WO2015027667A1 - 2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物及其制备方法和其药物组合物与应用 - Google Patents

2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物及其制备方法和其药物组合物与应用 Download PDF

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WO2015027667A1
WO2015027667A1 PCT/CN2014/000799 CN2014000799W WO2015027667A1 WO 2015027667 A1 WO2015027667 A1 WO 2015027667A1 CN 2014000799 W CN2014000799 W CN 2014000799W WO 2015027667 A1 WO2015027667 A1 WO 2015027667A1
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mmol
acid
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diamine
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PCT/CN2014/000799
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吴国锋
徐永梅
毛伟
陈春麟
吴章桂
林筱芹
汪俊
蔡金娜
肖森
吕立力
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浙江医药股份有限公司新昌制药厂
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    • C07D473/16—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two nitrogen atoms

Definitions

  • the present invention relates to the technical field of compound preparation, and in particular to a 2,6-dinitro-substituted anthracene derivative, a process for the preparation thereof, and a pharmaceutical composition and use thereof.
  • cancers Malignant tumors (cancers) are one of the major diseases that currently seriously affect human health and threaten human life. The number of people dying from cancer worldwide is not less than 5 million. Although surgery, radiotherapy, chemotherapy and other means to treat cancer, the cure rate is generally not high. Among them, chemical drug treatment is the main treatment, but there are defects such as poor selection and side effects. Therefore, it is a research hotspot to find anti-tumor drugs with low toxicity, small side effects, high anticancer activity and good stability.
  • Type I PI3K is a complex large family and one of the targets of targeted anti-tumor drugs, including type I, type II, and sputum.
  • Type I PI3K is further divided into two subtypes, IA and IB, which transmit signals from tyrosine kinase-linked receptors and G-protein-linked receptors, respectively, to catalyze the phosphorylation of phosphatidylinositol (P1) at the D3 position.
  • the substrate PIP2 was converted to PIP3.
  • Type IA P13K is a dimeric protein composed of a catalytic subunit P110 and a regulatory subunit P85, which has dual activities of a lipid kinase and a protein kinase.
  • P13K The activity of P13K is tightly controlled by many mechanisms in normal cells. It is generally believed that in resting cells, the inactive P85-P110 complex is ubiquitous in the cytosol, waiting for proper signal activation. P13K is activated in two ways: one is to interact with a growth factor receptor or a connexin with a phosphorylated tyrosine residue, causing
  • the P85-P110 dimer conformation is altered and activated.
  • this signal is derived from ligand-mediated activation of the kinase, resulting in phosphorylation of tyrosine residues on the inner surface of the cell membrane.
  • the phosphorylated tyrosine residue immediately becomes the binding site of the intracellular signaling protein, and the P85-P110 complex is aggregated and activated by binding to the SH2 domain of P85; the second is directly through Ras and P110. Binding leads to activation of P13K.
  • Akt also known as protein kinase B (PKB), is a serine/threonine kinase with a relative molecular mass of 60 000 and is a homologue of V- akt with protein kinase A (PKA) and protein kinase C (PKC). ) has similarities.
  • Akt can directly phosphorylate a variety of transcription factors, and by regulating these transcription factors, it can inhibit the expression of apoptotic genes and enhance the expression of anti-apoptotic genes, thereby promoting cell survival.
  • the transcription factor FKHRLI can promote the transcription of the apoptotic genes Fas-1 and Bim.
  • Akt is transferred from the cell membrane to the nucleus and phosphorylates FKHRL1.
  • Phosphorylated FKHRL1 is transported out of the nucleus and chelated with cytoplasmic protein 14-3 to lose the transcriptional function of the target gene.
  • Akt also positively regulates two transcription factors, NF- ⁇ and Bel-2.
  • NF-kB is involved in cell differentiation, apoptosis and survival induced by many cytokines and growth factors. Under normal conditions, NF- ⁇ binds to its inhibitor I- ⁇ in the cytoplasm and loses its transcriptional activity. Akt can activate ⁇ (1 ⁇ ⁇ kinase) by phosphorylation, resulting in I- ⁇ ⁇ phosphorylation, degradation, and separation from NF-, and the released NF-kB translocates into the nucleus and induces expression of the target gene. . AktlKK. It is essential for the mediated I- ⁇ degradation and NF- ⁇ activation, and is a key regulator of NF-kB-dependent gene transcription and plays an important role in promoting tumor cell survival.
  • Akt In addition to affecting the expression of apoptotic and anti-apoptotic genes, Akt also promotes cell survival by direct phosphorylation of the pro-apoptotic protein Bad.
  • Bad is an apoptotic protein in the EC1-2 family, which promotes apoptosis by binding and antagonizing Bel-2 and Eel-K.
  • Akt can phosphorylate the Serl36 residue of Bad, either directly or via Raf-1 and P65PAK, to chelate Bad with the 14-3 protein in the cytoplasm, thereby terminating Bad on the mitochondrial membrane to Bel-2 or Bel-
  • the antagonism of XI restores the anti-apoptotic function of released Bel-2 or Bcl-XI.
  • Akt also directly inhibits the activity of caspase-9 (caspase-9). Pro- caspase-9 (pro- caspase-9) is inactivated by Akt phosphorylation, interrupting downstream signaling.
  • W0200911824 discloses a compound having a PI3K inhibitor and its antitumor activity.
  • ⁇ ⁇ US4853386 discloses a method for the treatment of allergic diseases - disubstituted purine derivatives; JP2003- 55377A, JP 2003-119197A discloses 6-cyclopropylamino having antiviral activity - 9H purine compounds.
  • Document 1 J. Org. Chem., Vol. 69, pp. 3212-3215 discloses a glycosylated quinone derivative having an anti-inflammatory effect.
  • Document 2 J. Med. Chem. 1984, Vol. 27, pp. 175-181) discloses a N 2 -butylphenyl-2'-decament with eukaryotic DNA a polymerase activity Oxygen oxime derivatives.
  • Document 3 (Tetraheron Letters, 1998, Vol. 39, pp. 1827-1830) discloses 2,6,9-trisubstituted anthracene derivatives.
  • CN1880315A discloses an N 2 -quinoline or isoquinoline substituted anthracene derivative having antitumor effect and a preparation method thereof
  • XC302, CN101289449A discloses a 2, 6-di nitrogen-containing substituted anthracene derivative having antitumor effect. And its preparation method. Summary of the invention
  • R1 is selected from unsubstituted C6 straight or branched chain alkyl group; or a methoxy group substituted by a C 3 ⁇ C 6 cycloalkyl group, a hydroxyl group or an amino group d ⁇ C 6 linear or branched alkyl group; unsubstituted a C 3 -C 6 cycloalkyl group; or a C 3 -C 6 cyclodecyl group substituted by a methyl carboxylate group or a carboxylic acid group; or a phenyl group substituted by a methoxy group; an unsubstituted morpholinyl group, unsubstituted Piperazinyl, unsubstituted piperidinyl, unsubstituted pyrrolidinyl; any of the piperidinyl groups substituted by a hydroxy or amide group;
  • R2 is a hydrogen atom
  • R3 is selected from a hydrogen atom, a tetrahydropyran, a trifluoroethyl or a piperidinyl group;
  • R4 is selected from hydrogen; unsubstituted ⁇ C 6 straight-chain alkyl group; unsubstituted C 3 ⁇ C 6 cycloalkyl group embankment; an unsubstituted phenyl group; a carboxylate group, ⁇ C 6 straight-chain alkyl group, bis - C 6 linear decyloxy, ⁇ C 6 linear alkylthio or halogen substituted phenyl; benzo[1,3]dioxolyl; unsubstituted morpholinyl; unsubstituted piperazine Or a piperazinyl group substituted with a methyl group;
  • A is nitrogen or oxygen; but when A is nitrogen, R4 is hydrogen.
  • R4 is selected from the group consisting of methyl, ethyl, cyclopentylmethyl, cyclopropyl, phenyl, methyl paraben, methyl isophthalate, o-methoxyphenyl , m-methoxyphenyl, p-methoxyphenyl, m-ethoxyphenyl, dimethoxyphenyl, o-methylthiophenyl, m-methylthiophenyl, m-fluorobenzene Any of p-fluorophenyl, benzo[1,3]dioxolyl, morpholinyl, piperazinyl or methylpiperazinyl.
  • the pharmaceutically acceptable salt is selected from the group consisting of an acid addition salt obtained from an organic acid or an inorganic acid, or an alkali addition salt obtained from an organic base or an inorganic base, and preferably the acid is selected from hydrochloric acid. Any of sulfuric acid, hydrobromic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, maleic acid, fumaric acid, lactic acid, and citric acid.
  • the compound of the structure represented by Formula I is selected from the group consisting of:
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a 2,6-dinitro-substituted anthracene derivative of the formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a hydrate thereof, and a pharmaceutically acceptable Acceptable carrier composition.
  • the pharmaceutical composition is selected from the group consisting of a tablet, a capsule, a pill, an oral liquid preparation, a granule, a powder, an injection, an implant, or an external preparation.
  • the pharmaceutical composition is selected from the group consisting of an injection, an infusion, a lyophilized powder, an oral liquid preparation, a tablet, a capsule, a granule, a pill, a powder, a syrup, a mixture, a spray, and a lotion. Any one of tea, gel, gel, ointment, lotion, spread, fumigant, suppository, plaster, gel, ointment.
  • compositions of the present invention can be prepared by formulation techniques well known in the art.
  • the pharmaceutical composition of the present invention further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, and the amount and type of the pharmaceutically acceptable carrier are determined according to factors such as the physical and chemical properties and content of the active ingredient in the traditional Chinese medicine composition, the type of the preparation, and the like. .
  • the pharmaceutically acceptable carriers of the present invention are conventional excipients or adjuvants well known in the art for preparing the above formulations.
  • Commonly used excipients or excipients include, but are not limited to, fillers (diluents), lubricants (glidants or anti-adhesives), dispersants, wetting agents, binders, regulators, solubilizers, antioxidants, Bacteriostatic agents, emulsifiers, and the like.
  • the binder such as syrup, gum arabic, gelatin, sorbitol, tragacanth, cellulose or a derivative thereof, gelatin syrup, starch syrup or polyvinylpyrrolidone
  • the cellulose derivative is selected from the group consisting of microcrystalline cellulose, carboxy Any of methylcellulose sodium, ethylcellulose or hydroxypropylmethylcellulose
  • the starch derivative is selected from the group consisting of sodium carboxymethyl starch, sodium starch glycolate, pregelatinized starch, modified starch, hydroxypropyl Any one or a combination of starch or corn starch; a filler such as lactose, powdered sugar, dextrin, starch or a derivative thereof, cellulose or a derivative thereof, inorganic calcium salt, sorbitol or glycine, etc., preferably inorganic calcium
  • the salt is selected from the group consisting of calcium sulfate, calcium phosphate, calcium hydrogen phosphate, and precipitated calcium carbonate.
  • the cellulose derivative is selected from the group consisting of microcrystalline cellulose.
  • the starch derivative is selected from the group consisting of sodium carboxymethyl starch, sodium starch glycolate, pregelatinized starch, modified starch, hydroxypropyl Any one or a combination of starch, corn starch; lubricant, such as micronized silica gel, magnesium stearate, talc, aluminum hydroxide, boric acid, hydrogenated vegetable oil, polyethylene glycol, etc.; disintegrating agent, such as starch or a derivative thereof, polyvinylpyrrolidone or microcrystalline cellulose, preferably a starch derivative selected from the group consisting of sodium carboxymethyl starch, sodium starch glycolate, pregelatinized starch, modified starch, hydroxypropyl starch, corn starch or a combination thereof; a humectant such as sodium dodecyl sulfate, water or
  • Another object of the present invention is to provide a 2,6-dinitrogen-substituted anthracene derivative of the structure of the formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a hydrate thereof or a pharmaceutical composition thereof for the preparation of a medicament for the treatment or prevention of neoplastic diseases Application in medicine.
  • the tumor disease is selected from the group consisting of lung cancer, liver cancer, blood cancer, bone cancer, pancreatic cancer, skin cancer, melanoma, uterine cancer, ovarian cancer, rectal cancer, gastric cancer, colon cancer, breast cancer, Fallopian tube cancer, endometrial cancer, cervical cancer, vaginal cancer, vulvar cancer, esophageal cancer, small intestine cancer, endocrine system cancer, soft tissue sarcoma, urethral cancer, prostate cancer, lymphoma, bladder cancer, kidney cancer, ureteral cancer, Any one or combination of a spinal tumor, a brain stem glioma, a pituitary adenoma.
  • Another object of the present invention is to provide a process for producing a 2,6-dinitro-substituted anthracene derivative of the structure of the formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a hydrate thereof, comprising the steps of:
  • Compound a is catalyzed by a catalyst of p-toluenesulfonic acid or p-toluenesulfonic acid pyridinium salt, first reacted with R3, and then present in a deacidifying agent of triethylamine, sodium carbonate, potassium carbonate or sodium hydrogencarbonate and 20 Condensation with HA-R1 at ⁇ 100 ° C to prepare compound b;
  • tri-tolylphosphine P (o-tolyl) 3
  • tri-tert-butylphosphine P (Bu-t) 3
  • 2,2'-bisdiphenylphosphine-ruthenium ⁇ -binaphthyl ( ⁇ ), 1, ⁇ -bisdiphenylphosphinoferrocene (DPPF), bis(2-diphenylphosphinophenyl)ether (DPEphos), 9,9-dimethyl-4
  • the catalyst is selected from the group consisting of PdCl 2 , Pd(OAc) 2 , Pd 2 (dba) 3 > Ni(OAc) 2 or Ni/C palladium or nickel transition metal catalyst;
  • the base is selected from any one or a combination of sodium t-butoxide, potassium t-butoxide, potassium carbonate, cesium carbonate, and tripotassium phosphate;
  • the acid is selected from the group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, maleic acid, fumaric acid, lactic acid, and citric acid. Or a combination thereof;
  • C ⁇ R1 is an unsubstituted linear or branched chain alkyl group; or a methoxy group substituted by a C 3 ⁇ C 6 cycloalkyl group embankment, hydroxy or amino ⁇ ⁇ 06 linear or branched chain alkyl group; a substituted or unsubstituted a C 3 -C 6 cycloalkyl group; or a C 3 -C 6 cycloalkyl group substituted by a methyl carboxylate group or a carboxylic acid group; or a phenyl group substituted by a methoxy group; an unsubstituted morpholinyl group; an unsubstituted piperazine Pyrazinyl; unsubstituted piperidinyl; piperidinyl substituted by hydroxy or amide; unsubstituted pyrrolidinyl;
  • R2 is a hydrogen atom
  • R3 is a hydrogen atom, 2,3-dihydropyran, trifluoroethyl or piperidinyl;
  • R4 is hydrogen; unsubstituted d ⁇ C 6 linear fluorenyl; unsubstituted C 3 ⁇ C 6 cycloalkyl; unsubstituted phenyl; methyl carboxylate group, ⁇ C 6 linear decyloxy group, double d ⁇ a C 6 linear alkoxy group, a d-C 6 linear thiol group or a halogen atom-substituted phenyl group; a benzo[1,3]dioxolyl group; an unsubstituted morpholinyl group; an unsubstituted piperazine a pyrazinyl group; or a piperazinyl group substituted with a methyl group;
  • A is nitrogen or oxygen; but when A is nitrogen, R4 is hydrogen.
  • the molar ratio of the reaction of the compound a and the R3 is 1:1 to 5, and the preferred combination is The molar ratio of the substance a to the HA-R1 is 1:1 to 5, and more preferably the condensation reaction temperature is 40 to 60'C.
  • the molar ratio of the compound b to the compound c is 1:0.5-2.
  • the coupling reaction temperature is 55 to 120 ° C, preferably by microwave heating.
  • the aprotic solvent is selected from the group consisting of tetrahydrofuran, diisopropyl ether, ethylene glycol dimethyl ether, dioxane, pyridine, 1-methyl-2-pyrrolidone (NMP), 1, 3 - any one or a combination of dimethyl propylene urea (DMPV), toluene or xylene.
  • the molar ratio of the compound b to the acid is 1:1 to 10.
  • the acid is selected from the group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, maleic acid, fumaric acid, lactic acid, and citric acid.
  • hydrochloric acid sulfuric acid, hydrobromic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, maleic acid, fumaric acid, lactic acid, and citric acid.
  • MED1007-135 4-(3-Fluorophenyl)-indole-(6-isopropoxy-9-indole-2-yl)quinoline-6-amine-methanesulfonate
  • MED1007- 139 2-(4-(Benzo[1,3]dioxol-5-yl)quinolin-6-ylamino)-9 ⁇ - ⁇ -6-ol-methanesulfonate
  • MED1007-142 N-(6-Isopropoxy-9H-indol-2-yl)-4-(piperazin-1-yl)quinolin-6-amine-methanesulfonate
  • MED1007-152 1-(2-(4-Phenylquinolin-6-ylamino)-9 ⁇ - ⁇ -6-ylamino)cyclopropanecarboxylic acid
  • MED 1007-87 ⁇ 6-Cyclopropyl-indole 2-(4-(2-(methylthio)phenyl)quinolin-6-yl)- 9 ⁇ - ⁇ -2,6-diamine
  • MED 1007-88 N6-cyclopropyl-N2-(4-(3-(methylthio)phenyl)quinolin-6-yl)-9H-indole-2,6-diamine
  • the invention relates to the percentage between liquid and liquid, the percentage being volume/ Percentage of volume; when the present invention relates to the percentage between liquid and solid, the percentage is volume/weight percent; the invention relates to the percentage between solid and liquid, the percentage is weight/volume percentage; the balance is weight/weight percentage.
  • the N 2 , anthracene -disubstituted anthracene derivative of the present invention has PI3K inhibitory activity, and has the advantages of low toxicity, wide anticancer spectrum, high anticancer activity, and good stability. detailed description
  • Methanesulfonic acid (8.2 g, 85.9 mmol) was added to a solution of the compound MED1007-51 (17 g, 42.9 mmol) in ethanol (400 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours, filtered, and the filter cake was dried to obtain MED1007 -108 (22 g, yield 88%).
  • MED1007-31 The preparation method of the compound of the embodiment comprises the following steps:
  • Methanesulfonic acid 52 mg 0.51 mmol was added to a solution of compound MED 1007-31 (50 mg, 0.127 mmol) with ethanol (4 mL) and water (drop). The resulting mixture was stirred overnight at room temperature. The precipitate was filtered and washed with ethyl acetate and ethyl acetate to give a yellow solid M.s.
  • MED1007-34 MED1007-104 The preparation method of the compound of this example comprises the following steps:
  • CCK-8 12 candidate compound detection kit of the present invention detects half maximal inhibitory concentration IC 50 for proliferation of three tumor cell lines (U87MG, PC-3, BT474 ) a.
  • PC-3 human prostate cancer cell line (Chinese Academy of Sciences cell bank)
  • BT474 human breast cancer cell line (Chinese Academy of Sciences cell bank) Reagents and consumables:
  • Fetal bovine serum (Cat#10099-141, GIBCO)
  • the study compound was dissolved in DMSO to a final concentration of 10 mM.
  • test compound was diluted to 500 ⁇ M with medium and diluted 8 times in a gradient. The cells were added at 25 ⁇ l/well. The final concentration of the compound was from 100 ⁇ to 0 ⁇ , 4 times dilution, for a total of 10 concentration points.
  • the cells were incubated at 37 ° C, 100% relative humidity, 5 % C0 2 incubator for 72 hours.
  • Tumor cell growth inhibition rate % [(A c -A s ) / (A C -A b )] X 100%
  • a s sample OA (cell + CCK-8 + test compound);
  • a c negative control
  • MED1007 series compounds include -51, -63, -91, -101, -104, -105, -108, -109S, -115, XC-302, Wortmannin (wortmannin) to U87MG, PC-3 & BT474 Cytotoxicity, IC50s (pM) results are shown in Table 1.
  • Example 62 Inhibitory Activity of the Compound of the Invention on PDGFR P Enzyme
  • the inhibition efficiency of the assay was also determined by using Staurosporine as a positive control drug to study the inhibitory activity of the MED1007 series of test compounds on the PDGFRp enzyme at a concentration of 10 ⁇ M and ⁇ . Among them, three replicate wells were set in each study.
  • the HTRF kinEASE TK kit was used to detect the half-inhibitory concentration of staurosporine on PDGFR ⁇ and the inhibition rate of 10 test compounds in 10 ⁇ and ⁇ on PDGFR ⁇ enzyme activity.
  • the experimental results are shown in Table 3: Test compounds at 10 ⁇ and ⁇ The inhibition rate of PDGFR ⁇ . Materials and instruments
  • OptiPlate-384, White Opaque 384-well MicroPlate (Cat.6007290, PerkinElmer)
  • HTRF kinEASE TK (Cat.62TK0PEC, Cisbio)
  • PDGFR ⁇ enzyme (Cat.P3082, Invitrogen)
  • lmL l xKinase Buffer contains 200 ⁇ L 5> ⁇ Enzyme buffer, 5 ⁇ 1M MgCl 2 , ⁇ 1M DTT, l L 1M MnCl 2 , 20 ⁇ 2500nM SEB, 773 ⁇ L ddH 2 0.
  • TK-Substrate and ATP were diluted 1 x PDGFR ⁇ Kinase Buffer to 2.5 times the reaction concentration.
  • the 5 x PDGFR beta enzyme working solution was prepared using 1 xPDGFR ⁇ kinase buffer.
