WO1997007801A1 - Nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-[n-(1,2-benzisotiazolil-3(2h)ona-1,1-dioxido]etilo - Google Patents

Nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-[n-(1,2-benzisotiazolil-3(2h)ona-1,1-dioxido]etilo Download PDF

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Francisco Javier Cillero Corral
Miguel Fau De Casa-Juana Munoz
Pilar Ortega Navarrete
Jaime Priego Fernandez Del Campo
Luis Santos Gil
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Laboratorios Alter, S.A.
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Definitions

  • the present invention is within the field of drugs capable of influencing the regulation of atherosderotic disease and restenosis.
  • the present invention relates to new applications of 2- [n- (1, 2- benzisothiazolyl- 5-ethoxycarbonyl-2,4,6-trimethyl-1, 4-dihydropyridine-3-carboxylate) 3 (2h) ona-1,1-dioxide] ethyl, code PCA-4230, as a drug with effect on human arterial muscle cells, anti-eterosclerotic and antiproliferative.
  • PCA-4230 has been described for the first time in German Patent No. DE-A-36 79 76, as a medically antithrombotic.
  • the key processes responsible for plaque formation in atherosclerosis are: the accumulation of cholesteros, caused by the increase in the net uptake of atherogenic lipoproteins; cell recruitment and proliferation, caused by chemotactic and mitogenic activities; the expansion of the extracellular matrix and the accumulation of collagen, due to the increase in synthetic activity of the intimate cells and the high rates of cell death caused by the increase in metabolic needs in an unfavorable environment.
  • cell death is associated with neovascularization, fibrosis and calcification with subsequent complications of plaque rupture and hemorrhagic thrombosis.
  • Interporos junctions "gap junctions" between vascular smooth cells seem to regulate cell communication and be one of the critical factors in the development of atherosclerosis. These junctions are intramembrane proteins. Six proteins form a circular channel that can be opened or closed, through the which can be transferred from one cell to another molecule of up to 1200 daltons. There is experimental evidence of the participation of proliferation processes, via cellular communication in the development of atherosclerosis. It is also known that intracellular transfer of molecules is increased in muscle cells derived from arteriosclerotic plaques of aorta compared to normal aortic tissue cells.
  • an injury produced in the iliac artery induces the same pattern of cell proliferation throughout the aorta, while serum transfusions of animals with arterial lesions to healthy animals did not cause, in the latter, proliferation of smooth muscle cells (MA Reidy, Arteriosclerosis (1990), 10: 298-305).
  • Atherosclerosis Another functional characteristic of atherosclerosis, even in the pre-stenotic stages, is the severe vasomotor abnormalities caused in part by the endothelial dysfunction, which is characterized by an inability of the endothelial cells of the vessel to synthesize vasodilator substances, such as Prostacyclin (PGI 2 ) and nitric oxide (NO, EDRF) (ML Armstrong, Am. J. Hypertens. (1991), 7: 503S-511S).
  • PKI 2 Prostacyclin
  • NO, EDRF nitric oxide
  • Ca 2+ antagonists can block specific stages of atherogenesis.
  • Ca 2+ channel blockers reduce endothelial damage and intimacy permeability, block cell proliferation in the intima, inhibit lipid accumulation by various mechanisms and reduce the exacerbated vasoconstrictor response (AM Keogh, Am. J. Hypertens. (1991), 4: 512S-518S).
  • Ca 2+ antagonists should induce regression of atheromatous lesions and their effect should be superior to that obtained with the reduction of risk factors.
  • results obtained so far in various clinical trials are contradictory.
  • Ca 2+ antagonists seem to reduce only the progression of minimal coronary lesions. It is possible that the next publication of the results of the MIDAS clinical trial (Multicenter Isradipine / Diuretic Atherosclerosis Study, Blood Press. (1994), 3 (suppl 1): 29-35) contributes to clarify the possible antiatherogenic activity of this group of drugs .
  • treatment with platelet inhibitors, anticoagulants and beta-blockers is also required to prevent complications that may pose a risk to the patient's life. Therefore, an optimal strategy for secondary prevention of coronary artery disease should be directed at the cellular and molecular mechanisms in the initiation, progression or stabilization of the disease.
  • Ketanserin reduce the incidence of myocardial infarction, stroke, and other cardiovascular complications, due to platelet activation and frequent in atherosclerotic disease.
  • said drugs do not modify the evolution of the lesion that generates said pathologies (Verstreate, M., Br. Med. Bull. (1994), 50: 946-965).
  • the present invention surprisingly provides new applications of 2- [n- (1,2-benzisothiazolyl-3 (2h-5-ethoxycarbonyl-2,4,6-trimethyl-1,4,4-dihydropyridine-3- carboxylate) (2h ) one-1, 1-dioxide] ethyl BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES
  • Figure 1 a It is a bar chart depicting the effect of PCA-4230 on the synthesis of SFB-induced DNA in A10 cells.
  • Figure 1 b It is a bar chart in which the effect of PCA-4230, ASA and TICLOPIDINA on the proliferation of A10 cells is represented.
  • Figure 2 a It is a bar chart depicting the number of cells coupled in cultures per explant of normal and atherosclerotic arteries (smooth muscle cells of human aorta).
  • Figure 2b It is a bar chart depicting the number of coupled in atheromatous cell cultures and in the same type of cells treated with 200 ng / ml of PCA-4230.
