WO2014005421A1 - 苯并间二氧杂环戊烯衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents

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赵旭阳
钟金清
龚永祥
朱齐凤
刘晓宇
郑晓鹤
刘礼飞
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Definitions

  • the present invention relates to a novel class of benzodioxol derivatives which have acetylcholinesterase inhibitory activity and which can be used For the treatment or prevention of Alzheimer's disease.
  • the invention also relates to a process for the preparation of such compounds. BACKGROUND OF THE INVENTION With the rapid growth of the elderly population, the number of people suffering from Alzheimer's disease has also increased dramatically. Alzheimer's disease is also known as the Alzheimer type dementia or the senile dementia of the Alzheimer type.
  • Alzheimer's disease is the most common type of Alzheimer's disease. It has become the sixth leading cause of death in the United States and the fifth leading cause of death among Americans aged 65 and over. Although scientists have conducted extensive and in-depth research on this disease, to date, the exact cause of the disease remains unclear. Alzheimer's disease is a progressive disease that constantly kills nerve cells, destroys nerve connections in the brain, and causes tissue in the brain to be destroyed, causing patients to gradually lose memory, consciousness, and judgment, and cause The patient developed emotional disorders and behavioral disorders.
  • Alzheimer's disease is an irreversible disease, and there is no medicine to prevent it, and no medicine can cure it or delay the progression of it.
  • the drugs currently used to treat the disease can only alleviate or ameliorate the symptoms of the disease.
  • Acetylcholine is a neurotransmitter that is a chemical released by the nerves. If the system that produces acetylcholine in the brain, the cholinergic system is damaged, it can cause Alzheimer's disease. Memory impairment; and the function of acetylcholinesterase is to catalyze the hydrolysis of acetylcholine, ie, acetylcholine.
  • acetylcholinesterase inhibitors include donepezil and tacrine. , rivastigmine and galantamine, wherein donepezil (Sugimoto et al. US4895841 and 5100901; Pathi et al. WO 2007077443; Parthasaradhi et al. WO 2005003092; Dubey et al.
  • WO 2005076749; Gutman Et al. WO 200009483; Sugimoto et al. J. Med. Chem. 1995, 38, 481 ) is a first-line treatment for Alzheimer's disease.
  • donepezil and the other four drugs only improve the patient's symptoms, and this is only a temporary improvement in symptoms, only lasting about 6-12 months, and the patient's response rate to these drugs is only About 50% (Alzheimer's Association, 201 1 Alzheimer' Disease Facts and Figures, Alzheimer's & Dementia, 201 1, 7(2), 208).
  • the present invention provides a novel class of acetylcholinesterase inhibitors, which are a new class of benzodioxole derivatives, which are more effective than donepezil and have less side effects for the treatment of Alzheimer's disease. drug.
  • SUMMARY OF THE INVENTION One object of the present invention is to disclose a novel class of acetylcholinesterase inhibitors - benzodioxole derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • the compounds of the present invention can be represented by the formula (I):
  • A is selected from the group consisting of phenyl, R 3 substituted phenyl, pyridyl, R 4 substituted pyridyl, pyrimidinyl, R 5 substituted pyrimidinyl, pyrrolyl, R 6 substituted pyrrolyl, pyridazinyl R 7 substituted pyridazinyl, pyrazolyl or R 8 substituted pyrazolyl;
  • R 3 is 1 to 5 substituents independently selected from the group consisting of halogen, (-C 3 ) fluorenyl, (C 2 -C 3 ) alkenyl, (C 3 -C 4 )cyclodecyl, ( D-C 3 ) alkoxy, trifluoromethyl or cyano;
  • R 4 is 1 to 4 substituents independently selected from the group consisting of: halogen, (C, -C 3 ) fluorenyl, (C 2 - C 3 ) alkenyl, (C 3 - C 4 ) cyclodecyl , (-) alkoxy, trifluoromethyl or cyano;
  • R 5 is 1 to 3 substituents independently selected from the group consisting of halogen, (-Cs) fluorenyl, (C 2 - C 3 ) alkenyl, (C 3 -C 4 )cyclodecyl, (d - C 3 ) decyloxy, trifluoromethyl or cyano;
  • R 6 is 1 to 4 substituents independently selected from the group consisting of: (dC 3 ) anthracenyl, (C 2 -C 3 ) alkenyl or (C 3 -C 4 )cycloalkyl;
  • R 7 is 1 to 3 substituents independently selected from the group consisting of halogen, (dC 3 ) alkyl, (C 2 -C 3 ) alkenyl, (C 3 - C 4 )cyclodecyl, (Cr "C 3 ) methoxy, trifluoromethyl or cyano;
  • R 8 is 1 to 3 substituents independently selected from the group consisting of: (dC 3 ) alkyl, (C 2 -C 3 ) alkenyl or (C 3 -C 4 )cycloalkyl;
  • A is preferably selected from phenyl, R 3 is substituted phenyl, pyridyl, R 4 is a substituted pyridinyl, pyrimidinyl or pyrimidinyl substituted with R 5.
  • A is preferably a phenyl group wherein the above, R 3 is substituted phenyl, pyridyl, R 4 is a substituted pyridinyl, pyrimidinyl, R 5 substituted pyrimidinyl, pyrrolyl, R 6 substituted pyrrole a pyridazine group, a R 7 -substituted pyridazinyl group, a pyrazolyl group, an R 8 -substituted pyrazolyl group; wherein R 3 is 1 to 5 substituents, preferably from the group: halogen, (C "C 3 An alkyl group, (dC 3 ) decyloxy group, trifluoromethyl group or cyano group; R 4 is 1 to 4 substituents, preferably from the group: halogen, (d-Cs) fluorenyl, (dC 3 ) ⁇ oxy, trifluoromethyl or cyano; R 5 is 1 to
  • R 3 is substituted phenyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, R 6 substituted pyrrolyl, pyridazinyl, or pyrazolyl; wherein R 3 1 to 5 substituents, preferably From the following groups: halogen, (CH3 ⁇ 4) fluorenyl, (-C3) alkoxy, trifluoromethyl or cyano; R 6 is 1 to 4 substituents, preferably from (dC 3 ) fluorenyl.
  • A is phenyl, 2-fluorophenyl, 3-fluorophenyl, 4-fluorophenyl, 2,6-difluorophenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, pyrimidine-2 -yl, pyrrol-2-yl, 5-methylpyrrol-2-yl, pyridazin-3-yl or pyrazol-5-yl. More specifically, the compound (I) wherein the compound is selected from the group consisting of:
  • the compound is:
  • R 1 and R 2 are as defined above;
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably tert-butoxycarbonyl (Boc); a compound of formula H, or a salt thereof -
  • the salt refers to a salt formed with an acid.
  • the acid is selected from the group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, trifluoroacetic acid and the like.
  • a second aspect of the invention discloses the use of a compound of formula (I) and a pharmaceutical composition thereof for the manufacture of a medicament for the treatment or prevention of a disease associated with an acetylcholinesterase inhibitor.
  • a further aspect of the invention resides in the use of a compound of formula (I) for the manufacture of a medicament for the treatment of Alzheimer's disease.
  • Another aspect of the invention resides in a pharmaceutical composition comprising an effective amount of a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Pharmaceutically acceptable carriers compatible with the compounds of formula (I) may also be included in the pharmaceutical compositions of the invention.
  • the compound of the formula (1) can be administered in a general dosage form, such as an oral dosage form and an injection dosage form, including capsules, tablets, powders, cachets, suspensions and solutions, preferably in an oral dosage form, more preferably. Administration is carried out in tablets and capsules in oral dosage forms.
  • the dosage form and pharmaceutical compositions can be prepared using conventional pharmaceutically acceptable excipients and additives, as well as conventional techniques.
  • the pharmaceutically acceptable excipients and additives include non-toxic compatible fillers, binders, disintegrants, buffers, preservatives, antioxidants, lubricants, flavoring agents, thickeners, coloring agents. Agent, emulsifier, etc.
  • a second object of the present invention is to disclose a process for the preparation of the benzodioxole derivative (Formula I).
  • the method comprises: reacting a compound of the formula II or a salt thereof with a compound represented by the formula HI-1 or IH-2 to obtain:
  • R 1 R 2 and A are as defined above;
  • X is a halogen or a hydroxyl group, and Y is a formyl group or a fluorenyloxy group.
  • A is a pyrrole or a substituted pyrrole, and the reaction is carried out under basic conditions (sodium alkoxide, potassium alkoxide or sodium/alcohol);
  • Y is a fluorenyloxycarbonyl group, A is a pyrrole or a substituted pyrrole, with sodium/ The alcohol promotes the reaction.
  • the compound of the formula II or a salt thereof can be prepared by a process comprising: removing an amino-protecting group of the compound of the formula IV: Wherein R 1 and R 2 are as defined above; R 9 is a protecting group for an amino group, preferably tert-butoxycarbonyl (Boc).
  • the invention also provides a method for formulating a compound of formula (I) with an acid: that is, the compound of formula (I) is thoroughly mixed with a corresponding acid (such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, etc.), and post-treated to obtain a corresponding salt, such as preparation.
  • a corresponding acid such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, etc.
  • the third object of the present invention is to disclose a method for preparing an intermediate (Formula IV) involved in the invention.
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably a tert-butoxycarbonyl group (Boc); and R 1Q is a halogen or p-toluenesulfonyloxy group.
  • a further aspect of the present invention provides a method for reducing a compound represented by the formula IV-1 to an alcohol by using the compound IV-1 as a raw material, and then converting the formed hydroxyl group into an easily acetyl group.
  • the oxy group is finally subjected to catalytic hydrogenolysis to remove the acetoxy group to obtain a compound of the formula (IV-2) (shown as the following Reaction Scheme 2).
  • This method is applicable to the case where both R 1 and R 2 are hydrogen in the compound of the formula (IV).
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably a tert-butoxycarbonyl group (Boc).
  • a further aspect of the present invention provides a monomethylation of a benzylic group (i.e., a CH 2 group of a 5-membered lactam) of the compound of the formula IV-2 with the compound IV-2 as a starting material to give a compound of the formula (IV).
  • the method of -3 (shown in the following reaction formula 3). This method is applicable to the case where R 1 is a methyl group or an ethyl group and R 2 is hydrogen in the compound of the formula (IV).
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably a tert-butoxycarbonyl group (Boc).
  • a further aspect of the present invention provides a benzylation of a compound of the formula IV-3 (i.e., a carbon atom bonded to R 1 ) using the compound IV-3 as a starting material to obtain a compound of the formula (IV).
  • the method of -4 ) (shown in the following Reaction Scheme 4). This method is applicable to the case where R 1 and R 2 are a methyl group or an ethyl group in the compound of the formula (IV).
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably a tert-butoxycarbonyl group (Boc).
  • a further aspect of the present invention provides a method for reacting a compound represented by the formula IV-1 with a methyl Grignard reagent to form an alcohol, and then dehydrating the alcohol to an alkene under acidic conditions, and finally producing the compound IV-1.
  • Carbon carbon The double bond is converted into a three-membered ring with Et 2 Zn/TFA/CH 2 I 2 to give a method of the compound of the formula (IV-5) (shown in the following Reaction Scheme 5).
  • This method is applicable to the case where R 1 and R 2 in the compound of formula (IV) are cyclized together with the carbon atom to which they are attached to form a three-membered carbocyclic ring.
  • R 9 is a protecting group for an amino group, preferably a tert-butoxycarbonyl group (Boc); and X is a halogen.
  • Halogen means fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • Mercapto as a group means a straight or branched saturated aliphatic hydrocarbon group.
  • Mercapto groups include methyl, ethyl, n-propyl and 2-propyl.
  • Alkenyl as a group refers to an aliphatic hydrocarbon group containing a carbon-carbon double bond, which may be straight or branched. (C 2 -C 3 ) Alkenyl includes vinyl, propenyl, isopropenyl and allyl.
  • Cycloalkyl means a saturated carbocyclic ring.
  • the cyclodecyl group includes a cyclopropyl group and a cyclobutyl group.
  • the three-membered ring has the same meaning as the three-membered carbocyclic ring, and all refer to a cyclopropyl ring, that is, both R 1 and R 2 are CH 2 , and the two are linked by a single carbon-carbon bond.
  • Alkoxy means a group of (fluorenyl-0-). Among them, the sulfhydryl group is as defined above. (dC 3 ) Alkoxy includes methoxy, ethoxy, JH propoxy and isopropoxy.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to certain salts of the above compounds which retain their original biological activity and are suitable for medical use.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound represented by the formula (I) may be a salt formed with a suitable acid, and the suitable acid includes an inorganic acid and an organic acid such as acetic acid, benzenesulfonic acid, benzoic acid, camphor.
  • the glassware is dried in an oven and/or heated to dryness.
  • the reaction was followed by glass silica gel-60 F254 plate (0.25 mm) (TLC).
  • Analytical thin layer chromatography was carried out in an appropriate solvent ratio (Wv). The end point of the reaction was taken as the starting material was depleted on the TLC.
  • Mass spectrometry was measured by LC/MS, and the ionization method was ESI or APCI.
  • Figure 1 is a plasma drug concentration-time curve after oral administration of donepezil hydrochloride, 1-33 and 1-35 to rats (the abscissa is time, the unit is h; the ordinate is the concentration, the unit is nmol/L).
  • Example 1 4-[2-(5,7-Dioxo-[1,3]dioxol[4,5-1]isoindol-6-yl)ethyl]piperidine Preparation of small carboxylic acid tert-butyl ester (Compound XI)
  • Example 8 4-[2-(5-Acetoxy-7-oxo-5H-[1,3]dioxol[4,5-f]isoindol-6-yl) Preparation of tert-butyl ethyl]piperidine-1-carboxylate (compound VHI-1)
  • IM VIII-1 Into a 500 ml reaction flask, add 55 g (0.136 mol) of compound VH-1, 385 ml of dichloromethane, 43 ml (0.31 mol) of triethylamine, 1.8 g (0.015 mol) of 4-dimethyl The aminopyridine was stirred, and 31 ml (0.33 mol) of acetic anhydride was added thereto, and the mixture was reacted at room temperature for 1 hour, washed with 200 ml of water, and the organic layer was collected, dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated to dryness to give about 79 g of compound VHI-1 , did not do a purification, directly used in the next page.
  • Example 28 4-[2-(5-Oxospiro[[1,3]dioxol[4,5-f]isoindole-7,-cyclopropane] -6 -preparation of tert-butyl ester of ethyl]piperidine-1-carboxylate (Compound XV)
  • Example 46 6-[2-[l-(2-Pyridylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]spiro[[1,3]dioxol[4,5-f Preparation of isoindole-7, fluorene-cyclopropane]-5-one hydrochloride (Compound 1-33)
  • Example 48 6-[2-[l-(2-Pyridylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]spiro[[1,3]dioxol[4,5-f Preparation of isoindole-7, hydrazine-cyclopropene]-5-ketophosphate (compound I-3S)
  • Example 49 6-[2-[l-(2-Pyridylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]-[1,3]dioxole[4,5-f] Preparation of indole-5,7-dione (compound 1-36)
  • Example 50 6-[2-[l-(Pyridazin-3-ylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]-[1,3]dioxole[4,5- f] Preparation of isoindole-5,7-dione (compound 1-37)
  • Example 51 6-[2-[l-(Pyridazin-3-ylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]spiro[[1,3]dioxole[4, Preparation of 5-f]isoindole-7,1'-cyclopropane]-5-one (Compound 1-38)
  • Example 52 6-[2-[1-(1 ⁇ -pyrrol-2-ylmethyl)-4-piperidinyl]ethyl]spiro[[1,3]dioxole [4, Preparation of 5-f]isoindole-7,1'-cyclopropene]-5-one (Compound 1-39)
  • 1H-pyrrol-2-ylmethanol can be obtained by reduction of 1H-pyrrole-2-carbaldehyde via sodium borohydride.
