UA125252C2 - Химерний антигенний рецептор, що націлений на варіант iii рецептора епідермального фактора росту - Google Patents

Химерний антигенний рецептор, що націлений на варіант iii рецептора епідермального фактора росту Download PDF

Info

Publication number
UA125252C2
UA125252C2 UAA201808794A UAA201808794A UA125252C2 UA 125252 C2 UA125252 C2 UA 125252C2 UA A201808794 A UAA201808794 A UA A201808794A UA A201808794 A UAA201808794 A UA A201808794A UA 125252 C2 UA125252 C2 UA 125252C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acid
acid sequence
zeo
sokz
sac
Prior art date
Application number
UAA201808794A
Other languages
English (en)
Inventor
Оі Кван Вонг
Ои Кван Вонг
Джойс Чінг Чоу
Джойс Чинг ЧОУ
Матільд Бруннільд Дюссо
Матильд Бруннильд Дюссо
Джуліан Сміт
Джулиан СМИТ
Барбра Джонсон САСУ
Original Assignee
Пфайзер Інк.
Пфайзер Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пфайзер Інк., Пфайзер Инк. filed Critical Пфайзер Інк.
Publication of UA125252C2 publication Critical patent/UA125252C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies

Abstract

Винахід стосується химерного антигенного рецептора (CAR), який специфічно зв’язується з EGFRvIII (варіантом III рецептора епідермального фактора росту), сконструйованої імунної клітини, що містить такі CAR, CAR-кодуючої нуклеїнової кислоти, способів їх одержання, одержання сконструйованих імунних клітин і нуклеїнових кислот та застосування таких CAR та сконструйованих імунних клітин для лікування EGFRvIII-опосередкованих видів раку, зокрема гліобластоми. 253

Description

(57) Реферат:
Винахід стосується химерного антигенного рецептора (САК), який специфічно зв'язується з
ЕСЕРМІЇЇ (варіантом І рецептора епідермального фактора росту), сконструйованої імунної клітини, що містить такі САК, САК-кодуючої нуклеїнової кислоти, способів їх одержання, одержання сконструйованих імунних клітин і нуклеїнових кислот та застосування таких САК та сконструйованих імунних клітин для лікування ЕСЕРмМІП-опосередкованих видів раку, зокрема гліобластоми.
Галузь техніки
Винахід відноситься до химерних антигенних рецепторів (САК). САК здатні переспрямовувати специфічність та реактивність імунних клітин у напрямку вибраної мішені, використовуючи властивості ліганд-зв'язуючого домену. Зокрема, винахід відноситься до САК, які специфічно зв'язуються з варіантом І рецептора епідермального фактора росту (ЕСЕКМПІ- специфічні САК). Винахід також відноситься до полінуклеотидів, що кодують ЕСЕЕМПІ- специфічні САК, та ізольованих клітин, що експресують ЕСЕКМмМІІІ-специфічні САК на їхній поверхні. Винахід також відноситься до способів інжинірингу імунних клітин, що експресують
ЕСЕВМПІ-специфічні САК на їхній поверхні. Винахід є особливо придатним для лікування солідних пухлин, таких як мультиформна гліобластома (СВМ), недрібноклітинний рак легень, рак голови та шиї, рак молочної залози, рак яєчників і рак простати. Винахід також відноситься до імунних клітин, що містять ЕСЕКМІПІ-специфічні САК (ЕСЕКМПІ-специфічні САК-Т-клітини), композицій, що містять ЕСЕЕмМІІ-специфічні САБК-Т-клітини, і способів застосування ЕСЕЕКМІІ- специфічних САК-Т-клітин для лікування ЕСЕКмМПІ-опосередкованих патологій.
Рівень техніки
Варіант І ЕСЕК (ЕСЕРМмІ!), специфічний до пухлини мутант ЕСЕК, являє собою продукт геномного реаранжирування, який часто асоційований з генною ампліфікацією ЕСЕК дикого типу. ЕСЕЕМІЇЇ формується шляхом делеції екзонів 2-7 всередині рамки зчитування, призводячи до делеції 267 амінокислот із заміщенням гліцину у точці з'єднання. Вкорочений рецептор втрачає свою здатність до зв'язування лігандів, але отримує конститутивну кіназну активність.
Цікаво, що ЕСЕКМмМІ завжди коекспресується з ЕСЕК дикого типу повної довжини у одних і тих самих ракових клітинах. Більше того, ЕСЕКмІІ-експресуючі клітини проявляють підвищену проліферацію, інвазію, ангіогенез і резистивність до апоптозу.
ЕСЕРМІЇЇ найчастіше знаходиться у мультиформній гліобластомі (ЗВМ). Було оцінено, що 25-3596 ВМ несуть ці вкорочені рецептори. Більше того, його експресія часто відображає агресивніший фенотип і несприятливий прогноз. Окрім ВМ, експресія ЕСЕЕМІЇЇ також була відзначена в інших солідних пухлинах, таких як недрібноклітинний рак легень, рак голови та шиї, рак молочної залози, рак яєчників і рак простати. На відміну від цього, ЕСЕКМІЇ не експресується у здорових тканинах. Відсутність експресії у нормальних тканинах робить
Зо ЕСРЕРМІ ідеальною мішенню для розробки націленої терапії, специфічної до пухлини.
