WO2004076471A1

WO2004076471A1 - ビフラボノイドシアル酸配糖体からなる抗インフルエンザウイルス化合物

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Publication number: WO2004076471A1
Application number: PCT/JP2003/002046
Authority: WO
Inventors: Haruki Yamada; Takayuki Nagai; Kunio Takahashi
Original assignee: The Kitasato Institute
Priority date: 2003-02-25
Filing date: 2003-02-25
Publication date: 2004-09-10
Also published as: JPWO2004076471A1; EP1600454A1; US20070004649A1; EP1600454A4; CA2517104A1; AU2003207116A1

Abstract

本発明に係る化合物は、ビフラボノイドのシアル酸配糖体からなることを特徴としている。　このようなビフラボノイドのシアル酸配糖体は、培養細胞を用いたinvitroの系のみならず、マウスを用いたinvivoの系でも抗インフルエンザウイルス活性が認められ、インフルエンザの予防ないし治療剤として有用であるばかりでなく、インフルエンザの予防ないし治療用飲食物としても有用である。

Description

明細 ^j ビフラポノィドシアル酸配糖体からなる抗ィンブルエンザウィルス化合物技術分野

本発明は、シァリダーゼ阻害活性を有し、インフルエンザ等のウィルス疾患の予防 ·治療に有効な抗ウィルス化合物に関する。背景技術

インフルエンザは、基礎疾患を有する患者や高齢者にとって、生命に係わる危険な感染症である。実際、インフルエンザの流行した年には、超過死亡率の上昇が認められる。また、高齢者においては、肺炎、乳幼児においては、脳炎を併発し、死亡又は重症化した例が数多く報告されている（松本慶蔵、日本臨床、 55 (10)、 2536-2541 (1997)) ₀ さらに、近年、ィンフルェンザ A型ウィルスの新しい亜型の出現が危惧されており、我が国において流行した場合、数万〜数十万人の死亡者がでることが予測されている。これらのことから、インフルエンザ対策は、社会的に重要な課題となっている。インフルエンザ対策として、ワクチンの予防接種が最も有効な手段であることに議論の余地はない（田村慎一、倉田毅、 BIO Clinica、 11 (9)、 665-669 (1996))。しかし、ヮクチンの製造及ぴ充分量のワクチンの供給には、ある程度の時間を要することから、新型ウィルスの流行が差し迫つている場合には、症状の軽減のために、抗インフルエンザウイルス剤の投与が必要となる。現在、日本で市販されている抗インフルエンザウイルス薬にはァマンタジン、ザナミビル、ォセルタミビルがある。ァマンタジンは A型ィンフルェンザウィルス感染症に、ザナミビルとォセルタミビルは A、 B両型のインフルエンザウィルス感染症に保険適用が認められている。ァマンタジンはインフルエンザウイルスの M2蛋白に作用する。 M2蛋白は A型インフルエンザウイルスの膜上に存在するィオンチヤンネルで、ウィルス粒子内を酸性化することで、 RNA遺伝子ゃ核タンパク質、 RNAポリメラーゼの複合体であるリボ核蛋白質複合体（RNP) の細胞質への放出に大きな役割を果たす。ァマンタジンはこの M2蛋白の機能を阻害し、 RNP放出を抑制して、ウィルスの増殖を防ぐ。

ザナミビル、ォセルタミビルは A、 B両型のインフルエンザウイルスに有効である。これらの薬剤の作用機序はァマンタジンとは異なり、シァリダーゼ（ノィラミュダーゼともいう）阻害作用により効果を発揮する。シァリダーゼは A、 B 型ウィルスの表面に存在する糖蛋白で、増殖したウイルスが宿主細胞から遊離するときに、へマグルチニン一レセプター（レセプター中のシアル酸）の結合を切り離して、出芽を促す作用がある。ザナミビル、ォセルタミビルはこの活性部位に結合してその働きを抑え、ウィルスの遊離を阻止する作用がある。感染細胞に繋ぎ止められたウィルスは、他のウィルスと相互に結合するため、それ以上の感染の拡大をくい止め、やがて終息に向かわせることになる。

ザナミビルはコンピューター ·ケミストリーで理論的に開発された薬剤の 1つとしても有名である。基礎研究の進歩により、シァリダーゼの構造や活性部位の立体構造が明らかにされたために登場した薬である。

ォセルタミビルもシアル酸に結合するシァリダーゼの活性部位により強く結合することでシァリダーゼの機能を阻害する作用がある。ザナミビルは経口投与では生体利用率が低いため粉末剤を吸入器などで口から吸入する必要がある。その点、ォセルタミビルは経口投与可能で、体内に吸収されたのち活性体に変換するプロドラッグである。

これらの抗インフルエンザ薬はレ、ずれも発症後 48時間以内に投与する必要がある。これを過ぎると自然経過と変わらず、効果はほとんど認められない等、臨床での有効性が充分とはいえなかつた。また、シァリダーゼ阻害剤には耐性ウィルスの出現の可能性もあり、新規の抗インフルエンザ薬が求められている。

本発明者らも、ブラボノイドの 1 種である F36 ( 5, 7, 4'-trihydroxv-8-methoxyflavone)カ in vitroおぴ in vivoで inづンフノレエンケゥづノレス活性を有することを報告している（T. Nagai, Y. Miyaichi, T. Tomimori, Y. Suzuki, and H. Yamada, Chem. Pharm. Bull., 38, 1329-1332 (1990); T. Nagai, Y. Miyaichi, T. Tomimori, Y. Suzuki, and H. Yamada, Antiviral Res., 19, 207-217 (1992);特許第 2974370号）力 S、さらに強力な抗インフルエンザウイルス化合物の開発が望まれていた。一方、ビブラボンの 1種である口ブスタフラボンとァメントフラボンが in vitro で抗インフルエンザウイルス活性を示し、口ブスタフラボンはマウスを用いた in vivo の系でも抗インフルエンザウイルス活性を示すことが知られている（特許公表平 11-508264、 WO97/00679)。しかし、ビフラボノィドのシアル酸配糖体の有機合成並ぴに抗インフルェンザウィルス活性については検討されていない。

従って、本発明は、ウィルス疾患、とりわけインフルエンザ等のウィルス疾患の予防 ·治療に有用な、新規な抗ウィルス化合物を提供することを課題とする。発明の開示

本発明者らは、抗ィンフルェンザウィルス化合物を開発すべく鋭意検討を行ない、様々な新規のビブラボノィドシアル酸配糖体が抗インフルエンザウイルス活性を示すことを見い出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、たとえば下記のとおりである。

本発明に係る化合物は、ビフラボノィドのシアル酸配糖体である。

前記ビフラボノィドのシアル酸配糖体は、下記一般式（1 )、（I I ) または（I I I ) のいずれかの式で表される化合物またはその塩であることが好ましい：

(式（I ) 中、，，，，，ぉょぴは、それぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示し、は、水素原子、ナトリゥム原子、カリウム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R¹⁽⁾， R¹¹, R¹²および R¹³はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 X はァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 Aは酸素原子または硫黄原子を示す。）、

( I I )

(式（I I ) 中、，，，^，，ぉょびはそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-プチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示し、および R¹⁴はそれぞれ独立して水素原子、ナトリゥム原子、力リゥム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷およぴ R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 Xおよび Yはそれぞれ独立してァセトァミノ基、グリコリルァミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 Aおよび Bはそれぞれ独立して酸素原子または硫黄原子を示す）、

( I I I )

(式（I I I ) 中、 R¹, R²， R³, R⁴, R⁶， R⁷， R⁸および R¹⁹はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示し、 R¹⁴は水素原子、ナトリゥム原子、カリウム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R¹⁵，R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸ はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 Y はァセトアミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 B は酸素原子または硫黄原子を示す)。

前記式（I ) 〜（I I I ) 中、 R⁹および R¹⁴は水素原子であり、 R¹⁰, R¹¹, R¹²， R¹³, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷およぴ R¹⁸は水素原子であることが好ましい。

本発明に係る医薬品は、前記ビフラボノィドのシアル酸配糖体を有効成分とする。

本発明に係るインフルエンザ予防剤または治療剤は、前記ビブラボノィドのシアル酸配糖体を有効成分とする。

本発明に係る飲食品は、前記ビフラボノィドのシアル酸配糖体を有効成分とする。

本発明に係るインフルェンザ予防または治療用の飲食品は、前記ビブラボノィドのシアル酸酉己糖体を有効成分とする。

なお、本発明では、前記ビフラボノイドのシアル酸配糖体を有効量投与することを特徴とするィンフルェンザの予防または治療方法を含む。

さらに、本発明では、インフルェンザの予防剤または治療剤を製造するための前記ビフラポノィドのシアル酸配糖体の使用を含む。

また、本発明では、前記ビフラボノイドのシアル酸配糖体を有効量飲食することを特徴とするィンフルェンザ予防または治療のための飲食方法を含む。

さらに、本発明では、インフルエンザ予防または治療のための飲食品を製造するための前記ビフラボノィドのシアル酸配糖体の使用を含む。図面の簡単な説明

図 1は、ィヌガヤからのビフラボノィドの精製法を示す図である。

図 2は、イチヨウからのビブラボノィドの精製法を示す図である。

図 3は、糖供与体の合成法を示す図である。

図 4は、シアル酸誘導体とビフラボノィド誘導体の結合体の合成法を示す図である。

図 5は、化合物 29aと 29bの CDスぺクトルを示す図である。

図 6は、化合物 30aと 30bの CDスぺクトルを示す図である。

図 7は、化合物 31aと 31bの CDスぺクトルを示す図である。

図 8は、化合物 32aと 32bの CDスぺクトルを示す図である。

図 9 は、合成されたシアル酸誘導体とビフラポノィド誘導体の結合体の構造を示す図である。

図 10は、ィンフルェンザウィルス A/PR/8/34シァリダーゼ阻害活性を示す図である。

図 11は、インフルエンザウイルス A/Guizhou/54/89シァリダーゼ阻害活性を示す図である。

図 12は、インフルエンザウイルス B/茨城 /2/85シァリダーゼ阻害活性を示す図である。

図 I³は、 MDCK細胞におけるインフルエンザウイルスの増殖に対する影響を示す図である。

図 14は、ィンフルェンザウィルスを感染させたマウスの生存率おょぴ生存日数に対する影響を示す図である。

図 15は、インフルエンザウイルスを感染させたマウスの平均生存日数に対する影響を示す図である。発明を実施するための最良の形態

本発明に係るビフラポノィドのシアル酸配糖体は、ビフラポノィドに由来する構成単位とシアル酸に由来する構成単位とを含む化合物である。

ビブラボノィドに由来する構成単位とは、 2つのフラボノィド骨格が結合した化合物に由来する構成単位であり、シアル酸骨格とは、 9つの炭素原子を含むァミノ糖であるノィラミン酸誘導体、または KDN (2-keto-3-deoxy-D-gfycera-D-gatocto-2-nonulosonic acid) ¾体に由来す o構成単位を意味する。

本発明に係る該ビフラボノィドのシアル酸配糖体は、シアル酸に由来する構成単位が少なくとも 1つ含まれ、好ましくは 1つまたは 2つのシアル酸由来の構成単位が含まれることが望ましい。

このようなビフラボノイドのシアル酸配糖体としては、より具体的には、たとえば、下記一般式（1 )、 ( I I ) または ( I I I ) のいずれかの式で表されるィ匕合物またはその塩が挙げられる。

式（I ) 中、 1^，，1 ³, 1 ⁴, 1 ⁵, R⁶, R⁷および R⁸は、それぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-プチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示す。

このうち、 R¹, R², R³，R⁴, R⁵としては、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチノレオキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基またはァリルォキシ基が好ましく、水酸基またはメチルォキシ基がより好ましい。さらに、 R¹, R², R³, R⁴， R⁵のうち、少なくとも 1つは水酸基であり、より好ましくは 1〜3個が水酸基であることが望ましい。

R¹, R², R³, R⁴, R⁵のより具体的な組み合わせとしては、たとえば、

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R⁵が水

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R⁵がメチルォキシ基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R⁵がメチルォキシ基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R⁵が水酸基、 R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R⁵が水酸基、

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R⁵が水酸基、 R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R⁵がメチルォキシ基、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R⁵がメチルォキシ基である場合が挙げられる。

これらのうちでは、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、が水酸基、または

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R⁵がメチルォキシ基である場合が望ましい。

R⁶， R⁷および R⁸としては、水素原子、水酸基、メチル基またはメチルォキシ基が好ましく、水素原子であることがより好ましい。

R⁶, R⁷および R⁸のより具体的な組み合わせとしては、たとえば、

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷がメチルォキシ基、が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水酸基、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、 R⁸が水酸基、

R⁶がメチル基、 R⁷が水素原子、が水素原子

である場合が挙げられる。

R⁹は、水素原子、ナトリウム原子、カリウム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、これらのうちでは、水素原子が好ましい。

R¹⁰, R¹¹, R¹²および R¹³はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、これらのうちでは、 R^1G， R¹¹, R¹²および R¹³はそれぞれ独立して水素原子またはァセチル基が好ましく、水素原子であることがより好ましい。

なお本明細書において、硫酸基とは、 H 0₃ S—で表される基またはその塩を意味し、ァセチル基とは C H₃C O—で表される基を意味する。

さらに、，！^，！^^ぉょび！^が、水素原子であることが特に好ましい。このように前記式（ I )で表されるビフラボノィドのシアル酸配糖体において、 R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³が水素原子であると、ィンフルェンザウィルスのシァリダーゼ阻害活性および抗インフルエンザウイルス活性を向上させることができる。

X はァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、これらのうちでは、ァセトァミノ基、グリコリルアミノ基が好ましい。本明細書において、ァセトアミノ基は C H₃C O NH—で表される基であり、グリコリルアミノ基は H O C H₂C H (O H) Ν ί—で表される基であり、ァセチルォキシ基とは C H₃C O O-で表される基である。

Aは酸素原子または硫黄原子を示し、これらのうちでは、酸素原子が好ましい。前記式（ I ) で表されるビフラボノイドのシアル酸配糖体の具体例としては、たとえば、下記の化合物が挙げられる。

