UA129751C2 - Композиція, що включає пепстатин та альгінову кислоту або її сіль, та її застосування - Google Patents

Abstract

Винахід стосується водної композиції для офтальмологічного застосування, що включає пепстатин та альгінову кислоту або її сіль, а саме для лікування захворювання або симптому очного яблука та/або періокулярної ділянки, пов'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину у слізній рідині.

Description

Винахід стосується композиції переважно для офтальмологічного використання, що включає пепстатин, альгінову кислоту або її сіль та, необов'язково, гіалуронову кислоту або її сіль, та до застосування такої композиції у способі для лікування захворювання або симптому, зв'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину в екстраезофагеальних ділянках, переважно захворювання або симптому очного яблука та/або периокулярної ділянки, пов'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину в слізній рідині, у суб'єктів, які цього потребують, наприклад, у суб'єктів із гастроезофагеальним рефлюксом та/або зворотним потоком шлункової рідини зі шлунку до екстраезофагеальної області (ларингофарингеальний рефлюкс або екстраезофагеальний рефлюкс).

Гастроезофагеальний рефлюкс або гастроезофагеальна рефлюксна хвороба (скорочено

ГЕРХ) - це парафізіологічний стан, що характеризується зворотним потоком (зі шлунка в стравохід) шлункового вмісту або кислої шлункової рідини (рН 1-2), що, наприклад, включає пепсин, соляну кислоту, шлунковий сік, сік дванадцятипалої кишки та кислі рідини шлунка.

Таким чином, у хворих на ГЕРХ зворотний потік шлункового вмісту зі шлунка в стравохід, навіть у дуже невеликих кількостях, викликає подразнення епітелію стравоходу, що спричинює відчуття печіння в загрудинній області та болі при ковтанні, а також збільшення карієсу (внаслідок руйнування зубної емалі під впливом шлункової кислоти), блювання після їжі, відчуття кислотності у верхній частині стравоходу та у глотці.

Гастроезофагеальний рефлюкс є дуже поширеним захворюванням серед населення, що часто є пов'язаним з ожирінням, цукровим діабетом, підвищеною секрецією шлунка, вагітністю, палінням, алкоголем та грижею діафрагми.

За відсутності ендоскопічного пошкодження, видимого під час гастроскопії, шлунковий рефлюкс визначається як неерозивний рефлюкс або неерозивна рефлюксна хвороба (скорочено НЕРХ), оскільки рефлюкс кислотного вмісту не викликає езофагіту.

Ларингофарингеальний рефлюкс (скорочено ЛФР) або ларингофарингеальна рефлюксна хвороба або, альтернативно, екстраеєзофагеальний рефлюкс являють собою різні терміни, які використовуються для визначення симптомів, розладів або захворювань, що викликаються зворотним потоком шлункового вмісту зі шлунка в екстраезофагеальну область. Зазначеними екстраеєзофагеальними ділянками можуть бути верхні дихальні шляхи, очне яблуко (або око), о перитокулярна область (наприклад, повіка, кон'юнктива та слізний апарат) та слуховий апарат, зокрема, євстахієва труба та середнє вухо.

У контексті даного винаходу периокулярна ділянка визначається як область навколо ока або відносно контуру ока, така як, наприклад, повіка, кон'юнктива та слізний апарат. Повіка являє собою шкірно-перетинчасте утворення, що покриває око. Кон'юЮнктива являє собою слизову оболонку, яка вкриває очне яблуко та внутрішню частину повік. Сльозовий апарат являє собою сукупність секреторної системи слізної плівки, яка включає слізну залозу та апарат, що забезпечує її відтік. До апарату, який забезпечує її відтік, входять слізні шляхи, що складаються з: слізних точок, слізного мішка та слізних каналів або слізних шляхів, або носослізного протоку.

Коли шлунковий вміст або його частина (наприклад, пепсин) повертається зі шлунка, то на рівні позастравохідних областей виникають явища запалення та/або подразнення, які можуть включати одну або більше із зазначених позастравохідних областей, наприклад, верхні дихальні шляхи, ротову порожнину, порожнину вуха, очне яблуко (або око) та/або периокулярну область (наприклад, повіку, кон'юнктиву та слізний апарат).

Два захворювання, ГЕРХ та ЛФР або екстраезофагеальний рефлюкс, можуть співіснувати одночасно або з'являтися окремо.

У випадку, коли ГЕРХ та ЛФР співіснують одночасно, то крім розладів у стравохідній ділянці, пацієнти з ГЕРХ можуть також страждати від розладів або захворювань в одній або кількох екстраезофагеальних областях.

Якщо ГЕРХ та ЛФР не співіснують одночасно, розлади або симптоми, що відчуваються в одній або кількох позастравохідних областях, також можуть виникнути у суб'єктів, які не мають

ГЕРХ, після зворотного потоку шлункового вмісту зі шлунка до позастравохідної області.

У світлі викладеного вище, люди з ЛФР (ерозивним або неерозивним) або ЛФР (або екстраезофагеальним рефлюксом) можуть страждати, наприклад, від синдрому слізної дисфункції (скорочено ССД) або захворювання поверхні ока (ЗПО), альтернативно визначене як синдром сухого ока. Власне кажучи, у слізних виділеннях суб'єктів з гастроезофагеальним рефлюксом було виявлено наявність пепсину (компонента шлункового вмісту).

Синдром слізної дисфункції (ССД) являє собою захворювання очей, яке полягає в кількісній та/або якісній зміні слізної плівки, яка в основному виконує функцію зволоження та захисту передньої поверхні очного яблука. Слізна плівка має виконувати наступні важливі функції:

ї) живлення: сльози дозволяють забезпечити правильне постачання киснем та поживними речовинами для відповідного обміну речовин клітин очної поверхні; ії) антимікробний вплив: наявність антитіл та ферментів у слізній плівці забезпечує захисну дію від зовнішнього впливу; ії) очищення; та ім) змащування.

Таким чином, зміна кількості/якості слізної плівки призводить до піддання очного яблука більшому тертю (що визначається рухом повік) та до більшого ризику виникнення інфекцій.

Синдром слізної дисфункції є одним із найпоширеніших захворювань в офтальмології та його вплив є високим у популяції людей середнього та похилого віку.

У контексті даного винаходу вирази "синдром слізної дисфункції" (ССД) та "синдром сухого ока" використовуватимуться як взаємозамінні.

Іншим захворюванням або симптомом, який може виникнути у пацієнтів із ГЕРХ, ЛФР або екстраезофагеальним рефлюксом, є запалення очного яблука або запалення периокулярної ділянки, зокрема кон'юнктивіт, тобто запалення, яке вражає кон'юнктиву, спричиняючи почервоніння очей та викликаючи характерні червоні очі. Кон'юнктивіт також вражати дорослих, дітей та новонароджених.

