WO2012128363A1 - Ｐｅｄｆマイクロニードルアレイ及びその製造方法 - Google Patents

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WO2012128363A1
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pedf
microneedle
microneedle array
peptide
skin
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英淑 権
文男 神山
彩子 母里
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コスメディ製薬株式会社
株式会社アップウェル
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
    • A61M37/0015—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin by using microneedles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61M2037/0046—Solid microneedles

Definitions

  • the present invention relates to a microneedle array for administering PEDF.
  • the internal use method As a method for injecting pharmaceuticals into the body, the internal use method, the injection method, the transdermal method, etc. are known, and each has its own characteristics.
  • the internal use method is simple, depending on the drug, absorption efficiency is poor, or the digestive tract and liver are burdened.
  • the injection method is efficient, it is painful and requires the hands of specialists such as doctors.
  • the transdermal method can control the dose of the drug temporally to reduce side effects such as pain and inflammation due to a temporary increase in the local concentration of the drug, thereby relieving the patient's anxiety and burden.
  • a microneedle has been proposed as a method for solving these problems and reliably supplying a medicinal component to a specific place on the skin surface layer and / or the skin stratum corneum (Patent Document 1). Since the microneedle is very thin, there is no pain or bleeding when it is inserted into the skin surface layer and / or skin stratum corneum, and the puncture wound is quickly closed, which is suitable as a method for reliably supplying the drug under the skin. .
  • a substrate provided with a plurality of microneedles on a substrate is called a microneedle array.
  • the one provided with an adhesive tape or the like for fixing the microneedle array on the skin is called a microneedle patch.
  • Patent Document 2 A substance that dissolves and disappears in the living body has been proposed as a material of the microneedle.
  • Patent Document 2 A substance that dissolves and disappears in the living body has been proposed as a material of the microneedle.
  • the microneedle dissolves and disappears in the skin surface layer and / or the skin stratum corneum. Can be supplied to.
  • microneedle materials For example, maltose (patent document 2), hyaluronic acid (patent documents 4, 5, 6), dextran (patent document 4), polyvinylpyrrolidone (patent document 7), gelatin (patent documents 3, 5, 6), collagen (patent Documents 5 and 6), chitosan (Patent Document 5), proteins (Patent Documents 3 and 4), and biodegradable resins (Patent Document 1) are disclosed.
  • a microneedle containing a medical drug is called a medical microneedle.
  • Many drugs are expensive, and it is necessary to contain the drug only at the tip of the microneedle in order to avoid an increase in cost.
  • An application method for applying a drug to the tip of a microneedle has already been proposed (Patent Document 8).
  • PEDF Pigment epithelium-derived factor protein
  • the problem to be solved by the present invention is to provide a transdermal administration method using microneedles, which is superior to the internal use / injection method and the conventional application method when administering PEDF or its active partial peptide to the human body. There is.
  • the PEDF microneedle array of the present invention is characterized by comprising microneedles containing a pharmaceutically effective amount of one or more drugs selected from the group of PEDF and its active partial peptide.
  • PEDF is expensive.
  • it is preferable to manufacture the microneedle array so that PEDF is present only in the microneedle portion of the microneedle array and not included in the substrate portion. This is because only the tip portion of the microneedle is inserted and administered into the body, and the substrate portion is a portion that supports the microneedle and is not directly related to drug administration.
  • a welding method as a method of containing a drug only in the microneedle portion.
  • the microneedle material is made water-soluble, PEDF is dissolved in an aqueous solution made of that material or other water-soluble materials, and the tip of the microneedle array that has already been molded is immersed in the solution to make the drug microscopic.
  • This is a method of containing only at the tip of the needle array.
  • the tip of the microneedle array When the tip of the microneedle array is immersed in the drug solution, the tip of the microneedle array partially dissolves, and when the drug solution adheres to the tip, it is integrated, and when the microneedle is inserted into the skin, the drug-containing portion is peeled off. It wo n’t fall.
  • the microneedle array material and the drug solution are preferably compatible.
  • a method of manufacturing a microneedle array step by step as another method for containing a drug only in the microneedle portion.
  • An aqueous solution in which PEDF is added to a microneedle material is cast into a mold in which the shape of the microneedle is perforated, and the moisture is evaporated and dried at room temperature or by heating to produce only the microneedle portion.
  • An aqueous solution of only the microneedle material is cast on the substrate, the substrate is laminated and then peeled off, and the microneedle is transferred onto the substrate. Also by this method, a microneedle array containing PEDF only in the microneedle portion can be obtained.
  • the material is desirably a water-soluble polymer.
  • water-soluble polymers include synthetic polymers such as polyvinylpyrrolidone and polyvinyl alcohol, semi-synthetic polymers such as carboxymethylcellulose and ethylcellulose, polysaccharides such as hyaluronic acid, chondroitin sulfate, dextran, dextrin, and proteoglycan. Can be given.
  • a microneedle comprising a mixture obtained by adding a monosaccharide or a disaccharide to these polymer materials is more desirable because it has a feature that the dissolution rate of the microneedle in the skin is shortened.
  • a microneedle containing a polysaccharide as a main material and containing a pharmaceutically effective amount of PEDF can be particularly preferably used.
  • a microneedle containing PEDF in a material obtained by adding about 20 to 100 parts by weight of glucose to 100 parts by weight of polysaccharide is more preferable because the needle solubility in the skin is increased and PEDF is immediately dissolved.
  • the molecular weight of hyaluronic acid constituting the main component of the microneedle is 50,000 to 4,000,000. If the molecular weight of hyaluronic acid is less than 50,000, it is inconvenient from the viewpoint of mechanical strength. Moreover, when it exceeds 4 million, the solution viscosity at the time of preparing aqueous solution is too high, and it is inconvenient to handle.
  • the microneedle array of the present invention is a microneedle array in which a plurality of fine microneedles are formed on the surface of a substrate, and the shape of the microneedles is easy to be inserted into the skin and does not cause pain when inserting.
  • a conical shape, a truncated cone shape, or a coneide shape was used.
  • the Conide type is a so-called volcano type, and the side surface of the truncated cone is curved inward.
