WO1995013057A1

WO1995013057A1 - Procede antimicrobien et composition cosmetique

Info

Publication number: WO1995013057A1
Application number: PCT/JP1994/001911
Authority: WO
Inventors: Takeshi Nishino; Yoshiro Otsu; Yaeno Arima; Yoriko Nakai
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 1993-11-12
Filing date: 1994-11-11
Publication date: 1995-05-18
Also published as: AU8116294A; EP0728478A1; KR960705557A; CN1139879A

Description

明細書

抗微生物方法及び化粧品組成物

技術分野

本発明は、抗微生物方法及び化粧品組成物に関する。

背景技術

従来、ヒノキチオールは医薬や化粧品等に抗菌剤として用いられているが、紫外線に不安定であるという問題点を有しているため、より一層優れた抗微生物剤の開発が求められている。

発明の開示

本発明者は、斯かる現状に鑑み、優れた抗微生物活性を有する組成物を開発すべく鋭意研究を重ねて来た。その結果、銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種とが配合された組成物やヒノキチォ —ルー銅又は亜鉛錯体及びその塩、ら選ばれた^なくとも 1種が配合された組成物は、抗微生物活性に優れると共に、優れた光安定性、特に紫外線に対する安定性を有していることを見い出した。本発明は、斯かる知見に基づき完成されたものである。

即ち、本発明は、銅化合物とヒノキチオール及びそ塩から選ばれた少なくとも 1種とを含有する抗微生物斉 , 並びにヒノキチオール—銅又は亜鉛錯体及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を含有する抗微生物剤に係る。本発明の抗微生物剤の有効成分として用いられるヒノキチォ一ルー銅錯体又はその塩は、公知の化合物である。銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を混合した場合に、ヒノキチオール—銅錯体又はその塩が生成することもあるが、この場合生成したヒノキチオール—銅錯体又はその塩を単離精製することなく、この混合物をそのまま本発明の有効成分として使用することができる。

本発明において、銅化合物としては、特に限定がなく従来公知のものを広く使用できるが、例えば塩化銅（ I ) 、酢酸銅（Π) 、塩化アンモニゥム銅（II) 、臭化銅

( I ) 、臭化銅（π)、臭化銅（ I ) —硫化ジメチル錯体、炭酸銅（II) 、クェン酸銅（！1) 、シアン化銅（ I ) 、 4 ーシクロへキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（Π) 、二燐酸銅（Η) 、弗化銅（II) 、蟻酸銅（11) 、グルコン酸銅（II) 、水酸化銅（Η) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅（Π) 、ォレイン酸銅（Π) 、蓚酸銅 (II) 、酸化銅（Π) 、燐酸銅（Η) 、フタル酸銅（II) 、塩化力リウム銅（II) 、口ダン化銅（ I ) 、硫酸銅

(II) 、硫化銅（Π) 、チォシアン酸銅（ I ) 、銅クロ口フィル、ヒノキチオール銅、ニコチン酸銅化合物、二コチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸アミド銅化合物、アミノ酸及びペプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体等を挙げることができる。本発明では、これら銅化合物を 1種単独で使用してもよいし、 2種以上混合して使用してもよい。

本発明において、ヒノキチオールの塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシゥ厶塩等のアルカリ土類金属塩、銅塩、亜鉛塩等の金属塩類等の無機塩、ジエタノールアミン塩、 2 —アミノ一 2 —ェチルー 1， 3 —プロパンジオール塩、トリエタノールアミン塩等のアルカノールァミン塩、モルホリン塩、ピぺラジン塩、ピぺリジン塩等のへテロ環ァミン塩、アンモニゥム塩、アルギニン塩、リジン塩、ヒスチジン塩等の塩基性ァミノ酸塩等の有機塩類等を挙げることができる。ここで塩基性アミノ酸としては、 D体、 L 体又はこれらの混合物であってもよい。本発明では、ヒノキチオールやその塩を 1種単独で使用してもよいし、 2種以上混合して使用してもよい。

本発明の組成物中に配合すべき銅化合物とヒノキチォ —ル又はその塩との割合としては、本発明の所期の効果が発現され得る量である限り、特に限定されるものではないが、銅化合物とヒノキチオール又はその塩との合計量に対して、銅化合物を 0. 0 5〜 9 9. 9 5重量％程度、好ましくは 1 0〜 9 9. 9 5重量％程度、最も好ましくは 5 0〜 9 9. 9重量％程度使用し、ヒノキチォ一ル又はその塩を 9 9. 9 5〜 0. 0 5重量％程度、好ましくは 9 0〜 0. 0 5重量％程度、最も好ましくは 5 0 〜 0. 1重量％程度使用するのがよい。

本発明の抗微生物剤の有効成分として用いられるヒノキチオール一亜鉛錯体又はその塩も、公知の化合物である。ヒノキチオール及び亜鉛の割合としては、特に限定されるものではないが、前者：後者 = 2 ： 1のものや前者：後者 = 3 ： 1のものが特に好ましい。

本発明において、ヒノキチオール一亜鉛錯体の塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、銅塩、亜鉛塩等の金属塩類等の無機塩、ジエタノールアミン塩、 2—ァミノ一 2—ェチルー 1 , 3—プロノ、。ンジオール塩、トリエタノールアミン塩等のアルカノールァミン塩、モルホリン塩、ピぺラジン塩、ピぺリジン塩等のへテロ環アミン塩、アンモニゥム塩、アルギニン塩、リジン塩、ヒスチジン塩等の塩基性アミノ酸塩等の有機塩類、硫酸、塩酸、酢酸、クェン酸、乳酸等の無機酸又は有機酸塩類等を挙げることができる。ここで塩基性アミノ酸としては、 D体、 L体又はこれらの混合物であってもよい。本発明では、ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体やその塩を 1種単独で使用してもよいし、 2種以上混合して使用してもよい。

本発明の組成物を医薬として使用する場合には、銅化合物とヒノキチオール又はその塩とをそれぞれ単一の医薬製剤中に含有されるように調製して利用してもよく、これらの各々を別個に製剤化して両医薬製剤を利用することもできる。またヒノキチオール一銅錯体又はその塩ゃヒノキチオール一亜鉛錯体又はその塩の場合には、単 —の医薬製剤中に含有されるように調製して利用することができる。斯かる製剤は、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、保湿剤、崩壞剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤或いは賦形剤を用いて調製される。この医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択でき、この代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、油脂性軟膏、乳剤性軟膏、水溶性钦膏、パスタ剤、硬膏剤、ローション剤、リニメント剤等の外用剤等が挙げられる。

また本発明の組成物を化粧料として使用する場合には、抗フケ剤、抗ニキビ剤、抗腋臭剤、抗カビ剤、殺菌剤及びノ又は防腐剤等として化粧料に添加することができ、例えば化粧料の防腐を行なうことができる。該化粧料は、例えば洗浄用化粧料、クリーム、乳液、メイクアップクリーム、化粧用オイル、パック等の基礎化粧料、ファンデーンヨン、口紅、頰紅、アイライナー、マスカラ、ァイシャドー、マニキュア、白粉等の仕上げ化粧料、整髪料、養毛料、染毛料等の頭髪用化粧料、歯磨、洗口剤等の口腔衛生料、浴用剤、美白剤、サンスクリーン剤、二キビ用剤等の各種形態で使用でき、これらはこの分野で慣用されている方法に従って製造することができる。

また、斯かる化粧料の製造の際には、必要に応じて、公知の各種化粧料基材、例えば賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤等を使用することができ、更に必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、各種の油脂、ロウ、炭化水素、脂肪酸、高級アルコール、エステル油、金属石鹼等の油性原料、動物 ·植物抽出液、ビタミン剤、ホルモン剤、アミノ酸等の薬効剤、界面活性剤、色素、染料、顔料、香料、防腐剤、殺菌剤、保湿剤、増粘剤、酸化防止剤、金属封鎖剤のほか、すでに公知の各種成分や添加剤を適宜組合わせて使用することができる。

