WO2022173042A1 - サイトカインストーム抑制用医薬組成物 - Google Patents

サイトカインストーム抑制用医薬組成物 Download PDF

Info

Publication number
WO2022173042A1
WO2022173042A1 PCT/JP2022/005709 JP2022005709W WO2022173042A1 WO 2022173042 A1 WO2022173042 A1 WO 2022173042A1 JP 2022005709 W JP2022005709 W JP 2022005709W WO 2022173042 A1 WO2022173042 A1 WO 2022173042A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lps
syndrome
administered
group
administered group
Prior art date
Application number
PCT/JP2022/005709
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
升三 西田
正寛 椿
朋也 武田
元三 田邉
克輝 高島
敏生 森川
Original Assignee
学校法人近畿大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 学校法人近畿大学 filed Critical 学校法人近畿大学
Priority to US18/276,114 priority Critical patent/US20240115589A1/en
Priority to JP2022580708A priority patent/JPWO2022173042A1/ja
Priority to EP22752864.3A priority patent/EP4292593A1/en
Publication of WO2022173042A1 publication Critical patent/WO2022173042A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection

Definitions

  • the present invention relates to COVID-19, cytokine release syndrome, CAR (chimeric antigen receptor)-T therapy-induced cytokine release syndrome, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD (Graft-versus - Compositions, pharmaceutical compositions, and food compositions that are effective in preventing, treating, or alleviating cytokine storm, which is a cause of death in host disease (graft versus host disease), systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu arteritis, etc. and agents.
  • CAR chimeric antigen receptor
  • COVID-19 (abbreviation for Corona virus disease 2019) is a disease caused by SARS-CoV-2 (acronym for Severe acute respiratory syndrome corona virus 2). Critically ill patients with this disease develop acute respiratory distress syndrome and acute lung injury.
  • TNF ⁇ Tumor necrosis factor ⁇
  • IL-6 interleukin 6
  • Inflammatory cytokines such as TNF ⁇ and IL-6 are secreted from macrophages, B cells, monocytes, etc., and are associated with COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome by CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytosis. It is released in large amounts by diseases such as syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, and Takayasu arteritis.
  • cytokine storm causes acute respiratory distress syndrome, disseminated intravascular coagulation syndrome, acute circulatory failure, multiple organ failure, and the like, and is one of the causes of death.
  • NIK is a serine/threonine kinase that plays a role in both the canonical and non-canonical NF- ⁇ B pathways, but is essential in the non-canonical NF- ⁇ B signaling pathway and phosphorylates IKK ⁇ . This partially degrades NF- ⁇ Bp100 and releases NF- ⁇ Bp52. By forming a heterodimer with RelB, NF- ⁇ Bp52 translocates into the nucleus and expresses inflammatory cytokine genes such as TNF ⁇ and IL-6.
  • the canonical NF- ⁇ B pathway activates the IKK ⁇ , IKK ⁇ , and IKK ⁇ complexes to form heterodimers of NF- ⁇ Bp65 and NF- ⁇ Bp50, which translocate into the nucleus, leading to TNF ⁇ and IL- Regulates gene expression of inflammatory cytokines such as 6.
  • LPS Lipopolysaccharide
  • NF- ⁇ B pathway classical and non- Promoting activation of the canonical NF- ⁇ B pathway promotes the production of inflammatory cytokines such as TNF ⁇ and IL-6 in B cells and macrophages.
  • drugs that suppress classical and non-classical NF- ⁇ B pathway activation by NIK via LPS etc. and inhibit the production of inflammatory cytokines are COVID-19, cytokine release syndrome, CAR-T therapy Cytokine release syndrome, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, acute respiratory distress syndrome in Takayasu arteritis, disseminated intravascular coagulation syndrome, Acute circulatory failure, suppression of multiple organ failure, COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome by CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic It may reduce mortality in vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu arteritis, etc.
  • Cytokine storm is a symptom that also occurs in other diseases.
  • Patent Document 1 discloses a cytokine storm inhibitor containing histidine-rich glycoprotein as an active ingredient.
  • the disclosed cytokine storm inhibitor has an action of suppressing at least two or more cytokines selected from IL-6, TNF- ⁇ , and IL-10.
  • Patent Document 2 Japanese Patent Laid-Open No. 2012-20953 describes spiramycin or josamycin (leucomycin A3), or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient for prevention of fulminant inflammation and/or Or therapeutic agents are disclosed.
  • This prophylactic and/or therapeutic agent for fulminant inflammation is considered to be an agent for prophylaxis and/or treatment of fulminant inflammation caused by influenza infection (preferably H5N1 or H1N1).
  • agents that suppress canonical and non-canonical NF- ⁇ B pathway activation by NIK may be useful in COVID-19, cytokine release syndrome , Cytokine storm caused by CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu arteritis, etc.
  • it is highly expected to reduce the number of deaths by avoiding acute respiratory distress syndrome, disseminated intravascular coagulation, acute circulatory failure, multiple organ failure, and the like.
  • the present inventors searched for a material that suppresses the cytokine storm, found that substances having a xanthone skeleton (including new substances) were effective, and completed the present invention.
  • the pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm according to the present invention is characterized by containing at least one of the compounds of formulas (1) to (4) as an active ingredient.
  • the pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm according to the present invention is COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome caused by CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD. , systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu's arteritis, etc., which is one of the causes of death.
  • cytokine release syndrome COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome due to CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu arteritis Improving the cytokine storm caused by such factors will also improve the patient's survival rate. Furthermore, since the cytokine storm inhibitor according to the present invention can be administered orally, it contributes to the improvement of the tight medical field.
  • 1 is a graph showing the results of examining the ability of each compound to suppress TNF ⁇ mRNA production when mouse B cells were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the ability of each compound to suppress IL-6 mRNA production when mouse B cells were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the ability of each compound to suppress TNF ⁇ mRNA production when mouse macrophages were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the ability of each compound to suppress IL-6 mRNA production when mouse macrophages were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the TNF ⁇ secretion inhibitory effect of each compound when mouse B cells were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the IL-6 secretion inhibitory effect of each compound when mouse B cells were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the TNF ⁇ secretion inhibitory effect of each compound when mouse macrophages were stimulated with LPS.
  • 1 is a graph showing the results of examining the IL-6 secretion inhibitory effect of each compound when mouse macrophages were stimulated with LPS.
  • Fig. 10 is a graph showing the results of examining the survival rate 48 hours after administration of each reagent to mice followed by administration of LPS.
  • 2 is a graph showing the amount of TNF ⁇ produced in the serum of mice administered with each reagent and then LPS administered 2 hours later.
  • 2 is a graph showing the amount of IL-6 produced in the serum of mice administered with each reagent and then LPS administered 2 hours later.
  • cytokine storm suppression means exhibiting the effect of suppressing the production of TNF ⁇ or IL-6.
  • the compounds according to the present invention are represented by formulas (1) to (4) having a xanthone skeleton.
  • the "compound according to the present invention” may refer to at least one of the following four compounds.
  • Formula (1) is 1,3,6,7-tetrahydroxyxanthone, hereinafter referred to as "Noratriol".
  • Norachiliol is a known substance represented by CAS number 3542-72-1.
  • Formula (2) is 1,2′,3′,4′,6′-penta-O-propionyl mangiferin, hereinafter referred to as “mangiferin 8a”.
  • Formula (3) is 2′,3′,4′,6′-tetra-O-propionyl mangiferin (hereinafter referred to as “M9”).
  • Formula (4) is 2′,3′,4′,6′-tetra-O-butyrylmangiferin (hereinafter referred to as “M14”).
  • M14 2′,3′,4′,6′-tetra-O-butyrylmangiferin
  • R 1 to R 8 represent functional groups.
  • These compounds according to the present invention can be used as pharmaceutical compositions for suppressing cytokine storm. Its mechanism of action is thought to be that it inhibits NIK in the intracellular transduction pathway and suppresses NF- ⁇ B from IKK.
  • the compound according to the present invention like mangiferin, is a relatively low-molecular-weight compound, is highly soluble in water, and can be taken orally.
  • the pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm according to the present invention contains at least one of the above four compounds according to the present invention as an active ingredient. It may also contain other pharmaceutically acceptable ingredients.
  • the pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm according to the present invention can exert its effect by oral administration. Therefore, it can be provided as an internal medicine.
  • a powdery pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm can be formulated into capsules, granules, powders, tablets, and the like, and provided.
  • additives such as binders, lubricants, disintegrants, coloring agents, flavoring agents, preservatives, antioxidants, and stabilizers are added to prepare capsules, granules, powders, and tablets. It can be manufactured by a conventional method.
  • the cytokine storm suppressing pharmaceutical composition according to the present invention can be administered by intravenous, subcutaneous, or intramuscular injection.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated into external preparations such as liquids, ointments, creams, gelling agents, patches, and aerosols, and administered parenterally.
  • external preparations such as liquids, ointments, creams, gelling agents, patches, and aerosols, and administered parenterally.
  • water, a lower alcohol, a solubilizer, a surfactant, an emulsion stabilizer, a gelling agent, an adhesive, and other necessary base ingredients can be blended.
  • Additives such as vasodilating agents, adrenocortical hormones, keratolytic agents, moisturizing agents, bactericidal agents, antioxidants, cooling agents, fragrances, and pigments may be added as appropriate.
  • the compound according to the present invention can be provided as a food composition or agent. That is, even if the compound according to the present invention is ingested as a food composition, it exhibits the same effect as the pharmaceutical composition for suppressing cytokine storm according to the present invention.
  • the agent includes supplements and additives.
  • Food compositions or agents include, for example, candy, gum, jelly, biscuits, cookies, rice crackers, bread, noodles, fish and livestock meat products, tea, soft drinks, coffee drinks, milk drinks, whey drinks, lactic acid beverages,
  • foods with health claims such as foods with specified health uses and foods with nutrient function claims stipulated in the food with health claims system of the Ministry of Health, Labor and Welfare.
  • dietary supplements (supplements), feeds, food additives, etc. are also included in processed foods or agents.
  • the food composition according to the present invention can be prepared by adding the above four compounds to the ingredients of these food compositions or agents.
  • the addition of the compound according to the present invention to the food composition or agent may be said to be added as an active ingredient.
  • the food composition or agent according to the present invention can be said to be a food composition or agent labeled as being for cytokine storm suppression.
  • Mangiferin 8a was synthesized as follows. 1,3,2′,3′,4′,6,6′,7-octa-O-propionylmangiferin (M7) (5.06 g, 5.68 mmol), ammonium acetate (6.7 g, 87.0 mmol) ), methanol (160 mL) and water (20 mL) was stirred at room temperature for 6 hours. Methanol was distilled off from the reaction solution by concentration under reduced pressure, and the residue was diluted with ethyl acetate (100 mL). The mixture was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was purified using column chromatography [CHCl 3 /CH 3 OH (20:1)] to give the title compound (3.89 g 95%) as a pale yellow solid.
  • Mangiferin 8a is represented by formula (2).
  • Norachiliol was synthesized according to the method of Non-Patent Document 1.
  • Norachiliol is a known substance represented by CAS No. 3542-72-1 and is commercially available, so it may be purchased.
  • Norachiliol was synthesized as follows. That is, 2,4,5-trimethoxybenzoic acid (Compound II) was treated with thionyl chloride according to the method described in the literature (Non-Patent Document 1) to obtain 2,4,5-trimethoxybenzoic acid chloride (Compound III). rice field. Next, the obtained compound (compound III) and 1,3,5-trimethoxybenzene (compound IV) undergo Friedel-Crafts reaction to give 2-hydroxy-2′,4,4′,5,6′- Pentamethoxybenzophenone (Compound V) was obtained.
  • the extract was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered through a folded filter paper to remove the desiccant, and the filtrate was evaporated under reduced pressure to obtain a crude product.
  • Example 1 Effect of suppressing TNF ⁇ mRNA expression in B cells Using mouse B cells, the inhibitory effects of compounds on TNF ⁇ mRNA expression involved in cytokine storm were examined.
  • Mouse B cells were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M norathyrilol, 1 ⁇ M M9 and 1 ⁇ M M14 were added to the B cells, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 4 hours. After culturing for 4 hours, the cells were collected, RNA was extracted, and TNF ⁇ mRNA expression was measured by Real Time PCR. The results are shown in FIG.
  • the horizontal axis shows the treatment of each drug
  • the vertical axis shows the TNF ⁇ for mRNA of the housekeeping gene GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase). It shows the ratio of mRNA of .