  • the root diameter of the microneedle is reduced, the amount of material to be inserted into the skin is reduced, and it is easy to break when it is inserted into the skin. If it is thick, it is painful when it is inserted into the skin. 0.0 mm is appropriate. When the tip diameter is thin (pointed), it tends to break when piercing the skin, and when the tip diameter is thick, it is difficult to pierce the skin and is painful, so 0.01 to 0.08 mm is appropriate.
  • the height of the microneedle is low, it becomes difficult to supply the drug to a predetermined position on the skin surface layer and / or the skin stratum corneum, and if it is high, it is easy to break when inserted into the skin. It is. Also, when the pitch between the microneedles becomes shorter, it becomes difficult to pierce the skin, and when the pitch becomes longer, the number of microneedles per area decreases, and a large amount of medicine cannot be supplied to a predetermined narrow site. 0.4 to 1.0 mm is appropriate.
  • PEDF can be produced by expressing the DNA encoding the protein by the method described in Non-Patent Document 1, but can also be purchased. A specific production method is described in Patent Literature 9 [0018] and the like.
  • PEDF includes all PEDF variants having functionally equivalent characteristics to human PEDF.
  • PEDF variants are described in, for example, Patent Documents 10 to 12.
  • a PEDF variant comprising an amino acid sequence having one or more amino acid residue substitutions, deletions, and / or additions to the amino acid sequence of human PEDF, and having a function equivalent to that of human PEDF
  • This variant is a preferred variant.
  • Functionally equivalent to human PEDF has a hair loss inhibiting activity or hair growth promoting activity equivalent to human PEDF, or a function capable of preventing apoptosis of hair root cells including hair matrix cells, equivalent to human PEDF.
  • an active partial peptide having an amino acid sequence having homology with the amino acid sequence of human PEDF can be contained in the microneedle of the present invention as long as it is functionally equivalent to human PEDF.
  • the active partial peptide refers to a peptide having excellent hair loss inhibitory activity and hair growth promoting activity similar to or higher than PEDF among many fragments obtained by chemically or enzymatically degrading PEDF.
  • the amino acid sequence is equivalent to a part of the amino acid sequence of PEDF.
  • Peptide 1 His Leu Thr Phe Pro Leu Asp Tyr His Leu Asn Gln Pro Phe Ile Phe Val Leu Arg Asp: 20-residue peptide corresponding to residues 381-400 of PEDF 2: His Leu Thr Phe Pro Leu Asp: 7-residue peptide corresponding to residues 381-387 of PEDF 3: Tyr His Leu Asn Gln Pro: 6 residue peptide corresponding to 388-393 residues of PEDF 4: Phe Ile Phe Val Leu Arg Asp: 7 residues corresponding to 394-400 residues of PEDF
  • the dose of PEDF or active partial peptide can be appropriately determined depending on the age, weight, sex, symptoms, etc. of the administration subject.
  • the usual dose is 0.5 ⁇ g to 100 mg, preferably 1 ⁇ g to 10 mg per dose.
  • Administration is daily or every few days for several months. If the amount is too small, it is ineffective, and if the amount is too large, an unexpected side effect may occur.
  • the filling amount of PEDF or active partial peptide into the microneedles it is desirable to fill the whole administration amount into one microneedle in consideration of administration convenience.
  • the manufacturing method of the microneedle array of the present invention is not particularly limited, and may be manufactured by any conventionally known method.
  • a microneedle material aqueous solution is cast into a mold having a microneedle shape, and the substrate is peeled off after drying by evaporating moisture at room temperature or by heating.
  • the microneedle array In order to apply the microneedle array produced by the method as described above to the skin for several hours, it is preferable to make a microneedle patch by lining the back surface of the substrate of the microneedle array with an adhesive film.
  • the microneedle array includes a substrate and a plurality of needles or the like provided integrally with the substrate on one side of the substrate.
  • An adhesive film having a larger area than the substrate is laminated on the surface of the microneedle array on the opposite side of the surface on which the plurality of needles are provided. Thereby, the microneedle array can be lined with an adhesive film to form a microneedle patch.
  • an adhesive film a base material and an appropriate adhesive film in which an adhesive layer is provided on one side of the base material can be used.
  • a substrate examples include polyester film, polyethylene film, polyurethane film, urethane foam, and paper.
  • the adhesive which consists of acrylic ester, a styrene-isoprene thermoplastic rubber adhesive, etc. can be used conveniently.
  • FIG. 2 is a cross-sectional view schematically showing an embodiment of the microneedle patch.
  • the microneedle patch 1 has a substrate 2, and a plurality of needles 3 are integrally formed on one surface of the substrate 2.
  • An adhesive film 4 is laminated on the opposite surface of the substrate 2.
  • the adhesive film 4 has the base material 4a and the adhesive 4b provided in the single side
  • PEDF or an active partial peptide thereof is selectively supplied to a part that requires hair production, for example, the head, using a microneedle, hair loss is suppressed and hair growth promoting activity appears.
  • Microneedles have moderate hardness and resistance to breakage, and easily dissolve in the skin surface layer and / or skin stratum corneum. For this reason, there are few failures at the time of insertion, and it is easy to use even for beginners.
  • PEDF or an active partial peptide thereof can be gradually supplied only to a portion requiring hair production.
  • PEDF is distributed and supplied throughout the body, and the local concentration of the hair producing part becomes insufficient, and the effect is limited.
  • a sufficient amount of PEDF was locally administered or administered by injection or injection, side effects were caused and there was a risk of inducing serious illness.
  • PEDF subcutaneous injection is accompanied by severe pain because the amount of PEDF injection rises instantaneously and locally It is known that it is not practical to repeatedly apply such painful injections to many places.
  • the necessary amount of PEDF can be gradually supplied to the necessary local area by appropriately selecting the microneedle material and adjusting the dissolution time. Therefore, it is easy to administer intermittently over several days or weeks.
  • FIG. 1 is an example of a cross-sectional view of a microneedle array.
  • FIG. 2 is a schematic cross-sectional view showing a microneedle patch as a microneedle array according to an embodiment of the present invention.
  • PEDF and each peptide used in the present invention were prepared by Upwell Co., Ltd.
  • Table 1 summarizes the material of the microneedle used in this example and the PEDF contained in the microneedle.
  • the material composition of the microneedle is indicated by the weight ratio of each component constituting the microneedle.
  • FIG. 1 shows a part of a cross-sectional view of the microneedle array of this embodiment.