本発明の組成物を医薬として用いる場合、その効能効果を有する限りその量は特に限定されないが、銅化合物及びヒノキチオール又はその塩を合計量で通常

0. 0 0 1〜 2 0重量％程度、好ましくは 0. 0 1〜 1 0重量％程度含有させるのがよく、更に用時調整剤等の希釈を行なう製剤は、通常 0. 0 0 1〜 1 0 0重量％程度、好ましくは 0. 0 0 1〜 5 0重量％程度含有しているのがよい。また、ヒノキチオール一銅錯体又はその塩の場合も同様で、通常 0. 0 0 1〜 2 0重量％程度、好ましくは 0. 0 1〜 1 0重量％程度含有させるのがよく、更に用時調整剤等の希釈を行なう製剤は、通常 0. 0 0 1〜 1 0 0重量％程度、好ましくは 0. 0 0 1 〜 5 0重量％程度含有しているのがよい。また、ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体又はその塩の場合も、通常

0. 0 0 1〜 2 0重量％程度、好ましくは 0. 0 1〜 1 0重量％程度含有させるのがよく、更に用時調整剤等の希釈を行なう製剤は、通常 Q. 0 0 1〜 1 0 0重量％程度、好ましくは 0. 0 0 1〜 5 0重量％程度含有しているのがよい。

また本発明の組成物を化粧料として用いる場合には、その形態等により異なり一概には言えず、特に限定されるものではないが、一般には銅化合物及びヒノキチォール又はその塩を合計量で、或いはヒノキチオール—銅もしくは亜鉛錯体又はこれらの塩を各々通常 0. 0 0 0 1 〜 9 9 . 9重量％程度、好ましくは 0 . 0 0 1 〜 3 0重量％程度含有させるのがよい。また、上記化粧料を更に水、エタノール、ォリーブ油、液体ガス又は適当な溶媒により希釈して使用することもできる。

錠剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来よりよく知られている各種のものを広く使用することができる。その例としては、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシゥム、カオリン、結晶セルロース、ゲイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピ口リドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビ夕ン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバタ一、水素添加油等の崩壊抑制剤、第 4級アンモニゥム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ゲイ酸等の吸着剤、精製タルク、トウモロコシデンプン、ワックス、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる。さらに錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコ一ティング錠或いは二重錠、多層錠とすることができる。

丸剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用できる。その例としては、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の崩壌剤等を使用できる。

坐剤の形態に成形するに際しては、担体として従来公知のものを広く使用できる。その例としては、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセラィド等を挙げることができる。

注射剤として調製される場合、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌され、かっ血液と等張であるのが好ましく、これらの形態に成形するに際しては、希釈剤としてこの分野において慣用されているものをすベて使用でき、例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキン化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用できる。なお、この場合等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドゥ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。

軟膏剤として調製される場合には、この分野で従来公知の油性基剤を広く使用することができ、具体的にはラッカセィ油、ゴマ油、ダイズ油、サフラワー油、ァボカド油、ヒマヮリ油、トウモロコシ油、ナタネ油、メンジッ油、ヒマシ油、ツバキ油、ヤシ油、オリープ油、ケシ油、カカオ油、牛脂、豚脂、羊毛油等の油脂類、ヮセリン、パラフィン、シリコン油、スクヮラン等の鉱物油、イソプロピルミリステート、セィフレイソォクタノエート、 n —ブチルミリステート、イソプロピルリノレート、プ口ピルリシノレート、イソプロピルリシノレート、イソプチルリシノレート、ヘプチルリシノレ一ト、ジェチルセパ 'ゲート、ジイソプロピルアジペート、セチルアルコール、ステアリルァノレコール、ベへニルアルコール、パチルァノレコール、キミノレアルコール、サラシミツロウ、鯨ロウ、木ロウ等の高級脂肪酸エステル、高級脂肪族ァルコール及びヮックス類、ステアリン酸、ォレイン酸、パルミチン酸等の高級脂肪酸、炭素数 1 2〜 1 8の飽和又は不飽和脂肪酸のモノ、ジ、トリグリセライド混合物等を例示できる。本発明では、これら基剤を 1種単独で使用してもよいし、 2種以上混合して使用してもよい。

本発明の組成物には、慣用の添加剤、例えば金属石鹼、動物乃至植物抽出物、ビタミン剤、ホルモン剤、ァミン酸等の薬効剤、界面活性剤、色素、染料、顔料、香料、紫外線吸収剤、保湿剤、増粘剤、酸化防止剤、金属ィォン封鎖剤、 p H調整剤等を必要に応じて適宜配合することができる。

本発明の組成物は、常法に従い製造される。

上記医薬製剤の投与方法は特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じた方法で投与される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤の場合には、経口投与される。また注射剤の場合には単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の捕液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤の場合には直腸内投与される。外用剤の場合には患部に塗布される。

本発明のこれら医薬製剤の使用量は、通常成人一人一日当り有効成分の銅化合物とヒノキチオール又はその塩とを合計量で、或いはヒノキチオール一銅もしくは亜鉛錯体又はこれらの塩をそれぞれ約 1〜 2 O m gZ体重 1 k g程度で 1〜 3回に分けて投与されるのがよい。

本発明の組成物を外用殺菌の分野に使用するに当り、本発明組成物中に配合されるべき銅化合物とヒノキチォール又はその塩との割合としては、本発明の所期の効果が発現され得る量である限り、特に限定されるものではないが、本発明組成物中に銅化合物を通常

0. 00 0 05〜 9 9重量％程度、好ましくは

0. 0 0 1〜 3 0重量％程度配合するのがよく、またヒノキチオール又はその塩を通常 0. 000 0 5〜 5 0重量％程度、好ましくは 0. 0 01〜 2 0重量％程度配合するのがよい。ヒノキチォ一ルー銅錯体を用いる場合には、本発明組成物中に通常 0. 0001〜 6 0重量％程度、好ましくは 0. 01〜 3 0重量％程度配合するのがよい。またヒノキチオール一亜鉛錯体を用いる場合には、本発明組成物中に通常 0. 0001〜 6 0重量％程度、好ましくは 0. 01〜 30重量％程度配合するのがよい。本発明組成物を外用として用いる場合にも、必要に応じて適宜希釈を行なうことができる。

外用殺菌の目的で用いられる本発明組成物中には、上記有効成分の他に、この分野で従来公知の各種添加剤を配合することができる。このような添加剤としては、例えばアポガド油、オリープ油、ヤシ油、牛脂、豚脂等の油脂類、ミツロウ、鯨ロウ、ラノリン等のロウ類、 .流動ノ、。ラフィン、ワセリン、スクヮラン、シリコン油等の炭化水素類、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ォレイン酸等の脂肪酸類、セチルアルコール、ステアリノレアソレコール、 2 —へキシルデカノール、 2—才クチルドデカノール等の高級脂肪族アルコール類、イソプロピルミリステート、 2 —ォクチルドデシルミリステー小、セチルイソォクタノエート、イソノニルイソノニレート、ジノニルプロピレングリコール等のエステル類、モノステアリン酸グリセリン、モノォレイン酸グリセリン等の炭素数 8〜 2 0の飽和又は不飽和脂肪酸のモノ、ジ又はトリグリセライド、メタノール、エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール類、グリセリン、プロピレングリコール、 1 , 3 —ブチレングリコール、へキシレングリコール等の多価アルコール類、水、各種有機溶剤等の他、金属石験、動物乃至植物抽出物、ビタミン剤、ホルモン剤、ァミン等の薬効剤、界面活性剤、色素、染料、顔料、香料、紫外線吸収剤、保湿剤、増粘剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、 P H調整剤、皮膚収れん剤、防臭剤、漂白剤、蛍光増白剤、ビルダー、エアゾール用各種ガス類等を挙げることができる。

本発明の方法を実施するに当っては、外用殺菌が必要な箇所に上記本発明組成物を慣用手段に従って適用すればよい。斯かる慣用手段としては、例えばスプレー塗布、刷毛塗り、布雑巾、ペーパータオル、ゥエツ卜ティシュ等による清拭、エアゾール等を挙げることができる。

また、本発明の組成物は、外用殺菌が必要な一般用乃至医療用品（衣類、食品、家具、ガーゼ、シーツ、力一テン等）の洗浄剤、仕上げ糊、柔軟剤、漂白剤等に添加して使用できる。更に本発明の組成物は外用殺菌の必要な動物乃至動物用品にも適用できる。

