FR2819187A1

FR2819187A1 - Utilisation des substances chelatrices pour le traitement et la prevention de la deferrescence oculaire

Info

Publication number: FR2819187A1
Application number: FR0016369A
Authority: FR
Inventors: Michel Xilinas
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2001-01-10
Filing date: 2001-01-10
Publication date: 2002-07-12
Also published as: EP1408969A2; WO2002055081A2; WO2002055081A3

Abstract

Cette invention décrit l'utilisation du phanquinone et du clioquinol dans la fabrication de produits pharmaceutiques pour le traitement et la prévention des maladies maculaires des yeux liées à l'action des métalloproteinases de la matrice extracellulaire. Sont également décrit des méthodes de traitement ou de prévention dans de telles conditions.

Description

UTILISATION DE SUBSTANCES CHELATRICES POUR LE TRAITEMENT
ET LA PREVENTION DE LA DEGENERESCENCE MACULAIRE DOMAINE TECHNIQUE
La présente invention décrit l'utilisation d'une combinaison de deux substances connues, administrées ensemble ou séparement pour la fabrication d'une composition pharmaceutique destinée à la prévention et au traitement de la dégénérescence maculaire. Cette invention decrit une composition pharmaceutique destinée à une telle prévention et traitement. De plus l'invention décrit aussi des méthodes pour la prévention et le traitement de la dégénérescence maculaire liée à un derèglement des métalloprotéinases de la matrice extracellulaire.

DONNEES DE BASE DE L'INVENTION La dégénérescence maculaire liée à l'âge (DMLA) est une cause importante de la perte de la vue. C'est une maladie occulaire qui est présente (jusqu'à un certain point) chez des millions de personnes agées. La détection précoce est essentielle pour un traitement adéquat. La DMLA affecte la macula, qui est une petite partie de la rétine. La rétine fait partie du tissu nerveux sensible à la lumière de la partie existant à l'intérieure de l'oeil. Toutes les parties de la rétine participent à la visualisation de la lumière, mais seulement la macula offre la vue aigue directe nécessaire aux fonctions telles que la conduite ou la lecture des petites lettres
En vieillissant des changements surviennent à la macula qui peuvent provoquer des difficultés de lecture et une bonne vision centrale. Il n'est pas clair comment exactement ces changements maculaires surviennent mais le viellissement joue un role majeur dans ce processus. Bien que la DMLA est une cause principale de la perte de vue, la majorité des gens qui en souffrent continuent d'avoir une vision normale pour toute la durée de leur vie. Même parmi ceux ceux qui sont sévèrement affectés par la maladie arrivent à maintenir une vue suffisante pour leur permettre de

se déplacer et n'utilisent que des accessoires occulaires en présence d'une vue diminuée.

Dans la plupart des cas la DMLA ne survient qu'après l'âge de 65. Bien qu'un petit nombre d'individus agés de 40 à 50 ans peuvent aussi être affectés. La plupart des individus souffrant d'une DMLA ont une forme dite atrophique ou forme sèche. Dans cette forme des petits dépots jaunâtres appellés druses se forment au dessous

de la macula. De plus la couche des cellules photo-sensibles dans la macula s'amincissent en se dissociant entre elles. Ces changements provoquent une baisse ou distortion de la vision que les individus n'aperçoivent que quand ils essayent de lire. Génèralement, si un oeil souffre d'une DMLA sèche, l'autre oeil aura déjà quelques signes de l'affection. C'est ainsi que la personne avec une DMLA sèche aura éventuellement des problèmes avec les deux yeux. Malgré cela la forme sèche

de la DMLA aboutit rarement à une perte totale de la vision à la lecture Une plus importante menace pour la perte de la vue survient quand la forme sèche évolue vers la forme exsudative ou humide ou néovasculaire de la maladie. Cette condition ne survient qu'à un petit pourcentage d'individus souffrant d'une DMLA. A la forme humide, des néo-vaisseaux sanguins se développent sous la macula. Ces néo-vaisseaux anormaux et hzperperméables provoquent une fuite liquidienne et sanguine entraînant à la fin le mort des cellules photo-sensibles. Ce processus en général finit par provoquer une perturbation marquante de la vision au niveau de l'oeil affecté : les lignes droites apparraissent deformées et dans les cas les plus avancés on constate des tâches blanches au fond de l'oeil. Si les fuites et le saignement des vaisseaux néo-formés, continuent une importante partie du tissu nerveux de la macula va être détruit ou lésé dans quelques semaines ou mois. Ces destructions sont irréparables, car le tissu nerveux de la macula n'a pas la capacité de régèneration une fois détruit. Bien que seulement un petit nombre d'individus souffrant d'une DMLA développent la forme néovasculaire, ce groupe constitue la majorité des cas auxquels surviennent une sérieuse perte de vision. Une étude clinique (essais clinique) subventionnée par le National Eye Institute aux Etats Unis (NEI) a proposé qu'il y a un traitement pouvant aider la plupart des individus

menacée par la forme humide et néovasculaire de la DMLA. Ce traitement appellé photocoagulation par laser permet de converger ces rayons et les diriger dans l'oeil sur la surface de la macula. Le but de ce traitement est de préserver la vision en détruisant les néo-vaisseaux ainsi formés. Dans l'étude NEI, le traitement a reduit de

moitié le risque d'une sévère perte de la vsion chez les malades souffrant de la forme néovasculaire de la DMLA. Ce traitement est mieux appliqué s'il est effectué rapidement après le développement de la néo-vascularisation et avant que ces nouveaux vaisseaux arrivent à détruire la fovea (la partie centrale de la macula).

Selon le NEI, la photocoagulation prend une valeur seulement chez un petit nombre de cas souffrant effectivement de la forme néo-vasculaire de la DMLA, avec des vaisseaux néo-formés qui se développent activement dans la macula menaçant

une perte sérieuse de la vue. Il n'y a pas de preuve selon le NEI, que le traitement par laser est utile pour les malades souffrant de la forme sèche de la DMLA. Comme le traitement par laser ne peut pas restaurer la vue déjà perdue à cause de la DMLA, un oeil qui a été déjà sévèrement endommagé par la maladie ne va pas bénéficier d'un traitement au laser. Donc toujours selon le NEI il est important que la DMLA, et en particulier la forme néo-vasculaire de la maladie, soit le plus rapidement diagnostiquée.

La production de la druse et les autres changements maculaires typiques de la forme atrophique de la DMLA ne peuvent pas être aperçus par le malade lui-même

mais sont detectès pendant l'examen ophthalmologique. Il est conseillé chez les individus d'âge moyen ou plus, de faire un examen régulièrement afin de détecter des signes précoces de la DMLA ainsi que du glaucome et d'autres affections des yeux liées à l'âge.

Génèralement si la forme sèche de la DMLA est diagnostiquée chez un individu ce dernier est encouragé de retourner pour des examens complementaires rapidement. Même, le malade peut être instruit de faire des examens simples luimême à la maison. Le test est d'essayer de voir sur un papier avec des grilles les lignes droites.

Dans le cas que quelques lignes apparraissent courbées ou ne sont pas visibles cela peut être un préavis de valeur qu'une néo-vascularisation est en développement et le traitement au laser doit être pris en considération. Les malades qui utilisent le test des grilles doivent être initiés de faire ce test fréquemment et doivent être questionnés par le médecin afin, de decrire la forme des lignes. Dans le cas qu'une DMLA de forme néo-vasculaire est suspectée un examen est nécessaire.

Dans le cas où on a la suspicion qu'une forme néo-vasculaire de la DMLA se développe, une angiographie à la fluoresceine (substance fluorescente) est en génèral à conseiller. Des photographies sont prises pour visualiser l'arrivée de la

fluerescence à l'oeil et à travers les vaisseaux sanguins de la rétine. Dans le cas de fuites de liquidiennes ou sanguines à travers les vaisseaux (hyperperméables) sous ou intrarétinien proche de la macula, les photographies vont déterminer leurs localisations et vont servir de guide pour le traitement. Comme avec tous les examens médicaux les malades sont conseillés à demander aux médecins les bénéfices et les risques potentiels et les coûts, de diverses procédures, de diagnostiques et des thérapies proposées
Le traitement au laser est fait par des ophtalmologues experimentés. Une anesthésie locale peut être utilisée pour réconforter le malade pendant le traitement au laser. La session de traitement dure quelques minutes. Tout de suite après le malade peut retourner chez lui et poursuivre ses activités habituelles. Les patients vont être convoqués pour retourner au cabinet médical pour des contrôles. Dans le cas où d'autres néo-vascularisations sont observées lors d'un de ces contrôles un traitement au laser est indiqué. Entre les contrôles les patients peuvent utiliser comme test, le papier à grilles décrit auparavant pour détecter tout changement de vision peuvant indiquer une néo-vascularisation. A présent, il n'existe pas une méthode prouvée efficace pour prévenir la forme sèche de la DMLA ou l'initiation de la forme neo-vasculaire de la maladie.

