WO2002030956A1 - Trimeros de n-alquilglicina capaces de bloquear la respuesta a sustancias quimicas, estimulos termicos o mediadores de la inflamacion de receptores neuronales, y composiciones que los contienen - Google Patents

Trimeros de n-alquilglicina capaces de bloquear la respuesta a sustancias quimicas, estimulos termicos o mediadores de la inflamacion de receptores neuronales, y composiciones que los contienen Download PDF

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Antonio Ferrer Montiel
Rosa Planells Cases
Carolina Garcia Martinez
José Miguel GONZALEZ ROS
Jaime M. Merino Fernandez
Carlos Beimonte Martinez
Juana Gallar Martinez
Enrique Perez Paya
Francisco Sanchez Baeza
Marc Humet
Angel Messeguer Peypoch
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Diverdrugs, S.L.
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Definitions

  • This invention relates to N-alkylglycine trimers capable of blocking the response to chemical substances or thermal stimuli or mediators of neuronal receptor inflammation, for example, VRl nociceptors and / or L-glutamate ionotropic receptors, to compositions which already contain their use in the treatment of diseases or disorders mediated by the activity of said receptors.
  • Nociceptor neurons The sensation of pain begins when the peripheral terminals of a group of sensory neurons, known as nociceptor neurons, are activated by harmful stimuli of a chemical, mechanical or thermal nature (1, 2) [see the section on BIBLIOGRAPHY]. Nociceptor neurons transmit information about tissue damage to the processing centers of the sensation of pain in the spinal cord and brain.
  • nociceptor VRL capsaicin
  • the VRl nociceptor is specifically expressed in sensory neurons and mediates the response to harmful stimuli of a chemical and thermal nature (3, 4, 6).
  • This nociceptor is an ionic channel activated by ligand and is characterized by high calcium permeability (5, 7).
  • the high calcium permeability of the VRl nociceptor is consistent with the neurodegeneration observed by prolonged activation of nociceptor neurons, for example, in conditions of chronic pain (1, 5, 6). Therefore, a strategy to reduce peripheral transmission and sensation of pain is to control the ion channels involved in the chemical response of nociceptors through the development of specific and potent antagonists.
  • Glutamate activates membrane receptors that have ionic channel activity (ionotropic receptors) or that transduce the signal through G proteins (metabotropic receptors) (11). Ionotropic glutamate receptors have been implicated in glutamatergic nociception due to their permeability to Ca 2+ ions (10, 11). The proposed molecular mechanism indicates that high and chronic levels of glutamate cause prolonged activation
  • the fundamental disadvantage of using competitive and non-competitive antagonists is that these molecules interact with their receptors by inhibiting neurotransmission unspecifically and affecting both the pathological activity of glutamate and its physiological activity (10).
  • a strategy to overcome this therapeutic obstacle would be to use non-competitive and / or competitive antagonists that preferentially bind the agonist-receptor complex.
  • the most important advantage of using this type of antagonists is that these agents act primarily on hyperactivated receptors (pathological receptors), showing a marginal interaction on receptors that function in processes of rapid excitatory neurotransmission (physiological receptors) (10). This preferred activity on "pathological" receptors causes these types of antagonists to be evaluated as promising therapeutic agents to prevent transmission of the pain (10-16).
  • Molecules such as ⁇ encicli ' dina and dizolcipin are potent adjunctive NMDA receptor antagonists that act as effective neuroprotectors in vitro (10, 14-16). However, its clinical use is questioned by the psychotomimetic effects (10).
  • the invention faces the problem of looking for new compounds capable of reducing or treating the sensation of peripheral pain that overcome all or part of the aforementioned drawbacks.
  • the solution provided by this invention is based on the development of N-alkylglycine trimers which have the ability to block ion channels that are activated by exogenous chemicals, thermal stimuli or inflammation mediators, such as VRl nociceptors and ionotropic L-glutamate receptors, and are useful for treating disorders mediated by the activity of said receptors.
  • the ability of said N-alkylglycine trimers to block VRl nociceptors and ionotropic L-glutamate receptors of the NMDA type has been demonstrated by the tests described in Example 1.2, while the analgesic activity thereof has been proven by test described in Example 1.3.
  • an object of this invention is N-alkylglycine trimers capable of blocking the response to chemical substances, thermal stimuli or mediators of inflammation of nociceptors and ionotropic L-glutamate receptors, blocking the ion channels of said receptors .
  • a further object of this invention is a composition comprising at least one of said N-alkylglycine trimers, such as a pharmaceutical composition or a cosmetic composition.
  • said N-alkylglycine trimers in the preparation of a medicament for the treatment of disorders mediated by the activity of said receptors constitutes another additional object of this invention.
  • the invention provides N-alkylglycine trimers of general formula (I)
  • R x is selected from 2- (2,4-dichlorophenyl) ethyl, 3-methylbutyl, 2- (methylcarbonylane) ethyl, 2- (N-imidazolyl) ethyl and 3- (N, N-dimethylamino) propyl;
  • R 2 is selected from 2- (2, 4-dichlorophenyl) ethyl, 2- (4- ethoxyphenyl) ethyl, 3, 3-diphenylpropyl and 3- (N, N-diethylamino) propyl; and R 3 is selected from N, N-diethylaminopropyl, 3, 3-diphenylpropyl and 2- [2- (N-methyl) pyrrolidinyl] ethyl, its stereoisomeric forms and mixtures, racemic or non-racemic, thereof, and its pharmaceutically acceptable salts.
  • Some N-alkylglycine trimers of formula (I) may have one or more chiral centers.
  • said compounds of formula (I) may exist in any of their stereoisomeric forms (enantiomers or diastereoisomers) or in mixtures, racemic or non-racemic, thereof, all of which fall within the scope of the present invention.
  • (I) containing chiral centers include those containing 2- [2- (N-methyl) pyrrolidinyl] ethyl groups [(R, S) -2- [2-
  • the invention provides an N-alkylglycine trimer of formula (I) which also contains a reversible modification in order to increase its bioavailability and ease of passage of the blood brain barrier and epithelial tissue.
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) provided by this invention are set forth in Table 1 [Example 1.1].
  • pharmaceutically acceptable salts of the N-alkylglycine trimers of formula (I) provided by this invention.
  • pharmaceutically acceptable salts includes the salts commonly used to form metal salts or acid addition salts. The nature of salt is not critical, as long as it is pharmaceutically acceptable.
  • Pharmaceutically acceptable salts of the N-alkylglycine trimers of formula (I) can be obtained from acids, organic or inorganic. Said salts can be obtained by conventional methods well known to those skilled in the art by reacting the appropriate acid with the N-alkylglycine trimer of formula (I).
  • the N-alkylglycine trimers of formula (I) can be obtained by conventional methods, for example, by coupling and amidation reactions between the glycine derivatives that constitute the structural components of said trimers.
  • the glycine derivatives can be obtained, in turn, by conventional amino acid modification methods.
  • the stereosiomeric forms of the N-alkylglycine trimers of formula (I) can be synthesized from the corresponding enantiomers or from racemic mixtures or not racemic starting products. When starting from mixtures of enantiomers, the obtained stereoisomers can be separated by conventional methods of resolving stereoisomers (enantiomers and diastereoisomers), for example, fractional crystallization, chromatography or salt formation.
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) are capable of blocking the activity of the ionic channel characteristic of the VRl nociceptor and the ionotropic L-glutamate receptors, preferably of the NMDA type. Furthermore, it has been observed that the N-alkylglycine trimers of formula (I) tested do not behave as competitive antagonists of the capsaicin ligand.
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) to block the ionic channel of the VRl nociceptor expressed in Xenopus laevi s oocytes as well as to block the ionic channel of the ionotropic L-glutamate receptors, in particular, of the type NMDA, expressed in X. laevis, can be demonstrated by an assay that evaluates the efficacy and potency of said N-alkylglycine trimers by blocking the ionic current activated by agonist in X. laevis oocytes expressing said neuronal receptors [see Example 1.2 ]. These biological tests have the advantage that they allow the search for antagonists in functionally active receptors, increasing the potential of their use in vivo.
  • (I) to evaluate its analgesic efficacy it can be demonstrated by means of an assay that consists in determining the effect of said N-alkylglycine trimers on the electro-physiological response of nociceptor sensory nerve fibers that innervate the cornea of an anesthetized cat, such as It is described in detail in Belmonte et al. (6). Briefly, the method consists in the dissection of the ciliary nerves that innervate the cornea in fine nerve fillets until a single unit is located and identified by electrical stimulation afferent.
  • the insulated fiber undergoes electrophysiological studies that include the determination of the location and extent of the receptor field, the measurement of conduction velocity, and the exploration of its chemo-sensitivity to capsaicin, and the threshold of thermosensitivity and mechanosensitivity. Having determined all these parameters and electrophysiologically characterized afferent sensory fiber, we proceed to study its modulation by the different antagonists of the VRl nociceptor [see Example 1.3].
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) are useful as blockers of the ionic channel of the nociceptor VRl and of the ionotropic receptors of L-glutamate per se, whereby said N-alkylglycine trimers are suitable for the treatment of diseases and pathological alterations mediated by the activity or function of the ion channels of the VRl nociceptors and / or of the L-glutamate ionotropic receptors, especially of the NMDA type, for example, the sensation of pain, in response to various harmful stimuli (mechanical, chemical and thermal).
  • the N-alkylglycine trimers of formula (I) can be part of various types of compositions for application in the body of a mammal, preferably humans.
  • the invention provides a composition comprising at least one N-alkylglycine trimer of formula (I).
  • said composition is a pharmaceutical composition, while In another particular embodiment, said composition is a cosmetic composition.
