WO2012122618A1

WO2012122618A1 - Composição imunogênica para modulação do sistema imune e seu uso, método de tratamento e prevenção de doenças, método para induzir a regeneração celular e método para recondução da resposta imune

Info

Publication number: WO2012122618A1
Application number: PCT/BR2012/000072
Authority: WO
Inventors: Alexandre Eduardo NOWILL
Original assignee: Nowill Alexandre Eduardo
Priority date: 2011-03-17
Filing date: 2012-03-19
Publication date: 2012-09-20
Also published as: EP2687227B1; PT2687227T; US9566330B2; JP2017132776A; US20140037716A1; RU2013143400A; CL2013002712A1; AU2012229902A1; MX2013010669A; CA2837348A1; RU2678317C2; AU2012229902B2; JP6181636B2; ES2699264T3; WO2012122618A8; JP2014508783A; BR112013023773B1; EP2687227A1; KR102008535B1; EP2687227A4

Abstract

A presente invenção refere-se a composições imunogênicas para modulação do sistema imune que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de dois ou mais agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) e um ou mais dentre um veículo, excipiente, diluente ou solvente fisiologicamente aceitáveis. As composições imunogênicas da presente invenção são utilizadas na manufatura de medicamentos para prevenção e/ou tratamento de e na prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas. A presente invenção refere-se ainda a métodos para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino. Por último a presente invenção refere-se a métodos para recondução da resposta imune em um animal, particularmente humanos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para: "COMPOSIÇÃO IMUNOGÊNICA PARA MODULAÇÃO DO SISTEMA IMUNE E SEU USO, MÉTODO DE TRATAMENTO E PREVENÇÃO DE DOENÇAS, MÉTODO PARA INDUZIR A REGENERAÇÃO CELULAR E MÉTODO PARA RECONDUÇÃO DA RESPOSTA IMUNE".

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a composições imunogênicas para modulação do sistema imune que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de dois ou mais agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) e um ou mais dentre um veiculo, excipiente, diluente ou solvente fisiologicamente aceitáveis.

Preferencialmente as composições da presente invenção compreendem agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados do grupo consistindo em: (A) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias; (B) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus; (C) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras; (D) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários; (E) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a parasitas pluricelulares e/ou (F) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a príons.

Constitui outro aspecto da presente invenção o uso das composições imunogênicas na manufatura de medicamentos para prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas.

As composições imunogênicas da presente invenção são também utilizadas diretamente na prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas.

A presente invenção refere-se ainda a métodos para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino.

Por último a presente invenção refere-se a métodos para recondução da resposta imune em um animal, particularmnete humanos.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Da descoberta dos antibióticos e outras drogas

A partir da descoberta pioneira dos antibióticos, na segunda metade do século 20, novos antibióticos, antibióticos semi sintéticos e novos quimioterápicos com atividade antimicrobiana, passaram a ser desenvolvidos em larga escala, contra a maioria das bactérias extracelulares e intracelulares. Estes desenvolvimentos mudaram a história da medicina, permitindo alcançar um amplo espectro de cura, para a grande maioria das doenças infecciosas bacterianas, que flagelavam a humanidade.

Deste modo, a descoberta dos antibióticos foi um marco importante, um divisor de águas, pois as infecções puderam ser combatidas e curadas, de maneira especifica e com uma relação de causa e efeito nitida e mensurável, quando já estabelecidas. Esta descoberta ampliou sobremaneira a capacidade de cura da medicina, com enorme impacto positivo sobre a saúde do ser humano e sobre sua esperança de tempo de vida. A descoberta dos antibióticos, na evolução e na cura das doenças, influenciou profundamente a pesquisa e o modo de pensar dos pesquisadores a partir do sucesso alcançado por este modelo experimental (Reeves G, Todd I. Lecture notes on immunology. 2 ed: Blackwell Scientific Publications , 1991; Neto VA, Nicodemo AC, Lopes HV. Antibióticos na prática médica. 6 ed: Sarvier, 2007; Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiologia Médica. 5 ed: Mosby, 2006; Trabulsi LR, Alterthum F. Microbiologia. 5 Ed: Atheneu Editora, 2008) .

Aos antibióticos sucedeu-se o desenvolvimento e o uso das drogas antifúngicas , antiparasitárias e antivirais. Desenvolveram-se também as drogas antineoplásicas , citotóxicas e citostáticas contra os tumores malignos, as drogas anti-inflamatórias , antialérgicas e imunossupressoras (anti linfócitos, anti leucócitos neutralizadoras do sistema imune) de natureza hormonal e não hormonal, com uma enorme gama de aplicações, como nas doenças infecciosas, nas doenças inflamatórias de qualquer origem, nas doenças autoimunes, genéticas, nas doenças vasculares, nas doenças alérgicas, nos traumas, nas doenças neoplásicas, nas doenças hormonais, nas doenças degenerativas, entre outras.

Assim, as novas drogas trouxeram uma enorme capacidade de intervenção para a área médica, com inúmeros benefícios, com curas definitivas, parciais, com prolongamento do tempo de vida em doenças incuráveis, porém com uma enorme morbidade, por efeitos colaterais devido a sua falta de especificidade em relação à fisiopatologia das doenças tratadas.

Da imunidade inata

A imunidade inata, além de impedir à entrada de microorganismos e impedir o seu estabelecimento, tem outra função vital recentemente descoberta: a discriminação entre "self" e não "self" pelo reconhecimento padrão e a vinculada capacidade de dar o alarme e o comando para iniciar ou inibir uma resposta imunológica integrada contra um microorganismo invasor, ou para deter, reparar ou inibir uma situação de destruição, ou de auto agressão para o organismo, como por exemplo, nos traumas, nas doenças autoimunes e nas doenças alérgicas, entre outras. Esta dupla capacidade era anteriormente, erroneamente, atribuída exclusivamente à imunidade adaptativa. A imunidade inata, através de receptores próprios, reconhece o micro organismo patogênico invasor, ou as células neoplásicas autologas ou mesmo alogênicas, ou os transplantes alogênicos ou heterologos como não "self", ou seja, identificando-o como não pertencente ao organismo. A partir de então, dá o sinal de alarme e desencadeia conjuntamente a resposta imunológica inata e adaptativa capaz de eliminá-los ou suprime uma resposta deletéria para o organismo humano ou animal (Goldsby RA, Kindt TJ, Osborne B. Imunologia de kuby. 6 ed: ARTMED; 2008, 704 p; Janeway C, Travers P, Walport M, Slhlomchik MJ. Immunobiology five. 5 ed: Garland Pub.; 2001. 732 p.; Voltarelli JC . Imunologia clinica ha pratica medica: atheneu editora; 2009; Janeway CA, Jr . , Medzhitov R. Innate immune recognition. Annual review of immunology. 2002;20:197-216. Epub 2002/02/28; Matzinger P. The danger model: a renewed sense of self. Science. 2002;296 (5566) :301-5. Epub 2002/04/16; Steinman RM, Banchereau J. Taking dendritic cells into medicine. Nature. 2007; 449 (7161) : 419-26. Epub 2007/09/28.; Beutler BA. TLRs and innate immunity. Blood. 2009; 113 (7 ): 1399-407. Epub 2008/09/02; Moresco EM, LaVine D, Beutler B. Toll-like receptors. Current biology : CB . 2011 ; 21 ( 13 ) : R488-93. Epub 2011/07/12) .

O reconhecimento padrão, não "Self", de um germe invasor, de uma célula neoplásica, ou de uma célula alterada ou transplantada é realizado pelas células sentinelas, representadas pelas células epiteliais, pelas células das mucosas e pelas células do estroma, como os pericitos, as células dendriticas, os macrófagos e os fibroblastos, dentre outros. Estas células, estrategicamente distribuídas por todo organismo, possuem PRRs (Pattern Recognition Receptors) e os DRRs (Danger Recognition Receptors) , que são respectivamente receptores capazes de reconhecer a) moléculas de identificação padrão, características de uma vasta gama de microorganismos, e b) determinados padrões de substancias químicas e físicas ditas inertes e alterações de stress metabólico, como liberação de radicais livres e alterações químicas teciduais, provocadas por radiações ionizantes, ou por substâncias químicas, entre outras.

Os PRRs não discriminam um microorganismo específico individual e sim a presença microorganismos, diferentes do organismo humano. Cada receptor PRR pode ligar-se a vários patógenos diferentes, reconhecendo como PAMPs (Pathogen Associated Molecular Patterns) carboidratos , os lipídios, os peptídeos e os ácidos nucléicos, provenientes de bactérias, vírus, fungos ou parasitas, que não são encontradas no corpo humano ou animal.

Os DRRs descriminam que existe uma agressão tecidual, uma situação de perigo provocada por agentes ditos não vivos ou inertes. Os DRRs identificam DAMPs (Danger associated Molecular Patterns) associados a situações de agressão tecidual por substancias tóxicas, radiações, ou por traumatismos, que geram stress metabólico, liberação de radicais livres e alterações químicas teciduais, reconhecidas por estes receptores. (Janeway C, Travers P, alport M, Slhlomchik MJ. Immunobiology five. 5 ed: Garland Pub.; 2001. 732 p.; Matzinger P. The danger model: a renewed sense of self. Science. 2002 ; 296 ( 5566) : 301-5. Epub 2002/04/16; Beutler BA. TLRs and innate immunity. Blood. 2009;113 (7) : 1399-407. Epub 2008/09/02; Moresco EM, LaVine D, Beutler B. Toll-like receptors. Current biology: CB. 2011;21 (13) :R488-93. Epub 2011/07/12).

Desta forma, as células sentinelas, através dos seus PRRs e dos seus DRRs, possuem papel primordial na discriminação do que é pertencente ("Self") e do que não é pertencente (não "Self") e no desencadeamento da inflamação e da resposta imune, via reconhecimento dos PAMPs dos patógenos invasores e dos DAMPs provocados pelas células neoplásicas e substancias tóxicas ou alterações por traumatismos, que levem à uma situação de perigo real para o organismo humano e animal.

Imediatamente, estas células sentinelas ativadas dão o sinal de alarme, desencadeando a reposta imune inata, através do sistema de tradução de sinal NF-kB (Nuclear Factor-kB) , que leva a secreção das citocinas pró- inflamatórias e o sistema de tradução de sinal IRF, que produz os Intérferons Tipo I alfa e beta. Estas citocinas em conjunto, atuando sobre as células e vasos, provocam um processo inflamatório local, para conter inicialmente o agente invasor, autólogo (células tumorais) , heterólogo (microorganismos, prions, enxertos e transplantes) ou alogênico (enxertos e transplantes) , ou reparar situações de perigo. Esta contenção se dá através dos anticorpos, pré existentes, das proteínas da fase aguda opsonizantes e através dos leucócitos e macrófagos, que passam a fagocitar e a destruir os microorganismos extracelulares e intracelulares respectivamente, ou a eliminar os outros agentes etiológicos de qualquer natureza.

Na gota, na silicose, nas agressões químicas, nos granulomas de corpo estranho, nos traumas, o processo inflamatório é formado para eliminar se possível o agente agressor e depois induzir a cicatrização e a regeneração teciduais. Quando o agente agressor não é eliminado a inflamação se pereniza e provoca uma doença inflamatória crónica incurável ou incontrolável, estável ou progressiva, que compromete a vida ou a saúde dos pacientes.

Interação e integração da imunidade inata com a imunidade adaptativa Simultaneamnete, no local da invasão, da agressão e da inflamação, as células sentinelas da imunidade inata com função APC (Antigen Presenting Celis) , tais como as células dendriticas e macrófagos, , pinocitam e fagocitam os microorganismos, ou as células tumorais, ou as células transplantadas, entre outros agentes agressores e processam os seus antigenos. Estas células APC pulsadas pelos antigenos migram para os linfonodos regionais e os ativam. As células APC nos linfonodos reativos, ativados e amadurecidos apresentam os antigenos para os linfócitos, secretam citocinas e deste modo induzem, coordenam, polarizam, amplificam e mantém uma resposta imunológica adaptativa especifica para o germe invasor, ou para a célula neoplásica, ou para as células transplantadas, ou para outro agente agressor, permitindo o seu combate e a sua eliminação, quando factível e a consequente cura da infecção, ou da inflamação e a reparação e a regeneração ou cicatrização das lesões.

Assim, estes mecanismos imunológicos combatem doenças através das respostas inatas e adaptativa de forma integrada e sinérgica, realizada pelas células sentinelas, sentinelas de função APC e efetores da imunidade inata, celulares e moleculares em conjunto com os efetores celulares e moleculares da imunidade adaptativa que são respectivamente os linfócitos, as citocinas e os anticorpos.

Ou seja, a interação das duas imunidades, inata e adaptativa, no contexto de uma infecção ou resposta imunológica contra um agente agressor de qualquer natureza permite combater a doença de forma integrada e sinérgica. A integração das duas ocorre inicialmente pela ação das células da imunidade inata com função APC, como as células dendriticas e os macrófagos, mas principalmente pela atuação das células dendriticas, pois são as únicas que são capazes de iniciar uma resposta imunológica adaptativa primária contra um agente infeccioso ou parasitário, protegendo efetivamente o organismo.

Como foi assinalado os macrófagos também funcionam como células APC, mas estão mais especializados e envolvidos como parte da alça efetora, na fagocitose e eliminação de microorganismos. Os linfócitos B, quando maduros, também são células APC e sua ação mais conhecida é a da apresentação dos antigenos para os linfócitos T, dentro do contexto da colaboração dos dois linfócitos, para a produção de anticorpos, contra antigenos T dependente, da resposta anticorpo secundária. Os macrófagos, como outras células mielóides, estão também envolvidos na supressão da resposta imunológica no câncer e nas infecções crónicas incuráveis. Nestes casos a sua atuação é desfavorável à defesa do organismo, porque suprimem a resposta imunológica e criam a facilitação tumoral. A doença tumoral maligna, tem como característica inicial provocar uma inflamação silenciosa, imperceptível e no final se tornar extremamente pro inflamatória e sintomática através do perfil TH17 tissular inflamatório, que geralmente leva o paciente a um sofrimento prolongado.

Quando as moléculas de co-estimulação, não estão expressas na superfície das células APC, pela ausência do sinal de alarme caracterizado pela não ativação dos PRRs pelos PAMPs e DAMPs, ocorre apenas o primeiro sinal, dado pelo TCR. Após a ligação do TCR com o antígeno, na ausência do segundo sinal, o linfócito T torna-se especificamente tolerante ao antígeno apresentado e aborta a resposta imune .

Por outro lado, a molécula CD 40L dos linfócitos T ativados ao se ligar na molécula CD40 das células APC aumentam de maneira importante a expressão das moléculas CD80 e CD86, potencializando a resposta em curso, que desta forma ocorre somente quando a resposta T adaptativa já está engajada na defesa do organismo. O terceiro sinal dado pelas citocinas como a IL1, só é dado pelas células APC, após a ligação das moléculas de co-estimulação e emissão do segundo sinal. A IL1 secretada pelas células APC atua nos linfócitos e leva à expressão completa do receptor para a IL2 e à produção desta citocina pelo linfócito virgem ou memória engajado na resposta iniciando à expansão clonal.

Portanto a ativação da imunidade inata pelos patógenos é a chave para desencadear o segundo e o terceiro sinal e ocorrer uma imunidade potencialmente efetiva, através da ativação completa dos linfócitos T engajados na resposta. Sem a ocorrência do segundo e do terceiro sinal, a resposta é abortada e gera-se uma tolerância especifica ao antígeno apresentado.

Ao mesmo tempo em que os neutrófilos, monócitos e macrófagos iniciam o combate, as bactérias e a outros agentes etiológicos através da ligação dos PAMPS com os PRRs nas células apresentadoras de antigenos (APC) , ativam as células dendríticas e os macrófagos, locais e recém- chegados. Estas células fagocitam, pinocitam as bactérias e os antigenos bacterianos, processando-os e iniciando o seu processo de maturação. As células dendríticas ativadas e em maturação, agora migram para os linfonodos regionais para apresentar os antigenos e iniciar a resposta imunológica contra o agente invasor.

As células APC maduras pulsadas pelos antígenos, principalmente as células dendriticas, no linfonodo, colaboram com os linfócitos T e B e iniciam a resposta adaptativa. As células dendriticas são as células mais potentes para a apresentação dos antigenos e as únicas células APC capazes de ativar um linfócito T CD4 virgem e iniciar uma resposta imunológica nova.

Após um período de aproximadamente sete dias, no linfonodo, pela colaboração entre linfócitos T CD4 virgens, que se tornam T CD4 Th2, com os linfócitos B e com as células dendriticas apresentadora dos antígenos inicia-se a diferenciação dos linfócitos B específicos sensibilizados. Estas células B, agora ativadas, reconhecem os antígenos bacterianos pelas imunoglobulinas de superfície, após o contato com estes antígenos, proliferam, maduram e diferenciam-se em plasmócitos que agora passam a secretar os anticorpos específicos contra esta bactéria. As infecções de todos os tipos, bacterianas, virais, fúngicas e parasitárias podem, em geral, na fase aguda, evoluir para a cura completa, com regeneração e cicatrização, ou para a cura com sequela. Podem ainda evoluir para a cronicidade sem cura, com ou sem controle da doença, para a cronicidade com cura, com ou sem sequela, ou para o óbito.

Polarização da resposta imune

Os perfis imunológicos conhecidos e induzidos pelas células dendriticas pelo contato direto e indireto com as diferentes citocinas e gerados pelas células T CD4 são de quatro tipos:

a) perfil Thl celular, que gera a imunidade celular mediada por células b) perfil Th2 humoral, que gera a imunidade humoral mediada pelos anticorpos

c) perfil Thl7 tissular ou inflamatório, que gera a imunidade tissular inflamatória, mediada também por células e citocinas, que induzem uma importante inflamação para a eliminação de certos patógenos; e

d) perfil Treg/Trl que suprime a resposta imune e a controla,, inibindo os outros três perfis acima descritos, assegurando a volta do organismo ao estado de equilíbrio.

e) Perfis ainda não completamente estabelecidos, como Tfh (folicular Helper) , da resposta humoral, perfil Th9 para certos parasitas, ou ainda outros perfis que venham a ser descobertos .

Deste modo, os vários perfis asseguram a defesa do organismo e a eliminação de agentes etiológico heterologos (infecciosos) invasores e autólogos colonizadores (neoplasias) . O último perfil assegura o término da resposta imune, o equilíbrio, a regeneração, a volta segura à normalidade e impede a auto-agressão e a alergia sendo, portanto, vital para a saúde e para a preservação da espécie humana e animal, tanto quanto os outros perfis.

O fenómeno da polarização da reposta imunológica é definido como a predominância de um determinado perfil imunológico como Thl ou Th2 em detrimento de outros perfis que se tornam secundários ou nulos. Este fenómeno acontece de acordo com o tipo de agressão sofrida pelo organismo. Ou seja, de acordo com o tipo de infecção, patologia, e fase da infecção ou fase da patologia, predomina um tipo de resposta imune, podendo a mesma ser celular, humoral, tissular ou imunoreguladora, enquanto os outreos tipos de resposta imune são inibidos, resultando no fenómeno da polarização .

Por definição, na polarização predomina um perfil, porém os outros perfis não dominantes são também necessários, expressos e ajudam de maneira complementar a eliminação da doença. Por exemplo, na tuberculose é o aparecimento das células Thl7 no pulmão que permite que as células Thl se estabeleçam e possam levar a cura desta infecção no parênquima pulmonar (Stockinger, B. and Veldhoen, M. Differentiation and function of Thl7 T cells. Current Opinion in Immunology, 19 (3), pp. 281-286. 2007). Nas infecções virais, as células CTL de perfil Thl destroem as células infectadas pelos vírus, para eliminar os vírus. Porém, os anticorpos são necessários para impedir que os vírus infectem as outras células sãs e deste modo impeçam a propagação da infecção. O conjunto dos dois perfis coordenados é essencial para a cura de certas infecções virais. Certas infecções intestinais por bacilos Gram Negativos extracelulares necessitam, para a sua cura, na fase final, além do perfil Th2, a geração de um perfil Thl7 suplementar, capaz de gerar uma forte inflamação, que é necessária para a eliminação deste tipo de bactéria.

Em conclusão, como as células dendríticas são as únicas células APC profissionais capazes de iniciar uma resposta imunológica adaptativa primária e são as mais potentes para desencadear uma resposta imunológica secundária específica, de qualquer perfil, são elas então que comandam a interação e integração da imunidade inata com a imunidade adaptativa, para produzir uma resposta imune eficaz capaz de curar uma doença. As células dendriticas em colaboração com as outras células APC e sentinelas e em contato com os diferentes agentes agressores, em diferentes estados funcionais, nos sítios de inflamação, nos linfonodos, no baço e nas mucosas, são capazes de induzir, coordenar, polarizar e amplificar a resposta imunológica adaptativa, primária e secundária, específica para os peptídeos dos patógenos invasores, por exemplo, que, neste caso, é a mais adequada para a eliminação da infecção em curso.

Portanto, as células dendriticas e as outras células APC, são as células chave da resposta imune inata, pois elas avaliam a natureza do agente etiológico heterólogo e autólogo, ou seja, o tipo de patógeno ou células colonizadoras e auxiliado pelas outras células sentinelas, dimensionam e avaliam o tamanho da agressão heteróloga ou autóloga, a sua extensão, a sua intensidade e agressividade, além de comandarem a resposta adaptativa com o perfil e com a intensidade necessária para a eliminação do patógeno.

Após a diferenciação, pode ocorrer uma rediferenciaçao, induzida pelo microambiente e/ou pelo tipo de antígeno ou sua apresenta; áo, em que um perfil Thl ou Th2 pode ser trocado por um perfil inflamatório ou por um perfil imunossupressor ou vice-versa. Esta extrema plasticidade do sistema imune para se diferenciar ou se rediferenciar em qualquer direção aponta para uma janela estratégica, para a manipulação do sistema imune, durante uma infecção, quando a direção tomada na polarização, não está sendo a melhor para levar à cura do processo infeccioso ou da neoplasia. Como exemplo ilustrativo, temos o que acontece numa infecção grave ou numa septicemia, quando a massiva inflamação provocada pela grande quantidade de microorganismos que tocam as células sentinelas em todo o organismo, induz ainda um perfil Thl7, que por sua vez aumenta a mais a inflamação, e portanto passa a ser prejudicial levando à destruição tecidual, ao invés de induzir à cura. Nestes casos o perfil Thl7, pela destruição tecidual e pela amplificação da inflamação, é o principal responsável pela geração das complicações clinicas graves como a da SARA (síndrome da angustia respiratória do adulto) , do pulmão de choque, da insuficiência renal, ou do choque, que comprometem a cura.

A rediferenciação da polarização para o perfil Thl ou Th2, com inibição da inflamação massiva é o caminho lógico e estratégico de uma imunoterapia desenhada ou elaborada para tentar reverter este tipo de situação dramática e letal, durante uma infecção grave ou durante uma sepsis, que tem uma importante mortalidade e morbidade e para os quais a antibioticoterapia e os outros antimicrobianos , nos moldes atuais, como modalidade única anti-infecciosa tem resultados decepcionantes. O mesmo exemplo se aplica às infecções graves bacterianas intra celulares, fúngicas, virais e infestações parasitárias, com destruição tecidual extensa e com inflamação massiva, geralmente de mau prognóstico .

Do uso de adjuvantes para estimular a resposta imune

O organismo humano e animal geralmente não produzem anticorpos contra proteínas solúveis, sendo necessário o uso de adjuvantes ditos inespecíficos ou não relacionados, para obter-se a resposta imunológica desejada. Estes adjuvantes usados desde os primórdios da imunologia, nas imunizações e nas aplicações de vacinas, eram e são constituídos de partes de microorganismos, óleos minerais e outras substâncias que ativavam a imunidade inata, que então dá o sinal de alarme e o comando necessário ao desenvolvimento da resposta imune desejada à proteína ou à vacina em questão (GOLDSBY RA, KINDT TJ, OSBORNE BA. IMUNOLOGIA DE KUBY. 6 ed: ARTMED; 2008. 704 p) ; (Janeway C, Travers P, alport M, Slhlomchik MJ. Immunobiology five. 5 ed: Garland Pub.; 2001. 732 p.); (VOLTARELLI JC . IMUNOLOGIA CLINICA NA PRATICA MEDICA: ATHENEU EDITORA; 2009); (Janeway CA, Jr., Medzhitov R. Innate immune recognition. Annual review of immunology. 2002;20:197-216. Epub 2002/02/28.); (Matzinger P. The danger model: a renewed sense of self. Science. 2002 ; 296 ( 5566) : 301-5. Epub 2002/04/16.): (Steinman RM, Banchereau J. Taking dendritic cells into medicine. Nature. 2007 ; 449 ( 7161 ): 19-26. Epub 2007/09/28.); (Beutler BA. TLRs and innate immunity. Blood. 2009 ; 113 ( 7 ): 1399-407. Epub 2008/09/02.); (Moresco EM, LaVine D, Beutler B. Toll- like receptors. Current biology : CB. 2011 ; 21 ( 13 ) : R488-93. Epub 2011/07/12) .

Cabe observar, que o uso dos adjuvantes para imunizações, apesar de ser um recurso dos mais antigos e ainda atual, extremamente usado e essencial para as vacinações e para os estudos da imunologia, era considerado apenas como um efeito inespecífico útil. Não se vislumbrou por mais de um século, através dele, o papel fundamental da imunidade inata na discriminação do que é "Self" e não "Self" e na vinculada capacidade, única e fundamental, para a sobrevivência da espécie humana e animal: a de dar o sinal de alarme e o comando para iniciar ou não iniciar, ou inibir uma resposta imunológica protetora ou curadora inata e adaptativa integradas (GOLDSBY RA, KINDT TJ, OSBORNE BA. IMUNOLOGIA DE KUBY. 6 ed: ARTMED; 2008. 704 p); (Janeway C, Travers P, Walport M, Slhlomchik MJ. Immunobiology five. 5 ed: Garland Pub.; 2001. 732 p. ) ; (VOLTARELLI JC. IMUNOLOGIA CLINICA NA PRATICA MEDICA: ATHENEU EDITORA; 2009); (Janeway CA, Jr., Medzhitov R. Innate immune recognition. Annual review of immunology. 2002;20:197-216. Epub 2002/02/28.); (Matzinger P. The danger model: a renewed sense of self. Science. 2002;296 (5566) : 301-5. Epub 2002/04 /16.) : (Steinman RM, Banchereau J. Taking dendritic cells into medicine. Nature. 2007 ; 449 ( 7161 ): 419-26. Epub 2007/09/28.); (Beutler BA. TLRs and innate immunity. Blood. 2009 ; 113 ( 7 ): 1399-407. Epub 2008/09/02.); (Moresco EM, LaVine D, Beutler B. Toll- like receptors. Current biology : CB. 2011 ; 21 ( 13 ) : R488-93. Epub 2011/07/12) .