  • TK-Ab-Cryptate was diluted 100 times as a working solution with Detection Buffer.
  • Example 63 Inhibitory activity of the compounds of the present invention against Akt (Ser473) phosphorylation level of PC-3 cells
  • the compounds of the present invention were assayed for PC-3-cell Akt (Ser473) using a Cisbio HTRF phospho Akt (Ser473) cell-based assay kit. The inhibitory activity of phosphorylation levels.
  • PC-3 prostate cancer cell line (Chinese Academy of Sciences cell bank), cultured in medium (F12K + 10% FBS).
  • HTRF Phospho Akt (Ser473) cell-based assay kit (Cat.64AKSPEG, 500test CISBIO)
  • Fetal bovine serum (Cat#10099-141, GIBCO)
  • hEGF was formulated into 10 ug/ml stock solution with 10 mM acetic acid, diluted to 200 ng/ml with serum-free medium, and 50 ul was added to each well to be stimulated.
  • 4xLysis Buffer is diluted 4 times with ddH 2 0 and then formulated into lxLysis Buffer.
  • lOOxBlocking Reagent is diluted 100 times with 1 xLysis Buffer.
  • the working concentration of the compound diluted with DMSO was 100 times the detected concentration.
  • the compound was linearly diluted with DMSO.
  • Wortmannin 7.406 It can be seen from Table 4 that the compounds of the present invention have an inhibitory effect on the phosphorylation level of Akt (Ser473) in PC-3 cells, especially MED 1007-108 and MED 1007-51.
  • Example 64 Inhibitory Activity of the Compounds of the Invention on PI 3k a, PI 3k ⁇ and PI 3k ⁇
  • the inhibitory activity of the compounds of the present invention against PI 3k a, PI 3k 6 and PI 3k ⁇ was studied. Two to three concentrations were selected for primary screening, and the inhibition rate of the enzyme activity of the corresponding concentration of the compound was calculated, and the IC50 test was performed by the preliminary screening of the compound with better activity.
  • test compound was dissolved in DMSO to 1 mM as a stock solution, and 2 ⁇ L of each was added to 48 ⁇ L of ddH 2 0 to obtain 40 ⁇ L of a compound solution containing 4% DMSO. After mixing, each was pipetted with 3 ⁇ L of 4% DMSO (in ddH 2 0) A 4 ⁇ compound solution was obtained. 5 ⁇ of each diluted solution was added to a 384-well plate such that the final concentration of the compound in the final 20 ⁇ L of the kinase reaction system was 10 ⁇ and 1 ⁇ , respectively, and contained 1% DMSO.
  • the method of compound dilution in the IC50 test is similar to the initial screening.
  • the kinase was diluted with 2 X PIP2 working solution, and the concentration of the kinase working solution was twice the screening concentration.
  • Stop A and Stop B were mixed in a ratio of 3:1 and allowed to stand at room temperature for 2 hours.
  • Wortmamnnin 107.83 4.35 95.38 9.07 xc-302 67.42 5.07 22.84 10.45 Table 8 Inhibition rate of PI3K delta by test compound
  • the 1007 series of compounds of the present invention are potent ⁇ 3 ⁇ inhibitors, and the selectivity of different compounds for the ⁇ 3 ⁇ subtype is not the same.

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Abstract

本发明提供了一种式(I)结构的2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药用盐或其水合物及其制备方法和其应用。本发明的化合物具有毒性低、抗癌谱广、抗癌活性高、稳定性好等特点。

Description

说 明 书
2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物及其制备方法和其药物组合物与应用 技术领域
本发明涉及化合物制备技术领域，具体涉及 2,6-二含氮取代的嘌呤衍生物及 其制备方法和其药物组合物与应用。 背景技术
恶性肿瘤（癌症）是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。 全球每年死于癌症的人数不少于 500万。虽有外科手术、放疗、化疗等手段治疗 癌症， 但治愈率普遍都不高。其中， 化学药物治疗为主要的治疗手段， 但存在选 择性差、 副作用大等缺陷。 因而， 寻找毒性低、 副作用小、 抗癌活性高、 稳定性 好的抗肿瘤药物成为研究热点。
PI3K是一个复杂的大家族， 也是靶向性抗肿瘤药物的靶点之一， 包括 I型、 II型、 ΠΙ型三类。 I型 PI3K又分为 IA和 IB两个亚型， 分别从酪氨酸激酶连接 受体和 G蛋白连接受体传递信号， 其作用是催化磷脂酰肌醇 (P1)在 D3位的磷酸 化， 把底物 PIP2转化为 PIP3。 IA型 P13K是由催化亚单位 P110和调节亚单位 P85所组成的二聚体蛋白，具有类脂激酶和蛋白激酶的双重活性。 P13K的活性在 正常细胞中受许多机制严格控制。一般认为，在静息细胞中，无活性的 P85— P110 复合物普遍存在于胞质中， 等待适当的信号激活。 P13K通过两种方式激活： 一 是与具有磷酸化酪氨酸残基的生长因子受体或连接蛋白相互作用， 引起
P85— P110二聚体构象改变而被激活。 对 RTK而言， 这种信号来自于配体介导的 激酶的活化， 结果使位于细胞膜内表面的酪氨酸残基磷酸化。磷酸化的酪氨酸残 基立即成为细胞内信号蛋白的结合位点， 通过与 P85 的 SH2 结构域结合而把 P85— P110复合物聚集到细胞膜上并使之活化； 二是通过 Ras和 P110直接结合， 导致 P13K的活化。
PI3K被激活后， 在细胞膜上生成第二信使 PIPa， PlPa与细胞内含有 PH结 构域的信号蛋白 Akt和磷酸肌醇依赖性蛋白激酶（phosphoinositide dependent kinase— 1, PDK1)结合，促使 PDK1磷酸化 Akt蛋白的 Ser473和 Thr308导致 Akt 的活化。 Akt也称为蛋白激酶 B (PKB)， 是一种相对分子质量为 60 000的丝氨酸 /苏氨酸激酶，是 V— akt的同源物，与蛋白激酶 A (PKA)和蛋白激酶 C (PKC)具有 相似性。 Akt能直接磷酸化多种转录因子， 通过调控这些转录因子， 可以抑制凋 亡基因的表达和增强抗凋亡基因的表达， 从而促进细胞的存活。 如转录因子 FKHRLI能促进凋亡基因 Fas— 1和 Bim等转录， Akt被激活后从细胞膜转移到细 胞核并磷酸化 FKHRL1。磷酸化的 FKHRL1被转运出细胞核后与胞质蛋白 14一 3— 3 螯合在一起而失去了对靶基因的转录功能。 此外， Akt也能正调节两种转录因子 NF— κ Β和 Bel— 2。 NF— kB与许多细胞因子和生长因子引起的细胞分化、 凋亡 和生存有关。 在正常状态下， NF— κ Β在胞质中与它的抑制因子 I一 κ Β结合在 一起， 失去转录活性。 Akt能通过磷酸化激活 ΙΚΚ (1一 κ Β的激酶）， 导致 I一 κ Β 磷酸化、 降解， 并与 NF— 分离， 被释放后的 NF— kB转位到细胞核内并诱导 目的基因的表达。 AktlKK。 对介导的 I一 κ Β降解和 NF— κ Β激活是必需的， 是 NF-kB依赖的基因转录过程中的关键调节物， 在促进肿瘤细胞存活方面起重要 作用。
除了影响凋亡和抗凋亡基因的表达外， Akt也能通过直接磷酸化促凋亡蛋白 Bad来促进细胞的生存。 Bad是 EC1— 2家族中的致凋亡蛋白， 通过结合和拮抗 Bel— 2和 Eel— K等来促进细胞凋亡。 Akt能直接或者通过 Raf— 1和 P65PAK来 磷酸化 Bad的 Serl36位残基，使 Bad与胞质中的 14一 3— 3蛋白螯合，从而终止 Bad在线粒体膜上对 Bel— 2或 Bel— XI的拮抗作用， 使得被释放后的 Bel— 2或 Bcl-XI恢复抗细胞凋亡的功能。 另外， Akt也能直接抑制半胱氨酸天冬氨酸酶 一 9 (caspase— 9)的活性。 前半胱氨酸天冬氨酸酶一 9 (pro— caspase— 9)被 Akt 磷酸化以后丧失活性， 中断了下游的信号。
W00103456、 W02003072557、 TO2005113554、 W02006122806, W02006046040、 W02007044729、 W02008144463. W0200911824公开了具有 PI3K抑制剂及其抗肿 瘤活性的化合物。
US4853386 公开了一种用于治疗过敏性疾病的 Νβ -二取代的嘌呤衍生物； JP2003- 55377A、 JP 2003-119197A公开了具有抗病毒活性的 6-环丙基氨基- 9H 嘌呤类化合物。 文献 1 ( J. Org. Chem.， 200 年 69卷， 3212-3215页） 公开 了具有抗炎效果的糖基化嘌吟类衍生物。 文献 2 ( J. Med. Chem. 1984年 27卷， 175-181页） 公开了一种具有真核细胞 DNA a聚合酶活性的 N2-丁基苯基- 2' -去 氧嘌呤衍生物。文献 3 ( Tetraheron Letters, 1998年，第 39卷，第 1827-1830 页） 公开 2， 6， 9-三取代的嘌呤衍生物。 CN1880315A公开了具有抗肿瘤作用的 N2-喹啉或异喹啉取代的嘌呤衍生物及其制备方法， 如 XC302, CN101289449A公开 了 2， 6-二具有抗肿瘤作用的含氮取代的嘌呤衍生物及其制备方法。 发明内容
本发明的目的在于提供一种结构如式 I所示的 2,6-二含氮取代的嘌呤衍生物 或其药用盐或其水合物，
Figure imgf000005_0001
(I)
其中，
R1选自未取代 C6直链或支链垸基； 或由甲氧基、 C3〜C6环烷基、羟基或 氨基取代的 d~C6直链或支链烷基； 或未取代的 C3~C6环烷基； 或由羧酸甲酯基 或羧酸基取代的 C3~C6环垸基； 或由甲氧基取代的苯基； 未取代的吗啉基、未取 代的哌嗪基、未取代的哌啶基、未取代的吡咯垸基； 由羟基或酰胺基取代的哌啶 基的任一种；
R2为氢原子；
R3选自氢原子、 四氢吡喃、 三氟乙基或哌啶基；
R4选自氢； 未取代的 〜C6直链垸基； 未取代 C3~C6环垸基； 未取代苯基； 由羧酸甲酯基、 ~C6直链垸氧基、 双 〜C6直链垸氧基、 ~C6直链烷硫基或 卤原子取代的苯基；苯并 [1,3]间二氧杂环戊烯基；未取代吗啉基；未取代哌嗪基； 或由甲基取代的哌嗪基；
A为氮或氧； 但 A为氮时， R4≠氢。
本发明的优选技术方案中， R4选自甲基、 乙基、 环戊基甲基、 环丙基、 苯 基、 对苯甲酸甲酯基、 间苯甲酸甲酯基、邻甲氧基苯基、 间甲氧基苯基、 对甲氧 基苯基、 间乙氧基苯基、 二甲氧基苯基、 邻甲硫基苯基、 间甲硫基苯基、 间氟苯 基、 对氟苯基、 苯并 [1，3] 间二氧杂环戊烯基、 吗啉基、 哌嗪基、 甲基哌嗪基的 任一种。
本发明的优选技术方案中，所述的药用盐选自由有机酸或无机酸得到的酸加 合盐， 或为由有机碱或无机碱得到的碱加合盐， 优选所述酸选自盐酸、硫酸、 氢 溴酸、 甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、马来酸、 富马酸、乳酸、柠檬酸的任一种。
本发明的优选技术方案中， 式 I所示结构的化合物选自：
1 ) N6-环丙基 -N2- (4-吗啉喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
2) N6-环丙基 -N2- (4- (哌嗪 -1-基） 喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
3 ) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺；
4) N- (6-环戊氧基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺；
5 ) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基 -1-基） 喹啉 -6-胺；
6) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基小基）喹啉 -6-胺 -甲磺酸盐；
7) N6-环丙基 -N2-(4-甲基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺二水合二甲磺酸盐；
8 ) N6-环丙基 -N2-(4-乙基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6·二胺二水合二甲磺酸盐；
9) N6"环丙基 Ν2<Φ环丙 ¾¾fr6"¾ "9m吟 -2,6·二胺二水合二甲磺難；
10 ) 2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-醇-甲磺酸盐；
11 ) 4· (苯 13]间 ! «¾¾¾¾-5-¾>·Ν·(6·异丙 嘌吟 -2-基) Piffr6~胺 -甲磺
12) 2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-醇 -甲磺酸盐；
13 ) 4-(3-氟苯基) -N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺 -甲磺酸盐；
14) 4-(4-氟苯基) -N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺 -甲磺酸盐；
15) 4~(3, 二甲 ¾<¾^¾)·>Κ6·异丙 9Η』票呤 -2-¾)Ρϋ!^6·胺 -甲磺
16) 2-(4- (苯并 [1,3] 间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-醇-甲磺酸 ± .
17) N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基)喹啉 -6-胺 -甲磺酸盐；
18) Ν·(6-异丙 fl¾-9H-嘌呤 -2-基 )4-(4·甲基哌 1-基)喹! #~6·胺 -甲磺
19) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基)哌啶 -4-醇；
0) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌吟 -6-基)哌啶 -3-酰胺；
1 ) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基氨基)环丙烷羧酸甲酯；
2) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基氨基）环丙垸羧酸；
3 ) N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6二胺； ) N-(6-苯氧基 -9H-嘌呤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺；
) N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺；
) 4-(6-(6- (环丙基氨基 )-9H-嘌呤 -2-基氨基)喹啉 -4-基)对苯甲酸甲酯；
) 4-(6-(6- (环丙基氨基 )-9H-嘌呤 -2-基氨基)喹啉 4-基)间苯甲酸甲酯；
) N6-环丙基 -N2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(3-氟苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (2,2,2-三氟乙基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺；) N6-环丙基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (哌啶 4-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N6- (3-甲氧基丙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) N6-(2-甲氧基乙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) 2-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基氨基)乙醇；
) N6-(2-氨乙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌吟 -2，6-二胺；
) N6-环丁基 -N2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N6-环丁基 -N2-(4-(4-氟苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) 3-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6 -基氨基)丙基 -1-醇；
) N6-环丁基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(3-乙氧基苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(3， 4-二甲氧基苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
) N2-(4- (苯并 [U]间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基) -N6-环丙烷 -9H-嘌呤 -2,6-二胺；) N6-环丙基 -N2-(4-(2-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(2- (甲硫基）苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) N6-环丙基 -N2-(4-(3- (甲硫基）苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2,6-二胺；
) Ν6·珊辆 2 Φ¾¾ ^¾)·9Η』票吟 -2，6·二铵盐 合二-甲
) Ν-(6-环丁基 -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺；
) Ν-(6-环丁基 -9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺；
) Ν6- (环戊基甲基) -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺；
) Ν6-异丙基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺；
) 4-苯基 -Ν-(6- (吡咯烷 -1-基) -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺；
) Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺； 54) N-(6- (戊基 -3-基氧基 )-9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺；
55 ) N6-环戊基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
56) N-(6- (环已氧基 )-9H-嘌吟 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺；
57) N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐；
58 ) N-(6-吗啉 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺；
59) N-(6-吗啉 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐；
60) 2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-醇。
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，所述药物组合物由式 I所示结 构的 2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药用盐或其水合物与药学上可接受的载 体组成。
本发明的优选技术方案中，所述药物组合物的剂型选自片剂、胶囊剂、丸剂、 口服液体制剂、 颗粒剂、 散剂、 注射剂、 植入剂或外用制剂的任一种。
本发明的优选技术方案中， 所述药物组合物选自注射剂、 输液、 冻干粉针、 口服液体制剂、 片剂、 胶囊、 颗粒剂、 丸剂、 散剂、 糖浆剂、 合剂、 喷雾剂、 露 剂、 茶剂、 凝胶剂、 膏剂、 搽剂、 洗剂、 涂抹剂、 熏蒸剂、 栓剂、 贴膏剂、 凝膏 剂、 软膏剂的任一种。
可采用本领域熟知的制剂技术手段制备得到本发明的药物组合物。
必要时，本发明的药物组合物中还包含药学上可接受的载体，所述药学上可 接受的载体的用量、种类根据中药组合物中有效成分的理化性质和含量、制剂类 型等因素而定。
本发明所述的药学上可接受的载体为本领域熟知的用于制备上述制剂的常 用赋形剂或辅料。 常用的赋形剂或辅料包括但不仅限于填充剂 （稀释剂）、 润滑 剂（助流剂或抗粘着剂）、 分散剂、 湿润剂、 粘合剂、 调节剂、 增溶剂、 抗氧剂、 抑菌剂、 乳化剂等。 其中， 粘合剂， 例如糖浆、 阿拉伯胶、 明胶、 山梨醇、 黄芪 胶、 纤维素或其衍生物、 明胶浆、 淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮， 优选纤维素衍生物 选自微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、 乙基纤维素或羟丙甲基纤维素的任一种， 优 选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、 预胶化淀粉、 改良淀粉、羟丙 基淀粉、 玉米淀粉的任一种或其组合； 填充剂， 例如乳糖、 糖粉、 糊精、 淀粉或 其衍生物、纤维素或其衍生物、无机钙盐、 山梨醇或甘氨酸等， 优选无机钙盐选 自硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙，优选纤维素衍生物选自微晶纤维素、 羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素的任一种，优选淀粉衍生物选自 羧甲基淀粉钠、 淀粉乙醇酸钠、 预胶化淀粉、 改良淀粉、 羟丙基淀粉、 玉米淀粉 的任一种或其组合； 润滑剂， 例如微粉硅胶、 硬脂酸镁、 滑石粉、 氢氧化铝、硼 酸、氢化植物油、 聚乙二醇等； 崩解剂， 例如淀粉或其衍生物、 聚乙烯吡咯烷酮 或微晶纤维素，优选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、 改良淀粉、羟丙基淀粉、 玉米淀粉的任一种或其组合； 湿润剂， 例如十二垸基硫 酸钠、 水或醇等； 抗氧剂， 例如亚硫酸钠、 亚硫酸氢钠、 焦亚硫酸钠、 二丁基苯 酸等； 抑菌剂， 例如 0.5%苯酚、 0.3%甲酚、 0.5%三氯叔丁醇等； 酸碱调节剂， 例如盐酸、 枸橼酸、 氢氧化钾 （钠）、 枸橼酸钠、 磷酸二氢钠、 磷酸氢二钠等； 乳化剂， 例如聚山梨酯 -80、 没酸山梨坦、 普流罗尼克 F-68， 卵磷酯、 豆磷脂等； 增溶剂， 例如吐温 -80、 胆汁、 甘油等。
本发明的另一目的在于提供的式 I所示结构的 2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物 或其药用盐或其水合物或其药物组合物用于制备治疗或预防肿瘤疾病的药物中 的应用。
本发明的优选技术方案中， 所述肿瘤疾病选自肺癌、 肝癌、 血癌、 骨癌、 胰 腺癌、 皮肤癌、 黑素瘤、 子宫癌、 卵巢癌、 直肠癌、 胃癌、 结肠癌、 乳腺癌、 输 卵管癌、 子宫内膜癌、 子宫颈癌、 阴道癌、 外阴癌、 食道癌、 小肠癌、 内分泌系 统癌、软组织肉瘤、尿道癌、前列腺癌、淋巴细胞瘤、膀胱癌、 肾癌、输尿管癌、 脊椎肿瘤、 脑干神经胶质瘤、 垂体腺瘤的任一种或其组合。
本发明的另一目的提供式 I所示结构的 2，6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药 用盐或其水合物的制备方法， 包括以下步骤：
1 )化合物 a在对甲苯磺酸、 或对甲苯磺酸吡啶盐的催化剂的催化下， 先与 R3反应， 再在三乙胺、 碳酸钠、 碳酸钾或碳酸氢钠的去酸剂存在和 20~100°C条 件下， 与 HA-R1缩合制得化合物 b;
Figure imgf000009_0001
将化合物 b和 c在催化剂、 碱、 非质子溶剂作用下， 在 15〜150°C条件 下， d，
Figure imgf000010_0001
d
其中， 催化偶联反应中， 三邻甲苯基膦（P (o-tolyl) 3)、 三叔丁基膦（P (Bu-t) 3)、 2，2'-双二苯基膦 -Ι,Γ-联萘（ΒΙΝΑΡ)、 1，Γ-双二苯基膦二茂铁（DPPF)、双 (2- 二苯基膦苯基)醚（DPEphos)、 9,9-二甲基 -4,5-双（二苯基膦）氧杂葱（Xantphos)、 配体式 1-式 11化合物的任一种，
Figure imgf000010_0002
