WO2001058440A1

WO2001058440A1 - Medicaments pour le traitement de l'arthrite degenerative

Info

Publication number: WO2001058440A1
Application number: PCT/JP2001/000914
Authority: WO
Inventors: Yoshizou Maeda; Yasuo Yonetomi; Koji Ogawa
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2000-02-10
Filing date: 2001-02-09
Publication date: 2001-08-16
Also published as: NZ520711A; BR0108133A; KR20020074513A; NO20023793D0; CA2400243A1; ZA200206320B; NO20023793L; EP1293202A1; EP1293202A4; HUP0300379A2; RU2002121504A; MXPA02007736A; US20030114530A1; CN1400895A; HUP0300379A3; AU2001232258A1

Description

明細書変形性関節症治療剤技術分野

本発明は、変形性関節症の治療およぴンまたは予防剤に関する。

さらに詳しくは、マトリックスメタ口プロティナーゼ阻害活性を有する N —ヒドロキシ— 5—エトキシメチルォキシー 2 (S) —メチルー 4 (S) - (4—フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド、またはその非毒性塩を有効成分として含有する変形性関節症の治療およびまたは予防剤に関する。背景技術

マトリックスメタ口プロティナ一ゼ（以下、 MM Pと略記する。）は活性中心に亜鉛（以下、 Zn^{2 +}と略記する。）を有する中性メタ口プロティナ一ゼであり、現在までに一次構造の異なる 20種類以上の分子種が同定されている。具体的には、間質性コラゲナーゼ（MMP— 1) 、白血球コラゲナーゼ（MMP— 8) 、コラゲナーゼ—3 (MMP- 13) 、ゼラチナーゼ A (MMP- 2) 、ゼラチナ一ゼ B (MMP- 9) 、ストロムライシン 1 (M MP - 3) 、ストロムライシン 2 (MMP - 10) 、マトリライシン (MM P— 7) 、メタ口エラスタ一ゼ（MMP— 12) 等が挙げられる。

MMPは、生理的状況下においてはコラーゲン、ラミニン、プロテオダリカン、フイブロネクチン、エラスチン、ゼラチン等を分解することにより関節組織、骨組織、結合組織などの成長及び組織改築などに作用している。しかし、病態における各種組織の破壊は、 MM Pの調節機能の破綻から、 MM Pの発現または活性が上昇することによると考えられる。例えば、 MMP— 1、 2、 3、 8、 9、 1 3が変形性関節症患者の軟骨破壊部位で高発現していること、また、これらの MM Pが軟骨基質の分解に強く関与していることが報告されている [医学のあゆみ， 549-553 (1997)； J. Clin. Invest., M, 678-685 (1989)] 。

一方、変形性関節症（osteoarthritis；以下、 OAと略記する。）は、中高年者にみられる関節痛の大半を占める疾患であり、関節軟骨の退行性変性のため弾力性の低下、摩滅、亀裂などが起こり、軟骨の化骨増殖や関節周縁における新骨形成が促され、ついに関節軟骨が消失して骨が関節面に露出し、関節痛や関節液貯留などの症状を呈する。好発罹患関節としては、膝、股、脊髄、肘、肩、手指などがある。またその原因は不明なものが多い。その治療の第一選択薬としては、非ステロイド性の鎮痛剤、抗炎症剤が用いられており、また、関節の潤滑機能を高め、抗炎症作用もあるヒアルロン酸製剤の関節注入療法も行われている。しかし、これらはあくまで対症療法にすぎず、根本的治療法は確立していない。

MM P阻害作用を有する化合物の適応疾患に変形性関節症を挙げている特許出願として、例えば、 G B 2 2 6 8 9 3 4号明細書、 E P 6 0 6 0 4 6号明細書がある。また、 MM P阻害剤である C G S— 2 7 0 2 3 A ( 2 (R) — [N— （4ーメトキシフエニルスルホニル）一 N— ( 3—ピリジルメチル）ァミノ] —3—メチルプ夕ノヒドロキサム酸 ·塩酸塩）がゥサギ O Aモデルで有効である旨の報告がある [Inflamm Res 44, Supplement 2, S117-S118, (1995)] 。しかし現在、 MM P阻害作用を有する化合物での変形性関節症の治療および Zまたは予防剤は存在しないし、それを対象に開発が進められている MM P阻害作用を有する化合物は極わずかである。発明の開示

前記したように、変形性関節症の治療および/または予防剤の提供が切望されており、 MM P阻害剤がその治療およぴンまたは予防剤となることが期待されている。しかし、既に知られている MMP阻害剤のすべてが変形性関節症に有効であるとは限らないのは当然のことであり、まだその実現には至つていないのが現状である。

以上のような状況下で、本発明者らは鋭意検討を行った結果、 N—ヒドロキシ— 5—エトキシメチルォキシー 2 (S) ーメチルー 4 (S) ― (4ーフエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド、またはその非毒性塩が変形性関節症に有効であることを初めて見出し本発明を完成した。

すなわち、本発明は、式（I)

