WO2013166989A1 - 噻唑类化合物及其用途 - Google Patents

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WO2013166989A1
WO2013166989A1 PCT/CN2013/075471 CN2013075471W WO2013166989A1 WO 2013166989 A1 WO2013166989 A1 WO 2013166989A1 CN 2013075471 W CN2013075471 W CN 2013075471W WO 2013166989 A1 WO2013166989 A1 WO 2013166989A1
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phenyl
apoptosis
pharmaceutically acceptable
isomer
compound
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PCT/CN2013/075471
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French (fr)
Inventor
李松
钟武
刘娟
何昆仑
肖军海
周辛波
Original Assignee
中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/42—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Definitions

  • the present invention relates to novel thiazole compounds, and their use for the preparation of anti-apoptotic drugs and for the protection of cardiomyocytes.
  • Apoptosis generally refers to a programmed cell death that occurs through the regulation of intracellular genes and their products during the development of the body's cells or under certain factors. Apoptosis is ubiquitous in the biological world, both in physiological conditions and in pathological conditions. It plays an important role in the development and morphogenesis of embryos, the stability of normal cell populations in tissues, the defense and immune response of the body, the cell damage, aging and tumors caused by diseases or poisoning, and has been a hot spot in biomedical research.
  • cardiomyocyte apoptosis is closely related to the development, progression and prognosis of many heart diseases.
  • Myocardial cell death is not equal to myocardial necrosis by studying myocardial cell apoptosis.
  • Apoptosis is one of the mechanisms of myocardial infarction, and it is the main way of myocardial death and myocardial death caused by ischemia/reperfusion in early infarction. The massive apoptosis has aggravated the destruction of the myocardium.
  • SHR heart damage is related to apoptosis; late from hypertrophic heart to heart failure caused by cardiomyocyte apoptosis; acute myocardial infarction, necrosis, early infarction and reperfusion injury also induce apoptosis; myocardial apoptosis is also seen in transplantation Cardiac and right ventricular dysplastic cardiomyopathy, hypoxia also induces cardiomyocyte apoptosis.
  • Apoptosis is reversible to some extent.
  • Apoptosis in myocardial infarction and ischemia/reperfusion has its characteristics and regularity. It can prevent and reduce apoptosis by using its characteristics, and prevent ischemia/reperfusion for clinical prevention.
  • apoptosis in the region of the contractile zone (around the infarct) is induced by a number of inducements that can be prevented by apoptosis, such as drugs, to treat apoptosis.
  • apoptosis such as drugs
  • the first aspect of the invention relates to a compound represented by the formula (I), or an isomer, a pharmaceutically acceptable salt thereof and a solvate thereof,
  • (I) Represents hydrogen, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl, cycloalkylalkyl, phenyl, substituted phenyl, phenylalkyl, substituted phenylalkyl;
  • R 2 represents a phenyl group, a substituted phenyl group.
  • the substituted alkyl group, the substituted phenyl group, the substituted phenylalkyl group respectively mean an alkyl group, a phenyl group or a group substituted by one or more (for example, 2, 3) groups selected from the group consisting of Phenylalkyl: 13 ⁇ 4 , alkyl, alkoxy, cycloalkyl, hydroxy, nitro, gas, fluorenyl.
  • the alkyl group means C,. 8- alkyl, and means a linear or branched alkyl group having 1-8 carbon atoms.
  • it is 1 to 6 carbon atoms, for example, 1 to 4 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, 2-Ethyl-butyl, hexyl, heptyl, octyl and the like.
  • the cycloalkyl group means a cycloalkyl group, and represents a cyclic alkyl group having 3 to 8 carbon atoms.
  • Examples of the cycloalkyl group include a cyclopropyl group, a cyclobutyl group, a cyclopentyl group, a cyclohexyl group, a cycloheptyl group, a cyclooctyl group and the like.
  • the cycloalkylalkyl group means a side chain to which an alkyl group is bonded to a cycloalkyl group, and the cycloalkyl group and the alkyl group are as defined above, and the cycloalkylalkyl group may be, for example, Cyclopentyl fluorenyl, cyclohexylmethyl, cyclopentylethyl, cyclohexylethyl.
  • the phenylalkyl group means a side chain to which an alkyl group is bonded, and the alkyl group is as defined above, and the phenylalkyl group may be, for example, a phenylfluorenyl group or a phenylethyl group. , phenylpropyl and the like.
  • the alkoxy group means "alkyl group - 0-" wherein the alkyl group is as defined above.
  • the halogen means fluorine, chlorine, bromine or iodine.
  • a compound according to the first aspect of the invention or an isomer, a pharmaceutically acceptable salt thereof and a solvate thereof, wherein:
  • ⁇ represents hydrogen, methyl, propyl, hexyl, cyclopentylmethyl, cyclohexylmethyl, cyclopentylethyl, cyclohexylethyl, phenyl, 2-methoxyphenyl, 4-methoxy Phenyl group;
  • R 2 represents phenyl, 4-methoxyphenyl, 2-methoxyphenyl, 2-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 2,4-dichlorophenyl, 2,4-difluorobenzene base.
  • 1 ⁇ represents hydrogen, hexyl, cyclopentyl fluorenyl, phenyl;
  • R 2 represents phenyl, 4-methoxyphenyl, 2,4-difluorophenyl, 4-chlorophenyl.
  • a compound according to the first aspect of the invention or an isomer, a pharmaceutically acceptable salt thereof and a solvate thereof, which is selected from the group consisting of:
  • the compound of the first aspect of the invention can be prepared by the following method:
  • the compound of the present invention is prepared by reacting phenylacetic acid with phenylhydrazine ether under the catalysis of chloroform as a solvent of aluminum trichloride to form compound 2, and then preparing substituted 2- via copper bromide.
  • Bromoacetophenone 3, thiourea and isopropanol are added to reflux to obtain compound 4; while cinnamamide and trichloroacetaldehyde hydrate are refluxed in toluene to obtain compound 6, and then chlorination to obtain intermediate 7;
  • the anti-apoptotic effect of the compound of the present invention and the action of protecting cardiomyocytes were obtained by stirring with 7 at room temperature overnight in DMF.
  • Another aspect of the invention relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of the first aspect of the invention, or an isomer, pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent .
  • the present invention also relates to the compound of the above formula (I) or an isomer, a pharmaceutically acceptable salt thereof and a solvate thereof for use in the preparation of anti-apoptosis, prevention or treatment of diseases or symptoms associated with apoptosis. Use of the drug.