  • the hyaluronic acid used in this example is manufactured by Kikkoman Biochemifa Co., Ltd. (formerly Kibun Food Chemifa Co., Ltd.), its molecular weight is 800,000 (trade name: FCH-80), and dextran is manufactured by Nippon Bulk Chemical Co., Ltd. Name: Dextran 70) and polyvinylpyrrolidone are manufactured by BASF Japan (trade name: Kollidon 12PF).
  • molecular weight is a weight average molecular weight and means the quantity measured by gel permeation chromatography (GPC).
  • Each microneedle array is cast in a mold in which the shape of the microneedle is perforated, and an aqueous solution in which PEDF is added to the microneedle material is cast, and the microneedle portion is dried by evaporating moisture at room temperature or by heating. create.
  • the weight% of PEDF in Table 1 is the weight% of PEDF in this PEDF-added aqueous solution.
  • An aqueous solution of only the microneedle material is cast on the substrate, the substrate is laminated and then peeled off, and the microneedle is transferred onto the substrate. According to this method, a microneedle array in which PEDF is contained only in the microneedles is obtained, and the use efficiency of PEDF is good.
  • microneedle uniform microneedle in this specification.
  • a welding method as described in Example 2 is more appropriate.
  • Microneedles root diameter 0.2 mm, tip diameter 0.04 mm, a frustoconical length 0.8 mm, are arranged in a lattice pattern on 0.6mm interval, a circular patch type array of diameter 1 cm 2 There are 244 microneedles.
  • the hardness of the base portion of the produced microneedle array was measured by a JIS pencil hardness measurement method.
  • mice Male rats (12 weeks old) were anesthetized with Nembutal (30 mb / kg) and the abdominal skin was shaved, and the microneedles of each composition described above were lined with one protective bandage and administered. The administration time was 2 hours. The present composition 3, which was expected to dissolve immediately, was taken out after 30 minutes. The extracted microneedle was observed with a microscope, and the dissolution state of the tip was observed. Table 2 summarizes the pencil hardness of each microneedle and the observation results after administration.
  • the composition of the microneedle can be obtained by using a polysaccharide as a main material, but if the proportion of vinylpyrrolidone is large, it is too hard and the needle becomes brittle. Moreover, short-time needle dissolution of polysaccharide microneedles containing glucose can also be confirmed. According to another test result, it was confirmed that the microneedle composed only of polysaccharides has insufficient solubility when applied to the skin for 30 minutes.
  • a microneedle containing no drug of the material of the composition 1 was prepared.
  • the microneedle array was a 1 cm diameter circular patch.
  • dissolved 100 micrograms of microneedle raw materials of this composition 1, PEDF 5 mg, and trehalose (Hayashibara Laboratory, Okayama City) in 500 microliters of water was created.
  • the tip portion of the microneedle needle 100 ⁇ m was immersed in the aqueous solution for 1 second, and then dried to obtain a tip PEDF welded microneedle array. Thereby, about 10 ⁇ g of PEDF is contained in the microneedle needle portion.
  • Microneedles prepared by such a manufacturing method are referred to as welding microneedles in this specification, and the adhesive needle plaster (Micropore, 3M Company) is used on the back of the microneedle array to stabilize the application to the skin for several hours. ) was lined with a 2.5 cm diameter circular film to obtain a microneedle patch.
  • microneedle array using peptide 1 A microneedle not containing the drug of the composition 2 was prepared. Further, a solution was prepared by dissolving 5 mg of the microneedle material of the present composition 2, peptide 1 and 100 ⁇ g of trehalose (Hayashibara Laboratory, Okayama City) in 500 ⁇ l of water.
  • microneedle array The back surface of the microneedle array was lined with an adhesive film in which a bandage (Micropore, 3M Company) was cut into a 2.5 cm diameter to stabilize the application to the skin for several hours to obtain a microneedle patch.
  • a bandage Micropore, 3M Company
  • Example 4 Hair loss inhibitory activity of PEDF
  • Microneedle A Intraneedle uniform microneedle containing 10 ⁇ g of PEDF: This composition 1 was used.
  • Microneedle B In-needle uniform microneedle containing 0.5 ⁇ g of PEDF: The composition of composition 1 with a reduced PEDF concentration was used.
  • Microneedle C Welding method microneedle containing 10 ⁇ g of PEDF: This composition 3 was used.
  • Microneedle D Microneedle not containing PEDF: This composition 1 was used.
  • the microneedles are frustoconical with a root diameter of 0.2 mm, a tip diameter of 0.04 mm, and a length of 0.8 mm, arranged in a grid at intervals of 0.6 mm, and are 1 cm 2 circular patch type arrays. There were 244 microneedles. The back of the array was lined with an adhesive sheet in which an acrylic adhesive was applied to one side of a circular PET film having a diameter of 2 cm.
  • a hair loss mouse was created as a model animal as follows. C57BL6 / J mice (purchased from Claire), 6 to 8 weeks old and weighing 18 to 20 g, were bred for 10 weeks under conditions free of specific pathogens. The breeding method is “the thermae animal ethics committee or the US Department of Agriculture (USDA)“ the ”. It was carried out according to the protocol permitted in accordance with the guidelines of Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.
  • mice were allowed to eat a low-protein, high-fat choline-deficient diet from the start of the study.
  • the composition of this choline-deficient diet (unit:% by weight) is: vitamin-free casein 8.000; lard 37.950; granulated sugar 48.375; L-cystine 0.625; vitamin Mix 1.000; mineral Mix 4.000; Oily vitamin mixture 0.050.
  • vitamin Mix has the following composition (unit: mg / g of feed): Vitamin K3 0.3125, Vitamin B1 0.3125, Vitamin B2 0.5000, Vitamin B6 0.3125, DL-pantothenic acid Ca 1.2500, Niacin 1.2500, the rest has granulated sugar
  • Mineral Mix is Composition (unit: mg / 100 g of feed): Ca (H 2 PO 4 ) H 2 O 585.000, lactic acid Ca 1,328.000, Fe citrate 118.800, MgSO 4 ⁇ 7H 2 O 548.000, K 2 HPO 4 959.200, NaH 2 PO 4 ⁇ 2H 2 O
  • the oily vitamin mixture has the following composition (unit: mg / 100 g of feed): Vitamin A (500,000 IU / g) 2.5000, Vitamin D3 (500,000 IU) / G) having 0.6250, vitamin E 25.0000, and peanut oil 21.8750.