Часто розлади або симптоми, або захворювання в екстраезофагеальних ділянках таких, як очне яблуко та периокулярна область, аналізуються, діагностуються та/або лікуються без урахування можливої кореляції з феноменом зворотного потоку шлункового вмісту, наприклад, пепсину, зі шлунка до екстраезофагеальних ділянок.

Як наслідок, багато із зазначених захворювань або симптомів очного яблука та/або периокулярної ділянки, таких як, наприклад, синдром слізної дисфункції (ССД), кон'юнктивіт або запалення очей, або периокулярне запалення, лікуються продуктами, які зараз є на ринку (наприклад, стероїдні продукти), які специфічно не лікують причину, яка викликає зазначені захворювання або симптоми, а лише забезпечують тимчасове полегшення; наприклад, зазначені продукти не можуть ефективно лікувати присутність пепсину в слізній рідині, очному яблуці та/або периокулярній області.

ВАГЕЗТКА22І АГЕЗЗАМОКА ЕТ АГ: "А пему Іпегареціїс арргоасі Тог Те Огу Еуе Зупаготе іп о раїепів м/йп Іагупдорпагупдеа! геПйих: йгеї даїа" являє собою попереднє дослідження шляхом порівняння двох методів лікування у пацієнтів із синдромом сухого ока та ЛФР. Пацієнти отримували очні краплі Гастрофтал та таблетки Гастрофтал, або тільки очні краплі гіалуронової кислоти (Атлантіс) протягом З місяців. Очні краплі Гастрофтал не містять пепстатину.

МО 2008/039984 А2 описує сполуки, що є інгібіторами катепсину 0, який є членом підродини аспартилпротеази, та фармацевтичні композиції, які містять зазначені інгібітори. Такі сполуки мають нейротрофічну активність, вони є корисними для лікування та профілактики нейрональних розладів, таких як латеральний аміотрофічний склероз, розсіяний склероз та м'язова дистрофія. Зазначена фармацевтична композиція містить альгінову кислоту або її сіль. 5 4 339 439 А демонструє високу противиразкову активність, яку отримують у теплокровних тварин при одночасному введенні етинтідину, антагоніста рецептора гістаміну Н2, та пепстатину, комплексоутворювача пепсину.

Технічна проблема, яку розглядає та вирішує даний винахід, полягає у створенні композицій або сумішей для офтальмологічного застосування або для назального застосування, або для використання в ротовій порожнині у способах профілактичного та/або радикального лікування захворювань або симптомів у позастравохідних ділянках, переважно захворювань або симптомів очного яблука та/або периокулярної ділянки таких, як, наприклад, синдром слізної дисфункції (ССД), кон'юнктивіт, запалення очей або периокулярне запалення, що є пов'язаним з або таким, що походить від присутності пепсину в зазначених екстраезофагеальних областях, переважно в слізній рідині, головним чином, внаслідок шлункового рефлюксу в стравохідній та/або позастравохідній області.

Крім того, технічна проблема, яку розглядає та вирішує даний винахід, полягає у створенні композицій або сумішей для офтальмологічного або назального застосування, або в ротовій порожнині у зазначених методах лікування, які є стабільними, ефективними, легкими для введення/застосування, добре переносяться та в основному не спричинюють побічних ефектів.

Після екстенсивних та поглиблених досліджень та розробок заявник розглянув та вирішив зазначені вище технічні проблеми, забезпечивши композиції або суміші (зокрема, композиції або суміші згідно з винаходом) для офтальмологічного використання або для назального застосування, або для використання в ротовій порожнині, що включають пепстатин та альгінову кислоту або її сіль і, необов'язково, гіалуронову кислоту або її сіль, як описано нижче. 60 Переважно, композиції та суміші згідно з винаходом не містять стероїдних сполук.

Крім того, що композиції або суміші для офтальмологічного застосування згідно з винаходом на основі пепстатину та альгінової кислоти або її солі та, необов'язково, гіалуронової кислоти або її солі, є ефективними при лікуванні екстраезофагеальних розладів, переважно зазначених запальних очних та/або периокулярних розладів, вони також є стабільними, простими у введенні/застосуванні, добре переносяться та практично не мають побічних ефектів.

Зокрема, комбінація пепстатину та альгінової кислоти або її солі діє ефективно та синергетично для зниження та усунення пепсину із слізної рідини. Ця ефективність зумовлена, головним чином, інгібіторною дією пепстатину, навіть у низьких концентраціях, та одночасною дією альгінату як секвестранта пепсину за рахунок неспецифічного зв'язування та як змащувального агента.

Крім того, додання необов'язкового змащувального агента, переважно гіалуронової кислоти або її солі, забезпечує композиції згідно з даним винаходом в'язкоеластичну активність.

Крім того, офтальмологічні композиції або суміші згідно з даним винаходом переважно не містять стероїдних речовин.

Нарешті, композиції для офтальмологічного застосування згідно з даним винаходом прості у приготуванні та економічні.

Ці та інші цілі, які стануть очевидними з детального опису, який надається далі, досягаються з допомогою сумішей та композицій згідно з даним винаходом завдяки технічним характеристикам, заявленим у прикладеній формулі винаходу.

ФІГУРИ

Фіг. 1: спектри поглинання контролю та зразка (пепсин) без інгібувальної речовини (пепстатину); умови: пепсин 0,02 95, гемоглобін 2 95, рН 1,5, температура 37 "С.

Фіг. 2: спектри поглинання контролю та зразка пепсину у присутності пепстатину (пепстатин: суспензія в НгО) та порівняння зі спектрами, що стосуються вільного пепсину за відсутності пепстатину.

Фіг. 3: спектри поглинання контролю (пепсин без пепстатину) та зразка (пепсин « пепстатин) (пепстатин: розчинений в ЕН та розведений у воді).

Фіг. 4: спектри активності пепсину в присутності водного розчину, що включає альгінат магнію; умови: пепсин 0,02 95, гемоглобін 2 95, 195 водний розчин, до складу якого входить о альгінат магнію; рН 1,5, температура 37 "С.

Фіг. 5: спектри поглинання контролю (пепсин за відсутності пепстатину, але у присутності водного розчину, що містить альгінат магнію) та зразків пепсину в присутності водного розчину, що містить альгінат магнію та пепстатин (пепстатин розведений у водному розчині альгінату після розчинення в ЕТОН).

ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ

Об'єктом даного винаходу є композиція, що включає (ї) суміш М активних компонентів, що включає або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину або його фармацевтично прийнятної солі, переважно солі лужного або лужноземельного металу (наприклад, магнію, натрію, калію або кальцію), та (Б) альгінової кислоти або її фармацевтично прийнятної солі, переважно альгінату лужного або лужноземельного металу (наприклад, магнію, натрію, калію або кальцію); та, необов'язково, зазначена композиція містить (її) принаймні одну добавку та/або ексципієнт фармацевтичного або офтальмологічного класу.

