WO1997041437A1

WO1997041437A1 - Procede et dispositif d'analyse immunologique automatique

Info

Publication number: WO1997041437A1
Application number: PCT/JP1996/001194
Authority: WO
Inventors: Kyoichi Iwahashi; Toshimi Kawamura; Eiji Ikeda; Mitsutoshi Sato
Original assignee: Sanko Junyaku Co., Ltd.
Priority date: 1996-05-01
Filing date: 1996-05-01
Publication date: 1997-11-06
Also published as: EP0899572A1; EP0899572A4; US6103193A

Description

明細書免疫自動測定方法及び装置枝術分野

本発明は、抗原 -抗体反応により検体中の特定物質を測定する免疫測定を効果的かつ自動的に行うことのできる免疫自動測定装置及び方法に関する。背景技術

従来、抗原一抗体反応を利用した免疫測定法としては、 1 ステンプ方式及び 2 ステップ方式の非競合サンドィッチ法及び競合法が知られている。

1 ステップ方式の非競合サンドィツチ法により、試料として患者から採取した血液等の検体に舍まれる抗原の量を測定する方法を説明する。例えば、合成樹脂製の容器内壁や粒等の不溶性の担体（固相）に結合した抗体（以下「固相抗体」という）と、放射性物質、蛍光物質、酵素等の摞識物質を結合した抗体（以下「標識抗体」という）とを予め添加してある反応容器に、測定対象の検体を添加する。これによつて反応容器内においては、検体中に舍まれている抗原が上記固相抗体と抗原抗体反応（免疫反応）して抗原抗体複合体を生成し、また同時にこの抗原抗体複合体に標識抗体も複合して、固相抗体一抗原一標識抗体という 3 つの成分がサンドィツチになつた複合体が生成する。

このようにして、検体中の抗原を仲介物として、摞識抗体の標識を固相に結合させる。

次ぎにこの固相に結合された摞識以外のものであつて、反応容器内に添加された抗原とは結合しなかった余分の標識抗体や、免疫反応に関与しなかった抗体成分等を分離（以下「 B Z F分離」という ) する操作を行ない、最終的に、固相に結合した抗原量に比例する摞識量を、摞識の性質を利用した物理的あるいは化学的な手法で定量測定して、検体中の抗原港度を求める。

一方、 2 ステップ方式の非競合サンドイッチ法は、まず固相抗体のみを予め添加した反応容器に、検体を添加することで第 1 の反応を行なわせた後に、摞識抗体を添加して第 2 の反応を行なわせ測定を行なう方法である。

すなわち、固相抗体（あるいはこれを舍む試薬）が予め添加されている反応容器に、まず検体を添加する。これによつて検体中の特定の抗原が、固相抗体と免疫反応して不溶性担体に結合固定する。免疫反応を起こさなかった未反応の成分は、 B / F分離して容器外に排除する。次に標識抗体を上記反応容器に添加して免疫反応を起こさせる。これによつて固相抗体一抗原一標識抗体の複合体が生成する。未反応の成分や残渣物は B / F分離して容器外に排除する。

この操作の後、不溶性担体に結合した複合体の量を上記 1 ステツブ方式と同様に標識物質の定量で測定し、検体中の抗原濃度を求める。

またこれら非競合サンドイッチ法とは別に、上述した固相抗体に対し、予め標識物質で欏識した抗原（一般に「標識抗原」という）と、検体中の抗原を競争的に反応させる競合法と称される方法も知られている。