  • the present invention relates to new applications of 2- [n- (1, 2-benzisothiazolyl-3 (5-ethoxycarbonyl-2,4,6-trimethyl-1, 4-dihydropyridine-3-carboxylate) ( 2h) one-1, 1-dioxide] ethyl
  • PCA-4230 has useful properties for the prevention and treatment of diseases such as atherosclerosis, whether primarily or as a complication of other types of pathological situations and / or incipient restenosis subsequent to angioplasties, in this way, PCA-4230 could modify the course of the disease, improving the quality of life of these patients.
  • the invention also concerns the use of PCA-4230 and a pharmaceutically acceptable preparation for the manufacture of a drug useful in the treatment of atherosclerosis both in the case that this is the primary disease and when it is a complication in patients affected by another. type of pathologies
  • PCA-4230 is able to normalize the intercellular communication of human atherosclerotic cells, making these cells behave as healthy. Therefore, in accordance with the foregoing, the present invention relates to new and surprising applications of PCA-4230, which can be summarized in the following points:
  • PCA-4230 as such or in the form of a pharmaceutically acceptable preparation, has application in the manufacture of medicaments for the treatment of patients with vascular disease, including various pathologies, such as atherosclerosis and chronic ischemic and occlusive vascular disorders.
  • the present compound is formulated for use as a pharmaceutical product, also comprising pharmaceutically acceptable excipients or diluents.
  • the compositions can be prepared following conventional methods and administered in any pharmaceutically suitable form.
  • solid forms for oral administration may contain, in addition to the active product, diluents such as lactose, dextrose, sucrose, cellulose, corn starch or potato; lubricants such as silica, talc, stearic acid and / or polyethylene glycols; binding agents such as starches, gums, gelatin, methylcellulose, carboxymethylcellulose or polyvinylpyrrolidone; disintegrating agents such as starch, alginic acid, alginates or sodium starch glycolate; effervescent mixtures; authorized dyes, sweeteners; wetting agents such as lecithin, polysorbates or lauryl sulfates.
  • diluents such as lactose, dextrose, sucrose, cellulose, corn starch or potato
  • lubricants such as silica, talc, stearic acid and / or polyethylene glycols
  • binding agents such as starches, gums, gelatin, methylcellulose, carboxymethylcellulose or
  • Such mixtures can be prepared by known processes, such as processes for preparing mixtures, granules, tablets, tablets, dragees or capsules. They can also be prepared by coating processes of the foregoing, such as enteric coated tablets or capsules.
  • Liquid dispersions for oral administration may be syrups, emulsions or suspensions.
  • Syrups may contain, in addition to the active product, sucrose or sucrose with glycerol and / or mannitol and / or sorbitol.
  • a syrup for diabetic patients may contain, in addition to the active product, only products that are not metabolized to glucose or that only do so in a small proportion, such as sorbitol.
  • the suspensions and emulsions may contain as a vehicle, for example, a natural gum, agar, sodium alginate, pectin, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose or polyvinyl alcohol.
  • the suspensions or solutions for intramuscular injection may contain, together with the active compound, a pharmaceutically acceptable carrier, such as, for example, non-pyrogenic distilled water, olive oil, ethyl oleate, glycols such as propylene glycol and, if desired, a suitable amount of lidocaine hydrochloride.
  • Solutions for intravenous injection or infusion may contain a vehicle, for example, sterile and non-pyrogenic water, which is known as water for injections. However, these preparations can take the form of sterile isotonic saline solutions.
  • the present compound can be microencapsulated using liposomes.
  • PCA-4230 can be used in combination with one or more agents with vascular activity, such as ⁇ -blockers, calcium channel blockers and other drugs with vasodilator activity, as well as hypolipidemic agents.
  • PCA-4230 can be administered orally, associated or not with other drugs, to patients affected by chronic obstructive vascular disease, in order to reduce vessel stenosis and the risk of arterial obstruction.
  • DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium
  • DNA synthesis was measured by determining the incorporation of BrdU (a Thymidine analogue).
  • the cells were isolated by trypsinization (0.05% trypsin solution in 0.02% EDTA) and seeded in glass coverslips in 24-well culture plates, at a density of 10 4 cells per well. The cells were cultured for 24 hours in DMEM with 10% SFB, to allow the cells to adhere to the slides. After this time, the cells were washed with serum-free DMEM and containing 0.2% bovine serum albumin (BSA). They were incubated for 48 hours in the same medium to obtain quiescent cells.
  • BSA bovine serum albumin
  • proliferation was induced by replacing the medium with DMEM containing 10% Fetal Bovine Serum, together with the vehicle or drugs at the appropriate concentrations (0.5 to 50 ⁇ M for PCA-4230 and 50 ⁇ M for the rest of the compounds).
  • the cells were cultured under these conditions for 16 hours and, after this time, BrdU was added and the culture was continued for two to three hours.
  • RNA 10 ⁇ g
  • agarose gel electrophoresis (1.2% agarose + formaldehyde + formamide).
  • the gel was then transferred to a nylon membrane and this was hybridized with specific probes for c-fos and c-jun (previously labeled with [ 32 P] -deoxy CTP).
  • the membrane was finally exposed to a sensitive film (Kodak X-OMAT) for 8-17 hours at - 70 ° C
  • the level of expression of the oncogenes was normalized using a probe specific for ⁇ -actin.
  • Results.- The results obtained are described in Tables la and Ib and in Figures 1a and 1b. The percentages of cells showing BrdU incorporation in both the control group and those treated with each of the concentrations of PCA-4230 studied, the vehicle, the compounds structurally related to PCA-4230 (Table la and Fig. 1b).
  • PCA-4230 inhibited fetal bovine serum-induced cell proliferation proportionally to the concentration of PCA-4230 used.