Пепстатин (інша назва пепстатин А) є інгібітором аспартилпротеази. Це гексапептид, що містить амінокислоту статин (5іа, (35, 45)-4-аміно-3-гідрокси-б-метилгептанова кислота), який має послідовність ізовалерил-МаІ-МаІ-5(а-АІа-5їга (Іма-МаІ-МаІ-5їа-АІа-5іа) (приклад САБ Мо: 26305-03-3). Пепстатин являє собою молекулу, яку виробляють бактерії актиноміцети. При нейтральному значенні рН (забуферений) пепстатин має кислу форму та його можна розчинити в спирті (наприклад, етанолі) та потім розвести у воді. У формі солі пепстатин можна розчинити у воді з нейтральним значенням рН. Переважно, для приготування сумішей або композицій згідно з даним винаходом, що включають (а), (Б) та, необов'язково, (с) та/або інші компоненти, описані в даному винаході, пепстатин використовується як такий, тобто пепстатин не у формі солі.

Разом з (а) та, необов'язково, (с) талабо іншими компонентами, описаними в даному винаході, альгінова кислота, що міститься в суміші або композиції згідно з даним винаходом, є переважно альгіновою кислотою (наприклад, САЄ Мо 9005-32-7) із середньою молекулярною масою в діапазоні від приблизно 50 кДальтон (кКДа) до приблизно 800 кДа; переважно приблизно від 100 кДа до приблизно 600 кДа; переважно приблизно від 200 кДа до приблизно 400 кДа, наприклад, до приблизно 240 кДа (атомних одиниць маси). 60 Переважно, зазначену (Б) альгінову кислоту або її сіль отримують із морських водоростей.

У переважному варіанті здійснення суміш М активних компонентів, що входить до складу композиції згідно з винаходом, містить або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину або його солі, (Б) альгінової кислоти або її солі, переважно солі лужного металу або лужноземельного металу (наприклад, магнію, натрію, калію або кальцію), переважно альгінату магнію, та (с) змащувального агента, переважно гіалуронової кислоти або її фармацевтично прийнятної солі, переважно гіалуронату лужного або лужноземельного металу (наприклад, магнію, натрію, калію або кальцію), ще більш переважно гіалуронату натрію.

Разом із (а) та (Б) згідно з будь-яким із варіантів здійснення даного винаходу зазначений змащувальний агент (с), що необов'язково входить до складу суміші М композиції згідно з даним винаходом, може бути вибраний із: гіалуронової кислоти або її солі, карбоксиметилцелюлози, гіпромелози, ксантанової камеді, полівінілпіролідону (ПВП), полівінілового спирту та їх суміші; переважно гіалуронової кислоти або її солі.

Разом з (а) та (б) та, необов'язково з іншими компонентами, описаними в даному винаході, гіалуронова кислота або її сіль (наприклад, гіалуронат натрію), що входить до складу суміші або композиції згідно з даним винаходом, переважно є або походить від лінійної або розгалуженої гіалуронової кислоти із середньою молекулярною масою, що знаходиться в діапазоні від приблизно 200 кДа до приблизно 5000 кДа; переважно від приблизно 1000 кДа до приблизно 3000 кДа; переважно приблизно від 1500 кДа до приблизно 2000 кДа.

Згідно з бажаним прикладом композиція згідно з даним винаходом містить або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину; (Б) альгінату лужного або лужноземельного металу, переважно альгінату магнію, (с) гіаалуронату лужного або лужноземельного металу, переважно гіалуронату натрію та офтальмологічної добавки та/або ексципієнтів.

Відповідно до більш переважного прикладу композиція згідно з винаходом містить або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину, (Б) альгінату магнію, (с) гіалуронату натрію та офтальмологічних добавок та/або ексципієнтів.

Згідно з наступним кращим прикладом композиція даного винаходу містить або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину, (Б) альгінату магнію з альгінової кислоти, отриманої з морських водоростей із середньою молекулярною масою від приблизно 200 кДа до приблизно 400 кДа, наприклад, до приблизно 240 кДа, (с) гіалуронату натрію із середньою о молекулярною масою від приблизно 1500 кДа до приблизно 2000 кДа, та офтальмологічних добавок та/або ексципієнтів.

Крім (а) пепстатину, (Б) альгінової кислоти або її солі та, необов'язково (с) змащувального агента, переважно гіалуронової кислоти або її солі, суміш М, що входить разом з добавками в композицію згідно з даним винаходом, може додатково містити принаймні один додатковий активний компонент (4), вибраний із групи, що складається з: рослинних екстрактів (наприклад, екстрактів зеленого чаю (Сатеїйа 5іпепвів), амінокислот, вітамінів групи А, В, С, О та/або Е та їх суміші.

Композиції згідно з даним винаходом, що містять зазначену суміш М, що включає да), (Б) та, необов'язково (с), можуть містити принаймні одну прийнятну фармацевтичну або харчову добавку та/або допоміжну речовину, тобто речовину, що не має терапевтичної активності, придатну для фармацевтичного або харчового використання. У контексті даного винаходу прийнятні добавки та/або ексципієнти для фармацевтичного або харчового використання включають усі допоміжні речовини, відомі фахівцю в даній галузі техніки для приготування композицій у напівтвердій або рідкій формі, такі, як, наприклад, розріджувачі, розчинники (включаючи воду), солюбілізувальні агенти, підкислювальні агенти, загусники, підсолоджувальні агенти, змащувальні агенти, поверхнево-активні речовини, консерванти, стабілізатори, буфери для стабілізації рН та їх суміші.

Композиція та суміш М згідно з даним винаходом, що містить (а), (Б) та, необов'язково (с), згідно з будь-яким із описаних варіантів здійснення переважно не містить стероїдної сполуки.

Відповідно до одного аспекту винаходу суміші або композиції згідно з даним винаходом не є рецептованими для перорального застосування.

Композиція для офтальмологічного застосування винаходу, що включає (а), (Б) та, необов'язково (с) (відповідно до будь-якого з описаних варіантів здійснення), може бути в рідкій формі такій, як очні краплі на водній основі, та демонструє високу стабільність (переважно 2 (більше або дорівнює) 24 місяцям), однорідність та відсутність утворення преципітатів у рідкій формі, переважно очні краплі на водній або масляній основі, або у напівтвердій формі, переважно у вигляді мазі, бальзаму, гелю або крему.

Композиція згідно з винаходом у рідкій формі, наприклад, у формі очних крапель, може містити пепстатин у молярній концентрації (М), що знаходиться в діапазоні від 0,1 нМ (0,0001

А

МКМ) до 50 мкМ; переважно від 0,01 мкМ до 5 мкМ; переважно від 0,5 мкМ до 2 мкМ (наприклад, приблизно 1 мкм).