  • the pharmaceutical composition provided by this invention comprises a therapeutically effective amount of at least one N-alkylglycine trimer of formula (I) together with at least one pharmaceutically acceptable excipient.
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) can be administered by any means that produces contact of the N-alkylglycine trimer with its site of action in the body of a mammal, preferably man.
  • the amount of therapeutically effective N-alkylglycine trimer of formula (I) to be administered as well as its dosage to treat a pathological condition with the N-alkylglycine trimers of formula (I) or with pharmaceutical compositions of the invention will depend on numerous factors, including the age, condition of the patient, the severity of the alteration or disorder, the route and frequency of administration and the N-alkylglycine trimer of particular formula (I) to be used.
  • the pharmaceutical composition provided by this invention may be presented in any form of administration, for example, solid or liquid, and may be administered by any appropriate route, for example, orally, parenterally, rectally or topically, for which it will include the excipients pharmaceutically. Acceptable necessary for the formulation of the desired administration form.
  • a further object of this invention is the use of an N-alkylglycine trimer of formula (I) in the preparation of a medicament for the attenuation of the nerve activity of sensory neurons primaries involved in pain sensations evoked by the application of exogenous chemical substances or by thermal stimuli or by the endogenous release of chemical substances by inflamed tissues, or in the elaboration of a drug that inhibits the ionic channels that are activated by exogenous chemical substances or by thermal stimuli or by mediators of inflammation that lead to pain sensation.
  • the invention relates to the use of an N-alkylglycine trimer of formula (I) in the preparation of a medicament for the treatment of diseases and pathological alterations mediated by the activity of the ionic channels of VRl and nociceptors.
  • ionotropic L-glutamate receptors preferably of the NMDA type, for example, the sensation of pain in response to a harmful stimulus.
  • the invention also provides a method for the treatment in a patient of diseases and pathological alterations mediated by the activity of the ion channels of the nociceptors, for example, the sensation of pain mediated by the nociceptor VRl and the ionotropic receptors of L- glutamate in response to various harmful stimuli, for example, mechanical, chemical and thermal, comprising administering to said patient suffering from said disease or pathological alteration a therapeutically effective amount of an N-alkylglycine trimer of formula (I), preferably, in form of a pharmaceutical composition that contains it.
  • a therapeutically effective amount of an N-alkylglycine trimer of formula (I) preferably, in form of a pharmaceutical composition that contains it.
  • the cosmetic composition provided by this invention comprises a cosmetically effective amount of at least one N-alkylglycine trimer of formula (I) together with at least one cosmetically acceptable excipient or adjuvant.
  • the N-alkylglycine trimers of formula (I) can be administered in cosmetic compositions to soothe, reduce, mitigate or relieve pain or skin irritation caused by thermal stimuli, for example, sun exposure; mechanics, for example, hair removal, shaving; or chemicals, little aggressive
  • the cosmetic composition of the invention can be presented in any form suitable to allow contact of the N-alkylglycine trimer with its site of action in the body of the mammal on which it is applied.
  • the amount of N-alkylglycine trimer of formula (I) to be administered depends on numerous factors, including the degree of pain or irritation caused by thermal, mechanical or chemical stimuli, and the N-alkylglycine trimer to be used. .
  • the cosmetic composition provided by this invention can be presented in any form of administration, for example, solid or liquid, and can be administered by any appropriate route, preferably topically, for which it will include cosmetically acceptable excipients or adjuvants suitable for the form of Presentation of the cosmetic composition.
  • the cosmetic composition provided by the invention is a product after sunbathing, for example, an "aftersun" cream, ointment, emulsion or lotion, suitable for soothing, reducing, attenuating or alleviating the discomfort caused by sunburn due to sun exposure.
  • the cosmetic composition provided by the invention is an after-shave product, for example, a cream, a balm, emulsion or aftershave lotion, suitable for soothing, reducing, attenuating or relieving pain or pain. skin irritation caused by mechanical stimuli (shaving).
  • the cosmetic composition provided by the invention is an after-hair removal product, suitable for soothing, reducing, attenuating or relieving pain or skin irritation caused by hair removal.
  • a further object of this invention is the use of an N-alkylglycine trimer of formula (I) in the preparation of a cosmetic composition suitable for soothing, reducing, attenuating or relieving pain or skin irritation caused by stimuli. thermal, mechanical or chemical.
  • the invention also provides a cosmetic method for soothing, reducing, attenuating or relieving pain or skin irritation caused by thermal, mechanical or chemical stimuli in a mammal, preferably the human being, which comprises administering to said mammal an effective amount. of an N-alkylglycine trimer of formula (I), preferably, in the form of a cosmetic composition containing it.
  • a fundamental requirement to identify bioactive molecules is to have an assay that allows determining their biological activity on therapeutic targets.
  • the inventors have developed a biological assay that allows the evaluation of the potency of molecules that block the ionic current activated by agonist in X. laevis oocytes that express neuronal receptors, such as the VRl nocireceptor and ionotropic L-glutamate receptors
  • the invention also provides, in addition, a biological assay to identify antagonists of the VRl nociceptor and glutamatergic receptors, suitable as a high-performance screening assay for screening combinatorial chemical libraries of varied chemical diversity, as well as isolated molecules.
  • This assay comprises contacting X.
  • the potency and efficacy of the inhibitory activity of the compound to be tested can be determined by obtaining the dose-response curves. For this, the magnitude of the ionic current blockade activated by the agonist in X.
  • laevis oocytes expressing the receptors in the presence of increasing concentrations of the compound to be tested is examined.
  • the ratio of ionic current intensities in the presence and absence of the compound to be tested allows to obtain the dose-response curves (19, 20). These graphs are adjusted to logarithmic functions to determine the maximum block (power) and the concentration of antagonist that produces half of the maximum block (IC 50 , efficacy).
  • Example 1.1 describes the synthesis of N-alkylglycine trimers of formula (I), and Examples 1.2 and 1.3 illustrate the biological and analgesic activity of said compounds.
  • N-alkylglycine trimers 1.1. Synthesis of N-alkylglycine trimers
  • N-alkylglycine trimers identified in Table 1 were synthesized by conventional methods of solid phase peptide synthesis (21). The trimers were purified by high performance liquid chromatography. Table 1 N-alkylglycine trimers of formula (I)
  • the ionic currents activated by the capsaicin agonist are recorded with the constant voltage maintenance technique with two microelectrodes (t o-microelectrode voltage clamp) (19, 20).
  • the oocytes expressing the VRl nociceptor are transferred to the recording chamber and perfused using an 8-way perfusion system.
  • Capsaicin, both in the absence and presence of the N-alkylglycine trimers tested is dissolved in a Ringer buffer (10 mM Hepes pH 7.4, 100 mM NaCl, 2.0 mM BaCl 2, MgCl 2 2.0 mM, 3.0 mM KC1) supplemented with 100 ⁇ M flufenamic acid (19, 20).
  • This buffered solution is used to minimize the contribution of the endogenous ionic channel of calcium activated chloride to the ionic current of the VRl nociceptor (19, 20).
  • the transmembrane voltage is kept constant at -80 mV, and the ionic currents are activated by applying pulses of the capsaicin solution (20 ⁇ M) in the presence or absence of increasing concentrations of the N-alkylglycine trimers to be tested.
  • the inhibitory activity is detected by measuring the ionic current activated by the agonist in the presence and absence of the N-alkylglycine trimers.
  • the potency and efficacy of the inhibitory activity of the N-alkylglycine trimers is determined by obtaining the dose-response curves.
  • the magnitude of the ionic current blockade activated by capsaicin in oocytes expressing the VRl nociceptor in the presence of increasing concentrations of the N- trimers is examined.
  • alkylglycine The ratio of ionic current intensities in the presence and absence of said N-alkylglycine trimers is used to obtain the dose-response curves (19, 20). These graphs are adjusted to logarithmic functions to determine the maximum block (power) and the concentration of antagonist that produces half of the maximum block (IC 50 , efficacy).
  • the results obtained showed that all the N-alkylglycine trimers tested blocked the activity of the ionic channel characteristic of the VRl nociceptor expressed in frog X. laevis oocytes.
  • the N-alkylglycine trimer concentrations that inhibited half the response of the nociceptor VRl (IC 50 ) activated by capsaicin at a concentration of 20 ⁇ M were approximately 1 ⁇ M for the N-alkylglycine trimer identified as compound [4], of approximately 2 ⁇ M for the N-alkylglycine trimer identified as compound [8] and approximately 30 ⁇ M for the N-alkylglycine trimer identified as compound [7].
  • N-alkylglycine trimers of formula (I) can be presented as stereoisomers
  • the possibility of whether the blocking activity of the VRl nociceptor of the racemic mixture corresponded preferably to one of the isomers was evaluated.
  • the blocking activity of the VRl nociceptor of the enantiomers identified as [4a] and [4b] was evaluated according to the previously described protocol, and compared with the blocking activity of said receptor of a racemic mixture of said enantiomers. The results obtained were similar in both cases and showed that both enantiomers exert a similar VRl nociceptor blocking activity.
  • Heterologous expression of X. laevis oocyte receptors can be carried out according to the procedure described by Ferrer-Montiel and Montal (19). Briefly, the oocytes of adult frogs X. laevis are collected, manipulated, and injected with cRNA encoding the NR1 and NR2A subunits of the NMDA receptor (5, 20). Ionic currents activated by the agonist L-glutamate in the presence of the glycine coagonist are recorded with the constant voltage maintenance technique with two microelectrodes (two-microelectrode voltage clamp) (19, 20). The oocytes expressing the receptor are transferred to the recording chamber and perfused using an 8-way perfusion system.
