WO2004032892A1 - Procede d'obtention d'un principe actif presentant une activite pigmentante de la peau, principe actif obtenu et composition cosmetique l'incluant - Google Patents

Procede d'obtention d'un principe actif presentant une activite pigmentante de la peau, principe actif obtenu et composition cosmetique l'incluant Download PDF

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Jean-Jacques Paufique
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Societe Industrielle Limousine D'application Biologique (Silab)
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Definitions

  • the present invention relates to an active principle having a pigmenting activity on the skin obtained by a given process.
  • the invention also covers a composition which includes such an active ingredient.
  • Tanned skin is a sign of good health in the current framework. Even if we know that tanning and good health are in no way linked, the fact remains that it is a strong social sign.
  • This pigment is synthesized by specific cells, melanocytes during a reaction, melanogenesis.
  • the present invention is now described through a process for obtaining an active ingredient with a pigmenting effect, covers the active ingredient obtained and proposes a few suitable compositions including this active ingredient.
  • the measurement consists of starting from a given volume of liquid, placing this liquid in the oven at 105 ° C. until a constant weight is obtained and measuring the residual dry matter after drying.
  • the dry matter content obtained is between 5 and 100 g / 1, more particularly between 20 and 40 g / 1.
  • the pH is measured by the potentiometric method, at room temperature.
  • the pH is between 4.0 and 7.0 and more particularly between 5.0 and 6.0.
  • phenolic compounds form detectable colored complexes in the presence of potassium ferricyanide.
  • intensity of the coloration is proportional to the quantity of phenolic compounds, it suffices to compare with a standard range suitable for the range of measurements envisaged, namely 0.5 to 5.0 g / l.
  • the content of phenolic compounds varies from 0.15 to 3.6 g / l, more particularly from 0.6 to 1.4 g / l. 2-4 / Characterization of this polyphenolic fraction
  • a C18 type column is used for this purpose, in particular that marketed under the name Alltech Altima C18., With a pre-column having the same characteristics.
  • a gradient between these two solvents makes it possible to separate the different phenolic compounds.
  • a detector at 280 nm allows the analysis and provides the following results:
  • - hydroxybenzoic compounds including para-hydrobenzoic acid, all of these hydrobenzoic compounds representing around 2% of total polyphenols, - hydroxycinnamic compounds representing around 5% of total polyphenols, and
  • the principle consists in studying the pigmenting activity of the active principle according to the present invention on melanocyte cultures by measuring the tyrosinase activity and the level of synthesized melanin.
  • the operating protocol consists in inoculating B16F1 melanocytes in a complete medium in the presence of 0.25% and 0.5% (volume / volume) of the active principle and the mixture is left to incubate under suitable conditions.
  • a positive control is carried out in parallel in the presence of a-MSH (Melanocyte Stimuling Hormone), a hormone which stimulates melanogenesis.
  • the cells are trypsinized and counted.
  • the cells are lysed and after centrifugation, the tyrosinase is measured from the supernatant and the melanin level from the pellet.
  • This melanin level is determined relative to a standard range of synthetic melanin ranging from 0 to 500 ⁇ g / l.
  • the levels of melanin synthesized by melanocytes are summarized in the following table:
  • One of the cosmetic formulas used and therefore capable of being produced industrially comprises:
  • the active principle can be introduced into any suitable cosmetic support such as an emulsion, a cream, a lotion, an ointment or a dispersion.
  • a method of tanning the skin consists in applying a composition containing 0.5 and 10% of active principle to cause a large increase in melanin.

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Abstract

L'objet de l'invention est un procédé d'obtention d'un principe actif pour la stimulation de l'activité de la tyrosinase en sorte d'augmenter la synthèse de la mélanine, caractérisé en ce qu'il consiste à réaliser successivement les étapes suivantes : solubilisation de poudre de racines de bugrane choisie parmi les variétés Ononis spinosa, Ononis procurrens, Ononis campestris ou Ononis antiquorum dans une solution hydroglycolique à raison d'au moins 200 g/I, séparation des phases soluble et insoluble par décantation, filtration ou centrifugation, et concentration de la phase polyphénolique. L'invention couvre aussi le principe actif obtenu ainsi que des compositions l'incluant.