Відповідно до одного аспекту винаходу композиція згідно з винаходом може включати у відсотках (96) за вагою відносно загальної ваги композиції: (а) пепстатин як такий від 0,0000001 95 (1х1085) до 0,001 95 (1х103 5), переважно від 0,000001 95 (1х1062) до 0,0003 95 (3х10- 5), більш переважно від 0,00003 95 (3х10-55) до 0,0001 905 (1 х10- 5); (р) альгінову кислоту або її сіль, переважно альгінат магнію від 0,01 95 до 10 95, переважно від 0,05 95 до 2 95, більш переважно від 0,05 95 до 0,4 95, наприклад 0,2 95; та, необов'язково, (с) змащувальний агент, переважно гіалуронову кислоту або її сіль, більш переважно гіалуронат натрію у кількості від 0,01 95 до 10 95; переважно від 0,05 95 до 2 95; більш переважно від 0,05 95 до 0,30 95, наприклад 0,15 95.

У контексті даного винаходу вираз "композиція" використовується для позначення фармацевтичної композиції або композиції для медичного пристрою відповідно до

Європейського регламенту щодо медичних пристроїв (ЕО 2017/745 -(МОК), Директива 93/42/ЕЕС- (МОВІ).

Об'єктом даного винаходу є композиції та суміш М згідно з даним винаходом, що включає (а), (б) та, необов'язково, (с) та/"або добавки/допоміжні речовини відповідно до будь-якого з описаних варіантів здійснення винаходу, для використання як лікарського засобу.

Об'єктом даного винаходу є композиції та суміш М згідно з даним винаходом, що включає (а), (б) та, необов'язково, (с) та/"або добавки/допоміжні речовини відповідно до будь-якого з описаних варіантів здійснення, для використання в способі профілактичного та/або радикального лікування розладу або захворювання очного яблука та/або периокулярної ділянки, переважно запальної природи, такого як, наприклад, синдром слізної дисфункції (ССД), кон'юнктивіт, окулярне запалення або периокулярне запалення (наприклад, блефарит, кератит, увеїт), в першу чергу, пов'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину в слізній рідині, у суб'єктів, які цього потребують.

Присутність пепсину в слізній рідині, ймовірно, є пов'язаною з шлунковим рефлюксом в області стравоходу та/або в екстраєзофагеальній області.

Наявність пепсину в слізній рідині можна визначити звичайними діагностичними методами о) та методами, відомими фахівцям у даній галузі техніки, придатними для виявлення пепсину в рідині.

Наявність пепсину в слізній рідині виявляється у суб'єктів із шлунковим рефлюксом та/або захворюванням або симптомом, пов'язаним із зазначеним шлунковим рефлюксом.

Зазначені захворювання або симптоми, пов'язані з шлунковим рефлюксом, вибираються з групи, яка включає або, альтернативно, складається з: гастроезофагеальної рефлюксної хвороби (ГЕРХ), ларингофарингеальної рефлюксної хвороби (ЛФР) або екстраеєзофагеального рефлюксу, езофагіту (гострого або хронічного запалення слизової оболонки стравоходу), виразки стравоходу, деепітелізації слизової оболонки стравоходу, кислої регургітації, печії, відчуття переповненості шлунка, болі в епігастральній ділянці, диспепсії, нудоти, хронічного кашлю, бронхоспазму, болі у горлі, ларингіту, відчуття "комка у горлі", або гіпофарингеального болюсу, пірозу, дисфонії, ринофарингеального флогозу та всіх розладів, в основному спричинених або таких, що супроводжують шлунковий рефлюкс.

Вказані захворювання або симптоми, пов'язані з шлунковим рефлюксом, включаючи захворювання або симптом, пов'язаний з очним яблуком та/або периокулярною областю, переважно запального характеру, такі як, наприклад, синдром слізної дисфункції (ССД), кон'юнктивіт, окулярне запалення або периокулярне запалення (наприклад, блефарит, кератит, увеїт), можуть бути присутніми навіть за відсутності діагнозу гастроезофагеальної рефлюксної хвороби (ГЕРХ), тобто у суб'єктів, які не страждають на ГЕРХ.

Крім того, даний винахід також відноситься до процесу приготування суміші або композиції згідно з даним винаходом (іншими словами, способу згідно з винаходом), переважно для офтальмологічного використання, який включає етап 1) розчинення пепстатину у відповідному розчиннику (наприклад, спиртовому розчиннику, етанолі або етиловому спирті, ізопропіловому спирті, гліцерині, пропіленгліколі, сорбіті 20 або ТвінфФ 20 (суміш часткових три-естерів сорбіту з його моно- та діангідридами зі стеариновою кислотою), етоксильованій гідрогенізованій касторовій олії 40 моль (ПЕГ-40 гідрогенізована касторова олія); переважно у спиртовому розчиннику, переважно етанолі) при нейтральному значенні рН (отриманому з допомогою буферного розчину; переважно боратного буферного розчину) для одержання спиртового розчину пепстатину, переважно спиртового розчину пепстатину в концентрації, що становить таку в діапазоні від 0,01 мг/мл до 1 мг/мл, переважно становить від 0,1 мг/мл до 1 мг/мл, 60 наприклад, 1 мг/мл. Після вказаного етепу 1) здійснюють етап 2) розведення спиртового розчину пепстатину у водному розчині, що включає сіль альгінової кислоти, переважно альгінат лужного або лужноземельного металу, переважно альгінат магнію.

Пепстатин при нейтральному значенні рН не розчиняється у воді та в рівні техніки пепстатин використовується у формі водної суспензії.

На противагу до цього, спосіб згідно з даним винаходом дозволяє розчинити пепстатин у водній фазі та без використання розчинників, які є потенційно токсичними або непридатними для офтальмологічного використання.

Слід уточнити для ясності, що для того, щоб досягти мети цього винаходу, компоненти (або активні компоненти) (а), (Б) та, необов'язково (с), суміші або композиції згідно з даним винаходом можна вводити одночасно або окремо, (переважно в проміжку часу від 5 хвилин до 30 хвилин) та в будь-якому порядку; переважно активні компоненти вводять суб'єкту одночасно, навіть більш переважно в одній композиції для отримання більш швидкого ефекту та для полегшення введення. Коли активні компоненти винаходу вводяться в одній композиції, то зазначена поєднана композиція відповідає композиції згідно з даним винаходом.

У контексті даного винаходу вираз "суб'єкт(и)" використовується для позначення людей або тварин, переважно ссавців (наприклад, домашніх тварин таких, як собаки, коти, коні, вівці або велика рогата худоба). Переважно композиції згідно з винаходом призначені для використання в способах лікування людей.

Якщо не вказано інше, то вираз "композиція або суміш, або інше, що включає компонент у кількості, що знаходиться в діапазоні від х до у", використовується для зазначення того, що вказаний компонент може бути присутнім у композиції або суміші, або іншому в усіх кількостях у межах зазначеного діапазону, навіть якщо вони не вказані, включаючи граничні значення діапазону.

Якщо не зазначено інше, то вміст компонента в композиції або суміші відноситься до відсотка (95) за вагою цього компонента по відношенню до зазначеної загальної ваги зазначеної композиції або суміші.