  • H-5 1-40 Add 300 ml of absolute ethanol to the reaction flask, 10 g (0.029 mol) of compound ⁇ -5, 20 g (0.13 mol) of ethyl 5-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylate, room temperature After stirring, 30 g (1.30 mol) of sodium metal was added in portions. After the addition, the temperature was raised to 60-70 ° C for 5 to 6 hours. The reaction was completed. Ethyl acetate and water were extracted and washed, and the organic layer was collected. It was dried, filtered, and the filtrate was concentrated to dryness.
  • Scopolamine is a competitive antagonist of central M choline receptors, which blocks Ml and M2 receptors, causes memory impairment, and becomes a model of Alzheimer's disease.
  • the drug of the formula (I) was screened by using donepezil hydrochloride (DPH) as a positive drug. After 3-5 days of dosing, the animals were tested for Morris water maze behavior.
  • mice Male c57 mice, 22 ⁇ 2 g, animals were housed in clean-dark (10 h/14 h) clean-grade animal rooms, fed with free water, and started experimenting after one week of adaptive feeding;
  • Animals were randomly divided into body weights, 15 in each group.
  • the normal group, the scopolamine group, the donepezil hydrochloride group (DPH), and the compound of the formula (I) were intragastrically administered (10 ml/kg) daily, and the normal group and the model group were given an equal volume of vehicle.
  • the Morris Water Maze consists of a circular pool, automatic image acquisition and processing system. After the animals enter the water, the monitoring device is started, the animal's movement trajectory is recorded, and the relevant parameters are automatically analyzed and reported after the experiment is completed.
  • the Morris water fan cylindrical pool is divided into four equal-sized quadrants, with a platform placed in the center of the first quadrant, which remains unchanged throughout the behavioral test. Put a proper amount of water on the day before the experiment so that the platform is not under water l cm. Add white pigment (2 g/L) before the experiment to make the water in the pool milky white (the water in the pool is changed once a day during the experiment). The experimental training phase was continued for 5 days and trained twice a day. During training, scopolamine (1 mg/kg) was intraperitoneally injected 30 min before training, and the mice were placed in the pool from the third quadrant to the pool wall. Record the time it takes for the mouse to enter the water to find the underwater concealed platform and stand on it.
  • Place navigation Used to measure the ability of mice to learn and remember water maze. Experiments were performed to record and record the route map and time required for the mouse to find and climb the platform, ie to record its latency.
  • Spatial probe test Used to measure the ability of mice to maintain memory on the platform's spatial position after learning to find a platform. After the positioning navigation experiment is completed, the platform is removed, and the water is placed in the water from the same water inlet point, and the time of the first arrival at the original platform position and the number of crossing the original platform are measured.
  • mice were decapitated, brain tissue was taken (operated on an ice tray), 10% tissue homogenate was prepared with pre-cooled saline, centrifuged (3000 rpm, lO min), supernatant The solution was tested for malondialdehyde (MDA) according to the kit.
  • MDA malondialdehyde
  • the model of learning and memory impairment induced by injection of ⁇ 1-42 into the lateral ventricle is the most commonly used animal model for evaluating whether a compound has improved learning and memory.
  • the animal model significantly destroys the learning ability and memory function of the animal, and the mechanism of affecting memory is clear, the result is easy to repeat, and there is no obvious non-specific effect.
  • Morris water maze test and lateral ventricle injection of A ⁇ 1-42 induced learning and memory impairment model were used to evaluate the learning and memory of rats at different concentrations (0.7 mg/Kg, 3.5 mg Kg 7 mg/g). Improvement.
  • Experimental materials and grouping were used to evaluate the learning and memory of rats at different concentrations (0.7 mg/Kg, 3.5 mg Kg 7 mg/g). Improvement.
  • mice SD, male (220 soil 20g), animals are kept in the light and dark alternate (12 h: 12 h) clean animal room, free to eat drinking water. The animals were tested after 3 days in the animal room to adapt to the environment.
  • ⁇ ⁇ 1-42 is formulated into 2 ⁇ / ⁇ 1 according to the instructions.
  • Donepezil hydrochloride control group donepezil hydrochloride (DPH) (3 mg/Kg) + lateral ventricle injection A ⁇ 1-42
  • Experimental equipment Rat Morris water maze device, brain stereotaxic instrument.
  • SD rats were randomly divided into normal control group, lateral ventricle injection ⁇ ⁇ 1-42 model group, positive control group (donepezil hydrochloride 3 mg/Kg) and test group 1-33 (0.7 mg/kg, 3.5 mg/Kg). And 7 mg/kg group); "In the lower control group, the lateral ventricle was injected with 5 ⁇ of normal saline, and the other groups were injected with ⁇ ⁇ 1-42 5 ⁇ /only. The rats were recovered for one week after the operation and subsequent experiments were performed.
  • the normal control group and the lateral ventricle were injected with ⁇ ⁇ 1-42 model group to give the corresponding solvent every morning at a fixed time; the 1-33 group and the donepezil hydrochloride control group were given the corresponding doses of the drug for 8 days.
  • the water maze experiment was started on the 5th day, and the formal water maze test was performed on the 9th day. Try.
  • the acute toxicity test refers to the "Technical Guidelines for Acute Toxicity Test of Chemical Drugs", and the representative hydrochlorides of the compounds 1-29 of the present invention (1-33) and the hydrochlorides of the compounds 1-17 (1-34) The mice were subjected to preliminary acute toxicity experiments.
  • Acute toxicity test of donepezil hydrochloride 1. Intravenous injection: Animals were divided into 6 groups of 5 each; the doses used in 6 groups were: 4.00 mg/kg, 3.60 mg/kg, 3.24 mg/kg, 2.92 mg/kg, 2.62 mg/kg and 2.36. Mg/kg. Each tail vein was injected once and observed for 1W.
  • Intravenous injection Animals were divided into 6 groups of 5 each; the doses used in 6 groups were: 50.00 mg/kg, 40.00 mg kg, 32.00 mg/kg, 25.60 mg/kg, 20.48 mg/kg and 16.18 mg /kg. Each tail vein was injected once and observed for 1W.
  • Intravenous injection Animals were divided into 5 groups of 5 each; the doses used in the 5 groups were: 25.60 mg/kg, 23.04 mg/kg, 20.25 mg/kg, 18.23 mg/kg and 16.40 mg/kg, respectively. Each tail vein was injected once and observed for 1 W.
  • the toxicity and mortality of the animals after administration were observed, and the mortality was statistically analyzed.
  • the results were analyzed by LD50 data processing software.
  • Inhibition activity compared with donepezil hydrochloride, 1-17 and 1-29 or its hydrochloride (1-33) showed a stronger effect of improving learning and memory in the Morris water maze test, showing better In vivo efficacy; particularly striking is 1-29 or its hydrochloride (1-33), although the compound has a weaker acetylcholinesterase inhibitory activity in vitro, only about 10% of donepezil hydrochloride, but has a ratio Donepezil hydrochloride has better in vivo efficacy, and the antioxidant effect is stronger than donepezil hydrochloride.

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Abstract

本发明提供一类新的苯并间二氧杂环戊烯衍生物以及这类化合物的制备方法。这类由式（I）所表示的化合物或其药学上可接受的盐具有乙酰胆碱酯酶抑制活性，可以用于治疗或者预防阿尔茨海默氏症（Alzheimer's disease）。式（I）中的R1、R2和A的定义见说明书。

Description

苯并间二氧杂环戊烯衍生物及其制备方法和用途 发明领域 本发明涉及一类新的苯并间二氧杂环戊烯衍生物， 这类化合物具有乙酰胆碱酯 酶抑制活性， 可以用于治疗或者预防阿尔茨海默氏症 （Alzheimer's disease) . 本发 明也涉及到这类化合物的制备方法。 发明背景 随着老年人口的迅速增长， 患有阿尔茨海默氏症 （Alzheimer's disease) 的人数 也随之急剧增加。 阿尔茨海默氏症又被称为阿尔茨海默型痴呆 （Alzheimer type dementia)或阿尔茨海默型老年痴呆 ( senile dementia of the Alzheimer type) 。 目前， 虽然这种疾病在全球范围内的患病率仍然是未知的， 但根据美国阿尔茨海默氏症协 会 （the Alzheimer's Association) 的最新报告， 201 1年美国大约有 540万人患有阿 尔茨海默氏症， 而到 2050年， 在美国患有该疾病的人数将增至约 1350万左右。 因 此， 研发药效更好且副作用更小的治疗这种疾病的新药实在是当务之急。
阿尔茨海默氏症是最常见的一种老年痴呆， 它已经成为美国人的第六大死因， 而且是 65岁以及 65岁以上的美国人的第五大死因。 虽然科学家己经对这种疾病进 行了广泛而深入的研究， 但迄今为止， 对造成该疾病的确切原因仍不清楚。 阿尔茨 海默氏症是一种渐进性的疾病， 它不断杀死神经细胞， 破坏大脑中的神经连接， 致 使大脑中的组织被破坏， 从而导致患者逐渐失去记忆、 意识和判断力， 并造成患者 出现情绪紊乱和行为障碍。
阿尔茨海默氏症是一种不可逆转的疾病，现在尚无任何药物可以预防这种疾病， 也没有任何药物可以治愈这种疾病或者延缓这种疾病的进程。 目前用于治疗该疾病 的药物只能减轻或改善该疾病的症状。 这些被美国 FDA批准使用的药物共有 5个, 其中 4个是乙酰胆碱酯酶 （acetylcholinesterase) 抑制剂。 乙酰胆碱 （acetylcholine) 是一种神经递质，是一种由神经释放的化学物质，如果大脑中产生乙酰胆碱的系统, 即胆碱能系统遭到损坏， 则会导致与阿尔茨海默氏症相关的记忆障碍； 而乙酰胆碱 酯酶的功能就是催化乙酰胆碱的水解， 即分解乙酰胆碱。 由于阿尔茨海默氏症伴随 13 000813 着乙酰胆碱活性的衰减， 因此抑制乙酰胆碱酯酶就是治疗这种疾病的途径之一。 如 前所述， 目前在临床使用的 5个治疗阿尔茨海默氏症的药物中， 有 4个是乙酰胆碱 酯酶抑制剂，这些乙酰胆碱酯酶抑制剂包括多奈哌齐（donepezil)、他克林（tacrine)、 卡巴拉汀（rivastigmine )和加兰他敏（galantamine)， 其中多奈哌齐（Sugimoto et al. US4895841 and 5100901 ; Pathi et al. WO 2007077443; Parthasaradhi et al. WO 2005003092; Dubey et al. WO 2005076749; Gutman et al. WO 200009483; Sugimoto et al. J. Med. Chem. 1995, 38, 481 ) 是治疗阿尔茨海默氏症的一线药物。 然而， 多奈哌 齐和其它四个药物都只能改善病人的症状， 而且就是这种只能改善症状的作用也是 短暂的， 仅能持续约 6-12 个月， 并且病人对这些药物的响应率也只有 50% 左右 (Alzheimer's Association, 201 1 Alzheimer' Disease Facts and Figures, Alzheimer's & Dementia, 201 1, 7(2), 208 ) 。 本发明提供一类新的乙酰胆碱酯酶抑制剂， 这是一类 新的苯并间二氧杂环戊烯衍生物， 是比多奈哌齐更有效的且副作用更小的治疗阿尔 茨海默氏症的药物。 发明内容 本发明的目的之一在于公开了一类新的乙酰胆碱酯酶抑制剂- -苯并间二氧杂 环戊烯衍生物或其药学上适用的盐。