Il y a plusieures appareils qui peuvent améliorer la capacité d'une vision diminuée. Ces appareils, appellés aides à la vision, possèdent des lentilles spéciales ou des systèmes électroniques qui produisent des images agrandies des objets

proches. Ces aides de la vision peuvent être prescrites par l'ophthalmologiste, et donner d'autres informations ou conseils. En général, quand il s'agit d'une DMLA de forme sèche, le patient est convoqué à plusieurs contrôles. En plus le patient peut faire ses propores examens seuls pour détecter des changements de sa vision à l'aide du dit papier avec une grille de lignes droites.

EXPERIENCE PRECEDENTE
Les métalloprotéinases de la matrice extracellulaire (MMPs) font partie d'une famille d'endopeptidases dépendentes du zinc. Les MMPs existent sous forme d'enzymes secrétès ou d'enzyme liès sur les membranes. Les enzymes sont initialement exprimés sous-forme inactifs, et ensuite ils sont activés par des clivages protèolytiques de leur terminaisons acide aminées. Les MMPs jouent un rôle dans la physiologie du développement normal du tissu conjoctifs durant la morphogénèse et la cicatrisation. Une activité anormale semble être impliquée dans le développement de plusieurs maladies telles que l'arthrite, les métastases de cellules tumorales et l'athérosclerose.

Xilinas M. (Danish Patent Application No PA 2000 00704 Phanquinone and MMPs and Danish Patent Application No PA 2000 00703 Clioquinol and MMPs) a présenté une invention se reférant à une nouvelle utilisation de substances connues, soit du phanquinone et du clioquinol, pour la fabrication de préparations pharmaceutiques destinées au traitement ou à la prévention des conditions pathologiques influencées par l'action des MMPs.

Dans cette invention une méthode est donnée pour le traitement d'un sujet diagnostiqué d'avoir ou suspecté d'avoir une dégénérescence maculaire (DMLA)

influencée par les MPPs. L'action de la phanquinone avec ou sans clioquinol est centrée sur la chelation du zinc dans les yeux avec résultat une restriction de l'activité des différentes MMPs, impliquées dans le développemement de la maladie maculaire. Dans ce sens la phanquinone et le clioquinol ont tous les deux une activité inhibitrice sur ces enzymes.

Le but avec le traitement curatif ou préventif par la phanquinone avec ou sans clioquinol est d'une part l'inhibtion ou le blocage ou la réduction ou la restriction des effets pathologiques des MMPs liées au développement de la maladie maculaire et d'autre part le rétablissement d'un équilibre entre l'action des MMPs et de leurs inhibiteurs tissulaires des métalloprotèinases (tissue inhibitors of metalloproteinases, TIMPS) respectifs, en remodulant ainsi leurs interactions physiologiques.

L'activité des MMPs est étroitement réulée par les TIMPS, une famille des protéines secrétées et qui comprend au moins quatre membres (TIMP-1, 2,3, et-4).

L'équilibre entre l'activité les MMPs et les TIMPs régie l'intégrité de la matrice extracellulaire (extra cellular matrix, ECM). C'est ainsi que cet équilibre joue un rôle primordial sur un large spectre des processus physiologiques qui inclut le développement embryonaire, le remodelage du tissu conjonctif, la cicatrisation des blessures, la morphogénèse glandulaire et l'angiogénèse. Un déséquilibre de l'expression entre les MMPs et les TIMPs est impliqué dans la causalité de plusieurs maladies telles que la maladie érosive des articulations, les maladies cardiovasculaires et le cancer.

Les TIMPs forment des complexes 1 : 1 de hautes affinités avec les formes actives de la plupart des MMPs mais des spécificités variables avec la plupart des formes pro-enzymatiques (pro-MMPs) des MMPs spécifiques, qui permet le contrôle spécifique par les TIPMs des MMPs spécifiques. Elles ont été aussi décrites par des activités des TIMPs qui sont indépendantes de leur capacité d'inhiber les MMPs
Des préparations de choroïdes de Bruch humaines ont été examinées quant à l'effet du viellissement sur les MMPs relatifs aux mécanismes de remodelage de la matrice extracellulaire (Hussain et al, Invest Opthalmol Vis Sci, 1999,40 : 2676-82).

Une augmentation des méchanismes de dégradation des régions maculaires ainsi que des formes inactives des métalloprotéinases ont été constatées avec une disparition de la forme MMP-2. Ces résultats suggèrent la possibilité de l'effet déséquillibrant d'une dégradation extracellulaire tant dûe au viellissement qu'à la maladie maculaire. De plus Kadonosono et al (Am J Ophthalmol, 1999,128 : 382-4)

ont évalué l'expression et la localisation de la MMP-7 dans les membranes néo-

vasculaires choroïdales de Bruch chez des malades souffrant d"une DMLA. La MMP- 7 a été trouvée dans tous les échantillons et elle à été distinctivement exprimée dans les couches épaisses de la membrane et dans les structures basales autour des cellules épitheliales pigmentées de la rétine.

Il a été demontrés que les MMPs sont associés à des maladies lièes à une néovascularisation et une migration ou prolifération anormale des cellules. Un grand nombre de maladies de ce type sont liées à la rétine (Plantner et al, 1998, Exp Eye Res, 67 : 637-45). Dans les récepteurs de la matrice sensible à la lumière et dans le vitré la métalloprotéinase la plus abondante est la MPP-2. Le taux de MMP-2 est presque le double et plus précisément sur l'épithelium de la rétine pigmentée associée avec le récepteur de la matrice intra-vasculaire des malades souffrant d'une DMLA. On conclut que les changements qui surviennent chez ces malades et spécialement la néo-vascularisation qui accompagne la forme exsudative sont

associés avec le taux le plus élevé de la MMP-2
Les MMPs jouent un rôle dans la physiologie normale du tissu conjonctif (Brew et al, Biochem Biophys Acta, 2000, 1477 : 267-83). Un méchanisme important pour la régularisation de l'activité des MMPs s'effectue par l'intermediaire d'une famille de protéines homologues inhibitrices des MMPs les TIMPs (TIMP-1 to TIMP- 4). Les TIMPS ont deux domaines et sont d'une taille relativement petite, ils sont decrit comme ayant certaines fonctions biochimiques, physiologiques et biologiques. Parmis ces fonctions sont inclues leurs effets inhibiteurs des MMPs, l'activation des pro-MMP, la promotion de l'acroissement cellulaire, leur attachement sur la matrice,

l'inhibition de l'angiogénèse et l'induction de l'apoptose. Des mutations de la TIMP-3 sont la cause de la dystrophie fondulaire de Sorsby chez l'homme, une maladie qui provoque le début précoce de la dégènerescence maculaire. Récemment les structures à haute résolution des TIMPs ont été elucidées ainsi que leurs complexités avec des MMPs. Les résultats des études de mutation et des relations de la fonction par rapport à la structure moléculaire ont accru notre connaissance sur la manière de l'inhibition des MMPs par des TIMPS. Certaines questions intriguantes ont été soulevées, telles que l'explication des multiples fonctions des TIMPS, la cinétique des

interactions TIMP-MMP et les différences des liaisons de certaines paires des TIMPmétalloprotéinases. Ces questions sont discutées bien que leurs explications ne soient pas complètement résolues pour un éclaircissement et compréhension des interactions entre ces familles de molécules.

Plantner et al (Exp Eye Res, 1998, 67 : 637-45) ont demontré que les MMPs sont de plus en plus associés aux maladies dans lesquelles surviennent une néovascularisation ou une migration ou prolifération anormale des cellules. Un nombre de maladies de ce type affecte la rétine. La MMP-2 est la MMP la plus abondante dans le récepteur photo-sensible de la matrice et le vitré. On l'a determinée dans les yeux des sujets normaux par rapport à l'âge et l'on a comparé par rapport aux yeux des malades souffrant d'une DMLA. Les taux des MMP-2, étaient presque le double dans l'épithelium de la rétine pigmentée photo-sensible par rapport aux malades souffrant d'une DMLA. Ce résultat suggère que la MMP-2 peut être associée à des changements qui surviennent durant la DMLA, et spécialement dans les cas avec néovascularisation qu'accompagne la forme exsudative de la maladie.

