WO1996014336A1

WO1996014336A1 - Nouvelle oxyntomoduline

Info

Publication number: WO1996014336A1
Application number: PCT/JP1995/002269
Authority: WO
Inventors: Keiichi Yano; Motoo Yamasaki; Takahiro Moriyama; Masaaki Ando
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.
Priority date: 1994-11-07
Filing date: 1995-11-07
Publication date: 1996-05-17
Also published as: US5858975A; CA2204645A1; EP0795562A4; EP0795562A1

Description

明細書

新規なォキシントモジュリン

技術分野

本発明は、強心作用およびインシュリン遊離促進作用を有し、心臓疾患または糖尿病の予防または治療に有用な新規べプチドまたはその薬理学的に許容される塩に関する。

背景技術

ォキシントモジュリン（以下、 OXMと略す）は、グルカゴン（2 9アミノ酸からなるペプチド）、グルカゴン様ペプチド、グリセンチンと同様にグルカゴン前駆体の翻訳後プロセッシングによって生成するべプチドの一 ^であり、腸ゃ視床下部に存在が認められている。 OXMはグルカゴンまたはグルカゴン様べプチドのカルボキシル末端にァミノ酸がさらに 7または 8残基付加した構造を有し、現在までに、ブ夕（D.Bataille et al, FEBS Lett., 146, 73-78,1982) 、ゥシ（ J.M. Con Ion et al, Regul. Pept. , Π, 309-320, 1985 ) , ラット（A.Kervran et a 1, Endocrinol., 121,704-713, 1987) 、サメ (J. . Con Ion et al, Biochem. J., 245, 851-855, 1987) 、ィヌ（Y.Shinomura et al, Regul. Pept., 23, 299-308, 198 8 ) 、ゥシガエル (H. G.Pol lock et al, J. Biol. Chem. , 263, 9746-9751, 1988) 、ヮニ（H, G.Pol lock et al, Gen. Comp. Endocrinol. , 69, 133-140, 1988 ) で構造が決定されている。一次構造上はいずれの種の OXMも類似しており、分子内にシスティン残基およびプロリン残基を含まない。 OXMの生理的作用はソマトス夕チンの分泌促進 (T.Tani et al， Bioc im. Biophys. Acta, 1095, 249-254, 1991 ) 、胃酸分泌抑制（T.MBiedzinski et al, Peptides, ^967- 972， 1987) 、インシュリン分泌促進作用（ Jarrousse et al, Endocrinol., Π5^102-105.1984) 等が報告されており、グルカゴンとは異なる受容体を介してその生理的機能を発揮していると考えられているが（C.Depigny et al, C. R. Acad. Sci. Π I (FRANCE) 29 9, 677-680, 1984) . その全容は明らかにされていない。 OXMはグルカゴンとその 1次構造が類似しているが、組織分布や胃酸分泌抑制作用等はグルカゴンとは明らかに異なっている。 OXMの生理的作用を解明するためには、より下等な動物の構造解析も重要である。例えばカルシトニンのラット血しょう中カルシウム濃度に及ぼす効果は、ゥナギカルシトニンがラット、ブ夕、ヒトのカルシトニンよりも明らかに効果が強いことが知られている（M.0tani et al, J. Biochem. , 79 , 345-352, 1976 ； M. Azria, Prog. Clin. Biochem. Med. , _9, 1-33, 1989) 。しかし、ゥナギ〇XMの存在、構造および生理作用はこれまでに知られていない。

発明の開示

本発明者等は、ゥナギの腸管に含まれる物質を種々検討した結果、心房収縮活性を有する新規因子を見出した。さらに検討した結果、この因子は斩規ペプチドで、強心作用およびインシュリン遊離促進作用を有し、強心剤、糖尿病治療剤等の医薬品として有用であることを見出し、本発明を完成した。

即ち、本発明は式（ I )

H-H i s - S e r - G l n - G l -Th r -Ph e-Th r -As n-As p-Ty r-S e r -Ly s -Ty r-L eu-G l u-Th r-Ar g-Ar g - A 1 a - G l n-As p-Ph e-Va 1一 G l n-Tr p-L e u-Me t -As n-S e r-Ly s-Ar g-S e r -G l y - G 1 y-P r o-Th r -OH ( I)

