WO2014062022A1 - 이중구조 세포배양용기 및 이를 이용한 순환배양시스템 - Google Patents

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WO2014062022A1
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culture
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cell
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정초록
임정화
임동수
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한국생명공학연구원
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    • C12M41/48—Automatic or computerized control

Definitions

  • the present invention relates to a cell culture vessel and a circulation culture system capable of culturing cells and tissues or microorganisms of humans or animals / plants.
  • a culture vessel used for cultivating copper, plant tissues or plants is a container body having an upper surface open to hold a medium therein, and a cover that is coupled to the container body to prevent the medium from being contaminated with microorganisms. It is comprised by the container main body, plant tissues, plants, etc. which are culture
  • the container body or cover is made of a light-transmitting material through which light passes, and the medium injected into the culture vessel is divided into a solid medium and a liquid batch, and selected according to the characteristics of the tissue or plant to be cultured.
  • many techniques have been developed for the culture vessel to date.
  • Republic of Korea Registration No. 10-0679248 discloses a culture vessel in which the partition sharing the medium is divided
  • Republic of Korea Application No. 10-1999-0041759 discloses a culture vessel for preventing the external microbial contamination.
  • the culture vessel as described above is used only once, and can only culture single cells, and different heterogeneous cells cannot be co-cultured, and inflow / exhaust of medium or gas cannot be performed continuously.
  • the present invention is to provide a double cell culture vessel including a different inner container material inside the outer container that can contain the culture medium.
  • the present invention is to provide a circulating culture system capable of circulating a culture solution by connecting a plurality of dual culture vessels capable of three-dimensional cultivation by a circulation tube to set and selectively control the desired circulation tube and flow rate.
  • the present invention is the top surface is open, the outer container that can contain the culture solution; A container cover coupled to an upper end of the outer container to prevent the invasion of microorganisms; And an inner container located inside the outer container and containing a culture solution, the inner container being detachable from the outer container; It provides a cell culture vessel comprising a.
  • the present invention is provided with a plurality of cell culture vessels, connecting each of the cell culture vessels adjacent to the plurality of cell culture vessels are interconnected, the circulation tube connecting a pair of cell culture vessels disposed on the sock end ; It provides a circulation culture system comprising a; and a circulation unit for circulating by supplying a culture solution and gas to the cell culture unit.
  • the present invention includes an inner container of a different material inside the outer container that can hold the culture solution, thereby enabling simultaneous culture of adherent cells and non-adherent cells or heterologous non-adherent cells, and the outer container and the inner container can be separated. It is convenient to separate the inner container to be cultured by attaching cells from the outer container to move to other culture conditions.
  • the present invention is capable of three-dimensional culture can provide a culture conditions similar to the living body, it can be circulated by controlling the circulation of the culture solution sequentially, selective and quantitatively.
  • the present invention can be applied to devices for sequential, selective and quantitative control of various kinds of liquid transfer in cell culture as well as circulation apparatuses such as various laboratories, chemical production plants, wastewater treatment facilities, and the like.
  • FIG. 1 is an exploded perspective view of a cell culture vessel according to the present invention.
  • FIG. 2 is a perspective view of an outer container according to the present invention.
  • FIG. 3 is a front view of the outer container according to the present invention.
  • FIG. 4 is a right side view of the outer container according to the present invention.
  • FIG. 5 is a cross-sectional view of the cell culture vessel according to the present invention.
  • FIG. 6 is a perspective view of the inner container according to the present invention.
  • FIG. 7 is a block diagram of a circulation culture system according to the present invention.
  • FIG. 8 is a block diagram of a circulation culture system according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 9 is a view showing the result of culturing various cells using a circulation culture system according to an embodiment of the present invention.
  • the present invention is the top surface is open, the outer container that can contain the culture solution; A container cover coupled to an upper end of the outer container to prevent the invasion of microorganisms; And an inner container located inside the outer container and containing a culture solution, the inner container being detachable from the outer container; It is configured to include a cell culture vessel characterized in that it comprises a.
  • One side of the outer container is an inlet for allowing a culture or gas to flow into the outer container; And an outlet for discharging the culture liquid or gas introduced into the outer container to the other side of the outer container; It includes.
  • the container cover may include a gas supply part provided at one side of the container cover to supply gas into the outer container.
  • the gas supply unit may be opened and closed as necessary.
  • the gas supply unit may further include a filter of a microfiltration structure.
  • the inner container of the present invention is characterized in that it comprises a bottom surface and the side of the mesh form capable of cell adhesion.
  • the inner container of the present invention includes a bottom surface and the side capable of attaching the cells, the bottom surface and the side may be in the form of a mesh.
  • the culture medium supply device and the gas supply device is provided outside the cell culture container, the culture solution supply device is connected to the inlet port, the gas supply device is connected to the gas supply unit.
  • the material of the outer container and the inner container may be any one of PS (polystyrene), PP (polypropylene) and acrylic (acryl), characterized in that the outer container and the inner container may be made of different materials, respectively. do.
  • the present invention relates to a circulating culture system, the upper surface is open, the outer container which can hold the culture solution, the container cover coupled to the upper end of the outer container to prevent the invasion of microorganisms and located inside the outer container
  • the cell culture vessel is provided in plurality, the plurality of cell culture vessels connected to each of the adjacent cell culture vessels to be connected to each other, the circulation tube for connecting a pair of cell culture vessels disposed on the sock end;
  • a circulation unit which circulates by supplying a culture solution and a gas to the cell culture unit. It includes.
  • the circulation unit is connected to the circulation pipe pump for supplying the fluid to the cell culture along the circulation pipe; Pump driving means for driving the pump; A weight sensor installed in the culture vessel and measuring a changed weight value of the culture vessel in a culture process; And a flow control means for selectively operating any one of the pump driving means in accordance with the signal measured by the weight sensor. It includes.
  • it may further include a power supply for supplying power to the pump driving means, it may further include a receiving portion that can accommodate the cell culture vessel.
  • FIG. 1 is an exploded perspective view of a cell culture container according to the present invention
  • Figure 2 is a perspective view of an outer container according to the present invention
  • Figure 3 is a front view of the outer container according to the present invention
  • Figure 4 is a right side of the outer container according to the present invention
  • 5 is a cross-sectional view of the cell culture vessel according to the present invention
  • Figure 6 is a perspective view of the inner container according to the present invention.
  • Figure 7 is a block diagram of a circulating culture system according to the present invention
  • Figure 8 is a block diagram of a circulating culture system according to an embodiment of the present invention.
  • 9 is a view showing the result of culturing various cells using a circulation culture system according to an embodiment of the present invention. With reference to Figures 1 to 9 will be described in detail the configuration and function of the cell culture vessel of the present invention.
  • the present invention includes an inner container 130 of different materials in the outer container 110 that can hold the culture solution, thereby enabling simultaneous culture of adherent cells and non-adherent cells or heterologous non-adherent cells.
  • the cell line having a penetrating ability such as cancer cells makes it possible to observe that cells cultured in the inner container 130 penetrate and move into the outer container 110, and inject and discharge the medium or gas from the outside. This convenience is to provide a cell culture vessel 100 to enable the cells to be cultured under specific conditions.
  • the cell culture vessel 100 is composed of an outer container 110, a container cover 120 and the inner container 130.
  • the outer container 110 is configured to open the upper surface so as to contain the culture solution, the container cover 120 coupled to the top of the outer container 110 can prevent the microorganism from penetrating.
  • the outer container 110 and the container cover 120 are light-transmissive, and may be manufactured by injection molding or blow molding of synthetic resin, which is an elastic material.
  • the cell culture vessel 100 means a cell culture vessel 100 capable of culturing cells or tissues or microorganisms of humans or animals / plants.
  • the outer container 110 is provided with an inlet 111 on one side, the outlet 112 is provided on the other side. More specifically, the inlet 111 is to allow the culture solution to be introduced into the outer container 110, the outlet 112 is to allow the culture solution introduced into the outer container 110 to be discharged to the outside.
  • the cell may further include a cap (not shown) to block the inlet 111 and outlet 112 when the cells are cultured.
  • inlets 111 and outlets 112 may be installed as necessary.
  • the inlet 111 and the outlet 112 are located opposite to each other so that the flow direction of the culture medium is separated when the culture medium is injected or discharged.
  • the culture medium may be a cell line or plant of an animal (human), and in the case of culturing microorganisms, a medium suitable for the purpose may be used, but is not limited to any one.
  • a medium suitable for the purpose may be used, but is not limited to any one.
  • DMEM Denbecco's Modified Eagle's Medium
  • one side of the container cover 120 according to the present invention includes a gas supply part 121.
  • the gas supply unit 121 is a passage configured to enter and exit the air required for the culture
  • the filter 122 may be provided therein.
  • the filter 122 allows the microorganisms contained in the air to enter and exit the cell culture vessel 100 without being caught inside the air passage.
  • the gas supplied through the gas supply unit 121 may be oxygen or carbon dioxide. More specifically, animal cells may require oxygen, and plant cells may require carbon dioxide. Of course, nitrogen or other gas can also be supplied.
  • the gas supply unit 121 may be opened and closed. More specifically, when the culture solution is supplied to and discharged from the inlet 111 and the outlet 112 according to the present invention, the gas is supplied through the gas supply unit 121, and the gas is supplied to the inlet 111 and the outlet 112. When supplied and discharged, the gas supply unit 121 may be blocked to culture the cells. As an example, a conventional tape was used to block the gas supply unit 121.
  • the gas supply unit 121 provided in the container cover 120 is blocked and the culture solution inlet 111 of the outer container 110 is closed.
  • And outlet 112 may be used to inject and discharge the mixed gas of low oxygen.
  • the inner container 130 is put in a general cell culture container 100 and filled with a medium, it may be composed of a culture vessel having a triple structure contained in the outer container 110 provided by the present invention.
  • the culture medium supply device and the gas supply device are connected to the outside of the cell culture vessel 100, the culture solution and gas can be supplied into the culture vessel.