この競合法においては、固相抗体と摞識抗原を舍む弑薬に検体を反応させる。これにより、検体中の測定対象の成分（抗原）と標識抗原とが、固相抗体の免疫反応部位に対して競合的に反応する。その結果、検体中に含まれる未知量の抗原成分と、予めその量が决められて与えられている欏識抗原成分との量比（濃度比）に基づいた免疫複合体がそれぞれ生成することになる。したがってサンドイツチ法と同様に未反応物質や残潼物を Β / F分離した後、固相に固定された標識物質の量をその標識物質の性質を利用して定量測定することで、上記比に応じた計算により検体中の抗原量を求めることができる。なお既に述べているように、上記標識物質（「マーカー」と称する場合もある）の性質により、固相の固定 . 結合したその標識物質の量を定量測定する方法は異なっており、このような観点に基づく分類から、免疫測定方法は、蛍光物質を標識に用いる場合は F I A 、放射性物質を用いる場合は R I A、酵素を用いる場合は E I A、化学発光物質を標識に用いる場合は C L I Aとそれぞれ略称される場合も多い。

また、この種の免疫測定法において、固定化固相の形成手段としては、抗体又は抗原をスチレン、塩ビ等合成樹脂小球、鉄小球、ガラス小球、ガラス小片等に固定化してなる抗体又は抗原不溶化担休 (通常、ビーズ又はパーティクルと言われるが、本明細書では、以下パーティクルという）が用いられるようになつている。

上記各種の測定において、反応管へのパーティクルの供給 ' 廃棄、 B Z F分離のための洗浄、パーティクルの移替え等の作業を所定のタイミングで行う必要があり、これを人手でやることは大変な作業であり、測定の自動化の提案が種々なされている（特開昭 6 2 - 1 3 3 3 5 5 号公報、特開昭 6 2 - 1 3 3 3 5 6号公報、特開昭 6 3 - 2 4 1 6 0号公報、特開昭 6 3 - 2 4 1 6 1 号公報、特開平 3 一 5 1 7 6 2号公報等）。しかし、これらの提案された手法においても、いまだタイミングの取り方等において充分とは言えない点があった。

本発明は、上記した従来技術に鑑みてなされたもので、反応管の供給 ' 廃棄、 B Z F分離のための洗浄、試薬の分注、測定等を自動的に行うことができることは勿狳、反応時間を自在に変更することができ、 1 ステップ及び 2 ステップの非競合サンドィツチ法や競合法などのいずれの測定手法にも容易に対処し実施できる免疫自動測定装置及び方法を提供することを目的とする。発明の開示

上記課題を解決するために、本発明の免疫自動測定装置においては、所定速度で間欠的に回転移動する反応管ターレツトと、該反応管ターレツトの上面周辺部に複数個の反応管ホルダーを内周列及び外周列の 2列に配設してなる反応管保持部と、該反応管保持部に反応管を供給する反応管供給手段と、一の反応管ホルダーに保持された反応管を所望個数の反応管ホルダーをスキップして他の反応管ホルダ一に移載する反応管移載手段と、該反応管に検体を分注する検体分注手段と、該反応管にバーティクルを供袷するパーティクル供袷手段と、該反応管に標鏃試薬を分注する試薬分注手段と、 B Z F 分離を行うための洗浄手段と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注手段と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する測定手段と、該反応管保持部から測定済の反応管を取り出し廃棄する反応管廃棄手段とを有することを特徴とするものである。

本発明の免疫自動測定方法においては、上記した免疫自動測定装置を用い、反応時間に応じて反応管を反応管保持部の所定位置に移載するようにしたことを特徴とするものである。

また、本発明の免疫自動測定方法においては、上記した免疫自動測定装置を用い、該反応管ターレツ卜の内周列の反応管ホルダーに上記反応管供給手段により予め共給された検体を有する反応管を供給する工程と、上記パーティクル供給手段により該反応管にパーティクルを供給する工程と、垓検体とパーティクルとにより第 1 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、第 1 の反応後のパーティクルを充分洗浄して B / F分離する工程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識試薬を分注する工程と、該検体とパーティクルと摞識試薬とにより第 2 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、第 2 の反応後のバーティクルを充分洗浄して B Z F分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記第 1 の反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によつて所望の個数の反応管ホルダ—をスキップして同じ内周列の反応管ホルダ一に移載し、さらに上記第 2 の反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によつて所望の個数の反応管ホルダーをスキップして外周列の反応管ホルダーに移載することを可能としたことを特徴とするものである。この方法は、 2 ステツプの非競合サンドィツチ法に本発明装置を適用実施する場合の手法を述べたものである。

