WO2014075388A1

WO2014075388A1 - 组织修复用纤维膜及其制品和制备方法

Info

Publication number: WO2014075388A1
Application number: PCT/CN2013/001387
Authority: WO
Inventors: 郭泽跃; 赖奎霖; 王国帅; 詹泽丰; 徐弢; 袁玉宇
Original assignee: 广州迈普再生医学科技有限公司
Priority date: 2012-11-14
Filing date: 2013-11-14
Publication date: 2014-05-22
Also published as: BR112015009502A2; JP2016502426A; KR20150086227A; US20160045296A1; IN2015DN01362A; EP2921136A1; JP6140295B2; KR101853283B1; EP2921136B1; EP2921136A4; BR112015009502B1

Abstract

本发明涉及组织修复用纤维膜及其制品和制备方法，其中一种组织修复用纤维膜由直径为10nm-100μm的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为200-2000cm³/g。此外，本发明还涉及包括所述组织修复用纤维膜的复合纤维膜、植入膜片、防粘连组织修复膜及其制备方法和应用。

Description

组织修复用纤维膜及其制品和制备方法

技术领域

本发明涉及组织修复用纤维膜及其制造方法和应用，以及组织修复用制品。背景技术

组织器官修复是一个世界性医学难题。现代外科手术中，常需要对组织和器官进行修复，如疝气修复、女性骨盆底功能障碍性疾病修复、硬脑 /脊膜缺损修复、神经导管缺损修复、血管的修复、韧带修复、骨缺损修复等等。由于人体组织结构和功能的特殊性，理想的组织修复用纤维膜需具备以下性能： ①一定的强度，能够抵抗机械应力，在健康组织没有完全形成之前要能够承受腹腔内的压强； ②便于细胞黏附、爬行和生长，实现组织再生； ③防止细菌躲藏滋生，避免因使用人工生物合成材料而引起的感染； ④植入人体后能够保持良好的尺寸稳定性，即不能发生收缩和变形； ⑤结构稳定，便于裁剪成需要的形状而不脱散，便于与组织缝合； ⑥手感柔软，便于成型、增加手术的可操作性、降低病人的不适感、提高手术的效果； ⑦生物相容性好，能引导组织生长，达到理想修复。

现有的组织修复用纤维膜，往往存在如下问题：

1 ) 编制网片是目前组织修复用纤维膜中应用最广的产品，但该类产品表面粗糙、质地较硬、生物相容性差、易产生异物感和疼痛、引起常见侵蚀和感染等并发症；并且该类材料引发的免疫排斥反应较强，存在较多的手术后遗症；其与内脏、器官直接接触时，易造成损伤，可引起较严重的粘连、引发严重的异物和免疫反应，需要二次手术取出，给病人带来痛苦，甚至危及生命。

2) 目前研究的电纺膜，常见出现细胞难以向其内部长入或长入慢的不足。

由此可见，现有编织、电纺技术形成的组织修复用纤维膜的性能不够理想。发明内容

发明要解决的问题

本发明是鉴于上述现有技术的问题而作出的。目的在于提供一种组织修复用纤维膜，其具有良好的力学强度，能够在未完全修复前提供足够的力学支撑，且有利于细胞粘附和增殖、引导细胞分化，有利于组织之间的紧密缝合，减少组织修复用制品皱缩、引起感染以及与脏器粘连等情况的发生，提高病人的舒适感，而且快速修复，减少病人的痛苦。

另一方面，本发明的目的还在于还提供一种组织修复用植入膜片，其具有良好的柔软度、良好的生物相容性，有利于组织长入以形成牢固的修复，进一步可以具有抗感染、止血的特性。

进一步，本发明目的在于提供一种防粘连组织修复膜，其还能够有效防止修复后的组织与周围组织粘连。

用于解决问题的方案

本发明提供一种组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维膜由直径为 ΙΟηιη-ΙΟΟμιη 的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200-2000cm³/g，从而解决上述问题。

优选的，所述纤维膜的平均孔径为 50-500μιη，厚度为 0.1-2mm，优选 0.2-2mm，抗张强度为 10-300N/cm，柔软度为 50-500毫牛顿。

本发明还提供包含所述组织修复用纤维膜的用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的组织修复用植入膜片，包含所述组织修复用纤维膜的防粘连组织修复膜。

此外，本发明还提供所述组织修复用纤维膜、组织修复用植入膜片、和防粘连组织修复膜的制备方法，及其应用。

发明的效果

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

( 1 ) 本发明的组织修复用纤维膜，具有大比表面积，有利于细胞的粘附和增殖，而且纤维的表面拓扑结构也有利于引导细胞分化；

(2) 本发明的组织修复用纤维膜具有多孔蓬松结构，比普通电纺膜结构更有利于纤维细胞迅速长入，起到加强和固定的作用，达到快速理想修复效果；

(3 ) 本发明的组织修复用纤维膜质地轻、柔软，更利于与组织之间的紧密缝合，提高病人的舒适感；

( 4 ) 本发明的组织修复用纤维膜，可以减少修复用制品皱缩、引起感染以及与脏器等组织粘连等情况的发生；

(5 ) 本发明的组织修复用纤维膜由于可以不含活细胞成分，材料来源充分，成本较低，避免了自体、异体材料以及动物源性材料的来源不足，贮存运输简单；

(6) 本发明的纤维膜的制造方法工艺简单，生产时间短，能有效避免加工过程中产品受到污染，产品质量易于控制，产品标准容易实现，产品可实现低成本、高效率的产业化生产。附图说明图 1为实施例 4得到的蓬松纤维膜切面扫描电镜图；

图 2为实施例 4步骤（2) 得到的电纺膜切面扫描电镜图；

图 3为实施例 4得到的蓬松纤维膜 A和实施例 4步骤（2)得到的电纺膜 B的纤维在 5000x 下扫描电镜对比图；

图 4为实施例 4得到的蓬松纤维膜 A和实施例 4步骤（2 ) 得到的电纺膜 B的纤维在 lOOOOx下扫描电镜对比图；

图 5为实施例 8中 PP组术后 1个月的修复效果图；

图 6为实施例 8中 PVDF1组术后 6个月的修复效果图；

图 7为实施例 8中 PVDF2组术后 6个月的修复效果图；

图 8为实施例 8中 PVDF2组术后 6个月的修复效果图；

图 9为实施例 8中 PCU组术后 6个月的修复效果图；

图 10为实施例 10中 PLLA1组术后 3个月的病理图；

图 11为实施例 10中 PLLA2组术后 3个月的病理图；

图 12为实施例 10中动物源性组术后 3个月的病理图；

图 13为实施例 10中 PLLA1组术后 3个月的解剖图；

图 14为实施例 10中 PLLA2组术后 3个月的解剖图；

图 15为实施例 10中动物源性组术后 3个月的解剖图；

图 16为本发明的无张力尿失禁悬吊带的一个示例图；

图 17为本发明的无张力尿失禁悬吊带的另一个示例图；

图 18为本发明的用于前骨盆的骨盆底补片的示例图；

图 19为本发明的用于后骨盆的骨盆底补片的示例图；

图 20为实施例 21中 IV组 PVDF蓬松纤维层植入小型猪阴道膀胱间隙之间 4周后解剖效果图；

图 21为实施例 21中 I组 PP网片植入小型猪阴道膀胱间隙之间 4周后效果图。

图 22为实施例 1结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片（1#材料）的动物解剖图；图 23为实施例 23结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片（3#材料）的动物解剖图。附图标记说明

1 主体部分

2 端部

3 外轮廓

4 贯穿孔

5 补片贯穿孔 6 补片中部的块状部分

7 补片外周的臂状结构

8 补片臂状结构的牵拉部分具体实施方式

本发明的一个方面涉及组织修复用纤维膜及其制备方法，另一方面涉及该组织修复用纤维膜作为蓬松纤维层 (A)在用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的组织修复用植入膜片、以及防粘连组织修复膜中的应用及其制备方法。

I、本发明的组织修复用纤维膜

本发明的组织修复用纤维膜由直径为 10ηηι~100μηι的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200~2000cm³/g，所述纤维丝的直径优选为 500ηιη~5μιη。本发明的组织修复用纤维膜的蓬松度优选为 600~1600cm³/g。本发明的组织修复用纤维膜的柔软度优选为 50~500毫牛顿，优选为 200~450毫牛顿。本发明的组织修复用纤维膜的平均孔径优选为 50~500μηι, 厚度为 0.1~2.0mm，优选 0.1~1.0mm，更优选 0.2~1.0mm，抗张强度优选为 20~80N/cm。

本发明所述的蓬松度是指纤维膜的表观厚度与面密度之比的 1000倍，即：

蓬松度 B 表观厚度 IV面密度 ωχΐθ³

蓬松度以 cm³/g表示，表观厚度以 mm表示，面密度以 g/m²表示。表观厚度 T_Q的测试方法是利用 FAST-1压缩性织物风格仪按照 GB /T 7689.1-2001方法进行测试，表示为纤维膜在 2cN/cm²压强下厚度 (mm)与纤维膜在 100 cN/cm²压强下厚度（mm)之差。面密度 ω的测试方式是在忽略纤维膜的厚度情况下，测定单个面单位面积下的重量。

本发明所述的柔软度是指根据 GB/T 8942-2002中方法测试出来的膜片抗弯曲力和膜片与缝隙处摩擦力的最大矢量之和，以毫牛顿表示，柔软度值越小说明膜越柔软。

本发明中所述纤维丝直径是通过扫描电镜的方法进行测定的；所述平均孔径是参照 ASTM D 6767-2002, 利用毛细管流动孔径分析仪通过泡点法进行测定的；所述抗张强度是通过 GB/T3923.1-1997《织物断裂强力和断裂伸长率的测定》方法进行测定的；所述厚度是通过压缩性织物风格仪按照 GB ΙΊ 7689.1-2001方法进行测定的。

<组织修复用纤维膜的制备方法>

作为本发明组织修复用纤维膜的制造方法，包括采用静电纺丝步骤的方法。

作为本发明组织修复用纤维膜的一种优选制造方法，可以采用静电纺丝技术结合溶剂溶解法进行，具体包括如下步骤：

( 1 ) 将两种溶解性质不同的纤维丝材料，分别溶于相应的溶剂中，得到两种均一的纤维丝材料溶液；

(2)将步骤（1 ) 中得到的两种均一纤维丝材料溶液分别装入不同的静电纺丝注射器中，两种纤维丝材料的对应喷针在高压电源板上均匀排列，进行静电纺丝，得到两种溶解性质不同的纤维丝错综交叉的纤维膜；

(3 )根据纤维丝材料的溶解性质，选择合适的溶剂将步骤（2) 中制备的纤维膜中的一种纤维丝溶解，另外一种则保持不变，得到所述组织修复用纤维膜。

上述步骤（2) 中，优选微量注射泵的速率调节为 0.1~15.0 ml /小时，更优选 3~6 ml /小时。

上述步骤（2) 中，优选高压发生器的电压调节为 5~45 KV，更优选 20~36 KV。上述步骤 (2)中，优选接收装置的接收距离调节为 5.0~30.0 cm,更优选 15.0~20.0cm。本发明中，所述两种溶解性质不同的纤维丝材料是指，两种纤维丝材料中只有其中一种纤维丝材料能够溶解于某一溶剂中。优选其中的一种纤维丝材料为： PCU (聚碳酸酯聚氨酯）或 PVDF (聚偏二氟乙烯）。优选其中的另一种纤维丝材料为： PLLA (L-聚乳酸）或 PLGA (聚乳酸-羟基乙酸共聚物）。