  • the present invention also relates to the compound of the formula (I), or an isomer, a pharmaceutically acceptable salt thereof and a solvate thereof, according to the first aspect, for the preparation of a protective cardiomyocyte and for preventing or treating a disease or symptom associated with cardiomyocyte apoptosis. Use of the drug.
  • the invention also relates to an anti-apoptosis, prevention or treatment of diseases associated with apoptosis Or a method of symptom, the method comprising administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of a compound of formula (I), or an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt and a solvate thereof, of the first aspect of the invention.
  • the invention also relates to a method of protecting cardiomyocytes, preventing or treating a disease or condition associated with cardiomyocyte apoptosis, the method comprising administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of the first aspect of the invention A compound of the formula (I) or an isomer thereof, a pharmaceutically acceptable salt and a solvate.
  • the diseases or symptoms associated with apoptosis include, but are not limited to, cardiovascular diseases, neurodegenerative diseases (eg, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, etc.), multiple sclerosis, viral infections, AIDS , transplant rejection, ionizing radiation, etc.
  • cardiovascular diseases e.g, cardiovascular diseases, neurodegenerative diseases (eg, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, etc.), multiple sclerosis, viral infections, AIDS , transplant rejection, ionizing radiation, etc.
  • the diseases or symptoms associated with cardiomyocyte apoptosis include, but are not limited to, (i) starved myocardial atrophy, (ii) myocarditis, (iii) heart failure, (iv) myocardial damage caused by essential hypertension, (V) myocardial damage caused by acute myocardial infarction, (vi) myocardial damage caused by acute myocardial infarction, (vii) cardiomyocyte lesions caused by heart transplantation, (viii) dysplastic cardiomyopathy; or caused by hypoxia Cardiomyocyte apoptosis, or cardiovascular system sclerosis.
  • a compound of formula I has a chiral center.
  • a compound of formula I can be prepared using a reactant in the form of a single enantiomer in all possible steps, or in a single enantiomer form of the reagent or catalyst. It is prepared by carrying out the reaction in the presence of a solution, or by dissolving a mixture of stereoisomers by a conventional method. Some preferred methods include resolution using a microorganism, resolution of a diastereomeric salt formed with any usable acid such as mandelic acid, camphorsulfonic acid, tartaric acid, lactic acid, or the like, or splitting with a hand.
  • Salts of diastereomers formed by alkaloids such as bracine, cinchona alkaloids and derivatives thereof.
  • alkaloids such as bracine, cinchona alkaloids and derivatives thereof.
  • a commonly used method is described in "Enantiomers, Racemates and Resolution” by Jaques et al. (Wiley Interscience, 1981).
  • Physiologically acceptable salts of the compounds of formula I include conventional salts formed from pharmaceutically acceptable inorganic or organic acids or inorganic or organic bases, and quaternary ammonium acid addition salts.
  • Suitable acid salts include Hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, perchloric acid, fumaric acid, acetic acid, propionic acid, succinic acid, glycolic acid, citric acid, lactic acid, maleic acid, tartaric acid, citric acid, citric acid, propylene Acid, hydroxymaleic acid, phenylacetic acid, glutamic acid, benzoic acid, salicylic acid, fumaric acid, toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, naphthalene-2-resin, benzenesulfonic acid, hydroxynaphthoic acid, a salt of hydriodic acid, malic acid, steroic, citric acid or the like.
  • acids such as oxalic
  • suitable base salts include sodium, lithium, potassium, magnesium, aluminum, calcium, zinc, N,N,-dibenzylethylenediamine, chloroprocaine, choline, diethanolamine, B. Diamine, N-decyl glucosamine and procaine salt.
  • the present invention also encompasses prodrugs of the compounds of the invention which, upon administration, are chemically converted by a metabolic process and thereafter become active drugs.
  • prodrugs are functional derivatives of the compounds of the invention which are readily converted in vivo to the desired compound of formula (I).
  • ⁇ Design Of Prodrugs
  • H Bund Saard Elsevier, ed., 1985, describes conventional methods for the selection and preparation of suitable prodrug derivatives.
  • the invention also includes active metabolites of the compounds of the invention.
  • Another aspect of the invention relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a racemate or an optical isomer of a compound of the invention and at least one pharmaceutically acceptable carrier which is useful for in vivo treatment and is biocompatible.
  • the pharmaceutical composition can be prepared in various forms depending on the route of administration.
  • the compounds referred to in the present invention can also be prepared into various pharmaceutically acceptable salts.
  • compositions of the present invention comprise an effective amount of a compound of formula I according to the invention, or a pharmaceutically acceptable salt or hydrate thereof, and one or more suitable pharmaceutically acceptable carriers.
  • Pharmaceutically acceptable carriers herein include, but are not limited to, ion exchangers, alumina, aluminum stearate, lecithin, serum proteins such as human albumin, buffer substances such as phosphate, glycerin, sorbic acid, potassium sorbate, saturated plants.
  • a partial glyceride mixture of fatty acids, water, salt or electrolyte such as protamine sulfate, disodium hydrogen phosphate, potassium hydrogen phosphate, sodium chloride, zinc salts, colloidal silica, magnesium trisilicate, polyvinylpyrrolidone, Cellulose material, polyethylene glycol, sodium carboxymethyl strontium, polyacrylate, beeswax, lanolin.
  • composition of the compound of the present invention can be administered in any of the following ways: Oral, spray Inhalation of mist, rectal administration, nasal administration, buccal administration, topical administration, parenteral administration, such as subcutaneous, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, intrathecal, intraventricular, intrasternal and intracranial injection or input, or by means of a An explant storage drug.
  • Oral, spray Inhalation of mist rectal administration
  • nasal administration buccal administration
  • topical administration parenteral administration, such as subcutaneous, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, intrathecal, intraventricular, intrasternal and intracranial injection or input, or by means of a An explant storage drug.
  • parenteral administration such as subcutaneous, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, intrathecal, intraventricular, intrasternal and intracranial injection or input, or by means of a An explant storage drug.
  • oral, intraperitoneal or intravenous administration is preferred.
  • the compounds of the invention may be formulated into any orally acceptable formulation, including, but not limited to, tablets, capsules, aqueous solutions or aqueous suspensions.
  • the carrier used for the tablet generally comprises lactose and corn starch, and a lubricant such as magnesium stearate may also be added.