さらに、本発明の免疫自劻測定方法の他の態様においては、上記免疫自動測定装置を用い、該反応管ターレツ卜の外周列の反応管保持ホルダー部に上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程と、上記バーティクル供給手段により該反応管にパーティクルを供給する工程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識試薬を分注する工程と、該検体とパーティクルと標識試薬とにより抗原 -抗体反応を所定時間行わせる工程と、反応後のパーティクルを充分洗浄して B / F分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によって所望の個数の反応管ホルダーをスキップして同じ外周列の反応管ホルダ一に移載することを可能としたことを特徴とするものである。この場合、最初に内周列の反応管ホルダ一に反応管を供袷し、最初に内周列の反応管ホルダ一に反応管を供給し、反応時間の設定のためのスキ 'ンプ移載にあたり、同じく内周列の反応管ホルダーに移載することもできる。さらに、最初に内周列の反応管ホルダーに反応管を供給し、反応時間の設定のためのスキップ移載にあたり外周列の反応管ホルダ一に移載することもできる。この方法は、 1 ステップの非競合サンドイツチ法に本発明装置を適用実施する場合の手法であるが、同様の手法は競合法についても適用可能である，

上記したいずれの免疫自動測定方法においても、该反応管ターレットの内周列の反応管ホルダーに上記反応管供袷手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程の代わりに、該反応管ターレツ卜の内周列の反応管ホルダーに反応管を供給する工程と、該反応管に検体を供給する工程とを用いることもできる。また、検体の分注とバーティクルの分注を反応管ターレツト上で行う場合に

、これら 2工程の実施の順序に限定はなく、いずれの工程を先に行つても特別の問題はない。

本発明は、反応管ターレツト上の内周列と外周列の 2列の反応管保持部を自在に使用して、反応時間の設定が可能である。反応時間の設定にあたっては、反応管タ一レツトの各反応管ホルダーの設置個数によって反応管移載手段によるスキップ移載位置を決定することによって、種々の反応時間を自在に設定することができる。その上、本発明は、 1 ステップ又は 2 ステップの非競合サンドイッチ法や競合法の測定手法の異なる免疫測定に対しても、特別の困難性もなく適用可能である。図面の簡単な説明

図 1 は、本発明に係る免疫自動測定装置の一実施例を示す上面図である

図 2 は、図 1 の側面図である。

図 3 は、反応管タ一レツトの摘示上面図である。

図 4 は、反応管ターレツトの躯動機構を示す一部断面側面図である。

図 5 は、本発明方法の一施例（ 2 ステップ非競合サンドィツチ法）を示すフローチャートある。

図 6 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 1 ) を示す説明図である。

図 7 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 2 ) を示す説明図である。

図 8 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 3 ) を示す説明図である。

図 9 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 4 ) を示す説明図である。

図 1 0 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレット上の反応管の動き（ 5 ) を示す説明図である。

図 1 1 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレット上の反応管の勖き（ 6 ) を示す説明図である。

図 1 2 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 7 ) を示す説明図である。

図 1 3 は、図 5 に示した実施例の反応管タ一レット上の反応管の動き（ 8 ) を示す説明図である。

図 1 4 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 9 ) を示す説明図である。

図 1 5 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 1 0 ) を示す説明図である。

図 1 6 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 9 ) を示す説明図である。

図 1 7 は、図 5 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 1 0 ) を示す説明図である。

図 1 8 は、本発明方法の他の実施例（ 1 ステップ非競合サンドィツチ法、外周列の反応管ホルダーのみ使用）を示すフローチャートである。

図 1 9 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 1 ) を示す説明図である。

図 2 0 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 2 ) を示す説明図である。

図 2 1 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレット上の反応管の動き（ 3 ) を示す説明図である。

