WO2006134648A1

WO2006134648A1 - ポリオキシエチレン２，４－ジイソオクチルフェニルエーテルの製造方法

Info

Publication number: WO2006134648A1
Application number: PCT/JP2005/010964
Authority: WO
Inventors: Yoshinobu Tsukada
Original assignee: Actice Co., Ltd.
Priority date: 2005-06-15
Filing date: 2005-06-15
Publication date: 2006-12-21

Abstract

　本発明の製造方法によりポリオキシエチレン　２，４－ジイソオクチルフェニルエーテルを安定して得ることができる。

Description

ポリオキシエチレン 2， 4—ジイソォクチルフエニルエーテルの製造方法技術分野

[0001] 本発明は、ポリオキシエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造方法に関する。

背景技術

[0002] 細胞死を誘導する化合物あるいは細胞死を誘導する化合物の作用を増強する化合物としては種々の化合物が知られており、種々の疾患の予防あるいは治療用の医薬における有効成分としての利用につ、ての検討は盛んに行なわれて、る。

[0003] 特開 2004 - 51513号公報にはアポトーシスを誘導する物質であるリンゴ由来のプ口アントシァ-ジン成分を有効成分とした抗腫瘍剤が記載されており、特開 2002— 1 28690号公報にはサイト力インとしての TNF— a及び IL— 4を有効成分とし、これらのアポトーシス誘導作用を利用した悪性腫瘍の予防'治療剤が記載されている。更に、特開 2000— 72749号公報にはキノリン誘導体を有効成分とするアポトーシス誘導剤が制癌剤として利用できる点が記載されている。また、特開 2003— 238567号公報にはシユードモナス属に属する細菌由来のベンゾクラトン'エネミドィ匕合物が細胞障害活性を有し、抗腫瘍剤の活性成分として有用であることが記載されてヽる。発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0004] 癌細胞においてアポトーシスを誘導し、正常細胞においてはアポトーシスを起す確率が低い物質や化合物は、抗癌剤の成分としての利用が期待できる。本発明は、抗癌剤の有効成分としても利用し得る新規な化合物を提供することを目的とするものである。

課題を解決するための手段

[0005] 本発明のポリオキシエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造方法は下記式（1) : [0006] [化 1]

(上記式中、 nは 3〜15の整数を表す。）

で表わされるポリオキシエチレン 2, 4 ジイソオタチルフエ-ルエーテルの製造方法であって、

(A)下記式 (2) :

[0007] [化 2]

(上記式中、 nは式（1)と同じ意味を表す。 )

で表わされるポリエチレングリコールとパラトルエンスルホ -ルを反応させて、下記式（ 4) :

[0008] [化 3]

(上記式中、 nは式（1)と同じ意味を表す。 )

で表わされるポリオキシエチレンモノ（ρ トルエンスルホ -ル）エーテルを得る工程と、

(B) 2, 4, 4 トリメチル 1—ペンテンとフエノールから 2, 4 ジイソオタチルフエノールを得る工程と、

(C)前記ポリオキシエチレンモノ（p—トルエンスルホ -ル）エーテルと、前記 2, 4— ジイソオタチルフヱノールとを反応させて、前記ポリエチレン 2, 4—ジイソォクチルフェ-ルエーテルを得る工程と、

を有することを特徴とするポリオキシエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造方法である。

[0009] 上記式（1)の nとしては、 9〜13力 S好ましい。更に、上記式（1)の nが、 5、 7、 10または 12である場合がより好まし、。

発明の効果

[0010] 界面活性剤ゃ抗癌剤の有効成分としての利用が期待できるポリオキシエチレン 2, 4 -ジイソオタチルフエ-ルエーテルの製造方法を提供することができる。

図面の簡単な説明

[0011] [図 1]各化合物の作用濃度と細胞生存率の関係を示す図である。

[図 2]2種の化合物を単独または混合して用いた場合の作用濃度と細胞生存率の関係を示す図である。

[図 3(1)]2種の化合物を単独または混合して用いた場合の癌細胞における DNA合成阻害効果の試験結果を示す図である。

[図 3(2)]2種の化合物を単独または混合して用いた場合の癌細胞における DNA合成阻害効果の試験結果を示す図である。

[図 4]式（1)の nが 0である化合物のデータを示す図である。

[図 5]式（1)の nが 5である化合物のデータを示す図である。

[図 6]式（1)の nが 6である化合物のデータを示す図である。

[図 7]式（1)の nが 7である化合物のデータを示す図である。

[図 8]式（1)の nが 8である化合物のデータを示す図である。

[図 9]式（1)の nが 9である化合物のデータを示す図である。

[図 10]式（1)の nが 10である化合物のデータを示す図である。

[図 11]式（ 1)の nが 12である化合物のデータを示す図である。

発明を実施するための最良の形態 [0012] 本発明のポリオキシエチレン 2, 4 ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造では、出発物質として、下記 (4)で示されるポリオキシエチレンジ (p トルエンスルホ- ル）エーテルと下記式（7)で表わされる 2, 4 ジイソォクチルフエノールが用いられる