  • PCA-4230 The activity of PCA-4230 was studied by measuring dye transfer in atheromatous cell cultures before and after incubation with 200 ng / ml of PCA-4230 (final concentration 0.4 ⁇ M). After a first evaluation of the transfer of dye by atheromatous cells, the cells were incubated for 1 hour with 0.4 ⁇ M PCA-4230). After a first evaluation of the dye transfer by atheromatous cells, the cells were incubated for 1 hour with 0.4 ⁇ M PCA-4230 and the transfer of a new injection of Lucifer Yellow was reassessed. The same experiment was carried out with Verapamil 0.4 ⁇ M, used as a standard drug with calcium antagonist activity and with 0.02% dimethylsulfoxide, the vehicle used in both cases.
  • the cells were frozen at -110 ° C and fractured.
  • the planes of rupture are the planes of least resistance that correspond to the surface of the inner membrane, between the lipid bilayers.
  • Enteric coated tablets for oral administration each containing 200 mg of PCA-4230. Composition per tablet
  • Aerosil 200 2.00 mg Lactose 455.00 mg
  • PCA-4230 The specific cellular effects demonstrated by PCA-4230, strongly support the antiatherogenic activity of the compound. It is evident that the results included in the previous examples are surprising, since there is no known drug capable of inhibiting cell proliferation and normalizing the behavior of human atheromatous cells. These characteristics, together with a moderate hypolipidemic effect of PCA-4230 (M. Guivernay et al. Phase II Clinical Trial, Internal Report) and its well-known anti-thrombotic activity, make the PCA-4230 a compound of exceptional characteristics. This fact has special relevance, because at present, there is no drug capable of preventing cardiovascular disease, with a capacity to inhibit the proliferation of smooth muscle cells, normalizing the activity of atheromatous cells and simultaneously possessing anti activity. -plaquetaria.
  • a conceivable dose range for treatment would be between 200-800 mg / day, depending on the patient and the specific response of the medication. The exact daily dose will be determined by the doctor in each case.

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Abstract

Comprendre principalmente la aplicación de este producto como agente terapéutico de aplicación para el tratamiento de pacientes con aterosclerosis y/o re-estenosis que padecen un riesgo grave de oclulsión de los vasos afectados por la enfermedad. Dicho producto puede administrarse por vía oral o parenteral, asociado o no a otros fármacos, a los pacientes con enfermedad aterosclerótica para reducir la lesión ateromatosa así como para prevenir la re-estenosis de los vasos sanguíneos.

Description

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN
NUEVAS APLICACIONES DEL 5-ETOXICARBONIL-2,4>6-TRIMETIL-1>4- DIHIDROPIRIDINA-3-CARBOXILATO DE 2-[N-(1,2-BENZISOTIAZOLIL-
3(2H)ONA-1 ,1 -DIOXIDO]ETILO. La presente invención se encuentra dentro del campo de ios fármacos capaces de influir en la regulación de la enfermedad aterosderótica y de la re¬ estenosis.
Más concretamente, la presente invención se refiere a nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimet¡l-1 ,4-dihidropirid¡na-3-carboxilato de 2-[n-(1 ,2- benzisotiazolil-3(2h)ona-1,1-dioxido]etilo, de clave PCA-4230, como fármaco con efecto sobre las células musculares arteriales humanas, anti-eterosclerótico y antiproliferativo.
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PCA-4230
El PCA-4230 ha sido descrito por primera vez en la Patente Alemana No. DE-A-36 79 76, como un médicamente antitrombótico.
ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR A LA INVENCIÓN
Los procesos claves responsables de la formación de la placa en la aterosclerosis son: la acumulación de colesteros, causada por el incremento en la captación neta de lipoproteinas aterogénicas; el reclutamiento y proliferación celular, causado por actividades quimiotácticas y mitogénicas; la expansión de la matriz extracelular y la acumulación de colágeno, debido al aumento de actividad sintética de las células de la íntima y a los altos índices de muerte celular causados por el incremento de las necesidades metabólicas en un medio desfavorable. A su vez, ia muerte celular está asociada a neovascularización, fibrosis y calcificación con las subsecuentes complicaciones de ruptura de la placa y trombosis hemorrágica. (Para una revisión: R. Ross, Nature (1993), 362:801-809).
Las uniones interporos "gap junctions" entre células lisas vasculares parecen regular la comunicación celular y ser uno de los factores críticos en el desarrollo de la aterosclerosis. Estas uniones son proteínas intramembranosas. Seis proteínas forman un canal circular que puede abrirse o cerrarse, a través del cual pueden ser transferidas de una célula a otra moléculas de hasta 1200 daltons. Existe evidencia experimental de la participación de los procesos de proliferación, vía comunicación celular en el desarrollo de aterosclerosis. Se sabe asimismo, que la transferencia intracelular de moléculas está aumentada en células musculares derivadas de placas arterioscleróticas de aorta en comparación con células de tejido aórtico normal. Así, una lesión producida e la arteria ilíaca induce el mismo patrón de proliferación celular en toda la aorta, mientras que transfusiones de suero de animales con lesiones arteriales a animales sanos no ocasionaron, en estos últimos, proliferación de células musculares lisas (M.A. Reidy, Arteriosclerosis (1990), 10:298-305).
Otra característica funcional de la aterosclerosis, incluso en los estadios pre- estenóticos, son las severas anormalidades vasomotoras causadas en parte por ia disfunción endotelial, que se caracteriza por una incapacidad de las células endoteliales del vaso para sintetizar sustancias vasodilatadoras, tales como Prostaciclina (PGI2) y óxido nítrico (NO, EDRF)(M.L. Armstrong, Am. J. Hypertens. (1991), 7:503S-511S).