本发明所述的化合物可用式 （I ) 表示：
Figure imgf000003_0001
(I )
其中
R1和 R2独立地选自以下基团： 氢、 甲基或乙基； R1和 R2可以合起来为 =0; R1和 R2也可以与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环；
A选自以下基团： 苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取代的吡啶基、 嘧啶基、 R5取代的嘧啶基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基、 R7取代的哒嗪基、 吡唑基 或 R8取代的吡唑基； R3为 1〜5个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ -C3) 垸基、 （C2-C3) 烯基、 （C3-C4) 环垸基、 （d- C3) 烷氧基、 三氟甲基或氰基；
R4为 1〜4个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （C,- C3) 垸基、 （C2 - C3) 烯基、 （C3-C4) 环垸基、 （ - ) 烷氧基、 三氟甲基或氰基；
R5为 1〜3个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ -Cs) 垸基、 （C2 - C3) 烯基、 （C3-C4) 环垸基、 （d- C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基；
R6为 1〜4个取代基， 独立地选自以下基团： （d-C3) 垸基、 （C2~C3) 烯基 或 （C3-C4) 环烷基；
R7为 1〜3个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 烷基、 （C2-C3) 烯基、 （C3- C4) 环垸基、 （Cr"C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基；
R8为 1〜3 个取代基， 独立地选自以下基团： （d-C3) 烷基、 （C2-C3) 烯基 或 （C3-C4) 环烷基；
或者其药学上可以接受的盐。 在另一种实施方案中， A优选选自苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取代的吡 啶基、 嘧啶基或 R5取代的嘧啶基。 在另一种实施方案中， 其中上述 R1和 R2优选氢或甲基、 R1和 R2合起来为 =0 或 R1和 R2与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环； 更优选的是 R1和 R2 与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环。
在另一种实施方案中， 其中上述 A优选苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取 代的吡啶基、 嘧啶基、 R5取代的嘧啶基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基、 R7 取代的哒嗪基、 吡唑基、 R8取代的吡唑基； 其中 R3为 1〜5个取代基， 优选自以下 基团： 卤素、 （C「C3) 烷基、 （d-C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基； R4为 1〜4个 取代基， 优选自以下基团： 卤素、 （d-Cs) 垸基、 （d-C3) 垸氧基、 三氟甲基或 氰基； R5为 1〜3 个取代基， 优选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 垸基、 （CH 3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基； R6为 1〜4个取代基， 优选自 （C,-C3)垸基； R7为 1〜3 个取代基， 优选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 烷基、 （d-C3) 垸氧基、 三氟甲基 或氰基； R8为 1〜3个取代基， 优选自 （d-C^ 垸基。
在另一种实施方案中， 其中上述 A更优选苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 嘧啶 基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基或吡唑基； 其中 R3为 1〜5个取代基， 优选 自以下基团： 卤素、 （CH¾)垸基、 （ -C3)烷氧基、 三氟甲基或氰基； R6为 1~4 个取代基， 优选自 （d-C3) 垸基。
最优选的是， A 为苯基、 2-氟苯基、 3-氟苯基、 4-氟苯基、 2， 6-二氟苯基、 2- 吡啶基、 3-吡啶基、 嘧啶 -2-基、 吡咯 -2-基、 5-甲基吡咯 -2-基、 哒嗪 -3-基或吡唑 -5- 基。 更具体地说， 其中所述的化合物式 （I) 选自：
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5，7-二酮（1-1); 6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基 ]-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （1-2);
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （1-3);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （"）；
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （1-5); 6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7-酮 （1~6)；
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7-酮 （1-7);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （1~8)；
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7-酮 (1-9)；
6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -7-酮 (1-10)；
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-η 异吲哚 -7-酮 （1-11);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5Η-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -7-酮 （1-12);
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -7,7-二甲基 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5-酮 (1-13)；
6-[2-[l-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7,7-二甲基 -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -5-酮 (1-14)；
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7,7-二甲基 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -5-酮 (1-15)；
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7,7-二甲基 -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -5-酮 (1-16)；
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7，1'-环丙 烷] -5-酮 （I一 17);
6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙烷 ]-5-酮 （1-18);
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙浣 ]-5-酮 （1-19);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 (1-20)；
6-[2-[1-[(2-氯苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 (1-21)；
6-[2-[1-[(2-三氟甲基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -7,Γ-环丙烷 ]-5-酮 （1-22);
6-[2-[1-[(2-甲基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲 哚 -7,1'-环丙院 ]-5-酮 （1-23);
6-[2-[1-[(2-氰基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲 哚 -7,1'-环丙院 ]-5-酮 （1-24);
6-[2-[1-[(2，6-二氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 (1-25)；
6-[2-[1-[(2-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异 吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-26);
6-[2-[1-[(3-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-ί]异 吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 （1-27); 6-[2-[l-[(4-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-28);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-29);
6-[2-[1-(3-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-30);
6-[2-[1-(4-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-31);
6-[2-[1- (嘧啶 -2-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-32);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮盐酸盐 （1-33);
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基）乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙 垸] -5-酮盐酸盐 （1-34);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮磷酸盐 （1-35);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7-二 酮 （1-36);
6-[2-[1- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基] -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 (1-37)；
6-[2-[1- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-38);
6-[2-[1-(1Η-吡咯 -2-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异 B引哚 -7，1'-环丙浣 ]-5-酮 （1-39);
6-[2-[1- [(5-甲基 -1H-吡咯 -2-基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （140);
6-[2-[1-(1Η-吡唑 -5-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 (1-11)；
或其药学上可接受的盐。 在上述化合物中， 优选化合物为：
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮 （1-29 )
或其药学上可接受的盐。 在上述化合物中， 优选所述化合物为：
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌 基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-1]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 ( 1-29 )；
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-ί]异吲哚 -7，1 '-环丙垸 ]-5-酮盐酸盐 （1-33) ; 或者
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮磷酸盐 （1-35)。 本发明的另一方面还涉及制备式（I )化合物所使用的中间体式 IV和式 II化合 物， 如下所示： 式 IV表示的化合物：
Figure imgf000008_0001
其中
R1和 R2如上所定义； R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc ) ； 式 H化合物， 或其盐-
Figure imgf000008_0002
其中， R1和 R2如上所定义。 所述的盐是指与酸所形成的盐。 其中， 优选所述 的酸选自盐酸、 硫酸、 三氟乙酸等。 本发明的第二方面公幵了通式（I)化合物及其药物组合物在制备用于治疗或者 预防与乙酰胆碱酯酶抑制剂相关的疾病的药物中的应用。 本发明的又一方面在于公丌了通式（I )化合物在制备用于治疗阿尔茨海默氏症 (Alzheimer's disease) 的药物中的应用。 本发明的另一方面在于药物组合物， 其中包括有效量的本发明化合物或者它们 药学上可接受的盐。 本发明药物组合物中还可以包含与式（I)化合物相容的药学上 适用载体。 式（1)化合物可以用一般的剂型给药， 如口服剂型和注射剂型， 包括胶 囊剂、 片剂、 粉剂、 扁囊剂、 混悬液剂和溶液剂， 优选以口服剂型给药， 更优选以 口服剂型中的片剂和胶囊剂给药。 剂型和药用组合物可以用常用的药学上适用的赋 形剂和添加剂以及常用的技术制得。 所述药学上适用的赋形剂和添加剂包括无毒性 的可配伍的填充剂、 粘合剂、 崩解剂、 缓冲剂、 防腐剂、 抗氧化剂、 润滑剂、 矫味 剂、 增稠剂、 着色剂、 乳化剂等。 本发明的目的之二在于公幵所述苯并间二氧杂环戊烯衍生物 （式 I ) 的制备方 法。所述方法包括： 将式 II所示的化合物或其盐与式 HI-1或 IH-2所示的化合物反 应得到：
Figure imgf000009_0001
Π I
其中， R1 R2和 A如上所定义； X为卤素或羟基， Y为甲酰基或垸氧羰基。 当 X 为羟基时， A 为吡咯或取代吡咯， 反应在碱性条件下进行 （醇钠、 醇钾或者钠 / 醇）； 当 Y为垸氧羰基时， A为吡咯或取代吡咯， 用钠 /醇促进反应。 其中式 II化合物或其盐可以通过以下方法制备得到，所述方法包括：脱除式 IV 所示的化合物的氨基保护基：
Figure imgf000010_0001
其中， R1和 R2如上所定义； R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc)。 本发明还提供了化合物式 （I ) 与酸成盐的方法： 即将化合物式 （I) 与相应的 酸 （如盐酸、 硫酸、 磷酸等） 充分混合， 经过后处理， 得到相应的盐， 如制备化合 物 1-33、 化合物 1-34和化合物 I - 35。 本发明的目的之三在于公开所涉及的中间体 （式 IV) 的制备方法 本发明的一方面在于提供了以化合物 V为原料制备化合物式（IV-1 )的方法（如 下反应式 1所示）。该方法适用于式（IV)化合物中 R1和 R2合起来为 =0时的情况。 其中， R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基（Boc); R1Q为卤素或对甲苯磺酰氧基。
Figure imgf000010_0002
VI IV-1 反应式 1 本发明的又一方面在于提供了以化合物 IV-1为原料， 将式 IV-1所示的化合物 先还原成醇， 然后将形成的羟基转化成易离去的乙酰氧基， 最后通过催化氢解将乙 酰氧基脱掉以得到化合物式（IV-2 ) 的方法（如下反应式 2所示）。 该方法适用于式 (IV) 化合物中 R1和 R2均为氢时的情况。 其中， R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧 羰基 （Boc)。
Figure imgf000011_0001
VIII IV-2
反应式 2
本发明的再一方面在于提供了以化合物 IV-2为原料， 将式 IV-2所示化合物的 苄位 （即 5元内酰胺的 CH2基团） 单垸基化以得到化合物式 （IV-3 ) 的方法 （如下 反应式 3所示）。 该方法适用于式 （IV) 化合物中 R1为甲基或乙基， R2为氢时的情 况。 其中， R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc)。
Figure imgf000011_0002
反应式 3 本发明的再一方面在于提供了以化合物 IV-3为原料， 将式 IV-3所示化合物的 苄位 （即与 R1相连的碳原子）垸基化以得到化合物式（IV-4 ) 的方法 （如下反应式 4所示）。 该方法适用于式 （IV) 化合物中 R1和 R2为甲基或乙基时的情况。 其中， R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc)。
Figure imgf000011_0003
IV-3 IV-4 反应式 4
本发明的再一方面在于提供了以化合物 IV-1为原料， 将式 IV-1所示的化合物 先与甲基格氏试剂反应形成醇， 然后醇在酸性条件下脱水成烯， 最后将产生的碳碳 双键用 Et2Zn/TFA/CH2I2转化成三元环以得到化合物式（IV-5)的方法（如下反应式 5所示）。 该方法适用于式 （IV)化合物中 R1和 R2与连接它们的碳原子一起环合起 来形成三元碳环的情况。 其中， R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc); X为 卤素。
Figure imgf000012_0001
IV-5
反应式 5 如无特别定义， 本发明中所使用的术语具有本领域普遍所接受的含义， 进一歩 地， 本发明所使用的部分术语定义如下：
"卤素"是指氟、 氯、 溴和碘。
"垸基" 当作一基团时是指直链或者带有支链的饱和脂肪烃基团。 垸 基包括甲基、 乙基、 正丙基和 2-丙基。
