WO2013089429A1 - 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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WO2013089429A1
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water extract
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mushroom
awi
active ingredient
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PCT/KR2012/010792
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류성호
김재윤
천우재
이형지
이태훈
은종봉
김강하
심상갑
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경상북도
포항공과대학교 산학협력단
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    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics

Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical composition and a dietary supplement composition comprising a water extract of Awi mushroom, which can be used for the purpose of preventing or treating hyperlipidemia.
  • Hyperlipidemia refers to a condition in which fat is high in the blood. In general, it is called hyperlipidemia when total cholesterol exceeds 240mg / dl or triglyceride more than 200mg / dl. Hyperlipidemia is known to be a major cause of high blood pressure, myocardial infarction and stroke due to the blockage of cholesterol and blocking blood circulation. The number of hyperlipidemia patients in Korea is also steadily increasing, and the number of hyperlipidemia patients is increasing rapidly in the world, which is expected to lead to more hyperlipidemia patients. Many reports on the treatment, prevention and prescription of hyperlipidemia have been presented.
  • the cause of hyperlipidemia is a metabolic disorder caused by genetic factors, but it is also caused by the accumulation of cholesterol in the blood (Bray GA, Popkin BM .: Dietary fat intake) in other causes, such as obesity triggered by excessive calories and lack of exercise. dose affect obesity.Am. J Clin.Nutr 68: 1157-1173 (1998). In particular, the increased intake of high fat diets due to westernized diets is considered the main reason for hyperlipidemia.
  • candidate agonists such as cholesterol absorption inhibitors for the prevention or treatment of hyperlipidemia is being actively conducted worldwide, and accordingly, interest in the antihyperlipidemic efficacy evaluation model is increasing.
  • statins drugs for treating hyperlipidemia are widely used in statins.
  • This class of drugs is an HMG-CoA reductase inhibitor that inhibits cholesterol synthesis and lowers blood LDL-cholesterol.
  • ezetimibe, niacin, and fibrate are mainly used, but there are fears that side effects such as muscle pain, constipation or digestive disorders, and liver dysfunction may occur rarely when the drug is administered.
  • the inventors of the present invention have repeatedly studied the natural substance having almost no side effects in vivo and inhibiting cholesterol absorption in the body and improving hyperlipidemia.
  • Pleurotus eryngii var.ferulea Pf.
  • a strain of Pleurotus eryngii (Fleurotus eryngii var. It grows wild in the Awi tree of Xinjiang province, which is the dry area of China, and its growth temperature is 8 ⁇ 20 °C, which is suitable for spring and autumn cultivation in Korea.
  • Awi mushrooms which are native to China and Central Asia, are known as medicinal plants that can relieve clogging, relieve coughs and inflammation, and are effective against gastrointestinal diseases.They release toxins, cough, relieve inflammation, and obstetrics and gynecology. It is a highly functional mushroom that has been shown to be effective against systemic diseases.
  • the inventors of the present invention as a natural substance that can replace a drug such as statin, while studying the inhibitor for inhibiting the reabsorption of cholesterol and triglycerides or reducing blood cholesterol in the small intestine, the extract of Awi mushroom In particular, it was confirmed that the water extract of Awi mushroom effectively inhibits the absorption of cholesterol and triglycerides in the blood and completed the present invention.
  • the present invention is to provide a composition
  • a composition comprising a water for inhibiting the absorption of cholesterol and triglycerides in the body almost without in vivo, and a prophylactic or therapeutic medical composition and a health functional food containing the same as an active ingredient.
  • the above object of the present invention was achieved by obtaining a water extract of Awi mushroom and verifying and evaluating the effect of improving hyperlipidemia as a test material.
  • composition comprising the water extract of Awi mushroom of the present invention as an active ingredient has an excellent effect that can be usefully used for the prevention or treatment of hyperlipidemia by inhibiting the absorption of cholesterol and triglycerides in the body.
  • Figure 2 is a graph showing a comparison of CEL activity according to the concentration of Awi mushroom water extract according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 3 is a graph showing a comparison of TGL activity according to the concentration of Awi mushroom water extract according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 4 is a graph showing a comparison of the amount of cholesterol absorption from the digestive tract of the water extract of Awi mushrooms according to an embodiment of the present invention and the conventional fat inhibitor orlistat from the digestive tract.