  • the agonist and coagonist both in the absence and in the presence of the N-alkylglycine trimers to be tested, are dissolved in Ringer's buffer (10 M Hepes pH 7.4, 100 mM NaCl, 2.0 mM BaCl 2 , KCl 3 , 0 mM) supplemented with 100 ⁇ M flufenamic acid (20).
  • Ringer's buffer (10 M Hepes pH 7.4, 100 mM NaCl, 2.0 mM BaCl 2 , KCl 3 , 0 mM
  • This buffered solution is used to minimize the contribution of the endogenous calcium channel of calcium activated chloride to the ionic current of the glutamatergic receptor (19, 20).
  • the transmembrane voltage is kept constant at -80 mV, and the ionic currents are activated by applying pulses of the L-glutamate / glycine solution (100 ⁇ M / 20 ⁇ M) in the presence or absence of increasing concentrations of the N-alkylglycine trimers at test.
  • the inhibitory activity is detected by measuring the ionic current activated by the agonist in the presence and absence of the N-alkylglycine trimers.
  • the potency and efficacy of the inhibitory activity of the N-alkylglycine trimers is determined by obtaining of dose-response curves. " To this end, the magnitude of the ionic current blockade activated by L-glutamate / glycine in Ovocytes expressing the NMDA receptor in the presence of increasing concentrations of the N-alkylglycine trimers is examined. The ratio of ionic current intensities in the presence and absence of said N-alkylglycine trimers is used to obtain the dose-response curves (19, 20) These graphs are adjusted to logarithmic functions to determine the maximum block (potency) and the concentration of antagonist that produces half of the block maximum (IC 50 / efficiency).
  • the results obtained showed that all the N-alkylglycine trimers tested blocked the activity of the ionic channel characteristic of the NMDA receptor expressed in frog X. laevis oocytes.
  • the N-alkylglycine trimer concentrations that inhibited half of the NMDA receptor response (IC 50 ) activated by L-glutamate / glycine at a concentration of 100 ⁇ M / 20 ⁇ M ranged from 0.1 ⁇ M to 100 ⁇ M for different N-alkylglycine trimers tested (Table 1).
  • the IC 50 of the N-alkylglycine trimer identified as a compound [9] is ⁇ M, while it is approximately 2 uM for the N-alkylglycine trimer identified as a compound [10] and approximately 10 ⁇ M for the N-alkylglycine trimer identified as compound [11].
  • the experimental paradigm compares the number of scratches after topical administration of 0.01% capsaicin in the eye of a mouse in the absence and presence of N-alkylglycine trimers. After the administration of capsaicin, it is counted The number of times the mouse scratches the treated eye for 1 minute. Subsequently, the affected eye is washed extensively with saline and, 15 minutes after application, the test compound is administered. After 5 minutes of incubation, a 0.1% capsaicin solution containing the compound to be tested is administered.
  • the number of times the animal scratches the eye for 1 minute is immediately counted.
  • the analgesic capacity is obtained by comparing the number of scratches of the first application of capsaicin (without compound to be tested) and the second application of the irritant (in the presence of the compound to be tested). A decrease in scratches in the second application of capsaicin is indicative of an analgesic activity of the N-alkylglycine trimer tested.
  • the results obtained with the N-alkylglycine trimers identified as compounds [4] and [8] showed that the compound [4] attenuated the ocular irritation produced by capsaicin by approximately 40%, while the compound [8] la reduced by approximately 20%, which allows to affirm that said compounds have analgesic activity tested in an animal pain model.
  • the capsaicin receiver a heat-activated ion channel in the pain pathway. Na t ⁇ re 389, 816-824.

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Abstract

Los trímeros de N-alquilglicina (I), donde R1 es 2-(2,4-diclorofenil)etilo, 3-metil-butilo, 2-(metilcargonilamino)etilo, 2-(N-imidazolil)etilo o 3-(N,N-dimetilamino)propilo; R2 es 2-(2,4-diclorofenil)etilo, 2-(4-metoxifenil)etilo, 3,3-defenilpropilo o 3-(N,N-dietilamino)propilo; y R3 es N,N-dietil-aminopropilo, 3,3-difenil-propilo o 2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etilo, son capaces de bloquear los canales iónicos que se activan por sustancias químicas exógenas, por estímulos térmicos o por mediadores de la inflamación, tales como los nociceptores VR1 y los receptores ionotrópicos de glutamato, y son útiles para tratar trastornos mediados por la actividad de dichos receptores.

Description

TRÍMEROS DE N-ALQUILGLICINA CAPACES DE BLOQUEAR LA RESPUESTA A SUSTANCIAS QUÍMICAS, ESTÍMULOS TÉRMICOS O MEDIADORES DE LA INFLAMACIÓN DE RECEPTORES NEURONALES, Y COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN
CAMPO DE LA INVENCIÓN
Esta invención se refiere a unos trimeros de N- alquilglicina capaces de bloquear la respuesta a sustancias químicas o estímulos térmicos o mediadores de la inflamación de receptores neuronales, por ejemplo, los nociceptores VRl y/o los receptores ionotrópicos de L-glutamato, a composiciones que los contienen y a su empleo en el tratamiento de enfermedades o trastornos mediados por la actividad de dichos receptores.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
El dolor representa un grave problema social y económico. Se calcula que más de 2 millones de personas están incapacitadas diariamente por sufrir sensaciones dolorosas transitorias o crónicas. Claros ejemplos lo representan la algesia experimentada por pacientes de cáncer, jaqueca, artritis, quemados, accidentados y operados quirúrgicamente. A pesar de la gravedad del problema, el arsenal farmacológico para combatirlo, prevenirlo y/o aminorar sus síntomas y progreso es sorprendentemente limitado, debido, en parte, a la falta de dianas terapéuticas especificas sobre las que actuar.
La sensación de dolor se inicia cuando las terminales periféricas de un grupo de neuronas sensoriales, conocidas como neuronas nociceptoras, se activan por estímulos nocivos de naturaleza química, mecánica o térmica (1, 2) [véase el apartado relativo a la BIBLIOGRAFÍA] . Las neuronas nociceptoras transmiten la información acerca del daño tisular a los centros procesadores de la sensación de dolor en la médula espinal y el cerebro .
Aunque los mecanismos biológicos precisos de la transmisión del dolor no están claramente establecidos, recientemente se ha descrito- la clonación- y caracterización de un receptor de membrana activado por la capsaicina (en adelante identificado como "•nociceptor VRl") que está involucrado directamente en las vias de dolor (3-5) . El nociceptor VRl está expresado específicamente en neuronas sensoriales y media la respuesta a estímulos nocivos de naturaleza química y térmica (3, 4, 6) . Este nociceptor es un canal iónico activado por ligando y se caracteriza por poseer una alta permeabilidad al calcio (5, 7) . La alta permeabilidad al calcio del nociceptor VRl es consistente con la neurodegeneración observada por la activación prolongada de neuronas nociceptoras, por ejemplo, en condiciones de dolor crónico (1, 5, 6) . Por consiguiente, una estrategia para aminorar la transmisión y sensación de dolor periféricos es controlar los canales iónicos implicados en la respuesta química de los nociceptores mediante el desarrollo de antagonistas específicos y potentes.
Además del nociceptor VRl, también se ha descrito la participación del neurotransmisor excitatorio L-glutamato en la transmisión del dolor (8-10) . El glutamato activa receptores de membrana que tienen actividad de canal iónico (receptores ionotrópicos) o que transducen la señal a través de proteínas G (receptores metabotrópicos) (11) . Los receptores de glutamato ionotrópicos han sido implicados en la nocicepción glutamatérgica debido a su permeabilidad a iones Ca2+ (10, 11) . El mecanismo molecular propuesto indica que niveles altos y crónicos de glutamato provocan una activación prolongada
(hiperactivación) de los receptores ionotrópicos que cargan las neuronas sensoriales con iones Ca2+, disparando la activación masiva y excesiva de cascadas intracelulares que conducen a la transmisión del dolor (2, 8) . De hecho, se ha descrito que los antagonistas de estos receptores son capaces de producir analgesia (12-17) . De lo expuesto se deduce que una estrategia para prevenir o aminorar la algesia es controlar la actividad funcional de los receptores ionotrópicos de glutamato, específicamente, los presentes en las neuronas nociceptoras. Por tanto, parece ser qué el nociceptor VRl y los receptores ionotrópicos de L-glutamato son dianas terapéuticas importantes para controlar eficientemente el dolor periférico. A pesar del avance realizado en los últimos años, todavía no se han desarrollado inhibidores de receptores neuronales potentes, selectivos y carentes de toxicidad. Gran parte del esfuerzo realizado hasta el momento ha estado en desarrollar opioides que reconozcan a los receptores opiáceos del sistema nervioso central (1,2). Estas moléculas, aunque potentes analgésicos, presentan importantes efectos secundarios, tales como adicción, tolerancia, anomalías cognitivas, etc., que limitan su uso clínico (17, 18). También se ha realizado un esfuerzo importante para desarrollar antagonistas competitivos y no competitivos de glutamato y/o glicina [un coagonista que participa en la activación del receptor de glutamato de tipo NMDA (N-metil-D-aspartato) ] . Estos inhibidores se han mostrado eficaces y potentes mitigando la sensación de dolor pero han presentado una utilidad clínica restringida debido, de nuevo, a los efectos secundarios que presentan (10). La desventaja fundamental de usar antagonistas competitivos y no competitivos es que estas moléculas interaccionan con sus receptores inhibiendo la neurotransmisión inespecificamente y afectando tanto a la actividad patológica del glutamato como a su actividad fisiológica (10) . Una estrategia para superar este obstáculo terapéutico seria la de usar antagonistas no competitivos y/o acompetitivos que se unan preferentemente al complejo agonista-receptor. La ventaja más importante de utilizar este tipo de antagonistas es que estos agentes actúan fundamentalmente sobre receptores hiperactivados (receptores patológicos), mostrando una interacción marginal sobre receptores que funcionan en procesos de neurotransmisión excitadora rápida (receptores fisiológicos) (10) . Esta actividad preferente sobre los receptores "patológicos" hace que estos tipos de antagonistas sean valorados como agentes terapéuticos prometedores para prevenir la transmisión del dolor (10-16) . Moléculas como la ϊencicli'dina y la dizolcipina son antagonistas acompetitivos potentes del receptor de NMDA que actúan como neuroprotectores eficaces in vi tro (10, 14-16) . Sin embargo, su uso clínico está cuestionado por los efectos psicotomiméticos (10) .
