealed state were placed in all the aquariums for breeding (attack).
  • the three tanks were fed with a feed containing 4% of ⁇ -1,4-mannobiose produced in Example 1 as a control agent, and the remaining three tanks were fed with a control feed as a control group and continued to grow. .
  • Observations were made daily for 3 weeks after the attack, and observed for death or other abnormalities.
  • Cysts were collected and counted every two days from the next day when the infestation of white spot insects was clearly visible. After moving the test fish to the reserve tank, all the breeding water was drained, and the cysts adhering to the bottom of the tank were collected without using a spatula. The collected cysts were fixed with 70% ethanol and counted with a stereomicroscope at a later date.
  • Example 2 The feed used in the control test of Example 2 was prepared in Example 1 with respect to 100 parts of basic feed (manufactured by Nisshin Marubeni Corporation, Madai EP Super 2) in the 4% test feed. After adding 4 parts of a control agent containing 1,4-mannobiose and mixing, 1 part of carboxymethylcellulose was mixed as a spreading agent, and 10 parts of water was added thereto and mixed. In the control feed, 100 parts of the basic feed was mixed with 1 part of carboxymethylcellulose as a spreading agent without adding the control agent, and 10 parts of water was added thereto and mixed.
  • basic feed manufactured by Nisshin Marubeni Corporation, Madai EP Super 2
  • 100 parts of the basic feed was mixed with 1 part of carboxymethylcellulose as a spreading agent without adding the control agent, and 10 parts of water was added thereto and mixed.
  • Example 2 The results of the control test of Example 2 are shown in Table 1.
  • the body surface parasitism was confirmed for the first time 7-8 days after artificial infection, and cysts were collected and counted every 2nd day from the 9th day.
  • the total number of cysts up to 3 weeks after infection was 184 for the three aquariums in the control group, whereas the total for the three aquariums in the 4% test group was 117.
  • the number of cysts per aquarium is 31.3 ⁇ 13.3, while the average number of 3 aquariums in the control zone is 39.0 ⁇ 5.2. As a result, a remarkable control effect was observed.
  • Example 3 parasite control test 2 using red sea bream larvae, evaluation by infection control of marine parasites
  • Forty-five red sea bream fry (average weight 20.5 g) were accommodated in 40 fish, each with a weight of 3 300 L aquariums.
  • One of these tanks contains a feed containing 4% of ⁇ -1,4-mannobiose prepared in Example 1 as a control agent, the other one contains a feed containing 2% of a control agent, and the other one contains feed. Feeding was continued with the control feed as a control.
  • Seawater was collected from offshore using a pump, but the above three tanks use seawater sampled from the same location, so there are roughly the same number of parasites in all tanks. The animals were observed every day for 3 weeks from the start of feeding to check for death or other abnormalities.
  • Example 3 For the feed used in the control test of Example 3, the ⁇ -1,4-mannobiose produced in Example 1 was added to 100 parts of the basic feed (Madai EP Super 2) for the 4% test feed. After adding and mixing 4 parts of the contained control agent, 1 part of carboxymethylcellulose was mixed as a spreading agent, and 10 parts of water was added thereto and mixed. After adding 2 parts of the control agent containing ⁇ -1,4-mannobiose prepared in Example 1 to 100 parts of the basic feed, the 2% test feed was mixed with 1 part as a spreading agent. Carboxymethylcellulose was mixed and 10 parts of water was added and mixed. In the control feed, 100 parts of the basic feed was mixed with 1 part of carboxymethylcellulose as a spreading agent without adding the control agent, and 10 parts of water was added thereto and mixed.
  • the survival rate of the rearing test of Example 3 is shown in FIG. After 6 days from the start of feeding, all the water tanks started to show parasitic infection of white spot disease, and around 9 days, almost all white spots were seen in the control water tanks. In the 2% water tank, white spots were seen in about 60% to 70%. Seven to eleven days after the start of feeding, 39 fish were annihilated in the control tank, whereas only one died in the test 4% tank, and there were no deaths in the test 2% tank. . All of these deaths suffered from severe white spot disease. Breeding continued, but white spot disease in the 4% and 2% aquariums of the test turned to a better condition and no white spot diseased individuals were observed around 15 days after the start. Breeding was continued until the 20th day thereafter, but no new deaths were observed in both the test 4% group and the test 2% group. From the above, it was confirmed that ectoparasites can be remarkably controlled by using the feed containing this control agent.