  • the diluent used in the capsule preparation generally comprises lactose and dried corn starch.
  • Aqueous suspension formulations are usually prepared by admixing the active ingredient with suitable emulsifying and suspending agents. If desired, some sweeteners, fragrances or colorants may be added to the above oral formulations.
  • the compounds of the present invention can be formulated into different topical preparations according to different affected faces or organs.
  • the form is as follows:
  • the compound of the present invention When applied topically to the eye, the compound of the present invention can be formulated into a micronized suspension or solution preparation, the carrier used is an isotonic pH of sterile saline, with or without preservatives such as chlorination. Benzyl alkoxide.
  • the compound can also be formulated in the form of an elixir such as vaseline.
  • the compounds of the invention may be formulated in a suitable cartilage, lotion or cream formulation wherein the active ingredient is suspended or dissolved in one or more carriers.
  • Carriers that can be used for cartilage preparations include, but are not limited to, mineral oil, liquid petrolatum, white petrolatum, propylene glycol, polyethylene oxide, polypropylene oxide, emulsifying wax and water; and detergents or creams which may be used include, but are not limited to: Mineral oil, sorbitan monostearate, Tween 60, cetyl esters wax, hexadecene aryl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water.
  • the compounds of the present invention can also be administered in the form of a sterile injectable preparation, including sterile injectable aqueous or oily suspension or sterile injectable solutions.
  • a sterile injectable preparation including sterile injectable aqueous or oily suspension or sterile injectable solutions.
  • carriers and solvents which can be used include water, Ringer's solution and isotonic sodium chloride solution.
  • sterile, fixed oils may also be employed as a solvent or suspension medium such as a monoglyceride or a diglyceride.
  • the dosage and method of use of the compounds of the invention depend on a number of factors, including the age, weight, sex, natural health, nutritional status, and compound of the patient.
  • the present invention provides a thiazole compound and proves that it has anti-apoptotic and cell-protecting effects, and provides a new disease or symptom for treating apoptosis, especially for treating diseases or symptoms caused by apoptosis of cardiomyocytes. Ways and means. detailed description
  • Example 5 (2E)-3-(2-Phenyl)-N-[l-(4-chlorophenyl-2-thiazolyl)-2,2,2-trichloroethyl1-2-acrylamide Using the method of Example 1, the phenylacetic acid was changed to acetic acid, and the phenyl hydrazine ether was changed to 4-fluorobenzene to give a white solid (0.12 g).
  • Example 6 (2E)-3-(2-Phenyl)-N-[l-(4-phenyl-2-oxazolyl)-2,2,2-trichloroethyl]-2-acrylamide Using the method of Example 1, the phenylacetic acid was changed to acetic acid, and the anisole was changed to benzene to give a white solid (0.22 g).
  • Example 2 Using the method of Example 1, the phenylacetic acid was changed to 3-cyclopentylpropionic acid to obtain a yellow solid 0.19 g e.
  • Example 8 (2E)-3-(2-Phenyl)-N-[l-(4-phenyl-2-thiazolyl)-2,2,2-trichloroethyl-2-acrylamide hydrochloride salt 0.15 g of the compound of Example 6 was added to 2 ml of ethyl acetate aqueous solution and stirred for 5 hr to give a white solid. Elemental analysis results:
  • the Wistar rats within 24 hours of the newborn were male or female (provided by the Experimental Animal Center of the Academy of Military Medical Sciences, the animal certificate number is SCXK- (Jun) 2007-004).
  • High glucose DMEM culture Base, trypsin, type II collagenase was purchased from Gibco; newborn fetal bovine serum (FBS) was purchased from Beijing Yuanheng Shengma Biotechnology Research Institute; 5-bromo-2-deoxyuracil (5-Brdu), fungi Tunicamycin (TM) was purchased from Sigma; azole blue (MTT) and dimethylimide (DMSO) were Amresco products; the remaining chemical reagents were domestically analyzed.
  • the Universal Microplate Reader EL800 is a BIO-TEK product from the United States.
  • Compound Toxicity Assay The compounds of the invention were formulated in DMSO with DMSO as the solvent. After 4 days of cardiomyocyte culture, different concentrations of compounds were administered (0 ⁇ , 0.3 ⁇ , 1 ⁇ , 3 ⁇ , ⁇ ⁇ , 30 ⁇ , ⁇ ⁇ , 300 ⁇ ), placed at 37 ° C, 5% C02 incubator After incubation for 48 h, ⁇ ⁇ (5 mg/ml) was added to each well for 4 h. Finally, ⁇ 10% SDS was added to each well, and incubation was carried out for 24 h at 37 V 5 % C02 to completely dissolve the MTT crystal. The absorbance of each well was measured by an enzyme-linked immunosorbent assay at a wavelength of 550 nm. According to the formula: inhibition rate
  • (%) (OD value of the drug-administered group / average OD value of the solvent control well) ⁇ 100°/. .
  • the solvent control group was DMSO.
  • the average compound inhibition rate is plotted on the ordinate, and the Origin analysis software is used to determine the half-cell inhibitor value.

