WO2004071519A1 - Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations - Google Patents

Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations Download PDF

Info

Publication number
WO2004071519A1
WO2004071519A1 PCT/FR2003/000103 FR0300103W WO2004071519A1 WO 2004071519 A1 WO2004071519 A1 WO 2004071519A1 FR 0300103 W FR0300103 W FR 0300103W WO 2004071519 A1 WO2004071519 A1 WO 2004071519A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
biologically active
active molecules
chosen
molecules
mops
Prior art date
Application number
PCT/FR2003/000103
Other languages
English (en)
Inventor
François BRUNEAU
Peggy Hours-Linares
Original Assignee
Bruneau Francois
Peggy Hours-Linares
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bruneau Francois, Peggy Hours-Linares filed Critical Bruneau Francois
Priority to PCT/FR2003/000103 priority Critical patent/WO2004071519A1/fr
Priority to AU2003214316A priority patent/AU2003214316A1/en
Priority to PCT/FR2004/000064 priority patent/WO2004070044A1/fr
Publication of WO2004071519A1 publication Critical patent/WO2004071519A1/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/748—Cyanobacteria, i.e. blue-green bacteria or blue-green algae, e.g. spirulina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A61K36/04—Rhodophycota or rhodophyta (red algae), e.g. Porphyra
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A61K36/05—Chlorophycota or chlorophyta (green algae), e.g. Chlorella
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9706—Algae
    • A61K8/9717—Rhodophycota or Rhodophyta [red algae], e.g. Porphyra
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9706—Algae
    • A61K8/9722—Chlorophycota or Chlorophyta [green algae], e.g. Chlorella
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C12N1/125—Unicellular algae isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/89—Algae ; Processes using algae