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Abstract

【課題】 本発明は、魚類の養殖においてβ－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする、魚類の寄生虫による疾病を防除する添加剤、飼料を提供することを課題とした。 【解決手段】 本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料は、β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする。本発明の魚類の寄生虫用の防除剤は、これを飼料に添加すること、またはそのまま飼料として使用することによって、寄生虫のシスト数の減少、および寄生虫による疾病を改善することができ、低塩水浴や薬浴のような移し変えの煩雑さ、魚への負担を伴わず、寄生虫の防除を実現することができる。

Description

魚類寄生虫症防除剤及び飼料
本発明は、魚類養殖時の寄生虫を防除するための防除剤および飼料に関する。
海面養殖業において寄生虫症は養殖魚の大量斃死の原因となり、海面養殖業における大きな問題のひとつとなっている。この中でも例えば原生動物の繊毛虫綱に属する海水白点虫などは、宿主範囲も非常に広く多種類の海産魚類に寄生する。もともとは、水族館や陸上水槽などの閉鎖的は飼育環境で発生するものとされてきたが、近年は養魚場でも多発するようになっており、海面養殖業の阻害要因となっている。
寄生虫の代表的なものとしては、マタイ、ヒラメなどに寄生する海水白点虫（Cryptocaryon irritans）、ブリ類、マダイなどに寄生するハダムシ（Benedenia seriolae）などが知られている。
たとえば海水白点虫（Cryptocaryon irritans）の感染環は魚体に寄生して宿主を死に至らしめるトロホント、これが成長するとみずから魚を離れ、水中に沈んでシスト（トモント）を形成し、白点虫はシストの中で不等分裂を繰り返し、分裂後、シストから遊出してきた虫体セロントとなり、これが魚体に感染する、というステージを繰り返す。
これらの寄生虫症の防除対策としては、Cryptocaryon irritansは低塩分に比較的弱く、３時間の低塩水浴（１％）を３日おきに４回行うことが有効という。また単に白点虫フリーの海水の水槽への移し変えも有効という。（非特許文献１）
他に過酸化水素による薬浴法もあるが、これらはいずれも魚におよぼすストレス、薬剤による魚そのものへの悪影響、さらには養殖業者の煩雑な作業といった問題が多い。また薬浴法では食用の魚での薬物の残留や、環境への悪影響などの問題もある。
また寄生虫以外の感染症の防除対策として、マンノビオースを含む素材に関しては、パーム核ミール、コプラミール、コーヒー粕、グアーミール等には、マンノースを構成糖とするマンナンが豊富に含有されることが知られており、これら天然原料に酵素を作用させて調製したマンノビオースを主成分とするマンノノオリゴ糖類を含む組成物を添加された飼料は、有害細菌であるサルモネラ菌の動物腸内での定着を抑制し体外へ排出する排菌効果（サルモネラ菌定着抑制効果）を有することが知られている（非特許文献２）。
特許文献１には、β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする水産養殖用の飼料が成長性を改善し、それらの残留による人体の影響に問題がない飼料を得られることが記載されている。
特開２０１０－５７５１８号公報
魚介類の感染症・寄生虫病（若林久嗣、室賀清邦編）、恒星社厚生閣, p.295-303, 2004 Poultry Science, 687, p.1357-1360, 1989
本発明は、魚類の養殖においてβ－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする、魚類の寄生虫による疾病を防除する添加剤、飼料を提供することを課題とした。
従来技術である特許文献１は、β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする水産養殖用の飼料が成長性を改善することが言及されているが、寄生虫の感染時におけるシストの防除や、この発生時の死亡数の減少効果については、何ら明確にされていなかった。