  • the gas supply device may be a conventional gas regulator, for example, a Harrison gas regulator was used.
  • the inner container 130 of the present invention may include a bottom surface and a mesh-shaped side that can be attached to the cell. Since the side surface of the inner container 130 of the present invention is formed in a mesh shape, cell culture is possible on the side surface, and three-dimensional cell culture may be possible. In particular, the present invention can be cultured in three dimensions to create an in vivo mimiv atmosphere, it is possible to reduce the difference between in vitro and in vivo (in vivo). Furthermore, the present invention can be presented in a way to reduce animal testing.
  • the mesh is in the form of a net, and is not particularly limited so long as it is a form for preventing the mixing of cells cultured in the outer container 110 and the inner container 130.
  • the inner container 130 of the present invention includes a bottom surface and the side that can be attached to the cell, the bottom surface and the side may be in the form of a mesh.
  • the outside of the bottom of the inner container 130 is coated with fibronectin (fibronectin) and the inside of the bottom can be cultured by mixing the cells with methyl cellulose.
  • fibronectin fibronectin
  • Such a structure is effective in observing the penetration and mobility of cells.
  • fibronectin is a glycoprotein that is present on the surface of normal fibroblasts or endothelial cells, the basal membrane surface of intestinal epithelial cells, and the adhesion surface of various cells.
  • the fibronectin has several functions, but in the present invention, it helps to promote the adhesion and extension of the cultured cells to the petri dish.
  • the inner container 130 of the mesh form according to the present invention enables the separation of colony-formable cells and single cells which are not characterized in that the cells grow together in one another, and facilitate the isolation culture of single cells from tissue. Can be.
  • the material of the outer container 110 and the inner container 130 of the present invention may be any one of PS (polystyrene), PP (polypropylene) and acryl material of the outer container 110 and the inner container 130. .
  • the outer container 110 and the inner container 130 is characterized in that each can be made of a different material. This may allow co-culture of adherent and non-adherent cells or heterologous non-adherent cells.
  • the outer container 110 is PP (polypropylene), and the inner container 130 is PS (polystyrene).
  • PP polypropylene
  • PS polystyrene
  • non-adherent cells were cultured in the outer container 110 and adherent cells were cultured in the inner container 130.
  • cell signaling factors may be secreted into the culture medium, making the interactions observable.
  • the cell signaling factor may be a growth factor, a cytokine, a vascular growth factor (VEGF), and if it is a cell signaling factor that achieves the above object, it belongs to the scope of the present invention. .
  • VEGF vascular growth factor
  • the outer container 110 of the present invention is made of PP (Polypropylene), unlike the conventional cell culture dish, the strength of the incubator is increased, so that it can be reused by autoclaving after washing. In addition, it is possible to reuse because it is possible to reduce the cost, and to facilitate the culture of non-adherent cells than adherent cells.
  • PP Polypropylene
  • adhesion of adherent cells to the container is possible by simple polyglycine coating, so it is possible to simultaneously culture different adherent cells in the outer container 110 and the inner container 130, and of course, heterogeneous Cultivation of adherent cells is also possible.
  • the inner container 130 of the present invention can be easily separated from the outer container (110). Therefore, by separating only the inner container 130, it may be convenient to move to other culture conditions, it is easy to collect the cells of the inner container 130 and the outer container 110, respectively.
  • the dual culture vessel 100 of the present invention may be formed in a size of 1 to 3 cm in height to 5 to 20 cm in diameter to facilitate the culture of birds, which is specific to the culture vessel having the purpose for the culture of birds It is not limited to the size.
  • a double culture vessel having a diameter of 5 cm to 6 cm may be used, and a double culture vessel having a diameter of 9 cm to 10 cm may be used.
  • the accommodating part 700 is to accommodate the double culture vessel 100, is determined according to the size of the double culture vessel 100 is limited to any size if the size can accommodate the double culture vessel (100) It is not.
  • the invention also relates to a circulation culture system.
  • the circulation culture system comprises a cell culture vessel 100, a circulation tube 200 and the circulation.
  • the cell culture container 100 may be a cell culture container 100 of a dual structure including the outer container 110 and the inner container according to the present invention.
  • the cell culture vessel 100 may be provided in plurality, and the circulation pipe 200 connects each of the culture vessels adjacent to each other so that the plurality of cell culture vessels 100 are interconnected, and A pair of cell culture vessels 100 disposed at the ends can be connected.
  • the cell culture vessel 100 disposed at both ends means a pair of cell culture vessels 100 disposed at the outermost side of the plurality of cell culture vessels 100.
  • the cell culture unit of the present invention may include three as an example, for convenience the first cell culture vessel 101, the second cell culture vessel 102, the third cell culture Called the container 103.
  • the first cell culture vessel 101 is installed by the second cell culture vessel 102 and the circulation tube 200, the first cell culture vessel 101 and the second cell culture vessel 102 for convenience.
  • the circulation pipe 200 for connecting the first circulation pipe 201 is called, the second cell culture vessel 102 and the third cell culture vessel 103 is connected to the circulation tube 200 is the second circulation tube ( 202), the third cell culture vessel 103 and the circulation tube 200 connecting the first cell culture vessel 101 is referred to as a third circulation tube (203).
  • one side of the circulation tube 200 is connected to the inlet 111 of the cell culture vessel, the other side of the circulation tube 200 may be connected to the outlet of the neighboring cell culture vessel.
  • the first circulation tube 201 may be connected to an inlet 111 of the first culture part and an outlet of the second cell culture container 102.
  • the circulation pipe 200 may further include a flow sensor 320.
  • the flow sensor 320 is to maintain a constant flow rate and flow rate of the circulating culture when the culture medium is circulated in the cell culture vessel 100, for example, a pressure resistance milliliter flow sensor (Pressure Resistant Milliliter Flow Sensor) Can be.
  • the circulation pipe 200 for connecting a pair of cell culture vessels disposed at both ends may include at least one fluid shutoff valve (210).
  • it may be included in the third circulation pipe 203.
  • the fluid blocking valve 210 is to block the circulation of the fluid, it may be a conventional stop valve.
  • the circulation culture system of the present invention may include a circulation unit capable of supplying a culture solution and a gas to the cell culture vessel.
  • the circulation part is present to continuously circulate the culture solution existing in the plurality of cell culture parts, and includes a pump 200 and a pump driving means 310, and changes the weight value in the culture vessel. It includes a flow rate control means 500 for selectively operating any one of the pump driving means in accordance with the weight sensor 400 and the signal measured by the weight sensor 400 to measure.
  • the pump 200 is for circulating the culture solution in the cell culture vessel, at least one may be installed, a plurality of pumps 200 may be installed to correspond to the plurality of cell culture vessels.
  • a pump driving means 310 for driving the pump 200 and the pump 200 between the plurality of culture vessels to supply the fluid to the culture vessel along the circulation pipe 200 It may be connected to the circulation pipe (200).
  • the first circulation pipe 201 may be connected to the first pump 301
  • the second circulation pipe 202 may be the second pump 302
  • the third circulation pipe 203 may be the third pump 303.
  • It may include.
  • a first pump driving means 311 for driving the first pump 301, the second pump driving means 312, the third pump for driving the second pump 302 It may include a third pump driving means for driving 303.
  • the pump 200 used in the present invention may be a piezo pump.
  • the piezo pump may be a fluid by converting the electrical energy into mechanical energy by using a piezoelectric phenomenon. That is, the piezo pump may pressurize the fluid using a piezoelectric transducer.
  • the piezo pump may move air, which is a fluid, in a constant direction by using mechanical energy generated by changing the position of the piezoelectric crystal due to the warping effect.
  • the piezoelectric transducer means pump driving means 310 in the present invention.
  • the pump 200 is driven by the pump driving means 310, the pump driving means 310 is operated according to the signal received and measured by the weight sensor 400 installed in the culture vessel pump 200 ) Can be driven.
  • the weight sensor 400 may be installed in the culture vessel and convert the weight measured by the sensor for measuring the weight of the fluid in the culture vessel into an electrical signal and transmit the electrical signal to the signal processor of the flow control means 500 of the present invention.
  • the weight sensor 400 installed in the first culture vessel is the first weight sensor 401
  • the weight sensor 400 installed in the second culture vessel is the second weight sensor 402
  • the weight sensor installed in the third culture vessel 400 is referred to as a third weight sensor 403.
  • the weight measurement range of the weight sensor 400 may be 0.2 to 130g or 10 to 80g.
  • the present invention includes a flow control means 500, it is possible to selectively operate the pump driving means 310 of the plurality of pump driving means 310 in accordance with the signal measured by the weight sensor 400.
  • the culture solution is circulated sequentially or selectively along the circulation tube 200 and the cell culture part through the circulation part, the culture solution is sufficiently stirred to obtain high productivity.
  • the circulation culture system of the present invention circulates the culture solution through the circulation section, and is equipped with a temperature sensor in the cell culture section, so that a temperature suitable for culturing cells or tissues can be set and maintained.
  • it may be set to 30 to 50 °C or 36 to 44 °C to maintain the temperature of the culture.
  • the circulation culture system of the present invention further includes a receiver capable of accommodating the cell culture part, and as shown in FIG. 7, the accommodation part is easily configured to stack a plurality of cell culture parts.
  • the receiving portion may be formed in a shelf shape to easily accommodate the plurality of cell culture vessels 100, the hole may be formed at a position corresponding to the inlet 111 and the outlet of the cell culture vessel (100). have.
  • a plurality of cell culture units may be formed to facilitate connection with the circulation tube 200 through the holes.
  • At least one cell culture vessel 100 of the plurality of cell culture vessels 100 may be additionally provided with a fluid supply unit for supplying a fluid into the culture vessel, the pump 300, the pump driving means 310 ), The power supply unit 600 for supplying power to the weight sensor 400 and the flow control means 500 may be further included.
  • the flow control means 500 of the present invention may set the control time including the control time setting unit in addition to this, and when the operation of the circulating culture system including the operating state is completed, a stop alarm is generated, the pump 300 ) Or when there is a failure of the weight sensor 400 may be set to generate a failure alarm.
  • each culture vessel was planted in a double culture vessel to prepare the culture. Specifically, planted in the outer container 110 and the inner container 130 of the double culture vessel was prepared for culture.
  • each of the four double culture vessels was accommodated in the receiving portion of the circulation culture system and mounted, and cultured at 37 ° C. for 72 hours while circulating the culture solution at a rate of 7 mL / min. Afterwards, the cells were viable and stained with hematoxylin (Sigma, USA) to observe the cultured cells.
  • cell culture vessel / 101 first cell culture vessel
  • gas supply section 122 filter
  • circulation tube / 201 first circulation tube
  • pump driving means / 311 first pump driving means
  • weight sensor / 401 first weight sensor