"烯基"作为一基团时是指含有一个碳碳双键的脂肪烃基团， 可为直链也可以 带有支链。 （C2-C3 ) 烯基包括乙烯基、 丙烯基、 异丙烯基和烯丙基。
"环烷基"是指饱和的碳环。 （C3-C4) 环垸基包括环丙基和环丁基。 三元环具 有与三元碳环相同的含义， 都是指环丙基环， 即 R1和 R2均为 CH2， 并且二者通过 碳碳单键连接起来。
"烷氧基"是指 （垸基 -0-) 的基团。 其中， 垸基如上所定义。 （d-C3 ) 烷氧基 包括甲氧基、 乙氧基、 JH丙氧基和异丙氧基。
此外， 术语 "药学上可接受的盐"是指上述化合物能保持原有生物活性并且适 合于医药用途的某些盐类。 式（I)所表示的化合物药学上可接受的盐可以为与合适 的酸形成的盐， 合适的酸包括无机酸和有机酸， 例如乙酸、 苯磺酸、 苯甲酸、 樟脑 磺酸、 柠檬酸、 乙磺酸、 富马酸、 葡糖酸、 谷氨酸、 氢溴酸、 盐酸、 羟乙磺酸、 乳 酸、 苹果酸、 马来酸、 扁桃酸、 甲磺酸、 硝酸、 磷酸、 琥珀酸、 硫酸、 酒石酸、 对 甲苯磺酸等。 特别优选的是盐酸、 磷酸或硫酸。 我们已经发现， 本发明所提供的化合物是高活性的乙酰胆碱酯酶抑制剂， 具有 显著的改善学习记忆的作用， 能够用于治疗阿尔茨海默氏症 （Alzheimer's disease )。 下面通过实施例进一歩阐明本发明。 实施例给出了式（I )所表示的代表性化合 物的制备及相关结构鉴定数据。 必须说明， 下述实施例是用于说明本发明而不是对 本发明的限制。
在下列实例中， 除非另有指明， 所有温度为摄氏温度， 除非另有指明， 各种起 始原料和试剂均来自市售。 市售原料和试剂均不经进一步纯化直接使用， 除非另有 指明。
玻璃器皿用烘箱干燥和 /或加热千燥。 反应用玻璃硅胶 -60 F254平板（0.25 mm ) ( TLC ) 上进行跟踪。 分析性薄层层析并以适当的溶剂比例 （Wv) 加以展幵。 以 TLC上起始物质耗尽时为反应终点。
Ή NMR图谱是用 Bruker仪器 （400MHz) 测定而得， 化学位移用 ppm表示。 使用四甲基硅垸内标准 （0.00ppm)。 Ή NMR的表示方法： s=单峰， d=双重峰， t= 三重峰， m=多重峰， 1^=变宽的， dd=双重峰的双重峰。 若提供偶合常数时， 其单位 为 Hz。
质谱是用 LC/MS仪测定得到， 离子化方式可为 ESI或 APCI。
所有熔点均未经修正。
下面的实例仅仅是用来说明所发明的具体化合物的合成方法。 但在合成方法上 并没有任何限制。 在下面未列出的化合物， 也可以用与下面同样的合成路线与合成 方法， 选择适当的起始原材料、 在有必要的地方稍加适当的常识性的反应条件调整 即可加以制备。
附图说明
图 1是大鼠口服给予盐酸多奈哌齐、 1-33和 1-35后的血浆药物浓度一时间曲线 (横坐标为时间， 单位为 h; 纵坐标为浓度， 单位为 nmol/L ) 具体实施方案 实施例 1 : 4-[2-(5，7-二氧代-[1,3]二氧杂环戊烯并[4，5-1]异吲哚-6-基)乙基]哌啶小 羧酸叔丁酯 （化合物 XI) 的制备
Figure imgf000014_0001
向 1升反应瓶中，加入 52克（0.27摩尔） [1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7- 二酮（化合物 V-l， 参照文献 J. Am. Chem. Soc, 1951, 75, 1371和 J. Am. Chem. Soc, 1963， 473的方法合成得到） 和 320毫升二甲基亚砜， 搅拌， 加热至 60°C， 待固 体完全溶解后加入 110毫升溶有 23.4克（0.42摩尔）氢氧化钾的乙醇溶液， 搅拌 15 分钟， 再加入 160毫升溶有 117克 （0.31摩尔） 4-[2- (对甲苯磺酰氧基)乙基]哌啶 -1- 羧酸叔丁酯 （化合物 VI-1 , 参照专利 WO 2007082731 的方法合成得到） 的二甲基 亚砜溶液， 加完后于 60°C反应 5小时， 反应完全， 加入 500 ml乙酸乙酯和 300 ml 水， 萃取， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干得约 102.2克粗品， 柱 层析分离， 得 72克化合物 XI， 收率 65.8%。 1H NMR (DMSO- 6): δ 0.90-1.00 (m, 2 H)， 1.36 (s, 10 H), 1.46 (q, 2 H， J = 7.0 Hz), 1.66 (d, 2 H， J= 11.9 Hz), 2.62 (br s， 2 H), 3.51 (t, 2 H， J = 7.0 Hz), 3.88 (d, 2 H， J= 11.5 Hz), 6.24 (s, 2 H)， 7.32 (s， 2 H); MS (ESI): m/z 425 [M+Na]+„ 实施例 2: 6-[2- (4-哌啶基）乙基] -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7-二酮盐 酸盐 （化合物 H-1 ) 的制备
Figure imgf000014_0002
向 500毫升反应瓶中加入 20克 （0.05摩尔） 化合物 XI， 加入 400毫升含 10% 氯化氢的乙酸乙酯溶液，室温反应 2小时，过滤，洗涤，烘干得到 15.5克化合物 11-1， 收率 92.3% Ή NMR (D20): δ 1.40-1.64 (m, 5 Η)' 2.02 (d， 2 H，J= 13.4 Hz), 2.96-3.03 00813
14
(m， 2 H)， 3.45-3.50 (m， 4 H)， 6.12 (s， 2 H)， 6.79 (s, 2 H); MS (ESI).- m/z 303 [M-Cl]' 实施例 3: 6-[2-(l-节基 -4-哌啶基)乙基 ]-[U]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （化合物 1-1) 的制备
Figure imgf000015_0001
向反应瓶中加入 5克 （0.015摩尔） 化合物 11-1， 1.4克 （0.01摩尔） 碳酸钾， 100毫升乙腈， 2.3毫升 （0.02摩尔） 氯化苄， 加热至 50°C反应 3〜4小时， 反应完 毕， 加入 200毫升乙酸乙酯和 100毫升水， 萃取， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 柱层析分离得 3.5克化合物 1-1， 收率 60.4%。 1HNMR(DMSO- ): δ 1.08-1.17 (m, 3H), 1.48 (q， 2H, J =6.6 Hz), 1.67 (d, 2 H， J- 10.0 Hz), 1.85 (t, 2H， J= 10.8 Hz), 2.75 (d, 2H, J= 11.4 Hz), 3.41 (s, 2 H), 3.53 (t, 2H, J=7.1 Hz), 6.27 (s， 2 H)， 7.22-7.32 (m， 5 H)， 7.37 (s， 2 H); MS (ESI): m/z 393 [M+H]+。 以化合物 II-l为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 3方法制备以下化合物: 实施例 结构 Ή NMR (400MHz)和 MS (m/z)
'HNMR(CDC13): δ 1.24-1.32 (m, 3Η)， 1.58 (q, 2Η， J =7.5 Hz), 1.75 (d,2H,J= 10.8 Hz), 2.00 (t, 2H， J= 11.0 Hz), 2.89 (d， 2 H， J= 11.5 Hz), 3.57 (s, 2H), 3.64
4
(t,2H,J=7.4 Hz), 6.15 (s, 2H),
° 1-2 6.99-7.03 (m, 1 H), 7.07-7.11 (m,
1 H), 7.19 (s, 2H)， 7.21-7.23 (m， 1 H)， 7.37 (t， 1 H， J=7.1 Hz); MS (ESI): m/z 411 [M+H]+。
Figure imgf000016_0001
实施例 7: 4-[2-(5-羟基 -7-氧代 -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -6-基)乙基] 哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 VH-1) 的制备
Figure imgf000016_0002
XI VII I 向反应瓶中加入 92克 （0.23摩尔） 化合物 XI， 250毫升甲醇和 250毫升四氢 呋喃， 搅拌， 降温至 0〜10°C， 加入 10克 （0.26摩尔） 硼氢化钠， 于 0〜I0°C反应 20〜30分钟， 反应完毕， 加入 100毫升水， 反应液减压浓缩 （温度 45°C)至干， 浓 缩残留物加入 500毫升乙酸乙酯， 300毫升水提取洗涤， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 浓缩至少量， 加入 300毫升石油醚， 析出固体， 过滤， 石油醚洗涤滤饼， 烘干， 得 到 64.7克化合物 VH-1， 收率 70%。 lH MR (DMSO-^).- δ 0.95-1.04 (m, 2H), 1.39 (s， 10 H)， 1.51 (m, 2 H)， 1.70 (dd, 2 H, J= 25.0, 12.4 Hz), 2.65 (br s， 2 H)， 3.23-3.30 (m, 1 H)， 3.54-3.61 (m, 1 H)， 3.90 (d, 2 H， J= 10.0 Hz)， 5.67 (d, 1 H, J=8.9Hz), 6.12 (s, 1 H), 6.13 (s, 1 H), 6.50 (d, 1 H， J=9.0Hz), 7.08 (s, 1 H), 7.09 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 427 [M+Na]+。 实施例 8: 4-[2-(5-乙酰氧基 -7-氧代 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -6-基) 乙基]哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 VHI-1) 的制备
Figure imgf000017_0001
IM VIII-1 向 500毫升反应瓶中， 加入 55克（0.136摩尔）化合物 VH-1, 385毫升二氯甲 垸， 43毫升 （0.31摩尔） 三乙胺， 1.8克 （0.015摩尔） 4-二甲氨基吡啶， 搅拌， 加 入 31毫升（0.33摩尔） 乙酸酐， 室温反应 1小时， 加入 200毫升水洗涤， 收集有机 层， 加入硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 得约 79克化合物 VHI-1, 未做进一歩 提纯， 直接用于下一歩。 'HNMR (OMSO-d6): δ 0.94-1.02 (m, 2 H), 1.39 (s， 10 H), 1.43-1.54 (m, 2H), 1.67 (t, 2H, J =9.9 Hz), 2.14 (s, 3 H), 2.65 (br s, 2H)， 3.17-3.24 (m, 1 H)， 3.56-3.64 (m, 1 H)， 3.90 (d, 2H， J= 10.6 Hz), 6.16 (d, 1 H， J=0.8Hz)， 6.18 (d, 1 H， J- 0.6 Hz), 6.90 (s， 1 H)， 7.14 (s， 1 H)， 7.16 (s, 1 H); MS (ESI):
Figure imgf000017_0002
实施例 9: 4-[2-(7-氧代 -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -6-基)乙基]哌啶 -1- 羧酸叔丁酯 （化合物 XII) 的制备
Figure imgf000017_0003
VIII-1 向反应瓶中加入 79克化合物 VHI-1和 400毫升乙酸乙酯，再加入 Π克含 50% 水的 5%钯炭， 于 60°C常压氢化 7〜8小时， 反应完全， 过滤， 滤液减压浓缩至少 量， 滴加石油醚， 冷却析出固体， 过滤， 得到 33 克化合物 XII， 收率 （按化合物 VH-1计算） 约 62.5%。 'HNMR^DMSO-^): δ 0.94-1.04 (m, 2H)， 1.39 (s, 10 H), 1.47-1.54 (m, 2H)， 1.69 (d, 2H， J= 11.6 Hz), 2.64 (brs, 2 H)， 3.50 (t, 2H， J = 7.0 Hz), 3.90 (d, 2H, J= 11.3 Hz), 4.32 (s, 2 H)， 6.12 (s, 2 H), 7.08 (s, 1 H)， 7.11 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 411 [M+Na]+。 实施例 10: 6-[2-(4-哌啶基)乙基] -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮盐 （化合物 II-2) 的制备
Figure imgf000018_0001
向反应瓶中加入 15克 （0.039摩尔） 化合物 XII， 加入 300毫升含 10%氯化氢 的乙酸乙酯溶液， 室温反应 30分钟， 反应完全， 减压浓缩至干， 用乙醇和乙酸乙酯 混合溶液重结晶， 得到 10.5克化合物 11-2， 收率 84.3%。 1HNMR(D20): δ 1.38-1.49 (m， 2Η)' 1.59-1.61 (m, 3 Η), 1.98 (d, 2Η， J= 13.5 Hz), 2.91-2.98 (m, 2H), 3.42 (d， 2H， J= 12.8 Hz), 3.49 (t, 2H, J=7.0 Hz), 4.13 (s, 2H)， 5.97 (s, 2H), 6.72 (s， 1 H)， 6.76 (s， 1 H); MS (ESI): m/z 289 [M-Cl]+。 实施例 11: 6-[2-(l-苄基 -4-哌啶基)乙基] -5H-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （化合物 1-5) 的制备
Figure imgf000018_0002
II-2 1-5
向反应瓶中加入 5克 （0.015摩尔） 化合物 11-2， 1.4克 （0.01摩尔） 碳酸钾， 100毫升乙腈， 2.3毫升 （0,02摩尔） 氯化苄， 加热至 50°C反应 3〜4小时， 反应完 全， 加入 200毫升乙酸乙酯和 100毫升水， 萃取， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤, 滤液浓缩至干， 柱层析分离得到 3.1克化合物 1-5， 收率 53.4%。 1HNMR(CDC13): δ 1.26-1.36 (m, 3 H)， 1.57 (q， 2H， J =7.5 Hz), 1.73 (d， 2 H, J=9.2Hz), 1.93 (t, 2H， J= 10.6 Hz), 2.87 (d, 2H， J= 11.2 Hz), 3.48 (s, 2 H)， 3.60 (t， 2H, J- 7.5 Hz), 4.23 (s, 2H)， 6.04 (s, 2H)， 6.83 (s, 1 H)， 7.21 (s, 1 H)， 7.22-7.26 (m, 1 H), 7.29-7.30 (m, 4H); MS (ESI): m/z 379 [M+H]+。 以化合物 H-2为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 11方法制备以下化合物- 实施例 H NMR (400MHz)和 MS (m/z)
Figure imgf000019_0001
实施例 15: 4-[2-(5-甲基 -7-氧代 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -6-基)乙基] 哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 XIII ) 的制备
Figure imgf000019_0002
向反应瓶中加入 30克 （0.077摩尔） 化合物 XII和 300毫升四氢呋喃， 氮气保 护， 降温至 -10〜- 15°C， 滴加 78毫升 （0.16摩尔， 2摩尔 /升） 的二异丙基氨基锂的 正庚垸溶液， 滴加时间约为 30分钟， 滴完后， 保温反应 30分钟， 滴加入 4.8毫升 (0.077摩尔）碘甲烷， 滴加完毕自然升至室温， 反应 2小时， 加入 600毫升乙酸乙 酯和 300毫升水， 萃取， 收集有机层， 加入硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压浓缩至干， 柱层析分离， 得到 14.5克化合物 XIII， 收率： 46.7%。 Ή NMR (CDC13): δ 1.07-1.21 (m, 2 H), 1.41 (d, 3 H， J = 6.7 Hz)， 1.45 (s, 10 H)， 1.55 (q, 2 H, J = 7.4 Hz), 1.66-1.69 (m, 1 H), 1.80-1.83 (m, 1 H)， 2.64-2.71 (m, 2 H)， 3.17-3.24 (m, 1 H)， 3.92-4.00 (m, 1 H), 4.06-4.09 (m, 2 H)， 4.41 (q, 1 H, J= 6.7 Hz)， 6.05 (s， 2 H)， 6.82 (s, 1 H)， 7.20 (s， 1 H); MS (ESI): m/z 403 [M+H]+。 实施例 16: 5-甲基 -6-[2-(4-哌啶基)乙基] -5H-[U]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7- （化合物 II-3 ) 的制备
Figure imgf000020_0001
向反应瓶中加入 5克 （0.012摩尔）化合物 XIII和 30毫升乙醇， 加入 100毫升 含 10%氯化氢的乙酸乙酯溶液，室温反应 1〜1.5小时，过滤，滤饼以乙酸乙酯洗涤， 干燥，得到 3.4克化合物 11-3，收率 81%。 'H NMR (D20): δ 1.24 (d, 3 H， J= 7.0 Hz), 1.44-1.58 (m, 5 H)， 1.98 (m, 2 H)， 2.96 (m, 2 H)， 3.21-3.25 (m, 1 H)， 3.44 (d， 2 H， J= 12.4 Hz), 3.64-3.72 (m, 1 H)， 4.34 (q， 1 H， J= 6.6 Hz)， 5.94 (s, 2 H)， 6.72 (s， 1 H), 6.79 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 303 [M+H]+。 实施例 17: 6-[2-(l-苄基 -4-哌啶基)乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] -7-酮 （化合物 1-9) 的制备
Figure imgf000020_0002
向反应瓶中加入 2克（0.006摩尔）化合物 II-3和 40毫升乙腈， 搅拌， 加入 2.4 克 （0.017摩尔） 碳酸钾， 1.2毫升 （0.0087摩尔） 三乙胺， 1.5毫升 （0.013摩尔） 氯化苄， 升温至 50°C， 反应 1.5小时， 反应完全， 加入 200毫升乙酸乙酯和 100毫 升水， 萃取， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 柱层析分离得到 1.1 克化合物 1—9， 收率 47.4%。 1HNMR(CDC13): δ 1.34-1.42 (m, 3 H), 1.46 (d, 3 H, J=6.7Hz), 1.59-1.64 (m, 2 H)， 1.72-1.75 (m, 1 H), 1.86-1.89 (m, 1 H), 1.97-2.04 (m, 2H)， 2.94 (t, 2 H, J=9.1 Hz), 3.21-3.28 (m, 1 H), 3.55 (s, 2H)， 3.97-4.05 (m, 1 H)， 4.46 (q, 1 H， J =6.7 Hz), 6.09 (s, 2 H)， 6.87 (s, 1 H)， 7.26 (s, 1 H)， 7.29-7.32 (m, 1 H)， 7.34-7.37 (m, 4 H); MS (ESI): m/z 393 [M+H]+。
以化合物 II-3为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 17方法制备以下化合物: 实施例 结构 Ή NMR (400MHz)和 MS (m/z)