COMPENDIO DE LA INVENCIÓN
La invención se enfrenta con el problema de buscar nuevos compuestos capaces de aminorar o tratar la sensación de dolor periférico que superen la totalidad o parte de los inconvenientes previamente mencionados.
La solución proporcionada por esta invención se basa en el desarrollo de unos trímeros de N-alquilglicina qué tienen la capacidad de bloquear los canales iónicos que se activan por sustancias químicas exógenas, estímulos térmicos o mediadores de la inflamación, tales como los nociceptores VRl y los receptores ionotrópicos de L-glutamato, y son útiles para tratar trastornos mediados por la actividad de dichos receptores . La capacidad de dichos trímeros de N-alquilglicina de bloquear nociceptores VRl y receptores ionotrópicos de L- glutamato del tipo NMDA se ha puesto de manifiesto mediante los ensayos descritos en el Ejemplo 1.2, mientras que la actividad analgésica de los mismos se ha comprobado mediante el ensayo descrito en el Ejemplo 1.3.
Por tanto, un objeto de esta invención lo constituye unos trímeros de N-alquilglicina capaces de bloquear la respuesta a sustancias químicas, estímulos térmicos o mediadores de la inflamación de nociceptores y receptores ionotrópicos de L- glutamato, bloqueando a los canales iónicos de dichos receptores .
Un objeto adicional de esta invención lo constituye una composición que comprende al menos uno de dichos trímeros de N- alquilglicina, tal como una composición farmacéutica o una composición cosmética. El empleo de dichos trímeros de N-alquilglicina en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de trastornos mediados por la actividad de dichos receptores constituye otro objeto adicional de esta invención.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
La invención proporciona unos trímeros de N-alquilglicina de fórmula general (I)
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donde
Rx se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 3-metil- butilo, 2- (metilcarbonila ino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N,N-dimetilamino) propilo;
R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- etoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N, N-dietilamino) propilo; y R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3, 3-difenil- propilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales farmacéuticamente aceptables. Algunos trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) pueden tener uno o más centros quirales. Por tanto, dichos compuestos de fórmula (I) pueden existir en cualquiera de sus formas estereoisoméricas (enantiómeros o diastereoisómeros) o en mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, todas las cuales caen dentro del alcance de la presente invención. Ejemplos ilustrativos de trímeros "de N-alquilglicina de fórmula
(I) que contienen centros quirales incluyen aquellos que contienen grupos 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo [(R,S)-2-[2-
(N-metil)pirrolidinil] etilo, (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo o (S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etilo] .
En una realización particular, la invención proporciona un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) que contiene, además, una modificación reversible con el fin de aumentar su biodisponibilidad y facilidad de paso de la barrera hematoencefálica y tejido epitelial.
Ejemplos ilustrativos de trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) proporcionados por esta invención se recogen en la Tabla 1 [Ejemplo 1.1].
Dentro del alcance de esta invención se encuentran las sales farmacéuticamente aceptables de los trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) proporcionados por esta invención. El término "sales farmacéuticamente aceptables" incluye las sales habitualmente utilizadas para formar sales metálicas o sales de adición de ácidos. La naturaleza de la sal no es critica, siempre y cuando sea farmacéuticamente aceptable. Las sales farmacéuticamente aceptables de los trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) pueden obtenerse a partir de ácidos, orgánicos o inorgánicos. Dichas sales pueden obtenerse por métodos convencionales bien conocidos por los técnicos en la materia haciendo reaccionar el ácido apropiado con el trímero de N-alquilglicina de fórmula (I).
Los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) pueden ser obtenidos por métodos convencionales, por ejemplo, mediante reacciones de copulación y amidación entre los derivados de glicina que constituyen los componentes estructurales de dichos trímeros. Los derivados de glicina pueden obtenerse, a su vez, mediante métodos convencionales de modificación de aminoácidos. LLas formas estereosioméricas de los trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) pueden sintetizarse a partir de los enantiómeros correspondientes o de mezclas racémicas o no racémicas de los productos de partida. Cuando se parte de mezclas de enantiómeros, los estereosiómeros obtenidos se pueden separar por métodos convencionales de resolución de estereoisómeros (enantiómeros y diastereoisómeros) , por ejemplo, cristalización fraccionada, cromatografía o formación de sales.
Diversos ensayos han puesto de manifiesto que los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) son capaces de bloquear la actividad del canal iónico característica del nociceptor VRl y de los receptores ionotrópicos de L-glutamato, preferentemente, del tipo NMDA. Además, se ha observado que los trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) ensayados no se comportan como antagonistas competitivos del ligando capsaicina.
La capacidad de los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) para bloquear el canal iónico del nociceptor VRl expresado en ovocitos de Xenopus laevi s asi como para bloquear el canal iónico de los receptores ionotrópicos de L-glutamato, en particular, del tipo NMDA, expresados en X. laevis, se puede demostrar mediante un ensayo que evalúa la eficacia y potencia de dichos trímeros de N-alquilglicina bloqueando la corriente iónica activada por agonista en ovocitos de X. laevis que expresan dichos receptores neuronales [véase el Ejemplo 1.2]. Estos ensayos biológicos tienen la ventaja de que permiten la búsqueda de antagonistas en receptores funcionalmente activos, incrementando la potencialidad de su uso in vivo .
La capacidad de los trímeros de N-alquilglicina de fórmula
(I) para evaluar su eficacia analgésica se puede demostrar mediante un ensayo que consiste en determinar el efecto de dichos trímeros de N-alquilglicina sobre la respuesta electro- fisiológica de las fibras nerviosas sensoriales nociceptoras que inervan la córnea de un gato anestesiado, tal como se describe detalladamente en Belmonte et al. (6) . Brevemente, el método consiste en la disección de los nervios ciliares que inervan la córnea en finos filetes nerviosos hasta localizar e identificar por estimulación eléctrica una única unidad aferente. La fibra aislada" se somete a estudios electrofisiológicos que comprenden la determinación de la localización y extensión del campo receptor, la medida de la velocidad de conducción, y la exploración de su quimio- sensibilidad a la capsaicina, y el umbral de termosensibilidad y mecanosensibilidad. Determinados todos estos parámetros y caracterizada electrofisiológicamente la fibra sensorial aferente, se procede a estudiar su modulación por los distintos antagonistas del nociceptor VRl [véase el Ejemplo 1.3]. Dado el papel central del nociceptor VRl en la integración de la vias de dolor, una consecuencia de la actividad bloqueadora de dicho receptor por acción de los trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) es el desarrollo potencial de una nueva familia de analgésicos. Es más, los resultados obtenidos parecen indicar que los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I), por la potencia bloqueadora del nociceptor VRl que manifiestan, son firmes candidatos a constituir una nueva generación de analgésicos.
Los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) son útiles como bloqueadores del canal iónico del nociceptor VRl y de los receptores ionotrópicos de L-glutamato per se, por lo que dichos trímeros de N-alquilglicina son adecuados para el tratamiento de enfermedades y alteraciones patológicas mediadas por la actividad o función de los canales iónicos de los nociceptores VRl y/o de los receptores ionotrópicos de L- glutamato, especialmente del tipo NMDA, por ejemplo, la sensación de dolor, en respuesta a diversos estímulos nocivos (mecánicos, químicos y térmicos) .
Los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) pueden formar parte de diversos tipos de composiciones para su aplicación en el cuerpo de un mamífero, preferiblemente el ser humano. En este sentido, la invención proporciona una composición que comprende, al menos, un trímero de N- alquilglicina de fórmula (I) .. En una realización particular, dicha composición es una composición farmacéutica, mientras que en otra realización particular, dicha composición es una composición cosmética.
La composición farmacéutica proporcionada por esta invención comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de, al menos, un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) junto con, al menos, un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) pueden administrarse por cualquier medio que produzca el contacto del trímero de N-alquilglicina con el sitio de acción del mismo en el cuerpo de un mamífero, preferiblemente el hombre.
La cantidad de trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) terapéuticamente eficaz que debe administrarse asi como su dosificación para tratar un estado patológico con los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) o con composiciones farmacéuticas de la invención, dependerá de numerosos factores, incluyendo la edad, estado del paciente, la severidad de la alteración o trastorno, la ruta y frecuencia de administración y el trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) particular a utilizar. La composición farmacéutica proporcionada por esta invención puede presentarse en cualquier forma de administración, por ejemplo, sólida o liquida, y puede administrarse por cualquier via apropiada, por ejemplo, por via oral, parenteral, rectal o tópica, para lo cual incluirá los excipientes farmacéuticamente aceptables necesarios para la formulación de la forma de administración deseada. Una revisión de las distintas formas farmacéuticas de administración de medicamentos y de los excipientes necesarios para la obtención de las mismas puede encontrarse, por ejemplo, en el "Tratado de Farmacia Galénica", C. Fauli i Trillo, 1993, Luzán 5, S.A. Ediciones, Madrid.