  • a control was prepared by adding only 0.5% DMSO in PBS used for dissolving the reagent. 10 ⁇ g/mL LPS was administered to the LPS administration group, LPS and mangiferin 8a were administered together to the mangiferin 8a administration group, LPS and norachiryol were administered to the norachiriol administration group, LPS and M9 were administered together.
  • a group administered with LPS and M14 is called an M9-administered group
  • a group administered with LPS and M14 in combination is called an M14-administered group.
  • the LPS-administered group showed enhanced expression of TNF ⁇ mRNA. This reproduces the state of causing a cytokine storm.
  • a decrease in LPS-induced TNF ⁇ mRNA expression was confirmed in all of the mangiferin 8a-administered group, the noracilliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group.
  • Example 2 Effect of suppressing IL-6 mRNA expression in B cells Mouse B cells were used to examine the compound's suppression of IL-6 mRNA expression involved in cytokine storm. The experimental procedure is the same as in Example 1. The results are shown in FIG.
  • the horizontal axis indicates the treatment with each drug
  • the vertical axis indicates the ratio of IL-6 mRNA to the housekeeping gene GAPDH mRNA.
  • a control was prepared by adding only 0.5% DMSO in PBS used for dissolving the reagent. 10 ⁇ g/mL LPS was administered to the LPS administration group, LPS and mangiferin 8a were administered together to the mangiferin 8a administration group, LPS and norachiryol were administered to the norachiriol administration group, LPS and M9 were administered together.
  • a group administered with LPS and M14 is called an M9-administered group, and a group administered with LPS and M14 in combination is called an M14-administered group.
  • the LPS-administered group showed enhanced expression of IL-6 mRNA. This reproduces the state of causing a cytokine storm.
  • a decrease in the expression of IL-6 mRNA was confirmed in all of the mangiferin 8a-administered group, the noracliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group.
  • Example 3 Effect of suppressing TNF ⁇ mRNA expression in macrophages Using mouse macrophages, the inhibitory effects of compounds on TNF ⁇ mRNA expression involved in cytokine storm were examined.
  • Mouse macrophages were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M noratilol, 1 ⁇ M M9 and 1 ⁇ M M14 were added to the macrophages, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 4 hours. After culturing for 4 hours, the cells were collected, RNA was extracted, and TNF ⁇ mRNA expression was measured by Real Time PCR. The results are shown in FIG.
  • the horizontal axis indicates the treatment with each drug
  • the vertical axis indicates the ratio of TNF ⁇ mRNA to GAPDH mRNA, which is a housekeeping gene.
  • a control was prepared by adding only 0.5% DMSO in PBS used for dissolving the reagent. 10 ⁇ g/mL LPS was administered to the LPS administration group, LPS and mangiferin 8a were administered together to the mangiferin 8a administration group, LPS and norachiryol were administered to the norachiriol administration group, LPS and M9 were administered together.
  • a group administered with LPS and M14 is called an M9-administered group, and a group administered with LPS and M14 in combination is called an M14-administered group.
  • the LPS-administered group showed enhanced expression of TNF ⁇ mRNA. This reproduces the state of causing a cytokine storm.
  • a decrease in LPS-induced TNF ⁇ mRNA expression was confirmed in all of the mangiferin 8a-administered group, the noracilliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group.
  • Example 4 Effect of suppressing IL-6 mRNA expression in macrophages
  • Mouse macrophages were used to examine the suppression of IL-6 mRNA expression involved in cytokine storm by compounds.
  • the experimental procedure is the same as in Example 3. The results are shown in FIG. Referring to FIG. 4, the horizontal axis indicates the treatment with each drug, and the vertical axis indicates the ratio of IL-6 mRNA to the housekeeping gene GAPDH mRNA.
  • a control was prepared by adding only 0.5% DMSO in PBS used for dissolving the reagent. 10 ⁇ g/mL LPS was administered to the LPS administration group, LPS and mangiferin 8a were administered together to the mangiferin 8a administration group, LPS and norachiryol were administered to the norachiriol administration group, LPS and M9 were administered together.
  • a group administered with LPS and M14 is called an M9-administered group, and a group administered with LPS and M14 in combination is called an M14-administered group.
  • the LPS-administered group showed enhanced expression of IL-6 mRNA. This reproduces the state of causing a cytokine storm.
  • a decrease in the expression of IL-6 mRNA was confirmed in all of the mangiferin 8a-administered group, the noracliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group.
  • Example 5 Effect of suppressing TNF ⁇ production in B cells Using mouse B cells, the inhibitory effect of compounds on TNF ⁇ production involved in cytokine storm was examined.
  • Mouse B cells were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M norachirol, 1 ⁇ M M9, and 1 ⁇ M M14 were added to the B cells, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 2 days. After culturing for 2 days, the culture supernatant was collected and the amount of TNF ⁇ produced was measured by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse TNF ⁇ ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • TNF ⁇ was 15.13 pg/mL, while in 10 ⁇ g/mL LPS, it was 296.31 pg/mL, indicating that LPS stimulation activates B cells and promotes TNF ⁇ secretion.
  • the mangiferin 8a-administered group, the noracliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group significantly suppressed TNF ⁇ production upon LPS stimulation.
  • Example 6 Effect of suppressing IL-6 production in B cells Using mouse B cells, suppression of IL-6 production involved in cytokine storm by compounds was examined.
  • Mouse B cells were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M norachirol, 1 ⁇ M M9, and 1 ⁇ M M14 were added to the B cells, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 2 days. After culturing for 2 days, the culture supernatant was collected and IL-6 production was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse IL-6 ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • the results are shown in Figure 6.
  • the horizontal axis represents sample groups, and the vertical axis represents IL-6 production.
  • IL-6 was 9.46 pg/mL, whereas in 10 ⁇ g/mL LPS, it was 246.13 pg/mL, indicating that LPS stimulation activates B cells and promotes IL-6 secretion. .
  • Example 7 Effect of suppressing TNF ⁇ production in macrophages Using mouse macrophages, the inhibitory effects of compounds on TNF ⁇ production involved in cytokine storm were examined.
  • Mouse macrophages were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M noratilol, 1 ⁇ M M9, and 1 ⁇ M M14 were added to the macrophages, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 2 days. After culturing for 2 days, the culture supernatant was collected and the amount of TNF ⁇ produced was measured by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse TNF ⁇ ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • TNF ⁇ was 24.11 pg/mL, while in 10 ⁇ g/mL LPS, it was 421.13 pg/mL, indicating that LPS stimulation activates macrophages and promotes TNF ⁇ secretion.
  • the mangiferin 8a-administered group, the noracliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group significantly suppressed TNF ⁇ production upon LPS stimulation.
  • Example 8 Effect of suppressing IL-6 production in mouse macrophages Using mouse macrophages, suppression of IL-6 production involved in cytokine storm by compounds was examined.
  • Mouse macrophages were cultured in RPMI1640 medium for one day. After that, 10 ⁇ M mangiferin 8a, 10 ⁇ M noratilol, 1 ⁇ M M9, and 1 ⁇ M M14 were added to the macrophages, cultured for 1 day, 10 ⁇ g/mL LPS was added, and cultured for 2 days. After culturing for 2 days, the culture supernatant was collected and IL-6 production was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse IL-6 ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • IL-6 was 13.13 pg/mL in Control, whereas 321.13 pg/mL in 10 ⁇ g/mL LPS, indicating that LPS stimulation activates macrophages and promotes IL-6 secretion. On the other hand, it was 69.16 pg/mL, 64.13 pg/mL, 49.46 pg/mL, and 45.13 pg/mL in the mangiferin 8a-administered group, the norachillol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group, respectively.
  • Example 9 Effect of Compounds to Suppress Lethality in Cytokine Storm
  • Six-week-old male C57BL/6J (Shimizu Experimental Materials) were orally given 50 mg/kg mangiferin 8a, 100 mg/kg norachiriol, 50 mg/kg M9, and 50 mg/kg M14. 5 minutes later, 25 mg/kg LPS was intraperitoneally administered.
  • the administration start date was defined as day 0, and the survival rate was measured on day 2.
  • a control group was administered with no compound or LPS, a LPS-administered group was administered with 25 mg/kg LPS, a group with 50 mg/kg mangiferin 8a and 25 mg/kg LPS was administered with mangiferin 8a, and a group with 100 mg/kg norachiriol and 25 mg/kg LPS were administered as norachirol-administered group, 50 mg/kg M9 and 25 mg/kg LPS were administered as M9-administered group, and 50 mg/kg M14 and 25 mg/kg LPS were administered as M14-administered group. call.
  • Figure 9 shows the survival rate results.
  • the horizontal axis indicates compound treatment, and the vertical axis indicates survival rate (%).
  • “*” is shown for those that were significantly different from the control group (P ⁇ 0.05).
  • the LPS-administered group showed a significant decrease in survival rate, indicating that the cytokine storm caused by LPS administration decreased the survival rate.
  • the mangiferin 8a-administered group, the norachirol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group significantly suppressed the decrease in survival rate.
  • the mangiferin 8a-administered group, the noracliol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group improved the mortality rate due to cytokine storm.
  • TNF- ⁇ production inhibitory effect Six-week-old male C57BL/6J (Shimizu experimental materials) were orally administered with 100 mg/kg nolatyrol, 50 mg/kg M9, and 50 mg/kg M14, and 5 minutes later, 25 mg/kg LPS was intraperitoneally administered. Two hours after LPS administration, serum was collected from the mice, and TNF ⁇ production involved in cytokine storm was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse TNF ⁇ ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • the control group was administered no compounds and LPS, the LPS-administered group was administered 25 mg/kg LPS, the group administered 100 mg/kg norachiriol and 25 mg/kg LPS, the norachiriol-administered group 50 mg/kg M9 and 25 mg /kg LPS was administered as the M9 administration group, and 50 mg/kg M14 and 25 mg/kg LPS as the M14 administration group.
  • Fig. 10 The results are shown in Fig. 10.
  • the horizontal axis represents sample groups, and the vertical axis represents TNF ⁇ production.
  • TNF ⁇ was 1.55 ng/mL
  • TNF ⁇ secretion was increased to 10.28 ng/mL, indicating that cytokine storm was caused.
  • They were 2.71 ng/mL, 5.68 ng/mL, and 5.2 ng/mL in the noratilol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group, respectively.
  • the noratilol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group markedly suppressed TNF ⁇ production related to cytokine storm even in vivo.
  • IL-6 production inhibitory effect Six-week-old male C57BL/6J (Shimizu experimental materials) were orally administered with 100 mg/kg nolatyrol, 50 mg/kg M9, and 50 mg/kg M14, and 5 minutes later, 25 mg/kg LPS was intraperitoneally administered. Serum was collected from the mice 2 hours after LPS administration, and IL-6 production involved in cytokine storm was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This measurement was performed using a mouse IL-6 ELISA kit (R&D).
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • the control group was administered no compounds and LPS, the LPS-administered group was administered 25 mg/kg LPS, the group administered 100 mg/kg norachiriol and 25 mg/kg LPS, the norachiriol-administered group 50 mg/kg M9 and 25 mg
  • the group administered 50 mg/kg M14 and 25 mg/kg LPS is called the M14 administration group.
  • Fig. 11 The horizontal axis represents sample groups, and the vertical axis represents IL-6 production. While IL-6 was 2.75 ng/mL in the control, 10 ⁇ g/mL LPS increased IL-6 secretion to 20.1 ng/mL, indicating that it caused a cytokine storm. They were 11.37 ng/mL, 15.15 ng/mL, and 14.26 ng/mL in the noratilol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group, respectively.
  • the noratilol-administered group, the M9-administered group, and the M14-administered group markedly suppressed IL-6 production related to cytokine storm in vivo.
  • the cytokine storm inhibitor according to the present invention is COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome due to CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic It is possible to provide a therapeutic drug for cytokine storm, which is one of the causes of death such as vasculitis, Kawasaki disease, and Takayasu arteritis.
  • cytokine release syndrome COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome due to CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu artery Fulminant pneumonia other than inflammation, fulminant respiratory failure, fulminant hepatitis, fulminant myocarditis, fulminant colitis, fulminant sepsis, fulminant malaria, fulminant antiphospholipid antibody syndrome, fulminant It can also be used as a therapeutic drug for fulminant inflammation caused by fulminant pancreatitis, fulminant meningococcemia, fulminant type 1 diabetes, fulminant mutant collagen disease, and disseminated intravascular coagulation.
  • cytokine release syndrome COVID-19, cytokine release syndrome, cytokine release syndrome due to CAR-T therapy, sepsis, systemic inflammatory response syndrome, hemophagocytic syndrome, macrophage activation syndrome, influenza, GVHD, systemic vasculitis, Kawasaki disease, Takayasu arteritis Improving the cytokine storm caused by such factors will also improve the patient's survival rate. Furthermore, since the cytokine storm inhibitor according to the present invention can be administered orally, it contributes to the improvement of the tight medical field.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

コロナウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされるＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ（Ｃｈｉｍｅｒｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等は重篤化すると急性呼吸窮迫症候群、播種性血管内凝固症候群、急性循環不全、多臓器不全等を引き起こし死亡原因の１つとされている。これはサイトカインストームが起因となると考えられている。　（１）式～（４）式で表される化合物は、経口摂取で効果を有し、マンギフェリンよりも少ない量で効果を表すことができる。　【化１０５】　【化１０６】　【化１０７】　【化１０８】

Description

サイトカインストーム抑制用医薬組成物
　本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ（Ｃｈｉｍｅｒｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ（Ｇｒａｆｔ－ｖｅｒｓｕｓ－ｈｏｓｔ　ｄｉｓｅａｓｅ：移植片対宿主病）、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等の死亡原因であるサイトカインストームの予防、治療又は軽減において有効である組成物、医薬組成物、食品組成物および剤に関する。
　ＣＯＶＩＤ－１９（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ　ｄｉｓｅａｓｅ　２０１９　の略称）は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｓｅｖｅｒｅ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ　２　の頭字語）によって引き起こされる疾患である。この疾患での重症患者は急性呼吸窮迫症候群や急性肺損傷を発症する。
　このような症状を引き起こす重要な要因にＴｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　α（ＴＮＦα）やｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６（ＩＬ－６）等の炎症性サイトカインの関与がある。
　ＴＮＦαやＩＬ－６等の炎症性サイトカインはマクロファージ、Ｂ細胞、単球等から分泌され、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等の疾患により大量に放出される。
　この大量に放出されたサイトカインにより、過剰な炎症反応が惹起され、様々な臓器に致命的な傷害を生じる。この病態はサイトカインストームと呼ばれ、急性呼吸窮迫症候群、播種性血管内凝固症候群、急性循環不全、多臓器不全等の要因となり、死亡原因の１つとなる。
　ＮＩＫはセリン／スレオニンキナーゼであり、古典的および非古典的ＮＦ－κＢ経路の両方の経路で役割を担うが、非古典的ＮＦ－κＢシグナル伝達経路では必須なものであり、ＩＫＫαをリン酸化することでＮＦ－κＢｐ１００を部分分解し、ＮＦ－κＢｐ５２を遊離させる。ＮＦ－κＢｐ５２はＲｅｌＢとヘテロダイマーを形成することで、核内へと移行し、ＴＮＦαおよびＩＬ－６等の炎症性サイトカインの遺伝子を発現させる。さらに、古典的ＮＦ－κＢ経路ではＩＫＫα、ＩＫＫβおよびＩＫＫγ複合体を活性化させることでＮＦ－κＢｐ６５とＮＦ－κＢｐ５０のヘテロダイマーを形成させ、これが核内へと移行することで、ＴＮＦαおよびＩＬ－６等の炎症性サイトカインの遺伝子発現を調節する。
　さらに敗血症、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群等を発症させるＬＰＳ（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ：リポポリサッカライド）は、マクロファージ、Ｂ細胞、単球等に作用し、ＮＩＫ等を活性化することにより、古典的および非古典的ＮＦ－κＢ経路の活性化を促進させることで、Ｂ細胞およびマクロファージでのＴＮＦα、ＩＬ－６等の炎症性サイトカインの産生を促進する。
　このため、ＬＰＳ等を介したＮＩＫによる古典的および非古典的ＮＦ－κＢ経路活性化を抑制し、炎症性サイトカインの産生を阻害する薬剤は、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等における急性呼吸窮迫症候群、播種性血管内凝固症候群、急性循環不全、多臓器不全を抑制し、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等における死亡を軽減させる可能性がある。
　サイトカインストームは、他の疾患でも発生する症状であり、例えば、特許文献１（国際公開２０１６／１０４４３６号）には、ヒスチジンリッチ糖タンパク質を有効成分として含有する、サイトカインストーム抑制剤が開示されている。ここで、開示されているサイトカインストーム抑制剤は、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０から選択される少なくとも２種以上のサイトカインを抑制する作用を有する。
　また、特許文献２（特開２０１２－２０９５３号公報）には、スピラマイシンもしくはジョサマイシン（ロイコマイシンＡ３）、またはこれらの製薬上許容されうる塩を有効成分として含有する劇症型炎症の予防および／または治療剤が開示されている。この劇症型炎症の予防および／または治療剤は、インフルエンザ感染（Ｈ５Ｎ１型またはＨ１Ｎ１型であることが好ましい）に起因する劇症型炎症を予防および／または治療剤とされている。
国際公開２０１６／１０４４３６号 特開２０１２－２０９５３号公報
Ｈｕ　Ｌ，　Ｗｕ　Ｗ，　Ｃｈａｉ　Ｘ，　Ｌｕｏ　Ｊ，　Ｗｕ　Ｑ．：　Ｂｉｏｏｒｇ．　Ｍｅｄ．　Ｃｈｅｍ．　Ｌｅｔｔ．　２０１１，　２１，　４０１３－４０１５．
　現在ＣＯＶＩＤ－１９による死亡者は日々増加している。これだけのパンデミック的な罹患者増加では、治療体制が間に合わず、所謂医療崩壊状態になっている。このような状況下では、ＣＯＶＩＤ－１９に対する治療が効かず死亡した人もさることながら、重篤化した際の治療が間に合わず死亡する人も多い。また、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等によるサイトカインストームによって死亡する人も存在する。
　したがって、ＬＰＳ等を介したＮＩＫによる古典的および非古典的ＮＦ－κＢ経路活性化を抑制し、ＴＮＦαおよびＩＬ－６等の炎症性サイトカインの産生を阻害する薬剤は、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等により引き起こされるサイトカインストームを抑制し、急性呼吸窮迫症候群、播種性血管内凝固症候群、急性循環不全、多臓器不全等を回避することで、死亡者の数を下げることが大いに期待される。
　特に医療現場で治療を受けることのできない患者の数が増えている場合は、医師資格者でなければ、できない経皮投与、静脈投与だけでなく、経口投与によって、症状緩和が達成できれば、非常に望ましい。また、開発が急務であることを考慮すれば、副作用の可能性がほとんどないサイトカインストーム抑制用医薬組成物の提供が望まれている。
　本発明者らは、上記課題を解決すべくサイトカインストームを抑制する素材を探索し、キサントン骨格を有する物質（新規物質を含む）に有効な物質があることを見出し、本発明を完成した。
　より具体的に本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物は、（１）式から（４）式の化合物の内、少なくとも１種を有効成分として含むことを特徴とする。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
　本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物は、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等の死亡原因の１つであるサイトカインストームの治療薬を提供することができる。さらにＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等によるサイトカインストームが改善されることで、患者の生存率も向上する。さらに、本発明に係るサイトカインストーム抑制剤は、経口投与も可能なので、逼迫する医療現場の改善にも寄与するものである。
マウスＢ細胞にＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＴＮＦαｍＲＮＡの産生抑制能を検討した結果を示すグラフである。 マウスＢ細胞にＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＩＬ－６ｍＲＮＡの産生抑制能を検討した結果を示すグラフである。 マウスマクロファージにＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＴＮＦαｍＲＮＡの産生抑制能を検討した結果を示すグラフである。 マウスマクロファージにＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＩＬ－６ｍＲＮＡの産生抑制能を検討した結果を示すグラフである。 マウスＢ細胞にＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＴＮＦαの分泌量抑制効果を検討した結果を示すグラフである。 マウスＢ細胞にＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＩＬ－６の分泌量抑制効果を検討した結果を示すグラフである。 マウスマクロファージにＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＴＮＦαの分泌量抑制効果を検討した結果を示すグラフである。 マウスマクロファージにＬＰＳで刺激を与えた場合の各化合物のＩＬ－６の分泌量抑制効果を検討した結果を示すグラフである。 マウスに各試薬を投与し、その後ＬＰＳを投与したマウスの４８時間後の生存率を検討した結果を示すグラフである。 マウスに各試薬を投与し、その後ＬＰＳを投与したマウスの２時間後の血清中におけるＴＮＦα産生量を測定したグラフである。 マウスに各試薬を投与し、その後ＬＰＳを投与したマウスの２時間後の血清中におけるＩＬ－６産生量を測定したグラフである。
　以下に本発明に係る化合物とそれを有効成分として含有するサイトカインストーム抑制用医薬組成物について説明を行う。なお、以下の説明は本発明の一実施の形態および一実施例についての例示であって、本発明は以下の説明に限定されるものではない。本発明の趣旨を逸脱しない限りにおいて、以下の実施の形態は変更することができる。
　なお、本明細書において、「改善」とは、対象となる疾病や症状を治療するだけでなく、症状の低減および抑制を含んでもよい。また、本発明において、サイトカインストーム抑制とは、ＴＮＦα若しくはＩＬ－６の産生を抑制する効果を示すことである。
　本発明に係る化合物は、キサントン骨格を有する（１）式～（４）式で表される。以下「本発明に係る化合物」は以下の４つの化合物のうちの少なくとも１種を指していてもよい。
　（１）式は、１，３，６，７－テトラヒドロキシキサントンであり、以下「ノラチリオール」と呼ぶ。ノラチリオールはＣＡＳ番号３５４２－７２－１で表される既知物質である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
（２）式は、１，２’，３’，４’，６’－ペンタ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリンであり、以下「マンギフェリン８ａ」と呼ぶ。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
（３）式は、２’，３’，４’，６’－テトラ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリン（以後「Ｍ９」と呼ぶ。）である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
（４）式は、２’，３’，４’，６’－テトラ－Ｏ－ブチリルマンギフェリン（以後「Ｍ１４」と呼ぶ。）である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
 　なお、８ａ、Ｍ９、Ｍ１４の置換位置番号については、（５）式に示すように番号付けを行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
 　ここでＲ１～Ｒ８は官能基を示す。
　これら本発明に係る化合物は、サイトカインストーム抑制用医薬組成物とすることができる。その作用機序は、細胞内伝達経路においてＮＩＫを阻害し、ＩＫＫからＮＦ－κＢを抑制する点にあると考えられる。
　本発明に係る化合物は、マンギフェリン同様に比較的低分子量化合物で、水に良く溶け、経口摂取が可能である。
　本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物は、本発明に係る上記４つの化合物の少なくともどれか１種を有効成分として含む。またその他の薬剤として許容される成分を含んでいて良い。
　本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物は、経口投与することで効果を発揮することができる。したがって、内用剤として提供することができる。例えば、粉末状のサイトカインストーム抑制用医薬組成物を、カプセル剤、顆粒剤、散剤、錠剤等に製剤化して提供されうる。経口剤とする際には、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、矯味剤、防腐剤、抗酸化剤、安定化剤といった添加剤を加え、カプセル剤、顆粒剤、散剤、錠剤を常法によって製造することができる。
　また、本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物は、静脈内、皮下、若しくは筋肉内注射による投与を行うことができる。さらに、本発明に係る医薬組成物は、液剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル化剤、貼付剤、エアゾール剤といった外用剤に製剤化し、非経口投与してもよい。外用剤とする際には、水、低級アルコール、溶解補助剤、界面活性剤、乳化安定剤、ゲル化剤、粘着剤、その他必要とされる基剤成分を配合することができる。また、血管膨張剤、副腎皮質ホルモン、角質溶解剤、保湿剤、殺菌剤、抗酸化剤、清涼化剤、香料、色素といった添加剤を適宜配合してもよい。
　また、本発明に係る化合物は食品組成物若しくは剤として提供することも可能である。つまり、本発明に係る化合物は食品組成物として摂取しても、本発明に係るサイトカインストーム抑制用医薬組成物と同等の効果を奏する。なお、剤には、サプリメントおよび添加剤を含む。
　食品組成物若しくは剤としては、例えば、飴、ガム、ゼリー、ビスケット、クッキー、煎餅、パン、麺、魚肉・畜肉練製品、茶、清涼飲料、コーヒー飲料、乳飲料、乳清飲料、乳酸菌飲料、ヨーグルト、アイスクリーム、プリン等といった嗜好食品や健康食品を含む一般加工食品だけでなく、厚生労働省の保健機能食品制度に規定された特定保健用食品や栄養機能食品などの保健機能食品を含み、さらに、栄養補助食品（サプリメント）、飼料、食品添加物等も加工食品若しくは剤に含まれる。