Figure imgf000011_0001
10 11
所述催化剂选自 PdCl2、 Pd(OAc)2、 Pd2(dba)3> Ni(OAc)2或或 Ni/C的钯或镍 过渡金属催化剂；
所述碱选自叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钾、碳酸铯、 磷酸三钾的任一种或其 组合；
与酸成盐反应中， 所述的酸选自盐酸、 硫酸、 氢溴酸、 甲磺酸、 苯磺酸、 对 甲苯磺酸、 马来酸、 富马酸、 乳酸、 柠檬酸的任一种或其组合；
3 ) 合物 d用碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钠或氢氧化钾中和， 制得化合物（I);
Figure imgf000011_0002
其中，
R1为未取代 ~C6直链或支链垸基； 或由甲氧基、 C3~C6环垸基、羟基或氨 基取代的^~06直链或支链垸基； 或未取代 C3~C6环烷基； 或由羧酸甲酯基或羧 酸基取代的 C3~C6环烷基； 或由甲氧基取代的苯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪 基； 未取代哌啶基； 由羟基或酰胺基取代的哌啶基； 未取代吡咯烧基；
R2为氢原子；
R3为氢原子、 2，3-二氢吡喃、 三氟乙基或哌啶基；
R4为氢； 未取代 d~C6直链垸基； 未取代 C3~C6环烷基； 未取代苯基； 由 羧酸甲酯基、 ~C6直链垸氧基、 双 d~C6直链烷氧基、 d~C6直链垸硫基或卤 原子取代的苯基； 苯并 [1,3]间二氧杂环戊烯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪基； 或由甲基取代的哌嗪基；
A为氮或氧； 但 A为氮时， R4≠氢。
本发明的优选技术方案中， 化合物 a与 R3反应的摩尔比为 1:1~5， 优选化合 物 a与 HA-R1的摩尔比为 1:1~5， 更优选缩合反应温度为 40~60'C。
本发明的优选技术方案中， 化合物 b与化合物 c摩尔比为 1:0.5~2。
本发明的优选技术方案中， 偶联反应温度为 55~120°C， 优选用微波加热。 本发明的优选技术方案中， 所述非质子溶剂选自四氢呋喃、异丙醚、 乙二醇 二甲醚、二氧六环、吡啶、 1-甲基 -2-吡咯烷酮 (NMP)、 1,3-二甲基丙撑脲 (DMPV)、 甲苯或二甲苯的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中， 化合物 b与酸的摩尔比为 1:1~10。
本发明的优选技术方案中， 所述的酸选自盐酸、 硫酸、 氢溴酸、 甲磺酸、 苯 磺酸、 对甲苯磺酸、 马来酸、 富马酸、 乳酸、 柠檬酸的任一种或其组合。
为了清楚地表述本发明的保护范围，本发明所述的式 I所示结构化合物及其 编号如下所述。 编号 化合物名称
MED 1007-32 N6-环丙基 -N2- (4-吗啉喹啉 -6-基） -9H-嘌昤 -2,6-二胺
MED 1007-33 N6-环丙基 -N2- (4- (哌嗪 -1-基） 喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-34 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺
MED 1007-35 N- (6-环戊氧基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺
MED 1007-51 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基 -1-基） 喹啉 -6-胺
MED 1007- 108 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌吟 -2-基） (苯基小基）喹啉 -胺-甲磺酸盐
MED1007-113 Νό^环丙基 -Ν2 Φ甲 ¾(φ ·6·基) -9Η-嘌吟 -2,6-—胺二水合一甲磺酸盐
MED1007-114 Ν6·坏内基 -1^2<4-乙¾¾#"6"基)" 9Η-嘌呤 -2，6-—胺—水合—甲磺酸盐
MED1007-115 Ν6·坏内 频 ¾¾!^¾>9H』桌呤 -2,6·二胺 _ j合一甲
MED1007-132 2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌吟 -6-醇-甲磺酸盐
MED1007-133 4- (苯并 [U]间 潘 N<6 ^丙 »·9Η』票呤 -2-¾)¾#^胺-甲石»¾
MED 1007- 134 2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-醇-甲磺酸盐
MED1007-135 4-(3-氟苯基) -Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
MED 1007- 136 4-(4-氟苯基) -Ν-(6-异丙氧基 -9Η-噤呤 -2-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
MED 1007- 137 4 3,4·二甲 f¾^N<6 丙藝 9Η』 呤 -2-¾) ^^胺 -甲石 ¾
MED 1007- 139 2-(4- (苯并 [1，3] 间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-醇-甲磺酸盐 MED1007-142 N-(6-异丙氧基 -9H-嘌昤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
MED 1007- 143 Ν·<6^ «¾-9Η』票吟 -2-¾Η·(4·甲基 »1-¾)(¾！^胺-甲磺,
MED 1007- 148 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌吟 -6-基)哌啶 -4-醇
MED 1007- 149 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-基)哌啶 -3-酰胺
MED1007-15 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 9Η-嘌吟 -6-基氨基)环丙垸羧酸甲酯
MED1007-152 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-基氨基）环丙垸羧酸
MED1007-31 Ν6-环丙基 -Ν2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9Η-嘌呤 -2，6二胺
MED 1007-54 Ν-(6-苯氧基 -9Η-嘌吟 -2-基) -4- (哌嗪- 基） 喹啉 -6-胺
MED1007-58 Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌吟 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基） 喹啉 -6-胺
MED 1007-59 4_(6-(6- (环丙基氨基 9Η-嘌呤 -2-基氨基)喹啉 4-基)对苯甲酸甲酯
MED 1007-60 4_(6-(6- (环丙基氨基 )-9Η-嘌昤 -2-基氨基)喹啉 -4-基)间苯甲酸甲酯
MED 1007-61 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9Η-嘌吟 -2,6-二胺
MED 1007-63 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED1007-64 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(3-氟苯基） 喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED1007-65 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (2,2,2-三氟乙基） -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-66 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (哌啶 ·4-基） -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-67 Ν6- ( 3-甲氧基丙基) -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-68 Ν6-(2-甲氧基乙基) -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED 1007-69 2-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-基氨基)乙醇
MED 1007-70 Ν6-(2-氨乙基) -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED 1007-71 Ν6-环丁基 -Ν2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED 1007-72 Ν6-环丁基 -Ν2-(4-(4-氟苯基） 喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED1007-73 3-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6 -基氨基)丙基 -1-醇
MED1007-75 Ν6-环丁基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) - 9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED1007-83 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(3-乙氧基苯基）喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-84 Ν6-环丙基 -Ν2<4<3, 4-二甲氧基苯基） ¾Bfr6-基) ·9Η-嘌吟 -2，6-二胺
MED 1007-85 Ν2-(4- (苯并 [1，3]间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基) -Ν6-环丙垸 -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007-86 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(2-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) - 9Η-嘌呤 -2，6-二胺
MED 1007-87 Ν6-环丙基 -Ν2-(4-(2- (甲硫基） 苯基)喹啉 -6-基)- 9Η-嘌呤 -2，6-二胺 MED 1007-88 N6-环丙基 -N2-(4-(3- (甲硫基）苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌吟 -2,6-二胺
MED1007-91 6-^^N2 4-»¾!fr6-¾>-9HJ -2,6-_«_- X^-_-¥«¾
MED1007-97 N-(6-环丁基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺
MED丽 -98 N-(6-环丁基 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
MED 1007-99 N6- (环戊基甲基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌昤 -2，6-二胺
MED1007-101 N6-异丙基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺
MED 1007- 103 4-苯基 -N-(6- (吡咯垸 -1-基) -9H-嘌吟 -2-基)喹啉 -6-胺
MED 1007- 104 N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺
MED1007-105 N-(6- (戊基 -3-基氧基 )-9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
MED1007-106 N6-环戊基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺
MED 1007- 107 N-(6- (环已氧基) -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
MED1007-108 N-(6-异丙氧基 -9H-嘌吟 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐
MED 1007- 109 N-(6-吗啉 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
MED1007-109S N_(6-吗啉 -9H-嘌昤 -2-基 >4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐
ED1007-110 2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-醇 除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体 积 /体积百分比； 本发明涉及液体与固体之间的百分比时， 所述百分比为体积 /重 量百分比； 本发明涉及固体与液体之间的百分比时， 所述百分比为重量 /体积百 分比； 其余为重量 /重量百分比。
本发明的 N2, Νό-二取代的嘌吟衍生物具有 PI3K抑制活性， 还具有毒性低、 抗癌谱广、 抗癌活性高、 稳定性好等优点。 具体实施方式
以下将结合实施例具体说明本发明， 本发明的实施例仅用于说明本发明的技 术方案， 并非限定本发明。 实施例 1 Ν- (6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基） -4- (苯基 -1-基）喹啉 -6-胺的制备
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤-
Figure imgf000015_0001
1)化合物 B的制备：
在 -15'C~(rC条件下，向 SM-1 (260 g)的硫酸（320 ml)溶液中加入硫酸（320 ml)和硝酸（320 ml)， 室温下， 搅拌混合物 3小时； 将反应混合物加入冰水中， 过滤， 取滤饼， 制得化合物 B (320 g, 产率 95%);
2)化合物 C的制备：
向化合物 B (5g) 的三氯氧磷 （30 ml)溶液中加入 DMF (0.1 ml), 回流搅 拌 3小时后， 将反应混合物置于冰水中， 再用乙酸乙酯萃取， 萃取液经水和食盐 水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩， 通过 SGC纯化（纯化溶剂）， 得到化合物 C (3 g， 产率 55 %);
3)化合物 1的制备
向化合物 C (33 g， 156 mmol)、苯基硼酸（20 g, 156 mmol)和碳酸铯（152g, 468 mmol) 的二噁垸（400 ml)溶液中， 加入 Pd(pph3)4 ( 18g， 15.6 mrnol), 回流 搅拌 18小时； 将反应混合物用乙酸乙酯萃取， 萃取液经水和食盐水洗漆， 无水 硫酸钠干燥后， 浓缩， 通过 SGC纯化 （纯化溶剂）， 制得化合物 1 (22 g,产率 56 %)
4)化合物 INTA-1的制备：
向化合物 1 (20 g) 的四氢呋喃： 甲醇（300ml，） 的溶液中， 加入雷尼镍（5 g)，在氢气和室温条件下，搅拌 16小时，过滤反应混合物，滤液浓缩，通过 SGC 纯化 （纯化溶剂）， 制得化合物 INTA-1 ( 15g， 产率 88 %);
5)化合物 2的制备：
向化合物 SM-3 ( lOO g, 529 mmol)和对甲苯磺酸（5 g， 26 mmol) 的乙酸乙 酯（200ml) 的溶液中， 加入 THP ( 111 g, 1320 mmol), 将混合物回流搅拌半小 时， 将反应混合物用乙酸乙酯萃取， 萃取液经水和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥 后， 浓縮， 通过 SGC纯化 （纯化溶剂）， 制得化合物 2 ( 130 g, 产率 90 %);
6)化合物 INTB-1的制备：
在 O'C条件下， 在化合物 2 ( 10 g， 36.7 mmol) 的四氢呋喃 GOml) 溶液中加入 氢化钠 （2.2 g， 55 mmol); 将混合物在室温下搅拌 0.5小时； 在 -10°C下， 加入 2- 丙醇（2.4 g， 40.4 mmol); 反应混合物在 0°C下搅拌 1小时； 将反应混合物用乙酸 乙酯萃取， 萃取液经水和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥后， 浓縮， 通过 SGC纯 化 （纯化溶剂）， 制得化合物 INTB-1 (9 g, 产率 80 %);
7)化合物 3的制备：
向化合物 INTB-1 (2 g， 9.1 mmol), 化合物 INTA-1 (2.7 g, 9.1 mmol) 和 Pd(dppf)2Cl2 ( 1.3g, 1.82 mmol) 的甲苯 （30 ml) 溶液中， 加入磷酸钾 （7g， 27.3 mmol); 混合物在氩气下回流搅拌 20小时； 将反应混合物用乙酸乙酯萃取， 萃 取液经水和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，浓缩，通过 SGC纯化（纯化溶剂）， 制得化合物 3 ( 1.9 g, 产率 45 %);
8)化合物 MEDI007-51的制备
向化合物 3 ( 1.3 g)的甲醇（20 ml)溶液中， 加入 4N盐酸（5 ml); 室温下 搅拌混合物 5小时后， 通过加入饱和碳酸氢钠水溶液， 将 pH调至 8， 过滤， 滤 饼干燥， 制得化合物 MED 1007-51 (0.95 g, 产率 93 %)。 编号 分子式 分子量 结构确认参数 化合物 B C9H6N203 190.16 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.850-8.843 (d，
J=2.8 Hz, 1H), 8.443-8.414 (m, 1H), 8.067-8.049 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.754-7.732 (d， J=8.8 Hz, 1H), 6.227-6.208 (d, J=7.6 Hz, 1H).
化合物 C C9H5CIN2O2 208.60 !H-NMR (400 MHz, CDC13): 9.206-9.201 (d, J=2.0
Hz, 1H), 8.974-8.962 (d, J=4.8 Hz, 1H)， 8.558-8.536 (t, 1H), 8.298-8.275 (d, J=9.2 Hz, 1H)， 7.674-7.662 (d, J=4.8 Hz, 1H).
化合物 1 C15H10N2O2 250.2 化 合 物 CI5H12N2 220.27 MS (ESI) m/z: 220.10
INTA-1
化合物 2 C10H10CI2N4O 273.12 Ή-NMR (400 MHz, CDC13): 8.336 (s， 1H)，
5.783-5.756 (d, J=】0.8 Hz, 1H), 4.207-4.181 (d, J=10.4 Hz, 1H), 3.817-3.761 (m, 1H), 2.192-1.663 (m， 7H).
MS (ESI) m/z: 188
化 合 物 C13H17C1N402 296.75 lH-NMR (400 MHz, CDC13): 8.097 (s, 1H)， INTB-1 5.746-5.720 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.692-5.630 (m 1H),
4.174-4.113 (m 1H), 3.804-3.747 (m 1H), 2.130-1.945 (m 3H), 1.807-1.664 (m 3H), 1.638-0.885 (m, 7H).
MS (ESI) m/z: 297.3 [M+l]+
化合物 3 C28H28N602 480.56 Ή-NMR (400 MHz, CDC13): 8.822-8.811 (d, J=4.4
Hz, 1H), 8.153-8.086 (m, 3H), 7.857 (s 】H), 7.579-7.45】 （m, 5H)， 7.291-7.263 (m, 1H)， 5.479-5.448 (t， 1H), 5.287-5.225 (m, 1H), 4.148-4.113 (t， 1H), 3.712-3.659 (t, 1H), 2.046-2.027 (m, 4H), 1.773-1.625 (m， 2H), 1.408-1.336 (m, 6H), 1.277-1.242 (t, 1H).
MS (m/z) MS (ESI) m/z:: 481.2 [M+l]+
MED 1007-51 C23H20N6O 396.44 Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.743 (s 1H), (INT5 ) 9.668 (s 1H), 8.736 (s 1H), 8.387-8.000 (m, 4H),
7.600-7.544 (m, 5H), 7.339 (s 1H), 5.037 (s， 1 H), 1.221 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 397.2 [M+l]+ 实施例 2 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基小基）喹啉 -6·胺 -甲磺酸盐的 制备
， 包括下述步骤：
Figure imgf000017_0001
向化合物 MED1007-51 (17 g， 42.9 mmol)的乙醇 (400 ml)溶液中加入甲磺酸 (8.2 g, 85.9 mmol), 将混合物在室温下搅拌 16 小时， 过滤， 滤饼干燥， 制得 MED1007-108 (22 g, 产率 88%)。 分子式： C23H2oN60 2CH3S03H， 分子量： 590.67。
^-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.395 (s 1H), 9.154-9.140 (d, J=5.6 Hz, 1H); 8.820 (s 1H), 8.602-8.546 (t， 2H), 8.327-8.304 (d, J=9.2 Hz, 1H)， 7.956-7.942 (d J=5.6 Hz, 1H)， 7.743-7.691 (m， 5H), 5.049 (s, 1H), 2.930 (s, 6H), 1.272 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 397.2 [M+l]+
N6-环丙基 -N2- (4-吗啉喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的制备
Figure imgf000018_0001
1 ) 向三口烧瓶中加入化合物 C (208 mg， 1.0 mmol)、 醋酸钯 (22.45 mg, 0.1 mmol)、 Binap ( 125 mg, 0.2 mmol)和碳酸铯（290 mg, 1.5 rnmol), 真空条件下， 依次加入化合物 SM-4 (吗啉， 104 μΐ, 1.2 mmol) 和甲苯 （3 ml) 后， 在 100'C条 件下反应 3小时； 冷却， 加入乙酸乙酯， 过滤， 滤液减压浓缩， 浓缩物经柱层析
(柱层析洗脱液为石油和乙酸乙酯的混合物（1 :3 ))纯化，制得化合物 4( 158mg);
2)将化合物 4 ( 158 mg， 4.75 mmol)溶于乙醇（8 ml) 中， 真空条件下， 加 入^/碳 ( 16 mg), 室温下， 搅拌反应混合物 3小时， 过滤， 浓缩滤液， 制得化 合物 INTA-2的粗品 140mg。
3 )向三口烧瓶中加入化合物 INTAB-2 ( 144 mg， 0.49 mmol),化合物 INTA-2 ( 135 mg，0.59 mmol)、 醋酸钯 （ 11 mg, 0.05 mmol)、 Binap (62 mg, 0.10 mmol) 和碳酸铯（145 mg, 0.75 mmol), 真空条件下， 加入甲苯； 混合物在 100°C反应过 夜，冷却，过滤， 滤液经薄层色谱（薄层展开液为二氯甲烷和甲醇的混合液（10: 1))纯化， 制得化合物 5;
4)将化合物 5悬浮在 1N的盐酸水溶液中， 室温下， 搅拌 2小时， 过滤， 滤饼经水和二氯甲烷洗涤， 制得 MED1007-32 (105 mg, 产率 45%)。
分子式： C18H21N70; 分子量： 402.45;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.388 (s, 1H)， 9.271 (s， 1H)， 8.492-8.481 (d， J=4.4 Hz, 1H)， 8.396 (s, 1H)， 8.328 (s， 1H)， 7.843-7.824 (d, J=7.6 Hz, IH), 7.802 (s， IH), 7.605 (s， 1H)， 6.884-6.870 (d， J=5.6 Hz, IH), 3.915 (s， 4H), 3.169 (s， 4H)， 1.229(s, IH), 0.760 (m, 2H), 0.669 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 403 [M+l]+ 实施例 4N6-环丙基 -N2- (4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺的制备 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
Figure imgf000019_0001
1) 向三口烧瓶中加入化合物 C (208 mg, l.Ommol), 醋酸钯（22.45 mg, 0.1 mmol)、 Binap (125 mg, 0.2 mmol)和碳酸铯（290 mg， 1.5mmol), 真空条件下， 依次加入化合物 SM-5 (104μί, 1.2 mmol)和甲苯 Gml)， 混合物在 100'C反应 3小时， 冷却， 加入乙酸乙酯后， 过滤， 滤液减压浓缩， 浓缩物经柱层析（柱层 析洗脱液为石油和乙酸乙酯的混合物 （1:3)) 纯化， 制得化合物 6 (158 mg);
2)将化合物 6 (158mg, 4.75 mmol) 溶于乙醇 （8 ml) 中， 在真空条件下， 加入E/碳 (16 mg), 室温下， 搅拌反应混合物 3小时， 过滤， 浓缩滤液， 制得 化合物 26的粗品 140 mg。 3 )向三口烧瓶中加入化合物 8 ( 144 mg, 0.49 mmol )、化合物 26 ( 135 mg, 0.59 mmol)、 醋酸钯（11 mg， 0.05 mmol)、 Binap (62 mg, 0.10 mmol)和碳酸铯（145 mg, 0.75 mmol), 在真空条件下， 加入甲苯； 反应混合物在 100'C反应过夜； 冷 却， 过滤， 滤液， 经薄层色谱（薄层展开液为二氯甲垸和甲醇的混合液（10: 1 ) ) 纯化部分溶液， 得到化合物 29;
4)将化合物 29悬浮在 4N的盐酸甲醇溶液中， 室温下， 搅拌 2小时， 过滤， 滤饼用水和二氯甲垸洗涤， 制得 MED1007-33 ( 105 mg, 产率 45 °/。）。
分子式： C18H23N9 ; 分子量： 401.47;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.404 (s, 1H), 9.266 (s, 1H)， 8.461 (s， 1H), 8.384 (s， 1H), 8.284 (s, 1H)， 7.821-7.802 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.781 (s, 1H)， 7.602 (s, 1H), 6.838 (s， 1H)， 3.090 (s， 4H)， 3.017 (s， 4H)， 1.228(s, 1H), 1.160(s, 1H)， 0.748 (m， 2H)， 0.658 (m， 2H).