R^{1 =}水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³ =メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷==水素原子、 =水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1G=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 χ =ァセトァミノ基（N HA c ) であるビブラボノイドのシアル酸配糖体 (34)、（化合物の後ろのカツコ内の数字は、実施例中の化合物の番号を示す。以下本明細書中の化合物について同様である。）

水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R¹⁰ ==水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X = ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糠体 (36)、

R^{1 =}水酸基、 R²=水酸基、 R³ =メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷-水素原子、 R⁸=水素原子、 =水素原子、 R^1G=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X =ァセトァミノ基であるビフラボノイドのシアル酸配糠体、

R¹-水酸基、 =水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷= 水素原子、 =水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビブラボノィドのシァル酸配糖体、

R¹-水酸基、

素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビブラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴-水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシァノレ酸配糖体、

R¹-水酸基、 =水酸基、 R³-水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R^1=:水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶-水素原子、 R⁷= 水酸基、 R⁸=水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=メチルォキシ基、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 =水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷= 水素原子、 R⁸=水酸基、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビブラボノィドのシアル酸配糖体、

水酸基、 =水酸基、 R³=水酸基、 R⁴-水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷= 水酸基、 =水酸基、 =水素原子、 R¹⁽⁾=水素原子、 R¹¹-水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシァノレ酸配糖体、

Ri=水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=メチル基、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 =水素原子、 R¹⁽⁾=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=ァセトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R^]=水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 =水素原子、 R^1G=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X-グリコリルアミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=水酸基、

素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=水酸基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷-水素原子、 -水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=グリコリルォキシ基であるビブラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=7_K酸基、 R⁵=メチルォキシ基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸-水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 A=酸素原子、 X=水酸基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体。

( I I ) 式（I I ) 中、 R¹, R², R³，R⁴, R⁶, R⁷および R⁸はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはダリコシルォキシ基を示す。

このうち、 R¹, R², R³, R⁴としては、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基またはァリルォキシ基が好ましく、水酸基またはメチルォキシ基がより好ましい。さらに、 R¹, R², R³, R⁴のうち、少なくとも 1つは水酸基であり、より好ましくは 1〜 3個が水酸基であることが望ましい。

R¹, R², R³, R⁴のより具体的な組み合わせとしては、たとえば、

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基である場合が挙げられる。

これらのうちでは、 R¹が水酸基、がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基である場合が望ましい。

R⁶, R⁷およびとしては、水素原子、水酸基、メチル基またはメチルォキシ基が好ましく、水素原子であることがより好ましい。

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷がメチルォキシ基、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水酸基、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、が水酸基、

R⁶がメチル基、 R⁷が水素原子、が水素原子

である場合が挙げられる。

R⁹および R¹⁴はそれぞれ独立して水素原子、ナトリゥム原子、力リゥム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、これらのうちでは、 R⁹および R¹⁴はそれぞれ水素原子であることが好ましい。

R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、これらのうちでは、 R¹⁽⁾， R¹¹, R¹², R¹³, ¹⁵, R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子またはァセチル基が好ましく、水素原子であることがより好ましい。

さらに、 R⁹, R¹⁴, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷およぴ R¹⁸が、水素原子であることが特に好ましい。

このように前記式（I I ) で表されるビフラボノイドのシアル酸配糖体において、 R⁹および R¹⁴が水素原子であり、 R^1Q， R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁵， R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸が水素原子であると、ィンフルェンザウィルスのシァリダーゼ阻害活性および抗ィンフルェンザウィルス活性を向上させることができる。

Xおよび Yはそれぞれ独立してァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、これらのうちでは、ァセトァミノ基、グリコリルァミノ基が好ましい。

Aおよび Bはそれぞれ独立して酸素原子または硫黄原子を示し、これらのうちでは、酸素原子が好ましい。

前記式（I I )で表されるビブラボノィドのシアル酸配糖体の具体例としては、たとえば、下記の化合物が挙げられる。

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 =水素原子、 R¹⁽⁾=水素原子、 Rⁿ=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A= B =酸素原子、 X = Y = 7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体 (35)、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²=水素厚子、 R¹³= 水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=7セトァミノ基であるビフラボノイドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 =水素原子、 R¹⁽⁾=水素原子、 Rⁿ=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 Rⁿ=水素原子、 R¹⁸= 水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=7セトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²-水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 =水素原子、 R⁸=水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸= 水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、，

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷-水酸基、 R⁸= 水素原子、 =水素原子、 R^w=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=メチルォキシ基、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、 R"=水素原子、 R¹²= 水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=ァセトァ, ノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 =水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水酸基、 R⁹=水素原子、 R^lfl=水素原子、 R^u=水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、水酸基、 =水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水酸基、 R⁸= 水酸基、 =水素原子、 R¹⁽⁾=水素原子、 R¹¹-水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=7_K酸基、 R⁴=7_酸基、 R⁶=メチル基、 R⁷=水素原子、 R^s=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R^I8= 水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=7セトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R⁹=水素原子、 R^1Q=水素原子、水素原子、 R¹²=水素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 =丫=グリコリルアミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 =水素原子、 R^1Q=水素原子、 R¹¹-水素原子、 R¹²=7 素原子、 R¹³=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 A=B=酸素原子、 X=Y=水酸基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体。

( I I I ) 式（ I I I ) 中、 R¹, R², R³, R⁴, R⁶, R⁷, R⁸および R¹⁹はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 η-プロピルォキシ基、 η-プチルォキシ基、 η-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示す。

このうち、 R¹, R², R³， R⁴， R¹⁹としては、水酸基、ァセチルォキシ基、メチノレオキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-プチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基またはァリルォキシ基が好ましく、水酸基またはメチルォキシ基がより好ましい。さらに、 R¹, R², R³, R⁴, R¹⁹のうち、少なくとも 1つが水酸基であり、より好ましくは 1 ~ 3個が水酸基であることが望ましい。

R¹, R², R³, R⁴, R¹⁹のより具体的な組み合わせとしては、たとえば、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹がメチルォキシ基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹がメチルォキシ基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹が水酸基、

R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹が水酸基、 R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹がメチルォキシ基、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³が水酸基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹がメチルォキシ基、

R¹が水酸基、 R²が水酸基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹が水酸基、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹が水酸基

である場合が挙げられる。これらのうちでは、 R¹が水酸基、 R²がメチルォキシ基、 R³がメチルォキシ基、 R⁴が水酸基、 R¹⁹がメチルォキシ基である場合が好ましい。

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷がメチルォキシ基、 R⁸が水素原子、

R⁶が水素原子、 R⁷が水素原子、 R⁸が水酸基、

R⁶が水素原子、 R⁷が水酸基、 R⁸が水酸基、

R⁶がメチル基、 R⁷が水素原子、 R⁸が水素原子

である場合が挙げられる。

R¹⁴は水素原子、ナトリウム原子、カリウム原子、アンモユウム基またはメチル基を示し、このうちでは、水素原子が好ましい。

R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 R¹⁵， R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子またはァセチル基が好ましく、水素原子であることがより好ましい。さらに、 R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸が、水素原子であることが特に好ましい。このように前記式（I I I ) で表されるビフラボノイドのシアル酸配糖体において、 R¹⁴が水素原子であり、 R¹⁵，R¹⁶，R¹⁷および R¹⁸が水素原子であると、インフルェンザウィルスのシァリダーゼ阻害活性および抗ィンフルェンザウィルス活性を向上させることができる。

Y はァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、これらのうちでは、ァセトァミノ基、グリコリルアミノ基が好ましい。

B は酸素原子または硫黄原子を示し、このうちでは酸素原子であることが好ましい。

前記式（I I I ) で表されるビフラボノイドのシアル酸配糖体の具体例としては、たとえば、下記の化合物が挙げられる。

水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸ =水素原子、 R¹⁹=メチルォキシ基、 B =酸素原子、 Y =ァセトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体 (33)、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 =水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸= 水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Υ-ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糠体、

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、丫=ァセトァミノ基であるビブラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R^1S=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Y=7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 Rⁿ=水素原子、 R¹⁸= 水素原子、 R¹⁹=メチルォキシ基、 B=酸素原子、 ¥=ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 -メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷= 水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Υ-ァセトァミノ基であるビフラボノイドのシアル酸配糖体、

水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素.原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=メチルォキジ基、 B=酸素原子、 Υ-ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=メチルォキシ基、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷= 水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=メチルォキシ基、 B=酸素原子、 Υ-ァセトァミノ基であるビフラボノイドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水酸基、 R⁸= 水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Y=7セトァミノ基であるビフラポノィドのシァル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷-メチルォキシ基、 =水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷= 水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Υ-ァセトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 -水酸基、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶-水素原子、 Rⁿ=水素原子、 R¹⁸=7_k 素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Y=7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

水酸基、 R²=7k酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水酸基、 R⁸= 水酸基、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁰=水素原子、 R =水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Y=7セトァミノ基であるビフラポノィドのシアル酸配糖体、

R¹-水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=メチル基、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷=水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=水酸基、 B=酸素原子、 Y=7セトァミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

R¹⁼水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷= 水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=メチルォキシ基、 B=酸素原子、 Y=グリコリルアミノ基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体、

1^=水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R¹⁴=水素原子、 R¹⁵=水素原子、 R¹⁶=水素原子、 R¹⁷= 水素原子、 R¹⁸=水素原子、 R¹⁹=メチルォキシ基、 B=酸素原子、 Y=水酸基であるビフラボノィドのシアル酸配糖体。

このような前記式 ( I ) 〜（I I I ) で表されるビフラボノィドのシアル酸配糖体は、置換基の種類に応じて塩を形成する場合がある。後述する本発明に係る医薬品またはィンフルェンザ予防剤もしくは治療剤、飲食物またはィンフルェンザ予防飲食物もしくは治療飲食物においては、前記式（I ) 〜（I I I ) で表される化合物の薬学的に許容される塩を使用してもよい。

このような前記式 ( I ) ~ ( I I I ) で表される化合物の塩としては、たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩などの金属塩、アンモニゥム塩などの有機アンモニゥム塩、グリシンなどのアミノ酸塩を挙げることができる。遊離形態の化合物またはその塩のほか、それらの任意の水和物であってもよい。塩の形成は常法により行うことができる。

たとえば、 R⁹および R¹⁴はそれぞれ独立に、ナトリゥム、力リゥムなどとして金属塩、アンモニゥムなどとして有機アンモニゥム塩を形成していてもよい。前記式（I ) 〜（I I I ) で表される化合物は、該式で示した立体構造をとることが好ましいが、これらは不斉炭素を有しており、光学活性体として存在する場合がある。このような光学活性体またはジァステレオマー異性体などの立体異性体、立体異性体の任意の混合物、またはラセミ体などは、いずれも本発明に含まれる。また、前記式（I ) 〜（I I I ) において、たとえば、不斉炭素に結合する C 0₂R⁹と Aとは、その相対的な配置を示したものであって、絶対的な配置を示すものではない。他の不斉炭素における配置についても同様である。

このようなビフラボノィドに由来する構成単位と、シアル酸に由来する構成単位とが結合した、ビフラボノイドのシアル酸配糖体は、たとえば、ビフラポノィド誘導体とシァル酸誘導体をカップリングすることにより製造することができる。このようなカツプリングに用いるシアル酸誘導体の製造方法としては、出発原料として、たとえば、下記式（I V) 中、 R⁹, R^1Q, R¹¹, R¹²， R¹³が水素原子、 Xがァセトァミノ基、グリコリルアミノ基または水酸基、 Lが水酸基であるシアル酸誘導体（I V— 1 ) を例にとって説明する。

まず、下記式（ I V)

で表される化合物（以下「シアル酸誘導体（I v)」ということがある。）のうち、たとえば、市販品等として入手可能な、 R⁹, R^1Q，R^U，R¹², R¹³が水素原子、 Lが水酸基、 Xがァセトァミノ基、グリコリルアミノ基または水酸基、 Lが水酸基であるシアル酸誘導体（I V— 1 ) を、たとえばアルコール等の存在下にエステル化する（メタノールを用いるエステル化により、 R⁹は H→C H₃)。

エステル化反応は、特に限定されず、公知の方法を用いることができる。たとえば、エステル化反応は、過剰のメタノールなどのアルコール中にシアル酸誘導体（I V—1 ) を溶解させ、脱水剤の存在下、通常室温またはその付近の温度条件下、約 5〜 1 0 0時間程度撹拌することにより実施できる。

このようにして、力ルポキシル基がエステル化されたシアル酸誘導体（V I— 2 ) を得ることができる。

次に、得られたエステル化されたシアル酸誘導体（I V— 2 ) の水酸基をァセチル基により保護する。水酸基のァセチル化は、公知の方法により行うことができ、たとえば、ピリジンなどの溶媒中で、シアル酸誘導体（I V— 2) を、ァセチル化試薬と、必要に応じ触媒の存在下に反応させる。ァセチル化試薬としては、無水酢酸、塩化ァセチルなどが挙げられる。触媒としては、 4ージメチルァミノピリジン（DMAP) などが挙げられる。反応は、ァセチル化試薬は、水酸基の数に対して、好ましくは 1. 2〜3当量程度の量を用い、 0〜30°C、通常室温またはその付近の温度条件下、約 5〜 10◦時間程度撹拌することにより実施できる。このようにして水酸基がァセチルイ匕されたシアル酸誘導体（IV— 3) を得ることができる。

さらに、該シアル酸誘導体（IV— 3) を、たとえば、ハロゲン化試薬と触媒の存在下に反応させて、 Lがハロゲン化したシアル酸誘導体（IV— 4) を得ることができる。

ハロゲン化試薬としてはァセチルクロライドなどのハロゲン化ァセチルなどが挙げられる。触媒としては、塩酸ガス、硫酸などが挙げられる。反応は、たとえばシアル酸誘導体（I V— 3) を過剰当量のハロゲン化試薬に溶解し、一 10°C 〜室温の温度条件下、塩酸ガスなどの触媒を加え、約 5〜 1◦ 0時間程度撹拌することにより実施できる。