　これらの食品組成物若しくは剤の原料中に、上記４つの化合物を添加することで、本発明に係る食品組成物を調製することができる。本発明に係る化合物の食品組成物若しくは剤へ添加は、有効成分として添加すると言ってもよい。
　また、本発明に係る食品組成物若しくは剤は、サイトカインストーム抑制用である旨の表示のある食品組成物若しくは剤といってよい。
　以下に（１）式～（４）式で示す化合物の合成について示す。合成の順序は、以下の通りである。
（ａ）マンギフェリンから中間物質Ｍ７を合成する。
（ｂ）中間物質Ｍ７からマンギフェリン８ａ（（２）式）を合成する。
（ｃ）マンギフェリン８ａからＭ９（（３）式）を合成する。
（ｄ）マンギフェリンから中間物質Ｍ１１を合成する。
（ｅ）中間物質Ｍ１１から中間物質Ｍ１２を合成する。
（ｆ）中間物質Ｍ１２からＭ１４（（４式））を合成する。
（ｇ）ノラチリオール（（１式））を合成する。
＜中間物質（Ｍ７）の合成＞
　マンギフェリン（４．２１ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、無水プロピオン酸（１９．２ｍＬ，１４９ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２２ｍｇ，１ｍｍｏｌ）および乾燥ピリジン（６０ｍＬ）を１００℃で２４時間加熱した。反応液を氷水（６００ｍＬ）に注加し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を氷冷した１０％硫酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ－ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）を用いて精製し，標題化合物（７．１９ｇ、８３％）を無色固体として得た。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
ＩＲ　（ＫＢｒ）：　１７７４，　１７５５，　１６６７，　１６２０，　１４５８，　１３５４，　１２７３，　１１５７，　１１１４，　１０８３　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　０．７１－０．７７／０．９３－０．９７　（ｅａｃｈ　３Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　０．９８－１．０２／１．１２－１．１６／１．１９－１．２８　（ｅａｃｈ　６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１．９２－２．０１　（２Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．１７－２．３２　（６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．６０－２．９４　（８Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　３．８６－３．９２　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－６’ａ），　４．２１－４．３０　（２Ｈ，　ｍ，　Ｈ－５’　ａｎｄ　Ｈ－６’ｂ），　５．０１－５．０６　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－４’），　５．１０－５．２０　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－１’），　５．４５－５．５３　（２Ｈ，　ｍ，　Ｈ－２’　ａｎｄ　Ｈ－３’），　７．５１／７．５３　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－４），　７．６８／７．６９　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－５），　７．９７／７．９８　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－８）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６　２５　°Ｃ）　δ：　８．６４／８．７５／８．７７／８．９１／８．９４／８．９６／９．００／９．１３／９．１６　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２６．５８／２６．６３／２６．７／２６．８／２６．８９／２６．９４／２７．０／２７．１／２７．３２／２７．３４　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　６２．１／６２．２　（Ｃ６’），　６８．１８／６８．２０　（Ｃ４’），　６９．６／７０．０　（Ｃ２’），　７０．８／７１．３　（Ｃ１’），　７３．５／７３．６　（Ｃ３’），　７５．０／７５．１　（Ｃ５’），　１１０．２／１１１．８　（Ｃ４），　１１１．６／１１２．７　（Ｃ９ａ），　１１３．２／１１３．３　（Ｃ５），　１１８．８／１１８．９　（Ｃ２），　１１９．６／１１９．７　（Ｃ８ａ），　１２０．３／１２０．４　（Ｃ８），　１３９．５／１３９．６　（Ｃ７），　１４７．９　（Ｃ６），　１４９．１／１５０．９　（Ｃ１），　１５２．４７／１５２．５１　（Ｃ８ｂ），　１５３．４／１５４．８　（Ｃ４ａ），　１５６．５／１５６．８　（Ｃ３），　１７０．９／１７１．０４／１７１．０６／１７１．０９／１７１．６７／１７１．７２／１７１．９／１７２．４／１７２．６／１７２．７／１７３．１８／１７３．２２／１７３．５１／１７３．５４　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１７３．１　（Ｃ９）．　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ＋Ｎａ］＋　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ４３Ｈ５０Ｏ１９Ｎａ　８９３．２８３９；　Ｆｏｕｎｄ　８９３．２８５３．以上であった。
　中間物質Ｍ７の構造を（６）式に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
＜（２）式（マンギフェリン８ａ）の合成＞
　マンギフェリン８ａは、以下のようにして合成した。１，３，２’，３’，４’，６，６’，７－オクタ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリン（Ｍ７）（５．０６ｇ，５．６８ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニウム（６．７ｇ，８７．０ｍｍｏｌ）、メタノール（１６０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）の混合溶液を室温で６時間撹拌した。反応液から減圧濃縮によりメタノールを留去した後、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。その混合物を、水および飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー［ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ（２０：１）］を用いて精製し、標題化合物（３．８９ｇ　９５％）を淡黄色固体として得た。マンギフェリン８ａは（２）式で表される。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
ＩＲ　（ＫＢｒ）：　３４０６，　１７５１，　１６２０，　１４６２，　１３５４，　１２８４，　１１９２，　１０８３　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　０．７４／０．９４　（ｅａｃｈ　３Ｈ，　ｔ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　７．６，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　０．９７－１．０２　（６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１．２０／１．２３　（ｅａｃｈ　１．５Ｈ，　ｔ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　７．６，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１．９２－２．０２　（２Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．１５－２．３３　（６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．６１－２．８６　（２Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　３．８５　（０．５Ｈ，　ｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　１２．５，　１．９，　Ｈ－６ａ’），　４．０５　（０．５Ｈ，　ｂｒ　ｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　１２．５，　Ｈ－６ａ’），　４．０７　（０．５Ｈ，　ｄｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　４．７，　１．９，　Ｈ－５’），　４．０９－４．１４　（０．５Ｈ，　ｍ，　Ｈ－６ｂ’），　４．１１　（０．５Ｈ，　ｂｒ　ｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　９．５，　Ｈ－５’），　４．２４　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．５，　４．７，　Ｈ－６ｂ’），　４．９６　（０．５Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　９．９，　Ｈ－１’），　５．００　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．５，　９．５，　Ｈ－４’），　５．０２　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．８，　Ｈ－４’），　５．１６　（０．５Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　Ｈ－１’），　５．３５　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．５，　９．５，　Ｈ－３’），　５．４０　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．５，　Ｈ－３’），　５．４９　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　９．５，　Ｈ－２’），　５．８４　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．９，　９．５，　Ｈ－２’），　６．７２／６．７５　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　６．８０／６．８１　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－５），　７．２９／７．３０　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－８），　９．６２／１０．５　（ｅａｃｈ　１Ｈ，　ｂｒ　ｓ，　ＯＨ），　１１．２／１１．４　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｂｒ　ｓ，　ＯＨ）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　８．８１／８．８６／８．９６／９．０２／９．０６／９．１１／９．１２／９．２０　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２６．６／２６．８９／２６．９１／２６．９４／２７．００／２７．０４／２７．１／２７．４　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　６２．１／６２．３　（Ｃ－６’），　６８．２／６８．３　（Ｃ－４’），　６８．７／７０．４　（Ｃ－２’），　７１．０／７１．１　（Ｃ－１’），　７３．８／７４．１　（Ｃ－３’），　７４．６／７５．２　（Ｃ－５’），　９９．５／１００．８　（Ｃ－４），　１０２．５　（Ｃ－５），　１０６．６／１０７．８　（Ｃ－９ａ），　１０９．１　（Ｃ－８），　１１３．３　（Ｃ－２），　１１４．０／１１４．１　（Ｃ－８ａ），　１４３．８　（Ｃ－７），　１４９．７７／１４９．８２　（Ｃ－６，　Ｃ－１），　１５１．３　（Ｃ－１），　１５３．３　（Ｃ－８ｂ），　１５７．５／１５７．７　（Ｃ－４ａ），　１６０．７／１６２．２　（Ｃ－３），　１７１．１／１７１．９／１７２．２／１７２．５／１７２．８／１７３．１／１７３．４／１７３．６　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３）　１７２．６８／１７２．７１　（Ｃ－９）．　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ－Ｈ］－　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３４Ｈ３７Ｏ１６　７０１．２０７６；　Ｆｏｕｎｄ　７０１．２０７０．以上であった。
＜（３）式（Ｍ９）の合成＞
　１，２’，３’，４’，６－ペンタ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリン（マンギフェリン８ａ）（３．８８ｇ，５．５２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルトリメチレンジアミン（３．４７ｍＬ，２７．６ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（４０ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。反応液を氷水（５００ｍＬ）に注加し、ジエチルエーテルおよびヘキサンの混合溶液（３／１）で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー［ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ（２０：１）］を用いて精製し、標題化合物（３．０８ｇ，８６％）を淡黄色固体として得た。Ｍ９の構造は（３）式で表される。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