作为本发明组织修复用纤维膜的另一种优选制造方法，包括如下步骤：

( 1 ) 将纤维丝材料溶于溶剂中，得到均一的纤维丝材料溶液；

(2)将步骤（1 ) 中得到的均一纤维丝材料溶液装入静电纺丝注射器中，进行静电纺丝得到纤维，并将纤维接收为膜状结构，得到纤维膜；

(3 )将步骤（2) 中制备得到的纤维膜在溶剂超声溶胀后的状态下，在预定温度下进行预冻，然后进行真空冷冻干燥，得到组织修复用纤维膜。

上述步骤（2) 中，优选高压发生器的电压调节为 5~45 KV，更优选 30~36KV。上述步骤 (2)中，优选接收装置的接收距离调节为 5.0~30.0 cm,更优选 15.0~20.0cm。上述步骤（3) 中，优选地将步骤（2) 中制备得到的纤维膜用浓度为 50%~95%的乙醇水溶液浸润后，再进行超声溶胀。

上述步骤（3) 中，用于超声溶胀纤维膜的溶剂优选为注射用水。

上述步骤（3) 中，优选地将步骤（2) 中制备得到的纤维膜在浓度为 50%~95%的乙醇水溶液中浸润后，放入盛有注射用水的超声机中，超声溶胀 5~15分钟后静置，更换注射用水，再超声溶胀，如此重复操作，直至乙醇被注射用水置换完毕。然后将注射用水超声溶胀状态下的纤维膜放入冷冻干燥箱中于 -50°C进行预冷冻 2~5小时，然后开启真空进行真空冷冻干燥 20~26小时，得到所述组织修复用纤维膜。作为本发明组织修复用纤维膜的再一种优选制造方法，包括如下步骤：

(3 )将步骤（2) 中制备的纤维膜沿纤维膜的横轴或纵轴之一的方向拉伸，停止拉伸后使纤维膜在这种拉伸状态下定型；然后将纤维膜沿纤维膜的与上述拉伸方向垂直的方向拉伸，停止拉伸后使纤维膜在这种拉伸状态下定型，得到组织修复用纤维膜。

上述步骤（2) 中，优选高压发生器的电压调节为 5~45 KV，更优选 30~36KV。

上述步骤（2)中，优选接收装置的接收距离调节为 5.0~30.0 cm,更优选 15.0~20.0 cm。上述步骤（3 ) 中，横向和纵向的拉伸速率优选各自独立地为 50~400mm/min，更优选 50 mm/min~200 mm/min。

上述步骤（3 )中，横向和纵向的拉伸长度优选各自独立地为原来长度的 1.5~6.0倍。上述步骤（3 ) 中，优选地，用夹具夹住上述步骤（2) 中制得的纤维膜的两边，将温度设置为低于材料热变形温度 01〜 30°C的温度，以 50~400 mm/min的速率匀速拉伸，使纤维膜被拉长至原来长度的 1.5~6.0倍后停止拉伸，在常温下使纤维膜在这种拉伸状态下定型 1 ！！〜 4 h，然后取下并将纤维膜的另外两边用夹具夹住，将温度设置为低于材料热变形温度 0°C~30°C的温度，沿与之前拉伸方向垂直的方向以 50~400 mm/min的速率匀速拉伸，使纤维膜被拉长至原来长度的 1.5~6.0倍后停止拉伸，在常温下使纤维膜在这种拉伸状态下定型 11！〜 4h，得到所述组织修复用纤维膜。

本发明的组织修复用纤维膜中使用的纤维丝的材料可以是可降解材料、不可降解材料或其组合。可降解材料可以是合成可降解材料或天然高分子材料；不可降解材料优选为聚氟类材料、聚丙烯类材料或聚氨酯类材料。

作为可降解材料，优选聚乳酸（PLA) (特别是 L-聚乳酸（PLLA))、聚己内酯（PCL)、聚羟基乙酸（PGA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA) 或 1,3-丙二醇聚合物（PDO)、胶原蛋白、明胶、纤维蛋白、丝蛋白、弹力蛋白拟态的肽聚合物、壳聚糖、改性壳聚糖。作为聚氟类材料，优选聚偏二氟乙烯（PVDF) 或聚四氟乙烯（PTFE)。

作为聚丙烯类材料，优选间规聚丙烯。

作为聚氨酯类材料，优选聚氨酯（PU)、聚碳酸酯聚氨酯（PCU)、聚醚基聚氨酯或硅烷改性聚氨酯（SPU)。

其它可以使用的材料还包括：聚乙二醇、聚对苯二甲酸乙二酯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚羟基丁酸戊酸酯、聚羟基丁酸己酸酯、聚磷酸酯、聚氨基甲酸酐、聚酯酰胺、聚乙烯醇、聚对二恶酮、聚碳酸酯、海藻酸、硫酸软骨素，肝素，葡聚糖、褐藻酸等。

图 1是本发明实施例 4中根据上述方法得到的组织修复用纤维膜的切面电镜图，图 2 是本发明实施例 4中根据上述方法在步骤（2) 后，得到的电纺膜。由图 1和图 2所示，可以看出，本发明的组织修复用纤维膜与普通电纺得到的电纺膜在微观的纤维结构上不同，并且在宏观上表现为蓬松度、柔软度等不同，由 130cm³/g的蓬松度和 870毫牛顿的柔软度变为 1100cm³/g的蓬松度和 400毫牛顿的柔软度。可见本发明的组织修复用纤维膜具有更好的蓬松性和柔软性。

本发明的组织修复用纤维膜可以进一步与编织层复合从而得到组织修复用复合纤维膜。该组织修复用复合纤维膜可以通过嵌合、缝合、粘连、热融合、超声融合等方法与编织层复合，进一步还可以是编织线以本发明的组织修复用纤维膜为基材，进行编织或穿插，形成纤维膜与编织层的一体结构。编织层具有较好的力学强度，与本发明的织修复用纤维膜结合能增强组织修复纤维膜的力学性能，尤其适用于力学强度要求高的组织修复应用中，如疝气修复、女性盆底脱垂恢复、肌腱修复等；同时，本发明的组织修复用纤维膜有利于细胞的快速长入，起到固定膜片的作用，结合其柔软的性能，能减少或避免编织层的位移或对周围组织摩擦造成的损伤，尤其适用于女性盆底功能障碍性疾病的治疗应用。

所述编织层材料为合成高分子材料，如聚丙烯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、聚酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物等。优选为聚丙烯编织膜。

<组织修复用纤维膜的应用 >

本发明还提供所述组织修复用纤维膜在制造组织修复用制品中的应用。本发明中使用的术语"组织修复"不仅包括在组织缺损和 /或丧失后，而进行的再生性和 /或完整性的修补恢复，还包括组织和 /或器官偏离正常解剖位置或者改变正常生理结构（例如松弛、脱垂、膨出、或移位等）后，进行的位置和 /或功能性的恢复。例如，本发明的"组织修复" 包括但不限于疝气修复、女性盆底功能障碍性疾病修复（包括如子宫、阴道、直肠、尿道、膀胱等盆腔脏器脱垂、膨出和 /或盆腔肌肉组织松弛的恢复或瘘修补）、使用人工组织（如人工的肩袖、硬脑（脊）膜、皮肤、心包膜、血管、神经导管、牙膜、韧带、跟腱、骨等）材料（如膜片、支架等）对组织进行修复（填充）或恢复结构等。优选地，本发明的组织修复用纤维膜用于制造疝气修复补片、女性盆底功能障碍性疾病修复系统 (包括盆底修复补片或尿失禁悬吊带或瘘修补片）、人工肩袖、硬脑（脊）膜修复补片、人工皮肤、心包膜补片、人工血管、人工神经导管、人工牙膜、人工韧带、人工跟腱、骨修复（填充）产品等。本发明进一步提供由所述组织修复用纤维膜制造的组织修复用制品。

本发明的组织修复用制品，优选为疝气修复补片、女性盆底功能障碍性疾病修复系统（包括盆底修复补片或尿失禁悬吊带或瘘修补片）、人工肩袖、硬脑（脊）膜修复补片、人工皮肤、心包膜补片、人工血管、人工神经导管、人工牙膜、人工韧带、人工跟腱、骨修复（填充）产品等。

本发明进一步提供所述组织修复用纤维膜以及组织修复用制品用于组织修复中的应用。优选地提供所述组织修复用纤维膜以及组织修复用制品用于疝气修复、女性盆底功能障碍性疾病的治疗（包括但不局限于盆底修复或尿失禁的治疗或瘘修复）、肩袖修复、硬脑（脊）膜修复、皮肤组织修复、心包膜修复、血管修复、神经导管修复、牙膜修复、韧带修复、跟腱修复、骨修复（填充）中的应用。

II、本发明的组织修复用植入膜片

本发明还涉及用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的组织修复用植入膜片，所述植入膜片包括蓬松纤维层 (A); 所述蓬松纤维层 (A)由直径为 10ηηι~100μηι的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 400~1500cm³/g，其柔软度为 50~500毫牛顿。本发明的植入膜片可以为单层或多层膜，当植入膜片为单层膜时，仅包括蓬松纤维层 (A)。

当植入膜片为多层膜时，可以包括一层或多层的蓬松纤维层 (A)，对于其他层的材料、结构、制备方法等没有特别限制，可以使用现有技术中可用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的任何材料、结构和制备方法。优选，所述植入膜片可以进一步包括定向纤维层 (B)，所述定向纤维层 (B)是由纤维丝定向排列而形成的具有多孔状三维结构的层。植入膜片的各层之间可以通过静电纺丝、超声融合或缝合等方式结合。

本发明植入膜片的蓬松纤维层 (A)可以使用上述的组织修复用纤维膜，优选其由直径为 10ηιη~100μιη的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 400~1500cm³/g，其柔软度为 50~500毫牛顿。所述纤维丝的直径优选为 500ηιη~5μιη，所述蓬松度优选为 800-1300cm³/g, 所述柔软度优选为 200~450毫牛顿。进一步，本发明的蓬松纤维层 (A)的平均孔径优选为 50~500μιη，厚度为 0.1~2.0mm，优选为 0.1~1.0mm，更优选 0.2~1.0mm，优选抗张强度为 20~80N/cm。

作为本发明植入膜片的蓬松纤维层 (A)的制造方法，可以采用上述组织修复用纤维膜的制备方法。

<定向纤维层 (B)>

定向纤维层 (B)是由直径为 10ηιη〜20μιη的纤维丝定向排列而形成的具有多孔状三维结构的层。其具有规则纤维朝向，能够模拟筋膜内细胞外基质中的胶原纤维排列方向，可以引导细胞生长，为细胞及其新分泌的细胞外基质提供定向骨架，从结构上尽可能模仿机体自身的组织结构，十分利于成纤维细胞和毛细血管的长入，对肌肉、筋膜的自我修复起到关键作用，可实现长时稳定的修复效果。从而可以实现较好的术后修复效果，减小复发率。

本发明中优选使用静电纺丝制备定向纤维层 (B)，其操作条件为调节微量注射泵的速率为 0.1〜15.0毫升 /小时，调节高压发生器的电压为 5〜45kV，调节接收装置的接收距离为 5.0〜30.0厘米，调节电纺针头的移动速度 1〜20厘米 /秒，接收辊转速为 2000〜6000圈 / 分。

<纤维材料>

本发明的植入膜片的材料包括不可降解材料、可降解材料、或其结合。所述不可降解材料主要包括聚氟类材料，如聚偏二氟乙烯（PVDF)、聚四氟乙烯（PTFE) 等；聚烯烃，如聚乙烯、聚丙烯等；聚氨酯类材料，如聚氨基甲酸酯（PU)、聚碳酸酯聚氨酯（PCU)、聚醚基聚氨酯、硅烷改性聚氨酯（SPU) 等。所述可降解材料主要包括聚乳酸（PLA)、聚己内酯（PCL)、聚羟基乙酸（PGA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA)、 1,3-丙二醇聚合物（PDO) 等合成材料；和胶原蛋白、明胶、纤维蛋白、丝蛋白、弹力蛋白拟态的肽聚合物等天然高分子材料；壳聚糖、改性壳聚糖。蓬松纤维层 (A)、定向纤维层 (B)和其它层使用的纤维材料可以相同或不同，其中，优选聚偏二氟乙烯材料制备定向纤维层 (B)，其具有良好的组织相容性和耐久性，力学强度好。优选聚偏二氟乙烯（PVDF)、聚碳酸酯聚氨酯（PCU)、聚乳酸（PLA) 制备蓬松纤维层 (A)。