で表されるぺプチドまたはその薬理学的に許容される塩に関する。

式（ I) におけるアミノ酸の略号は、当該分野で一般に使用されるもので、以下の意味を有する。

A 1 a L—ァラニン A r g L—アルギニン

A s n Lーァスパラギン As L—ァスパラギン酸

G 1 n L -グル夕ミン G 1 u L一グル夕ミン酸

G 1 y グリシン H i s L—ヒスチジン

L e u L一口イシンし y s L一リジン

Me t L一メチォニン P h e L一フエ二ルァラニン

Pr o L一プロリン S e r Lーセリン

Th r L -スレオニン Tr p L一トリブトファン

T y r Lーチロシン V a 1 L一バリン

式（ I) で表されるペプチドの薬理学的に許容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クェン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩等の有機酸塩があげられる。本発明のぺブチドは、既知〇X Mのいずれとも異なる構造を有する新規 O X M である。特に、既知 O X Mでは、ァミノ末端から 1 5残基目は A s p、 3 5残基目は A s nまたは I 1 eであるのに対し、本発明のペプチドでは、 1 5残基目は G l u、 3 5残基目は P r oであるという特徴を有する。

本発明のペプチドは、該ペプチドを産生する細胞より回収する方法、あるいは有機合成的手法により得ることができる。該ペプチドの産生細胞としては、ゥナギ腸管組織細胞、それらを細胞培養によって増殖させた細胞、あるいは遺伝子組換え手法によって目的のぺブチドを産生するようにした細胞等がある。

ゥナギ腸管から抽出 '単離するには、ゥナギ腸管を適当な酸性溶液、例えば齚酸、塩酸等の水溶液中でホモジナイズ、不溶物を遠心分離することにより抽出液を得、次いでこの抽出液を有機溶媒による分別沈殿、溶媒抽出、透析、限外ろ過、イオン交換クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、結晶化、電気泳動等のペプチドの単離精製に通常用いられる処理を組み合わせて行い、対応する分子量を有する物質を取得すればよい。

本発明のぺプチドを遺伝子組換え手法により得るには、該ぺプチドの N末端側部分と C末端側部分をコードする D N A部分を別々に合成し、クロ一ニングした後、これらを所望によりオリゴヌクレオチドリンカーを介して連結し、常法に従つて適当な発現ベクターに導入した後、それを用いて大腸菌、酵母、動物細胞等の宿主を形質転換し、形質転換体を培養すればよい。遺伝子の発現方法としては、現在までのところ直接法、分泌法、融合法等が開発されているが、いずれの方法も用いることができる。例えば、 J . Sambrook et al, "Molecular Cloning 2n d edi t ion", Cold Spring Harbor Lab. Press, New York(1989) に記載されてい -る方法に準じて行うことができる。これらの細胞から本発明のベプチドを単離精製するには、前記のぺプチドの単離精製に通常用いられる処理を組み合わせて行うことかできる。

また、本発明のペプチドは、アミノ酸配列情報をもとに、アミノ酸から化学的に合成することも可能である。合成法としては、固相法、液相法等の通常用いられるペプチド合成方法が使用できる。例えば、矢島治明、柳原俊平著、日本生化学会編、「生化学実験講座（ I ) ：蛋白質の化学、 4巻」、東京化学同人発行（ 1 977 ) ；泉屋信夫ほか著、「ぺプチド合成の基礎と実験」、丸善（株）発行 ( 1 985 ) に記載されている方法に準じて行うことができる。

固相法を用いる場合、ペプチドを得るための支持体としては、 p—ベンジルォキシベンジルアルコール夕イブ樹脂（ボリスチレン）が好ましい。ひーァミノ保護アミノ酸の 1つがエステル結合で上記樹脂に結合したものも市販品として入手可能である。使用するァミノ酸の α—ァミノ基は、 9一フルォレニルメトキシカルポニル（Fmo c) 基で保護し、アルギニンのグァニジノ基は 2, 2, 5, 7 一ペン夕メチルクロマン一 6—スルホニル（Pmc) 基で、ァスパラギン酸、グルタミン酸の /3および 7カルボン酸、およびセリン、スレオニン、チロシンの水酸基は t -ブチル（ t B u) 基で、ァスパラギン、グル夕ミンの /3および 7ァミド基、およびヒスチジンのイミダゾ一ル基はトリチル（T r t ) 基で、リジンの £一アミノ基は t一ブチルォキシカルボニル（B 0 c) 基でそれぞれ保護するのが好ましい。保護ァミノ酸の縮合は、ジシクロへキシルカルボジィミド（DCC ) 、ベンゾトリァゾ一ルー 1一ィル一ォキシトリピロリジノフォスフォニゥ厶へキサフルオロフォスフエート（P y B〇 P) 等の縮合剤を用い、 N—ヒドロキシベンゾトリアブール（HOB t ) 存在下に行うことが好ましい。溶媒は N, N ージメチルホルムァミド（DMF) 、 Fmo c基の脱保護は N—メチルモルホリン（NMM) を用いることが好ましい。アミノ酸を順次延長し保護ペプチド樹脂を合成した後、チオアニソール、エタンジチオール、ェチルメチルスルフィド、チオフヱノール等の含硫化合物の存在下、トリフルォロ酢酸（TFA) 等の酸で処理することにより、粗合成ペプチドを得ることができる。通常の縮合反応においては、樹脂の水酸基または樹脂に最初に結合したアミノ酸に対し、保護アミノ酸、縮合剤、 H〇 B tは 1〜！ 5当量用いられ、室温で 30分〜 5時間行われる。樹脂からの合成べプチドの脱離は、室温で 1〜1 0時間行われる。得られたぺプチドを精製するには、前記のぺプチドの単離精製に通常用いられる処理を組み合わせて行うことができる。

