WO2013040732A1 - 一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法 - Google Patents

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钟惠昌
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Abstract

本发明公开了一种从富含油脂的真菌或藻类细胞中物理破壁提取油脂的的方法，其主要通过将发酵结束后的真菌或藻类发酵液通过分离系统分离并收集细胞控制细胞泥，细胞泥通过胶体磨或是高压均质机进行物理破壁，并通过球磨机进行二次球磨破壁和破乳，最后将料液通过三相分离机分离得到富含多不饱和脂肪酸的油脂。本发明采用物理的破壁和提取方法，工艺简单，细胞破壁效率高，由于低温和抗氧化处理，可有效保护藻类和真菌细胞内的活性成分，产品绿色无毒无残留，可以用于提取油脂为DHA油脂、ARA油脂、EPA油脂、GLA和ALA油脂等，适合于产业化生产。

Description

一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法 技术领域
[0001] 本发明涉及一种从真菌或藻类中提取有效成分的方法， 特别是涉及一种从真菌或 藻类中物理破壁提取油脂的方法。
背景技术
[0002] 多不饱和脂肪酸 (polyunsaturated fatty acid, PUFA)—般是指含两个或两个以上双 键， 碳链长度 16-22的直链脂肪酸， 根据双键所在碳原子的位置不同又分为 ω -3系列不饱和 说
脂肪酸和 ω -6 系列不饱和脂肪酸， 其中亚麻酸 (GLA) 、 二十碳五烯酸（ ΕΡΑ) 、 二十二碳六 烯酸 （DHA)属于 ω -3 系列， 亚油酸、 花生四烯酸 (ARA)属于 ω -6 系列。 PUFA 具有许多重 书
要的生理活性， 它可以调节人体内血脂和脂蛋白的正常代谢， 降低血液黏度和血液中胆固醇 含量， 保护血管壁， 防止脑血栓的形成， 具有预防心肌梗塞， 高血压、 心脏病的功能； 同吋 它在人体内能够被转化成前列腺素类化合物从而起到免疫应答的作用， 对提高机体免疫等方 面都具有积极的作用； 此外不饱和脂肪酸中的某些成分还是大脑和神经系统发育不可缺少的 营养物质， 如多不饱和脂肪酸中的 DHA可以促进胎儿脑部神经系统的发育， 显著提高婴幼 儿智力发育水平， 同时， DHA对维持脑部功能， 延缓脑部衰老起着重要的作用。
[0003] 人体自身不能合成多不饱和脂肪酸， 但它又是人体不可缺少的重要物质之一， 因此 只能通过从外界摄取来满足人体需要。 传统的不饱和脂肪酸的主要来源是鱼油， 但鱼油本身 具有许多缺点， 如: 难闻的鱼腥味、 口感不佳、 含胆固醇及令人生畏的芥酸等， 极大影响产 品的品质； 而且鱼油中不饱和脂肪酸含量容易受到季节、 地区、 种类及鱼类资源限制等影 响； 此外， 由于受到环境污染的影响， 某些地区的鱼类可能含有较高含量的重金属及其他污 染物， 这会额外增加提取成本。
[0004] 研究发现， 许多真菌和藻类细胞中含有大量的不饱和脂肪酸。 从真菌或藻类中提取 不饱和脂肪酸可以克服从鱼油中提取不饱和脂肪酸所存在的上述问题， 而且真菌和藻类可进 行大规模人工培养， 产量高， 周期短， 因此利用真菌和藻类作为鱼油的替代资源提取不饱和 脂肪酸具有深远意义。
[0005] 由于真菌和藻类自身细胞壁的原因， 从真菌或藻类细胞中提取不饱和脂肪酸的最大 的问题是细胞破壁。 从真菌或藻类细胞中提取不饱和脂肪酸的常用方法是： 有机溶剂法、 酸 热法、 酶法等。 有机溶剂法具有操作简单的优点， 但费时， 提取效率低， 同时存在产品残留 有机溶剂及生产安全隐患等问题。 采用酸热法能快速、 有效的破坏真菌或藻类的细胞壁， 但 说 明 书
反应条件剧烈， 容易破坏细胞内所需产品成分， 并存在酸残留等问题。 采用酶法破壁， 虽然 反应条件温和， 设备简单， 但由于不同微生物间细胞壁组成成分的差异， 不同微生物细胞间 破壁效果差异显著， 同时由于酶解条件较其他方法苛刻， 因此酶解成本较高， 不适用于工业 化生产。
发明内容
[0006] 本发明旨在提供一种无需任何有机溶剂的辅助， 采用物理的方法对真菌或是藻类细 胞进行破壁并提取胞内油脂， 适合于低成本的大规模生产。
[0007] 为达到上述目的， 本发明所提出的技术方案为： 一种从真菌或藻类中物理破壁提取 油脂的方法， 其特征在于： 包括如下步骤：
步骤 1 : 将发酵结束后的真菌或藻类发酵液通过分离系统收集细胞， 保持真菌或是藻细胞泥 含水量在 70-90%;
步骤 2: 控制细胞泥温度在 15-40 ;
步骤 3: 使用酸或碱调节细胞泥 PH为 0-5或 8-14;
步骤 4: 在细胞泥中加入细胞泥质量 1-3%的抗氧化剂；
步骤 5: 将细胞泥泵入胶体磨或高压均质机进行破壁， 控制温度在 30-95°C ;
步骤 6: 胶体磨或高压均质机出来的细胞泥通过球磨机进行二次破壁和破乳， 控制温度在
30-95 °C ;
步骤 7: 破壁后的细胞泥在 20-150rpm的搅拌条件下升温至 30-95Γ , 并维持 0.5-5小时； 步骤 8: 按重量比细胞泥：水 =1： 2.5-6.5 从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制温度 30-95 °C , 在 250-350rpm搅拌 50-80min， 将料液通过三枏分离机分离得到油脂。
[0008] 进一步， 步骤 4中所述的的抗氧化剂为维生素 E、 天然迷迭香、 抗坏血性酸棕榈酸酯 中的一种或它们的混合物。
[0009〗 进一歩， 步骤 6中所述的高压均质机的工作压力为 120-130Mpa。