Dos tratamentos anti-infeciosos e anti-neoplásicos da atualidade

Um grande número de materiais médicos, horas de trabalho, medicamentos e leitos hospitalares poderiam ser mais bem utilizados com uma terapia em que se avaliassem, priorizassem e otimizassem as variáveis que interferem no deslocamento do equilíbrio biológico em prol do paciente e modulassem o seu sistema imune, diminuindo suas ineficiências e possibilitando um grande número de altas médicas e em menor tempo. O estado da técnica ainda não apresentou alternativas para realizar intencionalmente uma repolarização do sistema imune em tempo real, ou seja, em tempo de alterar ou reverter uma resposta a uma doença ou enfermidade corrente, se possível em tempo de melhorar a qualidade de vida, ou ampliar o tempo de vida, ou mesmo auxiliar o processo de combate à doença ou enfermidade em curso no paciente.

A resistência bacteriana, fúngica, virai, parasitária e neoplásica aos antibióticos, antifúngicos , antiparasitários e antineoplásicos empregados na prática clinica é apontada como o principal obstáculo à cura das doenças bacterianas, fúngicas, virais, parasitárias e tumorais e é considerado um grave problema de saúde, em escala mundial. Este problema é contornado com o uso adequado e racional dos antibióticos, antimicrobianos e antineoplásicos e com o advento de novas drogas mais potentes. Porém, a resistência cedo ou tarde, inexoravelmente sempre se estabelece e, até o momento, não se encontrou uma solução para este problema. Como os antibióticos, antifúngicos, antivirais, antiparasitários e antineoplásicos são considerados como a única modalidade de tratamento antinfeccioso, antiparasitário e antineoplásico válidos e efetivos, a perspectiva futura dos tratamentos é preocupante e sombria, devido ao fenómeno da resistência microbiana e tumoral.

Os antibióticos, os antifúngicos, os antivirais, os antiparasitários e antineoplásicos podem ser usados em qualquer fase da doença infecciosa bacteriana, fúngica, virai parasitária e tumoral. No entanto, os antibióticos, os antimicrobianos e antineoplásicos não conseguem curar a maioria das doenças bacterianas, fúngicas, virais, parasitárias e neoplasias já avançadas, graves e disseminadas que têm, em geral, uma taxa muito alta de mortalidade e morbidade.

Por outro lado, a descoberta de novas drogas estã direcionada para drogas que sejam capazes de eliminar o agente etiológico e curar a infecção, infestação e neoplasia, baseda no conceito de uma droga única, capaz de curar uma moléstia infecciosa, parasitária e neoplásica.

Dos tratamentos de neoplasias da atualidade

As citocinas como a interleucina 2 e os interferons do tipo I alfa e beta, são utilizadas para o tratamento de tumores imunogênicos como o melanoma e o hipernefroma . As citocinas com função de fatores de crescimento de colónias da medulas óssea, são usadas para combater anemias, leucopenias, citopenias dos elementos figurados do sangue periférico, causados por doenças ou tratamentos, com bons resultados. Os intérferons tipo I são largamente empregados para o combate de hepatites viais C e B, com bons resultado e com resultados menos expressivos, para o tratamento da esclerose múltipla. Os transplantes de medula óssea autólogos e alogênicos são utilizados para o tratamento de neoplasias. As imunoterapias passivas com células dendriticas CTL CD8, leucócitos, autólogos ou alogênicos, com ou sem citocina, são utilizados para o tratamento de certos tumores, com resultados ainda pouco expressivos, ou expressivos, mas limitados a certas patologias de exceção, como tumores virus induzidos, que crescem em pacientes transplantados e imunossuprimidos . Nestes casos a imunoterapia passiva com células T CTL CD8 e CD4 especificas para o virus EBV, costuma ser bem sucedida e curar estes tumores de exceção que só crescem em pacientes imunossuprimidos. Porém, cabe ressaltar que estas técnicas, assim como outras similares, mas de menor eficácia, não desenvolveram agentes ou conjuntos de agentes capazes de efetivamente imunomodular o sistema imune de forma a passar a reagir contra qualquer invasor patogênico (infecção) , ou colonizador autólogo (tumores) que esteja presente no corpo do individuo a ser tratado, ou que possa resolver estados de desautonomia dos sistemas imunológicos genéticos primários ou secundários, que levem a estados de autoagressão pelo sistema imunológico, que deveria defender o organismo, justamente de agressões.

Podemos citar como exemplo bem sucedido de tratamento de câncer que utiliza um agente imunomodulador que contem padrões moleculares reconhecíveis pelos PPRs, o uso da vacina BCG como uma das raras técnicas, estabelecidas, aceitas, que comprovadamente, de alguma forma utilizam a imunomodulação como via de tratamento. Brake e colaboradores descreveram o uso da BCG em imunoterapia de pacientes com câncer superficial na bexiga, que se encontravam no Estágio Tl (Brake M, Loertzer H, Horsch R, Keller H (2000) . "Long-term results of intravesical bacillus Calmette-Guérin therapy for stage Tl superficial bladder câncer". UROLOGY 55 (5): 673- 678). A imunoterapia foi aplicada nos pacientes após a completa ressecção transuretral do tumor na bexiga, sendo aplicado um segundo ciclo de BCG em caso de recorrência de tumores superficiais. A conclusão do estudo foi de que a imunoterapia com BCG após a ressecção transuretral do tumor na bexiga, representa um tratamento primário altamente eficaz para Estágio Tl de câncer na bexiga, sendo 89% a taxa de sobrevivência livre de tumor em todos os pacientes.

Seguindo essa linha, Burguer e colaboradores demonstraram um ensaio randomizado comparativo, no qual os pacientes com câncer de bexiga não invasivo da camada muscular fizeram o uso da BCG ou de terapia celular autóloga com macrófagos (BEXIDEM®) (Burguer M, Thiounn N, Denzinger S, Kondas J, Benoit G, et . al (2010). "The application of adjuvant autologous antravesical macrophage cell therapy VS . BCG in non-muscle invasive bladder cancer: a multicenter, randomized trial. Journal of Translation Medicine, 8:54. doi: 10.1186/1479-5876-8-54). Em comparação com a BCG, a incidência de efeitos adversos foi significantemente menor no tratamento com BEXIDEM (26% e 14%, respectivamente). Em contrapartida, a taxa de recorrência do tumor nos pacientes tratados com BEXIDEM foi significativamente maior que nos pacientes que utilizaram BCG como terapia auxiliar.

Donald e colaboradores descreveram o uso da BCG como forma de imunoterapia em pacientes que apresentavam um quadro de melanoma (Donald L. Morton, M.D., Frederick R. Eilber , M.D., E. Carmack Holmes, M.D., John S. Hunt, M.D., et. al (1974). "BCG Immunotherapy of Malignant Melanoma: Summary of a Seven-year Experience". Ann. Surg. , p: 635- 641). Os pacientes selecionados para o estudo apresentavam melanoma recorrente, doença residual conhecida ou grande risco de desenvolvimento de recorrência. Primeiro, foram aplicadas injeções diretas nos nódulos malignos de melanoma utilizando 0,1-0,5 cc de BCG em cada lesão subcutânea e intracutânea . Os pacientes que se encontravam no Estágio II receberam tratamento imunoterápico somente com BCG ou com BCG e células alogênicas de melanoma. BCG foi administrada sozinha ou como adjuvante misturada com células tumorais em pacientes no Estágio III da doença. Os pacientes com metástase intradérmica que foram tratados com injeções intratumorais de BCG foram os que responderam melhor ao tratamento, sendo que três fatores aparentaram estar correlacionados com a resposta à imunoterapia com BCG: a localização da metástase, a quantidade de tumor presente e a imunocompetência do paciente. Observou-se baixa atividade antitumoral da BCG em pacientes com doença volumosa ou com metástase visceral. O resultado mostrou que 31% dos pacientes com metástase intradérmica se encontraram livres da recorrência da doença por um período de até 6 anos após o início da imunoterapia .

A imunoterapia descrita por Grant e colaboradores consiste na utilização de BEC2 (anticorpo antiidiotípico que mimetiza o gangliosídeo GD3 presente na superfície da maioria dos tumores de câncer de pulmão de células pequenas) em combinação com BCG (Grant SC, Kris MG, Houghton AN, Chapman PB (1999) . "Long Survival of Patients with Small Celi Lung Câncer after Adjuvant Treatment with the Anti-Idiotypic Antibody BEC2 Plus Bacillus Calmette- Gue". Clinicai Câncer Research, Vol. 5, 1319-1323). A dose aplicada nos pacientes com câncer de pulmão foi 2,5 mg por um período superior a 10 semanas. Os pacientes tratados com a referida imunoterapia tiveram um aumento considerável da sobrevivência e da sobrevivência livre de reincidência da doença quando comparados a um grupo similar de pacientes.

Popiela e colaboradores avaliaram o uso da imunoterapia com BCG e quimioterapia com FAM ( 5-fluoracil , adriamicina, mitomicina C) em pacientes com câncer gástrico em estágio III ou IV de câncer anteriormente submetidos à gastrectomia curativa (Popiela T, Kulig J, Czupryna A, Sczepanik AM, Zembala M (2004). " Efficiency of adjuvant immunochemotherapy following curative resection in patientes with locally advanced gastric câncer". Gastric câncer, 7: 240-245). Os pacientes foram divididos aleatoriamente em 3 grupos: BCG + FAM, FAM e controle ( somente cirurgia) . A dose de BCG administrada na imunoterapia foi 2-4 unidades viáveis por dose. Observou-se que no geral uma porcentagem de 47,1% de sobrevivência de 10 anos no grupo da imunoterapia. Powles e colaboradores relataram um estudo no qual pacientes com leucemia mielóide aguda receberam tratamento com BCG e células tumorais alogênicas mortas. A dose de BCG estimada foi de aproximadamente IO⁶ organismos (RL Powles, PJ Selby, DR Jones, JA Russel, HG Prentice, et. al (1977). "Maintenance of remission in acute myelogenous leukemia by a mixture of

B. C.G. and irradiated leukemia cells". THE LANCET, 1107- 1110). Observou-se uma melhora nos pacientes, pois eles apresentaram remissão da doença por um período, levando à conclusão de que a imunoterapia combinando células tumorais de leucemia e BCG, pode ser efetiva para prolongar a remissão da doença. Da mesma forma Vuvan e colaboradores descreveram o uso da imunoterapia com BCG em pacientes com leucemia aguda não linfóide (H. Vuvan, D.Fiere, M. Doillon,

C. Martin, B. Coiffier, et. al (1978). " BCG Therapy in Acute Non Lymphoid Leukaemias". Scand J Haematol 21, 40- 46) . Foi feito um estudo randomizado no qual os pacientes foram divididos em 2 grupos: tratados com quimioterapia apenas e tratados com quimioterapia e BCG, sendo a BCG administrada durante o intervalo dos ciclos de quimioterapia em doses de 6 x IO⁸ unidades viáveis. O resultado mostrou que os pacientes que receberam a imunoterapia tiveram taxa de sobrevivência superior ao do grupo que recebeu apenas quimioterapia. Além disso, foi observado que a BCG parecia ser mais eficiente em pacientes com idade superior a 40 anos.

Por fim, Hsueh e colaboradores utilizaram uma vacina terapêutica composta por células de melanoma chamada Canvaxin (Hsueh ED, Essner R, Foshag LJ, Ollila DW, Gammon G, et al (2002) . " Prolonged Survival After Complete Resection of Disseminated Melanoma and Active Immunotherapy with a Therapeutic Câncer Vaccine". Journal of Clinicai Oncology, Vol 20, n 23, pp 4549 - 4554) . Todos os pacientes foram submetidos ao teste com PPD (derivado de proteína purificada) antes de receberem a terapia com a vacina. Para os dois primeiros tratamentos, a vacina foi misturada com BCG. Na primeira injeção, BCG foi aplicada em dose de 2,7 a 10,8 x IO⁶ unidades formadoras de colónia em pacientes PPD negativo e a metade dessa dose em pacientes PPD positivo. Observou-se um prolongamento da sobrevivência em pacientes que receberam após a operação, imunoterapia ativa com Canvaxin .

Os estudos supracitados com uso de BCG, apesar de estarem utilizando um agente imunoestimulador distinto do agente causador da enfermidade ou doença para provocar efeitos desejáveis nos pacientes, de forma combinada ou não com outras terapias e procedimentos médicos conforme o proposto na presente invenção, não está entretanto se valendo de utilizar múltiplos componentes antigênicos que possuam padrões moleculares associados a distintos patógenos, especialmente uma combinação que possua representantes de bactérias intracelulares e extracelulares , virus, parasitos, fungos e leveduras. Os grupos de pesquisa e estudos supracitados apenas utilizaram BCG como uma simples função adjuvante, sem levar em consideração as bases da presente invenção que visam ativar células de memória, ou virgens, que podem estar inativadas nos mais diversos tecidos do corpo através de uma ampla gama de padrões moleculares associados a patógenos que podem ativar o maior número possível de células de memória e efetoras. Por não apresentar esta combinação de distintos agentes antigênicos inespecificos capazes de estimular a imunidade inata e especifica conforme descrito, muitas populações de células imune de memória deixarão de ser ativadas de acordo com os fundamentos apresentados, o que não levará a uma recontextualização reprogramação e recondução da resposta imune, que seja tão eficaz quanto a apresentada na presente invenção.

Tampouco o estado da arte descreve a importância dos protocolos de imunização e das aplicações locais e distais dos agentes imunoestimuladores , e como uma grande quantidade de aplicações em diversos pontos do corpo são necessárias para, de forma programada e intencional, fazer com que os padrões moleculares PAMPS e DAMPS atinjam os tecidos que possuem as células APCs em quantidade e qualidade adequada para provocar uma resposta e polarização ótimas .

Tanaka e colaboradores (Tanaka N., Gouchi A. Ohara T., Mannami T . , Konaga E., Fuchimoto S., Okamura S., Sato K., Orita K (1994). "Intratumoral injection of a streptococcal preparation, OK-432, before sugery for gastric câncer. A randomized Trial . Cooperative Study Group of Preoperative Intratumoral Immunotherapy for Câncer". Câncer, 74(12): 3097-3103) e Yasue e colaboradores (Yasue M. , Murakami M., Nakazato H., Suchi T., Ota K (1981). "A Controlled Study of Maintenance Chemoimmunotherapy VS Immunotherapy Alone Immediately Following Palliative Gastrectomy and Induction Chemoimmunotherapy for Advanced Gastric Câncer". Câncer Chemother Prasmacol, 7: 5-10.) relatam o uso em pacientes com câncer gástrico, de um agente imunomodulador preparado a partir da espécie Streptococcus pyogenes atenuada, chamado OK-432. Tal agente é capaz de ativar o sistema imunológico regional e causar degeneração do tecido afetado em carcinomas no estômago. Tanaka descreve o uso pré-operatório de 10KE de OK-432 injetado endoscopicamente, e doses de 1KE a 5KE em injeções intradérmicas em caso de metástase nos gânglios linfáticos pós-operação . Tanaka concluiu que injeções intratumorais de Ok-432 podem ter um efeito clinico benéfico em pacientes que se encontram no Estágio III de câncer gástrico, pois parece melhorar a sobrevida deste subgrupo de pacientes. Yoshida e colaboradores (Yoshida K., Sugiura T., Takifuji N . , Kawahara M . , Matsui K. , et al (2007). "Randomized phase II trial of three intrapleural therapy regimens for the management of malignant pleural effusion in previously untreated non-small cell lung câncer: JCOG 9515. Lunger Câncer, 58 : 362-368) avaliaram a eficácia e a toxidade do uso do OK-432 (0,2 KE/Kg, sendo a dose máxima 10KE/Kg) como terapia intrapleural no controle da efusão pleural maligna em pacientes com câncer de pulmão de células não-pequenas , previamente não tratados. Além do OK-432, a bleomicina e cisplatina junto com etoposida, também foram avaliadas como terapia intrapleural. Concluiu-se que a melhor terapia intrapleural utilizada foi o uso do OK-432, pois foi o que obteve melhor taxa de sobrevivência livre de doença. e a menor taxa de recidiva pleural.

Aftergut e colaboradores (Kent Aftergut, MD, Mary Curry, MD, Jack Cohen, DO (2005) . "Cândida Antigen in the Treatment of Basal Cell Carcinoma". Dermatol Surg, 31: 16- 18) estudaram o uso intralesional de antigenos de Cândida no tratamento de carcinoma de célula basal. O estudo mostra que 56% dos pacientes tratados tiveram regressão completa de células tumorais. Os antigenos foram aplicados em doses de 0,1 mg através de injeção intradérmica . Novamente, a presente invenção se diferencia através do uso de uma combinação muito mais complexa e elaborada de componentes antigênicos, possuindo potencial para atingir resultados mais vantajosos quando usada de forma isolada ou em conjunto com outras terapias. O estudo descrito por Miles e colaboradores (Miles DW, Towlson KE, Graham R, Reddish M, Longenecker BM, et al. (1996). "A randomised phase II study of sialyl-Tn and DETOX-B adjuvant with or without cyclophosphamide pretreatment of the active specific immunotherapy of breast câncer". British Journal of Câncer, 74:1292-1296) investigou a ocorrência de melhora na resposta imune provocada pela associação de sialil-Tn-KLH com DETOX-B (que contém em sua composição esqueleto de parede celular de Mycobacteríum phlei) em pacientes com câncer de mama, quando submetidos a um pré-tratamento com baixas doses de ciclofosfamida . Utilizou-se 0,5 ml da emulsão composta por STn-KLH em DETOX-B. Como resultado, observou-se que todos os pacientes desenvolveram IgG e IgM em relação ao sialil-Tn, e os pacientes que receberam prétratamento com ciclofosfamida, tiveram um aumento significativamente maior de IgM. Korec e colaboradores apresentaram um estudo em que 11 pacientes com diferentes tipos de tumor e 3 pacientes com trombocitopenia trombótica púrpura associada à mitomicina-C, foram tratados com perfusão de plasma extracorporal através de filtros contendo proteína A imobilizada de Staphylococcus aureus (Korec S, Smith FP, Schein PS, Phillips TM (1984) . "Clinicai experiences with extracorporeal immunoperfusion of plasma from câncer patients". J Biol Response Mod. 3(3): 330-5) . Como resultado, observou-se um modesto efeito antitumoral gerado pela imunoperfusão . Em 10 pacientes adequadamente tratados, verificou-se uma redução mensurável do tumor (40% de redução da massa do tumor original) .

Engelhardt e colaboradores (Engelhardt R, Mackensen A, Galanos C (1991) . "Phase I Trial of Intravenously Administered Endotoxin (Salmonella abortus equi) in Câncer Patients". CÂNCER . RESEARCH 51, 2524 - 2530) descreveram um ensaio relacionado à administração intravenosa de endotoxina, preparada a partir de lipossacarideo de Salmonella abortus equi (basicamente livre de proteínas e ácido nucléico) ._. Foram selecionados 24 pacientes com idades entre 33 e 67 anos, sendo 10 pacientes diagnosticados com câncer colo-retal, 5 com câncer de pulmão de células não- pequenas, 2 com carcinoma, 2 com câncer pancreático, 2 com sarcoma, 1 com câncer na vesícula biliar, 1 com câncer no ânus e 1 com câncer na traquéia. Os pacientes com câncer pancreático não receberam tratamento anterior, ao passo que os outros pacientes haviam sido tratados com radiação, quimioterapia e/ou cirurgia, sendo estes tratamentos finalizados quatro semanas antes do início do tratamento estudado. A dose da endotoxina inicial aplicada foi 0,15 ng/kg, sendo a dose máxima tolerada é 4 ng/kg. Os resultados obtidos mostraram duas respostas parciais e quatro ocorrências de estabilização da doença em pacientes que apresentavam câncer colo-retal, sendo que tais pacientes se encontravam no grupo com o maior número de participantes, indicando que não necessariamente este tipo de tumor tenha mais sensibilidade ao lipossacarideo que os outros tumores estudados na pesquisa. Foi verificada também a estabilização da doença por um período em pacientes com câncer de pulmão de células não-pequenas , câncer de célula renal e câncer traqueal. Otto e colaboradores descrevem a fase II do estudo reportado por Engelhardt. Nesta fase, 15 pacientes com câncer de pulmão de células não-pequena e 27 com câncer colo-retal receberam 4 injeções de endotoxina (dose de 4ng/kg) e 1600 mg de ibuprofeno via oral em intervalos de 2 semanas. Os resultados mostraram melhora em 3 pacientes com câncer colo-retal, sendo que 2 deles tiveram remissão parcial do tumor, que ficou estabilizado durante 7 e 8 meses respectivamente, e 1 deles teve completa remissão do tumor. Observou-se também um efeito antitumoral mínimo nos pacientes com câncer de pulmão.

Como pudemos observar nos exemplos do estado da técnica descritos por Aftergut (Kent Aftergut, MD, Mary Curry, MD, Jack Cohen, DO (2005) . "Cândida Antigen in the Treatment of Basal Celi Carcinoma". Dermatol Surg, 31: 16- 18) , Miles (Miles D , Towlson KE, Graham R, Reddish M, Longenecker BM, et al . (1996). "A randomised phase II study of sialyl-Tn and DETOX-B adjuvant with or without cyclophosphamide pretreatment of the active specific immunotherapy of breast câncer". British Journal of Câncer, 74:1292-1296), Korec (Korec S, Smith FP, Schein PS, Phillips TM (1984) . "Clinicai experiences with extracorporeal immunoperfusion of plasma from câncer patients". J Biol Response Mod. 3(3): 330-5), Engelhardt (Engelhardt R, Mackensen A, Galanos C (1991) . "Phase I Trial of Intravenously Administered Endotoxin (Salmonella abortus equi) in Câncer Patients". CÂNCER RESEARCH 51, 2524 - 2530) e Otto (Otto F, Schmid P, Mackensen A, ehr U, Seiz A, et. al (1996) . "Phase II trial of intravenous endotoxin in patients with colorectal and non-small cell lung câncer". Eur J Câncer, 32A(10): 1712 - 8), foram utilizados apenas um componente antigênico em cada respectivo estudo.

Willian B. Coley foi um pioneiro na pesquisa relacionando o uso da imunoterapia em pacientes com câncer (Edward F. McCarthy, MD. "The Toxins of Willian B. Coley and the treatment of bone and soft-tissue sarcomas". The Iowa Orthopaedic Journal, v. 26, p: 154-157). Nos estudos realizados por Coley, ele descreve o sucesso do uso de Streptococcus junto com Serratia marcescens (Toxina de Coley) no tratamento de sarcomas de tecido mole, observando também que tal imunoterapia não foi tão efetiva no tratamento de outros tipos de câncer, como melanomas e carcinomas. Como tais estudos foram realizados a mais de um século atrás e foram relativamente esquecidos pela medicina moderna (muito focada em obter uma droga única para as enfermidades) seus conceitos primordiais e possibilidades não foram explorados e esclarecidos. Coley apenas utilizou dois componentes bacterianos em sua composição, e não explorou o processo de utilização e todas as possibilidades de modulação do sistema imune como descrito na presente invenção. Hayashi e colaboradores puderam avançar mais no entendimento da importância do sistema imune e também combinaram dois componentes antigênicos, porém estes conceitos ainda não foram explorados em sua totalidade. Neste trabalho Hayashi e colaboradores avaliaram o efeito da importância dos gânglios linfáticos no tratamento de pacientes com câncer de ovário com esqueleto de parede celular de Mycobacterium bovis associado com Bacillus Calmette-Guérin (BCG-CWS) (Hayashi A, Nishida Y, Yoshii S, Kim SY, Uda H, Hamasaki T (2009) . "Immunotherapy of ovarian cancer with cell wall skeleton of Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guérin : Effect of lymphadenectomy" . Cancer Sei, vol.100, n°10, p: 1991-1995). Após a cirurgia de remoção dos tumores, pacientes receberam via intracutânea, doses de 2 a 200 yg de BCG-CWS . Utilizou-se a vacina no estudo devido ao seu potencial de induzir (IFN)-y e estimular as células de Langerhans (posteriormente diferenciadas a células dendriticas) , conforme relatado em ensaios anteriores. O prognóstico de pacientes depois da cirurgia sem terem passado por linfadenectomia foi consideravelmente melhor em relação àqueles que a fizeram, o que ratifica a importância dos gânglios linfáticos na obtenção de reações imunológicas contra câncer de ovário em resposta à imunoterapia com BCG-CWS. Apesar de já utilizarem dois componentes antigênicos distintos e inespecificos à enfermidade sendo tratada, os mesmos são oriundos apenas de duas bactérias, não apresentando em sua composição outros padrões moleculares associados a patógenos tais como os encontrados em virus, parasitos, fungos e leveduras.

De acordo com os conhecimentos existentes no estado da técnica, observa-se o papel imprescindível do sistema imune no combate às doenças, porém poucas tecnologias foram capazes de efetivamente estimular e imunomodular este sistema de forma a melhor combater a doença, quando ela já está estabelecida.

Além disso, é importante salientar que a cura das infecções e neoplasias, ao contrário do que se prega e aceita atualmente, é sempre realizada pelo sistema imunológico. Os antibióticos, antimicrobianos e as drogas antineoplásicas agem principalmente como um facilitador importante e muitas vezes imprescindível para a cura das infecções. Em outras palavras, os antibióticos não realizam a cura da doença em si, mas ajudam e facilitam o processo de cura, levado a cabo pelo sistema imunológico. Os antibióticos agem neste sentido, como um deslocador do equilíbrio biológico, a favor do organismo infectado, ao inibir ou matar, ou destruir as uma parcela das bactérias "in vivo", através da sua ação específica, possibilitando uma ação mais rápida e efetiva do sistema imunológico. Porém, não existe nenhum trabalho in vivo demonstrando a eliminação dos microorganismo pela ação dos antimicrobianos .

Partindo deste pressuposto científico novo, é necessário desenvolver agentes imunomodeladores , composições imunogênicas e métodos de tratamento capazes de selecionar agentes que possibilitem a indução de uma resposta imune inata, em tempo real que recontextualize, reprograme e reconduza o sistema imunológico a uma nova resposta adaptativa específica efetiva para a doença a ser tratada, através da apresentação correta de antígenos de agentes patogênicos às células APC, que via células memória e virgens do sistema imune, vão combater efetivamente as doenças infecciosas e outras enfermidades presentes em um determinado paciente. Isto é, sem a necessidade de geração e administração de um antígeno específico da doença estabelecida, usando para isso, os próprios mecanismos do sistema imune, após sua recontextualização, reprogramação, recondução, de forma ideal e induzida por agentes imunomoduladores, atingindo respostas imunes com velocidade e efetividade equivalentes as respostas imunes desencadeadas por invasões repetidas de um mesmo patógeno já previamente memorizado pelo sistema imune.

Ou seja, os novos agentes imunomodeladores, composições imunogênicas e métodos de tratamento deslocariam o equilíbrio biológico dos antimicrobianos e quimioterápicos em todas as neoplasias, infecções e infestações. Esta nova perspectiva terapêutica combinaria o uso concomitante da imunoterapia com os tradicionais antimicrobianos e nos processos infecciosos de qualquer tipo e nas infestações parasitárias, aumentando as chances de cura e podendo diminuir de maneira drástica a morbidade e a mortalidade por estas doenças, quando comparada com terapias que levam em consideração somente a função dos antimicrobianos e quimioterápicos isolados.

OBJETIVOS DA INVENÇÃO

Constitui um objetivo da presente invenção, fornecer composições imunogênicas para modulação do sistema imune que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de dois ou mais agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) e um ou mais dentre um veículo, excipiente, diluente ou solvente fisiologicamente aceitáveis.