<其它层 >

本发明的植入膜片还可以含有蓬松纤维层 (A)和定向纤维层 (B)以外的层，其可以为普通电纺技术制备的无取向的纤维层 (C)、编织网层 (D)或记忆金属层 (E)。

本发明的植入膜片还可以含有包含抗感染类药物、止血类药物和 /或微纳米颗粒的层，其中所述抗感染类药物、止血类药物和 /或微纳米颗粒可以位于蓬松纤维层 (A)、定向纤维层 (B)、无取向的纤维层 (C)中，也可以位于上述各层之外的其它层，也可以吸附于植入膜片的表面。

所述抗感染类药物包括氨苄西林类、螺旋霉素类、磺胺类、喹诺酮类、和 /或头孢类抗生素。所述的止血类药物包括 6-氨基己酸、对羧基苄胺、止血环酸、三七、和 /或云南白药。所述微纳米颗粒包括 Si0₂、 Ti0₂、 ZnO、 Ag、 Ni、季铵盐、壳聚糖、海藻酸钙、聚乙烯醇、和 /或天然大分子的纳米粒子。 <后处理 >

本发明的植入膜片可以进一步经过后处理改性，例如可以经过制孔处理、升温处理和浸泡处理中的一种或多种的方式进行处理。所述纤维膜还可以用金属丝或聚合物纤维进行缝纫处理。

所述制孔处理可以使用冲压制孔、激光制孔、局部压熔制孔等方法以形成贯穿纤维膜上下表面的贯穿孔。其中优选激光制孔，通过调节和优化参数，激光切割成孔后，孔洞周边会被高温瞬间熔融一部分，成为致密结构，孔洞周边熔融部分的宽度为约 0.02~0.05mm。该熔融部分可以起到固定孔洞尺寸，维持产品整体力学性能的作用。在使用静电纺丝制备植入补片时，可通过采用金属、绝缘交错网格接收板，接收板带具图案化的静电排斥纹路来制孔。

长期的盆底修复系统研究表明，植入膜片的孔径对治疗效果至关重要。而传统电纺工艺制备的支架孔隙率高，但是孔径很小；且一般的成孔方法会极大影响电纺支架的力学性能。本发明通过研究和比较不同的后处理工艺，并经过大量体外、体内生物学实验，经过反复优化得出力学强度好、更加柔软和治疗效果较好的膜片材料，具备合适的孔径大小和孔洞排列。如采用一定尺寸的孔洞交错排列或者不同尺寸孔洞相结合的方式能更好地利于组织长入，在提高物质内外交换的同时，也利于组织、细胞生长时代谢产物的快速排除。同时，孔洞为组织生长提供更多空间，更利于毛细血管的穿透。

为了保持力学强度，可以采用大孔和小孔相结合的方式制备：按照 0.5〜lcm间距打上 0.8〜1.6mm直径的大孔；在每四个大孔之间均匀打上 2〜4个 0.4〜0.6mm直径的小孔。这样可以保持修补片力学强度的同时增加孔洞数量，更利于组织快速贯通生长。

<植入医疗器械 >

本发明的用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的植入医疗器械，包含本发明的植入膜片。具体的，所述植入医疗器械可以为无张力尿失禁悬吊带或骨盆底修复补片。

所述无张力尿失禁悬吊带（以下简称吊带），包括主体部分和端部，所述主体部分由本发明的植入膜片制成，所述端部用于手术器械牵引和 /或用于固定。

示例性地，本发明的吊带可以具有如图 16-17的外观，吊带包括主体部分 1和端部 2，当吊带植入人体以后，主体部分 1与阴道前壁和尿道间层相接触，主体部分 1嵌入闭孔筋膜并使其保持张紧状态从而对尿道施加向上的支撑力，端部 2用于手术器械牵弓 I和 /或用于固定。吊带宽度优选为 5mm-30mm，厚度优选为 0.1mm-2mm。吊带的主体部分可以具有直线（如图 16 ) 或波纹形（如图 17 ) 的外轮廓 3，所述波纹形的凹凸宽度差优选为 lmm-5mm。在一个具体实施方案中端部也可以具有与主体部分相同或相似的波纹形外轮廓。优选使用具有波纹形外轮廓的吊带，其可以使吊带更稳固的固定于骨盆闭孔膜之中。优选，吊带的主体部分 1上具有直径为 0.1mm-3mm的贯穿孔 4，其贯穿吊带主体部分的上下表面，有利于组织从孔间长入，起到进一步锚定网片的作用。更优选所述贯穿孔 4的直径为 1.2mm-3mm₀

所述骨盆底补片包括用于修复盆腔脏器（如膀胱、子宫、直肠、阴道和小肠等）的脱垂、膨出的中部主体部分，所述中部主体部分由本发明的植入膜片制成。所述骨盆底补片中使用的植入膜片优选包含定向纤维层 (B)。示例性地，本发明的骨盆底补片可以为如图 18 (用于前骨盆）和图 19 (用于后骨盆）所示的形状，所述骨盆底补片包括用于悬吊脱垂盆腔脏器的位于中部块状部分 6和外周的臂状结构 7，所述臂状结构 7的末端是臂状结构的牵拉部分 8，优选在补片的中部块状部分 6和外周的臂状结构 7上具有贯穿上下表面的贯穿孔 5。所述中部块状部分 6根据用于修复的盆腔脏器的形状进行调整，臂状结构 7的形状和数量也可以具体依要修复的脏器进行调整。

由本发明的植入膜片制成的植入医疗器械可以用于女性骨盆底功能障碍性疾病的治疗。本发明的无张力尿失禁悬吊带可以用于女性尿失禁的治疗，骨盆底补片可以用于修复盆腔脏器的脱垂、膨出。

III、本发明的防粘连组织修复膜

本发明的防粘连组织修复膜的一侧表面层为蓬松纤维层 (A')，另一侧表面层为防粘连层 (B')_; 所述蓬松纤维层 (Α')由直径为 10ηιη~100μιη的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200~2000cm³/g，其柔软度为 50~500毫牛顿。

本发明的防粘连组织修复膜至少具有上述二层结构，在蓬松纤维层 (Α')和防粘连层 (Β')之间可以任选地具有中间层。对于中间层的材料、结构、制备方法等没有特别限制，可以使用现有技术中可用于组织修复的任何材料、结构和制备方法。

<蓬松纤维层 (Α')>

本发明的防粘连组织修复膜的蓬松纤维层 (Α')采用本发明的上述组织修复用纤维膜，可以采用与其相同的方法制备。

本发明的防粘连组织修复膜的蓬松纤维层 (Α')由直径为 10ηηι~100μηι的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200~2000cm³/g，优选其柔软度为 50~500毫牛顿。所述纤维丝的直径优选为 500ηιη~5μιη，所述蓬松度优选为 400~1500cm³/g，更优选 800-1300cm³/g_; 所述柔软度优选为 200~450毫牛顿。进一步，本发明的蓬松纤维层 (Α')的平均孔径优选为 50~500μιη，厚度为 0.1~2.0mm，优选 0.1~1.0mm，更优选 0.2~1.0mm，优选抗张强度为 20~80N/cm。

<纤维材料>

本发明的蓬松纤维层 (Α')和中间层的纤维材料包括不可降解材料、可降解材料、或其结合。所述不可降解材料主要包括聚氟类材料，如聚偏二氟乙烯（PVDF)、聚四氟乙烯（PTFE)等；聚烯烃，如聚乙烯、聚丙烯等；聚氨酯类材料，如聚氨基甲酸酯（PU)、聚碳酸酯聚氨酯（PCU)、聚醚基聚氨酯、硅烷改性聚氨酯（SPU) 等。所述可降解材料主要包括聚乳酸（PLA)、聚己内酯（PCL)、聚羟基乙酸（PGA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA)、 1,3-丙二醇聚合物（PDO)等合成材料；和胶原蛋白、明胶、纤维蛋白、丝蛋白、弹力蛋白拟态的肽聚合物等天然高分子材料；壳聚糖、改性壳聚糖。蓬松纤维层 (A')、纤维层 (D)和其它层使用的纤维材料可以相同或不同，其中，优选聚偏二氟乙烯 (PVDF)、聚碳酸酯聚氨酯（PCU)、聚乳酸（PLA) 制备蓬松纤维层 (A')。

<防粘连层 (B')>

本发明的防粘连层 (Β')通过喷涂或超声波熔接方式与其他层结合。在本发明的防粘连组织修复膜为双层膜时，优选防粘连层 (Β)通过喷涂的方式与蓬松纤维层 (Α')复合在一起。通过喷涂的方式能够使防粘连层 (Β')渗入蓬松纤维层 (Α')的内部，与蓬松纤维层 (Α') 紧密结合。

通过喷涂得到的防粘连层有一定的微孔，能保证营养物质供应的同时起到防粘连的效果。喷涂过程是通过液压将溶液挤出，并在喷嘴处雾化形成一些微小的液滴，该液滴与蓬松纤维层 (Α')接触后渗入表层纤维后，液滴间连接在一起，封闭掉部分纤维形成的孔洞，并通过控制液滴的大小及液滴的间距，便可控制液滴形成的微孔，通过该方法可得至微孔的直径范围在 0.05~3微米。通过喷涂的方式，得到的防粘连层 (Β')有一定的柔软性和顺应性，能在蓬松纤维层 (Α')受力的情况下产生相应的形变，以保证两者在受力情况下紧密结合。

所述防粘连层 (Β')的喷涂液优选使用壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖溶液制备而成。所述壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖的分子量优选在 30~100万，更优选 50~80万，其降解时间约为 1~3个月。所述壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖溶液的溶剂为乙酸水溶液、盐酸、稀硫酸、稀硝酸、纯化水等。所述的溶剂优选乙酸水溶液，其中乙酸的含量为 1%~36% (质量分数），优选 3%~15%。所述壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖在乙酸水溶液中的浓度为 1~15% (质量 /体积分数）。优选为 3~8%。

本发明喷涂所述防粘连层 (Β')的喷涂液所采用喷涂装置没有特别限制，只要其是密封的，且能够通过加压的方式使得装入其中的料液受到压力而从喷涂装置的喷嘴喷出。

本发明优选下述的喷涂方法，包括以下步骤： ( 1 ) 将壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖溶解在溶液中，形成防粘连层喷涂液。

(2)将防粘连层喷涂液装入与液压器相连接的喷涂装置。设定喷涂的参数范围为：喷涂流量， 0.005ml/min~0.1ml/min;扫描间距， 10mm~30mm_;扫描速度， lmm/s~50mm/s。将防粘连层喷涂液喷涂到蓬松纤维层 (A')、编织层 (C)、纤维层 (D)或其他中间层的一个表面上。

(3 ) 后处理：浸泡和干燥。将（2) 中得到的样品浸泡在水溶液中，除去残留溶剂后放入鼓风干燥箱中进行干燥，干燥温度设定为： 35X〜 60°C，处理时间为 2天。

在经过上述的喷涂和后处理后可以根据需要进行裁剪、包装、 EO灭菌等步骤。 <中间层 >

本发明的防粘连组织修复膜在蓬松纤维层 (Α')和防粘连层 (Β')之间可以具有中间层，其可以为编织层 (C')、纤维层 (D')、或其他可用于组织修复膜的层，如药物层等。

本发明的防粘连组织修复膜可以为三层、四层或更多层的结构。第一表面层为蓬松纤维层 (A')，其为具有特定蓬松结构的纤维层，能够快速促进组织修复再生的纤维膜，该纤维膜由直径为 10ηηι~100μηι的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200~2000cm3/g。中间层可以为编织层 ( )或纤维层 (D')，或者编织层 ( )和纤维层 (D')的组合，其中所述编织层 ( )为编织网片，用于增强整体补片的强度；所述纤维层 (D')可以为电纺得到的纤维层，优选为与第一层结构相同的蓬松结构纤维层。另一侧表面层为防粘连层 (B')，其为具有防粘连功能的材料。具有蓬松结构的纤维层与编织网片层之间可以采用超声波点熔接、缝合等方式结合在一起，防粘连层与中间层之间可以通过喷涂或超声波熔接等方式结合在一起，优选采用喷涂的方式结合。