Адоптивний перенос Т-клітин, генетично модифікованих для розпізнавання антигенів, асоційованих із злоякісною пухлиною, був показаний як перспективний новий підхід у лікуванні раку (див., наприклад, Вгеппег еї аї.,, Ситмепі Оріпіоп іп Іттипоіоду, 22(2): 251-257 (2010);
Возепбего еї аї., Маїште Неміемв Сапсег, 8(4): 299-308 (2008)). Т-клітини можуть бути генетично модифіковані для експресії химерних антигенних рецепторів (САК), які являють собою білки злиття, що складаються із розпізнаючого антиген фрагменту та доменів активації Т-клітин (див., наприклад, ЕзПпПаг еї аї., Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА, 90(2): 720-724 (1993), апа Заадеї!|аїп еї аї., бит. Оріп. Іттипої, 21(2): 215-223 (2009)). Відповідно, лікування солідної пухлини, такої як мультиформна гліобластома, із застосуванням антагоніста, специфічного до ЕСЕЕМІЇ, що включає ЕСЕРКмМІІ-специфічні САК і ЕСЕКМмМІІ-специфічні САК-Т-клітини, може стати перспективним терапевтичним агентом.
Стислий опис винаходу
Представлені химерні антигенні рецептори (САК), які зв'язуються з ЕСЕЕМІЇ.
Продемонстровано, що деякі ЕСЕКМПІ-специфічні САК є ефективними при експресії у Т- клітинах для активації Т-клітин після контакту з ЕСЕКМІИІ. Переважно, ЕСЕКмМІІ-специфічні САК, що представлені тут, зв'язуються з людським ЕСЕМКМИІ. Крім того, переважно, ЕСЕКМПІ- специфічні САК-Т-клітини, що представлені тут, проявляють активність дегрануляції, підвищену продукцію інтерферону гамма та/або цитотоксичну активність після контакту з ЕСЕЕМПІ- експресуючими клітинами.
В одному аспекті винахід передбачає ЕСЕЕмМІІІ-специфічний САКЕ, що містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, перший трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен, причому позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить (а) варіабельний домен важкого ланцюга (МН), що містить (ї) МН-область, що визначає комплементарність, один (СОМ), що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮО МО: 62, 63, 64, 74, 75, 76, 80, 81, 82, 88, 89, 90, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 137, 138 або 139; (ії) МН-СОК2, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮО МО: 70, 71, 77, 78, 83, 84, 86, 87, 91, 92, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 127, 128, 140 або 141; та її) МН-СОКЗ, що містить послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 73, 79, 85, 114, 120, 126, 129 або 142, та/або (Б) варіабельну область легкого ланцюга (МІ), що містить(і) МІ -
СОН, що містить послідовність, показану в 5ЕО ІЮ МО: 149, 156, 159, 162, 165, 182, 185, 187 60 або 195; (і) МІЕ-СОК2 , що містить послідовність, показану у 5ЕО ІОЮ МО: 152, 157, 160, 163, 183,
186, 188 або 196; та(ії) М/-СОКЗ, що містить послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 153, 158, 161, 164, 184, 189 або 197.
В іншому аспекті винахід передбачає ЕСЕКмМПІ-специфічний САК, що містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, перший трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен, причому позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить одноланцюговий Ем-фрагмент (5СЕм), що містить варіабельний домен важкого ланцюга (МН), що містить три СОЕ. з МН-області, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 5, 9, 11, 13, 15, 37, 39, 41, 43 або 48; та/або варіабельну область легкого ланцюга (МІ), що містить три СОК з Мі -області, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮО МО: 6, 10, 12, 14, 16, 38, 40, 42 або 49. У деяких варіантах здійснення МН-область може містити послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 5, 9, 11, 13, 15, 37, 39, 41, 43 або 48, або її варіант з однією або декількома консервативними амінокислотними замінами у залишках, які не знаходяться всередині СОК, та/або МІ -область може містити амінокислотну послідовність, показану у БЕО ІЮО МО: 6, 10, 12, 14, 16, 38, 40, 42 або 49, або її варіант з однією або декількома амінокислотними замінами в амінокислотах, які не знаходяться всередині СОК. Наприклад, у деяких варіантах здійснення МН- або Мі -область зсЕм може містити амінокислотну послідовність, описану вище, або її варіант з не більше, ніж 10, 9, 8, 7,6, 5, 4, 3, 2 або 1 консервативною заміною у залишках, які не знаходяться всередині СОК.
У деяких варіантах здійснення винахід передбачає ЕСЕКмМПІ-специфічний САК, що містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, перший трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен, причому позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить одноланцюговий Ем- фрагмент (5сЕм), що містить варіабельний домен важкого ланцюга (МН), що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 11, 15, 30, 37 або 41; та/або варіабельну область легкого ланцюга (МІ), що містить послідовність, показану у 5ЕО ІЮ МО: 12, 16, 31, 38 або 42. У деяких варіантах здійснення МН містить послідовність, показану у 5ЕО ІЮ МО: 11, а Мі містить послідовність, показану у 5ЕБЕО ІЮО МО: 12. У деяких варіантах здійснення МН містить послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 15, а Мі. містить послідовність, показану у 5ЕО ІЮО МО: 16.
У деяких варіантах здійснення МН містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 30, а МІ. містить послідовність, показану у 5ЕБЕО ІО МО: 31. У деяких варіантах здійснення МН містить послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 37, а МІ. містить послідовність, показану у 5ЕО ІЮО МО: 38.
Ко) У деяких варіантах здійснення УН містить послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 41, а МІ. містить послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 42.
У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен СОЗ дзета. У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен 4-188В. У деяких варіантах здійснення САК може додатково містити
З5 другий внутрішньоклітинний сигнальний домен. У деяких варіантах здійснення другий внутрішньоклітинний сигнальний домен може містити сигнальний домен 4-188. У деяких варіантах здійснення перший внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен
СОЗ дзета, а другий внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен 4-188.