MS (ESI) m/z: 402 [M+l]+ 实施例 5 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺的制备
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
Figure imgf000020_0001
1 ) 向三口烧瓶中加入化合物 INTB-1 ( 144 mg, 0.49 mmol) 化合物 INTA-4 ( 135 mg，0.59 mmol)、 醋酸钯 （ 11 mg, 0.05 mmol)、 Binap (62 mg, 0.10 mmol) 和碳酸铯（145 mg, 0.75 mmol), 真空条件下， 加入甲苯； 混合物在 100°C反应过 夜，冷却，过滤， 滤液经薄层色谱（薄层展幵液为二氯甲烷： 甲醇的混合液（10: 1 ) )纯化， 制得化合物 8;
2)将化合物 8悬浮在 4N的盐酸甲醇溶液中， 室温下， 搅拌 2小时； 过滤， 滤饼用水和二氯甲烷洗涤， 制得 MED1007-34 (68 mg, 产率 45 %)。
分子式： C17H16N60; 分子量： 320.35;
'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.919 (s, 1Η), 9.702 (s, 1H), 8.699 (s， 1H), 8.571 (s, IH), 8.140 (s, IH), 8.057 (s, 1H)， 7.982 (s, 1H)， 7.921 (s, IH), 7.442 (s, 1H): 5.638(s， IH), 1.461 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 321 [M+l]+ 实施例 6 N- (6-环戊氧基 -9H-嘌呤 -2-基）喹啉 -6-胺的制备
c
Figure imgf000021_0001
2 q
10 MED1007-35
1 )在化合物 SM-6 (86 mg, 1 mmol) 的 DMF (5 ml) 溶液中， 加入氢化钠 (60 mg, 1.5 mmol), 室温下， 搅拌 1小时； 再加入化合物 2 (273 mg， 1 mmol)， 室温下，搅拌过夜；将反应混合物溶于乙酸乙酯（50 ml)中，再用食盐水（2 x 50 ml)洗涤， 无水硫酸钠干燥后， 真空浓缩， 浓缩物通过 SGC (乙酸乙酯： 石油 醚 =1: 1 ) 纯化， 制得化合物 9 (300mg, 产率 86%);
2)将化合物 9的悬浮液（ 160 mg, 0.5 mmol )、 在氮气环境下回流反应 12小 时； 冷却至室温后，将反应混合物溶于乙酸乙酯（50ml)中， 再用食盐水（2 x 50 ml)洗'涤， 无水硫酸钠干燥后， 真空浓缩， 浓缩物经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 石油 醚 =1 : 1 )纯化， 制得化合物 10 ( lOO mg, 产率 68 %);
3)在化合物 lO ( lOO mg)的二噁垸（5ml)混合物中加入盐酸 /二噁烷（5ml)， 室温下， 搅拌反应 2小时； 将反应混合物溶解在二氯甲垸 （50 ml) 中， 并用氢 氧化钠（50 ml，lN)和食盐水（2 x 50 ml)洗涤， 无水硫酸钠干燥后， 真空浓缩， 浓缩物经 Pre-HPLC纯化 （纯化溶剂）， 制得 MED1007-35 ( 18 mg)。
分子式: C18H17N70; 分子量 :346.39;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.9 (s， IH), 9.708 (s， IH), 8.704-8.695 (d, J=3.6 Hz, 1H)， 8.585 (s， IH), 8.156-8.136 (d, J=8.0 Hz, IH), 8.058 (s， IH), 8.010-7.987(d, J=9.2 Hz, lH),7.924-7.901(d, J=9.2 Hz, 1H)， 7.461-7.430 (m， IH), 5.747(s, IH), 2.121-2.088 (t， 2H), 1.893-1.860(d, J=13.2 Hz, 2H)， 1.805-1.778 (t， 2H)， 1.686-1.672(d, J=5.6 Hz, 2H).
MS (ESI) m/z: 347 [M+l]+ 实施例 7 N6-环丙基 -N2- (4-甲基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺二水合二甲磺 酸盐的制备
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
Figure imgf000022_0001
1 )将化合物 INTA-5 (243 mg, 1.54 mmol)溶于甲苯（10 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 (450 mg, 1.54 mmol),醋酸钯（68 mg, 0.3 mmol)、 BINAP ( 186 mg, 0.3 mmol)和磷酸钾 （ 1.2 g, 4.62 mmol), 混合物搅拌回流过夜， 冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水，取有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经 Pre-TLC (乙 酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化， 制得化合物 11 (250 mg, 产率 39%);
2)将化合物 11 (250 mg, 0.6 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL)， 混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物， 用乙酸乙酯萃取， 萃取液经碳酸氢 钠和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，经 Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10: 1 )纯化， 制得化合物 12 ( 140 mg, 产率 70%)。
3 )将化合物 12 ( 140 mg, 0.42 mmol)溶于乙醇 （5 mL) 水溶液中， 在 O'C 条件下， 加入甲磺酸 （ 152 mg， 1.69 mmol), 混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 滤饼真空干燥， 制得 MED1007-113 ( 100 mg, 产率 42%)。
分子式: C18H17N 2CH3S03H'2H20; 分子量 :331.37。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.164 (s， 1H)， 8.975 (m， 1H)， 8.961 (s， 1H), 8.469 (m, 1H)， 8.282 (s, 1H), 8.123 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.914 (d, J=5.6Hz， 1H), 3.168 (b， 1H), 2.902 (s， 3H), 2.499 (s， 6H)， 0.871 (m, 2H)， 0.719 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 332.4 [M+l]+. W
21
实施例 8 N6-环丙基 -N2- (4-乙基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺二水合二甲磺 酸盐的制备
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
Figure imgf000023_0001
1 )将化合物 INTA-6 ( 80 mg, 0.46 mmol)溶于甲苯 （10 mL) 中， 加入化合物 INTB-2 ( 136 mg， 0.46 mmol )、 醋酸钯 （20 mg, 0.1 mmol)、 BINAP ( 56 mg, 0.1 mmol)和磷酸钾 （368 mg, 1.4 mmol), 混合物搅拌回流过夜， 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水， 分离取有机层， 有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩有机 层， 再经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 纯化， 制得化合物 3 ( 140 mg， 产 率: 71%);
2)将化合物 13 ( 140 mg, 0.32 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物， 用乙酸乙酯 萃取， 萃取液经碳酸氢钠和食盐水洗涤后， 用无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 经 Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 制得化合物 14 (60 mg, 产率 54%);
3 )将化合物 4 (60 mg, 0.17 mmol)溶于乙醇 （5 mL) 水溶液， 在 0°C条件 下， 加入甲磺酸（ 52 mg， 0.52 mmol), 混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 滤饼真 空干燥， 制得 MED1007-114 (25 mg, 产率 25%)。
分子式: Ci9Hi9N7，2CH3S03H'2H20; 分子量 :345.40。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.030 (s， 1H), 8.986 (m， 2H)， 8.509 (m, 2H)， 8.111 (m, 2H)， 7.876 (d, J= 5.6Hz， 1H)， 3.282 (q, J= 7.6Hz, 2H), 3.158 (m, 1H), 2.338 (s， 6H)， 1.415 (t, J= 7.6Hz, 3H), 0.849 (m, 2H), 0.718 (m, 2H). MS (ESI) m/z: 346.5 [M+l]+. 实施例 9 N6-环丙基 -N2- (4-环丙基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺二水合二甲磺 酸盐的制备
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
Figure imgf000024_0001
1 )将化合物 INTA-7 (300 mg, 1.63 mmol)溶于甲苯 （10 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 (480 mg， 1.63 mmol)、 醋酸钯（74 mg, 0.33 mmol)、 BINAP (205 mg, 0.33 mmol)和磷酸钾 （ 1280 mg, 4.9 mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水，分离，取有机层，有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤， 浓缩有机层， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 纯化， 制得化合物 3
( 130 mg, 产率 71%);
2)将化合物 15 ( 130 mg, 0.29 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N 盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 用乙酸 乙酯萃取， 萃取液经碳酸氢钠和食盐水洗涤 ， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩 至干， 经 Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10: 1 )纯化， 制得化合物 16 (60 mg, 产 率 58%);
3 )将化合物 16 (60 mg, 0.17 mmol)溶于乙醇（5 mL)水溶液中， 在 0°C条 件下， 加入甲磺酸 （52 mg， 0.52 mmol), 再将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干燥滤饼， 制得化合物 MED1007-115 (30 mg, 产率 30%)。
分子式 :C2((H19Nr2CH3S03H'2H20; 分子量 :357,41。 %S ^ '^O 81 'TO (1:01=灏 :¾ίώ鹙二)
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Z.99Z.Z0/S10Z O/A 燥滤饼， 制得化合物 5 ( lO mg, 产率 38%)。
分子式 :C21H16N6O 2CH3S03H; 分子量 :497.13。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.621 (b, 1H), 9.854 (s， 1H)， 9.133 (d, J- 5.2Hz, 1H), 8.821 (s, 1H)， 8.338 (m, 3H), 7.855 (d, J = 5.2Hz, 1H),7.728 (d, J = 4·4Ηζ， 2H), 7.284 (d， J= 8.8Hz， 2H), 3.893 (s, 3H), 2.369 (s, 6H).
MS (ESI) m/z: 385.3 [M+l]+. 实施例 11 4- (苯并 [1»3】间二氧杂环戊烯 -5-基） -N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基 ) 喹啉 -6-胺-甲磺酸盐的制备
Figure imgf000026_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1 )将化合物 INTA-9 ( 150 mg, 0.5 mmol)溶于甲苯（10 mL) 中， 加入化合 物 INTB-1 ( 100 mg, 0.38 mmol)、醋酸钯（ 17 mg, 0.076 mmol), BINAP (47 mg， 0.076 mmol)和磷酸钾 （300 mg, 1.14 mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷却 至室温后， 加入乙酸乙酯和水， 分离， 取有机层， 有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 19 ( 100 mg, 产率 50%);
2)将化合物 19 ( 100 mg, 0.19 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 再将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取 液经碳酸氢钠和食盐水洗涤，萃取液经无水硫酸钠干燥，浓缩至干，再经 Pre-TLC
(二氯甲垸:甲醇 =10:1 ) 纯化， 制得化合物 20 (30 mg, 产率 36%); 3)将化合物 20 (30 mg, 0.07 mmol)溶于乙醇（5 mL)水溶液中， 在 0°C时 加入甲磺酸（19 mg, 0.18 rnrnol), 将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干燥 滤饼， 制得化合物 MED 1007- 133 ( 15 mg, 产率 40%)。
分子式: C24H2GN603'2CH3S03H; 分子量 :553.45。
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 9.173 (s， IH), 8.869 (d, J=5.6Hz, 1H),8.710 (s; 1H)， 8.503 (d, J=9.2Hz, 1H)， 8.171 (m, IH), 7.832 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.210 (d， J=6Hz, 2H), 7.055 (d, J=8Hz, IH), 6.047 (d， J = 6Hz, 2H),5.250 (s, 1H)， 2.613 (s, 6H)， 1.320 (m， 6H).
MS (ESI) m/z: 441.4 [M+l]+. 实施例 12 2- (4- (3-甲氧基苯基）喹 Ι#·6-基氨基） -9Η-嘌呤 -6- 甲磺酸盐的制备 方案：
Figure imgf000027_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTB-1 (200 mg, 0.68 mmol) 溶于甲苯 （20 mL) 中， 加入化 合物 INTA-10 ( 170 mg， 0.68 mmol)、 醋酸钯（31 mg， 0.14 mmol)、 BINAP (87 mg, 0.14 mmol)和磷酸钾 （540 mg， 2.04 rnrnol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水，分离，取有机层，有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 21 (300 mg, 产率 87%);
2)将化合物 21 (300 mg, 0.59 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 再经 Pre-TLC (二氯甲烷:甲醇 =10:1) 纯化， 制得化合物 22 (170 mg, 产率 68%);
3)将化合物 22 (170mg, 0.4mmol)溶于乙醇 （10mL) 水溶液中， 在 0°C 时加入甲磺酸（19mg，0.18mmol)， 将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空千 燥滤饼， 制得化合物 MED1007-134 (50 mg, 产率 25%)。
分子式: C21H16N602CH3S03H; 分子量 :480.50。
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.405 (b， 1H)， 9.707 (s， 1H)， 9.067 (d, J =2 AKz, 1H)， 8.654 (s, 1H), 8.370 (m, 1H), 8.244 (d， J= 8.8Hz, 1H), 8.151 (d, J = 1.6Hz, 1H)， 7.787 (d,J= 5.2Hz, 1H)， 7.589 (t， J= 8.8Hz, 1H), 7.250 (d， J= 7.6 Hz, 1H), 7.202 (s， 1H)， 7.193 (d， J= 7.2 Hz, 1H), 3.857 (s， 3H)， 2.385 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 385.3 [M+l]+. - (3- ^¾) -N- (6 ^丙 ¾_¾·9ΙΜ 呤 -2-基） ¾ ^胺-甲磺舰的制备
Figure imgf000028_0001
24 MED1007-135
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTB-1 (150mg, 0.5 mmol)溶于甲苯（10mL) 中， 加入化合 物 INTA-11 ( 100 mg, 0.38 mmol)、醋酸钯（ 17 mg， 0.076 mmol)、 BINAP (47 mg, 0.076 mmol)和磷酸钾 （300 mg, 1.14 mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷却 至室温后， 加入乙酸乙酯和水， 分离， 取有机层， 有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1)纯化， 制得化合物 23 (100 mg, 产率 50%);
2)将化合物 23 (100 mg, 0.19 mmol)溶于甲醇（5mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 再经 Pre-TLC (二氯甲烷:甲醇 =10:1 ) 纯化， 制得化合物 24 (30 mg, 产率 36%);
3)将化合物 24 (30 mg, 0.07 mmol)溶于乙醇 （5 mL) 水溶液中 ， 在 0°C 时， 加入甲磺酸 （ 19 mg， 0.18 mmol, )， 再将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干燥滤饼， 制得化合物 MED1007-135 ( 15 mg, 产率 40%)。
分子式: C23H19FN6O2CH3S03H; 分子量 :414.43。
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 9.98 (s， 1H), 8.75 (d, J=5.6Hz, 1H)， 8.55-8.60 (m, 2H)， 8.23 (d， J=9.2Hz, 1H), 7.83-7.93 (m, 3H)， 7.47-7.51 (m, 2H)， 5.30 (m， 1H), 1.390 (m， 6H).
MS (ESI) m/z: 415 [M+l]+. 雄例 14 4r ( - ^¾) -N- (6 911秦 -2-基） 胺-甲磺隨的制备
Figure imgf000029_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1 )将化合物 INTB-1 ( 150 mg, 0.5 mmol)溶于甲苯（10 mL)中， 加入化合 物 INTA-12 ( 100 mg, 0.38 mmol),醋酸钯（ 17 mg， 0.076腿 ol)、 BINAP (47 mg, 0.076 mmol)和磷酸钾 （300 mg, 1.14 mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷却 至室温后， 加入乙酸乙酯和水， 分离， 取有机层， 有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 25 ( 100 mg, 产率 50%); 2)将化合物 25 ( 100 mg, 0.19 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 再经 Pre-TLC
(二氯甲垸：甲醇 =10:1 ) 纯化， 制得化合物 26 (30 mg, 产率 36%);
3 )将化合物 26 (30 mg, 0.07 mmol)溶于乙醇（5 mL)水溶液中， 在 O'C时， 加入甲磺酸（19 mg, 0.18 mmol), 再将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干 燥滤饼， 制得化合物 MED1007-136 ( 15 mg, 产率 40%)。
分子式: C23H19FN6O2C¾S03H; 分子量 :414.43。
'H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.91 (s， 1H)， 8.75 (d, J=5.6Hz, 1H)， 8.55-8.60 (m, 2H), 8.14 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.85 (m, 1H)， 7.61 (m， 1H)， 7.36-7.49 (m, 3H)， 5.23 (m， 1H)， 1.30 (m, 6H).
MS (ESI) m/z: 415 [M+l]+. 实施例 15 4- (3,4-二甲氧基苯基） -N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基）喹啉 -6-胺- 甲磺酸盐的制备
Figure imgf000030_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1 )将化合物 INTB-1 ( 170 mg， 0.57 mmol)溶于甲苯 ( 15 mL) 中， 加入化 合物 INTA-13 ( 160 mg， 0.57 mmol)、 醋酸钯（25 mg, 0.11 mmol)、 BINAP (71 mg, 0.11 mmol)和磷酸钾 （451 mg, 1.71mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水，分离，取有机层，有机层经无水硫酸钠干燥后， W 201
29 过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 27 ( 150 mg, 产率 50%);
2)将化合物 27 ( 150 mg, 0.27 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤 ，萃取液经无水硫酸钠干燥，浓缩至干，再经 Pre-TLC
(二氯甲烷:甲醇 -10:1 ) 纯化， 制得化合物 28 (40 mg, 产率 32%)。
3 )将化合物 28 (40 mg, 0.087 mmol)溶于乙醇（5 mL)水溶液中 ， 在 0°C 条件下， 加入甲磺酸 （25 mg, 0.26 mmol )， 再将混合物在室温下搅拌过夜， 过 滤， 滤饼真空干燥， 制得化合物 MED1007-137 ( 18 mg, 产率 37%)。
分子式: C25H24N603'2CH3S03H; 分子量 :569.5。
'H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 9.291 (s， 1H), 9.064 (m， 2H),8.570 (m, 1H), 8.305 (m， 1H)， 7.997 (m, 1H), 7.406 (m, 2H)„ 7.298 (d， J=8.8Hz, 1H), 4.916 (s, 1H), 3.950 (m, 6H)， 2.731 (s, 6H), 1.377 (m, 6H).
MS (ESI) m/z: 457.5 [M+l]+. 实施例 16 2- (4- (苯并【1，3】间二氧杂环戊烯 -5-基）喹啉 -6-基氨基） -9H-嘌呤 -6- 醇-甲磺酸盐的制备
Figure imgf000031_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1 )将化合物 INTB-1 (40 mg, 0.135 mmol)溶于甲苯 （10 mL) 中， 加入化 合物 INTA-9 (35.6 mg, 0.135 mmol)、醋酸钯（6 mg, 0.027 mmol)、 BINAP ( 16.8 mg, 0.027 mmol)和磷酸钾（ 108 mg, 0.41 mmol), 将混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水，分离，取有机层，有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 19 (60 mg, 产率 85%);
2)将化合物 20 (60 mg, 0.11 mmol) 溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 再经 Pre-TLC
(二氯甲垸:甲醇 =10:1 ) 纯化， 制得化合物 4 (28 mg, 产率 58%);
3 )将化合物 20 (28 mg, 0.07 mmol)溶于乙醇（5 mL)水溶液中， 在 0°C条 件下， 加入甲磺酸 （ 17 mg, 0.18 mmol), 再将混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 滤饼真空干燥， 制得化合物 MED1007-139 ( 11 mg， 产率 31%)。
分子式: C21H14N603'2CH3S03H; 分子量 :511.37。
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.758 (b, 1H), 9.974 (s, 1H), 9.151 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.963 (s， 1H)， 8.370 (m， 3H), 7.921 (d, J=5.6Hz， 1H)， 7.332 (s, 1H), 7.259 (s, 2H), 6.197 (s, 2H), 2.405 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 399.2 [M+l]+. 实施例 17 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (哌嗪小基）喹啉 -6-胺-甲磺酸 盐的制备
方案：
Figure imgf000032_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTB-1 (200 mg, 0.68 mmol)溶于甲苯 （10 mL) 中， 加入化 合物 INTA-3 ( 183 mg， 0.56 mmol )、 醋酸钯（25 mg， 0.11 mmol)、 BINAP ( 104.5 mg, 0.17 mmol)和磷酸钾 （442 mg, 1.68 mmol)， 将混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水，分离，取有机层，有机层经无水硫酸钠干燥后， 过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (二氯甲烷:甲醇 =10:1 )纯化， 制得化合物 29 (223 mg, 产率 68%);
2)将化合物 29 ( 190 mg, 0.37 mmol)溶于甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中， 将混合物在室温下搅拌过夜， 加水稀释混合物后， 萃取液 经碳酸氢钠和食盐水洗涤， 萃取液经无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 再经 Pre-TLC
(二氯甲垸:甲醇 =10:1 ) 纯化， 制得化合物 30 (60 mg, 产率 40%);
3 )将化合物 30 (60 mg, 0.15 mmol)溶解在乙醇 （5 mL)和水的混合溶液 中， 0°C时加入甲磺酸 （43 mg， 0.45 mmol)。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜 并过滤， 真空干燥滤饼得到化合物 MED1007-142 (80 mg, 产率 90%)。
分子式: C21H24N80，2CH3S03H， 分子量 :596.68
1H-NMR (400 MHz, CD3OD): «5 8.9 (s, 1H)， 8.469-8.455 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.990 (s, 2H), 7.847-7.824 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.091-7.077 (d, J=5.6Hz, 1H)， 5.586-5.555 (t， 1H), 3.703-3.691 (d， J=4.8Hz， 4H), 3.603-3.591 (d, J=4.8Hz， 4H)， 1.392(s, 3H)， 1.376 (s， 3H), 1.185 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 405.5 [M+l]+. 实施例 18 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (4-甲基哌嗪小基） 喹啉 -6-胺- 甲磺酸盐的制备
Figure imgf000033_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 1NTB-1 (200 mg, 0.68 mmol) 溶解在甲苯 （10 mL) 中， 加入 化合物 INTA-14 ( 136 mg, 0.56 mmol )、醋酸钯（ 25 mg, 0.11 mmol )、 BINAP ( 104.5 mg, 0.17 mmol)和磷酸钾（442 mg， 1.68 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (二氯甲烷:甲醇 =10:1 )纯化得到棕色固体化合物 31 ( 190 mg, 产率 67%)。
2)将化合物 31 ( 190 mg, 0.37 mmol) 溶解在甲醇 （5 mL) 和 4N盐酸甲醇 (5 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 加水稀释混合物， 用乙酸乙酯萃取、碳酸氢钠和盐水洗涤。合并的有机相用硫酸钠干燥，浓缩至干， 经 Pre-TLC (二氯甲垸:甲醇 =10:1 )纯化得到黄色固体 32 (88 mg, 产率 57%)。
3 )将化合 32 (88 mg, 0.21 mmol)溶解在乙醇（5 mL)和水的混合溶液中， O'C时加入甲磺酸（60 mg，0.63 mmol)。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜并过 滤， 真空干燥滤饼得到化合物 MED1007-143 (20 mg, 产率 15%)。
分子式: C22H26N80 2CH3S03H, 分子量 :610.2
^-NMR (400 MHz, DMSO-</6): δ 10.203 (s， 1H), 8.777-8.761 (d， J=6.4Hz, 1H)， 8.712 (s, 1H), 8.507 (s， 2H)， 8.116-8.093 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.380-7.363 (d， J=6.8Hz, 1H)， 5.641 (s, 1H), 4.283-4.281 (s， 3H)， 3.168 (s， 4H)， 2.962(s, 4H), 2.357 (s, 6H), 1.457 (s， 3H), 1.442(s, 3H) .