ＩＲ　（ＫＢｒ）：　３３９９　１７５１，　１６１８，　１４７５，　１２９２，　１１９０，　１０８４　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　６０　°Ｃ）　δ：　０．７４／０．９７／１．０２／１．０３　（ｅａｃｈ　３Ｈ，　ｔ，　Ｊ　＝　７．６，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１．９５／１．９８　（ｅａｃｈ　１Ｈ，　ｄｑ，　Ｊ　＝　１６．５，　７．６，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．１８　（２Ｈ，　ｑ，　Ｊ　＝　７．６，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２．２２－２．３４　（４Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　３．９９　（１Ｈ，　ｄｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　９．８，　４．５，　２．５，　Ｈ－５’），　４．１０　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．５，　２．５，　Ｈ－６ａ’），　４．１２　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．５，　４．５，　Ｈ－６ｂ’），　５．０６　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．８，　Ｈ－４’），　５．１０　（１Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　Ｈ－１’），　５．３１　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．５，　Ｈ－３’），　５．８５　（１Ｈ，　ｂｒ　ｄｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　９．５，　Ｈ－２’），　６．３５　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　６．８５　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　７．３４　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－８），　９．０－１１．０　（３Ｈ，　ｂｒ，　ＯＨ），　１３．９　（１Ｈ，　ｓ，　ＯＨ）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　６０　°Ｃ）　δ：　８．７１／８．７９／８．８２　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　２６．７２／２６．７３／　２６．７７／２６．８３　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　６２．０　（Ｃ－６’），　６８．３　（Ｃ－４’），　６９．１　（Ｃ－２’），　７０．４　（Ｃ－１’），　７４．２　（Ｃ－３’），　７５．０　（Ｃ－５’），　９３．３　（Ｃ－４），　１０１．０　（Ｃ－９ａ），　１０２．６　（Ｃ－５），　１０４．２　（Ｃ－２），　１０８．２　（Ｃ－８），　１１１．７　（Ｃ－８ａ），　１４３．８　（Ｃ－７），　１５０．８　（Ｃ－６），　１５４．２　（Ｃ－８ｂ），　１５６．８　（Ｃ－４ａ），　１６１．９　（Ｃ－１），　１６３．６　（Ｃ－３），　１７１．９／１７２．５／１７２．７／１７３．１　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３）　１７９．０　（Ｃ－９）．　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ－Ｈ］－　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３１Ｈ３３Ｏ１５　６４５．１８１４；　Ｆｏｕｎｄ　６４５．１８１７．以上であった。
＜中間物質（Ｍ１１）の合成＞
　中間物質Ｍ７の製造方法で、無水プロピオン酸を無水酪酸に置き換えたほかは、中間物質Ｍ７の合成方法に従い合成した。収率は８１％であった。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
無色固体：　ＩＲ　（ＫＢｒ）：　１７７５，　１７５１，　１６６５，　１６１８，　１４５８，　１１５７，　１０９２　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　０．５２－１．１１　（２４Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．２０－１．９７　（１６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　２．１４－２．８８　（１６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３．８８－３．９４　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－６’ａ），　４．１６－４．２５　（２Ｈ，　ｍ，　Ｈ－５’　ａｎｄ　Ｈ－６’ｂ），　５．０２－５．０６　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－４’），　５．０６－５．１２　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－１’），　５．４５－５．５２　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－３’），　５．５４－５．６５　（１Ｈ，　ｍ，　Ｈ－２’），　７．５０／７．５３　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－４），　７．６８／７．６９　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－５），　７．９５／７．９６　（１Ｈ，　ｅａｃｈ　ｓ，　Ｈ－８）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６　２５　°Ｃ）　δ：　１３．１／１３．４１／１３．４５／１３．４８／１３．５１／１３．５８／１３．６４／１３．８　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１７．５／１７．６２／１７．６６／１７．７２／１７．７６／１７．８３／１７．８８／１７．９０　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３４．９／３５．０９／３５．１５／３５．１７／３５．１９／３５．３１／３５．３３／３５．４／３５．６８／３５．７３　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　６２．０／６２．２　（Ｃ６’），　６８．２／６８．３　（Ｃ４’），　６９．３／６９．８　（Ｃ２’），　７０．９／７１．３　（Ｃ１’），　７３．３６／７３．４３　（Ｃ３’），　７５．１／７５．２　（Ｃ５’），　１１０．２／１１１．６　（Ｃ４），　１１１．６／１１２．６　（Ｃ９ａ），　１１３．３／１１３．４　（Ｃ５），　１１８．７／１１８．８　（Ｃ２），　１１９．６／１１９．７　（Ｃ８ａ），　１２０．３５／１２０．４０　（Ｃ８），　１３９．５　（Ｃ７），　１４７．８２／１４７．８５　（Ｃ６），　１４９．１／１５０．８　（Ｃ１），　１５２．４６／１５２．４９　（Ｃ８ｂ），　１５３．４／１５４．７　（Ｃ４ａ），　１５６．６／１５６．８　（Ｃ３），　１６９．９／１７０．１４／１７０．１７／１７０．１８／１７０．７／１７０．８／１７１．０／１７１．４／１７１．６／１７１．８／１７２．０／１７２．１／１７２．５／１７２．６　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３），　１７３．１　（Ｃ９）．　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ＋Ｎａ］＋　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ５１Ｈ６７Ｏ１９Ｎａ　１００５．４０９１；　Ｆｏｕｎｄ　１００５．４０９２．以上であった。
　中間物質Ｍ１１の構造は（７）式のようになる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
＜（中間物質（Ｍ１２）の合成＞
　８ａの合成方法において、１，３，２’，３’，４’，６，６’，７－オクタ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリン（Ｍ７）に変えて、１，３，２’，３’，４’，６，６’，７－オクタ－Ｏ－ブチリルマンギフェリン（Ｍ１１）を出発材とした他は、Ｍ８の合成方法に従って合成した。収率は９３％であった。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
淡かっ色固体：　ＩＲ　（ＫＢｒ）：　３３８５，　１７５１，　１６２４，　１４５８，　１２８８，　１１８８，　１０９９　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　０．４８－１．０９　（１５Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．１８－１．８３　（１０Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．８９－２．８６　（１０Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３．８７　（０．５Ｈ，　ｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　１２．６，　１．６，　Ｈ－６ａ’），　４．０２－４．１１　（２Ｈ，　ｂｒ　ｍ，　，　Ｈ－５，　Ｈ－５’，　Ｈ－６ａ’，　Ｈ－６ｂ’），　４．１６　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．６，　４．８，　Ｈ－６ｂ’），　４．９０　（０．５Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　９．６，　Ｈ－１’），　５．０１　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．６，　９．６，　Ｈ－４’），　５．０２　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．６，　９．６，　Ｈ－４’），　５．１５　（０．５Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　１０．４，　Ｈ－１’），　５．３５　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．６，　９．６，　Ｈ－３’），　５．３７　（０．５Ｈ，　ｂｒ　ｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　９．６，　９．６，　Ｈ－３’），　５．５４　（０．５Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１０．４，　９．６，　Ｈ－２’），　５．８８　（０．５Ｈ，　ｂｒ　ｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　ｃａ．　９．６，　９．６，　Ｈ－２’），　６．７２／６．７４　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　６．７９７／６．８０３　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－５），　７．２９／７．３０　（ｅａｃｈ　０．５Ｈ，　ｓ，　Ｈ－８），　９．６７／１０．５／１１．２　（ｅａｃｈ　１Ｈ，　ｂｒ　ｓ，　ＯＨ）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　２５　°Ｃ）　δ：　１３．１／１３．４／１３．５０／１３．５４／１３．６／１３．７／１３．９　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１７．７／１７．９０／１７．９３／１７．９６／１８．０２　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３５．１／３５．２／３５．３／３５．３７／３５．４１／３５．４６／３５．５０／３５．５４／３５．９　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　６２．０／６２．４　（Ｃ－６’），　６８．２／６８．４　（Ｃ－４’），　６８．５／７０．３　（Ｃ－２’），　７１．１／７１．２　（Ｃ－１’），　７３．７／７４．０　（Ｃ－３’），　７４．９／７５．３　（Ｃ－５’），　９９．７／１００．８　（Ｃ－４），　１０２．５２／１０２．５４　（Ｃ－５），　１０６．６／１０７．８　（Ｃ－９ａ），　１０９．１　（Ｃ－８），　１１３．２／１１３．４　（Ｃ－２），　１１４．０６／１１４．０８　（Ｃ－８ａ），　１４３．９　（Ｃ－７），　１４９．８／１４９．９　（Ｃ－６，　Ｃ－１），　１５１．３　（Ｃ－１），　１５３．３　（Ｃ－８ｂ），　１５７．６／１５７．７　（Ｃ－４ａ），　１６０．９／１６２．３　（Ｃ－３），　１７０．３／１７１．１／１７１．２／１７１．５／１７１．９／１７２．２／１７２．６　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３）　１７２．７　（Ｃ－９）．　　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ－Ｈ］－　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３９Ｈ４７Ｏ１６　７７１．２８５９；　Ｆｏｕｎｄ　７７１．２８５８．以上であった。
　中間物質Ｍ１２の構造は（８）式のようになる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
＜（４）式（Ｍ１４）の合成＞
　Ｍ９の合成方法において、１，３，２’，３’，４’，６，６’，７－オクタ－Ｏ－プロピオニルマンギフェリン（マンギフェリン８ａ）に変えて、１，２’，３’，４’，６－ペンタ－Ｏ－ブチリルマンギフェリン（Ｍ１２）を出発材とした他は、Ｍ９の合成方法に従って合成した。収率は８４％であった。
　以下ＮＭＲのスペクトルを示す。