Em particular, constitui um objetivo da presente invenção, fornecer composições imunogênicas para modulação do sistema imune que compreendem agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados do grupo consistindo em: (A) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias; (B) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus; (C) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras; (D) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários; (E) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a parasitas pluricelulares e/ou (F) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a príons .

Um outro objetivo da invenção é prover o uso das referidas composições imunológicas para manufatura de medicamentos para prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas.

A presente invenção objetiva também prover métodos para prevenir ou tratar doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas, em animais, mais particularmente humanos.

A presente invenção objetiva ainda prover métodos para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino.

Por último a presente invenção objetiva prover métodos para recondução da resposta imune em um animal, particularmnete humanos.

DEFINIÇÕES

No âmbito deste pedido de patente são utilizadas por diversas vezes abreviaturas cujas definições conforme empregues neste pedido, encontram-se resumidas abaixo:

• BCG refere-se ao Mycobacterium bovis atenuado, Bacilo de Calmette-Guérin;

• DA PS refer-se a padrões moleculares associados a perigo;

• DECA refere-se à composição 1 descrita Exemplo 1 do presente pedido de patente;

• GM-CSF refere-se a "Granulocyte macrophage colony-stimulating factor";

• IL12 refere-se à Interleucina-12 ;

• IL15 refere-se à Interleucina-15 ;

• IL2 refere-se à Interleucina-2 ;

• IL21 refere-se à Interleucina-21 ;

• IL4 refere-se à Interleucina-4 ;

• IL5 refere-se à Interleucina-5 ;

• IL7 refere-se à Interleucina-7 ;

• PAMPS refere-se a padrões moleculares associados a patógenos.

• PFU: unidades formadoras de placa de lise.

• PPD refere-se a derivado proteico purificado do bacilo de Koch;

• PPD refere-se à fração proteica purificada do extrato de cultura do bacilo de Koch ("Purified Protein Derivative") . O PPD representa os principais antigenos do Mycobacterium tuberculosis;

• TDCI50 é uma unidade para quantificação de partículas virais e representa a dose infectante em 50% das células de uma cultura de tecido;

• Turberculina bruta Koch refere-se a lisado inativado de Mycobacterium bovis;

• Unidades de Lf ou "Limes flocculations units" é a unidade internacional para quantificar antigenos em vacinas de toxóides aceita pela Organização Mundial de Saúde;

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

As figuras a seguir fazem parte do presente relatório e estão aqui inclusas a fim de ilustrar determinados aspectos da invenção. 0 objeto da presente invenção pode ser melhor entendido com referência a uma ou mais dessas figuras, em combinação com a descrição detalhada da modalidade preferida aqui apresentada.

• A Figura 1 mostra o efeito do tratamento com DECA, DECA + IL-2 sobre o crescimento tumoral in vivo. Células de melanoma murino (B16F10) foram inoculadas no dia zero (1 x IO⁶; 100 μΐ,/animal) por via subcutânea (s.c), no dorso de camundongos C57B16 machos. Em (A) volume do tumor (em mm³) medido a cada três dias com auxílio de paquímetro digital. Em (B) porcentagem de crescimento calculada em relação ao volume de cada tumor obtido no 7° dia. Os resultados foram expressos como Média ± Erro Padrão da Média (E.P.M.). *p < 0,05 representa a diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle (ANOVA de uma via, post-hoc: teste de Dunnett) . n= 9-10 animais.

• A Figura 2 mostra feito do tratamento com DECA, DECA + IL-2 sobre a sobrevida de animais inoculados com células de melanoma murino. Células B16F10 foram inoculadas no dia zero (1 x IO⁶; 100 μ1./3ηϊΐΐΐ3ΐ) por via subcutânea (s.c), no dorso de camundongos C57B16 machos. O gráfico representa a curva de mortalidade e as porcentagens representam os animais que permaneceram vivos ao final de 30 dias após a inoculação das células tumorais. n= 9-10 animais. * p,0,05 (p=0,0361), Análise estatística: Logrank Test - Chi square.

• A Figura 3 mostra exames anatomopatológicos da voluntária MBS. A. Exame pré-tratamento imunoterápico, a seta preta indica área tumoral e a seta branca região de ausência de infiltrado inflamatório. A região delimitada em preto ilustra a inibição do sistema imunológico pelo tumor constatada pela ausência de infiltrado inflamatório. B. Exame pós-tratamento imunológico, onde constata-se a eliminação completa do tumor; as setas brancas indicam o denso infiltrado inflamatório e a área delimitada em preto exemplifica áreas de fibrose e alterações reparativas permeadas por infiltrados inflamatórios. C. Recontextualização do sistema imunológico pelo uso da presente invenção, atestada pela reação positiva para S-100 em incontáveis células dendríticas intra- epidérmicas (indicadas pelas setas) e em meio ao infiltrado inflamatório dérmico estendendo-se até a derme profunda, sem células melanocíticas ou melanoma residual .

• A Figura 4 mosta xames anatomopatológicos do voluntário PPC. A. Exame pré-tratamento imunoterápico evidenciando área de agressivo melanoma metástatico com algumas células pigmentadas, e escasso e discreto infiltrado inflamatório periférico indicado pela seta, atestando a inibição do sistema imunológico pelo tumor. B. Exame pós-tratamento imunológico ilustrando o desaparecimento do tumor e substituição por intenso e denso infiltrado inflamatório. C. Recontextualização do sistema imunológico pelo tratamento com a presente invenção, atestada pela reação positiva para S-100 em incontáveis células dendriticas intra-epidérmicas (indicadas pelas setas) e em meio ao infiltrado inflamatório dérmico estendendo-se até a derme profunda, sem melanoma residual.

• A Figura 5 mostra Exames de Ressonância Magnética Nuclear (Al, A2 e A3 de 30.07/2008 pré- tratamento imunológioco) e Tomografias computadorizadas (Bl, B2, B3 pós-tratamento de 13/05/2009; Cl e C3 pós-tratamento de 30/08/2011 e C2 pós-tratamento de 13/04/2010) do paciente R - M. Al. Espessamento da gordura mostrando carcinomatose (seta). A2. Conglomerado linfonodal do tronco celíaco (seta; maior medindo 3,7 cm). A3. Conglomerado linfonodal do ligamento hepatogástrico medindo 4 cm (seta). Bl. Desaparecimento da carcinomatose, ao evidenciar o desaparecimento do espessamento da gordura (seta) . B2. Redução do maior linfonodo (de 3,7 cm para 1,4 cm) do conglomerado linfonodal do tronco celíaco (seta). B3. Desaparecimento do conglomerado linfonodal do ligamento hepatogástrico (seta). Cl. Desaparecimento da carcinomatose (seta). C2. Redução do maior linfonodo (de 1,4 cm para 1,1 cm) do conglomerado linfonodal do tronco celíaco (seta). C3. Confirmação do desaparecimento do conglomerado linfonodal do ligamento hepatogástrico (seta). Esses dados mostram uma remissão oncológica completa da carcinomatose peritoneal e disseminação linfática do adenocarcinoma gástrico com a associação da imunoterapia com a presente invenção asociada a rádio e quimioterapias paliativas.

• A Figura 6 mostra tomografias computadorizadas de tórax e abdómen da voluntária A - D. A. Exame pré-tratamento imunoterápico realizado em 09/10/2006 identificando os tumores nas áreas indicadas com círculos. B. Exame pós-tratamento imunológico de 11/12/2006 evidenciando a ausência desses tumores nas áreas analisadas.

• A Figura 7 mostra exames de níveis séricos de antígeno prostático específico (PSA) do paciente O - S. O primeiro ponto refere-se ao valor residual do marcador evidenciando presença de célula neoplásica residual da cirurgia não curativa, que ao ser tratado imunologicamente tornou-se indetectável (representado graficamente como zero) em 4 semanas. Este dado sugere fortemente que o tratamento imunoterápico, na condição de monoterapia farmacológica adotada enquanto se aguardava o início da radioterapia, foi efetivo na remissão completa do tumor loco-regional e erradicação da massa tumoral, uma vez que o atual estado da técnica não possibilita diferenciar erradicação completa da massa tumoral de doença residual mínima. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Descrição das composições imunogênicas

A presente invenção refere-se a composições imunogênicas para modulação do sistema imune que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de dois ou mais agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) e um ou mais dentre um veículo, excipiente, diluente ou solvente fisiologicamente aceitáveis.

Preferencialmente as composições da presente invenção compreendem agentes antigênicos imunoativos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados do grupo consistindo em: (A) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias; (B) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus; (C) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras; (D) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários; (E) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a parasitas pluricelulares e/ou (F) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a príons .

Ainda mais preferencialmente as composições da presente invenção compreendem padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados dentre pelo menos três dentre as categorias (A), (B) , (C) , (D), (E) e (F) supradescritas .

Ainda mais preferencialmente as composições da presente invenção compreendem padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados dentre pelo menos quatro dentre as categorias (A), (B) , (C) , (D), (E) e (F) supradescritas .

Os agentes antigênicos da presente invenção podem ser selecionados de epitopos, materiais genéticos, lipídeos, polissacarídeos e/ou proteínas imunoativas da presente invenção podem ser obtidos por purificação de fragmentos isolados de materiais existentes na natureza ou derivados de frações de extratos vegetais, animais ou microbiológicos, ou ainda produzidos por recombinação genética, sendo preferencialmente derivados de cepas virais, fúngicas, parasitárias, priônicas ou bacterianas.

Assim, os agentes antigênicos da presente invenção com padrões moleculares associados a bactérias da presente invenção podem ser selecionados dentre, porém não se limitam a agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias dos géneros Staphylococcus , Streptococcus, Enterococcus, Corynebacterium, Bacillus, histeria , Clostridium, Mycobacterium, Actínomyces, Nocardia , Escheríchia , Proteus, Klebsiella , Serratia , Enterobacter, Salmonella , Shigella , Pseudomonas,

Burkholderia , Stenotrophomonas, Acinetobacter, Vibrio, Campylobacter, Helicobacter, Bacteroides, Neisseria , Moraxella , Haemophilus, Bordetella , Brucella , Francisella , Pasteurella , Yersinia , Legionella , Gardnerella , Treponema , Leptospira , Borrelía , Micoplasmas, Riquétsias e Clamídias .

Os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus da presente invenção podem ser selecionados dentre, porém não se limitam a agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus das famílias Adenoviridae, Arenaviridae, Bunyaviridae, Coronaviridae, Filoviridae, Flaviviridae, Hepadnaviridae, Deltavirus, Caliciviridae, Herpesviridae, Orthomyxoviridae, Papovaviridae, Paramixoviridae, Parvoviridae,

Picornaviridae, Poxyviridae, Reoviridae, Retroviridae, Rhabdoviridae e Togaviridae .

Os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras da presente invenção podem ser selecionados dentre, porém não se limitam a agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras dos géneros Sporothrix, Aspergillus, Blastomyces, Cândida, Coccidioides , Cryptococcus , Histoplasma e Pneumocystis .

Os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários da presente invenção podem ser selecionados dentre, porém não se limitam a agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários dos géneros Criptosporidium, Ciclospora, Entamoeba, Naegleria, Giardia, Leishmania, Plasmodium, Toxoplasma, Trichomonas, Trypanosoma, Microsporidia e Isospora .

Os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a parasitas pluricelulares da presente invenção podem ser selecionados dentre, porém não se limitam a agentes antigênicos com padrões moleculares associados a parasitas pluricelulares trematódeos, cestódeos e nematódeos .

Os agentes antigênicos da presente invenção compreendem moléculas proteicas, polissacarídicas , lipidicas e/ou compostos sintéticos que mimetizam moléculas proteicas, polissacarídicas e/ou lipídicas.

Mais especificamente os agentes antigênicos da presente invenção compreendem moléculas imunoativas protéicas que apresentam atividade enzimática, como por exemplo quinases, fosfatases, streptoquinases , estreptodornases e , desoxirribonucleases (ex. : dornases).

As composições imunogênicas para modulação do sistema imune, da presente invenção compreendem de 0,001 a 500 microgramas por mL de cada agente imunogênico.

Tais agentes imunogênicos podem ser encapsulados na forma de cápsulas, micropartículas , nanopartículas , drágeas, lipossomas.

Especificamente, as composições imunogênicas para modulação do sistema imune, da presente invenção compreendem de 4 a 20 agentes antigênicos selecionados do grupo que consiste de agentes antigênicos oriundos de: dornase, levedurina, oidiomicina, PPD, príons, streptoquinase, toxoíde de Streptococcus, Toxóide diftérico, Toxóide tetânicotuberculina bruta de Koch, lisado inativado de Ascaris lumbricoides, Aspergillus spp. , Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus terreus, Cândida spp., Cândida albicans, Cândida glabrata, Cândida parapsilosis, Chlamydia spp. , Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci , Chlamydia trachomatis, Cryptosporidium spp., dermatofitos, Entamoeba hystolitica, Enterobius vermicularis, Enterococcus faecalis,

Epidermophyton floccosum, Escherichia coli, Giardia lamblia, Haemophilus influenzae, Microsporum cannis, Mycobacterium spp. , Mycobacterium bovis, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Neisseria gonorrhoeae, papiloma vírus, Polio vírus, Proteus spp., Proteus mirabilis, Proteus penerii, Proteus vulgaris, Salmonella spp. , Salmonella bongori, Salmonella entérica, Serratia spp. , Serratia liquefaciens, Serratia marcencens, Shigella spp., Shigella flexneri, Shigella sonnei, Staphylococcus spp. , Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Strongyloides stercoralis, Streptococcus spp. ,

Streptococcus bovis , Streptococcus do grupo viridans, Streptococcus equinus , Streptococcus pneumonie, Streptococcus pyogenes, Toxoplasma gondii, Trichomonas vaginalis , tricofitina, Trichophyton spp. , Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans, Tricophyton mentagrophytes, vírus da febre amarela, vírus da hepatite B, vírus da rubéola, vírus da Varicella zoster, vírus da varíola, vírus do caxumba, vírus do sarampo, vírus herpéticos e vírus vacínico ou análogos sintéticos que apresentem padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) associados a estes agentes antigênicos.

Uma composição imunogênica preferida da presente invenção compreende lisado inativado de Mycobacterium bovis, derivado proteico purificado do bacilo de Koch (PPD) , lisado inativado de Staphylococcus aureus, lisado inativado de Staphylococcus epidermidis, lisado inativado de Steptococcus pyogenes, lisado inativado de Streptococcus pneumonie, lisado inativado de Enterococcus faecalis, Estreptoquinase/dornase, lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado de Cândida glabrata , lisado inativado de Epidermophyton floccosum, lisado inativado de Microsporum cannis, lisado inativado de Tricophyton mentagrophytes variedade interdigitale, lisado e inativado de Escherichia coli enteropatogenica, lisado inativado de Salmonella bongori, lisado inativado de Salmonella entérica e lisado inativado de Salmonella subterrânea.

Uma composição imunogênica preferida da presente invenção compreende 0,001 a 1 ng/mL de lisado inativado de Mycobacterium bovis; 0,001 a 1 ng/mL de derivado proteico purificado do bacilo de Koch; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Staphylococcus aureus; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Staphylococcus epidermidis; 0,1 a 100 yg/mL de lisado inativado de Steptococcus pyogenes; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Streptococcus pneumonie; 0,1 a 100 g/mL de lisado inativado de Enterococcus faecalis; 0,01 a 10 μg/mL de estreptoquinase; 0,01 a 10 μg/mL de dornase; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Cândida albicans; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Cândida glabrata; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Epidermophyton floccosum; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Microsporum cannis; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Tricophyton mentagrophytes variedade interdigitale; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Escherichia coli enteropatogenica; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Salmonella bongori; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Salmonella entérica e 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Salmonella subterrânea.

Adicionalmente, de forma a aumentar, diminuir ou polarizar a resposta imune conforme o objetivo da imunoterapia as composição antigênicas da presente invenção podem compreender citocinas e/ou quimiocinas tais como GM- CSF, IL4, IL5, IL7, IL12, IL15, IL21, interferon gama, e mais preferencialmente IL2.

As composições da presente invenção podem compreender ainda excipientes, como bactericidas , bacteriostáticos, antioxidantes, conservantes, tampões, estabilizantes , ajustadores de pH, ajustadores de osmolaridade, agentes antiespuma e tensoativos ; e resíduos de agentes de inativação ou fracionamento de antígenos, componentes de meios de crescimento e solventes comumente utilizados na produção de vacinas e imunoterápicos .

As composições da presente invenção podem ser um sólido, líquido ou gel. Conforme usado na presente invenção, o emprego do termo " farmaceuticamente aceitável" significa um sólido não-tóxico, inerte, excipiente líquido semi-sólido, diluente, formulação auxiliar de qualquer tipo, ou simplesmente um meio aquoso estéril, tal como solução salina. Alguns exemplos dos materiais que podem servir como veículos farmaceuticamente aceitáveis são açúcares, tais como lactose, glicose e sacarose, os amidos, tais como amido de milho e o amido de batata, a celulose e os seus derivados, tais como a carboximetilcelulose de sódio, a etilcelulose e o acetato de celulose, ciclodextrina; óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girasol, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de semente de soja; glicóis, tais como propilenoglicol , polióleos, tais como glicerinaglicol, sorbitol, manitol e de polietileno; ésteres, tais como o laurato etílico, oleato etílico, ágar; agentes tamponantes, tais como o hidróxido de alumínio e hidróxido de magnésio; ácido algínico; água livre de pirogênio; salina isotônica, solução de Ringer; soluções tampões de álcool etílico e fosfato, assim como outras substâncias não tóxicas compatíveis usadas em formulações farmacêuticas .

Uma variedade de vias de administração em animais ou humanos das composições imunoterápicas e vacinas descritas na presente invenção está disponível. O modo particular selecionado dependerá do dos agentes antigenicos selecionados , da dosagem necessária para eficácia terapêutica e do paciente ao qual será administrada a composição. Os métodos da presente invenção, geralmente, podem ser praticados usando qualquer modo de administração biologicamente aceitável, i.e., qualquer modalidade que produzir níveis eficazes de resposta imune sem causar efeitos adversos clinicamente indesejáveis. Tais modos de administração incluem as vias intradérmica, oral, retal, sublingual, tópica, nasal, transdermal ou parenteral. O termo "parenteral" inclui subcutânea, intravenosa, epidural, irrigação, intramuscular, bombas de liberação, ou de infusão. Particularmente, nesta invenção as vias oral, intradérmica, parenteral, subcutânea, intravenosa, intramuscular, assim como, pela mucosa nasal e/ou oral. são preferidas para administração das composições aqui reivindicadas .

Para a administração parenteral, os princípios ativos podem igualmente ser dissolvidos em um veículo farmacêutico e administrados como uma solução, emulsão, incluindo micro e nanoemulsões , ou suspensão. Exemplos de veículos apropriados são água, salina, soluções de dextrose, soluções de frutose ou óleos de origem animal, vegetal ou sintéticos. Outros veículos podem também conter outros ingredientes, por exemplo, preservativos, agentes suspensores, agentes solubilizantes , tampões e similares.

Propriedades das composições imunogênicas da presente invenção

As composições imunogênicas da presente invenção apresentam um efeito inesperado sobre a resposta imunológica. Conforme poderá ser visto nos Exemplos abaixo, as composições imunogênicas da presente invenção apresentam o efeito técnico inesperado de provocar uma resposta imunológica que envolve a recontextualização, reprogramação e recondução da resposta imune em tempo real.

Mais especificamente, as composições imunoterápicas da presente invenção são capazes de provocar uma recontextualização da capacidade de atuação operacional do sistema imunológico, alterando a relação de forças contra os agentes agressores ao seu favor, dando ao sistema imunológico uma vantagem competitiva, que não ocorre espontaneamente na evolução das doenças. Esta recontextualização determina uma consequente reprogramação e recondução da resposta imune estabelecida ou incipientemente estabelecida, ou estabelecida erroneamente agredindo de maneira desautonômica o organismo humano ou animal, polarizando-a para uma resposta imune adequada, primária e ou secundária, ativa ou inibitória, mais eficaz.

Este efeito se dá, via estimulação, ativação e ação conjunta de determinados componentes do sistema imune, como as células sentinela, células sentinelas apresentadoras de antigenos e os linfócitos memória. Especificamente, as composições da presente ativam corretamente células sentinelas, células dendriticas e outras células APC gerando o grau e a intensidade de ativação das células TCD4 e o grau e a intensidade do perfil imunológico para combater a infecção, infestação ou doença neoplásica.

Assim, as composições antigênicas imunomoduladores da presente invenção, quando em quantidades maiores ou significativas, desencadeiam uma resposta imune adaptativa especifica ativa, desejada no combate a infecções bacterianas, virais ou parasitárias, no combate a neoplasias, câncer e tumores.

Adicionalmente, o tratamento com as composições imunogênicas da presente invenção é capaz de estimular o poder de regeneração do sistema imune, propiciando um efeito posterior à eliminação da doença infecciosa e de outras enfermidades: o de recuperar células e tecidos, restituindo as funções dos órgãos debilitados por traumas e outros danos que gerem a perda de parte do organismo.

Assim, as composições imunogênicas da presente ivenção invenção são capazes de mobilizar o sistema imune e levar a um aumento do poder de regeneração do corpo, através da mobilização de células tronco ou da ativação de conjuntos gênicos, que possibilitem a regeneração de células e de tecidos, podendo até reconstituir órgãos e suas funções e podendo reconstituir sistemas orgânicos, como o sistema vascular, como o sistema nervoso e o sistema endócrino entre outros.

Conforme poderá ser visto nos Exemplos apresnetados abaixo, as composições imunogênicas da presente invenção apresentam o efeito técnico inesperado de recontextualização, reprogramação e recondução da resposta imune em tempo real e consequentemente índices de cura significativos quando comparadas às drogas e metodologias existentes no estado da técnica.

Em uma primeira modalidade da invenção, uma determinada concentração de agente (s) imunomodulador (es) é utilizada para preparar uma composição farmacêutica imunoterápica capaz de induzir uma resposta imune inata, que desencadeia uma cascata de eventos imunológicos, incluindo a ativação de linfócitos memória a partir dos agente (s) inoculados por intervenção humana e da concomitante ativação pelos antigenos presentes no próprio organismo do paciente, que resultam na recontextualização, reprogramação e recondução da resposta imune em curso a uma determinada doença estabelecida (ou ainda em fase de estabelecimento) , gerando uma resposta adaptativa especifica efetiva a esta doença, possibilitando o combate ao agente patogênico. Ou seja, a administração da composição contendo os agentes da presente invenção repolarizam, ou melhoram a polarização do sistema imune na vigência de uma doença quando a polarização está até então estabelecida de forma inadequada, pela atuação de agente etiológico ou colonizador. A atuação dos agentes da presente invenção, alteram a forma, o tempo, a precisão e a polarização da resposta imune, preferivelmente levando a uma resposta inata e/ou adaptativa especifica que seja mais efetiva para combater a doença, levando a uma melhor reação do próprio organismo.

A presente invenção prevê uma forma de combater estes tipos de agressões heterólogas (infecções e infestações) e autólogas (neoplasias) através do uso das combinações antigênicas descritas. A presente invenção também prevê a possibilidade de agregar terapias tradicionais aos agentes desta invenção, auxiliando o processo de eliminação dos agentes etiológicos invasores heterólogos e células colonizadoras autólogas, através do real potencial terapêutico dos antimicrobianos e antineoplásicos e outros fármacos seletivos aos patógenos e outros agentes etiológicos. Isto é possível pelo princípio do deslocamento do equilíbrio biológico a favor do paciente em associação com uma correta polarização da resposta imunológica conforme descrito na presente invenção.

Quando o estimulo imunológico se segue a uma situação de fim de resposta imune, após cessar o mecanismo da doença ou da agressão, a continuação da ativação do sistema imunológico pelos antigenos ou agentes imunomoduladores da presente invenção,^" leva, pelo acionamento das células tronco, à regeneração dos tecidos, órgãos e sistemas, por mecanismos ainda não totalmente compreendidos, porém relacionados com mecanismos de cicatrização ou restitutio ad integrum observados em diversas situações médicas.

As composições da presente invenção possibilitam recrutar o máximo de células de memória e virgens do individuo, produzindo efeitos mais significativos do que um aumento de anticorpos conforme descrito no estado da técnica. O uso de múltiplos agentes antigênicos com PAMPS e DAMPS distintos o bastante para simular os diferentes tipos de ataque que o organismo sofre e para os quais o organismo já possui memória imunológica, seja por exposição no ambiente ou por programas de vacinação, permite um recrutamento muito mais amplo de células de memória, e células virgens, que permitam em tempo real recontextualizar a resposta imune e assim potencialmente alterar de forma radical o tipo de resposta imunológica e progressão da doença ou enfermidade que acomete o individuo de forma positiva e, em diversos casos, de forma surpreendente em relação ao estado da técnica. Ademais, a presente invenção, ao contrário do estado da técnica, aplica uma maior quantidade de componentes bacterianos, e que tenham representantes de bactérias intra e extracelulares na composição, além de componentes de virus, parasitos, fungos e leveduras. Hayashi e colaboradores não exploraram uma maior diversificação em sua composição para obter um efeito potencialmente maior. 0 processo de aplicação dos agentes antigênicos também foi distinto, dado que a presente invenção abrange a exposição de muito mais áreas do corpo e tecidos que possuam células APCs, e buscando preferencialmente uma exposição em local próximo à infecção ou localidade e outras aplicações distais do local da enfermidade (quando é o caso em doenças ou enfermidades que se manifestam de forma localizada no corpo) . As composições da presente invenção, quando aplicados conforme o processo de utilização da presente invenção, em um ou, geralmente, em diversos locais estratégicos do organismo drenados por territórios ou órgãos linfóides primários e/ou secundários ou ainda intra lesionai, são percebidos por todos os RPPs (receptores de padrões associados a patógenos) de todas as células sentinelas do corpo.

Em um primeiro grupo de condições de agressão ou de perigo real, em que o sistema imunológico está sendo extemporaneamente subjugado, paralisado ou superado por uma bactéria, fungo, vírus, príons, parasitas ou qualquer outro microorganismo ou macroorganismos , uni ou pluricelular, (agressão heteróloga) ou por uma neoplasia maligna ou benigna (agressão autóloga) , a alteração do seu preparo, se dá no estado de ativação e na mobilização do seu aparato celular e molecular da imunidade inata e adaptativa, que integradas são capazes de reverter a situação de desvantagem competitiva, em que o sistema imunológico e o organismo se encontram.

Em um segundo grupo de condições de agressão, onde o perigo real é oriundo do próprio sistema imunológico, ou seja, quando ele mesmo está agredindo o organismo humano ou animal, em uma doença autoimune ou alérgica, a recontextualização do sistema imunológico se dá no seu preparo para poder inibir esta ação prejudicial. A presente invenção induz o sistema imunológico a suprimir o seu estado de ativação e a desmobilizar as alças efetoras memórias, que mantém a auto agressão. Este efeito é alcançado mobilizando o aparato celular e molecular da imunidade inata e adaptativa responsáveis pela supressão e regulação da resposta imune e à volta ao estado de equilíbrio conhecido como homeostase ou normalidade.

