WO2007049819A1

WO2007049819A1 - Nkt細胞の機能を抑制する糖脂質誘導体を有効成分とする治療剤

Info

Publication number: WO2007049819A1
Application number: PCT/JP2006/322042
Authority: WO
Inventors: Sachiko Miyake; Takashi Yamamura; Hirokazu Annoura
Original assignee: Japan As Represented By President Of National Center Of Neurology And Psychiatry; Asubio Pharma Co., Ltd.
Priority date: 2005-10-28
Filing date: 2006-10-27
Publication date: 2007-05-03
Also published as: US20090048185A1; JPWO2007049819A1; CN101316599A; EP1952814A1; KR20080059611A; CA2627640A1; BRPI0618024A2

Abstract

式（I）：　（式中、R1はアルドピラノース残基を表し、R2は水素原子、又は水酸基を表し、Aは−CH2−、−CH(OH)−CH2−又は−CH=CHCH2−を示し、xは13～16の整数を示し、yは0～25の整数を示す。）で表される化学的に合成した糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含むNKT細胞又はNKT細胞への刺激が病態悪化に関与する疾患の治療薬。

Description

NKT細胞の機能を抑制する糖脂質誘導体を有効成分とする治,.療剤技術分野

本発明は、多発性硬化症、重症筋無力症、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、原発性通風、全身性エリテマ卜一デス、 'シェ一ダレン症候群、強皮症、混合性結明合組織病、インシュリン依存性糖尿病、特発性血小板減少性紫斑病、橋本病、バセドウ病、悪性貧血、ァシソン炳、萎縮性胃炎、溶血性貧血、潰瘍性大腸炎、クローン抦、書

自己免疫性肝炎、天疱瘡、類天疱瘡、血管炎症候群、自己免疫性溶血性貧血、グッドパスチヤ一症候群、ベーチェット病、サルコイド —シス、臓器移植の拒絶反応等の慢性炎症性疾患並びに気管支喘息アトピー性喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、じんま疹、花粉症、薬物アレルギー、接触性皮膚炎等のアレルギー疾患に有用な新規な糖脂質又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を含む治療薬に関する。背景技術

免疫系は、本来自己と非自己を識別し、非白己に対しては免疫応答により排除を、自己に対しては免疫不応答を口乃導して生体の恒常性を維持している。また、自己成分に対する免疫不応答の維持が破錠し、免疫系が自己を攻撃するようになった病能 ≠ 、が「自己免疫疾患

」であり、非自己の抗原（外来異物）に対して引さ起こされた免疫応答が、過度の反応により生体に不都合を生じさせるようになった病態が「アレルギー」と考えられる。

自己免疫疾患を含む種々の慢性炎症性疾患やァレルギー疾患の従来の治療法は、ダルココルチコィドゃ免疫抑制剤といった非特異的な免疫抑制療法が主体である。しかし、これらの治療法は副作用が多く、自己抗原特異的な免疫抑制剤の開発が切望されてきた。近年自己抗原のペプチド療法が試みられたが、ペプチドは多型性に富む主要組織適合遺伝子複合体（MHC) によって提示されるた.めに個人差が著しく、改善する症例もあったが、増悪する症例もみられ、臨床応用への困難さを露呈するような結果に終わっている。

NKT細胞は、 NK細胞のマーカー（NKT受容体）と T細胞抗原受容体 (TCR) の両方を発現するリンパ球であり、 T細胞が主要組織適合抗原（MHC) に結合したペプチドを認識するのに対し、多型性のなレ D 1 d分子に提示される糖脂質を抗原として認識し、 TCRからの刺激が入ると極めて短時間で大量のサイトカインを産生する。

例えば、式（II) ：

で表される α -ガラクトシルセラミド（ α-GC.) は、 CDld拘束性に NK T細胞を活性化させる初めての糖脂質リガンドとして報告され、抗腫瘍活性や免疫賦活作用を発現することが明らかにされている（T. Kawanoら、 Pro Natl. Acad. Sci. USA. 1998, 95, 5690.及び日本特許公報第 3088461号参照）。また、本発明者らは、ひ- GCのスフィンゴシン塩基の炭素鎖の長さを短縮した

式（III) ：

で表される OCHが、 Th2型サイト力インの産生を亢進し、 Thl/Th2免疫バランスを Th2に偏倚させることで多発性硬化症の動物モデル：マウス実験的自己免疫性脳脊髄炎（EAE) 、及び慢性関節リウマチの動物モデル：コラーゲン誘発関節炎（CIA) で高い有効性を示すことを報告した（K. Miyamotoら、 Nature 2001, 413, 531. , A. Ch ibaら、 Arthritis Rheum. 2004, 50, 305. , T. Yamamuraら、 Curr . Top. Med. Chem. 2004, 4, 561.及び WO2003/016326号公報参照）。即ち、式（III) ,で表される 0CHの上記の自己免疫疾患動物モデルにおける作用発現は、免疫担当細胞である NKT細胞からの Th 2型の抑制性サイ卜力イン産生による「アクティブ · サブレッシヨン」に基づくものと捉えることができる。 '

一方、 NKT細胞は、関節炎のような自己免疫疾患モデルや気管支喘息モデルでは、病態悪化に関与するエフェクター細胞として働くことが報告されている（0. Akbariら、 Curし Opin. Immunol. 2003 , 15, 627.参照）。従って、そのような病態において NKT細胞の機能を抑制する薬物療法が確立出来れば、自己免疫疾患の予防 · 治療のみならず、アレルギー疾患の治療にも翳がると考えられる。しかしながら、 NKT細胞の機能抑制を作用機序とする有効な薬物治療はこれまで知られていなかった。発明の開示

以上のような背景の下、本発明は、 NKT細胞の機能を抑制することにより、慢性炎症性疾患、アレルギー疾患及び NKT細胞が病態悪化に関与することが知られている疾患において有効な治療薬を提供することを目的とする。

本発明は、また、 CDld拘束性の NKT細胞のリガンドとして働ぐが、 NKT細胞からの IL- 4、 IFN-ァなどのサイト力イン産生はほとんど誘導せず、前記医薬品として有用である新規な糖脂質（I) 及びその薬学的に許容される水和物又は溶媒和物を有効成分として含む治療薬を提供すること'を目的とする。

本発明者らは、これまでに自己免疫応答を制御する能力のある糖脂質を合成し、自己免疫疾患治療薬の開発に取り組んできた（W020 03/016326 ； WO2004/072091 ； Karl 0. A. Yuら、 Proc. Nat 1. Acad . Sci. USA, 2005, 102, 3383) 。その中で、 o; -GC (II) よりも糖脂質のスフインゴシン塩基の炭素鎖の長さを伸長した誘導体において、驚くべきことに、抗体誘導性関節炎の抑制効果の強い

式（I) ：

(I)

(式中、 R¹はアルドビラノース残基を表し、 R²は水素原子又は水酸基を表し、 Aは— CH₂—、 — CH(0H)— CH₂ —又は一 CH = CHCH₂ —を示し、 Xは 13〜 16の整数を示し、 yは 0〜25の整数を示す。）

で表される糖脂質誘導体（以下 SGL (Suppressor glycol ipid) と称する）を見出した。

式（I) で表される SGLは、 NKT細胞の増殖反応及び IFN— ァ等のサィ卜力インの産生わずかに誘導するものの、前投与により NKT細胞の再刺激への反応性を著しく抑制する（免疫不応答）。抗体関節炎モデルは、 NKT細胞が存在しないマウスではその関節炎の発症が軽症化することが報告されている . U. Exp. Med. 2005, 201, 41-7 ； Arthritis Rheum. 2005, 52, 1941 ) 力^ 本発明に記載する糖脂質により、その関節炎の発症が強く抑制される。更に、式（I) で表される SGL は、気管支喘息の動物モデルにおいて、気道への好酸球を主体とする細胞浸潤を抑制し、肺胞洗浄液中の IL-5、 Iい 13等のサイト力イン産生を抑制し、気道過敏性を抑制する。即ち、本発明者らは、式（I) で表される SGLが、自己抗体惹起性の炎症反応を抑制し、自己免疫性関節炎等の自己免疫疾患、気管支喘息等のァレルギー疾患の治療薬になりうる有効な糖脂質誘導休であることを見出し、本発明の目的を達成するに到つた。図面の簡単な説明

以下、図面を参照して本発明を説明する。

図 1は K/BxN血清移入関節炎における合成糖脂質誘導体による抑制効果（臨床スコア）を示すグラフ図である。

図 2 は NKT細胞の存在しない: ί α 18遺伝子欠損マウスに誘導した Κ/ ΒχΝ血清移入関節炎における合成糖脂質誘導体効果（臨床スコア）を示すグラフ図である。