Abstract

본 발명은 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부용기; 상기 외부용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버; 및 상기 외부용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부용기로부터 분리 가능한 내부용기; 를 포함한 것을 특징으로 하는 세포배양용기에 관한 것이다. 본 발명은 상기 세포배양용기가 복수개로 구비되며, 상기 복수개의 세포배양용기가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 세포배양용기를 연결하며, 양말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기를 연결하는 순환관; 및 상기 세포 배양부에 배양액 및 가스를 공급하여 순환하는 순환부;를 포함하는 순환 배양 시스템에 관한 것이다.

Description

이중구조 세포배양용기 및 이를 이용한 순환배양시스템
본 발명은 사람 또는 동/식물의 세포 및 조직 또는 미생물을 배양할 수 있는 세포배양용기 및 순환배양시스템에 관한 것이다.
일반적으로 동, 식물 조직이나 식물 등을 배양할 때 사용되는 배양용기는 상면이 개방되어 내부에 배지를 담을 수 있도록 된 용기 본체와, 이 용기 본체에 결합되어 배지가 미생물 등에 오염되는 것을 방지하는 커버로 구성되어, 용기 본체에 배양할 동, 식물의 조직이나 식물 등에 넣고 커버를 닫아 배양시킬 수 있다.
그리고 용기 본체나 커버는 빛이 통과하는 투광성 재질로 구성되며, 배양용기의 내부에 주입되는 배지는 고체 배지와 액체 배치로 나뉘며, 배양하고자 하는 조직이나 식물의 특성에 따라 선택 사용된다. 이러한 배경에서 현재까지 배양용기에 대하여 많은 기술들이 개발되어 왔다.
이와 관련하여 대한민국 등록번호 제10-0679248호 에서는 배지를 공유하는 칸막이가 구분된 배양용기에 관하여 개시되어 있으며, 대한민국 출원번호 제10-1999-0041759호 에서는 외부 미생물 오염 방지용 배양용기가 개시되어 있다. 그러나 상기와 같은 배양용기는 일회성으로 사용되며, 단일세포만을 배양할 수 있는 것으로, 각기 다른 이종의 세포가 동시 배양될 수 없으며, 배지 또는 가스의 유입/배출이 연속적으로 이루어질 수 없다.
또한, 종래의 세포배양기술로 배양되는 세포는 세포가 2차원 방향으로 퍼진 단층세포이기 때문에, 생체 내와 동등한 3차원 조직을 구축할 수 없고, 세포가 체내에서 갖고 있는 특이적인 기능을 장시간 유지할 수 없으며, 이에 따라 시뮬레이션의 정밀도가 보장되지 않는 문제가 있다.
따라서 본 발명은 배양액을 담을 수 있는 외부 용기 내부에 재질이 다른 내부용기를 포함한 이중 세포배양용기를 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 3차원 배양이 가능한 복수개의 이중배양용기를 순환관으로 연결하여 원하는 순환관과 유량을 설정하고 선택적으로 제어하여 배양액을 순환시킬 수 있는 순환 배양 시스템을 제공하고자 한다.
본 발명은 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부용기; 상기 외부용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버; 및 상기 외부용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부용기로부터 분리 가능한 내부용기; 를 포함한 것을 특징으로 하는 세포배양용기를 제공한다.
본 발명은 상기 세포배양용기가 복수개로 구비되며, 상기 복수개의 세포배양용기가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 세포배양용기를 연결하며, 양말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기를 연결하는 순환관; 및 상기 세포 배양부에 배양액 및 가스를 공급하여 순환하는 순환부;를 포함하는 순환 배양 시스템을 제공한다.
본 발명은 배양액을 담을 수 있는 외부 용기 내부에 재질이 다른 내부용기를 포함함으로써, 부착세포 및 비부착세포 또는 이종의 비부착세포의 동시배양이 가능하며, 상기 외부 용기와 내용용기는 분리가 가능하여 세포가 부착되어 배양되는 내부용기를 외부용기로부터 분리하여 다른 배양 조건으로 이동하기 편리하다.
또한, 본 발명은 3차원 배양이 가능하여 생체와 유사한 배양조건을 제공할 수 있으며, 배양액의 순환을 순차적, 선택적 및 정량적으로 제어하여 순환할 수 있다.
또한, 본 발명은 세포배양뿐만 아니라 각종 실험실이나 화학 제품의 생산 공장, 폐수 처리 시설 등과 같은 순환 장치에서 다양한 종류의 액체 이송을 순차적, 선택적 및 정량적으로 제어하는 장치에 활용 가능하다.
도 1은 본 발명에 따른 세포배양용기의 분해 사시도이다.
도 2는 본 발명에 따른 외부용기의 사시도이다.
도 3은 본 발명에 따른 외부용기의 정면도이다.
도 4는 본 발명에 따른 외부용기의 우측면도이다.
도 5는 본 발명에 따른 세포배양용기의 단면도이다.
도 6는 본 발명에 따른 내부용기의 사시도이다.
도 7은 본 발명에 따른 순환 배양 시스템의 구성도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 순환 배양 시스템의 구성도이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 순환 배양 시스템을 이용하여 여러가지 세포를 배양한 결과물을 나타낸 도면이다.
본 발명은 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부용기; 상기 외부용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버; 및 상기 외부용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부용기로부터 분리 가능한 내부용기; 를 포함한 것을 특징으로 하는 세포배양용기를 포함하여 구성된다.
상기 외부용기 일측면에는 상기 외부용기 내부로 배양액 또는 가스가 유입될 수 있도록 하는 유입구; 및 상기 외부용기 타측면에는 외부용기로 유입된 배양액 또는 가스가 배출될 수 있도록 하는 배출구; 를 포함한다.
상기 용기 커버는 상기 용기 커버의 일측에 구비되어 외부용기 내부로 가스를 공급하는 가스 공급부를 포함할 수 있다. 또한 상기 가스 공급부는, 필요에 따라 개폐가능한 것을 특징으로 한다.
또한 상기 가스 공급부는 추가로 미세여과구조의 필터를 포함할 수 있다.
본 발명의 내부용기는 세포부착이 가능한 바닥면 및 메쉬형태의 측면을 포함하는 것을 특징으로 한다.
특정 양태에 따라, 본 발명의 내부용기는 세포부착이 가능한 바닥면 및 측면을 포함하며, 상기 바닥면 및 측면은 메쉬형태일 수 있다.
상기 세포배양용기 외부에는 배양액 공급 장치 및 가스 공급 장치가 구비되어, 배양액 공급 장치가 유입구와 연결설치되고, 가스 공급 장치는 가스 공급부와 연결설치된다.