  • the water extract of Awi mushroom may be prepared according to the conventional method for producing a plant extract. Most preferably, the above-mentioned mushrooms are pulverized after cold and dry at 15 ° C., and then the residues are removed, and 0.1 to 20 g of the crushed powder is added per 100 mL of water, and most preferably 1 to 5 g of pulverized powder per 100 mL of the extraction solvent. Extract by adding. Hot air drying of 40 degreeC or more was not preferable.
  • the content of the crushed awi mushroom is too small compared to the extraction solvent, the cholesterol absorption effect of the awi mushroom is not sufficient, and if the amount is too large compared to the amount of the extraction solvent, the effect of increasing the content is not large, but the production is not great. As the cost increases, it is not preferable in terms of productivity.
  • Extraction conditions of the above-mentioned mushrooms is preferably 20 to 24 hours at a temperature of 20 to 60 °C, 12 to 36 hours, most preferably at a temperature of 30 to 40 °C after mixing the mushroom with water as the extraction solvent Should be extracted.
  • the extraction is performed at a low temperature of 20 ° C. or less, a long time is required for the extraction of the effective extraction component, and when the extraction is performed at a high temperature of 60 ° C. or more, the activity is poor, which is not preferable.
  • the water extract obtained by hot water extraction for 15 minutes or more at 100 °C could not be used.
  • the water extract of Awi mushrooms extracted in the above manner was filtered through a filter cloth, etc., the filtrate was centrifuged to remove the precipitate, and then concentrated or concentrated under reduced pressure, and then preferably used by freeze drying.
  • the content of the water extract of Awi mushroom as an active ingredient in the treatment or prevention composition for hyperlipidemia of the above-described embodiment is preferably 0.01 to 30% by weight.
  • the content of the water extract of Awi mushroom as an active ingredient is less than 0.01% by weight, the effect of inhibiting cholesterol absorption in the body is insignificant, and when it exceeds 30% by weight, the effect of increasing the inhibitory activity by increasing the content is not economical.
  • the content of the water extract of Awi mushroom in the composition is 0.001 to 50% by weight, most preferably 0.1 to 30% by weight.
  • the present invention provides a pharmaceutical for the prevention or treatment of hyperlipidemia, comprising the water extract of Awi mushroom contained in the composition as an active ingredient.
  • Pharmaceutical products containing such a water extract of the mushroom as an active ingredient may further comprise a suitable carrier, excipients and diluents commonly used in the preparation thereof.
  • Carriers, excipients, and diluents that may be included in a medicament comprising the water extract of Awi mushroom of the present invention as an active ingredient include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate And gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
  • Medicines containing the water extract of Awi mushroom of the present invention as an active ingredient may be used in oral formulations such as powders, granules, tablets, suspensions, emulsions, syrups, etc. according to conventional methods.
  • the oral formulation is meant to include a solid preparation and a liquid preparation for oral administration
  • the solid preparation for oral administration may include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., such solid preparation is the extract
  • At least one excipient for example, may be prepared by mixing starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin and the like.
  • lubricants such as magnesium stearate, talc can also be used.
  • Liquid preparations for oral use include suspensions, solvents, emulsions, and serums.
  • simple diluents such as water and liquid paraffin
  • various excipients for example, wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, may be included. have.
  • Preferred dosages of the pharmaceutical compositions containing the water extracts of the above-mentioned mushrooms of the present invention vary depending on the condition and body weight, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art.
  • the drug containing the water extract of Awi mushroom of the present invention as an active ingredient is 0.0001 to 100 mg / kg per adult day (60 kg body weight) based on the amount of water extract of Awi mushroom, in order to be more effective 0.01 to Administration at 10 mg / kg is preferred.
  • the number of administrations may be administered once per day or may be divided several times.
  • the dosage and frequency of administration are not intended to limit the scope of the invention in any aspect.
  • a health functional food for improving hyperlipidemia comprising water extract of Awi mushroom as an active ingredient.
  • the term "health functional food” means a natural product or a processed product containing one or more nutrients, and preferably means a state in which it can be directly eaten through a certain process.
  • Examples of health functional foods to which the water extract of Awi mushroom of the present invention can be added include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and the like.