このようにして、カツプリングに用いることができる、前記式（ I V)の R^R¹¹, R¹², R¹³がァセチル基、がメチル基、 Lがハロゲン原子、 Xがァセトァミノ基、グリコリルアミノ基またはァセチルォキシ基のシアル酸誘導体（I V— 4) を得ることができる。

本発明のビフラポノィドのシアル酸配糖体の製造には下記式（V)

で表されるビフラボノイド誘導体（以下「ビブラポノイド誘導体（V)」ということがある。）を用いることができる。

前記式ビブラポノイド誘導体（V) 中、 R¹, R²，R³, R⁴，R⁶，R⁷および R⁸は、それぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基またはァリルォキシ基を示す。

R²⁰, R²¹は、それぞれ独立して水素原子、メチル基、ァセチル基、ェチル基、 n- プロピル基、 n-ブチル基、 n-ォクチル基、ベンジル基、ァリル基またはグリコシル基を示し、 R²⁰, R²¹の少なくとも 1つは水素原子である。

A、 Bは、それぞれ独立して酸素原子または硫黄原子を示す。

このようなビフラボノイド誘導体（V) は、市販品あるいは天然から分離精製することができる。

また、市販品あるいは天然から単離したビフラボノイド誘導体（V) の官能基- を、常法により変換すれば、所望の官能基を有するビフラボノイド誘導体とすることもできる。

天然物または市販品として入手可能なビフラボノィド誘導体としては、たとえば、下記の化合物が挙げられる。

R^{1 =}水酸基、 R²-メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 =水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹ =メチル基、 A=B=酸素原子であるビフラポノィド誘導体 (19)。

R¹^水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体 (20)。

R¹-水酸基、 =メチルォキシ基、 R³ =メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 =水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2G=メチル基、 R²¹ =水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラポノィド誘導体 (21)。

水酸基、 R²=水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R^2Q=メチル基、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラポノィド誘導体 (22)。

=水酸基、 -水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = 水素原子、 =水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビブラボノィド誘導体。

R¹-水酸基、 R²=7_K酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = 水素原子、 =水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

=水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2t)=メチル基、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹-水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = 水素原子、 =水素原子、 R^2Q=メチル基、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビブラボノィド誘導体。

水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=メチル基、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹^水酸基、 =メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = 水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=メチル基、 A=B=酸素原子であるビブラポノィド誘導体。

R¹^水酸基、 R²-水酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=7_k酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = 水素原子、 R⁸-水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=メチル基、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R^{1 =}水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水酸基、 R⁸ =水素原子、 R^2G =水素原子、 R²¹ =水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹:水酸基、 R²=7j酸基、 R³=メチルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷ = メチルォキシ基、 R⁸=水素原子、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビブラボノィド誘導体。

R^{1 =}=水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水酸基、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹-水酸基、 R²=水酸基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水酸基、 R⁸=水酸基、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラポノィド誘導体。

R^{1 =}水酸基、 R²=メチルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=メチル基、 R⁷ = 水素原子、 =水酸基、 R^2Q=水素原子、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビブラボノィド誘導体。

=水酸基、 R²=ダルコシルォキシ基、 R³=水酸基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、。 =ダルコシル基、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。

R¹ =水酸基、 R²=水酸基、 R³=ダルコシルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 =水素原子、 R⁸=水素原子、 R^2G=ダルコシル基、 R²¹=水素原子、 A=B=酸素原子であるビブラボノィド誘導体。

R¹ =水酸基、 R²=ダルコシルォキシ基、 R³ =ダルコシルォキシ基、 R⁴=水酸基、 R⁶=水素原子、 R⁷=水素原子、 =水素原子、 R^2Q=ダルコシル基、 ¹ =水素原子、 A=B=酸素原子であるビフラボノィド誘導体。このようなビフラボノイド誘導体（V) と、前記シアル酸誘導体（I V— 4) との反応を例にとって、ビフラボノィドのシアル酸配糖体の製造方法を説明する。前記シアル酸誘導体（I V— 4) と前記ビフラポノイド誘導体（V) との反応は、たとえば、溶媒中、塩基の存在下に、前記シアル酸誘導体（I V— 4) と前記ビフラポノイド誘導体（V) とを接触させて得ることができる。

塩基としては、たとえば、水素化アルカリ金属などが挙げられ、水素化アル力リ金属としては、 NaH、 KHなどが挙げられる。

溶媒としては、 N，N-ジメチルホルムアミド（DMF) などのアミド系溶媒、 H MP Aなどを用いることができる。

塩基の量は、ビフラポノィド誘導体に結合させるシアル酸誘導体の個数によるが、たとえば、シアル酸誘導体を 1つ結合させる場合には、塩基は、ビフラボノイド誘導体に対して 1. 2〜1. 8当量の範囲にあることが好ましい。シアル酸誘導体を 2つ結合させる場合には、塩基は、ビフラポノイド誘導体に対して 2. 2〜3. 5当量の範囲にあることが好ましい。

シアル酸誘導体の使用量は、シアル酸誘導体を 1つ結合させる場合には、ビフラボノイド誘導体に対して 1. 2〜1. 8当量の範囲にあることが好ましい。シアル酸誘導体を 2つ結合させる場合には、ビフラポノイド誘導体に対して 2. 2 〜3. 5当量の範囲にあることが好ましい。

反応は、 0〜30° (：、通常室温またはその付近の温度条件下、約 5〜1 00時間程度撹拌することにより実施できる。

なお、前記式（I ) 〜（ I I I) で表されるビブラボノィドのシアル酸配糖体において、 A、 Bが硫黄原子である化合物は、たとえば、前記式（I V) のが硫黄原子を含有する基であるシアル酸誘導体（I V— 5) と、後述する式（V) の R²¹ A—、 R^2Q B—の少なくとも 1つがハ口ゲン原子である化合物とを反応させて得ることができる。

Lが硫黄原子を含有する基であるシアル酸誘導体（I V— 5) は、たとえば、前記シアル酸誘導体（I V— 4) に Ac SK (カリウムチォアセテート）を接触させて得ることができる。

ビフラボノイド誘導体（V) 中、 R²¹A—、 R²⁰B—の少なくとも 1つがハロゲン原子である化合物は、前記ビフラポノイド誘導体（V) において、 R²¹A—、 R B—の少なくとも 1つが水酸基である化合物を、溶媒中、トリフエ-ルホスフィンなどの存在下に、 N B Sなどのハロゲン化剤を反応させて得ることができる。さらに、このようにして得られるビフラボノィドのハロゲン化体と前記シアル酸誘導体（I V— 5 ) とを DMF等の溶媒中、ァミン等の存在下に反応させることにより、前記式（I ) 〜（I I I ) で表されるビフラボノイドのシアル酸配糖体の A、 Bが硫黄原子であるビブラボノィドのシアル酸配糖体を製造することができる。

このようにして得られる本発明に係るビフラポノィドのシアル酸配糖体は、シアル酸由来成分の水酸基部分おょぴカルボキシル基が保護されたシァリルビフラポノィド保護体である。

このようなシァリルビフラボノイド保護体は、さらに、常法により加水分解することにより、ァセチル基を脱保護するとともに、カルボン酸エステル基をカルポキシル基に変換することができる。

このようなシアル酸由来成分の官能基がそれぞれ水酸基あるいはカルボキシル基に変換されたビフラボノィドのシアル酸配糖体（たとえば、 R⁹, R¹⁴が水素原子、 ^。，！^，！^，！^，！^，！^，！^ぉょぴ！^が、水素原子の場合。）またはその塩は、ィンフルェンザウィルスシァリダーゼ阻害活性、抗ィンフルェンザウィルス活性により優れる。

前記水酸基等の官能基を有する天然物等として入手したビブラボノィド誘導体は、該水酸基部分等を官能基変換することにより、種々の誘導体に導いて、シァル酸誘導体とのカップリングに用いることができる。

たとえば、カップリングの原料とした前記ビブラボノイド誘導体（V) について、水酸基部分を常法によりアルキルエーテルィ匕することができる。アルキルェ一テル化は、たとえば、水酸基を有する該ビフラボノイド誘導体を塩基の存在下にハロゲン化アルキル化合物などのアルキル化試薬と反応させることにより実施できる。ハロゲン化アルキル化合物に含まれるアルキル基としては、メチル基、ェチル基、 n—プロピル基、 n—ブチル基、 n—ォクチル基、ペンジル基、ァリル基などが含まれる。該アルキルエーテルィ匕したビフラボノィド誘導体とシアル酸誘導体とのカツプリング反応に対しても、上記カツプリング方法と同様の手法が適用可能である。

さらに、カップリングの原料とした前記ビブラボノィド誘導体（V)について、たとえば、水酸基部分を常法によりアルキル基に変換することもできる。アルキル基としては、たとえば、メチル基などが挙げられる。

アルキル化の方法としては、具体的には、たとえば、ジァゾメタンなどを用いた方法を採用することができる。このようにして、たとえば、前記水酸基部分がアルキル基に変換されたビフラボノィド誘導体を得ることができる。たとえば、 R\ R R R⁴、 R⁶、 R R⁸の少なくとも 1つをメチル基等のアルキル基とすることができる。該アルキル化したビフラポノィド誘導体とシアル酸誘導体との力ップリング反応に対しても、上記カツプリング方法と同様の手法が適用可能である。

本発明に係るビフラボノィドのシアル酸配糖体、特に一般式（I ) 〜（I I I ) で表される化合物またはその塩は、後記する実施例からも明らかなように、優れたィンフルェンザウイルスのシァリダーゼ活性およぴ抗ィンフルェンザゥィルス作用を有するので、この作用を利用した抗インフルエンザウイルス剤等の医薬品として用いることができる。さらに、該化合物を飲食品、特定保健用飲食品、健康飲料、健康食品、栄養食品その他各種タイプの飲食品としても用いることができる。

医薬品として使用する場合、本発明の化合物は、そのまま、或いは慣用の製剤担体と共に、人及ぴ動物に対し、経口、非経口いずれの方法によっても投与することができる。また、本発明の化合物は、各種の剤型、例えば散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠、カプセル剤、アンプル剤等の経口投与剤、皮下、筋肉若しくは静脈注射剤、点鼻剤、吸入剤、座剤等とすることができる。これらの製剤は、化合物単独または賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤化剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、矯味剤、香料、被覆剤等と適宜組み合わせて処方することにより製造することができる。このようにして得られた本発明の抗ィンフルェンザウィルス剤は、患者の年令、体重、症状、投与経路によって異なるが、一般的に成人において、化合物として、 0.6〜300 mg/日、好ましくは 5〜200 mg/日であり、これを通常 1日 3〜4回に分けて投与するのが好適である。

飲食品として使用する場合には、本有効成分である化合物をそのまま使用したり、他の食品ないし食品成分と併用したりして適宜常法に従って使用できる。本有効成分を用いる本発明に係る飲食品は、固体状（粉末、顆粒状その他)、ペースト状、液状ないし懸濁状のいずれでもよいが、甘味料、酸味料、ビタミン剤その他ドリンク剤製造に常用される各種成分を用いて健康ドリンクに製造化することも可能である。

【実施例】

以下、本発明を実施例によって具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。なお、本明細書中、室温とは、好ましくは 2 0〜 3 0 °Cの範囲、より好ましくは 2 5 °C前後の温度範囲を示す。また、一昼夜とは、 2 4時間程度の時間を示す。

[実施例 1 ] ビブラボノィド成分の分離，精製

ィヌガヤ Cephalotaxus drupacea Sieb. et Zucc.) (ィヌガヤ科）葉の室内放置乾燥品 1037.04 gを n-へキサン（"-hexane)， CHC1₃， MeOHの順にそれぞれ室温，一昼夜， 2回ずつ抽出し，その CHC1₃エキスについて図 1に従い分離を行った。その結果 TN-1， TN-2 と仮称した 2つの化合物を 983 mg， 1.62 g単離し，それぞれ了メントフラボン 7, 4'，7，'-トリ- 0-メチノレエーテノレ (amentoflavone 7,4',7"-tri-0-methyl ether) (19)，ギンゲチン（ginkgetin) (20) と同定した。 Ginkgetin (20)は，ィチヨゥ Ginkgo biioha L.) (ィテョゥ科) ， Cephalotaxus koreana, Cephaiotaxus grijfithii, Cephalotaxus harringtonia C.koch (以上，ヌ刃 "f科)， ihxus caspidata Sieb.et Zucc, Taxus caspidata Sieb.et Zucc. var. nana Rehder, Taxus baccata, 力ャ (Torreya nucifera Sieb. et Zucc.) (以上，ィチイ科)， Lonicera japonica (スィカズフ科)， Podocarpus macrophylla (マキ科)， Selaginella moellendorffa (イワヒノ科ノの他 Cal tris canescens, Zamia angustifolia力、らも！) できる。

融点（mp) は、柳本 MP微量融点測定装置を用いて測定し、補正は行わなかつた。紫外吸収（UV) スぺクトルは島津 UV-240装置を、赤外吸収（IR) スぺクトルは日本分光 A-102装置を、質量分析 (MS) は日本電子 JMS-DX302装置を用いて測定した。核磁気共鳴（NMR) スペクトルは、日本電子 GSX-400装置及び日本 's 'ΗΙ) 6 9 '(H-,9 'ZH LS 'VZ = £ 'PP 'Hi) 0Γ8 B.S '^H 2 = £ 'P 'Ηΐ) Si'L Έτ 'ZH VZ = f 'P 'HI) 60·8 '(H-8 '^ZH O'Z = ί 'P 'Ηΐ) 8ん ·9 '(Η_9 '^ΖΗ 0 = ί 'Ρ 'ΗΧ) ζξ,'9 '(Η-£ 's 'ΗΤ) 66·9：9 (⁹P-OS¥LO) ¾HN-H_t ΚΓ99 ^iQlO^zzR^z£D∞J ρορο 'ΠΖΓ99£ S HHH '(Ζ) SSZ '(ΐΐ) 69Ζ £ Ζ '(Ζ) 6ZV '(8) 9Ζξ '(001 '₊Η) 999 :(% Ί^) yui S H ^τι Ό6ΐ7ΐ Όθ9ΐ Ό59Χ Όεβζ 'οοεε：！ ^ "八 ¾ι -ds't) οεε