또한 상기 외부용기 및 내부용기의 재질은 PS(polystyrene), PP(polypropylene) 및 아크릴(acryl) 중 어느 하나 일 수 있으며, 상기 외부용기 및 상기 내부용기는 각각 서로 다른 재질로 이루어질 수 있는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 순환 배양 시스템에 관한 것으로, 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부 용기, 상기 외부 용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버 및 상기 외부 용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부 용기로부터 분리 가능한 내부용기를 포함하는 세포배양용기; 상기 세포배양용기는 복수개로 구비되며, 상기 복수개의 세포배양용기가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 세포배양용기를 연결하며, 양말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기를 연결하는 순환관; 및 상기 세포 배양부에 배양액 및 가스를 공급하여 순환하는 순환부; 를 포함한다.
또한, 상기 순환부는 상기 순환관에 연결설치되어 상기 순환관을 따라 유체를 상기 세포 배양부에 공급하는 펌프; 상기 펌프를 구동하는 펌프구동수단; 상기 배양용기에 설치되어 배양과정에서 상기 배양용기의 변화되는 중량값을 측정하는 중량센서; 및 상기 중량센서에서 측정되는 신호에 따라 선택적으로 어느 하나의 상기 펌프구동수단을 작동시키는 유량제어수단; 을 포함한다.
이때, 상기 펌프구동수단에 전원을 공급하는 전원공급부를 추가로 포함할 수 있으며, 상기 세포배양용기가 수용될 수 있는 수용부를 추가로 포함할 수 있다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 대하여 상세히 설명하면 다음과 같다. 그러나 하기의 설명은 오로지 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로 하기 설명에 의해 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
도 1은 본 발명에 따른 세포배양용기의 분해 사시도, 도 2는 본 발명에 따른 외부용기의 사시도, 도 3은 본 발명에 따른 외부용기의 정면도, 도 4는 본 발명에 따른 외부용기의 우측면도, 도 5는 본 발명에 따른 세포배양용기의 단면도, 도 6은 본 발명에 따른 내부용기의 사시도이다. 도 7은 본 발명에 따른 순환 배양 시스템의 구성도, 도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 순환 배양 시스템의 구성도이다. 도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 순환 배양 시스템을 이용하여 여러가지 세포를 배양한 결과물을 나타낸 도면이다. 도 1 내지 도 9를 참조하여 본 발명인 세포배양용기의 구성 및 기능을 상세히 설명한다.
본 발명은 배양액을 담을 수 있는 외부용기(110) 내부에 재질이 다른 내부용기(130)를 포함함으로써, 부착세포 및 비부착세포 또는 이종의 비부착세포의 동시배양이 가능하다. 또한 정상적인 세포는 없지만, 암세포와 같은 침투능력이 있는 세포주가 내부용기(130)에 배양된 세포가 외부용기(110)로 침투 및 이동하는 것으로 관찰가능하게 하며, 외부로부터 배지 또는 가스의 주입 및 배출이 편리하게 하여 특정 조건에서 세포가 배양가능하도록 하는 세포배양용기(100)를 제공하고자 한다.
보다 구체적으로, 도 1 내지 도 6에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 세포배양용기(100)는 외부용기(110), 용기 커버(120) 및 내부용기(130)로 구성된다.
이때 상기 외부용기(110)는 배양액을 담을 수 있도록 상면이 개방되도록 구성되며, 상기 외부용기(110)의 상단에 결합되는 용기 커버(120)는 미생물이 침투하는 것을 방지할 수 있다. 또한 상기 외부용기(110)와 용기 커버(120)는 투광성이며, 탄성재질인 합성수지를 사출 또는 블로잉 성형하여 제작될 수 있다.
여기서, 세포배양용기(100)라 함은 사람 또는 동/식물의 세포 및 조직 또는 미생물을 배양할 수 있는 세포배양용기(100)를 의미한다.
본 발명에 따른 외부용기(110)는 일측에 유입구(111)가 구비되어 있으며, 타측에는 배출구(112)가 구비되어 있다. 보다 구체적으로 상기 유입구(111)는 외부용기(110) 내부로 배양액이 유입될 수 있도록 하는 것이고, 배출구(112)는 외부용기(110)로 유입된 배양액이 외부로 배출될 수 있도록 하는 것이다.
특정양태로, 세포가 배양될 때 유입구(111) 및 배출구(112)를 막기위한 캡(미도시)을 추가로 포함할 수 있다.
또한 유입구(111) 및 배출구(112)는 필요에 따라 하나 또는 두 개 이상 설치될 수 있다.
유입구(111) 및 배출구(112)는 서로 맞은 편에 위치하여 배양액의 주입 또는 배출시 배양액의 유동 방향이 구분되도록 하는 것이 좋다.
이 때 배양액은 동물(사람)의 세포주 또는 식물, 미생물 배양의 경우는 목적에 맞는 배지를 사용할 수 있으며, 어느 하나에 한정되는 것은 아니다. 일 예로 동물(사람)의 세포주를 배양하였을 경우에는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)을 사용할 수 있다.
다음으로, 본 발명에 따른 용기 커버(120) 일측에는 가스 공급부(121)를 포함한다.
보다 구체적으로, 가스 공급부(121)는 배양시 필요한 공기가 출입할 수 있도록 구성된 통로이며, 내부에 필터(122)가 구비될 수 있다. 상기 필터(122)는 공기 중에 포함된 미생물이 공기통로 내부에 걸려 세포배양용기(100)의 내부로 유입되지 않고 공기만 출입할 수 있도록 한다.
여기서, 가스 공급부(121)를 통하여 공급되는 가스는 산소 또는 이산화탄소 일 수 있다. 보다 구체적으로 동물 세포인 경우 산소가 필요하고, 식물 세포인 경우 이산화탄소가 필요할 수 있다. 물론, 질소나 그 밖의 가스도 공급이 가능하다.
특정양태로, 본 발명에 따른 가스 공급부(121)는 개폐가 가능할 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 유입구(111) 및 배출구(112)에 배양액이 공급 및 배출될 때는 가스 공급부(121)를 통해 가스를 공급하게 되고, 유입구(111) 및 배출구(112)에 가스가 공급 및 배출될 때는 가스 공급부(121)를 막아 세포를 배양할 수 있다. 일 예로 가스 공급부(121)를 막을 때는 통상적인 테이프를 사용하였다.
예를 들어 설명하자면, 저산소조건등과 같은 특수한 조건에서 세포 및 식물 또는 미생물을 배양할 경우는 용기 커버(120)에 구비된 가스 공급부(121)를 차단하고 외부용기(110)의 배양액 유입구(111) 및 배출구(112)를 활용하여 저산소의 혼합 가스등을 주입 및 배출 할 수 있다. 이때, 내부용기(130)를 일반적인 세포배양용기(100)에 넣고 배지를 채운 후 본 발명에서 제공하는 외부용기(110)에 담아 3중구조의 배양용기로 구성될 수 있다.
또한 세포배양용기(100) 외부에 배양액 공급 장치 및 가스 공급장치가 연결설치되어 배양용기 내부로 배양액 및 가스가 공급될 수 있다. 이 때 가스 공급장치는 통상적인 가스조절기일 수 있으며, 일 예로 헤리슨 가스조절기를 사용하였다.
도 6에 도시한 바와 같이, 본 발명의 내부용기(130)는 세포부착이 가능한 바닥면과 메쉬형태의 측면을 포함할 수 있다. 본 발명의 내부용기(130)의 측면이 메쉬형태로 형성되어 있어, 상기 측면에도 세포배양이 가능하여, 3차원의 세포배양이 가능할 수 있다. 특히, 본 발명은 3차원의 배양이 가능하여 생체와 유사한(in vivo mimiv) 분위기를 조성할 수 있고, 생체외(in vitro)와 생체내(in vivo) 차이를 줄일 수 있다. 나아가서 본 발명은 동물실험을 줄일 수 있는 방법으로 제시될 수 있다.