  • the food in the present invention includes special nutritional products (e.g., prepared oils, infants, baby food, etc.), processed meat products, fish products, tofu, jelly, noodles (e.g. ramen, noodles, etc.), health supplements, seasoned foods ( For example, soy sauce, miso, red pepper paste, mixed soy sauce), sauces, confectionery (e.g. snacks), dairy products (e.g.
  • fermented milk, cheese, etc. other processed foods
  • kimchi, pickles various kimchi, pickles, etc.
  • beverages examples include, but are not limited to, fruits, vegetable drinks, soy milk, fermented beverages, and the like, and natural seasonings (eg, ramen soup).
  • the food, beverage or food additives may be prepared by a conventional manufacturing method.
  • the functional food is a biological defense rhythm control, disease prevention and the like having a food group or food composition that has added value to the food by using physical, biochemical, biotechnological techniques, etc. to function and express the function of the food for a specific purpose. It means a food that is designed and processed to fully express the gymnastics function on recovery.
  • the functional food may include food acceptable food additives, and may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of functional foods.
  • the beverage is a generic term for drinking to quench thirst or to enjoy a taste and is intended to include a functional beverage.
  • the drink contains water extract of the above-mentioned mushroom as an active ingredient in the ratio indicated as an active ingredient, and there are no special limitations to the other ingredients, and it may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks.
  • natural carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose and other disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and Sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.
  • natural flavoring agents such as, tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used.
  • the ratio of the natural carbohydrate may generally be about 1 to 20 g, preferably 5 to 12 g per 100 mL of the composition of the present invention, in addition to the composition of the present invention for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks, vegetable drinks It may further contain pulp.
  • the health functional food of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese and chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid And salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, water, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like.
  • These components can be used independently or in combination.
  • the proportion of such additives is not so critical, but may be selected in the range of 0 to 20 parts by weight per 100 parts by weight of the water extract of the above mushroom.
  • the functional beverage refers to a biological defense rhythm control, disease prevention, and the like having a beverage group or a beverage composition which has added value to the beverage by using physical, biochemical, or biotechnological techniques to act and express the function of the beverage to a specific purpose.
  • the functional beverage is not particularly limited in addition to the water extract of the awi mushroom of the present invention as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks.
  • natural carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose and other disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and xylitol Sugar alcohols such as sorbitol and erythritol.
  • natural flavoring agents such as, tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used.
  • the proportion of natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably 5-12 g per 100 mL of the composition of the present invention.
  • the amount of the extract may include 0.01 to 15% by weight of the total food weight
  • the beverage composition is 0.02 to 5 g, preferably based on 100 mL Preferably it may be included in a ratio of 0.3 to 1g.
  • the present invention provides a method for producing a water extract of the above mushroom according to another embodiment.
  • Method for producing a water extract of agaric mushroom comprises the steps of preparing a powder of agaric mushroom; Mixing the above mushroom powder with water; And extracting the mixture at a temperature of 20 to 60 ° C. for 12 to 36 hours.
  • Pleurotus eryngii var.ferulea Is dried and coarsely powdered, put into a gauze bag, 50 g of water is mixed with 1 g of powder and an extraction solvent, and the mixture is dried at 37 ° C. for 24 hours. The supernatant of the shaker was centrifuged at 2500 rpm for 10 minutes, and the filtered supernatant was collected and used as a test material.
  • Pancreatic cholesterol esterase is responsible for separating acyl chain by non-specific recognition of substrates with acyl chain.
  • posin pancreatic cholesterol esterase prepared from Sigma Chemical was used as an enzyme.
  • Pancreatic cholesterol esterases were used to decompose chromo-genic substrates (p-nirophenylbutyrate).
  • the inhibitory effect of enzyme was measured by the change in absorbance of 405nm using a microplate reader, and calculated based on the 405nm absorbance of the extract untreated group and expressed as%.
  • pancreatic cholesterol esterase activity was measured according to the concentration of the water extract of Awi mushrooms of Examples.
  • the amount of Awi mushroom water extract treated in the pancreatic cholesterol esterase is 1/5 times 1/10 times and 1/50 times dilution based on the initial awi mushroom powder concentration. Cholesterol esterase activity inhibitory effect was compared, and the results are shown in comparison with FIG.
  • Pancreatic lipase is responsible for separating acyl chain by non-specific recognition of substrates with acyl chain.