図 2 2 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレット上の反応管の勅き（ 4 ) を示す説明図である。図 2 3 は、図 1 8に示した実施例の反応管ターレント上の反応管の動き（ 5 ) を示す説明図である。

図 2 4 は、図 1 8に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 6 ) を示す説明図である。

図 2 5 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレット上の反応管の劻き（ 7 ) を示す説明図である。

図 2 6 は、図 1 8に示した実施例の反応管ターレツ卜上の反応管の動き（ 8 ) を示す説明図である。

図 2 7 は、図 1 8 に示した実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き ( 9 ) を示す説明図である。

図 2 8 は、本発明方法の別の実施例（ 1 ステップ非競合サンドィツチ法、外周列の反応管ホルダ一のみ使用）の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 1 ) を示す説明図である。

図 2 9 は、本発明方法の別の実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 2 ) を示す説明図である。

図 3 0 は、本発明方法の別の実施例の反応管タ一レツト上の反応管の動き（ 3 ) を示す説明図である。

図 3 1 は、本発明方法の別の実施例の反応管タ一レツト上の反応管の動き（ 4 ) を示す説明図である。

図 3 2 は、本発明方法の別の実施例の反応管タ一レツト上の反応管の動き（ 5 ) を示す説明図である，

図 3 3 は、本発明方法の別の実施例の反応管ターレント上の反応管の動き（ 6 ) を示す説明図である。

図 3 4 は、本発明方法の別の実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 7 ) を示す説明図である。

図 3 5 は、本発明方法の別の実施例の反応管タ一レツト上の反応管の動き（ 8 ) を示す説明図である。

図 3 6 は、本発明方法の別の実施例の反応管ターレツト上の反応管の動き（ 9 ) を示す説明図である。発明を実施するための最良の形態

以下に本発明の一実施例を添付図面に基づいて説明する。

図 1 は本発明に係る免疫自動測定装置の一実施例を示す上面図である。図 2 は図 1 の側面図である。図 3 は反応管ターレツトの摘示上面図である。図 4 は反応管タ一レットの駆動機構を示す一部断面側面図である。

図 1 において、 1 2 は本発明の免疫自動測定装置で、所定速度で間欠的に回転移動する反応管ターレツト 1 4 を有している。該反応管ターレツト 1 4 の上面周辺部には、複数個の反応管ホルダ一 1 6 を内周列 1 8 a 及び外周列 1 8 b の 2列に配設してなる反応管保持都 1 8 が形成されている。該反応管タ一レツト 1 4 上面に設けられる反応管ホルダ一 1 6 の設置数は、反応の態様により適宜設定すればよい力く、図 1 の例では、内周列及び外周列がそれぞれ 3 0個、合計 6 0個の反応管ホルダー 1 4 を設置して例を示してある。

2 0 は反応管ラックで、多数の受け部 2 1 に反応管 Tを保持する。 2 2 は、反応管移載手段で、移載 X軸機構 2 2 a と、移載 Y蚰機構 2 2 b とから構成されている。該反応管移載手段 2 2 は、反応管ラック 2 0 の受け部 2 1 に保持された反応管 Tを反応管ホルダ一 1 6 に移載し、かつ一の反応管ホルダ一 1 6 に保持された反応管を所望個数の反応管ホルダー 1 6をスキップして他の反応管ホルダー 1 6 に移載する作用を行う。この場合、内周列 1 8 a 又は外周列 1 8 bの反応管ホルダー 1 6 に保持された反応管 Tを同じ周列の反応管ホルダー 1 6 に移載することもできるし、他の周列の反応管ホルダ一 1 6 に移載することもできる。該反応管移載手段 2 2 は、該反応管保持部 1 8 に反応管 Tを供給する反応管供給手段と、該反応管保持部 1 8から測定済の反応管 Tを取り出し廃棄する反応管廃棄手段を有している。