  • mice Each of the mice was divided into the following 4 groups of 5 mice, and the following administration test was conducted.
  • One group Administered microneedle A and fed a choline-deficient diet;
  • Two groups Administered microneedle C and fed a choline-deficient diet;
  • 3 groups Administered Macroclone B and fed a choline-deficient diet;
  • 4 groups Administered microneedle D and fed a choline-deficient diet;
  • mice On the test start date (day 0), each group of mice was given one microneedle to the epilation skin. Thereafter, the administration was continued twice a week while eating a choline-deficient diet, and after 6 weeks, the hair amount test of the administration part was evaluated by measuring the weight of the collected hair. The evaluation results are shown in Table 3.
  • microneedle arrays the peptide is uniformly dissolved in all of the needle portion and the substrate portion.
  • the obtained microneedle array was lined with a circular protective bandage having a diameter of 2 cm.
  • the microneedle array was administered to the shaved skin of a male rat together with a protective adhesive bandage, it was confirmed by microscopic observation that the needle part was completely dissolved in the skin with three types of microneedles after 1 hour.
  • the microneedle-forming mold used in this test is a Conede type with a recess root diameter of 0.6 mm, a tip diameter of 0.02 mm, and a depth of 0.2 mm, and is arranged in a grid at intervals of 0.6 mm. About 244 pieces are formed per 1 cm 2 .

Abstract

　皮膚表層及び／又は皮膚角質層に折れることなく容易且つ均一に刺入でき、かつ容易に溶解するＰＥＤＦマイクロニードルアレイを提供する。　ＰＥＤＦマイクロニードルアレイは、ＰＥＤＦ及びその活性部分ペプチドの群の中から選択された１若しくは複数の薬物を医薬的に有効量含有させたマイクロニードルから構成される。活性部分ペプチドとして４種類のペプチドが有効であることを示している。ＰＥＤＦ及びその活性部分ペプチドは高価であるためマイクロニードルの先端部分にのみ保持させることが好ましい。マイクロニードルの素材は水溶性高分子、特に多糖類であることが好ましい。このマイクロニードルアレイにより、毛髪の脱毛抑制または発毛促進を誘導することができる。

Description

ＰＥＤＦマイクロニードルアレイ及びその製造方法
　本発明はＰＥＤＦ投与用マイクロニードルアレイに関する。
　医薬品を体内に投入する方法としては内服法、注射法、経皮法などが知られており、それぞれ特徴を有している。内服法は簡単であるが、薬剤によっては吸収効率が悪く、あるいは消化管や肝臓に負担をかける。注射法は効率がよいが、苦痛を伴い、医師等の専門家の手を患わさなければならない。これに対し経皮法は薬物の投与量を時間的にコントロールして薬物局所濃度の一時的増加による苦痛や炎症などの副作用を軽減でき、患者の不安・負担を和らげることができる。
　従来の経皮法は、薬効成分を含む製剤を皮膚表面に塗布又は貼付し、薬物を皮膚や粘膜を透過させて投与していた。しかし、この方法は発汗や外的圧力等により薬物が脱落するほか、体内への異物侵入を抑止する皮膚角質層のバリアー機能のため透過効率が低い欠点があった。
　これらの問題を解決し、皮膚表層及び／又は皮膚角質層の特定の場所に薬効成分を確実に供給する方法として、マイクロニードルが提案された（特許文献１）。マイクロニードルは非常に細いので皮膚表層及び／又は皮膚角質層に刺入した際痛みも出血もなく且つ穿刺創は速やかに閉鎖されるので、皮膚下に薬物を確実に供給する方法として好適である。基板上に複数のマイクロニードルを備えたものをマイクロニードルアレイという。さらにマイクロニードルアレイを皮膚上に固定するための粘着テープ等を備えたものをマイクロニードルパッチという。
　マイクロニードルの材質として、生体内で溶解消失する物質が提案されている（特許文献２）。このようなマイクロニードルに薬物を含有させて皮膚に刺入すると、マイクロニードルは皮膚表層及び／又は皮膚角質層において溶解消失するので、皮膚表層及び／又は皮膚角質層の特定の場所に薬物を確実に供給することができる。
　しかしながらマイクロニードルの機械的強度が小さい場合は皮膚に刺入する際に折れて刺入できず、機械的強度が大きい場合はマイクロニードルが皮膚内で容易に折れず残留させることが困難な欠点があった。これまでいろいろな材質がマイクロニードル素材として提案されている。例えば、マルトース（特許文献２）、ヒアルロン酸（特許文献４、５、６）、デキストラン（特許文献４）、ポリビニルピロリドン（特許文献７）、ゼラチン（特許文献３、５、６）、コラーゲン（特許文献５、６）、キトサン（特許文献５）、蛋白質（特許文献３、４）、生分解性樹脂（特許文献１）を用いたものが公表されている。
