WO2012094849A1

WO2012094849A1 - 荔枝核皂苷提取工艺

Info

Publication number: WO2012094849A1
Application number: PCT/CN2011/071992
Authority: WO
Inventors: 郭洁文; 叶碧波
Original assignee: 广州市中医医院
Priority date: 2011-01-10
Filing date: 2011-03-21
Publication date: 2012-07-19
Also published as: CN102048885B; CN102048885A

Description

荔枝核皂苷提取工艺技术领域

本发明涉及一种荔枝核皂苷提取工艺，属于中药提取技术领域。背景技术

荔枝核（Lychee Seed, Litchi Seed),别名荔仁、荔核、大荔核，是无患子科植物荔枝（Litchi

Chinensis Sonn) 的干燥成熟种子，性温，味微甘、苦、涩，无毒。《本草纲目》记载，荔枝核 "止渴、益人颜色、食之止烦渴"（烦渴病，现代医学称为糖尿病）。研究表明，荔枝核有降低血糖、调节血脂、提高抗氧化、抑制乙肝病毒表面抗原的作用。实验研究和临床治疗显示荔枝核提取物能够显著地降低血糖，有效治疗糖尿病。充分利用荔枝核，进一步开发治疗糖尿病的药物，对于糖尿病患者日益增多，需求大量治疗糖尿病药物具有重要的社会意义。

荔枝核的主要成分有皂苷、体类化合物、黄酮类化合物、脂肪酸、氨基酸、蛋白质和糖分等化学成分。研究证实，荔枝核皂苷是治疗糖尿病的有效成分。因此，充分开发荔枝核，提高荔枝核皂苷提取率，具有重要的经济效益。

目前，荔枝核成分分离制备工艺主要采用水提醇沉和溶剂提取法，水提醇沉法耗时、提取率低；溶剂提取法需要大量的溶剂，而且提取物含杂质多。这些提取工艺对皂苷提取效率不高。本发明旨在针对现有荔枝核化学成分提取工艺的不足，提供一种提取率高、工艺流程简单的从荔枝核中提取皂苷的工艺方法。发明内容

本发明的目的在于提供一种荔枝核皂苷提取工艺。本工艺通过酶软化降解细胞壁，结合超声的空化作用，充分破坏细胞壁，加速并增加活性成分的溶出，通过非极性的大孔吸附树月旨，对荔枝核的皂苷成分富集分离，制备出高含量的荔枝核皂苷。本工艺具有省时、省力和省费用等优点。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种荔枝核皂苷提取工艺，包括以下步骤：

1 )将荔枝核粉碎，称取一定量的荔枝核粉末加水浸润，然后加入重量为荔枝核粉末重量

1/100〜1/50的组合酶试剂进行酶解处理；

2) 加入乙醇溶液进行超声提取，得到超声提取液；

3 ) 对超声提取液进行过滤和减压浓缩处理，得到荔枝核皂苷粗提物； 4) 采用大孔吸附树脂对荔枝核皂苷粗提物进行纯化，得到所述的荔枝核皂苷。

在本发明中，所述的组合酶试剂选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶和木瓜蛋白酶中的两种或两种以上的组合。

在上述的步骤 1 ) 中，进行加水浸润处理时，加水量为荔枝核粉末重量的 2〜6倍，加水浸润的时间为 5〜30 min。

在上述的步骤 1 ) 中，进行酶解处理时，酶解温度控制在 30°C〜50°C，酶解时间为 1〜3 小时。

在上述的步骤 2) 中，乙醇溶液的浓度为 50%〜70% (体积百分比），乙醇溶液的用量为荔枝核粉末重量的 2〜3倍。

在上述的步骤 2) 中，进行超声提取时，超声频率控制在 20 KHz〜50 KHz，超声提取的时间为 20〜40 min。

在上述的步骤 4) 中，采用大孔吸附树脂进行纯化时，采用浓度为 50%〜80% (体积百分比）的乙醇溶液作为洗脱液；所述大孔吸附树脂采用型号为 AB-8、 D201、 D101、 X-5 的大孔吸附树脂。

本发明通过组合酶试剂酶解处理和超声空化作用，只需少量的溶剂，即能使荔枝核的有效成分快速浸出，具有提取率高、溶剂消耗量少等优点；通过大孔吸附树脂的洗脱，能够除去大量杂质，富集了皂苷含量。与水提醇沉法相比，本发明所述的工艺提取时间减少，提取率增加；与溶剂提取法相比，本发明所述的工艺在单位药材的溶剂消耗量减少，提取时间减少，提取率增加。采用本发明所述的工艺提取荔枝核有效成分，提取率高达 9.05%，荔枝核皂苷含量高达 85.0%。由此可见，本发明所述的工艺用于荔枝核皂苷的提取，具有提取效率高、节省时间和溶剂等显著优点。具体实施方式