Em um terceiro grupo de condições, onde o sistema imunológico lida com as consequências das agressões teciduais, orgânicas ou sistémicas derivadas de múltiplas causas, heterólogas ou autólogas, ou ainda traumáticas, a ação do sistema imunológico se dá na reparação dos danos causados nestas agressões. Neste caso, o preparo ou a mobilização do sistema imunológico se dá através da mobilização de células tronco do próprio sistema imune ou de outros sistemas celulares, autólogos, alogênicos ou heterólogos. Ou ainda pela ativação de conjuntos gênicos presentes nas células do próprio paciente.

Desta forma, a presente invenção utiliza agentes imunomoduladores em quantidade, concentrações e locais específicos para recontextualizar o sistema imunológico ativando e reconduzindo os mecanismos de regeneração e reparação tecidual, tal como ocorre na fase de cicatr ização e regeneração de um tecido, órgão ou sistemas, levando a um "restitutio ad integrum" ou a reconstituição com cicatriz. Esta reparação usualmente é desencadeada no final do processo de uma resposta imune, após cura de um trauma, de uma infecção, de um tumor ou de uma doença autoimune ou alérgica.

Uso das composições imunogênicas da presente invenção .

Considerando as propriedades das composições imunogênicas da presente invenção, constitui outro aspecto da presente invenção o uso das composições imunogênicas na manufatura de medicamentos para prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas.

As referidas doenças infecciosas podem ser de origem virótica, bacteriana, fúngica ou parasitária.

Doenças de origem virótica prevenidas e/ou tratadas pelas composições imunogênicas da presente invençãopodem ser causadas... pelos seguintes vírus mas não limitado a: HIV, vírus da hepatite, vírus da herpes, rhabdovirus, vírus da rubéola, vírus da varíola, poxvirus, paramyxovirus e morbillivirus .

Doenças de origem bacteriana prevenidas e/ou tratadas pelas composições imunogênicas da presente invençãopodem ser causadas... pelas seguintes bactériasmas não limitado a: Pneumococcus, Staphylococcus, Bacillus, Streptococcus, Meningococcus, Gonococcus, Eschericia, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Salmonella , Shigella , Hemophilus, Yersinia , Listeria , Corynebacterium, Vibrio, Clostridia , Chlamydia, Mycobacterium, Helicobacter e Treponema .

Doenças de origem fúngica prevenidas e/ou tratadas pelas composições imunogênicas da presente invençãopodem ser causadas... pelas seguintes fungos mas não limitado a: Cândida, Aspergillus, Cryptococcus neoformans, e/ou fungos causadores de micoses superficiais e profundas. Doenças de origem parasitária são causadas pelas seguintes parasitas: Tripanossoma , Schistossoma , Leíshmania, amebas e tênia.

As composições imunogênicas da presente invenção são também utilizadas na prevenção e/ou tratamento de Lúpus eritematoso sistémico e localizado, artrite reumatóide, poliaterite nodosa, poliomiosite e dematomiosite progressiva, esclerose progressiva sistémica, esclerodermia difusa, glomerulonefrite, myasthenia gravis, síndrome de Sjogren, doença de Hashimoto, doença de Graves, adrenalite, hipoparatiroidismo, anemia perniciosa, diabetes, esclerose múltipla, doenças dismielinizantes , uveites, pemfigos, cirrose pemfigoide, colite ulcerativa, miocardites, enterite regional, síndrome do stress respiratório do adulto, e manifestações locais de reação a drogas, dermatite atópica, eczema infantil, dermatite de contato, psoríases, liquem plano, enteropatias alérgicas, asma brônquica, rejeição de transplantes, doenças pós streptocócicas como manifestações cardíacas, renais e articulares da febre reumáticas e outras manifestações correlatas, várias e múltiplas formas de câncer, como por exemplo, carcinomas, adenocarcinomas , melanomas, sarcomas, astrocitomas malignos, hepatomas, hipernefromãs , linfomas e melanomas, entre outros.

As composições imunoterápicas da presente invenção são úteis também no tratamento de neoplasias, colonizações autólogas, por células tumorais benignas e ou malignas, em todas as formas de câncer, conhecidas como: como carcinomas, adenomas, adenocarcinomas, hepatomas, astrocitomas e outras neoplasias do sistema nervoso central e periférico, melanomas, sarcomas, linfomas e leucemias e todos os tumores benignos.

As composições imunoterápicas da presente invenção podem ser úteis também no caso de doenças provenientes da desautonomia do sistema imune (conforme já citado) tais como: Lúpus eritematoso sistémico; artrite reumatóide; poliarterite nodosa; polimiosites and dermatomiosites e esclerose progressiva sistémica (esclerodermia difusa) ; glomerulonefrites ; miastenia gravis; Síndrome de Sjogren; Doença de Hashimoto (hipotireoidismo) ; Doença de Graves (hipertiroidismo) ; adrenalites; hipoparatiroidismo; anemia perniciosa; diabetes; esclerose múltipla, and doenças desmineralizantes correlatas ou relacionadas; uveites; pemfigus e cirrose pemfigóide; colite ulcerativa; miocardites; enterite regional; hepatites e cirroses; síndrome do estresse respiratório do adulto (adult respiratory distress syndrome) ; manifestações locais e sistémicas de reações a drogas, tais como farmacodermias , dermatites e entre outras.

Ainda no campo das doenças da desautonimia do sistema inume entram ainda como imunoterapia da presente invenção o tratamento dos acidentes vasculares arteriais e venosos, nas doenças tais como enfarto do miocárdio, fenómenos trombo embólicos pulmonares, cerebrais e digestivos ou em qualquer outro território do organismo onde o acidente vascular leva a isquemia ou a hemorragia, que tem como consequência a necrose ou a atrofia desses segmentos, tais como, mas sem se limitar, a todo o sistema locomotor, todo o sistema nervoso central e periférico, que levem a oclusão da suplência sanguínea e tem como consequência os infartos e os acidentes cerebrais. Desta forma a imunoterapia da presente invenção apresenta uma ação anti-inflamatória e aumento da imunidade que pode levar ao bloqueio de processos inflamatórios importantes ao estabelecimento de doenças como: síndrome metabólica, obesidade, diabetes tipo 2, arteroesclerose, esteatose hepática alcoólica, esteatose hepática não alcoólica, hipertensão, insuficiência renal, síndrome pós trombótica, pós tromboflebites e qualquer outra doença derivada de uma ação inflamatória do sistema imunológico .

No caso de doenças alérgicas, autoimunes e inflamatórias a imunoterapia da presente invenção poder ser útil, mas sem se limitar, às inflamações associadas ou provocadas por reações do tipo alérgico da pele; na dermatite atópica eczema infantil; dermatite de contato na asma, na asma brônquica, na bronquiolite e bronquite alérgica, na rinite alérgica; enterite alérgica; enteropatia alérgica; processos inflamatório pseudo- tumorais de origem atualmente desconhecida; psoriases (pseudo tumor inflamatório) ; liquem plano; doenças pós- estreptocócicas ; rejeição de transplante de coração, fígado, pulmão, rins, ilhotas pancreáticas e outros; hipersensibilidade ou respostas imunológicas destrutivas contra agentes infecciosos; doença pós-estreptocócicas , tais como cardíaca, renal, miocardite, pericardite ou febre reumática; e equivalentes por outros agentes etiológicos, não limitadas pelas formas destas manifestações. No caso das doenças autoimunes e alérgicas as concentrações e dosagens serão preferencialmente bem menores, atuando na ativação incompleta das células imunes, memórias ou não, podendo englobar, mas sem se limitar às doenças já citadas.

As composições imunogênicas da presente invenção são também utilizadas para induzir a regeneração celular, regnçeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino.

Assim uma modalidade da invenção constitui um método para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino em um animal caracterizado por compreender administrar ao animal uma quantidade eficaz de uma ou mais composições imunogênicas da presente invenção.

Constitui uma outra modalidade da presente invenção um método para recondução da resposta imune em um animal que compreende as seguintes etapas:

a) administrar sistémica e/ou localmente no animal uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma ou mais composições imunogênicas, conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 21;

b) garantir o contato de uma ou mais composições imunogênicas, aplicadas na etapa "a" com as células dendriticas ou outras células APC do animal;

c) administrar opcionalmente agentes prostéticos, tais como vitaminas no local ou região onde ocorre a doença a ser tratada, de forma a fortalecer o metabolismo e consequentemente o sistema imune do animal; e

administrar opcionalmente outros medicamentos ou tratamentos específicos.

Em uma modalidade da presente invenção, as composições da presente invenção são administradas de uma só vez, em um único território do organismo ou em diferentes territórios de forma a reconduzir o sistema imune com maior eficácia possível. 0 uso das composições imunogênicas da presente invenção para modulação do sistema imune, envolvendo a exposição de parte ou do todo do sistema de reconhecimento de antígenos do sistema imune, tal como as células dendriticas, linfonodos e macrófagos de distintas partes do corpo, vai depender do objetivo imposto pela enfermidade sendo combatida, e dá-se preferencialmente através de injeções ou uso de pistolas, ou sistemas de liberação ou infusão controlada ou células pulsadas com antígenos in vitro. 0 agente pode ser aplicado em apenas um local do organismo ou em diversas dezenas de locais, em forma subcutânea, muscular, intravenosa, oral, por aerosol respirável, cutânea {patchs) em órgãos, vísceras ou tecidos específicos, . ou em distintas cavidades do organismo, em número que pode variar entre uma a 100 (cem) aplicações em uma a 50 (cinquenta) sessões.

As composições antigênicas da presente invenção também podem ser combinadas a outros medicamentos capazes de debilitar a reprodução, crescimento ou qualquer outra forma de fortalecimento do agente causador da doença, gerando um deslocamento do equilíbrio biológico a favor das defesas imunes do hospedeiro, humano ou animal. Ou ainda no tratamento concomitante

As composições antigênicas da presente invenção também podem ser combinadas a outros procedimentos tais como, porém sem se limitar, a antibioticoterapia, a quimioterapia, a radioterapia, a terapia com anticorpos e antisoros, uso de hormônios ou outros agentes moduladores da fisiologia (citocinas, quimiocinas, neurohormônios , peptídeos) , terapia com agentes antivirais, uso de fitoterápicos , suplementação com vitaminas, suplementação com outros cofatores ou agentes postéticos, transplantes de células ou tecidos, técnicas de vacinação terapêuticas ou profiláticas (com ou sem células e sem se limitar ao tipo de veículo das vacinas) , terapia gênica, cirurgias ou homeopatia, a depender da doença ou enfermidade relacionada com uma atividade imune imprópria ou ineficiente sendo combatida .

Em particular, de forma a aumentar, diminuir ou polarizar a resposta imune conforme o objetivo da imunoterapia as composições antigênicas da presente invenção podem ser usadas em conjunto com terapia com citocinas e/ou quimiocinas tais como GM-CSF, IL4, IL5, IL7, IL12, IL15, IL21, interferon gama, e mais preferencialmente IL2.

Recon extualização, reprogramação e recondução da resposta imune.

A recontextualização do sistema imune, como já foi explicado no texto do presente pedido de patente, se faz através da estimulação do sistema imunológico pelos antigenos de diferentes patógenos, não relacionados a patologia a ser tratada, para os quais o organismo humano ou animal, de preferência, já possua uma memória imunológica .

Estes vários e variados antigenos em número superior a cinco, com múltiplos PAMPs e DAMPs devem provocar nas células sentinelas e nas células APC, principalmente nas células dendriticas, uma ativação intensa que permita a mobilização dos linfócitos TCD4 memória específicos destes antigenos no local da aplicação.

Estes estímulos devem ser capazes de provocar uma intensa, forte e efetiva resposta imunológica específica secundária a estes antigenos no local da aplicação, nos linfonodos loco regionais, nos linfonodos a distância e uma mobilização sistémica do sistema imunológico para que este possa, em paralelo, provocar uma resposta efetiva específica capaz de erradicar a patologia em curso.

A resposta imunológica inata e adaptativa intencionalmente provocada pela composição da presente invenção deverá compreender toda a extensão corpórea da área afetada pela patologia a ser tratada e mesmo ultrapassá-la se possível para ser capaz de ativar as células sentinelas e APC em número e na intensidade que seriam necessárias para as mesmas dimensionarem corretamente a agressão provocada pelo patógeno da doença a ser tratada, ativando e provocando a melhor resposta especifica adaptativa, efetiva e corretamente polarizada sequencialmente de modo a poder curar a patologia a ser tratada . Deste modo a resposta inata e adaptativa provocada pela presente invenção, se superporá geograficamente a da patologia a ser tratada e pela sua intensa e extensa ativação corrigirá a ativação ineficiente, propositadamente limitada pela ação do patógeno, que esta vencendo as defesas do organismo, impedindo pela competição, a sua correta mobilização e a elaboração de uma resposta adaptativa efetiva segundo seu maior potencial genético e biológico. Esta ativação ideal também deverá reverter a imunossupressão, a tolerância e os mecanismos de escape estabelecidos pelo patógenos pois é sabido e comprovado, que uma resposta imune forte e intensa não relacionada, que abrange totalmente a resposta a ser corrigida, através das células ativadas e citocinas do sistema imune, corrigem estas situações de deficiência de maneira eficiente.

As células efetoras e memórias especificas dos antigenos da presente invenção, ativadas e geradas no local da aplicação dos antigenos, vão via sanguínea entrar nos linfonodos já ativados, que drenam a região afetada pela doença e vão ativar de maneira forte e intensa todas as células dendriticas ai existentes. Deste modo vão provocar uma ativação de todo o linfonodo, fazendo-o crescer com uma irrigação aumentada, aumentando as suas dimensões e tornando-o um linfonodo reacional capaz de provocar uma resposta imune contra antigenos fracos, que por si sós não são capazes de provocar uma resposta imune. Este efeito adjuvante, bem conhecido e demonstrado experimentalmente e clinicamente, dos linfócitos T efetores/memória, se contraporá à ação do agente etiológico alvo, que está bloqueando a ativação necessária do linfonodo, para a elaboração da resposta imune que se faz necessária para combater a doença em questão.

- Que, exclusivamente pelo propósito e pela ação da presente invenção, através da sua potente composição antigênica, possa ocorrer, que as células sentinelas e as células dendriticas e macrófagos da resposta imune serão as mesmas, para os antigenos não relacionados e para os antigenos patológicos, porém a partir desta ação, estarão intensa e corretamente ativadas. As células dendriticas intensamente ativadas por múltiplos antigenos, terão um metabolismo lento e apresentarão idealmente todos os epitopos dominantes e subdominantes do agente etilógico, pelo conhecido efeito "helper", mobilizando todos os possíveis e disponíveis linfócitos T capazes de reconhecer especificamente os antigenos do patógeno autólogo ou heterólogo, a ser tratado e contra ele poder reagir.

Que a área do processo inflamatório e os territórios linfáticos sejam exatamente os mesmos. A área inflamada, pela conhecida ação anti-inflamatória das células memorias específicas, não relacionadas, mobilizadas, pela presente invenção através da sua composição antigênica, vão bloquear os inflamassomas e exercerão uma ação anti-inflamatória que corrigira a inflamação patológica responsável pela morbidade da doença e que foi provocada pelo seu agente etiológico. Para efeito de memória é importante ressaltar que esta conhecida ação das células memórias T é uma das principais responsáveis, pelo fato, de um segundo contacto com um gente patológico qualquer, após uma imunidade estabelecida, ocorrer de maneira completamente assintomática sem provocar uma doença .

-Que os territórios linfáticos sejam exatamente os mesmos, só que agora intensamente ativados e com o sinal de alarme necessário, dado pela presente invenção, para provocar qualquer resposta imunológica, mesmo para um antigeno fraco, a exemplo do que ocorre com as células dendriticas comuns a esta invenção e ao agente etiológico autólogo ou heterologo a ser combatido. As linfocinas e células inatas que comandam uma reposta secundária efetiva serão as mesmas e os linfócitos T específicos contra o agente etiológico a ser combatido, vão pegar "uma carona deste microambiente ideal para a realização de uma resposta imune efetiva

-Que deste modo as células dendriticas ativadas pela presente invenção, possam captar os antigenos do , agente etiológico a ser combatido, no local da patologia e nos territórios linfáticos concernentes e poder estar em contato com os linfócitos TCD4 específicos do agente patológico, em um sistema linfático correta e idealmente ativado. A atuação das células dendriticas ativadas e maturadas com os linfócitos TCD4 específicos do agente etiológico, ocorrerá em um microambiente propicio a realização de uma resposta imune, com todo o potencial genético e biológico do sistema imune do organismo do hospedeiro .

As referidas células dendriticas no local da patologia e nos gânglios linfáticos irão dimensionar corretamente a gravidade, a extensão, a intensidade e o tipo da agressão, ativando, induzindo, coordenando, polarizando, conduzindo e mantendo uma nova resposta imunológica adaptativa efetiva, cuja alça efetora, com a colaboração das células e das moléculas efetoras da imunidade inata intensa e corretamente ativadas poderão ter a possibilidade de eliminar o agente etiológico a ser combatido. Assim a reposta será reprogramada e reconduzida como acima assinalado, revertendo o equilíbrio biológico a favor do hospedeiro, que até então estava sob o jugo do agente agressor autólogo ou heterologo.

Esta ação poderá ocorrer com, ou sem a ajuda de um deslocador do equilíbrio biológico como os antibióticos e os antineoplásicos , capazes de bloquear, enfraquecer ou neutralizar a ação e o potencial do agente etiológico, permitindo que o sistema imunológico possa ter a chance de curar a patologia alvo do tratamento. O sistema imunológico uma vez acionado por qualquer agente etiológico, só para uma resposta quando elimina o agente etiológico ou o organismo vem a falecer, desta maneira a presente invenção ajudará a evitar a última hipótese, ou melhorará as condições do paciente se ocorrer uma doença crónica que não puder ser curada.

Deste modo a ação das composições da presente invenção intencionalmente e estrategicamente supraposta e sobreposta sobre toda área sob ação do agente etiológico a ser combatido. Recontextualizará o sistema imune pela ativação dos PAMPs e DAMPs das células sentinelas e APCs comuns e pela resposta imune adaptativa secundária especifica não relacionada. Esta resposta imune intencionalmente induzida, ativará de maneira eficiente todo território linfático e o território orgânico atingido pelo agente etiológico. Na área recontextualizada e no bojo e dentro do contexto de uma resposta imunológica maior, mais forte, mais intensa, mais extensa, secundária, anti- inflamatória por natureza a reposta imune alvo será como descrito reprogramada e reconduzida de modo eficiente dentro das maiores possibilidades do hospedeiro, agora com chance de reverter o equilíbrio biológico a seu favor.

Adequação do protocolo às caracteisticas fisiopatológicas da patologia a ser tratada:

a) as bases da imunoterapia contra as neoplasias .

As neoplasias malignas apresentam como característica principal o domínio do microambiente, como definido no estudo da presente invenção e que difere daquele tradicionalmente balizado no atual estado da técnica, que é o do ambiente provocado pela ação da células tumorais com as células do organismo que por esta ação passam a funcionar à seu favor. 0 micro ambiente aqui definido é o espaço em torno de uma só célula neoplásica ou um conjunto destas, que por meio das moléculas de superfície e/ou por outras moléculas por ela secretadas passam a dominar totalmente este ambiente ao seu favor.

Nesse espaço dominado o tecido conjuntivo passa a sustentar e nutrir estas células através de seus elementos estruturais e de novos vasos destinados à suprir as células neoplásicas e seu tecido de sustentação. Através de moléculas de superfície e substâncias e enzimas secretadas neste ambiente pelas células tumorais, estas destroem o tecido de onde se originaram e os tecidos saudáveis por elas invadidos, que passam a ser colonizados e substituídos. As moléculas de superfície e as secretadas bloqueiam completamente o sistema imunológico imobilizando e inativando as células sentinelas, APC e linfocíticas induzindo uma imunossupressão inespecífica e específica e desativando os linfonodos loco-regionais e à distancia. Através do domínio do microambiente as células neoplásicas pelas enzimas e moléculas de superfície entram nos vasos sanguíneos e linfáticos ganham a circulação e colonizam locais a distância do tumor original e provocam metástases a distância tanto linfáticas quanto hematogênicas .

Deste modo, o domínio total do micromabiente em torno de uma só célula leva uma célula tumoral, através de sua proliferação indiscriminada, a subjulgar patologicamente inicialmente o espaço em torno de si mesma, o seu tecido de origem, as áreas adjacentes, o órgão e finalmente através das metástases o organismo como um todo. Assim também, a imunoignorância, a imunossupressão e a tolerâncias específicas e inespecíficas induzidas são primeiramente in situ, depois locais, loco-regionais , orgânicas e, finalmente, sistémicas dominando completamente o sistema imunológico do corpo do hospedeiro.

O domínio do microambiente é, portanto, o efeito estratégico, crucial e determinante produzido pelo potencial genômico de uma célula neoplásica, que leva uma só célula tumoral a dominar o espaço in situ, local, regional, orgânico e sistémico colonizando o hospedeiro e o conduzido ao óbito.

Em suma, uma imunoterapia deve, obrigatoriamente, quebrar o domínio do microambiente e macroambiente tumoral estabelecido e abranger todos os territórios imunológicos dominados pela neoplasia. 0 tratamento imunoterápico deverá, também, abranger os territórios linfáticos à distância da área tumoral induzindo uma recontextualização, reprogramação e recondução do sistema imune de fora para dentro da área atingida com uma forte inércia capaz de reverter, conjuntamente com o tratamento loco- regional (intratumoral e perilesional, completamente o domínio tumoral .

A imunoterapia deverá ser realizada cada 4 ou 5 dias, pois é o período fisiológico de geração de células supressoras que controlam a resposta imune. Vagas sucessivas de estimulação antigênicas repetidas neste espaço de tempo perenizam a resposta imune indefinidamente perpetuando o estímulo antigênico assim como ocorre em uma infecção antes de sua fase de cronificação e geração de uma disfunção imunológica. A não geração de células supressoras e a recontextualização impedem o domínio das células supressoras pelo o tumor e sua proteção contrapondo-se ao domínio do ambiente.

A ação de uma célula neoplásica no domínio do micro e conjunto delas no macroambientes se realiza por 24 horas por dia e durante de todo o período em que existe a doença. Portanto, a imunoterapia com a abrangência, invergadura e frequência supracitas deverá ser aplicada continuamente enquanto houver células tumorais. É interessante mencionar que as imunoterapia tradicionais que provocam estímulos descontínuos, à semelhança dos protocolos para imunização com antígenos inertes (solúveis ou não) ou agentes atenuados, não encontram aplicação ao contexto fisiopatológico induzido pelos tumores.

Uma resposta imune específica qualquer pode amplificada e potencializada de maneira eficiente pela adição de citocinas e/ou quimoquinas, preferencialmente IL2 exógena em nível de saturação de receptor, que irá produzir a proliferação de células imunes que reconheceram o antígeno e, por esta razão, apresentam em sua superfície a expressão completa do receptor da interleucina 2. Assim sendo, só será amplificada a resposta dos antígenos induzidos pela invenção e os induzidos pelo agente etiológico (autólogo ou heterólogo) . Em uma imunoterapia antitumoral na qual somente existem antigenos fracos, esta deverá ser complementada com a IL2 de modo a se obter uma resposta imunológica efetiva e robusta.

As bases da imunoterapia conta a septicemia, sepses e "shock séptico"

A septicemia é definida como um infecção extremamente grave, na qual uma ou mais bactérias, ou microorganismos, a partir do seu ponto de entrada, entram na circulação sanguínea e passam a circular geralmente em grande número, estabelecendo-se em pontos a distância colonizando tecidos, órgãos sucessivamente podendo nos casos mais graves a atingir a maioria da superfície corpórea. Geralmente quando a carga de microrganismos é muito grande, um numero grande de bactérias, com seus produtos tóxicos e metabólicos, com incontáveis PAMPS e DAMPS, tocando todos os também incontáveis RPPs e RDPs da maioria da superfície corpórea, ao mesmo tempo geram um extenso, intenso e violento processo inflamatório generalizado, pela maciça liberação de citocinas a partir da tradução de todos estes sinais.

A evolução desfavorável da septicemia leva à sepses, pela liberação maciça de citocinas pro-inflamatórias como TNFs, IL1, IL18, IL6 e outras, que provocam um colapso inflamatório com alterações hemodinâmicas características, como hipotensão, pulso acelerado, que pode culminar com o "shock" séptico, geralmente de carácter irreversível. A septicemia, a sepses são infecções graves com alta morbidade e mortalidade. Nestas infecções graves o sistema imunológico, por sua vez, com a sua operacionalidade comprometida, pelas deficiências e bloqueios induzidos pelas bactérias, passa a atuar de maneira a eliminar as bactérias a qualquer custo, pelo perfil Thl7 tissular inflamatório aumentando a inflamação de modo desproporcional prejudicando o organismo.

Neste perfil inflamatório tissular as alças efetoras da imunidade inata comandada pelos linfócitos TCD4 provocam lesões e destruições teciduais as vezes maciças, que comprometem órgãos e tecidos e que agravam as infecções, levando, por exemplo, à insuficiência respiratória, no pulmão de choque e na S.A.R.A. (Síndrome da Angustia Respiratória do Adulto) e levam também à insuficiência renal e a falência de múltiplos órgãos.

Portanto, nas septicemias, na sepses e no choque séptico existem duas variáveis que estrategicamente devem ser consideradas e devem ser o alvo de uma imunoterapia para esta ser bem sucedida. Estas duas variáveis são a inflamação massiva provocada pela disseminação de incontáveis bactérias no corpo todo e sua ligação com os RPPs e DPPs e a polarização para o perfil Thl7 provocada pela inviabilidade funcional dos perfis Thl e Th2. Estas variáveis são a pedra angular da severidade, da gravidade, da morbidade e da mortalidade destas patologias.

Levando em conta estas duas variáveis uma imunoterapia para ser efetiva nestas infecções deverá ser aplicada de modo a abranger toda a superfície corpórea, incluindo o maior numero de territórios linfáticos, para geograficamente se sobrepor a ação do patógenos ou patógenos. Deverá também se possível ser aplicada nas áreas lesionadas e na região perilesional para que em conjunto possam provocar uma recontextualização generalizada que recupere pela sua ação a integridade da alça T e produza um amplo extenso e intenso efeito anti-inflamatório através das células T efetoras/memórias geradas nos locais de aplicação. Deverá em paralelo pela reconstextualização e reprogramação acima descritas polarizar a resposta TCD4 do perfil Thl7 tissular inflamatório para os perfis de imunidade TH2 humral E TH1 celular, diminuindo ainda mais a inflamação generalizada.

A amplificação de alça pela IL2 deverá ser muito fraca, apenas o suficiente para amplificar especificamente a repolarização da resposta imune do perfil inflamatório para o perfil de imunidade.

Deste modo a recontextualização e a reprogramação alcançada pela imunoterapia usando as composições da presente invenção, através do resgate das células imunes, através da ação anti-inflamatória dos linfócitos T memória específicos não relacionados, através da repolarização do perfil tissular inflamatório TH17 para os perfis de imunidade eletiva e efetiva TH2 e TH1 , reconduzira a resposta imune. Esta resposta imune, reconduzida em tempo real, durante o processo infeccioso, poderá em conjunto com um deslocador do equilíbrio biológico, no caso com o uso de vários antimicrobianos , ter a chance de reverter este equilíbrio biológico na extremidade da curva em que é amplamente favorável ao microorganismo, para ser agora favorável ao hospedeiro e este ter uma chance de solução.