図 3 はコラーゲン誘導性関節炎における合成糖脂質誘導体による抑制効果（臨床スコア）を示すグラフ図である。

図 4は本発明化合物の ΝΚΤ細胞に与える影響を示すグラフ図である。

図 5 は本発明化合物の前投与における ΝΚΤ細胞に与える影響を示すグラフ図である。図 6 は本発明化合物の気管支喘息モデルにおける肺胞洗浄液中細胞浸潤の抑制効果を示すグラフ図である

図 7 は本発明化合物の気管支喘息モデルにおける肺胞洗浄液中のサイ卜カインの抑制効果を示すグラフ図である。

図 8 は本発明化合物の気管支喘息モデルにおける肺病理所見の抑制効果を示すグラフ図である。

図 9 は本発明化合物の気管支喘息モデルにおける肺胞洗浄液中サィ卜力インの抑制効果を示すグラフ図である発明を実施するための最良の形態

本発明において、慢性炎症性疾患としては、例えば、多発性硬化症、重症筋無力症、関節リウマチ、若年性関節リウチ、原発性通風、全身性ェリテマ卜一デス、シェ一グレン症候群強皮症 A ί 性結合組織病、ィンシュリン依存性糖尿病、特発性血小板減少性紫斑病、橋本病、バセドウ病、悪性貧血、ァジソン病萎縮性胃炎、溶血性貧血、潰瘍性大腸炎、クローン病、 '自己免疫性肝炎、天疱瘡

、類天疱瘡、血管炎症候群、自己免疫性溶血性貧血ヮッドパスチャ一症候群、ベ一チェッ卜病、サルコィドーシス、器移植の拒絶反応等が挙げられる。また、本発明におけるアレルギ一疾患としては、例えば、気管支喘息、アトピー性喘ァ卜ピ ―性皮膚炎、ァレルギ一性鼻炎、じんま疹、花粉症、薬物ァレルギ、接触性皮膚炎等が挙げられる

本発明の式 ( I )

(I)

(式中、 R¹ 、 R²、 A、 x及び yは前記定義の通りである。）で表される化合物において、 R¹で示されるアルドビラノース残基の好ましい例としては、ひ- D -ダルコシル、ひ- D-ガラクトシル、 a- D-マンノシル、 /3 - D -ダルコシル、 i6 - D-ガラク卜シル、 /3 - D-マンノシル、 2-デォキシ- 2-ァミノ - a -D-ガラクトシル、 2-デォキシ- 2-ァミノ - β - D-ガラクトシル、 2 -デォキシ- 2-ァセチルァミノ -ひ -D-ガラクトシル、 2-デォキシ 2-ァセチルァミノ -；0 -D -ガラク卜シル、 3 - D -ァロビラノシル、 /3 -D-アルトロビラノシル、 β -D-ィドシル等が挙げられ、特に好ましくは a -D-ダルコシル、ひ - D -ガラクトシル、 a - D-マンノシル、 2-デォキシ- 2 -ァミノ - a -D-ガラクトシル、 2-デォキシ- 2-ァセチルァミノ -ひ - D -ガラクトシル等のひ置換体である。 R ²は水素原子又は水酸基を表すが、好ましくは水素原子である。 Aは — CH₂—、 — CH (OH)— CH₂ —又は— CH=CHCH₂ —を表すが、好ましくは — CH₂ —又は一 CH (0H)— CH₂ —であり、特に好ましくは— CH (0H) - CH ₂—である。 Xは 13〜 16の整数を表すが、好ましくは 14〜 16の整数である。 nは 0〜25の整数を表すが、好ましくは 15〜25、より好ましくは 18〜25、最も好ましくは 20〜25の整数である。

前記式（I) で表される化合物のうち、特に好ましい例を列挙すれば以下の通りである。即ち、 2—へキサコサノィルアミノー 1一 0 一ひ一 D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール、 2—へキサコサノィルアミノー 1一 0— a— D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—へニコサン卜リオ一ル、 2_へキサコサノィルアミノー 1— 0— ひ一 D—ガラクトピラノシル一D— リボー 1, 3, 4 ーィコサン卜リオ一ル、 2—へキサコサノィルアミノー 1— 0— α— D 一ガラク卜ビラノシルー D— リボー 1, 3, 4— ノナデカントリオール、 2_ペン夕コサノィルァミノ一 1—0— ひ一 D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール、 2—ペン夕コサノィルアミノ一 1一 0— α— D—ガラク卜ビラノシル一 D— リボ一 1, 3, 4—へニコサントリオール、 2—ペン夕コサノィルァミノ一 1_0— ひ一 D—ガラクトピラノシル _ D— リボー 1 , 3, 4—ィコサントリオール、 2—ペン夕コサノィルアミノー 1一 O— α— D—ガラクトピラノシル一 D— リボ — 1, 3, 4— ノナデカントリオール、 2—テトラコサノィルアミノー 1 一 0— ひ一 D—ガラク卜ピラノシル一 D— リボー 1, 3, 4— ドコサン卜リオール、 2—テトラコサノィルァミノ一 1一 0— α—D—ガラクトピラノシル一D— リボー 1, 3, 4—へニコサントリオール、 2—テ卜ラコサノィルァミノ一 1一 0— ひ一 D—ガラク卜ビラノシル一 D— リボ一 1, 3, 4ーィコサントリオ一ル、 2—テトラコサノィルァミノ一 1— 0— ひ一 D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4— ノナデカントリオール、 2_ヘプ夕コサノィルァミノ一 1— 0— ひ一 D—ガラク卜ビラノシル一 D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール、 2_ヘプ夕コサノィルァミノ一 1一 0— α—D—ガラク卜ビラノシル一 D— リボー 1, 3, 4—へ二コサントリオール、 2—ヘプ夕コサノィルァミノ一 1— O— o;— D—ガラクトピラノシル一 D— リボー 1, 3, 4—ィコサントリオ一ル、 2—へプ夕コサノィルァミノ一 1一 0— a— D—ガラクトピラノシル一 D— リボ一 1, 3, 4— ノナデカントリオ一ル、 2—ォク夕コサノィルアミノー 1一 0— a— D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4— ドコサン卜リオール、 2—才クタコサノィルァミノ一 1一 0— ひ一 D—ガラク卜ピラノシル一 D— リボー 1, 3, 4—へニコサン卜リオ一ル、 2—才クタコサノィルアミノー 1一 0_ a _D—ガラク卜ビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—ィコサントリオール、 2_ォク夕コサノィルァミノ一 1一 0_ α 一 D—ガラクトピラノシル一 D— リボー 1, 3, 4—ノナデカントリす一ル、 2—ノナコサノィルァミノ一 1一 0— ひ一 D—ガラクトピラノシル一 D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール、 2—ノナコサノィルアミノー 1_0_ α—D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—へニコサントリオ一ル、 2—ノナコサノィルァミノ一 1— 0— ひ一 D—ガラク卜ビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—ィコサン卜リオール、 2—ノナコサノィルァミノ一 1一 0_ ひ一 D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—ノナデカントリオール等を挙げることができる。

式（I) で表される糖脂質は、種々の方法で合成することが可能であるが、例えば以下に記載する方法に従って合成することができる。以下、それらの方法について順次説明する。

' 先ず，公知の出発物質 UVa) (W0200 /072091 ； K. Murataら、 J . Org. Chem. 2005, 70, 2398) より、化合物.（Via) を得る。また、公知の方法（例えば、 M. Mori ら、 J. Med. Chem. 1995, 38, 2 176) に従って化合物（IVb) 、 (IVc) を得、化合物（IVb) については二重結合部分を還元して化合物（VIb) に変換する（工程 1 ) 。化合物（Via) 、 (VIb) 、 (IVc) から化合物（Vila) 、 (Vllb ) 、 (VIIc) を得（工程 2 ) 、アジド基の選択的還元と続くアミド化反応により化合物（Villa) 、 (Vlllb) 、 (VIIIc) を得る（ェ程 3 ) 。化合物（Vila) 、 (Vllb) 又は（VIIc) と化合物（IX) とのグリコシル化反応により化合物（Xa) 、 (Xb) 、 (Xc) を得る（工程 4) 。化合物（Xa) 、（Xb) 、（Xc) のアジド基の選択的還元と続くアミド化反応により化合物（XI a) 、 (Xlb) 、 (XIc) を得る。また、化合物（XIa) 、 (Xlb) 、 (XIc) は、化合物（Villa) 、 (Vlllb) 又は（VIIIc) と化合物（IX) とのグリコシル化反応によっても得ることができる（工程 5 ) 。最後に化合物（XIa) 、 (X lb) 、 (XIc) の保護基を脱保護することにより、目的とする化合物（I) が得られる（工程 6 ) 。