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も同様である。）

得られた 23 (4.80 g) をピリジン (乾燥） 150 mlに溶かし，無水酢酸 120 ml (1.27 mol)と触媒として 4-ジメチルァミノピリジン（4-dimethylaminopyridine) (DMAP) (18-36 mg, 0.149-0.298 mmol)を加え，空気ガス雰囲気下室温で 24時間撹拌した。反応後，ピリジン臭，酢酸臭を完全に除く目的で反応液をトルエンと共に減圧濃縮した。反応生成物はカラムクロマトグラフィー (CHC1₃ -イソプロパノール系）にて分離，精製し， 1-メチル -2,4,7,8,9-ペンタ- 0-ァセチル- N-ァセチルノイラミン酸 (l-methyl-2,4,7,8,9-penta-0-acetyl-N-acetylneuraminic acid) (24) (6.59 g, 83.2%) を得た。得られた 24 (6.59 g) をァセチルクロライド（Acetyl chloride) 150 mlに溶力し，氷冷下，溶液中に HC1 ガスを 10 分バブルし，室温で 24時間撹拌した。反応後， CHC1₃で共沸し， 2-ク口口- 1-メチル -4,7，8，9-テトラ -(9-ァセチルァセチルノイラミン酸 (2-chloro-l-methyl-4，7,8,9-tetra-0-acetyl- N-acetylneuraminic acid) (25) (6.20 g, 98.4%) を得た。

1-メチノレ- N-ァセチノレノイラミン酸 ( 1 -Methyl-N-acetylneuraminic acid) (23);

IR v_max (KBr) cm"¹: 3350, 2940, 1740, 1640, 1550， 1430, 1370, 1010; positive FABMS m/z (rel. int. ): 324 ([M+H]⁺， 11), 309 (16); 1H-NMR (DMSO- ） δ: 1.72 (1H， d, J = 12.1 Hz), 1.89 (3H, s)， 2.03 (1H， dd, J = 12.6, 4.7 Hz), 3.70 (3H, s)， 3.3-6.5 (13H, m)， 8.18 (1H， d, J = 8.0 Hz), ¹³C-NMR (DMSO- ） δ: 22.4, 48.5, 52.2, 53.0, 63.5, 65.3， 69.0, 69.5, 70.4, 94.8, 170.1, 171.9.

I—メチル -2,4，7，8，9-ペンタ -O-ァセチル- N-ァセチルノイラミン酸

(l-Methvl-2,4,7,8,9-penta-0-acetyl-N-acetvlneuraminic acid) (24);

IR V_max (KBr) cm"¹: 3300, 2900, 1750, 1670， 1550, 1450, 1380, 1230, 1050; positive FABMS m/z (rel. int. %)： 534 ([M+H]⁺, 3), 474 (9)， 414 (34); 1H-NMR (DMSO- ） δ: 1.70 (s, a-NHCOCHs), 1.70 (s, p-NHCOCH₃), 1.94-2.10 (s, a-OCOCBb), 1.94-2.13 (s, -OCOCHs), 1.90 (m)， 2.42 (dd, J = 5.0, 13.5 Hz, -H-3eq), 2.66 (dd, J = 5.0, 12.9 Hz, a-H-3eq), 3.68 (s, p-COOQfc), 3.70 (s， a-COOCHs), 3.97 (m), 4.11 (d, J = 10.5 Hz), 4.26 (ra), 4.95 (m)， 5.05 (m), 5.20 (m), 7.81 (d， J = 9.3 Hz, β-ΝΗ), 7.87 (d, J = 9.3 Hz, -ΝΗ), ¹³C- MR (DMSO- ₆) δ: a 20.4-20.6, 22.5, 35.9, 47.5, 52.7, 61.5， 66.8, 68.6, 68.6, 72.5, 96.3, 167.5, 168.3, 169.1， 169.6, 169.9, β 20.4-20.6, 22.5, 35.6, 47.4, 52.8, 61.3, 66.8, 68.5, 69.1, 71.5, 96.7, 166.0, 168.0， 168.9, 169.0, 169.2, 169.7, 169.9.

2-クロ口- 1-メチル -4，7,8，9-テトラ- 0-ァセチル -N-ァセチルノイラミン酸

(2-Chloro- 1 -methyl-4,7 ,8 ,9-tetra- O-acetyl-N-acetylneuraminic acid) (25);

IR v_max (KBr) cm"¹： 3300, 2860, 1750, 1660, 1540, 1440, 1370, 1220, 1035; positive FABMS m/z (rel. int. ): 510 ([M+H]⁺, 11.7), 492 (21), 474 (8), 450 (7), 432 (12), 414 (55), 372 (9), 252 (7), 196 (7); 1H-NMR (顧 SO- ) δ: 1.72 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.99 (3H, s), 2.01 (6H, s), 2.32 (1H, dd, J = 11.1, 13.9 Hz), 2.69 (1H, dd, J = 4.4, 13.9 Hz), 3.79 (3H， s), 4.01 (2H, m), 4.24 (1H， bd, J = 12.3 Hz), 4.39 (1H， bd, J = 10.7 Hz), 5.06 (m), 5.17 (m), 5.32 (1H, d, J = 11.9 Hz), 7.95 (1H, d, J = 9.5 Hz).

2. シァリルビフラボノィドアセチル保護体の合成（図 4)

ァメントフラボン 7,4',7"- トリ - 0-メチルエーテル ( Amentoflavone 7,4',7"-tri-(9-methyl ether) (19) (500 mg, 0.86 mmol), ギンクゲチン（ginkgetin) (20) (1.0 g， 1.77 mmol), sciadopitysin (21) (1.0 g, 1.72 mmol)をそれぞれジメチルホルムァミド（dimet ylformamide) (DMF) 30 ml に溶かし，水素ィ匕ナトリゥム（sodium hydride) (NaH) (それぞれ、 36.0 mg, 1.50 mmol, 90.0 mg, 3.75 mmol, 40 mg, 1.67 mmol)を加え， 2時間反応後，それぞれに対して、 25 (それぞれ、 600 mg, 1.18 mmol, 2.0 g, 3.92 mmol, 1.0 g, 1.96 mmol)をさらに加え，空気ガス雰囲気下室温で 24時間反応させた。反応終了後，反応液に CHC1₃を加え，飽和 NaCl水溶液および飽和 NaHC0₃ 水溶液で洗浄し，無水 Na₂S0₄で脱水した有機層を減圧濃縮した後， Sephadex LH-20 (Amersham Biosciences), HPLC (SENSHU PAK PEGASIL Silica 60-5, 10φχ250 にて分離し， 19から 29a (198.7 mg, 21.9%), 29b (248.5 mg, 27.4%), 20 から 30a (97.9 mg, 5.3%), 30b (73.4 mg, 4.0%) と 31a (216.5 mg, 8.1 31b (323.5 mg, 12.1%), 21から 32a (234.9 mg, 12.9%), 32b (367.9 mg, 20.2%) を得た。

LSPD (long range selective proton decoupling)法を用いた ¹³C-画 Rによる非経験的な決定法（H. Hon, T. Nakajima, Y. Nishida, H. Ohrui, H. Meguro, Tetrahedron Lett., 29, 6317-6320, 1988) を適用し，検討したところ，これらのシァリルビブラポノィドアセチル保護体のシアル酸の立体化学は全て oc-ァノマーであることが明らかとなつた。

29aと 29b， 30aと 30b， 31aと 31b， 32aと 32bがそれぞれビフラボノィド部分におけるアトロープ異性体であることをそれぞれの CD スぺクトルについて検討することにより明らかにした。なお、 C D (円偏向二色性）は、下記の機種、条件下で測定した。

機種：日本分光 J-720型円二色性分散計（Spectropolarimeter)

条件： Cell length 0.5 cm

Concentration 0.02%

Solvent EtOH

Temperature 20 C

Range 450 nm - 200 nm

Band width 1.0 nm

Resolution 1 nm

Accumulatio 1

Sensitivity 200 mdeg

Response 1 sec

Speed 50 nm/min

29a の CD スぺクトノレについてみると， P-メトキシシンナモイノレ (p-methoxycinnamoyl) 部分に由来する 331 nmに正の第 1 Cotton, 305 nmに負の第 2 Cottonを与えたことから正の励起子カイラリティーを示しており， 2つの遷移モーメントは時計回りに位置していることが明らかになった（図 5)。したがつて，ビブラボノィド部分のフラボン間結合の立体化学については Rであると決定した。また， -メトキシベンゾィル（/nmethoxybenzoyl)部分に由来する 265 nm付近においても 285 nmに正の第 1 Cotton, 270 nmに負の第 2 Cottonを示したことからも立体化学が ?であることを支持しているといえる。

一方， 29b の CD スぺクトルについてみると， P- トキシシンナモイル (/7-methoxycinnamoyl) 部分に由来する 332 nmに負の第 1 Cotton, 305 nmに止の第 2 Cottonを与えたことから負の励起子カイラリテイを示しており， 2つの遷移モーメントは逆時計回りに位置している（図 5)。したがって，ビブラボノイド部分のフラボン間結合の立体化学については Sであると決定した。また，メトキシベンゾィル (p-met oxybenzoyl) 部分に由来する 270 nm付近においても 284 nmに負の第 1 Cotton, 270 nmに正の第 2 Cottonを示したことからも立体構造が Sであることを支持する結果が得られた。

30aの CDスぺクトルについてみると，；;-メトキシシンナモイル部分に由来する 338 nmに負の第 1 Cotton, 309 nmに正の第 2 Cottonを与えたことから負の励起子カイラリティーを示しており， 2つの遷移モーメントは逆時計回りに位置していることが明らかとなった（図 6)。従って，ビフラポノイド部分のフラボン間結合の立体化学については ?であると決定した。

一方， 30bの CDスぺクトルについてみると， P- トキシシンナモイル部分に由来する 341 nmに正の第 1 Cotton, 310 nmに負の第 2 Cottonを与えたことから正の励起子カイラリティーを示しており， 2つの遷移モーメントは時計回りに位置していることが明らかとなった (図 6)。従って，ビフラボノイド部分のフラボン間結合の立体化学については Sであると決定した。また， p-≠トキシベンゾィル部分に由来する 270 nm付近にも 286 nmに正の第 1 Cotton, 272 nmに負の第 2 Cotton を示したことからも立体構造が Sであることを支持する結果が得られた。

31a の CD スぺクトルについてみると， -メトキシシンナモイル部分に由来する 332 nmに正の第 1 Cotton, 305 nmに負の第 2 Cottonを与えたことから正の励起子カイラリティーを示しており， 2つの遷移モーメントは時計回りに位置していることが明らかとなった（図 7)。したがって，ビフラボノイド部分のフラボン間結合の立体化学については Sであると決定した。

—方， 31bの CDスぺクトルについてみると， -メトキシシンナモイル部分に由来する 330 nmに負の第 1 Cotton, 304 nmに正の第 2 Cottonを与えたことから負の励起子カイラリティーを示しており， 2 つの遷移モーメントは逆時計回りに位置していることが明らかとなった（図 7)。従って，ビブラボノイド部分フラボン間結合の立体化学については Rであると決定した。

32aの CDスぺクトルについてみると， -メトキシシンナモイル部分に由来する 337 nmに負の第 1 Cotton, 307 nmに正の第 2 Cottonを与えたことから負の励起子カイラリティーを示しており， 2つの遷移モーメントは逆時計回りに位置していることが明らかとなった（図 8)。したがって，ビフラポノイド部分のフラボン間結合についての立体化学は Rであると決定した。また， -メトキシベンゾィル部分に由来する 270 nm付近においても， 286 nmに負の第 1 Cotton, 270 nmに正の第 2 Cottonを示したことからも立体構造が Rであるということを支持しているといえる.

一方， 32bの CDスぺクトルについてみると， P- トキシシンナモイル部分に由来する 336 nmに正の第 1 Cotton, 308 nmに負の第 2 Cottonを与えたことから正の励起子カイラリティーを示しており， 2 つの遷移モーメントは時計回りに位置していることが明らかとなった（図 8)。したがって，ビフラボノイド部分のフラボン間結合についての立体化学は Sであると決定した。また，/? -メトキシベンゾィル部分に由来する 270 nm付近においても， 280 nmに正の第 1 Cotton, 270 nmに負の第 2 Cottonを示したことからも立体構造が Sであるということを支持している。

以上のことから， 29 と 29b, 30aと 30b, 31aと 31b, 32aと 32bがそれぞれビフラボノィド部分におけるアト口ープ異性体であることが明らかとなった。

(R)-7，4，J，，-トリ- 0-メチル -4，，，-0-(1"，，-メチル-4，"，,7"",8，"，，9""-テトラ -0-ァセチル -N- ァセチルノィラミニル）ァメントフラボン

( (R)-7,4',7"-tri-0-methyl-4，"-0-(l""-methyl- 4"",7""，8，，，，,9""-tetra-0-acetyl-N-acetyl neuraminyl)amentoflavone (29a)