本发明的编织层 (C')优选将编织网片（网片材料可以为聚丙烯（PP)、 PVDF、 PTFE、聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET) 等）完全浸泡在一种具有特定浓度的聚合物溶液中，该聚合物材料优选与蓬松纤维层 (A)的纤维材料一致。浸泡一定时间后将编织网片取出并加热烘干，使编织网片上的纤维丝都被一层较薄的聚合物材料包裹。

上述多层结构的防粘连组织修复膜优选用于腹壁疝、切口疝的修补。采用这样的设计主要是考虑到： 1 )腹壁疝、切口疝的修补对力学强度要求较高，普通的单纯电纺膜难以符合其要求，故增加编织网片以保证力学强度。 2)单纯的编织网片进行疝修补，其修复生长的组织不能很好的与编织网片结合，使得编织网片不能固定，容易形成侵蚀、皱缩，故在编织网片两面都附加一层具有特定蓬松结构的纤维膜，使得组织能够很好的修复并包裹编织网片，使其不发生侵蚀、皱缩。 3 )在腹壁疝、切口疝的修补中，腹膜内的修补要求补片必须具有防止粘连功能，以防止新生组织与腹内脏器粘连，造成肠梗阻、坏死等情况，故该补片设计了具有防止粘连的第四层材料。本发明的四层结构的防粘连组织修复膜可以采用如下方法制备：

( 1 )按照前述的蓬松纤维层 (Α')的制备方法制备两张特定厚度的具有特定蓬松结构的纤维膜。

(2) 将一张符合力学强度要求的编织网片（网片材料可以为 PP、 PVDF, PTFE、 PET等）完全浸泡在一种具有特定浓度的聚合物溶液中，该聚合物材料应与（1 ) 中纤维膜材料一致。浸泡一定时间后将编织网片取出并加热烘干，使编织网片上的纤维丝都被一层较薄的聚合物材料包裹。

(3 ) 将步骤（2) 中得到的被聚合物包裹后的编织网片放于步骤（1 ) 中的两张纤维膜中间，然后一起放置于超声波熔接机上，在一定的超声功率及压力下，使两张纤维膜熔接在编织网片的两面。

(4) 采用前述的喷涂技术将防粘连材料喷涂在步骤（3 ) 中制备的膜的一个面上。实施例

<组织修复用纤维膜的制备：实施例 1-6>

实施例 1

( 1 ) 将聚碳酸酯聚氨酯（PCU)，溶于 Ν,Ν-二甲基甲酰胺与四氢呋喃的混合溶剂，使溶液中 PCU的浓度为 12g/100mL， Ν,Ν-二甲基甲酰胺与四氢呋喃的混合比例（体积比）为 1:1，得到均一的纤维丝材料溶液。

将 PLLA溶于六氟异丙醇（HFIP)溶液中，使溶液中 PLLA的浓度为 5g/100mL，得到均一的纤维丝材料溶液。

(2) 将上述两种均一的纤维丝材料溶液分别装入两个静电纺丝注射器中，两种材料的对应喷针在高压电源板上均匀排列，调节微量注射泵的速率为 6 ml /小时，调节高压发生器的电压为 22 KV，调节接收装置的接收距离为 20 cm，通过两种材料的同时静电共纺制备出两种溶解性质不同的纤维丝材料错综交叉的纤维膜，达到 0.5mm厚度后关闭静电纺丝。

(3 ) 将取下的膜，放入六氟异丙醇溶剂中超声溶胀、溶解 6小时，使 PLLA材料溶解完全， PCU材料则保持不变，从溶剂中取出未被溶解的材料，即得到组织修复用纤维膜。

实施例 1中所得组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5mm，平均孔径为 350μιη，抗张强度为 25 N/cm，蓬松度为 970 cm³/g，柔软度为 250毫牛顿。

实施例 2

( 1 ) 将聚偏二氟乙烯（PVDF) 溶于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮的混合溶剂，使 PVDF在溶液中的浓度为 18g/100mL_;将 L-聚乳酸（PLLA)溶于六氟异丙醇（HFIP) 溶液中，使溶液中 PLLA的浓度为 5g/100mL，得到均一的纤维丝材料溶液。

(2) 将上述两种均一的纤维丝材料溶液分别装入两个静电纺丝注射器中，除了将调节微量注射泵的速率为 5 ml/小时之外，采用实施例 1的步骤（2)相同的方法进行电纺。

(3 ) 将取下的膜，放入六氟异丙醇溶剂中超声溶胀、溶解 6小时，使其中 PLLA材料完全溶解，制得组织修复用纤维膜。

所述组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 3μηι，膜厚度为 0.5 mm,平均孔径为 450μηι，抗张强度为 35 N/cm，蓬松度为 1640 cm³/g，柔软度为 400毫牛顿。

实施例 3

( 1 )将 PVDF材料溶解于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮混合溶剂，使 PVDF 在溶液中的浓度为 18g/100mL_; 制备得到均一的纤维丝材料溶液。

(2)将步骤（1 ) 中得到的纤维丝材料溶液装入静电纺丝注射器中，调节微量注射泵的速率为 6 ml /小时，调节高压发生器的电压为 30 KV，调节接收装置的接收距离为 20 cm, 进行静电纺丝得到纤维，并将纤维接受为膜状结构，纺至膜层厚度约为 0.5 mm后关闭静电纺丝，得到纤维膜。

此处得到的纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5 mm, 平均孔径为 190μηι，抗张强度为 43 N/cm，蓬松度为 170 cm3/g，柔软度为 930毫牛顿。

(3 ) 将步骤（2) 中制得的纤维膜在浓度为 95体积％的乙醇溶液中完全浸润，然后取出乙醇溶液浸润后的纤维膜，放入盛有注射用水的超声容器中，使纤维膜完全浸泡在注射用水中，开启超声，功率 90W，超声 10分钟，静置 5~10分钟后，更换超声容器内的注射用水，再开启超声，功率 90W，超声 10分钟，如此重复操作 7~8次，至溶液中乙醇被置换完毕。然后取出注射用水超声溶胀后的纤维膜，放于 -50°C的冷冻干燥箱中进行预冷冻 4小时，再开启真空冷冻干燥，使预冷冻的纤维膜真空冷冻干燥 24小时，得到组织修复用纤维膜。

所述组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.6 mm,平均孔径为 400μηι，抗张强度为 48 N/cm，蓬松度为 1530 cm3/g，柔软度为 420毫牛顿。

实施例 4

( 1 ) 将 L-聚乳酸（PLLA) 材料溶于六氟异丙醇溶剂中，使溶液中 PLLA浓度为 6 g/100mL, 制备得到均一的纤维丝材料溶液。

(2)将步骤（1 ) 中制得的纤维丝材料溶液装入静电纺丝注射器中，除了调节高压发生器的电压为 20 KV, 调节接收装置的接收距离为 15cm以外，按照实施例 3步骤（2) 相同的方法电纺，得到纤维膜。

此处得到的纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5 mm, 平均孔径为 115μηι，抗张强度为 33 N/cm，蓬松度为 130 cm3/g，柔软度为 870毫牛顿。

(3 ) 然后用夹具夹住纤维膜的两边，在温度为 60 °C条件下以 100 mm/min的速率匀速拉伸，使纤维膜被拉长至原来长度的 3倍后停止拉伸，在常温下使纤维膜在这种拉伸状态下定型 4h，然后取下纤维膜并用夹具夹住纤维膜的另外两边，在温度为 60°C条件下，沿与之前拉伸方向垂直的方向以 100 mm/min的速率匀速拉伸，使纤维膜被拉长至原来长度的 3倍后停止拉伸，在常温下使纤维膜在这种拉伸状态下定型 4 h，得到组织修复用纤维膜。

所述组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.6 mm,平均孔径为 450μηι，抗张强度为 50 N/cm，蓬松度为 1100 cm³/g，柔软度为 400毫牛顿。

实施例 5

( 1 )将 PVDF材料溶解于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮混合溶剂，使 PVDF 在溶液中的浓度为 18g/100mL_; 制备得到均一的纤维丝材料溶液；

(2) 将步骤（1 ) 中得到的纤维丝材料溶液装入静电纺丝注射器中，按照实施例 3 步骤（2) 相同的方法电纺，得到纤维膜。

(3 ) 除了温度为 95°C、拉长至原来长度的 2.5倍以外，按照实施例 4步骤（3 ) 相同的方法拉伸，得到组织修复用纤维膜。

所述组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.6 mm,平均孔径为 400μηι，抗张强度为 65 N/cm，蓬松度为 1300 cm³/g，柔软度为 450毫牛顿。

实施例 6

( 1 ) 将 PCU材料溶解于体积比为 1:1的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /四氢呋喃混合溶剂，使 PCU在溶液中的浓度为 12g/100mL_; 制备得到均一的纤维丝材料溶液；

(2)将步骤（1 ) 中得到的纤维丝材料溶液装入静电纺丝注射器中，调节微量注射泵的速率为 5 ml /小时，调节高压发生器的电压为 36 KV, 调节接收装置的接收距离为

25cm, 进行静电纺丝得到纤维，并将纤维接受为膜状结构，纺至膜层厚度约为 0.5 mm后关闭静电纺丝，得到纤维膜。

此处得到的纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5 mm, 平均孔径为 160μηι，抗张强度为 52 N/cm，蓬松度为 110 cm3/g，柔软度为 510毫牛顿。

(3 ) 除了温度为 80°C、拉长至原来长度的 2.0倍、定型 6 h之外，按照实施例 4的步骤（3 ) 相同的方法拉伸，得到组织修复用纤维膜。

所述组织修复用纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5 mm,平均孔径为 260μηι，抗张强度为 60 N/cm，蓬松度为 230 cm³/g，柔软度为 470毫牛顿。

实施例 7

将实施例 1、 2、 3、 4、 5、 6中制得的蓬松纤维膜分别与编织聚丙烯（PP) ( 3DMAXTM Mesh 由中山大学第二附属医院提供的样品）膜片叠置在一起，然后使用 20000Hz频率超声（福坦机械设备有限公司，型号 JT-200-S), 每隔 10厘米的距离通过点超声融合的方式将上述各层连接在一起，分别得到组织修复用纤维膜和 PP编织膜的复合膜片。

<组织修复用纤维膜的动物实验：实施例 8-12>

实施例 8 纤维膜在疝气修复中的应用

将实施例 1、实施例 5中制得的组织修复用纤维膜、实施例 5步骤（2) 中制得的纤维膜以及临床上使用的聚丙烯网片（3DMAXTM Mesh 由中山大学第二附属医院提供的样品），裁剪成 3.5_Cmx6cm，清洗，灭菌，分别制成 PCU疝气修复补片（由实施例 1的纤维膜制造）、 PVDF1疝气修复补片（由实施例 5的纤维膜制造）、 PVDF2疝气修复补片（由实施例 5步骤（2) 中得到的纤维膜制造）和 PP疝气修复补片（由聚丙烯网片制造）。

将上述疝气修复补片进行新西兰兔实验。新西兰兔，体重 2.5-2.8 Kg,年龄 6-12个月，共 60只。将实验兔随机分成 4组，分别为 PCU组、 PVDF1组、 PVDF2组和 PP组，每组 15 只实验动物。对进入实验的动物进行麻醉、备皮、仰卧保定于木板上；消毒铺单后；于腹部正中，用 4#手术刀顺着兔腹白线切开皮肤，长约 8cm，暴露出肌肉，将大小为 2cmx5cm 的腹壁全层（包括腹膜、肌肉、筋膜组织）切除； PCU组、 PVDF1组、 PVDF2组、 PP组分别采用 PCU疝气修复补片、 PVDF1疝气修复补片、 PVDF2疝气修复补片和 PP疝气修复补片，用 0#丝线将补片与周围的肌肉间断缝合。 4# 丝线间断缝合皮肤。