[0010] 进一步， 步骤 6中胶体磨的工作转速为 14000rpm以下。
[0011] 进一步， 所述的酸为盐酸、 硫酸、 柠檬酸或乳酸。
[0012〗 进一步， 所述的碱为氢氧化钠。
[0013] 进一步， 所述的球磨机为砂磨机或珠磨机等， 其工作压力为 20-30Mpa。
[0014] 进一歩， 所述的藻类为裂壶藻或双鞭甲藻， 油脂为 DHA油脂。
[0015】 进一步， 所述的真菌为高山被孢霉， 油脂为 ARA油脂。
[0016] 进一步， 所述的真菌为深黄被孢霉， 油脂为 EPA油脂。 说 明 书
[0017] 进一步， 所述的真菌为小克银汉， 油脂为 GLA和 ALA油脂。
[0018] 本发明克服了传统上必须进行干燥制成粉末才进行粉碎， 以及难以破碎真菌或藻类 坚硬的细胞壁的技术屏障， 实现了低成本而高效率的破碎藻类和真菌的细胞壁。 其具体特征 如下： （1 ) 为避免真菌和藻类细胞泥在高速碰撞或是高压挤压条件下， 容易产生热量， 而破 坏胞内产物的生物活性， 本发明采用预先降温的手段将真菌和藻类细胞泥的温度降低到 15- 40 °C , 同时调整 pH更有利于料液的储存有效地控制了真菌和藻类细胞泥特别是胞内多不饱 和脂肪酸油脂暴露在高温中， 避免了因高温造成的有效成分分解或是失活， 同时调整 pH更 有利于料液的储存和提高破壁率； (2) 预先添加了保护剂， 在高压均质机或是胶体磨破壁过 程中， 保护剂能均匀有效的将破壁后的油脂或颗粒包埋， 形成有效的保护屏障， 从而大大降 低胞内多不饱和脂肪酸的与空气的接触， 降低多不饱和脂肪酸油脂被氧化分解的可能性。 (3 ) 采用物理的提取方法， 克服传统上有机溶剂带来的残留和爆炸隐患， 提供一种安全绿 色无毒无残留的产品； （4) 采用胶体磨或高压均质机出来的细胞泥通过¾¾磨机进行二次破壁 和破乳， 提高了产率。
具体实施方式
[0019】 下面结合具体实施例， 对本发明做进一步说明。
[0020] 实施例 1
1 ) 将发酵结束后的裂壶藻发酵液通过分离系统分离收集藻细胞， 保持藻泥含水量在 70%- 90%; 将藻泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10 冷却水进行冷却， 等藻泥的温度降至 15-40°C， 关 闭冷却水进出口；
3 ) 在搅拌情况下， 利用酸调节 pH， 使得藻泥 pH在 0.0-5.0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照藻泥重量比加入 3%抗氧化剂混合物 （维生素 E 1%, 天然迷迭香 0.5%, 抗坏血性酸棕榈酸酯 1.5%)， 混合均匀；
5 ) 将藻泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa， 保持高压 均质机的温度在 30-95°C， 将藻泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的储罐 中；
6) 调节球磨机的压力为 30Mpa， 控制温度在 30-95 , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的裂壶藻藻泥升温到 30-95Γ , 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比藻泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从藻泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30- 说 明 书
95 V , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分离 得到 DHA油脂， 提取率为 93%。
[0021] 实施例 2 .
1 ) 将发酵结束后的双鞭甲藻发酵液利用分离系统分离收集双鞭甲藻细胞， 保持藻泥含水量 在 70%-90%； 将藻泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，；
2) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等藻泥的温度降至 20°C， 关闭冷 却水进出口；
3 ) 在高速搅拌情况下， 利用酸调节 pH， 使得藻泥 pH 0.0-5.0之间；
4) 在高速搅拌情况下， 按照藻泥重量比加入 1%抗氧化剂混合物 （维生素 E 0.3%, 天然迷 迭香 0.5%， 抗坏血性酸棕榈酸酯 0.2%)， 混合均匀；
5 ) 将藻泥泵入胶体磨的中， 调节胶体磨的工作转速为 14000rpm 以下， 控制温度在 30- 95V , 将藻泥进行破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的储罐中；
6) 调节球磨机的压力为 20Mpa， 控制温度在 30-95 °C , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的双鞭甲藻藻泥升温到 30-95°C， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比藻泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从藻泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30- 95 , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min, 将料液通过三相分离机分离 得到 DHA油脂， 提取率为 88%。