Por tanto, un objeto adicional de esta invención lo constituye el empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) en la elaboración de un medicamento para la atenuación de la actividad nerviosa de las neuronas sensoriales primarias implicadas en las sensaciones de dolor evocadas por la aplicación de sustancias químicas exógenas o por estímulos térmicos o por la liberación endógena de sustancias químicas por tejidos inflamados, o en la elaboración de un medicamento que inhibe los canales iónicos que se activan por sustancias químicas exógenas o por estímulos térmicos o por mediadores de inflamación que conducen a la sensación de dolor.
De forma más concreta, la invención se refiere al empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y alteraciones patológicas mediadas por la actividad de los canales iónicos de los nociceptores VRl y receptores ionotrópicos de L-glutamato, preferentemente del tipo NMDA, por ejemplo, la sensación de dolor en respuesta a un estimulo nocivo.
La invención proporciona, además, un método para el tratamiento en un paciente de enfermedades y alteraciones patológicas mediadas por la actividad de los canales iónicos de los nociceptores, por ejemplo, la sensación de dolor mediada por el nociceptor VRl y los receptores ionotrópicos de L- glutamato en respuesta a diversos estímulos nocivos, por ejemplo, mecánicos, químicos y térmicos, que comprende administrar a dicho paciente que padece dicha enfermedad o alteración patológica una cantidad terapéuticamente eficaz de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I), preferiblemente, en forma de una composición farmacéutica que lo contiene.
La composición cosmética proporcionada por esta invención comprende una cantidad cosméticamente eficaz de, al menos, un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) junto con, al menos, un excipiente o adyuvante cosméticamente aceptable.
Los trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I) pueden administrarse en composiciones cosméticas para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos térmicos, por ejemplo, exposición al sol; mecánicos, por ejemplo, depilaciones, afeitado; o químicos, poco agresivos. La composición cosmética de la invención puede presentarse en cualquier forma adecuada para permitir el contacto del trímero de N-alquilglicina con el sitio de acción del mismo en el cuerpo del mamífero sobre el que se aplica. La cantidad de trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) a administrar depende de numerosos factores, entre los que se encuentra el grado de dolor o irritación producido por los estímulos térmico, mecánico o químico, y del trímero de N- alquilglicina a utilizar. La composición cosmética proporcionada por esta invención puede presentarse en cualquier forma de administración, por ejemplo, sólida o líquida, y puede administrarse por cualquier vía apropiada, preferentemente por vía tópica, para lo cual incluirá los excipientes o adyuvantes cosméticamente aceptables adecuados para la forma de presentación de la composición cosmética. En una realización particular, la composición cosmética proporcionada por la invención es un producto para después de tomar el sol, por ejemplo, una crema, pomada, emulsión o loción "aftersun", adecuada para calmar, reducir, atenuar o aliviar las molestias producidas por las quemaduras solares debidas a la exposición al sol. En otra realización particular, la composición cosmética proporcionada por la invención es un producto para después del afeitado, por ejemplo, una crema, un bálsamo, emulsión o loción para después del afeitado, adecuada para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos mecánicos (afeitado) . En otra realización particular, la composición cosmética proporcionada por la invención es un producto para después del depilado, adecuado para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por el depilado. Una revisión de las distintas formas de presentación de composiciones cosméticas y de los excipientes y adyuvantes necesarios para su obtención puede encontrarse, por ejemplo, en "Cosmetologia Teórico-Práctica", Prof . A. del Pozo, publicado por el Consejo General de Colegios Oficiales de Farmacéuticos, 3a Edición, 1985.
Por tanto, un objeto adicional de esta invención lo constituye el empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) en la elaboración de una composición cosmética adecuada para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos térmicos, mecánicos o químicos .
La invención proporciona, además, un método cosmético para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos térmicos, mecánicos o químicos, en un mamífero, preferiblemente el ser humano, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) , preferiblemente, en forma de una composición cosmética que lo contiene. Por otra parte, un requisito fundamental para identificar moléculas bioactivas es disponer de un ensayo que permita determinar su actividad biológica sobre las dianas terapéuticas. Los inventores han desarrollado un ensayo biológico que permite evaluar la potencia de moléculas que bloquean la corriente iónica activada por agonista en ovocitos de X. laevis que expresan receptores neuronales, tales como el nocireceptor VRl y los receptores ionotrópicos de L-glutamato
(19, 20) . Una ventaja importante de este ensayo biológico es que permite la búsqueda de antagonistas en receptores funcionalmente activos, incrementando la potencialidad de su uso in vivo .
Los métodos de expresión heteróloga de receptores en ovocitos de X. laevis han sido descritos con detalle por Ferrer-Montiel y Montal (19) . Por tanto, la invención también proporciona, además, un ensayo biológico para identificar antagonistas del nociceptor VRl y de los receptores glutamatérgicos, adecuado como ensayo de cribado (screening) de alto rendimiento para cribar quimiotecas combinatorias de diversidad química variada, asi como moléculas aisladas. Este ensayo comprende poner en contacto ovocitos de X. laevis que expresan el nociceptor VRl o receptores glutamatérgicos con un agonista (ligando) para dicho nociceptor VRl, por ejemplo, capsaicina o L-glutamato, en presencia o en ausencia del compuesto a ensayar, manteniendo el voltaje transmembrana constante a -80 mV, y detectar la actividad inhibitoria de dicho compuesto a ensayar midiendo la corriente iónica activada por el agonista en presencia y ausencia del compuesto a ensayar. La potencia y eficacia de la actividad inhibitoria del compuesto a ensayar se puede determinar mediante la obtención de las curvas dosis-respuesta. Para ello, se examina la magnitud del bloqueo de la corriente iónica activada por el agonista en ovocitos de X. laevis que expresan los receptores en presencia de concentraciones crecientes del compuesto a ensayar. La relación de intensidades de corriente iónica en presencia y ausencia del compuesto a ensayar permite obtener las curvas dosis-respuesta (19, 20) . Estas gráficas se ajustan a funciones logarítmicas para determinar el bloqueo máximo (potencia) y la concentración de antagonista que produce la mitad del bloqueo máximo (IC50, eficacia) .
Los siguientes ejemplos sirven para ilustrar la naturaleza de la presente invención y no deben ser considerados en sentido limitativo de la misma. El Ejemplo 1.1 describe la síntesis de unos trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I), y los Ejemplos 1.2 y 1.3 ilustran la actividad biológica y analgésica de dichos compuestos.
EJEMPLO 1 Trímeros de N-alquilglicina 1.1. Síntesis de trímeros de N-alquilglicina
Se sintetizaron los trímeros de N-alquilglicina identificados en la Tabla 1 mediante métodos convencionales de síntesis de péptidos en fase sólida (21) . Los trímeros se purificaron mediante cromatografía liquida de alta resolución. Tabla 1 Trímeros de N-alquilglicina de fórmula (I)
[1] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [la] : [N-[ (R)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxif enetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [Ib] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [2] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (4-metoxif enetil) glicil] -N- (2, 4 -dicloro f enetil ) glicinamida [2a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxif enetil) glicil]- - (2,4- di clorofene til) glicinamida [2b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil ) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxif enetil) glicil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida [3] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorofene til) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida
[3a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil ) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorofenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [3b] : [N-[ (S ) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (2, 4-diclorofenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [4] : [N-[ (R,S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N-
(2, -di cloro f enetil) glicil] -N- (2, 4 -dicloro f enetil) glicinamida [4a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorofenetil) glicil] -N- (2, 4-diclorof enetil) glicinamida [4b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4 -di cloro f enetil) glicil] -N- (2, 4 -dicloro f enetil) glicinamida [5] : [ N- [3- (N,N-dietilamino ) propil] glicil] - [N- ( 4- metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [6] : [N- [3- (N,N-die ti lami o) propil] glicil] - [N- (4- metoxifenetil) glicil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida
[7] : [N- [3- (N,N-die ti lamino) propil] glicil]-[N-(2,4- diclorof enetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida [8] : [N- [3- (N,N-die ti lamino) propil] glicil] - [N- (2, 4- diclorofenetil) glicil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida
[9] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] - [N- [3- (N,N- dietilamino) propil] glicil] - [N- (2-metilcarbonilamino) etil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida [10] : [N-(3,3-difenilpropil)glicil]-[N-[3-(N,N-dietilamino) propil] glicil] - [N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida
[11] : [N-(3,3-difenilpropil)glicil]-[N-[3-(N,N-dietilamino) propil] glicil] - [N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida [12] : [N- (3,3-difenilpropil)glicil]-[N-[3-(N,N-dietilamino) propil ] glicil] - [N- [3- (N,N-dimetil amino) propil] glicinamida