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Abstract

本发明涉及通式I化合物，或其异构体、可药用盐及溶剂化物；本发明还涉及包含通式I化合物或其异构体、可药用盐及溶剂化物，以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物；本发明还涉及通式I化合物，或其异构体、可药用盐及溶剂化物，用于抗细胞凋亡、预防或治疗与细胞凋亡有关的疾病或症状的用途；特别是用于保护心肌细胞和预防或治疗与心肌细胞凋亡有关的疾病或症状中的用途。

Description

噻唑类化合物及其用途 技术领域
本发明涉及涉及新型噻唑类化合物，及其用于制备抗细胞凋亡的药 物和保护心肌细胞药物的用途。
背景技术
细胞凋亡一般是指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下， 通 过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡。 细胞凋亡 普遍存在于生物界， 既发生于生理状态下， 也发生于病理状态下。 对胚 胎发育及形态发生、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、 疾病或中毒时引起的细胞损伤、 老化、 肿瘤的发生进展起着重要作用， 一直是生物医学研究的热点。
研究表明， 有很多重大疾病的发生都与细胞过度凋亡有关， 例如在 艾滋病的发展过程中， CD4+T 细胞数目的减少； 移植排斥反应中， 细 胞毒性 T细胞介导的细胞死亡； 缺血及再灌注损伤， 心肌细胞和神经细 胞的凋亡； 神经系统退化性疾病 （如阿尔海默次病、 帕金森氏症等） ； 暴露于电离辐射引起的多种组织细胞凋亡等。
有证据表明， 心肌细胞凋亡与许多心脏疾病的发生、 发展和预后有 着密切的关系。 通过研究心肌细胞凋亡发现梗死的心肌死亡不等于心肌 坏死， 凋亡是心肌梗死的机制之一， 而且是梗死早期心肌死亡及缺血 / 再灌注所致的心肌死亡的主要方式， JH时心肌的大量凋亡， 加重了心肌 的破坏。 1989年， Nepomniashchikh等观察饥饿性心肌萎缩超微结构时 发现， 心肌细胞结构蛋白合成降低， 细!包数减少， 但不伴细包核相应成 比例地减少， 由此初步提出饥饿性心肌萎缩是由细胞凋亡所致。 1994 年， Gottlieb和 Kawano等采用电镜结合 DNA凝胶电泳方法取得了心肌 细胞凋亡的直接证据， 前者揭示再灌注损伤诱发兔心肌细胞凋亡， 后者 证实心肌炎患者伴发心肌细胞凋亡。 Tanaka等培养的乳鼠心肌细胞中， 也证明了凋亡的存在。 由于方法学的进步和凋亡的研究深入， 已在多种 心脏病中发现心肌细胞凋亡的病理作用。 研究表明， 自发性高血压小鼠
(SHR)心脏损害与凋亡有关； 晚期由肥厚心脏转向心力衰竭为心肌细胞 凋亡所致； 急性心梗除坏死外， 梗塞早期和再灌注损伤也诱发凋亡； 心 肌细胞凋亡同样见于移植的心脏和右室发育不良性心肌病， 缺氧同样诱 导心肌细胞凋亡。 凋亡在某种程度上具有可复性，心肌梗死和缺血 /再灌注中的细胞凋 亡有其特点和规律， 利用其特点可以预防和减少细胞凋亡， 为临床预防 缺血 /再灌注损伤提供启示； 在再灌注过程中， 产生收缩带区域（梗死灶 周围）的细胞凋亡是由一些诱因诱导产生的， 可以利用凋亡的抑制因素 如药物等来预防凋亡， 治疗凋亡引起的相应疾病。
但目前可供临床应用的用于抗细胞凋亡和保护细胞的药物种类和 数量还很少， 选择性和靶向性都不高， 因此不断研究开发新的安全有效 的抗细胞凋亡和保护细胞的药物， 尤其是具有全新作用机制的药物具有 十分重要的意义。 发明内容
为了开发新的安全有效的抗细胞凋亡和保护细胞的药物， 发明人经 过长期、 大量的实验研究， 发现了一类噻唑类化合物， 其具有抗细胞凋 亡， 保护心肌细胞的作用， 能够用于预防或治疗与心肌细胞凋亡有关的 疾病或症状。 具体地， 本发明的第一方面涉及通式 (I)所示的化合物， 或其异构体、 可药用 盐及溶剂化物，
Figure imgf000003_0001
( I ) 代表氢、 烷基、 取代烷基、 环烷基、 环烷基烷基、 苯基、 取代苯 基、 苯基烷基、 取代苯基烷基；
R2代表苯基、 取代苯基。
在本发明中， 所述取代烷基、 取代苯基、 取代苯基烷基分别是指被 一个或多个 (例如 2个、 3个)选自以下的基团取代的烷基、 苯基或苯基 烷基： 1¾素、 烷基、 烷氧基、 环烷基、 羟基、 硝基、 氣基、 巯基。
在本发明中， 所述烷基是指 C，.8烷基， 是指具有 1-8个碳原子的直 链或支链烷基。 例如为 1-6个碳原子， 例如为 1-4个碳原子， 例如甲 基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 仲丁基、 叔丁基、 戊基、 2-乙基-丁基、 己基、 庚基、 辛基等。
在本发明中， 所述环烷基是指 环烷基， 表示具有 3-8个碳原子 的环状烷基。 所述环烷基的例子包括环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己 基、 环庚基和环辛基等。
在本发明中， 所述环烷基烷基是指在环烷基上连接烷基的侧链， 所 述环烷基和烷基的定义如上所述， 所述环烷基烷基例如可以为环戊基曱 基、 环己基甲基、 环戊基乙基、 环己基乙基。
在本发明中， 所述苯基烷基是指在苯基上连接烷基的侧链， 所述烷 基的定义如上所述， 苯基烷基例如可以为苯基曱基、 苯基乙基、 苯基丙 基等。
在本发明中， 所述烷氧基是指 "烷基 -0-" , 其中烷基如上所定义。 在本发明中， 所述卤素是指氟、 氯、 溴、 碘。
根据本发明第一方面所述的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂 化物， 其中：
！^代表氢、 甲基、 丙基、 己基、 环戊基甲基、 环己基甲基、 环戊基 乙基、 环己基乙基、 苯基、 2-甲氧基苯基、 4-甲氧基苯基；
R2代表苯基、 4-甲氧基苯基、 2-甲氧基苯基、 2-氯苯基、 4-氯苯基、 2，4-二氯苯基、 2，4-二氟苯基。
根据本发明第一方面所述的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂 化物， 其中：
1^代表氢、 己基、 环戊基曱基、 苯基；
R2代表苯基、 4-甲氧基苯基、 2，4-二氟苯基、 4-氯苯基。
根据本发明第一方面所迷的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂 化物， 其选自下面的化合物：
( 1 ) (2E)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基） -5苯基 -2-噻唑 基】 -2，2，2-三氯乙基}-2-丙烯酰胺；