L'activité de la MMP au niveau de la membrane de Bruch et la choroide sont dépendant de l'âge (Guo et al, Invest Ophthalmol Vis Sci, 1999,40 : 2676-82). Un mécansime de dégradation de la matrice, essentielle pour le remodelage extracellulaire a été demontré dans la membrane de Bruch. Dans les régions maculaires, des taux qui augmentent les formes inactives des métalloprotéinases et la rareté des formes actives de MMP-2 suggèrent un désèquillibre possible de la dégradation extracellulaire tant au niveau du viellissement qu'au niveau de la DMLA.

Kodonosono et al (Am J Ophthalmol, 1999,128 : 382-4) ont demontré que les MMPs sont associés à une néovascularisation. En particulier la MMP-7 est exprimée dans la membrane de Bruch et dans les membranes néovasculaires choroidales après prélevements chez des malades souffrants d'une DMLA. La MMP-7 peut être un facteur important pour le développement de la membrane néovasculaire sousmaculaire dans la DMLA.

Jomary et al (Neuroreport, 1997,8 : 2169-72), ont trouvé que la TIMP'3 appartient à un groupe de gènes qui sont impliqués dans la régularisation du

remodelage de la matrice extra-cellulaire. Les taux de codage du messager ARN pour la TIMP-3 sont élevés dans les rétines prélevées chez des malades souffrant de la maladie dégénérative des photorécepteurs, dans la rétinite simplex pigmentaire.

Des mutations de la TIMP-3 sont associées à la forme héreditaire de dystrophie maculaire. Une comparaison de l'expression de la protéine TIMP-3 dans des rétines provenant de sujets normaux et d'autres provenant de malades souffrant d'une DMLA a été effectuée. Le TIMP-3 immunoréactif est présenté dans l'épithelium pigmentée normal ainsi que dans des rétines provenant des maladies dégénérative et il est surtout concentré sur la membrane de Bruch et dans les régions des photo-récepteurs de la rétinopathie simple. Ces résultats suggèrent que le rôle de la TIMP-3 dans la rétine normale est le maintient de l'homèostase. Dans le rétines des états pathologiques, la TIMP-3 joue un rôle sur la modulation du métabolisme de la matrice extracellulaire et sur la néo-vascularisation
Les métalloprotéinases et leur inhibiteurs TIMPs sont présents chez l'homme dans les récepteurs phot-sensible de la matrice et du vitré (Plantner et al, Curr Eye Res, 1998,17 : 132-40). In apparat que les MMPs et les TIMPs sont impliquées dans

la formation normale de la matrice extra-cellulaire qui entoume la rétine neurale et joue un rôle dans un nombre de maladies rétiniennes et plus particulièrement dans la rétinopathie diabétique et la DMLA.

Nagase et al (Ann N Y Acad Sci, 1999, 878 : 1-11) ont trouvé que les différences dans la susceptibilité de la protéinase retrouvée entre la forme libre de la TIMP-1 et celle de la TIMP-1 associée à la MMP-3, suggère que les residus autour de l'attachement disulfidique entre la position Cys1 et Cys70 de la TIMP-1 peuvent interagir avec la MMP'1. La structure en forme de cristaux du complexe entre le TIMP-1 et le domaine catalytique de la MMP-3 a rélevé que le groupe alpha-aminé du Cys1 chelate le zinc de la MMP-3 et la chaine latèrale Thr2 qui occupe la poche S1'de la molécule.

Plus partulièrment dans la dystrophie fundulaire de Sorby, Felbor et al (J Med Genet, 1996,33 : 233-6), ont demontré que la mutation qui survient sur la Tyr168Cys apparat affecter la terminaison de la région carbonique C de la forme mature de la

TIMP-3. De plus, toutes les mutations connues provoquent un changement critique à cause d'un acide aminé sur le résidu de la cystèine. Ceci suggère un rôle crucial du groupe thiolique libre de la terminaison carbonique C dans la pathogénèse de la maladie fundulaire de Sorby.

L'étude du gène qui encode l'inhibiteur des métalloprotéeinases TIMP-3 (Felbor et al, Invest Ophthalmol Vis Sci, 1997,38 : 1054-9), a demontré que ces muations sont à la cause de la dystrophie de Sorby qui est caracterisée par des irrégularités de la matrice extra-cellulaire au niveau de la membrane de Bruch. Chez 217 patients analysés Felbor et al, ont identifié une altération de séquence (un changement de base de G-à-C) dans la région non-traduite de 5'-chez un patient qui avait une DMLA. Il est suggéré que le TIMP-3 n'est pas un facteur majeur dans la causalité de la DMLA et d'autres affections maculaires excepté dans le cas de la dystrophie de Sorby. Vettakkorumakankav et Ananthanarayanan (Biochim Biophys Acta, 1999,1432 : 356-70VS) ont demontré que les TIMPs sont liés seulement au zinc et cela avec une stoichiometrie bien definie.

De La Paz et al, (Invest Ophthalmol Vis Sci, 1998,39 : 1256-60) ont demontré que les MMPS et leurs TIMPS endogènes sont présents dans le vitré humain et peuvent être impliqué dans la pathogénèse des maladies vitréo-rétiniennes.

En général (Stohr et al, Genome Res, 1995,5 : 483-7), les TIMPs jouent un rôle dans le turn-over physiologique de la matrice extra-cellulaire, en réglant étroitement l'activité des MMPs. Des perturbations dans le système TIMP/MMP ont été impliquées dans plusieurs processus pathologiques dans lesquels une perte de l'integrité de la matrice extra-cellulaire figure comme l'élément principal. Plus récemment il a été demontré que des mutations dans le TIME3 provoquent la maladie autosomal dominante de la dystrophie de Sorsby, dans laquelle des irrégularités de la matrice extra-cellulaire surviennent.

Steen et al (Invest Ophthalmol Vis Sci, 1998,39 : 2194-200) ont demontré que

les MMPs jouent probablement un rôle dans la néo-vascularisation choroidale et provoquerait finalement le développement de la dégénéréscence maculaire. La localisation des MMP-2 et MMP-9 au niveau des régions de formation des néo-

vesseuax vaisseaux et dans la membrane de Bruch suggère que ces deux MMPs sont impliqués dans l'accroissement de la néo-vascularisation choroïdale progressive de la maladie maculaire
Des changements de l'inhibiteur TIMP-3 dans la membrane de Bruch peuvent intervenir dans le vieillissement et aussi dans l'évolution de la DMLA (Kamei and Hollyfield Invest Ophthalmol Vis Sci, 1999,40 : 2367-75). Le TIMP-3 est présent uniformément à travers la membrane de Bruch dans des échantillons provenant de sujets normaux. Dans des échantillons provenant de malades ayant une dégénérescence maculaire, le TIMP-3 est abondamment dans des régions où se trouve la druse. Par contre dans des régions au dessous de l'épithelium pigmentée de la rétine, la concentration est moindre. Pendant le vieilleissement normal, la

concentration en TIMP-3 de la membrane de Bruch, montre une augmentation significative dans la macula. La comparaison de la concentration de TIMP-3 montre que le TIMP-3 est plus elevé chez les malades souffrant d'une DMLA que chez les sujets normaux.

Dans cette invention une nouvelle thérapie est proposée basée sur l'habilitè de deux substances connues, le phanquinone et le clioquinol, chelateur du zinc et du cuivre.

Cette invention est le résultat des recherches centrées sur l'identifiacation des molécules qui peuvent avoir le potentiel de :
Demontrer une activité chelatrice suffisante envers le zinc
Avoir des propriétés chimiques lipophile
Démontrer une importante pénétration tissulaire qui leur permettra d'atteindre la rétine de l'oeil
Démontrer une pharmaco-cinétique satisfaisante permettant une application locale dans l'oeil et aussi une absorption par des formulations orales
Avoir un profil toxicologique satisfaisant basé sur des experimentations appropriées

Avoir un profil de tolérance satisfaisant chez l'homme leur permettant d'avoir un rapport d'efficacité, quant aux effets indésirables, favorable pour les usages préconisés
Avoir un profil chelateur faible envers tous les autres métaux et en particulier le fer, le calcium et le magnésium
Démontrer une bonne distribution dans les tissus
Démontrer une bonne distribution à l'intérieur du parenchyme cellulaire
Démontrer une réduction du stress oxidatif dans les yeux
Mes recherches m'ont conduit à la decouverte et l'identification du phanquinone et du clioquinol, deux molécules chelatrices connues, qui satisfont la plupart des critères décrits précédemment.