Adequação do protocolo ao "status" do sistema imunológico na patologia e no paciente a ser tratado .

No caso das neoplasias e da septicemias, pelos próprios mecanismos fisiopatológicos , há uma quebra da integridade e funcionabilidade da alça T com uma polarização inadequada para um perfil TREG supressor nas neoplasias e Thl7 inflamatório tissular nas septicemias com uma inoperabilidade quase completa do sistema imunológico vencido pela doença. Nestes casos, como nos exemplos aqui citados, a recontextualização deve atingir todo o organismo a fim de reverter toda a imunossupressão, a tolerância e a imunoignorância induzidas pela patologia, bem como restaurar toda a capacidade funcional e operacional do sistema imunológico para haver uma reprogramação e recondução de uma resposta imune efetiva.

Racional do protocolo terapêutico

O protocolo terapêutico da presente invenção desenhado para ser aplicado nos casos de câncer e de septicemia deverá:

-ser aplicado na maior parte nas regiões de linfáticas estratégicas do corpo ou da infecção. Nos casos descritos neste documento, foram atingidos mais de 10 territórios linfáticos. Deverá ser aplicada dentro das áreas tumorais e infectadas nas áreas peri lesionais

-A formulação imunoterápica deverá conter pelo menos 5 antigenos antigenos de modo a conter PAMPs e DAMPs de modo a ser capaz de recontextualizar o sistema imunológico .

-a área de aplicação deverá se sobrepor, abranger e suplantar toda a extensão das regiões dominadas pelo tumor e pela infecção.

-os estímulos antigênicos deverão ser repetidos a cada 4 ou 5 dias a fim de evitar a geração de células supressoras capazes de abortar a nova resposta imune desejada ou suprimir uma repolarização alcançada.

-a tratamento deverá ser mantido desta maneira até a eliminação da última célula neoplásica, ou o fim da infecção, ou a cicatrização das lesões, órgãos ou sistemas.

-na prática deverão ser aplicados de 1 a 3 mL da presente imunoterapia em 10 ou mais territórios linfáticos. Conjuntamente a presente inversão deverá ser aplicada intra e extra tumoral ou lesionai nas áreas lesionadas pela neoplasia, ou pela infecção.

Em resumo a imunoterapia é "sistemicamente" distribuída em vários (pelo menos dez) territórios linfáticos, peri e intratumorais ou lesioanais com volume capaz de desestruturar e desestabilizar o tumor e o domínio de seu micro e macroambientes , ou de abranger significativamente a área afetada pela infecção e inflamação, bem como de restabelecer o microambiente , que seja favorável a resposta imune do organismo. Será aplicado a cada 4 a 5 dias com o uso de interleucina 2 exógeno em baixas doses, de modo ininterrupto, durante o período da duração da doença. No caso da septicemia da sespse e do choque séptico como já foi assinalado esta dose deverá ser a menor possível.

EXEMPLOS

Para permitir uma melhor compreensão da presente invenção e demonstrar claramente os avanços técnicos obtidos, são apresentados abaixo, como exemplos, os resultados dos diferentes ensaios efetuados com relação a esta invenção. No Exemplo 1 são descritas diversas composições imunogênicas preferencias da presente invenção. Nos Exemplos 2 a 8 são ilustradas as propriedades, uso e metodologias terapêuticas empregando as composições imunogênicas da presente invenção. Nos Exemplos 2 a 8 foi utilizada a composição imunogênica descrita no Exemplo 1, composição 1, e aqui denominada DECA.

Estes Exemplos são apresentados a titulo meramente ilustrativo e não devem ser de forma alguma considerados como limitativos do âmbito e do alcance da presente invenção .

Exemplo 1: Composições imunogênicas

A fim de atingir a recontextualização, reprogramação e recondução da resposta imune em tempo real conforme os conceitos inovadores descritos na presente invenção, um especialista experiente na técnica poderá desenhar diversas e distintas composições, combinações ou formulações de produtos que se enquadram no escopo da presente invenção.

Conforme descrito, para que tais composições atendam aos requisitos técnicos necessários para que os resultados vantajosos ou inéditos no combate a uma série de enfermidades e doenças sejam atingidos, as mesmas devem apresentar elevada diversidade de antigenos de patógenos, de modo a obter o máximo de efeitos sinérgicos na ligação de PAMPs e DAMPs aos seus receptores possibilitando atingir elevado grau de ativação da imunidade inata nas células sentinelas (com ou sem função ATC) permitindo assim a recontextualização, reprogramação e recondução da resposta imune em tempo real.

Tais composições devem utilizar preferencialmente os agentes antigênicos para os quais a maioria das pessoas, em virtude de contato prévio, apresentariam clones de memória em seu sistema imune capazes de induzir uma ampla ação anti-inflamatória em paralelo à recontextualização . Para tanto, devem ser preferencialmente selecionados agentes antigênicos que:

• correspondam às infecções mais comuns contraídas pelo indivíduo desde a infância até a maturidade (quando o animal ou o ser humano adquire o seu "repertório de imunidade").

• sejam utilizados em programas de imunização tais como programas de vacinação infantil, contra moléstias endémicas e/ou enfermidades epidêmicas.

• sejam oriundos de organismos da microbiota potencialmente patogênica, principalmente do trato gastrointestinal, onde os línfócitos de memória exercem uma barreira dinâmica ativa garantindo a sobrevivência do indivíduo.

• Idealmente cada um dos agentes antigênicos deve estar presente em uma concentração de em uma concentração de 0,001 a 500 microgramas por mL.

De acordo com estes conceitos foram desenvolvidas diversas formulações utilizando agentes antigênicos nas suas formas já disponíveis, seguras e aprovadas para utilização em humanos em programas de vacinação ou testes de resposta alérgica e testes de avaliação de imunidade.

Desta forma, apresentamos a seguir diversos exemplos de composições que se enquadram no escopo da presente invenção, sem porém o intuito de limitá-la, uma vez que a presente invenção e seus conceitos permitem o desenho de composições imunogênicas compreendendo um número muito elevado de combinações de agentes antigênicos.

Composição 1

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de

Mycobacterium bovis) . 0,004 ng/mL

PPD 0,004 g/mL

Lisado inativado de Staphylococcus (Staphylococcus

aureus e Staphylococcus epidermidis em partes 6,94 μg/mL iguais ) .

Lisado inativado de Steptococcus (Streptococcus

pyogenes , Streptococcus pneumonie e Enterococcus 6,94 ug/mL faecalis em partes iguais).

Estreptoquinase oriunda de purificação a partir de

0,444 μg/mL lisado inativado de Streptococcus beta-hemolitico .

Dornase oriunda de purificação a partir de lisado

0,111 μg/mL inativado de Streptococcus beta-hemolitico.

Lisado inativado de Cândida (Cândida albicans e 6,94 g/mL Cândida glabrata em partes iguais) .

Lisado inativado de dermatofitos (Epidermophyton

floccosum , Microsporum cannis, Tricophyton 6,94 μg/mL mentagrophytes variedade interdigitale em partes

iguais) .

Lisado e inativado de Escherichia coli

6,94 μg/mL enteropatogenica (EPEC)

Lisado e inativado de Salmonella (Salmonella

bongori , Salmonella entérica e Salmonella 6,94 μg/mL subterrânea em partes iguais) .

Cloreto de sódio 7 , 5 mg/mL

Fosfato de sódio dibásico heptahidratado 0,48 mg/mL

Fosfato de potássio monobásico 0,06 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Agua q. s . p .

Composição 2

Agua q . s . p .

Composição 3:

Componente Concentração Componente Concentração

PPD.

0,004 ug/mL

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6, 94 μg/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Staphylococcus aureus e lisado 6, 94 μg/mL inativado de Staphylococcus epidermidis em partes

iguais .

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado 6,94 ug/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Cloreto de sódio 7 , 5 mg/mL

Fosfato de sódio dibásico heptahidratado 0,48 mg/mL

Fosfato de potássio monobásico 0,06 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Agua q . s . p .

Composição 4:

Componente Concentração

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

Lisado inativado de Staphylococcus aureus e lisado 6,94 μg/mL inativado de Staphylococcus epidermidis em partes

iguais .

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus 6,94 μg/mL agalactiae e de mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de Streptococcus

pyogenes, lisado inativado de Streptococcus

pneumonie e lisado inativado de Enterococcus

faecalis em partes iguais. Lisado inativado de Cândida albicans, lisado 6,94 μg/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Cloreto de sódio 7 , 5 mg/mL

Fosfato de sódio dibásico heptahidratado 0,48 mg/mL

Fosfato de potássio monobásico 0,06 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q . s . p .

Composição 5:

Agua q . s . p .

Composição 6:

Componente Concentração Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6,94 μg/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 pg/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus , 6,94 μg/mL Aspergillus flavus e Aspergillus terreus em partes

iguais .

Cloreto de sódio 7 , 5 mg/mL

Fosfato de sódio dibásico heptahidratado 0,48 mg/mL

Fosfato de potássio monobásico 0,06 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q . s . p .

Composição 7 :

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

Lisado inativado de Staphylococcus aureus e lisado 6,94 g/mL inativado de Staphylococcus epidermidis em partes

iguais.

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado 6,94 μg/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Streptococcus equinus , 6,94 μg/mL Streptococcus bovís e Streptococcus do grupo

viridans em partes iguais.

Lisado inativado de Escherichia coli 6, 94 g/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC) em partes iguais.

Lisado inativado de Salmonella typhi , Salmonella 6,94 μg/mL paratyphi e Salmonella entérica em partes iguais.

iguais .

Antigenos do vírus do sarampo ("cepa Schwarz") 10.000 lisado e inativado. TDCI50/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q. s . p .

Composição 8:

Componente Concentração

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de Myccubacteriujn tuberculosis . 0,004 ng/mL

iguais .

Lisado inativado de Escherichia coli 6,94 μg/mL enteropatogênica (EPEC), produtora de toxina

"shiga-like" (STEC), enteroagregativa (EAEC),

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

Agua q . s . p .

Composição 9:

Componente Concentração

Lisado inativado de BCG. . 50 mg/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis 0,004 ng/mL

iguais .

Lisado e inativado de Escherichia coli 6,94 μg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

Agua q . s . p .

Composição 10:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium africanum. 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Escherichia coli 6,94 μg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de tollina

"shiga-like" (STEC) _r enteroagregativa (EAEC) ,

Agua q. s . p .

Composição 11:

Componente Concentração Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium leprae. 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

iguais .

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado 6,94 μg/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus 6,94 ug/mL agalactiae e de mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de Streptococcus

pyogenes, lisado inativado de Streptococcus

pneumonie e lisado inativado de Enterococcus

faecalis em partes iguais.

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 μg/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo

viridans em partes iguais.

Lisado inativado de Haemophilus influenzae . 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Proteus mirabilis, Proteus 6,94 μg/mL vulgaris e Proteus penerii em partes iguais.

Antígenos do vírus da rubéola ("cepa Wistar RA 10.000 27/3M") lisado e inativado. TDCI50/mL

Antígenos do vírus da Varicella zoster vírus lisado 149.231 e inativado.. PFU/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2,5 mg/mL

Água q . s . p .

Composição 12:

Agua q. s .p.

Composição 13:

Componente Concentração Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Helicobacter pylori . 6,94 μg/mL

Lisado de Serra tia marcencens e Serratia 6,94 μg/mL liquefaciens em partes iguais.

149.231

Antígenos do HSV-I e HSV-II lisado e inativado. PFU/mL

Antígenos do vírus do sarampo ("cepa Schwarz") 10.000 lisado e inativado. TDCI50/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q . s . p .

Composição 14:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium africanum. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae. 6,94 μg/mL

Agua q . s . p .

Composição 15:

Componente Concentração

PPD 0,004 pg/ml

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

viridans em partes iguais.

iguais .

Toxóide tetânico 50 unidades Componente Concentração de Lf/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Lisado inativado de Acinetobacter baumannii. 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Escherichia coli 6,94 μg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC)em partes iguais.

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, 6,94 μg/mL Aspergillus flavus e Aspergillus terreus em partes

iguais .

Antigenos do virus do caxumba ("cepa Urabe AM9") 50.000 lisado e inativado. TDCI50/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q. s .p.

Composição 16:

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Salmonella typhi, Salmonella 6,94 μg/mL paratyphi e Salmonella entérica em partes iguais.

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Epidermophyton floccosum, 6,94 μg/mL

Agua q. s . p .

Composição 17:

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

PPD 0,004 ug/ml

iguais .

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6,94 μg/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado Componente Concentração inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Klebsiella oxytoca e lisado 6,94 μg/mL inativado de Klebsiella pneumoniae em partes iguais

Lisado inativado de Epidermophyton floccosum, 6,94 μg/mL Microsporum cannis e Tricophyton mentagrophytes

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 g/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo

viridans em partes iguais.

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Lisado inativado de Escherichia colí 6,94 μg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC), enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ET.EC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC)em partes iguais.

Toxóide de Bordetella pertussis . 75 μg/mL

iguais .

Antigenos do virus do sarampo ("cepa Schwarz") 10.000 lisado e inativado. TDCI50/mL

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado

inativado de Cândida parapsilosis e lisado 6,94 μg/mL inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Agua q . s . p .

Composição 18:

Componente Concentração

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

iguais .

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6,94 g/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Estreptoquinase oriunda de purificação a partir de 0,444 μg/mL lisado inativado de Streptococcus beta-hemolitico .

Dornase oriunda de purificação a partir de lisado 0,111 g/mL inativado de Streptococcus beta-hemolitico.

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus 6,94 g/mL agalactiae e de mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

Lisado inativado de Helicobacter pylori. 6,94 pg/mL

Agua q. s .p.

Composição 19:

Componente Concentração

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

iguais .

Lisado de Serratia marcencens e Serratia 6,94 μg/mL liquefaciens em partes iguais.

Lisado inativado de Haemophilus influenzae. 6,94 g/mL

6,94 μg/mL

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus

agalactiae e de Mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

variedade interdigitale em partes iguais.

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Antigenos do virus vacinico ("smallpox") lisado e 1 a 10 x 10^a inativado PFU/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Agua q . s . p .

Composição 20:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium africanum. 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, 6,94 g/mL Aspergillus flavus e Aspergillus terreus em partes

iguais .

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6,94 ug/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC) .

Antigenos Lisado inativado de Salmonella typhi, 6,94 μg/mL Salmonella paratyphi e Salmonella entérica em

partes iguais.

Lisado inativado de Acinetobacter baumannii . 6,94 μg/mL

6,94 μg/mL

Lisado inativado de Helicobacter pylori. Componente Concentração

Lisado inativado de Haemophilus influenzae. 6, 94 μg/mL

Antígenos do vírus do caxumba ("cepa Urabe AM9") 50.000 lisado e inativado. TDCI50/mL

40UD antígenos tipo 1; 1,8UD

Lisado inativado de Polio vírus antígenos tipo 2 e 32UD antígenos tipo 3

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Agua q. s . p .

Composição 21:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium leprae . 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

iguais .

variedade interdigitale em partes iguais.

Toxóide diftérico 67 unidades Componente Concentração de Lf/mL

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 yg/mL

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 g/mL

Lisado inativado de Proteus mirabilis, Proteus 6,94 yg/mL vulgaris e Proteus penerii em partes iguais.

Lisado de Serratia marcencens e Serratia 6,94 yg/mL liquefaciens em partes iguais.

Antígenos do vírus da rubéola ("cepa Wistar RA 10.000

27/3M") TDCI50/mL

Antígenos do vírus da varicella zoster vírus lisado 149.231 e inativado. PFU/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, 6,94 yg/mL

Aspergillus flavus e Aspergillus terreus em partes

iguais .

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2,5 mg/mL

Agua q. s .p.

Composição 22:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium kansasii . 0,004 ng/mL Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

iguais .

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae . 6, 94 μg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

viridans em partes iguais.

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Antigenos Lisado inativado de Salmonella typhi , 6,94 μg/mL Salmonella paratyphi e Salmonella entérica em

partes iguais.

Partes iguais de lisado inativado de Chlamydia 6,94 μg/mL trachomatis, Chlamydia psittaci e Chlamydia

pneumoniae .

Lisado inativado de Escherichia coli 6, 94 μg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC)em partes iguais.

Antigenos do vírus da rubéola ("cepa istar RA 10.000 27/3M") TDCI50/mL

Antigenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 10^a Componente Concentração inativado PFU/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Glicerina 500 mg/mL

Fenol 2 , 5 mg/mL

Água q . s . p .

Composição 23:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 g/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado 6,94 g/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

variedade interdigitale em partes iguais.

Agua q. s .p.

Composição 24:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium africanum. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae. 6,94 g/mL

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Agua q . s . p .

Composição 25:

Componente Concentração

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de BCG. 50 mg/mL

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

inativado de Enterococcus faecalis em partes

iguais .

Lisado inativado de Staphylococcus aureus e lisado 6,94 ug/mL Componente Concentração inativado de Staphylococcus epidermidis em partes

iguais .

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Lisado inativado de Salmonella typhi , Salmonella 6,94 g/mL paratyphi e Salmonella entérica em partes iguais.

Lisado inativado de Epidermophyton floccosum , 6,94 μg/mL Microsporum cannis e Tricophyton mentagrophytes

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Acinetobacter baumannii . 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Escherichia coli 6,94 yg/mL enteropatogênica (EPEC) , produtora de toxina

"shiga-like" (STEC) , enteroagregativa (EAEC) ,

entrerotoxigênica (ETEC) , enteroinvasora (EIEC) e

extraintestinal (ExPEC)em partes iguais.

Lisado inativado de Cândida albicans , lisado 6,94 μg/mL inativado de Cândida parapsilosis e lisado

inativado de Cândida glabrata em partes iguais.

iguais .

Antigenos do vírus do caxumba ("cepa Urabe AM9") 50.000 lisado e inativado. TDCl50/mL

Antigenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 x 10^a inativado PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Agua q. s . p . Composição

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch (lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis) .

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, Aspergillus 6,94 μg/mL flavus e Aspergillus terreus em partes iguais.

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

pneumoniae .

Toxóide de Bordetella pertussis . 75 μg/mL

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae . 6,94 μg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado 6,94 μg/mL de Cândida parapsilosis e lisado inativado de Cândida

glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Escherichia coli enteropatogênica 6,94 μg/mL (EPEC) , produtora de toxina "shiga-like" (STEC) ,

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC)em

partes iguais.

40D antígenos

Lisado inativado de Polio vírus

tipo 1; 1,8D antígenos Componente Concentração tipo 2 e 32D antígenos tipo 3

Antigenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 x IO⁹ inativado PFU/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Composição 27:

Agua q. s . p .

Composição 28:

Componente Concentração

Antigenos do vírus da rubéola ("cepa Wistar RA 27/3M") 10.000 TDCI50/mL

0,4 μq/ml

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL

iguais .

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

oriunda de purificação a partir de lisado inativado de

Streptococcus beta-hemolitico.

Dornase oriunda de purificação a partir de lisado 0,111 μg/mL inativado de Streptococcus beta-hemolitico. oriunda de

purificação a partir de lisado inativado de

Streptococcus beta-hemolitico.

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

Partes iguais de lisado inativado de Enterobacter 6,94 yg/mL aerogenes, Enterobacter cloacae e Enterobacter

agglomerans group.

Lisado inativado de Helicobacter pylorí. 6, 94 yg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Lisado inativado de Escherichia coli enteropatogênica 6,94 yg/mL (EPEC) , produtora de toxina "shiga-like" (STEC) ,

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) em

partes iguais.

Antigenos do virus vacinico ("smallpox") lisado e 10 x 10^y inativado PFU/mL

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado 6,94 yg/mL de Cândida parapsilosis e lisado inativado de Cândida

glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, Aspergillus 6,94 yg/mL flavus e Aspergillus terreus em partes iguais.

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q. s.p.

Composição 29:

Componente Concentração

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL Componente Concentração

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de Mycobacterium leprae. 0,004 ng/mL

iguais .

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 g/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo viridans

em partes iguais.

Lisado de Serratia marcencens e Serratia liquefaciens 6,94 μg/mL em partes iguais.

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 μg/mL

6,94 μg/mL

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus

agalactiae e de Mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) .

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Agua q. s .p.

Composição 30:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium africanum 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 μg/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo viridans

em partes iguais.

Lisado inativado de Staphylococcus aureus e lisado 6,94 μg/mL Componente Concentração inativado de Staphylococcus epidermidis em partes

iguais .

Lisado inativado de Neisseria meningitidis. 6,94 g/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Lisado inativado de Escherichia coli enteropatogênica 6,94 g/mL (EPEC) , produtora de toxina "shiga-like" (STEC) ,

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) .

variedade interdigitale em partes iguais.

em partes iguais.

Lisado inativado de Acinetobacter baumannii . 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Helicobacter pylori. 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 μg/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

40UD antigenos tipo 1;

Lisado inativado de Polio virus

1, 8UD antigenos tipo 2 e Componente Concentração

32UD antigenos tipo 3

glabrata em partes iguais.

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q . s . p .

Composição 31:

Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium leprae. 0,004 ng/mL

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

PPD 0,004 pg/ml

iguais .

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae . 6,94 μg/mL

6,94 μg/mL Componente Concentração

Partes iguais de lisado inativado de Streptococcus

agalactiae e de Mistura de lisados de Streptococcus

constituído por lisado inativado de

Streptococcus pyogenes, lisado inativado de

Streptococcus pneumonie e lisado inativado de

Enterococcus faecalis em partes iguais.

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Escherichia coli enteropatogênica 6, 94 ug/mL (EPEC) , produtora de toxina "shiga-like" (STEC) ,

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) em

partes iguais.

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 pg/mL

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado 6,94 g/mL de Cândida parapsilosis e lisado inativado de Cândida

glabrata em partes iguais.

10.000

Antígenos do vírus da rubéola ("cepa istar RA 27/3M") TDCI50/mL

Antígenos do vírus da varicella zoster vírus lisado e 149.231 inativado . PFU/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, Aspergillus 6,94 μg/mL flavus e Aspergillus terreus em partes iguais. Composição

Componente Concentração

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado

de Cândida parapsilosis e lisado inativado de Cândida 6,94 μg/mL glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium kansasií . 0,004 ng/mL turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

Lisado inativado de Neisseria gonorrhoeae . 6,94 yg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 yg/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo viridans

em partes iguais.

Lisado inativado de Epidermophyton floccosum, 6,94 g/mL Microsporum cannis e Tricophyton mentagrophytes

variedade interdigitale em partes iguais.

Antigenos Lisado inativado de Salmonella typhi , 6,94 yg/mL Salmonella paratyphi e Salmonella entérica em partes

iguais .

Lisado inativado de Helicobacter pylori. 6,94 ]iq/mL

Partes iguais de lisado inativado de Chlamydia 6,94 yg/mL trachomatis, Chlamydia psittaci e Chlamydia

pneumoniae . Componente Concentração

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC)em

partes iguais.

Lisado inativado de Klebsiella oxytoca e lisado 6,94 μg mL inativado de Klebsiella pneumoniae em partes iguais

10.000

Antigenos do vírus da rubéola ("cepa istar RA 27/3M") TDCI50/mL

Antígenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 x 10^y inativado PFU/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Agua q. s .p.

Composição 33:

Componente Concentração

Lisado inativado de Escherichia coli enteropatogênica 6,94 yg/mL (EPEC), produtora de toxina "shiga-like" (STEC),

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) em

partes iguais.

Lisado inativado de Mycobacterium leprae. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium avium. 0,004 ng/mL turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Neisseria meningitidis. 6,94 μg/mL

Lisado inativado de Shigella flexneri e Shigella 6,94 μg/mL sonnei em partes iguais.

6,94 μg/mL

Lisado inativado de Helícobacter pylori.

Antigenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 x 10^a inativado PFU/mL

149.231

Antigenos do HSV-I e HSV-II lisado e inativado. PFU/mL

Antigenos do vírus do sarampo ("cepa Schwarz") lisado 10.000 e inativado. TDCI50/mL

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, Aspergillus 6, 94 μg/mL Componente Concentração flavus e Aspergillus terreus em partes iguais.

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q . s . p .

Composição 34:

Componente Concentração

glabrata em partes iguais.

Lisado inativado de Mycobacterium africanum. 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) .

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 ug/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

Lisado inativado de Streptococcus equinus, 6,94 μg/mL Streptococcus bovis e Streptococcus do grupo viridans Componente Concentração em partes iguais.

Lisado inativado de Salmonella typhi, Salmonella 6,94 g/mL paratyphi e Salmonella entérica em partes iguais.

Lisado inativado de Shigella flexneri e Shigella 6,94 g/mL sonnei em partes iguais.

Lisado inativado de Proteus mirabilis, Proteus 6, 94 g/mL vulgaris e Proteus penerii em partes iguais.

Lisado inativado de Aspergillus fumigatus, Aspergillus 6,94 g/mL flavus e Aspergillus terreus em partes iguais.

Antigenos de superfície do vírus da hepatite B (HBs 200 pg/mL Ag) lisado e inativado.

Antígenos do vírus do sarampo ("cepa Schwarz") lisado 110.000 e inativado. TDCI50/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q . s . p .

Composição

Componente Concentração

glabrata em partes iguais.

PPD 0,004 g/ml

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis Componente Concentração

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de Streptococcus pyogenes, lisado 6,94 μg/mL inativado de Streptococcus pneumonie e lisado inativado

de Enterococcus faecalis em partes iguais.

iguais .

variedade interdigitale em partes iguais.

Lisado inativado de Neisseria meningitidis . 6,94 μg/mL

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

67 unidades

Toxóide diftérico de Lf/mL

em partes iguais.

Lisado inativado de Acinetobacter baumannii . 6,94 μg/mL

enteroagregativa (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) em

partes iguais.

Antigenos Lisado inativado de Salmonella typhi, 6,94 μg mL Salmonella paratyphi e Salmonella entérica em partes

iguais .

Lisado inativado de YF-17D. 3000000 Componente Concentração

PFU/mL

Antigenos do vírus do caxumba ("cepa Urabe AM9") lisado 50.000 e inativado. TDCI50/mL

Antigenos do vírus vacínico ("smallpox") lisado e 10 10^a inativado PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q . s . p .

Composição

Componente Concentração

Turberculina bruta Koch. Lisado inativado de 0,004 ng/mL Mycobacterium bovis

Lisado inativado de Mycobacterium tuberculosis . 0,004 ng/mL

Lisado inativado de BCG . 50 mg/mL

PPD (derivado proteico purificado derivado do inglês 0,004 g/ml "Purified Protein Derivative")

inativado de Enterococcus faecalis em partes iguais.

pneumoniae .

Lisado inativado de Epidermophyton floccosum, 6,94 μg/mL Componente Concentração

Microsporum cannis e Tricophyton mentagrophytes

variedade interdigitale em partes iguais.

Toxóide de Bordetella pertussis . 75 μg/mL

Lisado inativado de Haemophilus influenzae 6,94 g/mL

Estreptoquinase oriunda de purificação a partir de 0,444 g/mL lisado inativado de Streptococcus beta-hemolitico .

Dornase oriunda de purificação a partir de lisado 0,111 μg/mL inativado de Streptococcus beta-hemolitico.