Якщо не вказано інше, то вказівка на те, що композиція або суміш, або інше "містить" один або більше компонентів, означає, що інші компоненти можуть бути присутніми окрім цього або тих, що спеціально вказані, та вказівка на те, що композиція або суміш, або інше "складається" з зо визначених компонентів означає, що виключається наявність інших компонентів, які не зазначені.

У контексті даного винаходу вираз "спосіб лікування" використовується для позначення здійснення впливу на суб'єкта, який цього потребує, що включає введення суб'єкту композиції або суміші згідно з даним винаходом у терапевтично ефективній кількості з метою усунення, зменшення/зниження або запобігання хвороби або стану та їх симптомів або розладів.

Вираз "терапевтично ефективна кількість" стосується кількості активної сполуки, яка викликає біологічну або медичну реакцію в тканині, системі, ссавці або у людини, як передбачається та визначається особою, дослідником, ветеринаром, лікарем або іншим клініцистом або медичним працівником.

ПРИКЛАДИ

Приклади офтальмологічної композиції у рідкій формі у відповідності з даним винаходом є представленими у Таблицях 1, 2, З та 4 (розчини, забуферені до значення рН приблизно рн 7,6-0,1: 7,4-7,8:0,1).

Таблиця 1

Пепстатин у ЕЮН 1 мг/мл від 0,01 95 до 1 95 (0,01 95-0,1 95)

Таблиця 2

Пепстатин у ЕЮН 1 мг/мл від 0,01 95 до 1 95 (0,01 95-0,1 95)

Таблиця З

Пепстатин у ЕЮН 1 мг/мл від 0,01 95 до 1 95 (0,01 95-0,1 95)

Таблиця 4

Пепстатин у ЕЮН 1 мг/мл від 0,01 95 до 1 95 (0,01 95-0,1 Фо)

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА

І. СПОСІБ

Спосіб, який використовували для вимірювання ферментативної активності пепсину окремо або разом з речовиною, що має інгібіторну активність (пепстатином), полягає в адаптації методу

Енсона |Апзоп та ін., У. Сеп. РНПузіої. 1931, 16, 59), що передбачає використання як субстрату денатурованого гемоглобіну. Ферментативну активність визначали після осадження трихлороцтовою кислотою негідролізованого субстрату. Активність ферменту визначали спектрофотометрично за концентрацією розчинних пептидів, що вивільняються під час протеолітичної дії.

Досліджувана реакція: (Гемоглобін я НгО) ж пепсин -» олігопептиди

ІЇ. РЕАГЕНТИ:

Соляна кислота 12 М.

Людський гемоглобін (Зідта-ЛАіІагісй).

Пепсин (абсолютно сухий стан; 1 одиниця Енсона на грам): фермент.

Розчин трихлороцтової кислоти 6,1 М (Зідта-Аїагісн).

Пепстатин А: інгібіторна речовина (або інгібітор).

І. УМОВИ

Т-37 "С, рН-1,5, Агвонм, оптичний шлях 1 см, час реакції 10 хвилин. При значенні рН-1,5, при якому проводили експерименти, наявна максимальна активність пепсину.

Гемоглобін 2 95, пепсин 0,02 95, інгібітор 0,01 95.

ІМ. ПРИГОТУВАННЯ

Субстрат: у флакон на 10 мл відважували 250 мг гемоглобіну людини, доводили дистильованою водою до вказаного об'єму та залишали при перемішуванні протягом 10 хвилин на водяній бані при 37 С до отримання 2,5 9У56-ного розчину. Розчин пропускали через фільтрувальний папір для видалення нерозчинних залишків. Відбирали 8 мл фільтрату та доводили об'єм до 10 мл кислою водою так, щоб мати заключне значення рнН 1,5 та 2 95-ий розчин (ваг./об.).

Фермент: 5 мг пепсину відважували у флакон на 5 мл та доводили до вказаного об'єму підкисленою водою (рнНе-1,5).

Фермент разом з інгібіторною речовиною: 5 мг пепсину відважували у флакон на 5 мл.

Окремо готували 0,5 мг/мл розчину або суспензії інгібіторної речовини при рН-1,5 (перевіряли значення при використанні рН-метра та коригували у разі необхідності 12 М хлористоводневою кислотою у кількості, щоб не змінити загальний об'єм). Флакон, що містив пепсин, доводили до вказаного об'єму розчином або суспензією інгібіторної речовини 0,5 мг/мл та все витримували на магнітній мішалці протягом 10 хвилин перед початком експерименту.

Трихлороцтова кислота: 6,1 М розчин трихлороцтової кислоти 20-кратно розводили у дистильованій воді з одержанням 5 95 розчину (ваг./об.).

М. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ПРОЦЕДУРА 0,25 мл субстрату (гемоглобін) піпеткою вносили у прийнятний флакон та майже повністю занурювали у водяну баню, з температурою термостату 37 "С. Залишали флакон на магнітній мішалці на 10 хвилин при 37 "С. Потім додавали 50 мікролітрів розчину ферменту (пепсин) або ферменту разом з інгібіторною речовиною (пепсин ї- пепстатин А) та інкубували систему протягом рівно 10 хвилин. Після цього додавали 0,5 мл розчину трихлороцтової кислоти 5 95 та залишали ще на 5 хвилин.

Градуйованою піпеткою у флакон додавали точно З мл дистильованої води з рН-1,5; розчин перемішували та фільтрували при використанні 0,45 мкм шприцевого фільтра. Спектр поглинання (з поглинанням (А) завжди нижче 1) із довжинами хвиль від 300 нм до 250 нм реєстрували з допомогою спектрофотометра, використовуючи значення поглинання при 280 нм як еталон.

Контрольний дослід: 0,25 мл субстрату (гемоглобін) піпеткою вносили у прийнятний флакон о та майже повністю занурювали у водяну баню, з температурою термостату 37 "С. Залишали флакон на магнітній мішалці на 10 хвилин. Потім додавали 50 мікролітрів розчину ферменту (пепсин) або ферменту разом з інгібіторною речовиною (пепсин ї пепстатин А) та інкубували систему протягом рівно 10 хвилин. Після цього додавали 0,5 мл 5 95 розчину трихлороцтової кислоти та залишали ще на 5 хвилин.

Вводили 50 мкл розчину 1 мг/мл ферменту без інгібіторної речовини. Градуйованою піпеткою у флакон додавали точно 3 мл дистильованої води з рН-1,5, потім розчин перемішували та фільтрували з допомогою 0,45 мкм шприцевого фільтра. Поглинання із довжинами хвиль від 300 нм до 250 нм реєстрували з допомогою спектрофотометра, використовуючи значення поглинання при 280 нм як еталон.