  • EXAMPLES In order to measure pancreatic lipase activity according to the concentration of Awi mushroom water extract, pocin pancreatic lipase prepared from Sigma Chemical was used as an enzyme.
  • Pancreatic lipase decomposed chromo-genic substrates p-nirophenylbutyrate
  • the inhibitory effect of enzyme was measured by the change in absorbance of 405nm using a microplate reader, and calculated based on the 405nm absorbance of the extract untreated group and expressed as%.
  • control mice (Balb / c male, 8 weeks old, weight ⁇ 25g) to 400 ⁇ g (20mg / kg) Orlistat of cholesterol absorption inhibitory effect, experimental mice (Balb / c male, 8 weeks old, weight ⁇ 25g) ), 20 mL of the Awi mushroom water extract (10 mg / mL) of the example was concentrated and 0.1 mL was orally administered.
  • the blood of the mice was collected, the plasma was obtained by centrifugation at 14000 rpm for 10 minutes at 4 ° C, and the dose was measured using a liquid scintillator (Beta counter, Beckman LS1801).
  • the control group was administered with no cholesterol absorption inhibitors.
  • the dose of the control group was set to 1, and the fat absorption amount was determined as a relative value when the dose of each experimental group was divided by the dose of the control group.
  • the water extract of Awi mushrooms according to the present invention showed a significant fat absorption inhibitory effect like the olistat used as a control.
  • the results are shown in comparison with FIG. 4.
  • the control is the blood sampling result of the mice not administered with the cholesterol absorption inhibitor.
  • the above ingredients were mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.
  • each component is added to the purified water to dissolve, the lemon flavor is added appropriately, the above components are mixed, purified water is added, the whole is adjusted to 100 mL by adding purified water, and then filled into a brown bottle and sterilized. To prepare a liquid formulation.
  • Vitamin B6 0.5 mg
  • composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixtures is mixed with a component suitable for a health food in a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional health food manufacturing method.
  • the granules may be prepared and used for preparing a health food composition according to a conventional method.

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Abstract

본 발명은 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이를 포함하는 건강 기능성 식품에 관한 것으로, 아위버섯의 물 추출물은 콜레스테롤 에스터레이즈의 활성 및 중성지방 흡수 저해능이 에탄올 추출물에 비하여 탁월하게 뛰어난 효과가 있다.

Description

아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증 예방 또는 치료용 조성물
본 발명은 고지혈증 예방 또는 치료를 목적으로 사용될 수 있는 아위버섯의 물 추출물을 포함하는 약학적 조성물 및 건강 보조식품 조성물에 관한 것이다.
고지혈증은 혈액 속에 지방성분이 높은 상태를 말한다. 일반적으로 총 콜레스테롤이 240mg/dl을 넘거나 중성지방이 200mg/dl이상일 때 고지혈증이라 한다. 고지혈증은 콜레스테롤 덩어리가 혈관을 막고 혈액순환을 저해해 고혈압, 심근경색, 뇌졸증을 유발하는 주요 원인으로 알려져 있다. 우리나라의 고지혈증 환자수 또한 꾸준히 증가하고 있으며, 세계적으로 고지혈증 환자의 증가가 급증하고 있어 더 많은 고지혈증 환자의 증가를 초래할 것으로 예상된다. 이에 고지혈증의 치료 및 예방법, 처방법에 대한 많은 보고들이 제시되고 있다.
고지혈증의 발생 원인은 유전적인 요인으로 인한 대사장애도 있지만 과도한 열량의 식사와 운동 부족으로 촉발되는 비만과 같은 다른 원인에서도 혈액 내 콜로스테롤이 축적되어 발생한다(Bray GA, Popkin BM.: Dietary fat intake dose affect obesity. Am. J Clin. Nutr 68 : 1157-1173 (1998)). 특히 서구화된 식단으로 인한 고지방 식이의 섭취 증가가 고지혈증의 주된 이유로 여겨지고 있다. 현재 전세계적으로 고지혈증의 예방 또는 치료를 위해 콜레스테롤 흡수 저해제 등 후보 효능물질에 대한 개발이 활발하게 이루어지고 있으며, 그에 따라 항고지혈증 효능평가모델에 대한 관심도 증대되고 있다.