Pale yellow powder; m 162-167°C; UV X_msK (EtOH) (logs): 210 (4.73), 270 (4.66), 320 (4.53); IR v_max (KBr) cm"¹: 3450， 3050, 1760, 1680， 1620, 1510, 1440, 1380, 1230, 1040， 850; positive FABMS m/z (rel. int. %): 1054 ([M+H]⁺, 14)， 565 (10), 535 (4)， 474 (6), 372 (4)， 252 (8); 1H-NMR (DMSO- ） δ: biflavonoid moiety; 6.98 (1H， s, 3-H), 6.33 (1H, d, J = 2.1 Hz, 6-H), 6.73 (1H， d, J = 2.1 Hz, 8-H), 8.09 (1H， d, J = 2.4 Hz, 2'-H), 7.37 (1H, d, J = 8.9 Hz, 5，-H)， 8.21 (1H， dd, J = 8.9， 2.4 Hz, 6'-H), 6.97 (1H, s， 3"-H), 6.67 (1H, s, 6"-H), 7.61 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 7.04 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5，"-H), 12.90 (1H, s, 5-OH), 13.16 (1H, s, 5"-OH), 3.79 (3H， s, 7-OCH₃), 3.82 (3H, s, 4'-OCH₃), 3.71 (3H， s, 7"-OCH₃), sialic acid moiety; 2.07 (IH, m, 3""-H), 2.64 (IH, dd, J = 12.8, 4.6 Hz, 3""-H), 4.77 (IH, dt, J = 11.0, 4.6 Hz, 4""-H), 3.94 (IH, m, 5""-H), 4.43 (IH, d, J = 11.0 Hz, 6""-H), 5.19 (IH, m, 7""-H), 5.19 (1H， m， 8""-H), 4.03 (1H， dd, J = 11.0, 4.0 Hz, 9""-H), 4.15 (IH, dd, J = 11.0, 2.4 Hz, 9""-H), 7.80 (IH, d， J = 9.8 Hz, NH), 3.55 (3H， s, COOCH₃)， 1.93 (3H， OCOCH₃), 1.98 (3H, OCOCH₃), 1.99 (3H， OCOCH3), 2.06 (3H， OCOCH3), 1.72 (3H, s, NHCOCH₃), ¹³C-NM (DMSO- ） δ: biflavonoid moiety; 163.5 (2-C), 104.2*² (3-C), 181.9 (4-C), 161.1 (5-C), 97.9 (6-C), 165.1 (7-C), 92.6 (8-C), 157.2 (9-C), 104.7* ¹ (10-C), 122.4 (l'-C), 130.6 (2，-C), 121.0 (3'-C), 160.3 (4，-C), 112.0 (5，-C)， 128.3 (6'-C), 162.9 (2"-C), 104.1*² (3"-C), 182.2 (4"-C), 161.5 (5"-C), 95.6 (6"-C), 162.6 (7"-C), 104.7*¹ (8"-C), 153.5 (9"-C), 103.7 (10"-C), 125.5 (1"'-C), 127.7 (2"'-C, 6"'-C), 118.8 (3"'-C, 5"'-C), 156.4 (4"'-C), 56.4 (7-OC¾), 55.9*³ (4'-OCH₃), 55.8*³ (7"-OCH₃), sialic acid; 167.7 (1""-C), 99.3 (2""-C), 38.0 (3，，，，-C)， 68.2 (4""-C), 47.6 (5，，，，-C)， 72.8 (6""-C), 66.7 (7""-C), 67.5 (8，，，，-C)， 61.6 (9""-C), 53.0 (COOCH₃), 20.45 (2C， OCOCH₃), 20.47 (OCOCH₃), 20.6 (OCOCH₃), 22.5 (NHCOCH3), 169.1 (OCOCH3), 169.2 (OCOCH3), 169.6 (OCOCH₃), 170.9 (OCOCH3), 169.1 (NHCOCH₃). * *², *³: may be interchanged.

(S)-1A -トリ- O-メチル -4，"-0-(Γ"，-メチル -4"",7，，"，8""，9""-テトラ -0-ァセチル -N- ァセチルノイラミニル）ァメントフラボン ( (y>-7,4，,7，，-tri-(9-methyl-4"，-0-( "，-methyl-4，，"，7，"，，8，"，,9""-tetra- -acetyl-N-acetyl neuraminyl)amento£lavone) (29b)

Pale yellow powder; mp 161-168°C; UV _max (EtOH) (logs): 213 (4.78), 270 (4.73), 320 (4.61); IR v_max (KBr) cm"¹: 3300, 3000, 1760, 1660, 1610, 1510, 1440, 1380， 1350, 1210， 1040， 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 1054 ([M+H]⁺, 13), 565 (5), 414 (12), 252 (4); 1H-NMR (DMSO-J₆) δ: biflavonoid moiety; 6.98 (IH, s， 3-H), 6.33 (1H， d, J - 2.1 Hz， 6-H)， 6.73ひ H, d， J = 2.1 Hz, 8-H), 8.09 (IH, d, J - 2.4 Hz, 2'-H), 7.37 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.21 (IH, dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 6，-H)， 6.97 (IH, s, 3"-H), 6.67 (1H， s, 6"-H), 7.61 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 7.04 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5"，-H)， 12.90 (IH, s, 5-OH), 13.16 (IH, s, 5"-OH), 3.79 (3H， s, 7-OCH₃), 3.82 (3H， s, 4'-OCH₃), 3.71 (3H s, 7"-OCH₃), sialic acid moiety; 2.01 (IH, m, 3""-H), 2.66 (1H dd, J = 12.8, 4.9 Hz, 3""-H), 4.77 (IH, dt, J = 11.0, 4.9 Hz, 4""-H), 3.92 (IH, m, 5""-H), 4.40 (IH, d, J = 10.7 Hz, 6""-H), 5.17 (IH, d, J = 10.7 Hz, 7""-H), 5.13 (IH, m, 8""-H), 3.99 (IH, m, 9""-H), 3.99 (IH, m, 9""-H), 7.78 (1H d, J = 9.8 Hz, NH), 3.60 (3H s, COOCH₃), 1.93 (3H, OCOCH₃), 1.93 (3H OCOCH₃), 1.95 (3H OCOCH₃), 2.08 (3H OCOCH3), 1.70 (3H, s NHCOC¾), ¹³C-匪 R (DMSO- ） 5: biflavonoid moiety; 163.5 (2-C), 103.7 (3-C), 181.8 (4-C), 161.1 (5-C), 97.9 (6-C), 165.1 (7-C), 92.5 (8-C), 157.2 (9-C), 104.7*¹ (10-C), 122.5 (l'-C), 130.6 (2'-C), 121.1 (3'-C), 160.3 (4 - C)， 111.8 (5'-C), 128.3 (6'-C), 162.8 (2"-C), 104.2*¹ (3 - C)， 182.2 (4"-C), 161.4 (5"-C)， 95.6 (6"-C), 162.7 (7"-C), 104.6*¹ (8"-C), 153.5 (9"-C), 104.1*¹ (10"-C), 125.6 (1"'-C), 127.6 (2"'-C, 6"'-C), 119.1 (3" -C, 5"'-C), 156.4 (4 -C), 55.8*² (7-OCH₃), 55.8*² (4'-OCH₃), 55.9*² (7"-OCH₃), sialic acid; 167.6 (1""-C), 99.4 (2""-C), 37.8 (3""-C), 68.3 (4""-C), 47.6 (5""-C), 72.8 (6""-C), 66.5 (7""-C), 67.6 (8""-C), 61.2 (9""-C), 53.1 (COOCH₃), 20.35 (OCOCH₃), 20.37 (OCOCH₃), 20.44 (OCOCH3), 20.6 (OCOCH₃), 22.5 (NHCOCH₃), 169.1 (OCOCH3), 169.2 (OCOCH3), 169.6 (OCOCH3), 169.8 (OCOCH₃), 168.9 (NHCOCH3). * *²: may be interchanged.

00-7,4'-ジ -O-メチル -7"- MT"，-メチル -4 7"",8 " 9""-テトラ -0-ァセチルァセチルノイラミニル）ァメントフラボン ( (R)-7,4 -di-0-methyl-7"- 0-( " -niethyl-4"" 7"",8"" 9""-tetra- O-acetyl- N-ace ylneur aminvDamentoflavone) (30a)

Pale yellow powder; mp 160-166°C; UV _max (EtOH) (logs): 205 (4.61), 270 (4.47), 330 (4.46); IR V (KBr) cm-¹: 3280, 2880 1760, 1660, 1605, 1510, 1440, 1370, 1260, 1220, 1030, 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 1040 ([M+H]+ 6), 567 (23), 535 (4 414 (5); 1H-NMR (DMSO- ) δ: biflavonoid moiety; 7.00 (IH, s, 3-H), 6.38 (IH, d, J = 1.9 Hz, 6-H), 6.76 (IH, d, J = 1.9 Hz, 8-H), 8.16 (IH, d, J = 2.4 Hz, 2'-H), 7.38 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.26 (IH, dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 6'-H), 6.93 (IH, s, 3"-H), 6.96 (1H s, 6"-H), 7.55 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 6.72 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5"'-H), 12.91 (IH, s, 5-OH), 13.15 (IH, s, 5"-OH), 10.33 (IH, bs, 4"'-OH), 3.84 (3H, s, 7-OCH₃), 3.80 (3H, s, 4' OC¾)， sialic acid moiety; 1.94 (1H， m, 3""-H), 2.41 (IH, dd, J = 13.1, 4.9 Hz, 3""-H), 4.73 (IH, dt, J = 10.7, 4.9 Hz, 4""-H), 3.92 (IH, m， 5""-H), 4.27 (IH, m, 6""-H), 5.17 (IH, dd, J = 6.7, 1.5 Hz, 7""-H), 5.28 (IH, dt, J = 6.7, 3.1 Hz, 8""-H), 4.11 (1H， dd, J = 12.2, 6.7 Hz, 9""-H), 4.27 (IH, m, 9""-H), 7.76 (IH, t, J = 9.8 Hz, NH), 3.63 (3H, s, COOCH₃)， 1.84 (3H, OCOCH₃)， 1.99 (3H, OCOCH₃), 2.05 (3H, OCOCH3), 2.07 (3H， OCOCH3), 1.70 (3H， s， NHCOCH3), ¹³C-NM (DMSO- ₆) 5: biflavonoid moiety; 163.6 (2-C), 103.8 (3-C), 181.9 (4-C), 161.2 (5-C), 98.0 (6-C), 165.2 (7-C), 92.7 (8-C), 157.3 (9-C), 104.7 (10-C), 122.1 (l'-C), 130.8 (2，- C)， 120.6 (3，-C)， 160.4 (4，-C), 111.6 (5，-C)， 128.6 (6，-C)， 164.4 (2"-C), 102.4 (3"-C), 182.4 (4"-C), 160.4 (5"-C), 102.9 (6"-C), 156.2 (7"-C), 108.5 (8"-C), 153.6 (9"-C), 106.5 (10"-C), 120.9 (1"'-C), 128.2 (2"'-C， 6"'-C), 115.8 (3"'-C, 5，，，-C), 161.3 (4，，，-C)， 56.0 (7-OCH₃), 55.8 (4， - OCH₃)， sialic acid; 166.9 (1""-C), 100.0 (2""-C), 35.9 (3""-C), 68.4 (4""-C), 47.5 (5""-C), 73.0 ( ，，-C)， 67.1 (7""-C), 68.5 (8，，"-C)， 61.8 (9""-C), 53.1 (COOCH₃), 20.37 (2C， OCOCH3), 20.44 (OCOCH3), 20.5 (OCOCH₃), 22.5 (NHCOCH3), 169.1 (OCOCH3), 169.3 (OCOCH3), 169.4 (OCOCH₃), 170.0 (OCOCH3), 169.1 (NHCOCH3).

( -7，4，-ジ -O-メチル -7"- l"，，-メチル -4""，7，，，，，8""，9""-テトラ -0-ァセチル- N-ァセチルノイラミニル）ァメントフラボン ( (y^ '-di-O-methyl -O-aw-methyl-f' '^wy'-tetra-O-acetyl-N-acetylneur aminyl)amentoflavone) (30b")

Pale yellow powder; mp 176-179°C; UV _max (EtOH) (logs): 208 (4.71), 268 (4.61), 330 (4.61); IR _max (KBr) cm"¹: 3300， 2880, 1750, 1660， 1610, 1510, 1440, 1370, 1220, 1040, 840; positive FABMS m/z (rel. int. ): 1040 ([M+H]⁺, 7), 567 (30)， 535 (6); 1H-NMR (DMSO- ） δ: biflavonoid moiety; 6.97 (IH, s, 3-H), 6.36 (IH, d, J = 2.1 Hz, 6-H), 6.70 (IH, d， J = 2.1 Hz, H-8), 8.14 (IH, d, J = 2.4 Hz, 2，-H), 7.38 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.24 (IH, dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 6，-H)， 6.93 (IH, s, 3"-H), 6.92 (IH, s, 6"-H), 7.54 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 6.73 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5"'-H), 12.88 (IH, s, 5-OH), 13.16 (1H， s, 5"-OH), 10.30 (IH, bs, 4"'-OH), 3.82 (3H, s， 7-OCH₃), 3.79 (3H， s， 4'-OCH₃), sialic acid moiety; 1.90 (1H， m, 3""-H), 2.39 (IH, dd, J = 13.1, 4.9 Hz,

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CS -7，4，,4"，-トリ - O-メチル -7"-0-( "，-メチル -4，，",7，"，，8，，，，,9，，，，-テトラ -0-ァセチル- N- ァセチルノイラミェノレ）ァメントフラボン ( ( -7,4，，4"，- tri-0-methyl-7"-0- (1""-1^ ¥1-4"",7""，8""，9""461^- O-acetyl-N-acetyl neuraminvDamentoflavone) (32b)