МІ. РОЗРАХУНКИ

Кожний експеримент повторювали принаймні двічі. Заключне значення поглинання (А) при 280 нм було середнім значенням отриманих значень поглинання (з похибкою значень завжди набагато нижчою за 10 Фо). ДА з ДАХХАзвозразок х - А?2воконтроль Х та ДАротАзвозразок вільного пепсину -

Азвоконтроль вільного пепсину У ВИПадку відсутності інгібіторної речовини пов'язували з речовиною, що інгібує пепсин. ДА було пропорційним до кількості розчинних залишків ароматичних амінокислот, що вивільнялися у розчин завдяки протеолітичній дії пепсину, узятого окремо, або у присутності інгібітора (пепстатин А).

На Фіг. 1 представлені спектри поглинання контрольного зразка (час реакції - 10 хвилин) без присутності будь-якого інгібітора ДАс-0,40.

Виявлена максимальна різниця поглинання між зразком та контролем при 280 нм дорівнює 0,34 та стосується протеолітичної активності ферменту пепсину стосовно субстрату протягом 10-хвилинного періоду часу без присутності будь-якого інгібітора за цих експериментальних умов.

Залишкову активність у присутності речовини Х розраховували на основі наступного рівняння:

Рівняння 1

Залишкова активність - (ДАх/ ДАб) х 100

МІ. РЕЗУЛЬТАТИ ТА ОБГОВОРЕННЯ

МІ.А. ПЕПСТАТИН бо

Таблиця 5

Значення ДАх при 280 нм стосовно досліджуваної речовини та залишкова активність по відношенню до максимуму виміряної активності 11111 Пепстатин///// | 777777777170777171717171111111Ї111111111111ожсссСс1С

Концентрація речовини (0,01 95) була вибрана як для того, щоб спостерігати інгібування пепсину, так і для максимального зниження оптичної дифузії, викликаної інгібітором.

Використаний метод Енсона дозволяє нормалізувати збільшення поглинання щодо дифузії, що має еквівалентний ефект як на контроль, так і на зразок для кожної речовини. По суті, різниця поглинання при 280 нм була виміряна незалежно від явища дифузії.

Пепстатин показав загальне зниження залишкової активності (ДАх-0).

Пепстатин є нерозчинним у НО, але суспензія, що отримана в лабораторії, була повністю ефективною для поставлених цілей (ДАх:-0).

Фіг. 2 демонструє спектри поглинання контролю та зразка (час реакції - 10 хвилин) у присутності пепстатину 0,01 95 (суспензія в НгО; більша абсорбція контролю завдяки суспензії пепстатину), ДАс-0,004, та порівняння зі спектрами щодо вільного пепсину без інгібіторів

ДАхХ-0,340.

Пепстатин добре розчинявся в етанолі (ЕН) у концентрації 1 мг/мл. Такий розчин можна розводити у воді. Пепстатин зберігав свою інгібіторну активність навіть після розведення у воді з ЕЮН та залишався розчинним; це підтверджується тим фактом, що він зберігав свою інгібувальну здатність та тим фактом, що не спостерігалося ефекту розсіювання відносно контрольного зразка (індекс агрегації молекул не виявлений у цьому випадку).

Потім вимірювали активність пепсину в присутності пепстатину 1 мкМ в умовах дослідження, ідентичних попереднім експериментам. Пепстатин додавали до 2595 гемоглобіну перед доданням пепсину. У світлі вищезазначеного вивчали, чи було зв'язування ферменту з інгібітором негайним або більш повільним у часовому масштабі експерименту (1-10 хвилин) (кінетичне дослідження). Готували розчини 2 95 гемоглобіну, 1 мкМ у пепстатині та вимірювали різні активності після додання ферменту. Результати експерименту представлені на Фіг. 3.

На Фіг. 3 представлено спектри поглинання контролю (пепсин без пепстатину) та досліджуваного зразка (час реакції - 10 хв.) при рН-1,5 у присутності пепстатину (розведеного в

НгО після розчинення в ЕН 1 мг/мл) 1 мкМ.

Фіг. З чітко показує загальне зниження активності при концентрації 1 мкМ. З кінетичної точки зору, враховуючи, що активність є практично нульовою, є зрозумілим, що це негайне о зв'язування між ферментом та інгібітором, враховуючи, що фермент не встигає виконати свою протеолітичну функцію, коли інгібітор вже є присутнім у 2 95 розчині гемоглобіну.

МІІ.В. АЛЬГІНАТ МАГНІЮ

Стерильний водний розчин, що містить 0,2 95 ваг./ваг. альгінату магнію (скорочено, розчин альгінату) додавали до розчину гемоглобіну на наступному етапі проведення експериментів.

Вибрана концентрація зазначеного розчину альгінату в гемоглобіні становила 1 95. Така концентрація дозволяє уникнути розсіювання та не мати повного зниження активності. Розчин альгінату в гемоглобіні показав інгібування пепсину зі зниженням активності на 60 95 відносно вільного пепсину при рнН-1,5 (Фіг. 4). На Фіг. 4 представлене зниження активності пепсину в присутності водного розчину альгінату магнію 1 95 при рН-1,5.

М.С. ПЕПСТАТИН - АЛЬГІНАТ МАГНІЮ

Для перевірки синергічного ефекту пепстатину разом з альгінатом магнію (композиція згідно з винаходом) щодо повного інгібування пепсину, розчини гемоглобіну при рН-1,5, в яких був присутній 1 95 зазначеного водного розчину, що містить альгінат магнію 0,2 95 ваг./ваг. (див. параграф МІі!І.В.), та 1 мкМ у пепстатині, розчиненого в такому розчині (у кількості розчину, що містить альгінат, який додавали до гемоглобіну, була така кількість пепстатину, щоб отримати бажану заключну концентрацію пепстатину), та різні активності вимірювали після додання ферменту (пепсину). Результати експерименту показані на Фіг. 5.

Розведення етанольного розчину пепстатину 1 мг/мл у водному розчині альгінату магнію не ставить під загрозу розчинення та інгібіторну здатність пепстатину. 5О На Фіг. 5 представлено спектри поглинання контрольного зразка (пепсин без пепстатину, але з 195 розчином гемоглобіну, що містить альгінат магнію) та досліджуваних зразків (час реакції - 10 хв.) при рН-1,5 у присутності 1 95 розчину альгінату магнію та пепстатину 100 нм (пепстатин, розведений у водному розчині альгінату магнію після розчинення в ЕН 1 мг/мл).

Синергетичний ефект пепстатину разом з альгінатом магнію дозволив отримати загальне зниження активності пепсину за рахунок концентрації у пепстатині, що дорівнює 100 нМ (на порядок менше по відношенню до пепстатину у воді).

МІ. ВИСНОВКИ - Пепсин може бути присутнім у сльозах пацієнтів з гастроезофагеальним рефлюксом.

Такий фермент спричинює пошкодження ока через протеолітичну дію, коли він ще активний.