50 unidades

Toxóide tetânico de Lf/mL

Antigenos de superfície do vírus da hepatite B (HBs 200 ug/mL Ag) lisado e inativado.

enteroagregativa ^' (EAEC) , entrerotoxigênica (ETEC) ,

enteroinvasora (EIEC) e extraintestinal (ExPEC) em

partes iguais.

Lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado

40UD antigenos tipo 1;

1, 8UD

Lisado inativado de Polio vírus

antigenos tipo 2 e

32UD antigenos Componente Concentração tipo 3

Antígenos do vírus vacinico ("smallpox") lisado e 10 x 10⁹ inativado PFU/mL

3000000

Lisado inativado de YF-17D. PFU/mL

Glicerina 500 mg/ml

Fenol 2 , 5 mg/ml

Água q . s . p .

Quando houverem doenças parasitárias associadas ou a

serem combatidas, as formulações contêm preferencialmente

agentes antigênicos de origem parasitária.

Neste caso, de acordo com os conceitos descritos na

presente invenção, as formulações devem compreender agentes

antigênicos provenientes dos parasitas mais prevalentes

para os quais os indivíduos tenham mais células de

memória de acordo com a distribuição geográfica e o

desenvolvimento humano local e regional (países

desenvolvidos ou não desenvolvidos). Tais parâmetros são

determinantes para a ocorrência destes parasitos e

existência de células de memória no sistema imune das

pessoas em determinada região.

Composição 37: Associação da Composição 2 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 ug/mL

Composição 38: Associação da Composição 3 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 g/mL Composição 39: Associação da Composição 4 com:

Composição 40: Associação da Composição 5 com:

Composição 41: Associação da Composição 6 com:

Composição 42: Associação da Composição 7 com:

Composição 43: Associação da Composição

Composição 45: Associação da Composição 10 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 ug/mL Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 μς/mL

Composição 46: Associação da Composição 11 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 μς/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Composição 47: Associação da Composição 12 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 μg/mL

Composição 48: Associação da Composição 13 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 μg/mL

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 μg/mL

Composição 49: Associação da Composição 14 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 μg/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Composição 50: Associação da Composição 15 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis . 400 μg/mL

Composição 51: Associação da Composição 16 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Trichomonas vaginalis. 400 μg/mL Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 ug/mL

Composição 52: Associação da Composição 17 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 g/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis . 400 pg/mL

Composição 53: Associação da Composição 18 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis. 400 ug/mL

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 g/mL

Composição 54: Associação da Composição 19 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 ug/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Composição 55: Associação da Composição 20 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 g/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 ug/mL

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 ug mL

Composição 56: Associação da Composição 21 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 ug/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 ug/mL Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 yg/mL

Composição 57: Associação da Composição 22 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 yg/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 yg/mL

Composição 58: Associação da Composição 23 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 g/mL

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 yg/mL

Lisado inativado de Enterobius vermicularis . 400 yg/mL

Composição 59: Associação da Composição 24 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 g/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 yg/mL

Composição 60: Associação da Composição 25 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 yg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis. 400 yg/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 yg/mL

Composição 61: Associação da Composição 26 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Trichomonas vaginalis. 400 yg/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 yg/mL Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 g/mL

Composição 62: Associação da Composição 27 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 ug/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 μg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis . 400 yg/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 μg/mL

Composição 63: Associação da Composição 28 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 ug/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis. 400 μg/mL

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 ug/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 ug/mL

Composição 64: Associação da Composição 29 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 μg/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis. 400 μg/mL

Composição 65: Associação da Composição 30 com:

Composição 66: Associação da Composição 31 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 ug/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 μg/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 yg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis . 400 μg/mL

Composição 67: Associação da Composição 32 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 ug/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 ug/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 μg/mL

Composição 68: Associação da Composição 33 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 μg/mL

Lisado inativado de Toxoplasma gondii. 400 ug/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis. 400 g/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 g/mL

Composição 69: Associação da Composição 34 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 g/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides. 400 μg/mL

Lisado inativado de Trichomonas vaginalis. 400 μg/mL

Composição 70: Associação da Composição 35 com:

Componente Concentração Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Lisado inativadode Enterobius vermicularis . 400 μg/mL

Lisado inativado de Entamoeba hystolitica. 400 μg/mL

Lisado inativado de Cryptosporidium spp.. 400 μg/mL

Composição 71: Associação da Composição 36 com:

Componente Concentração

Lisado inativado de Trichomonas vaginalis. 400 μg/mL

Lisado inativado de Ascaris lumbricoides . 400 μg/mL

Lisado inativado de Giardia lamblia. 400 μg/mL

Lisado inativado de Strongyloides stercoralis. 400 μg/mL

Exemplo 2: Tratamento de modelo experimental de melanoma em camundongos usando a composição antigênica

PECA.

Animais

Foram utilizados camundongos C57BL6 Specific Pathogen

Free (SPF) fêmeas (25 -35 g, 8-12 semanas). Os animais foram mantidos em ambiente com temperatura e umidade controladas (22 ± 2 °C e 60 - 80 %, respectivamente) , em ciclo claro/escuro de 12 h e com livre acesso à água e ração até o momento dos experimentos.

Indução de melanoma Murino

Células de melanoma da linhagem B16-F10 foram inoculadas no dia zero (1 x IO⁶ células em 100 uL de meio de cultura por animal), por via subcutânea (s.c.) no dorso de camundongos C57BL/6 machos (Lee, Y.S., et al.

Suppression of tumor growth by a new glycosaminoglycan isolated from the African giant snail Achatina fulica.

European Journal of Pharmacology, 465: 191- 198, 2003). Os animais (n=8 por grupo, tabela 3) foram tratados a partir do 7^o. Dia (e posteriormente a cada 4 dias) com veiculo

(controle) , DECA ou DECA+IL2, conforme o esquema apresentado na tabela 1. O grupo DECA+IL-2, recebeu ainda injeções diárias de IL-2 (20.000 UI, 2 vezes ao dia, via subcutânea) . Os volumes dos tumores foram avaliados com auxilio de paquímetro digital e determinados (mm³) de acordo com a fórmula: volume do tumor (mm3) = largura² x comprimento x 0,5 (Lee, Y.S., et al. Suppression of tumor growth by a new glycosaminoglycan isolated from the African giant snail Achatina fulica. European Journal of

Pharmacology, 465: 191- 198, 2003). O volume da massa tumoral sólida foi avaliado a cada 3 dias durante o período de 28 dias após a injeção das células tumorais. A sobrevida dos animais foi avaliada pelo período de 30 dias após a injeção das células tumorais.

Tabela 1. Esquema de tratamento

Início no 7°. dia e posteriormente a cada 4 dias

GRUPO Controle (Veículo)

1° Salina sistémica - 24 injeções intradérmicas de solução salina (NaCL 0, 9% estéril) em pontos pré-determinados na região dorsal e ventral

2° Salina intratumoral - duas injeções (1 no centro 0,02 mL e base da lesão 0,02 mL) ;

3° Salina perilesional (6 pontos de aplicação - com o objetivo de circundar o tumor)

GRUPO DECA ^{' ~ '}

1° DECA sistémica - 24 injeções intradérmicas de solução DECA (estéril) em pontos pré-determinados na região dorsal e ventral 2° DECA intratumoral (centro 0,02 mL e base da lesão 0,02 mL) 3° DECA perilesional (6 pontos de aplicação)

GRUPO DECA + IL-2 ■ , 1° DECA sistémica - 24 injeções intradérmicas de solução salina (NaCL 0,9% estéril) em pontos pré-determinados na região dorsal e ventral

2° DECA intratumoral - duas injeções (centro 0,02 mL e base da lesão 0, 02 mL)

3° DECA perilesional (6 pontos de aplicação - com o objetivo de circundar o tumor)

4° IL-2 20.000 UI intratumoral (0,02 mL no centro do tumor) 5^o IL-2 20.000 UI perilesional (1 aplicação próximo à região circundada pela DECA)

6° IL-2 20.000 UI intraperitoneal

OBS.: Diariamente a partir do 7°. dia: IL-2 -20.000 UI

intraperitoneal (2x/dia)

Resultados

Os resultados demonstraram que 28 dias após a inoculação das células tumorais o volume do tumor atingiu seu pico máximo de 6.728,65 ± 2.027,01 mm³ (média ± E.P.M), com sobrevida de 33,3% dos animais (3 dos 9 animais que iniciaram o estudo permaneceram vivos 30 dias após a inoculação das céls B16F10) (Figura 1) . Apesar de não apresentar diferença estatística significativa, o grupo de animais que recebeu tratamento com DECA, no 28° dia após a indução do modelo apresentou massa tumoral de inferior volume, quando comparado ao grupo veículo (3.524,87 ±

871,01 mm³) e sobrevida de 50% (5 dos 10 animais que iniciaram o estudo) . É importante mencionar que apesar de não significativo, houve, no 28° dia, inibição de 47,6% no volume do tumor (quando comparado ao grupo controle) e que a ausência de significância pode ser decorrente do erro padrão da média apresentado pelo grupo controle. Para o grupo DECA+IL-2, os resultados demonstraram que a associação foi capaz de reduzir o volume do tumor de maneira significante a partir 13° dia (inibição de 57%) até 28° dia, quando apresentou inibição de aproximadamente 67%

(2.198, 36 ± 450, 39 mm³) com sobrevida de 80 % (8 dos 10 animais que iniciaram o estudo) . Além disso, os animais apresentaram boa tolerância ao tratamento repetido com IL- 2. Na clinica a IL-2 é administrada em altas doses (600.000 - 720.000 UI/Kg) e os sintomas tóxicos apresentados são comparados à indução do estado controlado de choque séptico

(baixa pressão arterial, baixa resistência vascular sistémica, toxicidade hepática e renal além de edema pulmonar) (Rosenberg SA, Yang YC, Topalian SL, et al. Treatment of 283 consecutive patients with metastatic melanoma or renal cell câncer using high-dose bolus interleukin-2. JAMA, 271: 907-913, 1994.). A análise apresentada na figura 1B corrobora os dados da figura IA, demonstrando que a redução do volume está relacionada à redução na taxa de crescimento do tumor (para o grupo DECA+IL-2) .

De maneira geral, os resultados demonstraram que o tratamento com a associação DECA + IL-2, além de reduzir a taxa de crescimento/volume do tumor (Figura 1) aumentou a sobrevida dos animais quando comparado com o grupo controle (veiculo) (figura 2), sugerindo ser benéfica para o tratamento de melanoma.

Exemplo 3: Tratamento de melanoma maligno metastático na quarta recidiva.

Dados do paciente

Paciente MBS de 46 anos do sexo feminino.

Diagnóstico

Melanoma maligno metastático na quarta recidiva nível III de Clark e Breslow de 1.32 mm² diagnosticado em 16/05/2006.

Tratamentos convencionais prévios

a. Primeiro tratamento cirúrgico oncológico

Em 01/06/2006 foi realizado cirurgia para ampliação de margem no sítio da lesão tumoral com pesquisa do linfonodo sentinela que se revelou negativa para malignidade. O anatomopatológico complementar com imunohistoquímica do gânglio linfático mostrou a presença de micrometástases , a maior de 0,17 mm, firmando a posteriori o diagnostico de melanoma maligno metastático e imunogênico, pela presença do antígeno Melan A.

b. Segundo tratamento cirúrgico oncológico

Em 20/02/2008 foi realizada extração de dois nódulos superficiais suspeitos de recidiva na coxa esquerda cujo anatomopatológico revelou o diagnóstico melanoma maligno metastático. Foi, então, realizado uma ampliação da margem cirúrgica, com biopsia, de todas as lesões operadas em 09/04/2008.

c. Terceiro tratamento cirúrgico oncológico Oito meses após (15/10/2008) ocorreu a segunda recidiva na pele da coxa esquerda que mostrou metástase de melanoma maligno, com lesão coincidente com a margem cirúrgica. Foi novamente realizada uma ampliação de margem cirúrgica, cujo anatomopatológico de 27/11/2008 não revelou restos do tumor no leito cirúrgico.

d. Quarto tratamento cirúrgico oncológico

Em 13/05/2010 foi diagnosticado uma nova lesão na região glútea retirada cirurgicamente em 19/05/2010 sem exame de congelação. 0 anatomopatológico mostrou uma nova metástase do melanoma com margens cirúrgicas comprometidas indicando a terceira recidiva da doença.

e. Resultados do quarto tratamento cirúrgico oncológico pré administração de DECA.

Em 23/06/2010 foi realizado um PET/CT que mostrou tratar-se de lesão tumoral comprovando a quarta recidiva. O tempo curto em que se formou a quarta recidiva, a partir de uma lesão residual, mostrou um caráter agressivo das células metastáticas .

Avaliação imunológica pré- administração de DECA

A avaliação imunológica constituiu-se em uma parte in vitro de exames de sangue (hemograma completo, fenotipagem de linfócitos, dosagem de imunoglobilinas , RAST test (alergia) eletroforese de proteínas da fase aguda e testes de autoimunidade) e in vivo (teste de hipersensibilidade retardada primária e secundária) .

Os testes de hipersensibilidade retardada secundária foram realizados com uma bateria de nove antigenos (administrados 0,1 cc) à saber: 1) tuberculina Eruta Koch 1:100000; 2) PPD 20UI/mL; 3) toxina estafilocócica 1:100; 4) toxina estreptocócica 1:100; 5) estreptokinase/Dornase 40/10 UDS/mL; 6) Oidimicina 1:100; 7) Tricofitina 1:100; 8) Escherichia coli 1:100; 9) Salmonella spp 1:100 .

Os testes de hipersensibilidade retardada primária foram realizados com "patchs" cutâneos de DNCB a 0,5% e a 2%.

O resultado da avaliação imunológica expressou uma alteração nas proteínas na fase aguda, com aumento do VHS, PCR e alfa 1 glicoproteína acida, mostrando uma repercussão inflamatória sistémica ao crescimento do tumor, após a cirurgia, conforme exames de sangue realizados em 12/06/2010. A avaliação da hipersensibilidade primária revelou-se abolida. A hipersensibilidade retardada secundaria sistémica mostrou-se diminuída de +/++ em +++++ para os antígenos intracelulares e normais de ++/++++ para os outros antígenos, à distancia do tumor. Nas áreas das recidivas todos os antígenos mostraram uma reação bem diminuída de 0/+ para os antígenos intracelulares e de +/+++ em +++++ para os demais antígenos. Na região peritumoral a reação revelou-se praticamente abolida, com 0/0 para os antígenos intracelulares e de 0/+ para os demais antígenos.

Estes resultados, da hipersensibilidade retardada secundaria, mostraram também uma importante imunossupressão .

Tratamento com DECA

Teve início em 26/06/2010 e término em 04/08/2010 no período de espera para a liberação do convénio de saúde para a cirurgia. O tratamento imunoterápico foi realizado com o consentimento livre e esclarecido da paciente. A imunoterapia com DECA foi realizada da seguinte forma:

• Aplicação de 1,8 cc da composição antigênica dividida em 2 aplicações de 0,9 ml junto aos 10 principais territórios linfáticos.

• Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 4+1 dias.

• Administração de 9 jogos extras perilesionais de l,8cc em duas aplicações de 0,9 por jogo utilizado, contornando as cicatrizes da cirurgia do tumor primário, da segunda e terceira recidiva, bem como a região da quarta e quinta recidiva, também com intervalo de 4±1 dias.

• A partir da avaliação da segunda aplicação foi realizada conjuntamente uma aplicação intratumoral com volume de equivalente a dez composições de l,8ml.

• Aplicação de interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nível de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por metro de superfície corpórea situados à uma proximidade de 5 cm da lesão. Para a paciente foram aplicadas 1 milhão de unidades diárias subcutâneas. Nos dias da aplicação do antígeno, após a aplicação destes, foram administradas duas doses extras de 1 milhão de unidades sendo uma na região intraperilesional e mais 1 milhão de unidades na área intratumoral. Estas aplicações totalizaram 3 milhões de unidades nestas ocasiões, ainda dentro dos limites de baixas dose preconizada por superfície corpórea.

Desta forma, até à data da cirurgia foram aplicadas 11 sessões de imunoterapia sistémicas e perilesionais entre 24/06/2010 a 02/08/2010, bem como 5 intratumorais no intervalo de 4+1 dias concomitantemente ou um dia após às sistémicas e perilesionais.

É interessante mencionar que os exames ultrassonográficos com Doppler (em 19/07/2010 e 04/08/2010) sugerem a transformação da área tumoral em uma área inflamatória sem nenhuma angiogênese.

Avaliação do tratamento imunoterápico com DECA

Na quinta cirurgia, em 05/08/2010, o exame de congelação mostrou ausência de tumor na área tratada em que foi realizada apenas uma remoção conservadora da lesão inflamatória . Resultado do tratamento imunoterápico com DECA

O exame anatomopatológico pós-cirúrgico de 05/08/2010 demonstrou presença de granuloma em paliçada com necrose central, pele com denso infiltrado inflamatório crónico envolvendo o granuloma gigantocelular de corpo estranho supradescrito, ausência de neoplasia residual e margens cirúrgicas livres de neoplasias.

O exame imunohistoquimico revelou ausência completa de células tumorais do tecido retirado cirurgicamente previamente tratado com DECA de acordo com os limites das técnicas diagnosticas disponíveis (Figura 3).

Após as duas primeiras aplicações do protocolo acima descrito a paciente recobrou-se da imunossupressão constatada pela normalização e hiperativação de todos os pontos de aplicação da imunoterapia como se fosse um paciente normal. Estes resultados demonstram a recuperação da alça T e de toda a imunidade celular de perfil TH1 da paciente que estava subjugada pelo tumor. Concomitantemente a imunoterapia gerou um processo inflamatório que envolveu completamente toda a lesão tumoral necrosando-a e eliminando-a conforme mostraram os exames de ultrassonografia e comprovado pelo exame histológico.

Desde 07/08/2010 até a 30/11/2011 a paciente foi tratada de mesma forma sistémica e perilesional 2 vezes por semana e interleucina 2 recombinante humana em dose abaixo da saturação de receptor com 600000 unidades diárias. Desde então, recebe administração da bateria de antígenos semanalmente e diárias de interleucina 2. Dessa forma, a paciente está há 18 meses livre de tumor.

Conclusão do caso

Os dados avaliados e a evolução clínica da paciente, até o momento, sugerem fortemente que a imunoterapia com as composições imunogénicas da presente invenção foi a responsável pela eliminação constatada do tumor.

Exemplo 4: Combate a um melanoma maligno

Dados do paciente

Paciente PPC de 62 anos do sexo masculino.

Diagnóstico

Melanoma maligno nível II de Clark e Breslow de 1,2 mm² diagnosticado em 02/02/2011.

Tratamentos prévios

Neste caso não foi realizado o tratamento prévio, pois a imunoterapica utilizando DECA foi realizada antes da cirurgia oncológica do tumor primário após a aplicação do termo de consentimento livre e esclarecido.

Avaliação imunológica pré-tratamento com DECA

Como não havia tempo hábil para uma avaliação imunológica prévia, devido à necessidade de cirurgia no menor tempo possível, esta avaliação foi realizada pela leitura dos antígenos aplicados durante o tratamento com DECA.

Tratamento com DECA pré-cirurgia oncológica

No período pré-operatório (10/02/2011 a 17/02/2011) foi iniciado o tratamento do paciente na seguinte base:

• Aplicação, junto aos 10 principais territórios linfáticos, de 1,8 cc da formulação 1 ou DECA, dividida em 2 aplicações de 0,9cc.

Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 4±1 dias.

• . Administrações de 2 jogos extras da composição DECA de 1,8 cc dividido em duas aplicações 0,9 cc para cada composição, contornando a lesão tumoral do melanoma no primeiro dia de tratamento.

• Aplicação intratumoral de cinco composições de DECA de 1,8 cc cada , com volume final de 9,0 cc.

• Aplicação de baixas doses, em nível de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea situados à uma proximidade de 5 cm da lesão. Para o paciente foram utilizados 1 milhão unidades diárias por via subcutânea.

Dessa maneira, até à data da cirurgia foram aplicadas 02 sessões de imunoterapia sistémica, 01 perilesional e 01 intratumoral sendo estas duas últimas aplicadas no primeiro dia de tratamento. Ao referido tratamento foi associada a aplicação diária de interleucina 2 recombinante humana das doses e na forma supradescritas .

Resultado do tratamento imunoterápico com DECA pré- cirurgia oncológica

Neste período de 8 dias de terapêutica, o paciente respondeu bem ao tratamento imunológico com regressão total do melanoma maligno. A lesão na parte transformada em tumor evoluiu com intenso processo inflamatório local que se ulcerou e desapareceu dando lugar ao processo inflamatório descrito no exame anatomopatológico cirúrgico. Faz-se necessário mencionar que o paciente apresentou neste período: episódios de febres alta e baixa e adenopatia inguinal homolateral inflamatória intensa.

Tratamento oncológico cirúrgico convencional

Foi proposta a exérese completa do tumor primário com ampla margem cirúrgica de segurança, com pesquisa de linfonodo sentinela intraoperatorio.

Cirurgia oncológica convencional do tumor primário

Em 18/02/2011 o paciente foi operado tendo sido realizada a exérese completa da lesão tumoral com ampla margem de segurança cuja pesquisa de dois gânglios satélites revelou-se negativa para neoplasia. Por este motivo não foi realizado o esvaziamento ganglionar.

Resultado da cirurgia oncológica convencional do tumor primário

O exame anatomopatológico confirmou a regressão completa do tumor atestando:

• na pele: alterações inflamatórias com área de ulceração recoberta por tampão fibrino- leucocitário, apresentando na base tecido de granulação com exuberante infiltrado inflamatório misto. Este infiltrado permeia e se estende por todo o epitélio nas bordas desta úlcera, havendo também, células gigantes multinucleadas de tipo corpo-estranho . A região esbranquiçada e abaulada descrita à microscopia corresponde a queratose seborreica do tipo papilomatoso com acantose, hiperqueratose e papilomatose da epiderme. Toda a pele foi submetida a exame histológico não havendo neoplasia melanocitica residual.

• nos linfonodos sentinela I: extensa fibrose da região hilar e histiocitose sinusal e subcapsular não sendo identificados depósitos metastáticos ao exame morfológico;

• nos linfonodos sentinela II: achados histológicos semelhantes aos descritos no I, não havendo à morfologia depósitos metastáticos.

Nesta data o exame imunohistoquímico para os linfonodos sentinelas I e II revelou ausência de micrometástase de melanoma.

0 exame imunohistoquímico do tumor primário revelou ausência completa de células tumorais do tecido retirado cirurgicamente previamente tratado com DECA de acordo com os limites das técnicas diagnosticas disponíveis (Figura 4) .

Resultado do tratamento com DECA pré-cirurgia oncológica do tumor primário

Estes dados produzidos pela cirurgia, dentro do contexto e dos limites das técnicas diagnosticas disponíveis, mostraram um resultado supreendente pela não detecção do tumor primário após o tratamento imunoterápico com DECA.

Tratamento com DECA pós-cirurgia oncológica

Com este resultado da regressão completa do tumor foi continuado o tratamento imunológico nas seguintes bases:

• Aplicação, junto aos 10 principais territórios linfáticos, de 1,8 cc da composição DECA dividida em 2 aplicações de 0,9 cc.

• Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 4±1 dias.

• Administrações de 2 composições extras perilesionais de 1,8 cc cada uma, com duas aplicações de 0,9 por ccpor composição contornando a grande cicatriz cirúrgica sem espaço entre elas, também, com intervalo de 4±1 • Aplicação diária de interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nivel de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea situados à uma proximidade de 5 cm da cicatriz cirúrgica. Para o paciente foram utilizados 1 milhão de unidades por m² de superfície corpórea por aplicação.

Resultado do tratamento com DECA pós-cirurgia oncológica

A área cirúrgica da retirada dos gânglios satélites, na região inguinal, evoluiu com formação de coleção líquida, confirmada em 16/03/2011 por ultrassonografia que mostrou: formação cística simples de 6,0 x 5,2 x 3,1 cm, com borramento dos planos gordurosos adjacentes e não se observou vascularização anómala ou alterações vasculares do tipo tumoral ao Doppler colorido.

Esta coleção descrita acima evoluiu com processo inflamatório local, com redução de suas dimensões e aumento da adenopatia inflamatória constatada na ultrassonografia de 28/03/2011. Ao Doppler colorido não se observou nenhuma vascularização anómala nesta formação. Em relação do exame de 16/03/2011 nota-se: 1) acentuada redução da formação que anteriormente apresentava aspecto cístico, sugerindo significativa reabsorção, organização e favorecimento a hipótese inflamatória/reacional (coleção pós-cirúrgica) ; observou-se também na região dos gânglios inguinais esquerdos 2) linfonodos aumentados em dimensões, preservando hilo vascularizado e de aspecto reacional, situados medial e cranialmente à formação supracitada medindo 1,6x0,8 cm e 2,4 xl,7 cm. O tratamento imunológico foi continuado até 31/07/2011, cujo exame físico revelou regressão completa das lesões e transformação da linfoadenopatia regional reacional intensa para uma linfoadenopatia regional reacional residual.

Em 05 e 08 de julho de 2011, a repetição do PET/CT e da ultrassonografia de partes moles com "doppler" colorido, da perna esquerda e região inguinal esquerda, respectivamente, comprovaram o caráter inflamatório e a regressão completa das lesões, restando apenas a adenopatia inflamatória reacional residual. Houve, também, regressão do aumento difuso da atividade metabólica na medula óssea do esqueleto axial e apendicular, mostrando um efeito de estimulação da medula óssea pela DECA, na recondução da resposta imune, o que mostra a sua capacidade de estimular e regenerar tecidos.

Discussão dos resultados dos tratamentos com DECA pré e pós-cirurgia oncológica convencional

Trata-se de um caso de melanoma maligno de aproximadamente 1 cm que foi submetido à uma biopsia pontual sem tratamento cirúrgico. Esta lesão tumoral foi alvo do tratamento imunoterápico com a bateria de 9 antígenos associados a reduzidas doses de interleucina 2 recombinante humana acima descrito. Esta terapêutica provocou uma reação inflamatória intensa envolvendo toda a lesão conduzindo à uma necrose e ulceração de toda a área tumoral que desapareceu em 8 dias de tratamento.

Após este período o paciente foi operado e o exame anatomopatológico comprovou a substituição do tecido tumoral por uma ulceração com ausência total de células tumorais envolvida por intenso processo inflamatório com características de granuloma de corpo estranho (Figura 4B) .

O exame anatomopatológico de dois linfonodos sentinelas comprovou a hiperplasia linfóide reacional com uma intensa histiocitose sinusal e subcapsular, bem como extensa fibrose da região hilar não sendo que não identificado qualquer depósito metastático. O exame imunohistoquímico confirmou o achado atestando ausência de micrometástase nesses linfonodos.

A região de onde foram retirados os linfonodos satélites evoluiu com a formação de uma coleção líquida envolta em processo inflamatório com aumento da linfoadenite inflamatória reacional loco-regional mostrando uma boa reação imunológica. Com a continuidade do tratamento, um intenso processo inflamatório envolveu esta coleção líquida provocando a sua regressão e absorção acompanhada da reação inflamatória de caráter não tumoral dos gânglios satélites.

Os exames de ultrassonografia com Doppler e PET-CT demonstram o aspecto inflamatório não tumoral sugerido, comprovando a ausência de massa tumoral. Estes exames demonstraram que a intensa reação linfática regional e o aumento da atividade da medula óssea evidenciam um intensa e efetiva reação imunológica anti-tumoral .