1HNMR (CDC13):51.36-1.42 (m, 3H)， 1.46 (d, 3 H, J=6.7Hz), 1.58-1.63 (m, 2H)， 1.73-1.76 (m， 1 H)， 1.87-1.89 (m , 1 H)， 2.05-2.10 (m, 2 H)， 2.95 (m, 2 H)， 3.20-3.27 (m， 1 H)， 3.63 (s， 2 H)，
18
3.98-4.05 (m, 1 H), 4.46 (q， 1 H，
1-10 J= 6.6 Hz), 6.10 (s, 2 H)， 6.87 (s，
1 H)， 7.07 (t, I H， J =9.1 Hz), 7.16 (t, 1 H,J=7.4 Hz), 7.26-7.35 (m,2H),7.43 (t, 1 H,J=7.1 Hz); MS (ESI): m/z 411 [M+H]+。
1 H NMR (CDC13) :δ 1.34-1.42 (m， 3 H), 1.46 (d, 3 H, J=6.8Hz), 1.59-1.64 (m, 2H)， 1.72-1.75 (m, 1 H)， 1.87-1.89 (m , 1 H)， 1.99-2.04 (m, 2H)， 2.92 (t, 2H， J=8.9Hz), 3.21-3.28 (m, 1 H)，
19
3.54 (s, 2 H), 3.97-4.05 (m, 1 H),
I ll 4.47 (q, 1 H， J =6.7 Hz), 6.10 (s,
2H), 6.88 (s, 1 H)， 6.96-7.01 (m, 1 H)， 7.10-7.15 (m, 2H), 7.26 (s， 1 H)， 7.30-7.34 (m, 1 H); MS (ESI): m/z 411 [M+H]+。
Ή NMR (CDCI3): δ 1.32-1.40 (m， 3 H), 1.46 (d, 3H， J=6.7Hz)，
20 1.59-1.64 (m, 2 H)， 1.73-1.75 (m,
1 H) , 1.86-1.88 (m , 1 H)，
1-12
1.95-2.00 (m, 2 H)， 2.90 (t, 2H, J = 8.2 Hz), 3.21-3.28 (m, 1 H)，
3.50 (s, 2 H), 3.98-4.05 (m, 1 H)， 4.47 (q, 1 H， J= 6.7 Hz), 6.10 (s, 2 H)， 6.88 (s， 1 H)， 7.02-7.06 (m， 2 H)， 7.26 (s， 1 H)， 7.31-7.34 (m, 2 H); MS (ESI): m/z 411 [M+H]+。 实施例 21 : 4-[2-(7，7-二甲基 -5-氧代 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-ί]异吲哚 -6-基)乙 基]哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 XIV) 的制备
Figure imgf000022_0001
XIII XIV 向反应瓶中加入 10克 （0.025摩尔） 化合物 XIII和 100毫升四氢呋喃， 搅拌， 氮气保护， 降温至 -10〜- 15°C， 滴加 48毫升 （0.096摩尔， 2摩尔 /升） 的二异丙基 氨基锂的正庚垸溶液， 滴加时间约为 30分钟， 滴完后， 保温反应 30分钟， 再滴加 1.6毫升（0Ό26摩尔）碘甲垸， 滴加完毕自然升至室温， 反应 1小时， 反应完全后， 加入 300毫升乙酸乙酯， 150毫升水提取洗涤， 收集有机层， 加入硫酸钠干燥， 过 滤，滤液减压浓缩至干，柱层析分离，得到 5.6克化合物 XIV，收率 54.2%。MS(ESI): m/z 417 [M+H]+。 实施例 22: 7,7-二甲基 -6-[2-(4-哌啶基)乙基 ]-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5-酮盐酸盐 （化合物 H-4) 的制备
Figure imgf000022_0002
XIV H-4
向反应瓶中加入 2克（0.0048摩尔）化合物 XIV和 10毫升乙醇， 再加入 50毫 升含 10%氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温反应！〜 1.5小时， 过滤， 滤饼以乙酸乙酯洗 涤， 干燥， 得到 1.2克化合物 11-4, 收率 71%。 1H NMR (D20): δ 1.27 (s, 6 H)， 1.45 (m， 2H), 1.56 (q， 2H， J=6.9Hz)， 1.69 (brs, 1 H), 2.00 (d, 2H， J= 13.9 Hz), 3.00 (t, 2H, J= 12.6 Hz), 3.37 (t, 2H， J=7.6Hz), 3.45 (d, 2 H， J= 12.3 Hz), 5.96 (s, 2H)， 6.79 (s, 1 H), 6.86 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 317 [M-Cl]+。 实施例 23: 6-[2-(l-节基 -4-哌啶基)乙基] -7，7-二甲基 -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -5-酮 （化合物 1-13) 的制备
Figure imgf000023_0001
向反应瓶中加入 2.3克 (0.0065摩尔）化合物 H-4和 46毫升乙腈， 搅拌， 加入 6克 （0.043摩尔）碳酸钾， 1.3毫升 （0.0094摩尔） 三乙胺， 1.7毫升 （0.015摩尔） 氯化苄， 升温至 50°C， 反应 2〜3小时， 加入 200毫升乙酸乙酯， 100毫升水， 提取 洗涤， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 柱层析分离得到 1.8克化 合物 I一 13， 收率 67.7%。 1HNMR (DMSO-^6): δ 1.18-1.23 (m, 2H)， 1.26-1.33 (m, 1H)， 1.40 (s, 6H)， 1.50-1.56 (m, 2H)， 1.70 (d， 2H， J= 11.2 Hz), 1.89 (t， 2 H， J= 10.4 Hz), 2.77 (d, 2H, J= 11.2 Hz), 3.35 (t, 2H, J=7.8Hz)， 3.42 (s, 2H)， 6.12 (s, 2 H), 7.05 (s， 1 H), 7.21-7.25 (m, 2 H)， 7.27-7.33 (m, 4 H); MS (ESI): m/z 407 [M+H]+ 0 以化合物 H-4为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 23方法制备以下化合物: 实施例 结构 Ή NMR (400MHz)和 MS (m/z)
'HNMR (DMSO-i/6): δ 1.13-1.22 (m, 2H)， 1.23-1.28 (m, 1 H)， 1.39 (s, 6H), 1.48-1.54 (m,2H), 1.70 (d, 2H， J= 11.6 Hz), 1.94 (t， 2H, J= 10.9 Hz), 2.78 (d,
24 2H, J= 11.2 Hz), 3.33 (t， 2 H,
' 1-14 J= 7.7 Hz), 3.48 (s,2H),6.10(s,
2 H), 7.03 (s， 1 H), 7.12-7.18 (m, 2 H)， 7.24 (s, 1 H)， 7.27-7.32 (m, 1 H)， 7.39 (t, 1 H, J =7.4 Hz); MS (ESI): m/z 425 [M+H]+o
Figure imgf000024_0001
实施例 27: 4-[2-(5-亚甲基 -7-氧代 -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -6-基)乙基] 哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 IX-1) 的制备
Figure imgf000024_0002
XI 1X 1 将 75克 （0.19摩尔） 化合物 XI和 500毫升四氢呋喃投于反应瓶中， 搅拌， 氮 气保护， 冷却至 0〜10°C, 将 400毫升 1.2 N甲基碘化镁 /乙醚溶液缓慢加至反应瓶 中， 反应 1小时， 加入少量水至无气泡产生， 滴加浓盐酸， 调 PH至酸性， 反应 15 分钟， 加入 500ml乙酸乙酯， 300ml水提取洗涤， 收集有机层， 加入硫酸钠干燥， 过滤。滤液浓缩至少量，滴加石油醚，析出固体，过滤，烘干得到 47.6克化合物 IX-1， 收率： 63.8%o 'HNMR (DMSO-i6): δ 0.95-1.05 (m, 2 H)， 1.38 (s, 10H)， 1.48 (q, 2H, J =7.0 Hz), 1.71 (d， 2 H， J= 12.2 Hz), 2.65 (brs， 2H), 3.70 (t, 2 H, J=7.2Hz)， 3.90 (d, 2H， J= 11.6 Hz), 4.95 (s, 1 H), 5.34 (s, 1 H)， 6.17 (s， 2 H)， 7.15 (s, 1 Η)' 7.53 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 423 [M+Na]+。 实施例 28: 4-[2-(5-氧代螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7， -环丙'烷] -6- 基)乙基]哌啶 -1-羧酸叔丁酯 （化合物 XV) 的制备
Figure imgf000025_0001
IX-1 在反应瓶中加入 300毫升二氯甲垸和 300毫升 （1N) 二乙基锌的己垸溶液， 氮 气保护， 降温至 0〜10°C, 搅拌， 滴加 200毫升含 23.1毫升 （0.31摩尔） 三氟乙酸 的二氯甲垸溶液， 滴加时间约 20分钟， 滴完后反应 20分钟， 滴加 200毫升含 24 毫升 （0.3摩尔） 二碘甲垸的二氯甲烷溶液， 滴完后反应 20分钟， 再滴加 300毫升 溶有 60克 （0.15摩尔） 化合物 IX-1的二氯甲垸溶液， 滴完后升至 30°C反应 3〜4 小时， 反应完全， 加入 500 ml水， 以 1 N盐酸调至中性， 分层， 收集有机层， 加入 硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干得化合物 XV,直接投入下一步反应。 'H NMR (CDC13): δ 1.08-1.19 (m, 2 H), 1.28 (dd, 2 H, J = 6.2, 7.4 Hz), 1.45 (s, 9 H), 1.48-1.57 (m， 5 H)， 1.72 (d， 2 H， J= 12.7 Hz), 2.69 (t, 2 H， J= 11.6 Hz), 3.20 (t, 2 H， J = 7.6 Hz), 4.07 (d, 2 H, J = 13.1 Hz), 6.03 (s, 2 H)， 6.43 (s, 1 H), 7.23 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 437 [M+Na]+ 0 实施例 29: 6-[2-(4-哌啶)乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-fI异吲哚 -7,Γ-环丙 垸] -5-酮盐酸盐 （化合物 Η-5) 的制备
Figure imgf000025_0002
向反应瓶中加入上歩化合物 XV的全量， 750毫升乙醇， 加热至全溶， 加入 36 毫升浓盐酸， 保持 50〜55°C左右反应 5小时， 减压浓缩至约余 200 ml, 滴加 900 ml 乙酸乙酯，冷却过滤，滤饼洗涤烘干，得到 24.3克化合物 11-5，收率（按化合物 IX-1 计算）： 46.2% Ή NMR (D20): δ 1.06 (t, 2 H, J = 6.7 Hz), 1.32-1.46 (m, 6 H)， 1.60 (m, 1 H)， 1.91 (d， 2 H, J= 13.5 Hz), 2.91-3.03 (m, 4 H)， 3.39 (d, 2 H， J: 12.8 Hz), 5.90 (s， 2H), 6.18 (s, 1 H)， 6.68 (s, 1 H); MS (ESI): m/z 315 [M-Cl]+。 实施例 30: 6-[2-(l-节基 -4-哌啶基)乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7，Γ-环丙垸 ]-5-酮 （化合物 1-17) 的制备
Figure imgf000026_0001
向反应瓶中加入 2克 （0.006摩尔） 化合物 11-5， 40毫升乙腈， 搅拌， 加入 1.2 克 （0.008摩尔） 碳酸钾， 1毫升 （0.007摩尔） 三乙胺， 2毫升 （0.017摩尔） 氯化 苄， 升温至 60°C， 反应 2.5小时， 反应完全， 加入 200毫升乙酸乙酯， 100毫升水， 萃取洗涤， 收集有机层， 硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓縮至干， 柱层析分离得到 1.5 克化合物 1-17， 收率 65.2%。 1H NMR (CDC13): δ 1.24-1.33 (m, 5H)， 1.49-1.57 (m， 4H), 1.72 (d, 2H， J =9.6 Hz), 1.96 (t, 2H， J= 10.8 Hz), 2.87 (d, 2H, J= 11.4 Hz), 3.19 (t, 2H, J=7.8Hz)， 3.49 (s, 2 H), 6.03 (s, 2H)， 6.42 (s, 1 H), 7.22-7.25 (m， 2H)， 7.28-7.32 (m, 4H); MS (ESI): m/z 405 [M+H]+。 以化合物 II-5为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 30方法制备以下化合物: 实施例 结构 Ή NMR (400MHz)禾口 MS (m/z)
Ή NMR (CDC13): δ 1.23-1.31 (m, 5H)， 1.48-1.55 (m, 4H), 1.72 (d, 2H, J =9.2 Hz), 2.02 (t， 2H， J= 10.3 Hz), 2.88 (d， 2H， J= 11.2 Hz), 3.18 (t, 2H，
31 J=7.9Hz)， 3.56 (s, 2 H), 6.02
(s, 2 H), 6.41 (s, 1 H)， 6.99-7.03
1-18 (m, 1 H)， 7.07-7.11 (m, 1 H)，
7.19-7.25 (m, 2 H), 7.35-7.39 (m, 1 H); MS (ESI): m/z 423 [M+H]+。
1H NMR (CDC13): δ 1.24-1.32 (m, 5H)， 1.49-1.56 (m, 4H)，
32 1.71 (d， 2H， J= 10.2 Hz), 1.95
(t， 2 H, J= 10.7 Hz), 2.83 (d,
Figure imgf000026_0002
2H， J= 11.2 Hz), 3.19 (t, 2H,
Figure imgf000027_0001
2H), 6.04 (s, 2H), 6.44 (s， 1
H)， 7.16 (s， 3H)， 7.26-7.29 (m, 2 H); MS (ESI): m/z 419 [M+H]+。
Ή NMR (CDC13): δ 1.25-1.33 (m, 5H), 1.49-1.57 (m, 4H)， 1.72 (d, 2H, J= 10.7 Hz), 2.09 (t， 2H， J= 10.8 Hz), 2.85 (d， 2H， J= 11.1 Hz), 3.19 (t, 2H， J=7.8Hz), 3.67 (s, 2H)， 6.03 (s, 2 H)， 6.42 (s， 1 H)， 7.23 (s，
Figure imgf000028_0001
1 H)， 7.31-7.35 (m, 1 H)， 7.52-7.55 (m, 2 H), 7.62 (d, 1 H， J =7.7 Hz); MS (ESI): m/z 430 [M+H]+。
1H NMR (CDCI3): δ 1.24-1.27 (m, 5H)， 1.49-1.51 (m, 4 H)，
F
1.71 (d, 2H， J=9.0Hz), 2.04 (t， 2H， J= 10.4 Hz), 2.91 (d， c4 2H， J= 10.4 Hz), 3.17 (t, 2H，
J=7.8Hz), 3.68 (s, 2H)， 6.02
1-25 (s, 2H), 6.41 (s, 1 H), 6.87 (t，
2H， J=7.5Hz), 7.22 (m, 2 H); MS (ESI): m/z 441 [M+H]+。
Ή NMR (DMSO-i/tf) ： δ 1.14-1.24 (m, 3 H), 1.33 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.40 (q, 2H， J = 6.5 Hz), 1.57 (t, 2 H, J= 7.7 Hz), 1.66 (d, 2H, J= 11.2 Hz), 1.86 (t, 2H， J= 10.8 Hz), 2.76 (d, 2H， J= 11.1 Hz), 3.13 (t， 2H， J =7.6 Hz), 3.37 (s, 2 H),
Figure imgf000028_0002
3.73 (s, 3 H)， 6.11 (s, 2 H), 6.79-6.81 (m, 1 H)， 6.84-6.86 (m, 2H), 6.88 (s, 1 H)， 7.11 (s, 1 H), 7.21 (t， 1 H， J =7.9 Hz); MS (ESI): m/z 435 [M+H]+ 0
Ή NMR (DMSO-d0) ： δ 1.12-1.20 (m, 3 H)， 1.33 (t, 2 H, J =6.4 Hz), 1.40 (q,2H,J=6.4 Hz), 1.57 (t, 2H， J=7.7Hz)， 1.66 (d, 2H, J= 11.0 Hz), 1.90 (t, 2H， J= 10.4 Hz), 2.78 (d, 2H, J= 11.3 Hz), 3.13 (t, 2H， J=7.7Hz)， 3.41 (s， 2H)， 3.76
(s, 3 H)， 6.10 (s， 2H)， 6.88 (s, 1 H)， 6.91 (d, 1 H， J=7.4 Hz), 6.95 (s， 1 H), 7.11 (s， 1 H), 7.21 (t， 1 H,J=7.3 Hz), 7.29 (d, 1 H， J =7.4 Hz); MS (ESI): m/z435 [M+H]+。
Ή NMR (DMSO-i6) ： 6 1.13-1.16 (m, 2H)， 1.23 (brs, 1 H)， 1.39 (t， 2H， J =6.9 Hz),
I.38 (q, 2H, J=6.6Hz), 1.57 (t， 2H， J=7.5 Hz), 1.65 (d, 2 H, J= 11.4 Hz), 1.83 (t, 2H,
41 On J= 11.0 Hz), 2.74 (d, 2H， J =
II.1 Hz), 3.12 (t
1-28 ， 2 H， J= 7.6
Hz), 3.34 (s，2H)，3.73 (s, 3 H), 6.10 (s, 2H)， 6.86 (d, 2 H， J = 8.5 Hz), 6.88 (s, 1 H)， 7.10 (s， 1 H), 7.17 (d, 2H， J=8.4Hz); MS (ESI): m/z 435 [M+H]+。 实施例 42:6-[2-[l-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -7,Γ-环丙浣 ]-5-酮 （化合物 1-29) 的制备
Figure imgf000029_0001
向反应瓶中加入 24.3克 （0.069摩尔） 化合物 11-5， 36.5克 （0.26摩尔） 碳酸 钾， 243毫升乙醇， 6.1毫升 （0.044摩尔） 三乙胺， 升温至 50°C左右， 加入 31.5 克 （0.049摩尔） 2-氯甲基吡啶盐酸盐， 保持 50°C左右反应 5小时， 反应完全， 加 入 750 ml水， 析出固体，过滤， 滤饼水洗，烘干得 17.8 g化合物 1-29，收率： 63.4%。 'HNMR (CDC13): δ 1.26 (dd, 2H, J=6.1， 7.6 Hz), 1.35 (brs, 3 H)， 1.49-1.57 (m, 4H)， 1.72 (d， 2H, J=8.6Hz)， 2.08 (t, 2H, J= 10.4 Hz), 2.89 (d, 2H， J= 10.7 Hz), 3.19 (t， 2H， J =7.9 Hz), 3.64 (s, 2H)， 6.03 (s, 2H)， 6.42 (s, 1 H)， 7.15 (dd, 1 H, J=5.2, 6.7 Hz), 7.24 (s， 1 H)， 7.41 (d, 1 H， J = 7.7 Hz), 7.64 (td， 1 H， J = 7.6， 1.8 Hz), 8.55 (d， 1 H， J =4.2 Hz); MS (ESI): m/z 406 [M+H]+。 以化合物 II-5为原料， 选用合适的试剂， 按实施例 42方法制备以下化合物-