Definitions

  • the present invention relates to photosynthetic microorganisms enriched in biologically active molecules, their preparation methods, and their uses, in particular in the form of pharmaceutical, veterinary, cosmetic compositions, or as a food supplement.
  • the object of this invention is to provide a vector of drugs or biologically active molecules allowing, by its qualities, a reduction in the side effects of these products, a buffer effect and a complementation of these by an intake of vitamins, essential fatty acids and anti-radicals.
  • These vectors are cyanobacteria and / or fractions of cyanobacteria, and / or microalgae and / or fractions of microalgae.
  • This set of microorganisms is grouped under the abbreviation MOP (Photosynthetic Microorganisms).
  • the associated drugs can be metal ions (such as trace elements), or complex biologically active molecules of natural or synthetic origin (such as analgesics, antibiotics, anticancer drugs, steroid hormones, antivirals, bioactive peptides), molecules which cause unwanted side reactions.
  • MOPs contain two types of microorganisms belonging to two different kingdoms. Cyanobacteria are prokaryotes while unicellular algae are eukaryotic plants.
  • spirulina (Arthrospira platensis, Spirulina major) and Nostoc which are already consumed by humans, Synechocystis, Synechococcus, which are single-celled and are very effective in industrial culture.
  • chlorella Chlamydomonas, Scenedesmus, Haematococcus, Dunaliella, Chlorococcwn, Nanochloropsis, Rhodella, Rhodosorus and Porphyridium which are unicellular microalgae.
  • MOPs have very different compositions both from the point of view of membranes and of their proportion of pigments and vitamins, which makes it possible to offer very targeted formulations.
  • MOPs provide biologically active molecules (vitamins, essential lipids, polysaccharides, pigments, proteins ”) which have beneficial actions on the healthy and sick organism. Some of these components have special properties.
  • the polysaccharides extracted from these photosynthetic microorganisms contain carboxyl and sulphate functions, ionizable and reactive functions which allow the ionic or chemical fixation of molecules.
  • glucuronic acid plays a very important role in mammals by allowing the elimination of toxic molecules having an alcohol function, for example phenol or morphine.
  • Certain sugars are sulphated and this sulphate function makes it possible to trap the divalent positive ions. This is precisely the case for most trace elements, essential metals. But this is also the case for toxic metals such as lead and mercury. This property of metal trapping is exploited in the processes of bioremediation (depollution of sites) of "biomining" (assisted recovery of metals).
  • Sulphated polysaccharides have significant biological activities in mammals: anti-thrombic, anti-viral, anti-inflammatory, immunomodulatory, anti-metastatic ...
  • MOPs are rich in linoleic acid and gamma-linolenic acid of cis form (only biologically active form), which are essential lipids not synthesized by animals. They are necessary for normal growth, skin development, gestation and lactation, transport of cholesterol, synthesis of progesterones ,. The oxidation of unsaturated lipids is inhibited by vitamin K which is also found in MOPs.
  • Beta-carotene is provitamin A.
  • MOPs phycobiliproteins
  • cyanobacteria and red microalgae have recognized activities as anti-radical, immuno-modulating and anti-inflammatory. Mention may also be made of the superoxide dismutase present in MOPs. All of these characteristics give MOPs a set of interesting qualities for use as a co-drug in human medicine, veterinary medicine, cosmetics, or as a dietary supplement.
  • the present invention essentially stems from the discovery by the inventors of the fact that MOPs are capable of fixing the abovementioned biologically active molecules, and of transporting these molecules while protecting them towards their target cells, thus avoiding the phenomena of plasma peaks of these molecules, and the possible side effects of the latter, without altering the chemical structures and the biological effects of said molecules.
  • the subject of the present invention is the use of whole or ground photosynthetic microorganisms (MOPs) for the preparation of pharmaceutical compositions for human or veterinary use, cosmetic compositions, or food supplements, in combination with one or more biologically active molecules. .
  • MOPs photosynthetic microorganisms
  • the invention more particularly relates to the aforementioned use of MOP, characterized in that:
  • the MOPs are chosen from cyanobacteria, such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, or from unicellular micro-algae, such as Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella - and the biologically active molecules are chosen from trace elements, essential amino acids, lipids, vitamins, analgesics, antibiotics, anti-cancer drugs, anti-inflammatories, antivirals, hormones, beta- blockers, anti-arrhythmics, anti-parasites, bioactive peptides, of natural or synthetic origin.
  • cyanobacteria such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, or from unicellular micro-algae, such as Chlamydomonas,
  • the invention relates more particularly to the aforementioned use of MOP, characterized in that:
  • the MOPs are chosen from Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, or Hematococcus,
  • - and the biologically active molecules are chosen from:
  • anti-inflammatory drugs such as acetylsalicylic acid or its derivatives, anti-cyclooxygenase 2,
  • vitamins such as vitamin C
  • antivirals such as 3'Azido-3'deoxythymidine (AZT) or its derivatives,
  • antibiotics such as macrolides, or sulfa drugs
  • anti-cancer drugs such as vinblastine, or taxol derivatives
  • bioactive peptides The subject of the invention is also a process for preparing whole photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules, characterized in that it comprises the following steps:
  • This first process is an evolution of part of the physiological induction process described in patent FR 2789399.
  • Microalgae are cultivated as photobioreactors in the environments which are most favorable to them. Shortly before the stationary phase, the MOPs are harvested and concentrated by filtration. They are then incubated for 1 to 12 hours in a specific culture medium intended to induce modifications.
  • the physiological induction medium contains the biologically active molecule (s).
  • a physiological induction medium based on sea water will advantageously be used.
  • the whole cells are then harvested by filtration and dried by lyophilization (freeze-drying), atomization (spray-drying) or desiccation to be preferably packaged in the form of capsules. Only active molecules attached or complexed to microalgae will therefore be used.
  • the use of the physiological induction medium promotes the fixation of these molecules by the polysaccharides of the wall in the general case.
  • the subject of the invention is also a process for the preparation of ground photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules, characterized in that it comprises the following stages:
  • This second method allows the use of other components of the cell, in particular proteins and lipids as vectors for drugs and / or ions.
  • the microalgae are cultivated in photobioreactors in the media which are favorable to them and harvested at the end of the growth phase by filtration, washed and reconcentrated in physiological saline to be mechanically ground.
  • To the ground material is added with gentle stirring biologically active molecules in known quantity which can be natural (obtained by aqueous extraction of plants) or synthetic.
  • This incubation lasts 1 to 8 hours at 4 degrees Celsius.
  • To avoid photo-oxidation of biologically active molecules incubation is carried out in the dark.
  • the solution is then dried either by spray-drying or by freeze-drying to be packaged in capsules. In this case, all of the active molecules will be present in the extract.
  • the invention also relates to a process for the preparation of photosynthetic microorganisms enriched in biologically active molecules, characterized in that it comprises the successive implementation of one and the other process described above.
  • the invention also relates to a method as described above, characterized in that:
  • the MOPs are chosen from cyanobacteria, such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, or from unicellular microalgae, such as Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodella pigments, proteins and lipids linked to photosynthesis provide the anti-radicals necessary for the conservation of biologically active molecules and whose components are capable of fixing these biologically active molecules,
  • cyanobacteria such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus
  • unicellular microalgae such as Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodella pigments
  • the biologically active molecules are chosen from trace elements, essential amino acids, lipids, vitamins, analgesics, antibiotics, anti-cancer drugs, anti-inflammatories, antivirals, hormones, beta- blockers, anti-arrhythmics, anti-parasitics, bioactive peptides, of natural or synthetic origin.
  • a subject of the invention is also the photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules, as obtained by implementing a process described above.
  • the invention more particularly relates to photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules as defined above, characterized in that the proportion of said molecules linked to the wall of the microorganism, or accumulated inside the microorganism , or integrated into one of the components of the microorganism cell, or linked to the constituents of the ground material of the microorganism, represents at least about 50% of the quantity of said molecules used for the implementation of a process according to one of claims 4 to 7.
  • the invention relates more particularly to photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules as defined above, characterized in that: - the MOPs are chosen from cyanobacteria, such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, or from unicellular micro-algae, such as Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella
  • cyanobacteria such as Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus
  • unicellular micro-algae such as Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella
  • the biologically active molecules are chosen from trace elements, essential amino acids, lipids, vitamins, analgesics, antibiotics, anti-cancer drugs, anti-inflammatories, antivirals, hormones, beta- blockers, anti-arrhythmics, anti-parasitics, bioactive peptides, of natural or synthetic origin.
  • the subject of the invention is more particularly the photosynthetic microorganisms enriched in biologically active molecules as defined above, characterized in that:
  • the MOPs are chosen from Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, or Hematococcus,
  • - and the biologically active molecules are chosen from:
  • anti-inflammatory drugs such as acetylsalicylic acid or its derivatives, anti-cyclooxygenase 2,
  • vitamins such as vitamin C
  • antivirals such as 3 ⁇ zido-3'deoxythymidine (AZT) or its derivatives,
  • antibiotics such as macrolides, or sulfa drugs
  • anti-cancer drugs such as vinblastine, or taxol derivatives
  • bioactive peptides The invention also relates to any pharmaceutical, veterinary, cosmetic, or food supplement composition, characterized in that they comprise photosynthetic microorganisms enriched with biologically active molecules as defined above, in association with a physiologically acceptable vehicle.
  • compositions of the invention are in a form which can be administered orally, in particular in the form of capsules, or by topical route, in particular in the form of creams.
  • the product being in powder, nothing prevents making compositions by mixing different complexes together or associating them with active products, and using them as medicines in medicine human, veterinary, or as a dietary supplement, or as a cosmetic product.
  • Spirulina is cultivated in a photobioreactor in a Zarrouk medium (Hours M.C. et al., (1998), Biotechnology Letters, Vol. 20, pp 557-560) until a concentration of dry lg per liter is obtained.
  • the spirulina is then collected by filtration on a 50 micron sieve and washed with a sterile solution.
  • the washed pellet is taken up in approximately 1/5 of fresh medium supplemented with Zinc at 0.05 g / l, Selenium 0.16 mg / l, Molybdenum 0.16 mg / 1 (1 liter corresponds to lg dry spirulina). Induction lasts 12 hours under the initial culture conditions. After 12 hours, the biomass is harvested by filtration and dried.
  • Packaging in capsules or tablets will be carried out to obtain a known dose of active product.
  • This process is used to obtain a preparation containing a known quantity of active product (therefore with a therapeutic objective), while benefiting from the contribution beneficial of MOP.
  • MOP the protective effect of sulfated polysaccharides vis-à-vis the mucous membranes and the anti-radical effects of carotenoids, phycobiliproteins and superoxide dismutase.
  • the choice of MOP in this case depends on the desired effect and on the biodegradability of the active molecule.
  • vitamin C acetylsalicylic acid, glucosamine, caffeine (and phenolic derivatives), phorboesters, certain antibiotics, oside derivatives of purine and pyrimidine bases, hormones, all of which have interactions with polysaccharides or with cytoplasmic membranes or the thylacoide.
  • Some of these molecules have important secondary activities, even aspirin which is prescribed to the elderly in high doses and for a long time. It is therefore useful to have a vector allowing on the one hand the protection of the mucous membranes and on the other hand by the more progressive release of the active molecule. In this case, the intake of vitamins also contributes to the effectiveness of the treatment.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