术后对动物进行常规的观察和喂养。观察期内 PCU组、 PVDF1组和 PVDF2组所有动物进食进水正常，切口愈合良好，未见感染及腹部疝气形成。 PP组 5只动物在术后第 5~7 天切口处出现隆起， 3只动物于术后第 7~10天死亡，解剖时发现补片与内脏发生严重粘连。其余动物均存活至取材时间。

术后 1个月，将 PCU组、 PVDF1组、 PVDF2组每组 5只动物解剖， PP组 4只动物解剖。触摸手术部位， PCU组和 PVDF1组手术部位触摸柔软。 PVDF2组触摸较 PVDF1组稍硬。沿补片边缘 2cm以上切开肌肉层，肉眼可见， PCU组、 PVDF1组和 PVDF2组补片与内脏均无粘连，毛细血管沿补片边缘向中间长入，新生组织已基本覆盖整个补片。镜下结果显示， PCU组、 PVDF1组、 PVDF2组补片周围可见大量的成纤维细胞及胶原纤维增生，少数淋巴细胞浸润（≤25个/ HPF)，较多毛细血管增生（5-10个 /HPF)。且镜下， PCU组、 PVDF1组毛细血管较 PVDF2组多，差异有统计学意义（P<0.05 )。可见 PCU组补片、 PVDF1 组补片、 PVDF2组补片具有较好的组织相容性；其中 PCU组补片和 PVDF1组补片较高的蓬松度更有利于组织长入。

PP组触摸手术部位，感觉较其他三组硬，能明显感觉到异物的存在。切开皮肤，可见一层薄薄的新生组织覆盖在补片表面，但与补片易撕开。沿补片周围 2cm切开肌肉层，肉眼可见 PP组补片与内脏严重粘连，且不易分离（图 5 )。镜下结果显示， PP组补片内部有在较多空洞，空洞周围有少量成纤维细胞及胶原形成，可见较少量毛细血管增生（≤2 个 /HPF)，大量异物巨细胞及淋巴细胞浸润，可见 PP组补片组织相容性较差，不利于细胞粘附，排异和免疫炎症反应明显。

术后 3个月， PP组解剖 4只动物，其余组每组解剖 5只。切取补片及其周围 2cm范围内的组织。 PCU组、 PVDF1组手术部位触摸柔软，与自体组织相近。补片与皮肤间层次清楚，易分离，补片与内脏器官无任何粘连，大量新生组织长入补片内部。镜下结果显示，补片周围与胶原纤维和纤维细胞结合紧密；补片内部可见大量的胶原纤维，伴有少量毛细血管（3-5个/ HPF)。 PVDF2组材料手术部位触摸较柔软，补片与皮肤间层次清楚，易分离，补片与内脏器官无任何粘连，切开补片内部，新生组织较少。镜下结果显示，补片仅表面可见较多胶原纤维，补片内部未见新生组织，可见新生组织向 PVDF2膜片内部长入较慢。

PP组触摸手术部位，感觉较硬，能明显感觉到异物的存在。 PP组补片表面有一层较薄的新生组织，与皮肤层次不清，不易分离，补片接近内脏，与内脏发生严重粘连，难易撕开，肠道肿胀。镜下结果显示，补片周围有少量成纤维细胞及胶原形成，伴有较少量毛细血管增生（≤2个 /HPF); 大量异物巨细胞及淋巴细胞浸润，说明排异和免疫炎症反应明显。

术后 6个月， PP组解剖 4只动物，其余组每组解剖 5只。切取修补处的补片及其周围 2cm范围内的组织。 PVDF1组与 PCU组手术部位触摸都很柔软，如图 6和图 9所示，补片与新生组织已融合为一体，较难区分开新生组织和补片，新生组织与皮肤间层次清楚，易分离，新生组织与内脏器官无任何粘连。镜下观察结果显示，植入补片部位周围与胶原纤维和纤维细胞结合紧密；内部可见大量的胶原纤维。 PVDF2组手术部位触摸较柔软，如图 7和图 8所示，尚能分辨出补片和新生组织，新生组织与皮肤间层次清楚，易分离，补片与内脏器官无任何粘连。镜下观察结果显示，补片表面可见较多胶原纤维补片，切开补片内部，新生组织仍较少。

PP组触摸手术部位，感觉较硬，明显感觉到异物的存在。 PP组与皮肤层次不清，不能分离；与内脏器官粘连严重；镜下观察结果显示，仅补片周围有少量成纤维细胞及胶原形成，表面可见少量毛细血管增生（≤5个 /HPF)，大量异物巨细胞及淋巴细胞浸润，异物反应和免疫排斥严重；说明 PP组补片不利于细胞的粘附和长入，组织相容性和修复效果差。

实施例 9 纤维膜在盆底修复中的应用

采用由实施例 3制得纤维膜制造的盆底修复补片（PVDF3补片）、实施例 3步骤 2制得纤维膜制造的盆底修复补片（PVDF4补片）、实施例 6制得纤维膜制造的盆底修复补片 (PCU1补片）和聚丙烯材料制造的盆底修复补片（PP补片，强生 ProliftTM, 广州华侨医院提供）进行小型猪实验。所有补片裁剪成 2_Cmx2cm大小。选用 20〜25kg，性成熟雌性小型猪 8只， PVDF3组、 PVDF4组、 PCU1组和 PP组共 4组，每组 2只。对进入实验的小型猪实施全麻，经下腹部腹壁入路，暴露膀胱、子宫和阴道上段。将补片分别置入阴道膀胱间隙之间，丝线固定。 PVDF3组、 PVDF4组、 PCU1组和作为对照组的 PP组分别采用 PVDF3补片、 PVDF4补片、 PCU1补片和 PP补片。术后对动物进行常规的喂养及观察。所有实验动物观察期内均表现良好，切口愈合良好，无植入物逐出、暴露等发生。术后进食进水正常，均存活至取材时间。

术后 4周，切取包括盆底修复补片在内的阴道膀胱间隙组织标本。用手触摸手术部位， PVDF3组、 PVDF4组、 PCU1补片和 PP组中， PP材料最硬， PVDF4组材料次之， PCU1 组材料柔软， PVDF3组材料最柔软且有韧性， PVDF3组、 PVDF4组、 PCU1组补片表面覆盖一层新生上皮，补片与新生组织不易撕开，肉眼可见新生的毛细血管， PP组补片表面亦覆盖一层新生组织，补片与新生组织易分开。病理结果显示， PVDF3组补片内部及表面都有大量成纤维细胞及胶原纤维增生，补片内部有较多毛细血管（5-10个 /HPF)，可见新生组织已长入膜片内部，并且长入较快。 PCU1组、 PVDF4组表面有较多成纤维细胞和胶原纤维，补片内部可见少量的成纤维细胞及胶原纤维增生，少量毛细血管增生（3-5个 /HPF), 说明新生组织长入膜片内部但长入较慢。 PVDF4组内部可见少数淋巴细胞浸润，具有轻微的免疫炎症反应。 PP组补片周围有较多的成纤维细胞及胶原，较少量毛细血管 (2-3个 /HPF)，少量异物巨细胞（≤3个 /HPF)，可见新生组织无法与膜片长成一体，修复较慢，并有异物排斥反应。

术后 12周，切取包括盆底修补植入物在内的阴道及膀胱标本。用手触摸， PVDF3组、

PVDF4组、 PCU1组和 PP组中， PP材料最硬， PVDF4材料次之，修复部位与周围组织柔软性有较明显差别； PCU1材料触感柔软， PVDF3最柔软且有韧性。 PVDF3组补片表面及内部都可见大量成纤维细胞和胶原，且补片与长出的组织形为一体，无法分辨剥离。镜下观察结果显示，植入补片部位周围与胶原纤维和纤维细胞结合紧密，无法区分新生组织和膜片材料，内部可见大量的胶原纤维，新生组织已完全与膜片长成一体，实现再生修复。 PCU1组补片与新生组织不易剥离，肉眼可见，新生组织长入材料内部，材料与新生组织之间难以区分。镜下观察结果显示，表面有大量成纤维细胞及少量毛细血管生长 (3-5个 /HPF)，内部可见较少量毛细血管（2-3个 /HPF)。 PVDF4组补片与新生组织能剥离，表面有较多成纤维细胞及少量毛细血管生长（3-5个 /HPF)，内部可见较少量毛细血管（≤2个 /HPF)。PP组补片表面也可见较多成纤维细胞及较少量毛细血管生长 (2-3个 /HPF)，但补片与所长出的组织较易剥离，可见新生组织无法与膜片长成一体，修复效果较差。

可见植入补片的蓬松度对细胞和组织快速粘附到植入补片表面并进入材料内部起到重要作用，且补片的高蓬松度和柔软性更有利于新生组织和材料形成一体；蓬松度较小，则新生组织长入膜片内部较缓慢。

实施例 10 纤维膜在硬脑膜修复中的应用

将实施例 4中制得的组织修复用纤维膜、实施例 4步骤（2) 中制得的纤维膜裁剪成 4cmx6cm, 清洗，灭菌，分别制成 PLLA1硬脑膜修复补片（由实施例 4的纤维膜制造）、 PLLA2硬脑膜修复补片（由实施例 4步骤（2) 中得到的纤维膜制造），对照组采用已商品化的临床上使用的动物源性硬脑膜修补片（脑膜健，由中山大学第三附属医院提供样品）。

选择健康犬 6只，雌雄不限，体重 10-15kg之间，观察期为 2-3个月。进入实验的犬实施全麻，双顶开颅，人为制造双侧部分硬脑膜缺损及脑组织损伤，然后用 PLLA1硬脑膜修复补片以及 PLLA2硬脑膜修复补片在同只实验犬脑左右两侧分别实施硬脑膜修补术，平行试验 3只犬。用 PLLA2硬脑膜修复补片以及对照组的动物源性脑膜修补片在同一只实验犬脑左右两侧分别实施硬脑膜修补术，平行试验 3只犬。术后对犬进行常规的喂养及观察，每个观察期满时在修补补片部位采集标本，对比观察大体标本和镜下组织。各实验动物词养到设定的时间后麻醉动物，按前述开颅方式暴露颅骨，分离暴露修补补片外表面，静脉注入空气处死动物，锯开颅骨后掀开切取修补补片及周围的组织。肉眼观察修补补片外表面、质地、与周围组织的关系、有无囊肿、硬结及内表面与脑组织的粘连情况。标本装瓶，浸泡于福尔马林固定液，把标本瓶贴标签。室温下福尔马林固定 1周后，取手术部位局部组织，常规石蜡包理， HE组织切片染色。

手术后 6只犬恢复良好，切口愈合良好，无分泌物。术后进食，进水正常，犬的户外活动正常，没有发现运动障碍。 3个月后静脉内推入空气处死犬，以手术部位为中心，在大于手术部位 lcm范围切取标本，使其包括修补补片及周边硬脑膜及内面的脑组织。切取出标本后，逐层分离脑骨与脑膜，可见 PLLA1硬脑膜修复补片植入部位的脑膜完整，补片植入处已完全纤维组织代替，未看见植入材料，且植入处脑膜内表面无粘连，与之对应脑组织表面光滑，无粘连。修复效果如解剖图片图 13所示，病理图片如图 10所示； PLLA2硬脑膜修复补片植入部位的脑膜完整，可见部分植入材料已经被裂解成碎片，形成新的纤维组织，与之对应的脑组织表面有少许粘连，修复效果如解剖图片图 14所示，病理图片如图 11所示。而对照组动物源性脑膜修补补片植入部位仍可见完整的未降解植入补片，且植入处脑膜内表面与脑组织存在较多粘连，会引起如脑组织的异位放电、癫痫发作等并发症，修复效果如解剖图片图 15所示，病理图片如图 12所示。