次に、式（ I ) で表されるぺプチド（ゥナギ OXT) の薬理作用について試験例で説明する。

試験例 1 ゥナギ心房への OXTの作用

95 %酸素と 5 %二酸化炭素ガスを通気したリンガー液 1. 5m 1の入った注射管中に、ゥナギから摘出した心房の一端を固定し、もう一端を絹糸を介し張力トランスデューサ一（NEC) に取り付けて懸垂した。蒸留水で希釈した様々な濃度の OXM水溶液 1 5 / 1を上記リンガー液に添加し、心房が収縮することによって発生する張力を張力トランスデューサ一により測定した。 OXMは実施例 2で得られた合成品を使用した。その際、心拍数についても測定を行った。第 1 図に添加した OXMの濃度と張力との関係を示し、第 2図に OXM濃度と心拍数との関係を示す。

以上の結果、 OXMは用量依存的に心収縮力および心拍数を増加させることが認められた。

試験例 2 麻酔ラッ卜の血しようインシュリン濃度に対する OXMの作用

SD系雄性ラット（370〜430グラム）を 1 5〜20時間絶食した後、ぺントバルビタール N a塩（5 OmgZkg) を腹腔内に投与した。頸動脈に採血用力ニューレを揷入した。頸静脈に薬物投与用力ニューレを挿入した。薬物投与前と薬物の各用量投与 5分後に約 600 At 1採血した。実施例 2で得た ΟΧΜを、生理食塩液で 1 mgZm 1の濃度に調整し、生理食塩水で希釈した後、累積的に投与した。薬液投与量は lmgZkgとした。採血した血液を遠心後、インシュリンー E I Aテスト（和光純薬）でインシュリン濃度を測定した。その結果を第 3図に示す。

以上の結果、 OXMは 0. 0 1 mgZk g以上の用量投与により、血しょうィンシュリン濃度を上昇させることが認められた。

式（ I) で表されるペプチドまたはその薬理学的に許容される塩は、各種注射剤、経粘膜投与剤、経口剤等の各種投与形態が可能であり、該投与形態に応じた種々の剤形で使用される。投与剤形としては、例えば静脈内注射 '筋肉内注射 ' 皮下注射 ·皮內注射等用の注射剤、懸濁注射剤、凍結乾燥等の用時溶解型注射剤、座剤 ·経鼻剤等の経粘膜投与剤、あるいは錠剤 ·カプセル剤■顆粒剤 ·懸濁液等の経口剤をあげることができる。これらの剤形の製剤化には、通常知られた方法が適用され、目的に応じて医薬品として許容される保存剤、安定化剤、抗酸化剤、陚形剤、結合剤、崩壊剤、湿潤剤、滑沢剤、着色剤、芳香剤、镇味剤、剤皮、懸濁化剤、乳化剤、溶解補助剤、緩衝剤、等張化剤、塑性剤、界面活性剤、無痛化剤等を含有させてもよい。

使用する製剤用担体としては、例えば水、注射用蒸留水、生理食塩水、ダルコース、フラクト一ス、白糖、マンニット、ラクトース、でん粉、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、グリセリン、マンニトール、キシリトール、ソルビール、グルクロン酸、ヒアルロン酸、へパリン、キチン、キトサン、グリシン、ァラニン、ブロリン、セリン、システィン、ァスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒト血清アルブミン、ヒト血清グロブリン、コラーゲン、ゼラチン、アルギン酸、タルク、クェン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、尿素、シリコーン樹脂、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ァスコルビン酸、ひ一トコフエロール等があげられる。投与量は、投与形態、患者の年齢、体重、症状等により異なるが、通常、 0. 0 1 〃 g〜 1 0mg/6 0 k gZ日が適当である。