( 2 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4， 5-二苯基 -2-噻唑基 )-2,2，2-三氯乙 基] -2-丙烯酰胺；
( 3 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-甲氧基苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基] -2-丙烯酰胺；
( 4 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(2， 4-二氟苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基卜 2-丙烯酰胺；
( 5 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-氯苯基 -2-噻唑基 )-2,2，2-三氯乙基卜 2- 丙烯酰胺；
( 6 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙基】-2-丙 烯酰胺 ί
( 7 ) (2Ε)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基) -5-环戊基曱基 -2- 噻唑基】-2，2，2-三氯乙基}-2-丙烯酰胺。
本发明第一方面所述的化合物可通过下述方法制备：
Figure imgf000006_0001
化合物一
以化合物一的合成为例， 本发明化合物以苯乙酸为起始原料， 与苯 曱醚在氯仿为溶剂三氯化铝催化的条件下反应生成化合物 2， 再经过溴 化铜制备取代的 2-溴苯乙酮 3， 加入硫脲和异丙醇回流得到化合物 4; 同时将肉桂酰胺与三氯乙醛水合物在甲苯中回流制得化合物 6, 然后经 过氯化制得中间体 7; 最后 4与 7在 DMF中室温搅拌过夜得到化合物 本发明化合物的抗细胞凋亡作用和保护心肌细胞作用详见实施例。 本发明的另一方面涉及药物组合物， 其包含本发明第一方面所述的 化合物或其异构体、 可药用盐或溶剂化物， 以及药学上可接受的载体、 赋形剂或稀释剂。
本发明还涉及第一方面所述的通式（ I )化合物或其异构体、 可药 用盐及溶剂化物， 用于制备抗细胞凋亡， 预防或治疗与细胞凋亡有关的 疾病或症状的药物的用途。 本发明还涉及第一方面所述的通式（ I )化合物或其异构体、 可药 用盐及溶剂化物， 用于制备保护心肌细胞和预防或治疗与心肌细胞凋亡 有关的疾病或症状的药物的用途。
本发明还涉及一种抗细胞凋亡、预防或治疗与细胞凋亡有关的疾病 或症状的方法， 所述方法包括向有此需要的受试者给予治疗有效量的本 发明第一方面所述通式（ I )化合物或其异构体， 可药用盐及溶剂化物。
本发明还涉及一种保护心肌细胞、 预防或治疗与心肌细胞凋亡有关 的疾病或症状的方法， 所述方法包括向有此需要的受试者给予治疗有效 量的本发明第一方面所述通式（ I )化合物或其异构体， 可药用盐及溶 剂化物。
本发明所述与细胞凋亡有关的疾病或症状包括但不限于心血管疾 病， 神经退行性疾病 (例如阿尔次海默病、 帕金森氏症等）， 多发性硬化 症， 病毒性感染、 艾滋病、 移植排斥反应、 电离辐射等。
本发明所述与心肌细胞凋亡有关的疾病或症状包括但不限于（ i )饥 饿性心肌萎缩， （ii )心肌炎， （iii )心力衰竭， （iv )原发性高血压引 起的心肌损伤， （V)急性心梗早期引起的心肌损伤， （vi ) 急性心梗再灌 注引起的心肌损伤， （vii)心脏移植引起的心肌细胞病变， （viii)发育不良 性心肌病； 或缺氧引起的心肌细胞凋亡， 或心血管系统硬化。
本领域技术人员应该认识到通式 I化合物存在手性中心。 当需要通 式 I化合物为单一的对映体时， 可以使用在所有可能的步骤中均处于单 一对映异构体形式的反应物来制备， 或者在单一对映异构体形式的试剂 或催化剂的存在下进行反应来制备， 或者通过常规方法拆分立体异构体 混合物来制备。 一些优选的方法包括使用微生物进行拆分， 拆分与手性 酸如扁桃酸、 樟脑磺酸、 酒石酸、 乳酸等任何可使用的酸形成的非对映 异构体的盐， 或者拆分与手性碱如番木鳖碱 (bracine), 金鸡纳树生物碱 及其衍生物等形成的非对映异构体的盐。 常用的方法见 Jaques 等人编 辑的" Enantiomers , Racemates and Resolution"(Wiley Interscience, 1981)。
本领域技术人员应该意识到，本发明化合物也可以以其可药用盐 (生 理学上可接受的盐)或溶剂化物的形式使用。通式 I化合物的生理学上可 接受的盐包括由药学上可接受的无机酸或有机酸或者无机碱或有机碱 形成的常规的盐以及季铵的酸加成盐。 合适的酸盐的更具体的例子包括 盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 磷酸、 硝酸、 高氯酸、 富马酸、 乙酸、 丙酸、 琥 珀酸、 羟基乙酸、 曱酸、 乳酸、 马来酸、 酒石酸、 柠檬酸、 朴酸、 丙二 酸、 羟基马来酸、 苯乙酸、 谷氨酸、 苯曱酸、 水杨酸、 富马酸、 曱苯磺 酸、 甲磺酸、萘 -2-碩酸、苯磺酸、羟基萘甲酸、 氢碘酸、苹果酸、 steroic、 鞣酸等的盐。 其它的酸， 如草酸， 虽然其本身并非药学上可接受的， 但 可以用于制备用作中间体的盐， 以获得本发明化合物及其可药用盐。 合 适的碱盐的更具体的例子包括钠、 锂、 钾、 镁、 铝、 钙、 锌、 N，N，-二 苄基乙二胺、 氯代普鲁卡因、 胆碱、 二乙醇胺、 乙二胺、 N-曱基葡糖胺 和普鲁卡因盐。 此后涉及到本发明的化合物时， 包括通式 I化合物及其 可药用盐和溶剂化物。
本发明还包括本发明化合物的前药， 该前药一经给药， 即通过代 谢过程进行化学转化， 之后变成具有活性的药物。 通常， 这类前药是本 发明化合物的功能性衍生物， 其在体内容易转化成所需的式 (I)的化合 物。例如， ^"Design Of Prodrugs" , H Bund Saard , Elsevier编辑， 1985 中描述了选择和制备适宜前药衍生物的常规方法。
本发明也包括本发明化合物的活性代谢物。
本发明的另一个方面涉及药物组合物， 其含有本发明化合物的消旋 体或旋光异构体和至少一种药学上可接受的载体， 其可用于体内治疗并 具有生物相容性。 所述药物组合物可以根据不同给药途径而制备成各种 形式。 本发明所提及的化合物也可以被制备成各种药学可接受的盐。
本发明的药物组合物包括有效剂量的本发明通式 I化合物或其可药 用盐或水合物和一种或多种适宜的可药用载体。 这里的药用载体包括但 不限于： 离子交换剂， 氧化铝， 硬脂酸铝， 卵磷脂， 血清蛋白如人血白 蛋白， 緩沖物质如磷酸盐， 甘油， 山梨酸， 山梨酸钾， 饱和植物脂肪酸 的部分甘油酯混合物， 水， 盐或电解质， 如硫酸鱼精蛋白， 磷酸氢二钠， 磷酸氢钾， 氯化钠， 锌盐， 胶态二氧化硅， 三硅酸镁， 聚乙烯吡咯烷酮， 纤维素物质， 聚乙二醇， 羧甲基紆维素钠， 聚丙烯酸酯， 蜂蜡， 羊毛脂。