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、魚へのストレスや、薬剤の魚への悪影響や残留の問題、それに養殖業者の煩雑な作業を伴わずに、β－１，４－マンノビオースを含有する防除剤を用いることで、寄生虫の感染時におけるシスト産生の抑制効果と、寄生虫による死亡を劇的に改善することを見出し、本発明を完成させた。
すなわち本発明は、
（１）β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする魚類寄生虫症の防除剤、
（２）β－１，４－マンノビオースがコプラミール、パーム核ミールまたはコーヒー粕由来である、（１）記載の魚類寄生虫症の防除剤、
（３）β－１，４－マンノビオースがマンナン含有天然物にマンナン分解酵素を作用させて生成したものである、（１）記載の魚類寄生虫症の防除剤、
（４）β－１，４－マンノビオースの含有量が３重量％以上である、（１）～（３）いずれか１項に記載の魚類寄生虫症の防除剤、
（５）β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする魚類寄生虫症防除用飼料、
（６）魚類にβ－１，４－マンノビオースを含有する組成物を投与することを特徴とする寄生虫症の防除法、
である。
本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料は、これを飼料に添加することによって、またはそのまま飼料として使用することによって、寄生虫のシスト数の減少、および寄生虫による疾病を改善することができ、魚へのストレスや、薬剤の魚への悪影響や残留の問題及び養殖業者の低塩水浴や薬浴のような移し変えのような煩雑な作業を伴わずに、寄生虫の防除を実現することができる。

図１はマダイ稚魚を用いた飼養試験の生残率を示した図である。飼養開始後７～１１日後には対照区の水槽では３９尾が全滅し、生残率が０％になったのに対し、試験４％区の水槽では１尾のみ死亡にとどまり、また試験２％区の水槽では死亡例は無く、１００％の生残率となった。
本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料は、β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする。
（β１，４－マンノビオース）
本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料は、β－１，４－マンノビオース（以下、単にマンノビオースともいう）は、マンノース２分子がβ－１，４－グリコシド結合してなるものである。本発明で用いられるβ－１，４－マンノビオースは、例えば、マンノースを合成する方法や、β－１，４－マンナン（以下、単にマンナンともいう）を分解する方法により得ることができる。
（β１，４－マンノビオースの製造方法）
β－１，４－マンナンを分解する方法は、原料の資源性及び反応効率の点でより好ましく、より簡便にβ－１，４－マンノビオースを得ることができる。この方法では、例えば、マンナンを豊富に含有するパーム核ミール、コプラミール、コーヒー豆粕、グアーガム、ローカストビーンガムなどのマンナン含有天然物又はこれらの天然物から抽出したマンナンに、マンナン分解酵素を作用させて、β－１，４－マンノビオースを得ることができる。
また、この方法において使用されるマンナン分解酵素としては、マンナナーゼ、マンノシダーゼ、ヘミセルラーゼ等、マンナンを分解してマンノビオースを生成する活性を有するものであればいずれでもよいが、Aspergillus niger由来のもので、市販されているもの（例えばヘミセルラーゼＧＭ「アマノ」（天野製薬株式会社製）、スミチームＡＣＨ（新日本化学工業株式会社製）、セルロシンＧＭ５（阪急バイオインダストリー株式会社）等を好ましく使用できる。また、これらのほか、キシラナーゼ、セルラーゼとして市販されているものであっても、当該加水分解活性を有するものも使用でき、例えば、セルラーゼＹ－ＮＣ（ヤクルト薬品工業株式会社製）を使用できる。特に、マンノシダーゼ（exo型）活性が低く、マンナナーゼ（endo型）活性が高いヘミセルラーゼＧＭ「アマノ」（天野製薬株式会社製）、スミチームＡＣＨ（新日本化学工業株式会社製）が、マンノースの生成を抑え、多量にマンノビオースを生成させることができる点で好ましい。