[0022] 实施例 3
1 ) 将发酵结束后的高山被孢霉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含水量 在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40°C， 关闭冷却水进出口；
3 ) 在搅拌情况下， 利用酸调节 pH， 使得细胞泥 pH 0.0-5.0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 2%抗氧化剂混合物 （维生素 E 0.5%, 天然迷迭 香 0.5%， 抗坏血性酸棕榈酸酯 1%)， 混合均匀;
5 ) 将细胞泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa， 保持高 压均质机的温度在 30-95 °C， 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的 储罐中；
6 ) 调节球磨机的压力为 25Mpa， 控制温度在 30- 95 °C , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的细胞泥升温到 30-95°C， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C, 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 ARA油脂， 提取率为 83%。
[0023] 实施例 4
1) 将发酵结束后的深黄被孢霉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含水量 在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
说
2) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10 冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40C， 关闭冷却水进出口；
书
3) 在搅拌情况下， 利用酸进行 pH的调配， 使得细胞泥 pH 0.0-5:0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 1%抗氧化剂维生素 E， 混合均匀；
5) 将细胞泥泵入胶体磨的中， 调节胶体磨的工作转速为 MOOOrpm 以下， 控制温度在 30- 95°C， 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的储罐中；
6) 调节球磨机的压力为 30Mpa， 控制温度在 30-95Γ, 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的细胞泥升温到 30-95°C， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C, 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 EPA油脂， 提取率为 85%。
[0024] 实施例 5
1) 将发酵结束后的小克银汉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含水量在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40°C， 关闭冷却水进出口；
3) 在搅拌情况下， 利用酸调节 pH， 使得细胞泥 pH 0.0-5.0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 2%抗氧化剂天然迷迭香， 混合均匀；
5) 将细胞泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 】20-130Mpa， 保持高 压均质机的温度在 30-95°C， 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的 储罐中； 说 明 书
6 ) 调节球磨机的压力为 20Mpa， 控制温度在 30-95 Γ , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7)将破壁后的细胞泥升温到 30-95 Ό， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 GLA和 ALA油脂， 提取率为 82%。
[0025] 实施例 6
1 ) 将发酵结束后的裂壶藻发酵液通过分离系统分离收集藻细胞， 保持藻泥含水量在 70%- 90%； 将藻泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等藻泥的温度降至 15-40°C， 关 闭冷却水进出口；
3 ) 在搅拌情况下， 利用碱调节 pH， 使得藻泥 pH 8.0-14.0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照藻泥重量比加入 3%抗氧化剂抗坏血性酸棕榈酸酯， 混合均匀；
5 ) 将藻泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa， 保持高压 均质机的温度在 30-95 °C， 将藻泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的储罐 中；.