本发明化合物的药物组合物可以以下面的任意方式施用： 口服， 喷 雾吸入， 直肠用药， 鼻腔用药， 颊部用药， 局部用药， 非肠道用药， 如 皮下、 静脉、 肌内、 腹膜内、 鞘内、 心室内、 胸骨内和颅内注射或输入， 或借助一种外植储器用药。 其中优选口服、 腹膜内或静脉内给药方式。
当口服用药时，本发明化合物可制成任意口服可接受的制剂形式，包 括但不限于片剂、 胶囊、 水溶液或水悬浮液。 其中， 片剂使用的载体一 般包括乳糖和玉米淀粉， 另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。 胶囊制剂使 用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。 水悬浮液制剂则通常是将活 性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。 如果需要， 以上口服制剂形 式中还可加入一些甜味剂、 芳香剂或着色剂。 当局部用药时， 特别是治疗局部外敷容易达到的患面或器官， 如眼 睛、 皮肤或下肠道神经性疾病时， 可根据不同的患面或器官将本发明化 合物制成不同的局部用药制剂形式， 具体说明如下：
当眼部局部施用时， 本发明化合物可配制成一种微粉化悬浮液或溶 液的制剂形式， 所使用栽体为等渗的一定 pH的无菌盐水， 其中可加入 也可不加防腐剂如氯化苄基烷醇盐。 对于眼用， 也可将化合物制成赍剂 形式如凡士林骨。
当皮肤局部施用时， 本发明化合物可制成适当的软骨、 洗剂或霜剂 制剂形式， 其中将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中。 软骨制剂 可使用的栽体包括但不限于： 矿物油， 液体凡士林， 白凡士林， 丙二醇， 聚氧化乙烯， 聚氧化丙烯， 乳化蜡和水； 洗剂或霜剂可使用的载体包括 但不限于： 矿物油， 脱水山梨糖醇单硬脂酸酯， 吐温 60， 十六烷酯蜡， 十六碳烯芳醇， 2-辛基十二烷醇， 苄醇和水。
本发明化合物还可以无菌注射制剂形式用药， 包括无菌注射水或油 悬浮液或无菌注射溶液。 其中， 可使用的载体和溶剂包括水、 林格氏溶 液和等渗氯化钠溶液。另外，灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质， 如单甘油酯或二甘油酯。
另外需要指出， 本发明化合物的使用剂量和使用方法取决于诸多因 素， 包括患者的年龄、 体重、 性别、 自然健康状况、 营养状况、 化合物 的活性强度、 服用时间、 代谢速率、 病症的严重程度以及诊治医师的主 观判断。 发明的有益效果
本发明提供了一种噻唑类化合物， 并证明其具有抗细胞凋亡和保护 细胞的作用， 为治疗细胞凋亡引起的疾病或症状， 特别是治疗心肌细胞 凋亡引起的疾病或症状提供了新的方法和途径。 具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述， 但是本领 域技术人员将会理解， 下列实施例仅用于说明本发明， 而不应枧为限 定本发明的范围。 实施例中未注明具体条件者， 按照常规奈件或制造 商建议的条件进行。 所用试剂或仪器未注明生产厂商者， 均为可以通 过市购获得的常规产品。 化合物的熔点由 RY-1 熔点仪测定， 温度计未较正。 质谱由 Micromass ZabSpec 高分辨率质谱仪（分辨率 1000 ) 测定。 JH NMR 由 JNM-ECA-400超导 NMR仪测定，工作频率 NMR 400MHz, 13C NMR 100MHz。
实 施 例
实 施 例 1 (2E)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基 ) -5苯基 -2- 噻唑基 1-2，2，2-三氯乙 -2-丙烯酰胺
Figure imgf000010_0001
将 1.10g肉桂酰胺与 1.20g三氯乙醛水合物加入 30ml甲苯中 110。C 回流 8小时， 冷却至室温析出大量黄色片状晶体 (2E)-3-(2-噻吩基) -N-(l- 羟基 -2， 2， 2-三氯乙基)丙烯酰胺 1.20g。 将其溶于 20ml无氷 THF中， 加入 DMF催化， 室温下滴入 SOa21.2ml, 加热至 60°C反应 2小时.蒸 干溶剂后得到黄色固体 (2E)-3-(2-噻吩基) -N-(l , 2， 2, 2_四氯乙基）丙烯 酰胺， 用冷石油醚洗至中性， 真空干燥备用。 另将 1.44g苯乙酸溶于 20mlTHF中， 室温滴入 2.50gSOCl2, 回流 2h , 旋干溶剂得黄色油状物。 将此黄色油状物溶于 10ml无水氯仿中， 冰浴下緩慢滴入 1.06g苯甲醚 与 2.66g三氯化铝的 20ml氯仿溶液中， 滴毕室温反应 2h。 反应液由橘 色变为深棕色。 緩慢滴入 20ml水， 反应液分层， 取下层用饱和食盐水 洗涤 3次， 每次 20ml。 将有机层旋干得 4，-甲氧基 -2-苯基苯乙酮。 将其 与 4.40gCuBr2在 10ml乙酸乙酯与 10ml氯仿的混合溶剂中回流 3h， 黑 色固体变成白色固体， 溶液由澄清变墨绿色， 反应完毕滤除固体， 将反 应液旋干， 再溶于 15ml异丙醇中， 加入硫脲 0.76g, 回流 1.5h, 析出大 量淡黄色固体， 为 4- ( 4-甲氧基苯基） -5-苯基 -2-氨基噻唑。 将其与上迷 (2E)-3-(2-噻吩基) -N-(l， 2, 2， 2-四氯乙基)丙烯酰胺一起加入 20mlDMF 中， 室温搅拌 24小时。将反应液倒入 40ml水中，用乙酸乙酯萃取 3次， 每次 20ml， 合并有机相后用饱和食盐水洗 3次， 每次 50n 。 在有机相 中直接加入 4g粗硅胶拌样， 用石油醚： 乙酸乙酯 =4:1洗脱， 得白色固 体 0.30g。 1H-NMR(400MHz,DMSO-i/6)63.74(s,3H);
56.84-6.86(dd,2H);56.94-6.98(m,lH); 67.26-7.46(m,
6H);57.55-7.61(t,lH);68.71-8.73(d,lH);
S9,03-9.05(d,lH)。 MS(TOF) 559.5 (M+)。
实 施 例 2 (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4， 5-二苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯 乙基 1-2-丙婦跌胺
Figure imgf000011_0001
Q tt (AOl)SM o(Hlt )90"6- 0"6§i(Hl'P)6 8-9,'8§KHT'iu)∑T,8-80-8e