工程 1 ：

公知の出発原料（IVa) から、化合物（Via) を合成することができる。また、公知の方法に従って化合物（IVb) 及び（IVc) を得、 ( IVb) は化合物（VIb) へ変換することができる。

(式中、 Xは前記定義の通りであり、 R³及び^は同一又は異なっていてもよ < 、水素原子、メチル基、ェチル基、ィソプ口ピル基、メトキシ基、卜リフルォロメチル基、塩素原子、フソ素原子などで置換されていてもよぃァルキル基、メチル基、ェチル基、ィソプロピル基、メ卜キシ基、卜リフルォ □メチル基、メ卜キシメチル ¾、塩素原子、フヅ素原子、臭素原子、 3ゥ素原子、一卜 D基などで置換されていてよいァリ —ル基、メチル基、ェチル基、ィソプ口ピル基、メ卜キシ基、卜 U フルォロメチル基、メ卜キシメチル基、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、 3ゥ素原子、 ― P基などで置換されていてもよいァラルキル基を示すか、又は R³及び R⁴は一緒になつてそれらが結合する環状構造となるプロピレン基、ブチレン基、ぺンチレン基を示し、 R⁵はべンジル基、 p-メトキシベンジル基、 P-二卜口べンジル基、 p-メ卜キシメチルォキシベンジル基、 p-ベンジルォキシベンジル基、 3, 4-ジメ卜キシベンジル基、ジフエニルメチル基、ジ（p -ニトロフエニル）メチル基を示し、 Mは L MgCl MgBr Mglを示し、 Zは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子を示す。）化合物（IVa) から化合物（V ) への工程では、ヨウ化銅（I) 、臭化銅（ I ) 、塩化銅（ I ) 又はフッ化ホウ素のジェチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジォキサン、トルエン、キシレン、へキサン、シクロべキサン等の不活性溶媒又はそれらの混合溶媒中、 — 78 0°C、好ましくは一 50 ― 10°Cで、化合物（IVa) に対して 1 6当量のアルキルリチウム試薬又は Grignard試薬を加え、同温度で 1 5 時間攪拌し、その中に化合物（IVa) を加え、更に 1 5時間攪拌することにより、目的とする化合物（Via) が得られる。また、化合から化合物 (VIb) へのェ程では化合物（IVb) をジェチルエーテル、ジメ卜キシェ夕ン、テ卜ラヒドロフラン、ジォキサン、トルェン、キシレン、酢酸ェチル、ク □口ホルム、ジクロロメタン、メ夕ノール、水、エタノール、ィソプ □ ピルアルコール等の不活性溶媒又はそれらの混合溶媒中、必要に応じて酢酸ナトリウム

、酢酸力リウム、炭酸ナ卜リゥム、灰酸水素ナ卜リゥム等の塩基存在下、ヒドラジン又は卜シルヒドランンと ,ヽに 30 150°Cで攪拌する力、、或いは Pd- (：、 Pd -Pb、 Pd- BaSO 4 、 Pt0₂等の存在下、室温で水素添加することにより、化合物（VIb) を化合物（IVb) へ変換することができる。

本反応により得られた化合物は、そのまま次工程の原料として用いることもできる力必要に応じて一般に用いられる精製方法、例えば再結晶やカラ Aクロマトグラフィーにより精製してから利用してもよい。

工程 2 ：

工程 1で得られた化合物（Via) から化合物（Vila) 又は（VI lb ) へ変換することができる。また、工程 1で得られた化合物（VIb ) 又は（IVc) から化合物（VIIc) へ変換することができる。

(Via)

(Vlla) (Vllb)

(式中、 x及び R⁵は前記定義の通りであり、 R⁵及び R⁶は同一又は異なっていてもよく、水素原子、メチル基、 iチル基、イソプロピル基、メトキシ基、トリフルォロメチル基、塩素原子、フッ素原子などで置換されていてもよいアルキル基、メチル基、ェチル基、イソプロピル基、メトキシ基、トリフルォロメチル基、メ卜キシメチル基、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ニトロ基などで置換されていてもよいァリール基、メチル基、ェチル基、イソプ口ピル基、メ卜キシ基、卜リフルォロメチル基、メトキシメチル基、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ニトロ基などで置換されていてもよいァラルキル基を示すか、又は R⁵及びはー緒になってそれらが結合する環状構造となるプロピレン基、ブチレン基、ペンチレン基を示し、 A' は— CH₂ —又は— CH = CHCH₂ —を示す。

) 化合物（Via) を塩化メチレン、 1, 2—ジクロロェタン、クロロホルム、四塩化炭素、ァセト ―卜リル、ジェチルェ ― 丁ル、テ卜ラヒド□フラン、ジォキサン、ベンゼン、トルエン、キシレン、酢酸ェチル等の不活性溶媒中、トェチルァミン、ジィソプ口ピルェチル了ミン、ピリジン、炭酸ナ卜リゥム、炭酸水素ナ卜ゥム、炭酸力リウム、炭酸水素カリウム等の塩基の存在下、一 20〜 100°C、好ましくは - 10〜80°Cで、：！〜 5当量の塩化メタンスルホニル、メタンスルホン酸無水物、塩化工タンスルホニル、塩化 1-プ口ノンスルホニル、塩化 1 -ブタンスルホ ―ル、塩化トリフルォ □メ夕ンスルホニル、塩化ひ -トルエンスルホニル、塩化ベンゼンスルホニル、塩化 p -トルエンスルホニル、 P-トルエンスルホン酸無水物、塩化 4-メ卜キシベンゼンスルホニル、塩化 4-クロ口ベンゼンスルホニル、塩化 2-二ト口ベンゼンスルホニル、塩化 3-二ト口ベンゼンスルホニル、塩化 4-ニトロベンゼンスルホニル等のスルホニル化剤と、例えば 1 時間〜 72時間反応させ、常法により脱ァセタール化する。脱ァセ夕ールの条件は、「Protective Groups In Organic Synthesisj (Jo hn Wiley & Sons社）等に記載の多彩な方法を用いることができる

。例えば、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸、トリフルォロ酢酸、メタンスルホン酸、卜りフルォロメ夕ンスルホン酸等の無機酸又は有機酸とメ夕ノ一ル、エタノール、 2—プロパノール、ジォキサン、塩化メチレン、 1, 2-ジクロロェタン、クロ口ホルム、四塩化炭素、ベンゼン、トルェン、キシレン等の不活性溶媒の混合液中、一 10〜 100°C

、好まし <は 0〜50°Cで、攪拌することにより、目的物を得ることができる続いて得られた化合物を、ァセトニトリル、ジェチルェ一テル、テトラヒドロフラン、ジォキサン、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド等の不活性溶媒中、 1〜 50当量のアジ化ナトリウム、アジ化リチウムと 0〜 20 Ot：、好ましくは 20〜 120^aCで反応させる。この際、必要に応じてト " リエチルァミン、ジイソプロピルェチルァミン、ピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム · 等の塩基を添加してもよい。得られた化合物をァセ夕 ,ル化することにより化合物（Vila) が得られる。ァセタールの条件は、「Prot ective Groups In Organic Synthesisj (John Wiley & Sons社）等に記載の多彩な方法を用いることができる。即ち、化合物を有機酸又は無機酸の存¾下、無溶媒条件下、ジェチルェ一テル、ジォキサン、ベンゼン、トルエン、キシレン等の不活性溶媒中、ァセ夕ル化試薬と 0〜 200°C、好ましくは 20〜 120°Cで、反応させることにより、目的とする化合物（ Vila) を ί旦