6) 调节球磨机的压力为 25Mpa， 控制温度在 30-95 Γ , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的裂壶藻藻泥升温到 30-95 °C， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比藻泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从藻泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30- 95 V , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80ηώι， 将料液通过三相分离机分离 得刭 DHA油脂，. 提取率为 94%。
[0026] 实施例 7
1 ) 将发酵结束后的双鞭甲藻发酵液利用分离系统分离收集双鞭甲藻细胞， 保持藻泥含水量 在 70%-90%; 将藻泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，；
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等藻泥的温度降至 20Γ , 关闭冷 却水进出口；
3 ) 在高速搅拌情况下， 利用碱调节 pH， 使得藻泥 pH 8.0-14.0之间；
4) 在高速搅拌情况下， 按照藻泥重量比加入 2%抗氧化剂混合物 （维生素 E 1.5%, 天然迷 迭香 0.5%)， 混合均匀； 5 ) 将藻泥胶体磨的中， 调节胶体磨的工作转速为 14000rpm以下， 控制温度在 30-95 °C， 将 藻泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的储罐中；
6) 调节球磨机的压力为 30Mpa, 控制温度在 30-95 Ό , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的双鞭甲藻藻泥升温到 30-95 °C， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比藻泥：水 =1 : 2.5-6.5 的比例从藻泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30- 95 °C , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分离 得到 DHA油脂, 提取率为 91%。
说
[0027] 实施例 8
1 ) 将发酵结束后的高山被孢霉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含水量 书
在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40°C， 关闭冷却水进出口；
3 ) 在搅拌情况下， 利用碱调节 pH， 使得细胞泥 pH 8.0-14.0之间；
4) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 2.5%抗氧化剂混合物 （维生素 E 1%, 抗坏血性 酸棕榈酸酯 1.5%)，. 混合均匀；
5 ) 将细胞泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa, 保持高 压均质机的温度在 30-95 °C， 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的 储罐中;
6) 调节球磨机的压力为 30Mpa， 控制温度在 30-95 °C， 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的细胞泥升温到 30-95Ό， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 ARA油脂， 提取率为 85%。
[0028] 实施例 9
1 ) 将发酵结束后的深黄被孢霉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含水量 在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40°C， 关闭冷却水进出口； 说 明 书
3 ) 在搅拌情况下， 利用碱调节 pH， 使得细胞泥 pH 8.0-14.0之间；
4 ) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 1.5%抗氧化剂混合物.（维生素 E 1%, 天然迷迭 香 0.5%) 混合均匀；
5 ) 将细胞泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa， 保持高 压均质机的温度在 30-95 °C， 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的 储罐中;
6 ) 调节球磨机的压力为 25Mpa， 控制温度在 30-95 °C , 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的细胞泥升温到 30-95 ， 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 EPA油脂， 提取率为 85%。
[0029] 实施例 10