また、本発明の組成物は、食品に防腐剤として配合する |_とおさ

本発明の組成物は、優れた抗微生物活性を有しており、各種の微生物に起因する各種の感染症、例えば、アトピ一性皮膚炎、貨幣状皮膚炎、自家感作性皮膚炎、おむつ皮虜炎、うっ滞性皮膚炎等の皮膚炎、主婦（手）湿疹、乾燥性湿疹等の湿疹、膿疱性乾癬、熱湯、火傷による潮紅、とびひ、かぶれ、あせも、ただれ、擦過症、搔破による二次感染等の各種の皮膚疾患の治療に特に有用である c

しかも本発明の組成物は、皮廣刺激性、アレルギー性が極めて低く、乳児、幼児、小児その他の皮膚疾患患者、例えば皮膚刺激に弱い患者に適用できることは勿論のこと、ヒ卜以外の哺乳動物（犬、猫等のぺットゃ牛、馬等の家畜等）の皮膚疾患の治療にも用いることができる。

銅化合物及びヒノ'キチオールもしくはその塩並びにヒノキチォ一ルー銅錯体又はその塩を有効成分とする本発明の組成物は、優れた抗微生物活性を有しており、紫外線等の光に対しても安定であり、しかも刺激が低く、乳児、幼児、小児その他皮膚疾患の患者、刺激に弱い患者等に対して好適に使用され得る。また、この本発明の組成物は、アトピー性皮膚炎患者や接触皮膚炎患者に対しても好適に使用され得る。

ヒノキチオール一亜鉛錯体又はその塩を有効成分とする本発明の組成物は、優れた抗微生物活性、特に抗菌 (カビを除く）活性を有しており、安定性に優れ、持続時間が長く、吸収性がよく、安全性が高く、しかも皮膚に対し低刺激性である。従って、この本発明の組成物は、乳児、幼児、小児その他皮膚疾患の患者、刺激に弱い患者等に対して好適に使用され得る。また、本発明の組成物は、アトピー性皮膚炎碧や接触皮膚炎患者に対しても好適に使用され得る。また、本発明の組成物は、抗フケ剤として特に顕著な効果を発現する。本発明の組成物は、広くグラム陽性菌及びグラム陰性菌に対して優れた抗微生物活性を発揮する低毒性で且つ副作用が極めて弱い組成物である。特に上記組成物は、例えばブドウ球菌属、レンサ球菌属、ジフテリア菌、結核菌、クロストリジゥム属等のグラム陽性菌、ナイセリァ属、ェシエリキア属、シトロバクター属、サルモネラ属、シゲラ属、クレブシエラ属、シユードモナス属等のグラム陰性菌、クロス卜リジゥム属、ぺプトコッカス属、ぺプトストレプトコッカス属、プロピオニバクテリゥム属、パクテロイデス属等の嫌気性菌、ムコール属等を含む接合菌菌類、ァスペルギルス属、ぺニシリウム属等を含む子嚢菌類、クリプトコッカス属、カンジダ属、皮膚糸状菌、ピチロスポルム属等を含む不完全菌類等の真菌等に対して極めて強い抗微生物活性を発揮する。本発明組成物は、標準株は勿論、臨床株に対しても優れた抗微生物活性を発現する。

また本発明の組成物は、ペニシリン系、セフヱム系、キノロン系、アミノ配糖体系、マクロライド系、テトラサイクリン系等の各種抗生物質の耐性菌、臨床分離菌に対しても優れた抗微生物活性を発揮する。特に M R S A 及び M R S Eには顕著な殺菌効果を発現する。また本発明の組成物は、キノロン耐性、ァミノ配糖体耐性、マク口ライド耐性、テトラサイクリン耐性等を伴った多剤耐性の M R S Aや M R S Eにも有効である。

更にヒノキチオールを銅錯体又は亜鉛錯体とすることにより、或いは銅化合物とヒノキチオール又はその塩とを併用することにより、スタフイロコッカス属等で認められるヒノキチオール又はその塩の反転現象を抑制するため、ヒノキチオール又はその塩の殺菌作用を一層増大させることができる。

従って、本発明の組成物は、ゥエツトティッシュ、化学雑巾、ペーパータオル、おしぼり、カーぺット、フロァー、食器、一般衣類、一般器具類（例えば家具類、メガネ等）、医療用衣類等の洗浄、食器洗浄機、排水管等の除蘭、医療用器具類（例えばガーゼ、光学レンズ等）、飲料保存容器、動物用用具類等の洗浄乃至除菌等に好適に適用され得る。

ヒノキチオールは通常汎用されるポリエチレン容器に充填した際、ポリエチレン容器に付着もしくは吸着して、その抗菌効果が低減する。これに対して、本発明のヒノキチオール—銅又は亜鉛錯体ゃこれらの塩は、ポリェチレン容器に付着もしくは吸着することなく優れた抗菌効果をもたらすものである。

発明を実施するための最良の形態以下に参考例、製造例及び試験例を掲げて本発明をより一層明らかにする。尚、以下単に「％」とあるのは「重量％」を意味する。

参考例

ヒノキチオールは、高砂香料（株）製の試薬を、酢酸亜鉛 2水和物及びエタノールは和光純薬工業（株）製の特級品をそのまま使用した。

ヒノキチオール 5. O gを攪拌しながらエタノール 2 0 0 m l に溶解し、更にそこに酢酸亜鉛 2水和物 3. 4 gを溶解した。 5時間攪拌し、析出した沈殿を N o . 5 C濾紙にて濾過し、バキユウムポンプ

(VA C U UM P UM P 4 V P - C ₄ ； (株）日立製作所製）において減圧乾燥を行ない、下記式

H₃C CH,

³\ノ ³

で表わされるジヒノキチオール亜鉛（Π) 4. 6 g得た。製造例 1 (亜鉛華軟膏）

ヒノキチオール 0. 5 g 豚脂 3 0 0. 0 g サラシミツロウ 6 0. O g 酸化亜鉛 1 0 0. 0 g 酸化銅（H) 0. 1 g 白色ワセリン適量合計 1 0 0 0. 0 g

( 1 ) ヒノキチオール及び酸化銅（1】）を秤取し、これに豚脂の一部を加え、約 4 0°Cに加温、均一に攪拌溶融した。（ 2 ) 残りの豚脂、サラシミツロウ及び白色ヮセリンを水浴上で溶解した後、攪拌して 8 0 °Cの混合物を形成した。（3 ) 乳鉢に酸化亜鉛を秤取し、上記（2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0^eCになるまで攪拌下冷却した。（4) 次いで、上記（ 1 ) で調製された混合物を約 4 0でで添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の钦膏を得た。

製造例 2 (軟膏）

ヒノキチオール 0. 1 ォリーブ油 1 0 0. 0 g 酸化銅（II) 1 0 0. 0 g 局方単钦膏適量合計 1 0 0 0. O g

( 1 ) ヒノキチオールを秤取し、これにォリーブ油の —部を加え、約 4 0 °Cに加温、均一に攪拌溶融した。

( 2 ) 残りのォリーブ油及び局方単軟膏を水浴上で溶解した後、攪拌して 8 0 °Cの混合物を形成した。（ 3 ) 乳鉢に酸化銅（Π) を秤取し、上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0でになるまで攪拌下冷却した。（4 ) 次いで、上記（ 1 ) で調製された混合物を約 4 0 °Cで添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の軟膏を得た。

製造例 3 (軟膏）

親油型モノステアリン酸グリセリン 5 0. 0 g 酸化銅（Π) 5 0. 0 g 白色ワセリン τΜ. 量ヒノキチオールナトリウム塩 0. 0 5 g グリセリン 3 0. 0 g 精製水 5 0. 0 g α I 0 0 0. 0 g

( l ) ヒノキチオールナトリウム塩、グリセリン及び精製水を約 6 0^eCに加温、均一に攪拌溶融した。（2 ) 親油型モノステアリン酸グリセリン及び白色ヮセリンを水浴上で溶解した後、攪拌して 6 0 ^DCの混合物を形成した。（ 3 ) 上記（ 2 ) で調製された混合物に上記（ 1 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0 ^aCになるまで攪拌下冷却した。（ 4 ) 乳鉢に酸化銅（II) を秤取し、上記（ 3 ) で調製された混合物を少量ずつ添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の軟膏を得た。