さらに、この方法では、マンナン分解酵素は、水に溶解又は分散させた酵素液として、マンナン含有天然物又はこれから抽出したマンナンに作用させる。そして、マンナン含有天然物を用いる場合において効率的な反応を行うためには、マンナン含有天然物、マンナン分解酵素及び水からなる反応系における水分の調整が重要である。水を添加することにより、マンナン類の繊維質を十分に膨潤させ、酵素液を接触しやすくすることができる。水分調整のための水の添加量としては、マンナン１００重量部に対して、５０～１００００重量部が好ましく、より好ましくは５０～１５００重量部であり、さらに好ましくは５０～５００重量部である。水分量が少ないと、酵素反応が進みにくい傾向があり、水分量が多い場合は、酵素反応効率が低下する傾向になる。
また、酵素量、反応時間としては、マンノビオースが出来るだけ多く生成するように酵素を選択し、反応時間を調整することができる。但し、マンナナーゼ（endo型）活性が高い酵素は、通常、マンノシダーゼ（exo型）活性も有していることから、酵素反応の時間が長すぎると、マンノビオースが分解されてマンノース量が増加してしまうため、反応時間は必要以上に長い時間としないことが好ましい。これら酵素反応条件は、マンノビオース生成量ができるだけ多くなるように適宜設定される。この場合、β－１，４－マンノビオースがマンノースより多く含まれるよう設定するのが好ましい。例えば、β－１，４－マンノビオースに対するマンノースの割合は、６０重量％以下が好ましく、より好ましくは２０重量％以下である。以上のようにして、例えば、原料としてコプラルミール（マンナン含有量は、およそ３０％）を用いて３～３６時間反応させた場合、マンノビオース量は、使用する酵素の種類や量、時間にもよるが、原料１００重量部に対して、５～１５重量部程度まで生成させることができる。
（β１，４－マンノビオースの含有量）
このようにして生成したマンノビオースを含有する酵素処理物（β－１，４－マンノビオース含有組成物）は、不溶物を除去する等してマンノビオース濃度を高めて魚類の寄生虫用の防除剤としても良いが、濃縮のためのコストを要するため、寧ろ、不溶物などは除去せず、そのまま、又は必要に応じた乾燥を行って防除剤とするのが良い。この場合、防除剤中に、マンノビオースとして３重量％以上含有するものが好ましい。より好ましくは５重量％以上、さらに好ましくは７重量％以上、さらに好ましくは９重量％以上である。この防除剤は、飼料に配合して使用することができる。一方、酵素処理物からマンノビオース等を水抽出物したものを、そのまま飼料に添加する防除剤として使用することもできる。この場合も、当該水抽出物は、マンノビオースの他にマンノースやマンノオリゴ糖類などを含有するが、特にマンノビオースのみを抽出、精製する必要はなく、むしろこれらが含まれていることが好ましい。
本発明の魚類の寄生虫用の防除剤は、飼料に添加する場合、配合飼料中の含有量がマンノビオースとして０．００１～２．００重量％となるように混合することが好ましい。更に好ましくは０．００５～１．００％、最も好ましくは０．０１～０．５０％となるように添加するのが良い。このような飼料は、魚類に、固形状（DP）、もしくは水分を含む団子状（MP）で給餌することによって、寄生虫を防除することができる。また、水溶液を養殖を行う海域の海水に直接混合しても良い。海水に混合する場合は、魚の養殖飼育数、摂餌量に応じて飼料に添加する場合と同等のマンノビオース量を目安にすることができる。
（魚類）
魚類は水中で生活し、主としてえらで呼吸を行い、ひれをもっている脊椎動物であり、無顎類、軟骨魚類、硬骨魚類などで総称されるが、本発明の魚類の防除剤および飼料はこれらのあらゆる魚類に使用することができる。すなわち、本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料が使用できる魚類として、マタイ、ブリ類、フグ、ヒラメ、ウナギ、ドジョウ、アナゴ、マグロ、アジ、サケ・マス、アユ、カンパチ、ハタ類、コイ類などが例示される。本発明の防除剤および飼料を給与する段階としては、孵化後の稚魚に一定期間給餌しても良いし、その後の成魚に至る養殖段階の全てを通じて用いても良い。
（寄生虫）