2 6 は、該反応管 Tにパーティクルを供給するパーティクル供給手段で、試薬テーブル 2 5 に設けられている。 2 8 は、該反応管 T に標識試薬を分注する試薬分注手段である。 3 0 は、 B Z F分離を行うための洗浄手段である。 3 2 は、該反応管 Tに測定用試薬を分注する測定用試薬分注手段である。 3 4 は、該反応管 Tの反応後の反応溶液における標識物の置を測定する測定手段である。

なお、 3 6 は該反応管ターレツト 1 4 を回転自在に支持する回転岫である。該回転軸 3 6 には、プーリ一 3 8 が固着されている。 4 0 はモータで、その駆動軸 4 2 にはモータプーリー 4 4 が取付けられている。該モータプーリー 4 4 は上記ブーリー 3 8 とタイミングベルト 4 6 を介して接続されており、該モータプーリ一 4 4 の回転がプーリー 3 8 に伝達され、該回転岫 3 6 を介して該反応管ターレット 1 4 が間欠的に回転する。

上記した免疫自動測定装置 1 2 を用いて、免疫自動測定を行う場合についてさらに具体的に説明する。まず、 2 ステップの非競合サンドィツチ法を実施する場合について反応フローを示す図 5及び反応管ターレツト 1 4 における反応管 Tの動きを示す図 6 〜図 1 7 を参照して説明する。

まず、図示しないスィツチ手段をオンにすると、該免疫自動測定装置 1 2 のモータ 4 0がオンとなり起動し、反応管タ一レット 1 4 が所定速度で間欠的に回転運動を行い、これにより反応管ホルダ一 1 6 も回転する。この反応管ターレツト 1 4 の間欠的回転の回転速度は、反応の態様により任意の時間単位で、例えば 3 0秒又は 1 分ごとに 1 コマずつ動くように設定すればよい力 <、本実施例では、 3 0秒に 1 コマ回転するように設定した場合について説明する。

工程 1 0 0 (図 5 ) において、この回転する反応管ターレット 1 4 の内周列 1 8 a の反応管ホルダー 1 6 a に上記反応管移載手段 2 2 に舍まれる反応管供給手段により反応管 Tが供袷される（図 6 ) このとき、該反応管 Tには予め検体を供給しておいてもよいし、反応管 Tが反応管ホルダー 1 6 a に保持された後、その反応管丁に検体を供袷してもよい。本実施例では、反応管 T内に予め検体分注を行った場合について説明する。工程 1 0 1 において、バーテイクル供給手段 2 6 により該反応管 Tにパーティクルが供袷される（図 7 ) 。パーティクルの供袷された反応管 Tは、設定された反応時間（本実施例では、 5分 3 0秒）に応じて反応管移載手段 2 2 によって、所定数の反応管ホルダー 1 6をスキップして内周列 1 8 a の所定位置の反応管ホルダ一 1 6 に移載せしめられる。本実施例では、 B Z F分離手段 3 0から 1 1 番目の内周列の反応管ホルダ一 1 6 bに移載することによって、 1 1 X 3 0秒 = 3 3 0秒（ 5分 3 0秒）と設定される（図 8 ) 。

工程 1 0 2 において、該検体とバ一ティクルとにより第 1 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる（図 9 ) 。

工程 1 0 3 において、第 1 の反応後のバーティクルを充分洗浄して B Z F分離を行う（図 1 0 ) 。この B Z F分離の終了した反応管 Tは反応管移載手段 2 2 によって、試薬分注手段 2 8が設置されている試薬分注位置、即ち反応管ホルダー 1 6 c に移載される（図 1 1 ) .