[0013] [ィ匕 4]

式（4)で表わされるポリオキシエチレンジ（p トルエンスルホ -ル）エーテルは、下記式（2)で表わされるポリエチレングリコールと下記式（3)で表わされる p トルェンスルホニルを反応させて得ることができる（工程 A)。

[化 5]

また、式（7)で表わされる 2, 4 ジイソォクチルフエノールは、下記式（5)で表わされるフエノールと下記式（6)で表わされる 2、 4, 4 トリメチル 1—ペンテンとを反応させて得ることができる（工程 B)。

[0015] [化 6]

工程 Aは、ジクロロメタン等の不活性溶媒中で行なうことができる。反応は、酸化銀、ヨウ化カリウム等の存在下で行なうことができる。低温度 (例えば— 20°C)下で、各成分を不活性溶媒中に添加して反応溶液を調製し、その後、温度を、例えば室温まで上げて反応を開始させ、必要時間保持する。反応終了後、反応液から目的とする式 (4)で示される化合物を回収する。この回収には、ろ過、各種のクロマトグラフィーを利用した分離方法などの常法を用いることができる。

[0016] 工程 Bは、式（5)の化合物と式 (6)の化合物とを、濃硫酸などの触媒の存在下で行なうことができる。また、この反応は加熱下 (例えば、 100°C)、窒素気流下などの不活性雰囲気下で行なうこともできる。反応終了後、反応液から目的とする式 (7)で示され化合物を回収する。この回収には、ろ過、各種のクロマトグラフィーを利用した分離方法などの常法を用いることができる。

[0017] 式 (4)の化合物と式（7)の化合物との反応（工程 A)は、 NaH、炭酸カリウムなどの存在下、テトラヒドロフラン (THF)、ジメチルホルムアミド (DMF)等の不活性溶媒中、窒素気流下などの不活性雰囲気で行なうことができる。反応終了後、反応液から目的とする式（1)で示されィ匕合物を回収する。この回収には、ろ過、各種のクロマトダラフィーを利用した分離方法などの常法を用いることができる。

[0018] 本発明の方法によれば、所望とするォキシエチレン鎖数 (n= 3〜 15)の式（1)で示される化合物を安定して製造することが可能となる。

[0019] 式（1)の化合物は両親媒性であり、界面活性剤として利用できる。更に、式（1)の化合物は、癌細胞においてアポトーシスを誘導し、かつ正常細胞においてアポトーシスを起し難いという特性を有し、 DNA合成抑制あるいは阻害作用も更に有し、抗癌剤や細胞死誘導剤の活性成分として有用である。

実施例

[0020] 以下実施例に基づいて本発明を更に詳細に説明する。

(実施例 1)

下記に示す工程によりノナエチレングリコールジ（p—トルエンスルホ -ル）エーテルを得た。

[0021] [化 7]

( 7 ) ( 4 ) ( 1 )

(X@A)

まず、塩ィ匕カルシウム乾燥管を装着した 50mLナスフラスコ中、ノナエチレングリコール（1. 69mmol、 700mg)をジクロロメタン（17mL)に溶解した.これを撹拌しながら氷一メタノール浴に浸し、 20°Cに冷却した.これに酸化銀 (I) (2. 53mmol、 58 6mg)およびヨウ化カリウム（335mmol、 55. 6mg)を加え、次に、塩化 p—トルエンスルホ-ル（1. 86mmol、 354mg)をゆっくり加えた。氷浴を除き、室温に戻しながら 1 . 5時間撹拌を続けた。その後、反応液をセライト濾過し、エバボレーターで溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒:クロ口ホルム —メタノール混合溶媒（30 : 1；容量比）によって精製し、ノナエチレングリコールモノ (p—トルエンスルホ -ル）エーテルを得た（収率：59%、 988 ^ m, 563mg)。この際、副生成物として、下記式で表わされるノナエチレングリコールジ (p トルエンスルホ -ル）エーテルが得られた（収率：23%、 394mmol、 285mg)。