本発明の魚類の寄生虫用の防除剤および飼料は、養殖の現場において発生する魚類の寄生虫によって発症し、その適切な防除が嘱望されているいかなる寄生虫症をも対象とする。例えば、繊毛虫である白点虫（Cryptocaryon irritans、Ichthyophthirius multifiliis）、トリコジナ（Trichodina spp.等）、キロドネラ（Chilodonella piscicola等）、単生虫であるハダムシ（Benedenia seriolae、Neobenedenia girellae等）、エラムシ（Heteraxine heterocerca、Bivagina tai、Heterobothrium okamotoi、Neoheterobothrium hirame等）、甲殻虫であるカリグス（Caligus spinosus等） 、吸虫である魚類血吸虫（Paradeontacylix spp.、Cardicola spp. 等）などが例示される。特に養殖業界で問題となっている白点虫については、海水白点虫（Cryptocaryon irritans）、淡水白点虫（Ichthyophthirius multifiliis）のいずれに対しても有効である。
（飼料としての使用）
本発明の防除剤を飼料に混合して使用する場合、他の通常の飼料原料として用いられる材料と自由に配合しても構わない。例えば、魚粉、ミートミール、脱脂粉乳、乾燥ホエー、オキアミミール、カゼイン、ゼラチンなどの動物性材料、酵母類、トウモロコシデンプン、デキストリンなどの糖類、大豆タンパク、小麦グルテン、トウモロコシツエインなどの植物性たん白質、トウモロコシ、マイロ、小麦、大麦、米、ライ麦、燕麦、ルーピン、甘薯、キャッサバなどの穀物類、大豆、おから、脱脂大豆などの豆類、菜種粕、ヒマワリ粕、サフラワー粕などの植物性油粕類、米ヌカ、フスマ、麦ヌカなどの糟糠類、コーングルテンフィード、ビートパルプ、ビール粕、酒粕、コンニャク飛粉などの製造副産物類、綿実油、菜種油、トウモロコシ油、大豆油、ヒマワリ油、サフラワー油、オリーブ油、ヤシ油、パーム油などの油脂類などが挙げられる。これらは単独で使用してもよいし又は二種以上の混合物として用いられることができる。飼料の給餌形態として、水分を含まない固形飼料（DP）および水分を含む団子状飼料（MP）の形態などがあるが、いずれの形態で給餌してもよい。
さらに他に、飼料の品質の低下の防止、飼料の栄養成分その他有効成分の補給、飼料の含有している栄養成分の有効な利用の促進を目的に各種の添加物が用いられる。例えばアミノ酸類、ビタミン類、ミネラル類、脂肪酸類などの栄養成分、酵素類、生菌剤、防カビ剤、抗酸化剤、乳化剤などを本防除剤の効果を阻害しない範囲で自由に配合することは差し支えない。
以下、本発明の実施例を示し、本発明を詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。実施例中の「部」、「％」は、特に断りがない限りそれぞれ「重量部」、「重量％」を表す。
（実施例１）
コプラミール（マンナン含有量３０％、水分４．４％）１００部に、酵素ヘミセルラーゼＧＭ「アマノ」（天野製薬株式会社製）０．２５部を溶解した酵素液１５０部を、６０℃で１２時間作用させた後、流動層乾燥装置（大河原製作所製）にて水分９．３％にまで乾燥させて、乾燥粉体１０６部を得た。この乾燥粉体のマンノビオース含有量およびマンノース含有量をイオン交換クロマトグラフィー法で測定したところ、β－１，４－マンノビオースが１２．７部、マンノースが１．４１部生成していた。
（実施例２、マダイ稚魚を用いた寄生虫防除試験１、人工寄生によるシスト数抑制による評価）
マダイ稚魚（平均体重６．８ｇ）１２０尾を、２００Ｌ水槽６基に体重を揃えて２０尾ずつ収容した。その翌日、全ての水槽に、密封状態で冷蔵保存しておいた白点病シストから浮出した幼生を１水槽あたり４４２０虫ずつ投入して飼育を行った（攻撃）。その翌日から、水槽３基には実施例１で製造したβ－１，４－マンノビオースを防除剤として４％含む飼料を、残りの水槽３基にはコントロール区として対照飼料を与えて飼育継続した。攻撃後、３週間毎日観察を行い、死亡やその他の異常の有無を観察した。白点虫の寄生を明瞭に視認した翌日から、２日毎にシストを回収、計数した。供試魚を予備水槽に移動後、飼育水を全て排水し、水槽底面に付着したシストをヘラを用いて残さずに回収した。回収したシストは７０％エタノールで固定し、後日、実体顕微鏡で計数した。
実施例２の防除試験に用いた飼料は、試験４％区の飼料には、基礎飼料（日清丸紅株式会社製、マダイＥＰスーパー２号）１００部に対して、実施例１で製造したβ－１，４－マンノビオースを含む防除剤４部を加えて混合したのち、展着剤として１部のカルボキシメチルセルロースを混合し、これに１０部の水を加えて混合した。対照区の飼料には、基礎飼料１００部に対して、防除剤を添加せずに、展着剤として１部のカルボキシメチルセルロースを混合し、これに１０部の水を加えて混合した。