　医療用の薬物を含むマイクロニードルは医療用マイクロニードルと呼ばれている。医薬品の中には高価なものが多く、高コスト化を避けるためにはマイクロニードル先端部分にのみ薬剤を含有させる必要がある。薬物をマイクロニードル先端に塗布する塗布法がすでに提案されている（特許文献８）。
　ストレス社会のため近年薄毛人口が増加し、育毛・発毛に対する関心が高まっている。ヘアケア市場にはすでに多くの育毛・発毛剤が上市されている。
　色素上皮由来因子蛋白質（以下「ＰＥＤＦ」と略記する）は優れた脱毛抑制活性及び発毛促進活性を有する（特許文献９）。しかしながら、これを注射法で投与すると薬液の皮内での注入量の一時的急増のため激しい痛みが生じる。
ＰＥＤＦの変異体（特許文献１０～１２）やＰＥＤＦの製造方法（非特許文献１）はすでに知られている。
特表２００２－５１７３００号公報 特開２００３－２３８３４７号公報 特開２００６－３４６１２６号公報 ＷＯ２００６／０８０５０８号公報 特開２００８－２８４３１８号公報 特開２０１０－０２９６３４号公報 特開２０１０－０８２４０１号公報 ＷＯ２００８／０９６７３２号公報 特開２００７－１９７３３０号公報 米国特許第６３１９６８７号公報 ＷＯ０３／０５９２４８号公報 ＷＯ９３／２４５２９号公報
コールドスプリングハーバー研究所(Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ ＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ)編「分子クロニング実験指針（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ）」第２版、コールドスプリングハーバー研究所出版（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）,１９８９年。
　本発明の解決しようとする課題は、ＰＥＤＦないしはその活性部分ペプチドを人体に投与するに際し、内服法・注射法や在来の塗布法より優れた、マイクロニードルを利用する経皮投与法を提供することにある。
　本発明のＰＥＤＦマイクロニードルアレイは、ＰＥＤＦ及びその活性部分ペプチドの群の中から選択された１若しくは複数の薬物を医薬的に有効量含有させたマイクロニードルから構成されていることを特徴とする。
　ＰＥＤＦは高価である。またＰＥＤＦの利用率を高めるためにＰＥＤＦはマイクロニードルアレイのマイクロニードル部分にのみ存在させ、基板部分には含ませないようにマイクロニードルアレイを製造することが好ましい。体内に刺入され、投与されるのはマイクロニードルの先端部分のみで、基板部分はマイクロニードルを支持する部分であって、薬剤投与に直接関係しないからである。
　薬物をマイクロニードルアレイの先端に付着させる方法として、従来薬物をマイクロニードルアレイ先端に塗布する塗布法が知られているが、この方法では薬物がマイクロニードルの皮膚刺入の際剥がれ落ちることが多く、不満足であった。
　マイクロニードル部分にのみ薬剤を含有させる方法として溶着法がある。これはマイクロニードル素材を水溶性とし、その素材もしくは他の水溶性素材からなる水溶液中にＰＥＤＦを溶解させておき、その溶液内にすでに成形されたマイクロニードルアレイの先端を浸すことにより薬物をマイクロニードルアレイ先端部にのみ含有させる方法である。マイクロニードルアレイの先端を薬物溶液に浸したとき、マイクロニードルアレイの先端が部分的に溶解し、薬物溶液が先端に付着したとき一体化し、マイクロニードルの皮膚への刺入に際し薬物含有部分がはがれ落ちることがない。
　溶着法によりマイクロニードルアレイ先端に薬物を効率よく付着させるためには、マイクロニードルアレイ素材と薬物溶液は相溶性があることが好ましい。
　マイクロニードル部分にのみ薬剤を含有させる別の方法として、マイクロニードルアレイを段階的に製造する方法がある。マイクロニードルの形状が穿設された型に、マイクロニードル素材にＰＥＤＦを添加した水溶液を流延し、室温下又は加熱して水分を蒸発して乾燥し、マイクロニードル部分のみを製造する。その上にマイクロニードル素材のみの水溶液を流延して基板を積層した後剥離し、基板上にマイクロニードルを転写する。この方法によってもマイクロニードル部分にのみＰＥＤＦが含有されたマイクロニードルアレイが得られる。
　本発明のＰＥＤＦマイクロニードルアレイは、ＰＥＤＦが水溶性であるため、素材が水溶性の高分子であることが望ましい。水溶性高分子の例としては、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールのような合成高分子、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロースのような半合成高分子、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デキストラン、デキストリン、プロテオグリカンのような多糖類などがあげられる。これらの高分子素材に単糖類、２糖類を添加した混合物からなるマイクロニードルは、マイクロニードルの皮膚内溶解速度が短縮されるという特徴を有するのでより望ましい。
　多糖類を主素材とするマイクロニードルに医薬的に有効量のＰＥＤＦを含有させたものは特に好適に使用できる。
　また、多糖類１００重量部にグルコースを約２０～１００重量部添加した素材にＰＥＤＦを含有させたマイクロニードルは、皮膚内での針溶解性が高まりＰＥＤＦの即溶解性を与えるのでより好ましい。
　マイクロニードルの主成分を構成するヒアルロン酸の分子量は５万以上４００万以下であることが望ましい。ヒアルロン酸の分子量が５万未満であると機械的強度の観点から不都合である。また４００万を超えると水溶液とした際の溶液粘度が高すぎて取扱に不便である。
　本発明のマイクロニードルアレイは、複数の微細なマイクロニードルが基板の表面に形成されてなるマイクロニードルアレイであって、該マイクロニードルの形状は皮膚に刺入しやすく且つ刺入に際し苦痛を伴わないように円錐型、円錐台型又はコニーデ型とした。なお、コニーデ型とは、いわゆる火山型と呼ばれる形状であり、円錐台型の側面が内側方向に湾曲した形状である。
　マイクロニードルの根元直径は細くなると皮膚内に刺入する素材の量が減少すると共に皮膚に刺入する際に折れやすくなり、太くなると皮膚に刺入する際に苦痛を伴うので０．１５～１．０ｍｍが適当である。先端直径は、細くなると（尖っていると）皮膚に刺入する際に折れやすくなり、太くなると皮膚に刺入しにくくなり苦痛を伴うので０．０１～０．０８ｍｍが適当である。
　マイクロニードルの高さは、低くなると皮膚表層及び／又は皮膚角質層の所定位置に薬剤を供給しにくくなり、高くなると皮膚に刺入する際に折れやすくなるので０．１～１．０ｍｍが適当である。又、マイクロニードルとマイクロニードルの間のピッチは、短くなると皮膚に刺入しにくくなり、長くなると面積あたりのマイクロニードルの数が少なくなり、所定の狭い部位に多量の薬剤を供給できなくなるので、０．４～１．０ｍｍが適当である。