Альгінати інгібують пепсин неконкурентним та залежним від дози способом. Натомість пепстатин А інгібує пепсин у пікомолярних концентраціях. Бінарна система пепстатин-альгінат магнію має синергетичну інгібіторну активність, яка повністю дезактивує фермент пепсин починаючи безпосередньо з пікомолярних концентрацій завдяки пепстатину та секвеструє такий фермент шляхом неспецифічного зв'язування альгінатом магнію, який одночасно має змащувальну активність. Таким чином, така бінарна система лікує та запобігає пошкодженню очей, що викликане пепсином. - Пепстатин не розчиняється у воді; по суті, він завжди використовувався як суспензія, здатна в будь-якому випадку інгібувати пепсин. Заявник знайшов спосіб, з допомогою якого такий інгібітор можна розчинити у воді без використання токсичних розчинників. Етанольний розчин пепстатину можна розвести у воді. Він все ще зберігає свою інгібіторну активність та залишається розчинним після розведення. Пепстатин, розчинений у воді з допомогою цього способу, є здатним стехіометрично інгібувати пепсин. У розчині не було виявлено суспензій або осадів. Зв'язування з пепсином у воді є миттєвим у часовому масштабі для людини в тій мірі, в якій пепсин, що додається до гемоглобіну під час експериментів, не може здійснювати його протеолітичну дію, якщо є присутнім інгібітор.

ЇХ. СПОСІБ ПРИГОТУВАННЯ

Нижче описані етапи приготування композиції на водній основі в рідкій формі, що містить пепстатин та альгінат магнію (композиція згідно з винаходом, Таблиця 6).

Етап 1: - Відмірювали воду та наливали її у хімічний стакан з магнітним перемішуванням; о - Вмикали перемішування та нагрівали воду до 50 "С; - Додавали буферні солі.

Сировина: демінералізована вода, тетраборат натрію, борна кислота.

Етап 2: - Додавали інгредієнти у вказаній послідовності (1. Хлорид натрію, 2. Альгінат магнію) поступово, очікуючи повного розчинення; - Отриманий розчин залишали при перемішуванні на 30 хвилин.

Етап фільтрації 1: Отриманий розчин слід відфільтрувати з допомогою фільтра РЕ5 0,2 мкм.

Етап 3: - Після першого фільтрування відмірюли воду та наливали її у хімічний стакан, вмикали перемішування та нагрівали воду до 50 "С; - Додавали етанольний розчин пепстатину (наприклад, у концентрації 1 мг/мл); - Отриманий розчин залишали при перемішуванні на 30 хвилин. - Пепстатин: Ізовалерил-ї -Ма!І-(-МаІ-е(а-І -АіІа-статин або ізовалерил-їі -МаІ-І -МаІ-4-(5)-аміно- 3-(5)-гідрокси-6-метил-гептаноїл-2-ЕІа-4-(5)-аміно-3-(5)-гідрокси-б-метилгептанова кислота).

Етап фільтрації 2: Отриманий розчин слід відфільтрувати з допомогою фільтра РЕ5 0,2 мкм.

Таблиця 6 (заключна концентрація у пепстатині приблизно 1 мкМ) вимірювання

Фізичні характеристики композиції Таблиці 6:

рН приблизно 7,53;

Осмоляльність приблизно 304 мосм кг";

В'язкість приблизно 1,309 сст;

Густина приблизно 1,003 г мл"!

Вимірювання приведених фізичних величин:

Осмолярність: осмометр

В'язкість: віскозиметр Оствальда (вимірюється при кімнатній температурі) рН: рН-метр

Густина: Пікнометр

Очікувана кількість пепстатину в композиції: менше або дорівнює 1 мкМ.

Пепстатин розчинний в етанолі до 1 мг/мл.

Втілення Е(п) даного винаходу проілюстровано нижче:

ЕТ. Водна композиція для офтальмологічного застосування, що включає () суміш М, яка включає або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину або його фармацевтично прийнятної солі, та (р) альгінової кислоти або її фармацевтично прийнятної солі; та (ї) принаймні однієї офтальмологічної добавки та/або наповнювача.

Е2. Композиція згідно з Е1, де зазначена суміш М додатково містить (с) гіалуронову кислоту або її фармацевтично прийнятну сіль.

ЕЗ. Композиція згідно з Е2, де зазначена (ї) суміш (М) містить або, альтернативно, складається з: (а) пепстатину; (р) альгінату лужного або лужноземельного металу, переважно альгінату магнію; та (с) галуронату лужного або лужноземельного металу, переважно гіалуронату натрію.

Е4. Композиція згідно з будь-яким з Е17-ЕЗ3, де композиція розроблена для офтальмологічного застосування; переважно в рідкій формі для офтальмологічного застосування, більш переважно вона являє собою очні краплі або очні краплі на водній основі; або, альтернативно, у напівтвердій формі для офтальмологічного застосування, переважно у вигляді мазі, бальзаму, гелю або крему. о Е5. Композиція згідно з будь-яким з Е1-Е4 для використання як лікарського засобу.

Еб. Композиція згідно з будь-яким з Е1-Е4 для використання в способі профілактичного та/або радикального лікування захворювання або симптому очного яблука та/або периокулярної ділянки, пов'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину в слізній рідині, у суб'єкта, який цього потребує.

Е7. Композиція для застосування згідно з Еб, де зазначене захворювання або симптом очного яблука та/або периокулярної ділянки є вибраним із групи, що включає або, альтернативно, складається з: синдрому слізної дисфункції (ССД) або синдрому сухого ока, кон'юнктивіту кон'юнктиви, кон'юнктивіту рогівки, окулярного запалення, периокулярного запалення, блефариту, кератиту та увеїту; переважно вибраного з групи, яка включає або, альтернативно, складається з: синдрому слізної дисфункції (ССД) або синдрому сухого ока, кон'юнктивіту кон'юнктиви, кон'юнктивіту рогівки, окулярного запалення та периокулярного запалення.

Е8. Композиція для використання згідно з Еб або Е7, де зазначена композиція призначена для використання в способі профілактичного та/або радикального лікування захворювання або симптому очного яблука та/або периокулярної ділянки у: (ї) суб'єкта з шлунковим рефлюксом, що проявляє себе від області шлунка до стравохідної та/або позастравохідної області, (ії) суб'єкта із захворюванням або симптомом, зв'язаним з або такого, що походить від зазначеного шлункового рефлюксу.

Е9. Композиція для застосування згідно з Е8, де зазначені захворювання або симптоми, що 5О є пов'язаними з або походять від зазначеного шлункового рефлюксу, який проявляється від області шлунка до стравохідної та/або позастравохідної області, вибрані з групи, що включає або, альтернативно, складається з: гастроезофагеальної рефлюксної хвороби (ГЕРХ), ерозивного або неерозивного ларингофарингеального рефлюксу (ЛФР) або екстраезофагеального рефлюксу, езофагіту, виразки стравоходу, деепітелізації слизової оболонки стравоходу, кислотної відрижки, печії, відчуття переповнення шлунка, болі в епігастрії, диспепсії, нудоти, хронічний кашлю, бронхоспазму, болі у горлі, ларингіту, відчуття "комка у горлі", або гіпофарингеального болюсу, пірозу, дисфонії та ринофарингеального флогозу.