이에 더하여, 외부용기(110) 내부에 내부용기(130)가 존재하여, 이종세포 배양시에 혼합되는 것을 방지하는 효과가 발휘될 수 있다.
또한 메쉬형태는 그물망 형태를 하고 있는 것으로서, 외부용기(110) 및 내부용기(130)에서 배양되는 세포의 혼합을 막기 위한 형태라면 특별히 제한되지 않는다.
또한 특정 양태에 따라, 본 발명의 내부용기(130)는 세포부착이 가능한 바닥면 및 측면을 포함하며, 상기 바닥면 및 측면은 메쉬형태일 수 있다. 이때는 내부용기(130)의 바닥외부에는 파이브로넥틴(fibronectin)을 코팅하고 바닥 내부에는 메틸셀룰로스에 세포를 혼합하여 배양할 수 있다. 이와 같은 구조는 세포의 침투 및 이동력을 관찰하는데 있어 효과가 있다. 또한 외부로 배출되는 신호전달인자들에 의한 영향을 받는지 관찰이 가능하게 하고, 다른 조작이 필요 없이 세포의 침투 및 이동력을 현미경하에서 관찰이 가능할 수 있다.
여기서 파이브로넥틴(fibronectin)은 정상선유아세포나 내피세포의 표면, 장관상피세포의 기저막면 기타 여러가지 세포의 접착면에 존재하는 당단백질로서 세포외피의 성분을 의미한다. 상기 파이브로넥틴(fibronectin)은 여러가지 기능이 있으나 본 발명에서 배양세포가 페트리접시위에 접착 및 신전하는 것을 촉진하는데에 도움이 된다.
또한 본 발명에 따른 메쉬 형태의 내부용기(130)는 세포가 서로 뭉쳐서 자라는 것을 특징으로 하는 콜로니형성 가능한 세포와 그렇지 않은 단일세포의 분리를 가능하게 하며, 조직으로부터 단일세포의 분리 배양을 수월하게 할 수 있다.
또한 본 발명의 외부용기(110) 및 내부용기(130)의 재질은 상기 외부용기(110) 및 내부용기(130)의 재질은 PS(polystyrene), PP(polypropylene) 및 acryl 중 어느 하나 일 수 있다.
특히 외부용기(110) 및 내부용기(130)는 각각 서로 다른 재질로 이루어질 수 있는 것을 특징으로 한다. 이로 인해 부착세포 및 비부착세포 또는 이종의 비부착세포의 동시배양이 가능할 수 있다.
본 발명의 일 예로 외부용기(110)는 PP(Polypropylene), 내부용기(130)는 PS (Polystyrene)를 사용하였다. 이 때, 외부용기(110)에는 비부착세포가 배양되고 내부용기(130)에는 부착세포가 배양되었다. 또한 배양액으로 세포신호전달인자가 분비되어 상호 작용을 관찰가능하게 할 수 있다.
여기서, 상기 세포신호전달인자는 성장촉진인자(Growth factor), 싸이토카인(cytokine), 혈관 증식인자(VEGF)일 수 있으며, 이러한 목적을 달성하는 세포신호전달인자라면 본 발명의 범주에 속함은 당연하다.
또한, 본 발명의 외부용기(110)가 PP(Polypropylene) 재질일 경우, 종래의 세포배양접시와 달리 배양기의 강도가 높아져 세척 후 고압멸균하여 재사용이 가능하다. 또한 재사용이 가능하기 때문에 비용 절감의 효과가 있을 뿐 아니라, 부착세포보다 비부착세포의 배양을 수월하게 할 수 있다. 그러나 PP(Polypropylene) 재질일경우, 용기에 부착세포의 부착은 간단한 폴리글리신 코팅으로 가능하므로 외부용기(110) 및 내부용기(130)에 서로다른 부착세포의 동시배양이 가능하며, 당연히 이종의 비부착세포의 배양도 가능하다.
또한 본 발명의 내부용기(130)는 외부용기(110)로부터 쉽게 분리할 수 있다. 따라서 내부용기(130)만을 분리하여, 다른 배양 조건으로 이동하기 편리할 수 있으며, 내부용기(130) 및 외부용기(110)의 세포를 각각 수거하기 용이하다.
이에 더하여, 본 발명의 이중배양용기(100)는 새포배양에 용이하도록 직경이 5 내지 20 cm 에 높이는 1 내지 3 cm 의 크기로 형성될 수 있으나, 이는 새포배양을 위한 목적을 갖는 배양용기로 특정 크기로 한정되는 것은 아니다. 일 예로 직경이 5 내지 6 cm 에 높이는 1cm 의 이중배양용기를 사용할 수 있으며, 직경이 9 내지 10 cm 에 높이는 1.5 cm 의 이중배양용기를 사용할 수 있다. 또한, 수용부(700)는 이중배양용기(100)를 수용하기 위한 것으로, 이중배양용기(100)의 크기에 따라 정해지는 것으로 이중배양용기(100)를 수용할 수 있는 크기라면 어떠한 크기로 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 순환 배양 시스템에 관한 것이다.
보다 구체적으로, 본 발명에 따른 순환 배양 시스템은 세포배양용기(100), 순환관(200) 및 순환부를 포함하여 구성된다.
상기 세포배양용기(100)는 본 발명에 따른 외부용기(110) 및 내부용기를 포함하는 이중구조의 세포배양용기(100)일 수 있다. 특히, 본 발명에서 세포배양용기(100)는 복수개로 구비될 수 있으며, 상기 순환관(200)은 상기 복수개의 세포배양용기(100)가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 배양용기를 연결하며, 양 말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기(100)를 연결할 수 있다.
여기서, 양 말단에 배치되는 세포배양용기(100)라 함은, 복수개의 세포배양용기(100) 중에서 최외측에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기(100)를 의미한다.
도 7 및 도 8에 도시된 바와 같이, 본 발명의 세포 배양부는 일 예로 3개를 포함할 수 있으며, 편의상 제1세포배양용기(101), 제2세포배양용기(102), 제3세포배양용기(103)라 한다.
이때, 제1세포배양용기(101)는 제2세포배양용기(102)와 순환관(200)에 의해서 연결설치되며, 편의상 상기 제1세포배양용기(101)와 제2세포배양용기(102)를 연결하는 순환관(200)은 제1순환관(201)이라 하고, 제2세포배양용기(102)와 제3세포배양용기(103)를 연결하는 순환관(200)은 제2순환관(202), 제3세포배양용기(103)와 제1세포배양용기(101)를 연결하는 순환관(200)은 제3순환관(203)이라 한다.
특히, 순환관(200)의 일측은 세포배양용기의 유입구(111)와 연결되며, 상기 순환관(200)의 타측은 이웃하는 세포배양용기의 유출구와 연결될 수 있다. 일 예로, 제1순환관(201)은 제1배양부의 유입구(111)와 제2세포배양용기(102)의 유출구에 연결될 수 있다.
또한, 상기 순환관(200)은 유량센서(320)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 유량센서(320)는 배양액이 세포배양용기(100)를 순환할 때, 순환되는 배양액의 유량 및 유속을 일정하게 유지하기 위한 것으로, 일 예로 압력저항 밀리리터 유량센서(Pressure Resistant Milliliter Flow Sensor)일 수 있다.
또한 양 말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기를 연결하는 순환관(200)은 적어도 하나의 유체차단밸브(210)를 포함할 수 있다. 일 예로 제3순환관(203)에 포함될 수 있다.
여기서, 유체차단밸브(210)라 함은 유체의 순환을 차단하기 위한 것으로, 통상적인 스톱 밸브일 수 있다.
이에 더하여, 본 발명의 순환 배양 시스템은 세포배양용기에 배양액 및 가스를 공급할 수 있는 순환부를 포함할 수 있다.