Les deux molécules partagent un puissant effet chelateur envers le zinc et le

cuivre. Le clioquinol à un effet chelateur plus fort envers le zinc par rapport au cuivre et la phanquinone plus envers le cuivre et moins envers le zinc. Malgré cela les deux molècules possèdent un effet chelateur envers les deux métaux suffisant et par contre ont un effet négligeable envers le fer, le calcium et le magnesium.

En utilisant la spectromètrie de masse, Kidany et al (1974, Jap Analyst 23 : 1375-1378), ont analysé quantitativement la chelation par le clioquinol du Fe, Co, Ni, Cu et Zn, et on obtenu les résultats suivants : dans le cas du cobalt, nickel, cuivre et zinc les pics moléculaires correspondent à un ratio de 2 : 1 dans tous les spectres obtenus. En ce qui concermne le Fe (III) le ratio est de 3 : 1.

Compte tenu des diverses études faites chez la souris par micro-

autoradiographie et en microscopie électronique, ainsi que chez le singe et en chez l'homme par autopsie, on peut conclure que : la radioactivité elevée dans le sécteur de Sommer de la corne d'Ammon de l'hippocampe est dûe à la formation de chelats de zinc (II) avec le clioquinol. Ces chelats sont concentrés principalement dans les terminaisons (boutons axodendritiques) des fibres mousseuses. La nature du zinc dans ces sites est particulièrement susceptible à la chelation par le clioquinol à cause de la forte concentration de ce métal dans ces structures anatomiques du cerveau.

Il y a une grande pénétration du clioquinol administré par voie intraveineuse, dans le système nerveux avec pratiquement absence de barrière hématoencéphalique (Shiraki, 1979, Handbook of Clinical Neurology, 37 : 115-139).

Les deux molécules, phanquinone et clioquinol, sont lipohiles et sont bien absorbées par voie orale. Des concentrations satisfaisantes sont acquises par voie orale à de doses de 250 mg qui donnent de concentrations plasmatiques de l'ordre de 1 à 5 microg/ml.

Le phanquinone à des dosages de 50 mg trois fois par jour donne des concentrations de l'ordre de 10 à 20 microg/ml. Plus spécifiquement le clioquinol chez l'homme à des dosages 7.4 àto 9.3 mg/kg/day donne des concentrations plasmatiques de l'ordre de 2.7 à 5.8 microg/ml dans le plasma (Shiraki, 1979).

A cause de leur lipophilité, ces deux molécules passent la barrière hématoencéphalique et se trouvent dans le liquide-céphalo rachidien et dans les tissus cérébraux. Des autoradiographies chez des souris après injection de clioquinol marqué (14C) ont été entreprises (Shiraki, 1979). La microscopie électronique des autoradio-graphies chez les souris, 18 heures après une administration intrapéritonéale de Zn65CI, a révelée de grands nombres de grains, concentrés dans les boutons axodendritiques et les cellules pyramidales de l'hippocampe. Les grains de Zn65 ont été retouvés sur les vessicules synaptiques mais moins sur les mitochondries des régions pré-synaptiques dans les terminaisons des fibres mousseuses.

Comme exemples de l'activité cérébrale du clioquinol et du phanquinone en relation avec l'Ass amyloide, les experimentations suivantes ont été decrites (WO 99/09981) sur l'effet du phanquinone en réponse à different dosages, sur la toxicité induiite par l'Ass amyloide (25-35) sur des cellules PC12 en culture. En présence de phanquinone, l'effet toxique du (25-35) a été complètement aboli et même à des concentrations de Ap amyloide éléves (1 microM) la présence du phanquinone, a neutralisé tout effet toxique du Ap. D'aute part, il a été démontré qu'en présence des concentrations de plus en plus élévées de phanquinone (supèrieres à 0.1 microg/ml)

l'effet toxique du Ap amyloide été dramatiquement diminué en présence de phanquinone.

Les données mentionnées ci-dessus (WO 99/09981 publiés dans ce PCT Treaty) montrent que le clioquinol ainsi que le phanquinone reduisent la neurotoxicité dans le cerveau en séquestratnt le zinc et le cuivre. La chelation de ces deux métaux constitue la base du traitement et de la prévention de la DMLA.

DIVULGATION DE L'INVENTION
Selon la présente invention le nouveau usage et l'utilisation de la phanquinone et du clioquinol et de leurs combinaisons, pour la fabrication de produits (compositions) pharmaceutiques pour le traitement ou la prévention des états pathologiques influencés par l'action des MMPs dans la maladie maculaire des yeux

sont décrites et divulgés.

Plusieurs maladies sont influencées par les MMPs. Comme par exemple la DMLA ainsi que les métastases cancereuses, l'angiogénèse, l'arthrite rhumatismale, l'ulcération cornèenne, l'ostéoporose, l'ostéoarthrite, la sclérose en plaques, les complications diabétiques, les maladies périodontales et l'athérosclérose. Le facteur commun des toutes états pathologiques qui sont influencées par les MMPs est qu'il y a une rupture de la continuitée tissulaire. En général, la cause de ces maladies est liées à une expression et une activité des MMPs qui conduit à une augmentation de la dégradation tissulaire
Le phanquinone et le clioquinol séparément ou en combinaison sont deux molécules à être utiliser dans le traitement et la prévention de la dégénérésence maculaire. Les deux molécules ont été déjà emplozées pour d'autres indications et sont relativement bien toierées pour leur utilisation. Plusieurs million de malades ont utilisé le phanquinone auparavant sans effets seconadaires sérieux. Le clioquinol a été lié au SMON (sub-acute myelo-optical neuritis) décrit seulement au Japon où le médicament a été utilsée dans des dosages excessifs en dehors des recommandations de prescriptions approuvées.

Les deux molécules sont des chelateurs connus de zinc et de cuivre : le clioquinol agit relativement moins que le phanquinone sur le cuivre. Toutes ces deux molécules ont la capacité de pénétrer bien la barrière hémato-encéphalique. Toutes ces deux molécules ont été proposées pour le traitement de la maladie d'Alzheimer à cause de leur capacité de chelate le zinc et le cuivre et de réduire les réactions oxidatives dans le cerveau. Dans la maladie d'Alzheimer l'amyloide s'agrége en présence du zinc mais aussi du cuivre et le clioquinol et le phanquinone sont utilisées pour la chelation de ces deux métaux et ainsi bloquent l'agrégation de l'amyloide dans le cerveau et la formation de plaques.

Le phanquinone ou le clioquinol ou leurs combinaisons sont aussi indiquées pour le traitement des maladies maculaires, et en particulier de DMLA. Le traitement est indiqué dans tous les cas où nous avons une sur-expression ou sur- activité d'une ou de plusieurs MMPs, où un déséquillibre entre les MMPs et leurs TIMPs respectfs qui mènent à des conditions pathologiques maculaires et en général à des maladies vitréo-rétiniennes. Le traitement est indiqué dans des dégénérances de la rétine (inclus les formes atrophique et exudative de la DMLA).
Le traitement est aussi indiqué dans les conditions suivantes : maladies dégénératives liées à l'âge, maladies des photo-récepteurs, la rétinite pigmentaire simplex, la rétinopathie diabétique proliferaante, la dystrophie fundulaire de Sorby,

la fossé maculaire, le syndrome d'histoplasmose occulaire présumé, la membrane epirétinienne, le syndrome de traction vitréo-rétinienne, les microanevrysmes avec hémmoragies ous-rétiniennes, l'occlusion de la veine centrale de la rétine avec hémorragie et toutes autres conditions pathologiques vitréo-rétiniennes dans lesquelles une modulation par le phanquinone et/ou le clioquinol vont réablir l'équillibre de l'activité enzymatique entre les MMPs et leurs TIMPs respectifs.

Le phanquinone et le clioquinol possèdent des effets anti-oxidant dûes à leur capacité de chelate le cuivre tissulaire. Cet effet est plus évident avec le phanquinone qu'avec le clioquinol à cause de la plus grande capacité chelatrice de ce dernier envers le cuivre.