工程 1 0 4 において、該試薬分注手段 2 8 により該反応管 Tに標識試薬が分注される。標識試薬の分注された反応管 Tは、設定された反応時間（本実施例では、 5分 3 0秒）に応じて反応管移載手段 2 2 によって、所定数の反応管ホルダ一 1 6 をスキップして外周列 1 8 bの所定位 gの反応管ホルダ一 1 6 に再び移載せしめられる。本実施例では、 B Z F分離手段 3 0から 1 1 番目の外周列の反応管ホルダー 1 6 d に移載することによって、 1 1 X 3 0秒 = 3 3 0秒 ( 5分 3 0秒）と設定される（図 1 2 ) 。

工程 1 0 5 において、該検体とバーティクルと標識試薬とにより第 2 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる（図 1 3 ) 。

工程 1 0 6 において、第 2 の反応後のパーティクルを充分洗浄して B Z F分離を行う（図 1 4 ) 。

工程 1 0 7 において、この B Z F分離の終了した反応管 Tに測定用試薬分注手段 3 2により標識物の量を測定するための試薬、例えば基質等の測定用試薬が分注される（図 1 5 ) 。工程 1 0 8 において、該反応管 Tの反応後の反応溶液における標識物の量が測定される（図 1 6 ) 。この測定としては、測定用試薬の分注により、反応溶液が呈色し又は蛍光を発し又は化学発光することなどを利用して比色測定等を行うのが通常である。

工程 1 0 9 において、反応管移載手段 2 2 に舍まれた反応管廃棄手段により、測定済の反応管 Τを廃棄する（図 1 7 ) 。

次に、反応管ターレツト 1 4 の外周列 1 8 b のみを用いて 1 ステッブの非競合サンドィツチ法を実施する場合について反応フロ一を示す図 1 8及び反応管タ一レツト 1 4 における反応管 Tの動きを示す図 1 8 ~ 2 6図を参照して説明する。なお、図 6 〜図 1 7 に示した反応フロー図と同一作用の場合には説明を省略することがある。まず、図示しないスィッチ手段をオンにすると、上記実施例と同様に、該免疫自動測定装置 1 2がオンとなり起動し、反応管ターレット 1 4 が所定速度で間欠的に回転移動を行い、これにより反応管ホルダー 1 6 も回転する。本実施例でも、 3 0秒に 1 コマ回牵云するように設定した場合について説明する。

工程 2 0 0 (図 1 8 ) において、この回転する反応管ターレント 1 4 の外周列 1 8 b の反応管ホルダー 1 6 e に上記反応管移載手段 2 2 に舍まれる反応管供給手段により反応管 Tが供給される（図 1 9 ) o

このとき、該反応管 Tには予め検体を供袷しておいてもよいし、反応管 Tが反応管ホルダー 1 6 d に保持された後、その反応管丁に検体を供袷してもよい。本実施例では、反応管 T内に予め検体分注を行った場合について説明する。

工程 2 0 1 において、パ一ティクル供給手段 2 6 により該反応管 Tにパーティクルが供給される（図 2 0 ) 。

工程 2 0 2 において、試薬分注手段 2 8 により該反応管 Tに標識試薬が分注される（図 2 1 ) 。バーティクル及び標識試薬の供給された反応管 Tは、設定された反応時間（本実施例では、 5分 3 0秒 ) に応じて反応管移載手段 2 2によって、所定数の反応管ホルダー 1 6 をスキップして同じく外周列の所定位置の反応管ホルダー 1 6 に移載せしめられる（図 2 2 ) 。本実施例では、 B F分離手段 3 0 から 1 1 番目の外周列の反応管ホルダー 1 6 f に移載することによって、 1 1 X 3 0秒 = 3 3 0秒（ 5分 3 0秒）と設定される（図 2 2 ) o

工程 2 0 3 において、該検体とバーティクルと標識試薬により抗原一抗体反応を所定時間行わせる（図 2 3 ) 。

工程 2 0 4 において、反応後のバ一ティクルを充分洗浄して B / F分離を行う（図 2 4 ) 。

工程 2 0 5 において、この B / F分離の終了した反応管 Tに測定用試薬分注手段 3 2 により標識物の量を測定するための試薬、例えば基質等の測定用試薬が分注される（図 2 5 ) 。