1 ) 将发酵结束后的小克银汉发酵液通过分离系统分离收集真菌细胞， 保持细胞泥含^^量在 70%-90%； 将细胞泥收集到一个带有冷却盘管和搅拌的储罐中，
2 ) 通过在罐体的盘管中通入温度为 10°C冷却水进行冷却， 等细胞泥的温度降至 15-40°C， 关闭冷却水进出口；
3 ) .在搅拌情况下， 利用碱调节 pH， 使得细胞泥 pH 8.0-14.0之间；
4 ) 在搅拌情况下， 按照细胞泥重量比加入 3%抗氧化剂混合物 （维生素 E . l%， 天然迷迭香 0.5%， 抗坏血性酸棕榈酸酯 1.5%)， 混合均匀；
5 ) 将细胞泥泵入高压均质机的桐体中， 调节高压均质机的工作压力为 120-130Mpa， 保持高 压均质机的温度在 30-95 Γ , 将细胞泥进行高压均质破壁， 破壁后的料液直接打入球磨机的 储罐中；
6 ) 调节球磨机的压力为 20Mpa， 控制温度在 30-95°C， 进行二次破壁和破乳， 二次破壁后 的料液装入带有布气管道和盘管的储罐中；
7) 将破壁后的细胞泥升温到 30-95 'C , 在 20-150rpm搅拌下加热维持 0.5-5小时；
8 ) 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 的比例从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制料温 30-95 °C , 添加适量的食用盐在 250-350rpm搅拌下维持 50-80min， 将料液通过三相分离机分 离得到多不饱和脂肪酸 GLA和 ALA油脂， 提取率为 87%。
[0030] 尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明， 但所属领域的技术人员应该明 说 明 书
白， 在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内， 在形式上和细节上对本发明 做出各种变化， 均为本发明的保护范围。

Claims

权 利 要 求 书
1. 一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 包括如下步骤:
步骤 1 : 将发酵结束后的真菌或藻类发酵液通过分离系统收集细胞， 保持真菌或是藻细胞泥 含水量在 70-90%;
步骤 2: 控制细胞泥温度在 15-40°C ;
步骤 3 : 使用酸或碱调节细胞泥 PH为 0-5或 8-14;
步骤 4: 在细胞泥中加入细胞泥质量 1-3%的抗氧化剂；
步骤 5 : 将细胞泥泵入胶体磨或高压均质机进行破壁， 控制温度在 30-95 °C ;
步骤 . 6 : 胶体磨或高压均质机出来的细胞泥通过球磨机进行二次破壁和破乳， 控制温度在
30-95。。；
步骤 7: 破壁后的细胞泥在 20-150rpm的搅拌条件下升温至 30-95°C， 并维持 0.5-5小时； 步骤 8 : 按重量比细胞泥：水 =1 ： 2.5-6.5 从细胞泥底部通过布气管加入热水， 并控制温度 30-95 °C， 在 250-350rpm搅拌 50-80min， 将料液通过三相分离机分离得到油脂。
2. 根据权利要求 1 所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 步 骤 4中所述的的抗氧化剂为维生素 E、 天然迷迭香、 抗坏血性酸棕榈酸酯中的一种或它们的 混合物。
3. 根据权利要求 .1 所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 步 骤 6中所述的高压均质机的工作压力为 120-130Mpa。
4. 根据权利要求 1 所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 步 骤 6中胶体磨的工作转速为 14000rpm以下。
5..根据权利要求 1 所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 所 述的酸为盐酸、 硫酸、 柠檬酸或乳酸, 所述的碱为氢氧化钠。
6. 根据权利要求 1 所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其特征在于： 所 述的球磨机为砂磨机或珠磨机， 其工作压力为 20-30Mpa。
7. 根据权利要求 1-6任一权利要求所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其 特征在于： 所述的藻类为裂壶藻或双鞭甲藻， 油脂为 DHA油脂。
8. 根据权利要求 1-6任一权利要求所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其 特征在于： 所述的真菌为高山被孢霉， 油脂为 ARA油脂。
9. 根据权利要求 1-6任一权利要求所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 其 特征在于： 所述的真菌为深黄被孢霉， 油脂为 EPA油脂。
10. 根据权利要求 1 -6 任一权利要求所述的一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法， 权 禾 iJ 要 求 书
其特征在于： 所述的真菌为小克银汉， 油脂为 GLA和 ALA油脂。
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