寸るとができるの際、ァセタール化試薬としては、アセトン、 2, 2-ジメ卜キシプ □ ン、 2- メ卜キシプロべノ、 2-ェ卜キシプ□ぺン、ベンズァル了ヒ F 、ベンズアルデヒドジメチルァセタール、シク Dへキサノン、シク □へキサノンジメチルァセタール、シクロぺン夕ノン、シク □ぺノ夕ノンジメチルァセタル等を用いることがでさる。ま 7こァシ化後に得られた化合物について一級水酸基を卜 Uチル化、続いて他の二級水酸基をァリ一ルメチル化した後、脱卜 Uチル化するとにより、化合物 (Vllb) を得ることができる卜 Uチル化の条件としては例えば、 0.8- 2当量の臭化トリチル又は塩化卜リチルを、ジェチルェテル、テ卜ラヒフドロフランンォキサン、ベンゼン、卜ルェノ、キシレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の不活性溶媒中、炭酸リチウム、炭酸力リウム炭酸ナ卜リウム、酸水素ナ卜 U ゥム、炭酸水素力リウム、水酸化リチゥム、水酸化ナ卜 'J ゥム、水酸化力リウム、水素化ナ卜リウム、水素化カリゥム、ナ卜リゥム、力リウム、卜リエチルァ ^ ノ、シィソプ口ピルェチルァミン、ピリジン、ルチジン等の塩基存在下 - 50 〜 120C 好ましくは一 20〜 80°Cで反応させる条件が挙げられる。また、ァリールメチル化剤としては、塩化ベンジル、臭化ベンジル、 P-メトキシべンジルクロリド、 m-メトキシベンジルクロリド、 P-ニトロベンジルクロリド、 P-ニトロベンジルブロミド等が挙げられ、ァリールメチル化の反応条件としては上記のトリチル化の条件を用いることができる。また、脱トリチル化の条件としては、「Protect ive Groups In Organic Synthesis」 Uohn Wiley & Sons社）等に記載の多彩，な方法を用いることができ、例えば、無溶媒条件下、又は塩化メチレン、クロ口ホルム、 1, 2-ジクロロェタン、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジォキサン、水、メタノール、エタノール、 2-プロパノ —ル、 tert-ブ夕ノール等の溶媒中、ギ酸、酢酸、トリフルォロ酢酸、塩酸、硫酸、硝酸等の酸又は硫酸銅 ( II) の存在下、一 50°C〜

150°C、好ましくは— 20°C〜 100°C.で反，心させる条件が挙げられ'る.。

' 本反応により得られる化合物は、そのまま次ェ程の原料として用いることもできる力必要に応じて一に用いられる精製方法、例えば再結晶やカラムクロマトグラフィ一により精製してから禾 ϋ用してもよい。

工程 3 ：

工程 2で得られた化合物（Vila) 、 (Vllb) 、 (VIIc) のアジド基をァミノ基に還元した後、アミド基に変換することにより、化合物（Villa) 、（VI lib) 、（VI lie) を得ることができる。

(Villa)

(Vlllb)

(式中、 R²、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 x、 y及び A' は前記定義の通りである。

) , .

' 先ず、化合物（Vila) 、 (Vllb) 又は（VIIc) を、亜鉛 Z塩酸、水素化リチウムアルミニウム等の金属試薬やトリフエニルホスフィン、トリメチルホスフィン、卜リエチルホズフィン、トリプチルホスフイン等の卜リアリールフォスフィン或いは卜リアルキルフォスフィンで処理するか、或いは Pd- (：、 Pd-CaC0₃-Pb, Pd- BaS0₄、 Pt0₂ 等の存在下、室温で水素添加することにより、アジド基をァミノ基に選択的に還元し、続いてカルボン酸とのアミド化反応により、化合物（Villa) 、 (Vlllb) 又は（VIIIc) に誘導することができる。アミド化反応は、「 Compend i urn for Organic Synthesisj (Wile y- Intersc ience； A Division of John Wiely & Sons社）等に記載の多様な方法を利用することができる。一例を挙げれば、アミン体を塩化メチレン、クロ口ホルム、 1, 2 -ジクロロェタン、ジェチルェ一テル、テ卜ラヒフドロフラン、ジォキサン、ァセトニ卜リル、ベンゼン、トルエン、キシレン、ジメチルホルムアミド等の不活性溶媒中、カルボン酸の活性化剤存在下、 - 50°C〜 120°C、好ましくは- 2 0°C〜80°Cで、対応するカルボン酸と反応させることにより、目的とする化合物（Villa) 、 (VHIb) 又は（VIIIc) が得られる。力ルボン酸の活性化試薬としては、四塩化ケィ素、無水酢酸、塩化ァセチル、クロル炭酸ェチル、ヨウ化 2-ョード -卜メチルピリジニゥム、ヨウ化 2-クロ口-卜メチルピリジニゥム、ジフエニルホスフィニルクロライド、 N, N ' -ジシクロへキシルカルポジイミド（ DCC) 、 N-ヒドロキシベンゾ卜リアゾ一ル /DCC、塩酸卜ェチル -3- (3-ジェチルァミノプロピル）カルポジイミド、エトキシアセチレン、トリメチルシリルェ卜キシアセチレン、カルポジィミダゾール、ジフェニルホスホリルアジド、ジェチルホスホリルシアニデート等が挙げられる。また、必要に応じて P-トルエンスルホン酸、ポリリン酸等の酸又は卜リエチルァミン、ジイソプロピルェチルァミン、 N-メチルモルホリン、ピリジン、 2, 6-ルチジン等の塩基を加えても良い本反応により得られる化合物は、そのま次工程の原料として用いることもできるが、必要に応じて一般に用いられる精製方法、例えば再結晶やカラムクロマ卜グラフィ一により精製してから利用してもよい。

工程 4 ：

工程 2で得られた化合物（Vila) 、 (Vllb) 又は（VIIc) と化合物（IX) とのグリコシデ一シヨン反応により、化合物（Xa) 、 (Xb ) 又は（Xc) を得ることができる。

(Vllc)

(式中、 R²、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 x及び A' は前記定義の通りであり、 R⁸は水酸基ゃァミノ基が保護されたアルドビラノース残基を示し、 Lは塩素原子、臭素原子、フッ素原子又はヨウ素原子を示す。）

化合物（（Vila) 、 (Vllb) 又は（VIIc) を、へキサン、シクロへキサン、塩化メチレン、クロ口ホルム、 1, 2-ジクロロェタン、ェ一テル、テ卜ラヒフドロフラン、ァセ卜二トリル、ベンゼン、トルェン、キシレン、ジォキサン、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン等の不活性溶媒又はそれらの混合溶媒中、三フッ化ホウ素、過塩素酸銀、塩化スズ（II) 、四塩化チタン、四塩化スズ等の Lewis 酸の存在下、或いはテ卜ラ n-プチルアンモニゥム等のハロゲン化ァンモニゥム塩存在下、例えば— 100°C〜50°C、好ましくは— 78°C〜3 0°Cで、化合物（IX) と反応させることにより、化合物（Xa) 、（X b) 又は（Xc) を得ることができる。本反応に用いる Lew is酸ゃハロゲン化アンモニゥム塩は、単独又は複数の組み合わせでもよく、また、その際に必要に応じてモレキュラーシ一ブスを添加してもよいまた、 R^sとなる水酸基ゃァミノ基が保護されたアルドビラノース残基としては、 2, 3, 4, 6-テトラ- 0-ベンジル- D -ダルコシル、 2, 3, 4, 6 -テトラ- 0-ベンジル- D-ガラクトシル、 2, 3, 4, 6-テ卜ラ- 0-ベンジル- D-マンノシル、 3, 4, 6-トリ -0-ベンジル- 2-デォキシ- 2-デォキシ- 2- ( tert-ブ卜キシカルボニルァミノ） - D-ガラクトシル、 3, 4, 6-卜リ - 0-ベンジル -2-デォキシ- 2-ァセチルァミノ - D-ガラクトシル、 2, 3, 4, 6-テトラ- 0-ベンジル- D -ァロビラノシル、 2, 3, 4, 6-テ卜ラ - 0-ベンジル- /3 - D-アルトロピラノシル、 2, 3, 4, 6-テトラ -0-ベンジル- )3 -D-イドシル、 3, 4, 6-トリ - 0-ベンジル- 2-デォキシ -2- (ジベンジルァミノ） - D-ガラクトシル等が挙げられる。

本反応により得られた化合物（Xa) 、 (Xb) 又は（Xc) は、そのまま次工程の原料として用いることもできる力必要に応じて一般に用いられる精製方法、例えば再結晶や力ラムクロマトグラフィーにより精製してから利用してもよい。

工程。：

工程 4で得られた化合物（Xa) 、 (Xb) 又は（Xc) のアジド基をァミノ基に還元した後、アミド基に変換することにより、化合物（ XI a) 、 (Xlb) 又は（XIc) を得ることができる。また、工程 3で得られた化合物（Villa) 、 (Vlllb) 又は '（VIIIc) と化合物（IX ) とのグリコシデーシヨン反応により、化合物（XIa) 、 (Xlb) 又は（XIc) 'を得ることができる。

(Xa) or (Xb)

(Villa) or (Vlllb)

(Vlllc)

(式中、 R² 、 R⁵ 、 R⁶ 、 R⁷ 、 R⁸ 、 x、 y及び A' は前記定義の通りである。）

化合物（Xa) 、 (Xb) 又は Uc) から化合物（XIa) 、 (Xlb) 又は（Xlc) への変換は、工程 3 と同様の方法'により行うことができる。また、化合物（Villa) 、 (VHIb) 又は（VIIIc) から、化合物（XIa) 、 (Xlb) 又は（Xlc) への変換は、工程 4 と同様の方法により行うことができる。