La regresión de la aterosclerosis implica la interrupción de estos procesos patológicos y las existencia de un cambio en la evolución de los mismos.
En los últimos años, se han estudiado los efectos que ejercen diversos fármacos sobre la evolución de la enfermedad, con resultados poco concluyentes.
Los antagonistas del Ca2+ pueden bloquear estadios específicos de la aterogénesis. Así, los bloqueadores de los canales del Ca2+ reducen el daño endotelial y la permeabilidad de la íntima, bloquean la proliferación celular en la íntima, inhiben la acumulación de lípidos por diversos mecanismos y reducen la respuesta vasoconstrictora exacerbada (A.M. Keogh, Am. J. Hypertens. (1991), 4:512S-518S).
Aparentemente, los antagonistas del Ca2+ deberían inducir la regresión de las lesiones ateromatosas y su efecto debería ser superior al obtenido con la reducción de los factores de riesgo. Sin embargo, los resultados obtenidos hasta el momento en diversos ensayos clínicos son contradictorios. Los antagonistas del Ca2+ parecen reducir solamente la progresión de lesiones coronarias mínimas. Es posible que la próxima publicación de los resultados del ensayo clínico MIDAS (Multicenter Isradipine/Diuretic Atherosclerosis Study, Blood Press. (1994), 3(suppl 1):29-35) contribuya a aclarar ia posible actividad antiaterogénicas de este grupo de fármacos. No obstante, en las fases agudas de la enfermedad aterosclerótica arterial, se requiere además el tratamiento con inhibidores de la función plaquetaria, anticoagulantes y beta-bloquentes para prevenir complicaciones que puedan suponer un riesgo para la vida del enfermo. Por tanto, una estrategia óptima para la prevención secundaria de la enfermedad arterial coronaria, debería estar dirigida a los mecanismos celulares y moleculares en la iniciación, progresión o estabilización de la enfermedad.
Debido a la importancia de la trombosis en la patogénesis y progresión de las lesiones ateromatosas, es necesario desarrollar estrategias de intervención dirigidas a la trombo-resistencia de la célula endotelial y a la trombo-regulación. No obstante, los resultados de ensayos clínicos como el realizado con un nuevo fármaco antiplaquetario, análogo estable de prostaciclina, activo por vía oral (TRK 100), en pacientes con lesiones ateromatosas de la arteria carótida, demuestran que aunque el compuesto redujo de forma significativa la agregación plaquetaria y el índice de acumulación de plaquetas en la lesión, no hubo reducciones significativas de la placa comparado con los valores básales. Los datos obtenidos sugieren que la terapia a corto plazo con un antiplaquetario, TRK-100 en este caso, tiene un efecto inhibitorio sobre la acumulación de plaquetas en el ateroma, pero no causa cambios significativos en el tamaño de la placa ateromatosa (Y. Isaka, Thromb. Haemost. (1991), 65:344-350).
Esta falta de actividad de los compuestos antiplaquetarios en la regresión de la enfermedad aterosclerótica, ha sido descrita para otros compuestos con esta actividad, tales como Ketanserina (Ketanserin Trial Group, Br. Med. J., (1989), 298:424-430), Ticlopidina (Janzon, I. Bergquist, D., Boderg, J. Et al., J. Intern. Med., (1190), 227:301-308) o Picotamida (Balsano, F., Violi, F. y ADEP Group, Circulation, (1993), 87:1563-1569). En los estudios clínicos realizados con estos fármacos se ha demostrado que todos ellos, excepto la Ketanserina, reducen la incidencia de infartos de miocardio, ictus, y otras complicaciones cardiovasculares, debidas a la activación de plaquetas y frecuentes en la enfermedad aterosclerótica. Sin embargo, dichos fármacos no modifican la evolución misma de la lesión que genera dichas patologías (Verstreate, M., Br. Med. Bull. (1994), 50:946-965).
El compuesto objeto de esta patente, 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4- dihidropiridina-3-carboxilato de 2-[n-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2h)ona-1 ,1-dioxido]etilo, ha sido previamente descrito y su uso patentado como un medicamento con actividad antiplaquetaria. Dicho fármaco, posee un mecanismo de acción original relacionado con la inhibición de la entrada de Ca2+ en plaquetas a través de canales operados por receptores y con la inhibición selectiva de la fosfodiesterasa V, específica del GMP cíclico (M.T. Alonso, C. Villalobos y A. Sánchez, Biochim. Biophys. Acta (1992), 1104:257-260; M. Lombardía, R.E. Catalán et al. Cell. Pharmacol. Enviado para publicación). Sorprendentemente, dicho compuesto, además de su actividad antiplaquetaria, de acuerdo a las reivindicaciones de la patente DE-A-36 79 76, ha demostrado recientemente, poseer actividad antiproliferante e hipolipidemiante en estudios sobre células musculares lisas de origen vascular, y en ensayos clínicos realizados en pacientes. Este efecto del compuesto no está relacionado con su actividad antiplaquetaria, como queda demostrado en los ejemplos incluidos más adelante.
En esta línea, la presente invención proporciona sorprendentemente, nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[n-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2h)ona-1 ,1-dioxido]etilo. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Figura 1a: Es un diagrama de barras en el que se representa el efecto de PCA-4230 sobre la síntesis de DNA inducida por SFB en células A10.