实施例一：

将荔枝核粉碎，粒度大小为 20〜30目。取 50g荔枝核粉，加入 150ml水（相当于荔枝核粉末重量的 3倍）浸润 lOmin, 称取 0.5g纤维素酶、 0.5g果胶酶和 0.5g葡聚糖酶加入其中，充分混匀，控制温度 50°C，酶解处理 3小时。然后加入 150ml 70%的乙醇溶液，在超声频率为 20KHz的条件下提取 40min。将提取液过滤并减压浓缩，得荔枝核皂苷粗提物 4.53g。将荔枝核皂苷粗提物经大孔吸附树脂柱，用 70%的乙醇溶液洗脱 3 个柱体积，得荔枝核皂苷 3.85g。经测定，荔枝核皂苷含量为 85.0%。实施例二：将荔枝核粉碎，粒度大小为 20〜30 目。取 50g荔枝核粉，加入 150ml水浸润 5min，称取 0.5g纤维素酶和 0.5g果胶酶加入其中，充分混匀，控制温度 50°C，酶解处理 3小时。然后加入 150ml 70%的乙醇溶液，在超声频率为 20KHz的条件下提取 40min。将提取液过滤并减压浓缩，得荔枝核皂苷粗提物 4.20g。将荔枝核皂苷粗提物经大孔吸附树脂柱，用 70%的乙醇溶液洗脱 3个柱体积，得荔枝核皂苷 3.55g。经测定，荔枝核皂苷含量为 83.5%。实施例三：

将荔枝核粉碎，粒度大小为 10〜20目。取 50g荔枝核粉，加入 150ml水浸润 10min，称取 0.5g纤维素酶和 0.5g葡聚糖酶加入其中，充分混匀，控制温度 50°C，酶解处理 3小时。然后加入 150ml 70%的乙醇溶液，在超声频率为 20KHz的条件下提取 40min。将提取液过滤并减压浓缩，得荔枝核皂苷粗提物 4.03g。将荔枝核皂苷粗提物经大孔吸附树脂柱，用 70% 的乙醇溶液洗脱 3个柱体积，得荔枝核皂苷 3.48g。经测定，荔枝核皂苷含量为 83.9%。实施例四：

将荔枝核粉碎，粒度大小为 10〜20目。取 50g荔枝核粉，加入 150ml水浸润 10min，称取 0.5g果胶酶和 0.5g葡聚糖酶加入其中，充分混匀，控制温度 30°C，酶解处理 2小时。然后加入 150ml 50%的乙醇溶液，在超声频率为 50KHz的条件下提取 40min。将提取液过滤并减压浓缩，得荔枝核皂苷粗提物 3.83g。将荔枝核皂苷粗提物经大孔吸附树脂柱，用 70%的乙醇溶液洗脱 3个柱体积，得荔枝核皂苷 3.05g。经测定，荔枝核皂苷含量为 82.6%。实施例五：

将荔枝核粉碎，粒度大小为 10〜20 目。取 50g荔枝核粉，加入 100ml水浸润 5min，称取 0.5g纤维素酶、 0.5g果胶酶和 0.5g葡聚糖酶加入其中，充分混匀，控制温度 30°C，酶解处理 1小时。然后加入 100ml 50%的乙醇溶液，在超声频率为 20KHz的条件下提取 20min。将提取液过滤并减压浓缩，得荔枝核皂苷粗提物 4.23g。将荔枝核皂苷粗提物经大孔吸附树脂柱，用 70%的乙醇溶液洗脱 3个柱体积，得荔枝核皂苷 3.20g。经测定，荔枝核皂苷含量为 84.5%。

Claims

权利要求书

1、一种荔枝核皂苷提取工艺，包括以下步骤：

1 )将荔枝核粉碎，称取一定量的荔枝核粉末加水浸润，然后加入重量为荔枝核粉末重量 1/100〜1/50的组合酶试剂进行酶解处理；

2) 加入乙醇溶液进行超声提取，得到超声提取液；

3 ) 对超声提取液进行过滤和减压浓缩处理，得到荔枝核皂苷粗提物；

4) 采用大孔吸附树脂对荔枝核皂苷粗提物进行纯化，得到所述的荔枝核皂苷。

2、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：所述的组合酶试剂选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶和木瓜蛋白酶中的两种或两种以上的组合。

3、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：在步骤 1 ) 中，进行加水浸润处理时，加水量为荔枝核粉末重量的 2〜6倍，加水浸润的时间为 5〜30 min。

4、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：在步骤 1 ) 中，进行酶解处理时，酶解温度控制在 30°C〜50°C，酶解时间为 1〜3小时。

5、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：在步骤 2) 中，所述乙醇溶液的浓度为 50%〜70%，所述乙醇溶液的用量为荔枝核粉末重量的 2〜3倍。

6、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：在步骤 2) 中，进行超声提取时，超声频率控制在 20 KHz〜50 KHz, 超声提取的时间为 20〜40 min。

7、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：在步骤 4) 中，采用大孔吸附树脂进行纯化时，采用浓度为 50%〜80%的乙醇溶液作为洗脱液。

8、根据权利要求 1所述的荔枝核皂苷提取工艺，其特征在于：所述大孔吸附树脂采用型号为 AB-8、 D201、 D101、 X-5的大孔吸附树脂。