MS (ESI) m/z: 419.4 [M+l]+. 实施例 19 l-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基)哌啶 -4-醇的制备
Figure imgf000034_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 2 (0.7g, 2.56mmol)溶解在四氢呋喃（10mL) 中， 加入化合物 2 (0.3g，3.1mmol)、 DIPEA (0.7g， 5.2mmol)。将得到的混合物在室温下搅拌 10小 时。加水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤 并浓缩， 经 SGC纯化得到棕色固体化合物 INTB-3 (0.75g， 产率 85 %)。
2)将化合物 I TA-1 (540mg, 2.44mmol)溶解在甲苯 （30mL) 中， 加入化 合物 INTB-3 (750mg, 2.22mmol)、 醋酸钯 (lOOmg, 0.45mmol)、 BINAP (414mg, 0.67mmol)、 磷酸钾 (1.8g， 6.67mmol)0 将得到的混合物搅拌回流过夜。 冷却至室 温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 SGC (二氯甲垸： 甲醇 =50:1)纯化得到棕色固体化合物 33 (500mg, 产率 50%)。
3 )将化合物 33 ( lOOmg, 0.19mmol)溶解在甲醇（2mL) 和 4N盐酸 (2mL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。加水稀释混合物， 并用乙酸 乙酯萃取。用碳酸氢钠和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥合并的有机相。浓缩至干， 经 SGC (二氯甲垸:甲醇 =10:1 )纯化得到黄色固体 MED1007-148 (30mg, 产率 38% )o
分子式： C25H23N70， 分子量： 437.20
1H-NMR (400 MHz, DMSO-£?6): δ 9.285 (s, 1H), 8.771-8.761 (d， J=4.0Hz, 1H), 8.312-8.308 (d, J=1.6Hz, 1H)， 8.266-8.243 (d, J=9.2Hz, 1H), 8.034-8.011 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.881 (s, 1H)， 7.657-7.586 (m, 5H)， 7.374-7.363 (d, J=4.4Hz， 1H), 4.758 (s， 2H)， 3.742 (s， 1H)， 1.785-1.761 (m, 4H), 1.342(m, 4H) .
MS (ESI) m/z: 438.3 [M+l]+ l-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基)哌啶 -3-酰胺的制备
Figure imgf000035_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 2 (0.7g, 2.56mmol)溶解在四氢呋喃 （10mL) 中， 加入化合 物 SM-8 (0.4g, 3.1mmol)、 DIPEA (0.7g, 5.2mmol)。 将得到的混合物在室温下 搅拌 10小时。 加水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。 分离有机层， 用无水硫酸钠 干燥。过滤并浓缩，经 SGC纯化得到棕色固体化合物 INTB-4 (0.8g，产率 85 %)。
2) 将化合物 INTA-1 ( 540mg, 2.44mmol) 溶解在甲苯 （30mL) 中， 加入 化合物 INTB-4 (810mg， 2.22mmol)、醋酸钯 (100mg， 0.45mmol)> BINAP (414mg, 0.67mmol)、磷酸钾 (1.8g， 6.67mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。冷却至室 温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 SGC (二氯甲烷： 甲醇 =50:1 )纯化得到棕色固体化合物 34 (240mg，产率 20%)。
3 )将化合物 34 (80mg, 0.15mmol)溶解在二氯甲烷（5mL)和三氟乙酸（lmL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。加水稀释混合物并用乙酸乙 酯萃取。 用碳酸氢钠和盐水洗涤。 用无水硫酸钠干燥合并的有机相。 浓缩至干， 经 SGC (二氯甲烷： 甲醇 =10:1 ) 纯化得到黄色固体 （MED1007-149) (25mg, 产率 40%)。
分子式： C26H24N80， 分子量： 464.21
^- MR (400 MHz, DMSO-</6): δ 9.206 (s, 1Η)， 8.710-8.699 (d， J=4.4Hz, 1H), 8.314-8.294 (d， J=8.0Hz, 1H)， 8.150 (s, 1H)， 7.969-7.946 (d, J=9.2Hz, 1H), 7.809 (s， 1H), 7.622-7.529 (m, 5H), 7.342 (s, 1H), 7.316-7.305 (d， J=4.4Hz, 1H), 6.849 (s, 1H), 3.157-3.140 (m， 2H)， 2.338-2.311 (m, 2H), 1.883-1.859 (m, 2H), 1.644-1.620 (m, 2H), 1.359-1.335 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 465.4 [M+l]+ 实施例 21 1- (2- (4-苯基喹啉 -6-基氨基） -9H-嘌呤 -6-基氨基） 环丙垸羧酸甲 酯的制备
Figure imgf000036_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 2 ( l g, 3.68 mmol)溶解在二氯甲烷（10 mL) 中， 加入化合物 SM-9 (0.72 g， 4.78 mmol)和 DIPEA (2.4 g, 18.4 mmol)。将得到的混合物在 50°C 下搅拌 50小时， 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫 酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 SGC (乙酸乙酯:石油醚 =1:2) 纯化得到棕色固体化 合物 INTB-5 (0.9 g， 产率 75%)。
2)将化合物 INTA-1 (313 mg, 1.4 mmol)溶解在甲苯（30 mL) 中， 加入化 合物 INTB-5 ( 500 mg, 1.4 mmol )、醋酸钯（ 63 mg, 0.28 mmol )、 BINAP ( 174 mg, 0.28 mmol)和磷酸钾 （1.1 g， 4.2 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩， 经 SGC (二氯甲烷:甲醇 =30: 1 )纯化得到棕色固体化合物 35 ( 535 mg,产率 65%)。
3 )将化合物 35 (535 mg, 1 mmol)溶解在甲醇 （5 mL)和 4N盐酸甲醇 （5 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 加水稀释混合物， 用 乙酸乙酯萃取、 碳酸氢钠和盐水洗涤。 合并的有机相用硫酸钠干燥， 浓缩至干， 经 SGC (二氯甲垸:甲醇 =10:1 ) 纯化得到黄色固体 （MED1007-151 ) (300 mg, 产率 65%)。
分子式: C25H21N702, 分子量 :451.18
MS (ESI) m/z: 452.1 [M+l]+. - (2-
Figure imgf000037_0001
-9H 吟 基 环丙微酸的制备
Figure imgf000037_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
在 0°C条件下， 向化合物 MED1007-151 (65 mg, 0.15 mmol)的四氢呋喃（5 mL) 与水 （0.5 mL) 的混合溶液中分批加入氢氧化锂 （30 mg, 0.72 mmol), 将 混合物在室温条件下搅拌 50小时， 用盐酸溶液调 pH至 5， 过滤， 干燥， 制得 MED1007-152 (40 mg, 产率 60%)。
分子式: C24H19N702; 分子量 :437.16。
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-rf6): δ 12.1 (b, 1H), 9.157 (s， 1H)， 8.699 (s, 1H); 7.928-7.307 (m, 10H), 1.404 (s， 1H)， 1.114 (s， 1H).
MS (ESI) m/z: 438.1 [M+l]+.
N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2， 6二胺的制备
Figure imgf000038_0001
MED1007-31 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-K60 mg, 0.27 mmol)、化合物 INTB-2(80 mg, 0.27 mmol), 醋酸钯（ 10 mg, 0.045 mmol)、 Binap (30mg， 0.048 mmol)和磷酸钾（230 mg, 1.08 mmol)溶解在甲苯（lO mL)中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温 后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，经 Pre-TLC 纯化（乙酸乙酯:甲醇 =15:1 ) 得到棕色固体化合物 36 (50 mg, 产率 39 %)。
2)将化合物 36 (50 mg, 0.104 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸 (2 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 经 Pre-HPLC纯化得到黄色固体化合物 MED1007-31 (25mg, 产率 61%)。
分子式： C23H19N7, 分子量： 393.44
^- MR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s， 1H), 8.377 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.963 (d， J = 8.8 Hz, 1H), 7.875 (s， 1H)， 7.761 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.846 (d， J = 5.2 Hz, 1H), 5.556-5.586 (m, 1H), 3.193-3.209 (m， 4H)， 3.086-3.096 (m, 4H), 1.379 (d， J = 6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 394.3 [M+l]+. 实施例 24 N- (6-苯氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000039_0001
INTA-3 INTB-6 37 MED1007-54 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-3 ( 100 mg， 0.305 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入 化合物 INTB-6 ( 101 mg, 0.305 mmol)、 Pd(PPh3)4 (35 mg, 0.0305 mmol)和碳酸 铯 （198 mg， 0.61 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加 入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，经 Pre-TLC (乙 酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 纯化得到棕色固体化合物 37 ( 101 mg， 产率 53 %)。
2)将化合物 37 ( 101 mg, 0.16 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸 ( 1 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED1007-54 (9 mg， 产率 11%)。
分子式: C24H22N80, 分子量 :438.48
!H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.646 (s, 1H), 8.431-8.472 (m， 2H), 8.012 (d， J=8.8 Hz, 1H)， 7.731 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.383-7.421 (m， 2H), 7.181-7.262 (m, 4H)， 3.920-3.930 (m, 4H), 3.200-3.215 (m, 4H)。
MS (ESI) m/z: 439 [M+l]+ 实施例 25 - (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000039_0002
INTA-3 INTB-1 38 MED1007-58 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-3 ( 100 mg, 0.305 mmol) 溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入 化合物 2 (90mg， 0.305 mmol )、 Pd(PPh3)4 (35 mg, 0.0305 mmol)和碳酸铯 （198 mg, 0.61 mmol 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙 酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯: 甲醇 =15:1 )纯化得到棕色固体化合物 38 (80mg， 产率 45%)。
2)将化合物 38 (80 mg， 0.136 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸 ( 1 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓縮至干， 通过 Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED1007-58 (25mg， 产率 46%)。
分子式: C21H24N80， 分子量 :404.47
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s， 1H), 8.377 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.963 (d, J=8.8 Hz, 1H)， 7.875 (s， 1H), 7.761 (d， J=8.8 Hz, 1H), 6.846 (d， J=5.2 Hz, 1H), 5.556-5.586 (m, 1H)， 3.193-3.209 (m， 4H)， 3.086-3.096 (m, 4H)， 1.379 (d, J=6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 405 [M+l]+ 实施例 26 4- (6- (6- (环丙基氨基） -9H-嘌呤 -2-基氨基）喹 Ifr4~基）对苯甲酸甲酯的 制备
Figure imgf000040_0001
INTA-15 INTB-2 39 MED1007-59 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-15 ( lOOmg, 0.36mmol) 溶解在甲苯 （3mL) 中， 加入化 合物 2 ( 105mg， 0.36mmol)、醋酸钯（8mg， 0.036mmol)、 BINAP (22 mg, 0.036 mmol)和磷酸钾 （152 mg, 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 ) 纯化得到棕色固体化合物 39 (50 mg, 产率 26%), 2)将化合物 39 (50 mg, 0.093 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸 ( lmL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓縮至干， 通过 Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED 1007-59 ( 10 mg, 产率 24%)。
分子式: C25H21N702, 分子量 :451.48
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.596 (d, J=4.0 Hz, 1H)， 8.384 (s, 1H), 8.061-8.124 (m， 3H)， 7.900 (d, J=8.8 Hz, 1H)， 7.624-7.703 (m， 3H)， 7.295 (d, J=4.4 Hz, 1H), 3.884 (s, 3H)， 2.293 (s， 1H)， 1.187 (s, 1H), 0.377-0.469 (m， 4H).
MS (m/z):MS (ESI) m/z: 452 [M+1J+ 实施例 27 4- (6- (6- (环丙基氣基） -9H-嘌呤 -2-基氨基）喹 (# "基）间苯甲酸甲
Figure imgf000041_0001
ΙΝΤΑ-16 INTB-2 40 ME01007-60
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-16 ( 100 mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入 化合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36 mmol)>醋酸钯（8 mg, 0.036 mmol), BINAP (22 mg, 0.036 mmol)和磷酸钾（152 mg, 0.72 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 ) 纯化得到棕色固体化合物 40 (50mg， 产率 26%)。
2)将化合物 40 (50mg, 0.093mmol) 溶解在二氯甲垸 （4 mL) 和三氟乙酸 ( lmL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED 1007-60 ( llmg, 产率 26%)。
分子式: C25H21N702， 分子量 :451.48 1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.599 (d， J=4.8 Hz, IH), 8.352 (s， 1H)， 8.070-8.132 (m， 3H), 7.907 (d, J=8.8 Hz, 1H)， 7.592-7.772 (m， 3H), 7.290 (d, J=4.4 Hz, IH), 3.836 (s, 3H)， 2.346 (s, 1H)， 1.188 (s， 1H)， 0.386-0.506 (m， 4H)
MS (ESI) m/z: 452 [M+l]+ 实施例 28 N6-环丙基 -N2- (4- (3-甲氧基苯基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺 的制备
Figure imgf000042_0001
ΙΝΤΑ-10 ΙΝΤΒ-2 41 MED1007-61 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-10 (90mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36 mmol),醋酸钯（8 mg， 0.036 mmol)、 BINAP (22 mg, 0.036 mmol)和磷酸钾（ 152 mg, 0.72 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 ) 纯化得到棕色固体化合物 41 (60mg， 产率 30%)。
2)将化合物 41 ( 60mg， 0.12mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸（ lmL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC (二 氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-61 ( 10mg, 产率 24%)。
分子式: C24H21N70， 分子量 :423.47
^ MR (400 MHz, CD30D): δ 8.659 (d, J=2.8Hz, 2H), 8.112 (d, J=9.2 Hz, 1H)， 7.978 (d, J=9.2 Hz, 1H)， 7.822 (s, IH), 7.467 (t, J-8.0 Hz, 1H)， 7.360 (d, J=8.4 Hz, IH), 7.158 (d, J=7.6 Hz, 2H)， 7.085 (d， J=8.4 Hz, IH), 3.869 (s， 3H), 3.365 (s, IH), 2.429 (s, 1H),0.479-0.618 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 424 [M+l]+ 实施例 29 N6-环丙基 -N2- (4- (4-甲氧基苯基） 喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺
Figure imgf000043_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1)将化合物 INTA-8 (90mg, 0.36 mmol) 溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36 mmol)、醋酸钯（8 mg， 0.036 mmol), BINAP (22 mg, 0.036 mmol)和磷酸钾 （ 152 mg， 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 ) 纯化得到棕色固体化合物 42 (50mg， 产率 27.5%)。
2)将化合物 42 (50mg, O.lmmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸（ lmL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC (二 氯甲垸： 甲醇 =10: 1 )纯化， 得到黄色固体 MED 1007-63 (20mg, 产率 47.6%)。
分子式: C24H21N70， 分子量 :423.47
!H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.684 (s, 1H)， δ 8.647 (d， J=4.4Hz， 1H), 8.093 (d, 5=9.2 Hz, 1H)， 7.977 (d, J=8.8 Hz, 1H)， 7.824 (s, 1H), 7.562 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.350 (d， J=8.4 Hz, 1H)， 7.137 (d, J=7.6 Hz, 2H), 3.918 (s， 3H)， 2.437 (s， 1H)， 0.479-0.601 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 424 [M+l]+. -环丙基 -N2- (4- (3-氟苯基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺的制备
Figure imgf000043_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-11 (86 mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯（3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36 mmol )、醋酸钯（ 8 mg, 0.036 mmol )、 BINAP ( 22 mg, 0.036 mmol) 和磷酸钾 （ 152 mg， 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓缩，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 43 (30 mg， 产率 16.8%)。
2)将化合物 43 (30 mg, 0.06 mmol)溶解在二氯甲垸 （4 mL)和三氟乙酸 ( lmL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED 1007-64 (7 mg, 产率 28.4%)。
分子式 :C23H18FN7， 分子量 :411.43
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.698 (d, J=4.4Hz, 1H), δ 8.502 (s， 1H)， δ 8.225 (d, J=9.6Hz, 1H), 8.008 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.611 (q, Jl=14.0 Hz, J2=7.2 Hz, 1H)， 7.446 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.368-7.399 (m, 2H)， 7.293 (t， J=8.8 Hz, 1H), 2.481-2.512 (m, 1H)， 0.527-0.674 (m， 4H).
MS (ESI) m/z: 412 [M+l]+. 实施例 31 N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9- (2，2，2-三氟乙基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺的制备
Figure imgf000044_0001
MED1007-65
ΙΝΤΑ-1 ΙΝΤΒ-7
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
将化合物 INTA-1 (79.2 mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯（3 mL) 中， 加入化合 物 INTB-7 ( 105 mg, 0.36 mmol). 醋酸钯（8mg， 0.036 mmol)、 BINAP (22mg, 0.036mmol)和磷酸钾 （ 152mg， 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待 冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并浓 缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 和 Pre-HPLC纯化得到粉红色固体化 合物 MED1007-65 (40 mg, 产率 23.4%)。
分子式: C25H2。F3N7， 分子量 :475
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.858 (s, 1H), δ 8.680 (d， J=4.4Hz， 1H), 7.976 (dd, Jl=9.2 Hz, J2=16.4 Hz, 2H), 7.856 (s， 1H), 7.551-7.600 (m， 5H)， 7.362 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.661 (dd, Jl=8.8 Hz, J2=17.6 Hz, 2H)， 2.593 (s， 1H), 0.536-0.691 (m， 4H).
MS (ESI) m/z: 476.3 [M+l]+.
N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9- (哌啶 -4-基） -9H-嘌呤 -2，6-
Figure imgf000045_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-1 (56mg, 0.25mmol)、化合物 INTB-8 C lOOmg, 0.25mmol)> 醋酸钯（10mg， 0.045 mmol)、 Binap (30mg， 0.048 mmol) 和磷酸钾 （230 mg, 1.08mmo l)溶解在甲苯 （lOmL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至 室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯：甲醇 =8: 1 )纯化得到棕色固体化合物 3 (50 mg，产率 38%)。
2)将化合物 44 (55 mg, 0.095 mmol)溶解在二氯甲垸 （4 mL)和三氟乙酸 (2mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED1007-66 ( 15 mg, 产率 33%)。
分子式: C28H28N8， 分子量 :476.58
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s， 1H)， 8.377 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.963 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.875 (s， 1H)， 7.761 (d， J=8.8 Hz, 1H), 6.846 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.556-5.586 (m, 1H), 3.193-3.209 (m， 4H), 3.086-3.096 (m, 4H), 1.379 (d， J=6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 394.3 [M+l]+. N6- (3-甲氧基丙基） -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的
Figure imgf000046_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 ( 68mg， 0.307mmol )、 化合物 INTB-9 ( lOOmg, 0.307mmol)、 醋酸钯（ 10mg， 0.045 mmol)、 Binap (30mg， 0.048 mmol)和磷酸 钾 （250 mg, 1.17mmo 1)溶解在甲苯 （lOmL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过 夜。待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过 滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =25: 1 ) 纯化得到棕色固体化合物 45
(50 mg, 产率 31.9%)。
2)将化合物 45 (50 mg, 0.098 mmol)溶解在二氯甲烷 （4 mL)和三氟乙酸 (2mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED1007-67 ( 16mg， 产率 38.4%)。
分子式: C24H23N70， 分子量 :425.49
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s， 1H)， 8.377 (d， J=5.2 Hz, 1H), 7.963 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.875 (s， 1H), 7.761 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.846 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.556-5.586 (m, 1H), 3.193-3.209 (m， 4H), 3.086-3.096 (m, 4H), 1.379 (d， J=6.0 Hz, 6H)
MS (ESI) m/z: 426.3 [M+l]+ 实施例 34 N6- (2-甲氧基乙基） -N2- (4-苯基喹啉 -6-S) -9H-嘌呤 -2,6-二胺的制备
Figure imgf000046_0002
INTA-1 INTB-10 46 MED1007-68 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 (79 mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯（3 mL) 中， 加入化合 物 INTB-10 ( 112 mg, 0.36薩 ol)、 醋酸钯（8 mg, 0.036 mmol), BINAP (22 mg, 0.036 mmol) 和磷酸钾 （ 152 mg, 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 )纯化得到棕色固体化合物 46 (45mg, 产率 25%)。
2)将化合物 46 (45 mg, 0.091 mmol)溶解在二氯甲垸 （4 mL)和三氟乙酸 ( lmL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓縮至干， 通过
Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED 1007-68 ( lO mg, 产率 27% )。
分子式: C23H2IN70， 分子量 :411.46
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.445 (s, 1Η)， 8.761 (d, J=4.0 Hz, 2H), 8.410 (s, 1H)， 7.956-8.227 (m, 3H)， 7.384-7.607 (m， 7H), 3.289-3.441 (m, 7H).