La présente invention a pour objet des micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, leurs procédés de préparation, et leurs utilisations, notamment sous forme de compositions pharmaceutiques, vétérinaires, cosmétiques, ou comme complément alimentaire.

Description

MICRO-ORGANISMES PHOTOSYNTHETIQUES ENRICHIS EN
MOLECULES BIOLOGIQUEMENT ACTIVES, LEURS PROCEDES DE PREPARATION, ET LEURS UTILISATIONS
La présente invention a pour objet des micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, leurs procédés de préparation, et leurs utilisations, notamment sous forme de compositions pharmaceutiques, vétérinaires, cosmétiques, ou comme complément alimentaire.
L'objet de cette invention est de proposer un vecteur de médicaments ou de molécules biologiquement actives permettant, par ses qualités une diminution des effets secondaires de ces produits, un effet tampon et une complémentation de ceux-ci par un apport de vitamines, d'acides gras essentiels et d'antiradicalaires.
Ces vecteurs sont des cyanobactéries et/ou des fractions de cyanobactéries, et/ou des micro-algues et/ou des fractions de microalgues. Cet ensemble de micro-organismes est regroupé sous l'abréviation MOP (Micro-Organismes Photosynthétiques). Les médicaments associés peuvent être des ions métalliques (tels que des oligo-éléments), ou des molécules biologiquement actives complexes d'origine naturelle ou de synthèse (tels que les analgésiques, antibiotiques, anticancéreux, hormones stéroïdes, antiviraux, peptides bioactifs), molécules qui provoquent des réactions secondaires non désirées.
Les MOP comportent deux types de micro-organismes appartenant à deux règnes différents. Les cyanobactéries sont des procaryotes tandis que les algues unicellulaires sont des végétaux eucaryotes.
Parmi les cyanobactéries on utilisera préférentiellement la spiruline (Arthrospira platensis, Spirulina major) et Nostoc qui sont déjà consommées par l'homme, Synechocystis, Synechococcus, qui sont unicellulaires et sont très performantes en culture industrielle. Parmi les algues on utilisera préférentiellement la chlorelle (Chlorella vulgaris) qui est aussi consommée par l'homme, Chlamydomonas, Scenedesmus, Haematococcus, Dunaliella, Chlorococcwn, Nanochloropsis, Rhodella, Rhodosorus et Porphyridium qui sont des microalgues unicellulaires. Toutes ces espèces peuvent être cultivées en conditions artificielles, en milieux clos et contrôlés du point de vue des paramètres physico-chimiques et de la qualité microbiologique. Les MOP ont des compositions très différentes tant du point de vue des membranes, que de leur proportion en pigments et en vitamines, ce qui permet de proposer des formulations très ciblées.
Il est connu que les MOP apportent des molécules biologiquement actives (vitamines, lipides essentiels, polysaccharides, pigments, protéines...) qui ont des actions bénéfiques sur l'organisme sain et malade. Certains de ces composants ont des propriétés particulières.
Les polysaccharides extraits de ces micro-organismes photosynthétiques comportent des fonctions carboxyles et sulfates, fonctions ionisables et réactives qui permettent la fixation ionique ou chimique de molécules. Ainsi l'acide glucuronique joue un rôle très important chez les mammifères en permettant l'élimination de molécules toxiques possédants une fonction alcool, par exemple le phénol ou la morphine. Certains sucres sont sulfatés et cette fonction sulfate permet de piéger les ions positifs divalents. C'est justement le cas de la plupart des oligo-éléments, métaux essentiels. Mais c'est aussi le cas de métaux toxiques comme le plomb et le mercure. Cette propriété de piège de métaux est exploitée dans les procédés de bioremédiation (dépollution de sites) de "biomining" (récupération assistée des métaux). Les polysaccharides sulfatés ont chez les mammifères des activités biologiques non négligeables: anti-thrombique, anti-virale, anti-inflammatoire, immunomodulatrice, anti-métastasique...
Les lipides sont aussi très intéressants, les MOP sont riches en acide linoléique et en acide gamma-linolénique de forme cis (seule forme biologiquement active), qui sont des lipides essentiels non synthétisés par les animaux. Ils sont nécessaires à la croissance normale, au développement de la peau, à la gestation et à la lactation, au transport du cholestérol, à la synthèse des progestérones,. L'oxydation des lipides insaturés est inhibée par la vitamine K que l'on trouve aussi dans les MOP.
Les caroténoïdes ont une activité antiradicalaire, et des activités anti-cancéreuses et anti-inflammatoires sont signalées dans les publications scientifiques. Le béta- carotène est la provitamine A.
Parmi les protéines, les phycobiliprotéines, qui représentent une proportion importante du poids sec chez les cyanobactéries et les microalgues rouges, ont des activités reconnues en tant qu'anti-radicalaire, immuno-modulatrice et anti- inflammatoire. On peut aussi citer la superoxyde-dismutase présente chez les MOP. L'ensemble de ces caractéristiques confère aux MOP un ensemble de qualités intéressantes pour une utilisation comme co-medicament en médecine humaine, en médecine vétérinaire, en cosmétique, ou comme complément alimentaire.
Ces caractéristiques sont:
-Leur capacité à complexer des molécules actives ou des ions dans leur paroi polysaccharidique.
-Ces mêmes polysaccharides exercent un rôle protecteur de la muqueuse et un effet tampon lors de la délivrance de ces molécules actives ou ces ions, et donc limitent leurs effets secondaires.
-La libération d'un ensemble de cofacteurs exerçant des activités anti-radicalaires et anti-inflammatoires augmente la tolérance à des médicaments particulièrement agressifs comme les antibiotiques, les antifongiques, les anticancéreux et les antiviraux.
-La présence de vitamines, et de lipides essentiels améliorent sensiblement l'état général de l'organisme.
-Enfin d'autres composants cellulaires sont capables de fixer des molécules biologiquement actives.
La présente invention découle essentiellement de la mise en évidence par les inventeurs du fait que les MOP sont capables de fixer les molécules biologiquement actives susmentionnées, et de transporter ces molécules en les protégeant vers leur cellules cibles, évitant ainsi les phénomènes de pics plasmatiques de ces molécules, et les éventuels effets secondaires de ces dernières, sans pour autant altérer les structures chimiques et les effets biologiques desdites molécules.