보다 구체적으로, 순환부라 함은 복수개의 세포 배양부내에 존재하는 배양액을 계속적으로 순환시키기 위해 존재하는 것으로, 펌프(200)와 펌프구동수단(310)을 포함하며, 배양용기내의 변화되는 중량값을 측정하는 중량센서(400)와 상기 중량센서(400)에서 측정되는 신호에 따라 선택적으로 어느 하나의 펌프 구동수단을 작동시키는 유량제어수단(500)을 포함한다.
여기서, 펌프(200)는 세포배양용기에 배양액을 순환시키기 위한 것으로, 적어도 하나가 설치될 수 있으며, 복수개의 세포배양용기에 대응되도록 복수개의 펌프(200)가 설치될 수 있다.
이에 더하여, 상기 순환관(200)을 따라 유체를 배양용기에 공급하도록 복수개의 배양용기의 사이에는 펌프(200)와 상기 펌프(200)를 구동하는 펌프구동수단(310)을 포함할 수 있으며, 순환관(200)에 연결설치될 수 있다. 일 예로 제1순환관(201)은 제1펌프(301)와 연결될 수 있으며, 제2순환관(202)은 제2펌프(302), 제3순환관(203)은 제3펌프(303)를 포함할 수 있다. 또한, 일 예로 상기 제1펌프(301)를 구동하는 제1펌프구동수단(311)을 포함할 수 있으며, 제2펌프(302)를 구동하는 제2펌프구동수단(312), 제3펌프(303)를 구동하는 제3펌프구동수단을 포함할 수 있다.
일 예로, 본 발명에서 사용되는 펌프(200)는 피에조펌프일 수 있다. 여기서, 피에조펌프라 함은, 압전현상을 이용하여 전기적인 에너지를 기계적인 에너지로 변환하여 유체가 유동되도록 할 수 있다. 즉, 피에조펌프는 압전변환기 (piezoelectric transducer)를 사용하여 유체를 가압할 수 있다.
압전변환기에 전압을 가하면, 압전변환기를 이루는 압전 결정이 왜곡되는 전왜효과가 발생한다. 피에조펌프는, 전왜효과에 의하여 압전 결정의 위치가 변경됨으로 인하여 발생되는 기계에너지를 사용하여 유체인 공기를 일정한 방향으로 이동시킬 수 있다.
상기 압전변환기라함은 본 발명에서 펌프구동수단(310)을 의미한다.
특히, 상기 펌프(200)는 펌프구동수단(310)에 의해서 구동되며, 배양용기에 설치되어 있는 중량센서(400)에서 측정되어 수신되는 신호에 따라 펌프구동수단(310)이 작동하여 펌프(200)를 구동시킬 수 있다.
상기 중량센서(400)는 배양용기에 설치되어 배양용기 내의 유체의 중량을 측정하는 센서로 측정된 무게를 전기신호로 변환하여 본 발명의 유량제어수단(500)의 신호처리부로 전달할 수 있다. 이때, 제1배양용기에 설치된 중량센서(400)는 제1중량센서(401), 제2배양용기에 설치된 중량센서(400)는 제2중량센서(402), 제3배양용기에 설치된 중량센서(400)는 제3중량센서(403)라 한다. 본 발명에서, 중량센서(400)의 중량 측정범위는 0.2 내지 130g 또는 10 내지 80g 일 수 있다.
특히, 본 발명은 유량제어수단(500)을 포함하여, 상기 중량센서(400)에서 측정되는 신호에따라 복수개의 펌프구동수단(310) 중에서 선택적으로 펌프구동수단(310)을 작동시킬 수 있다.
상기 순환부를 통해 배양액이 순환관(200)과 세포 배양부를 따라 순차적 또는 선택적으로 순환되면서 배양액이 충분한 교반이 이루어져 높은 생산성을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 순환 배양 시스템은 순환부를 통해서 배양액을 순환시킴과 동시에, 세포 배양부내에 온도센서를 구비하고 있어, 세포 또는 조직을 배양하기에 적절한 온도를 설정하여 유지할 수 있다.
일 예로 30 내지 50℃ 또는 36 내지 44℃로 설정하여 배양액의 온도를 유지시킬 수 있다.
이에 더하여, 본 발명의 순환배양시스템은 상기 세포 배양부를 수용할 수 있는 수용가 추가로 포함되며, 도 7에 도시된 바와 같이 상기 수용부는 복수개의 세포 배양부를 적층하기에 용이하게 구성되어 있다.
이때, 상기 수용부는 복수개의 세포배양용기(100)를 수용하기 용이하도록 선반형태로 형성될 수 있으며, 상기 세포배양용기(100)의 유입구(111)와 유출구에 대응되는 위치에 홀이 형성될 수 있다. 상기 홀을 통해서 복수개의 세포 배양부가 순환관(200)과 연결하기 용이하도록 형성될 수 있다.
또한, 복수개의 세포배양용기(100) 중 적어도 하나의 세포배양용기(100)는 배양용기 내부로 유체를 공급할 수 있는 유체공급부가 추가로 설치될 수 있으며, 펌프(300), 펌프구동수단(310), 중량센서(400) 및 유량제어수단(500)에 전원을 공급하는 전원공급부(600)가 추가로 포함될 수 있다.
또한, 본 발명의 유량제어수단(500)은 이 외에 제어시간설정부를 포함하여 제어시간을 설정할 수 있으며, 동작상태부를 포함하여 순환 배양 시스템의 동작이 완료되면, 정지알람이 발생하고, 펌프(300) 또는 중량센서(400)의 고장이 있을 경우 고장알람이 발생하도록 설정할 수 있다.
이하, 본 발명의 효과에 대해 실험예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
<실험예>
실험예 1. 본 발명의 순환 배양 시스템을 이용하여 각종의 다른 세포배양
본 발명자의 실시예에서 3차원의 배양을 관찰하기 위하여 4종의 세포를 배양하였다.
먼저, 마우스 정상 섬유세포인 NIH 3T3 세포주 (ATCC), 지방전구세포 3T3-L1(ATCC), 사람 신장암 세포 786-o (ATCC) 및 사람의 간암 세포 hepG2(ATCC) 의 4종의 세포를 본 발명의 배양접시에 2차원 배양하였다.
다음으로, 이들을 트립신 (Gibco, USA)으로 처리하여 단일세포로 분리한 다음 5 × 104cell/mL 가 되도록 메틸셀룰로오스(methlycelluose 1.4%, R&D, USA)와 혼합하여 4종의 세포를 본 발명의 배양용기인 이중배양용기에 각각 심어 배양준비를 하였다. 구체적으로, 이중배양용기의 외부용기(110)와 내부용기(130)에 각각 심어 배양준비를 하였다.
그 후 4장의 각각의 이중배양용기를 순환 배양 시스템의 수용부에 수용하여 장착하고, 7mL/min 의 속도로 배양액을 순환시키면서 37℃, 72 시간 동안 배양하였다. 이후 세포의 생존과 배양상태를 헤마톡실린 (Sigma, USA) 염색하여 배양된 세포를 관찰하였다.
그 결과, 도 6에 나타난 바와 같이, 내부용기(130)의 측면에 3차원으로 세포배양된 것을 관찰할 수 있었다.
또한, 본 발명의 세포 배양 시스템을 사용하여 배양액을 순차적, 선택적 또는 정량적으로 제어하여 순환시킴으로써 원할하게 3차원 세포배양을 할 수 있었다.
이상에서 본 발명에 따른 실시예들이 설명되었으나, 이는 예시적인 것에 불과하며, 당해 분야에서 통상적 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 범위의 실시예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서, 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 다음의 특허청구범위에 의해서 정해져야 할 것이다.
<부호의 설명>
100: 세포배양용기/101: 제1세포배양용기
102: 제2세포배양용기/ 103: 제3세포배양용기
110: 외부용기
111: 유입구/ 112: 배출구
120: 용기 커버
121: 가스 공급부/ 122: 필터
130: 내부용기
200: 순환관/ 201: 제1순환관
202: 제2순환관/ 203: 제3순환관
210: 유체차단밸브
300: 펌프/ 301: 제1펌프
302: 제2펌프/ 303: 제3펌프
310: 펌프구동수단/ 311: 제1펌프구동수단
312: 제2펌프구동수단/ 313: 제3펌프구동수단
320: 유량센서
400: 중량센서/ 401: 제1중량센서
402: 제2중량센서/ 403: 제3중량센서
500: 유량제어수단
600: 전원공급부
700: 수용부