MS (ESI) m/z: 412.2 [M+l]+. 实施例 35 2- (2- (4-苯基喹啉 -6-基氨基） -9H-嘌呤 -6-基氨基） 乙醇的制备
Figure imgf000047_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
将化合物 INTA-1 ( 100 mg, 0.45 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化合 物 INTB-11 ( 136 mg, 0.45 mmol), 醋酸钯（ 10 mg， 0.045 mmol)、 BINAP (30 mg, 0.045 mmol)和磷酸钾（240 mg, 0.9 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓縮，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 47 (70mg, 产率 33%)。 将化合物 47 (70mg, 0.15mmol)溶解在二氯甲烷（4 mL)和三氟乙酸（lmL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC (二 氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-69 (30mg, 产率 52%)。
分子式: C22H19N70， 分子量 :397
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.695 (d， J=4.4Hz, IH), δ 8.452 (s， IH), 8.091 (d, J=10.4Hz, IH), 8.004 (d， J=9.2 Hz, IH), 7.819 (s, 1H)， 7.549-7.629 (m, 5H), 7.392(d, J-4.8 Hz, IH), 3.624-3.648 (m, 2H), 3.366 (m， 2H).
MS (ESI) m/z: 398.4 [M+l]+. - (2-氨乙基 1) -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的制备
Figure imgf000048_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 ( 100 mg, 0.45 mmol)溶解在甲苯（3mL)中， 加入化合 物 INTB-11 ( 180 mg, 0.45 mmol)、 醋酸钯（ 10 mg， 0.045 mmol)、 BINAP (30 mg, 0.045 mmol)和磷酸钾（240 mg, 0.9 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓縮，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 48 (50 mg， 产率 19.1%)。
2)将化合物 48 (50 mg, 0.09 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸（1 mL)的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC
(二氯甲垸：甲醇 =10: 1 )纯化，得到黄色固体 MED1007-70(20 mg，产率 58.8%)。
分子式: C22H2。N8, 分子量 :396
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.981 (d， J=5.2Hz, IH), δ 8.597-8.649 (m， 2H), 8.377 (s, IH), 8.242 (d, J=9.6 Hz, IH), 7.921 (d， J=6.0 Hz, IH), 7.721-7.784 (m， 5H)， 3.664 (m， 2H), 3.817 (t, J-5.2 Hz, 2H).
MS (ESI) m/z: 397.3 [M+l]+. 6-环丁基 -N2- (4- (3-甲^ ¾苯基） Ptf^6-¾) -9H-嘌呤 -2,6·二胺的制备
Figure imgf000049_0001
INTA-10 INTB-13 49 MED1007-71 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-10 (90 mg, 0.36 mmol) 溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-13 ( 110 mg, 0.36 mmoI)、 醋酸钯（8 mg, 0.036 mmol)、 BINAP (22 mg, 0.036 mmol)和磷酸钾（152 mg, 0.72 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓缩， 经过 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 49 (50 mg, 产率 27%)。
2)将化合物 49 (50 mg, 0.096 mmol)溶解在二氯甲垸 （4 mL) 和三氟乙酸 ( lmL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过
Pre-TLC (二氯甲垸: 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-71 ( 10 mg, 产率 24%)。
分子式: C25H23N70， 分子量 :437.50
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.558 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.409 (s， 1H)， 7.708-8.002 (m, 3H), 7.277-7.414 (m, 2H)， 6.996-7.100 (m, 3H)， 3.759 (s, 3H)， 3.249 (s, 1H)， 2.169-2.200 (m, 2H), 1.803-1.850 (m, 2H)， 4.575-1.649 (m， 2H).
MS (ESI) m/z: 438.3 [M+l]+. 实施例 38 N6-环丁基 -N2- (4- (4-氟苯基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的制备
Figure imgf000049_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-12 ( 107 mg， 0.45 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-13 ( 138.6 mg, 0.45 mmol)、醋酸钯（10 mg， 0.045 mmol)、BINAP (30 mg, 0.045 mmol)和磷酸钾（240 mg， 0.9 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 )纯化得到棕色固体化合物 50 (60 mg, 产率 26.1%)。
2)将化合物 50 (60 mg, 0.12 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸（1 mL)的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC
(二氯甲垸：甲醇 =10: 1 )纯化，得到黄色固体 MED1007-72( 10 mg,产率 20.1%)。
分子式: C24H2GFN7， 分子量 :425
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.563 (d, J=4.4Hz, 1H), δ 8.298 (s， 1H), 8.062 (d， J=8.0 Hz, 1H)， 7.914 (d， J=9.2 Hz, 1H), 7.732 (s, 1H)， 7.581-7.621 (m， 2H), 7.258-7.318 (m, 3H), 4.218 (t， J=7.2 Hz, 1H)， 2.218-2.251 (m, 2H)， 1.865-1.895 (m, 2H)， 1.656-1.684 (m， 2H).
MS (ESI) m/z: 246.3 [M+l]+.
Figure imgf000050_0001
1)将化合物 INTA-1 (71 mg, 0.32 mmol), 化合物 INTB-14 ( 100 mg, 0.32 mmol)、醋酸钯（ 10 mg， 0.045 mmol). Binap (30mg， 0.048 mmol)和磷酸钾（250 mg, 1.17 mmol)溶解在甲苯（lO mL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =10: 1 ) 纯化得到棕色固体化合物 51 (45 mg, 产 率 28.4%)。
2)将化合物 51 (45 mg, 0.091mmol)溶解在二氯甲烷（4 mL)和三氟乙酸（2 mL ) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过 Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED1007-73 ( 14 mg, 产率 37.4%)。 分子式: C23H21N70， 分子量 :411.46
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s, 1H)， 8.377 (d， J=5.2 Hz, IH), 7.963 (d， J=8.8 Hz, IH), 7.875 (s, IH), 7.761 (d, J=8.8 Hz, 1H)， 6.846 (d, J=5.2 Hz, IH), 5.556-5.586 (m， IH), 3.193-3.209 (m, 4H), 3.086-3.096 (m， 4H), 1.379 (d, J=6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 412.4 [M+l]+. 实施例 40 N6-环丁基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） - 9H-嘌吟 -2，6-二胺的制备
Figure imgf000051_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 (72 mg, 0.32 mmol)、 化合物 INTB-13 ( 100 mg, 0.32 mmol)、醋酸钯（ 10 mg， 0.045 mmol), Binap (30 mg , 0.048 mmol)和磷酸钾（250 mg， 1.17 mmol)溶解在甲苯（lO mL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =30: 1 )纯化得到棕色固体化合物 52 (45 mg, 产 率 28.6%) o
2)将化合物 52 (45 mg, 0.091mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL)和三氟乙酸（2 mL ) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过 Pre-HPLC纯化， 得到黄色固体 MED 1007-75 ( 15 mg, 产率 40.5%)。
分子式: C24H21N7， 分子量 :407.47
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.445 (s, IH), 8.377 (d, J 5.2 Hz, 1H)， 7.963 (d, J=8.8 Hz, IH), 7.875 (s, 1H)， 7.761 (d, J=8.8 Hz, IH), 6.846 (d, J=5.2 Hz, 1H)， 5.556-5.586 (m, IH), 3.193-3.209 (m， 4H), 3.086-3.096 (m， 4H), 1.379 (d, J=6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 408.4 [M+l]+. 实施例 41 N6-环丙基 -N2- (4- (3-乙氧基苯基）喹啉 -6-基） -9H-嘌昤 -2，6-二 胺的制备
Figure imgf000052_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-17 ( 198 mg， 0.749 mmol )、 化合物 INTB-2 (200 mg, 0.473 mmol),醋酸钯（ 15 mg, 0.068 mmol), Binap (30 mg， 0.064 mmol)和磷酸钾（500 mg, 2.24 mmol)溶解在甲苯 （15 mL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =20: 1 ) 纯化得到黄色固体化合物 53 (60 mg, 产 率 44%)。
2)将化合物 53 (60 mg, 0.115 mmol)溶解在用盐酸饱和的甲醇（10 mL)中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过 Pre-HPLC纯化， 得到黄色 固体 MED1007-83 (9 mg， 产率 17.8%)。
分子式: C25H23N70, 分子量 :437.5
^-NMR (400 MHz, DMSO 8.445 (s， 1H)， 8.377 (d， J=5.2 Hz, 1H), 7.963 (d， J=8.8 Hz, 1H), 7.875 (s， 1H)， 7.761 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.846 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.556-5.586 (m， 1H), 3.193-3.209 (m, 4H), 3.086-3.096 (m， 4H)， 1.379 (d, J=6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 438.4 [M+l]+.
Figure imgf000052_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-13 ( 119 mg, 0.45 mmol)溶解在甲苯（3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 132 mg, 0.45 ol、醋酸钯（ 10 mg 0.045 mmol)、 BINAP (30 mg, 0.045 mmol)和磷酸钾 （240 mg, 0.9 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待 冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并浓 缩，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 54 ( 100 mg 产率 42.6%)。
2)将化合物 54 (60 mg, 0.125 mmol)溶解在 2 N的盐酸甲醇（5 mL)中。将 得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC (二氯甲垸：甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-84 ( 15 mg)0
分子式: C25H23N702， 分子量 :453.5
'H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.686 (s, IH), 8.518 (d J-4.4 Hz, IH), δ 7.944 (d, J=8.4 Hz, 1H 7.850 (d, J-8.4 Hz, IH), 7.720 (s IH), 7.243 (d, J=4.0 Hz, 1H 7.020-7.092 (m 3H 3.828 (s, 3H), 3.753 (s, 3H),3.222 (s 3H 2.350 (s, 1H),1.184 (s IH), 0.358-0.471 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 454.3 [M+l]+. 实施例 43 N2- (4- (苯并 [1 3]间二氧杂环戊烯 -5-基）喹啉 -6-基） -N6-环丙垸 -9H-嘌呤 -2 6-二胺的制备
Figure imgf000053_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-9 ( 119 mg, 0.45 mmol)溶解在甲苯（3mL) 中， 加入化合 物 INTB-2 ( 132 mg, 0.45 mmol、 醋酸钯（ 10 mg 0.045 mmol), BINAP (30 mg, 0.045 mmol)和磷酸钾 （ 240 mg 0.9 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待 冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并浓 縮， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 55 100 mg 产率 42.6%)。
2)将化合物 55 (60 mg, 0.125 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL) 和 三氟乙酸 ( 1 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓縮至干， 通过 Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED 1007-85 (35 mg, 产率 41.8%)。
分子式: C23H19N7， 分子量 :437
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.647 (d, J=2.8 Hz, 2H)， δ 8.138 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.978 (d， J=9.2 Hz, 1H), 7.833 (s， 1H), 7.358 (d, J=4.4 Hz, 1H), 7.023-7.123 (m, 3H)， 6.096 (s， 2H), 2.577-2.593 (m， 1H), 0.533-0.689 (m， 4H).
MS (ESI) m/z: 438.4 [M+l]+. 实施例 44 N6-环丙基 -N2- (4- (2-甲氧基苯基） 喹啉 -6-基） - 9H-嘌呤 -2,6-二 胺的制备
Figure imgf000054_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-18 (90 mg, 0.36 mmol) 溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36匪 ol)、醋酸钯（8 mg, 0.036匪 ol)、 BINAP (22 mg, 0.036 mmol) 和磷酸钾 （ 152 mg, 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓缩，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 56 (50 mg， 产率 27.5%)。
2)将化合物 56 (50 mg, O.lmmol)溶解在二氯甲垸（4 mL) 和三氟乙酸（1 mL)的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩至干，通过 Pre-TLC
(二氯甲垸：甲醇 =10: 1 )纯化，得到黄色固体 MED1007-86(30 mg，产率 71.4%)。
分子式: C24H21N70， 分子量 :423
1H-NMR (400 MHz, CD30D): 5 8.658 (d， J=4.4Hz, 1Η)， δ 8.223 (d, 3=9.2 Hz, IH), 8.144 (s IH), 7.969 (d J=9.2 Hz, 1H 7.811 (s, 1H 7.524 (t J=8.0 Hz, 1H 7.319-7.342 (m, 2H 7.176 (d, J=17.2 Hz, 1H 7.136 (t, J=7.2 Hz, IH), 3.739 (s 3H), 2.443 (s 1H 0.489-0.697 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 424.2 [M+l]+. 实施例 45 N6-环丙基 -N2- (4- (2- (甲硫基）苯基）喹啉 -6-基） - 9H-嘌呤 -2,6-
Figure imgf000055_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-19 (96 mg, 0.36 mmol)溶解在甲苯 （3 mL) 中， 加入化 合物 INTB-2 ( 105 mg, 0.36 ol)、醋酸钯（8 mg, 0.036 mmol BINAP (22 mg, 0.036 mmol) 和磷酸钾 （ 152 mg 0.72 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓縮，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 57 (60 mg 产率 32%)。
2)将化合物 57 (60 mg, 0.11 mmol)溶解在二氯甲垸（4 mL) 和 三氟乙酸 ( 1 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓縮至干， 通过
Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-87 (30mg 产率 59.5%)。
分子式: C24H21N7S， 分子量 :440
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 12.339 (s, IH), 9.244 (s, IH), 8.676 (d J=4.0Hz, 1H 8.268-8.293 (m 1H 7.798-8.010 (m 3H), 7.425-7.526 (m, 3H 7.210-7.321 (m 3H), 2.332 (s 3H), 2.286 (b 1H 0.423-0.523 (m 4H).
MS (ESI) m/z:440.2 [M+l]+. 实施例 46 N6-环丙基 -N2- (4- (3- (甲硫基）苯基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6- 二胺的制备
Figure imgf000056_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-20 ( 181 mg, 0.68 mmol), 化合物 INTB-2 (200 mg, 0.68 mmol),醋酸钯（15 mg, 0.068 mmol), Binap (30 mg， 0.064 mmol)和磷酸钾（500 mg, 2.24 mmol)溶解在甲苯（15 mL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷 却至室温后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =20: 1 ) 纯化得到黄色固体化合物 58 (80 mg, 产 率 24%)。
2)将化合物 58 (80 mg, 0.115 mmol)溶解在用盐酸饱和的甲醇溶液（10 mL) 中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过 Pre-HPLC纯化， 得到 黄色固体 MED 1007-88 (21mg, 产率 35%)。
分子式: C24H21N7S， 分子量 :439.1
^-NMR (400 MHz, DMSO 0.449 (d, J=7.2 Hz，4H), 2.330-2.433 (m， 1H), 2.535 (s, 3H), 7.422-7.655 (m, 4H)， 8.154 (d， J=2.4 Hz, 1H), 8.277-8.423 (m, 2H), 8.667 (m, 1H)， 8.914 (d， J= 1.8Hz, 1H)， 9.912-9.924 (m, 1H).
MS (m/z):MS (ESI) m/z: 440 [M+l]+. 实施例 47 N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二铵盐二水合」
Figure imgf000056_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
将甲磺酸（52 mg 0.51mmol) 随乙醇（4 mL)和水 （滴加）， 加入到化合物 MED1007-31 (50 mg, 0.127 mmol) 的溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过 夜。过滤沉淀并用乙醇和乙酸乙酯洗涤，得到黄色固体 MED1007-91 (35 mg,产 率 44%)。
分子式: C25H33N708S2， 分子量 :624
^-NMR (400 MHz, CD30D): δ 9.038 (d, J-5.6 Hz, 1H 6 8.062-8.657 (m, 3H 8.281 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.963 (d, J=5.6 Hz, 1H 7.700-7.782 (m, 5H), 2.737 (s, 6H), 2.419 (b 1H), 0.609-0.709 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 394.3 [M+l]+. 48 N- (6-环丁基 -9H-嘌呤 -2-基） 喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000057_0001
Ι ΤΑ-4 ΙΝΤΒ-15 59 MED1007-97 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 ΙΝΤΑ-4 (93 mg, 0.65 mmol)溶解在甲苯 （20 mL) 中， 加入化 合物 INTB-15 (200 mg, 0.65 mmol)、醋酸钯（ 15 mg 0.065 ol)、 BINAP (45 mg, 0.065 mmol)和磷酸钾（512 mg, 1.95 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤并 浓缩，经 Pre-TLC (乙酸乙酯：甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 59 ( 190mg 产率 70%)。
2)将化合物 59 ( 190 mg 0.46 mmol)溶解在甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 加水稀释混合物并用 乙酸乙酯萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤。合并的有机相经硫酸钠干燥，浓缩至干， 通过 Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 )纯化得到黄色固体 MED1007-97 (70 mg, 产率 46%)。
分子式: C18H16N60， 分子量 :332.36 Ή-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.669 (d J=2.4 Hz, 2H), 8.241 (d, J=8 Hz, 1H): 8.021 (s, 1H 7.958 (m, 2H), 7.484 (m, 1H 5,551 (m, 1H 2.619 (m, 2H), 2.324 (m: 2H), 1.878 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 333.3 [M+l]+. 实施例 49 N- (6-环丁基 -9H-嘌呤 -2-基） -4-苯基喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000058_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 ( 142 mg, 0.487 mmol)溶解在甲苯（3 mL) 中。 加入化 合物 INTB-15 (200 mg, 0.487 mmol)、醋酸钯（ 15 mg 0.049 ol BINAP (45 mg, 0.049mmol)和磷酸钾（360 mg 1.46 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓缩，经 Pre-TLC (乙酸乙酯：甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 60 ( 100 mg 产率 41.6 %)。
2)将化合物 60 ( lOO mg, 0.2 mmol)溶解在二氯甲烷（4 mL)和三氟乙酸（1 mL)的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜， 浓缩至干， 经 Pre-TLC
(二氯甲垸：甲醇 =10: 1 )纯化得到黄色固体 MED1007-98 (50 mg，产率 61.3%)。
分子式: C24H21N70， 分子量 :408
1H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 8.718 (d, J=4.8Hz, 1H δ 8.509 (d, J=2.4 Hz, 1H),7.967-8.108 (m, 3H 7.560-7.682 (m, 5H 7.425 (d J=4.8Hz,lH), 4.830-4.866 (m, 1H 2.309-2.372 (m 2H), 2.105-2.155 (m 2H), 1.619-1.811(m 2H).
MS (ESI) m/z: 409.5 [M+l]+. 实施例 50 N6- (环戊基甲基） -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的 制备
Figure imgf000059_0001
b， MED1007-99 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)室温下向化合物 SM-10 (375 mg, 2.78 mmol)和化合物 2 (600 mg, 2.32 mmol) 的四氢呋喃 （30 ml) 溶液中加入 DIPEA (900 mg， 6.95 mmol)。 混合物 在 50'C搅拌 12小时， 用乙酸乙酯萃取、 水和盐水洗涤、 硫酸钠干燥。 过滤并浓 缩得到黄色固体化合物 INTB-16 (700 mg, 产率 90 %)。
2)将化合物 INTA-1 ( 100 mg, 0.45 mmol)溶解在甲苯（20 mL) 中， 加入化 合物 INTB-16 ( 184 mg, 0.55 mmol )、 醋酸钯（20 mg, 0.09 mmol)、 BINAP (56 mg, 0.09 mmol)和磷酸钾（328 mg， 1.35 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。 待冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并 浓縮，经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 61 (90 mg， 产率 38 %)。
3)将化合物 61 (90 mg, 0.17 mmol)溶解在甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 加水稀释混合物并用 乙酸乙酯萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤。合并的有机相经硫酸钠干燥，浓缩至干， 通过 Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 )纯化得到黄色固体 MED1007-99 (50 mg， 产率 68%)。
分子式: C26H25N7, 分子量 :435.52
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.319 (s, 1H)， 9.109 (d， J=5.6 Hz, 1H), 8.997 (s， 1H), 8.882 (s， 1H)， 8.544 (s， 2H), 8.393 (d, J=10 Hz, 1H), 7.900 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.679 (m， 5H)， 3.092 (s， 2H), 2.049 (m, 1H), 1.671 (m， 2H)， 1.491 (m， 4H)， 1.167 (M, 2H).
MS (ESI) m/z: 436.5 [M+l]+. 实施例 51 N6-异丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺的制备
Figure imgf000060_0001
INTA-1 62 MED1007-101 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 (220 mg, 1 mmol)溶解在甲苯 （15 mL) 中， 加入化合 物 INTB-17 (295 mg, 1 mmol),醋酸钯（45 mg, 0.2 mmol). BINAP ( 124 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾 （630 mg, 3 mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至 室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 )纯化得到棕色固体化合物 62 (300 mg, 产率 62 %)。
2)将化合物 62 (300 mg, 0.62 mmol)溶解在甲醇 （10 mL)和 4N盐酸甲醇 ( lO mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干燥 滤饼得到化合物 MED1007-101 ( 150 mg， 产率 60%)。
分子式: C23H21N7, 分子量 :395.46
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.427 (s, 1Η)， 9.119 (d， J=5.6 Hz, 1H)， 9.026 (s， 1H)， 8.920 (s, 1H)， 8.591 (s， 1H)， 8.514 (m， 2H), 7.991 (d， J=5.6 Hz, 1H)， 7.741 (m， 5H), 3.651 (s， 1H), 1.071 (d, J=6.4 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 396.4 [M+l]+.