La présente invention a pour objet l'utilisation de micro-organismes photosynthétiques (MOP) entiers ou broyés pour la préparation de compositions pharmaceutiques à usage humain ou vétérinaire, de compositions cosmétiques, ou de compléments alimentaires, en association avec une ou plusieurs molécules biologiquement actives.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de MOP, caractérisée en ce que :
- les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus, - et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée de MOP, caractérisée en ce que :
- les MOP sont choisis parmi Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, ou Hematococcus,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi :
. les anti-inflammatoires, tel que l'acide acétylsalicylique ou ses dérivés, les anti-cyclooxygénase 2,
. les vitamines, telle que la vitamine C,
. les antiviraux, tel que le 3'Azido-3'déoxythymidine (AZT) ou ses dérivés,
. les antibiotiques, tels que les macrolides, ou les sulfamides,
. les anti-cancéreux, telle que la vinblastine, ou les dérivés du taxol,
. les oligo-éléments et les métaux bivalents,
. les peptides bioactifs. L'invention a également pour objet un procédé de préparation de microorganismes photosynthétiques entiers enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
- mise en culture desdits micro-organismes dans un milieu de culture approprié,
- récolte des micro-organismes obtenus à l'étape précédente, et induction des MOP dans un milieu approprié comprenant des molécules biologiquement actives pendant un temps compris entre 1 et 12 heures permettant à ces molécules soit d'être fixées par la paroi du micro-organisme soit d'être accumulées à l'intérieur du micro-organisme, soit encore d'être intégrées dans l'un des composants de la cellule,
- récolte des cellules entières de micro-organismes après l'étape précédente, par filtration,
- et séchage par lyophilisation, atomisation ou dessication.
Ce premier procédé est une évolution d'une partie du procédé d'induction physiologique décrit dans le brevet FR 2789399. Les microalgues sont cultivées en photobioréacteurs dans les milieux qui leur sont le plus favorable. Peu de temps avant la phase stationnaire, les MOP sont récoltés et concentrés par filtration. Us sont ensuite incubés pendant 1 à 12 heures dans un milieu de culture spécifique destiné à induire des modifications. Dans ce cas précis le milieu d'induction physiologique contient la ou les molécules biologiquement actives. Dans certains cas, on utilisera avantageusement un milieu d'induction physiologique basé sur l'eau de mer.
Les cellules entières sont ensuite récoltées par filtration et séchées par lyophilisation (freeze-drying), atomisation (spray-drying) ou dessication pour être conditionnées préférentiellement sous forme de gélules. Seules les molécules actives fixées ou complexées aux microalgues seront donc utilisées. L'utilisation du milieu d'induction physiologique favorise la fixation de ces molécules par les polysaccharides de la paroi dans le cas général. Il peut aussi y avoir intégration de ces molécules soit dans le système membranaire, soit dans les organites.
L'invention a également pour objet un procédé de préparation de microorganismes photosynthétiques broyés enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
- mise en culture desdits micro-organismes dans un milieu de culture approprié,
- récolte des micro-organismes obtenus à l'étape précédente, et broyage dans un tampon physiologique,
- incubation du broyât obtenu à l'étape précédente à froid pendant un temps de 1 à 8 heures, le cas échéant à l'abri de la lumière, avec des molécules biologiquement actives,
- et séchage par lyophilisation, atomisation ou dessication.
Ce deuxième procédé permet l'utilisation d'autres composants de la cellule, notamment les protéines et les lipides comme vecteurs de médicaments et/ou d'ions. Dans ce cas, les microalgues sont cultivées en photobioréapteurs dans les milieux qui leur sont favorables et récoltées en fin de phase de croissance par filtration, lavées et reconcentrées dans du sérum physiologique pour être broyées mécaniquement. Au broyât est ajouté sous agitation douce des molécules biologiquement actives en quantité connue qui peuvent être naturelles (obtenues par extraction aqueuse de plantes) ou synthétiques. Cette incubation dure 1 à huit heures à 4 degrés Celsius. Pour éviter la photo-oxydation des molécules biologiquement actives, l'incubation est réalisée à l'obscurité. La solution est alors séchée soit par atomisation (spray-drying) soit par lyophilisation (freeze-drying) pour être conditionnée en gélules. Dans ce cas la totalité des molécules actives sera présente dans l'extrait. On profite alors de l'addition des propriétés des composants des microalgues et des propriétés des molécules actives servant de médicaments.
L'invention a également pour objet un procédé de préparation de microorganismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend la mise en oeuvre successive de l'un et l'autre procédé décrit ci- dessus.
L'invention concerne également un procédé tel que décrit ci-dessus, caractérisé en ce que :
- les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus, dont les pigments, les protéines et les lipides liés à la photosynthèse apportent les anti-radicalaires nécessaires à la conservation des molécules biologiquement actives et dont les composants sont aptes à la fixation de ces molécules biologiquement actives,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
L'invention a également pour objet les micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, tels qu'obtenus par mise en oeuvre d'un procédé décrit ci-dessus.
L'invention a plus particulièrement pour objet les micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives tels que définis ci- dessus, caractérisés en ce que la proportion desdites molécules liée à la paroi du microorganisme, ou accumulée à l'intérieur du micro-organisme, ou intégrée dans l'un des composants de la cellule du micro-organisme, ou liée aux constituants du broyât du micro-organisme, représente au moins environ 50% de la quantité desdites molécules utilisée pour la mise en oeuvre d'un procédé selon l'une des revendications 4 à 7.
L'invention concerne plus particulièrement les micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives tels que définis ci- dessus, caractérisés en ce que : - les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