현재 고지혈증 치료약물은 스타틴(statin)계열의 약물이 널리 사용되어 지고 있다. 이 계열의 약은 HMG-CoA환원효소 억제제로 콜레스테롤 합성 억제 및 혈중 LDL-콜레스테롤를 저하시키는 효과가 있다. 이 외에도 에제티미브(ezetimibe), 니아신(niacin) 그리고 피브레이트(bibrate)제제등이 주로 사용되어 지고 있으나 약물 투여시 드물게 근육통, 변비 내지는 소화장애 및 간기능 장애가 발생하는 부작용이 생길 우려가 있다.
한편, 버섯류는 전 세계적으로 약 1만 여종이 보고되어 있으며 식용 및 약용가치가 높아 미생물 유용자원으로의 확보를 위해, 유럽, 미국, 일본 등의 선진국에서 많은 연구가 이루어지고 있다. 특히 버섯류가 생산하는 생리활성물질은 부작용이 적어 독성면에서 안전하고 인체 내 면역계의 기능 조절, 항암효과, 신진대사 조절 등의 다양한 기능을 가지고 있다는 많은 연구 결과가 보고되고 있다.
본 발명의 발명자들은 생체 내 부작용이 거의 나타나지 않고, 체내 콜레스테롤 흡수를 저해하여 고지혈증 개선 효과를 가지는 천연물질에 대해 연구를 거듭하여 본 발명을 착수하였다.
상기 아위버섯(Pleurotus eryngii var. ferulea (Pf.),새송이의 변종이다. 영어명칭은 페룰라 오이스터 머쉬룸(Ferula Oyster Mushroom)으로, 해석하면 아위나무 느타리버섯이다. 중국에서는 백령측이(白靈側耳)라고 부른다. 중국의 건조지대인 신강지방의 아위 나무에서 야생하는 것으로 생장온도는 8~20도씨의 중온으로 우리나라의 봄, 가을 재배에 적합하다.
중국과 중앙아시아에서 자생하는 아위버섯은 막힌데를 풀어주고 기침과 염증을 해소시키고 위장 질환에 효험이 있는 약용식물로 알려져 있고 한의학 서적 등에 인체의 독소를 배출하고 기침을 멎게 하며 염증을 해소시키고 산부인과 계통 질환에도 효과가 있다고 소개된 고기능성 버섯이다.
본 발명의 발명자들은 스타틴(statin)과 같은 약물을 대체할 만한 천연물질로, 소장에서 콜레스테롤 및 중성지방의 재흡수를 억제 하거나 혈중 콜레스테롤을 감소시키는 저해제에 대한 연구를 거듭 하던 중, 아위버섯의 추출물, 특히 아위버섯의 물 추출물이 혈중 콜레스테롤 및 중성지방의 흡수를 효과적으로 저해하는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 생체 내 부작용이 거의 나타나지 않고, 체내 콜레스테롤 및 중성지방 흡수를 저해용 물을 포함하는 조성물 및 이를 유효성분으로 함유하는 예방 또는 치료용 의학적 조성물 및 건강 기능성 식품을 제공하는데 있다.
본 발명의 상기 목적은 아위버섯의 물 추출물을 수득하고 이를 공시 재료로 하여 고지혈증 개선 효과를 검증하고 이를 평가함으로써 달성하였다.
본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 유효 성분으로 포함하는 조성물은 체내 콜레스테롤 및 중성지방 흡수를 저해함으로써 고지혈증의 예방 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있는 뛰어난 효과가 있다.
도1 은 본 발명의 실시예와 비교예의 아위버섯의 추출물의 CEL 활성 저해 효능을 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 아위버섯 물 추추출물의 농도에 따른 CEL 활성을 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 아위버섯 물 추출물의 농도에 따른 TGL 활성을 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 아위버섯의 물 추출물과 종래의 지방저해제인 orlistat의 소화관으로부터 혈액으로의 콜레스테롤 흡수량을 비교하여 나타낸 그래프이다.
아위버섯의 물 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다. 가장 바람직하게는 상기 아위버섯을 15℃의 냉온 건조한 후에 분쇄한 다음 잔사를 제거하고, 물 100mL 당 상기 분쇄물 0.1 내지 20g을 첨가하여, 가장 바람직하게는 추출 용매 100 mL 당 분쇄물 1 내지 5 g을 첨가하여 추출한다. 40℃이상의 열풍 건조는 바람직하지 않았다. 또, 아위버섯 분쇄물의 함량이 추출 용매 대비하여 지나치게 적은 경우 아위버섯의 콜레스테롤 흡수 효과가 충분히 이루어 지지 않아 바람직하지 않고, 추출 용매의 양 대비 지나치게 많은 경우 함량 증가에 따른 효과의 증대는 크지 않은 반면 생산 비용이 증가하므로 생산성 측면에서 바람직하지 않다.