Figure imgf000060_0002
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤: 1)将化合物 INTA-1 (220mg, lmmol),化合物 INTB-18 (307mg, lmmol)、 醋酸钯（44.8mg， 0.2mmol)、 Binap ( 124.4mg, 0.2mmol)、 磷酸钾 （789 mg， 3 mmol)溶解于甲苯（15mL)中。将得到的混合物搅拌回流过夜。冷却至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 并用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 通过 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =20:1 )纯化， 得到黄色固体化合物 63 (80 mg, 产率： 47 %)。
2)将化合物 63 (80mg) 溶解于用 HC1饱和的甲醇 （10mL) 中。 将得到的 混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩至干， 通过 Pre-HPLC 纯化， 得到黄色固体 MED1007-103 (40 mg, 产率 56%)。
分子式： C24H21N7S， 分子量： 407
'H-NMR: 1H-NMR (400 MHz, DMSO 1.649-1.899 (m, 4H)， 2.867 (t, 2H), 3.941 (s， 2H), 7.621-7.737 (m， 6H)， 8.133 (s 1H)， 8.244(s, 2H), 8.766 (s， 1H), 8.985 (d, J= 4.8Hz, 1H)， 9.940-9.948 (m， 1H)
MS (ESI) m/z: MS (ESI) m/z: 408 [M+l]+
Figure imgf000061_0001
MED1007-34 MED1007-104 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-4 ( 144 mg, 1 mmol)、 化合物 INTB-1 (296 mg, 1 mmol)、 醋酸钯（44.8 mg, 0.2 mmol)、 Binap ( 124.4 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾（789 mg, 3 mmol)溶解在甲苯（15 mL)中。将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至室温 后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓縮，经 Pre-TLC
(乙酸乙酯:甲醇 =20:1 ) 纯化得到黄色固体化合物 8 ( 80 mg， 产率 49 %)。
2)将化合物 8 ( 80 mg) 溶解在用氯化氢饱和的甲醇 （10 mL) 中， 将得到的 混合物在室温下搅拌过夜， 浓缩至干， 经 Pre-HPLC 纯化得到黄色固体 MED1007-34 (40 mg)。 3)将化合物 MED1007-34 (40 mg)溶解在乙醇和 2滴水中， 室温下缓慢滴 加 B搅拌过夜。 过滤并浓缩得到黄色固体化合物 MED1007-104 (29 mg, 产率 68 %)。
分子式: C24H21N7S， 分子量 :512
!H-NMR (400 MHz, DMSO 1.499(d, J=6 Hz,6H), 2.505 (m， 6H)， 5.674 (t， IH), 8.011 (dd， J=8.0 Hz, 1H)， 8.217 (d， J=8.8 Hz, 1H)， 8.327-8.351 (m, 1H)， 8.749 (s, IH), 8.900 (s， IH), 8.977 (d， J=8.8 Hz 1H)， 9.096 (d， J=4.8 Hz IH), 10.396 (s, IH).
MS (ESI) m/z: 321 [M+l]+. 实施例 54 N- (6- (戊基 -3-基氧基） -9H-嘌呤 -2-基） -4-苯基喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000062_0001
INTB-19 INTA-1 64 MED1007-105 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-1 (220 mg, 1 mmol) 溶解在甲苯 （15 mL) 中， 加入化 合物 INTB-19 (322 mg， 1 mmol)、 醋酸钯（45 mg， 0.2 mmol)、 BINAP ( 124 mg， 0.2 mmol)和磷酸钾（630 mg， 3 mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却 至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯:甲醇 =15:1 )纯化得到棕色固体化合物 64 (280 mg, 产率 55 %)。
2)将化合物 64 (280 mg, 0.55 mmol)溶解在甲醇（10 mL)和 4N盐酸甲醇 ( lO mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜， 过滤， 真空干燥 滤饼得到化合物 MED1007-105 ( 140 mg, 产率 60%)。
分子式: C25H24N60， 分子量 :424.50
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.712 (s, 1H)， 9.607 (s, IH), 8.748 (d， J=4 Hz, IH), 8.315 (d, J=8 Hz, IH), 8.181 (s， 1H)， 8.006 (m, 2H), 7.618 (m， 5H)， 7.350 (d， J=4.8 Hz, 1H)， 5.049 (m， 1H)， 1.630 (m， 4H)， 0.847 (m, 6H). MS (ESI) m/z: 425.4 [M+l]+.
Figure imgf000063_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤:
1 )将化合物 INTA-1 (220 mg， 1 mmol), INTB-20 (321 mg， 1 mmol), 醋酸钯（44.8 mg， 0.2 mmol )、 Binap ( 124.4 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾 （789 mg，3 mmol)溶解在甲苯（15 mL) 中。 将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至室温 后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓縮，经 Pre-TLC
(乙酸乙酯:甲醇 =20:1 ) 纯化得到黄色固体化合物 65 (40 mg, 产率 29 %)。
2)将化合物 65 (40 mg)溶解在用氯化氢饱和的甲醇 UO mL) 中， 将得到 的混合物在室温下搅拌过夜， 浓缩至干， 经 Pre-HPLC 纯化得到黄色固体 MED1007-106 ( 19 mg， 产率 42 %)。
分子式: C24H21N7S， 分子量 :420
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.176-1.777 (m， 8H)， 3.936-4.021 (m, 1H)， 7.568-7.828 (m, 8H), 8.151 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.348-8.443 (m, 3H), 8.950 (d, J= 4.8Hz, 1H), 9.898 (s, 1H).
MS (ESI) m/z: 421 [M+l]+. 实施例 56 N- (6- (环已氧基） -9H-嘌呤 -2-基） -4-苯基喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000063_0002
INTA-1 INTB-21 66 MED丽 -107 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-1 (220 mg， 1 mmol)、化合物 INTB-21 (420 mg, 1 mmol)、 醋酸钯（44.8 mg, 0.2 mmol). Binap ( 124.4 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾（789 mg, 3 mmol)溶解在甲苯（15 mL) 中。将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至室温 后，加入乙酸乙酯和水。分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤并浓縮，经 Pre-TLC
(乙酸乙酯： 甲醇 =20: 1 ) 纯化得到黄色固体化合物 66 ( 100 mg， 产率 49 %)。
2)将化合物 66 ( 100 mg) 溶解在用氯化氢饱和的甲醇 （10 mL) 中， 将得 到的混合物在室温下搅拌过夜， 浓缩至干， 经 Pre-HPLC 纯化得到黄色固体 MED1007-107 (60 mg, 产率 58 %)。
分子式: C24H21N7S; 分子量 :436
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1.181-1.986 (m，10H)， 5.139 (t， 1H), 7.585-7.675 (m, 6H), 8.136-8.325 (m, 2H), 8.510 (s， 1H), 8.532-8.542 (m， 1H), 8.926 (s, 1H),9.861 (s， 1H).
MS (ESI) m/z: 437 [M+l]+. 实施例 57 N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐
Figure imgf000064_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1 )将化合物 INTA-1 (220 mg, 1 mmol)溶解在甲苯 （10 mL) 中， 加入化 合物 2 (296 mg, 1 匪 ol)、 醋酸钯（44.8 mg, 0.2腿 ol)、 BINAP ( 124.4 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾 （636 mg, 3mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却至 室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 纯化得到棕色固体化合物 3 (400 mg, 产率 83%)。
2)将化合物 3 (200 mg, 0.48 mmol)溶解在甲醇（5 mL)和 4N盐酸甲醇（5 mL) 的混合溶液中。 将得到的混合物在室温下搅拌过夜。 加水稀释混合物， 用 乙酸乙酯萃取、 碳酸氢钠和盐水洗涤。 合并的有机相用硫酸钠干燥， 浓缩至干， 经 Pre-TLC (二氯甲烷：甲醇 =10: 1 )纯化得到棕色固体化合物 MED1007-51 140 mg, 产率 73%) 。
3)将化合物 MED1007-51 ( 140 mg, 0.35 mmol)溶解在乙醇（5 mL)和水的 混合溶液中， 0°C时加入甲磺酸（ 152 mg, 1.69 mmol)。 将得到的混合物在室温下 搅拌过夜并过滤，真空干燥滤饼得到化合物 MED1007-108 ( 100 mg,产率 45%)。
分子式: C23H2GN60 2CH3S03H'2H20， 分子量 :396.44
^-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.193 (s， IH), 9.046 (d， J=5.6Hz, IH), 8.679 (m， 2H), 8.304 (d, J=10Hz， IH), 7.988 (d, J=6Hz, IH), 7.745 (m, 5H), 5.355 (m， IH), 2.727 (s, 6H), 1.401 (d, J=6Hz, 6H).
MS (ESI) m/z:397.2 [M+l]+. -(6-吗啉 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺的制备
Figure imgf000065_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 ( lOOmg, 45mmol) 溶解于甲苯 （10 mL) 中， 并加入 化合物 INTB-22 ( 146mg, 0.45mmol)、醋酸钯（20mg， 0.1mmol) BINAP (56mg， O.lmmol), K3P04 (355mg, 1.35mmol)。将得到的混合物搅拌回流过夜。冷却至 室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 无水硫酸钠干燥。 过滤并浓縮， 得到 通过 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15:1 ) 纯化， 得到棕色固体化合物 67 ( 180mg， 产率： 78 %) 。
2)将化合物 67( 180mg, 0.35mmol)溶解于甲醇（5mL)和 4N的盐酸甲醇（5mL) 的混合溶液中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜。混合物用水稀释并用乙酸乙 酯萃取， 使用碳酸氢钠和盐水洗涤。硫酸钠干燥合并的有机相。浓缩至干， 通过 Pre-TLC (二氯甲垸： 甲醇 =10:1 ) 纯化， 得到黄色固体 MED1007-109 ( 100mg， 产率： 66%)。
分子式： C24H21N70; 分子量： 423.47。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.077 (b， 1H), 9.067 (d, J=2Hz, 1H)， 8.566 (s， 1H), 8.466 (s， 2H), 8.183 (b， 1H)， 7.887 (d, J=5.6 Hz, 1H)， 7.693 (m, 5H), 3.863 (b， 4H), 3.587 (d， J=4 Hz, 4H)
MS (ESI) m/z: 424.4 [M+l]+ 实施例 59 -(6-吗啉 -9H-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐的制备
Figure imgf000066_0001
本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
将化合物 MED1007-109 (60 mg，0.14 mmol)溶解在乙醇（5 mL)水的混合溶 液中， 在 0°C条件下， 加入甲磺酸 （40 mg，0.42 mmol)。 得到的混合物在室温下 搅拌过夜，过滤，真空干燥滤饼，得到化合物 MED1007-109S(40 mg,产率 44%)。
分子式： C24H21N70 2CH3S03H.2H20， 分子量： 423.47
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.083 (d， J=5.6Hz, 1H)， 8.671 (d, J=2.4Hz, 1H), 8.473 (m, 2H), 8.325 (d， J=9.2Hz， 1H), 8.000 (d, J=5.6Hz, 1H), 7.755 (m， 5H)， 3.894 (s, 4H)， 3.710 (m， 4H)， 2.746 (s， 6H).
MS (ESI) m/z: 424.5 [M+l]+ 实施例 60 2- (4-苯基喹啉 -6-基氨基） -9H-嘌呤 -6-醇的制备
Figure imgf000067_0001
INTB-1 INTA-1 3 MED1007-110 本实施例化合物的制备方法， 包括下述步骤：
1)将化合物 INTA-1 (220 mg, 1 mmol)溶解在甲苯 （lO mL) 中， 加入化合 物 INTB-1 (296 mg, 1 mmol)、 醋酸钯（44.8 mg， 0.2 mmol)、 BINAP ( 124.4 mg, 0.2 mmol)和磷酸钾 （636 mg， 3mmol)。 将得到的混合物搅拌回流过夜， 待冷却 至室温后， 加入乙酸乙酯和水。 分离有机层， 用无水硫酸钠干燥。 过滤并浓缩， 经 Pre-TLC (乙酸乙酯： 甲醇 =15: 1 ) 纯化得到棕色固体化合物 3 (400 mg, 产 率 83%)。
2)将化合物 3 (200 mg, 0.42 mmol)溶解在二氯甲垸（5 mL) 中， 0°C下时加 入三氟乙酸 （1.5 mD c 将得到的混合物在 35°C下搅拌 30小时。 加水稀释混合 物， 用乙酸乙酯萃取、碳酸氢钠和盐水洗涤。合并的有机相用硫酸钠干燥， 浓缩 至干， 经 Pre-TLC (二氯甲烷： 甲醇 =10: 1 )纯化得到黄色固体 MED1007-110
( 120 mg， 产率 80%)。
分子式: C2cH14N60， 分子量 :354.36
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.551 (b， 1H), 10.822 (b, 1H), 9.559 (b, 1H), 8.818 (d, J=3.2Hz， 1H), 8.090 (m, 9H)， 7.392 (m， 1H).
MS (ESI) m/z: 355.4 [M+l]+. 实施例 61 本发明化合物的体外抗肿瘤细胞增殖研究
通过 CCK-8检测试剂盒， 检测本发明的 12个候选化合物对 3种肿瘤细胞 株 (U87MG、 PC-3、 BT474) 的增殖半数抑制浓度 IC50。 细胞株：
U87MG人恶性胶质母细胞瘤细胞株 （中科院细胞库）
PC-3 人前列腺癌细胞株 （中科院细胞库）
BT474人乳腺癌细胞株 （中科院细胞库） 试剂和耗材：
Cell Counting Kit-8 (Cat# CK04-13 , Dojindo)
96孔培养板 (Cat# 3599, Corning Costar)
胎牛血清 （Cat#10099-141， GIBCO)
培养基 (Invitrogen )
台式酶标仪 SpectraMax M5 Microplate Reader (Molecular Devices) 侯选化合物:： 由 Medicilon化学部提供.
实验步骤
3.1 试剂配制
培养基的配制
Figure imgf000068_0001
研究化合物用 DMSO溶解， 使终浓度为 10mM。
3.2细胞培养
a) 收集对数生长期细胞， 计数， 用完全培养基重新悬浮细胞， b) 调整细胞浓度至合适浓度， 接种 96孔板， 每孔接种 100 μΐ细胞悬液。 c) 细胞在 37。C， 100 %相对湿度条件下， 5 % C02培养箱中孵育 24小时。 3.3 IC50实验
a) 收集对数生长期细胞， 计数， 用完全培养基重新悬浮细胞， 调整细胞 浓度至合适浓度 （依照细胞密度优化试验结果确定） ， 接种 96孔板， 每孔加 ΙΟΟμΙ细胞悬液。 细胞在 37 °C， 100 %相对湿度， 5 % C02培养 箱中孵育 24小时。
b) 用培养基将待测化合物稀释至 500μΜ后， 梯度稀释 8次。 按 25μ1/孔加 入细胞。 化合物终浓度从 100 μΜ至 0 μΜ， 4倍稀释， 共 10个浓度点。 c) 细胞置于 37°C， 100 %相对湿度， 5 % C02培养箱中， 孵育 72小时。 d) 吸弃培养基， 加入含 10% CCK-8 的完全培养基置于 37 °C培养箱中孵 育 2~4小时。
e) 轻轻震荡后， 在 SpectraMax M5 Microplate Reader上测定 450 nm波长 处的吸光度， 以 650 nm处吸光度作为参比， 计算抑制率。
3.4数据处理
肿瘤细胞生长抑制率％ = [(Ac-As)/(AC-Ab)] X 100%
其中， As: 样品的 OA (细胞 +CCK-8+待测化合物)； Ac: 阴性对照的
OA (细胞 +CCK-8+DMSO) ； Ab: 阳性对照的 OA (培养基
+CCK-8+DMSO)
实验结果
MED1007系列化合物包括 -51， -63, -91， -101， -104, -105， -108, -109S,-115, XC-302、 Wortmannin (渥曼青霉素））对 U87MG, PC-3& BT474的细胞毒作用， IC50s (pM)结果 见表 1。
Figure imgf000069_0001
Figure imgf000069_0002
由表 1可见， 本发明的化合物具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。 实施例 62 本发明化合物对 PDGFR P酶的抑制活性研究 检测的抑制效率， 同时选取以 Staurosporine (十字孢碱） 为阳性对照药物， 研究 MED1007系列待测化合物在 10μΜ， ΙμΜ浓度时对 PDGFRp 酶的抑制活性， 其中， 每组研究设置三复孔检测。
应用 HTRF kinEASE TK kit检测 staurosporine对 PDGFR β 的半数抑制浓度 以及 10个待测化合物在 10 μΜ和 ΙμΜ对 PDGFR β 酶活性的抑制率， 实验结 果参见表 3: 待测化合物在 10 μΜ和 ΙμΜ时对 PDGFR β 的抑制率。 材料和仪器
2104 EnVision® Multilabel Reader (PerkinElmer)
OptiPlate-384, White Opaque 384-well MicroPlate(Cat.6007290, PerkinElmer) HTRF kinEASE TK (Cat.62TK0PEC， Cisbio)
PDGFR β enzyme (Cat.P3082, Invitrogen)
ATP 10 mM (Cat.PV3227, Invitrogen)
DTT 1 M (Cat.D5545， Sigma)
MgCl2 1 M (Cat.M8266 Sigma)
MnCl2 1 M
待测化合物
实验步骤
1. 试剂配制
表 2
Figure imgf000070_0001
lxPDGFR β Enzymatic Buffer:
lmL l xKinase Buffer 中含有 200 μL 5><Enzyme buffer, 5 μΐ 1M MgCl2, \μΙ 1M DTT, l L 1M MnCl2, 20μί 2500nM SEB, 773 μL ddH20.
2.5xTK-Substrate /ATP混合液
TK-Substrate和 ATP的具体浓度见表 2。
用 1 xPDGFR β Kinase Buffer稀释 TK-Substrate和 ATP至反应浓度的 2.5倍。
5xEnzyme工作液
用 1 xPDGFR β kinase buffer配制 5 x PDGFR β 酶工作液。
4xSa-XL665工作液
Sa-XL665在反应中的浓度参见表 1。用 Detection Buffer配制 4xSa-XL665 工 作液。
4xTK-Ab-cryptate工作液
用 Detection Buffer将 TK-Ab-Cryptate稀释 100倍作为工作液。
实验结果见表 3.
表 3
10 μΜ 1μΜ
抑制率％ SD 抑制率％ SD
MED1007-15 93.52 2.99 31.22 10.80
MED 1007-31 26.16 8.17 13.84 5.70
MED1007-32 24.48 3.39 9.16 7.71
MED1007-33 25.64 5.41 4.71 2.98
MED1007-34 98.81 0.46 53.82 0.58
MED1007-35 98.99 0.27 54.84 4.93
MED1007-51 33.56 6.25 11.90 8.34
MED1007-54 43.66 9.04 7.30 6.78
MED1007-58 29.50 5.74 3.93 5.03
MED1007-59 0.93 5.95 4.39 7.18
MED1007-60 10.59 8.43 -0.63 9.55
MED1007-61 55.00 6.51 4.72 15.97
ED1007-63 28.00 3.86 -0.31 10.29
MED1007-64 20.07 5.02 -3.26 16.10
MED1007-65 13.99 7.93 21.49 4.50
MED1007-66 14.49 6.06 16.99 5.66
MED1007-67 18.74 9.64 22.24 2.60
MED1007-68 11.74 13.32 18.74 2.41
MED1007-69 31.76 3.88 11.74 19.27
MED1007-70 73.01 1.02 33.37 3.77
MED1007-71 4.50 15.44 9.74 15.37
MED1007-72 2.50 8.69 7.25 20.83
MED1007-73 35.03 19.70 16.99 12.72 MED1007-75 8.74 7.90 13.24 9.54
MED1007-83 7.60 9.50 4.50 2.74
MED1007-84 13.42 3.14 -8.59 1.15
MED1007-85 29.83 9.04 -3.44 7.56
MED1007-86 -3.13 5.06 -5.49 7.58
MED1007-87 -4.13 2.09 -7.60 6.81
MED1007-88 2.89 3.14 -5.37 8.17
MED1007-91 13.82 5.30 -10.96 8.66
MED1007-97 99.45 0.62 98.42 0.98
MED 1007-98 37.83 1.68 38.13 9.81
MED1007-99 9.88 5.88 33.06 6.25
Staurosporine 98.52 0.84 99.82 2.44
XC-302 96.53 1.31 51.15 5.21 由表 3可见， 本发明的化合物具有抑制 PDGFR β酶的作用。 实施例 63 本发明化合物对 PC-3细胞 Akt (Ser473)磷酸化水平的抑制活性研究 釆用 Cisbio HTRF phospho Akt(Ser473) cell-based assay检测试剂盒研究本 发明化合物对 PC-3细胞 Akt (Ser473)磷酸化水平的抑制活性。 材料和方法
细胞株： PC-3前列腺癌细胞系 （中科院细胞库）， 采用培养基（F12K +10% FBS)培养。
试剂和耗材：
2104 EnVision® Multilabel Reader (PerkinElmer)
OptiPlate-384 , White Opaque Low Volume 384-well MicroPlate(Cat.3674: CORNING)
HTRF Phospho Akt (Ser473) cell-based assay kit (Cat.64AKSPEG,500test CISBIO)
96孔培养板 (Cat# 3599, Corning Costar)
胎牛血清 （Cat#10099-141， GIBCO)
F12K培养基 （Invitrogen )
hEGF (Cat.9644-0.2mg, SIGMA) 实验步骤
3.1试剂配制
a) 刺激剂的配制： hEGF用 lOmM 乙酸配制成 lOOug/ml的储备液， 用不含血清的培养基 稀释至 200ng/ml， 每个待刺激孔加入 50ul.
b) 完全裂解液的配制：
4xLysis Buffer用 ddH20稀释 4倍后配成 lxLysis Buffer.