工程 2 0 6 において、該反応管 Tの反応後の反応溶液における標識物の量が測定される（図 2 6 ) 。この測定としては、測定用試薬の分注により、反応溶液が呈色し又は蛍光を発し、又は化学発光することなどを利用して比色測定等を行うのが通常である。

工程 2 0 7 において、反応管移載手段 2 2 に舍まれた反応管廃棄手段により、測定済の反応管 Tを廃棄する（図 2 7 ) 。

上記した 1 ステップの非競合サンドィツチ法の実施例では、反応管 Tを最初は外周列の反応管ホルダ一 1 6 e に供給し、そのまま外周列の反応管ホルダーのみを用いて工程を進めた例を示したが、図 2 8 〜図 3 6 に示すように、反応管 Tを最初は内周列の反応管ホルダー 1 6 gに供袷し、そのまま内周列の反応管ホルダ一のみを用いて、図 1 9〜図 2 5 の場合と同様に工程を進めることもできる。さらに、必要に応じて、反応管 Tを最初は内周列の反応管ホルダ一に供給し、樓識試薬の分注までをそのまま内周列の反応管ホルダーにおいて行い、その後反応管移載手段 2 2 によって該反応管 Tを外周列の反応管ホルダーにスキップして移載せしめ、検体とパーティクルと標識試薬との反応を外周列の反応管ホルダ一において行わせることも可能である。上記した各実施例では、非競合サンドィッチ法の 2 ステンプ及び 1 ステップの場合について説明したが、本発明は、上記した 1 ステプの非競合サンドイツチ法の適用例と同様の手法で、競合法についても適用可能である。また、いずれの測定法に適用するにあたつても、内周列と外周列を自在に使用して、反応時間の設定が可能である。反応時間の設定にあたっては、反応管ターレット 1 4 の各反応管ホルダー 1 6 の設置個数によって反応管移載手段によるスキップ移載位置を决定することによって、種々の反応時間を自在に設定することができる。産業上の利用可能性

以上のベたごとく、本発明によれば、免疫測定を行うにあたり、反応管の供袷 · 廃棄、 B / F分離のための洗浄、試薬の分注、測定等を自動的に行うことができることは勿論、反応時間を自在に変更することができ、 1 ステップ及び 2 ステップの非競合サンドィツチ法や競合法などのいずれの測定手法にも容易に対処し実施できるという効果を奏する。

Claims

請求の範囲

1 . 所定速度で間欠的に回転移動する反応管ターレツトと、該反応管ターレツトの上面周辺部に複数個の反応管ホルダーを内周列及び外周列の 2列に配設してなる反応管保持部と、反応管を所定の反応管ホルダーに供給し又は当該反応管ホルダ一から取り出し、該反応管保持部に反応管を供給する反応管供給手段と、一の反応管ホルダ一に保持された反応管を所望個数の反応管ホルダーをスキップして他の反応管ホルダ一に移載する反応管移載手段と、該反応管に検体を分注する検体分注手段と、該反応管にパーティクルを供給するバ一ティクル供給手段と、該反応管に標識試薬を分注する試薬分注手段と、 B / F分離を行うための洗浄手段と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注手段と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する測定手段と、該反応管保持部から測定済の反応管を取り出し廃棄する反応管廃棄手段とを有することを特徴とする免疫自動測定装置。

2 . 請求項 1 記載の免疫自動測定装置を用い、反応時間に応じて反応管を反応管保持部の所定装置に移載するようにしたことを特徴とする免疫自動測定方法。

3 . 請求項 1 記載の免疫自動測定装置を用い、該反応管ターレントの内周列の反応管ホルダーに上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程と、上記パーティクル供給手段により該反応管にバーティクルを供給する工程と、該検体とバ一ティクルとにより第 1 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、第 1 の反応後のパーティクルを充分洗浄して B Z F分離するェ程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識試薬を分注する工程と、該検体とバーティクルと標識試薬とにより第 2 の抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、第 2 の反応後のパーティクルを充分洗浄して分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記第 1 の反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によつて所望の個数の反応管ホルダーをスキップして同じ内周列の反応管ホルダ一に移載し、さらに上記第 2 の反応の反応時間を所定時間に設定するため、 ί亥反応管を反応管移載手段によって所望の個数の反応管ホルダーをスキップして外周列の反応管ホルダーに移載することを特徴とする免疫自動測定方法。