아위버섯의 추출 조건은 바람직하게 아위버섯을 추출 용매인 물과 혼합한 후, 20 내지 60℃의 온도에서, 12 내지 36 시간 동안, 가장 바람직하게는 30 내지 40℃의 온도에서, 20 내지 24 시간 동안 추출하여야 한다.
20℃이하의 낮은 온도 조건에서 추출하는 경우, 유효 추출 성분의 추출을 위해서 긴 시간이 요구되며, 60℃이상의 고온 조건에서 추출하는 경우, 활성이 떨어져 바람직하지 않았다. 특히, 100℃에서 15분이상 열 수추출한 수추출물도 활성이 없으므로 사용할 수 없었다.
그리고, 추출 시간을 12시간 이하 짧게 하는 경우, 추출되는 유효 성분의 농도가 낮고, 36시간 이상 긴 시간 동안 추출하는 경우, 추출 시간의 증가에 따른 추출 유효 성분의 농도 증가가 미미하여 생산성 측면에서 바람직하지 않았다.
그리고, 상기와 같은 방법으로 추출한 아위버섯의 물 추출액은 여과포 등으로 여과한 후, 여액을 원심분리시켜 침전물을 제거시킨 다음, 감압 농축 또는 농축 한 후, 동결 건조하여 사용하는 것이 바람직하였다.
한편, 상술한 구현예의 고지혈증의 치료 또는 예방 조성물 중 유효성분인 아위버섯의 물 추출물의 함량은 바람직하게는 0.01 내지 30 중량%이다. 유효 성분인 아위버섯의 물 추출물의 함량이 0.01 중량% 미만인 경우에는, 체내 콜레스테롤 흡수 저해 효과가 미미하며, 30 중량%를 초과하는 경우에는 함량 증가에 따른 저해 활성 증가 효과가 미미하여 경제적이지 못하다. 바람직하기는 조성물 내에 아위버섯의 물 추출물의 함량은 0.001 내지 50 중량%, 가장 바람직하게는 0.1 내지 30 중량%이었다.
본 발명은 구현예에 따라 상기 조성물에 포함된 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 고지혈증의 예방 또는 치료용 의약품을 제공한다. 이와 같은 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약품은 그 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약품에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약품은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 현탁제, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형물로 사용될 수 있다.
상기 경구형 제형물은 경구 투여를 위한 고형제제와 액상제제를 포함하는 의미이며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다.
또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럼제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 함유하는 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 의약품은 아위버섯의 물 추출물의 양을 기준으로 1일 성인기준(60kg체중) 0.0001 내지 100mg/kg으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 내지 10mg/kg으로 투여하는 것이 바람직하다. 투여횟수는 1일에 1회 투여할 수 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량과 투여횟수는 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 다른 구현 예에 따라, 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 고지혈증의 개선용 건강 기능성 식품을 제공한다. 본 명세서에서 ‘건강 기능성 식품’이라 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미한다.
본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 첨가할 수 있는 건강 기능성 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
본 명세서에서, 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 명세서에서, 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100mL 당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 5 내지 12g일 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강 기능성 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 물, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 아위버섯의 물 추출물 100 중량부 당 0 내지 20 중량부 범위에서 선택될 수 있다.
본 명세서에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.
상기 기능성음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100mL 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 5 내지 12 g이다.
또한, 고지혈증의 개선 또는 예방을 목적으로 하는 건강 기능성 식품 에 있어서, 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 mL를 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 포함할 수 있다.
한편, 본 발명은 또 다른 구현예에 따라 상기와 같은 아위버섯의 물 추출물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 따른 아위버섯의 물 추출물의 제조 방법은 아위버섯의 분말을 준비하는 단계; 상기 아위버섯 분말을 물과 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 20 내지 60℃ 의 온도에서, 12 내지 36 시간 동안 추출하는 단계를 포함한다.