実施例２の防除試験の結果を表１に示した。人為感染の７～８日後に体表の寄生を初めて確認し、９日めから２日おきにシストを回収・計数を行った。感染３週間後までの合計シスト数は対照区の水槽３基の合計は１８４個となったのに対して、試験４％区の水槽３基の合計は１１７個となった。また水槽ごとのシスト数は、対照区の水槽３基の平均数は６１．３±１３．３個に対して、試験４％区の水槽３基の平均数は３９．０±５．２個となり、顕著な防除効果がみられた。
（実施例３、マダイ稚魚を用いた寄生虫防除試験２、海産寄生虫の感染防除による評価）
マダイ稚魚（平均体重２０．５ｇ）１２０尾に、３００Ｌ水槽３基に体重を揃えて４０尾ずつ収容した。そのうちの水槽１基には実施例１で製造したβ－１，４－マンノビオースを防除剤として４％含む飼料を、もう１基には防除剤を２％含む飼料を、残りの１基にはコントロールとした対照飼料を給餌して飼育継続した。海水はポンプを用いて沖合より採水したが、上記の３基の水槽は同一箇所から採水された海水を用いているため、全ての水槽に概ね同一数の寄生虫が存在する。飼養開始から３週間毎日観察し、死亡やその他の異常の有無を確認した。
実施例３の防除試験に用いた飼料は、試験４％区の飼料には、基礎飼料（マダイＥＰスーパー２号）１００部に対して、実施例１で製造したβ－１，４－マンノビオースを含む防除剤４部を加えて混合したのち、展着剤として１部のカルボキシメチルセルロースを混合し、これに１０部の水を加えて混合した。試験２％区の飼料には、基礎飼料１００部に対して、実施例１で製造したβ－１，４－マンノビオースを含む防除剤２部を加えて混合したのち、展着剤として１部のカルボキシメチルセルロースを混合し、これに１０部の水を加えて混合した。対照区の飼料には、基礎飼料１００部に対して、防除剤を添加せずに、展着剤として１部のカルボキシメチルセルロースを混合し、これに１０部の水を加えて混合した。
実施例３の飼養試験の生残率を図１に示した。飼養開始後６日め以降に全ての水槽で白点病の寄生感染が見られ始め、９日後ごろには、対照区の水槽ではほぼ全例に白点がみられ、試験４％区および試験２％区の水槽では６，７割程度に白点がみられた。飼養開始後７～１１日後には対照区の水槽では３９尾が全滅したのに対し、試験４％区の水槽では１尾のみ死亡にとどまり、また試験２％区の水槽では死亡例は無かった。これらの死亡例の全例が重度の白点病に罹患していた。その後も飼育を継続したが、試験４％区および２％区の水槽での白点病の病状は快方に向かい、開始後１５日ごろには白点病罹患個体はみられなくなり、その後、開始後２０日めまで飼育を継続したが、試験４％区および試験２％区とも新たな死亡例はみられなかった。以上より、本防除剤入りの飼料の使用によって外部寄生虫を顕著に防除できることが確認できた。
（表１）マダイ稚魚を用いた寄生虫抑制試験結果
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
以上のことから、本発明のβ－１，４－マンノビオースを含有する防除剤および飼料を用いることで、寄生虫の感染時におけるシストの防除効果と、寄生虫による症状および死亡率を劇的に改善することが見出された。魚類の寄生虫症に対して有効な天然の生理活性物質を含有する魚類の飼料を提供することができる。これを使用することで魚へのストレスや、薬剤の魚への悪影響や残留の問題、それに養殖業者の煩雑な作業を伴わずに安全に魚類の寄生虫症による体重減少や斃死を防ぐことができ、魚類養殖における経済性も向上することができる。

Claims (6)

  1. β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする魚類寄生虫症の防除剤。
  2. β－１，４－マンノビオースがコプラミール、パーム核ミールまたはコーヒー粕由来である、請求項１記載の魚類寄生虫症の防除剤。
  3. β－１，４－マンノビオースがマンナン含有天然物にマンナン分解酵素を作用させて生成したものである、請求項１記載の魚類寄生虫症の防除剤。
  4. β－１，４－マンノビオースの含有量が３重量％以上である、請求項１～３いずれか１項に記載の魚類寄生虫症の防除剤。
  5. β－１，４－マンノビオースを含有することを特徴とする魚類寄生虫症防除用飼料