实施例 11 纤维膜在皮肤修复中的应用

将实施例 4中制得的组织修复用纤维膜裁剪成 5_Cmx5cm，清洗，灭菌制成人工皮肤进行动物实验。实验兔体重 2-2.5kg，年龄 6-8个月，雌雄不限，共 12只。随机分为两组（实验组和对照组），每组 6只。兔子耳缘静脉麻醉后将动物置于专用手术台上，然后备毛与消毒。用手术刀将背部全层皮肤切除：切除面积为 4*4cm。然后贴附人工真皮：实验组在创伤部位贴上由实施例 4的纤维膜制得的人工皮肤，每间隔 lcm用缝线固定。对照组做空白对照处理。实验组和对照组分别在伤口上覆盖一层无菌油纱和无菌纱布，用缝线与周围皮肤固定。

手术后观察动物有无正常进食，饮水，体温，各组覆盖物与创面分离的时间及其他的生理活动情况，并且观察创面的修复情况。

术后第 2、 4、 8周每组取 2只兔子处死，取背部整个创面及邻近正常皮肤，福尔马林固定，进行 HE染色，光镜下观察真皮中组织的新生情况，炎症反应情况，表皮结构的厚度和附属器的再生情况。

对照组兔子在术后全部创面都与油纱或纱布粘连。辅料有脱落现象。创面出血，有大量组织液渗出。创面完全愈合后呈线性痂。实验组术后创面干燥，与油纱和纱布无粘连, 与创面之间贴合紧密。创口无红肿热,动物未出现皮肤过敏或感染现象。材料覆盖下无坏死现象。伤口完全愈合后呈矩形痂。通过显微镜观察愈合口皮肤棘细胞层增厚，基底细胞增生活跃，表皮层的角质层、颗粒层棘皮层和基底层均可见。真皮层附属器管，汗腺，毛囊等结构可见，可见大量成纤维细胞平行于皮肤表面排列，其间较多毛细血管增生，局部少量淋巴细胞浸润。

观察结果表明：实验组的抗感染能力、防止创面出血的作用优于对照组。实验组创面未见红肿、坏死。组织学观察显示由实施例 4的纤维膜制得的人工皮肤材料促进皮肤结构再生能力强于对照组。

实施例 12 纤维膜在骨填充中的应用

将实施例 2中制得的组织修复用纤维膜清洗，灭菌，制成骨修复支架进行兔动物实验。 3只新西兰兔，体重 2.5±0.5Kg，其中雌性 1只，雄性 2只。全麻后备皮，将动物置于专用手术台上，俯卧位，用碘伏酒精消毒，铺好无菌敷料，布巾钳固定好。切开兔腿部皮肤，使用剥离器分离骨膜，暴露胫骨骨板，用高速骨钻制造兔子胫骨缺损，缺损大小为 l_Cmx2cm，将由实施例 2的纤维膜制得的骨修复支架折叠成扇形塞入缺损处，调整填充物高度，使其与骨缺损面平齐，缝合。术后 14天，肉眼观察骨小梁较粗大，超声骨密度仪检测新生骨质致密，并有较多的编织骨形成。术后 3个月，缺损的骨洞表面有骨痂形成。敲击骨痂，质地坚硬，与正常骨组织硬度相似，且骨痂颜色与自体骨颜色一致。康复期间无炎症反应。术后动物恢复良好，进食进水正常。肢体运动功能逐渐恢复后，未发现运动障碍。

以上实施例足以说明本发明的纤维膜蓬松度为 200_Cm³/g〜2000cm³/g所带来的有益效果，可归纳如下：

由上表可以看出，蓬松度控制在 200cm³/g〜2000cm³/g的组织修复补片，可以诱导细胞在补片内快速生长形成新生组织，达到修复效果。同样可以看出，对于可降解材料 (PLLA)来说，蓬松度在 200cm³/g〜2000cm³/g范围内的补片，与蓬松度不在该范围内的补片相比，修复效果更快，材料降解更快。进一步地，用柔软度为 50~500毫牛顿范围的补片修复后，修复部位的相对柔软显著提高术后舒适感。

<修复用植入纤维膜片的制备：实施例 13-21>

实施例 13

( 1 ) 将聚偏二氟乙烯（PVDF) 溶于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮的混合溶剂，使 PVDF在溶液中的浓度为 18g/100mL，得到均一的纤维材料溶液 A; 将 L-聚乳酸 (PLLA) 溶于六氟异丙醇（HFIP) 溶液中，使溶液中 PLLA的浓度为 5g/100mL，得到均一的纤维材料溶液 B。

(2)将上述两种均一的纤维材料溶液 A和 B分别装入五个静电纺丝注射器中，其中 4 支注射器装 PVDF溶液，一支注射器装 PLLA溶液。 PVDF溶液对应的 4个喷针和 PLLA对应的 1个喷针在高压电源板上均匀排列，调节微量注射泵的速率为 5mL/小时，调节高压发生器的电压为 30 KV, 调节接收装置的接收距离为 25cm，通过两种材料的同时静电共纺制备出两种溶解性质不同的纤维丝材料错综交叉的纤维膜，达到 0.5mm厚度后停止静电纺丝。

(3 ) 将取下的膜，放入六氟异丙醇溶剂中超声溶胀、溶解 6小时，使其中 PLLA材料完全溶解，制得蓬松纤维层（Al )。

所述蓬松纤维层（A1 )的纤维平均直径为 3μιη，膜厚度为 0.5mm，平均孔径为 350μιη，抗张强度为 60N/cm，蓬松度为 420cm³/g，柔软度为 470毫牛顿。

实施例 14

( 1 )将 PVDF材料溶解于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮混合溶剂，使 PVDF 在溶液中的浓度为 20g/100mL_; 制备得到均一的纤维材料溶液。

(2)将步骤（1 ) 中得到的纤维材料溶液装入静电纺丝注射器中，调节微量注射泵的速率为 6mL/小时，调节高压发生器的电压为 30KV，调节接收装置的接收距离为 25cm，进行静电纺丝得到纤维丝，并将纤维丝接收为膜状结构，纺至膜层厚度约为 0.5mm后停止静电纺丝，得到纤维膜。

此处得到的纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5mm，平均孔径为 150μηι，抗张强度为 32N/cm，蓬松度为 110cm³/g，柔软度为 740毫牛顿。

(3 ) 将步骤（2) 中制得的纤维膜按照实施例 3的步骤（3 ) 完全相同的方法进行处理，得到蓬松纤维层（A2)。所述蓬松纤维层（A2)的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.6mm，平均孔径为 380μηι，抗张强度为 37N/cm，蓬松度为 1105cm³/g，柔软度为 400毫牛顿。

实施例 15

( 1 )将 PVDF材料溶解于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮混合溶剂，使 PVDF 在溶液中的浓度为 18g/100mL_; 制备得到均一的纤维材料溶液；

(2)将步骤（1 ) 中得到的纤维材料溶液装入静电纺丝注射器中，除了调节接收装置的接收距离为 20cm以外，按照实施例 14的步骤（2) 相同的方法电纺，得到纤维膜。

此处得到的纤维膜的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.5mm，平均孔径为 190μηι，抗张强度为 43N/cm，蓬松度为 170cm3/g，柔软度为 930毫牛顿。

(3 )然后用夹具夹住纤维膜的两边，除了温度为 95°C之外，按照实施例 4的步骤（3 ) 相同的方法拉伸，得到蓬松纤维层（A3 )。

所述蓬松纤维层（A3 )的纤维平均直径为 2μιη，膜厚度为 0.6mm，平均孔径为 400μιη，抗张强度为 65N/cm，蓬松度为 1410cm³/g，柔软度为 400毫牛顿。

实施例 16

( 1 ) 将聚碳酸酯聚氨酯（PCU)，溶于 Ν,Ν-二甲基甲酰胺与四氢呋喃的混合溶剂，使溶液中 PCU的浓度为 12g/100mL， Ν,Ν-二甲基甲酰胺与四氢呋喃的混合比例（体积比）为 1:1，得到均一的纤维材料溶液 Α。

将 PLLA溶于六氟异丙醇（HFIP)溶液中，使溶液中 PLLA的浓度为 5g/100mL，得到均一的纤维材料溶液 B。

(2) 将上述两种均一的纤维材料溶液 A和 B分别装入 4个静电纺丝注射器中，其中 3 支注射器装 PCU溶液，一支注射器装 PLLA溶液。 PCU溶液对应的 3个喷针和 PLLA对应的 1个喷针在高压电源板上均匀排列，调节微量注射泵的速率为 6mL/小时，调节高压发生器的电压为 28KV，调节接收装置的接收距离为 22cm，通过两种材料的同时静电共纺制备出两种溶解性质不同的纤维丝材料错综交叉的纤维膜，达到 0.5mm厚度后停止静电纺丝。

(3 ) 将取下的膜，放入六氟异丙醇溶剂中超声溶胀、溶解 6小时，使 PLLA材料溶解完全， PCU材料则保持不变，从溶剂中取出未被溶解的材料，即得到蓬松纤维层（A4)。

此处所得蓬松纤维层（A4) 的纤维平均直径为 2μιη，膜厚度为 0.5mm，平均孔径为 300μιη, 抗张强度为 25N/cm，蓬松度为 830cm³/g，柔软度为 230毫牛顿。

实施例 17

按照实施例 4完全相同的方法得到蓬松纤维层（A5 )。

所述蓬松纤维层（A5 )的纤维平均直径为 2μηι，膜厚度为 0.6mm，平均孔径为 450μηι，抗张强度为 50N/cm，蓬松度为 1100cm³/g，柔软度为 400毫牛顿。实施例 18

将 PVDF材料溶解于体积比为 4:6的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 /丙酮混合溶剂，使 PVDF在溶液中的浓度为 20g/100mL_; 制备得到均一的纤维材料溶液。

将实施例 14制备的蓬松纤维层（A2) 覆盖在接收辊表面，将前述 PVDF溶液装入静电纺丝注射器中，调节微量注射泵的速率为 4mL/小时，调节高压发生器的电压为 28KV，调节接收装置的接收距离为 20cm，电纺针头的移动速度 10厘米 /秒，接收辊转速为 4000圈 /分，进行静电纺丝，在蓬松纤维层（A2) 上形成定向纤维层（Bl )，从而得到包含蓬松纤维层（A2) 和定向纤维层（B1 ) 的双层纤维膜。

实施例 19

将前述溶液装入静电纺丝注射器中，调节微量注射泵的速率为 4mL/小时，调节高压发生器的电压为 28KV，调节接收装置的接收距离为 20cm，电纺针头的移动速度 10厘米 / 秒，接收辊转速为 4000圈 /分，进行静电纺丝。纺至膜层厚度约为 0.3mm后关闭静电纺丝，得到有序取向单层的定向纤维层（B2)。

(2)将步骤（1 ) 的定向纤维层（B2)与实施例 15制备的蓬松纤维层（A3 )两种纤维膜叠置在一起，然后使用 20000Hz频率超声（福坦机械设备有限公司，型号 JT-200-S), 每隔 10厘米的距离通过点超声融合的方式将上述各层连接在一起，得到包含蓬松纤维层 (A3 ) 和定向纤维层（B2) 的双层纤维膜。

实施例 20

<含表面止血层 >

将 0.9g氯化钠， 1.79g十二合水磷酸氢二钠溶于 70mL水溶液中，充分溶解后，加入 1.5mL浓度为 36体积％的乙酸溶液和 20mL乙醇搅拌均匀，得到溶液。

将 2g氧化纤维素和 2g的 II型胶原加热溶解于上述溶液 A中，并待其冷却，得到溶液 B。将冻干的凝血酶冻干粉制成浓度为 350单位 /mL，将 1 OmL的凝血酶溶液加入到上述的溶液 B中，得到溶液〔。

将实施例 13、 14、 15、 16、 17中制得的蓬松纤维层（A1-5 ) 浸入上述溶液 C中 10分钟，将充分浸湿的膜片进行冻干过夜。裁剪到需要的规格，得到一个含有止血功能成分氧化纤维素的盆底修复膜片和无张力悬吊带。