Figura 1 b: Es un diagrama de barras en el que se representa el efecto de PCA-4230, ASA y TICLOPIDINA sobre la proliferación de células A10. Figura 2a: Es un diagrama de barras en el que se representa el número de células acopladas en cultivos por explante de arterias normales y ateroscleróticas (células musculares lisas de aorta humana).
Figura 2b: Es un diagrama de barras en el que se representa el número de acopladas en cultivos de células ateromatosas y en el mismo tipo de células tratadas con 200 ng/ml de PCA-4230.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil- 2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-[n-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2h)ona- 1 ,1-dioxido]etilo. Los estudios realizados, expuestos en los Ejemplos mas adelante, han demostrado sorprendentemente, que el PCA-4230 tiene propiedades útiles para la prevención y el tratamiento de enfermedades tales como aterosclerosis, ya sea primariamente o como una complicación de otro tipo de situaciones patológicas y/o re-estenosis incipientes subsiguientes a angioplastias. De esta forma, el PCA-4230 podría modificar el curso de la enfermedad, mejorando la calidad de vida de estos enfermos.
La invención también concierne al uso del PCA-4230 y de una preparación farmacéuticamente aceptable para la fabricación de un fármaco útil en el tratamiento de la aterosclerosis tanto en el caso de que esta sea la enfermedad primaria como cuando es una complicación en pacientes afectados por otro tipo de patologías.
La experimentación científica con el PCA-4230 se ha llevado a cabo en estudios "in vitro" con una línea celular de músculo liso de rata (A10, American Type Tissue Colecction) en la que se ha estudiado la capacidad del PCA-4230 para inhibir la proliferación celular inducida por suero fetal bovino (SFB). Asimismo, hemos demostrado que esta inhibición de la proliferación es debida a un efecto supresor de la droga sobre la transcripción de los proto-oncogenes c-fos y c-jun. Un efecto específico que solo se manifiesta en células capaces de replicarse en respuesta a estímulos mitogénicos y que, evidentemente, no está relacionado con ia actividad del compuesto sobre las plaquetas, que son partículas carentes de
DNA y, por tanto, de la capacidad de proliferar.
Otra serie de experimentos se llevaron a cabo con células musculares lisas de arterias humanas sanas y provenientes de placas ateromatosas. En estas células, se ha medido ia capacidad de comunicación intracelular de ambos tipos de células y el efecto del PCA-4230 sobre este proceso de comunicación celular. Los resultados de estos experimentos demostraron que el PCA-4230 es capaz de normalizar la comunicación intercelular de las células ateroscleróticas humanas, haciendo que estas células se comporten como sanas. Por lo tanto, de acuerdo con lo anterior, la presente invención se refiere a nuevas y sorprendentes aplicaciones del PCA-4230, que se pueden resumir en los siguientes puntos:
(1) Aplicación como agente terapéutico para el tratamiento de situaciones patológicas que requieran la inhibición de la proliferación de células musculares lisas, tales como re-estenosis subsiguiente a angioplastia o a otras situaciones clínicas y aterosclerosis.
(2) Aplicación como agente terapéutico de la enfermedad vascular con efectos anti-aterogénicos.
(3) Aplicación para el tratamiento de pacientes con claudicación intermitente que padecen riesgo de desarrollar obstrucción arterial. (4) Aplicación como coadyuvante en el tratamiento de complicaciones ateroscleróticas originadas por la existencia de otros estados patológicos que favorecen el desarrollo de la aterosclerosis.
Asimismo, el PCA-4230 como tal o en forma de preparación farmacéuticamente aceptable, tiene aplicación en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de pacientes con enfermedad vascular, incluyendo diversas patologías, tales como la aterosclerosis y los trastornos vasculares isquémicos y oclusivos crónicos.
El presente compuesto está formulado para su uso como producto farmacéutico, comprendiendo también excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Las composiciones pueden ser preparadas siguiendo métodos convencionales y administrarse en cualquier forma farmacéuticamente adecuada.
Por ejemplo, las formas sólidas para administración oral pueden contener, además del producto activo, diluyentes tales como lactosa, dextrosa, sacarosa, celulosa, almidón de maíz o patata; lubricantes tales como sílice, talco, ácido esteárico y/o polietiienglicoles; agentes aglutinantes tales como almidones, gomas arábigas, gelatina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa o polivinilpirrolidona; agentes desintegrantes tales como almidón, ácido algínico, alginatos o glicolato sódico de almidón; mezclas efervescentes; colorantes autorizados, edulcorantes; agentes humectantes tales como lecitina, polisorbatos o lauril sulfatos.
Tales mezclas pueden ser preparadas mediante procesos conocidos, como por ejemplo procesos de preparación de mezclas, granulados, tabletas, comprimidos, grageas o cápsulas. También se pueden preparar mediante procesos de recubrimiento de los anteriores, como por ejemplo comprimidos o cápsulas con recubrimiento entérico.
Las dispersiones líquidas para administración oral pueden ser jarabes, emulsiones o suspensiones. Los jarabes pueden contener, además del producto activo, sacarosa o sacarosa con glicerol y/o manitol y/o sorbitol. En particular, un jarabe para pacientes diabéticos puede contener, además del producto activo, solamente productos que no se metabolicen a glucosa o que sólo lo hagan en una pequeña proporción, como por ejemplo sorbitol. Las suspensiones y las emulsiones pueden contener como vehículo, por ejemplo una goma natural, agar, alginato sódico, pectina, metil celulosa, carboximetil celulosa o alcohol polivinílico.