[13] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil]- [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcabonilamino) etil] glicinamida [14] : [N- (3,3-difenilpropil)glicil]-[N-(3,3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida [15]: [N-(3,3-difenilpropil)glicil]-[N-(3,3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida [16] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -[N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida [17] : [N-[ (R,S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N- [3- (N,N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (metil- carbonilamino) etil] glicinamida [17a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (metil- carbonilamino) etil] glicinamida [17b]: [N-[ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N, N-dietilamí o) propil ] glicil] -N- [2- (metil- carbonilamino) etil] glicinamida [18] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidiniletil] glicil] - [N-
[3- (N,N-die ti lamino) propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida
[18a] : [N-[ (R)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N,N-dietilamino)propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida [18b] : [N-[ (S ) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil ]-[N- [3- (N,N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida [19] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil ]-[N-
[3- (N,N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida [19a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[ 3- (N,N-dietilamino) propil] glicil ]-N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida [19b] : [N- [ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil ] glicil] - [N-
[ 3- (N,N-dietilamino) propil] glicil ]-N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida
[20] : [N-[ (R, S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N-
[3- (N,N-dieti lamino) propil] glicil]-N-[3-(N,N- dimetilamino) propil] glicinamida [20a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N,N-dieti lamino) propil] glicil] -N- [3- (N,N- dimetilamino) propil] glicinamida [20b] : [N- [ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N,N-die ti lamino) propil] glicil] -N- [3- (N, N- dimetilamino) propil] glicinamida [21]: [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] -[N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida [21a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) - etil] glicinamida [21b] : [N-[ (S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida [22] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidini] etil] glicil] -[N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida [22a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil ) pirrolidini] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil ] -N- [ 2- ( 2-piridil ) etil] glicinamida [22b]: [N- [ (S)-2- [2- (N-metil) pirrolidini] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2-(2-piridil) etil] glicinamida [23] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida
[23a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida
[23b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida [24] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida [24a]: [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida [24b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida
1.2 Evaluación de la actividad biológica 1.2.1 Bloqueo del nociceptor VRl Para evaluar la actividad biológica de los trímeros de N- alquilglicina obtenidos en el Ejemplo 1.1 sobre nociceptores VRl se desarrolló un ensayo 'que evalúa la eficacia y potencia de dichos compuestos con que bloquean la corriente iónica activada por agonista en ovocitos de X. laevis que expresan el nociceptor VRl . La expresión' heteróloga de receptores en ovocitos de X. laevis puede llevarse a cabo según el procedimiento descrito por Ferrer-Montiel y Montal (19) . Brevemente, los ovocitos de ranas adultas X. laevis se recogen, manipulan, e inyectan con cDNA que codifica el nociceptor VRl (5, 19) . Las corrientes iónicas activadas por el agonista capsaicina se registran con la técnica de mantenimiento del voltaje constante con dos microelectrodos (t o-microelectrode voltage clamp) (19, 20) . Los ovocitos que expresan el nociceptor VRl se transfieren a la cámara de registro y se perfunden utilizando un sistema de perfusión de 8 salidas. La capsaicina, tanto en ausencia como en presencia de los trímeros de N-alquilglicina a ensayar, se disuelve en tampón de Ringer (Hepes 10 mM pH 7,4, NaCl 100 mM, BaCl2 2,0 mM, MgCl2 2,0 mM, KC1 3,0 mM) suple entado con ácido flufenámico 100 μM (19, 20) . Esta disolución tamponada se utiliza para minimizar la contribución del canal iónico endógeno de cloruro activado por calcio a la corriente iónica del nociceptor VRl (19, 20). El voltaje transmembrana se mantiene constante a -80 mV, y las corrientes iónicas se activan aplicando pulsos de la disolución de capsaicina (20 μM) en presencia o ausencia de concentraciones crecientes de los trímeros de N-alquilglicina a ensayar. La actividad inhibitoria se detecta midiendo la corriente iónica activada por el agonista en presencia y ausencia de los trímeros de N- alquilglicina. La potencia y eficacia de la actividad inhibitoria de los trímeros de N-alquilglicina se determina mediante la obtención de las curvas dosis-respuesta. Para ello, se examina la magnitud del bloqueo de la corriente iónica activada por la capsaicina en ovocitos que expresan el nociceptor VRl en presencia de concentraciones crecientes de los trímeros de N- alquilglicina. La relación de intensidades de corriente iónica en presencia y ausencia de dichos trímeros de N-alquilglicina se utiliza para obtener las curvas dosis-respuesta (19, 20) . Estas gráficas se ajustan a funciones logarítmicas para determinar el bloqueo máximo (potencia) y la concentración de antagonista que produce la mitad del bloqueo máximo (IC50, eficacia) .
Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto que todos los trímeros de N-alquilglicina ensayados bloquearon la actividad del canal iónico característico del nociceptor VRl expresado en ovocitos de rana X. laevis . Las concentraciones de trímero de N-alquilglicina que inhibieron la mitad de la respuesta del nociceptor VRl (IC50) activada por capsaicina a una concentración de 20 μM fueron aproximadamente 1 μM para el trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [4], de aproximadamente 2 μM para el trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [8] y de aproximadamente 30 μM para el trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [7] .
Por otra parte, debido a que algunos trímeros de N- alquilglicina de fórmula (I) pueden presentarse como estereoisómeros, se evaluó la posibilidad de si la actividad bloqueadora del nociceptor VRl de la mezcla racémica correspondía preferentemente a uno de los isómeros. Para ello, se evaluó la actividad bloqueadora del nociceptor VRl de los enantiómeros identificados como [4a] y [4b] (véase la Tabla 1) según el protocolo previamente descrito, y se comparó con la actividad bloqueadora de dicho receptor de una mezcla racémica de dichos enantiómeros. Los resultados obtenidos fueron similares en ambos casos y pusieron de manifiesto que ambos enantiómeros ejercen una actividad bloqueadora del nociceptor VRl similar.
Dado el papel del nociceptor en la integración de las vias de dolor, una consecuencia de la actividad bloqueadora de estos trímeros de N-alquilglicina es su empleo como analgésico. 1.2.2 Bloqueo del receptor glutamatérgico de tipo NMDA Para evaluar la actividad biológica de los trímeros de N- alquilglicina obtenidos en el Ejemplo 1.1 sobre receptores glutamatérgicos de tipo NMDA se desarrolló un ensayo que evalúa la eficacia y potencia de dichos compuestos con que bloquean la corriente iónica activada por agonista en ovocitos de X. laevis que expresan el receptor de tipo NMDA.el nociceptor VRl.
La expresión heteróloga de receptores en ovocitos de X. laevis puede llevarse a cabo según el procedimiento descrito por Ferrer-Montiel y Montal (19). Brevemente, los ovocitos de ranas adultas X. laevis se recogen, manipulan, e inyectan con cRNA que codifica las subunidades NR1 y NR2A del receptor de NMDA (5, 20) . Las corrientes iónicas activadas por el agonista L-glutamato en presencia del coagonista glicina se registran con la técnica de mantenimiento del voltaje constante con dos microelectrodos (two-microelectrode voltage clamp) (19, 20) . Los ovocitos que expresan el receptor se transfieren a la cámara de registro y se perfunden utilizando un sistema de perfusión de 8 salidas. El agonista y el coagonista, tanto en ausencia como en presencia de los trímeros de N-alquilglicina a ensayar, se disuelven en tampón de Ringer (Hepes 10 M pH 7,4, NaCl 100 mM, BaCl2 2,0 mM, KCl 3,0 mM) suplementado con ácido flufenámico 100 μM (20) . Esta disolución tamponada se utiliza para minimizar la contribución del canal iónico endógeno de cloruro activado por calcio a la corriente iónica del receptor glutamatérgico (19, 20) . El voltaje transmembrana se mantiene constante a -80 mV, y las corrientes iónicas se activan aplicando pulsos de la disolución de L- glutamato/glicina (100 μM/20 μM) en presencia o ausencia de concentraciones crecientes de los trímeros de N-alquilglicina a ensayar. La actividad inhibitoria se detecta midiendo la corriente iónica activada por el agonista en presencia y ausencia de los trímeros de N-alquilglicina.
La potencia y eficacia de la actividad inhibitoria de los trímeros de N-alquilglicina se determina mediante la obtención de las curvas dosis-respuesta . " Para ello, se examina la magnitud del bloqueo de la corriente iónica activada por L- glutamato/glicina en Ovocitos que expresan el receptor NMDA en presencia de concentraciones crecientes de los trímeros de N- alquilglicina. La relación de intensidades de corriente iónica en presencia y ausencia de dichos trímeros de N-alquilglicina se utiliza para obtener las curvas dosis-respuesta (19, 20) . Estas gráficas se ajustan a funciones logarítmicas para determinar el bloqueo máximo (potencia) y la concentración de antagonista que produce la mitad del bloqueo máximo (IC50/ eficacia) .
Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto que todos los trímeros de N-alquilglicina ensayados bloquearon la actividad del canal iónico característica del receptor de NMDA expresado en ovocitos de rana X. laevis . Las concentraciones de trímero de N-alquilglicina que inhibieron la mitad de la respuesta del receptor de NMDA (IC50) activada por L- glutamato/glicina a una concentración de 100 μM/20 μM oscilaron entre 0,1 μM y 100 μM para los distintos trímeros de N- alquilglicina ensayados (Tabla 1) . Así, por ejemplo, la IC50 del trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [9] es de μM, mientras que es de aproximadamente 2 uM para el trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [10] y de aproximadamente 10 μM para el trímero de N-alquilglicina identificado como compuesto [11] .