<组织修复用植入膜片在盆底修复中的应用：实施例 21-22>

实施例 21

采用现有临床采用的聚丙烯网片（3DMAXTM _MeSh，由中山大学附属第二医院提供的样品）作为对照组（ I组）、由实施例 13步骤（2) 中制得的电纺膜裁减得到的纤维膜作为对照组（Π组）、由实施例 13中制得的 PVDF蓬松纤维层（A1 ) 裁减得到的植入膜片 1 (III组）、由实施例 14制得的 PVDF蓬松纤维层（A2) 裁减得到的植入膜片 2 ( IV组）、由实施例 15制得的 PVDF蓬松纤维层（A3 ) 裁减得到的植入膜片 3 ( V组）、由实施例 16 制得的 PCU蓬松纤维层（A4) 裁减得到的植入膜片 4 ( VI组）、由实施例 17制得的 PLLA 蓬松纤维层（A5 )裁减得到的植入膜片 5 ( 组）作为实验组进行小型猪实验。上述材料均裁剪成 2cmx2_Cm大小膜片。选用 20kg〜25kg，健康性成熟雌性小型猪 28只，随机分为 7 组，每组 4只。

对小型猪实施全麻，仰位保定。经下腹部腹壁入路，暴露膀胱、子宫和阴道上段。将膜片分别置入阴道膀胱间隙之间，丝线固定。术后对动物进行常规的喂养及观察。所有实验动物观察期内均表现良好，切口愈合良好，无植入物突出、暴露等发生，术部无红肿。术后饮食和精神状态正常，给以足够活动场地，均存活至取材时间。

术后 4周，每组处死两只动物，切取包括修复补片在内的阴道膀胱间隙组织标本。用手触摸植入材料的柔软度，对比组 I组的聚丙烯网片明显变硬，有异物感；对比组 II 组柔软度次之，实验组补片柔软度都有较大的改善，具体而言，以 IV、 ν、 νπ组柔软度最优，有韧性，接近自体组织。

对比材料内部的组织长入情况及与周围新生组织生长情况，大体观察，实验组 απ-νπ)膜片的组织长入情况及与周围新生组织的结合牢固度较 I组聚丙烯网片和对比组 Π组膜片更优异，表现为实验组膜片表面都覆盖一层新生上皮组织，血管化程度较高，膜片与新生组织不易撕开；其中 IV组 PVDF材料植入后 4周后的解剖效果如图 20，可见植入部位新生组织与周围组织并无差异。 I组聚丙烯网片和对比组 II组膜片表面也覆盖有一层新生组织，但新生组织上的毛细管稀疏；且 I组聚丙烯网片易与补片剥离，如图 21，材料与新生组织剥离后仍为质地较硬网架，新生没有长入；可见实验组具有更好的细胞和组织长入效果，与新生组织的相容性及贴合能力较强。

病理结果显示， ΙΙΙ-ΥΠ组植入膜片表面和内部均有大量成纤维细胞及胶原纤维增生，补片内部有较多毛细血管（3-5个 /HPF); 其中， V组补片内部有大量毛细血管（5-10个 /HPF)。可见新生组织已长入膜片内部，血管化程度高，并且长入较快，较高的蓬松度对细胞爬行、增殖以及组织的快速长入更有利。 Π组纤维膜片表面有较多成纤维细胞和胶原纤维，补片内部可见少量的成纤维细胞及胶原纤维增生，少数淋巴细胞浸润（<5个 /HPF)，少量毛细血管增生（2-3个/ HPF)，可见新生组织长入膜片内部但长入较慢，并且具有轻微的免疫炎症反应。 I组聚丙烯组网片周围有大量的成纤维细胞及胶原，较少量毛细血管（<2个 /HPF)，少量异物巨细胞（≤3个/ HPF)，可见新生组织无法与膜片长成一体，修复较慢，并有异物排斥反应。

继续观察致术后 12周，期间植入 I组聚丙烯网片材料的小型猪，有烦躁表现，有在舍内墙壁和栏杆上磨擦、咬尾表现，且精神状态不佳。其余实验小型猪，活动正常，在宽广词养场地放养。

术后 12周，每组处死两只动物，切取包括盆底修补植入物在内的阴道及膀胱标本。用手触摸， I组聚丙烯网片材料相对术后 4周时，仍保持相当的硬度，而且有明显异物感； Π组纤维膜片较软，但触摸植入部位与周围组织间，仍存在明显区分；实验组 ΙΙΙ-ΥΠ植入膜片的柔软度基本与自体组织接近，而且植入材料部位与周围组织间基本没有明显的手感区别；其中 V组材料的触感几乎与自体组织一致。

肉眼观察， ΙΙΙ-ΥΠ组植入膜片材料与长出的组织成为一体，无法分辨剥离，整体贴近人体组织，血管清晰可见。镜下观察结果显示， ιπ-νπ组植入膜片周围与胶原纤维、纤维细胞结合紧密，无法区分新生组织和膜片材料，内部可见大量的胶原纤维，可见新生组织已完全与膜片长成一体，实现重建修复；病理结果显示，材料表面及内部都可见大量成纤维细胞及胶原，未见异物巨细胞和淋巴细胞，材料与新生的组织融为一体，难以区分。可见较高的蓬松度更有利于诱导细胞长入和组织再生，适合的柔软度对更有利于植入部位新生组织与周围组织的贴合，而且显而易见地，新生组织在体内没有引起异物感，或对新生或自体组织造成摩擦损伤。

肉眼观察， II组纤维膜片与新生组织能剥离，表面可见较多毛细血管；镜下观察结果显示， II组纤维膜片周围与胶原纤维、纤维细胞结合有明显界线，易于区分新生组织和膜片材料，表面有大量胶原纤维、毛细血管丰富，内部仍可见材料；病理结果显示，材料表面有较多成纤维细胞及大量毛细血管生长（5-10个 /HPF)，内部可见少量毛细血管

(≤3个 /HPF)，异物巨细胞 1个 /HPF，可见新生组织长入膜片内部，但新生组织相对较少，并存在轻微异物反应。 I组聚丙烯网片，修复部位与周围组织产生四级（采用 Nari粘连评分法 1 )粘连，材料与所长出的组织较易剥离，聚丙烯材料清楚可见，材料内部未见新生组织长入、穿透；病理结果显示，仅材料周围有少量成纤维细胞及胶原形成，表面可见较多毛细血管增生（3-5个 /HPF)，大量异物巨细胞及淋巴细胞浸润，异物反应和免疫排斥严重，可见新生组织无法与膜片长成一体，修复效果差。同时推测观察过程对应实验猪烦躁表现的原因可能是异物感及组织感染反应强烈。

实施例 22

采用常规电纺得到的无取向的纤维层 (C)与实施例 15得到的蓬松纤维层（A3 ) 膜通过实施例 19步骤（2) 的方法制成双层纤维膜（简称无序蓬松膜）。

以上述无序蓬松膜作为对照组，实施例 19的双层纤维膜（简称有序蓬松膜）为实验组，进行动物实验，以验证有序结构的效果。

实验动物选用 12只健康新西兰兔，体重 2.0-2.5Kg，雌雄不限，兔龄约 6-12个月。将实验兔随机分成 3组，每组 4只。实验组和对照组均剪裁为 lcmx4_Cm长条，分别植入兔子腹部皮下，于术后 2周、 3个月观察材料表面组织生长情况。

植入方法：将家兔腹部备毛，消毒，沿中线切开腹部皮肤，钝性分离皮下筋膜与肌肉，暴露出适宜的材料植入范围。在皮下与筋膜间层间左侧植入 3条 lcmx4_Cm的实验组样品，右侧植入 3条 lcmx4_Cm的对照组样品。将材料用 4号线固定在相应的位置，分别缝合皮下筋膜层与皮肤层。

在 2周后，实验组和对照组的蓬松面均有纤薄的纤维包裹，植入部位毛细血管丰富。取出部分材料染色后观察，实验组中的定向层上面有明显的细胞生长和爬行取向，而对照组的无定向层细胞生长散乱。三个月后两组样品取出部分观察，实验组定向纤维层上面有明显的纤维组织定向纹理，而对照组的无定向纤维层则没有。可见定向取向纤维层 (B) 更有利于引导细胞爬行和组织顺应性生长，修复组织更贴近自然筋膜组织。

<防粘连组织修复膜的制备：实施例 23-26>

将实施例 1-3制备的组织修复用纤维膜作为防粘连组织修复膜的蓬松纤维层（A' l-3 )。实施例 23

( 1 ) 选取一张聚丙烯（PP) 的编织网片浸泡于浓度为 8g/100mL的 PVDF/Ν,Ν-二甲基甲酰胺与丙酮溶液中，浸泡 10分钟后取出网片，于 60°C的鼓风干燥箱中干燥 2小时，得到具有较薄 PVDF包裹的编织网片层 (C')。

(2)将步骤（1 )得到的编织网片层（ )放于两片实施例 3中得到组织修复用纤维膜

(蓬松纤维层（A'3 ) )中间并一起放于超声波熔接机上，在熔接压力为 120N，频率为 40KHz 的条件下超声熔接 8秒，即得到一张组织修复膜基材。

实施例 24

( 1 )选取一张聚丙烯（PP) 的编织网片浸泡于浓度为 3g/100mL的 PCU/Ν,Ν-二甲基甲酰胺与四氢呋喃溶液中，浸泡 10分钟后取出网片，于 50°C的鼓风干燥箱中干燥 2小时，得到具有较薄 PCU包裹的编织网片层 (C')。

(2)将步骤（1 )得到的编织网片层（ )放于两片实施例 1中得到的组织修复用纤维膜（蓬松纤维层（A' l ) ) 中间并一起放于超声波熔接机上，在熔接压力为 120N，频率为 40KHz的条件下超声熔接 7秒，即得到一张组织修复膜基材。

实施例 25

( 1 ) 将 60万分子量的壳聚糖溶解在乙酸水溶液中，乙酸水溶液的浓度为 5% (即乙酸的质量分数），壳聚糖的浓度为 3% (w/v), 得到浅黄色的溶液。 (2 ) 将上述浅黄色的溶液装入喷涂装置中，并将喷涂装置密封，外接气压装置，装配上 KZ-1型空心锥形喷嘴，调节出液量为 0.02ml/min，喷涂速度为 10cm/s，喷涂间距为 15mm, 设置完毕后，准备进行喷涂。

( 3 ) 以实施例 1-3得到的组织修复用纤维膜（蓬松纤维层（A' l-3 )) 和实施例 23-24 得到的样品作为基材，在其蓬松纤维层的任一外侧面喷涂。启动喷涂设备，以（2) 中所设参数进行喷涂，喷涂 3~5次后，将样品放入 35 °C鼓风干燥箱中，干燥 24h。

(4) 从鼓风干燥箱取出，用 75%酒精浸润后，放入水中浸泡 24h。

( 5 ) 干燥、裁剪、包装、灭菌，得到不含和含有中间层的防粘连组织修复膜片。实施例 26

( 1 ) 将 70万分子量的羧甲基壳聚糖溶解在乙酸水溶液中，乙酸水溶液的浓度为 3%

(即乙酸的质量分数），羧甲基壳聚糖的浓度为 5% (w/v)，得到具有一定粘稠性的溶液。

(2 ) 将上述溶液装入喷涂装置中，并将喷涂装置密封，外接气压装置，装配上通用 CC型扇形喷嘴，调节出液量为 0.01ml/min，喷涂速度为 15cm/s，喷涂间距为 12mm，设置完毕后，准备进行喷涂。

( 3 ) 以实施例 1-3得到的组织修复用纤维膜（蓬松纤维层（A' l-3 )) 和实施例 23-24 得到的样品作为基材，在其蓬松纤维层的任一外侧面喷涂。启动喷涂设备，以（2) 中所设参数进行喷涂，喷涂 5~7次后，将样品放入 40°C鼓风干燥箱中，干燥 24h。