図面の簡単な説明

第 1図は、ゥナギ心房収縮に対するォキシントモジュリンの作用を示す。

第 2図は、ゥナギ心房の心拍数に対するォキシントモジユリンの作用を示す。第 3図は、ラット血しょうインシユリン濃度に対するォキシントモジュリンの作用を示す。

発明を実施するための最良の形態

実施例 1 ゥナギ OXMの単雜精製

1 5 0匹のゥナギから摘出した腸 3 6 1 gを液体窒素で凍結後、破砕し、蒸留水で煮沸後、 1 M酢酸と 2 OmM塩酸中ホモジナイズし、遠心分離した上清を回収した。最終濃度 6 6%になるようにアセトンを加えて遠心分離し、沈澱物を除去した。上清をセップパック C 1 8 (ウォーターズ）に通し、それに保持される物質を 5 0 %ァセトニトリル、 1 0 %イソプロピルアルコールと 0. 1 %TFA (pH 2. 2) で溶出した。これをトヨパール HW— 4 0 F (2. 6 X 1 0 0 c m) を用いたゲルろ過クロマトグラフィーにより精製した。溶出液は 1 M酢酸、 1 0 %イソプロピルアルコールで、流速は 1. 5m l /m i nで行った。得られた各面分のうち、ゥナギ心房に対して試験例 1に記載する収縮増強活性を示した画分を以下の 5段階の高速液体クロマトグラフィ一により精製を行った。

第 1段階：

カラム： A s a h i p a k C 8 P- 5 0 ( 4. 6 X 2 5 Omm、旭化成）溶離液： A液（ 1 0 %イソプロピルアルコール， 0. 1 %TFA)

B液（ 5 0 %ァセトニトリル， 1 0 %イソプロピルアルコール， 0. 1 %TFA

)

A液から B液の直線濃度勾配溶出（5 0分間）

第 2段階：

カラム： TSKg e l ODS- 8 0 TM ( 4. 6 X 2 5 0 mm、東ソ一）溶離液： A液（ 1 5 %ァセトニトリル， 5 %イソプロピルアルコール' 0. 1 %

TF A)

B液（ 3 5 %ァセトニトリル， 5 %イソプロピルアルコール， 0. 1 %TFA) A液から B液の直線濃度勾配溶出（ 1 0 0分間）

第 3段階：

カラム： TSKg e l CM- 5 PW (7. 5 X 7 5mm、東ソ一）

溶離液： A液（ 2 OmMリン酸緩衝液， pH 6. 8， 1 0 %イソプロピルアルコール）

B液（ 2 OmMリン酸緩衝液， pH 6. 8, 1 0 %イソプロピルアルコール' 3

5 OmM塩化ナ卜リゥム）

A液から B液の直線濃度勾配溶出（ 3 5分間）

OXMの溶出する塩化ナトリウム濃度： 0. 1 4 M

第 4段階：

カラム： TSKg e l OD S - 8 0 TM ( 4. 6 X 1 5 0 mm、東ソ一）溶離液： A液（ 2 4 %ァセトニトリル， 5 %イソプロピルアルコール' 0. 1 %

TF A)

B液（ 3 4 %ァセトニトリル， 5 %イソプロピルアルコール' 0. 1 %TFA) A液から B液の直線濃度勾配溶出（ 5 0分間）

OXM保持時間： 3 1. 5分（有機溶媒濃度： 3 3 %)

第 5段階：

カラム： TSKg e l ODS- 8 0 TM (4. 6 X 1 5 0mm、東ソ一）溶雜液：（27%ァセトニトリル， 5 %イソプロピルアルコール， 0. 1 %TF A)

イソクラティック溶出

OXM保持時間： 2 0. 0分

以上の精製により、クロマトグラフィー上で単一ピークを与える OXMを約 7 U g得た。

OXMの理化学的性質を以下に示す。なお、理化学的諸性質は以下の機器により測定した。

マススペクトル：日本電子 JMS-HX110A(FAB法により測定）

アミノ酸分析は、 B. A.Bidlingmeyer et al (J. Chromatogr. , 336, 93, 1984 ) の方法で実施した。加水分解は塩酸蒸気中 1 1 0^eCで 20時間実施した。加水分解物のァミノ酸組成はピコタグァミノ酸分析計（ウォーターズ）で分析した。