У деяких варіантах здійснення САК може містити стебловий домен між позаклітинним ліганд-зв'язуючим доменом і першим трансмембранним доменом. У деяких варіантах здійснення стебловий домен може бути вибраний із групи, що складається 3: людської шарнірної ділянки СОвса, людської шарнірної ділянки СО28, шарнірної ділянки ЇДО1 та шарнірної ділянки ЕсукШа.
У деяких варіантах здійснення перший трансмембранний домен може містити трансмембранний домен ланцюга СОва.
У деяких варіантах здійснення САК може містити інший позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, який не є специфічним для ЕСЕЕМІЇ.
У деяких варіантах здійснення САК, позаклітинний|(і) ліганд-зв'язуючий(ї) домен(и), перший трансмембранний домен і внутрішньоклітиннийіії) сигнальний(ї) домен(и) знаходяться на одному поліпептиді.
У деяких варіантах здійснення САК може містити другий трансмембранний домен, причому перший трансмембранний домен і позаклітинний(і) ліганд-зв'язуючиййї) домен(и) знаходяться на першому поліпептиді, і причому другий трансмембранний домен і внутрішньоклітинний|(і) сигнальнийі(ії) домен(и) знаходяться на другому поліпептиді, причому перший трансмембранний домен містить трансмембранний домен з а-ланцюга високоафінного рецептора ІДЕ (Есе), а другий трансмембранний домен містить трансмембранний домен з у- або ВД-ланцюга ЕсеєКІ. У деяких варіантах здійснення САК може містити третій поліпептид, що містить третій трансмембранний домен, зшитий з внутрішньоклітинним сигнальним доменом із костимулюючої молекули, причому третій трансмембранний домен містить трансмембранний домен з у- або вр- бо ланцюга ЕсекІ.
В іншому аспекті винахід передбачає ізольований полінуклеотид, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує ЕСЕКмМПІ-специфічний САК, як описано тут.
В іншому аспекті винахід передбачає вектор експресії, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує антитіло ЕСЕКмМПІ-специфічного САКЕ, як описано тут.
В іншому аспекті винахід передбачає сконструйовану імунну клітину, що експресує на мембрані своєї клітинної поверхні ЕСЕКМПІ-специфічний САК, як описано тут. У деяких варіантах здійснення сконструйована імунна клітина може містити інший САК, який не є специфічним для ЕСЕЕМІІ.
У деяких варіантах здійснення сконструйована імунна клітина може містити полінуклеотид, що кодує суїцидальний поліпептид. У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид являє собою КОМ8. У деяких варіантах здійснення полінуклеотид, що кодує суїцидальний поліпептид, знаходиться в іншій молекулі нуклеїнової кислоти, ніж полінуклеотид, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує ЕСЕКМІЇ-специфічний САК. У деяких варіантах здійснення полінуклеотид, що кодує суїцидальний поліпептид, являє собою частину тієї самоїмолекули нуклеїнової кислоти, що і полінуклеотид, який містить послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує ЕСЕКмМІПІ-специфічний САК.
У деяких варіантах здійснення сконструйована імунна клітина, що містить ЕСЕРКМПІ- специфічний САК, може містити суїцидальний поліпептид в окремому поліпептидному ланцюгу від поліпептидного ланцюга ЕСЕКмМІПІ-специфічного САК.
У деяких варіантах здійснення ЕСЕКмМПІ-специфічний САК, як описано тут, також містить суїцидальний поліпептид у тому самому поліпептидному ланцюгу, що і САК. Наприклад, суїцидальний поліпептид може знаходитися між 5сЕм і шарнірною послідовністю САК. У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид у САК може мати К2-формат, як передбачено тут. У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид містить епітоп, який розпізнається рітуксимабом.
Також тут передбачений полінуклеотид, що кодує ЕСЕКМІІ-специфічний САК, який також кодує суїцидальний поліпептид у САК.
У деяких варіантах здійснення імунна клітина може бути одержана із запаленого Т- лімфоциту, цитотоксичного Т-лімфоциту, регуляторного Т-лімфоциту, Т-лімфоциту пам'яті, Т-
Зо лімфоциту хелпера, Т-лімфоциту натурального кілера або натуральної клітини-кілера.
У деяких варіантах здійснення сконструйована імунна клітина може містити розрив в одному або більше ендогенних генах, причому ендогенний ген кодує ТСКа, ТСКВ, СО52, глюкокортикоїдний рецептор (СК), дезоксицитидинову кіназу (СК) або білок імунної контрольної точки, такий як, наприклад, білок програмованої смерті-1 (РО-1).
У деяких варіантах здійснення імунна клітина одержана від здорового донора. У деяких варіантах здійснення імунна клітина одержана від пацієнта.
В іншому аспекті винахід передбачає сконструйовану імунну клітину, що експресує на мембрані своєї клітинної поверхні ЕСЕЕміІПІ-специфічний САКЕ, як описано тут, для застосування як лікарський засіб. У деяких варіантах здійснення лікарський засіб призначений для застосування у лікуванні ЕСЕЕКМІПІ-пов'язаного раку (наприклад, будь-якого раку з експресією
ЕСЕРМІЇ), вибраного із групи, що складається з мультиформної гліобластоми, анапластичної астроцитоми, гігантоклітинної гліобластоми, гліосаркоми, анапластичної олігодендрогліоми, анапластичної епендимоми, анапластичної олігоароцитоми, карциноми хороїдного сплетення, анапластичної гангліогліоми, пінеобластоми, пінеоцитоми, менінгіоми, медулоепітеліоми, епендимобластоми, медулобластоми, супратенторіальної примітивної нейроектодермальної пухлини, атипової тератоїдної/рабдоїдної пухлини, змішаної гліоми, раку голови та шиї, недрібноклітинного раку легень, раку молочної залози, раку яєчників, раку простати, медулобастоми, колоректального раку, раку анального каналу, раку шийки матки, раку нирок, раку шкіри, раку підшлункової залози, раку печінки, раку сечового міхура, раку шлунка, раку щитовидної залози, мезотеліоми, раку матки, лімфоми і лейкемії.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб інжинірингу імунної клітини, що включає: забезпечення імунної клітини й експресію на поверхні клітини щонайменше одного ЕСЕКМІЇІ- специфічного САК, як описано тут.