Figure imgf000030_0001
实施例 46: 6-[2-[l-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -7,Γ-环丙烷 ]-5-酮盐酸盐 （化合物 1-33) 的制备
Figure imgf000030_0002
向反应瓶中加入 5克 （0.012摩尔） 化合物 1-29和 25毫升乙醇， 50°C加热搅 拌至全部溶解， 加入 1毫升 （0.012摩尔） 浓盐酸， 加入 1 g活性炭脱色 20分钟， 过滤， 将滤液冷却至室温， 滴加 50 ml异丙醚， 析出固体， 搅拌 1小时， 过滤， 少 量异丙醚洗涤滤饼， 烘干得到 5 g化合物 1-33， 收率： 91.7%。 可用乙醇 /异丙醚再 次精制， 收率约 90%。 1HNMR (D20): 51.14 (t, 2 H， J- 7.0 Hz), 1.38-1.70 (m, 7 H)， 1.96 (d, 2H， J= 13.3 Hz), 2.99-3.14 (m, 4 H), 3.50 (d, 2 H， J= 11.0 Hz), 4.37 (s, 2H)， 5.93 (s, 2H), 6.28 (s, 1 H), 6.75 (s, 1 H), 7.47 (dd, 1 H， J=5.6， 7.5 Hz), 7.55 (d， 1 H， J=7.8Hz), 7.91 (td, 1 H, J=7.8, 1.7Hz), 8.58 (d, 1 H, J =4.4 Hz); MS (ESI): m/z 406 [M-Cl]+。 实施例 47: 6-[2-(l-苄基 -4-哌啶基)乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮盐酸盐 （化合物 1-34) 的制备
Figure imgf000031_0001
以 6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-ί]异吲哚 -7,1'-环 丙垸] -5-酮盐酸盐（化合物 Ι-Π)为原料按实施例 46的方法制备化合物 1-34。 Ή NMR (CDC13): 1HNMR (CDC13): δ 1.27 (dd, 2H， J =6.2, 7.5 Hz), 1.48-1.66 (m, 5 H)， 1.95-2.10 (m, 4H)， 2.62 (ddd, 2 H, J=4.6, 12.4, 22.2 Hz), 3.25 (t， 2H， J=6.7 Hz), 3.43 (d, 2H， J= 11.3 Hz), 4.11 (d， 2H， J =5.0 Hz), 6.04 (s， 2H)， 6.43 (s, 1 H), 7.21 (s, 1 H)， 7.41-7.46 (m, 3 H)， 7.62 (dd, 2 H， J=2.3, 5.9 Hz), 12.31 (br s， 1 H); MS (ESI): m/z405 [M-Cl]+。 实施例 48:6-[2-[l-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -7,Γ-环丙院 ]-5-酮磷酸盐 （化合物 I-3S) 的制备
Figure imgf000031_0002
向反应瓶中加入 2克 （0.0049摩尔） 化合物 1-29和 40毫升乙醇， 60°C加热搅 拌至全部溶解， 加入 0.57克 （0.0049摩尔） 85%磷酸， 搅拌析出固体， 滴加 40亳 升乙酸乙酯， 冷却至室温， 搅拌 1小时， 过滤， 少量乙酸乙酯洗涤滤饼， 烘干得到 2.1 g化合物 1-35，收率： 84.7%。 1HNMR(D20): δ 1.10 (t， 2 H, J =7.2 Hz), 1.33-1.64 (m, 7 H)， 1.92 (d， 2 H， J= 13.4 Hz), 2.95-3.09 (m, 4 H), 3.46 (d， 2 H， J= 10.7 Hz), 4.34 (s, 2H), 5.89 (s， 2 H)， 6.20 (s, 1 H), 6.69 (s, 1 H)， 7.45 (dd, 1 H, J- 5.2, 7.4 Hz), 7.53 (d, 1 H, J- 7.8 Hz), 7.88 (td, 1 H, J=7.7, 1.2 Hz), 8.54 (d, 1 H， J =4.6 Hz)。 实施例 49: 6-[2-[l-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -5,7-二酮 （化合物 1-36) 的制备
Figure imgf000032_0001
以 6-[2-(4-哌啶基）乙基 ]-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7-二酮盐酸盐（化 合物 H-1 )和 2-氯甲基吡啶盐酸盐为原料,按实施例 3方法制备化合物 1-36: 1H NMR (DMSO-^).- δ 1.12-1.19 (m， 3 H)， 1.48 (q， 2 H, J=6.1 Hz), 1.67 (d， 2H， J- 9.4 Hz), 1.94 (t， 2H， J- 10.3 Hz), 2.76 (d， 2H， J- 11.2 Hz), 3.54 (m, 4H)， 6.27 (s， 2H)， 7.24 (dd, 1 H， J=6.8, 5.4 Hz), 7.38 (s， 2H)， 7.42 (d, 1 H， J=7.8Hz), 7.74 (td, 1 H, J =1.1, 1.4 Hz), 8.64 (d， 1 H, J=4.2 Hz): m/z 394 [M+H]+。 实施例 50: 6-[2-[l- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基 ]-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -5,7-二酮 （化合物 1-37) 的制备
Figure imgf000032_0002
以 6-[2-(4-哌啶基）乙基 ]-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7-二酮盐酸盐（化 合物 H-1)和 3-溴甲基哒嗪氢溴酸盐为原料， 按实施例 3方法制备化合物 1-37: Ή NMR(CDC13): δ 1.26-1.32 (m, 3H), 1.58 (q， 2H， J=5.0 Hz), 1.75 (d， 2H, J=8.9Hz), 2.12 (t， 2H， J= 10.6 Hz), 2.81 (d， 2H， J= 11.1 Hz), 3.65 (t， 2H， J=7.2 Hz), 3.84 (s， 2H)， 6.15 (s， 2H)， 7.19 (s， 2H)， 7.45 (dd， 1 H， J=8.4, 4.9 Hz), 7.66 (dd, 1 H, J=8.4, 1.2 Hz), 9.07 (dd， 1 H， J=4.8, 1.6 Hz): m/z395 [M+H]+。 实施例 51: 6-[2-[l- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 （化合物 1-38) 的制备
Figure imgf000033_0001
以 6-[2-(4-哌啶)乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 盐酸盐 （化合物 II-5) 和 3-溴甲基哒嗪氢溴酸盐为原料， 按实施例 42方法制备化 合物 1-38: 'HNMR(CDC13): δ 1.25-1.37 (m， 5 H)， 1.49-1.58 (m, 4H)， 1.73 (d， 2H， J= 11.2 Hz), 2.14 (t， 2H, J= 10.7 Hz), 2.82 (d, 2 H， J= 11.6 Hz), 3.19 (t， 2H, J=7.8Hz), 3.85 (s， 2H), 6.03 (s， 2H)， 6.43 (s， 1 H)， 7.23 (s， 1 H)， 7.46 (dd, 1 H， J=8.4, 4.9 Hz), 7.67 (d， 1 H, J=8.0 Hz), 9.08 (dd, 1 H， J=4.8， 1.4 Hz): m/z407 [M+H]+。 实施例 52: 6-[2-[1-(1Η-吡咯 -2-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯 [4，5-f]异吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 （化合物 1-39) 的制备
Figure imgf000033_0002
向反应瓶中加入 100毫升无水乙醇， 1.4克 （0.061摩尔） 金属钠， 反应完全后 加入 4.2克 (0.043摩尔） 1H-吡咯 -2-基甲醇, 2.5克 （0.0071摩尔） 化合物 11-5， 加热回流 3小时， 反应完全， 加入乙酸乙酯、 水萃取洗涤， 收集有机层， 无水硫酸 钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 柱层析分离， 得到 1.5 克化合物 1-39。 Ή NMR (DMSO- )·· δ 1.10-1.19 (m, 3 H), 1.33-1.40 (m, 4H)， 1.57 (t, 2H， J=6.6Hz)， 1.64 (d， 2H， J= 11.7 Hz), 1.81 (t, 2H， J= 11.1 Hz), 2.74 (d, 2 H， J= 10.9 Hz), 3.13 (t， 2 H， J = 1.6 Hz), 3.34 (s， 2 H)， 5.83 (s， 1 H), 5.90 (s， 1 H)， 6.10 (s, 2H)， 6.61 (s， 1 H)， 6.88 (s， 1 H)， 7.10 (s， 1 H)， 10.60 (s， 1 H): m/z 394 [M+H]+。
注： 1H-吡咯 -2-基甲醇可由 1H-吡咯 -2-甲醛经由硼氢化钠还原而制得。 实施例 53: 6-[2-[1- [(5-甲基 -1H-吡咯 -2-基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧
[4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烧 ]-5-酮 （化合物 140) 的制备
Figure imgf000034_0001
H-5 1-40 向反应瓶中加入 300毫升无水乙醇， 10克（0.029摩尔）化合物 Π-5, 20克（0.13 摩尔） 5-甲基 -1H-吡咯 -2-甲酸乙酯， 室温搅拌， 分批加入 30克（1.30摩尔）金属钠， 加完后升温至 60〜70°C反应 5〜6小时， 反应完全， 加入乙酸乙酯、 水萃取洗涤， 收集有机层， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液浓缩至干， 柱层析分离， 得到 2克化合 物 140。 'HNMR (DMSO-i6): δ 1.08-1.22 (m, 3 H)， 1.32-1.42 (m， 4H), 1.57 (t, 2H, J=7.0 Hz), 1.65 (d, 2H, J= 11.5 Hz), 1.84 (t， 2H， J=9.1 Hz), 2.13 (s， 3H)， 2.78 (d， 2H， J= 10.2 Hz), 3.13 (t， 2 H， J=7,5 Hz), 3.31 (s， 2 H), 5.57
(s， 1 H)， 5.69 (s， 1 H), 6.10 (s, 2H)， 6.88 (s, 1 H)， 7.10 (s， 1 H), 10.35
(s， 1 H): m/z 408 [M+H]+。 实施例 54: 6-[2-[1-(1Η-吡唑 -5-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊 烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 （化合物 141) 的制备
Figure imgf000034_0002
II-5 1-41 向反应瓶中加入 10克 （0.029摩尔） 化合物 11-5， 3.4克 (0.035摩尔） 1H-P比 唑 -5-甲醛， 150毫升无水甲醇， 搅拌， 加入 3.6毫升 （0.063摩尔） 乙酸， 搅拌 30 分钟， 加入 2.5克 （0.040摩尔） 氰基硼氢化钠， 于 50〜60°C反应 6小时， 降至室 温， 加入 150毫升水， 以氢氧化钠调反应液 PH至 8〜9, 继续滴加 300毫升水， 析 出白色固体， 过滤得到 8.1克化合物 Ι· 1。 Ή NMR (DMSO-i/6): δ 1.09-1.21 (m, 3 H)， 1.33 (t, 2H， J=7.1 Hz), 1.40 (q， 2 H， J=7.8Hz), 1.57 (t， 2H， J =1.5 Hz), 1.65 (d， 2H， J= 11.4 Hz), 1.89 (t, 2H， J= 10.8 Hz), 2.77 (d, 2H, J = 10.4 Hz), 3.12 (t， 2H, J =1.6 Hz), 3.45 (s， 2H), 6.10 (s， 3 H), 6.88 (s， 1 H)， 7.11 (s， 1 H)， 7.56 (brs, 1 H), 12.58 (brs, 1 H): m/z 395 [M+H]+。 本发明化合物的药效学筛选， 按下列方式进行
一. 体外药效学筛选
本实验采用改良的 Ellman 法 ( Alvin V. et al. JWS-USC-75-IX Improves Information Processing and Cognitive Function in Animal Models [J]. Journal of Pharmacology and experimental therapeutics, 2010, 336( 3) :751) 检测式 (I) 系列化 合物对乙酰胆碱酯酶抑制作用， 以筛选出具有活性的 AChEIs, 通过式 （I) 系列化 合物对酶抑制 IC50值来评价活性。 实验结果见表 1:
表 1 化合物 （I)对乙酰胆碱酷醉抑制活性数据 化合物 IC50 (nM) 化合物 1C50 (nM)
DPH 94 1-21 653
1-1 86 1-22 >2000
1-2 80 1-23 959
1-3 269 1-24 >2000
1-4 167 1-25 249
1-5 502 1-26 >2000
1-6 483 1-27 >2000
1-7 486 1-28 〉2000
1-8 658 1-29 903
1-9 601 1-30 >2000
1-10 239 1-31 >2000
1-11 889 1-32 >2000
1-12 >2000 1-33 950
1-13 >2000 1-34 197
1-14 >2000 1-35 601
1-15 〉2000 1-36 161
1-16 >2000 1-37 905
1-17 202 1-38 >2000
1-18 154 1-39 >2000
H9 376 1-40 >2000
1-20 706 1-41 990 体外药效筛选实验， 以盐酸多奈哌齐（DPH )作为阳性药， 结果显示化合物 1-1 和 1-2在酶学水平上药效略好于阳性药； 1-3、 1-4、 1-10、 1-17、 1-18、 1-25、 1-34、 1-36 药效略差于阳性药； 1-5、 1-6、 1-7、 1-8、 1-9、 1-11、 1-19、 1-20、 1-21、 1-23、 1-29、 1-33、 1-35、 1-37、 1-41次之； 1-12、 1-13、 1-14、 1-15、 1-16、 1-22、 1-24、 1-26、 1-27、 1-28、 1-30、 1-31、 1-32、 1-38、 1-39、 1-40活性较弱。 二. 体内药效学筛选
(一） 式 （I) 系列化合物对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的改善
东莨菪碱是中枢 M胆碱受体竞争性拮抗剂， 可阻断 Ml和 M2受体， 造成记忆 障碍， 成为老年痴呆模型。 以盐酸多奈哌齐 （DPH)作为阳性药， 对式 （I ) 系列化 合物进行药效筛选。 给药 3-5天后， 动物进行 Morris水迷宫行为测试。
实验材料：
1.实验动物： 雄性 c57小鼠， 22±2 g， 动物饲养于明暗交替（10 h/14 h)清洁级动物 房内， 自由饮水进食， 适应性喂养一周后开始进行实验；
2.实验器材： Morris水迷宫；
3.实验药物： 东莨宕碱， 盐酸多奈哌齐 （DPH) , 式 （I) 系列化合物
实验方法：
1.动物分组及给药方案：
动物按体重随机分组， 每组 15只。 分别为正常组、 东莨菪碱组、 盐酸多奈哌齐 组 （DPH) 、 式 （I) 系列化合物组， 每天灌胃给药 （10 ml/kg) ， 正常组及模型组 给予等体积的溶媒。
2. Morris水迷宫实验
2.1实验方法与歩骤
Morris水迷宫由圆形水池、 图像自动采集和处理系统组成。 动物入水后启动监 测装置， 记录动物运动轨迹， 实验完毕自动分析报告相关参数。
Morris水迷圆柱形水池其内部被分为 4个大小相等的象限， 在第 I象限中央放置 一平台， 此平台位置在整个行为学测试中保持不变。 实验前一天放入适量水， 使平 台没于水下 l cm。 实验前加入食用白色素 （2 g/L) ， 使水池内水成乳白色 （实验期 间水池内的水每天更换一次） 。 实验训练阶段连续进行 5 d， 每天训练 2次。 训练时， 训练前 30 min腹腔注射东莨菪碱（l mg/kg)， 将小鼠面向池壁从第 III象限放入水池， 记录小鼠从入水到找到水下隐蔽平台并站立于其上所需时间，作为潜伏期，用秒（S ) 表模 ¾ w正示 £ ss s常， 小鼠找到平台后， 让其在平台上站立 10 s。 若入水后 60 s小鼠未能找到平台， 则逃避潜伏期记为 60 s, 并将其轻轻从水中拖上平台， 并停留 10 s。
2.2实验项目
1. 定位航行实验 （place navigation) ： 用于测量小鼠对水迷宫学习和记忆的获 取能力。 实验观察和记录小鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间， 即记录其潜伏 期。
2. 空间搜索实验 （spatial probe test) ： 用于测量小鼠学会寻找平台后， 对平台 空间位置记忆的保持能力。 定位航行实验结束后， 撤去平台， 从同一个入水点放入 水中， 测其第一次到达原平台位置的时间、 穿越原平台的次数。
2.3 脑组织生化指标测定：
行为学测试结束后， 将小鼠断头处死， 取大脑组织 （在冰盘上操作） ， 用预冷 的生理盐水制成 10%的组织匀浆， 离心 （3000 rpm， lO min) , 上清液按试剂盒进 行丙二醛 （MDA) 测定。 实验结果-
( 1 ) 1-17、 1-18和 1-19对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠的治疗作用
本实验分为正常组、 东莨菪碱（1 mg/kg)组、 盐酸多奈哌齐（DPH) ( 5 mg/kg) 组、 1-17 ( 5 mg/kg) 组、 1-18 ( 5 mg/kg) 组和 1-19 (5 mg/kg) 组。 Morris水迷宫实 验结果见表 2:
表 2 1-17、 1-18和 1-19的 Morris水迷宫实验结果 (^±SD)
潜伏期 （s)
Group n 站台穿越数
dayl day2 day 3 day4 day 5
15 59.0土3.7 57.0±8.6 52.0士 12.1 44.5±9.7 47.7±16.9 1.8±3.2
15 58.3±6.7 60士0 55.U13.6 59.6±1.5 57. U7.8 0.5±0.6
15 60±0 60±0 51.3±15.6 60±0 57.7±6.6 1.3±1.5*
15 56.8±8.6 60±0 48.7±] 5.7 56.7±8.1 47.2±13.4* 1.8±2.5*
15 60±0 60±0 53.1±10.4 56.9±8.2 56.8±8.6 0.5±0.6
15 60±0 60±0 55.2±1 1.8 57.3±10.4 53.9士 12.4 0.8± 1.4
*P<0.05， 与模型组比较.