Description

PROCEDE D'OBTENTION D'UN PRINCIPE ACTIF PRESENTANT UNE
ACTIVITE PIGMENTANTE DE LA PEAU, PRINCIPE ACTIF OBTENU ET
COMPOSITION COSMETIQUE L'INCLUANT
La présente invention concerne un principe actif présentant une activité pigmentante de la peau obtenu par un procédé donné.
L'invention couvre aussi une composition qui inclut un tel principe actif.
Une peau bronzée est un signe de bonne santé dans le référentiel actuel. Même si l'on sait que bronzage et bonne santé ne sont aucunement liés, il n'en demeure pas moins qu'il s'agit d'un signe social fort.
Ainsi de nombreuses personnes s'exposent aux rayons du soleil en sorte de provoquer une réaction de protection qui génère de la mélanine et off e à la peau un teint hâlé voire fortement coloré. Les conséquences d'une telle exposition sont, elles, préjudiciables à la santé car l'exposition aux rayonnements ultraviolets à forte dose comme c'est le cas pour certaines personnes peuvent engendrer des cancers.
Il conviendrait de trouver un moyen de provoquer une réaction de la peau pour augmenter la production de mélanine. Ce pigment est synthétisé par des cellules spécifiques les mélanocytes au cours d'une réaction, la mélanogenèse.
Plus cette réaction est mise en oeuvre, plus la mélanine est synthétisée et plus la peau devient colorée.
Il existe aussi les autobronzants qui résistent maintenant à l'eau mais il ne s'agit que de produits qui provoquent une coloration superficielle de la peau et dont la durabilité éphémère ne convient pas à la plupart des consommateurs. De plus, la coloration obtenue dépend aussi de la nature de la peau et les résultats obtenus ne sont pas nécessairement ceux qui sont recherchés. L'effet est artificiel et n'est pas une réaction de la peau qui seule peut conduire à un résultat adéquat. Un des moyens efficace est de provoquer une réaction naturelle de la peau et de provoquer la production de mélanine.
Dans ce type d'action, on sait que la synthèse de la mélanine, sous ses différentes formes, résulte d'une succession de réactions enzymatiques qui transforment un amino-acide, la tyrosine, en pigments mélaniques. Une des étapes essentielles comprennent une hydroxylation de la tyrosine par la tyrosinase. Cette même enzyme, par des réactions successives, conduit à la synthèse de ces pigments mélaniques, phaeomélanine et de d'eumélanine. La présente invention consiste à provoquer une augmentation de l'activité tyrosinase. Un principe actif qui permet une telle action est celui de la présente invention, à savoir un extrait de bugrane, choisie parmi les variétés Ononis spinosa, Ononis procurrens, Ononis campestris ou Ononis antiquorum.
La présente invention est maintenant décrite à travers un procédé d'obtention d'un principe actif à effet pigmentant, couvre le principe actif obtenu et propose quelques compositions adaptées incluant ce principe actif.
1/ PROCEDE D'OBTENTION
Le procédé prévoit la succession d'étapes suivantes :
- solubilisation de poudre de racines de bugrane choisie parmi les variétés Ononis spinosa, Ononis procurrens, Ononis campestris ou Ononis antiquorum dans une solution hydroglycolique à raison d'au moins 200 g/1,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation, filtration ou centrifugation, et
- concentration de la phase polyphénolique. 2/ CARACTÉRISTIQUES U PRINCIPE ACTIF AINSI OBTENU :
2-1/ Taux de matière sèche :
La mesure consiste à partir d'un volume donné de liquide, à placer ce liquide à l' étuve à 105°C jusqu'à obtention d'un poids constant et à mesurer la matière sèche résiduelle après dessiccation.
Le taux de matière sèche obtenu est compris entre 5 et 100 g/1, plus particulièrement entre 20 et 40 g/1.
2-2/ pH : Le pH est mesuré par la méthode potentiométrique, à température ambiante.
Le pH est compris entre 4,0 et 7,0 et plus particulièrement entre 5,0 et 6,0.
2-3/ Polyphénols totaux :
On sait que les composés phénoliques forment en présence de ferricyanure de potassium des complexes colorés détectables. Comme l'intensité de la coloration est proportionnelle à la quantité de composés phénoliques, il suffit de comparer avec une gamme étalon adaptée à la plage de mesures envisagées à savoir 0,5 à 5,0 g/l.
La teneur en composés phénoliques varie de 0,15 à 3,6 g/1, plus particulièrement de 0,6 à 1,4 g/1. 2-4/ Caractérisation de cette fraction polyphénolique
La caractérisation des composés phénoliques est réalisée par CLHP,
Chromatographie Liquide Haute Performance.
On utilise à cet effet une colonne de type C18, notamment celle commercialisée sous la dénomination Alltech Altima C18., avec pré-colonne ayant les mêmes caractéristiques.
On utilise comme solvants une solution d'acide formique et de l'acétonitrile.