Claims (12)

  1. 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부용기;
    상기 외부용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버; 및
    상기 외부용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부용기로부터 분리 가능한 내부용기; 를 포함한 것을 특징으로 하는 세포배양용기.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 외부용기 일측면에는 상기 외부용기 내부로 배양액 또는 가스가 유입될 수 있도록 하는 유입구; 및
    상기 외부용기 타측면에는 외부용기로 유입된 배양액 또는 가스가 배출될 수 있도록 하는 배출구; 를 포함하는 세포배양용기.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 용기 커버의 일측에 구비되어 외부용기 내부로 가스를 공급하는 가스 공급부를 포함하는 세포배양용기.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 가스 공급부는 개폐가 가능한 것을 특징으로 하는 세포배양용기.
  5. 제 3항에 있어서
    상기 가스 공급부는 추가로 미세여과구조의 필터를 포함하는 세포배양용기.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 내부용기는 세포부착이 가능한 바닥면 및 메쉬형태의 측면을 포함하는 세포배양용기.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 내부용기는 세포부착이 가능한 바닥면 및 측면을 포함하며, 상기 바닥면 및 측면은 메쉬형태인 것을 특징으로 하는 세포배양용기.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 세포배양용기 외부에는 배양액 공급 장치 및 가스 공급 장치가 연결설치되는 세포배양용기.
  9. 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부 용기, 상기 외부 용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버 및 상기 외부 용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부 용기로부터 분리 가능한 내부용기를 포함하는 세포배양용기;
    상기 세포배양용기는 복수개로 구비되며, 상기 복수개의 세포배양용기가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 세포배양용기를 연결하며, 양말단에 배치되는 한 쌍의 세포배양용기를 연결하는 순환관; 및
    상기 세포 배양부에 배양액 및 가스를 공급하여 순환하는 순환부;를 포함하는 순환 배양 시스템.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 순환부는 상기 순환관에 연결설치되어 상기 순환관을 따라 유체를 상기 세포 배양부에 공급하는 펌프;
    상기 펌프를 구동하는 펌프구동수단;
    상기 배양용기에 설치되어 배양과정에서 상기 배양용기의 변화되는 중량값을 측정하는 중량센서; 및
    상기 중량센서에서 측정되는 신호에 따라 선택적으로 어느 하나의 상기 펌프구동수단을 작동시키는 유량제어수단; 을 포함하는 순환 배양 시스템.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 펌프구동수단에 전원을 공급하는 전원공급부를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 순환 배양 시스템.
  12. 제9항에 있어서,
    상기 세포배양용기가 수용될 수 있는 수용부를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 순환 배양 시스템.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11732232B2 (en) 2020-08-14 2023-08-22 Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology Biomimetic cell culture apparatus and cell culture system comprising the same