•Zi9i(Hl'b)^ i-0 i9i(Hl'P)tl,Z.-irZ. i(Hl^)66'9-96,9§i(HT<P)l?6-9-06,9
C/'-OS ia'zHIMOO^iilAIM-H t AHZ'0^ ^^U '玄
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000012_0002
e(+IM)t £8 （J(XL)SIAi β(ΗΪ 'Ρ)ίΟ·6_66·8§ί (Ht 'Ρ) 9'8-S9'8§ i(HZ'PP)S8' _£8' lK'^ WZ^ST^ ί( HS )6 'L- £ L9 6'9_T6'9§ ί(Ηε
Figure imgf000012_0003
°SiuorO
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^==/ ~ -S ειοο o U^) t'l'S 'L9'( ' ^)L£'L-ZZ'L9'HVI)0VL-L6'99 i(HT'P)969-Z6,9§(9/'-OSIA[aizHIA[00t')HI\[M-Hl °3θΓΟ
UtSLO/€lOZSLJ/∑Jd 686991/C10Z ΟΛ\ (M+)。
实 施 例 5 (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-氯苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基 1-2-丙烯酰胺
Figure imgf000013_0001
采用实施例 1 的方法， 将其中的苯乙酸改为乙酸， 苯曱醚改为 4- 氟苯， 得白色固体 0.12g。
,H-NMR(400MHz,DMSO-i 6)66.91-6.95(d,lH);
56.96-7.00(d,lH);d7.30(s,lH);67.40-7.48(m,5H);
87.55-7.60(m,3H);67.87-7.89(m,2H);08.73-8.75(d,lH);d9.03-9.05(d,lH)o MS(TOF) 488.1 (M+)。
实 施 例 6 (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-苯基 -2- 唑基 )-2，2，2-三氯乙 基] -2-丙烯酰胺
Figure imgf000013_0002
釆用实施例 1 的方法， 将其中的苯乙酸改为乙酸， 苯甲醚改为苯， 得白色固体 0.22g。
'H- MRC^OMHz^MSO-^Se^l-e^SCd H);
66.96-7.00(t,lH);67.22(s,lH);67.28-7.30(t,lH); δ7.38-7.43( m， 5Η ); δ7.55-7.59(πι,3Η); 67.85-7.87(dd,2H); 68.67-8.69
( d, 1H ) ;69.01-9.03(d, 1H)。 MS(TOF) 453.6 (M+)0
实 施 例 7 (2E)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基） -5-环戊基甲 基 -2-噻唑基] -2，2 ,2-三氯乙基} -2-丙烯酰胺
Figure imgf000014_0001
采用实施例 1 的方法，将其中的苯乙酸改为 3-环戊基丙酸，得黄色 固体 0.19ge
1H-NMR(400MHz,DMSO-i 6) 60.81-0.88(t,3H);
51.04-1.07(t, 1H); 51.30-1.36(m, 2Η);δ1.50-1.56(ιτι， 2H); 62.70-2.74(t,2H); 63.16-3.17(d,lH); 53.78(s,3H); 66.86-6.90(t,lH);
66.92-6.96(d,lH);
66.97-6.99(d,lH);07.41-7.48(m,5H);67.53-7.60(m,3H);68.39-8.42(d,lH);6 8.92-8.94(d，lH)。 MS(TOF) 465.5 (M+)。
实 施 例 8 (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基卜 2-丙烯酰胺盐酸盐
Figure imgf000014_0002
实施例 6的化合物 0.15g, 加入 2ml盐酸乙酸乙酯溶液搅拌 5h， 析 出白色固体， 过滤， 得到目标化合物 0.12g。 元素分析结果：
C: 49.05%, H: 3.46%, N: 8.59%。
实 施 例 9 化合物的抗细胞凋亡作用和保护心肌细胞作用的评价 1、 动物与试剂
新生 24 h内的 Wistar大鼠， 雌雄不拘（ 军事医学科学院实验动物 中心提供， 动物合格证号为 SCXK- (军） 2007-004 )。 高糖 DMEM培养 基、 胰蛋白酶、 II型胶原酶购自 Gibco 公司； 新生胎牛血清 （FBS ) 购自北京元亨圣马生物技术研究所； 5-溴 -2-脱氧尿嘧啶 （5-Brdu)、 衣霉 素（Tunicamycin , TM)购自 Sigma 公司； 唑蓝 （MTT)、 二甲亚现 (DMSO) 为 Amresco产品； 其余化学试剂均为国产分析纯。 Universal Microplate ReaderEL800型酶标仪为美国 BIO-TEK公司产品。
2、 心肌细胞原代培养
取 24h内新生 Wistar乳鼠， 经碘酒、 酒精消毒腹部， 无菌操作取 出心尖部分组织， 剪碎成 lmm3大小。加入适量的 0.125% 胰酶、 0.1% 胶原酶 II (终浓度分别为 0.1%和 0.02% ) , 37°C水浴机械振荡， 每次 lOmin , 反复消化直至组织块完全消化为止。 制备心肌细胞悬液接种到 75cm2培养瓶。 差速贴壁法去除非心肌细胞， 用含 10% FBS的 DMEM 培养液调整细胞密度，按 104个 /ml接种到 96孔板，置于 37。C、5% C02 孵箱进行原代培养。 24h后换半液， 再补加含 0.1% 5-Brdu ( 5-溴 -2-脱 氧尿嘧啶）的培养基抑制非心肌细胞生长。 原代培养每 48h换一次培养 液。
3、 细胞存活率 （MTT)测定
化合物毒性测定： 本发明化合物用 DMSO配制， DMSO为溶剂。 心肌细胞培养 4天后，分别给予不同浓度的化合物处理（ 0 μΜ ,0.3 μΜ, 1 μΜ,3 μΜ,ΙΟ μΜ,30 μΜ,ΙΟΟ μΜ,300 μΜ ) , 置于 37°C、 5% C02孵箱培 养 48h , 而后每孔加入 ΙΟμΙ ΜΤΤ ( 5mg/ml ) 继续孵育 4h， 最后每孔加 入 ΙΟΟμΙ^ 10%的 SDS , 37 V 5 % C02下孵育 24 h , 使 MTT结晶完全 溶解。 酶联免疫检测仪 550nm 波长测定每孔吸光度。 按公式： 抑制率