淡黄色固体：ＩＲ　（ＫＢｒ）：　３３９９　１７５１，　１６１８，　１４７４，　１２９２，　１１８８，　１０８５　ｃｍ－１．　１Ｈ　ＮＭＲ　（８００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　６０　°Ｃ）　δ：　０．５０　（３Ｈ，　ｂｒ，　ｔ－ｌｉｋｅ　Ｊ　＝　ｃａ．　７．０，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　０．８３／０．８７１／０．８７２　（ｅａｃｈ　３Ｈ，　ｔ，　Ｊ　＝　７．４，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．１８－１．３０／１．４４－１．４９　（ｅａｃｈ　２Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．５０－１．５６　（６Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１．９３　（２Ｈ，　ｔ，　Ｊ　＝　７．０，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　２．１５　（２Ｈ，　ｔ，　Ｊ　＝　７．２，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　２．２２－２．３１　（４Ｈ，　ｍ，　ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３．９８　（１Ｈ，　ｄｄｄ－ｌｉｋｅ，　Ｊ　＝　９．８，　４．６，　２．５，　Ｈ－５’），　４．０９　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．５，　４．６，　Ｈ－６ａ’），　４．１１　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　１２．５，　２．５，　Ｈ－６ｂ’），　５．０６　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．８，　Ｈ－４’），　５．０９　（１Ｈ，　ｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　Ｈ－１’），　５．３１　（１Ｈ，　ｄｄ，　Ｊ　＝　９．８，　９．５，　Ｈ－３’），　５．８５　（１Ｈ，　ｂｒ　ｄｄ，　Ｊ　＝　１０．０，　９．５，　Ｈ－２’），　６．３４　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　６．８５　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－４），　７．３８　（１Ｈ，　ｓ，　Ｈ－８），　８．９－１１．５　（３Ｈ，　ｂｒ，　ＯＨ），　１３．９　（１Ｈ，　ｓ，　ＯＨ）．　１３Ｃ　ＮＭＲ　（２００　ＭＨｚ，　ＤＭＳＯ－ｄ６，　６０　°Ｃ）　δ：　１２．６／１３．１３／１３．１６／１３．２２　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　１７．６２／１７．６４／１７．６６　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　３５．１６／３５．２３／３５．２６／３５．３１　（ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３），　６１．９　（Ｃ－６’），　６８．３　（Ｃ－４’），　６９．０　（Ｃ－２’），　７０．４　（Ｃ－１’），　７４．１　（Ｃ－３’），　７５．０　（Ｃ－５’），　９３．３　（Ｃ－４），　１０１．１　（Ｃ－９ａ），　１０２．６　（Ｃ－５），　１０４．２　（Ｃ－２），　１０８．２　（Ｃ－８），　１１１．７　（Ｃ－８ａ），　１４３．８　（Ｃ－７），　１５０．８　（Ｃ－６），　１５４．２　（Ｃ－８ｂ），　１５６．８　（Ｃ－４ａ），　１６２．１　（Ｃ－１），　１６３．７　（Ｃ－３），　１７０．９／１７１．６／１７１．７／１７２．３　（ＣＯＣＨ２ＣＨ３）　１７９．０　（Ｃ－９）．　ＨＲＭＳ　（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：　［Ｍ－Ｈ］－　Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３５Ｈ４１Ｏ１５　７０１．２４４０；　Ｆｏｕｎｄ　７０１．２４４０．以上であった。
＜（１）式（ノラチリオール）の合成＞
　ノラチリオールを非特許文献１の方法に従って合成した。なお、ノラチリオールはＣＡＳ番号３５４２－７２－１で表される既知物質であり、市販もされているので、購入してもよい。
　ノラチリオールは以下のように合成した。すなわち、文献記載（非特許文献１）の方法に従って、２，４，５－トリメトキシ安息香酸（化合物ＩＩ）を塩化チオニルで処理して２，４，５－トリメトキシ安息香酸クロリド（化合物ＩＩＩ）を得た。次に、得られた化合物（化合物ＩＩＩ）と１，３，５－トリメトキシベンゼン（化合物ＩＶ）とのフリーデル－クラフト反応により２－ヒロドキシ－２’，４，４’，５，６’－ペンタメトキシベンゾフェノン（化合物Ｖ）を得た。さらに、この化合物（Ｖ）にテトラブチルアンモニウムヒドロキシドを処理して、１，３，６，７－テトラメトキシキサントン（化合物ＶＩ）を得、その後、脱メチル化を行い、ノラチリオール（化合物Ｉ）を収率３９％で得た。
　以下に、本実施例の合成経路を詳細に説明する。
（１）２，４，５－トリメトキシ安息香酸クロリド（化合物ＩＩＩ）の製造方法
　２，４，５－トリメトキシ安息香酸（化合物ＩＩ、８．４９ｇ、０．０４０ｍｏｌ）にアルゴン雰囲気下、室温で塩化チオニル（５ｍＬ）を徐々に加えて溶解させたのち、６時間加熱還流を行った。反応終了後、反応混合物を減圧下留去し、２，４，５－トリメトキシ安息香酸クロリド（化合物ＩＩＩ、８．３０ｇ、９０％）を得た。得られた化合物（ＩＩＩ）は、ただちに次の反応へ用いた。
（２）２－ヒロドキシ－２’，４，４’，５，６’－ペンタメトキシベンゾフェノン（化合物Ｖ）の製造方法
　上述のようにして得られた２，４，５－トリメトキシ安息香酸クロリド（化合物ＩＩＩ、８．０７ｇ、０．０３５ｍｏｌ）、１，３，５－トリメトキシベンゼン（化合物ＩＶ、６．４８ｇ、０．０３８５ｍｏｌ）および無水ジエチルエーテル（５００ｍＬ）の混合懸濁物にアルゴン雰囲気下、室温で塩化アルミニウム（１６ｇ）を徐々に加えた後、反応混合物を室温で４８時間攪拌した。反応液を減圧下溶媒留去した後、残渣に水を加え、酢酸エチルにて抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ひだ折りろ紙にて乾燥剤を濾別後、ろ液を減圧下溶媒留去して粗生成物を得た。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ－ヘキサン：酢酸エチル＝１：１，ｖ／ｖ）により精製し、２－ヒロドキシ－２’，４，４’，５，６’－ペンタメトキシベンゾフェノン（化合物Ｖ、８．４３ｇ、６９％）を得た。
（３）１，３，６，７－テトラメトキシキサントン（化合物ＶＩ）の製造方法
　上述のようにして得られた２－ヒロドキシ－２’，４，４’，５，６’－ペンタメトキシベンゾフェノン（化合物Ｖ、６．９７ｇ、０．０２０ｍｏｌ）をピリジン（１０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）との混合溶媒を溶かし、４０％テトラブチルアンモニウムヒドロキシド水溶液（５ｍＬ）を加えて６時間加熱還流を行った。得られた反応混合物を５％塩酸に注加した後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ひだ折りろ紙にて乾燥剤を濾別後、ろ液を減圧下溶媒留去して粗生成物を得た。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ－ヘキサン：酢酸エチル＝１：１，ｖ／ｖ）により精製し、１，３，６，７－テトラメトキシキサントン（化合物ＶＩ、５．８２ｇ、９２％）を得た。
（４）ノラチリオール（化合物Ｉ）の製造方法
　上述のようにして得られた１，３，６，７－テトラメトキシキサントン（化合物ＶＩ、４．７４ｇ、０．０１５ｍｏｌ）とピリジン塩酸塩（５．００ｇ）の混合物を６時間、２００℃にて加熱攪拌した。得られた反応混合物を室温まで放冷後、５％塩酸に注加した後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ひだ折りろ紙にて乾燥剤を濾別後、ろ液を減圧下溶媒留去して粗生成物を得た。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝７：１，ｖ／ｖ）により精製し、（２）式のノラチリオール（化合物Ｉ、２．６５ｇ、６８％）を得た。
　以下本発明に係る化合物のサイトカインストーム抑制効果について実施例を示して説明する。
＜実施例１＞Ｂ細胞におけるＴＮＦα　ｍＲＮＡ発現抑制効果
　マウスＢ細胞を用いてサイトカインストームに関与するＴＮＦα　ｍＲＮＡ発現に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスＢ細胞をＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をＢ細胞に添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、４時間培養した。４時間培養後、細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した後、Ｒｅａｌ　Ｔｉｍｅ　ＰＣＲにてＴＮＦαのｍＲＮＡ発現を測定した。結果を図１に示す。
　図１を参照して、横軸は各薬剤の処理を示し、縦軸はハウスキーピング遺伝子であるＧＡＰＤＨ（Ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ　３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ；　グリセルアルデヒド　－３－　リン酸脱水素酵素）のｍＲＮＡに対する、ＴＮＦαのｍＲＮＡの割合を示すものである。試薬の溶解に用いた０．５％ＤＭＳＯ　ｉｎ　ＰＢＳのみを添加したものをｃｏｎｔｒｏｌとした。１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、ＬＰＳとマンギフェリン８ａを併用して投与したものをマンギフェリン８ａ投与群、ＬＰＳとノラチリオールを併用して投与したものをノラチリオール投与群、ＬＰＳとＭ９を併用して投与したものをＭ９投与群、ＬＰＳとＭ１４を併用して投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　図１を参照して、ＬＰＳ投与群は、ＴＮＦα　ｍＲＮＡの発現が亢進していた。これはサイトカインストームを起こしている状態を再現したものである。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ともＬＰＳ誘導性ＴＮＦα　ｍＲＮＡの発現の低下が確認された。
＜実施例２＞Ｂ細胞におけるＩＬ－６　ｍＲＮＡ発現抑制効果
　マウスＢ細胞を用いてサイトカインストームに関与するＩＬ－６　ｍＲＮＡ発現に対する化合物の抑制の検討を行った。実験手順は実施例１と同じである。結果を図２に示す。
　図２を参照して、横軸は各薬剤の処理を示し、縦軸はハウスキーピング遺伝子であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡに対する、ＩＬ－６のｍＲＮＡの割合を示すものである。試薬の溶解に用いた０．５％ＤＭＳＯ　ｉｎ　ＰＢＳのみを添加したものをｃｏｎｔｒｏｌとした。１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、ＬＰＳとマンギフェリン８ａを併用して投与したものをマンギフェリン８ａ投与群、ＬＰＳとノラチリオールを併用して投与したものをノラチリオール投与群、ＬＰＳとＭ９を併用して投与したものをＭ９投与群、ＬＰＳとＭ１４を併用して投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　図２を参照して、ＬＰＳ投与群は、ＩＬ－６　ｍＲＮＡの発現が亢進していた。これはサイトカインストームを起こしている状態を再現したものである。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ともＩＬ－６　ｍＲＮＡの発現の低下が確認された。
＜実施例３＞マクロファージにおけるＴＮＦα　ｍＲＮＡ発現抑制効果
　マウスマクロファージを用いてサイトカインストームに関与するＴＮＦα　ｍＲＮＡ発現に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスマクロファージをＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をマクロファージに添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、４時間培養した。４時間培養後、細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した後、Ｒｅａｌ　Ｔｉｍｅ　ＰＣＲにてＴＮＦαのｍＲＮＡ発現を測定した。結果を図３に示す。
　図３を参照して、横軸は各薬剤の処理を示し、縦軸はハウスキーピング遺伝子であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡに対する、ＴＮＦαのｍＲＮＡの割合を示すものである。試薬の溶解に用いた０．５％ＤＭＳＯ　ｉｎ　ＰＢＳのみを添加したものをｃｏｎｔｒｏｌとした。１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、ＬＰＳとマンギフェリン８ａを併用して投与したものをマンギフェリン８ａ投与群、ＬＰＳとノラチリオールを併用して投与したものをノラチリオール投与群、ＬＰＳとＭ９を併用して投与したものをＭ９投与群、ＬＰＳとＭ１４を併用して投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　図３を参照して、ＬＰＳ投与群は、ＴＮＦα　ｍＲＮＡの発現が亢進していた。これはサイトカインストームを起こしている状態を再現したものである。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ともＬＰＳ誘導性ＴＮＦα　ｍＲＮＡの発現の低下が確認された。
＜実施例４＞マクロファージにおけるＩＬ－６　ｍＲＮＡ発現抑制効果
　マウスマクロファージを用いてサイトカインストームに関与するＩＬ－６　ｍＲＮＡ発現に対する化合物の抑制の検討を行った。
　実験の手順は実施例３と同じである。結果を図４に示す。図４を参照して、横軸は各薬剤の処理を示し、縦軸はハウスキーピング遺伝子であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡに対する、ＩＬ－６のｍＲＮＡの割合を示すものである。試薬の溶解に用いた０．５％ＤＭＳＯ　ｉｎ　ＰＢＳのみを添加したものをｃｏｎｔｒｏｌとした。１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、ＬＰＳとマンギフェリン８ａを併用して投与したものをマンギフェリン８ａ投与群、ＬＰＳとノラチリオールを併用して投与したものをノラチリオール投与群、ＬＰＳとＭ９を併用して投与したものをＭ９投与群、ＬＰＳとＭ１４を併用して投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　図４を参照して、ＬＰＳ投与群は、ＩＬ－６　ｍＲＮＡの発現が亢進していた。これはサイトカインストームを起こしている状態を再現したものである。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ともＩＬ－６　ｍＲＮＡの発現の低下が確認された。
＜実施例５＞Ｂ細胞におけるＴＮＦα産生抑制効果