L'invention a plus particulièrement pour objet les micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives tels que définis ci- dessus, caractérisés en ce que :
- les MOP sont choisis parmi Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, ou Hematococcus,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi :
. les anti-inflammatoires, tel que l'acide acétylsalicylique ou ses dérivés, les anti-cyclooxygénase 2,
. les vitamines, telle que la vitamine C,
. les antiviraux, tel que le 3Αzido-3'déoxythymidine (AZT) ou ses dérivés,
. les antibiotiques, tels que les macrolides, ou les sulfamides,
. les anti-cancéreux, telle que la vinblastine, ou les dérivés du taxol,
. les oligo-éléments et les métaux bivalents,
. les peptides bioactifs. L'invention concerne également toute composition pharmaceutique, vétérinaire, cosmétique, ou complément alimentaire, caractérisé en ce qu'ils comprennent des micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives tels que définis ci-dessus, en association avec un véhicule physiologiquement acceptable.
Avantageusement, les compositions susmentionnées de l'invention se présentent sous une forme administrable par voie orale, notamment sous forme de gélules, ou par voie topique, notamment sous forme de crèmes.
Le produit (complexes MOP-molécules actives) étant en poudre, rien n'interdit de réaliser des compositions par mélange de complexes différents entre eux ou de les associer à des produits actifs, et de les utiliser comme médicaments en médecine humaine, vétérinaire, ou comme complément alimentaire, ou comme produit cosmétique.
Bases expérimentales de l'invention.
1- Enrichissement en Zinc, Sélénium et Molybdène de la spiruline par le premier procédé:
La spiruline est cultivée en photobioréacteur en milieu de Zarrouk (Hours M.C. et al., (1998), Biotechnology Letters, Vol. 20, pp 557-560) jusqu'à obtenir une concentration de lg sec par litre. La spiruline est alors récoltée par filtration sur un tamis de 50 microns et lavées par une solution stérile. Le culot lavé est repris dans environ 1/5 de milieu frais additionné de Zinc à 0,05g/l, Sélénium 0,16mg/l, Molybdène 0,16 mg/1 (1 litre correspond à lg sec de spiruline). L'induction dure 12 heures dans les conditions de culture initiale. Après 12h, la biomasse est récoltée par filtration et séchée.
Les résultats font apparaître une fixation importante de ces oligo-éléments:
Culture normale Culture induite
Zinc 2,1 mg 100g sec 1384mg/100g sec
Sélénium 0,002mg/100g sec 6,5 mg/lOOg sec
Molybdène < 0,00 lmg/100g sec 0,17 mg/100g sec
De même pour un enrichissement de la spiruline en fer selon ce même procédé, on obtient:
Culture normale Culture induite
Fer 0,08 mg/100g sec 0,66 mg/100g sec
Appliqué à une microalgue comme la chlorelle selon ce, même procédé, on montre par exemple que l'on peut obtenir une importante fixation du cuivre, du Zinc, du Nickel et du cadmium. Les quantités fixées sont comprises entre 0,1 et 3g pour 100g sec. L'enrichissement par ce procédé n'est pas limité aux métaux. En effet des expériences montrent que si l'on cultive la microalgue Chlamydomonas en présence de liposomes fabriqués avec un seul lipide insaturé spécifique du thylacoide, celui-ci est peu à peu incorporé à la membrane du thylacoide. La composition globale en lipide de cette membrane est modifiée d'une façon importante. Il est à noter que pour intégrer cette membrane, le lipide doit franchir la paroi, la membrane cytoplasmique et la membrane chloroplastique. De même lors de l'enrichissement d'une culture de microalgue en Méthionine, celle-ci s'accumule sous forme très active de S-Adénosyl-Méthionine dans la vacuole ou les vacuoles. Ceci est vérifiable par microscopie à fluorescence dans l'TJV.
Enfin, nous avons réalisé avec la microalgue Scenedesmus, une expérience de fixation de la vitamine C en ajoutant celle-ci dans son milieu de culture et en incubant sans lumière pendant une nuit. En ajoutant 0,04g/l d'acide ascorbique, on peut suivre sa disparition dans le milieu de culture en mesurant la densité optique du milieu à 280nm. L'expérience montre que la quasi totalité de la vitamine C a disparu du milieu en 12h.
La même expérience réalisée sur la spiruline dans les mêmes conditions, montre que seul 40% de la vitamine C a disparu du milieu, et les 60% restant sont stables pendant au moins 24h prouvant que la vitamine C n'est pas dégradée dans le milieu, et qu'il n'y a pas métabolisation. Il y a donc bien fixation spécifique de la vitamine C par la spiruline et la quantité d'acide ascorbique fixé est proportionnelle à la quantité de biomasse de spiruline.
2- Enrichissement en molécules biologiquement actives selon le deuxième procédé.
Comme exemple, reprenons la chlorelle. Celle ci est cultivée .en photobioréacteur, jusqu'au début de la phase stationnaire. L'avantage par rapport à la spiruline est qu'elle est cultivée à un pH acide. Elle est récoltée par filtration sur un tamis de 50 microns et lavée à l'eau stérile. Elle est ensuite reprise dans du sérum physiologique à une concentration de 3 volumes de sérum par volume de chlorelle humide sous agitation douce. Elle est ensuite broyée à froid par des moyens mécaniques. Un contrôle de pH est nécessaire pour vérifier qu'après broyage le pH est légèrement acide. A ce broyât on ajoute une concentration définie d'une molécule active par exemple de l'acide acétylsalicylique, sous agitation et à froid en absence de lumière pour éviter la photooxydation, et ce pendant une à huit heures. Au delà, l'action des protéases et hydrolases risquent de dénaturer et les produits actifs et les composants de la micro-algue. La totalité de la préparation est séchée soit par lyophilisation (freeze-drying) soit par atomisation (spray-drying).
Le conditionnement en gélule ou en comprimé sera réalisé pour obtenir une dose connue de produit actif.
Ce procédé est utilisé pour obtenir une préparation contenant une quantité connue de produit actif (donc avec un objectif thérapeutique), tout en bénéficiant de l'apport bénéfique des MOP. Notamment l'effet protecteur des polysaccharides sulfatés vis-à-vis des muqueuses et les effets anti-radicalaires des caroténoïdes, des phycobiliprotéines et de la superoxide-dismutase. Le choix du MOP est dans ce cas dépendant de l'effet recherché et de la biodégradabilité de la molécule active.