本反応により得られた化合物は、そのまま次工程に用いることもできるが、必要に応じて一般に用いられる精製方法、例えば再結晶やカラムクロマトグラフィーにより精製してから利用してもよい。

工程 6 ：

工程 5で得られた化合物（XIa) を脱ァセタール化及び脱ァリールメチル化することにより、或いは化合物（Xlb) 又は（Xlc) を脱ァリールメチル化することにより、化合物（I) を得ることができる。 HN- CH₃

脱保護

(Xla), (Xlb)or (Xlc) R¹-0-CH,—— C- CH₃

(式中、式中、 R¹ 、 R²、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 R^s、 x、 y、 A及び A は刖 sd定義の通りである。）

脱ァセ夕'ール化及び脱ァリールメチル化の条件として

ective Groups In Organic Synthesisj (John W i 1 ey & Sons社 ) 等に記載の多彩な方法を用いることができる。例えば、. 脱ァセタール化の条件どしては、工程 2の中で示した方法にり、実施可能である。また、脱ァリールメチル化の条件としては、メ夕ノール、ェ夕ノール、 2_プロパノール、酢酸ェチル、テトラヒド□フラン、ジメチルホルムアミド等の反応に関与しない溶媒中、 Pd- C 、 Pd (OH) ₂

、 Pt0₂等の存在下、 4-メチルシクロへキセンを加えて加熱還流するか、或いは室温で水素添加する条件が挙げれる

本反応により得られた化合物は、必要に応じて一般に用いられる

〇精製方法、例えば再結晶やカラムクロマトグラフィ一により精製することができる。

本発明の式（I) で表される化合物は、それ自体単独で投与しても良いが、所望により他の通常の薬理学的に許容される公知慣用の担体と共に、慢性炎症性疾患、アレルギー疾患或いは NKT細胞或いは NKT細胞への刺激が病態悪化に関与することが知られている疾患、に起因する症状の改善、治療を目的とする製剤に調整することができる。例えば有効成分を単独又は慣用の賦形剤と共にカプセル剤、錠剤、注射剤等の適宜な剤形として、経口的又は非経口的に投与することができる。例えば、カプセル剤は、粉末状の原体を乳糖、澱粉又はその誘体、セルローフ ^ an辱、体等の賦形剤と混合してゼラチン力プセルにき土

口 P)めて e周整するた、上記賦形剤の他にカルボキシメチルセル口 ―スナ卜リウム、ァルギン酸、ァラビァゴム等.の結合剤と水を加えて混練し、必要によ Ό顆粒とした後、更にタルク、ステアリン酸等の潤滑剤を添加して通常の圧縮打錠機を用いて調整する。注射による非経 Π投与に際しては、有効成分を溶解補助剤と共に滅菌蒸留水又は滅菌生埋食塩水に溶解し、アンプルに封入して注射製剤とする必要により安定化剤、緩衝物質を含有させても良い。

本発明の医薬は、慢性炎症性疾患、アレルギー疾患又は NKT細胞もしくは NKT細胞への刺激が病態悪化に関与することが知られている疾患に起因する症状の改善、治療に用いることができる力、その場合の改善薬、治療薬の投与量は、種々の要因、例えば治療すべき患者の症状、年齢、投与経路、剤形、投与回数等に依存するが、通常、 0. 00 1 mg〜 5000mgZ日人、好ましくは 0. 0 l mg〜 500^ノ日人、より好ましくは 0. l mg〜 l OOnigZ日 Z人、適当である。実施例

以下、参考例及び実施例に基づいて、本発明を更に具体的に説明する力本発明の範囲をこれらの実施例に限定するものでないことはいうまでもない。

参考例 1 ： 1 , 3-0-ベンジリデン- D-ァラビトール（化合物 1 ) の合

D-ァラビトール（ 300g, 1. 97mo l ) とべンズアルデヒド（26 1 g, 2 . 46mo l ) を混合し、塩化水素ガスを 50分間吹き込み、アルゴン気流下で攪拌した。そのまま一晩放置後、得られた固体を粉砕し、 5¾ァンモニァ水溶液（ 900m l ) 及びトルエン（ 600m l ) を加えて 1時間攪拌した。得られた結晶を濾取後、冷水（ 600ml) 、トルエン（ 600ml X2) の順に洗浄し、減圧下乾燥することにより、表題化合物 295g (収率 62.4%) を得た。

nip 130- 131° C; ¹ H-NMR (CD₃0D) δ ： 7.51-7.30 (m, 5H)， 5.58 (s, 1H) , 4. 18 (d, 1H, J = 12Hz) , 4. 11 (d, 1H, J = 12Hz) , 3.87-3. 28 (in, 5H)； HRMS-FAB (m/z)： [M + H] +

計算値 C_{l 2}H_{l 7}0₅, 241. 1076; 実測値 241. 1086。

参考例 2 ： 1, 3-0-ベンジリデン- 5-0-トルエンスルホニル- D-ァラビトール（化合物 2 ) の合成

アルゴン気流下、参考例 1 で合成した化合物 1 (30g, 125mmol) の塩化メチレン（ 240ml) 溶液に 0〜5°Cで、ジ -π -プチルスズォキシド（ 623mg, 2.50mmol) 、 p-トルエンスルホニルクロリド（23.8g， 125mniol) 及び卜リエチルァミン（12.9g, 127mmol) を添加した。室温で 20時間攪拌後、有機層を水洗（ 100ffll x3) し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を濃縮して得られた残渣をカラムクロマ卜グラフィー（塩化メチレン：メタノール =40 ： ί) で精製し、粗結晶を得た。最後に粗結晶を再結晶（η-へキサン：酢酸ェチル = 1 ： 1) して、標題化合物 39.7g (収率 80.8%) を得た。

¹ H-NMR (DMS0- d₆) o ： 7.73 (d, 2H, J = 8.2Hz) , 7.37-7.24 (m, 7H) , 5.43 (s, 1H) , 5.34 (d, 1H, J = 6. 1Hz) , 4.77 (d, 1H, J = 6.5 Hz) , 4. 11 (dd, 1H, J = 9.8, 1.9Hz) , 4.04-3.85 (m, 4H) , 3.71 (d , 1H, J = 9.2Hz) , 3.59 (d, 1H, J = 5.7Hz) , 2.32 (s, 3H)；

¹³C-NMR (CDC1₃) d ： 145. 1, 137.3, 132.5, 129.9, 129. 1, 128 .2, 128.0, 125.8, 101.0, 77.9, 72.4, 70.9, 67.6, 62.7, 21.6; MS-ESI (m/z)： 395 [M + H] + ; HRMS-FAB (m/z)： [M+H] ⁺ 計算値 C_{l 9} H₂₃0₇ S, 395. 1164; 実測値 395. 1189。

参考例 3丄 A 5——アンハイドロー 1 J— 0—ベンジリデン— D—ァラビドール（化合物 3 ) の合成

アルゴン気流下、参考例 2で合成した化合物 2 (30g, 76mmol) の無水テトラヒドロフラン（191ml) 溶液を氷冷し、その中に〜 5 °Cの温度を保ちながらカリウム-卜ブトキシド（9. llg, 81.2mmol) を 20分間かけて添加した。同温度で 1.5時間攪拌後、氷冷下、水（7 6ml) を加えて 1Mの塩酸で中和（pH=7.5) し、塩化メチレン（76ml X 3) で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を濃縮して得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノ一ル = 50 : 1) で精製し、粗結晶を得た。最後に粗結晶に n -へキサン（90ml) を加えて室温で 30分間攪拌することにより、標題化合物 15.9g (収率 94% ) を得た。 '

¹ H-NMR (CDC1₃) δ 7.52-7.34 (m, 5H) , 5.57 (s, 1H) , 4.25 ( dd, 1H, 12, 1. $Hz) , 4.08 (dd, 1H, J = 12, 1.2Hz) , 3.78-3,.75 (in, 2H), 3.35-3.31 (m, 1H), 2.93-2.84 (ui, 3H)； ^{l 3}C-瞧 (CDC1 ₃) δ ： 137.4, 129.3, 128.4, 126.0, 101. , .79.7, 72.3, 64.4, 50.8, 45.9; MS-ESI (m/z)： 223 [Μ+ΗΓ ; HRMS-FAB (m/z)： [M + H] ⁺ 計算値 C_{l 2}H_{l 5}0₄, 223.0971; 実測値 223.0895。