Un gradient entre ces deux solvants permet de séparer les différents composés phénoliques. Un détecteur à 280 nm permet l'analyse et de fournir les résultats suivants :
- composés hydroxybenzoïques dont l'acide para-hydrobenzoïque, l'ensemble de ces composés hydrobenzoïques représentant de l'ordre de 2 % des polyphénols totaux, - composés hydroxycinnamiques représentant de l'ordre de 5 % des polyphénols totaux, et
- isoflavones représentant de l'ordre de 11 % des polyphénols totaux.
3/ EVALUATION IN VITRO DE L' ACTIVITÉ PIGMENTANTE Le principe consiste à étudier l'activité pigmentante du principe actif selon la présente invention sur des cultures de mélanocytes par mesure de l'activité tyrosinase et du taux de mélanine synthétisée.
Le protocole opératoire consiste à ensemencer de mélanocytes B16F1 dans un milieu complet en présence de 0,25 % et 0,5 % (volume /volume) du principe actif et on laisse incuber dans des conditions adaptées. On réalise parallèlement un témoin positif en présence de a-MSH (Melanocyte Stimuling Hormone), hormone de stimulation de la mélanogenèse.
Les cellules sont trypsinées et comptées.
Les cellules sont lysées et après centrifugation, on dose la tyrosinase à partir du surnageant et le taux de mélanine à partir du culot.
3-1 Dosage de l'activité tyrosinase
On ajoute à ce surnageant de la L-DOPA. Après incubation, la densité optique DO à 490nm permet de déterminer l'activité de la tyrosinase.
Les résultats sont les suivants :
Figure imgf000006_0001
On constate à travers les résultats une forte activité tyrosinase ayant des valeurs tout à fait comparables avec celles obtenues avec l'hormone a-MSH, l'effet étant dose-dépendant.
2-2 Dosage du taux de mélanine :
Ce taux de mélanine est déterminé par rapport à une gamme étalon de mélanine synthétique allant de 0 à 500 μg/l. Les taux de mélanine synthétisée par des mélanocytes sont récapitulés dans le tableau suivant :
Figure imgf000006_0002
On constate une très forte augmentation dose-dépendante du taux de mélanine sous l'action du principe actif.
Une des formules cosmétiques utilisée et donc susceptible d'être réalisée industriellement comprend :
- Alcool d'arachidyle / Alcool de béhényle / Glucoside d'arachidyl (Montanov 2002) : 3% - Isononαnoαte d'isononyle (Lαnol 99) '• 2%
- Octαnoαte de cétéαryle (Lαnol 1688) : 10%
- Polyαcrylαmide / Isopαrαff ine C13-14 / Lαureth-7 (Sepigel 305) : 2%
- Principe actif: 5% - Eau : 77,5%
- Conservateur : 0,5%.
Le principe actif peut être introduit dans tout support cosmétique adapté tel qu'une émulsion, une crème, une lotion, un onguent ou une dispersion. Ainsi, un procédé de bronzage de la peau consiste à appliquer une composition contenant de 0,5 et 10 % de principe actif pour provoquer une forte augmentation de la mélanine.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé d'obtention d'un principe actif pour la stimulation de l'activité de la tyrosinase en sorte d'augmenter la synthèse de la mélanine, caractérisé en ce qu'il consiste à réaliser successivement les étapes suivantes : - solubilisation de poudre de racines de bugrane choisie parmi les variétés Ononis spinosa, Ononis procurrens, Ononis campestris ou Ononis antiquorum dans une solution hydroglycolique à raison d'au moins 200 g/1,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation, filtration ou centrifugation, et - concentration de la phase polyphénolique.
2. Principe actif obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente :
- un taux de matière sèche compris entre 5 et 100 g/1, plus particulièrement entre 20 et 40 g/1. - un taux de composés phénoliques compris entre 0,15 à 3,6 g/1, plus particulièrement de 0,6 à 1,4 g/1.
- un pH compris entre 4,0 et 7,0, plus particulièrement entre 5,0 et 6,0.
3. Procédé de bronzage de la peau par application du principe actif selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il provoque une forte augmentation de la mélanine lorsque ledit principe actif est dosé entre 0,5 et 10 %.
4. Composition cosmétique destinée à favoriser le bronzage de la peau, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,5 et 10 % de principe actif selon la revendication 2 sous une forme galénique telle qu'une crème, un onguent, une émulsion ou encore une dispersion.
5. Composition cosmétique selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle est intègre les composés suivants :
- Alcool d'arachidyle / Alcool de behényle / Glucoside d'arachidyl (Montanov 2002) : 3%
- Isononanoate d'isononyle (Lanol 99) *• 2%
- Octanoate de cétéaryle (Lanol 1688) : 10%
- Polyacryla ide / Isoparaffine C13-14 / Laureth-7 (Sepigel 305) : 2%
- Principe actif: 5% - Eau : 77,5%
- Conservateur : 0,5%.
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