Pale yellow powder; m 161-165°C; UV _max (EtOH) (logs): 205 (4.46), 268 (4.31), 325 (4.30); IR v_max (KBr) cm^-1: 3230, 2860, 1750, 1660, 1610, 1510, 1440, 1370, 1210, 1030, 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 1054 ([M+H]⁺, 11), 581 (50), 549 (10); 1H-NMR (DMSO- ) 5: biflavonoid moiety; 6.98 (IH, s， 3-H), 6.38 (IH, d, J = 1.9 Hz, 6-H), 6.70 (IH, d, J = 1.9 Hz, 8-H), 8.14 (IH, d， J = 2.4 Hz, 2，-H), 7.41 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5，-H), 8.27 (IH, dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 6，-H)， 7.03 (IH, s, 3"-H), 6.97 (1H， s, 6"-H), 7.66 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 6.96 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5"'-H), 12.89 (IH, s, 5-OH), 13.13 (IH, s, 5"-OH), 3.84 (3H, s, 7-OCH₃), 3.82 (3H, s, 4'-OC¾), 3.77 (3H, s, 4"'-OCH₃), sialic acid moiety; 1.90 (IH, m, 3""-H), 2.41 (IH, dd, J = 12.8, 4.9 Hz, 3""-H), 4.75 (1H， dt, J = 10.7, 4.9 Hz, 4""-H), 3.93 (IH, m, 5""-H), 4.34 (lH,, d, J = 11.6, 6""-H), 5.18 (IH, d, J = 6.7 Hz, 7""-H), 5.31 (IH, dt, J = 6.7, 3.1 Hz, 8""-H), 4.14 (IH, dd, J = 12.2, 6.7 Hz, 9，，，，-H)， 4.30 (1H， dd, J = 12.2, 3.1 Hz, 9，，，，-H)， 7.79 (IH, t, J = 9.5 Hz, NH), 3.69 (3H， s, COOCH₃), 1.83 (3H， s， OCOCH₃), 2.01 (3H, s, OCOCH3), 2.07 (3H, s, OCOCH3), 2.07 (3H, s, OCOCH3), 1.72 (3H, s, NHCOCH3), ¹³C-NMR (DMSO- e) δ: biflavonoid moiety; 163.5 (2-C), 103.8 (3-C), 181.9 (4-C), 161.1 (5-C)， 98.1 (6-C), 165.2 (7-C), 92.5 (8-C), 157.3 (9-C), 104.7 (10-C), 122.3 (l'-C), 130.8 (2'-C), 120.5 (3'-C), 160.1 (4'-C), 111.6 (5，-C)， 128.7 (6'-C), 163.9 (2"-C), 103.6 (3"-C), 182.4 (4"-C), 160.5 (5"-C), 102.2 (6"-C), 156.3 (7"-C), 108.3 (8"-C), 153.6 (9"-C), 106.5 (10"-C), 122.5 (1"'-C), 128.0 (2"'-C, 6"'-C), 114.6 (3"'-C, 5"'-C), 162.5 (4"'-C)， 55.9 (7-OCH₃), 55.8 (4'- OCH₃)， 55.5 (4"'-OCH₃), sialic acid moiety; 167.2 (1""-C), 100.1 (2""-C), 35.8 (3""-C), 68.4 (4""-C), 47.5 (5""-C), 73.1 (6""-C), 67.2 (7""-C), 68.6 (8""-C), 61.9 (9""-C), 53.3 (COOCH₃), 20.4 (2C, OCOCH3), 20.45 (OCOCH₃), 20.51 (OCOCH3), 22.5 (NHCOCH3), 169.2 (OCOCH₃), 169.3 (OCOCH3), 169.5 (OCOCH₃), 170.0 (OCOCH3), 169.2 (NHCOCH3).

3. シァリルビブラボノィドアセチル保護体の脱保護（図 4)

29a (100.2 mg, 0.095 mmol), 29b (100.0 mg， 0.095 mmol), 32a (100.0 mg, 0.095 mmol), 32b (100.0 mg, 0.095 mmol)をそれぞれ pureMeOH 5 mlに溶かし，ナトリウムメトキシド (NaOMe) を pH > 8になるように加え (pH は pH試験紙で確認した)，室温で 2時間撹拌し，さらに ¾0 5 mlを加えて 24 時間撹拌した。反応終了後， MeOH を減圧乾燥し，新たに H₂0 5 mlを加え，そこに Dowex 50W- X2 (2.0 g)を加えて 20 分撹拌した。その後， Dowex 50W- X2を吸引ろ過により除き， ¾0を減圧乾燥し，シァリルビフラボノィド 33a (75.1 mg, 90.6%), 33b (81.6 mg, 98.7%) および 36a (84.6 mg, 100.0%), 36b (84.9 mg, 100.0%) を得た。

—方， 30a (57.5 mg, 0.055 mmol), 30b (65.3 mg, 0.063 mmol), 31a (100.0 mg, 0.066 mmol), 31b (100.0 mg, 0.066 mmol)はそれぞれ pure MeOH 5 mlに溶かし，ナトリウムメトキシド (NaOMe) を pH > 8になるように加え（pHは pH試験紙で確認した)，室温で 2〜9 hr撹拌し，さらに H₂0 5 mlを加えて 24時間撹拌した。反応後， 3.5% HC1で中和し，溶媒を減圧乾燥した後， HP-20で塩を除き， HPLC (逆相， SENSHU PAK ODS-4251-SH, 10φχ250 ιηπι, 80% MeOH) にて精製し，シァリルビフラポノィド 34a (45.7 mg, 96.4%), 34b (41.1 mg, 76.3%) およぴ 35a (52.0 mg, 68.5%), 35b (60.8 mg, 80.1%) を得た。

(R)-4，"-0-(N-ァセチルノイラミニル) -7,4，, 7，，-トリ -0-メチルァメントフラボン

(( ^^"'- N-acetylneuraminyD- ^^j -tri-O-inethylamentoflavone) (33a)

Pale yellow powder; m 191°C(dec); UV (MeOH) (logs): 210 (4.92), 270 (4.83)， 325 (4.76); JR V_max (KBr) cm"¹: 3350, 2950, 1660, 1610， 1510, 1440, 1380， 1340, 1260, 1210, 1160, 1130, 1030， 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 872 ([M+H]⁺, 1), 581 (10); 1H-NMR (DMSO- ) δ: biflavonoid moiety; 6.96 (1H， s, 3-H), 6.30 (IH, bs, 6-H), 6.74 (IH, s， 8-H), 8.04 (IH, d, J = 1.8 Hz, 2'-H), 7.41 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5，-H), 8.20 (1H， m, 6，-H), 6.92 (IH, s, 3"-H), 6.65 (IH, s, 6"-H), 7.49 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 7.19 (2H， d, J = 8.9 Hz, 3"，-H， 5，，，-H)， 12.89 (1H， s, 5-OH), 13.20 (1H， s, 5"-OH), 3.78 (3H, s, 7-OCH₃), 3.75 (3H， s， 4，-OC¾)， 3.80 (3H, s， 7" - OC¾)， sialic acid moiety; 1.56 (1H， t, J = 11.9 Hz, 3-H""), 2.83 (1H， dd, J = 11.9， 4.9 Hz, 3-H""), 3.58 (IH, m, 4-H""), 3.38 (IH, m, 5- H"，，)， 3.74 (IH, m, 6-H""), 3.32 (IH, m, 7-H""), 3.61 (IH, m， 8-H""), 3.43 (1H， m, 9-H，，，，)， 3.64 (IH, m, 9-H""), 8.35 (1H， bs, NH), 5.27 (1H， bs, OH), 4.70 (IH, d, J = 3.1 Hz, OH), 4.30 (IH, bs, OH), 1.89 (3H， s, NHCOCHs), ¹³C-NMR (DMSO-rf₆) δ: biflavonoid moiety; 163.5 (2-C), 103.9 (3-C), 181.9 (4-C), 161.1 (5-C), 98.1 (6-C), 165.2 (7-C), 92.7 (8-C), 157.3 (9-C), 104.7 (10-C), 122.4 (l'-C), 130.8 (2，-C)， 121.3 (3，- C)， 160.5 (4，-C), 111.8 (5，-C), 128.4 (6'-C), 163.9 (2，，-C)， 102.5 (3"-C), 182.2 (4"-C), 161.5 (5"-C), 95.5 (6"-C), 165.5 (7"-C), 104.5 (8"-C), 153.4 (9"-C), 104.0 (10"-C), 121.1 (1"'-C), 128.1 (2"'-C, 6"'-C), 115.8 (3"，-C, 5"'-C), 161.2 (4"'-C), 56.0 (7-OCH₃), 56.0 (4，-OC¾)， 56.5 (7"-OC¾)， sialic acid moiety; 168.8 (1""-C), 101.9 (2"，，- C)， 42.6 (3""-C), 66.8 (4"，，-C)， 52.9 (5""-C), 73.7 (6""-C), 69.0 (7""-C), 71.6 (8""-C), 63.4 (9""-C), 22.4 (NHCOCH₃), 172.3 (NHCOCH3).

CS)-4"，- 0-(N-ァセチルノイラミニル) -7，4，,7"-トリ -<9-メチルァメントフラボン

(( )-4^,"-0-(N-acetylneuraminvl')-7,4\7"-tri-0-methvlaiTientoflavone) (33b)

Pale yellow powder; mp 184°C(dec); UV (MeOH) (logs): 207 (4.86)， 270 (4.74)， 325 (4.67); IR v_max (KBr) cm"¹: 3400, 2950, 1660, 1600， 1500, 1440, 1380, 1340, 1260, 1200, 1160, 1120, 1020, 840; positive FABMS m/z (rel. int. ): 872 ([M+H]⁺, 1), 581 (12); 1H- MR (DMSO- ) δ: biflavonoid moiety; 6.93 (IH, s, 3-H), 6.31 (IH, bs, 6-H), 6.73 (1H， bs, 8-H), 8.05 (IH, d, J = 2.4 Hz, 2，-H), 7.39 (1H， d, J = 8.9 Hz, 5，- H), 8.20 (IH, m, 6'-H), 6.92 (IH, s, 3"-H), 6.65 (IH, bs, 6"-H), 7.51 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6，"-H), 7.18 (2H， d, J = 8.9 Hz, 3"，-H， 5"，-H)， 12.89 (1H， s, 5-OH), 13.16 (IH, s， 5"-OH), 3.78 (3H， s, 7-OCH₃), 3.78 (3H, s, 4'-OC¾), 3.80 (3H， s, 7"-OCH₃), sialic acid moiety; 1.63 (1H， t， J = 11.9 Hz, 3-H""), 2.77 (IH, dd, J = 11.9, 4.6 Hz, 3-H""), 3.61 (IH, m, 4- H，"，)， 3.52 (IH, m, 5-H""), 3.72 (IH, m, 6-H，，")， 3.32 (IH, m, 7-H""), 3.59 (IH, m, 8-H""), 3.42 (IH, m, 9-H""), 3.63 (IH, m, 9 - H"")， 8.20 (IH, bs, NH), 5.18 (IH, bs, OH), 4.67 (IH, bs, OH), 4.23 (IH, bs, OH), 1.89 (3H， s， NHCOCH₃), ¹³C-NMR (DMSO- ） δ: biflavonoid moiety; 163.2^a) (2-C), 104.0^b) (3-C), 181.8 (4-C), 161.1 (5-C), 97.9 (6-C), 165.0 (7-C), 92.6 (8- C)， 157.2 (9-C), 104.7^C) (10-C), 122.5 (l'-C), 130.7 (2'-C),

121.1 (3，-C)， 160.3 (4，-C)， 111.7 (5'-C), 128.4 (6，-C), 163.4^a) (2"-C), 103.8^b) (3"-C),

182.2 (4"-C), 161.4 (5"-C)， 95.5 (6"-C), 162.4 (7"-C), 104.5^c) (8"-C), 153.4 (9"-C)， 104.0^b) (10，，- C)， 124.3 (1"'-C), 126.9 (2，"-C， 6"，- C), 120.4 (3"'-C, 5"'-C), 158.2 (4"'-C), 55.9^d) (7-OCHs), 55.9^d) (4，-OC¾)， 56.3^d) (7"-OCH₃), sialic acid moiety; 168.9 (1""-C), 101.6 (2""-C), 41.8 (3""-C), 66.6 (4""-C), 52.5 (5""-C), 73.9 (6""-C), 68.7 (7""-C), 71.4 (8""-C), 63.1 (9""-C), 22.5 (NHCOCH3), 172.1 (NHCOCH₃). a), b), c), d): may be interchanged.

(RW,-0-(N-ァセチルノイラミニル）-7,4，-ジ -0-メチルァメントフラボン

((j?)-7"-Q-(N-acetylne iraminyl)-7,4'-di-0-niethylamentoflavone) (34a)

Pale yellow powder; mp 224°C (dec); UV _max (MeOH) (logs): 205 (4.58), 268 (4.44), 328 (4.42); IR V_max (KBr) cm"¹: 3400, 2950, 1650, 1600, 1500, 1440, 1370, 1250, 1160, 1110, 1020, 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 857 ([M+H]⁺, 1)， 567 (2); 1H- MR (DMSO- ₆) δ: biflavonoid moiety; 6.99 (IH, s, 3-H), 6.34 (IH, d, J = 2.1 Hz, 6-H), 6.76 (1H， d，J = 2.1 Hz, 8-H), 8.05 (IH, d, J = 2.1 Hz, 2，-H)， 7.35 (IH, d， J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.18 (IH, dd， J = 8.9, 2.1 Hz, 6'-H), 6.80 (1H， s, 3"-H), 7.34ひ H, s, 6"-H), 7.50 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2，，，-H, 6"'-H), 6.71 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5"'-H), 12.97 (IH, bs, 5-OH), 12.97 (1H， bs, 5"-OH), 3.83 (3H， s, 7-OCH₃), 3.79 (3H, s, 4'-OCH₃), sialic acid moiety; 1.46 (IH, t, J = 11.9 Hz, 3-H""), 2.75 (IH, dd, J = 11.9, 4.9 Hz, 3-H""), 3.59 (IH, m， 4-H，"，)， 3.40 (1H， m, 5-H""), 3.71 (IH, m, 6-H""), 3.31ひ H, m， 7-H""), 3.67 (IH, m, 8-H""), 3.42 (IH, m, 9-H""), 3.61 (IH, m, 9-H""), 8.30 (IH, bs, NH), 6.25 (1H， bs, OH), 5.14 (IH, bs, OH), 4.72 (IH, s, OH), 4.14 (1H， bs, OH), 1.89 (3H, s, NHCOCH3), ¹³C-NMR (DMSO- ) δ: biflavonoid moiety; 163.9 (2-C), 103.9 (3-C), 181.9 (4-C), 161.0 (5-C), 98.3 (6-C), 165.1 (7-C), 92.4 (8-C), 157.4 (9-C), 104.8 (10-C), 122.1 (l'-C), 131.0

£) ( ( Cg))) p3，， () {¾，8712.5NHC. a b 7C 763.192OH0CH 172.2N-""

p

3 ¾ oo

£ C)3 (£)，3NH.3HCO 172 CHNHQ

() () () ( ()，，)， ()，，， 6998,C6.4C.C 6252573.6673.09C2.4C8C 67------""""""""""""

y () ()3， () (，)，3，C7OH 594 moit5. O sialic acide:C3CC0.2241.7H 12---""""

) ( ()， ( ())，，p 10C 1 56.02Cr8.02C3.8CC 114C 1256-- -- - -""ミ"。

( ())) (， (， ()) (，， .80C 102.14.679C4C0102.03.2 65C 1C 10856.2--.---""""""

()) ( ()，) ()， () ( (，)，2 C 13 C2C518.23C1.4 C2102.73.8C. 561632C----"""

g tひ Int-erslaaed (2C, NHCOCH3), 172.4 (NHCOCH3), 172.3 (NHCOCH3). a), b): may be interchanged.