実施例 1 ： 1 , 3— 0—ベンジリデン一 D—ァラビノー 1 , 2, 3, 4— ドコサンテトラオール（化合物 4 ) の合成

ヨウ化銅（I) (3.2g, 16. δπιπιοΐ)の脱水テトラハイドロフラン（210 ml)懸濁液に、 1.58M 臭化 n—へプ夕デカイルマグネシウム（67mmol in テトラハイド口フラン溶液）を一 40°Cで滴下し、 - 15°Cで 30分間攪拌した。次いで、参考例 3で合成した化合物 3 (5g, 22.5mmol ) の脱水テトラハイドロフラン（100m 1 ) 溶液を _ 20°Cで滴下し、同温度で 4.5時間攪拌後、室温にて終夜攪拌した。反応混合液に飽和塩化アンモニゥム水溶液を加え、生成物を酢酸ェチルで抽出、有機層を飽和食塩水にて洗浄、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過後、減圧'濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー

(クロ口ホルム：酢酸ェチル =2： 1〜 1 ： 2) にて精製することにより、表題化合物 3.75g (収率 36 ) を得た。白色粉末； ' H-NMR (CDC1 ₃) d： 7.53 (d, 2H) , 7.39 (m, 3H) , 5.60 (s, 1H) , 4.28 (dd, 1H ) , .05 (d, 1H) , 4.00-3.80 (m, 2H) , 3.27 (d, 1H) , 2.39 (d, 1

H) , 1.85-1.20 (DI. 34H) , 0.89 (t, 3H)。

実施例 2 ； 1, 3— 0—べンジリデン— 2— 0—メタンスルホ二ルー D— ァラビノー 1, 2.3, 4_ ドコサンテトラオール（化合物 5 ) の合成

実施例 1で合成した化合物 4 (lg, 2.2DIDIO1) の脱水ピリジン（30m

I)及び脱水テトラ八イド口フラン（20ml) の溶液に、 _5°Cで塩化メタンスルホニル（0.38g, 3.3mmol)を徐々に滴下した。同温度で 18 時間攪拌後、反応混合物に 5m 1のメタノールを滴下して過剰の塩化メタンスルホニル,を潰し、室温で終夜攪袢した。反応混合物を減圧下濃縮し、次いでヘプタンを用いて共沸（2回）させた後、' 得られた残渣をクロ口ホルム（ 500ml) に溶解させ、水にて洗浄（2回）した。有機層を分取し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：酢酸ェチル = 10： 1) にて精製することにより、表題化合物 780mg (収率 66.7%) を得た。白色粉末；，'H- NMR (CDC1₃) o ： 7. 49 (d, 2H) , 7.37 (m, 3Η) , 5.59 (s, 1Η) , 4.99 (m, 1H) , 4.52 ( dd, 1H) , 4.16 (d, 1H) , 3.90-3.70 (m, 2H) , 3.19 (s, 3H) , 2.78

(d, 1H 1.90-1.20 (m, 34H), 0.88 (t, 3H)。

実施例 3 ： 2— 0—メタンスルホニル— D— リボー 1, 3, 4 _ ドコサン卜リオール（化合物 6 ) の合成

実施例 2で合成した化合物 2 (10g, 18.5mmol)のメタノール（11 0ml) , クロ口ホルム（180ml) 及び脱水テトラハイド口フラン（150 ml) の混合溶液に、 20%Pd(OH)₂/C U.7g)を加え、常圧下、 45°C で'水素添加を行った。反応終了後、クロ口ホルム（20,0ml) を加え、触媒をろ過して除き、ろ液を減圧濃縮することにより、表題化合物 8.27g (収率 98.8%) を得た。白色粉末； ¹ H- NMR (DMS0-d6) δ ： 4. 73 (t, 1H) , 3.64 (m, 2Η) , 3.38 (m, 2Η) , 3.16 (s, 3Η) , 1.75-1 .15 (m, 34Η) , 0.86 (t, 3Η)。

実施例 4 ： 2 _アジドー D— リポ— 1, 2.3, 4— ドコサントリオール（化合物 7 ) の合成

実施例 3,で合成した化合物 6 (8.26g, 18.24mmol)の脱水ジメチルホルムアミド（150ml)溶液に、アジ化ナトリウム（2.37g, 36.41mm ol)を加え、 95°Cで 5時間攪拌し、その後、室温で終夜攪拌した。反応混合物に水（1L) を加え、酢酸ェチル（2L) で抽出した。硫酸.ナトリウムにて乾燥、濾過後、減圧濃縮して得られた粗結晶をシリカゲルカラムクロマ，トグラフィ一（n—へキサン：酢酸ェチル =3： 2 ) にて精製する,ことにより、表題化合物 5.33g (収率 70 ) を得た。淡褐色固体； ¹ H - NMR (DMS0-d6) ό： 4.99 (d, 1H) , 4.87 (t, 1Η) , 4.51 (m, 1H) , 3.80-3.70 (m, 1H), 3.65-3.45 (m, 2H) , 1.65-1.1 5 (DI, 34H) , 0.85 (t, 3H)。

実施例 5 ： 2—アジドー 3, 4— 0—イソプロピリデン _ D— リボー 1 , 3, 4ードコサントリオール（化合物 8 ) の合成

実施例 4で合成した化合物 7 (7.19g, 18mmol)のアセトン（ 150m 1 )溶液に、濃硫酸（0. lg)を加え、室温で 3時間攪袢した。反応終了後、トリェチルァミン（3.64g, 36mmol) を加え室温で 1時間攪拌し、次いで反応混合物に水（ 800ml) を加え、酢酸ェチル（ 800ml) 及びトルエン（ 400ml) で抽出した。硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過後、減圧濃縮して得られた粗結晶をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィー（n—へキサン：酢酸ェチル =8 : 1〜 6 : 1) にて精製することにより、表題化合物 44.04g (収率 50.5%) を得た。白色粉末； ¹ H- NM R (CDCI3) 0 ： 4. 17 (m, 1H) , 4.05-3.91 (m, 2H) , 3.86 (m, 1H), 346 (m, 1H) , 2. 11 (m, 1H) , 1.65-1. 15 (m, 34H) , 1. 3 (s, 3H) ,

1.34 (s, 3H) , 0.88 (t, 3Hに

実施例 6 ： 2 _アジドー 1 _ 0— （2, 3, 4, 6—テトラー 0—ベンジル一 α 一 D—ガラク卜ピラノシル）一 3, 4— 0—イソプロピリデン一 D— リボ — 1, 3, 4— ドコサントリオール（化合物 9 ) の合成

乾燥させたモレキュラーシ一ブス A, 粉末）（250mg)に、実施例 5で合成した化合物 8 (lOlmg, 0.23mmol) 及び臭化 2, 3, 4, 6-テトラ- 0-ベンジルーひ一 D—ガラクトピラノシル（ 280mg, 0.46mmol ) のトルエン（4.5ml) 及びジメチルホルムアミド（4.5ml)の溶液を加え、次いで臭化テ卜ラ n-プチルアンモニゥム（218mg, 0.68mmol) を加えて 4日間攪拌した。反応混合物に酢酸ェチル（ 200ml) を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び水にて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（π—へキサン：酢酸ェチル = 25 : 1 ~8 ： 1) にて精製することにより、表題化合物 107mg (収率 48%) を得た。 'H-NMR (CDC1₃) δ ： 7.39-7.23 (m, 20H) , 4.96-4.92 (m, 2H ), 4.85 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.80 (d, 1H, 12Hz), 4.73-4.68 (m,

2H) , 4.57 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.48 (d, 1H, J=12Hz) , 4.40 (d, 1 H, Hz), 4. 12-3.91 (m, 7H) , 3.72 (dd, 1H, 10.8, 6.6Hz) ,

3.54-3.44 (m, 3H) , 1.59- 1.20 (m, 40H) , 0.88 (t, 3H, 〗 = 6.8Hz )； MS- ESI (m/z) ： 985 (M + Na)。

実施例 7 ： 2—アミノー 1一 0— (2, 3.4, 6—テトラー 0—ベンジル一ひ一 D—ガラクトビラノシル）一 3, 4— 0—イソプロピリデン一 D— リボ — 1, 3, 4— ドコサントリオール（化合物 1 0 ) の合成

実施例 6で合成した化合物 9 (87mg, 0.09mmol)のエタノール（9m い及び塩化メチレン（3ml) の溶液に、パラジウム—炭酸カルシゥム（鉛被毒化済）（リンドラ一触媒）（280mg)を加え、常圧、室温で終夜攪拌する事により水素添加した。触媒を濾去、濾液を減圧濃縮し、表題化合物 80mg (収率 94 ) を得た。 UMR (CDCI₃) δ ： 7.3 9-7. 13 (m, 20H) , 4.95-4.92 (m, 2Η) , 4.83-4.78 (m, 2Η) , 4.74 (d, 1Η, J = 12Hz) , 4.68 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.47 (d, 1H, = 12Hz), 4.40 (d, 1H, J = 12Hz) , 4. 11-4.04 (m, 2H) , 3.99-3.91 (m, 4H) , 3.87 (dd, 1H, J = 9.0, 5.5Hz) , 3.55-3.52 (m, 2H) , 3.39 (dd, 1