结果显示， 与模型组相比， 1-17显著减少动物上台潜伏期， 同时提高动物穿越 平台次数， 可以改善东莨菪碱所致动物学习记忆障碍， 好于盐酸多奈哌齐组。 1-18 和 1-19可以减少动物上台潜伏期， 同时提高动物穿越平台次数， 有改善东莨菪碱所 致动物学习记忆障碍的作用。
模正模： w 22 ¾:正！
常
( 2 ί常 ¾ u 439 _-) 1-3和 1-18对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠的治疗作用
本实验分为正常组、 东莨菪碱（1 mg/kg)组、 盐酸多奈哌齐（DPH) ( 5 mg/kg) 组、 1-3 ( 10 mg/kg) 组、 1-3 ( 5 mg/kg) 组、 1-18 ( 10 mg/kg) 组和 1-18 ( 5 mg/kg) 组。 Morris水迷宫实验结果见表 3:
表 3 1-3和 1-18的 Morris水迷宫实验结果 士 SD)
潜伏期 (s)
Group n 站台穿越次数 dayl day2 day3 day4 da 5
15 55.3±9.0 49.3±12.4 35· 1±Π · 1 18.6±14.6 22.7±14.0 3.1±1.8
14 59.9±0.3 58.2土 6.8 59.4±2.3 49.7±13.3 48.0±13.5 1.4±1.2
DPH 15 57.1±7.7 59.5±2.1 58.2±7.1 42.9±19.2 45.5±17.4 1.8±1.1
1-3 ( 10 mg/kg) 15 59.3±2.6 56.3±9.7 55.5±9.5 49.4±15.7 45.0±15.0 l . lil . l 1-3 ( 5 mg/kg) 13 56.5±8.5 56.5±8.6 60±0 43.9±15.4 34.0±19.5* 1.9±1.5 1-18 ( 10 mg kg) 14 56.0±9.9 52.4±12.4 60±0 48.8±15.4 49.2±15.9 1.5士 1.2 1-18 ( 5 mg/kg) 15 55.0±10.3 55.9±9.0 60±0 51.8±15.6 35.6±15.4 1.5±1.7
*P<0.05， 与模型组比较
结果显示， 在 Morris水迷宫实验中， 各组潜伏期均有随时间而下降的趋势， 其 中 1-3组比模型组下降明显，接近或好于盐酸多奈哌齐组，化合物 1-3可能有改善东莫 菪碱所致小鼠学习记忆障碍的作用。
( 3 ) 1-14、 1-15、 1-23和 1-29对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠的治疗作用
本实验分为正常组、 东莨菪碱（1 mg/kg)组、 盐酸多奈哌齐（DPH ) ( 5 mg/kg) 组、 1-14 (5 mg/kg) 组、 1-15 ( 5 mg/kg)组、 1-23 (5 mg/kg)和 1-29 ( 5 mg/kg) 组。 Morris水迷宫实验结果见表 4, 生化检测结果见表 5:
表 4 1-14、 1-15、 1-23和 1-29的 Morris水迷宫实验结果（x±SD)
消伏期 （s)
Group n 站台穿越次数 dayl day2 day3 day4 day5
15 57.5±5.8 50.3±18.0 47.4±15.1 43.1±16.9 36.0±18.5 2.4±2.6
15 59.7士 1.2 57.5±6.9 56.8±8.4 53.5±12.2 55.6±12.5 0.8±0.9
15 60±0 59.6±1.4 57.0士 8.0 57.2±7.5 53.7±1 1.5 1.6±1.7*
15 57. U7.6 60±0 60±0 54.2±8.9 49.9±14.7 1.3±1.8
15 60士 0 58.9±4.4 56.5±8.3 57.8±5.3 51.1±10.9 1.9±1.5*
13 57.8±5.4 57.7±7.1 55.5±8.8 43·9±14· 1 * 51.8±10.9 1.5±1.5*
15 59.3士 2.7 54.6士 12.5 48.0±15.8* 46.0±16.3 40.4±21.6* 1.5±1.4* 与模型組比较， *P<0.05. 表 5 1-14、 1-15、 1-23和 1-29化合物生化检测结果 组别 n 剂 ( mg kg) MDA ( nmol/mgprot) 正常 15 一 7.85±2.3
模型 15 一 10.12±4.7
DPH 15 5 8.44±3.09
1-14 15 5 7.36±1.3*
1-15 15 5 7.41±2.1 *
1-23 13 5 6.53±2.3*
1-29 】5 5 6.66土 1.75*
*P<0.05 , 与模型组比较.
结果显示， 与模型组相比， 在 Morris水迷宫实验中， 各组动物上台潜伏期都有 随时间而下降的趋势， 穿越平台次数也较多， 其中 1-29组好于盐酸多奈哌齐组或与 之相当； 同时各组均可显著降低动物脑中 MDA含量， 化合物 1-29抗氧化作用的效 果尤为显著， 可能有改善东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的作用。
(4 ) 1-9和 1-17对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠的治疗作用
本实验分为正常组、 东莨菪碱（1 mg/kg)组、 盐酸多奈哌齐（DPH) ( 5 mg/kg) 组、 1-9 ( 10 mg kg) 组、 1-9 ( 5 mg/kg) 组、 1-17 ( 10 mg/kg) 组和 1-17 ( 5 mg/kg) 组。 Morris水迷宫实验结果见表 6:
表 6 1-9和 1-17的 Morris水迷宫实验结果 ±SD)
潜伏期 （s)
Group n 站台穿越次数 dayl day2 day3 day4 day5
正常 15 55.7±6.2 45.0±18.8 44.6±15.0 35.9±16.8 28.0±16.6 2.60±2.10
15 58.4±5.5 59.7±1.3 55.3±8.3 52.8±10.3 50.6±16.0 1.33±1.23
DPH 15 58.8±4.8 60±0 54.4±8.4 47.0±14.7 48.1±14.4 1.40±1.40
1-9 ( 10 mg/kg) 15 58.3±6.5 56.6±9.1 56.5±6.3 51. ]±1 1.6 49.2士 16.9 1.80±1.74
1-9 ( 5 mg/kg) 15 58.9±4.0 60±0 51.2±11.0 53.4±1 1.8 51.1±1 1.5 1.27±1.44
1-17(10 mg/kg) 15 59.9±0.3 58.1±6.2 51.1±12.0 42.1±15.5* 39.3±16.7* 2.60±1.96
1-17(5 mg/kg) 15 57.3±6.7 56.3±9.1 52.5±10.4 46.4±16.6 43.7±1 1.8 2.00±1.41
*P<0.05, 模^组比较
结果显示， 与模型组相比， 在 Morris水迷宫定位航行实验中， 各组动物上台潜 伏期都有随时间而下降的趋势， 其中 1-17 ( 10 mg/kg)组比盐酸多奈哌齐组效果好， 下降趋势明显；在 Morris水迷宫空间探索实验中， 1-9 ( 10 mg/kg )组、 1-17 ( 10 mg/kg ) 组和 1-17 ( 5 mg/kg)组穿越平台的次数比盐酸多奈哌齐组多。在 Morris水迷宫实验 中， 无论是上台潜伏期还是穿越平台次数， Ι-Π ( 10 mg/kg) 组都比盐酸多奈哌齐 组效果好。 化合物 1-17有改善东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的作用。
(二） 化合物 1-29的盐酸盐 （1-33) 对侧脑室注射 Αβ1-42所致大鼠学习记忆障碍 的改善
侧脑室注射 Α β 1-42后引起学习记忆障碍模型是最常用的评价化合物是否有改 善学习记忆作用的动物模型。 该动物模型显著破坏了动物的学习能力和记忆功能， 而且影响记忆的机制比较清楚， 结果易重复， 无明显非特异性作用。 本研究采用 Morris水迷宫实验和侧脑室注射 A β 1-42引起的学习记忆障碍模型，评价了 1-33在 不同浓度 （0.7 mg/Kg、 3.5 mg Kg 7 mg/ g) 对大鼠学习记忆的改善作用。 实验材料与分组
1 . 实验动物： SD， 雄性 (220土 20g), 动物饲养于明暗交替 ( 12 h: 12 h) 清洁级动物 房中， 自由进食饮水。 动物在动物房中适应环境 3天后幵始进行实验。 Α β 1-42按照 说明书方法配制成 2 μβ/μ1ο
2. 实验分组：
( 1 ) 正常组： 侧脑室注射生理盐水
(2 ) 侧脑室注射 Α β 1-42模型组： 侧脑室注射 Α β 1-42
(3 )盐酸多奈哌齐对照组： 盐酸多奈哌齐（DPH) (3 mg/Kg) +侧脑室注射 A β 1-42
(4) 1-33 (低浓度组）： 1-33 ( 0.7 mg/Kg) +侧脑室注射 Α β 1-42
(5 ) 1-33 (中浓度组）： 1-33 (3.5 mg/Kg) +侧脑室注射 Α β 42
(6) 1-33 (高浓度组）： 1-33 (7 mg/Kg) +侧脑室注射 A β 1-42
3. 实验仪器： 大鼠 Morris水迷宫装置， 脑立体定位仪。
4. 实验试剂： A β 1-42, 盐酸多奈哌齐 (DPH), 1-33。
实验方法：
将 SD大鼠随机分成正常对照组、 侧脑室注射 Α β 1-42模型组、 阳性对照组 （盐 酸多奈哌齐 3 mg/Kg) 和待测药 1-33组 （0.7 mg/kg、 3.5 mg/Kg 和 7 mg/kg组）； 」下常 对照组侧脑室注射生理盐水 5 μΐ/只， 其余各组侧脑室注射 Α β 1-42 5 μΐ/只。 术后大 鼠均恢复一周再进行后续实验。 正常对照组及侧脑室注射 Α β 1-42模型组每天早上 固定时间灌胃给予相应的溶剂； 1-33组和盐酸多奈哌齐对照组分别按体重给与相应 剂量的药物， 共给药 8天。第 5天开始进行水迷宫实验训练， 第 9天进行正式水迷宫测 试。
实验结果： 见表 7
(1) 各组大鼠游泳速度没有明显统计学差异， 说明大鼠的状态相同。
(2) 大鼠侧脑室注射 Αβ 1-42 (lO g/只） 后， 第一次到达平台的时间 （潜伏 期)显著延长。 盐酸多奈哌齐 （DPH) (3 mg/Kg)可对抗 A β 1-42的作用， 明显缩短 第一次到达平台的时间。所测试的 1-33不同剂量均能显著缩短大鼠第一次到达平台 的时间 （潜伏期）。
(3) 大鼠侧脑室注射 Αβ 1-42 (10 g/只） 后， 穿越平台的次数明显减少。 盐 酸多奈哌齐 （DPH) (3mg/Kg)可对抗 Αβ 1-42的作用， 明显增加穿越平台的次数。 所测试的 1-33不同剂量均能显著增加穿越平台的次数。
1-33对侧脑室注射 ΑβΙ-42所致大鼠学习记忆障碍的改善 ±SD)
Figure imgf000041_0001
*Ρ<0.05, 与 Αβ组比较.