Conclusão do caso

Os dados avaliados e a evolução clínica do paciente, até ao momento, sugerem fortemente que a imunoterapia usando as composições da presente invenção, como único tratamento empregado pré-cirurgia oncológica do tumor primário, foi a responsável pela eliminação constatada do tumor em 8 dias.

Exemplo 5: Combate a um adenocarcinoma gástrico microtubular avançado com carcinomatose peritonial disseminação metastática linfática intra-abdominal

Dados do paciente

Paciente R - M de 72 anos do sexo masculino.

Diagnóstico

Adenocarcinoma gástrico microtubular avançado com carcinomatose peritonial e disseminação metastática linfática intra-abdominal.

Exames realizados

a. Convencionais de endoscopia digestiva alta e anátomopatológicos

A endoscopia digestiva alta de 12/06/2008 demonstrou neoplasia de antro gástrico avançada e estenosante, confirmada por exame anatomopatológico de 13/06/2008 o anatomopatológico de biopsia mostrou:

b. Convencionais de imagem

Em de 20/06/2008 foi realizada tomografia de abdómen e pélvis para estadiamento pré-operatório de neoplasia gástrica cuja conclusão foi neoplasia gástrica avançada com carcinomatose peritoneal por disseminação de continuidade e linfática extensa em múltiplos territórios linfáticos medindo 4 cm o maior deles (figura 5, Al - A3) .

c. Avaliação imunológica pós-cirúrgica

A primeira consulta foi realizada após a cirurgia em 23/07/2008 e os exames convencionais e a avaliação imunológica em 24/07/2008.

Os exames convencionais evidenciaram anemia microcitica discreta (Hb= 11,7 g/dL (VN =13 a 18 g/dL, HT= 37,1% (VN=40 a 54%) e VCM= 70 U³ (VN=80 a 97 U³) e hiperplaquetemia (755.000 (VN=150.000 a 450.000/mm³) ) , linfocitose (9.100/mm³ (VN= 4.000 a 11.000/mm³), hiperglicemia (155 mg/dL (VN= até 99 mg/dL) , VHS elevado 110 mm/h, ácido úrico elevado (7,3 mg/dL (VN= até 7,0 mg/dL), PCR elevada (0,6 mg/dL cujo VN é até 0,5 mg/dL), alfa-1 glicoproteina ácida elevada (141 mg/dL (VN= até 140 mg/dL) e amilase elevada com 170 U/L (VN= 25 a 125 U/L) .

A avaliação imunológica foi realizada após a cirurgia com os seguintes testes in vitro (exames de sangue) e in vivo (hipersensibilidade primária e secundária) .

Os testes in vitro consistiram; dosagem de imunoglobulinas T dependentes que se apresentam limítrofes para os valores máximos de normalidade (Ig A 324 (VN= 82 a 453), Ig G 1476 (VN=751 a 1560), Ig M 200 (VN= 46 a 304) e Ig E 61,89 (VRN= até 100)), RAST negativo para todos os testes, beta-2 microglobulina 2496 (VN= até 2030) imunofenotipagem de linfócitos T totais CD3⁺ normais, com células CD4⁺ normais (43,3% (845/mm³) VN=27 a 57% (560 a 2700/mm³) ) , CD8⁺ diminuídos em valores absolutos e relativos (242/mm³ VN= 14 a 34% (330 a 1400/mm³) e uma relação CD4⁺/CD8⁺ elevada (3,49 VN= 0.98 a 3,24).

Os testes in vivo:

• hipersensibilidade retardada primária: realizados com "patches" cutâneos de DNCB a 0,5% e a 2%.

• hipersensibilidade retardada secundária .

Os resultados demonstraram:

• hipersensibilidade primária revelou-se abolida .

• hipersensibilidade retardada secundaria sistémica mostrou-se diminuída de 0/+ em +++++ para os antígenos intracelulares e diminuída de +/++ para os outros antígenos, à distancia do tumor. Na área pericicatricial todos os antígenos mostraram reações abolida de 0/+ para os antígenos intracelulares e de 0/+ em +++++ para os demais antígenos.

Estes exames in vivo e in vitro, revelaram uma importante imunossupressão da imunidade celular de perfil Thl, primária e secundária, local e sistémica, que é a responsável pela imunidade antitumoral e eliminação das células tumorais e um mecanismo de escape tumoral, pelo perfil Th2 , com uma resposta anticorpo ao invés de uma resposta celular. A imunossupressão primária com a perda da integridade da alça T e sem possibilidade da elaboração de uma nova resposta T, aliada a quebra da imunidade celular de perfil TH1 responsável pela imunidade anti-tumoral e o predomínio da resposta anticorpo de escape ao invés da celular, mostraram um sistema imunológico comprometido, subjugado pelo tumor, sem chances de por si próprio conter a doença.

d. Conclusão diagnostica

Adenocarcinoma gástrico microtubular avançado estenosante com carcinomatose peritoneal por disseminação por contiguidade e disseminação metastática linfática extensa em múltiplos territórios linfáticos medindo 4 cm o maior deles.

Tratamento

e. Convencional cirúrgico

O tratamento realizado (em 11/07/2008) foi a gastrectomia parcial com reconstrução em B2 paliativa com linfoadenectomia parcial.

O exame anatomopatológico da gastrectomia e linfoadenectomia parciais e paliativas de 11/07/2008 apresentaram extensa doença neoplásica avançada restante. f. Quimioterapia e radioterapia convencionais

Por se tratar de um carcinoma gástrico avançado com carcinomatose peritonial e disseminação linfática intra- abdominal sem possibilidade de cura pela cirurgia e pela quimioterapia, foi proposto radioterapia associada à quimioterapia não curativas com 5-fluoracil e taxotere em ciclos de 21 dias para controle da massa tumoral e melhora tanto da qualidade de vida quanto da sobrevida do paciente. Este tratamento quimioterápico foi realizado de 14/08/2008 à 26/12/2008. Já as 25 sessões de radioterapia foi iniciada em 10/10/2008 e terminou em 13/11/2008.

gr. Tratamento com DECA

Pelas razões acima foi proposta associação de imunoterapia à quimioterapia paliativa para melhora das condições do paciente e possíveis resultados benéficos dessa associação farmacológica.

A imunoterapia foi realizada uma semana (duas aplicações de DECA ) antes do início da quimioterapia e seguiu nas segunda e terceira semanas após a primeira semana e cada ciclo de 21 dias de quimioterapia. Dessa maneira, a quimioterapia manteve-se ininterrupta, ao passo que, a terapia imunológica foi realizada por um período de 2 semanas com intervalo de 1 semana.

O protocolo DECA foi realizado da seguinte forma:

• Aplicação de 1,8 cc da composição DECA dividida em duas aplicações de 0,9 cc junto aos 10 principais territórios linfáticos.

Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 4+1 dias.

• A partir da avaliação da quarta aplicação, ocasião em que todas as respostas se normalizaram tornando-se hiperérgicas .

• A interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nível de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea para o paciente à 600.000 unidades diárias aplicadas próxima a cicatriz cirúrgica.

h. Resultados do tratamento

i. Convencional

O tratamento convencional isolado (cirúrgico) foi realizado de maneira paliativa para solucionar a obstrução gástrica do paciente.

ii. Tratamento com DECA associado à quimioterapia

A paciente normalizou os testes de hipersensibilidade retardada primária em um mês e hipersensibilidade retardada secundária em duas semanas demonstrando uma recuperação da resposta celular da alça T. No período de duas semanas desaparecem os sinais e sintomas de inflamação e infecção sistémicos .

Após seis meses de tratamento de DECA e quimioterapia associados (iniciados, respectivamente, em 06/08/2008 14/08/2008) a paciente foi reavaliado. Após seis meses (09/02/2009) de tratamento imunológico e quimioterápico associados houve:

• redução significativa da maioria da linfoademegalia adbdominal;

• redução significativa dos sinais de carcinomatose .

• remissão completa da imunossupressão com a positivação, após 4 semanas de tratamento, da leitura da hipersensibilidade retardada secundária mostrando uma reação positiva de 3+/4+ em 5+ para os 9 antigenos antes tolerados. A hipersensibilidade retardada primária antes abolida tornou-se positiva, também, após 1 mês de tratamento.

Após 9 meses (13/05/2009) de tratamento supradescrito houve :

• redução da linfonodomegalia do tronco celíaco de 2,0 a 1,6 cm para 1,4 cm sem outras linfonofomegalias (Figura 5, B2 - B3) .

• atenuação do aspecto fibrocicatricial mostrando desaparecimento dos sinais de carcinomatose (Figura 5, BI).

• derrame pleural à esquerda inalterado .

Após 1 ano e 2 meses (03/10/2009) de tratamento supradescrito houve:

• Redução significativa do derrame pleural esquerdo;

• redução da linfonodomegalia do tronco celíaco de 1,4 cm para 1,3 cm sem outras linfonofomegalias

• Atenuação das alterações fibrocicatricias da loja cirúrgica.

Após 1 ano e 8 meses (13/04/2010) de tratamento supradescrito houve:

• Resolução do derrame pleural esquerdo .

• linfonodomegalia do tronco celíaco inalterada (Figura 5, C2) .

Após 1 ano e 11 meses (31/07/2010) de tratamento supradescrito houve:

• redução da linfonodomegalia do tronco celíaco de 1,3 cm para 1,1 cm sem outras linfonofomegalias .

• Desaparecimento completo dos nódulos hepáticos;

Após 2 ano e 4 meses (18/02/2011) de tratamento supradescrito houve:

• Tórax sem alterações.

• Manutenção dos linfonodos do tronco celíaco medindo 1,1 cm.

Conclusão do caso

Associação de radio, quimio e imunoterapias realizadas de agosto a dezembro de 2008 trouxe: remissão completa da imunossupressão e redução significativa tanto da carcinomatose quanto da linfoadenomegalia do abdómen superior. Restaram os nódulos hepáticos e linfonodos aumentados do tronco celíaco apresentado o maior 1,6 cm.

A partir desta avaliação foi instituída exclusivamente a imunoterapia até fevereiro de 2012. Como resultado deste tratamento é possível observar: remissão completa dos nódulos hepáticos suspeitos, desaparecimento dos sinais da carcinomatose e significativa redução dos linfonodos de 2,0 a 1,6 cm para 1,1 cm.

Estes dados sugerem fortemente que a imunoterapia foi uma efetiva como coadjuvante da radio e quimioterapia e, quando aplicada isoladamente mostrou-se eficaz para a indução e manutenção da remissão tumoral, após 3 anos e 6 meses de tratamento (Figura 5, Cl, C3) .

Exemplo 6: Combate a um pseudotumor inflamatório múltiplo relacionado ao herpes virus humano tipo VIII.

Dados do paciente

Paciente A - D de 40 anos do sexo feminino.

Diagnóstico

Pseudotumor inflamatório múltiplo relacionado ao herpes virus humano tipo VIII.

História clínica

a. Resumo clinico

Em consulta de 04/06/2006 apresentou história de febre vespertina (entre 37,5 a 37,8°C), cefaléia, cansaço e dispnéia aos pequenos esforços. Ao exame clinico a paciente estava febril, adinâmica um pouco prostrada, com roncos esparsos em ambos os pulmões e importante hepatoesplenomegalia .

b. Exames realizados

Convencionais de sangue

Os exames laboratoriais de 05/10/2006 mostraram um quadro infeccioso/inflamatório a esclarecer: VHS= 41 mm

(VN= <10 mm), PCR= 3,83 mg/dL (VN= <0,50 mg/mL) , alfa-1 glicoproteina ácida=l,66 mg/dL (VN= 50 a 120 mg/dL) , hipocalcemia Ca²⁺=7,4 mg/dL (VN= 8,6 a 10,3 mg/dL), plaquetopenia discreta com plaquetas 143.000/mm³

(VN=150.000 a 450.000/mm³) , proteinúria 0,66 g. No dia 05/10/2006 a pesquisa sorológica revelou-se negativa para os seguintes agentes etiológicos: Toxoplasmose, Dengue, Brucelose, HIV, hepatite pelos virus: A, B e C; Paracoccus spp, Histoplasma spp., A pesquisa direta de antigeno por PCR foi negativa para Criptococcus spp e Histoplasma spp. As sorologias mostraram infecção pregressa para Citomegalovirus , EBV (mononucleose) e Rubéola. Ao passo que a pesquisa para herpes vírus foi Ig M positiva. Esta patologia está relacionada ao herpes vírus do tipo VIII e a reação cruzada entre este tipo com os I e II sugere a infecção pelo sorotipo VIII humano.

Convencionais de imagem

A tomografia de tórax de 09/10/2006 revelou: múltiplos nódulos pulmonares bilaterais de ate 3,0 cm, uma área irregular de aspecto tumoral de 5,0 cm em ápice esquerdo, broncograma aéreo à direita e um nódulo em LMD aderido a pleura (Figura 6A) . A tomografia de abdómen contemporânea confirmou uma importante hepatoesplenomegalia, com múltiplos gânglios em toda a raiz do mesentério, nódulos hepáticos e um nódulo esplénico. Foi, também, constatado um quadro de sinusite maxilar e edema e hipertrofia de fossas nasais.

Convencionais anatomopatológicos

0 exame anatomopatológico revelou-se complexo mostrando um processo inflamatório com grande quantidade de histiocitos. O exame foi enviado à uma especialista de pulmão. A análise do anatomopatológico foi o diagnóstico de uma patologia rara: pseudotumor inflamatório.

Avaliação imunológica

A avaliação imunológica foi realizada em 05/10/2006 com os seguintes testes in vitro (exames de sangue) e in vivo (hipersensibilidade primária e secundária) .

Os testes in vitro apresentavam a seguinte conjuntura clínica: dosagem de imunoglobulinas (Ig G, Ig A, Ig E) normais, complemento total e C3 e C4 de acordo com os padrões de normalidade, imunofenotipagem de linfócitos T totais CD3⁺ com diminuídos em número absoluto (715/mm³ - valor mínimo de normalidade=1035/mm³) evidenciando linfopenia T, com células CD4⁺ normais (54% (551/mm³) VN=35 a 62% (535 a 2580/mm³) ) , CD8⁺ diminuídos em valores absolutos (163/mm³ VN= 17 a 43% (255 a 1720/mm³) e uma relação CD4⁺/CD8⁺ elevada (3,4 VN= 0.9 a 2,6).

Estes resultados mostraram imunidade humoral e do sistema complemento normais, porém, não reativos, ou seja, não envolvidos na resposta imunológica da infecção em curso. A imunofenotipagem demonstrou um linfopenia T e uma resposta T em curso devido à elevada relação CD4⁺/CD8⁺' (predomínio das células auxiliadoras sobre as supressoras/citotóxicas ) . O agente infeccioso provocou uma polarização para uma resposta do tipo celular THl.

Os testes in vivo:

• hipersensibilidade retardada primária: realizada com "patches" cutâneos de DNCB a 0,5% e a 2 "o .

·^' hipersensibilidade retardada secundária .

Os resultados demonstraram:

• hipersensibilidade primária revelou-se abolida .

• hipersensibilidade retardada secundária sistémica mostrou-se diminuída.

A conclusão da avaliação imunológica: os testes in vivo e in vitro mostraram que o agente infeccioso provocou uma polarização para uma resposta T celular do tipo THl. Esta resposta demonstrou-se inefetiva com linfopenia e ruptura da alça T pela abolição da hipersensibilidade retardada primária indicando incapacidade de realizar uma nova reposta primária, bem como hipersensibilidade retardada secundária diminuída mostrando uma memória celular e a alça efetora comprometidas.

Conclusão diagnostica

Pseudotumor inflamatório múltiplo (associado e relacionado ao herpes vírus humano tipo VIII) com imunossupressão T associada.

Tratamento

Convencional

A intervenção cirúrgica constitui-se numa forma efetiva de tratamento e a etiologia é relacionada ao herpes vírus VIII o que explica a reação cruzada com o de IgM positivo para herpes vírus I e II. São descritos casos de recidiva em caso após extirpação cirúrgica. Neste caso, em que existem múltiplos nódulos pulmonares, abdominais (na raiz do mesentério) e hepatoesplenomegalia, com quadro inflamatório sistémico, hipocalcemia, não foram encontrados relatos semelhantes na literatura cientifica. Assim, a cirurgia não pode ser curativa. É possível inferir que a importante imunossupressão T observada pode ter contribuído com a forma múltipla e incomum de uma patologia rara.

Tratamento com DECA

Devido à imunossupressão constatada e a impossibilidade de tratamento cirúrgico (em virtude dos múltiplos focos) , com o consentimento livre e esclarecido decidiu-se tratar esta imunossupressão com DECA, por um período de aproximadamente 2 meses, após o qual a paciente seria reavaliada. O protocolo consistiu de:

• Aplicação de 3 composições de DECA de 1,8 cc dividida em 2 aplicaçOes de 0,9 cc por composição, no abdómen e de duas de DECA de 1,8 cc dividida em 2 aplicações de 0,9 cc por composição, respectivamente uma em cada membro superior direito e esquerdo com 0, 9 cc no braço e 0,9 cc no antebraço bilateralmente junto aos 10 principais territórios linfáticos.

Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 7±2 dias.

• Aplicações diárias de interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nivel de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea. Para a paciente foram utilizados 600 mil unidades uma vez ao dia por via subcutânea no abdómen .

i. Resultados do tratamento i. Convencional

Neste caso não existiam alternativas terapêuticas, uma vez que o tratamento cirúrgico não seria efetivo perante as múltiplas manifestações da doença,

ií. Tratamento com DECA

A paciente normalizou os testes de hipersensibilidade retardada primária em um mês e de hipersensibilidade retardada secundária em duas semanas demonstrando uma recuperação da resposta celular da alça T. No período de duas semanas desapareceram os sinais e sintomas de inflamação e infecção sistémicos.

Após dois meses de tratamento a paciente foi reavaliada. No exame físico a paciente não apresentava sinais de infecção ou inflamação e houve regressão da hepatoesplenomegalia . A tomografia computadorizada de tórax e abdómen realizada em 11/12/2006 mostrou:

• Nos pulmões: opacidades ténues em vidro fosco nas suturas do ápice direito (sequelas cirúrgicas) , desaparecimento das múltiplas opacidades nodulares esparças em ambos os pulmões (remissão completa do processo infeccioso e inflamatório pulmonar) e regressão completa do linfonodo hilar direito (Figura 6B) .

• No abdómen: remissão completa da hepatoesplenomegalia, e redução significativa dos linfonodos da raiz do mesentério.

Conclusão do caso

Após o período de tratamento (15/10/2006 a

11/12/2006) com DECA houve: regressão completa da hepatoesplenomegalia, dos múltiplos nódulos pulmonares e abdominais com normailização dos linfonodos mesenteriais , bem como dos sintomas clínicos de inflamação e infecção sistémicas nos exames de 11/12/2006. Houve, também, remissão completa da imunossupressão com a positivação, após 2 semanas de tratamento, da leitura da hipersensibilidade retardada mostrando uma reação positiva de 3+/4+ em 5+. A hipersensibilidade retardada primária antes abolida tornou-se positiva, após 1 mês de tratamento. Estes resultados mostraram uma remissão completa: clínica, laboratorial e de imagem do pseudotumor inflamatório, bem como do quadro de imunossupressão apresentado pela paciente pelo tratamento proposto empregado. A paciente esta sem sinais da doença ou recidiva há 5 anos e 3 meses

Exemplo 7 : Combate a um adenocarcinoma acinar grau 7 (4+3) de Gleason. Adenocarcinoma localizado da próstata estágio T2a.

Dados do paciente

Paciente O - S de 69 anos do sexo masculino.

Diagnóstico inicial

Adenocarcinoma acinar prostático grau 7 (4+3) de Gleason cujo estadiamento é T_2a.

Idenficação e resumo da história clínica

Apresentou aumento de PSA 20, com biópsia revelando adenocarcinoma acinar grau 7 (4+3) de Gleason e estadiamento T_2a- Ressalta-se que o paciente apresentava rinite alérgica como comorbidade.

Tratamento convencional proposto e realizado

Prostatectomia total como forma de cirurgia curativa para a doença localizada (restrita à próstata) . Foi realizada em 18/02/2010 sem intercorrência .

Resultado do tratamento convencional realizado e diagnóstico final

O diagnóstico final através do exame anatomopatológico descreve a doença com disseminação loco- regional por adenocarcinoma da próstata, grau 9 (4+5) de Gleason com estadiamento TNM 2002 pT3bN0, acometendo 22% do volume glandular (volume tumoral de 11,2 cc) e localizado em ambos os lobos da glândula. A vesícula seminal esquerda e gordura periprostática infiltradas pela neoplasia, mas os linfonodos ilíacos e colo vesical apresentaram-se livres de neoplasia .

Conclusão final: tratamento cirúrgico não efetivo, uma vez que restou massa tumoral na região periprostática comprometendo a possibilidade de cura proposta. O tratamento proposto foi radioterapia em 2 meses e segmento oncológico a cada 6 meses por 5 anos.

Avaliação imunológica prévia ao tratamento com

DECA

Na primeira consulta foi realizada em 09/03/2010 o paciente solicitou avaliação imunológica e de possibilidade de imunoterapia para conter a doença antes da radioterapia que seria realizada em 2 meses.

Na avaliação laboratorial oncológica de 10/03/2010 foi realizado PSA de 0,15 compatível com status de neoplasia residual por prostatectomia não efetiva (Figura 7) .

A avaliação imunológica prévia demonstrada pelos exames de sangue de 10/03/2010 mostrou:

• Perfil TH1 celular compatível com uma boa resposta antitumoral ao apresentar anticorpos no limite inferior da normalidade:

o Ig G 977 mg/dL (VN= 600 a 1500);

o Ig A 233 mg/dL (VN= 50 a 400 mg/dL); o Ig M 112 mg/dL (VN= 50 a 300 mg/dL) o albumina 3,67 g/dL (3,50 a 4,85 g/dL); o gama globulina 0,97 g/dL (VN= 0,74 a 1,75 g/dL) .

• Alça T fenotipicamente normal com:

o CD4⁺ 846/mm³ ;

o CD8⁺ 504 /mm³ ;

o Relação CD4^+// CD8⁺ 1,7.

• Avaliação de alergia moderada:

o Ig E 204 mg/dL (VN= inferior a 100 mg/dL) ;

o IgE espefícido para poeira 1,5 mg/dL

(classe 2 moderado) ; • Avaliação de autoimunidade positiva para os seguintes marcadores:

o FAN nuclear > 1/640;

o FAN nucleolar > 1/640;

Avaliação in vivo (testes de hipersensibilidade retardada primária e secundária) não foram realizadas em virtude ao exíguo tempo restante para imunoterapia antes da radioterapia .

Conclusão baseda nos exames in vitro:

1. imunidade humoral, sistema complemento e alça T apresentaram-se fenotipicamente normais e sem imunodeficiências aparentes;

2. perfil celular TH1 propício à um boa resposta com a imunoterapia;

3. provas funcionais não realizada, pois não foram realizados testes in vivo.

Tratamento proposto com DECA

0 tratamento com DECA consistiu de:

• Administração de 6 composições de DECA de 1,8 cc cada dividida em duas aplicçOes de 0,9cc cada uma perilesionais contornando nas seguintes regiões: superior e inferior do segmento inguinal direito e esquerdo totalizando 4 composições nestas regiões, bem como uma composição suprapúbica e o outra composiçãoj ogo no abdómen inferior (infroumbilical) .

• A interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nivel de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea situados na região dos DECA s extras. Dessa maneira, nos dias da aplicação do antígeno, após a milhão de unidades subcutâneas diárias nas regiões indicadas supracitadas .

Desse modo, até à data da radioterapia optou-se com o consentimento livre e esclarecido do paciente pelo tratamento imunoterápico que teve início em 11/03/2010 com a primeira reavaliação parcial marcada para 03/04/2010.

Primeiro resultado parcial do tratamento proposto com DECA

Após 4 semanas de tratamento a PSA tornou-se indetectável (Figura 7), indicando uma remissão completa induzida pela imunoterapia sendo esta, aparentemente, capaz de eliminar ou reduzir de maneira significativa a massa tumoral. Pelo atual estado da técnica, não é possível diferenciar erradicação completa da massa tumoral de doença residual mínima mostrando que o tratamento proposto com DECA evidenciou efeito surpreendente.

Nesta ocasião (03/04/2010) pôde-se constatar:

o Ig G 1070 mg/dL(VN= 600 a 1500);

o Ig A 248 mg/dL (VN= 50 a 400 mg/dL) ;

o Ig M 129 mg/dL (VN= 50 a 300 mg/dL);

o Sistema complemento total sem alterações significativas (280 em 10/03/2010 para 281 em 03/04/2010) ;

o Esta manutenção do sistema complemento pode ser constatada também em C3 (de 117 para 115) e C4 ( 76 para 71);

o albumina 3,21 g/dL (3,50 a 4,85 g/dL) ;

o gama globulina 1,00 g/dL (VN= 0,74 a 1,75 g/dL) .

o CD4⁺ 1.075/mm³ ;

o CD8⁺ 537mm³ ;

o Relação CD4^+// CD8⁺ 2,0.

o Ig E 165 mg/dL (VN= inferior a 100 mg/dL) ; o FAN nuclear > 1/320;

o FAN nucleolar > 1/320;

Avaliação in vivo (testes de hipersensibilidade retardada secundária) demonstrou:

• na primeira aplicação:

o os antigenos administrados à distância da área tumoral com escore de +/++ para todos os antigenos ;

o na região dos DECA s próximos à área tumoral residual a reação estava diminuída apresentando um escore de +/++ em +++++ atestando a imunossupressão tumoral.

• na segunda aplicação:

o os antigenos administrados à distância da área tumoral se tornaram hiperérgicos com escore de +++/++++ para todos os antigenos;

o na região dos DECA s próximos à área tumoral residual normalizou-se passando a apresentar um escore de ++/+++ em +++++ atestando uma reversão da imunossupressão provocada pela massa tumoral residual.

• na terceira aplicação (início da segunda semana de tratamento) :

o os antígenos administrados à distância da área tumoral se tornaram mais hiperérgicos com escore de ++++/+++++ para todos os antígenos;

o na região dos DECA s próximos à área tumoral residual alcançaram o mesmo nível de atividade (de ++++/+++++) atestando uma reversão completa da imunossupressão loco-regional da massa residual .

Essas reações continuaram hiperérgicas até a data da reavaliação da quarta semana (03/04/2010).

Conclusão do primeiro resultado parcial do tratamento proposto com DECA

O paciente inicialmente estava com imunidade sistémica preservada com o perfil Thl celular. Este perfil Thl celular estava comprometido nas regiões próximas ao tumor com uma alça T pouco reativa atestando a imunossupressão loco-regional do tumor.

A imunoterapia tornou a hipersensibilidade retardada secundária hiperérgica em todos os territórios à distância do tumor após a segunda aplicação do DECA e reverteu a imunossupressão loco-regional que se tornou hiperérgicas como as outras.

Os exames de sangue corroboraram com a análise funcional da alça T mostrando um aumento das células CD4^+/ auxiliadoras em número absoluto e relativo e um aumento da relação CD4^+// CD8⁺ atestando a mobilização de células CD4⁺, em nível sistémico com que restauraram a imunidade celular do paciente. Os exames de sangue demonstraram, ainda, uma ação específica da composição DECA, exclusivamente, sobre a imunidade celular, pois os anticorpos e o sistema complemento permaneceram inalterados nesta primeira fase do tratamento .