Parmi ces molécules actives on peut citer, la vitamine C, l'acide acétylsalicylique, la glucosamine, la caféine ( et les dérivés phénoliques), les phorboesters, certains antibiotiques, les dérivés osidiques de bases puriques et pyrimidiques, les hormones, qui toutes ont des interactions avec les polysaccharides ou avec les membranes cytoplasmiques ou le thylacoide. Certaines de ces molécules ont des activités secondaires importantes, ne serait-ce que l'aspirine qui est prescrit aux personnes âgées à forte dose et pendant longtemps. Il est donc utile de disposer d'un vecteur permettant d'une part la protection des muqueuses et d'autre par la libération plus progressive de la molécule active. Dans ce cas, l'apport de vitamines contribue aussi à l'efficacité du traitement.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation de micro-organismes photosynthétiques (MOP) entiers ou broyés pour la préparation de compositions pharmaceutiques à usage humain ou vétérinaire, de compositions cosmétiques, ou de compléments alimentaires, en association avec une ou plusieurs molécules biologiquement actives.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que :
- les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que :
- les MOP sont choisis parmi Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, ou Hematococcus,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi :
. les anti-inflammatoires, tel que l'acide acétylsalicylique ou ses dérivés, les anti-cyclooxygénase 2,
. les vitamines, telle que la vitamine C,
. les antiviraux, tel que le 3'Azido-3'déoxythymidine (AZT) ou ses dérivés,
. les antibiotiques, tels que. les macrolides, ou les sulfamides,
. les anti-cancéreux, telle que la vinblastine, ou les dérivés du taxol,
. les oligo-éléments et les métaux bivalents,
. les peptides bioactifs.
4. Procédé de préparation de micro-organismes photosynthétiques entiers enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
- mise en culture desdits micro-organismes dans un milieu de culture approprié,
- récolte des micro-organismes obtenus à l'étape précédente, et mise en présence de ces derniers avec des molécules biologiquement actives pendant un temps compris entre 1 et 12 heures permettant à ces molécules soit d'être fixées par la paroi du microorganisme soit d'être accumulées à l'intérieur du micro-organisme, soit encore d'être intégrées dans l'un des composants de la cellule,
- récolte des cellules entières de micro-organismes après l'étape précédente, par filtration,
- et séchage par lyophilisation, atomisation ou dessication.
5. Procédé de préparation de micro-organismes photosynthétiques broyés enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
- mise en culture desdits micro-organismes dans un milieu de culture approprié,
- récolte des micro-organismes obtenus à l'étape précédente, et broyage dans un tampon physiologique,
- incubation du broyât obtenu à l'étape précédente à froid pendant un temps de 1 à 8 heures, le cas échéant à l'abri de la lumière, avec des molécules biologiquement actives,
- et séchage par lyophilisation, atomisation ou dessication. j
6. Procédé de préparation de micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, caractérisé en ce qu'il comprend la mise en oeuvre successive de l'un et l'autre procédé selon les revendications 4 et 5.
7. Procédé selon l'une des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que :
- les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus, - et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
8. Micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives, tels qu'obtenus par mise en oeuvre d'un procédé selon l'une des revendications 4 à 7.
9. Micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives selon la revendication 8, caractérisés en ce que la proportion desdites molécules liée à la paroi du micro-organisme, ou accumulée à l'intérieur du micro-organisme, ou intégrée dans l'un des composants de la cellule du micro-organisme, ou liée aux constituants du broyât du micro-organisme, représente au moins environ 50% de la quantité desdites molécules utilisée pour la mise en oeuvre d'un procédé selon l'une des revendications 4 à 7.
10. Micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives selon la revendication 8 ou 9, caractérisés en ce que :
- les MOP sont choisis parmi les cyanobactéries, telles que Arthrospira, Spirulina, Nostoc, Synechocystis, Synechococcus, ou parmi les micro-algues unicellulaires, telles que Chlamydomonas, Chlorella, Chlorococcum, Dunaliella, Hematococcus, Nanochloropsis, Porphyridium, Rhodella, Rhodosorus, ,
- et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi les oligo-éléments, les acides aminés essentiels, les lipides, les vitamines, les analgésiques, les antibiotiques, les anti-cancéreux, les anti-inflammatoires, les antiviraux, les hormones, les béta-bloquants, les anti-arythmiques, les anti-parasitaires, les peptides bioactifs, d'origine naturelle ou synthétique.
11. Micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives selon l'une des revendications 8 à 10, caractérisés en ce que
- les MOP sont choisis parmi Spirulina, Chlamydomonas, Chlorella, ou Hematococcus, - et les molécules biologiquement actives sont choisies parmi :
. les anti-inflammatoires, tel que l'acide acétylsalicylique ou ses dérivés, les anti-cyclooxygénase 2,
. les vitamines, telle que la vitamine C,
. les antiviraux, tel que le 3'Azido-3'déoxymymidine (AZT) ou ses dérivés,
. les antibiotiques, tels que les macrolides, ou les sulfamides,
. les anti-cancéreux, telle que la vinblastine, ou les dérivés du taxol,
. les oligo-éléments et les métaux bivalents,
. les peptides bioactifs.
12. Composition pharmaceutique, vétérinaire, cosmétique, ou complément alimentaire, caractérisé en ce qu'ils comprennent des micro-organismes photosynthétiques enrichis en molécules biologiquement actives selon l'une des revendications 8 à 11, en association avec un véhicule physiologiquement acceptable.
PCT/FR2003/000103 2003-01-14 2003-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations WO2004071519A1 (fr)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/FR2003/000103 WO2004071519A1 (fr) 2003-01-14 2003-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations
AU2003214316A AU2003214316A1 (en) 2003-01-14 2003-01-14 Photosynthetic micro-organisms enriched with biologically-active molecules, preparation method thereof and uses of same
PCT/FR2004/000064 WO2004070044A1 (fr) 2003-01-14 2004-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leur procede de preparation, et leurs utilisations