　ＰＥＤＦは非特許文献１に記載の方法で、該蛋白質をコードするＤＮＡを発現させることにより産生できるが、購入することもできる。具体的な産生手法は、特許文献９の［００１８］等に記載されている。
　本明細書では、ＰＥＤＦには、ヒトＰＥＤＦと機能的に同等な特性を有するすべてのＰＥＤＦ変異体を含むものとする。ＰＥＤＦ変異体は、例えば特許文献１０～１２に記載されている。
　ヒトＰＥＤＦのアミノ酸配列に対して、１つ又は複数のアミノ酸残基の置換、欠失、及び／又は付加を有するアミノ酸配列を含むＰＥＤＦ変異体であって、かつヒトＰＥＤＦと同等な機能を有するＰＥＤＦの変異体は、好ましい変異体である。ヒトＰＥＤＦと機能的に同等とは、ヒトＰＥＤＦと同等の脱毛抑制活性又は発毛促進活性を有すること、又はヒトＰＥＤＦと同等に毛母細胞を含む毛根部の細胞のアポトーシスを防止し得る機能を有することを意味する（特許文献９［００２０］～［００２２］）。
　また、ヒトＰＥＤＦのアミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列を有する活性部分ペプチドも、ヒトＰＥＤＦと機能的に同等であれば、本発明のマイクロニードルに含有させることができる。本明細書において活性部分ペプチドとは、ＰＥＤＦを化学的ないしは酵素的に分解した多くのフラグメントの中でＰＥＤＦと同様あるいはそれ以上の優れた脱毛抑制性及び発毛促進活性を有するペプチドをいうものとし、そのアミノ酸配列がＰＥＤＦのアミノ酸配列の一部と同等なものをいう。
　脱毛抑制性及び発毛促進活性を確認できた活性部分ぺプチドの例として以下の４種がある。本明細書において、それぞれペプチド１、ペプチド２、ペプチド３、ペプチド４と記載する。
ペプチド１：Ｈｉｓ　Ｌｅｕ
Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｈｅ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｓｐ：ＰＥＤＦの３８１―４００残基に相当する２０残基
ペプチド２：Ｈｉｓ　Ｌｅｕ
Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ａｓｐ：ＰＥＤＦの３８１－３８７残基に相当する７残基
ペプチド３：Ｔｙｒ　Ｈｉｓ
Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｐｒｏ : ＰＥＤＦの３８８－３９３残基に相当する６残基
ペプチド４：Ｐｈｅ　Ｉｌｅ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ａｓｐ：ＰＥＤＦの３９４－４００残基に相当する７残基
　ＰＥＤＦないしは活性部分ペプチドの投与量は、投与対象の年齢、体重、性別、症状、などで適宜決定されうる。通常の投与量は1回あたり０．５μgから１００ｍｇ、好適には１μｇから１０ｍｇである。投与は毎日あるいは数日おきに数ヶ月間投与する。少なければ効果がなく、多すぎれば予期せぬ副作用が起こることが懸念される。マイクロニードルへのＰＥＤＦないしは活性部分ペプチドの充填量は、投与の便を考慮すると投与全量を１枚のマイクロニードルに充填することが望ましい。
　本発明のマイクロニードルアレイの製造方法は、特に限定されず、従来公知の任意の方法で製造されればよい。
　例えば、マイクロニードルの形状が穿設された型に、マイクロニードル素材水溶液を流延し、室温下又は加熱して水分を蒸発して乾燥し、乾燥後基板を剥離する。
　以上のような方法で作製したマイクロニードルアレイを皮膚に数時間適用するためにはマイクロニードルアレイの基板の裏面に粘着性フィルムで裏打ちしてマイクロニードルパッチとすることが好ましい。より具体的には、マイクロニードルアレイは、基板と、基板の片面において該基板と一体に設けられた複数のニードル等を有する。このマイクロニードルアレイの基板の複数のニードルが設けられている面と反対側の面に、基板よりも大きな面積の粘着性フィルムを積層する。それによって、粘着性フィルムによりマイクロニードルアレイを裏打ちして、マイクロニードルパッチとすることができる。このような粘着性フィルムとしては、基材と、基材の片面に粘着剤層が設けられた適宜の粘着性フィルムを用いることができる。このような基材としては、ポリエステルフィルム、ポリエチレンフィルム、ポリウレタンフィルム、ウレタンフォーム、紙などが挙げられる。また、上記粘着剤としては、アクリルエステル、スチレン‐イソプレン系熱可塑性ゴム粘着剤等からなる粘着剤を好適に使用出来る。
　図２は、上記マイクロニードルパッチの一実施形態を略図的に示す断面図である。図２に示すように、マイクロニードルパッチ１は、基板２を有し、基板２の片面に複数のニードル３が一体的に構成されている。また、基板２の反対側の面に、粘着性フィルム４が積層されている。粘着性フィルム４は、基材４ａと、基材４ａの片面に設けられた粘着剤４ｂとを有する。
　ＰＥＤＦ若しくはその活性部分ペプチドを毛髪産生を必要とする部分、例えば頭部に、マイクロニードルにより選択的に供給すれば、脱毛が抑制され、発毛促進活性が現れる。
　マイクロニードルは適度の硬さと折れにくさを有し、しかも皮膚表層及び／又は皮膚角質層において容易に溶解する。このため刺入に際し失敗が少なく、初心者にも使用しやすい。
　本発明のＰＥＤＦマイクロニードルアレイの構成によれば、ＰＥＤＦ若しくはその活性部分ペプチドを毛髪の産生を必要とする部分のみに徐々に供給することができる。
　従来の内服法や注射法では、体内全体にＰＥＤＦが分配供給され、毛髪産生部分の局所濃度が不十分となり、効果が限定的であった。局所的に十分な効果が得られるほどの量のＰＥＤＦを内服あるいは注射により投与すると副作用を生じ、重篤な疾病を誘発する危険があった。
　これに対し毛髪産生を必要とする部分、例えば頭部の多数箇所に微量ずつ分けて注射する方法が考えられるが、ＰＥＤＦ皮下注射はＰＥＤＦ注入量が瞬間的かつ局所的に急上昇するため激痛を伴うことが知られており、このような激痛を伴う注射を多数箇所に、それも反復して適用することは現実的でない。
　一方マイクロニードルによれば、マイクロニードル素材を適切に選択して溶解時間を調節することにより、必要局所に必要量のＰＥＤＦを徐々に供給することができる。従って数日あるいは数週間にわたって断続的に投与することが容易である。
図１は、マイクロニードルアレイの断面図の例である。 図２は、本発明の一実施形態にかかるマイクロニードルアレイとしてのマイクロニードルパッチを示す略図的断面図の図である。
　次に、本発明を詳細に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。本発明で用いたＰＥＤＦ及び各ペプチドは株式会社アップウエルにより作成された。