Otra forma de administración aceptable es en forma de supositorio. Las suspensiones o soluciones para inyección intramuscular pueden contener, junto con el compuesto activo, un vehículo farmacéuticamente aceptable, como por ejemplo, agua destilada apirógena, aceite de oliva, oleato de etilo, glicoles tales como propilenglicol y, si se desea, una cantidad adecuada de clorhidrato de lidocaína. Las soluciones para inyección o infusión intravenosa pueden contener un vehículo, por ejemplo, agua estéril y apirógena, que es conocida como agua para inyectables. Sin embargo, estas preparaciones pueden tomar la forma de soluciones salinas isotónicas estériles. Alternativamente, el presente compuesto puede ser microencapsulado utilizando liposomas. Además, el PCA-4230 puede utilizarse en combinación con uno o más agentes con actividad vascular, tales como β-bloqueantes, antagonistas de los canales del calcio y otros fármacos con actividad vasodilatadora, así como fármacos hipolipidemíantes.
El PCA-4230 puede administrarse por vía oral, asociado o no a otros fármacos, a los pacientes afectados de enfermedad vascular obstructiva crónica, con el fin de reducir la estenosis del vaso y los índices de riesgo de obstrucción arterial.
MODOS DE REALIZACIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención se fundamente mediante los Ejemplos dados a continuación, en los que se muestran diversos estudios efectuados para poner de manifiesto las nuevas aplicaciones del PCA-4230. Estos Ejemplos son simplemente ilustrativos de la invención, sin que por ello limiten en modo alguno su alcance, definido exclusivamente por la Nota Reivindicativa adjunta.
EJEMPLO 1 Inhibición producida por PCA-4230 sobre la proliferación de células musculares lisas inducida por suero fetal bovino
Materiales y Métodos.- Se llevó a cabo el estudio comparativo sobre la proliferación de células musculares lisas del PCA-4230 y otros compuestos estructuralmente relacionados con él (compuestos según los ejemplos 2 y 5 descritos en la patente DE-A-36 79 76) sobre la proliferación de células musculares lisas. Asimismo, se realizó otra serie de experimentos en los que su actividad antiproliferativa se comparó con la de dos fármacos de reconocida actividad antiplaquetaria como son Aspirina y Ticlopidina (Pantrano, O, N. Engl. Med. J. (1994), 330:1287-1294; Editorial, The Lancet (1991), i:459-460). En estos experimentos se utilizó una línea celular de músculo liso de aorta de rata obtenida de American Type Culture Collection (ATCC; A10 CRL 1476)! Las células fueron cultivadas en atmósfera humidificada (37°C, 95% de aire - 5% CO2) en Dulbecco's Modified Eagle Médium (DMEM) conteniendo 10% de suero fetal bovino suplementado con L-glutamina 20 mM, 100 Ul/ml de penicilina, 100 μg/ml de anfotericina B (solución antibiótica-antimicótica, Gibco). El medio se reemplazó cada dos días.
Para estudiar el efecto del PCA-4230 y de los otros compuestos, se midió la síntesis de DNA por determinación de la incorporación de BrdU (un análogo de Timidina). Las células se aislaron por tripsinización (solución de tripsina al 0,05% en EDTA al 0,02%) y se sembrara en cubreobjetos de vidrio en placas de cultivo de 24 pocilios, a una densidad de 104 células por pocilio. Las células se cultivaron durante 24 horas en DMEM con 10% de SFB, para permitir la adhesión de las células a los portaobjetos. Pasado este tiempo, las células se lavaron con DMEM libre de suero y conteniendo un 0,2% de albúmina sérica bovina (BSA). Se incubaron durante 48 horas en el mismo medio para obtener células quiescentes. Pasado este tiempo, se indujo la proliferación por sustitución del medio por DMEM conteniendo un 10% de Suero Fetal Bovino, junto con el vehículo o los fármacos a las concentraciones adecuadas (0,5 a 50 μM para el PCA-4230 y 50 μM para el resto de los compuestos). Las células se cultivaron en estas condiciones durante 16 horas y, pasado este tiempo, se añadió BrdU y se continuó el cultivo durante dos a tres horas.
La incorporación de BrdU se visualizó mediante tinción inmunocitoquímica de los núcleos con un anticuerpo monoclonal específico anti-BrdU. La expresión de los proto-oncogenes c-fos y c-jun se analizó en células ayunadas durante 48 horas (cultivadas en DMEM libre de suero, conteniendo BSA 0.2%) y posteriormente estimuladas durante 30 min con 10% FCS en presencia o ausencia de PCA-4230 (5x10"5M). El ARN total se extrajo de dichas células empleando un método previamente descrito (Chomczynski, P. & N. Sacchi. (1987)., Ann. Biochem. 162: 156-159).
Seguidamente, el ARN extraído (10 μg) se resolvió mediante electroforesis en gel de agarosa (1.2% agarosa + formaldehido + formamida). El gel se transfirió, a continuación, a una membrana de nylon y esta se hibridó con sondas específicas para c-fos y c-jun (marcadas previamente con [32P]-deoxi CTP). La membrana se expuso finalmente a una película sensible (Kodak X-OMAT) durante 8-17 horas a - 70°C. El nivel de expresión de los oncogenes fue normalizado empleando una sonda específica para β-actina.
Resultados.- Los resultados obtenidos están descritos en las Tablas la y Ib y en las Figuras 1a y 1b. En ellas están expresados los porcentajes de células que mostraban incorporación de BrdU tanto en el grupo control como en los tratados con cada una de las concentraciones de PCA-4230 estudiadas, el vehículo, los compuestos estructuralmente relacionados con el PCA-4230 (Tabla la y Fig. 1b).