　マウスＢ細胞を用いてサイトカインストームに関与するＴＮＦα産生に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスＢ細胞をＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をＢ細胞に添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、２日間培養した。２日間培養後、培養上清を回収し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってＴＮＦα産生量を測定した。この測定にはマウスＴＮＦα　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　結果を図５に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＴＮＦα産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＴＮＦαが１５．１３ｐｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、２９６．３１ｐｇ／ｍＬとＬＰＳ刺激によりＢ細胞が活性化し、ＴＮＦα分泌を亢進していることが分かる。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、５９．３１ｐｇ／ｍＬ、６４．１３ｐｇ／ｍＬ、５５．１３ｐｇ／ｍＬ、４６．１３ｐｇ／ｍＬであった。
　以上のようにマンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はＬＰＳ刺激におけるＴＮＦα産生を顕著に抑制することが分かった。
＜実施例６＞Ｂ細胞におけるＩＬ－６産生抑制効果
　マウスＢ細胞を用いてサイトカインストームに関与するＩＬ－６産生に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスＢ細胞をＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をＢ細胞に添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、２日間培養した。２日間培養後、培養上清を回収し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってＩＬ－６産生量を測定した。この測定にはマウスＩＬ－６　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　結果を図６に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＩＬ－６産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＩＬ－６が９．４６ｐｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、２４６．１３ｐｇ／ｍＬとＬＰＳ刺激によりＢ細胞が活性化し、ＩＬ－６分泌を亢進していることが分かる。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、５４．１３ｐｇ／ｍＬ、５６．１３ｐｇ／ｍＬ、４５．１２ｐｇ／ｍＬ、４５．１３ｐｇ／ｍＬであった。
　以上のようにマンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はＬＰＳ刺激におけるＩＬ－６産生を顕著に抑制することが分かった。
＜実施例７＞マクロファージにおけるＴＮＦα産生抑制効果
　マウスマクロファージを用いてサイトカインストームに関与するＴＮＦα産生に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスマクロファージをＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をマクロファージに添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、２日間培養した。２日間培養後、培養上清を回収し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってＴＮＦα産生量を測定した。この測定にはマウスＴＮＦα　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　結果を図７に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＴＮＦα産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＴＮＦαが２４．１１ｐｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、４２１．１３ｐｇ／ｍＬとＬＰＳ刺激によりマクロファージが活性化し、ＴＮＦα分泌を亢進していることが分かる。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、６５．１３ｐｇ／ｍＬ、６８．１３ｐｇ／ｍＬ、５８．１３ｐｇ／ｍＬ、５４．１３ｐｇ／ｍＬであった。
　以上のようにマンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はＬＰＳ刺激におけるＴＮＦα産生を顕著に抑制することが分かった。
＜実施例８＞マウスマクロファージにおけるＩＬ－６産生抑制効果
　マウスマクロファージを用いてサイトカインストームに関与するＩＬ－６産生に対する化合物の抑制の検討を行った。
　マウスマクロファージをＲＰＭＩ１６４０培地にて１日培養した。その後、１０μＭ　マンギフェリン８ａ、１０μＭ　ノラチリオール、１μＭ　Ｍ９、１μＭ　Ｍ１４をマクロファージに添加し、１日間培養後、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳを添加した後、２日間培養した。２日間培養後、培養上清を回収し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってＩＬ－６産生量を測定した。この測定にはマウスＩＬ－６　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　結果を図８に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＩＬ－６産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＩＬ－６が１３．１３ｐｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、３２１．１３ｐｇ／ｍＬとＬＰＳ刺激によりマクロファージが活性化し、ＩＬ－６分泌を亢進していることが分かる。一方、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、６９．１６ｐｇ／ｍＬ、６４．１３ｐｇ／ｍＬ、４９．４６ｐｇ／ｍＬ、４５．１３ｐｇ／ｍＬであった。
　以上のようにマンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はＬＰＳ刺激におけるＩＬ－６産生を顕著に抑制することが分かった。
＜実施例９＞化合物によるサイトカインストームでの致死抑制効果
　６週齢のオスＣ５７ＢＬ／６Ｊ（清水実験材料）に５０ｍｇ／ｋｇ　マンギフェリン８ａ、１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオール、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４を経口投与し、その５分後に２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳ腹腔内投与した。なお、投与開始日を０日目とし、２日目の生存率を測定した。
　化合物およびＬＰＳを投与していないものをコントロール群、２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　マンギフェリン８ａと２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをマンギフェリン８ａ投与群、１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオールと２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをノラチリオール投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ９投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　図９に生存率の結果を示す。図９を参照して横軸は化合物の処理を示し、縦軸は生存率（％）を示す。また、コントロール群に対して有意な差（Ｐ＜０．０５）であったものには「＊」を示した。
　図９を参照して、コントロール群と比較し、ＬＰＳ投与群では顕著に生存率の低下が認められ、ＬＰＳ投与によるサイトカインストームにより生存率が低下していることが分かる。
　マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではＬＰＳ投与群と比較し、顕著に生存率の低下を抑制した。
　すなわち、マンギフェリン８ａ投与群、ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はサイトカインストームによる致死率を改善することが分かった。
＜実施例１０：ＴＮＦ－α産生抑制効果＞
　６週齢のオスＣ５７ＢＬ／６Ｊ（清水実験材料）に１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオール、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４を経口投与し、その５分後に２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳ腹腔内投与した。ＬＰＳ投与２時間後にマウスから血清を採取し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってサイトカインストームに関与するＴＮＦα産生量を測定した。この測定にはマウスＴＮＦα　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　化合物およびＬＰＳを投与していないものをコントロール群、２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオールと２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをノラチリオール投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ９投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　結果を図１０に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＴＮＦα産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＴＮＦαが１．５５ｎｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、１０．２８ｎｇ／ｍＬとＴＮＦα分泌を亢進し、サイトカインストームを引き起こしていることが分かる。ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、２．７１ｎｇ／ｍＬ、５．６８ｎｇ／ｍＬ、５．２ｎｇ／ｍＬであった。
　以上のようにノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はｉｎ　ｖｉｖｏにおいてもサイトカインストームに関わるＴＮＦα産生を顕著に抑制することが分かった。
＜実施例１１：ＩＬ－６産生抑制効果＞
　６週齢のオスＣ５７ＢＬ／６Ｊ（清水実験材料）に１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオール、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４を経口投与し、その５分後に２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳ腹腔内投与した。ＬＰＳ投与２時間後にマウスから血清を採取し、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってサイトカインストームに関与するＩＬ－６産生量を測定した。この測定にはマウスＩＬ－６　ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ）を用いて行った。
　化合物およびＬＰＳを投与していないものをコントロール群、２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＬＰＳ投与群、１００ｍｇ／ｋｇ　ノラチリオールと２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをノラチリオール投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ９と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ９投与群、５０ｍｇ／ｋｇ　Ｍ１４と２５ｍｇ／ｋｇ　ＬＰＳを投与したものをＭ１４投与群と呼ぶ。
　結果を図１１に示す。横軸はサンプル群を表し、縦軸はＩＬ－６産生量を表す。ＣｏｎｔｒｏｌではＩＬ－６が２．７５ｎｇ／ｍＬであるのに対し、１０μｇ／ｍＬ　ＬＰＳでは、２０．１ｎｇ／ｍＬとＩＬ－６分泌を亢進し、サイトカインストームを引き起こしていることが分かる。ノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群ではそれぞれ、１１．３７ｎｇ／ｍＬ、１５．１５ｎｇ／ｍＬ、１４．２６ｎｇ／ｍＬであった。
　以上のようにノラチリオール投与群、Ｍ９投与群、Ｍ１４投与群はｉｎ　ｖｉｖｏにおいてもサイトカインストームに関わるＩＬ－６産生を顕著に抑制することが分かった。
　本発明に係るサイトカインストーム抑制剤は、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等の死亡原因の１つであるサイトカインストームの治療薬を提供することができる。さらに、ＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等以外による劇症型肺炎、劇症型呼吸器不全、劇症肝炎、劇症型心筋炎、劇症大腸炎、劇症型敗血症、劇症マラリア、劇症型抗リン脂質抗体症候群、劇症膵炎、劇症髄膜炎菌血症、劇症１型糖尿病、変異性劇症膠原病、および播種性血管内凝固症候群による劇症型炎症の治療薬としても利用できる。
　さらにＣＯＶＩＤ－１９、サイトカイン放出症候群、ＣＡＲ－Ｔ療法によるサイトカイン放出症候群、敗血症、全身性炎症反応症候群、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、インフルエンザ、ＧＶＨＤ、全身性血管炎、川崎病、高安動脈炎等によるサイトカインストームが改善されることで、患者の生存率も向上する。さらに、本発明に係るサイトカインストーム抑制剤は、経口投与も可能なので、逼迫する医療現場の改善にも寄与するものである。