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/FR2003/000103 WO2004071519A1 (fr) 2003-01-14 2003-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2004071519A1 true WO2004071519A1 (fr) 2004-08-26

Family

ID=32843008

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2003/000103 WO2004071519A1 (fr) 2003-01-14 2003-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations
PCT/FR2004/000064 WO2004070044A1 (fr) 2003-01-14 2004-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leur procede de preparation, et leurs utilisations

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2004/000064 WO2004070044A1 (fr) 2003-01-14 2004-01-14 Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leur procede de preparation, et leurs utilisations

Country Status (2)

Country Link
AU (1) AU2003214316A1 (fr)
WO (2) WO2004071519A1 (fr)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017087177A3 (fr) * 2015-11-18 2017-07-13 Seiberg Consulting, LLC Compositions contenant des extraits naturels et leur utilisation pour la peau et les cheveux
CN108587984A (zh) * 2018-06-08 2018-09-28 武汉藻优生物科技有限公司 一种富硒螺旋藻培养物、其培养方法及应用
US11020340B2 (en) 2017-09-18 2021-06-01 Seiberg Consulting, LLC Compositions containing natural products and use thereof for skin and hair

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130287714A1 (en) * 2010-11-12 2013-10-31 Sven Gohla Cosmetic and/or dermatological preparations containing snow algae extract
FR2980698B1 (fr) * 2011-09-29 2015-11-06 Gelyma Utilisation d'une association d'extraits d'algues destinees a limiter les desordres cutanes de la peau a tendance grasse et/ou acneique
FR2993456B1 (fr) * 2012-07-19 2014-07-25 Henri Oreal Integration de molecules actives dans des micro-algues seleniees
FR3143953A1 (fr) * 2022-12-23 2024-06-28 Faracha Equities Procédé de préparation d’un extrait de cyanobacterie comprenant de la phycocyanine enrichie en oligoéléments provenant de sources naturelles d’oligoéléments pour la fabrication de compléments alimentaires

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57159447A (en) * 1981-03-30 1982-10-01 Shikamitsu Honsha:Kk Production of veterinary nutrition-promoting preparation
JPS5872522A (ja) * 1981-10-24 1983-04-30 Shikamitsu Honsha:Kk 鉄強化栄養剤の製造法
JPS62123128A (ja) * 1986-07-11 1987-06-04 Asahi Glass Co Ltd ヨウ素含有淡水クロレラおよびそれを主成分とする抗癌剤
FR2612399A1 (fr) * 1987-03-18 1988-09-23 Caola Kozmetikai Compositions pharmaceutiques agissant sur le coeur et le systeme cardiovasculaire et procede pour leur preparation
WO1992021749A1 (fr) * 1991-06-03 1992-12-10 Innovi N.V. Additif riche en oligo-elements et son procede de preparation, preparation contenant cet additif et utilisation de ce dernier
CN1105566A (zh) * 1994-11-25 1995-07-26 刘玉良 螺旋藻保健品的制备方法
FR2789399A1 (fr) * 1999-02-04 2000-08-11 Alpha Biotech Procede de fabrication d'extraits de micro-organismes photosynthetiques tels que notamment de spiruline
FR2827301A1 (fr) * 2001-07-13 2003-01-17 Blue Energy Laboratoire Procedes de fixation/complementation de molecules biologiquement actives par des cyanobacteries et des micro-algues ou des fractions de cyanobacteries et de micro-algues

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5521090A (en) * 1985-07-01 1996-05-28 Bio-Technical Resources L-ascorbic acid containing biomass of chlorella pyrenoidosa

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57159447A (en) * 1981-03-30 1982-10-01 Shikamitsu Honsha:Kk Production of veterinary nutrition-promoting preparation
JPS5872522A (ja) * 1981-10-24 1983-04-30 Shikamitsu Honsha:Kk 鉄強化栄養剤の製造法
JPS62123128A (ja) * 1986-07-11 1987-06-04 Asahi Glass Co Ltd ヨウ素含有淡水クロレラおよびそれを主成分とする抗癌剤
FR2612399A1 (fr) * 1987-03-18 1988-09-23 Caola Kozmetikai Compositions pharmaceutiques agissant sur le coeur et le systeme cardiovasculaire et procede pour leur preparation
WO1992021749A1 (fr) * 1991-06-03 1992-12-10 Innovi N.V. Additif riche en oligo-elements et son procede de preparation, preparation contenant cet additif et utilisation de ce dernier
CN1105566A (zh) * 1994-11-25 1995-07-26 刘玉良 螺旋藻保健品的制备方法
FR2789399A1 (fr) * 1999-02-04 2000-08-11 Alpha Biotech Procede de fabrication d'extraits de micro-organismes photosynthetiques tels que notamment de spiruline
FR2827301A1 (fr) * 2001-07-13 2003-01-17 Blue Energy Laboratoire Procedes de fixation/complementation de molecules biologiquement actives par des cyanobacteries et des micro-algues ou des fractions de cyanobacteries et de micro-algues