  6. 魚類にβ－１，４－マンノビオースを含有する組成物を投与することを特徴とする寄生虫症の防除法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023114315A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Quality Technology International, Inc. Method and composition for treating parasites in an animal

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110622894A (zh) * 2019-09-03 2019-12-31 广西壮族自治区海洋研究所 一种清除杉虎斑寄生鱼蛭的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008007505A (ja) * 2006-06-26 2008-01-17 Fuji Oil Co Ltd 抗炎症作用組成物及び剤、並びにこれらを含有する飲食物及び飼料
JP2010057518A (ja) * 2009-12-18 2010-03-18 Fuji Oil Co Ltd 水産養殖用の餌料添加剤および餌料
JP2010183909A (ja) * 2002-11-26 2010-08-26 Fuji Oil Co Ltd β−１，４−マンノビオース含有組成物
WO2012002379A1 (ja) * 2010-06-28 2012-01-05 日本水産株式会社 魚類の寄生虫駆除剤及び駆除方法
JP2015107989A (ja) * 2009-04-27 2015-06-11 日本水産株式会社 魚類寄生虫駆除方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100521964C (zh) * 2004-02-27 2009-08-05 日本水产株式会社 鳝鱼用饲料
CN101031203B (zh) * 2004-09-24 2011-05-11 生物耐克斯特公司 抗一种或多种病原体的组合物的用途
WO2008001770A1 (fr) * 2006-06-26 2008-01-03 Fuji Oil Company, Limited Composition et agent antiallergiques, et aliment, boisson et aliment pour animaux contenant lesdits composition ou agent
WO2013095965A1 (en) * 2011-12-19 2013-06-27 Wellstat Biologics Corporation Stable storage of enveloped viruses in histidine aqueous solution

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010183909A (ja) * 2002-11-26 2010-08-26 Fuji Oil Co Ltd β−１，４−マンノビオース含有組成物
JP2008007505A (ja) * 2006-06-26 2008-01-17 Fuji Oil Co Ltd 抗炎症作用組成物及び剤、並びにこれらを含有する飲食物及び飼料
JP2015107989A (ja) * 2009-04-27 2015-06-11 日本水産株式会社 魚類寄生虫駆除方法
JP2010057518A (ja) * 2009-12-18 2010-03-18 Fuji Oil Co Ltd 水産養殖用の餌料添加剤および餌料
WO2012002379A1 (ja) * 2010-06-28 2012-01-05 日本水産株式会社 魚類の寄生虫駆除剤及び駆除方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023114315A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Quality Technology International, Inc. Method and composition for treating parasites in an animal

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