　本実施例で用いたマイクロニードルの材質とマイクロニードルに含有させたＰＥＤＦをまとめて表１に示す。マイクロニードルの材質組成は、マイクロニードルを構成する各成分の重量比で示す。図１に本実施例のマイクロニードルアレイの断面図の一部分を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　本実施例で用いられているヒアルロン酸はキッコーマンバイオケミファ（株）（旧名（株）紀文フードケミファ）製でその分子量は８０万（商品名：ＦＣＨ－８０）、デキストランは日本バルク薬品製（商品名：デキストラン７０）、ポリビニルピロリドンはＢＡＳＦジャパン製（商品名：コリドン１２ＰＦ）である。また、本発明において分子量とは重量平均分子量であり、ゲルパーミェーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）により測定された量をいう。
　各マイクロニードルアレイは、マイクロニードルの形状が穿設された型に、マイクロニードル素材にＰＥＤＦを添加した水溶液を流延し、室温下又は加熱して水分を蒸発して乾燥してマイクロニードル部分を作成する。表１のＰＥＤＦの重量％は、このＰＥＤＦ添加水溶液中のＰＥＤＦの重量％である。その上にマイクロニードル素材のみの水溶液を流延して基板を積層した後剥離し、基板上にマイクロニードルを転写する。この方法によればマイクロニードルにのみＰＥＤＦが含有されたマイクロニードルアレイが得られ、ＰＥＤＦの利用効率がよい。しかし、ＰＥＤＦの含有を針部のみに限定することは困難で一部は基板にも含浸される。このようにして製造したマイクロニードルを、本明細書では針内均一マイクロニードルと記載する。ＰＥＤＦをより効率的に針先にのみ装填するためには実施例２で述べるような溶着法がさらに適切である。
　マイクロニードルは、根元直径０．２ｍｍ、先端直径０．０４ｍｍ、長さ０．８ｍｍの円錐台状であり、０．６ｍｍ間隔に格子状に配列されており、直径１ｃｍ２の円形パッチ型アレイでありマイクロニードルは２４４個形成されている。
　作製したマイクロニードルアレイのベース部の硬度をＪＩＳ鉛筆硬度測定法により測定した。
　雄性ラット（１２週齢）をネンブタール（３０ｍｂ／ｋｇ）で麻酔後腹部皮膚を剃毛し、上記の各組成のマイクロニードルを１枚の保護絆創膏で裏打ちして投与した。投与時間は２時間であった。また即溶解が期待された本組成３については３０分後に取り出した。取出したマイクロニードルを顕微鏡観察し、先端部の溶解状況を観察した。各マイクロニードルの鉛筆硬度と投与後の観察結果を表２にまとめた。
　この表より、マイクロニードルの組成は多糖類を主素材とすることで良好な結果を得られるが、ビニルピロリドンの割合が多いと硬すぎて針が脆くなることが分かる。また、グルコースを含有する多糖類マイクロニードルの短時間針溶解も確認できる。別の試験結果から多糖類のみからなるマイクロニードルでは30分の皮膚適用では針の溶解性は不十分であることを確認している。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
（溶着法によるＰＥＤＦマイクロニードルアレイの作成と評価）
　前記本組成１の素材の薬物を含まないマイクロニードルを作成した。マイクロニードルアレイは直径１cmの円形パッチであった。また、本組成１のマイクロニードル素材とＰＥＤＦ５ｍｇ及びトレハロース（林原研究所、岡山市）１００μｇを５００μｌの水に溶解した溶液を作成した。溶着法により、すなわち上記マイクロニードルの針の先端部１００μｍを上記水溶液に1秒間浸漬して引き上げ乾燥させ、先端ＰＥＤＦ溶着マイクロニードルアレイを得た。これによりマイクロニードル針部にＰＥＤＦが約１０μg含有される。このような製造法により作成したマイクロニードルを、本明細書では溶着法マイクロニードルと記載する　マイクロニードルアレイの裏面には皮膚への数時間の適用を安定化させるために絆創膏（マイクロポア、３Ｍ社）を直径２．５ｃｍの円形に切り出した粘着フィルムを裏打ちしマイクロニードルパッチを得た。
　このマイクロニードルパッチを雄性ラットに投与したところ、上記と同様マイクロニードルは皮膚内で完全に溶解することを認めた。
（ペプチド１を用いるマイクロニードルアレイの作成と評価）
　前記本組成２の素材の薬物を含まないマイクロニードルを作成した。また本組成２のマイクロニードル素材とペプチド１の５ｍｇ及びトレハロース（林原研究所、岡山市）１００μｇを５００μｌの水に溶解した溶液を作成した。
　溶着法により、すなわち上記マイクロニードルの針の先端部１００μｍを上記水溶液に１秒間浸漬して引き上げ乾燥させ、先端ＰＥＤＦ溶着マイクロニードルアレイを得た。これによりマイクロニードル針部にＰＥＤＦが約１０μｇ含有される。
　マイクロニードルアレイの裏面には皮膚への数時間の適用を安定化させるために絆創膏（マイクロポア、３Ｍ社）を直径２．５ｃｍの円形に切り出した粘着フィルムを裏打ちしマイクロニードルパッチを得た。
　このマイクロニードルパッチを雄性ラット剃毛背部皮膚に投与したところ、マイクロニードルは皮膚内で完全に溶解することを認めた。
（実施例４：ＰＥＤＦの脱毛抑制活性）
４種類のマイクロニードルを以下のように作成した。
マイクロニードルＡ：　ＰＥＤＦ１０μgを含有する針内均一マイクロニードル：本組成１を用いた。
マイクロニードルＢ：　ＰＥＤＦ０．５μgを含有する針内均一マイクロニードル：本組成１のＰＥＤＦ濃度を減少させた組成を用いた。
マイクロニードルＣ：　ＰＥＤＦ１０μgを含有する溶着法マイクロニードル：本組成３を用いた。
マイクロニードルＤ：　ＰＥＤＦを含まないマイクロニードル：本組成１を用いた。
　マイクロニードルは、根元直径０．２ｍｍ、先端直径０．０４ｍｍ、長さ０．８ｍｍの円錐台状であり、０．６ｍｍ間隔に格子状に配列されており、１ｃｍ２の円形パッチ型アレイでありマイクロニードルは２４４個形成されていた。アレイの後ろは直径２ｃｍの円形ＰＥＴフィルムの片面にアクリル粘着剤を塗布した粘着シートで裏打ちした。
　モデル動物として脱毛マウスを以下のように作成した。
６～８週齢の体重１８～２０ｇのＣ５７ＢＬ６／Ｊマウス（クレアより購入）を特定病原体未感染条件下において１０週間飼育した。飼育方法は、久留米大学動物実験倫理委員会もしくは米国農務省（ＵＳＤＡ）の「ｔｈｅ
Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ」のガイドラインに沿って許可されたプロトコルに従って行った。
　コリン欠乏食給餌群では、試験開始日から、マウスに低蛋白高脂肪のコリン欠乏食を自由に摂食させた。このコリン欠乏食の組成（単位は質量％）は、ビタミンフリーカゼイン８．０００；ラード３７．９５０；グラニュー糖４８．３７５；Ｌ－シスチン０．６２５；ビタミンＭｉｘ１．０００；ミネラルＭｉｘ４．０００；および油性ビタミン混合物０．０５０である。ここで、ビタミンＭｉｘは、以下の組成（単位はｍｇ／飼料ｇ）：ビタミンＫ３