製造例 4 (バニシングクリーム）

ステアリン酸 1 0. 0 % パラフィンワックス（ 1 3 5 F) 2. 0 % 鯨ロウ 2. 0 % セチルアルコール 2. 0 % イソオクタン酸セチル 5. 0 % モノラウリン酸ポリオキシエチレン

ソルビタン（ 2 0 E 0 ) 3 0 % 酢酸銅（Π) 0. 0 5 % 水酸化ナトリウム 0. 5 % 濃グリセリン 5 0 % ヒノキチオール 0. 0 2 % 香料適量精製水残分合計 0 0. 0 % ( 1 ) ステアリン酸、パラフィンワックス（ 1 3 5 F ) 、鯨ロウ、セチルアルコール、イソオクタン酸セチル及びモノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（ 2 0 E 0 ) を 8 0〜 8 5 °Cに加温し、均一に溶融した。（ 2 ) 酢酸銅（H) 、水酸化ナトリウム、濃グリセリン及び精製水を 8 0〜 8 5 °Cに加温し、均一に溶解した。（ 3 ) 8 0 °Cで上記（ 1 ) で調製された混合物に上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加し、均一に乳化した後、攪拌下 4 5 °Cまで冷却した。（ 4 ) 4 5 °Cで上記（ 3 ) で調製された混合物にヒノキチオール及び香料を添加後、均一に攪拌し、更に攪拌下室温まで冷却して、目的のバ二シングクリームを得た。

製造例 5 (クレンジングクリーム）

サラシミツロウ 3 0 % 流動パラフィン 3 0 0 % セチルアルコール 2 0 % イソオクタン酸セチル 1 0 0 % トリエタノールァミン 0 2 % プロピレングリコール 5 0 % 酢酸銅（Π) 0 1 % 酸化防止剤適量ヒノキチオール 0 0 5 % 香料適量精製水残分合計 1 0 0. 0 % 上記各成分を製造例 4に準じて添加し、適宜加温攪拌後クレンジングクリームを得た。

製造例 6 (化粧水）

エチルアルコール 1 0. 0 % ポリオキシエチレンラウリルエーテル

( 9 E 0) 2. 0 % 感光素 2 0 1号 0. 0 0 1 % 香料量濃グリセリン 5. 0 %

1， 3—ブチレングリコ一ル 3. 0 % ヒノキチオール一銅錯体 0. 0 5 % ヒノキチオール 0. 0 5 % 色素適量精製水 ― 残分合計 1 0 0. 0 %

( 1 ) エチルアルコールにポリオキシエチレンラウリルエーテル（ 9 E 0) 、感光素 2 0 1号、ヒノキチォールー銅錯体、ヒノキチオール及び香料を加え、均一に混合した。（ 2 ) 精製水に、濃グリセリン及び 1， 3—ブチレングリコールを加え、均一に溶解した。（ 3 ) 6 0 °Cで上記（ 1 ) で調製された混合物に上記（ 2 ) で調製された混合物を加え、均一に混合し、色素で着色し、化粧水を得た。

製造例 7 (軟膏）

U 曰 2 0. 9 5 % サラシミツロウ 7. 0 % 親油性モノステアリン酸グリセリン 2. 0 % 白色ヮセリン 6 0. 0 % 酸化銅 (Π) 1 0. 0 % ヒノキチオール 0. 0 5 % 合計 1 0 0. 0 %

( 1 ) ヒノキチォ一ルを秤取し、これに豚脂の一部を加え、約 4 0でに加温、均一に攪拌溶融した。（ 2 ) 残りの豚脂、親油性モノステアリン酸グリセリン、サラシミツロウ及び白色ヮセリンを水浴上で溶解した後、攪拌して 8 0 °Cの混合物を形成した。（ 3 ) 乳鉢に酸化銅

(II) を秤取じ、上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0 °Cになるまで攪拌下冷却した。（ 4 ) 次いで、上記（ 1 ) で調製された混合物を約 4 0 °Cで添加した後、固まるまでよく攪拌し. 目的の软膏を得た。製造例 8 (ポンプ用消毒剤）

ヒノキチオール 0. 0 5 g 塩化銅（ I ) 0. 0 4 g

9 9. 5 %エタノール 7 0. 0 g 精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 9 (ペット用シャンプ一）

ラウロイノレメチルァラニン

ナトリウム（ 3 0 %) 4 0 0 g ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチル

ァミノ酢酸ベタィン 0 0 g ヒノキチオール 0 1

9 9. 5 %エタノール 3 0 g 塩化銅（ I ) 0. 0 8 g p H調整剤 M 量精製水にて全量 0 0. 0 g 製造例 1 0 (固形石鹼）

石素地 3 0. 0 g 硬化ャシ油脂肪酸グリセリル

硫酸ナトリウム 5 0 0 g グリセリルモノステアレート 5 0 g セチルアルコール 5 0 g 二酸化チタン 0 5 g 酸化銅（1】） 0. 5 g ヒノキチオール 0. 0 5 g 香料、酸化防止剤及び金属イオン封鎖剤適量製造例 1 1 (器具洗浄剤）

ャシ油脂肪酸メチルァラニン

ナトリウム（ 2 5 %) 1 5. 0 g ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチル

ァミノ酢酸ベタイン 5. 0 g ヒノキチオール · トリエタノール

アミン塩 0. 0 1 g ヒノキチオール —アルギニン酸 0. 0 3 g ダルコン酸銅（ Π ) 0. 0 0 1 g p H調整剤適量精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 1 2 (液状ランドリ用洗剤）

ポリオキシエチレンラウリルエーテル 3 5. 0 g アルキルベンゼンスルホン酸トリ

エタノールアミン塩 1 5. O g ヒノキチオール · 2—アミノー 2—

メチノレー 1 , 3 -プロパンジオール塩 0. 5 g 塩化銅（ I ) 0. 4 g 精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 1 3 (液伏ランドリ用洗剤）

アルキルベンゼンスルホン酸卜リ

エタノールアミン塩 1 9 . 0 g ポリオキンエチレンドデシルェ一テル 7 . 0 g メ夕キシレンスルホン酸ナトリゥム 6 . 0 g クェン酸トリエタノールァミン 8 . 0 g カノレボキシメチルセルロース 0 . 5 g ヒノキチオール · 2 —アミノー 2—

メチル一 1 , 3 —プロパンジオール塩 1 . 0 g クェン酸銅（ H ) 0 . 4 g 蛍光增白剤及び香料適量精製水にて全量 1 0 0 . 0 g 製造例 1 4 (粉末状ランドリ洗剤）

牛脂石験 4 0 g ヤシ ώ石鹼 1 0 g 無水炭酸ナトリウム 3 0 g 無¾硫酸ナトリウム 0 g ヒノキチオール一銅錯体 5 g ヒノキチオール · ナトリウム塩 5 g 蛍光増白剤及び香料適量精製水にて全量 1 0 0 . 0 g 製造例 1 5 (浴室用洗浄剤）ポリオキシエチレンアルキル（ c ₂ )

エーテル 1 0. O g クェン酸 5. 0 g ポリプロピレングリコール 5. 0 g

9 9. 5 %エタノール 3. 0 g ヒノキチオール 0. 0 5 g 酢酸銅（Π) 0. 0 5 g H調整剤適量精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 1 6 (トイレ用洗浄剤）

塩酸 9. 5 g 塩化ナトリウム 7. 0 g ポリオキシエチレンアルキル（ C丄 ₂)

エーテル 2. 0 g 増粘剤 2. 5 g ヒノキチオール 0. 0 3 g 塩化銅（ I ) 0. 5 g p H調整剤適量精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 1 7 (清拭剤、エアゾール用原液）

流動パラフィン 0. 3 g 蔗糖脂肪酸エステル 2. 0 g 1 , 3 —ブチレングリコール 3. 0 g ヒノキチオール 0. 0 2 g 9 9. 5 %エタノール 5. 0 g 塩化銅（ I ) 0. 0 1 g 精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 1 8 (亜鉛華軟膏）

ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体 0 5 g 豚脂 J百 3 0 0 0 g サラシミッロウ 6 0 0 g 酸化亜鉛 1 0 0 0 g 白色ヮセリン適量