H, J = 10.2, 7.6Hz) , 3.07-3.02 (m, 1H), 1.53- 1.20 (m, 40H) , 0. 88 (t, 3H, J = 6.8Hz)； MS - ESI (m/z)： 937 (M + H)。

実施例 8 ： 2_へキサコサノィルァミノ — 1一 0— （2, 3, 4, 6—テトラ一 0—ベンジルーひ一 D—ガラクトピラノシル）一 3.4— 0—イソプロピリデン _ D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール（化合物 1 1 ) の合成 ,

実施例 7で合成した化合物 1 0 (560mg, 0.6mmol)、 n— へキサコサン酸（270mg, 0.69關0 、及び 1 ーヒドロキシァザべンゾ卜リアゾール（12mg, 0.087mmol)のジメチルホルムアミド（45ml)及び塩化メチレン（25ml)の混合懸濁液に、氷冷下、卜リエチルァミン（0.2m

I、 1.4mmol) 、 1 —ェチルー 3— (3—ジメチルァミノプロピル）カルポジイミド塩酸塩（210mg, 1. lmmol)を加え、室温で 5日間攪拌した

。反応混合物を酢酸ェチル（ 1.5L) で希釈後、飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液、水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（n—へキサン：酢酸ェチル = 4 : 1) にて精製することにより、表題化合物 340mg (収率 43%) を得た。白色粉末； ¹ H- NMR (CDC1₃) δ ： 7.41-7.23 (m, 20H), 6.27 (d, 1H, J = 8.7Hz) , 4.92 (d, 1H, 12Hz) , 4.90 (d, 1H, J = 3.7Hz) , 4.83-4.78 (m, 2H) , 4.75 (d, 1H , J = 12Hz) , 4.66 (d, 1H, J =l 1Hz) , 4.58 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.49 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.37 (d, 1H, J = 12Hz)， 4. 12-4.02 (m, 4H) , 3. 98 (t, 1H, J = 6.2Hz) , 3.93-3.88 (m, 3H) , 3.62-3.52 (m, 2H) , 3 .36 (dd, 1H, J = 9.4, 5.5Hz)； 2.08- 1.96 (m, 2H) , 1.54- 1.39 (m,

7H) , 1.31-1.22 (m, 79H) , 0.90-0.86 (m, 6H)； MS-ESI (m/z)： 1 338 (M+Na)。 '

実施例 9 ： 2—へキサコサノィルァミノ — 1一 0— （2.3.4, 6—テトラ一 0—ベンジル一ひ一 D—ガラク卜ピラノシル）一 D— リボー 1, 3, 4— ドコサントリオール（化合物 1 2 ) の合成

実施例 8で合成した化合物 1 1 (53mg, 0.04mmol>のメタノール（ 1.5ml) /塩化メチレン（6ml) Z4N塩酸一ジォキサン（120 /い混合溶液を室温で 2時間攪拌後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル = 2 : 1) にて精製することにより、. 表題化合物 35mg (収率 68%) を得た。白粉、末； ¹ H-NMR (CDC1₃)™： 7.40-7.25 (m, 20H) , 6.38 (d, J = 8.4 Hz) , 4.93-4.-87 (in, 2Η) , 4.84 (d, 1H, J = 3.8Hz) , 4.79-4.73 (m,

2H), 4.67 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.56 (d, 1H, J = 11Hz) , .4.47 (d, 1 H, J = 12Hz) , 4.38 (d, 1H, J = 12Hz) , 4.21-4. 18 (m, 1H) , 4.04 (d d, 1H, J = 10, 3.8Hz), 3.97 (d, 1H, J = l.9Hz) , 3.89-3.84 (m, 4H ) , 3.81 (d, 1H, J = 8.3Hz) , 3.51-3.43 (m, 4H) , 2. 13-2. 10 (m, 3 H) ， 1.62- 1.54 (m, 4H) , 1.46- 1.25 (m, 76H) , 0.90-0.86 (m, 6H) ； MS-ESI (m/z) ： 1275 (M+H)。

実施例 1 0 ： 2—へキサコサノィルァミノ一 1一 0— ひ一 D—ガラクトビラノシルー D— リボー 1 , 3, 4— ドコサントリオ一ル（化合物 1 3 ) の合成

実施例 9で合成した化合物 1 2 (325mg, 0.255mmo 1)のメタノール（70ml) Z塩化メチレン（40ml)の混合溶液に、水酸化パラジウム（1 50mg)を加え、常圧、室温で 4時間攪拌する事により水素添加した。触媒を濾去、濾液を減圧濃縮し、表題化合物 206mg (収率 88%) を得た。白色粉末（エタノールより再結晶）： Rf値（TLC) =0.22 (ク口口ホルム：メタノール = 7 ： 1 ) ； ¹ H-NMR (py-d5) d ： 8.50 (d, 1H, J = 8.8Hz) , 6.98 (brs, 1H) , 6.64 (brs, 1H) , 6.56 (brs, 1H) , 6.46 (brs, 1H) , 6.34 (brs, 1H) , 6. 10 (brs, 1H) , 5.60 (d， 1 H, J = 3.8Hz) , 5.32-5.25 (m, 1H) , 4.71-4.67 (m, 2H) , 4.57-4.51 (m, 2H) , 4.44-4.33 (m, 6H) , 2.45 (t, 2H, J = 7.4Hz) , 2.35-2.2 5 (m, 1H) ,. 2.00- 1.62 (m. 5H) , 1.50-1. 18 (m, 74H) ₍ 0.90-0.85 (m, 6H) ； MS- ESI (m/z) ： 915 (M + H) ; MS-MALDI (m/z) ： [M+Na] ⁺ 計算値 C H ! NOS · Na, 937.418 ；実測値 937.09。

K/BxN血清移入関節炎における合成糖脂質の抑制効果

(A) C57BL/6Jマウス（ 8週令、雌）の腹腔に K/BxN血清 150 1 を投与し、関節炎を誘導した。関節炎スコアは観察により以下の様に判定した。

関節炎スコアは、 0 : 症状なし、 1 ：四肢の指など小関節力本のみ腫脹発赤、 2 : 小関節 2本以上、あるいは手首や足首などの比較的大きな関節が腫脹発赤、 3 ： 1本の手や足全体が腫脹発赤、 4 ： 1本の手や足の全体的腫脹が最大限に達していると判断したときとし、両手、両足の合計を点数とした。

化合物は、 10%DMS0/PBSに溶解し、血清投与当日から週 2回、 ΐ /マウスを腹腔内に投与した。コントロール群には、 l(nDMSO/PBSのみの投与を行った。実験の結果、化合物の投与により関節炎スコアは著明に抑制された（図 1 参照）。

( B) NKT細胞が存在じない J ひ 18遺伝子欠損マウスにおいては、化合物における K/BxN血清移入関節炎の抑制効果はみられな,かつた。このことから、本発明に関わる.化合物の関節炎抑制効果発現には NKT細胞が必須であることがわかった（図 2参照）。

コラーゲン誘導性関節炎における合成糖脂質の抑制効果

DBA 1マゥス ( 8週令、雄）の皮下にゥシタイプ I Iコラーゲンを完全フロイ卜ァンュバン卜とともに投与し、 3週間後に皮下にゥシ夕イブ 1 1コラ ―ゲンを不完全フロイトァンュバントとともに投与し、関節炎を誘導した。関節炎スコアは、観察により、以下の様に判定した。

関節炎スコァは、 0 ：症状なし、 1 四肢の指など小関節力本のみ腫脹発赤、 2 : 小関節 2本以上、あるいは手首や足首などの比較的 '大きな関節が腫脹発赤、 3 ： 1本の手や足全体が腫脹発赤、 4 ： 1本の手や足の全体的腫脹が最大限に達していると判断したときとし、両手、両足の合計を点数とした。

化合物は 10%DMS0/PBSに溶解し、血清投与当日から週 2回、 1 n g/ マウスを腹腔内に投与した。コントロール群には、 10%DMS0/PBSのみの投与を行った。化合物の投与により関節炎スコアは著明に抑制されることがわかった（図 3参照）。

化合物の NKT細胞に与える影響

C57BL/6 Jマウス（ 8週令、雌）肝臓から単核球を分離し、化合物と共に 48時間培養し、上清中のサイトカインを EL I SA法で測定し、細胞増殖反応を卜リチウムサイミジンの取り込みによって測定した。 a - GCは、細胞増殖、 I FN-ァ産生、 I L- 4産生を引きおこしたが、化合物は何れの反応もおこさなかった（図 4参照）。