4 . 請求項 2記載の免疫自動測定方法において、該反応管タ一レツトの内周列の反応管ホルダーに上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程の代わりに、該反応管タ一レツ卜の内周列の反応管ホルダーに反応管を供給する工程と、亥反応管に検体を供給する工程とを用いることを特徴とする免疫自動測定方法。

5 . 請求項 1 記載の免疫自動測定装置を用い、該反応管ターレツトの外周列の反応管保持ホルダ一部に上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程と、上記バーテイクル供給手段により該反応管にパーティクルを供給する工程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識試薬を分注する工程と、該検体とパーティクルと標識試薬とにより抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、反応後のパーティクルを充分洗浄して B Z F分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によって所望の個数の反応管ホルダ一をスキップして同じ外周列の反応管ホルダ一に移載することを特徴とする免疫自動測定方法。

6 . 請求項 4 記載の免疫自動測定方法において、該反応管ターレツトの外周列の反応管ホルダーに上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程の代わりに、該反応管タ一レツトの外周列の反応管ホルダーに反応管を供給する工程と、該反応管に検体を供給する工程とを用いることを特徴とする免疫自動測定方法。

7 . 請求項 1 記載の免疫自動測定装置を用い、該反応管ターレツトの内周列の反応管保持ホルダ一部に上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供袷する工程と、上記パーテイクル供給手段により該反応管にパーティクルを供給する工程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識试薬を分注する工程と、該検体とパーティクルと標識試薬とにより抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、反応後のパーティクルを充分洗浄して B Z F分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における標識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によって所望の個数の反応管ホルダーをスキップして同じ内周列の反応管ホルダ一に移載することを特徴とする免疫自動測定方法。

8 . 請求項 1 記載の免疫自動測定装置を用い、該反応管タ一レットの内周列の反応管保持ホルダー部に上記反応管供袷手段により予め供給された検体を有する反応管を供袷する工程と、上記バーテイクル供給手段により ¾反応管にパーティクルを供 ½する工程と、上記試薬分注手段により該反応管に標識試薬を分注する工程と、該検休とパーティクルと樘識試薬とにより抗原一抗体反応を所定時間行わせる工程と、反応後のバーティクルを充分洗浄して B / F分離する工程と、該反応管に測定用試薬を分注する測定用試薬分注工程と、該反応管の反応後の反応溶液における摞識物の量を測定する工程と、測定済の反応管を廃棄する工程とからなり、上記反応の反応時間を所定時間に設定するため、該反応管を反応管移載手段によって所望の個数の反応管ホルダーをスキップして外周列の反応管ホルダーに移載することを特徴とする免疫自動測定方法。

9 . 請求項 6記載の免疫自動測定方法において、該反応管タ一レツトの内周列の反応管ホルダ一に上記反応管供給手段により予め供袷された検体を有する反応管を供給する工程の代わりに、該反応管タ一レツトの内周列の反応管ホルダ一に反応管を供給する工程と、該反応管に検体を供給する工程とを用いることを特徴とする免疫自動測定方法。

10. 請求項 7記載の免疫自動測定方法において、該反応管ターレツトの内周列の反応管ホルダーに上記反応管供給手段により予め供給された検体を有する反応管を供給する工程の代わりに、該反応管タ —レツ卜の内周列の反応管ホルダーに反応管を供給する工程と、該反応管に検体を供給する工程とを用いることを特徴とする免疫自動測定方法。