이하, 본 발명의 구체적인 실시예를 통하여 발명의 구성 및 효과를 보다 상세히 설명하기로 한다. 그러나 하기의 실시예는 발명을 보다 명확하게 이해시키기 위한 것일 뿐이며, 발명의 권리범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
다만, 본 발명을 벗어난 예컨대 아위버섯의 분말은 본 발명자들이 집중하여 반복 실험한 결과, 콜레스테롤 에스터레이즈 활성 저해 효과가 없으므로 본 발명의 권리 범위에 속하지 아니한다 할 것이다.
[실시예] 아위버섯의 물 추출물 준비
건조된 아위버섯(Pleurotus eryngii var. ferulea (Pf.)을 시중에서 구입하여 조대분말화한 후 거즈로 된 봉지에 넣고 분말 1g 당, 추출 용매로써 물 50mL를 혼합한 후, 37℃에서 24시간 동안 진탕배양기에추출하였다. 진탕배양기의 상등액을 2500rpm으로 10분 동안 원심 분리한 후 여과한 상등액을 수집하여, 공시재료로 사용하였다.
[비교예] 아위버섯의 물 추출물 준비
추출 용매로써 물 50mL대신에 에탄올(99.9% (v/v)) 70% 및 100% 각 100mL 를 사용한 점을 제외하고는 상기 실시예와 동일한 방법으로 65℃이상에서 아위버섯의 에탄올 환류 추출물을 공시재료로 준비하였다.
<실험예1> 본 발명 아위버섯 추출물에 의한 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 활성 측정
췌장 콜레세테롤 에스터레이즈는 acyl chain을 가지는 기질들을 비 특이적으로 인식하여 acyl chain을 분리하는 역할을 한다. 실시예 및 비교예의 아위버섯 추출물에 의한 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 활성을 측정하기 위하여, 효소로 시그마 케미칼에서 제조된 포오신 판크리틱 콜레스테롤 에스터레이즈를 사용하였다.
췌장 콜레스테롤 에스터레이즈가 chromo-genic substrate (p-nirophenylbutyrate)을　분해하는 성질을 이용하여　발색　반응을　통해　enzyme의　활성변화를　확인하였다. 효소의 활성 저해 효과는 Microplate reader를 이용하여 405nm의 흡광도의 변화를 통해 측정하고, 추출물 비처리 그룹의 405nm흡광도를 베이스로 하여, 계산하여 %로 나타내었다.
실시예 및 비교예의 추출물에 의해 효소의 활성이 어떻게 달라지는지 측정하였고, 그 결과 실시예의 물 추출물이 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 의 활성을 현저하게 저하시키는 것을 확인하였다.
한편, 비교예의 70% 및 100% 에탄올 추출물 시료들에서는 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈의 활성을 저해하는 효과가 거의 나타나지 않았다. 실험 결과를 도 1 에 비교하여 간단히 나타내었다.
<실험예2> 아위버섯 물 추출물의 농도에 따른 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 활성 측정
한편, 실시예의 아위버섯의 물 추출물의 농도에 따른 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 활성을 측정하였다. 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈에 처리하는 아위버섯 물 추출물의 양을 추출 시 초기 아위버섯 분말 농도를 기준(1%)으로 하여, 1/5배 1/10배, 1/50배로 희석(dilution)했을 때 췌장 콜레스테롤 에스터레이즈 활성 저해 효과를 비교하여, 그 결과를 도 2에 비교하여 나타내었다.
<실험예3> 아위버섯 물 추출물의 농도에 따른 췌장 리파아제 활성 측정
췌장 리파아제는 acyl chain을 가지는 기질들을 비 특이적으로 인식하여 acyl chain을 분리하는 역할을 한다. 실시예 아위버섯 물 추출물의 농도에 따른 췌장 리파아제 활성을 측정하기 위하여, 효소로 시그마 케미칼에서 제조된 포오신 판크리틱 리파아제를 사용하였다.
췌장 리파아제가chromo-genic substrate (p-nirophenylbutyrate)을　 분해하는 성질을 이용하여　발색　반응을　통해　enzyme의　활성변화를　확인하였다. 효소의 활성 저해 효과는 Microplate reader를 이용하여 405nm의 흡광도의 변화를 통해 측정하고, 추출물 비처리 그룹의 405nm흡광도를 베이스로 하여, 계산하여 %로 나타내었다.