で示される N—ヒドロキシー 5—エトキシメチルォキシ— 2 (S) 一メチル —4 (S) ― (4—フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド、またはその非毒性塩を有効成分として含有する変形性関節症治療および/または予防剤に関する。

式（ I ) で示される N—ヒドロキシ— 5—エトキシメチルォキシ— 2 (S) 一メチル一4 (S) ― (4一フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミドは、 MM P阻害作用を有する化合物として、 W099Z19296号明細書中、実施例 71に記載されている。その MMP阻害活性、例えば、 M MP— 2および MMP— 3に対する I C 50 (nM) 値はそれぞれ、 0.5および 26である。

該明細書には、式（I) で示される化合物を含むアミノブタン酸誘導体は、 MMP阻害作用を有するため、リウマチ、骨関節炎、病的骨吸収、骨粗鬆症、歯周病、間質性腎炎、動脈硬化、肺気腫、肝硬変、角膜損傷、ガン細胞の転移浸潤や増殖の疾患、自己免疫疾患（クローン病、シュグレン病等) 、白血球系の細胞の血管遊出や浸潤による疾患、血管新生、多発性硬化症、大動脈瘤、子宮内膜症等に有効であることが記載されている。しかし、式（I ) で示される化合物が、変形性関節症に有効である旨の記載は存在しない。

MM Pと変形性関節症（O A) には、何らかの関わりがあることは知られている。しかし、本発明者らがいくつかの MM P阻害剤を、実際の O A病態モデルとして評価されているゥサギ外側半月部分切除モデルにかけてみたところ、式（I ) で示される化合物が有効性を示した。図面の簡単な説明

式（I ) で示される化合物の 3、 1 0及び3 0 1!1 ^< 1^ _§、 1日 2回投与時の大腿骨の浸食面積抑制効果を示すグラフである。発明の詳細な説明

本発明において用いる化合物は、塩の形で用いてもよい。塩は毒性のない、水溶性のものが好ましい。

適当な塩としては、アルカリ金属，（カリウム、ナトリウム等）の塩、アルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモニゥム塩、薬学的に許容される有機アミン（テトラメチルアンモニゥム、トリェチルァミン、メチルァミン、ジメチルァミン、シクロペンチルァミン、ベンジルァミン、フエネチルァミン、ピぺリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）ァミン、リジン、アルギニン、 N—メチル - D -グルカミン等）の塩が挙げられる。

本発明において用いる化合物またはその非毒性塩は、公知の方法により水和物に変換することもできる。発明を実施するための最良の形態

本発明化合物の変形性関節症に対する有効性は、例えば、以下のゥサギ外側半月部分切除モデル実験によつて証明された。

[実験方法]

ゥサギ（雌性 Kbs:NZW(He_althy)系ゥサギ）を一週間予備飼育した後、以下の方法によって半月板切除の手術を施した。

ゥサギにセラクタール 2 %注射液（0.05m l Z k g ) (パイエル）を頸背部皮下に投与し、ネンブタール注射液（2 0 m g Z k g ) (ダイナポット）を耳介辺縁静脈内に投与して麻酔を施した。右後肢膝関節周囲の毛をバリ力ンで刈り、ノギス（A B S デジマチックキヤリバ一 C D C， Mitutoyo) を用いて、右後肢膝関節の横幅（内外側半月板の中央を結ぶ線に相当する）を測定した。その後、右膝を蒸留水で 5倍希釈したヨードチンキ（東洋製薬化成）で消毒した。必要に応じて、切開部分にキシロカイン注射液 2 % (ASTRA Japan)を滴下し、局所麻酔を施した。

次に、 No.10 のブレード（Blade；夏目製作所: D-13)を用いて、右後肢の膝の外側の上皮および関節包を膝蓋靭帯に対して 9 0 ° に切開し、外側側副靭帯を切離し、次いで種子骨靭帯を切離した。その際、止血にはボスミン注射液（第一製薬）を滴下した。外側半月板を肉眼で確認した後、半月板の前方の組織と結合した部分の組織を鉗子でつまみ、半月板を手前に引き出して、半月板の中央 1 / 3を N0.15 のブレード（夏目製作所: D-13)で切除した。その後、生理食塩注射液（大塚製薬工場）で術部を洗浄し、滑膜および関節包を 4-0のシルクの滅菌針付縫合糸（ァズゥエル）で縫合した。さらに、筋層および外皮を同じ 4-0のシルクの縫合糸でそれぞれ縫合した。外皮の縫合部分をヨードチンキで消毒した後、外皮を縫合した縫合糸の結び目をァロンァルファ A 「三共」（三共）で固定した。