Le phanquinone, (4, 7-phenanthroline-5, 6-dione) a été utisé auparavant pour traiter des infections parasitaires et en particulier les lambliases et les amibiases. Le phanquinone a été commercialisé par les laboratoires CIBA-GEIGY sous le nom de ENTOBEX. Récemment il y a eu un regain d'interêts pour le phanquinone et la molécule a été proposée pour le traitement de la maladie d'Alzheimer (WO 99/09981).

Le clioquinol (iodo-chlorohydroxyquinol ou iodo-chloro hydroxyquinoline ou chloro-iodoquine, 7-iodo-5-chloro-8-hydroxyquinoline ou 5-Chloro-7-iodo-8- hydroxy quinoline ou 5-Chloro-7-iodo-8-quinolinol ou 5-Chloro-8-hydroxy-7- iodoquinoline) est un médicament bien connu, un anti-parasitaire et anti-infectieux utilisé auparavant principalement dans les amibiases. Il a été commercialisé par les laboratoires CIBA-GEIGY sous la marque d'ENTEROVIOFORME ainsi que par d'autres laboratoires. Récemment il a été demontré que le clioquinol possède des effets sur l'amyloide dans la maladie d'Alzheimer (WO 99/09981).

Le clioquinoi est un agent chelateur avec une activité bien prouvée en ce qui concerne la séquestration du zinc, du fer, du manganèse, du cuivre, du mercure, du nickel et du cobalt. Des préparation injectables du clioquinol pouvant pénétrer le cerveau en traversant la barrière hémato-encéphalique ont été tester. Des concentrations de l'ordre de 20 microg/ml peuvent être atteints dans le cerveau. La concentration du clioquinol a été trouvée élevée dans l'hippocampe, région du cerveau directement liée à la maladie d'Alzheimer.

Le clioquinol a été utilisé en combinaison avec le phanquinone dans differentes proportions pour les mêmes indications, commrcialisé par les laboratoires CIBA-GEIGY sous les noms de MEXAFORME et MEXASE.

Récemment des recherches étendues ont été entreprises pour l'utilisation du phanquinone et du clioquinol dans le traitement de la maladie d'Alzheimer. Des données experimentales ont demontrèr que le clioquinol a la capacité de chelate des métaux lourds dans le cerveau, et plus particulièrement le zinc et le cuivre. Le phanquinone a la même capacité de chelate le cuvre et le zinc. La chelation du cuivre par le phanquinone est trois fois plus prononcée que le clioquinol. Au contaire

le clioquinol possède une capacité deux fois plus importante envers la chelation du zinc. Il a été aussi trouver que le phanquinone possède les mêmes proprietés bénéfiques que le clioquinol, pour inhibition de la précipitation d'amyloide et sa résolubilisation dans le cerveau.

Dans le passé, le clioquinol a été administré à des dosages de 250mg trois fois par jour et pour des périodes allant jusqu'à trois mois pour le traitement de l'amibiase intestinale. Il a été aussi utilisé massivenent pour le traitement de la diarrhée infecteiuse. La seule toxicité connue avec le clioquinol a été rapportée provenant du Japon où des dosages excessifs ont été utilisés pendant de longues périodes allant jusqu'à deux ans et une neurotoxicité dénommée nevrite myelooptique sub-aigue (sub-acute myelo optic neuritis, SMON) s'est développée. Dans des recherches récentes, il a été démontré que cette toxicité est lièe au metabolisme de la vitamine B12.

Le phanquinone n'a pas démontré de éffets toxiques en utilisation à des dosages jusqu'à 150mg par jour pour des périodes de traitement allant de trois sémaines à six mois.

En se basant sur des études démontrant que le phanquinone et le cloquinol sont des chelateurs puissants du zinc et du cuivre et de récents travaux démontrant

que l'amyloide dans la maladie d'Alzheimer se précipite seulement en présence de zinc et de cuivre, des recherches importantes ont été entreprises pour le traitement de la maladie d'Alzheimer avec les deux molécules. Ces effets ont été etudiés en relation avec la capacité des deux molécules d'abolir la précipitation de l'amyloide in vitro. En plus il a été demontré que les deux molècules resolubilisent l'amyloide précipité dans des échantillons de cerveaux chez des malades atteints de la maladie d'Alzheimer.

Les proprietés physicochimiques du clioquinol ont été confirmées en ce qui concerne sa capacité chelatrice dans plusieurs recherches (Kidani et al, 1974, Jap Analyst 23 : 1375-78, Tateishi et al, 1973, Psychiat Neurol. Jap. 75 : 187-196).

En se basant sur des données experimentales en administrant le clioquinol par voie intraveineuse, des concentrations dans le cerveau de l'ordre de 20 microg/ml

sont atteintes avec des dosages de 10-20mg/kg (Tateishi et al 1975 and Tamura, 1975, Sci Biol suppl, 28 : 69-77).

Le clioquinol après plusieurs décennies d'usage dans le monde entier, a demontré une toxicité seulement au Japon et dans le cadre de conditions tout à fait particulières. Tous les cas de neurotoxicité documentés ont été observés chez des malades qui ont utilisé des dosages allant de 23 à 50 mg/kg/par jour pendant 13 à 313 jours.

La capacité du clioquinol à abolir l'aggrégation de l'amyloide en présence du zinc a été confirmé expérimentattement. Quand du phanquinone (30uM) est ajouté il réduit la solubilté du Ag amyloide (2. 5uM in TBS at a pH of 7.4) de 95% à 43%.

Quand le clioquinol est ajouté (120, uM) au zinc et au Ap amyloide (aug) il abolit l'aggrégation induite par le zinc de 43% à 70%.

C'est la raison pour laquelle l'administration du clioquinol va chelate le zinc et les autres métaux lourds dans le cerveau et dans des régions spécifiques du cerveau à cause de la lipophilicité de la molécule. De plus la bonne absorption du clioquinol par voie orale lui permettra d'atteindre les concentrations elevées trouvées dans le liquide céphalo-rachidien et le cerveau.

Plusieurs résultats expérimentaux ont demontré actuellement que l'accumulation du Ap amyloide dans le cortex cérérbral est étroitement lié à la causalité de la maladie d'Alzheimer. L'Ass amyloide est un composant normal des liquides biologiques bien que sa fonction ne soit pas connue encore. L'Ass amyloide accumulé dans différentes morphologies sous forme de dépôts insolubles d'amyloide peut être extrait dans des solutions acqueses dans des tissues postmortem. Les facteurs qui provoquent cette accumulation ne sont pas connus mais la solubilité d'un péptide syntètique d'Ass amyloide est bien étudié afin de connaitre les

circonstances qui interviennent dans sa précipitation.

Le Ap amyloide possède trois principales vulnérabilités : le zinc, le cuivre et le pH bas (Bush, 1994). La précipitation de l'Ass amyloide par le cuivre est dramatiquement accentué dans des milieux légèrement acides (par example un pH 6. 9) ; chose qui suggère que l'acidose lau niveau du cerveau dans la maladie

d'Alzheimer, contribue à la précipitation de l'Ass amyloide ; cet événement peut être réalisé par l'intermédiaire du cuivre. Il faut cependant considérer l'importance des deux métaux, le zinc et le cuivre, dans l'évolution de la pathologie des plaques d'amyloide en tenant compte que le métabolisme de ces deux métaux est anormal chez les malades souffrant de la maladie d'Alzheimer.

La conclusion générale des expérimentations sur l'amyloide peut être résumée comme suit : des métaux bivalents (principalement le zinc) maintiennent l'Ass amyloide dans un état insoluble chez les sujets sains et chez les sujets malades en

suggèrant un rôle dans l'homèostase de l'amyloide. D'autres métaux, par exemple le calcium et le magnésium opèrent pour le maintien de l'Ass amyloide dans un état soluble. Des dépôts d'amyloide dans des échantillons de cerveau des malades d'Alzheimer, répondent à des traitements appropriés avec des chelateurs. Cela reflete l'enlevement du zinc lié à des formes moins soluble d'amyloide dans les abords des plaques. Un traitement moderé avec des agents chelateurs permet une resolubilisation rapide des aggregats d'Ass amyloide.

Des dépôts éphémères abondants peuvent être présents en tout temps tant chez des individus atteints de la maladie d'Alzheimer que chez des sujets sains. Les résultats suggèrent que les chelateurs de métaux vont avoir un effet thérapeutique chez des malades ayant la maladie d'Alzheimer et peuvent servir préventivement à réduire la charge en amyloide sur le plan clinique.