lOOxBlocking Reagent用 1 xLysis Buffer稀释 100倍。
c) 检测液的配制：
20xAnti-Phospho-Akt 用检测缓冲液 （Detection Buffer)稀释 20倍。
20xAnti- Akt 用检测缓冲液（Detection Buffer) 稀释 20倍。
d) 待测化合物的配制
用 DMSO稀释化合物的工作浓度为检测浓度的 100倍。
实验方法
细胞培养
收集对数生长期细胞， 计数， 用完全培养基重新悬浮细胞；
调整细胞浓度至合适浓度， 接种 96孔板， 每孔接种 50μ1细胞悬液； 细胞在 37 °C , 100 %相对湿度， 5 % C02培养箱中孵育 4h以上小时； 将细胞板从培养箱取出， 轻轻的吸走， 并迅速加入 50ul无血清的 F12K培 养基。 放入培养箱过夜培养。
加药处理
将化合物用 DMSO进行线性梯度稀释。
取 0.5ul化合物加入试验孔， 震荡器上混匀， 室温孵育 2h。
活化刺激处理
每个试验孔加入 50μ1配好的 hEGF溶液， 其终浓度为 100ng/ml.阴性对照孔加 入 50μ1不含血清的培养基。
震荡器上混匀， 室温孵育 15min。
裂解细胞：
用排枪吸走％孔板里的液体或者轻轻扣掉上清。迅速加入配制好的完全裂解 液 50μ1每孔。
震荡器上混匀， 室温裂解 30min。
转移加样：
从 96孔板里转移 16μ1细胞裂解液到白色低体积 384孔板内， 加入配好的 两对检测抗体。 震荡器上混匀， 室温孵育 4h后检测读数。 实验结果见表 4. 表 4
化合物 IC50(nM) MED 1007-31 111.5
MED1007-35 74.50
MED 1007-46 261.4
1.140 (1st test)
MED 1007-51
0.6831 (2nd test)
MED 1007-63 62.22
MED 1007-91 73.96
MED1007-101 66.96
MED 1007- 103 276.4
3.827 (1st test)
MED 1007- 108
6.513 (2nd test)
MED1007-109S 116.4
MED1007-115 259.5
10.05 (1st test)
XC-302
33.60 (2nd test)
Wortmannin 7.406 由表 4可见， 本发明的化合物对 PC-3细胞 Akt (Ser473)磷酸化水平具有抑制作 用， 尤其是 MED 1007- 108和 MED 1007-51。 实施例 64 本发明化合物对 PI 3k a， PI 3k δ和 PI 3k γ的抑制活性研究
本发明化合物对 PI 3k a, PI 3k 6和 PI 3k γ 的抑制活性研究。 选取 2到 3 个浓度进行初筛，分别计算相应浓度的化合物对酶的活性抑制率， 通过初筛选取 活性较好的化合物进行 IC50测试。
材料和仪器
En Vision Multilabel Plate Reader (PerkinElmer)
384孔不透明黑板（Cat. 6007279, PerkinElmer)
PI 3-Kinase (human) HTRF™ Assay kit (Cat. 33-017， Millipore)
4χ Reaction Buffer (Cat. 33-002, Millipore)
PIP2 ImM (Cat. 33-004， Millipore)
Stop A (Cat. 33-006, Millipore)
Stop B (Cat. 33-008, Millipore)
DM A (Cat. 33-010， Millipore)
DM B (Cat. 33-012, Millipore)
DM C (Cat. 33-014, Millipore) PI 3 k γ (Biology, Medicilon)
PI 3k a (Cat.14-602, Millipore)
PI 3k 6 (Cat.14-604， Millipore)
ATP lOmM (Cat. PV3227, Invitrogen)
DTT 1M (cat. D5545, Sigma)
待测化合物
试剂配制
1.33x Reaction Buffer
4χ Reaction Buffer (Cat. 33-002, Millipore)用 ddH20稀释至 1.33χ， 并加入 1M DTT使其终浓度为 6.67mM。 例如取 500 4 χ Reaction Buffer, 加入 10 DTT, 加水至 1 .5 mLc
4x化合物工作液
待测化合物用 DMSO溶解至 1 mM作为储存液，各取 2 μL加入 48 μL ddH20 中，得到 40 μΜ含 4% DMSO的化合物溶液，混匀后各吸取 3 加入 27 μL 4% DMSO (in ddH20) 得到 4 μΜ化合物溶液。 每个稀释溶液各取 5μί加入 384 孔板中，这样在最后的 20 μL激酶反应体系中化合物的终浓度就分别是 10 μΜ和 1 μΜ并含有 1% DMSO。 IC50测试时化合物稀释方法与初筛类似。
2x PIP2工作液
用 1.33 xreaction buffer配制 2 X PIP2工作液， 使其终浓度为 20 μΜ。
2x ΡΙΡ2/激酶工作液
两种酶的浓度优化已在之前的工作中完成，
PI 3k γ激酶的筛选浓度： 80 ng/well,
PI 3k α激酶的筛选浓度： 8 ng/well。
PI 3k δ激酶的筛选浓度： 2 ng/well。
用 2 X PIP2工作液稀释激酶， 激酶工作液的浓度为筛选浓度的 2倍。
无激酶对照 （可视为 100%抑制）
即 2 X PIP2工作液。
4 ATP工作液
10 mM的 ATP用 1.33xreaction buffer稀释至 400 μΜ。 在 20 μL激酶反应体 系中， ΑΤΡ的浓度为 100 μΜ。 终止液
Stop A和 Stop B按 3: 1的比例混合， 室温放置 2小时后可用。
检测液
DM C, DM A和 DM B 按照 18: 1： 1的比例混合， 室温放置 2小时后可用。 实验结果
待测化合物在 ΙΟ μΜ和 ΙμΜ时对 PDK alpha 的抑制率， 请参见表 5。 待测 化合物在 10 μΜ和 ΙμΜ时对 ΡΙ3Κ gamma 的抑制率， 请参见表 6。 待测化合物 在不同作用浓度下对 PI3K delta 的抑制率请参见表 7〜表 8。
表 5本发明化合物对 PI3K α的抑制率
10 μΜ 1 μΜ
% Inhibition Rate SD % Inhibition Rate SD
MED1007-65 10.16 3.24 0.69 3.33
MED 1007-66 -4.35 3.44 -2.28 2.60
MED1007-67 37.24 5.99 3.77 1.27
MED1007-68 51.93 7.89 7.74 5.81
MED1007-69 78.19 2.00 38.81 1.27
MED1007-70 62.53 13.41 26.60 3.41
MED1007-71 75.01 4.56 10.38 2.89
MED1007-72 65.93 10.25 8.78 4.14
MED1007-73 66.06 3.86 29.68 8.53
MED1007-75 51.31 6.47 11.07 4.73
MED 1007-83 87.58 13.37 36.18 5.41
MED1007-84 99.19 6.55 58.69 9.60
MED 1007-85 90.10 8.98 66.25 2.16
MED1007-86 39.60 7.57 19.17 2.97
MED1007-87 60.58 11.46 13.77 5.82
MED1007-88 109.90 3.38 46.17 2.72
MED1007-91 123.67 12.67 97.03 9.40
MED1007-97 114.22 10.91 56.26 15.28
MED1007-98 117.55 9.60 102.16 25.20
MED1007-99 88.30 8.37 23.31 3.06
MED1007-101 126.00 4.56 49.53 9.31
MED1007-103 82.17 11.55 55.28 5.82
MED1007-104 106.40 5.35 60.32 7.07
MED1007-105 110.74 15.85 60.41 5.51
MED1007-106 97.43 9.31 24.37 5.18
MED1007-107 65.78 14.86 29.88 4.55 wortmamnnin 104.86 11.68 109.45 2.58 ϋ3/: O 66/-001£ ζ-99/-ϊοίAV
Figure imgf000077_0001
Figure imgf000077_0002
Figure imgf000078_0001
wortmamnnin 107.83 4.35 95.38 9.07 xc-302 67.42 5.07 22.84 10.45 表 8待测化合物对 PI3K delta 的抑制率
Figure imgf000079_0001
从表 5、 6、 7、 8可以看出， 本发明的 1007系列化合物是有效的 ΡΙ3Κ抑制 剂， 不同化合物对 ΡΙ3Κ亚型的选择性不尽相同。 这些结果显示本发明的化合物 可筛选出特异性 ΡΙ3Κ抑制剂和泛 ΡΙ3Κ抑制剂， 具有良好的抗癌活性及选择性。
本发明通过上面的实施例进行举例说明， 但是， 应当理解， 本发明并不限于 这里所描述的特殊实例和实施方案。在这里包含这些特殊实例和实施方案的目的 在于帮助本领域中的技术人员实践本发明。任何本领域中的技术人员很容易在不 脱离本发明精神和范围的情况下进行进一步的改进和完善，因此本发明只受到本 发明权利要求的内容和范围的限制，其意图涵盖所有包括在由附录权利要求所限 定的本发明精神和范围内的备选方案和等同方案。

Claims

权 利 要 求 书
1、 2,6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药用盐或水合物， 其特征在于， 如结构 式 （I)所示的化合物为：
Figure imgf000080_0001
(I)
其中：
R1为未取代 C^Ce直链或支链垸基； 或由甲氧基、 C3~C6环垸基、羟基或氨 基取代的 ~C6直链或支链垸基； 或未取代 C3~C6环垸基； 或由羧酸甲酯基或羧 酸基取代的 C3~C6环垸基； 或由甲氧基取代的苯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪 基； 未取代哌啶基； 由羟基或酰胺基取代的哌啶基； 未取代吡咯垸基；
R2为氢原子；
R3为氢原子、 四氢吡喃、 三氟乙基或哌啶基；
R4为氢； 未取代 ~C6直链烷基； 未取代 C3~C6环垸基； 未取代苯基； 由 羧酸甲酯基、 ~C6直链烷氧基、 双 d~C6直链垸氧基、 d~C6直链烷硫基或卤 原子取代的苯基； 苯并 [1,3]间二氧杂环戊烯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪基； 或由甲基取代的哌嗪基；
A为氮或氧； 但 A为氮时， R4≠氢。
2、如权利要求 1所述的 2， 6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药用盐或水合物， 其特征在于， R4为甲基、 乙基、 环戊基甲基、 环丙基、 苯基、 对苯甲酸甲酯基、 间苯甲酸甲酯基、邻甲氧基苯基、间甲氧基苯基、对甲氧基苯基、间乙氧基苯基、 二甲氧基苯基、 邻甲硫基苯基、 间甲硫基苯基、 间氟苯基、 对氟苯基、 苯并 [1，3] 间二氧杂环戊烯基、 吗啉基； 哌嗪基； 甲基哌嗪基。
3、如权利要求 1所述的 2， 6-二含氮取代的嘌呤衍生物或其药用盐或水合物， 其特征在于， 如结构式 I所示的化合物为下列化合物： 1 ) N6-环丙基 -N2- (4-吗啉喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺；
2) N6-环丙基 -N2- (4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺；
3) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基）喹啉 -6-胺；
4) N- (6-环戊氧基 -9H-嘌呤 -2-基）喹啉 -6-胺；
5) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基 -1-基） 喹啉 -6-胺；
6) N- (6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基） -4- (苯基小基）喹啉 -6-胺 -甲磺酸盐；
7) Ν6·环丙基 -Ν2-(4·甲基 «-6 "基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺二水合二甲磺酸盐
8 ) Ν6·环丙基 -1^2-(4-乙¾(1^#"6-基) "9Η-嘌呤 -2，6·二胺二水合二甲磺酸盐
9) Ν6·环丙 ¾·Ν2 环丙 ¾##6"¾>·9Η』累呤 -2,6·二胺二水合二甲磺麟
10 ) 2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌吟 -6-醇-甲磺酸盐
11 ) (苯辨 ]间 離 5-¾ ·Ν·(6·异丙 9Η-嘌吟 -2-¾)Rgfr6~胺-甲磺
12) 2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌昤 -6-醇-甲磺酸盐
13 ) 4-(3-氟苯基) -N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
14) 4-(4-氟苯基) -N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
15) 二甲 ^ ¾)·Ν<6·异丙 *¾·9Η』,票呤 -2-¾)¾^ ·胺-甲磺離
16) 2-(4- (苯并 [1，3] 间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-醇-甲磺酸盐
17) Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基)喹啉 -6-胺-甲磺酸盐
18) Ν<6·异丙 ¾¾-9Η-嘌呤 -2-基 ^(4-甲 «tf«l-基 胺-甲横酸盐
19) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基)哌啶 -4-醇
20) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基)哌啶 -3-酰胺
21 ) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基氨基)环丙烷羧酸甲酯；
22) 1-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌吟 -6-基氨基）环丙烷羧酸；
23) N6-环丙基 -N2- (4-苯基喹啉 -6-基） -9H-嘌呤 -2,6二胺
24) N-(6-苯氧基 -9H-嘌昤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺
25) N-(6-异丙氧基 -9H-嘌呤 -2-基) -4- (哌嗪 -1-基）喹啉 -6-胺
26) 4-(6-(6- (环丙基氨基 )-9H-嘌呤 -2-基氨基)喹啉 -4-基)对苯甲酸甲酯
27) 4-(6-(6" (环丙基氨基 )-9H-嘌昤 -2-基氨基)喹啉 4-基)间苯甲酸甲酯
28) N6-环丙基 -N2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺
29) N6-环丙基 -N2-(4-(4-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺
30) N6-环丙基 -N2-(4-(3-氟苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺 31 ) N6-环丙基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (2，2，2-三氟乙基） -9H-嘌呤 -2,6-二胺
32) N6-环丙基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9- (哌啶 4-基） -9H-嘌呤 -2，6-二胺
33) N6- (3-甲氧基丙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺
34) N6-(2-甲氧基乙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺
35 ) 2-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6-基氨基)乙醇
36) N6-(2-氨乙基) -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺
37) N6-环丁基 -N2-(4-(3-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) -9H-噤呤 -2，6-二胺
38) N6-环丁基 -N2-(4-(4-氟苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2,6-二胺
39) 3-(2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9H-嘌呤 -6 -基氨基)丙基 -1-醇
40) N6-环丁基 -N2-(4-苯基喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2，6-二胺
41 ) N6-环丙基 -N2-(4-(3-乙氧基苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺
42) N6-环丙基 -N2-(4-(3， 4-二甲氧基苯基）喹啉 -6-基) -9H-嘌呤 -2，6-二胺
43 ) N2<4- (苯并 [1，3]间二氧杂环戊烯 -5-基)喹啉 -6-基) -N6-环丙垸 -9H-嘌呤 -2，6-二胺
44) N6-环丙基 -N2-(4-(2-甲氧基苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌吟 -2，6-二胺
45) N6-环丙基 -N2-(4-(2- (甲硫基）苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2，6-二胺
46) N6-环丙基 -N2-(4-(3- (甲硫基）苯基)喹啉 -6-基) - 9H-嘌呤 -2，6-二胺
47) Ν6·丽 ¾·Ν2<Φ¾η§ ^¾ ·9Η』票吟 -2,6·二铵盐 H -甲^^
48) Ν-(6-环丁基 -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺
49) Ν-(6-环丁基 -9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
50) Ν6- (环戊基甲基) -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
51 ) Ν6-异丙基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌呤 -2,6-二胺
52) 4-苯基 -Ν-(6- (吡咯垸小基 )-9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺
53) Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基)喹啉 -6-胺
54) Ν-(6- (戊基 -3-基氧基 )-9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
55 ) Ν6-环戊基 -Ν2-(4-苯基喹啉 -6-基) -9Η-嘌吟 -2,6-二胺
56) Ν-(6- (环已氧基 )-9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
57) Ν-(6-异丙氧基 -9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐
58 ) Ν-(6-吗啉 -9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺
59) Ν-(6-吗啉 -9Η-嘌呤 -2-基) -4-苯基喹啉 -6-胺二水合二甲磺酸盐
60 ) 2-(4-苯基喹啉 -6-基氨基 )-9Η-嘌呤 -6-醇。 4、一种药物组合物， 其特征在于， 该药物组合物由权利要求 1~3中的任意一 项的化合物或其药用盐或水合物、 以及药用辅料组成。
5、 如权利要求 4所述的药物组合物， 其特征在于， 所述盐为由有机酸或无 机酸得到的酸加合盐， 或为由有机碱或无机碱得到的碱加合盐； 所述酸为盐酸、 硫酸、氢溴酸、 甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、 马来酸、 富马酸、 乳酸、柠檬酸。
6、 如权利要求 4或 5所述的药物组合物， 其特征在于， 所述药物组合物为 片剂、 胶囊剂、 丸剂、 口服液体制剂、 颗粒剂、 散剂、 注射剂、 植入剂或外用制 剂。
7、 一种如权利要求 1~3中的任意一项的化合物或其药用盐或水合物或药物 组合物在制备治疗或预防肿瘤疾病药物中的应用。
8、 如权利要求 7所述的的应用， 其特征在于， 所述肿瘤疾病为肺癌、肝癌、 血癌、 骨癌、 胰腺癌、 皮肤癌、 黑素瘤、 子宫癌、 卵巢癌、 直肠癌、 胃癌、 结肠 癌、 乳腺癌、 子宫癌、 输卵管癌、 子宫内膜癌、 子宫颈癌、 阴道癌、 外阴癌、 食 道癌、 小肠癌、 内分泌系统癌、 软组织肉瘤、 尿道癌、 前列腺癌、 淋巴细胞瘤、 膀胱癌、 肾或输尿管癌、 脊椎肿瘤、 脑干神经胶质瘤或垂体腺瘤。
9、 一种如权利要求 1~3中任意一项的化合物或其药用盐或水合物的制备方 法， 其特征在于， 该方法包括以下步骤：
1 ) 化合物 a在对甲苯磺酸、 或对甲苯磺酸吡啶盐的催化剂的催化下， 先与 R3反应， 再在三乙胺、 碳酸钠、 碳酸钾或碳酸氢钠的去酸剂存在下， 在縮合反 应温度为 20~100°C下与 AH-R1缩合制得化合物 b;
Figure imgf000083_0001
2) 将化合物 b和 c在催化剂、碱、 非质子溶剂作用下在催化偶联反应温度 为 15〜150'C下通过催化偶联反应， 及与酸成盐反应后， 得到化合物 d，
Figure imgf000084_0001
Figure imgf000084_0002
其中： 所述的催化偶联反应中， 三邻甲苯基膦（P (o-tolyl) 3)、 三叔丁基膦 (P (Bu-ί) 3 )、 2,2'-双二苯基膦 -Ι,Γ-联萘 (ΒΙΝΑΡ)、 1，Γ-双二苯基膦二茂铁 (DPPF), 双 (2-二苯基膦苯基)醚 （DPEphos)、 9,9-二甲基 -4，5-双 （二苯基膦） 氧杂葱 （Xantphos)或配体式 1、 式 2、 式 3、 式 4、 式 5、 式 6、 式 7、 式 8、 式
9、 式 10或式 11化合物，
Figure imgf000084_0003
Figure imgf000084_0004
Figure imgf000084_0005
Figure imgf000085_0001
10
所述催化剂为 PdCl2、 Pd(OAc)2、 Pd2(dba)3、 Ni(OAc)2或 Ni/C的钯或镍过渡 金属催化剂；
所述碱为叔丁醇钠、 叔丁醇钾、 碳酸钾、 碳酸铯或磷酸三钾；
所述与酸成盐反应在盐酸、 硫酸、 氢溴酸、 甲磺酸、 苯磺酸、 对甲苯磺酸、 马来酸、 富马酸、 乳酸或柠檬酸存在的酸性条件下进行；
3)化合物 d用碳酸钠、碳酸钾、氢 化钠或氢氧化钾中和， 制得化合物（I);
Figure imgf000085_0002
其中，
R1为未取代 C 直链或支链垸基； 或由甲氧基、 C3~C6环烷基、羟基或氨 基取代的 d~C6直链或支链垸基； 或未取代 C3~C6环垸基； 或由羧酸甲酯基或羧 酸基取代的 C3~C6环垸基； 或由甲氧基取代的苯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪 基； 未取代哌啶基； 由羟基或酰胺基取代的哌啶基； 未取代吡咯烷基；
R2为氢原子；
R3为氢原子、 2,3-二氢吡喃、 三氟乙基或哌啶基；
R4为氢； 未取代 〜C6直链垸基； 未取代 C3~C6环垸基； 未取代苯基； 由 羧酸甲酯基、 ~C6直链烷氧基、 双 ~C6直链垸氧基、 ~C6直链垸硫基或卤 原子取代的苯基； 苯并 [1,3]间二氧杂环戊烯基； 未取代吗啉基； 未取代哌嗪基； 或由甲基取代的哌嗪基；
A为氮或氧； 但 A为氮时， R4≠氢。
10、如权利要求 9所述的制备方法， 其特征在于，化合物 a与 R3反应的摩尔 比为 1 :1~5， 化合物 a与 AH-R1的摩尔比为 1 :1~5， 缩合反应温度为 4( 60'C。
11、 如权利要求 9所述的制备方法， 其特征在于， 化合物 b与化合物 c摩尔 比为 1:0.5~2；所述催化偶联反应温度为 55〜120'C或用微波加热反应；所述非质 子溶剂为四氢呋喃、 异丙醚、 乙二醇二甲醚、 二氧六环、 吡啶、 1-甲基 -2-吡咯垸 酮 (NMP)、 1,3-二甲基丙撑脲 (DMPV)、 甲苯或二甲苯或它们一种或多种组成的混 合溶剂。
12、如权利要求 9所述的化合物或其药用盐或水合物的制备方法，其特征在 于， 化合物 b与盐酸、 硫酸、 氢溴酸、 甲磺酸、 苯磺酸、 对甲苯磺酸、 马来酸、 富马酸、 乳酸、 柠檬酸的摩尔比为 1:1~10。
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