質量分析：測定値 4208 ±1(M+H)

了ミノ酸分析：実測値（理論値）： A s x 3. 5 (4) ， G 1 X 3. 7 (4) , S e r 4. 3 (4) , G 1 y 3. 4 ( 3) , H i s 1. 1 ( 1 ) ， A r g 3. 0 (3) , Th r 4. 5 (4) , A 1 a 1. 2 ( 1 ) , P r o l . 2 ( 1 ) , Ty r 2. 1 (2) ， Va 1 0. 9 ( 1 ) , M e t 0. 8 ( 1 ) , L e u 2. 0 (2 ) , P h e 2. 0 (2) ， L y s 1. 8 (2) (T r pは未分析： A s xは A s Pまたは A s nを、 G 1 xは G 1 uまたは G 1 nをそれぞれ示す）

アミノ酸の一次構造は、 QXMの自動エドマン分解 (PPSQ- 1 0プロテインシークェンサ一、島津製）と FAB— MSスぺクトル分析、および 0. 1 Mトリス塩酸緩衝液（pH 9) 中、 3 7 °Cで 6時間リジルエンドべプチダーゼ消化し、逆相 H P L Cで分離して得た部分べプチドの自動ェドマン分解と F A B— M Sスぺクトル分析により決定した。

実施例 2 〇XMの合成島津製作所のぺプチド合成機 P SSM8を用い、島津製作所の試薬および溶媒を用いて、同社の合成プログラムにより合成機を運転してぺブチドを合成した。アミノ酸の縮合反応は Fmo c法 [泉屋信夫ほか著、「ペプチド合成の基礎と実験」、丸善（株）発行（ 1 985 ) ] により標準の条件で行った。

23 mo lの Fmo c— Th r— 0 Hが結合した担体樹脂 5 Omg (p—べンジルォキシベンジルアルコールタイプ）を自動合成機の反応器に入れ島津製作所の合成プログラムに従い次の操作を行った。

(a) 担体樹脂を DMFにより 3分間洗浄し、該溶液を排出した。

(b) 30%ピぺリジンを含む DMF溶液を加えて混合物を 4分間攪拌し、該溶液を排出し、この操作をもう 1回繰り返した。

(c)担体樹脂を DMFで 1分間洗浄し、該溶液を排出し、この操作を 5回操り返した。このようにして、 Fmo cを除去した Th rの結合した担体樹脂を得た

(d) Fmo c - Pr o— OH1 84 o l (62. Omg) . Py BOP 1 84 ^mo U HOB ΐ 1 84 ^mo NMM 276〃mo 1を含む DM F溶液 644 1を加え 3分間撹拌して得た溶液を樹脂に加え、混合物を 30分間撹拌し溶液を排出した。