0 0 0. 0 g

( 1 ) ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体を秤取し、これに豚脂の一部を加え、約 4 0 °Cに加温、均一に攪拌溶融した

( 2 ) 残りの豚脂、サラシミツロウ及び白色ワセリンを水浴上で溶解した後、攪拌して 8 0での混合物を形成した。（ 3 ) 乳鉢に酸化亜鉛を秤取し、上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0 °Cになるまで攪拌下冷却した。（ 4 ) 次いで、上記

( 1 ) で調製された混合物を約 4 0 °Cで添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的.の软膏を得た。

製造例 1 9 (軟膏）ヒノキチォル -亜鉛錯体 0. 1 g ォリーブ油 0 0. 0 g 局方単軟膏適里合計 1 0 0 0. 0 g

( 1 ) ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体を秤取し、これにォリーブ油の一部を加え、約 4 0 °Cに加温、均一に攪拌溶融した。（ 2 ) 残りのォリーブ油及び局方単軟膏を水浴上で溶解した後、攪拌して 8 0 °Cの混合物を形成した。

( 3 ) 乳鉢に上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0 °Cになるまで攪拌下冷却した。（ 4 ) 次いで、上記（ 1 ) で調製された混合物を約 4 0 °Cで添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の軟膏を得た。

製造例 2 0 (軟膏）

親油型モノステアリン酸グリセリン 5 0. 0 g 白色ワセリン M 量ヒノキチオール一亜鉛錯体の

ナトリウム塩 0. 0 5 g グリセリン 3 0. 0 g 精製水 ― 5 0. 0 g 合計 1 0 0 0. 0 g

( 1 ) ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体のナトリウム塩、グリセリン及び精製水を約 6 0 °Cに加温、均一に攪拌溶融した。（ 2 ) 親油型モノステアリン酸グリセリン及び白色ヮセリンを水浴上で溶解した後、攪拌して 6 0 °Cの混合物を形成计した。（ 3 ) 上記（ 2 ) で調製された混合物に上記（ 1 ) で調製された混合物を少量ずつ添加しなら均一に攪拌し、約 4 0 °Cになるまで攪拌下冷却した。 ( 4 ) 乳鉢に上記（ 3 ) で調製された混合物を少量ずつ添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の軟膏を得た製造例 2 1 (バニシングクリーム）

ソノレビタン（ 2 0 E 0 ) 3 0 % 水酸化ナトリウム 0 5 % 濃グリセリン 5. 0 % ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 2 % 香料適量精製水 ― 残分合 0 0. 0 % ( 1 ) ステアリン酸、パラフィンワックス（ 1 3 5 F ) 、鯨ロウ、セチルアルコール、イソオクタン酸セチル及びモノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（ 2 0 E O ) を 8 0〜 8 5 °Cに加温し、均一に溶融した。（ 2 ) 水酸化ナトリウム、濃グリセリン及び精製水を 8 0〜 8 5 °Cに加温し、均一に溶解した。（ 3 ) 8 0 °Cで上記 ( 1 ) で調製された混合物に上記（ 2 ) で調製された混合物を少量ずつ添加し、均一に乳化した後、攪拌下 4 5 °Cまで冷却した。（ 4 ) 4 5 °Cで上記（ 3 ) で調製された混合物にヒノキチオール一亜鉛錯体及び香料を添加後、均一に攪拌し、更に攪拌下室温まで冷却して、目的のバ二シングクリームを得た。

製造例 2 2 (クレンジングクリーム）

サラシミツロウ 3 0 % 流動パラフィン 3 0 0 % セチルアルコール 2 0 % イソオクタン酸セチル 1 0 0 % トリエタノールァミン 0 2 % プロピレングリコール 5 0 % 酸化防止剤適量ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 5 % 香料量精製水残分合計 1 0 0. 0 % 上記各成分を製造例 2 1 に準じて添加し、適宜加温攪拌後クレンジングクリームを得た。

製造例 2 3 (化粧水）

( 9 E 0 ) 2. 0 % 感光素 2 0 1号 0. 0 0 1 % 香料 M 量濃グリセリン 5. 0 %

1 , 3—ブチレングリコール 3. 0 % ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 5 % 色素適量精製水残分合計 1 0 0. 0 %

( 1 ) ェチルァルコールにポリォキシェチレンラゥリルエーテル（ 9 E O) 、感光素 2 0 1号、ヒノキチォールー亜鉛錯体及び香料を加え、均一に混合した。（2 ) 精製水に、濃グリセリン及び 1， 3—プチレングリコールを加え、均一に溶解した。（ 3 ) 6 0 °Cで上記（ 1 ) で調製された混合物に上記（2 ) で調製された混合物を加え、均一に混合し、色素で着色し、化粧水を得た。製造例 7 (軟膏）

豚 8 B 2 0. 9 5 % サラシミッロウ 7. 0 % 親油性モノステァリン酸グリセリン 2. 0 % 白色ワセリン 6 0. 0 % ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 5 % 合計 1 0 0. 0 %

( 1 ) ヒノキチオール—亜鉛錯体を秤取し、これに豚脂の一部を加え、約 4 0 °Cに加温、均一に攪拌溶融した ( 2 ) 残りの豚脂、親油性モノステアリン酸グリセリンサラシミッロウ及び白色ヮセリンを水浴上で溶解した後攪拌して 8 0 °Cの混合物を形成した。（ 3 ) 乳鉢に上記 ( 2) で調製された混合物を少量ずつ添加しながら均一に攪拌し、約 4 0 °Cになるまで攪拌下冷却した。（4 ) 次いで、上記（ 1 ) で調製された混合物を約 4 0°Cで添加した後、固まるまでよく攪拌し、目的の軟膏を得た。製造例 2 4 (ポンプ用消毒剤）

ヒノキチオール—亜鉛錯体 0. 0 5 g 9 9. 5 %エタノール 7 0. 0 g 精製水にて全量 0 0. 0 g 製造例 2 5 (ペット用シャンプー）ラウロイノレメチルァラニンナトリウム

( 3 0 %) 4 0. 0 g ャシ油脂肪酸ァミドプロピルジチル

ァミノ酢酸ベタィン 0 g ヒノキチオール—亜鉛錯体 1 g

9 9. 5 %エタノール 0 g P H調整剤適量精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 2 6 (固形石鹼）

石鹼素地 3 0. 0 g 硬化ャシ油脂肪酸グリセリル硫酸

ナトリウム 5 0 0 g グリセリルモノステアレート 5 0 g セチルアルコール 5 0 g 二酸化チタン 0 5 g ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 5 g 香料、酸化防止剤及び金属イオン封鎖剤適量製造例 2 7 (器具洗浄剤）

ャシ油脂肪酸メチルテラニンナトリウム

( 2 5 %) 1 5 0 g ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチル

ァミノ酢酸ベタイン 5 0 g ヒノキチオール—亜鉛錯体のトリ

エタノールアミン塩 0 . 0 1 g ヒノキチオール一亜鉛錯体の

L —アルギニン酸塩 0 . 0 3 g p H調整剤適里精製水にて全量 1 0 0 . 0 g 製造例 2 8 (液状ランドリ用洗剤）

ポリオキシエチレンラウリルエーテル 3 5 0 g アルキルベンゼンスルホン酸トリ

エタノールアミン塩 1 5 0 g ヒノキチオール一亜鉛錯体の 2 —アミノ

— 2—メチル一 1 , 3 —プロパンジォ一ル塩 0 5 g 精製水にて全量 1 0 0 0 g 製造例 2 9 (液状ランドリ用洗剤）

アルキルベンゼンスルホン酸トリ

エタノールアミン塩 1 9 0 g ポリオキシエチレンドデシルエーテル 7 0 g メタキシレンスルホン酸ナトリウム 6 0 g クェン酸トリエタノールァミン 8 0 g カノレボキシメチルセノレロース 0 5 g ヒノキチオール一亜鉛錯体の 2 —アミノ

一 2 —メチルー 1 , 3 —プロパンジオール塩 0 g 蛍光増白剤及び香料適量精製水にて全量 1 0 0 . 0 g 製造例 3 0 (粉末伏ランドリ洗剤）