结果显示， 在 Morris 水迷宫中， 1-33 各剂量组均可以显著改善侧脑室注射 Αβ1-42所致大鼠学习记忆障碍， 并有剂量依赖性。 急性毒性试验 参照 《化学药物急性毒性试验技术指导原则》， 将本发明具有代表性的化合物 1-29的盐酸盐 （1-33) 和化合物 1-17的盐酸盐 （1-34) 对小白鼠进行初步的急性毒 性实验。
实验方法- 首先进行预试验， 确定每个化合物正好 0%死亡率和 100%死亡率的浓度， 然后 开始正式试验。按体重将动物分组，在 0%~100%区间内，分别给予不同剂量的药物。 给药体积： 10ml/kg。 给药方式： 分别为静脉注射或灌胃。
(一） 盐酸多奈哌齐的急毒试验 1 .静脉注射：将动物分成 6组，每组 5只； 6组所用的剂量分别为： 4.00 mg/kg， 3.60 mg/kg, 3.24 mg/kg, 2.92 mg/kg, 2.62 mg/kg和 2.36 mg/kg。 每只尾静脉注射一 次， 观察 1W。
2. 灌胃： 将动物分成 6组， 每组 5只； 6组所用的剂量分别为： 64.80 mg/kg, 58.32 mg/kg, 42.51 mg/kg, 38.27 mg/kg, 34.44 mg/kg和 30.99 mg/kg 0 给药前禁食 12 h。 每只灌胃一次， 观察 1W。
(二） 1-33的急毒试验
1 .静脉注射：将动物分成 6组，每组 5只； 6组所用的剂量分别为： 50.00 mg/kg, 40.00 mg kg, 32.00 mg/kg, 25.60 mg/kg, 20.48 mg/kg和 16.18 mg/kg。 每只尾静脉 注射一次， 观察 1W。
2. 灌胃： 将动物分成 6组， 每组 5只； 6组所用的剂量分别为： 500.00 mg/kg， 450.00 mg/kg, 295.25 mg/kg, 265.72 mg/kg, 239.15 mg/kg和 215.23 mg/kg 给药 前禁食 12 h。 每只灌胃一次， 观察 1W。
(三） 1-34的急毒试验
1.静脉注射：将动物分成 5组，每组 5只； 5组所用的剂量分别为： 25.60 mg/kg, 23.04 mg/kg, 20.25 mg/kg, 18.23 mg/kg和 16.40 mg/kg。 每只尾静脉注射一次， 观 察 1 W。
2. 灌胃： 将动物分成 5组， 每组 5只； 5组所用的剂量分别为： 300.00 mg/kg， 240.00 mg/kg, 192.00 mg/kg, 153.60 mg/kg和 122.88 mg/kg。 给药前禁食 12 h。 每 只灌胃一次， 观察 1W。
观察指标：
观察动物给药后的毒性反应及死亡情况， 统计死亡率， 结果经 LD50数据处理 软件分析。
实验结果： 见表 8。
Figure imgf000042_0001
2.62 5 1 20
2.36 5 0 0
64.80 5 5 100
58.32 5 4 80
警 42.51 5 3 60
42.52 30.13 ^LD50^60.00
38.27 5 2 40
34.44 5 1 40
30.99 5 0 0
50.00 5 5 100
静 40.00 5 4 80
脉 32.00 5 3 60
注 31.30 8.77^LD50^ 1 1 I .69 射 25.60 5 1 20
20.48 5 0 0
16.18 5 0 0
1-33
500.00 5 5 100
450.00 5 4 80
響 295.25 5 3 60
303.13 176.25^LD50^521.34
265.72 5 2 40
239.15 5 1 0
215.23 5 0 0
25.60 5 5 100
静 23.04 5 4 80
脉
注 20.25 5 3 60 20.14 8.06 LD50 50.51 射 18.23 5 1 20
16.40 5 0 0
1-34
300.00 5 5 100
灌 240.00 5 4 80
田
H 192.00 5 3 60 171.20 96.23 ^LD50^304.59
153.60 5 2 40
122.88 5 0 0 初歩实验结果显示， 1-33的口服和静脉给药半数致死量分别为盐酸多奈哌齐的 口服或静脉给药半数致死量的 8〜10倍， 1-34的口服和静脉给药半数致死量分别为 盐酸多奈哌齐的口服或静脉给药半数致死量的 4〜7倍， 1-33和 1-34均显示比盐酸 多奈哌齐更小的毒性， 有更好的安全性。 药代动力学研究 参照《临床前药代动力学研究指导原则》，我们又对本发明的代表性化合物 1-29 的盐酸盐 （1-33) 和其磷酸盐 （1-35) 进行了口服大鼠血浆药代动力学研究。 实验方法及结果： 口服给予大鼠不同药物，分别是为盐酸多奈哌齐给药组、 1-35 给药组和 1-33给药组给药剂量为 5mg/kg,给药容积为 10mL/kg。分别在给药后 0.083， 0.167, 0.333 , 0.666, 1.0， 2.0, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 12, 24， 36, 48， 72和 96h 经大鼠眼球后静脉丛采静脉血， 每个时间点 6只大鼠。在相应时间点取全血 0.3mL， 肝素抗凝， 4000rpm离心 10min， 分离血浆， 取大鼠血浆样品 50μ!^， 加入 ΙΟΟμί的 乙腈 （含 0.1%的甲酸）， 涡流混合 l min， 离心 （12000 rpm) lO min, 取上清液， 用液相质谱联用仪测定分析， 记录峰面积， 以此计算血药浓度， 绘制药时曲线。 同 时用中国药理学会 DAS 2.0药动学软件自动拟合，其相关药动学参数见表 9和图 1 :
表 9 1-33和 1-35口服大鼠血浆药代动力学实验结果
参数 盐酸多奈哌齐 （5 mg/kg ) 1-33 ( 5 mg kg) 1-35 ( 5 mg kg)
AUC(O-t) 1370.709±3 1 1.367 4933.099±1397.72 5165.21 1±441.415
AUC(O-oo) 1415.126±337.15 I 4990.306±1423.91 5222.684±433.165
MRT(O-t) 2.734±0.251 2.212士 0.389 2.343±0.206
MRT(0-∞) 3.1 19±0.404 2.352±0.373 2.483±0.265 t l/2z 2.473±0.449 2.085±0.392 1.965士 0.296
Tmax 0.389±0.136 0.305±0.068 0.555±0.172
Cmax 638.5±127.792 2463.333±385.73 21 1 1 .667±331 .748 实验结果显示，与盐酸多奈哌齐相比，等剂量下， 1-33和 1-35的吸收程度（AUC) 和达峰浓度（Cmax)显著高于盐酸多奈哌齐的吸收程度（AUC)和达峰浓度（Cmax)。 综上所述，在本发明所提供的化合物中， 1-1、 1-2、 1-4和 Ι-Π或其盐酸盐（1-34) 具有和多奈哌齐盐酸盐相当的乙酰胆碱酯酶抑制活性；而与盐酸多奈哌齐相比， 1-17 和 1-29或其盐酸盐（1-33 ) 在 Morris水迷宫实验中， 表现出了更强的改善学习记忆 的作用， 展示了更好的体内药效； 尤其引人注目的是 1-29或其盐酸盐（1-33)， 虽然 该化合物体外的乙酰胆碱酯酶抑制活性较弱， 只有盐酸多奈哌齐的 10%左右， 但却 具有比盐酸多奈哌齐更好的体内药效， 而且抗氧化的效果也比盐酸多奈哌齐更强， 这说明 1-29除了作用于乙酰胆碱酯酶以外， 可能还通过别的途径也产生了改善学习 记忆的作用； 另一十分令人鼓舞的实验结果是： 在对小白鼠进行的初歩的急性毒性 实验中， 1-29 盐酸盐 （1-33) 所表现出来的毒性小到约为盐酸多奈哌齐毒性的十分 之一， 这就更使得该化合物具有巨大的使用潜力， 而且可以大大减小病人由于现有 药物的毒副作用所带来的痛苦。 这预示着 1-29无限美好的前景。 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考， 就如同每一篇文献被单 独引用作为参考那样。 此外应理解， 在阅读了本发明的上述讲授内容之后， 本领域 技术人员可以对本发明作各种改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利 要求书所限定的范围。

Claims

权 利 要 求 书
1. 式 （I) 所表示的化合物， 或其药学上可接受的盐:
Figure imgf000046_0001
(I)
其中
R1和 R2独立地选自以下基团： 氢、 甲基或乙基； R1和 R2可以合起来为 =0; R1和 R2也可以与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环；
A选自以下基团： 苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取代的吡啶基、 嘧啶基、 R5取代的嘧啶基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基、 R7取代的哒嗪基、 吡唑基 或 R8取代的吡唑基；
R3为 1〜5个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 垸基、 （C2-C3) 烯基、 （C3- C4) 环垸基、 (C,-C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基；
R4为 1〜4个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ -C3) 烷基、 （C2-C3) 烯基、 （C3- C4) 环垸基、 (C,-C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基；
R5为 1〜3个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ -C3) 垸基、 （C2-C3) 烯基、 （c3- c4)环垸基、 (C,-C3) 垸氧基、 三氟甲基或氰基；
R6为 1〜4个取代基， 独立地选自以下基团： （ - ) 烷基、 （C2- C3) 烯基 或 (C3-C4) 环垸基；
R7为 1〜3个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 垸基、 （C2-C3) 烯基、 （C3- C4) 环垸基、 (C,-C3) 烷氧基、 三氟甲基或氰基；
R8为 1〜3 个取代基， 独立地选自以下基团： （d-C3) 垸基、 （C2- C3) 烯基 或 (C3-C4) 环烷基。
2. 如权利要求 I所述的化合物， 其中， A选自苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取代的吡啶基、 嘧啶基或 R5取代的嘧啶基。
3. 如权利要求 1或 2所述的化合物， 其中， R1和 R2独立地选自氢或甲基； R1 和 R2合起来为 =0; R1和 R2与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环。
4. 如权利要求 3所述的化合物， 其中， R1和 R2与连接它们的碳原子一起环合 起来形成三元碳环。
5. 如以上任一项权利要求所述的化合物， 其中， A选自苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 R4取代的吡啶基、 嘧啶基、 R5取代的嘧啶基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基、 R7取代的哒嗪基、 吡唑基、 R8取代的吡唑基； 其中 R3为 1〜5个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （CH^ )烷基、 （ ~C3 )烷氧基、 三氟甲基或氰基； R4为 1〜4个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （d-C3 ) 垸基、 （ -C3 ) 垸 氧基、三氟甲基或氰基； R5为 1〜3个取代基，独立地选自以下基团： 卤素、 （d-C3) 垸基、 烷氧基、三氟甲基或氰基； R6为 1〜4个取代基，独立地选自（d-C3 ) 烷基； R7为 1〜3个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ -C3)烷基、 （C「C3 ) 垸氧基、 三氟甲基或氰基； R8为 1〜3个取代基， 独立地选自 （ -C3) 垸基。
6. 如权利要求 5所述的化合物， 其中， A选自苯基、 R3取代的苯基、 吡啶基、 嘧啶基、 吡咯基、 R6取代的吡咯基、 哒嗪基、 吡唑基； 其中 R3为！〜 5个取代基， 独立地选自以下基团： 卤素、 （ ^C 垸基、 （C C3)垸氧基、 三氟甲基或氰基； R6为 1〜4个取代基， 独立地选自 （d-Cs ) 烷基。
7. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自苯基。
8. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自 R3取代的苯基， 优选 2-氟苯基、 3-氟苯基、 4-氟苯基或 2， 6-二氟苯基。
9. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自吡啶基， 优选 2-吡啶基或 3-吡 啶基。
10. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自嘧啶基， 优选嘧啶 -2-基。
1 1 . 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自吡咯基， 优选吡咯 -2-基。
12. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自 R6取代的吡咯基， 优选 5-甲基 吡咯 -2-基。
13. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自哒嗪基， 优选哒嗪 -3-基。
14. 如权利要求 6所述的化合物， 其中， A选自吡唑基， 优选吡唑 -5-基。
15. 如权利要求 1所述的化合物， 其中所述的化合物式 （I) 选自-
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5,7-二酮（1-1); 6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基 ]-[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-1]异吲哚 -5,7- 二酮 （1-2);
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基 HU]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （1-3);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5，7- 二酮 （1 ）；
6-[2- ( 苄基 -4-哌啶基)乙基] -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （1-5); 6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （1~6)；
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[U]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7-酮 （1-7);
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5H-[U]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7-酮 （1—8);
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-fJ异吲哚 -7-酮 (1-9)；
6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -7-酮 (1-10)；
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -7-酮 (1-11)；
6-[2-卩 -[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -5-甲基 -5H-[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -7-酮 （1-12);
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基)乙基] -7，7-二甲基 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -5-酮 (1-13)；
6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7，7-二甲基 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -5-酮 （1-14); 6-[2-[l-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7，7-二甲基 -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -5-酮 (1-15)；
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基] -7，7-二甲基 -[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f] 异吲哚 -5-酮 (1-16)；
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基）乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙 烷] -5-酮 （1-17);
6-[2-[1-[(2-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-18);
6-[2-[1-[(3-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 (1-19)；
6-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 (1-20)；
6-[2-[1-[(2-氯苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 （1—21);
6-[2-[1-[(2-三氟甲基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f] 异吲哚 -7，Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-22);
6-[2-[1-[(2-甲基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲 哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮 （1-23);
6-[2-[1-[(2-氰基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲 哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮 （1-24);
6-[2-[1-[(2，6-二氟苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-fJ异 吲哚 -7，1'-环丙院 ]-5-酮 （1-25);
6-[2-[1-[(2-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-26);
6-[2-[1-[(3-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异 吲哚 -7， Γ-环丙烷 ]-5-酮 （1-27);
6-[2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基] -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异 吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-28);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-29);
6-[2-[1-(3-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮 (1-30)；
6-[2-[1-(4-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-ί]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮 (1-31)；
6-[2-[1- (嘧啶 -2-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-32);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮盐酸盐 （I - 33);
6-[2-(1-苄基 -4-哌啶基）乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f 异吲哚 -7，Γ-环丙 垸] -5-酮盐酸盐 （1-34);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮磷酸盐 （1-35);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5，7-二 酮 （1-36);
6-[2-[1- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基] -[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -5,7- 二酮 （1-37);
6-[2-[1- (哒嗪 -3-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7， Γ-环丙垸 ]-5-酮 （1-38);
6-[2-[1-(1Η-吡咯 -2-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1,3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异 吲哚 -7，1'-环丙垸 ]-5-酮 （1-39);
6-[2-[1- [(5-甲基 -1H-吡咯 -2-基)甲基] 哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮 （140);
6-[2-[1-(1Η-吡唑 -5-基甲基 )-4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异 吲哚 -7,1'-环丙院 ]-5-酮 (1-41)；
或其药学上可接受的盐。
16. 如权利要求 1所述的化合物， 其中化合物为：
6-[2-[1 -(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[U]二氧杂环戊烯并 [4,5-f)异吲哚 -7， Γ-环丙烷 ]-5-酮 （1-29) 或其药学上可接受的盐。
17. 如权利要求 16所述的化合物， 其中化合物为-
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4，5-f]异吲哚 -7,1'-环丙烷 ]-5-酮 （1-29);
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7，1'-环丙烷 ]-5-酮盐酸盐 （1-33); 或者
6-[2-[1-(2-吡啶甲基) -4-哌啶基]乙基]螺环 [[1，3]二氧杂环戊烯并 [4,5-f]异吲哚 -7,1'-环丙垸 ]-5-酮磷酸盐 （1-35)。
18. 药物组合物， 其中包括有效剂量的权利要求 1〜17中任一项的式（I )化合 物或者它们药学上可接受的盐。
19. 如权利要求 1〜17中任一项所述的化合物在制备用于治疗或者预防与乙酰 胆碱酯酶抑制剂相关的疾病的药物中的应用。
20. 如权利要求 1〜17中任一项所述的化合物在制备用于治疗或者预防阿尔茨 海默氏症 （Alzheimer's disease) 的药物中的应用。
21 . 权利要求 1所述的式 （I ) 化合物的制备方法， 所述方法包括： 将式 II所 示的化合物或其盐与式 III-1或 HI-2所示的化合物反应得到：
Figure imgf000051_0001
" I
其中， I 1、 R2、 A如权利要求 1所定义， X为卤素或羟基， Y为甲酰基或垸氧 敷基。
22. 如权利要求 21所述的制备方法， 其中式 （II )化合物或其盐通过以下方法 进行制备， 包括： 脱除式 IV所示的化合物的氨基保护基：
Figure imgf000052_0001
其中， R1和 R2如权利要求 1所定义; R9为氨基的保护基,优选叔丁氧羰基 (Boc)。
23.如权利要求 22所述的制备方法，其中 R1和 R2合起来为 =0的式 IV化合物， 即式 IV-1化合物通过以下方法进行制备， 包括： 将式 V所示的化合物与式 VI所示 的化合物反应得到：
Figure imgf000052_0002
VI IV-1
其中， Ri和 R2合起来为 =0: R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基（Boc); R10 为卤素或对甲苯磺酰氧基。
24. 如权利要求 22所述的制备方法， 其中 R1和 R2均为氢的式 IV化合物， 即 IV-2化合物通过以下方法进行制备， 包括： 将式 IV-1所示的化合物先还原成醇， 然 后将形成的羟基转化成易离去的乙酰氧基， 最后通过催化氢解将乙酰氧基脱掉以得 到：
Figure imgf000052_0003
VIII IV-2
其中， R1和 R2均为氢； R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc )。
25.如权利要求 22所述的制备方法，其中 R1为甲基或乙基并且 R2为氢的式 IV 化合物， 即 IV-3化合物通过以下方法进行制备， 包括： 对式 IV-2所示化合物的 元内酰胺的亚甲基进行单垸基化以得到：
Figure imgf000053_0001
其中， R1为甲基或乙基； R2为氢； R9为氨基的保护基，优选叔丁氧羰基（Boc)。
26. 如权利要求 22所述的制备方法， 其中 I 1、 R2为甲基或乙基的式 IV化合 物， 即 IV-4化合物通过以下方法进行制备， 包括： 将式 IV-3所示化合物的与 R1相 连的碳原子进一歩进行烷基化以得到：
Figure imgf000053_0002
其中， R R2为甲基或乙基； R9为氨基的保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc )。
27. 如权利要求 22所述的制备方法， 其中 R1和 R2与连接它们的碳原子一起环 合起来形成三元碳环的式 IV化合物， 即 IV-5化合物通过以下方法进行制备，包括: 将式 IV-1所示的化合物先与甲基格氏试剂反应形成醇，然后醇在酸性条件下脱水成 烯， 最后将产生的碳碳双键用 Et2Zn/TFA/CH2I2转化成三元环以得到：
Figure imgf000053_0003
IV-5
其中， R1和 R2与连接它们的碳原子一起环合起来形成三元碳环； R9为氨基的 保护基， 优选叔丁氧羰基 （Boc); X为卤素。
Figure imgf000054_0001
II
其中， R1和 R2如权利要求 1所定义。 29. 式 IV化合物：
Figure imgf000054_0002
IV 其中， R1和 R2如权利要求 1所定义; R9为氨基的保护基，优选叔丁氧羰基 (Boc)。
30. 如权利要求 1〜17中任一项所述的化合物在治疗或者预防与乙酰胆碱酯酶 抑制剂相关的疾病中的应用。
31 . 如权利要求 1〜17中任一项所述的化合物在治疗或者预防阿尔茨海默氏症 (Alzheimer's disease) 中的应用。
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