У деяких варіантах здійснення спосіб включає: забезпечення імунної клітини; введення у клітину щонайменше одного полінуклеотиду, що кодує зазначений ЕСЕКмМІІІ-специфічний САК; і експресію зазначеного полінуклеотиду в клітині.
У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення імунної клітини; введення в клітину щонайменше одного полінуклеотиду, що кодує зазначений ЕСЕКмМІПІ-специфічний САКЕ; і введення щонайменше одного іншого САК, який не є специфічним для ЕСЕЕМІЇ. 60 В іншому аспекті винахід передбачає спосіб лікування суб'єкта, що страждає від стану,
асоційованого із клітинами злоякісної пухлини, при цьому спосіб включає: забезпечення імунної клітини, що експресує на поверхні ЕСЕКмМПІ-специфічний САК, як описано тут; і введення зазначених імунних клітин зазначеному пацієнту.
В іншому аспекті винахід забезпечує фармацевтичну композицію, що містить сконструйовану імунну клітину, як описано тут.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб лікування стану, асоційованого із клітинами злоякісної пухлини, що експресують ЕСЕРМІІІ у суб'єкта, що включає введення суб'єкту, який потребує цього, ефективної кількості фармацевтичної композиції за пунктом формули винаходу, що містить сконструйовану імунну клітину, як описано тут. У деяких варіантах здійснення стан являє собою рак. У деяких варіантах здійснення рак являє собою ЕСЕРЕМІІ-пов'язаний рак, вибраний із групи, що складається з мультиформної гліобластоми, анапластичної астроцитоми, гігантоклітинної гліобластоми, гліосаркоми, анапластичної олігодендрогліоми, анапластичної епендимоми, анапластичної олігоароцитоми, карциноми хороїдного сплетення, анапластичної гангліогліоми, пінеобластоми, пінеоцитоми, менінгіоми, медулоепітеліоми, епендимобластоми, медулобластоми, супратенторіальної примітивної нейроектодермальної пухлини, атипової тератоїдної/рабдоїдної пухлини, змішаної гліоми, раку голови та шиї, недрібноклітинного раку легень, раку молочної залози, раку яєчників, раку простати, медулобастоми, колоректального раку, раку анального каналу, раку нирок, раку шийки матки, раку печінки, раку підшлункової залози, раку шлунка, раку щитовидної залози, мезотеліоми, раку матки і раку сечового міхура.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб інгібування росту або прогресування пухлини у суб'єкта, який має клітини злоякісної пухлини, що експресують ЕСЕРЕМІЇЇ, що включає введення суб'єкту, який потребує цього, ефективної кількості фармацевтичної композиції, що містить сконструйовану імунну клітину, як описано тут.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб інгібування метастазу клітин злоякісної пухлини, що експресують ЕСЕКМІ у суб'єкта, що включає введення суб'єкту, який потребує цього, ефективної кількості фармацевтичної композиції, що містить сконструйовану імунну клітину, як описано тут.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб індукування регресії пухлини у суб'єкта, який має клітини злоякісної пухлини, що експресують ЕСЕРМІЇЇ, що включає введення суб'єкту, який
Зо потребує цього, ефективної кількості фармацевтичної композиції, що містить сконструйовану імунну клітину, як описано тут.
Стислий опис фігур/креслень
На фіг. 1А, фіг. 18 ї фіг. 1С показані приклади ЕГАСсС5-гістограм зв'язування трьох ЕСЕКМІІ- антитіл: тАб 4259 (фіг. 1А), 32А10 (фіг. 18) і 3208 (фіг. 1С), з трьома лініями Е98-клітин: Е98 (ЕСЕК негативний), ЕБ98-ЕСЕКУЛ та Б98-ЕСЕРМІИ. Вісь Х являє собою інтенсивність флуоресценції; вісь М являє собою відсоткове відношення максимум/нормований до модального значення.
На фіг. 2А показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена експресія ЕСЕКМІЇІ- специфічного САК для САК, що містять різні ЕСЕКмМІПІ-специфічні клони.
На фіг. 28 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнене відсоткове відношення
ЕСЕВМПІ-специфічних САБ-Т-клітин, які зв'язуються з рекомбінантними ЕСЕК-тЕс і ЕСЕРБМПІ- тес.
На фіг. 28 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена експресія САК, що містять 10 різних ЕСЕКМмМІІ-специфічних клонів у САК-Т-клітинах.
На фіг. З показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнені активності дегрануляції
ЕСЕВМПІ-специфічних САК-Т-клітин, що експресують різні ЕСЕКМПІ-специфічні клони, окремо або після спільного культивування з різними лініями клітин: клітини, які не експресують будь- який ЕСЕК-білок (МСІ-Н522 і 0О87-КО), клітини, що експресують високий рівень ЕСЕК дикого типу (087-КО-ЕСЕРМІ), або клітини, які експресують низькі (МСІ-Н522-ЕСЕРЕМІЇ) і високі (087-
КО-ЕСЕРЕМІЇ) рівні ЕСЕЕМІІ.