[化 8]

(工程 B)

(その 1)

オートクレープ中、 2, 4, 4 トリメチルー 1 ペンテン（17. 3mmol、 19. 5mg)とフェノール（3. 44mmol、 323mg)を混合し、これに濃硫酸を 2滴加えた。これを撹拌しながら窒素下で 7気圧に加圧し、 100°Cで 3時間加熱した。常圧、室温に戻した後、酢酸ェチル (20mL)で反応混合物を希釈し、飽和重曹水（30mL)、飽和食塩水（3 OmL)で順次これを洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。これをろ紙で濾過し、ェバポレーターで揮発成分を留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒:へキサン一クロ口ホルム混合溶媒：（1 : 0→2 : 1) (容量比)）で精製し、 2, 4ージイソォクチルフエノールを淡黄色液体として得た（収率： 57%、 1. 95mmol、 6 21mg) ₀この際、副生成物として、 4 (1, 1, 3, 3—テトラメチルブチル）フエノール力 S得られた（収率： 18%、 619 /ζ πιο1、 128mg) ₀ [0023] (その 2)

塩ィ匕カルシウム乾燥管及びジムロート冷却管を装着した 200mL二口ナスフラスコ中、 2, 4, 4 トリメチル 1—ペンテン（524mmol、 83. Omg)とフエノール（104m mol、 9. 83g)を混合し、これに濃硫酸を 10滴カ卩えた。 100°Cで 3時間加熱した。室温に戻した後、酢酸ェチル（lOOmL)で反応混合物を希釈し、飽和重曹水（lOOmL )、飽和食塩水（lOOmL)で順次これを洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。これをろ紙で濾過し、エバポレーターで揮発成分を留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒:へキサンクロ口ホルム混合溶媒：（1 : 0→2 : 1) (容量比））で精製し、 2, 4 ジイソオタチルフヱノールを淡黄色液体として得た (収率: 65 %、 67. 8mmol、 21. 6g)。

[0024] (工程。）

窒素気流下、 2, 4ージイソォクチルフエノール（300 mol、 9. 85mg)をテトラヒド口フラン (2mL)に溶解した。これを撹拌しながら氷浴に浸し、水素化ナトリウム (ミネラルオイル懸濁： 540 /ζ πιο1、 18. Omg)を添加した。これを室温で 30分撹拌した後、ノナエチレングリコールジ（p トルエンスルホ -ル）エーテル（300 πιπιο1、 171mg )のテトラヒドロフラン（lmL)溶液を添加した。室温で 24時間撹拌した後、反応溶液を酢酸ェチル (4mL)で希釈し、これを希塩酸（1M、 2mL)、飽和重曹水（2mL)及び飽和食塩水（2mL)で順次洗浄した。無水硫酸ナトリウムで脱水した後、これを濾過し、エバポレーターで溶媒を蒸去し、得られた残渣をシリカゲル薄層クロマトグラフィー (展開溶媒:クロ口ホルム—メタノール混合溶媒、 30 : 1 (混合比)）で精製し、ノナエチレングリコール 2, 4 ジイソォクチルフエ-ルエーテル [2—（2—（2—（2— (2 一（2— (2— (2— (2— (2,4 ビス一（1, 1, 3, 3—テトラメチルブチル）フエノキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール；あるいはノナオキシエチレン 2, 4 ジイソォクチルフエ-ルエーテル]を淡黄色液体として得た（収率 54%、 162 /ζ πιο1、 116mg)。

[0025] (実施例 2)

ノナエチレングリコールの代わりに、ポリエチレングリコールのォキシエチレン鎖（一 CH -CH—O ）の数の異なるポリオキシエチレングリコールをそれぞれ用いて、実施例 1と同様にして、ォキシエチレン鎖（一 CH -CH—O )の数の異なるポリオ

2 2

キシエチレン 2, 4 ジイソォクチルフエ-ルエーテルを合成した。得られた各化合物の収率などを以下に示す。

なお、使用したィ匕合物の中で巿販化合物は、以下のとおりである。

ペンタエチレンリコール（シグマアルドリッチ Co. )