Le clioquinol est le seul chelateur qui est enrichit dans le cerveau grâce à sa lipohilité, le rendant un excellent candidat pour des essais cliniques dans la maladie d'Alzheimer.

Récemment il a été mis en evidence que ces métaux font partie intégrale des

dépôts d'amyloide dans le cerveau. Il été trouvé que les chelateurs spécifiques du zinc et du cuivre peuvent d'une façon dramatique dissoudre une proportion importante de l'Ass amyloide extraite post-mortem des cerveeaux de malades souffrant cliniquement pendant leur vie de la maladie d'Alzheimer. De plus la recherche effectuée chez des malades souffrant de la maladie d'Alzheimer a été entrepris en les traitant avec des dosages de clioquinol de 10 à 40mg deux fois par

jour. Effectivement le clioquinol a démontrer une amélioration clinique et a apporté des changements biochimiques. L'extrapolation de ces résulats par rapport à la

prévention et le traitement des maladies occulaires est que le clioquinoi pénétre le cerveau et entrainent d'importants changements biochimiques liés à une activité chelatrice.

Dans le passé on a démontré que le phanquinone possède des effets électrophysiologiques et fonctionels sur le système nerveux central, changements qui apportent des modifications sur le comportement et sur l'eveillissement.

Le phanquinone a été largement utilisé dans le passé pour le traitement des maladies parasitaires et surtout contre la lambliase. Il a été aussi utilisé à differentes concentrations en combinaison avec le clioquinol dans les mêmes indications que ce dernier.

Récemment le phanquinone a été experimenté dans de vastes recherches en vue d'un traitement potentiel pour la maladie d'Alzheimer. Des résultats dans des travaux expérimentaux ont demontré que le phanquinone possède la capaciter de

chelate le zinc et le cuivre dans le cerveau. Cette chelation du cuivre est quatre fois plus importante que celle du clioquinol. Il a été aussi démontré que le phanquinone possède les mêmes effets bénefiques que le clioquinol pour l'abolition de la précipitation de l'amyloide et sa re-sobulisation dans le cerveau.
Le phanquinone n'a pas produit des effets toxiques quand il est utilisé dans des dosages allant jusqu'à 150 mg et pendant trois semaines à six mois.

DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION
Ci après, nous allons décrire l'invention avec plus de détails. Le mécansime proposé n'est pas limité à une seule action.

A présent le demandeur croit que le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons, et les MMPs chetatent compétitivement les réserves communes dans du zinc. Ces deux molécules ont une abilité physico-chimique de pénétrer dans les tissus, inclus la rétine, dans les liquides biologiques, dans les cellules et dans les formations pathologiques donc les druses, les athéromes, les cellules métastatiques,

les cellules en dégénéréscence, les cellules néo-vaissaux et les cellules inflammatoires. Quand le phanquinone ou le clioquinol ou leurs combinaisons rentrent dans le milieu biologique de la région incriminée dans le processus pathologique, l'ion de zinc (II) est capturé du pool de zinc libre à cause de l'équillibre existant entre les métalloprotéinases zinc dépendantes et leurs TIMPs respectfs. Le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons, chelatent l'ion de zinc (II) qui est à son tour enlevé de la région impliqué dans le processus pathologique et le chelat est transferé dans le liquide interstitial, la lymphe, le sang, les urines ou la bile et il est ainsi éliminé du corps. La privation de zinc de l'environnement direct des MMPs, nécessitant du zinc pour leurs fonctionnement inhibe leur action.

Les MMPs sont directement impliqués dans les maladies dégénératives maculaires chez l'homme. Dans plusieurs études, il a été demontré que des concentrations élevées de zinc de plusieurs espèces dont l'homme, existent dans la choroide des yeux. Il a aussi été clairement établi chez le singe que le clioquinol atteint dans la choroide des concentrations elevées, exactement dans les mêmes sites anatomiques où d'autres études ont identifié le site de l'activité des MMPs et leurs TIMPs respectifs.

De plus le phanquinone et le clioquinol à cause de leurs capacités de chelate le cuivre possède un effet anti-oxidant de"scavenger"pour des radicaux libre d'ozygène.

La composition pharmaceutique utilisant le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons, comprend de préference une ou plusieurs adjuvants (carriers) et, en option, un ou plusieurs constituants actifs. Les adjuvants (carriers) doivent êtres compatibles avec les autres ingrediens de la composition et ne pas être nocifs pour le receveur. Dans une mise en application préférée, le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons et en plus les autres constituants de la composition pharmaceutiques, sont purifiés.

Il est préferable que la quantité de phanquinone, le clioquinol ou de leurs combinaisons avec en plus les autres constituants requis pour la prévention ou le

traitement varie selon le mode d'administration, la maladie à traiter, la condition, l'âge

et l'historique du sujet, et la formulation galénique de la composition pharmaceutique. Quand on traite un patient avec une maladie des yeux, la quantité du phanquinone et/ou du clioquinol doit être de préference adequate pour avoir au moins une inhibition partielle sur au moins un des enzymes appartenant au groupe des métalloprotéinsases
En général, une quantité appropriée pour la composition pharmaceutique orale est, par exemple 1 mg à 1 g, de préférence 10 mg à 50 mg de phanquinone et/ou 1 mg à 1 g de clioquinol, de préférence 20 mg à 250 mg. Un autre exemple peut être, une quantité appropriée d'un mélange de phanquinone et du clioquinol dans des quantités de 1 mg à 1 g de chacun de deux constituants.

Si la vitamine 612 est sélectionnée comme ingrédient actif de la composition pharmaceutique, la quantité à admisitrer est celle nécessaire pour inhiber tout effet nocif du clioquinol, soit de 5 micro g à 2 mg. Dans le cas d'une pommade ophtalmique localement appliqué ou de collyre (gouttes ophtalmiques) la composition pharmaceutique efficace devrait être par exemple de 0.1 à 3 % de phanquinone, du clioquinol ou de leur mélange.

Les quantités réellement administrées de phanquinone et/ou de clioquinol et en option d'autres constituants, tels que la vitamine B12, peuvent être supervisés par le médecin traitant. Si la composition pharmaceutique en plus du phanquinone et/ou du clioquinol comprend d'autres constituants actifs ils peuvent être dans la même composition pour êtres administrés en association en même temps, ou dans des compositions différentes pour être administrés simultanément mais séparément, ou séquentiellement ; les ingrédients actifs les plus actifs peuvent être administrés avant ou après l'administration du phanquinone et/ou du clioquinol.

Les formulations pharmaceutiques incluant celles qui sont appropriées à l'

usage perenteral (intra-musculaire et intraveineux) oral, rectal, local dans les yeux, (des pommade et des collyres), ou l'administration intradermique, y compris les préparations transdermique, bien que pour les yeux les voies preferentielles orale et topique sont preferées. Donc la composition pharmaceutique peut être formulée en comprimés, pillules, capsules, sirops, suppositoires, en application transdermique,

poudres, spécialement poudres lyophilisées pour reconstituer avec un porteur (carrier) en vue d'une administration intra-veineuse, des pommades occulaires, des collyres, des solutions occulaires et des solutions pour injections intra-occulaires. La préparation pharmaceutique peut être réalisée en utilisant des porteurs (carriers) conventionels.

Le terme"carrier" (porteur) se référe à un diluant, adjuvant, excipient, ou vehicule avec lequel la thérapie est administrée. Le carrier dans la composition pharmaceutique peut comprendre un lieur (binder), tel que la cellulose

microcrystalline, la polivinylpyrrolidone (polyvidone or povidone), le polysorbate 80, le polyethylene glycol (Macrogol), la gomme, le tragacanthe, la gelatine, l'amidon, le lactose, ou le monohydrate de lactose ; un agent désintégrant, tel que l'acide alginique, l'amidon de maïs, et les similaires, un lubrifiant ou surfactant, tel que le stearate de magnesium, ou de sodium, be sulfate de lauryl, un glissant, tel que le dioxide colloidalle de silicone, un agent adoucissant, tel que la sucrose ou la saccharine ; et/ou un agent aromatique, tel que le peppermint, le salicylat de methyl et l'essence d'orange.

Des formulations pharmaceutiques adéquates pour l'administration orale, par exemple des comprimés (tablettes) et des pillules, peuvent être obtenues par compression ou par moulage, et en option avec un ou plusieurs ingrédients accessoires. Les comprimées compressées peuvent être préparées en mélangant le ou les constituants et en compressant le mélange obtenu dans un appareil approprié pour former les comprimés de taille determinée. Avant le mélange, le phanquinone

ou le clioquinol ou leur méelange, peuvent être mélangés avec un lieur (binder), un lubrifiant, un diluant inerte et avec ou sans un agent déséntegrant et de plus les autres constituants necessaires en option, et le tout peut être mélangé avec un diluant, un lubrifiant eVou un surfactant.