На фіг. 4 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена секреція ІЕМу ЕСЕЕМПІ- специфічними САК-Т-клітинами, що експресують різні ЕСЕКмМПІ-специфічні клони, окремо або після спільного культивування з різними лініями клітин: клітини, які не експресують будь-який
ЕСЕВ-білок (МСІ-Н522 ії Ш87-КО), клітини, що експресують високий рівень ЕСЕК дикого типу (087-КО-ЕСЕВМ), або клітини, які експресують низькі (МСІ-Н522-ЕСЕРЕМІЇ) і високі (087-КО-
ЕСЕРМІЇ) рівні ЕСЕЕМІЇЇ.
На фіг. 5 показана стовпчикова діаграма, на якій порівняна цитотоксичність ЕСЕЕМПІ- специфічних САК-Т-клітин, що експресують різні ЕСЕКмМІИІ-специфічні клони у напрямку лінії клітин, що експресує ЕСЕК дикого типу, (087-КО-ЕСЕЕмМІ) з лініями клітин з високою (087-КО- 60 ЕСРЕРМІЇ) і низькою експресією (МСІ-Н522-ЕСЕВМІ) ЕСЕВМІП.
На фіг. 6 показана діаграма, на якій узагальнені активності ЕСЕКмМИ!-специфічних САК-Т- клітин, що експресують різні ЕСЕКМмМІІ-специфічні клони проти СОВМ-клітин у підшкірній ксенотрансплантатній моделі СВМ.
На фіг. 7 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена САК-експресія. САК-Т- клітинами, що експресують чотири різних ЕСЕЕмМІІІ-специфічних клони у САК і несуть інтра-САВ суїцидальну послідовність К2 у САК на день 4, день 9/10 і день 14/15 після трансдукції Т-клітин.
На фіг. 8 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена САК-експресія САК-Т- клітинами, що експресують чотири різних ЕСЕВМІІ-специфічних клони у САК і несуть інтра-САВ суїцидальну послідовність Ка на день 4 і день 14/15 після трансдукції Т-клітин.
На фіг. 9 показана стовпчикова діаграма, на якій узагальнена цитотоксичність САК-Т-клітин, які експресують чотири різні ЕСЕНМмПІ-специфічні клони і несуть інтра-САК суїцидальну послідовність К2, проти ліній клітин з високим рівнем (087-КО-ЕСЕЕМІІІ) і низьким рівнем експресії (МСІ-Н522-ЕСЕРМІ) ЕСЕВМІЇП.
Докладний опис
Винахід, що розкритий тут, передбачає химерні антигенні рецептори (САК) й імунні клітини, що містять САК (наприклад, САК-Т-клітини), які специфічно зв'язуються з ЕСЕЕМІЇ (наприклад, людським ЕСЕЕМІ). Винахід також передбачає полінуклеотиди, що кодують ці САК, композиції, що містять ці САК-Т-клітини, і способи одержання та застосування цих САК і САК-Т-клітин.
Винахід також передбачає способи лікування у суб'єкта стану, асоційованого з ЕСЕЕМПІ- опосередкованими патологіями, такого як рак.
Загальні методи
У реалізації винаходу на практиці будуть використовуватися, якщо не зазначено інше, традиційні методи молекулярної біології (у тому числі рекомбінантні методи), мікробіології, клітинної біології, біохімії, іммунології, вірусології, генерування й інжинірингу моноклональних антитіл, які відомі з рівня техніки. Такі методи в повній мірі описані в літературі, такій як
Молекулярне клонування: лабораторна інструкція, друге видання (Затрьгоок еї аї!., 1989) Соїа
Зргіпд Нагрог Рге55; Синтез олігонуклеотидів (М.9У. Сай, ейд., 1984); Способи у молекулярній біології, Нитапа Ргез55; Клітинна біологія: лабораторний журнал (У.Е. Сеїї5, ед., 1998) Асадетіс
Рге55; Культура клітин тварин (К.І. Егезппеу, ед., 1987); Введення у культуру клітин і тканин (.Р.
Зо Машег апа Р.Е. Корбрегіх5, 1998) Ріепит Ргев5; Культура клітин і тканин: лабораторні процедури (А. Ооуїе, 9У.В. Стінйне, апа О.С. МемеїЇ, еєд5., 1993-1998) У. УМіеу апа Зоп5; Способи в ензимології (Асадетіс Ргез5, Іпс.); Довідник з експериментальної імунології (О.М. Умеїг апа С.с.
ВіасКуиеїЇ, ед5.); Вектори для переносу генів для клітин ссавців (У.М. Міпег апа М.Р. Са/пюов, еав., 1987); Поточні протоколи в молекулярній біології (Е.М. А!йзибеї! еї аї., еавз., 1987); ПЛР: полімеразна ланцюгова реакція, (Миїйїй5 еї аї., еаз., 1994); Поточні протоколи в імунології (У.Е.
Соїїдап еї аї., єдв., 1991); Стислі протоколи в молекулярній біології (УМіеу апа боп5, 1999);
Імунобіологія (С.А. дапеулау апа Р. Тгамегє, 1997); Антитіла (Р. Ріпсп, 1997); Антитіла: практичний підхід (ОО. Сацу., ей., ІК Рге55, 1988-1989); Моноклональні антитіла: практичний підхід (Р. Зперпега апа С. ЮОеап, еаз., Охіога Опімегейу Ргез5, 2000); Використання антитіл: лабораторна інструкція (Е. Нагіоу/ апа О. Гапе (Соїй Зргіпд Нагрог І арогаїогу Рге55, 1999);
Антитіла (М. 2апейі апа 9.0. Сарга, еа5., Нагмоса Асадетіс Рибіїхпегв, 1995).