CR)-7",4'，，-ジ -6KN-ァセチルノイラミニル )-7，4'-ジメチルァメントフラボン

((R)-7' 4'"-di-(9-(N-acetylneuraminyl)-7,4'-di- 9-niethvlamentoflavone) (35b)

Pale yellow powder; 194°C (dec); UV _max (EtOH) (loge): 207 (4.73)， 270 (4.59)， 325 (4.55); IR v_max (KBr) cm"¹: 3400， 2940, 1650， 1610， 1500, 1440， 1370， 1340， 1280,1260, 1240， 1160, 1110, 1020, 950, 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 1149 ([M+H]⁺, 1), 567 (1); 1H-NMR (DMSO- ） 5: biflavonoid moiety; 6.96 (IH, s, 3-H), 6.33 (IH, d, J = 2.1 Hz, 6-H), 6.76 (IH, d, J = 2.1 Hz, 8-H), 7.99 (IH, d, J = 2.1 Hz, 2'-H), 7.38 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.17 (1H， dd, J = 8.9, 2.1 Hz, 6'-H), 6.91 (1H， s, 3"-H), 7.34 (IH, s, 6"-H), 7.51 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 7.18 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3，，，- H， 5"'-H), 12.93 (IH, s, 5-OH), 12.90 (IH, s, 5"-OH), 3.83 (3H， s, 7-OCH₃), 3.80 (3H, s, 4'-OCH₃), sialic acid moiety; 1.54 (IH, t, J = 11.6 Hz, 3""-H), 2.80 (IH, dd, J = 12.8， 4.3 Hz, 3""-H), 3.58 (IH, m, 4""-H)， 3.42 (IH, m, 5""-H), 3.69 (IH, m, 6""-H), 3.30 (1H， m, 7""-H), 3.56 (IH, m, 8""-H), 3.64 (1H， m， 9""-H), 3.42 (1H， m, 9""-H), 1.54 (IH, t, J = 11.6 Hz, 3""'-H), 2.80 (IH, dd, J = 12.8, 4.3 Hz, 3""'-H), 3.58 (IH, m, 4""'-H), 3.42 (IH, m, 5""'-H), 3.69 (IH, m, 6""'-H), 3.30 (IH, m, 7""'-H), 3.66 (IH, m, 8""'-H), 3.64 (IH, m, 9"，，，- H)， 3.42 (IH, m, 9""'-H), 8.41 (IH, bs, NH), 8.41 (IH, bs, NH), 6.14 (IH, bs, OH), 5.33 (IH, bs, OH), 4.78 (IH, bs, OH), 4.72 (IH, bs, OH), 4.28 (IH, bs, OH), 1.88 (3H， s, NHCOCHs), 1.87 (3H, s, NHCOCH3), ¹³C-NMR (DMSO- ） δ: biflavonoid moiety; 164.0 (2-C), 104.0 (3-C), 181.9 (4- C), 161.0 (5-C), 98.4 (6-C), 165.2 (7-C), 92.3 (8-C), 157.5 (9-C), 104.8 (10-C), 122.3 (l '-C), 131.0 (2'-C), 121.5 (3，-C)， 160.4 (4，-C)， 111.6 (5'-C), 128.3 (6，-C)， 163.4 (2"-C), 103.4 (3"-C)， 182.3 (4"-C)， 160.0 (5"-C), 102.2 (6"-C), 158.7 (7"-C), 106.3 (8"-C), 153.3 (9"-C), 104.7 (10"-C), 123.8 (1"'-C), 126.9 (2"'-C, 6"'-C), 120.2 (3"'-C, 5"'-C), 158.9 (4"'-C), 55.9 (7-OCH₃), 56.0 (4，-OC¾), sialic acid moiety; 168.7 (1""-C), 102.2 (2，"，-C)， 41.6 (3""-C), 66.7 (4""-C), 53.0 (5""-C), 73.7 (6""-C), 68.7 (7""-C), 71.2 (8""-C), 62.9 (9""-C), 168.9 (1""'-C), 102.3 (2"'"-C), 42.4 (3""'-C), 66.8 (4""'-C), 53.0 (5""'-C), 73.8 (6""'-C), 68.7 (7"'"-C), 71.6 (8"，，，-C), 63.1 (9""'-C), 22.4 (NHCOCH3), 22.4 (NHCOCH₃), 172.3 (NHCOCH₃), 172.4 (NHCOCH3). )- 7"-0イ N-ァセチルノイラミニル )-7,4，,4"，-トリメチルァメントフラボン

((j?)-7"-( -(N-acetvlneuraminvl)-7,4\4"'-tri-C>-methylamentoflavone) (36a)

Pale yellow powder; mp 206°C (dec); UV _max (MeOH) (logs): 206 (4.88), 269 (4.80), 325 (4.73); IR V_max (KBr) cm—¹: 3400, 2950, 1660, 1600, 1500， 1440, 1370, 1350, 1260, 1180, 1160， 1120, 1030， 840; positive FABMS m/z (rel. int. %): 872 ([M+H]⁺, 1), 581 (12); 1H-NMR (DMSO-J₆) 6: biflavonoid moiety; 6.99 (IH, s, 3- H), 6 35 (IH, bs, 6-H), 6.75 (IH, bs, 8-H), 8.08 (IH, bs, 2，-H), 7.37 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.22 (IH, d, J - 8.9 Hz, 6'-H), 6.97 (IH, s, 3"-H), 7.18 (IH, s, 6"-H), 7.64 (2H, d, J = 8.5 Hz, 2"'-H, 6"'-H), 6.95 (2H, d, J = 8.5 Hz, 3"'-H, 5"'-H), 12.92 (IH, s, 5- OH), 13.01 (IH, s, 5"-OH), 3.83 (3H， s, 7-OCH₃), 3.80 (3H， s, 4，-OC¾), 3.76 (3H, s, 4"'-OCH₃), sialic acid moiety; 1.67 (IH, t, J = 11.9 Hz, 3""-H), 2.57 (IH, m, 3""-H), 3.65 (IH, m, 4""-H), 3.61 (1H， m, 5""-H), 3.80 (IH, m， 6""-H), 3.36 (IH, m, 7""-H), 3.65 (IH, m, 8""-H), 3.65 (IH, m， 9""-H), 3.45 (IH, m， 9""-H), 8.10 (IH, d, J = 6.4 Hz, NH), 5.08 (IH, bs, OH), 4.68 (IH, bs, OH), 4.24 (IH, bs, OH), 1.89 (3H, s， NHCOCH3), ¹³C-NMR (DMSO- ） 6: biflavonoid moiety; 163.6^a) (2-C), 103.9 (3-C), 181.9 (4-C), 161.1 (5-C), 98.2 (6-C), 165.2 (7-C), 92.5 (8-C), 157.4 (9-C), 104.8 (10-C), 122.2 (l'-C), 130.9 (2， - C), 121.1 (3，- C)， 160.1 (4，- C)， 111.6 (5'-C), 128.4 (6，-C), 163.7^a) (2"-C), 103.4 (3，，-C)， 182.3 (4"-C), 160.4 (5"_:C), 102.2 (6"-C), 157.8 (7"-C), 107.2 (8"-C), 153.5 (9"-C), 105.4 (10"-C), 122.6 (1"'-C), 127.9 (2"'-C, 6"'-C), 114.5 (3"'-C, 5"'-C), 162.3 (4"'-C), 56.0 (7-OCH₃), 55.9 (4'-OCH₃), 55.5 (4"'-OCH₃), sialic acid moiety; 168.6 ひ"" -C), 101.1 (2""-C), 40.4 (3""-C), 66.3 (4""-C), 52.3 (5""-C), 74.4 (6""-C), 68.7 (7""-C), 71.0 (8""-C), 63.2 (9""-C), 22.6 (NHCOCH3), 171.9 (NHCOCH3). a): may be interchanged.

(^-T'-O-jN-ァセチルノイラミニル) -7，4'，4"，-トリ- 0-メチルァメントフラボン

((₁S^-7"-0-(N-acetvlneuraminvl)-7^^,4"^,-tri-Q-methvlamentoflavone) (36b)

Pale yellow powder; mp 200°C (dec); UV _max (MeOH) (logs): 206 (4.86), 270 (4.78), 325 (4.71); IR V_max (KBr) cm"¹: 3400, 2950, 1650, 1610, 1510, 1440, 1370， 1340， 1260, 1180, 1160， 1110， 1030, 840; positive FABMS m/z (rel. int. ): 872 ([M+H]⁺, 1), 581 (15); 1H-NMR (DMSO- ） S: biflavonoid moiety; 7.02 (1H， s, 3-H), 6.30 (IH, d, J = 1.8 Hz, 6-H), 6.87 (IH, d, J = 1.8 Hz, 8-H), 8.57 (IH, bs, 2'-H), 7.36 (IH, d, J = 8.9 Hz, 5'-H), 8.18 (IH, d, J = 8.9 Hz, 6'-H), 6.93 (IH, s, 3"-H)， 7.11 (IH, s, 6"-H), 7.65 (2H, d, J = 8.9 Hz, 2"'-H, 6"，-H), 6.98 (2H, d, J = 8.9 Hz, 3"'-H, 5，，，-H), 12.90 (1H， s, 5-OH), 12.93 (IH, s, 5"-OH), 3.86 (3H, s， 7-OCH₃), 3.78 (3H， s, 4，-OCH₃), 3.78 (3H, s， 4，"-OCH₃)， sialic acid moiety; 1.38 (1H， t, J = 11.9 Hz, 3，，，，-H)， 2.77 (IH, m, 3'"，- H)， 3.55 (1H， m, 4""-H), 3.40 (IH, m, 5""-H), 3.89 (IH, d, J = 5.2 Hz, 6""-H), 3.34 (IH, m, 7""-H), 3.72 (1H， m, 8""-H), 3.45 (IH, m, 9""-H), 3.65 (1H， m， 9""-H), 8.21 (IH, bs, NH), 4.95 (1H， bs, OH), 4.64 (IH, d, J = 3.7 Hz, OH), 4.26 (IH, bs, OH), 1.88 (3H， s, NHCOCH3), ¹³C-NMR (DMSO-Je) δ: biflavonoid moiety; 163.8 (2-C), 103.5 (3-C), 182.0 (4-C), 161.1 (5-C), 97.9 (6-C), 165.1 (7-C), 92.8 (8-C), 157.3 (9-C), 104.7 (10-C), 122.2 (l'-C), 132.2 (2'-C), 121.2 (3'-C)， 160.1 (4，-C), 111.3 (5'-C), 127.9 (6'-C), 163.4 (2"-C), 103.3 (3"-C), 182.3 (4"-C), 159.9 (5"-C), 102.9^a) (6"-C), 159.0 (7"-C), 106.8 (8"-C), 153.1 (9"-C), 105.2 (10"-C), 122.7 (1"'-C), 127.9 (2"，- C， 6，"-C), 114.6 (3"'-C, 5"'-C), 162.3 (4"'-C), 55.9 (7-OCH₃), 55.8 (4，-OCH₃)， 55.5 (4，"-OCH₃)， sialic acid moiety; 168.4 (1""-C), 103. l^a) (2""-C), 42.4 (3""-C), 66.8 (4""-C), 52.9 (5""-C), 73.9 (6""-C), 68.7 (7""-C), 71.5 (8""-C), 63.1 (9""-C), 22.5 (NHCOCH₃), 172.2 (NHCOCH₃). a): may be interchanged. 図 9に合成されたシァリルビフラボノィドの構造を示す。

[実施例 3 ] ィンフルェンザウィルスシァリダーゼ阻害活性

植物から単離したビフラボン 4種（19, 20, 21, 22)及ぴ有機合成したビフラボンのシァノレ酸配糖体 19種 [Gin- Neu-l-(R) (34a), Gin-Neu-2-(S) (35a), Gin-Neu-l-(S) (34b), Gin-Neu-2-(R) (35b), Gin-NeuAc-1 (30a), Gin-NeuAc-2 (31a), Gin-NeuAc-3 (30b), Gin-NeuAc-4 (31b), Gin-NeuAc-di(Mix) (31aと 31bの混合物)、 TNl-Neu-1 (33a), TNl-Neu-2 (33b), TNl-Neu-Mix (33a と 33b の混合物）、 TN-l-NeuAc-1 (29a), TN-l-NeuAc-2 (29b), Sci-Neu-1 (36a), Sci-Neu-2 (36b), Sci-Neu(Mix) (36 と 36bの混合物)、 Sci-NeuAc-1 (32a), Sci-NeuAc-2 (32b)]について、終濃度 0.2 g/mL、 1 g/mL、 10 g/mL及ぴ 100 g/mLにおけるィンフルェンザウィルス A/PR/8/34 (HlNl亜型）、 A/Guizhou/54/89 (H3N2亜型）、 B/茨城 /2/85 のシァリダーゼに対する阻害活性を、基質として 4-MU-NeuAcを、酵素としてィンフルェンザ HAワクチンを用い、それぞれの至適 pHにおいて測定した。

A/PR/8/34シァリダーゼ阻害活性の結果を図 10に、 A/Guizhou/54/89シァリダーゼ阻害活性の結果を図 11に、 B/茨城 /2/85シァリダーゼ阻害活性の結果を図 12に示す。