Dans une mise en application préférée, la poudre coulante de phanquinone eVou de clioquinol est mélangée dans un lieur (binder), tel que la cellulose microcrystalline, et un surfactant, tel que le sulphate de lauryl, jusqu'à ce qu'un mélange homogène soit obtenu. Après quoi, un autre lieur (binder), tel que le

polyvidone, est transféré dans le mélange en remuant. Quand une distribution uniforme est obtenue une solution aqueuse de vitamine 812 est ajoutée en remuant constamment. Le mélange dit est passé à travers des tamis à granulations et il est sèeché par dessiccation avant d'être compressé en compimés (tablettes) dans un appareil standard.

Dans une seconde mise en application préférée, la poudre coulante de phanquinone et/ou de clioquinol est mélangée avec des surfactants et/ou avec des agents emulsifiants, tel que la Sapamine (N- (4'-stearoyl amino phenyl)trimethylammonium methyl acide sulphurique) et le monohydrate de lactose jusqu'à obtention d'une distribution uniforme des constituants. Une seconde préparation qui contient un agent désintégrant, tel que l'amidon de maïs, est ajouté dans le phanquinone et/ou le clioquinol en remuant constamment. Une telle seconde préparation peut être préparée en ajoutant de l'eau bouillante en excès à l'amidon de maïs suspendu dans de l'eau froide. Le mélange final est granulé et séché comme décrit précédemment il est mélangé avec l'amidon de maïs et le stéarate de magnésium et il est finalement compressé dans des comprimés (tablettes) dans un appareil standard.

Un comprimé (tablette) peut être enrobée ou non enrobée (coated ou uncoated). Un comprimé (tablette) non enrobée peut être entallé. Une tablette enrobée peut être couverte de sucre, du shellaque, d'un film ou des agents de protection inta-gastrique (enteric coating agents).

Les formulations pharmaceutiques adéquates pour admininistration parenterale inclus des solutions ou suspensions des constitaunts tels que comme précédemment décrits. Une solution aqueuse ou huileuse peut être utilisée. Les porteurs (carriiers) peuvent être des liquides stériles comme le pétroleum, ou des huiles d'origine animale, vegetale ou synthétique (comme l'huile de cacaouette, l'huile de soja, l'huile minérale, l'huile de sésame, et autres. Les formulations pour administration parenterale incluses également les poudres lyophilisées de phanquinone et/ou de clioquinol et en option une solution aqueuse de carboxymethylcellulose et/ou du sulfate de lauryl.

Quand la formulation pharmaceutique est une capsule, elle peut contenir un porteur liquide tel qu'une huile grasse, comme le beurre de cacao.

Les excipients pharmaceutiques appropriés sont l'amidon, le glucose, le lactose, la gélatine, le maïs, le riz, la chaux, la silice, le stéarate de sodium, le monostéarate de glycérole, l'éthanol, l'eau de glycole, et autres. Les compositions peuvent être des solutions, y compris les collyres, des suspensions, des onguents, ou les pommades, les crèmes, les gouttes, les emulsion, les comprimés (tablettes), des pillules, des capsules, des poudres, des formulations retards et similaires. La composition peut être formulée comme suppositoire, avec des liants (binders) traditionelles ou des porteurs (carriers) tels que les triglycerides.

Dans une mise en application de la composition pharmaceutique, le phanquinone, le clioquinol ou leurs mélange, et en option les autres constituants actifs, sont compris comme entités pharmaceutques separées. Dans un exemple, une entité peut comprendre la vitamine 812. Les deux entités, peuvent êtres administrés simultanement ou en séquentiellement. Par exemple, l'entité qui comprend le phanquinone ou le clioquinol ou leur mélange, peut être administrée en premier suivi de la vitamine B12, la dernière etante administrée dans un jour, ou une semaine, ou un mois après l'administration du phanquinone ou du clioquinol. Si deux entités sont administrées séquentiellement, l'entité qui comprend le phanquinone ou le clioquinol, est de préférence administrée pour une à trois semaines suivi par une période de lavage d'une à trois semaines, pendant laquelle l'entité qui comprend la vitamine B12 est administrée, mais pas l'entité qui comprend le phanquinone ou le clioquinol..

Après la période de lavage un autre traitemnt peut être répéter.

La composition pharmaceutique peut être présentée dans un emballage ou dans un kit qui comprend une ou plusieurs des entités qui contiennent un ou plusieurs des ingrédients des compositions pharmaceutiques de l'invention. En option avec de telles entités il peut y avoir une notice écrite par une agence gouvernementale qui règle la fabrication ou la mise au marche ou la vente des produits pharmaceutiques ou biologiques, notice qui reflette l'approbation par l'agence de la fabrication ou la mise au marché ou la vente pour une administration à usage humain.

D'autres caractéristiques et avantages de l'invention vont être expliqués cidessous comme exemples de l'invention : Exemple 1
Préparation d'une composition pharmaceutique comprenante du phanquinone, du clioquinol et de la vitamine 612.

250 g de phanquinone et 250 g du clioquinol sont mélangés avec 200g de sapamine (N'- (4'-steatoryl aminophenyl)-trimethylamonium methyl acide sulphurique) et 1025 g de mono-hydrate de lactose pour une durée de 5 minutes. 300 g d'eau bouillante sont ajouté en une fois dans un mélange de 100 g d'amidon de maïs dans 100 g de l'eau froide. La suspension du maïs, est refroidie à 400 C et ajoutée à la poudre de phanquinone et de clioquinol en remuant constamment. En suite, une solution aqueuse de 5 g de vitamine B12 est ajoutée. Le mélange a été granulé en utilisant un tamis graduée de 2.5 mm et a été dessiquée pendant 18 heures à 400 C. Les granules sèchés son mélanger avec 400 g d'amidon de maïs et 20 g de stéarate de magnésium. Le mélange final est formulé en comprimés (tablettes) avec un diamètre 8.0 mm et un poid de 500 mg. Exemple 2
Préparation d'une composition pharmaceutique comprenante du phanquinone.

250 g de phanquinone est mélangé avec 200g de sapamine (N'- (4'-steatoryl aminophenyl) - trimethylamonium methyl acide sulphurique) et 1025 g de monohydrate de lactose pour une durée de 5 minutes. 300 g d'eau bouillante sont ajoutées dans un mélange de 100 g d'amidon de maïs dans 100 g d'eau froide. La suspension du maïs, est refroidie à 400 C et ajoutée à la poudre de phanquinone en remuant constamment. Le mélange est granulé en utilisant un tamis graduée de 2.5 mm et est dessiquée pendant 18 heures à 400 C. Les granules sèchés on été mélangé avec 400 g d'amidon de maïs et 20 g de stéarate de magnésium. Le mélange final est formulé en comprimés (tablettes) avec un diamètre 8.0 mm et un poid de 200 mg.

Plusieurs publications sont citées dans cette description de l'invention sous référence, dans leur integralité.

Il'est évident dans cette invention ainsi décrite, que la même chose peut être sujet à plusieurs variations. De telles variations ne peuvent pas être considérés lointaines de l'esprit et de la visée de l'invention. De telles variations sont suffisées par une personne qualifiée en la matière, faire partie des revendications suivantes de l'invention :

Claims

REVENDICATIONS

1. Une utilisation du phanquinone ou du clioquinol ou de leurs combinaisons, en vue de la fabrication d'une composition pharmaceutique pour le traitement ou la prévention de la

DMLA influencée par l'action des métalloprotéinases de la matrice extracellulaire (MMPs).

2. Utilisation selon la revendication 1, où la maladie à traiter est influencée par un

déséquillibre des MMPs parmi lesquels sont inclus les métalloprotéinases MMP-1,

MMP-2, MMP-3, MMP-4, MMP-7, MMP-9, MMP-12 et MMP-14 ou d'autres métalloprotéinases dependantes du zinc.

3. Utilisation selon la revendication 1 et 2 où la maladie à traiter est influencée par un déséquillibre ou mauvais fonctionnement de l'action des MMPs ou des inhibiteurs tissulaires des métalloprotéinases (TIMPs) respectifs ou par leurs effets anti-oxidatifs.