(e) 担体榭脂を DMFで 1分間洗浄し、これを 5回繰り返した。このようにして、 Fmo c— P r o— Th rが担体上に合成された。次に、上記（a) 〜（c ) の洗浄、脱保護工程を行った後、（d) の工程で Fmo c -G 1 y— OHを用いて縮合反応を行い、次いで（e) の洗浄工程を得て Fmo c -G l y-Pr o 一 Th rを担体樹脂上に合成した。以下、工程（a) 〜（e) を順次繰り返して保護ペプチドの結合した担体樹脂を得た。なお、工程（d) には順次、各々 1 8 4 1110 1の？1110 <:—017—〇1^ Fmo c— S e r ( t B υ) 一〇H、 F m o c - A r g (Pm c ) -OH, Fmo c-Ly s (Bo c) -〇H、 Fmo c— S e r ( t B u) 一 OH、 Fmo c -A s n (T r t ) 一 OH、 Fmo c - Me t—OH、 Fmo c - L eu - OH、 Fmo c - Tr p -〇H、 Fmo c - G i n (T r t ) 一 OH、 Fmo c - Va l - OH、 Fmo c - Ph e - OH、 Fmo c— As p (0 t B u) -OH, Fmo c— G i n (Tr t) —〇H、 F m o c - A 1 a— 0H、 Fmo c -A r g (Pmc) —〇H、 Fmo c -A r g (Pm c) -OH. Fmo c—Th r ( t B u) 一 OH、 Fm o c - G 1 u (〇 t B u) -OH. Fmo c - L e u— OH、 Fmo c - Ty r ( t B υ) - OH 、 Fmo c -L y s (B o c) -OH. Fmo c - S e r ( t B u) -OH. F mo c - Ty r ( t B u) 一 OH、 Fmo c— A s p (0 t B u) _0H、 Fm o c - A s n (Tr t ) - 0H、 Fmo c—Th r ( t B u) 一 0H、 Fmo c 一 P h e— 0H、 Fmo c— Th r ( t B u) 一 0H、 Fmo c— G l y - OH 、 Fmo c - G i n (T r t ) -OH, Fmo c - S e r ( t B u) -OH. F mo c— H i s (T r t ) 一 OHを用いた。得られた担体樹脂をメタノール、ブチルエーテルで洗浄した後、減圧下 3時間乾燥した。これに、 TFAZH₂ 0/ チオア二ソールエ夕ンジチオール//ェチルメチルサルフアイド Zチォフエノ一ル（ 8 2. 5 : 5 : 5 : 2. 5 : 3 : 2) の混合溶液 8 0 0〃 1を加え室温で 6 時間放置し、樹脂よりペプチドを切り出した。次いで樹脂をろ別し、得られた溶液におよそ 1 5m 1のエーテルを加えて、生じる沈澱を凍結乾燥し、粗ペプチドとして 8 8. 9mgろ取した。この粗生成物を逆相カラム（カラム：資生堂製、 CAPCE LL PAK C 1 8 S G 1 2 0 S— 5 3 0 x 2 5 0 mm ) を用いた高速液体クロマトグラフィーで精製した。 0. 1 %TFAとァセトニトリルを用いた直線濃度勾配法で溶出し 22 0 nmで検出し、主なピークを分取し、その一部について前記アミノ酸組成分析および質量分析を行い、 OXMを含む画分を得た。この画分を濃縮後、凍結乾燥して標記化合物を 2 5. 9mg得た o

以上のようにして得られた合成べプチドを、実施例 1で得られた OXMと共に第 5段階の精製条件に従い逆相高速クロマトグラフィ一で分析し、両者が同一の溶出位置にあることを確認した。

質量分析： M + H= 4 2 0 8 (理論値 4 2 0 8 )

ァミノ酸分析； A s x 3. 6 (4 ) , G 1 X 4. 0 (4) ， S e r 4. 0 ( 4) , G 1 y 3. 4 ( 3) ， H i s 1. 0 ( 1 ) , A r g 3. 0 ( 3) , Th r 4. 0 (4 ) , A 1 a 1. 1 ( 1 ) ， P r o l . 0 ( 1 ) ， Ty r 2. 0 ( 2) , V a l l . 0 ( 1 ) , Me t 0. 9 ( 1 ) , L e u 2. 1 (2) , P h e 2. 0 (

l o 2) ， L y s 2. 0 (2) (T r pは未分析； A s xは A s pまたは A s nを、 G 1 xは G 1 uまたは G 1 nをそれぞれ示す）

産業上の利用可能性

本発明により、強心作用およびインシュリン遊離促進作用を有し、心臓疾患または糖尿病の予防または治療に有用な新規べプチドまたはその薬理学的に許容される塩が提供される。

配列表

配列番号： 1

配列の長さ： 3 6

配列の型：アミノ酸

鎖の数：一本鎖

トポロジー：直鎖状

配列の種類：ぺプチド

起源

生物名：ゥナギ (Anguilla japonica)

組 iss ： ^

配列

His Ser Gin Gly Thr Phe Thr Asn Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Glu Thr

1 5 10 15

Arg Arg Ala Gin Asp Phe Val Gin Trp Leu Met Asn Ser Lys Arg Ser

20 25 30

Gly Gly Pro Thr

35

Claims

請求の範囲

1. 式（ I )

H— H i s - S e r - G】 n - G l y - Th r - Ph e - Th r - As n As p-Ty r -S e r-Ly s -Ty r-Le u-G l u-Th r -Ar g A r - A 1 a - G 1 n-As p-Ph e-Va 1一 G l n-Tr p-Leu Me t -As n-S e r -Ly s -Ar g-Se r -G l y - G 1 y - P r o Th r -OH ( I )

で表されるぺブチドまたはその薬理学的に許容される塩。

2. 請求の範囲 1記載の化合物を含有する医薬。

3. 請求の範囲 1記載の化合物を含有する強心剤。

4. 請求の範囲 1記載の化合物を含有する糖尿病治療剤。