(4) 从鼓风干燥箱取出，用 95%酒精浸润后，放入水中浸泡 24h。

( 5 ) 干燥、裁剪、包装、灭菌，得到不含和含有中间层的防粘连组织修复膜片。 <防粘连组织修复膜的动物实验>

实施例 27

在实施例 25制得的防粘连组织修复膜片中选取 4组材料，每组材料分别裁剪成 3.5 cmx6 cm膜片，进行新西兰兔腹壁全层缺损修复动物实验。

4组材料分别为：

1#材料：实施例 1结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片；

2#材料：实施例 3结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片；

3#材料：实施例 23结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片；

4#材料：实施例 24结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片。

新西兰兔，体重 2.5-2.8 Kg, 年龄 6-12个月，共 20只。将实验兔随机分成 4组，分别为 1#材料组、 2#材料组、 3#材料组和 4#材料组，每组 5只实验动物。对进入实验的动物进行麻醉、备皮、仰卧保定于木板上；消毒铺单后；于腹部正中，用 4#手术刀顺着兔腹白线切开皮肤，切口长约 8 cm，暴露腹壁肌肉层，将大小为 2 cmx5 cm的腹壁全层（包括腹膜、肌肉、筋膜组织）切除；用 4/0丝线分别将 1#材料、 2#材料、 3#材料和 4#材料分别与对应各组新西兰兔腹壁切口周围的肌肉间断缝合。用 4/0丝线间断缝合皮肤。

术后 3天内对所有实验动物肌肉注射青霉素 100万 IU/天，予以正常的饮食和饮水，笼内词养。观察期内 4组所有动物进食进水正常，切口愈合良好，未见术部感染及腹部隆起形成，所有实验动物大便正常，无肠梗阻等情况出现。观察期内无实验动物死亡。一个月后解剖，图 22显示了实施例 1结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片（1#材料）的动物解剖图；图 23显示了实施例 23结合实施例 25制得的防粘连组织修复膜片（3#材料）的动物解剖图。观察结果如表 2所示：

4组材料解剖观察情况表

从实验结果可以看出上述所有防粘连组织修复膜片都能有效促进组织生长，采用表层涂覆壳聚糖的方式能有效实现膜片的防粘连效果，利用超声熔接 PP材料的方式能大幅度提高膜片的强度。

Claims

权利要求书

1. 一种组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维膜由直径为 ΙΟηηι-ΙΟΟμηι的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200-2000cm³/g。

2. 根据权利要求 1所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维膜的平均孔径为 50-500μιη。

3. 根据权利要求 1或 2所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维膜的厚度为

0.2-2mm，所述纤维膜的抗张强度为 10-300N/cm。

4. 根据权利要求 1-3任一项所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，纤维膜的柔软度为 50-500毫牛顿。

5. 根据权利要求 1-4任一项所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维丝的材料为可降解材料、不可降解材料或其组合。

6. 根据权利要求 5所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，所述可降解材料为合成可降解材料或天然高分子材料；所述不可降解材料为聚氟类材料、聚丙烯类材料或聚氨酯类材料。

7. 根据权利要求 5所述的组织修复用纤维膜，其特征在于，所述纤维丝的材料选自由聚乳酸、聚己内酯、聚羟基乙酸、聚乳酸 -羟基乙酸共聚物、 1,3-丙二醇聚合物、胶原蛋白、明胶、纤维蛋白、丝蛋白、弹力蛋白拟态的肽聚合物、壳聚糖、改性壳聚糖、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、聚氨酯、聚碳酸酯聚氨酯、聚醚基聚氨酯、硅烷改性聚氨酯、聚乙二醇、聚对苯二甲酸乙二酯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚羟基丁酸戊酸酯、聚羟基丁酸己酸酯、聚磷酸酯、聚氨基甲酸酐、聚酯酰胺、聚乙烯醇、聚对二恶酮、聚碳酸酯、淀粉、纤维素、海藻酸、硫酸软骨素，肝素，葡聚糖、褐藻酸组成的组中一个或两个以上。

8. 一种组织修复用复合纤维膜，其特征在于，所述的复合纤维膜包括权利要求 1-7 任一项所述的纤维膜和编织层。

9. 根据权利要求 8所述的组织修复用复合纤维膜，其特征在于，所述编织层的材料为聚丙烯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、聚酯、聚乳酸、聚乳酸 -羟基乙酸共聚物。

10. 权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

( 1 )将溶解性质不同的两种纤维材料，分别溶于相应的溶剂中，得到两种均一的纤维材料溶液；

(2) 将步骤（1 ) 中得到的两种均一纤维材料溶液分别装入不同的静电纺丝注射器中，经过静电纺丝，得到两种溶解性质不同的纤维丝相互错综交叉的纤维膜；

(3 ) 根据纤维丝材料的溶解性质，用溶剂将步骤（2) 中制造的纤维膜中的一种纤维丝溶解，另外一种则保持不变，得到所述组织修复用纤维膜。

11. 权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

( 1 ) 将纤维材料溶于溶剂中，得到均一的纤维材料溶液；

(2) 将步骤（1 ) 中得到的均一纤维材料溶液装入静电纺丝注射器中，进行静电纺丝得到纤维，并将纤维接收为膜状结构，得到纤维膜；

(3 ) 将步骤（2) 中制备得到的纤维膜在溶剂超声溶胀后的状态下，进行预冻，然后进行真空冷冻干燥，得到所述组织修复用纤维膜。

12. 权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

( 1 ) 将纤维材料溶于溶剂中，得到均一的纤维材料溶液；

(2) 将步骤（1 ) 中得到的均一纤维材料溶液装入静电纺丝注射器中，经静电纺丝得到纤维膜；

(3 ) 将步骤（2) 中制备的纤维膜沿纤维膜的横轴或纵轴之一的方向拉伸，停止拉伸后使纤维膜在这种拉伸状态下定型；然后将纤维膜沿纤维膜的与上述拉伸方向垂直的方向拉伸，停止拉伸后使纤维膜在这种拉伸状态下定型，得到所述蓬松纤维层 (A)。

13. 根据权利要求 10-12任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤（2) 的静电纺丝中，调节微量注射泵的速率为 0.1-15.0 ml /小时，调节高压发生器的电压为 5-45 KV，调节接收装置的接收距离为 5.0-30.0 cm。

14. 一种用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的组织修复用植入膜片，其特征在于，所述植入膜片包括蓬松纤维层 (A); 所述蓬松纤维层 (A)为权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜，并且其蓬松度为 400-1500cm³/g，柔软度为 50-500毫牛顿。

15. 根据权利要求 14所述的植入膜片，其中所述植入膜片进一步包括定向纤维层 (B)，所述定向纤维层 (B)是由纤维丝定向排列而形成的具有多孔状三维结构的层。

16.根据权利要求 15所述的植入膜片，其中所述定向纤维层 (B)中的纤维丝的直径为 10ηιη-20μιη。

17. 根据权利要求 14-16任一项所述的植入膜片，其中所述植入膜片中各层之间通过静电纺丝、超声融合或缝合的方式结合。

18. 根据权利要求 14-17任一项所述的植入膜片，其中所述植入膜片中包含止血类药物、抗感染类药物、细胞生长调节剂、毒性抑制剂、麻醉剂微纳米颗粒和 /或治疗尿失禁的药物。

19. 根据权利要求 14-18任一项所述的植入膜片，其中所述植入膜片的表面包含止血层。

20. 根据权利要求 19所述的植入膜片，其中所述止血层包含胶原、聚氧乙烯纤维、壳聚糖、纤维蛋白、缩氨酸和 /或凝血酶。

21. 根据权利要求 19或 20所述的植入膜片，其中所述止血层通过静电纺丝、冷冻干燥、鼓风干燥、或真空烘干的方法形成。

22. 根据权利要求 14-21任一项所述的植入膜片，其中所述植入膜片具有贯穿所述植入膜片上下表面的贯穿孔。

23. 权利要求 14-22任一项所述的植入膜片的制备方法，其特征在于，其包括通过权利要求 10-13任一项的方法制备所述蓬松纤维层 (A)的步骤。

24. 根据权利要求 23所述的制备方法，其特征在于，进一步包括用静电纺丝制备定向纤维层 (B)的步骤。

25. 一种用于治疗女性盆底功能障碍性疾病的植入医疗器械，其特征在于，所述植入医疗器械包含权利要求 14-22任一项所述的植入膜片。

26. 根据权利要求 25所述的植入医疗器械，其中所述植入医疗器械为无张力尿失禁悬吊带或骨盆底补片。

27. 根据权利要求 26所述的植入医疗器械，其中所述无张力尿失禁悬吊带包括主体部分和端部，所述主体部分由权利要求 14-22任一项所述的植入膜片制成，所述端部用于手术器械牵引和 /或用于固定。

28. 根据权利要求 27所述的植入医疗器械，其中所述主体部分具有直线或波纹形的外轮廓。

29. 根据权利要求 28所述的植入医疗器械，其中所述波纹形的凹凸宽度差为 lmm-5mm。

30. 根据权利要求 26所述的植入医疗器械，其中所述骨盆底补片包括用于修复盆腔脏器的脱垂、膨出的中部块状部分，所述中部块状部分由权利要求 14-22任一项所述的植入膜片制成。

31. 根据权利要求 30所述的植入医疗器械，其中所述骨盆底补片包括用于悬吊脱垂盆腔脏器的位于中部块状部分外周的臂状结构。

32. 一种防粘连组织修复膜，其特征在于，所述防粘连组织修复膜的一侧表面层为蓬松纤维层 (A')，另一侧表面层为防粘连层 (B')_;

所述蓬松纤维层 (Α')为权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜。

33. 根据权利要求 32所述的防粘连组织修复膜，其中防粘连层 (Β')包含壳聚糖和 /或羧甲基壳聚糖。

34. 根据权利要求 32或 33所述的防粘连组织修复膜，其中在所述蓬松纤维层 (Α')和所述防粘连层 (Β')的中间存在中间层。

35. 根据权利要求 34所述的防粘连组织修复膜，其中所述中间层包括编织层 (C')或纤维层 (D')，或者编织层 (C')和纤维层 (D')的组合。

36. 根据权利要求 35所述的防粘连组织修复膜，其中所述纤维层 (D')由直径为 10ηιη~100μιη的纤维丝交织而成，具有多孔状结构，其蓬松度为 200~2000cm³/g。

37. 根据权利要求 32-36任一项所述的防粘连组织修复膜，其中所述防粘连层 (Β')通过喷涂或超声波熔接方式与其他层结合。

38. 权利要求 32-37任一项所述的防粘连组织修复膜的制备方法，其特征在于，其包括通过权利要求 10-13任一项的方法制备所述蓬松纤维层 (Α')的步骤，和通过喷涂或超声波熔接方式将所述防粘连层 (Β')与其他层结合的步骤。

39. 权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜、权利要求 8或 9所述的组织修复用复合纤维膜、或权利要求 32-37任一项所述的防粘连组织修复膜在制备组织修复用制品中的应用。

40. 根据权利要求 39所述的应用，其特征在于所述组织修复用制品为疝气修复补片、女性盆底功能障碍性疾病修复系统、人工肩袖、硬脑膜修复补片、脊膜修复补片、人工皮肤、心包膜补片、人工血管、人工神经导管、人工牙膜、人工韧带、人工跟腱、骨修复产品。

41. 根据权利要求 40所述的应用，其特征在于所述女性盆底功能障碍性疾病修复系统为盆底修复补片或尿失禁悬吊带或瘘修补片。

42. 由权利要求 1-7任一项所述的组织修复用纤维膜、权利要求 8或 9所述的组织修复用复合纤维膜、或权利要求 32-37任一项所述的防粘连组织修复膜制得的组织修复用制品。

43. 根据权利要求 42所述的组织修复用制品，所述组织修复用制品为疝气修复补片、女性盆底功能障碍性疾病修复系统、人工肩袖、硬脑膜修复补片、脊膜修复补片、人工皮肤、心包膜补片、人工血管、人工神经导管、人工牙膜、人工韧带、人工跟腱、骨修复产品。

44. 根据权利要求 43所述的组织修复用制品，其特征在于所述女性盆底功能障碍性疾病修复系统为盆底修复补片或尿失禁悬吊带或瘘修补片。