化合物の前投与により NKT細胞に与える影響 C57BL/6Jマウス（ 8週令、雌）の腹腔に KRN血清 150 1を投与し、関節炎を誘導した。化合物を' 2日おきに 3回、 2/x g/マウスを腹腔に投与した。コン卜ロール群には、 10%DMS0/PBSのみの投与を行つた。最終投与の 2日後に肝臓から単核球を分離し、 a- GCと共に 48時間培養し、上清中のサイト力インを ELISA法で測定し、細胞増殖反応を卜リチウムサイミジンの取り込みによって測定した。化合物の前投与を行った群では、ひ- GCによる細胞増殖、 I FN-ァ産生、 Iい 4. 産生は観察されなかった。このことから、本発明の化合物は、 NKT 細胞の抗原刺激に対する反応を抑制することが明らかとなった（図 5参照）。

気管支喘息モデルにおける肺胞洗浄液中細胞浸潤の抑制（ C57BL6 J マウス）

C57BL6Jマウス（ 8週令、雌）に、 Ovalubumin (OVA) 50 g/マウスを Alum 2.25mg/マウスと混和後、 Day 0'、 Day 7に腹腔内投与を行つた。 Day 18より連日 3 日間、 10 mg/mlの濃度で OVAを吸入させた。化合物は、吸入前に 2 g/マウスを腹腔内投与した。最終吸入日の翌日に、肺胞洗浄をおこない、細胞成分の検討を行った。細胞浸潤は、コントロール群（0VA/DMS0) に比較して、化合物投与群では著しく抑制された。また、喘息に特徴的である好酸球浸潤も著明に抑制された（図 6参照）。

気管支喘息モデルにおける肺胞洗净液中サイ卜力インの抑制（C57B L6Jマウス）

C57BL6Jマウス（ 8週令、雌）に、 OVA 50 g/マウスを A 1 um 2.2 5mg/マウスと混和後、 Day 0、 Day 7に腹腔内投与を行った。 Day 18 より連日 3 日間、 10 mg/mlの濃度で 0VAを吸入させた。化合物は、吸入前に 2^ g/マウスを腹腔内投与した。最終吸入日の翌日に、肺胞洗浄をおこない、肺胞洗浄液中のサイトカインの測定 EL ISA法を用いて行った。コントロール群（0VA/DMS0) に比較して、化合物投与群では IL- 5、 Iい 13ともに著しく抑制された（図 7参照）。

気管支喘息モデルにおける肺病理所見の抑制（C57BL6Jマウス） • C57BL/6マウス（ 8週令、雌）に、 OVA 40 g/マウスを A 1 um 2.2 5mg/マウスと混和後、 Day 0、 Day 7に腹腔内投与を行った。 Day 18 より連日 3 日間、 10 Dig/mlの濃度で OVAを吸入させた。化合物は、吸入前に 2 g/マウスを腹腔内投与した。最終吸入日の翌日に、肺組織を採取し病理学'的解析を行った。コントロール群（0VA/DMS0) に比較して、化合物投与群では、細胞浸潤、 PAS陽性ゴブレット細胞の増殖が優位に抑制された（図 8参照）。組織スコアは、以下の様に判定した。即ち、細胞浸潤スコアは、 0 :'正常、' 1 ：少数の細胞浸潤、 2 ： —層の細胞浸潤、 3：二〜四層の細胞浸潤、 5 ：四層以上の細胞浸潤、とした。また、 PASスコアは、 0 : 杯細胞が肺胞円周の 5%以下、 1 ：杯細胞が肺胞円周の 5%- 25%、 2 : 杯細胞が肺胞円周の 25%-50%、 3 ：杯細胞が肺胞円周の 50%-75 、 4：杯細胞が肺胞円周の 75 以上、とした。 ' '

気管支喘息モデルにおける肺胞洗浄液中サイトカインの抑制（ Ba 1 b /cマウス）

Balb/cマウス（ 8週令、雌）に、 OVA 20 ^ g/マウスを Al um 2.25 mg/マウスと混和後、 Day 0、 Day 7に腹腔内投与を行った。 Day 18 より連日 3 日間、 5 mg/mlの濃度で OVAを吸入させた。化合物は、吸入前に 2/i g/マウスを腹腔内投与した。最終吸入日の翌日に、肺胞洗浄をおこない、肺胞洗浄液中のサイ卜カインの測定を EL ISA法を用いて行った。コントロール群（0VA/DMS0) に比較して、化合物投与群では IL-5、 Iい 13ともに著しく抑制された（図 9参照）。産業上の利用可能性本発明に係る、前記式. （ I ) で表わされる糖脂質誘導体 SGLは自己抗体惹起性の炎症反応'を抑制し、自己免疫性関節炎などの慢性炎症性疾患、気管支喘息などのアレルギー疾患及び NKT細胞が病態悪化に関与する疾患の治療薬として有用である。

Claims

請求の範囲式（I )

(l)

(式中、 R ¹はアルドビラノース残基を表し、 R²は水素原子又は水酸基を表し、 Aは— CH₂—、 —CH (OH)—CH₂ —又は— CH = CHCH₂ —を示し、 Xは 13〜 1 6の整数を示し、 yは 0〜 25の整数を示す。）で表される糖脂質誘導体又はの薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む NKT細胞又は NKT細胞への刺激が病態悪化に関与する疾患の治療薬。 '

'

2 . 請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含むアレルギー疾患のための治療薬。

3 . 請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む慢性炎症性疾患のための治療薬。

4 . 式（I ) において、 R ¹が a _ D—ガラク卜ピラノシルを示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む NKT細胞又は NKT細胞への刺激が病態悪化に関与する疾患の治療薬。

5 . 式（I ) において、 R ¹がひ一 D—ガラクトピラノシルを示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含むアレルギー疾患のための治療薬。

6 . 式（I ) において、 R ¹が α — D—ガラク卜ビラノシルを示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む慢性炎症性疾患のための治療薬。

7 . 式（ I ) において、 R ¹が α _ D—ガラクトピラノシルを示し、 Αがー CH₂ —又は一 CH' (OH)— CH₂ —を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む NKT細胞又は NKT細胞への刺激が病態悪化に関与する疾患の治療薬。 '

8 . 式（ I ) において、 R ¹がひ一 D—ガラク卜ビラノシルを示し、 Aがー CH₂ —又は一 CH (0H)— CH₂ —を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含むアレルギー疾患のための治療薬。 '

9 . 式（I ) において、 R 'がひ一 D—ガラク卜ビラノシルを示し、

Aが— CH₂ —又は— CH (0H) 一 CH₂ 一を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘 . 導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む慢性炎症性疾患のための治療,薬。

10. 式（ I ) において、 R ¹がひ一 D—ガラク卜ビラノシルを示し、 R²が水素原子を示し、 Aが— CH₂—又は一 CH (OH)— CH₂ —を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む NKT細胞又は NKT細胞への刺激が病態悪化に関与する疾患の治療薬。

1 1 . 式（ I ) において、 R ¹が α — D—ガラクトピラノシルを示し、 R²が水素原子を示し、 Αがー CH₂—又は— CH (OH)— CH₂ —を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もじくは溶媒和物を有効成分として含むアレルギー疾患のための治療薬。

12. 式（ I') において、 R¹がひ一 D _ガラク卜ビラノシルをし、 R²が水素原子を示し、 Aが— CH₂ —又は一 CH (OH) _ CH₂ —を示す請求項 1 に記載の糖脂質誘導体又はその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物を有効成分として含む慢性炎症性疾患のための治療薬。

13. 式 .（1' ) ：

' (に）

(式中、 R¹は a _D—ガラク卜ビラノシルを示し、 R²は水素'原子を示し、 Aは— CH(OH)— CH₂ —を示し、 Xは 13 16の整数を示し、 yは 0 〜25の整数を示す。）で表わされる糖脂質誘導体及びその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物。

14. 前記糖脂質誘導体が 2—へキサコサノィルァミノ — 1 —0— α 一 D—ガラク卜ビラノシルー D— リボー 1 , 3, 4— ドコサントリオール

、 2—へキサコサノィルァミノ一 1— 0— a— D—ガラク卜ビラノシル一 D— リボー 1, 3, 4—へニコサン卜リオ一ル、 2—へキサコサノィルアミノー 1— 0— —ガラクトピラノシル一 D— リボ一 1, 3, 4—ィコサン卜リオール又は 2—へキサコサノィルアミノー 1_0— a—D— ガラクトビラノシルー D— リボー 1, 3, 4—ノナデカントリオールである請求項 13に記載の糖脂質誘導体及びその薬理学的に許容される水和物もしくは溶媒和物。