牛脂石鹼 4 0 g ヤシ油石験 1 0 g 無水炭酸ナトリウム 3 0 g 無水硫酸ナトリウム 0 g ヒノキチオール一亜鉛錯体 5 g ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体のナトリゥム塩 5 g 蛍光増白剤及び香料適量精製水にて全量 1 0 0 . 0 g 製造例 3 1 (浴室用洗浄剤）

ポリオキシエチレンアルキル（ C i ₂ )

エーテル 1 0 . 0 g クェン酸 5 . 0 g ポリプロピレングリコール 5 . 0 g

9 9 . 5 %エタノール 3 . 0 g ヒノキチオール一亜鉛錯体 0 . 0 5 g Ρ Η調整剤適量精製水にて全量 0 0 . 0 g 製造例 3 2 ( トイレ用洗浄剤）

9 . 5 g 塩化ナトリウム 7. 0 g ポリオキシエチレンアルキル（ c 丄 ₂)

エーテル 2. 0 g 增粘剤 2. 5 g ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 3 g p H調整剤適量精製水にて全量 1 0 0. 0 g 製造例 3 3 (清拭剤、エアゾル用原液）

流動パラフィン 0 3 g 蔗糖脂肪酸エステル 2 0 g

1， 3— ブチレングリコール 3 0 g ヒノキチオール一亜鉛錯体 0. 0 2 g

9 9. 5 %エタノール 5. 0 g 精製水にて全量 0 0. 0 g 参考例 2

下記試験例で用いられる供試菌のうち、 MR S Aは、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌であり、メチシリン耐性の他、キノロン耐性、ァミノ配糖体耐性、マクロライド耐性及びテトラサイクリン耐性を有するものである。また M S S Aは、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌である

MR S A (臨床分離株）及び M S S A (臨床分離株）にっき、ヒノキチオール、メチシリンナトリウム（ベニシリン系）、オフロキサシン（キノロン剤）、硫酸ゲンタマイシン（アミノ配糖体）、エリスロマイシン（マク口ライド）又は塩酸ミノサイクリン（テトラサイクリン）を存在させた培地上での最小発育阻止濃度（M I C ) を調べた。結果を第 1表に示す。

第 1 表

M I C 測定結果

単位： fi /m 1 上記第 1表の結果から、 M I C値が 1 2. 5以上の菌株を耐性菌とした。例えば M R S Aの場合、オフロキサシン 1 2. 5 β g / 1 (→キノ口ン耐性）、硫酸ゲンタマイシン〉 l O O z g Zm l (—アミノ配糖体耐性）、エリスロマイシン〉 1 0 O /z g Zm l (—マクロライド耐性）、塩酸ミノサイクリン 2 5 g m 1 (テトラサイクリン耐性）なので、キノロン耐性、アミノ配糖体耐性、マクロライド耐性、テトラサイクリン耐性を伴った M R S Aであると判断できる。

試験例 1 (抗菌試験）

試験薬剤としてヒノキチオール一銅錯体を使用した。また供試菌として S t a p h y l o c o c c u s ( S . ) a u r e u s 2 0 9 P J Cを使用した。

ヒノキチオール一銅錯体を 0. 8 %含有するエタノール溶液をまず調製し、これを 5 0 %エタノール液で順次 2倍希釈を行ない、ヒノキチオール一銅錯体を各種濃度で含有する各種溶液を調製した。

用いた培地は前培養液として卜リプトソーャブイヨン培地、菌希釈液は乾燥ブイヨン培地、平板用培地はハートインフユ一ジョン寒天培地であった。また培養温度は 3 7 °C、培養時間は 2 0時間であった。

常法に従い M I Cを求めた結果を第 2表に示す。

第 2 表

試験例 2 (抗菌試験）

チヱッカーボート法により、ヒノキチオール及び銅化合物の併用による効果を調べた。

試験薬剤として次のものを使用した。ヒノキチオール：ヒノキチオール S P、高砂香料工業

(株）製、 L o t . N o . 1 1 2 1 0 8

塩化銅（ I ) ：半井化学薬品（株）製、 L o t . N o . M 3 G 4 5 1 8

硫酸銅（ I ) · 5水和物：半井化学薬品（株）製、

L o t . N o . M 3 5 7 4 0

酸化銅（！I) ：半井化学薬品（株）製、 L o t . N o . M 3 F 3 8 7 6

また供試菌として下記に示す菌株を使用した。

S . a u r e u s 2 0 9 P J C

S . e p i d e r m i d i s A T C C 1 4 9 9 0

MR S A 1 (臨離株）

M S S A 1 (臨床分離株、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌）

菌液は、トリブトソーャブイヨン培地で前培養（培養温度： 3 7で、培養時間： 1 8〜 2 0時間）した細菌を、乾燥ブイヨン培地で希釈して、 1 0⁶ 個 111 1 に調製したものを使用した。

薬剤の作用濃度及び調製法は、次の通りである。即ち、ヒノキチオールを 5 %含有するアルコール溶液を滅菌蒸留水で希釈し、ヒノキチオール 0. 4 %液を調製し、この液を滅菌蒸留水で順次 2倍希釈を行ない、 2 0 0 0 β g / 1 . l O O O /z g /m l , 5 0 0 ^ g m 1 _% 2 5 0 g /m 1 . 1 2 5 g /m 6 2. 5 g / m l、 3 1. 3 ; g ^/m l、 1 5. 6 /z g m l、 7. 8 g Zm l、 3. 9 2 g 1 を含有する液を作製した。銅化合物が塩化銅（ I ) 又は硫酸銅（ I ) · 5 水和物の場合には、該銅化合物を 3. 2 %含有する水溶液を滅菌蒸留水で順次 2倍希釈して、 1 6 0 0 0 m l、 8 0 0 0 / g Zm l、 4 0 0 0 // g /m l

2 0 0 0 / g Zm l、 1 0 0 0 g Zm l、 5 0 0 g /m 1 ^ 2 5 0 g /m 1 2 5 ^ g / 1 ,

6 2. 5 g /m 1 . 3 1. 3 g Zm 1 を含有する水溶液を作製した。また銅化合物が酸化銅（I I) の場合には、該銅化合物を 3. 2 %量滅菌蒸留水に分散させた分散液を滅菌蒸留水で順次 2倍希釈して、 1 6 0 0 0 g /m 1 ^ 8 0 0 0 // g / 1 . 4 0 0 0 ^ g Zm l、 2 0 0 0 μ g /m 1 . 1 0 0 0 g /m 1 _N 5 0 0 /z g Zm l、 2 5 0 / g Zin l、 1 2 5 // g Zm l、 6 2. 5 g Zm l、 3 1. 3 /z g Zm l を含有する分散液を作製した。

ヒノキチオール及び銅化合物を併用する場合、上記 2 種の薬剤の作用濃度の 2 0倍液を各々 0. 5 m l と培地 9 m 1 をシャーレに添加し、平板培地を作製した。ヒノキチオール及び銅化合物をそれぞれ単独で使用する場合、ヒノキチオール又は銅化合物の 1 0倍液 l m 1 と培地 9 m l とをシャーレに添加し、平板培地を作製した。

ヒノキチオール及びノ又は銅化合物を種々の濃度に含 ' ませたハートインフュージョン平板培地を上述した方法で作製し、 1 0 ⁶ 個 Z m 1 に調製した各種菌液を接種し、 3 7 °Cで 2 0時間培養後、発育の有無を判定した。結果を下記第 3表〜第 1 4表に示す。以下の表において、

「十」は発育があることを示し、「一」は発育がないこ I とを示し、「土」はごくわずかに発育があることを示す。

第 3 表

S. aureus 209PJC

(^位： gZml)

第 4 表

&^: S. aureus 209PJC

位：; ugZml)

硫酸銅（ I ) · 5水和物

1600 800 400 200 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + キ 12.5 + + + + + + + チ 6.25

才 3.13

1 1.56 +

ル 0.78 + + + + + + + + +

0.39 + + + + + + + + + +

0 + + + + + + + + +

066 Τ :)丄 V s ιρ IUIJ ap i da 'S

拏 9 祟

+ + + + 一 + + + + +

+ + + -I- + + + + + + + 6ε Ό

+ + + + + + + + + + 81 Ό

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+ + + + + + + + +

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001

05 001 ooz 00 008 0091

(i i ) m q> m

3Γ d602 s ns i riB .s:

U6lO/P6dr/lDd LSO£HSS OAV 第 7 表

S. ep i de rmi d i s ATCC14990

( L： β g/m 1 )

11 硫酸銅（ I ) · 5水和物

1600 800 400 200 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + + キ + + + + + + チ 6.25

才 3.13

1.56 + + +

ル a 78 + + + + + + + + +

0.39 + + + + + + +

+ + + + + + + + 第 8 表

&^: S. epidermi di s ATCC14990 酸化 1 ( 1 ! )

1600 800 400 200 100 50 2S 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + + キ 12.5 + + + + + + + + チ 6.25

ォ 3.13

1 1.56

ル 0.78

0.39 + + T + + + + + + + +

0 + + + + + + + + + 第 9 表

¾«:MRSA1

難：/ gZml)

+ + + +

+ + +

+ + + 第 10 表 + + +

$¾®^:MRSA1 + + +

難：/ g/ml) 硫酸銅（ I ) · 5水和物 + + +

1600 800 400 200 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

50

ノ 25 + キ 12.5 + + + + + + チ 6.25

才 3.13

I 1.56 +

ル' 0.18

0.39 丄 +

丄第 11 表

^¾¾:MRSA1

第 12 表

^¾«:MSSA1 塩化 ¾ ( I )

誦 800 400 200 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + キ 12.5 + + + + + チ 6.25

ォ 3.13

1 1.56 +

ル 0.78 + + + + + + + + +

0.39 + + + + + + + + +

0 + + + + + + + 十第 13 表

M«:MSSA1

纖： gZml) 硫酸銅（ I ) · 5水和物

1600 800 400 200 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + キ 12.5 + + + + + + チ 6.25

ォ 3.13

56 + +

ル 0.78 + + + + + + + + +

0.39 + + + + + + + + + +

+ + + + + + + + + 第 14 表

{¾ffi«:MSSAl

纖： gZml) 酸化 i ( I I )

1600 800 400 200 50 25 12.5 6.25 3.13 0

200

100

ヒ 50

ノ 25 + + キ 12..5 + + + + + + + + + チ 6.25

ォ 3.13

1 1.56

ル 0.78 + + + + + + + + + + +

0.39 + + + + + + + + + + +

0 + + + + + + + + + + 上記第 3表〜第 1 4表から明らかなように、ヒノキチオールと銅化合物とを併用することにより、抗微生物活性が顕著に向上することがわかる。

試験例 3 (抗菌試験）

試験薬剤として上記参考例で得られたヒノキチオール一亜鉛錯体を使用した。また供試菌として

S t a p h y l o c o c c u s ( S . ) a u r e u s

2 0 9 P J Cを使用した。

ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体を 0. 8 %含有するェタノ —ル溶液をまず調製し、これを 5 0 %エタノール液で順次 2倍希釈を行ない、ヒノキチオール—亜鉛錯体を各種濃度で含有する各種溶液を調製した。

用いた培地は前培養液としてトリプトソーャブイヨン培地、菌希釈液は乾燥ブイヨン培地、平板用培地はハートインフュージョン寒天培地であった。また培養温度は 3 7 °C、培養時間は 2 0時間であった。

常法に従い M I Cを求めた結果を第 1 5表に示す。

5 表

試験例 4 (抗菌試験）試験薬剤として上記参考例で得られたヒノキチオール一亜鉛錯体を使用した。また供試菌として

P i t y r o s p o r u m o v a l e I F 0 0 6 5 6を使用した。

ヒノキチオール一亜鉛錯体を 0. 8 %含有するェ夕ノール溶液をまず調製し、これを 5 0 %エタノール液で順次 2倍希釈を行ない、ヒノキチォ一ルー亜鉛錯体を各種濃度で含有する各種溶液を調製した。

用いた培地は前培養液として 5 %ポリオキシエチレン ( 5 ) モノォレイン酸グリセリル加ポテトデキストロース斜面培地、菌希釈液はモノォレイン酸ポリオキシェチレン（ 2 0 ) ソルビタンを 0. 7 %添加した生理食塩水平板用培地は 5 %ポリオキシエチレン（ 5 ) モノォレイン酸グリセリル加ポテトデキストロース寒天培地であつた。また培養温度は 3 8 °C、培蹇時間は 4 8時間であつ常法に従い M I Cを求めた結果を第 1 6表に示す第 16 表供試菌 M I C (β g m l )

P. Ova 1 e I FO 0656 12. 5 試験例 5 (抗菌試験）

試験薬剤としてヒノキチオール銅及びヒノキチオールを使用した。また供試菌として

S t a p h y l o c o c c u s ( S . ) a u r e u s 2 0 9 P J Cを使用した。トリブトソーャブイヨン培地で前培養（ 1 8〜 2 0時間、 3 7 °C) し、ハートインフュージョンブイヨン培地で調整した対数増殖期の上記供試菌液に所定の濃度になるように調製しておいた薬剤を作用させ、 3 7 °Cで振盪培養を行ない、経時的に生菌数を測定した（希釈液： S C D L P培地、培地： S C D L P寒天培地、培養時間： 2 4〜 4 8時間）。

薬剤の調製法は次の通りである。即ち、ヒノキチォールはヒノキチオール（高砂香料（株）製）を 2 %含有するエタノール溶液を滅菌蒸留水で希釈し、作用濃度の 1 0倍及び 2 0倍溶液を調製した。ヒノキチオール銅はヒノキチオール銅（高砂香料（株）製）を 2 %含有するエタノール溶液をまず調製し、これを滅菌蒸留水で希釈して作用濃度の 1 0倍及び 2 0倍溶液を調製した。ヒノキチオール及びヒノキチオール銅をそれぞれ単独で用いる場合には、上記 1 0倍液 0. 8 m l に菌液 7. 2 m l を添加し、ヒノキチオール及びヒノキチオール銅を併用する場合には、上記 2 0倍液各々 0. 4 m l に菌液 7. 2 m l を添加し、コントロールでは、滅菌蒸留水 0. 8 m l に菌液 7. 2 m l を添加した。

経時的な生菌数を求め、その結果を第 1図〜第 3図に示す。

生菌数の経時的変化を示すグラフである第 1図〜第 3 図から明らかなように、ヒノキチォール銅とヒノキチォ一ルとを併用することにより、抗菌活性が顕著に向上することがわかる。

図面の簡単な説明

第 1図、第 2図及び第 3図は、生菌数の経時的変化を示すグラフである。

Claims

請求の範囲

1. ヒノキチォ一ルー銅錯体及びその塩から選ばれた少なくとも 1種又はヒノキチオール一亜鉛錯体及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を患者に投与すること力、らなる抗微生物方法。

2. 微生物がカビを除く菌である請求の範囲第 1項記載の方法。

3. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を患者に投与することからなる抗微生物方法。

4. 微生物が力ビを除く菌である請求の範囲第 3項記載の方法。

5. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で l〜2 0m g 体重 1 k g 程度で 1〜 3回に分けて投与する請求の範囲第 3項記載の方法。

6. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で 1〜2 O m gZ体重 1 k g 程度で 1〜 3回に分けて投与する請求の範囲第 4項記載の方法。

7. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を

0. 0 5〜 9 9. 9 5重量％程度使用し、ヒノキチォール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 9 9. 9 5 〜 0. 0 5重量％程度使用する請求の範¾第 5項又は第 6項記載の方法。

8. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 1 0 〜 9 9. 9 5重量％程度使用し、ヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 9 0〜 0. 0 5重量程度使用する請求の範囲第 7項記載の方法。

9. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 5 0 〜 9 9. 9重量％程度使用し、ヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 5 0〜 0. 1重量％程度使用する請求の範囲第 8項記載の方法。