Е10. Спосіб приготування композиції згідно з будь-яким з Е1-Е4, де вказаний спосіб включає:

- операцію 1) розчинення пепстатину в розчиннику, переважно спиртовому розчиннику або етанолі, при нейтральному значенні рН для отримання спиртового розчину пепстатину, після якої здійснюють - операцію 2) розведення спиртового розчину пепстатину у водному розчині, що містить сіль альгінової кислоти, переважно альгінат лужного або лужноземельного металу, більш переважно альгінат магнію.

Claims (12)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Водна композиція для офтальмологічного застосування, що включає: () суміш М, яка містить: (а) пепстатин або його фармацевтично прийнятну сіль, та (р) альгінову кислоту або її фармацевтично прийнятну сіль; та (ї) принаймні одну добавку та/або наповнювач офтальмологічного призначення.

2. Композиція за п. 1, де вказана суміш М додатково містить (с) гіалуронову кислоту або її фармацевтично прийнятну сіль.

3. Композиція за п. 2, де вказана (ї) суміш (М) містить: (а) пепстатин; (р) альгінат лужного або лужно-земельного металу або саме альгінат магнію; та (с) гіаалуронат лужного або лужно-земельного металу або саме гіалуронат натрію.

4. Композиція за будь-яким з пп. 1-3, де композиція рецептована для офтальмологічного призначення: або у рідкій формі для офтальмологічного призначення - саме у формі очних крапель або очних крапель на водній основі; або у напівтвердій формі для офтальмологічного призначення, - саме у формі мазі, бальзаму, гелю або крему.

5. Композиція за будь-яким з пп. 1-4 для застосування як лікарського засобу.

6. Композиція за будь-яким з пп. 1-4 для застосування у профілактиці та/або радикальному лікуванні захворювання або симптому очного яблука та/або періокулярної ділянки, зв'язаного з або такого, що походить від присутності пепсину у слізній рідині, у суб'єкта, який цього потребує.

7. Композиція для застосування за п. б, де вказане захворювання або симптом очного яблука о та/або періокулярної ділянки є вибраним з групи, що складається з: синдрому слізної дисфункції (ССД) або синдрому сухого ока, кон'юнктивіту кон'юнктиви, кон'юнктивіту рогівки, окулярного запалення або періокулярного запалення, блефариту, кератиту та увеїту.

8. Композиція для застосування за п. б, де вказане захворювання або симптом очного яблука та/або періокулярної ділянки є вибраним з групи, що складається з: синдрому слізної дисфункції (ССД) або синдрому сухого ока, кон'юнктивіту кон'юнктиви, кон'юнктивіту рогівки, окулярного запалення та періокулярного запалення.

9. Композиція для застосування за будь-яким з пп. 6-8, де вказану композицію застосовано у профілактиці та/або радикальному лікуванні захворювання або симптому окулярної та/або періокулярної ділянки у: (ї) суб'єкта зі шлунковим рефлюксом, який проявляється від області шлунка до стравохідної та/або позастравохідної області, (ії) у суб'єкта із захворюванням або симптомом, зв'язаним з або таким, що походить від вказаного шлункового рефлюксу.

10. Композиція для застосування за п. 9, де вказані захворювання або симптоми, що пов'язаними з або походять від вказаного шлункового рефлюксу, який проявляється від області шлунка до стравохідної та/або позастравохідної області, є вибраними з групи, що складається з: гастроезофагеальної рефлюксної хвороби (ГЕРХ), ерозивного або неерозивного, ларингофарингеального рефлюксу (ЛФР) або екстраєзофагеального рефлюксу, езофагіту, виразки стравоходу, деепітелізації слизової оболонки стравоходу, кислотної відрижки, печії, відчуття переповнення шлунка, болі в епігастрії, диспепсії, нудоти, хронічного кашлю, бронхоспазму, болі у горлі, ларингіту, відчуття "клубка у горлі" або гіпофарингеального болюсу, пірозу, дисфонії та ринофарингеального флогозу.

11. Спосіб одержання композиції за будь-яким з пп. 1-4, за яким: 1) здійснюють розчинення пепстатину в розчиннику при нейтральному значенні рН для отримання розчину пепстатину, після чого 2) здійснюють розведення розчину пепстатину у водному розчині, що містить сіль альгінової кислоти.

12. Спосіб одержання композиції за п. 11, де розчинником є спиртовий розчинник або етанол, а сіллю альгінової кислоти є альгінат лужного або лужноземельного металу або альгінат магнію.

у З м ко і х Без інгібітора ' Ех Й і Ух ї Ко і ж о Зразок і г пе удпдлчднююююкке не В і Ще т І вм, ' Кк і У о : ї Мч і йо : 4 ! в | й ! й ЖІ ік ж хх я : і о, : вч і і ек, : се ! 242 . і : а ! Н Теж хни ї Ш- і к клю ещ ї м 1 і а З ді ; ни : їх х з. а ткож вич ОК ККУ юю кияни Н м. Контроль » песен ткани ха 5 ЗЕ Зх В 5 ТЕ Зах ж З ЗЕ й. р КЕ. зв їх мя ї з с Бе о Ж шк ділити ТКУ жк син 1 ХХ о : а доти : т пої Ти ат зт ї че ут чт уч ШЕ в Я : Тедннннннннннннннннннтх ДЕМО, Н в Я Ж жи ж Ол ; 7 му 7 квот І : Фліт ФК ю . ПП нене. ДЕС КИЖИЬ пк дп А А ААУ А Антін, ща ка ке щк тк т - ще ХЕ ке хх тя що кн Х ВН Ту Зк - К бод СЕК ИМ ю сх М на онлюсмтантьниннкнте ото, Ба ; с че пе що : де пот . п с вже у, ни и о МиМ У вести ї ЩЕ ХХ оку оди І її ж Ж ПК оон ОК ХО ме ке жа ХВ тт Хо т т Уе з й. (ріг. З по. "ЯВИ о езакннккаітакзкия сих ис я 0 зниження ака вності КК при 80 нь Г т Ух июня Ук а» а З: х т 7 Тек ве пи сх зх - : мули Скотт, Пе б : Жука, й Ст ша ен А п НВ

Фіг. 4 па А оде х за У чо з зе 1 дози, віх зяхсткех в ли гіжКат пасатевіяс А Не ою лиююююлин в ОН с а шоп той Ши . с а - сок Ша МО нм ж гіеистазині, . т їж етно, «Не ню містите аз зне вОхЕНІЬ УМ кн бекжек . - БК екоснкюю плов Есеичтхнямь З рек, Ії3с» ККіСтУятх» дна магНеКа ПККудутюсюхкня що ще З З зн тх5 я зв5 зва 255 що АХ

Фіг. 5