1.3 Evaluación de la actividad analgésica
Se investigó la atenuación de los trímeros de N- alquilglicina indicados en la Tabla 1 sobre la irritación producida por aplicación tópica de capsaicina en los ojos de animales, un modelo de dolor ocular (22) . El paradigma experimental compara el número de rascados tras la administración tópica de capsaicina al 0,01% en el ojo de un ratón en ausencia y presencia de los trímeros de N- alquilglicina. Tras la administración de capsaicina, se cuenta el número de veces que el ratón sé rasca el ojo tratado durante 1 minuto. Posteriormente, se lava extensivamente con solución salina el ojo afectado y, a los 15 minutos de la aplicación, se administra el compuesto a ensayar. Tras 5 minutos de incubación, se procede a administrar una solución de capsaicina al 0,1% conteniendo el compuesto a ensayar. Se procede inmediatamente a contar el número de veces que el animal se rasca el ojo durante 1 minuto. La capacidad analgésica se obtiene comparando el número de rascados de la primera apliación de capsaicina (sin compuesto a ensayar) y la segunda aplicación del irritante (en presencia del compuesto a ensayar) . Una disminución de rascados en la segunda aplicación de capsaicina es indicativa de una actividad analgésica del trímero de N-alquilglicina ensayado. Los resultados obtenidos con los trímeros de N- alquilglicina identificados como compuestos [4] y [8] pusieron de manifiesto que el compuesto [4] atenuó la irritación ocular producida por capsaicina en un 40% aproximadamente, mientras que el compuesto [8] la redujo en un 20% aproximadamente, lo que permite afirmar que dichos compuestos poseen actividad analgésica ensayada en un modelo de dolor animal.
BIBLIOGRAFÍA
1. Fields, H.L. (1987) Pain (McGraw-Hill) , New York. 2. Baranauskas, G. and Nistri, A. (1998) Sensitization of pain pathways in the spinal cord: cellular mechanisms. Prog. Neurobiol . 54, 349-365.
3. Liu, L. and Simón, S.A. (1994) A rapid capsaicin-activated current in rat trigeminal ganglion neurons . Proc . Na ti . Acad. Sci . USA 91 , 738-741.
4. Szallasi, A. & Blumberg, P.M. (1996) Vanilloid receptors: new insights enhance potential as therapeutic target. Pain 68, 195-208.
5. Caterina, M.J., Schumacher, M.A., Tominaga, M., Rossen, T.A., Levine, J.D. and Julius, D. (1997) The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the pain pathway. Na tυre 389, 816-824.
6. Belmonte, C., Gallar, J., Pozo, M.A. and Rebollo, I.
(1991) Excitation by irritant chemical substances of sensory afferent units in the cat's cornea. J. Physiol . (Lond) 437, 709-725.
7. García-Hirschfeld, J., López-Briones, L.G., Belmonte, C. and Valdeolmillos, M. (1994) Intracellular free calcium responses to protons and capsaicin in cultured trigeminal neurons . Neurosci . 67, 235-243.
8. Sakurada, T., ako, K., Sugiyama, A., Sakurada, C, Tan- No, K. and Kisara, K. (1998) Involvement of spinal NNDA receptors in capsaicin-induced nociception. Pharmacol . Biochem. Behav. 59, 339-345. 9. Ornóte, K., Kawamata, T., Kawamata, M. and Namiki, A. (1998) Formalin-induced reléase of excitatory amino acids in the skin of rat hindpaw. Brain Res . 787 r 161-164.
10. Lipton, S.A. and Rosenburg, P.A. (1994). Excitatory amino acids as a final common pathway for neurologic disorders. New Engl . J. Med. 330, 613-622.
11. Nakanishi, S. and Masu, M. (1994) Molecular diversity and functions of glutamate receptors (1994) Annu . Rev. Biophys . Biomol . Struc . 23, 319-348.
12. Zahn, P.K, Umali, E. and Breannan, T.J. (1998) Intrathecal non-NMDA excitatory amino acid receptor antagonists inhibit pain behaviors in a rat model of postoperative pain. Pain 74, 213-223.
13. Nicolodi, M., Del Bianco, P.L. and Sicuteri, F. (1997) Modulation of excitatory amino acids pathway: a possible therapeutic approach to chronic daily headache associated with analgesic drug abuse. Int . J. Clin . Pharmacol . Res . 1 7, 97-100.
14. Wiesenfeld-Hallin, Z. (1998) Combined opioid-NMDA antagonist therapies. hat advantages do they offer for the control of pain syndromes? Drugs 55, 1-4. 15. Davidson, E.M. and Carlton, S.M.- (1998) Intraplanar injection of dextrorphan, ketamine or memantine attenuates formalin-induced behaviors . Brain Res . 785, 136-142.
16. Eisenberf, E. and Pud, D. (1998) Can patients with chronic neuropathic pain be cured by acute administration of the
NMDA receptor antagonist amantadine?. Pain 74, 337-339.
17. Karlsten, R. and Gordh, T. (1997) -How do drugs relieve neurogenic pain? Drugs Aging 11 , 398-412.
18. González, P., Cabello, P., Germany, A., Norris, B. and Contreras, E. (1997) Decrease of tolerance to, and physical dependence on morphine by, glutamate receptor antagonists. Eur. J. Pharmacol . 332, 257-262.
19. Ferrer-Montiel, A.V. and Montal, M. (1994) . Structure- function relations in ligand-gated ion channels: Reconstitution in lipid bilayers and heterologous expression in Xenopus oocytes . Methods : a Companion to Methods in Enzymology 6, 60-69.
20. Ferrer-Montiel, A. V., Sun, W. and Montal, M. (1995). Molecular design of the NMDA receptor binding site for PCP and MK-801. Proc . Nati . Acad. Sci . USA. 92, 8021-8025.
21. Figliozzi, G.M.m, Goldsmith, R., Ng., S.C., Banville, S.C., Zuckermann, R.N. (1996) Synthesis of N-substituted glycine peptoid libraries. Method Enzymol . 267, 437-447.
22. González, G.G., García de la Rubia, P., Gallar, J. and Belmonte, C. (1993) Reduction of capsaicin-induced ocular pain and neurogenic inflammation by calcium antagonists. Investig. Ophtalmol . Visual Sci . 34, 3329-3335.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Un trímero de N-alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000027_0001
(I)
donde
Rα se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 3-metil- butilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N,N-dimetilamino) propilo;
R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N,N-dietilamino) propilo; y
R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3,3-difenil- propilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales farmacéuticamente aceptables.
2. Un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 1, seleccionado entre: [1]: [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida;
[la] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(4-metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida;
[Ib] : [N-[ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil ]-[N- (4-metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida; [2] : [N-[ (R, Ξ)-2-[2-(N-metilJpirrolidinil]etil]glicil]-[N-
( 4 -me t ox i f enetil) glicil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamidá; [2a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- ( 4-metoxif enetil) glicil] -N- (2, 4 -dicloro f enetil ) glicinamida; [2b] : [N-[ (S)-2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
( 4-met ox i f enetil) glicil] -N- (2, 4 -di el oro f enetil ) glicinamida; [3] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2,4-diclorofenetil) glicil]- - (3-metilbutil) glicinamida; [3a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil ) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2,4-diclorofenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida;
[3b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorofenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida;
[4] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil ] - [N- (2, 4-diclorofenetil) glicil]-N- (2, 4-diclorof enetil ) glicinamida; [4a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorof enetil) glicil] -N- (2, 4-diclorof enetil) glicinamida; [4b] : [N-[ (S) -2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(2, 4-diclorofenetil) glicil]-N- (2, 4-diclorof enetil) glicinamida; [5] : [ N- [3- (N,N-dietil amino) propil] glicil] - [N- (4- metoxifenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida; [6] : [N- [3- (N, N-die ti lamino ) propil] glicil] - [N- (4- metoxifenetil) glicil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida; [7] : [N- [3- (N, N- di etilamino) propil] glicil]-[N-(2,4- diclorofenetil) glicil] -N- (3-metilbutil) glicinamida; [8] : [N- [3- (N, N-dietilamino ) propil ] glicil] - [N- (2, 4- diclorofenetil) glicil] -N- (2", 4-diclorofenetil) glicinamida;
[9] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] - [N- [3- (N,N- dietilamino) propil] glicil] - [N- (2-metilcarbonilamino) etil] -N- (2, 4-diclorofenetil) glicinamida;
[10] : [N-( 3, 3-dif enilpropil) glicil ] - [N- [ 3- (N,N-dietilamino) propil] glicil] - [N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida;
[11] : [N-(3,3-difenilpropil)glicil]-[N-[3-(N,N-dietilamino) propil] glicil] - [N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida; [12]: [N- (3,3-difenilpropil)glicil]-[N-[3-(N,N-dietilamino) propil] glicil] - [N- [3- (N, N-dimetil amino ) propil ] glicinamida;
[13] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcabonilamino) etil] glicinamida; [14]: [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida;
[15] : [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida;
[16] : [N- (3,3-difenilpropil)glicil]-[N-(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida;
[17] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida;
[17a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida;
[17b] : [N- [ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N, N-dietilamino ) propil] glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida; [18]: [N-[ (R, S)-2-[2-(N-metil)pirrolidiniletil]glicil]-[N-
[3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida;
[18a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [3- (N,N-dietilamino)propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida; [18b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) irrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N,N-dietilamino)propil] glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida; [19] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- [ 3- (N, N-dietilamino ) propil] glicil ]-N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida; [19a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil ] etil] glicil] - [N-
[ 3- (N, N-dietilamino ) propil] glicil] -N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida; [19b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N, N-dietilamino) propil ] glicil ]-N- [2- (N- imidazolil) etil] glicinamida; [20] : [N-[ (R,S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N-
[3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [3- (N,N- dimetilamino) propil] glicinamida;
[20a] : [N- [ (R)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
[3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [3- (N,N- dimetilamino) propil] glicinamida; [20b] : [N-[ (S ) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil ]-[N- [3- (N, N-dietilamino) propil] glicil] -N- [3- (N,N- dimetilamino) propil] glicinamida; [21] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-dif enilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida; [21a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida; [21b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil ] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (metilcarbonilamino) etil] glicinamida;
[22] : [N-[ (R, S) -2- [2- (N-metil) pirrolidini] etil] glicil] - [N-
(3, 3-dif enilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida; [22a] : [N- [ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidini] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida; [22b] : [N- [ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidini] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (2-piridil) etil] glicinamida; [23]: [N-[ (R,S)-2-[2-(N-metil)pirrolidinil]etil]glicil]-[N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida; [23a] : [N- [ (R)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida;
[23b] : [N-[ (S)-2-[2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [2- (N-imidazolil) etil] glicinamida; [24] : [N-[ (R,S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N- (3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida; [24a] : [N-[ (R) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil]-[N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida; y [24b]: [N- [ (S) -2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etil] glicil] - [N-
(3, 3-difenilpropil) glicil] -N- [3- (N, N-dimetilamino) propil] glicinamida .