Визначення
Термін «позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен», як використовується тут, відноситься до оліго- або поліпептиду, який здатний до зв'язування ліганду. Переважно, домен буде здатний взаємодіяти з молекулою клітинної поверхні. Наприклад, позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен може бути вибраний для розпізнавання ліганду, який діє як маркер клітинної поверхні на клітинах-мішенях, асоційованих з конкретним хворобливим станом.
Терміни «стебловий домен» або «шарнірний домен» використовуються тут взаємозамінним чином і відносяться до будь-якого оліго- або поліпептиду, який функціонує для зв'язування трансмембранного домену із позаклітинним ліганд-зв'язуючим доменом. Зокрема, стеблові домени використовуються для забезпечення більшої гнучкості та доступності для позаклітинного ліганд-зв'язуючого домену.
Термін «внутрішньоклітинний сигнальний домен» відноситься до частини білка, яка трансдукує сигнал ефекторної функції та спрямовує клітину на виконання спеціалізованої функції. «Костимулююча молекула», як використовується тут, відноситься до партнера по зв'язуванню з родичем на Т-клітині, який специфічно зв'язується з костимулюючим лігандом, тим самим опосередковуючи костимулюючу відповідь клітиною, таку як, але без обмеження, проліферація. Костимулюючі молекули включають, але без обмеження, молекулу МНС класу І, бо ВТА ії рецептор ТоїІ-ліганду. Приклади костимулюючих молекул включають СО27, Сра28, СО8,
4-88 (20137), ОХ40, С030, 6040, РО-1, ІСО5, функціонально зв'язаний антиген-1 лімфоцитів (ГЕА-1), 602, 207, Пант, МкКагс, В7-НЗ і ліганд, який специфічно зв'язується з СО83, і тому подібне. «Костимулюючий ліганд» відноситься до молекули на антиген-презентуючій клітині, яка специфічно зв'язується з когнатною костимулюючою сигнальною молекулою на Т-клітині, тим самим забезпечуючи сигнал, який, на додаток до первинного сигналу, забезпеченого, наприклад, зв'язуванням ТОСК/СОЗ-комплексу з молекулою МНС, навантаженою пептидом, опосередковує Т-клітинну відповідь, у тому числі, але без обмеження, активацію проліферації, диференціацію, продукцію цитокінів і тому подібне. Костимулюючий ліганд може включати, але без обмеження, СО7, В7-1 (2080), В7-2 (2086), РО-І1, РО-І2, 4-188ГІ, ОХ401Ї, індуцибельний костимулюючий ліганд (ІСО5-Ї), молекулу міжклітинної адгезії САМ, СОзЗ0Ї, С0р40, С070,
СО83, НГА-С, МІСА, МІСВ, НМЕМ, лімфотоксин В рецептор, З/ТКб, ІІ Т3, ІІ Т4, агоніст або антитіло, що зв'язує рецептор ТоїІ-ліганду, і ліганд, який специфічно зв'язується з В7-НЗ.
Костимулюючий ліганд також охоплює, між іншим, антитіло, яке специфічно зв'язується з костимулюючою молекулою, присутньою на Т-клітині, такою як, але без обмеження, СО27,
Ср2г8, 4-188, ОХ40, СО030, 2040, РО-1, ІСО5, функціонально зв'язаний антиген-1 лімфоцитів (ГЕА-1), б02, 207, ПСНТ, МКагс, В7-НЗ і ліганд, який специфічно зв'язується з СО83. «Антитіло» являє собою молекулу імуноглобуліну, яка здатна специфічно зв'язуватися з мішенню, таку як карбогідрат, полінуклеотид, ліпід, поліпептид та ін., через щонайменше один сайт розпізнавання антигену, що розташований у варіабельній області молекули імуноглобуліну. Як використовується тут, термін охоплює не тільки інтактні поліклональні або моноклональні антитіла, але також їхні антиген-зв'язуючі фрагменти (такі як Раб, Раб", Е(аб)»,
Ем), одноланцюгові (5СЕм) і доменні антитіла (у тому числі, наприклад, акулячі та верблюжі антитіла), і білки злиття, що містять антитіло, і будь-яку іншу модифіковану конфігурацію молекули імуноглобуліну, яка містить сайт розпізнавання антигену. Антитіло включає антитіло будь-якого класу, такого як до, ІА або ІдДМ (або його підкласу), при цьому антитіло не повинно належати будь-якому конкретному класу. У залежності від амінокислотної послідовності антитіла у константній області його важких ланцюгів, імуноглобуліни можуть бути віднесені до різних класів. Існує п'ять основних класів імуноглобулінів: ІА, дО, ІДЕ, дс та ІДМ, при цьому декілька з них можуть бути додатково поділені на підкласи (ізотипи), наприклад, Іс, Ідс2,
ІЧО3, Ідс4, ІДА1 та ІдА2. Константні області важкого ланцюга, які відповідають різним класам імуноглобулінів, називаються альфа, дельта, епсілон, гамма і мю, відповідно. Структури субодиниць і тривимірні конфігурації різних класів імуноглобулінів добре відомі.
Термін «антиген-зв'язучий фрагмент» або «антиген-зв'язуюча частина» антитіла, як використовується тут, відноситься до одного або більше фрагментів інтактного антитіла, які зберігають здатність до специфічного зв'язування із заданим антигеном (наприклад, ЕСЕЕМІЇ).