4. Utilisation selon la revendication 1 à 3, où les maladies sont des conditions dégénérative de la rétine dans lesquelles sont inclus les formes atrophiques et exsudative de la DMLA, ainsi que des maladies dégénératives liées a l'âge des photo- récepteurs, la rétinite pigmentaire simplex, la rétinopathie diabétique proliferante, la dystrophie fundulaire de Sorby, la fossé maculaire, le syndrome d'histoplasmose occulaire présumé, la membrane épirétinienne, le syndrome de traction vitréo- maculaire, le micro-anévrisme sous-rétinien haemorrhagiques, l'occlusion de la veine centrale de la rétine avec haemorrhagie et la vitréo-rétinopathie proliferante ou de toute autre conditions pathologique vitréo-rétinienne pour le retablissement et le re- équillibrage de l'activité enzymatique entre les MMPs et leurs TIMPs respectifs.

5. Utilisation selon la revendication 1 à 4, où le clioquinol, le phanquinone ou leurs combinaisons, modulen le zinc ou le cuivre dans les yeux et réduisant, diminuant, ou inhibant l'activité enzymatique des MMPs ou re-etablissant l'activité equillibrée entre les

MMPs et leurs TIMPs respectifs.

6. Utilisation selon la revendication 1 à 5, où le clioquinol est administré en quantités allant de 1 mg à 1 g, ou de preference de 20 mg à 250 mg.

7. Utilisation selon la revendication 1 à 5, où le phanquinone est administré en quantités allant de 1 mg à 1 g ou de preference de 10 mg à 50 mg est utilisé en combinaison

avec le clioquinol administré à des quantités allant de 1 mg à 1 g, ou de preference de 20 mg à 250 mg.

8. Utilisation selon la revendication 1 à 5, où le phanquinone est administré en quantités de 1 mg à 1 g ou de préférence 10 mg à 50 mg sans le clioquinol.

9. Utilisation selon la revendication 1 à 8, où le phanquinone et le clioquinol ou leurs combinaisons sont administrées dans une préparation pharmaceutique.

10. Utilisation selon la revendication 1 à 9, où le phanquinone et le clioquinol ou leurs combinaisons sont administrées une à quatre fois par jour.

11. L'utilisation selon n'importe laquelle des revendications précédentes où un sel métalique comme group prosthétique est donnée avant, simultanement, ou après l'administration du phanquinone, ou du clioquinol ou de leurs combinaisons.

12. L'utilisation selon la revendication 11 où le groupe prothétique est la vitamine 612.

13. L'utilisation selon n'importe laquelle des revendications precedentes où la quantité de vitamine B12 est necessaire pour inhiber des effets indésirables provoqués par l'administration du clioquinol.

14. L'utilisation selon la revendication 11 où la quantité de vitamine B12 est de 5 microg à 2 mg.

15. L'utilisation selon la revendication 11 où la quantité de vitamine B12 est de 0.5 mg to 1 mg.

16. L'utisation selon n'importe laquelle des revendications précédentes où la composition pharmaceutique est formulée pour usage occulaire ophtalmologique, orale, parenterale ou intradermique

17. Une méthode pour traiter un sujet ayant ou suspecté d'avoir une condition pathologique qui peut être influencée par l'action chelatrice sur le zinc et sur les MMPs et-ou sur les TIMPs respectifs, et qui comprend l'administration d'une quantité de phanquinone, du clioquinol ou de leurs combinaisons pour traiter ou prévenir des conditions pathologiques liées à des états de dégénérescence maculaire ou vitréo-rétiniennes des yeux.

18. Une méthode pour traiter un sujet ayant ou suspecté d'avoir une condition pathologique qui peut être influencéee par un stress oxidatif en plus d'un déséquillibre de l'interaction

physiologique réguliaire des MMPITIMP, et qui comprend l'administration à un sujet d'une quantité de phanquinone, du clioquinol ou de leurs combinaisons nécessaires pour traiter ou prevenir des conditions pathologiques liées à des états de dégénérescence maculaire ou vitréo-rétiniennes des yeux.

19. Une méthode pour traiter un sujet avoir ou suspecté d'avoir une condition pathologique qui peut être influencée par un déséquillibre entre les MMPs et/ou leurs respectifs TIMPs dans les yeux, et qui comprend l'administration au dit sujet d'une : (a) quantité de clioquinoi ou de phanquinone ou de leurs combinaisons pour traiter ou prévenir une maladie influencée par un déséquillibre entre l'action des MMPs et/ou leurs respectifs TIMPS, ou d'un stress oxidatif, (b) quantité d'une substance ou un mélange des substances sélectionnés parmi les groupes prothétiques de sels métalliques ou de groupes prothétiques ayant une activité différente du phanquinone ou du clioquinol, pour traiter ou prévenir une maladie influencéee par un déséquillibre entre l'action des MMPs et/ou leurs respectifs TIMPS, ou d'un stress oxidatif.

20. La méthode selon la revendication 19, où la quantité totale des substances dans le paragraphe (b) est suffisante pour accroître l'effet en vue d'une prévention ou un traitement thérapeutique des conditions pathologiques influencées par l'action des

MMPs ou pour empêcher tout effet négatif adverse.

21. Une méthode selon les revendications 18,19 ou 20, où la quantité du dosage quotidien du clioquinol adminsitré est 1 mg à 1 g.

22. Une méthode selon les revendications 18,19 ou 20, où la quantité du dosage quotidien du clioquinol adminsitré est 1 mg à 250 mg et adminsitré une à quatre fois par jour.

23. Une méthode selon les revendications 18,19 ou 20, où la quantité du dosage quotidien du phanquinone adminsitré est de1 mg à 1 g.

24. Une méthode selon les revendications 18,19 ou 20, où la quantité du dosage quotidien du phanquinone adminsitré est de1 mg à 250 mg une à quatre fois par jour.

25. Une méthode selon la revendication 19, où la quantité des substances dans le paragraphe (b) est de 5 microg à 250 mg.

26. Une méthode selon la revendication 19, où le composant différent du phanqumone ou du clioquinol qui possède une autre activité est la vitamine 812.

27. Une méthode selon la revendication 19, où la quantitée de vitamine B12 est de 5 microg à 2 mg.

28. Une méthode selon la revendication 19, où la quantitée de vitamine 612 est de 0.5 mg à

1 mg.

29. Une méthode pour traiter un individu ayant ou suspect d'en avoir une condition pathologique ou une maladie influencée par les MMPs comprenant administration : (a) D'une quantité de clioquinol capable de traiter ou prévenir un désèquillibre entre l'action des MMPs et leurs TIMPs respectifs ou d'un stress oxidatif, et (b) A un mélange de phanquinone et de vitamine B, la quantité du phanquinone étant influencée par l'effet chelateur sur les MMPs dépendantes du zinc provoquant la condition pathologique ou la maladie et d'une quantité de vitamine B12 qui est suffisante pour inhiber les effets adverses négatifs provoqués par l'administration du clioquinol.

30. La méthode selon les revendications 19 ou or 29, où le wherein (a) phanquinone ou le clioquinol et and (b) la ou les substances sont comprises dans une seule composition pharmaceutique.

31. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le (a) phanquinone ou le clioquinol et (b) la ou les substances sont administrées simultanèment.

32. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le (a) phanquinone ou le clioquinol et (b) la ou les substances sont administrés séquentillement l'une après l'autre.

33. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le clioquinol et la vitamine 812 sont administrés séquentillement l'un après l'autre.

34. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le phanquinone et la vitamine B12 sont administrés séquentiellement l'un après l'autre.

35. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le phanquinone est administré en premier suivi d'une deuxièeme période pendant laquelle le clioquinol est adminsitré.

36. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le clioquinol est administré en premier suivi d'une deuxième période pendant laquelle le phanquinone est adminsitré.

37. La méthode selon les revendications 19 ou 29, où le phanquinone est administré en premier suivi d'une deuxième période pendant laquelle le clioquinol est adminsitré.

38. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où la première période d'administration est d'une duréee, d'une à trois semaines et la seconde une à quatre semaines.

39. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons sont formulées pour une adminsitration orale.

40. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons sont formulées pour une adminsitration occulaire ophtalmologique.

41. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons sont formulées pour une adminsitration injectée par voie intra-oculaire.

42. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons sont formulées pour une administration parenterale.

43. L'utisation selon n'importe quelles revendications précédentes où le phanquinone, le clioquinol ou leurs combinaisons sont formulées pour une adminsitration intra-dermique ou transdermique.