1 0. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（11) 、塩化アンモニゥム銅（Π) 、臭化銅（ I ) 、臭化銅（Η)、臭化銅（ I ) 一硫化ジメチル錯体、炭酸銅（II) 、クェン酸銅（Π) 、シアン化銅（ I ) 、 4— シクロへキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（Π) 、二燐酸銅（Π) 、弗化銅（Π) 、蟻酸銅（H) 、グルコン酸銅（】1) 、水酸化銅（H) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅 (11) 、ォレイン酸銅（Π) 、蓚酸銅（11) 、酸化銅 ( I I) 、燐酸銅（ 11) 、フタル酸銅（ I I) 、塩化力リゥム銅（ I I) 、ロダン化銅（ I ) 、硫酸銅（Π) 、硫化銅 ( I I) 、チォシアン酸銅（ I ) 、銅クロロフィル、ヒノキチオール銅、ニコチン酸銅化合物、ニコチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸アミド銅化合物並びにァミノ酸及びべプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 3項、第 4項、第 5項、第 6項、第 8項又は第 9項に記載の方法。

1 1. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（ I I) 、塩化アンモニゥム銅（ I I) 、臭化銅（ I ) 、臭化銅（11)、臭化銅（ I ) 一硫化ジメチル錯体、炭酸銅 U I) 、クェン酸銅（Π) 、シアン化銅（ I ) 、 4 ーシクロへキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（ 11) 、二燐酸銅（ Π) 、弗化銅（Π) 、蟻酸銅（ Π) 、グルコン酸銅（ Π) 、水酸化銅（Π) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅 ( 11) 、ォレイン酸銅（I I) 、蓚酸銅（Π) 、酸化銅 ( I I) 、燐酸銅（Π) 、フタル酸銅（ I I) 、塩化力リウム銅（I I) 、ロダン化銅（ I ) 、硫酸銅（ Π) 、硫化銅 (】】）、チォシアン酸銅（ I ) 、ヒノキチオール銅、二コチン酸銅化合物、ニコチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸ァミド銅化合物並びにァミノ酸及びぺプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 3項、第 4項、第 5項、第 6項、第 8項又は第 9項に記載の方法。

1 2. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（Π) 、クェン酸銅（Π) 、グルコン酸銅（II) 、酸化銅（H) 、硫酸銅（ Π ) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 3項、第 4項、第 5項、第 6 項、第 8項又は第 9項に記載の方法。

1 3. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酸化銅（11) 、硫酸銅（ π ) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 3項、第 4項、第 5項、第 6項、第 8項又は第 9項に記載の方法。

1 4. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を患者に投与することからなる、患者における微生物に起因する感染症を治療する方法であつて、銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（11) 、塩化ァンモニゥム銅（Π) 、臭化銅（ I ) 、臭化銅（11)、臭化銅（ I ) 一硫化ジメチル錯体、炭酸銅（H) 、クェン酸銅（ Π) 、シアン化銅（ I ) 、 4ーシクロへキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（Π) 、二燐酸銅（H) 、弗化銅（11) 、蟻酸銅（Π) 、ダルコン酸銅（Π) 、水酸化銅（Π) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅（H) 、ォレイン酸銅（H) 、蓚酸銅（ I I) 、酸化銅（ 11) 、燐酸銅（ Π) 、フタル酸銅（ I I) 、塩化カリウム銅（ I I) 、ロダン化銅（ I ) 、硫酸銅（ I I) 、硫化銅（ Π) 、チオシアン酸銅（ I ) 、ヒノキチオール銅、ニコチン酸銅化合物、ニコチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸アミド銅化合物並びにアミノ酸及びぺプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 3項記載の方法。

1 5. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酸化銅（ H) 、硫酸銅（ Π) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも

1種である請求の範囲第 1 4項に記載の方法。

1 6. 塩化銅（ I ) 、酢酸銅（H) 、塩化アンモニゥム銅（I I) 、臭化銅（ I ) 、臭化銅（！ 1)、臭化銅（ I ) 一硫化ジメチル錯体、炭酸銅（ I I) 、クェン酸銅（Π) 、シァン化銅（ I ) 、 4 ーシク口へキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（I I) 、二燐酸銅（ H) 、弗化銅（I I) 、蟻酸銅（ I I) 、グルコン酸銅（ Π) 、水酸化銅（Π) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅（】 1) 、ォレイン酸銅（Π) 、蓚酸銅（Π) 、酸化銅（ I !) 、燐酸銅（ I I) 、フタル酸銅（Π) 、塩化力リウム銅（H) 、ロダン化銅（ I ) 、硫酸銅（I I) 、硫化銅（ Π) 、チォシアン酸銅（ I ) 、ヒノキチオール銅、ニコチン酸銅化合物、二コチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸アミド銅化合物並びにアミノ酸及びペプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体から選ばれた少なくとも 1種の銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれ 5 た少なくとも 1種とを含有することを特徵とする化粧品組成物。

1 7. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で組成物中 0. 0 0 0 1〜 9 9. 9重量％程度使用する請求の範囲第 1 6項記載の

ID 化粧品組成物。

1 8. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で組成物中 0. 0 0 1〜 3 0重量％程度使用する請求の範囲第 1 6項記載の化粧品組成物。

¹⁵ 1 9. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なぐとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 0. 0 5〜 9 9. 9 5重量％程度使用し、ヒノキチォール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 9 9. 9 5 〜 0. 0 5重量％程度使用する請求の範囲第 1 8項記載

20 の化粧品組成物。

2 0. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 1 0〜 9 9. 9 5重量％程度使用し、ヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 9 0〜 0. 0 5 重量％程度使用する請求の範囲第 1 9項記載の化粧品組成物。

2 1. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 5 0〜 9 9. 9重量％程度使用し、ヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 5 0〜 0. 1 重量 %程度使用する請求の範囲第 2 0項記載の化粧品組成物。 2 2. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（ 1 !) 、クェン酸銅（ I I) 、グルコン酸銅（Π) 、酸化銅（ 1 !) 、硫酸銅（ H) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 1 6項〜第 2 1項のいずれかに記載の化粧品組成物。

2 3. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酸化銅（ Π) 、硫酸銅（11) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 1 6項〜第 2 1項のいずれかに記載の化粧品組成物。

2 4. 塩化銅（ I ) 、酢酸銅（I I) 、塩化アンモニゥム銅（I I) 、臭化銅（ I ) 、臭化銅（11)、臭化銅（ I ) 一硫化ジメチル錯体、炭酸銅（H) 、クェン酸銅（Π) 、シァン化銅（ I ) 、 4 ーシクロへキシル酪酸銅、塩化二アンモニゥム銅（II) 、二燐酸銅（Π) 、弗化銅（Π) 、蟻酸銅（】1) 、グルコン酸銅（Π) 、水酸化銅（II) 、沃化銅（ I ) 、ナフテン酸銅、硝酸銅（ Π) 、ォレイン酸銅（H) 、蓚酸銅（11) 、酸化銅（H) 、燐酸銅（II) 、フタル酸銅（】1) 、塩化カリウム銅（ Π) 、ロダン化銅（ I ) 、硫酸銅（11) 、硫化銅（II) 、チォシアン酸銅（ I ) 、ヒノキチオール銅、ニコチン酸銅化合物、二コチン酸アミド銅化合物、ピコリン酸銅化合物、ピコリン酸アミド化合物並びにアミノ酸及びペプチドから選ばれる化合物の銅塩乃至銅錯体から選ばれた少なくとも

1種の銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種とを用いる化粧品の防腐方法。

2 5. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で組成物中 0. 0 0 0 1〜 9 9. 9重量％程度使用する請求の範囲第 2 4項記載の化粧品の防腐方法。

2 6. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を合計量で組成物中 0. 0 0 1〜

3 0重量％程度使用する請求の範囲第 2 5項記載の化粧

□の防腐方法

2 7. 銅化合物とヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種との合計量に対して、銅化合物を 5 0〜 9 9. 9重量％程度使用し、ヒノキチオール及びその塩から選ばれた少なくとも 1種を 5 0〜 0. 1重量 %程度使用する請求の範囲第 2 6項記載の化粧品の防腐方法。

2 8. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酢酸銅（H) 、クェン酸銅（Π) 、ダルコン酸銅（】！）、酸化銅（II) 、硫酸銅（！ 1 ) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも 1種である請求の範囲第 2 4項〜第 2 7項のいずれかに記載の化粧品の防腐方法。

2 9. 銅化合物が塩化銅（ I ) 、酸化銅（ Π) 、硫酸銅（H) 及びヒノキチオール銅から選ばれた少なくとも

1種である請求の範囲第 2 4項〜第 2 7項のいずれかに記載の化粧品の防腐方法。