術後、感染を予防するため、結晶ペニシリン Gカリウム明治（5000U /animal) (明治製菓）および硫酸ストレプトマイシン明治（1 0 O m g Z animal) (明治製菓）を左後肢に筋肉内注射した。手術後 7日目に解剖するまで飼育し、その間、 1日 2回の経口投与により被験化合物を投与した。ネンブタール注射液（4 0 m g Z k g ) (ダイナポット）を耳介辺縁静脈内に投与して麻酔を施した後、右後肢膝関節周囲の毛をバリカンで刈り、ノギス（A B S デジマチックキヤリバ一 C D C， Mitutoyo) を用いて両膝の関節横幅（内外側半月板の中央を結ぶ線に相当する）を計測した。その後、動物を放血致死せしめ、右の膝関節部分を採取した。その後、膝関節を鋏およびメスを用いて関節軟骨を傷つけない様に切開し、大腿骨および脛骨頭を採取した。大腿骨および脛骨頭は、 1 0 %中性緩衝ホルマリン（和光純薬ェ業）を入れたヒストパック中に室温で保存した。全サンプルの採取が終了した後、大腿骨および脛骨頭をマスク化した。その後、実体顕微鏡を用いて侵蝕面積の計測を行った。

統計処理方法は、ビークル（vehicle) 群と式（I ) で示される化合物投与群の軟骨浸蝕面積の比較を Williams の多重比較（EXSAS, Ver5.00, アーム (有））で行った。結果を図 1に示す。産業上の利用可能性

[効果]

本モデルは、ヒトの変形性関節症に酷似した軟骨破壊を誘導することができ、 O Aモデルとして一般的に認知されたものである。本モデルにおいて、一般式（I ) で示される化合物は高い有効性を示すことが判った。従って、一般式（I ) で示される化合物は変形性関節症に有効であると判断できる。

[毒性]

本発明化合物の毒性は非常に低いものであり、医薬として使用するために十分安全であると判断できる。例えば、ラットを用いた単回の経口投与での最低致死量は、 2000m g / k gであった。

[医薬品への適用]

本発明に用いられる、マトリックスメタ口プロティナーゼ、例えばゼラチナーゼ、ストロムライシンまたはコラゲナ一ゼ等に対し阻害作用を有する N —ヒドロキシ— 5 _エトキシメチルォキシ一 2 ( S ) —メチルー 4 ( S ) - ( 4一フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド、またはその非毒性塩は、ヒトを含めた動物、特にヒトにおいて、変形性関節症の治療および Zまたは予防に有用である。

本発明化合物、その非毒性の塩、酸付加塩、またはその水和物を上記の目的で用いるには、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。

投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、 .投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人一人あたり、 1回につき、 l m gから lOOOm gの範囲で、

1日 1回から数回経口投与されるか、または成人一人あたり、 1回につき、 O.lm gから 1 0 O m gの範囲で、 1日 1回から数回非経口投与（好ましくは、静脈内投与）されるか、または 1日 1時間から 2 4時間の範囲で静脈内に持続投与される。 '

もちろん前記したように、投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また範囲を越えて必要な場合もある。

本発明化合物を投与する際には、経口投与のための内服用固形剤、内服用液剤、および非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として用いられる。経口投与のための内服用固形剤には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含まれる。

このような内服用固形剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質はそのままか、または賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壌剤（繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、ァスパラギン酸等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセル口一スフ夕レート等）で被覆していてもよいし、また 2以上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも包含される。

経口投与のための内服用液剤は、薬剤的に許容される水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質が、一般的に用いられる希釈剤（精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。

非経口投与のための注射剤としては、溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含する。注射剤は、ひとつまたはそれ以上の活性物質を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、ァスパラギン酸、ポリソルベート 8 0 (登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって調製される。また、無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。

非経口投与のためのその他の製剤としては、ひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、常法により処方される外用液剤、軟膏剤、塗布剤、吸入剤、スプレー剤、坐剤および膣内投与のためのペッサリー等が含まれる。

スプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば塩化ナトリウム、クェン酸ナトリウムあるいはクェン酸のような等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法は、例えば米国特許第 2,868,691号および同第 3,095,355 号に詳しく記載されている。

[製剤例]

製剤例 1

以下の各成分を常法により混合した後打錠して、一錠中に 5 O m gの活性成分を含有する錠剤 1 0 0錠を得た。

• N—ヒドロキシ— 5—エトキシメチルォキシ _ 2 ( S ) 一メチル—4 ( S ) 一（4—フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド

…… 5.0 g

•カルポキシメチルセルロースカルシウム（崩壊剤） …… 0.2g •ステアリン酸マグネシゥム（潤滑剤） …… 0.1 g

'微結晶セルロース …… 4.7g 製剤例 2

以下の各成分を常法により混合した後、溶液を常法により滅菌し、 5 m l ずつアンプルに充填し、常法により凍結乾燥し、 1アンプル中 2 O m gの活性成分を含有するアンプル 1 0 0本を得た。

· N—ヒドロキシ— 5—エトキシメチルォキシ _ 2 ( S ) ーメチルー 4 ( S ) 一（4—フエノキシベンゾィル'）ァミノペンタンアミド 2.0 g マンニトール 20 g 蒸留水 500ml

Claims

請求の範囲

1. 式（I)

で示される N—ヒドロキシー 5—エトキシメチルォキシー 2 (S) —メチル -4 (S) - (4一フエノキシベンゾィル）ァミノペンタンアミド、またはその非毒性塩を有効成分として含有する変形性関節症治療および/または予防剤。