3. Un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 1 ó 2, que contiene, además, una modificación reversible con el fin de aumentar su biodisponibilidad y facilidad de paso de la barrera hematoencefálica y tejido epitelial.
4. Una composición que comprende, al menos, un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.
5. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de, al menos, un trímero de N- alquilglicina de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 " y, al menos, un excipiente farmacéuticamente aceptable.
6. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I), según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la elaboración de un medicamento para la atenuación de la actividad nerviosa de las neuronas sensoriales primarias implicadas en las sensaciones de dolor evocadas por la aplicación de sustancias químicas expgenas o por estímulos térmicos o por la liberación endógena de sustancias químicas por tejidos inflamados.
7. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I), según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la elaboración de un medicamento que inhibe los canales iónicos que se activan por sustancias químicas exógenas o por estímulos térmicos o por mediadores de inflamación que conducen a la sensación de dolor.
8. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I), según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y alteraciones patológicas mediadas por la actividad de canales iónicos de los nociceptores VRl y/o de los receptores ionotrópicos de glutamato.
9. Empleo de un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 8, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del dolor.
10. Empleo de un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 8, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento el tratamiento de la hiperalgesia térmica.
11. Empleo de un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 8, en la elaboración de uñ medicamento para el tratamiento del dolor neuropático y la inflamación neurogénica.
12. Una composición cosmética que comprende una cantidad cosméticamente eficaz de, al menos, un trímero de N- alquilglicina de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y, al menos, un excipiente o adyuvante cosméticamente aceptable.
13. Composición cosmética según la reivindicación 12, para el tratamiento y cuidado de la piel, seleccionada entre un producto para después del sol, un producto para después del afeitado y un producto para después del depilado.
14. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula (I) segúna cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la elaboración de una composición cosmética útil para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos térmicos, mecánicos o químicos, o por hiperalgesia térmica.
REIVINDICACIONES
[recibidas el 18 de marzo de 2002 (18.03.02) reivindicaciones 1 a 14 reemplazadas por las nuevas reivindicaciones 1 a 10 (6 páginas)]
1. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000034_0001
:D
donde
Rj se selecciona entre 2- (2, -diclorofenil) etilo, 3-metil- butilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3-
(N, N-dimetilamino) propilo; R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N, -dietilamino) propilo; y
R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3,3-difenil- propilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales farmacéuticamente aceptables,
en la elaboración de un medicamento para la atenuación de la actividad nerviosa de las neuronas sensoriales primarias implicadas en las sensaciones de dolor evocadas por la aplicación de sustancias químicas exógenas o por estímulos térmicos o por la liberación endógena de sustancias químicas por tejidos inflamados.
2. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000035_0001
(I)
donde R-L se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 3-metil- butilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N, N-dimetilamino) propilo;
R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N, N-dietilamino) propilo; y
R3 se selecciona entre N, N-dietilaminopropilo, 3,3-difenil- propilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales farmacéuticamente aceptables,
en la elaboración de un medicamento que inhibe los canales iónicos que se activan por sustancias químicas exógenas o por estímulos térmicos o por mediadores de inflamación que conducen a la sensación de dolor.
3. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000036_0001
(I)
donde Rx se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 3-metil- butilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N, N-dimetilamino) propilo;
R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N, N-dietilamino) propilo; y
R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3,3-difenil- propilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales farmacéuticamente aceptables,
en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y alteraciones patológicas mediadas por la actividad de canales iónicos de los nociceptores VRl y/o de los receptores ionotrópicos de glutamato.
4. Empleo de un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 3, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del dolor.
5. Empleo de . un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 3, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de la hiperalgesia térmica o sensibilización térmica .
6. Empleo de un trímero de N-alquilglicina según la reivindicación 3, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del dolor neuropático y la inflamación neurogénica .
7. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de, al menos, un trímero de N- alquilglicina según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, y, al menos, un excipiente farmacéuticamente aceptable.
8 Una composición dermocosmética según las reivindicaciones 1, 2 y 5, que comprende una cantidd cosméticamente eficaz de, al menos, un trímero de N- alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000037_0001
donde
Ri se selecciona entre 2- (2 , 4-diclorofenil) etilo, 3- metilbutilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N, N-dimetilamino) propilo; R2 se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 2- (4- metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3- (N, -dietilamino) propilo; y
R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3,3- difenilpropilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales cosméticamente aceptables, y al menos, un excipiente o adyuvante cosméticamente aceptable.
9. Composición dermocosmética según la reivindicación 8, para el tratamiento y cuidado de la piel, seleccionada entre un producto para después del sol, un producto para después del afeitado y un producto para después del depilado.
10. Empleo de un trímero de N-alquilglicina de fórmula general (I)
Figure imgf000038_0001
(I) donde
Ri se selecciona entre 2- (2, 4-diclorofenil) etilo, 3- metilbutilo, 2- (metilcarbonilamino) etilo, 2- (N-imidazolil) etilo y 3- (N, N-dimetilamino) propilo; R2 se selecciona entre 2- (2 , 4-diclorofenil) etilo, 2-
(4-metoxifenil) etilo, 3, 3-difenilpropilo y 3-(N,N- dietilamino) propilo; y R3 se selecciona entre N,N-dietilaminopropilo, 3,3- difenilpropilo y 2- [2- (N-metil) pirrolidinil] etilo, sus formas estereoisoméricas y mezclas, racémicas o no racémicas, de las mismas, y sus sales cosméticamente aceptables, según las reivindicaciones 1, 2 y 5, en la elaboración de una composición dermocosmética útil para calmar, reducir, atenuar o aliviar el dolor o la irritación cutánea producida por estímulos térmicos, mecánicos o químicos, o por hiperalgesia térmica.
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097670A1 (es) * 2002-05-20 2003-11-27 Diverdrugs, S.L. Compuestos capaces de bloquear la respuesta a sustancias químicas o estímulos térmicos o mediadores de la inflamación de los nociceptores, un método para su obtención y composiciones que los contienen
WO2004092204A1 (en) * 2003-04-15 2004-10-28 Merck Patent Gmbh Identification of n-alkylglycine trimers for induction of apoptosis
WO2012098281A2 (es) 2011-01-19 2012-07-26 Universidad Miguel Hernández De Elche Péptidos moduladores de receptores trp y sus usos
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5946454B2 (ja) 2010-08-31 2016-07-06 バイオニュア ファーマ， エセ．エレ． ニューロトロフィン受容体のアゴニストおよび医薬としてのその使用
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CN111563445A (zh) * 2020-04-30 2020-08-21 徐宇轩 一种基于卷积神经网络的显微镜下岩性识别方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996040747A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Chiron Corporation Urokinase receptor ligands

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996040747A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Chiron Corporation Urokinase receptor ligands

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GIBBONS J.A. ET AL.: "Pharmacologic characterization of CHIR 2279, an N-substituted glycine peptoid with high-affinity binding for alpha1 adrenoceptors", J. PHARMACOL. EXP. THER., vol. 277, no. 2, 1996, pages 885 - 889, XP002953307 *
GOODSON B. ET AL.: "Characterization of novel antimicrobial peptoids", ANTIMICROB. AGENTS CHEMOTHER., vol. 43, no. 6, 1999, pages 1429 - 1434, XP002950650 *
KIRSHENBAUM K. ET AL.: "Sequence especific polypeptoids: a diverse family of heteropolymers with stable secondary structure", PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, vol. 95, no. 8, pages 4303 - 4308, XP002944445 *
ZUCKERMANN R.N. ET AL.: "Discovery of nanomolar ligands for 7-transmembrane G-protein-coupled receptors from a diverse N (substituted) glycine peptoid library", J. MED. CHEM., vol. 37, 1994, pages 2678 - 2685, XP000608720 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097670A1 (es) * 2002-05-20 2003-11-27 Diverdrugs, S.L. Compuestos capaces de bloquear la respuesta a sustancias químicas o estímulos térmicos o mediadores de la inflamación de los nociceptores, un método para su obtención y composiciones que los contienen
ES2195787A1 (es) * 2002-05-20 2003-12-01 Diverdrugs Sl Compuestos capaces de bloquear la respuesta a sustancias quimicas o estimulos termicos o mediadores de la inflamacion de los nociceptores, un metodo para su obtencion y composiciones que los continen.
US7183430B2 (en) 2002-05-20 2007-02-27 Diverdrugs, S.L. Compounds which can block the response to chemical substances or thermal stimuli or mediators of inflammation of nociceptors, production method thereof and compositions containing same
WO2004092204A1 (en) * 2003-04-15 2004-10-28 Merck Patent Gmbh Identification of n-alkylglycine trimers for induction of apoptosis
WO2012098281A2 (es) 2011-01-19 2012-07-26 Universidad Miguel Hernández De Elche Péptidos moduladores de receptores trp y sus usos
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