La incubación con suero fetal bovino al 10% indujo una estimulación de la proliferación celular y la subsecuente incorporación de la BrdU al DNA de las células en cultivo, mientras que la incubación con albúmina bovina en la misma proporción no indujo incorporación de BrdU en absoluto, lo que demuestra que los cultivos utilizados en estos experimentos eran quiescentes y sincronizados. En estas condiciones, el PCA-4230 inhibió la proliferación celular inducida por suero fetal bovino de forma proporcional a la concentración de PCA-4230 utilizada. Los homólogos estructurales del PCA-4230 según los ejemplos 2 y 5 de la patente DE- A-36 79 76, no modificaron la incorporación de BrdU en las células en cultivo, cuando se ensayaron en las mismas condiciones a la concentración de 50 μM.
TABLA la
Los datos representan la media ± D.S. de tres experimentos por triplicado.
Figure imgf000012_0001
TABLA Ib os datos representan la media ± D.S. de dos experimentos por triplicado.
Figure imgf000012_0002
Asimismo, los dos potentes fármacos antiplaquetarios estudiados (Aspirina y Ticlopidina) demostraron, a las concentraciones ensayadas, un débil efecto inhibitorio de la proliferación celular, comparable con el obtenido con una concentración 100 veces menor de PCA-4230. En el caso de la aspirina este resultado ha sido confirmado por otros autores (Bernhardt, J., Rogalla, K. Luscher, T.F. et al., J. Immunogenet.m (1193), 21:973-76) que demuestran que ia inhibición de la proliferación de células musculares lisas solo se consigue con concentraciones de Aspirina superiores a 270 μM.
EJEMPLO 2 Efecto del PCA-4230 sobre la comunicación celular alterada en células musculares lisas ateroscleróticas humanas de origen vascular
Materiales y Métodos.- Se utilizaron células musculares lisas procedentes de aortas no ateroscleróticas (NASA), obtenidas de biopsias de órganos destinados a transplantes cardíacos. Las células musculares lisas ateromatosas (ASA) fueron obtenidas de biopsias obtenidas de arterias ateroscleroticas procedentes de reconstrucciones aórticas. Estas biopsias fueron usadas como fuente para cultivos por explante, evitando el uso de aditivos enzimáticos o detergentes. Se dejaron crecer las células hasta confluencia, en medio M199, suplementado con 5% SFB y antibióticos como en el ejemplo anterior. La pureza de los cultivos se determinió mediante tinción específica de los mismos con anti-α actina de células musculares lisas.
La comunicación intercelular se estudió mediante la evalucación de la transferencia del colorante fluorescente Amarillo Lucifer desde una única célula, en la que se introduce por microinyección, hasta las células circundantes. La extensión de esta transferencia de colorante se determinó en 40 células normales y en 100 células ateromatosas.
La actividad del PCA-4230 se estudió midiendo la transferencia de colorante en cultivos de células ateromatosas antes y después de la incubación con 200 ng/ml de PCA-4230 (concentración final 0,4 μM). Tras una primera evalución de la transferencia de colorante por células ateromatosas, las células se incubaron durante 1 hora con PCA-4230 0,4 μM). Tras una primera evaluciación de la transferencia de colorante por células ateromatosas, las células se incubaron durante 1 hora con PCA-4230 0,4 μM y se reevaluó ia transferencia de una nueva inyección de Amarillo Lucifer. El mismo experimento se llevó a cabo con Verapamil 0,4 μM, utilizado como fármaco estándar con actividad antagonista del calcio y con 0,02% de dimetilsulfoxido, el vehículo utilizado en ambos casos.
Para controlar la velocidad de migración y los estadios de división celular, 15 células individuales, colocadas en forma radial a una misma distancia del explante original, fueron inyectadas con el colorante antes y después de la incubación con PCT-4230. El mismo estudio se repitió con el vehículo y con Verapamil.
Posteriormente, las células se fijaron con glutalraldehído y se estudiaron por
FFEM "Free Fracture Electron Microscopy" para determiinar la morfología de las
"Gap Junctions". Las células se congelaron a -110° C y se fracturaron. Los planos de ruptura son los planos de menor resistencia que corresponden a la superficie de la membrana interior, entre las bicapas lipídicas.
Resultados.- Los resultados de estos experimentos están expresados en la tabla II y en las figuras 2a y 2b. Las células musculares lisas procedentes de cultivos de arterias no ateroscleróticas demostraron una frecuencia de 2,35 ± 0,22 células marcadas por inyección, mientras que las procedentes de placas ateromatosas, esta frecuencia fue de 7,75 ± 0,49 [P(t) < 0,0005)]. Después de la incubación con PCA-4230, hubo una reducción significativa del número de células marcadas con el colorante (2,42 ± 0,34 células marcadas por inyección, P(t) < 0,001 ). Esta densidad es similar a la observada en cultivos de células procedentes de arterias sanas (Figuras 2a y 2b). Por el contrario, el Verapamil no demostró efectos significativos en la transferencia de colorante entre células ateromatosas.
No se observaron diferencias en la morfología de las "Gap Junctions" ni en la distribución y número de las mismas en las membranas intercelulares de las células tratadas con PCA-4230. Conclusiones
1.- La transferencia ¡ntracelular de moléculas aumenta significativamente en células musculares lisas derivadas de placas ateroscleróticas comparadas con las derivadas de tejido arterial normal.
2.- El PCA-4230 disminuy significativamente la transferencia intracelular de colorante en células musculares lisas ateroscleróticas. El resultado funcional obtenido en las "Gap Junctions" de estas células, es comparable al exhibido por las células procedentes de tejidos sanos.