Функції антитіла щодо зв'язування з антигеном можуть виконуватися фрагментами інтактного антитіла. Приклади зв'язуючих фрагментів, що охоплюються терміном «антиген-зв'язучий фрагмент» антитіла, включають Раб; Раб" Е(ар)2; Ба-фрагмент, що складається з УН- і СНІ1- доменів; Ем-фрагмент, що складається з МН- і Мі -доменів одного плеча антитіла; фрагмент однодоменного антитіла (аАБ) (Умага еї аї!., Маїиге 341:544-546, 1989) й ізольована область, що визначає комплементарність (СОК).
Антитіло, кон'югат антитіла або поліпептид, який «преференційно зв'язується» або «специфічно зв'язується» (що використовуються тут взаємозамінним чином) з мішенню (наприклад, білюоом ЕСЕЕКМІЇЇ), є терміном, який добре зрозумілий з рівня техніки, а також добре відомими є способи визначення такого специфічного або преференційного зв'язування.
Говорять, що молекула проявляє «специфічне зв'язування» або «преференційне зв'язування», якщо вона реагує або асоціює частіше, швидше, триваліше та/або з більшою афінністю з конкретною клітиною або речовиною, ніж це відбувається з альтернативними клітинами або речовинами. Антитіло «специфічно зв'язується» або «преференційно зв'язується» з мішенню, якщо воно зв'язується з більшою афінністю, авідністю, надійніше та/або триваліше, ніж воно зв'язується з іншими речовинами. Наприклад, антитіло, яке специфічно або преференційно зв'язується з епітопом ЕСЕРЕМІІЇ, являє собою антитіло, яке зв'язує цей епітоп з більшою афінністю, авідністю, надійніше та/або триваліше, ніж воно зв'язується з іншими епітопами
ЕСЕКМІЇ або епітопами, що не відносяться до ЕСЕКМІ. Після ознайомлення з даним визначенням слід також розуміти, що, наприклад, антитіло (або фрагмент, або епітоп), яке специфічно або преференційно зв'язується з першою мішенню, може специфічно або преференційно зв'язуватися з другою мішенню, а може і не робити цього. Таким чином, «специфічне зв'язування» або «преференційне зв'язування» не обов'язково вимагає (хоча воно бо може включати) виключне зв'язування. Загалом, але необов'язково, посилання на зв'язування означає преференційне зв'язування. «Варіабельна область» антитіла відноситься до варіабельної області легкого ланцюга антитіла або варіабельної області важкого ланцюга антитіла окремо або в комбінації. Як відомо з рівня техніки, кожна варіабельна область важкого і легкого ланцюга складається з чотирьох каркасних областей (ЕК), з'єднаних трьома областями, що визначають комплементарність (СОК), які також відомі, як гіперваріабельні області. СОК у кожному ланцюгу утримуються разом у безпосередній близькості за допомогою ЕК і, разом із СОК іншого ланцюга, роблять внесок у формування антиген-зв'язуючого сайту антитіл. Існує щонайменше два методи визначення
СОК: (1) підхід, що базується на міжвидовій варіабельності послідовностей (тобто, КаБбаї еї аї.
Послідовності білків, що являють імунологічний інтерес, (Бій ей., 1991, Майопа! Іпбійшев ої
Неан, Веїпезда МО)); і (2) підхід, що базується на кристалографічних випробуваннях компексів антитіло-антиген (АІ-Іагікапі єї аї!., 1997, 9). Моїес. Віої. 273:927-948). Як використовується тут,
СОК може відноситися до СОЕ, визначених одним із підходів або комбінацією обох підходів. «СОР» варіабельного домену являють собою амінокислотні залишки в межах варіабельної області, які ідентифіковані відповідно до визначень у Кабата, Чотіа, комбінації обох Кабата й
Чотіа, АВМ, контакту та/"або конформаційних визначень або будь-якого способу визначення
СОК, добре відомого з рівня техніки. СОК антитіла можуть бути ідентифіковані як гіперваріабельні області, що від самого початку були визначені Кабаї еї аЇ. Див., наприклад,
Кабаї єї аї., 1992, Послідовності білків, що являють імунологічний інтерес, 5Іп ед., Рибіїс Неакй зЗегмісе, МІН, УМмазпіпдаіоп О.С. Положення СОК також можуть бути ідентифіковані як замкнуті петлеподібні структури, що від самого початку були описані Споїйіа та іншими. Див., наприклад,
Споїнпіа єї аї., Майте 342:877-883, 1989. Інші підходи щодо ідентифікації СОК включають «Визначення АБМ», що являє собою компроміс між Кабатом і Чотіа та отриманий із застосуванням програмного забезпечення АБМ з моделювання антитіл від компанії «ОхгТога
Моїесшіаг» (тепер Ассеїгу5Ф), або «визначення контакту» СОК виходячи зі спостережених контактів антигенів, що викладено у МассСаїЇшт еї аї., У. Мої. Віої!., 262:732-745, 1996. В іншому підході, який тут називається «конформаційним визначенням» СОК, положення СОК можуть бути ідентифіковані як залишки, які роблять ентальпійні внески у зв'язування антигенів. Див., наприклад, МаКабре еї аї., ЧдЧоигпа! ої Віоіодісаї Спетівігу, 283:1156-1166, 2008. Ще інші визначення меж СОК можуть не чітко слідувати одному із зазначених вище підходів, але тим не менш будуть перекриватися щонайменше з частиною СОК у Кабата, хоча вони можуть бути скорочені або подовжені з огляду на прогноз або результати експериментів щодо того, що конкретні залишки або групи залишків, або навіть повністю всі СОК, не впливають значним чином на зв'язування антигенів. Як використовується тут, СОК може відноситися до СОК, визначених будь-яким із підходів, відомих з рівня техніки, у тому числі комбінаціями підходів. У способах, що викристовуються тут, можуть використовуватися СОК, що визначені відповідно до будь-якого з цих підходів. Для будь-якого заданого варіанту здійснення, що містить більше однієї СОМ, СОК можуть бути визначені відповідно до будь-якого з Кабата, Чотіа, розширеного,
АБМ, контакту та/або конформаційних визначень.