( % ) = (给药组 OD值 /溶剂对照孔平均 OD值） χ100°/。。 其中溶剂对 照组为 DMSO。 以化合物浓度的对数为横坐标，化合物抑制率平均值为 纵坐标绘制剂量效应曲线，并用 Origin分析软件求半数细胞抑制剂量值
( IC50 ) 。 结果以 ± SD表示， 利用该法可初步确定具有细胞毒性的化 合物浓度。
4、 保护由 Tm诱导的心肌细胞凋亡活性 化合物活性测定： 心肌细胞培养 4天后， 分别给予不同浓度的化合 物（0.3μΜ、 1μΜ、 3μΜ )处理 30min后， 加入 TM终浓度为 0.5 g/ml, 同时设置终浓度为 0.5 g/ml的 TM组和溶剂对照组（DMSO ) 。 置于' 37。C、 5% C02孵箱培养 48h， 而后每孔加入 ΙΟμΙΜΤΤ ( 5mg/ml )继续 孵育 4h，最后每孔加入 ΙΟΟμΙ^ 10%的 SDS, 37 *C 5 % C02下孵育 24 h , 使 MTT结晶完全溶解。 酶联免疫检测仪 550nm波长测定每孔吸光度。 其中 TM和本发明化合物用 DMSO配制。 按公式： 细胞存活率（％ ) = 给药组 OD值 /溶剂对照孔平均 OD值 χ100%。 结果以 表示。 进而 用软件计算得到 EC50值 （表 1 ) ， 从而测定本发明化合物对 TM诱导 心肌细胞凋亡的保护作用。 实施例化合物保护心肌细胞活性结果如下： 表 1 对 TM诱导心肌的细胞凋亡活性的保护作用
Figure imgf000016_0001
实验结果表明， 实施例 4和 5化合物对 Tm诱导的心肌细胞凋亡有 很好的保护作用。 尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述， 本领域技术人 员将会理解。 根据已经公开的所有教导， 可以对那些细节进行各种修 改和替换， 这些改变均在本发明的保护范围之内。 本发明的全部范围 由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims

权 利 要 求
1. 通式（I )化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂化物，
Figure imgf000017_0001
( I )
其中
1^代表氢、 烷基、 取代烷基、 环烷基、 环烷基烷基、 苯基、 取代苯 基、 苯基烷基、 取代苯基烷基；
代表苯基、 取代苯基。
2. 权利要求 1的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂化物， 其中
！^代表氢、 曱基、 丙基、 己基、 环戊基曱基、 环己基甲基、 环戊基 乙基、 环己基乙基、 苯基、 2-甲氧基苯基、 4-曱氧基苯基；
R2代表苯基、 4-曱氧基苯基、 2-甲氧基苯基、 2-氯苯基、 4-氯苯基、 2，4-二氯苯基、. 2，4-二氟苯基。
3. 权利要求 2的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂化物， 其中 1^代表氢、 己基、 环戊基曱基、 苯基；
R2代表笨基、 4-甲氧基苯基、 2，4-二氟苯基、 4-氯苯基。
4.权利要求 3的化合物， 或其异构体、 可药用盐及溶剂化物， 其选 自以下化合物：
( 1 ) (2E)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基） -5苯基 -2-噻唑 基] -2，2，2-三氯乙基}-2-丙烯酰胺；
( 2 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-【l-(4, 5-二笨基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基】 -2-丙烯酰胺；
( 3 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-曱氧基苯基 -2-噻唑基 )-2,2,2-三氯乙 基卜 2-丙烯酰胺；
( 4 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(2， 4-二氟苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙 基】 -2-丙烯酰胺；
( 5 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-氯苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙基] -2- 丙烯酰胺；
( 6 ) (2E)-3-(2-苯基) -N-[l-(4-苯基 -2-噻唑基 )-2，2，2-三氯乙基卜2-丙 烯酰胺；
( 7 ) (2E)-3-(2-苯基) -Ν-{1-[ 4- ( 4-甲氧基苯基) -5-环戊基甲基 -2- 噻唑基】-2，2，2-三氯乙基 }-2-丙烯酰胺。
5. 药物组合物， 其包含权利要求 1 - 4任一项所述化合物或其异构 体、可药用盐及溶剂化物， 以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
6. 权利要求 1-4任一项所述化合物或其异构体、可药用盐及溶剂化 物用于制备抗细胞凋亡、预防或治疗与细胞凋亡有关的疾病或症状的药 物的用途。
7. 权利要求 1-4任一项所述化合物或其异构体、可药用盐及溶剂化 物用于制备保护心肌细胞、预防或治疗与心肌细胞凋亡有关的疾病或症 状的药物的用途。
8. 一种抗细胞凋亡、 预防或治疗与细胞凋亡有关的疾病或症状的 方法， 所述方法包括向有此需要的受试者给予治疗有效量的权利要求
1-4任一项所述化合物或其异构体、 可药用盐及溶剂化物。
9. 一种保护心肌细胞、预防或治疗与心肌细胞凋亡有关的疾病或症 状的方法， 所述方法包括向有此需要的受试者给予治疗有效量的权利要 求 1-4任一项所述化合物或其异构体、 可药用盐及溶剂化物。
10. 权利要求 6的用途或权利要求 8的方法， 其中所述与细胞凋亡 有关的疾病或症状包括但不限于心血管疾病，神经退行性疾病 (例如阿尔 次海默病、 帕金森氏症等）， 多发性硬化症， 病毒性感染、 艾滋病、 移植 排斥反应、 电离辐射。
11. 权利要求 7的用途或权利要求 9的方法， 其中所述与心肌细胞 凋亡有关的疾病或症状包括但不限于 （i )饥饿性心肌萎缩， （ii ) 心肌 炎， （iii ) 心力衰竭， （iv )原发性高血压引起的心肌损伤， （V)急性心 梗早期引起的心肌损伤， （vi ) 急性心梗再灌注引起的心肌损伤， （vii) 心脏移植引起的心肌细胞病变， （viii)发育不良性心肌病； 或缺氧引起的 心肌细胞凋亡， 或心血管系统硬化。
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