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE MEDLINE [online] 2001, KODENTSOVA V M ET AL: "[Use of the microalgae Spirulina platensis and its selenium-containing form in nutrition of patients with nonspecific ulcerative colitis]", XP002241172, Database accession no. NLM11715692 *
DATABASE MEDLINE [online] May 2002 (2002-05-01), HUANG ZHI ET AL: "[Optimization of cultivation conditions in se-enriched Spirulina platensis]", XP002241173, Database accession no. NLM12192878 *
DATABASE WPI Section Ch Week 199730, Derwent World Patents Index; Class D13, AN 1997-320450, XP002241174 *
HERNANDEZ E ET AL: "Biosorption of heavy metals influenced by the chemical composition of Spirulina SP. (Arthrospira) biomass.", ENVIRONMENTAL TECHNOLOGY, vol. 23, no. 12, 20 December 2002 (2002-12-20), pages 1369 - 1377, XP009011027, ISSN: 0959-3330 *
PATENT ABSTRACTS OF JAPAN vol. 006, no. 266 (C - 142) 25 December 1982 (1982-12-25) *
PATENT ABSTRACTS OF JAPAN vol. 007, no. 161 (C - 176) 15 July 1983 (1983-07-15) *
PATENT ABSTRACTS OF JAPAN vol. 011, no. 349 (C - 456) 14 November 1987 (1987-11-14) *
SHENG WU GONG CHENG XUE BAO = CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY. CHINA MAY 2002, vol. 18, no. 3, May 2002 (2002-05-01), pages 373 - 376, ISSN: 1000-3061 *
VOPROSY PITANIIA. RUSSIA 2001, vol. 70, no. 5, 2001, pages 17 - 21, ISSN: 0042-8833 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017087177A3 (fr) * 2015-11-18 2017-07-13 Seiberg Consulting, LLC Compositions contenant des extraits naturels et leur utilisation pour la peau et les cheveux
CN108472322A (zh) * 2015-11-18 2018-08-31 赛贝格咨询有限责任公司 含有天然提取物的组合物以及它们在皮肤和毛发中的用途
US10206861B2 (en) 2015-11-18 2019-02-19 Seiberg Consulting, LLC Compositions containing natural extracts and use thereof for skin and hair
US10675233B2 (en) 2015-11-18 2020-06-09 Seiberg Consulting, LLC Compositions containing natural extracts and use thereof for skin and hair
US11020340B2 (en) 2017-09-18 2021-06-01 Seiberg Consulting, LLC Compositions containing natural products and use thereof for skin and hair
CN108587984A (zh) * 2018-06-08 2018-09-28 武汉藻优生物科技有限公司 一种富硒螺旋藻培养物、其培养方法及应用
CN108587984B (zh) * 2018-06-08 2022-03-15 武汉藻优生物科技有限公司 一种富硒螺旋藻培养物、其培养方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2004070044A1 (fr) 2004-08-19
AU2003214316A1 (en) 2004-09-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6868611B2 (ja) スーパーオキシドジスムターゼ（ｓｏｄ）に富むテトラセルミス チュイイ種の微小藻類のバイオマスを得る方法
EP2326708B1 (fr) Microorqanismes photosynthétiques enrichis en sélénium à partir de composés séléno-hydroxyacides, leurs applications en nutrition, cosmétique et pharmacie
CA3003330A1 (fr) Utilisation de beta-1,3-glucane pour moduler la fonction immunitaire et traiter l&#39;inflammation intestinale
US11279962B2 (en) Chitin and chitosan producing methods
EP0987010A2 (fr) Composition cosmétique contenant au moins un polysaccharide provenant de bactéries d&#39;origine hydrothermale
WO2009043991A2 (fr) Utlisation d&#39;un principe actif issu du lin dans une composition destinee a activer le cytochrome c
EP2911680A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de lin provenant de l&#39;hydrolyse des protéines de lin, en tant qu&#39;agent actif antimicrobien
FR2929957A1 (fr) Phycocyanines chargees en metaux divalents obtenues par l&#39;internalisation de ces metaux par la cyanobacterie arthrospira platensis et par fixation directe. produits obtenus par ces procedes
WO2004071519A1 (fr) Micro-organismes photosynthetiques enrichis en molecules biologiquement actives, leurs procedes de preparation, et leurs utilisations
WO2006008401A2 (fr) Composition comprenant un milieu de culture de microorganisme marin et/ou d&#39;eau douce photosynthetique.
EP1207892B1 (fr) Utilisation d&#39;hydrolysats enzymatiques de chair d&#39;huitres pour la preparation de compositions antiradicalaires
EP2010200B1 (fr) Utilisation de polysaccharides d&#39;origine fongique comme composition pharmaceutique ou complements alimentaires
FR2770228A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;oligomeres de proanthocyanidines par biofermentation et leur utilisation dans des compositions cosmetiques, dietetiques, pharmaceutiques, chimiques et alimentaires
FR2827301A1 (fr) Procedes de fixation/complementation de molecules biologiquement actives par des cyanobacteries et des micro-algues ou des fractions de cyanobacteries et de micro-algues
FR3091161A1 (fr) Extrait de chlamydomonas acidophila, son procede de preparation et les compositions cosmetiques, et dermatologiques le comprenant
FR3031040A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;un extrait proteique concentre en superoxydase dismutase (sod)
CN103462945A (zh) 一种红球藻虾青素在制备保护或修复肾脏功能药物中的应用
WO2008145850A2 (fr) Utlisation d&#39;un principe actif issu de l&#39;amarante (amaranthus hypochondriacus) pour preparer une composition destinee a proteger les mitochondries
WO2008145853A2 (fr) Utlisation d&#39;un principe actif issu de l&#39;amarante (amaranthus) pour preparer une composition destinee a activer l&#39;energie cellulaire et a proteger la peau des dommages oxydatifs
EP3191106B1 (fr) Composition comprenant une microalgue enrichie en silicium pour une utilisation therapeutique
FR3055544A1 (fr) Association de olea eupopaea et rosmarinus officinalis a moduler l&#39;activite des mitrochondries
Kumar Aquaculture and Marine Products Contribution for Healthcare Application
FR2947179A1 (fr) Anti-oxydant fait a partir d&#39;une algue spiruline seleniee
FR3062396A1 (fr) Composition de metabolites issus de la fermentation d&#39;ingredients bio-sources a partir de microbiotes de centenaires ayant des proprietes anti-inflammatoires et d&#39;augmentation de l&#39;activite mitochondriale
WO2007072178A1 (fr) Nouvelles compositions cosmetologiques et/ou dermatologiques a base de derives de la proline et leurs utilisations

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NO NZ OM PH PL PT RO RU SD SE SG SK SL TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PT SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
122 Ep: pct application non-entry in european phase
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP

WWW Wipo information: withdrawn in national office

Country of ref document: JP