Claims (5)

  1. 　（１）式～（４）式のいずれかの化合物を有効成分とするサイトカインストーム抑制用医薬組成物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
  2. 　請求項１に記載された（１）～（４）式の少なくとも１種の化合物を含むＴＮＦαおよびＩＬ－６産生を抑制する医薬組成物。
  3. 　請求項１に記載された（１）～（４）式の少なくとも１種の化合物を含むＴＮＦαおよびＩＬ－６産生を抑制する組成物。
  4. 　請求項１に記載された（１）～（４）式の少なくとも１種の化合物を含む食品組成物。
  5. 　請求項１に記載された（１）～（４）式の少なくとも１種の化合物を含む剤。
PCT/JP2022/005709 2021-02-15 2022-02-14 サイトカインストーム抑制用医薬組成物 WO2022173042A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US18/276,114 US20240115589A1 (en) 2021-02-15 2022-02-14 Pharmaceutical composition for preventing cytokine storm
JP2022580708A JPWO2022173042A1 (ja) 2021-02-15 2022-02-14
EP22752864.3A EP4292593A1 (en) 2021-02-15 2022-02-14 Pharmaceutical composition for preventing cytokine storm

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2021021955 2021-02-15
JP2021-021955 2021-02-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022173042A1 true WO2022173042A1 (ja) 2022-08-18

Family

ID=82838365

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2022/005709 WO2022173042A1 (ja) 2021-02-15 2022-02-14 サイトカインストーム抑制用医薬組成物

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20240115589A1 (ja)
EP (1) EP4292593A1 (ja)
JP (1) JPWO2022173042A1 (ja)
WO (1) WO2022173042A1 (ja)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012020953A (ja) 2010-07-13 2012-02-02 Chiba Univ 劇症型炎症の予防および／または治療剤
WO2016104436A1 (ja) 2014-12-22 2016-06-30 国立大学法人 岡山大学 サイトカインストーム抑制剤
WO2020130102A1 (ja) * 2018-12-19 2020-06-25 学校法人近畿大学 自己免疫疾患の改善用組成物
WO2020162638A1 (ja) * 2019-02-08 2020-08-13 学校法人近畿大学 悪性腫瘍疾患の改善用組成物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012020953A (ja) 2010-07-13 2012-02-02 Chiba Univ 劇症型炎症の予防および／または治療剤
WO2016104436A1 (ja) 2014-12-22 2016-06-30 国立大学法人 岡山大学 サイトカインストーム抑制剤
WO2020130102A1 (ja) * 2018-12-19 2020-06-25 学校法人近畿大学 自己免疫疾患の改善用組成物
WO2020162638A1 (ja) * 2019-02-08 2020-08-13 学校法人近畿大学 悪性腫瘍疾患の改善用組成物

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Molecular theory of organic pharmaceuticals", 25 August 2012, KYOTO HIROKAWA SHOTEN, JP, ISBN: 978-4-901789-81-3, article SATOSHI SHUTO: "4) Prodrugs", pages: 169 - 171, XP009539019 *
CAS, no. 3542-72-1
CHOWDHURY APU, LU JIHONG, ZHANG RUMENG, NABILA JAHAN, GAO HANG, WAN ZHIKANG, ADELUSI TEMITOPE ISAAC, YIN XIAOXING, SUN YING: "Mangiferin ameliorates acetaminophen-induced hepatotoxicity through APAP-Cys and JNK modulation", BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY, ELSEVIER, FR, vol. 117, 1 September 2019 (2019-09-01), FR , pages 109097, XP055958598, ISSN: 0753-3322, DOI: 10.1016/j.biopha.2019.109097 *
CONVERTINO IRMA, TUCCORI MARCO, FERRARO SARA, VALDISERRA GIULIA, CAPPELLO EMILIANO, FOCOSI DANIELE, BLANDIZZI CORRADO: "Exploring pharmacological approaches for managing cytokine storm associated with pneumonia and acute respiratory distress syndrome in COVID-19 patients", CRITICAL CARE, vol. 24, no. 1, 1 December 2020 (2020-12-01), XP055879485, DOI: 10.1186/s13054-020-03020-3 *
GU TINGXUAN, ZHAO SIMIN, JIN GUOGUO, SONG MENGQIU, ZHI YAFEI, ZHAO RAN, MA FAYANG, ZHENG YAQIU, WANG KEKE, LIU HUI, XIN MINGXIA, H: "Cytokine Signature Induced by SARS-CoV-2 Spike Protein in a Mouse Model", FRONTIERS IN IMMUNOLOGY, vol. 11, 28 January 2021 (2021-01-28), XP055877307, DOI: 10.3389/fimmu.2020.621441 *
HU LWU WCHAI XLUO JWU Q, BIOORG. MED. CHEM. LETT, vol. 21, 2011, pages 4013 - 4015
JI-SUN SHIN, YOUNG-SU NOH , DONG-HYUN KIM , YOUNG-WUK CHO , KYUNG-TAE LEE: "Mangiferin isolated from the rhizome of Anemarrhena asphodeloides inhibits the LPS-induced nitric oxide and prostagladin E2 via the NF-κB inactivation in inflammatory macrophages.", NATURAL PRODUCT SCIENCES, vol. 14, no. 3, 1 January 2008 (2008-01-01), pages 206 - 213, XP055958595 *
QU SHIHUI; WANG WENQING; LI DEPENG; LI SHUMIN; ZHANG LIKE; FU YUNHE; ZHANG NAISHENG: "Mangiferin inhibits mastitis induced by LPS via suppressing NF-ĸB and NLRP3 signaling pathways", INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 43, 14 December 2016 (2016-12-14), NL , pages 85 - 90, XP029881743, ISSN: 1567-5769, DOI: 10.1016/j.intimp.2016.11.036 *
WILZ, S. W.: "A clinical trial of IL-15 and IL-21 combination therapy for COVID-19 is warranted. ", CYTOKINE & GROWTH FACTOR REVIEWS, ELSEVIER LTD, GB, vol. 58, 1 August 2020 (2020-08-01), GB , pages 49 - 50, XP055958605, ISSN: 1359-6101, DOI: 10.1016/j.cytogfr.2020.06.008 *

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2022173042A1 (ja) 2022-08-18
EP4292593A1 (en) 2023-12-20
US20240115589A1 (en) 2024-04-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2020162638A1 (ja) 悪性腫瘍疾患の改善用組成物
WO2020130102A1 (ja) 自己免疫疾患の改善用組成物
JPWO2004096198A1 (ja) 治療剤
KR100704299B1 (ko) 신규한 퀴놀린계 화합물, 및 지네 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물
CA2525486C (en) Composition for lowering the internal lipid
JP2006273741A (ja) ＰＰＡＲγリガンド活性を有する組成物
JP6157041B2 (ja) ＰＰＡＲγ活性化剤、抗肥満剤及び抗糖尿病剤
JP5275315B2 (ja) 新規化合物及びβ−セクレターゼ阻害剤
JPWO2005074906A1 (ja) 治療剤
WO2012008467A1 (ja) axial-equatorial aryl配向のfurofuran型リグナンを含有する骨形成促進用医薬組成物、その組成物を含有する医薬製剤、その組成物を含む機能性食品及び健康食品
WO2022173042A1 (ja) サイトカインストーム抑制用医薬組成物
WO2022138735A1 (ja) 悪性腫瘍疾患の改善用医薬組成物
KR102287236B1 (ko) 카탈폴 유도체 화합물을 포함하는 항암 보조제
JP4993969B2 (ja) 抗発癌プロモーター活性剤
KR102203163B1 (ko) 산꼬리풀 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항암 보조제
JP2021054838A (ja) オレアノール酸アセテートを有効成分として含む、薬剤により誘発される腎臓毒性の予防、改善または治療用の組成物
JP2017530110A (ja) シュードリシマキオン・ロツンダム変種スブインテグルムから単離された新規の化合物（ｋｓ５１３）、その化合物を有効成分として含む、アレルギー性疾患、炎症性疾患、喘息又は慢性閉塞性肺疾患の予防又は治療用組成物及びその使用
JP6368270B2 (ja) モニエロサイドａ及びその誘導体、又はそれを有効成分として含有する医薬用組成物、健康食品又は化粧品
CN108904481B (zh) 邻羟基查尔酮类似物在制备抗氧化药物中的应用
JP2018177738A (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
JP2006348003A (ja) マスト細胞ＩｇＥレセプター発現抑制剤
JP5186084B2 (ja) ロボフルーツ含有サポニンとその用途
KR102482984B1 (ko) 베타-펠토보이키놀산을 포함하는 폐섬유화증 및 미세먼지 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO1999004777A1 (fr) Carcinostatiques
JPWO2004009521A1 (ja) 治療剤

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 22752864

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2022580708

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 18276114

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2022752864

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2022752864

Country of ref document: EP

Effective date: 20230915