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10011811B2 (en) * 2013-11-25 2018-07-03 Vericel Corporation Cell seeding device and method
JP7035070B2 (ja) * 2016-11-11 2022-03-14 オリバイオテク・リミテッド 細胞培養装置システムおよびその使用の方法
KR101847044B1 (ko) * 2017-09-07 2018-04-09 한국기초과학지원연구원 3차원 세포배양 용기
US10247724B1 (en) * 2017-09-28 2019-04-02 Autobiologic Inc. Optically clear sealable petri dish bioreactor
JP7216267B2 (ja) * 2018-06-29 2023-02-01 国立大学法人大阪大学 培養容器の収容体および培養処理システムおよび培養用収容体の使用方法
KR102127469B1 (ko) 2018-08-13 2020-06-26 광주과학기술원 세포배양장치 및 이를 이용한 세포배양시스템
CN109929762A (zh) * 2019-04-02 2019-06-25 杭州园泰生物科技有限公司 一种细胞培养装置

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5766937A (en) * 1996-02-15 1998-06-16 Becton Dickinson And Company Culture vessel and assembly
KR19990041759A (ko) 1997-11-24 1999-06-15 손욱 이차전지의 캡 어셈블리
US20040132175A1 (en) * 2000-07-19 2004-07-08 Jerome Vetillard Cell culture chamber and bioreactor for extracorporeal culture of animal cells
JP2005095015A (ja) * 2003-09-22 2005-04-14 Jms Co Ltd 培養容器、該培養容器を使用した培養物と培養物の作製方法
KR100679248B1 (ko) 2005-04-27 2007-02-05 서울시립대학교 산학협력단 배지를 공유하는 칸막이가 구분된 배양용기
KR20090065643A (ko) * 2007-12-18 2009-06-23 송효주 세포배양용기 및 세포배양계
KR20110133382A (ko) * 2010-06-04 2011-12-12 (주) 청맥 미생물 배양 용기

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2701229A (en) * 1950-10-02 1955-02-01 Scherr George Harry Apparatus for the cultivation of microorganisms
DE1017751B (de) * 1956-01-19 1957-10-17 Dr Herbert Bucherer Geraet zur Zuechtung von Mikroorganismen
US4201845A (en) * 1976-04-12 1980-05-06 Monsanto Company Cell culture reactor
US6066496A (en) * 1991-09-17 2000-05-23 Bridges; Michael Anthony Apparatus for culturing mammalian respiratory epithelial
US5612188A (en) * 1991-11-25 1997-03-18 Cornell Research Foundation, Inc. Automated, multicompartmental cell culture system
US5527705A (en) * 1994-09-12 1996-06-18 Becton, Dickinson And Company Roller bottle for trans-membrane co-culture of cells and method for its use
AT407047B (de) * 1998-08-03 2000-11-27 Pfaller Walter Dr Zellkulturvorrichtung
KR20010029122A (ko) * 1999-09-29 2001-04-06 복성해 외부 미생물 오염방지용 동식물 세포조직배양 보조용기
DE10240787B4 (de) * 2002-08-30 2004-07-22 Oxyphen Ag Zellkultureinsatz
GB0224986D0 (en) * 2002-10-28 2002-12-04 Smith & Nephew Apparatus
US7186548B2 (en) * 2003-11-10 2007-03-06 Advanced Pharmaceutical Sciences, Inc. Cell culture tool and method
US7635586B2 (en) * 2003-11-26 2009-12-22 Broadley-James Corporation Integrated bio-reactor monitor and control system
EP1702052A4 (en) * 2003-12-19 2009-02-18 Univ Waterloo CELL CELL AND METHOD AND APPARATUS FOR CELL CULTURE
US20050244957A1 (en) * 2004-04-29 2005-11-03 Healthy Soils, Inc. Regenerating tank
EP1857543B1 (en) * 2005-02-15 2012-04-04 School Juridical Person Kitasato Gakuen Method and apparatus for producing high-density cultured tissue
US20080076170A1 (en) * 2006-09-27 2008-03-27 Tuija Annala Cell culture insert and cell culture vessel
KR100946643B1 (ko) * 2007-11-30 2010-03-09 코아스템(주) 세포배양장치 및 이를 구비한 대용량 자동화 세포배양기
US9550971B2 (en) * 2009-04-14 2017-01-24 Therapeutic Proteins International, LLC Universal bioreactors and methods of use
CN201729833U (zh) * 2010-02-05 2011-02-02 广州医学院 一种用于灌流实验的细胞培养皿
CN202181306U (zh) * 2011-08-23 2012-04-04 首都医科大学附属北京友谊医院 多种细胞共培养支架以及多种细胞共培养装置
WO2013145235A1 (ja) * 2012-03-29 2013-10-03 株式会社日立製作所 培養容器及び自動培養装置

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5766937A (en) * 1996-02-15 1998-06-16 Becton Dickinson And Company Culture vessel and assembly
KR19990041759A (ko) 1997-11-24 1999-06-15 손욱 이차전지의 캡 어셈블리
US20040132175A1 (en) * 2000-07-19 2004-07-08 Jerome Vetillard Cell culture chamber and bioreactor for extracorporeal culture of animal cells
JP2005095015A (ja) * 2003-09-22 2005-04-14 Jms Co Ltd 培養容器、該培養容器を使用した培養物と培養物の作製方法
KR100679248B1 (ko) 2005-04-27 2007-02-05 서울시립대학교 산학협력단 배지를 공유하는 칸막이가 구분된 배양용기
KR20090065643A (ko) * 2007-12-18 2009-06-23 송효주 세포배양용기 및 세포배양계
KR20110133382A (ko) * 2010-06-04 2011-12-12 (주) 청맥 미생물 배양 용기

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP2878663A4

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11732232B2 (en) 2020-08-14 2023-08-22 Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology Biomimetic cell culture apparatus and cell culture system comprising the same

Also Published As

Publication number Publication date
EP2878663A1 (en) 2015-06-03
CN104379723A (zh) 2015-02-25
KR20140050345A (ko) 2014-04-29
EP2878663A4 (en) 2016-04-20
KR101422345B1 (ko) 2014-07-22
US20150191687A1 (en) 2015-07-09

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