へキサエチレングリコール (東京化成株式会社）

ヘプタエチレングリコール (東京化成株式会社）

ォクタエチレングリコール (東京化成株式会社）

ノナエチレングリコール (東京化成株式会社）

デカエチレングリコール (東京化成株式会社）

ドデカエチレングリコール (東京化成株式会社）

2, 4, 4 トリメチル—1—ペンテン (東京化成株式会社）

テトラヒドロフラン (脱水、和光純薬工業株式会社）

p -トルエンスルホ-ル (ナカライテスタ株式会社）

(中間体に関するデータ： nは式 (4)の nの値である。 )

(1)ペンタエチレングリコールモノ（p—トルエンスルホ -ル）エーテル； n= 5；収率 9 4% ;無色液体

( 2)へキサエチレングリコールモノ（p トルエンスルホ -ル）エーテル； n = 6；収率 9 0% ;無色液体；

(3)ヘプタエチレングリコールモノ（p—トルエンスルホ -ル）エーテル； _n= 7；収率 9 9% ;無色液体；

(4)ォクタエチレングリコールモノ（p トルエンスルホ -ル）エーテル； n = 8；収率 7 5%；無色液体；副生物：ォクタエチレングリコールジ（p トルエンスルホ -ル）エーテル（収率 14%)

(5)デカエチレングリコールモノ（p -トルエンスルホ -ル）エーテル； n = 10；収率 6 7%；無色液体；副生成物：デカエチレングリコールジ（p トルエンスルホ -ル）エーテル (収率 19%)

(6)ドデカエチレングリコールモノ（p トルエンスルホ -ル）エーテル； n= 12；収率 63；無色液体；副生成物：ドデカエチレングリコールジ（p—トルエンスルホ -ル）エーテル (収率 23%)

(目的化合物に関するデータ: nは式（1)の nの値である。 )

(1)ペンタォキシエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； n = 5；収率 45%；淡黄色液体

(2)へキサォキシエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； n = 6；収率 38% ；淡黄色液体

(3)へプタオキシエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； n = 7；収率 48% ；淡黄色液体

(4)ォクタォキシエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； n= 8；収率 71 %；淡黄色液体

(5)デカオキシエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； n = 10；収率 72%；淡黄色液体

(6)ドデカオキシエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテル； n = 12 ;収率 47 % ;淡黄色液体

(各生成物の分析結果）

1.質量分析

各生成物のナトリウム塩の質量分析を日本電子 ¾iMS—T100 (ESI-TOF)を用い、以下の条件で行った。

測疋モ ~~ト： Positive mode

観測範囲： 100〜1000

分解能： 6000

得られた結果を、化合物名；式（1)中の n;組成式;理論値;測定値の順に以下に示す。

(1)ペンタエチレン 2, 4 -ジイソオタチルフエ-ルエーテル； 5； C32H5806N1 ;561.4 1311 ;561.40948

(2)へキサエチレン 2, 4 -ジイソオタチルフエ-ルエーテル； 6； C34H6207Nal； 605. 43932 ;605.43340 (3)ヘプタエチレン 2, 4 -ジイソオタチルフエ-ルエーテル； 7； C36H6608Nal； 649. 46554 ;649.45656

(4)オタタエチレン 2, 4 -ジイソオタチルフエ-ルエーテル； 8； C38H70O9Nal； 693.4 9175 ;693.48241

(5)ノナエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテル： 9： C40H74O10Nal： 737.51 797 : 737.51372

(6)デカエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル； 10； C42H7801 INal； 781. 54418 ; 781.54057

(7)ドデカエチレン 2, 4—ジイソオタチルフエ-ルエーテル；12 ; C46H86013Nal； 86 9.59661 ;869.59470

2. NMR分析

測定装置: JEOL ECX-400

磁場強度： 9. 4T

共鳴周波数： 400MHz

測定温度： 25°C

測定溶媒: CDC1

2

標準物質：テトラメチルシラン (TMS)を内部標準 (Oppm)として使用

図 5〜： L 1に各化合物（n= 5、 6、 7、 8、 9、 10及び 12)の NMR分析データをそれぞれ示す。なお、図 4に n=0の場合の NMRデータを参考に示す。

[0027] 参考例 1

実施例 1及び 2で得られた各化合物につ、て MTTアツセィを行なった。

[0028] まず、試験化合物（20mg)を Dulbecco's MEM培地に 10重量％ゥシ胎児血清（FB S)、 2. 5重量％ゥマ血清（HS)、ペニシリン及びストレプトマイシンを含む培地（4ml) 中に添加し、ボルテックスミキサーで 1分間の攪拌混合後、 4°Cで一晩放置し、更に、 1分間の攪拌をし、 0. 22 /z mのポアサイズのフィルターでろ過滅菌を行なった。濾液を上記と同じ組成の培地に希釈し、 100ppm、 24ppm、 0. 8ppmのサンプルをそれぞれ調製した。各サンプルを以下の MTTアツセィに供した。