A/PR/8/34ウィルスのシァリダーゼに対して、終濃度 100 μg/mLでは、検討した試料のうち Sci-Neu- 2、 Gin-Neu- 1-(R)、 Gin- Neu- 2-(S)、 Gin-Neu-1-(S)、 Gin-Neu- 2-(R) が 80%以上の阻害活性を示した。また、終濃度 10 g/mLにおいても、 Sci- Neu-2、 Sci-Neu(Mix)、 Gin-Neu- 1-(R)、 Gin-Neu- 1-(S)、 Gin-Neu-2- (R)が 70%»以上の阻害活性を示した。終濃度 10 gl Lにおいて比較すると、検討した試料のうち、 Sci-Neu-2 及び Gin-Neu-1- (R)が最も高い阻害活性を示し、 50%阻害濃度（IC₅₀) は、ともに 5 g/mLであつ 7こ。

A/Guizhou/54/89 ウィルスのシァリダーゼに対して、終濃度 10 pg/mLの場合、 Sci-Neu-2、 Gin-Neu- 1-(R)、 Gin-Neu-2-(S)、 Gin-Neu- 1-(S)、 Gin- Neu-2-(R)が 80%以上の阻害活性を示した。また、終濃度 1 g/mLでは、 Sci- Neu-2、 Gin-NeuAc-3、 Gin- NeuAc-4、 Gin-Neu- 1-(R)、 Gin-Neu-2- (S)、 Gin-Neu-l-(S)の 6つの試料が約 50% の阻害活性を示した。終濃度 1 g/mLにおいて比較すると、検討した試料のうち、 Sci-Neu-2及ぴ Gin-Neu-l-(R)が最も高い阻害活性を示し、 IC₅₀は、ともに 1 g/mL であった。

B/茨城 /2/85 ウィルスのシァリダーゼに対して、終濃度 100 g/mL の場合、 Sci-Neu-2, TN1-Neu-Mix、 Gin-Neu- 1-(R)_N Gin-Neu- 1-(S)が 80%以上の阻害活性を示した。終濃度 10 xglm では、 6種類の試料が 50%以上の活性を示し、 Sci-Neu-2 が 65%と高い活性を示した（IC₅₀ = 7 g/mL)。

[実施例 4 ] In vitro抗インフルェンザウイルス活性

実施例 3と同じ試料（植物から単離したビフラボン 4種及び有機合成したビブラボンのシアル酸配糖体 19種）について、 in vitro抗インフルエンザウイルス活性を測定した。すなわち、 96-well培養プレートで培養した MDCK (Madin-Darby canine kidney) 細胞にトリプシン（3 g/mL) 存在下、インフルエンザウイルス A/PR/8/34 (H1N1亜型）を 0.001 MOI (multiplicity of infection;感染多重度）で感染させ、同時に試料（終濃度 12.5 g/mL) を添加した。これを 59¾ C0₂条件下、 37°Cで 3日間培養した。抗インフルエンザウイルス活性の指標として、培養上清のウィルス量をウィルスの持つシァリダーゼ活性で測定した。

細胞毒性に関しては、抗インフルエンザウイルス活性測定の場合と同様に、 96-well培養プレートで培養したィンフルェンザウィルス非感染の MDCK細胞に、上記と同様にして試料を添加した。これらを 5% C0₂条件下、 37°Cで 3日間培養し、細胞の生存率を MTT法で測定した。

結果を図 13に示す。検討した試料のうち、ギンゲチン（ginkgetin) (20)とィソギンゲチン（isoginkgetin) (22)には細胞毒性が認められたが、他の試料には細胞毒性は認められなかった。溶媒のジメチルスルホキシド（DMSO) を基準として、細胞毒性が認められなかった試料の中では、 Sci- Neu-1、 Sci- Neu- 2、 TNl-Neu- 1、 TNl-Neu-2、 TNl-Neu-Mix、 Gin-Neu-l-(R)、 Gin- Neu-2-(S)、 Gin-Neu-l-(S)、 Gin-Neu-2-(R)の 9種に 4 5 %以上の培養上清中のシァリダーゼ活性の低下が認められ、ィンフルェンザウィルスの増殖抑制活性が示された。

以上の結果より、ビフラポノイドをシアル酸配糖体とすることにより、基となつたビフラボンよりも高い in vitro抗ィンフルェンザウィルス活性を示すとともに、細胞毒性も低下することが明らかとなった。

[実施例 5 ] In vivo抗インフルェンザゥィルス活性

マウス馴化インフルエンザウイルス A/PR/8/34 原液（50%マウス致死量（LD₅₀) = 10⁴·⁸³)を 0.1% ゥシ血清アルブミンを含むリン酸緩衝生理食塩水 (PBS)で 10⁴·⁵ 倍に希釈し (2 X LD₅₀)，ウィルス希釈液を調製した。 BALB/cマウス（雌性， 7週齢） (日本クレア）をァモパルビタールナトリウム溶液（11 mg/mL生理食塩水） 0.25 mL の腹腔内投与により麻酔し，ウィルス希釈液 20 を経鼻接種することにより感染させた。実施例 2と同様に調製した化合物 [Gin-Neu- 1-(R) (34a)、 Gin-Neu-l-(S) (34b)、 Gin-Neu-2-(R) (35b)、 Gin-Neu-2-(S) (35a) ] を生理食塩水溶液 (1 mg/mL) とし，ウィルス接種 5分前に 1回 0.5 mg kgの用量でァモバルビタール麻酔下にマウスに経鼻投与した。コント口ール群には化合物溶液の代りに生理食塩水を経鼻投与した。インフルエンザウイルス感染後 21日間マウスの生存率を観察し，コントロール群との比較により化合物（Gin-Neu-1-(R)、 Gin-Neu-l-(S), Gin-Neu-2-(R)、 Gin-Neu-2-(S)) の in vivo抗ィンブルエンザウィルス活性の評価を行つた。結果を図 14に示す。図 14から以下のことが明らかである。

生理食塩水を経鼻投与したコントロール群のマウスはウィルス接種 8 日目から死亡し始め， 11 日目から 21 日目までの生存率は 22%であった。

これに対し，化合物（Gin-Neu-l-(R)) を経鼻投与したマウスでは 10日目から 16 日目までの生存率が 75%で， 21 日目においても 62.5% のマウスが生存しており，コントロール群と比べ，統計的に有意な生存率の上昇および生存日数の延長が認められた（p = 0.0385、 Kaplan-Meier法の Logrankテスト）。

また，化合物（Gin-Neu-2-(S)) を経鼻投与したマウスでは 10 日目から 14 日目までの生存率が 89%で， 21日目におけるマウスの生存率は 44%であり，コント口ール群と比べ，統計的に生存率の上昇おょぴ生存日数の延長傾向が認められた（p = 0.0523) o

さらに，化合物（Gin- Neu-1- (S)) を経鼻投与したマウスでは 8日目から 10日目までの生存率が 89%， 10日目から 14日目までが 78%で， 21 日目における生存率は 56%であり，コントロール群と比べ，統計的に生存率の上昇および生存日数の延長傾向が認められた（p = 0.0714)。

化合物（Gin-Neu-2-(R)) を経鼻投与したマウスでは 10 日目から 14日目までの生存率が 56%で、 21 日における生存率は 44%であり，コントロール群と比べ，生存率の上昇および生存日数の延長が認められた。

これらの結果を平均生存日数でグラフにしたものが図 15である。その結果、コントロール群では平均生存日数が 10.9日であった。

これに対し、 Gin-Neu-l-(R)を投与したマウスでは平均生存日数が 17.3日であり、コントロール群と比べ生存日数が 6.4日延長しており、統計的に有意であった（p = 0.0277) o

また、 Gin-Neu-l-(S)を投与したマウスでは平均生存日数が 16.2 日であり、コント口ール群と比べ生存日数が 5.3日延長しており、統計的に延長傾向が認められた (p = 0.0555)。

さらに、 Gin-Neu-2-(S)を投与したマウスでは平均生存日数が 15.7 日であり、コントロール群と比べて生存日数が 4.8日延長しており、統計的に延長傾向が認められた（p = 0.0851)。 Gin-Neu- ²-(S)を投与したマウスでは、平均生存日数が 14.3 日とコントロール群より 3.4日の延長が認められた。

これらの結果から，化合物（Gin-Neu-1-(R)、 Gin-Neu-1-(S)、 Gin-Neu-2- (R；)、 Gin-Neu-2-(S))は in vivo の系においても抗インフルエンザウイルス活性を示すことが明らかとなった。

[実施例 6 ] 硫黄原子を含有するビブラボノィドのシアル酸配糖体の製造

(1) シアル酸 SAc体の合成

実施例 2で合成したシアル酸誘導体 5) (5.32 g) を CH₂C1₂ (dry) 60 ml に溶かし， AcSK (カリウムチォアセテート（potassium thioacetate) ) (3.5 g) をァノレゴン雰囲気下， 18時間攪拌した。反応終了後，反応液を CHC1₃で抽出し，飽和 NaCl水溶液及び飽和 NaHC0₃水溶液で順次洗浄し，有機層を無水 Na₂S0₄で脱水後，減圧濃縮した。これをシリカゲル力ラムクロマトグラフィー（CHCl₃-MeOH) で精製することにより，前記式（IV) の R¹⁰， R¹¹, R¹², R¹³がァセチル基、 R⁹がメチル基、 L が SAc基、 Xがァセトァミノ基のシアル酸誘導体（IV-5) (メチル -4,7,8,9-テトラ -0- ァセチル -2-S-ァセチノレ - N-ァセチルノィラミネート ( methyl-4,7,8,9- tetra-0-acetyl-2- 5¹- acetyl-N-acetylneuraminate) (37) ) を（3.62 g, 63 )得た。

(2) ビブラボノィド誘導体（Br体）の合成

ビフラボノィド誘導体（V) のうち、 R²¹A, R² の少なくとも一つが水酸基である化合物を DMF (dry) に溶かし，トリフエニルホスフイン（triphenylphosphine) (1 当量)， NBS (N-プロモスクシンィミド）ひ〜 2当量）を加えて，アルゴン雰囲気下， 18時間攪拌する。反応終了後，反応液を CHC1₃で抽出し，飽和 NaCl水溶液及び飽和 NaHC0₃水溶液で順次洗浄し，有機層を無水 Na₂S0₄で脱水後，減圧濃縮する。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー又は HPLCで精製することにより， R²¹A, R²⁰Bの少なくともひとつが Brのビフラポノィド誘導体（V) の Br体が得られる。

C3)配糖体の合成

ビフラボノィド誘導体（V) の Br体及ぴ前記シアル酸誘導体（IV- 5) (1-2当量）を DMF (dry) に溶かし，ジェチルァミン（diethylamine) (0.5-1.0当量）を加え，ァルゴン雰囲気下， 18時間攪拌する。反応終了後，反応液を CHC1₃で抽出し，飽和 NaCl水溶液及ぴ飽和 NaHC0₃水溶液で順次洗浄し，有機層を無水 Na₂S0₄で脱水後，減圧濃縮する。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー又は HPLCで精製することにより，目的とする配糖体の保護体が得られる。

これらを MeOH (dry) に溶かし， NaOMe (2~3当量）を加え， 4時間攪拌後， H₂0 (10 ~15当量 =NaOMe量の 2倍量）を加え，アルゴン雰囲気下， 18時間攪拌する。反応終了後， 2N HC1で中和し， Sephadex LH-20 (MeOH)または HP-20 (H₂0→MeOH ) で塩を取り除き， ODS-HPLCで精製することで，目的とする配糖体が得られる。産業上の利用可能性

本発明によれば，ビフラボノィドのシアル酸配糖体は， in vitroおよび in vivoの系において抗インフルエンザウイルス活性を示し，しかも天然物化合物から誘導される化合物であり安全性も高く，インフルエンザの予防ないし治療薬として有用であるばかりでなく，ィンフルェンザの予防ないし治療用飲食品としても利用することができる。

Claims

請求の範囲

1 . ビブラポノィドのシアル酸配糖体。

2 . 前記ビフラボノイドのシアル酸配糖体が、下記一般式（1 )、 ( I I ) または（I I I ) のいずれかの式で表される化合物またはその塩であることを特徴とする請求項 1に記載の化合物：

(式（I ) 中、 R¹, R², R³, R⁴，，R⁶, R⁷および R⁸は、それぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはグリコシルォキシ基を示し、 R⁹は、水素原子、ナトリゥム原子、カリウム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R^1Q, R¹¹, R¹²および R¹³はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 X はァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 Aは酸素原子または硫黄原子を示す。）、

( I I )

(式（ I I ) 中、 R¹, R²， R³, R⁴, R⁶, R⁷および R⁸はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはダリコシルォキシ基を示し、 R⁹および R¹⁴はそれぞれ独立して水素原子、ナトリウム原子、カリウム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷およぴ R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 Xおよび Yはそれぞれ独立してァセトァミノ基、グリコリルァミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 Aおよび Bはそれぞれ独立して酸素原子または硫黄原子を示す）、

(I I I)

(式（ I I I )中、 R¹, R², R³, R⁴, R⁶, R⁷,R⁸およぴ R¹⁹はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、水酸基、ァセチルォキシ基、メチルォキシ基、ェチルォキシ基、 n-プロピルォキシ基、 n-ブチルォキシ基、 n-ォクチルォキシ基、ベンジルォキシ基、ァリルォキシ基またはダリコシルォキシ基を示し、 R¹⁴は水素原子、ナトリゥム原子、カリゥム原子、アンモニゥム基またはメチル基を示し、 R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷および R¹⁸はそれぞれ独立して水素原子、硫酸基またはァセチル基を示し、 Y はァセトァミノ基、グリコリルアミノ基、水酸基またはァセチルォキシ基を示し、 B は酸素原子または硫黄原子を示す)。

3. 前記式 (I) 〜（I I I) 中、 R⁹, R¹⁰,^¹,!^²,!^³,^⁴,^⁵,^⁶,^⁷および R¹⁸が水素原子であることを特徴とする請求項 2に記載の化合物。

4. 請求項 1〜 3のいずれかに記載の化合物を有効成分とする医薬品。

5. 請求項 1〜 3のいずれかに記載の化合物を有効成分とするインフルエンザ予防剤または治療剤。

6. 請求項 1〜 3のいずれかに記載の化合物を有効成分とする飲食品。

7. 請求項 1〜 3のいずれかに記載の化合物を有効成分とするィンブルエンザ予防または治療用の飲食品。