０．３１２５、ビタミンＢ１ ０．３１２５、ビタミンＢ２ ０．５０００、ビタミンＢ６ ０．３１２５、ＤＬ－パントテン酸Ｃａ １．２５００、ナイアシン １．２５００、残りはグラニュー糖を有し、ミネラルＭｉｘは、以下の組成（単位はｍｇ／飼料１００ｇ中）：Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）Ｈ２Ｏ　５８５．０００、乳酸Ｃａ
１，３２８．０００、クエン酸Ｆｅ　１１８．８００、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５４８．０００、Ｋ２ＨＰＯ４　９５９．２００、ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ
４５３．６００、およびＮａＣｌ １７４．０００を有し、油性ビタミン混合物は、以下の組成（単位はｍｇ／飼料１００ｇ中）：ビタミンＡ（５０万ＩＵ／ｇ）２．５０００、ビタミンＤ３（５０万ＩＵ／ｇ）０．６２５０、ビタミンＥ　２５．００００、およびピーナッツ油２１．８７５０を有する。
　それぞれマウス５ひきずつの下記の４群に分け、次のような投与試験を行った。
１群．マイクロニードルＡを投与し、コリン欠乏食を給餌した；
２群．マイクロニードルＣを投与し、コリン欠乏食を給餌した；
３群．マククロニードルＢを投与し、コリン欠乏食を給餌した；
４群．マイクロニードルＤを投与し、コリン欠乏食を給餌した；
　試験開始日（０日目）に、各群のマウスにそれぞれのマイクロニードル１枚を脱毛皮膚に投与した。その後もコリン欠乏食を摂食させつつ２回／週に投与を継続し６週間後に投与部の毛髪量試験を毛髪採取重量測定により評価した。評価結果を表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　表３から明らかなように、１群、２群、３群ともに育毛効果が確認された。１群２群はＰＥＤＦ含量が多いので育毛効果も大きかった。
　室温で水１ｇにヒアルロン酸ナトリウム（キッコーマンバイオケミファ（株）製、商品名ＦＣＨ－ＳＵ、培養由来、重量平均分子量１０万）１００ｍｇおよびペプチド２の１ｍｇを溶解しヒアルロン酸水溶液を得た。本水溶液を下記のディメンジョンを有するマイクロニードル形成鋳型に厚さ２ｍｍに流延して乾燥させ、針高さ２００μｍのコニーデ型マイクロニードルを有する直径１ｃｍのマイクロニードルアレイを得た。同様にしてペプチド３、ペプチド４に関してもマイクロニードルアレイを得た。これらのマイクロニードルアレイは針部および基板部すべてに均一にペプチドが溶解している。得られたマイクロニードルアレイを直径２ｃｍの円形の保護絆創膏で裏打ちした。マイクロニードルアレイを保護絆創膏と共に雄性ラットの剃毛皮膚に投与したところ１時間後には針部は３種マイクロニードルとも完全に皮膚内溶解していることを顕微鏡観察により確認した。
　本試験に使用したマイクロニードル形成鋳型は凹部根元の直径が０．６ｍｍ、先端直径が０．０２ｍｍ、深さ０．２ｍｍのコニーデ型であり、０．６ｍｍ間隔に格子状に配列されており、１ｃｍ２あたり約２４４個形成されている。

Claims (12)

  1. 　ＰＥＤＦ及びその活性部分ペプチドの群の中から選択された１若しくは複数の薬物を医薬的に有効量含有させたマイクロニードルから構成されるＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  2. 　前記活性部分ペプチドがペプチド１、ペプチド２、ペプチド３及びペプチド４の群の中から選択された１若しくは複数のペプチドであることを特徴とする請求項１のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  3. 　前記ＰＥＤＦまたはその活性部分ペプチドは前記マイクロニードルの先端部分にのみ存在していることを特徴とする請求項1又は請求項２に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  4. 　前記ＰＥＤＦまたはその活性部分ペプチドを含有するマイクロニードルは、溶着法により作成したことを特徴とする請求項３に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  5. 　マイクロニードルの素材が水溶性高分子であることを特徴とする請求項1ないし請求項４のいずれか1項に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  6. 　前記水溶性高分子が水溶性の多糖類であることを特徴とする請求項５に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  7. 　前記水溶性の多糖類が、ヒアルロン酸であることを特徴とする請求項６に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  8. 　前記ヒアルロン酸の分子量が５万以上、４００万以下であることを特徴とする請求項７に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  9. 　マイクロニードルが水溶性高分子１００重量部と単糖類ないしは２糖類の２０～１００重量部との混合物からなる素材とすることを特徴とする請求項1ないし請求項４のいずれか1項に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  10. 　前記マイクロニードルの形状が円錐型、円錐台型又はコニーデ型であり、その根元直径は０．１５～１．０ｍｍ、先端直径は０．０１～０．０８ｍｍ、高さは０．１～１．２ｍｍであり、マイクロニードルとマイクロニードルのピッチが０．４～１．０ｍｍであることを特徴とする請求項１ないし請求項９のいずれか１項に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイ。
  11. 　マイクロニードルアレイの後ろを片面に粘着剤を塗布した粘着性支持体シートで裏打ちしたことを特徴とする請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のＰＥＤＦマイクロニードル投与システム
  12. 　請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のＰＥＤＦマイクロニードルアレイを無傷の皮膚へ適用し、毛髪の脱毛抑制または発毛促進を誘導することを特徴とする毛髪再生方法。
     
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