[0029] ヒト脾臓ガン由来細胞 MIAPaCa— 2 (大日本製薬）を 96ゥエルプレートに 1ゥエルあたり I X 10⁵個で捲種し、 37°C、 5容量⁰ /oCOのインキュベータ中で Dulbecco's M

2

EM培地に 10重量％ゥシ胎児血清（FBS)、 2. 5重量％ゥマ血清（HS)、ペニシリン及びストレプトマイシンを含む培地で 2時間培養した。培地を前記したサンプルと交換して、 37°C、 5容量⁰ /oCOのインキュベータ中で 72時間培養した後、 5mgZmlMTT

2

溶液を 10 /z lZゥエルの割合で添カ卩した。ゥエルを更に 37°C、 5容量％COのインキ

2 ュベータ中で 4時間培養し、 150 1のイソプロパノール一 HC1を添カ卩した。 1時間経過後十分にピッぺティングを行い、ホルマザンを溶解させ、 560nmでの吸光度を測定した。得られた吸光度力も試験化合物の濃度と腫瘍生存率の関係を求めた。得られた結果を図 1に示す。また、 Triton X— 100を陽性コントロールとして用い、上記と同様にしてその濃度と腫瘍生存率の関係を求めた。

[0030] (参考例 2)

参考例 1と同様にして、ノナエチレングリコール 2, 4ージイソォクチルフエ-ルエーテル（n= 9)、ドデカエチレングリコール 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテル（n = 12)及びこれらの混合物の濃度と腫瘍生存率の関係を求めた。結果を図 2に示す

[0031] (参考例 3)

ノナエチレングリコール 2, 4ージイソォクチルフエ-ルエーテル（n= 9)、ドデカェチレングリコール 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテル（n= 12)及びこれらの混合物の Meth— A腫瘍細胞に対する DNA合成阻害効果を試験した。

[0032] Meth— A腫瘍細胞は、 RPMI1640+FBC15重量⁰ /₀培養液に 96ゥエルプレートの各ゥエル中で培養した。試験化合物は、 500

で上記培養液で希釈し、培養液と細胞を含むゥエルと、所定の濃度での試験化合物、培養液及び細胞とを含むゥエルと、を用意した。次に、各ゥエルにアイソトープ（3H —チミジン）を 74kBqの量となるように加え、 37°Cで 24時間培養を行なった。細胞に取り込まれた 3H—チミジンの放射活性 (cpm)を測定した。各測定値について、対照 (試験化合物無添加)の放射活性を 100とした相対値を算出した。得られた結果を図 3に示す。

[0033] 図 3において PEN9は n= 9である式（1)の化合物を、 PEN12は n= 12である式（1 )の化合物を、 Mixlは PEN9 (75重量％)と PEN12 (25重量％)の混合物を、 Mix2 は PEN9 (50重量％)と PEN12 (50重量％)の混合物を、 Mix3は PEN9 (25重量 %)と PEN12 (75重量⁰ /₀)の混合物を、 SRT— KAは、糸状菌（Asupergirus lumigat us) SRT株の PEN9などを含む抽出物を表す。

Claims

請求の範囲

下記式（1)

(上記式中、 nは 3〜15の整数を表す。）

で表わされるポリオキシエチレン 2, 4—ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造方法であって、

(A)下記式 (2):

[化 2]

(2)

(上記式中、 nは式（1)と同じ意味を表す。 )

で表わされるポリエチレングリコールとパラトルエンスルホ -ルを反応させて、下記式（

4):

[化 3]

(4)

(上記式中、 nは式（1)と同じ意味を表す。 )

で表わされるポリオキシエチレンモノ（P—トルエンスルホ -ル）エーテルを得る工程と、

(C)前記ポリオキシエチレンモノ（p—トルエンスルホ -ル）エーテルと、前記 2, 4— ジイソオタチルフヱノールとを反応させて、前記ポリオキシエチレン 2, 4 ジイソオタチルフエ-ルエーテルを得る工程と、

を有することを特徴とするポリオキシエチレン 2, 4 ジイソォクチルフエ-ルエーテルの製造方法。

前記 nが 5、 7、 10または 12である請求項 1に記載の製造方法。