Paralelamente observaram-se outros benefícios antialérgicos e autoimunes:

• diminuição dos anticorpos da classe Ig E acompanhada da remissão clínica completa da rinite alérgica manifestada no paciente como comorbidade sugerindo uma ação antialérgica do tratamento DECA proposto.

• Redução significativa do escore de FAN que passou de 1/640 para 1/320 mostrando uma provável regressão da tendência à autoimunidade ;

Resultado final do tratamento proposto com DECA anterior à radioterapia

Em 27/04/2010 foi realizada a segunda reavaliação parcial quando o paciente apresentava reações hiperérgicas (todas com +++++) dolorosas. Perante ao resultado PSA indetectável e assim permaneceram até fevereiro de 2012.

O tratamento imunológico que se iniciou em 11/03/2010 continuou vigente até 10/06/2010 (véspera do tratamento radioterápico ) totalizando 90 dias ressaltando-se que a remissão completa da massa tumoral foi alcançada após 4 semanas e a reversão da imunossupressão em 2 semanas.

Resultados do tratamento com DECA

Devido à remissão completa de um paciente com adenocarcinoma prostático grau 9 (4+5) de Gleason e estadiamento cirúrgico pT3bN0 com massa tumoral residual pós-curúrgica, em 4 semanas, pode-se inferir que este resultados são surpreendentes em relação ao estado da técnica que aponta esses casos como de difícil reversão.

É possível inferir, outrossim, que nesse primeiro mês de tratamento, a imunoterapia com DECA demonstrou capacidade potencial antialérgica (redução de Ig E associada a remissão completa da rinite alérgica) e de regressora da tendência à autoimunidade (evidenciada pela redução da titulação pela metade dos anticorpos contra os elementos nucleares) .

Conclusão do caso

Estes dados sugerem fortemente que o tratamento imunoterápico com DECA, na condição de monoterapia farmacológica adotada enquanto se aguardava o inicio da radioterapia, foi efetivo na remissão completa do tumor loco-regional remanescente (em 4 semanas) da prostatectomia lastreado pela conversão dos níveis de PSA até este ser indetectável representando, portanto, erradicação da massa tumoral, uma vez que o atual estado da técnica não possibilita diferenciar erradicação completa da massa tumoral de doença residual mínima.

Adicionalmente observou-se a remissão clínica completa da rinite alérgica e melhoria dos níveis de FAN (provavelmente melhorando a tendência da autoimunidade) .

Exemplo 8 : Combate a uma septicemia

Dados do paciente

Paciente J - P de 58 anos do sexo masculino.

Diagnóstico principal

Septicemia .

Diagnósticos secundários

Politraumatismo com:

•Feridas complexas infectadas com perda importante de tecido de aproximadamente 40 cm.

•Necrose tecidual extensa infectada com indicação de amputação de membro inferior esquerdo. •Fratura exposta de grau IIIB infectada com osteomielite de fémur esquerdo com exposição lateral .

•Ferimentos abertos, infectados corto- contusos sem possibilidade de sutura em braço esquerdo, dorso de pé esquerdo e região maleolar lateral direita..

Identificação e resumo da história clínica Em 12 janeiro de 2011 foi no admitido em Centro de Terapia Intensiva do Hospital das Clinicas de Teresópolis Constantino Otaviano, vitima de deslizamento com fratura exposta de fémur esquerdo grau III b com exposição de face lateral e ferimento corto-contuso medial com 40 cm de extensão que em profundidade se comunicava com a exposição da face lateral. Ferimento corto-contuso no braço esquerdo, região dorsal do pé esquerdo e região maleolar lateral direita. Evoluiu em 24 horas com quadro séptico com identificação microbiológica de Pseudomona aeroginosa.

Tratamento convencional proposto e realizado

Colocação de fixador externo no fémur, na emergência, com administração de clindamicina, vancomicina e cefepime associada ao debridamento cirúrgico diário.

Resultado do tratamento convencional realizado Inicialmente, melhorou o quadro séptico seguido de evolução da infecção do membro inferior esquerdo com extensa área de necrose muscular com elevado risco de amputação. Após 15 dias de internação apresentou recrudescimento da sepse com episódios febris de 39°C, anemia profunda (recebendo transfusão) e troca dos antimicrobianos para Tazocim. O paciente foi transferido em uma UTI móvel aérea para São Paulo com acompanhamento médico .

A conclusão do tratamento convencional evidenciou recidiva da sepse e aumento da necrose do membro inferior esquerdo com indicação de amputação.

Tratamento proposto com DECA associado ao tratamento cirúrgico convencional

O paciente foi internado na UTI do Hospital Alemão Oswaldo Cruz para debridamento e aplicação do tratamento com DECA que assumiu a seguinte forma:

• Aplicação de 1,8 cc da composição DECA dividida em 2 aplicações de 0,9 cc por composição junto aos 10 principais territórios linfáticos.

Margem de 3 a 4 cm de interdistância para facilitar a leitura da evolução do tratamento com intervalo de 4±1 dias. Estas aplicações foram realizadas juntamente com o debridamento cirúrgico (em média 1 a 2 vezes por semana) .

• Administração de 36 composições extras perilesionais de 01,8 cc cc de cada DECA dividida em duas aplicações de 0,9 cc por composição contornando nas seguintes lesões abertas sem possibilidade de sutura: região inguinal esquerda, face lateral da coxa esquerda, face anterior da coxa esquerda e face medial da coxa esquerda, dorso do pé esquerdo e região maleolar lateral da perna direita.

• A interleucina 2 recombinante humana em baixas doses, em nivel de saturação de receptor na concentração de 1 a 2 milhões de unidades por m² de superfície corpórea situados na região das dos DECA s extras. Para o paciente foram utilizadas 3 milhões de unidades subcutâneas diárias na coxa esquerda ou região inguinal esquerda .

• Nas regiões expostas foram aplicadas 15 composições de DECA de 1,8 cc cada uma, para infiltração das áreas cruentas expostas.

• Esta extensa imunoterapia foi aplicada sempre em centro cirúrgico nos dias de limpeza e debridamento cirúrgicos sob anestesia geral.

Dessa maneira, a primeira fase da imunoterapia teve inicio em 29/01/2011 com término em 19/03/2011 totalizando 9 aplicações de DECA em períodos que variavam de uma a duas vezes por semana, uma vez que seguia a programação de limpeza e debridamento em centro cirúrgico (em virtude da gravidade, da dor e do amplo risco de infecção pela extensa exposição de tecidos internos nas áreas cruentas).

Resultado do tratamento proposto com DECA associado ao debridamento cirúrgico e antibioticoterapia Avaliação inicial dos ferimentos do paciente no centro cirúrgico em 29/01/2011 demonstrou todos os ferimentos hemorrágicos com inúmeros coágulos, com extensa área de necrose e secreção purulenta de odor fétido. Após limpeza cirúrgica o tecido continuava a se apresentar vinhoso com mal aspecto geral sem nenhuma aparência de tecido de granulação saudável. Conforme a descrição realizada, a imunoterapia com DECA foi aplicada nessas áreas. É interessante mencionar que nesta ocasião foram realizadas culturas das secreções internas e de fragmentos de tecidos.

Após 24 horas foi realizada a primeira avaliação do tratamento cirúrgico associado à imunoterapia com DECA que demonstrou: lesões avermelhadas, com aspecto de tecido de granulação saudável, com poucas áreas necróticas, com secreção escassas, sem odor fétido e sem sangramento ativo. Foi realizada a limpeza das lesões e aplicação da imunoterapia com DECA conforme acima assinalado. Nessa ocasião foi trocada a antibioticoterapia de Tazocim para Meronem, Cubicin e Rifampicina enquanto se aguardava o resultado das culturas.

Em 01/02/2011 o resultado das culturas dos ferimento e do sangue periférico e cateter central mostrou:

• no ferimento da coxa esquerda o isolamento de Pseudomonas aeroginosa multirresistente, Acinetobacter baunnamii multirresistente e sensível apenas à Polimixina B e Proteus mirabíles multirresistente.

• no sangue periférico e no cateter central o isolamento de Acinetobacter baunnamii multirresistente e sensível apenas à Polimixina B.

Conclusão: esses resultados demonstraram que a má evolução dos ferimentos da perna esquerda levou a um novo episódio de sespse com Acinetobacter baunnamii e que por ser multirresistente e sensível apenas à Polimixina B, não respondeu ao tratamento com Tazocim endovenoso. Por outro lado, sugere fortemente uma ação benéfica da composição DECA conjunta ao tratamento cirúrgico na proteção local e sistémica contra esta infecção, uma vez que houve melhora do quadro de infecção sistémica e dos ferimentos antes da aplicação da Polimixina B capaz de neutralizar esse agente etiológico.

Nesse dia, o Meronem foi trocado por 20.000 UI/Kg em duas administrações diárias de Polimixina B sem alteração dos demais medicamentos.

Em 03/02/2011 foi constatada a remissão do quadro séptico com a associação terapêutica de antibioticoterapia, limpeza cirúrgica e imunoterapia com DECA o que possibilitou a transferência da UTI para a enfermaria a partir dessa data.

Em 06/02/2011, dada a toxicidade da administração de

Polimixina B e dos demais antimicrobianos , o paciente apresentou um quadro de insuficiência renal aguda com oligúria. Como consequência no período entre 06/02/2011 e 15/02/2011 (12 dias) a administração desses antimicrobianos foi suspensa sendo introduzido Limezolida (Zyvox) para a proteção contra contaminação hospitalar estaficocócica . Em 15/02/2011 foi constatada a remissão completa da insuficiência renal apresentada pelo paciente. Nesse período de 12 dias, contando apenas com a associação terapêutica de limpeza cirúrgica, antibioticoterapia profilática e imunoterapia com DECA o paciente apresentou excelente evolução do quadro infeccioso geral e dos ferimentos estando, após este período, apto a retirada do fixador externo, limpez cirúrgica e introdução de haste interna para a fixação do foco de fratura em cirúrgia realizada em 17/02/2011. Desse modo, neste período, conjuntamente com a cirurgia ortopédica, houve uma redução significativa das áreas cruentas sem pele com ampla regeneração dos tecidos e sem novas infecções.

O paciente recebeu alta em 15/03/2011 com cura completa da infecção de todas as lesões e feridas complexas, incluindo a da osteomielite . O paciente teve alta sem uso de antibioticoterapia .

Conclusão do caso

A existência de uma infecção grave generalizada e de uma ferida complexa contaminada por Acinetobacter baunnamii multirresistente e sensível apenas à Polimixina B que foi controlada sem antibioticoterapia espefífica com ampla evolução para a cura da sepse, de todas as lesões expostas, da osteomielite sugerem fortemente um papel decisivo da imunoterapia com DECA, associado à limpeza cirúrgica e antibioticoterapia, para a cura do quadro clínico, em tempo relativamente curto.

Tabela 2. Resultado da associação de imunoterapia com DECA, antibioticoterapia e limpeza cirúrgica para sepse e infecção grave de ferimentos complexos.

Resultado da associação de

Culturas pré- imunoterapia, tratamen o

Regiões infectadas antibioticoterapia e imunológico

limpeza cirúrgica (29/01/2011)

(15/03/2011)

Pseudomonas

aeroginosa

multirresistente,

Acinetobacter

Ferimento coxa Ausência de sinais de baumannii

esquerda infecção

multirresistente e

sensível apenas ao

Aztreonam e

Polimixina B

Acinetobacter

baumannii

Ausência de sinais de

Sangue periférico multirresistente e

infecção sensível apenas ao

Aztreonam e Polimixina B

Acinetobacter

baumanníí

multirresistente e Ausência de sinais de

Catéter central

sensível apenas ao infecção

Aztreonam e

Polimixina B

Em suma, os casos clínicos aqui apresentados demonstram que doenças e enfermidades consideradas de alto grau de complexidade e prognóstico obscuro a muito ruim quando analisadas pelos conhecimentos do estado da técnica, foram combatidas de forma diferenciada, mais vantajosa ou mais eficiente através do uso das composições da presente invenção .

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição imunogênica para modulação do sistema imune caracterizada por compreender uma quantidade terapeuticamente eficaz de dois ou mais agentes antigênicos naturais ou sintéticos que apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) selecionados do grupo consistindo em: (A) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias; (B) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus; (C) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras; (D) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários; (E) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a helmintos e/ou (F) agentes antigênicos com padrões moleculares associados a príons e um ou mais dentre um veículo, excipiente, diluente ou solvente fisiologicamente aceitáveis.

2. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos são selecionados dentre pelos menos três dos grupos (A) , (B) , (C) , (D) , (E) e (F) .

3. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos são selecionados dentre pelos menos quatro dos grupos (A) , (B) , (C) , (D) , (E) e (F) .

4. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias são selecionados de agentes antigênicos com padrões moleculares associados a bactérias pertencentes aos géneros Staphylococcus , Streptococcus , Enterococcus , Corynebacterium , Bacillus, histeria _r Clostridium, Mycobacteríum , Actinomyces , Nocardia , Escherichia , Proteus, Klebsiella , Serratia , Enterobacter, Salmonella , Shigella , Pseudomonas ,

Burkholderia , Stenotrophomonas , Acinetobacter, Vibrio, Campylobacter, Helícobacter, Bacteroides , Neisseria , Moraxella , Haemophilus , Bordetella , Brucella , Francisella , Pasteurella , Yersínia , Legionella , Gardnerella , Treponema , Leptospira , Borrella , Micoplasmas , Ríquétsias e Clamídias .

5. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus são selecionados de agentes antigênicos com padrões moleculares associados a vírus pertencentes às famílias Adenoviridae, Arenaviridae, Bunyaviridae, Coronaviridae, Filoviridae, Flavivíridae, Hepadnaviridae, Deltavírus , Caliciviridae, Herpesviridae, Orthomyxoviridae, Papovavíridae, Paramixoviridae, Parvoviridae, Picornaviridae, Poliovirus , Poxyviridae, Reoviridae, Retrovirídae, Rhabdoviridae e Togaviridae.

6. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras são selecionados de agentes antigênicos com padrões moleculares associados a fungos e leveduras pertencentes aos géneros Sporothrix, Aspergillus, Blastomyces, Cândida, Coccidioides , Cryptococcus, Histoplasma e Pneumocystis .

7. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários são selecionados de agentes antigênicos com padrões moleculares associados a protozoários pertecentes aos géneros Criptosporidiu , Ciclospora , Entamoeba , Naegleria , Giardia, Leishmania , Plasmodium, Toxoplasma , Trichomonas,

Trypanosoma , Microsporidia e Isospora.

8. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos com padrões moleculares associados a helmintos são selecionados de agentes antigênicos com padrões moleculares associados aos helmintos trematódeos, cestódeos e nematódeos.

9. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos compreendem moléculas proteicas, polissacaridicas , lipidicas e/ou compostos sintéticos que mimetizem moléculas proteicas, polissacaridicas e/ou lipidicas.

10. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que as moléculas imunoativas protéicas apresentam atividade enzimática.

11. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que as moléculas imunoativas protéicas atuam como quinases, fosfatases, streptoquinases e estreptodornases .

12. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de compreender de 0,001 a 500 microgramas por mL de cada agente imunogênico.

13. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pelo fato de compreender de 4 a 20 agentes antigênicos selecionados do grupo que consiste em agentes antigênicos oriundos de: dornase, levedurina, oidiomicina, derivado proteico purificado do bacilo de Koch (PPD) , prions, streptoquinase , toxoide de Streptococcus, Toxóide diftérico, Toxóide tetânico, tuberculina bruta de Koch, lisados inativados de Ascaris lumbricoides , Aspergillus spp. , Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus , Aspergillus terreus, Cândida spp. , Cândida albicans , Cândida glabrata , Cândida parapsilosis , Chlamydia spp., Chla ydia pneumoniae, Chlamydia psittaci, Chlamydia trachomatis , Cryptosporidium spp. , dermatofitos , Entamoeba hystolitica , Enterobíus vermicularis ,

Enterococcus faecalis , Epidermophyton floccosum,

Escherichia coli , Giardia lamblia, Haemophilus influenzae, Microsporum cannis, Mycobacterium spp., Mycobacterium bovis, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Neisseria gonorrhoeae, papiloma vírus, Polio vírus, Proteus spp., Proteus mirabilis, Proteus penerii, Proteus vulgaris, Salmonella spp., Salmonella bongori, Salmonella entérica, Serratia spp., Serratia liquefaciens , Serratia marcencens, Shigella spp., Shigella flexneri, Shigella sonnei, Staphylococcus spp., Staphylococcus aureus ,

Staphylococcus epidermidis, Strongyloides stercoralis, Streptococcus spp. , Streptococcus bovis , Streptococcus do grupo viridans, Streptococcus equinus , Streptococcus pneumonie, Streptococcus pyogenes, Toxoplasma gondii, Trichomonas vaginalis , tricofitina, Trichophyton spp. , Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans , Tricophyton mentagrophytes, vírus da febre amarela, vírus da hepatite B, vírus da rubéola, vírus da Varicella zoster, vírus da varíola, vírus da caxumba, vírus do sarampo, vírus herpéticos e vírus vacínico ou análogos sintéticos que apresentem padrões moleculares associados a patógenos (PAMPS) e/ou padrões moleculares associados a perigo (DAMPS) associados a estes agentes antigênicos.

14. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada por compreender lisado inativado de Mycobacterium bovis, derivado proteico purificado do bacilo de Koch, lisado inativado de Staphylococcus aureus, lisado inativado de Staphylococcus epidermídis, lisado inativado de Steptococcus pyogenes, lisado inativado de Streptococcus pneumonie, lisado inativado de Enterococcus faecalis, Estreptoquinase/dornase, lisado inativado de Cândida albicans, lisado inativado de Cândida glabrata , lisado inativado de Epidermophyton floccosum, lisado inativado de Microsporum cannis, lisado inativado de Tricophyton mentagrophytes variedade interdigitale, lisado e inativado de Escherichia coli enteropatogenica, lisado inativado de Salmonella bongori, lisado inativado de Salmonella entérica e lisado inativado de Salmonella subterrânea .

15. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por compreender 0,001 a 1 ng/mL de lisado inativado de Mycobacterium bovis; 0,001 a 1 ng/mL de derivado proteico purificado do bacilo de Koch; 0,1 a 100 μg/mL lisado inativado de Staphylococcus aureus; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Staphylococcus epidermídis; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Steptococcus pyogenes; 0,1 a 100 μg/ de lisado inativado de Streptococcus pneumonie; 0,1 a 100 ug/mL de lisado inativado de Enterococcus faecalis; 0,01 a 10 pg/mL de estreptoquinase ; 0,01 a 10 g/mL de dornase; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Cândida albicans; 0,1 a 100 μg/mL de lisado inativado de Cândida glabrata; 0,1 a 100 pg/mL de lisado inativado de Epidermophyton floccosum; 0,1 a 100 pg/mL de lisado inativado de Microsporum cannis; 0,1 a 100 g/mL lisado inativado de Trícophyton mentagrophytes variedade interdigitale; 0,1 a 100 pg/mL lisado inativado de Escherichia coli enteropatogenica; 0,1 a 100 pg/mL lisado inativado de Salmonella bongori; 0,1 a 100 pg/mL lisado inativado de Salmonella entérica e 0,1 a 100 pg/mL lisado inativado de Salmonella subterrânea.

16. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de compreender adicionalmente citocinas e/ou quimiocinas.

17. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 16, caracterizada pelo fato de que compreende GM-CSF, IL2, IL4, IL5, IL7, IL12, IL15, IL21 e/ou interferon gama.

18. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que compreende IL2.

19. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizada pelo fato de que os agentes antigênicos são encapsulados na forma de cápsulas, microparticulas , nanoparticulas , drágeas ou lipossomas.

20. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivinidcações 1 a

19, caracterizada pelo fato de ser um sólido, liquido ou gel .

21. Composição imunogênica para modulação do sistema imune, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a

20, caracterizada por ser para administração em humano ou animal por via oral, intradérmica, parenteral, subcutânea, intravenosa, intramuscular, assim como pela mucosa nasal e/ou oral.

22. Uso de uma ou mais composições imunogênicas , conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a

21, caracterizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento.

23. Uso, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição de tecidos, insuficiência cardíaca, renal, respiratória ou hepática, câncer, neoplasias e tumores malignos e benignos.

24. Uso, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que as doenças infecciosas podem ser de origem virótica, bacteriana, fúngica ou parasitária.

25. Uso, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem virótica são causadas pelos seguintes vírus: HIV, vírus da hepatite, vírus do herpes, rhabdovirus, vírus da rubéola, vírus da varíola, poxvirus, paramyxovírus e morbillivirus .

26. Uso, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem bacteriana são causadas pelas seguintes bactérias: Pneumococcus, Staphylococcus, Bacillus, Streptococcus, Meningococcus , Gonococcus, Escherichia, Klehsiella, Proteus, Pseudomonas, Salmonella , Shigella , Hemophilus, Yersinia , histeria , Corynebacterium, Vibrio, Clostridia , Chlamydia, Mycobacterium, Helicobacter e Treponema .

27. Uso, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem fúngica são causadas pelos seguintes fungos: Cândida, Aspergillus, Cryptococcus neoformans, e/ou fungos causadores de micoses superficiais e profundas.

28. Uso, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem parasitária são causadas pelos seguintes parasitas: Tripanossoma , Schistossoma , Leishmania, amebas e tênia.

29. Uso, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de ser para a prevenção e/ou tratamento de Lúpus eritematoso sistémico e localizado, artrite reumatóide, poliaterite nodosa, poliomiosite e dematomiosite progressiva, esclerose progressiva sistémica, esclerodermia difusa, glomerulonefrite, myasthenia gravis, síndrome de Sjogren, doença de Hashimoto, doença de Graves, adrenalite, hipoparatiroidismo, anemia perniciosa, diabetes, esclerose múltipla, doenças dismielinizantes, uveítes, pênfigos, cirrose penfigóide, colite ulcerativa, miocardites, enterite regional, síndrome do stress respiratório do adulto, manifestações locais de reação a drogas, dermatite atópica, eczema infantil, dermatite de contato, psoríases, liquem plano, enteropatias alérgicas, asma brônquica, rejeição de transplantes, doenças pós streptocócicas com manifestações cardíacas, renais e articulares da febre reumática e outras manifestações correlatas, várias e múltiplas formas de câncer, como por exemplo, carcinomas, adenocarcinomas , melanomas, sarcomas, astrocitomas malignos, hepatomas, hipernefromãs , linfomas e melanomas, entre outros.

30. Uso, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de ser para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino.

31. Método de prevenir ou tratar doenças infecciosas, doenças autoimunes, doenças alérgicas, inflamações, artrites, doenças inflamatórias, rejeição de transplantes, afecções causadas por distúrbios vasculares, doenças provocadas por acidentes cardiovasculares hemorrágicos ou isquêmicos, isquemia, infarto e hemorragias que levam a destruição dos tecidos, câncer, tumores e neoplasias malignas e benignas em um animal caracterizado por compreender administrar ao animal uma quantidade eficaz de uma ou mais composições imunogênicas , conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 21.

32. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que as doenças infecciosas podem ser de origem virótica, bacteriana, fúngica ou parasitária.

33. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem virótica são causadas pelos seguintes vírus: HIV, vírus da hepatite, vírus da herpes, rhabdovirus, vírus da rubéola, vírus da varíola, poxvirus, paramyxovirus e morbillivirus .

34. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem bacteriana são causadas pelas seguintes bactérias: Pneumococcus, Staphylococcus, Bacíllus, Streptococcus, Meningococcus , Gonococcus , Escherichia, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Salmonella , Shigella , Hemophilus, Yersinia , histeria , Corynebacterium, Vibrio, Clostridia , Chlamydia , Mycobacterium, Helicobacter e Treponema .

35. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem fúngica são causadas pelos seguintes fungos: Cândida, Aspergillus, Cryptococcus neoformans, fungos causadores de micoses superficiais e profundas.

36. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que as doenças de origem parasitária são causadas pelos seguintes parasitas: Tripanossoma , Schistossoma , Leishmania, amebas e tênia.

37. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser para a prevenção e/ou tratamento de Lúpus eritematoso sistémico e localizado, artrite reumatóide, poliaterite nodosa, poliomiosite e dematomiosite progressiva, esclerose progressiva sistémica, esclerodermia difusa, glomerolonefrite, myasthenia gravis, síndrome de Sjogren, doença de Hashimoto, doença de Graves, adrenalite, hipoparatiroidismo, anemia perniciosa, diabetes, esclerose múltipla, doenças dismielinizantes, uveítes, pênfigos, cirrose penfigóide, colite ulcerativa, miocardites, enterite regional, síndrome do stress respiratório do adulto, manifestações locais de reação a drogas, dermatite atópica, eczema infantil, dermatite de contato, psoríases, liquem plano, enteropatias alérgicas, asma brônquica, rejeição de transplantes, doenças pós streptocócicas, como manifestações cardíacas, renais e articulares da febre reumática e outras manifestações correlatas, várias e múltiplas formas de câncer, como por exemplo, carcinomas, adenocarcinomas , melanomas, sarcomas, astrocitomas malignos, hepatomas, hipernefromãs , linfornas e melanomas, entre outros.

38. Método para induzir a regeneração celular, regeneração de tecidos, regeneração de órgãos e regeneração de sistemas orgânicos, tais como o sistema circulatório, o sistema nervoso e o sistema endócrino em um animal caracterizado por compreender administrar ao animal uma quantidade eficaz de uma ou mais composições imunogênicas , conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 21.

39. Método para recondução da resposta imune em um animal caracterizado por compreender as seguintes etapas: d) administrar sistémica e/ou localmente no animal uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma ou mais composições imunogênicas, conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 21;

e) garantir o contato de uma ou mais composições imunogênicas, aplicadas na etapa "a" com as células dendríticas ou outras células APC do animal;

f) administrar opcionalmente agentes prostéticos, tais como vitaminas no local ou região onde ocorre a doença a ser tratada, de forma a fortalecer o metabolismo e consequentemente o sistema imune do animal; e

g) administrar opcionalmente outros medicamentos ou tratamentos específicos.

40. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 31 a 39, caracterizado pelo fato de compreender administrar opcionalmente ao animal uma ou mais citocinas e/ou quimiocinas.

41. Método, de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de compreender administrar opcionalmente ao animal GM-CSF, IL2, IL4, IL5, IL7, IL12, IL15, IL21 e/ou interferon gama.

42. Método, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de compreender administrar opcionalmente ao animal IL2.

43. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 31 a 42, caracterizado pelo fato de ser associado a antibioticoterapia, quimioterapia, radioterapia, terapia com anticorpos e antisoros, uso de hormônios, citocinas, quimiocinas, neuro-hormônios , peptideos, antivirais, fitoterápicos , suplementação com vitaminas, suplementação com outros cofatores ou agentes prostéticos, transplantes de células ou tecidos, técnicas de vacinação terapêuticas ou profiláticas, terapia gênica, cirurgia e homeopatia.

44. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 31 a 43, caracterizado pelo fato de que o animal é um mamífero.

45. Método, de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo fato de que o mamífero é um humano.