실시예의 아위버섯 물 추출물의 농도에 따른 효소의 활성이 어떻게 달라지는지 측정하였고, 그 결과 실시예의 아위버섯 물 추출물이 농도 의존적으로 췌장 리파아제가 활성을 현저하게 저하시키는 것을 확인하였다. 결과는 도 3에 간단하게 나타내었다.
<실험예4> 본 발명 아위버섯 물 추출물에 의한 콜레스테롤 흡수 측정
콜레스테롤 에스터레이즈 활성 저해 효과를 보인 실시예의 아위버섯 물 추출물이 개체 수준에서도 효과를 보이는 지 확인하기 위하여 소화관에서의 콜레스테롤 흡수를 측정하였다.
동위원소(3H)로 표지된 콜레스테롤 올리에이트 (Cholesterol oleate, Amersham, 100 μCi/ml)을 1%(w/v) 카르복실메틸셀룰로오스나트륨(CMC-Na), 1% (v/v) 트윈80 (Tween 80), 비표지된 콜레스테롤 올리에이트와 섞어 개체당 1μCi가 들어가도록 생쥐(mouse)에 경구용 존대를 통해 0.1 mL를 강제투여했다.
이때 대조군 생쥐(Balb/c 수컷, 8주령, 몸무게 ~25g)에는 콜레스테롤 흡수 저해 효능의 올리스탯(Orlistat) 400 μg (20mg/kg)을, 실험군 생쥐( Balb/c 수컷, 8주령, 몸무게 ~25g)에는 실시예의 아위버섯 물 추출물(10 mg/mL) 20mL을 농축하여 0.1mL을 경구 투여 하였다.
6 시간 후 생쥐의 혈액을 채취하여 4℃에서 혈장을 14000rpm 으로 10분 동안 원심 분리하여 얻고, 액체 신틸레이터(Beta counter, Beckman LS1801)를 이용하여 선량을 측정하였다. control 그룹은 콜레스테롤 흡수 저해제로 아무것도 투여하지 않은 그룹이다. control 그룹의 선량을 1로 정하고 각 실험 그룹의 선량을 control그룹의 선량으로 나누었을 때의 상대값으로 지방 흡수량을 정하였다.
본 발명에 따른 아위버섯의 물 추출물은 대조군으로 사용한 올리스탯과 마찬가지로 현저한 지방 흡수 저해 효과를 보였다. 결과는 도 4에 비교하여 나타내었다. 참고로, 도 4에서 control은 콜레스테롤 흡수 저해제로 아무것도 투여하지 않은 생쥐의 혈액 채취 결과이다.
이하에서 본 발명의 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 하는 각종 제형의 예를 기재하였으나, 본 발명의 제제가 이에 국한되는 것은 아니다.
제조예 1. 산제의 제조
아위버섯 물 추출물 분말 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제조예 2. 정제의 제조
아위버섯 물 추출물 분말 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제조예 3. 캡슐제의 제조
아위버섯 물 추출물 분말 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예 4. 액제의 제조
아위버섯 물 추출물 분말 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100mL로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.
제조예 5. 주사제의 제조
아위버섯 물 추출물 분량 10mg
만니톨 180mg
주사용 멸균 증류수 3000mg
Na2HPO4, 12H2O 25mg
통상의 주사제의 제조 방법에 따라 1 앰플당(2mL)
상기의 성분함량으로 제조한다.
제조예 6. 건강 식품의 제조
아위버섯 물 추출물 분말 1000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

Claims (8)

  1. 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유량을 특징으로 하는 고지혈증의 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 물 추출물은 아위버섯을 20 내지 60℃ 온도의 물에서, 12 내지 36 시간 동안 추출한 것이 특징인 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 물 추출물은 물 50mL 당 아위버섯 분말을 1 내지 5g 혼합하여 추출한 것인 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 아위버섯의 물 추출물은 0.01 내지 30 중량% 포함하는 조성물.
  5. 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 제 5 항에 있어서, 상기 약학적 조성물이 산제, 과립제, 정제, 현탁제, 에멀젼, 주사제 또는 시럽 중 어느 하나인 의약품.
  7. 아위버섯의 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 고지혈증의 개선 기능성 건강보조 식품 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 건강 보조식품 조성물이 식품, 식품첨가제 또는 음료 중 어느 하나인 고지혈증의 개선 기능성 건강보조 식품.
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