3.- El Verapamil no tuvo efecto en el proceso de comunicación intercelular de las células ateromatosas. TABLA II
Figure imgf000015_0001
EJEMPLO 3 Composición Farmacéutica
Comprimidos con recubrimiento entérico para administración oral, conteniendo cada uno 200 mg de PCA-4230. Composición por comprimido
Comprimido:
PCA-4230 200,00 mg
Almidón de maíz 32,00 mg
Ac-di-sol 20,00 mg Avicel PH-101 (Celulosa) 90,00 mg
Polivinilpirrolidona (Povidone) 5,00 mg
Talco 10,00 mg
Estearato Magnésico 2,00 mg
Aerosil 200 2,00 mg Lactosa 455,00 mg
Cubierta Aislante:
Pharmacoat 606 22,50 mg
Propilenglicol 2,50 mg
Cubierta Entérica: Hidroxipropil metilcelulosa (HP-55) 50,71 mg
Dioxido de titanio 1 ,51 mg
Alcohol etílico 2,78 mg
Conclusiones generales
La proliferación de células musculares lisas representa el evento clave en el desarrollo de las lesiones ateroscleróticas y de la re-estenosis (Ross, R., Nature (1993), 362:801-809). Diversos estudios realizados en animales de experimentación y en humanos indican que, en la mayoría de los casos, el componente principal y origen de la lesión ateromatosa es la migración y proliferación de células musculares lisas de la media a la íntima (Ross, R. Nature (1993), 362:801-809); Zanellato, A.M.C., Borrione, A.C. et al., Arteriosclerosis (1990), 10:996-1009; Takuda, T. Rosenfeld, M. et al., Arteriosclerosis (1986), 6:601- 613).
Los efectos celulares específicos demostrados por el PCA-4230, apoyan sobradamente la actividad antiaterogénica del compuesto. Es evidente que los resultados incluidos en los ejemplos anteriores son sorprendentes, ya que no se conoce ningún fármaco capaz de inhibir la proliferación celular y normalizar el comportamiento de células ateromatosas humanas. Estas características, sumadas a un moderado efecto hipolipidemiante del PCA-4230 (M. Guivernay et al. Phase II Clinical Trial, Internal Report) y a su ya conocida actividad anti-trombótica, convierten al PCA-4230 en un compuesto de características excepcionales. Este hecho tiene especial relevancia, debido a que en la actualidad, no se dispone de ningún fármaco capaz de prevenir la enfermedad cardiovascular, con capacidad inhibitoria de la proliferación de células musculares lisas, normalizadora de la actividad de células ateromatosas y que posea simultáneamente actividad anti-plaquetaria.
La mayoría de los individuos definidos como de alto riesgo cardiovascular, presentan estenosis en zonas arteriales, altos valores de lípidos en sangre y activación plaquetaria aumentada, lo que otorga al PCA-4230 un enorme interés clínico y relevantes implicaciones terapéuticas.
Un rango de dosis concebible para el tratamiento estaría entre 200-800 mg/día, dependiendo del paciente y de la respuesta específica del mismo a la medicación. La dosis exacta diaria será determinada por el médico en cada caso.

Claims

REIVINDICACIONES
1.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo como fármaco con efecto sobre la enfermedad aterosclerótica. 2.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,
2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo como fármaco con efecto sobre trastornos vasculares isquémicos y oclusivos.
3.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo como fármaco con efectos inhibidores de la proliferación celular.
4.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo como fármaco con efectos normalizadores de la intercomunicación celular.
5.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo, de acuerdo con las reivindicaciones 1-4, para su uso en el tratamiento de enfermos con claudicación intermitente.
6.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo, de acuerdo con las reivindicaciones 1-4, para su uso en el tratamiento de la obstrucción arterial en pacientes con perfil lipídico alterado.
7.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la preparación de fármacos para el tratamiento de la enfermedad aterosclerótica.
8.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la preparación de fármacos para el tratamiento de los trastornos vasculares isquémicos y oclusivos.
9.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la preparación de fármacos para el tratamiento de enfermedades que cursan con proliferación celular elevada de forma patológica.
10.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la preparación de fármacos para el tratamiento de enfermedades que cursan con intercomunicación celular elevada de forma patológica.
11.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la preparación de fármacos para el tramiento de la claudicación intermitente.
12.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-d¡hidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo, en la preparación de una composición farmacéutica que contiene este producto como ingrediente activo y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
13.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo, según las reivindicaciones anteriores donde dichos productos se emplean sólo o en combinación con uno o más agentes con actividad vascular tales como β- bloqueantes, antagonistas de los canales del calcio y otros fármacos con actividad vasodilatadora, así como fármacos hipolipidemiantes.
14.- Aplicación del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1 ,4-dihidropiridina-3- carboxilato de 2-[N-(1 ,2-benzisotiazolil-3(2H)ona-1 ,1-dióxido]etilo en la fabricación de preparaciones para admnistración por vía oral o parenteral, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
PCT/ES1996/000160 1995-08-25 1996-08-20 Nuevas aplicaciones del 5-etoxicarbonil-2,4,6-trimetil-1,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-[n-(1,2-benzisotiazolil-3(2h)ona-1,1-dioxido]etilo WO1997007801A1 (es)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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TLAEMOSTASIS, 1992, 22(4), GUTIERREZ J.A. et al., "Interaction of Platelets with Subendothelium in Rats Treated with PCA-4230, a New Antithrombotic Agent", pages 202-210. *

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