Як використовується тут, «моноклональне антитіло» відноситься до антитіла, одержаного з популяції по суті гомогенних антитіл, тобто окремі антитіла, що містять популяцію, є ідентичними за виключенням можливих природніх мутацій, які можуть бути присутні у малих кількостях. Моноклональні антитіла є високоспецифічними та спрямованими на окремий антигенний сайт. Крім того, на відміну від препаратів з поліклональними антитілами, які зазвичай включають різні антитіла, що спрямовані на різні детермінанти (епітопи), кожне моноклональне антитіло спрямоване на окрему детермінанту на антигені. Модифікатор «моноклональне» позначає характер антитіла, одержуваного з по суті гомогенної популяції антитіл, і воно не підлягає конструюванню як таке, що вимагає продукції антитіла будь-яким конкретним способом. Наприклад, моноклональні антитіла, що підлягають використанню відповідно до винаходу, можуть бути одержані методом гібридом, який був вперше описаний
Копіег апа Міїсієїп, Маїиге 256:495, 1975, або можуть бути одержані методами рекомбінантної
ДНК, такими як описані у патенті США Мо 4,816,567. Моноклональні антитіла також можуть бути ізольовані з бібліотек фагів, згенерованих із застосуванням методів, описаних, наприклад, у
МесСагнепу еї аї., Маїшге 348:552-554, 1990.
Як використовується тут, «гуманізоване» антитіло відноситься до форм антитіл, що не відносяться до людських (наприклад, мишачих), і які є химерними імуноглобулінами, ланцюгами імуноглобуліну або його фрагментами (такими як Ем, Раб, Раб, К(ар)», або іншими антиген- зв'язуючими послідовностями антитіл), які містять мінімальну послідовність, одержану з імуноглобуліну, що не належить людині. Переважно, гуманізовані антитіла являють собою бо людські імуноглобуліни (реципієнтне антитіло), в яких залишки з області, що визначає комплементарність (СОК), реціпієнту заміщені залишками з СОК видів, що не належать людині, (донорне антитіло), таких як миша, пацюк або кролик, що мають бажану специфічність, афінність та ємність. У деяких випадках, залишки Ем-каркасної області (ЕК) людського імуноглобуліну заміщені відповідними залишками, що не належать людині. Крім того, гуманізоване антитіло може містити залишки, які не знаходяться ані у реципієнтному антитілі, ані в імпортованій СОК або каркасних послідовностях, але включені для додаткового покращення й оптимізації продуктивності антитіла. Загалом, гуманізоване антитіло буде містити по суті все з щонайменше однієї та, зазвичай, двох, варіабельних областей, в яких по суті всі
СОВ-області відповідають таким у імуноглобуліні, що не відноситься до людського, а всі або по суті всі ЕК-області являють собою такі у консенсусній послідовності людського імуноглобуліну.
Оптимально, гуманізоване антитіло також буде містити щонайменше частину константної області або домену (Ес) імуноглобуліну, зазвичай, такої у людському імуноглобуліні.
Переважними є антитіла, що мають Ес-області, модифіковані так, як описано у М/О 99/58572.
Інші форми гуманізованих антитіл мають одну або більше СОК (СОК1І1, СОК1І2, СОМІЗ, СОК
НІ, СОК НО або СОК НУ), які змінені у порівнянні з оригінальним антитілом, які також називаються однією або більше СОК, «що одержані з» однієї або більше СОК з оригінального антитіла.
Як використовується тут, «людське антитіло» означає антитіло, що має амінокислотну послідовність, що відповідає такій в антитілі, що продукується людиною, і/або яке було одержано із застосуванням будь-якого з методів одержання людських антитіл, відомих фахівцям у даній галузі техніки або розкритих тут. Дане визначення людського антитіла включає антитіла, що містять щонайменше один людський поліпептид з важким ланцюгом або щонайменше один людський поліпептид з легким ланцюгом. Одним таким прикладом є антитіло, що містить мишачі поліпептиди з легсим ланцюгом і людські поліпептиди з важким ланцюгом. Людські антитіла можуть бути одержані із застосуванням різних методів, відомих з рівня техніки. В одному варіанті здійснення людське антитіло вибране з бібліотеки фагів, причому бібліотека фагів експресує людські антитіла (Мацдпап еї аї., Маїшге ВіоїесппоїЇоду, 14:309-314, 1996; 5Невів вї а!., Ргос. Маї). Асад. сі. (ОБА) 95:6157-6162, 1998; Ноодепроот апа
Уміпіег, У. Мої. ВіоїЇ., 227:381, 1991; Магк5 еї аї., У). Мої. ВіоїІ., 222:581, 1991). Людські антитіла
Зо також можуть бути одержані шляхом імунізації тварин, яким вже був трансгенно включений локус людського імуноглобуліну замість ендогенного локусу, наприклад, мишей, у яких ендогенні гени імуноглобуліну були частково або повністю деактивовані. Цей підхід описаний у патентах США Мо 5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; та 5,661,016. Як альтернатива, людське антитіло може бути одержане шляхом іморталізації людських В- лімфоцитів, які продукують антитіло, що спрямоване на антиген-мішень (такі В-лімфоцити можуть бути виділені з індивідуума або з клонування одиночної клітини кКДНК, або можуть бути імунізовані іп міїго). Див., наприклад, Соїе еї а. Моноклональні антитіла і терапія проти раку,
Аїап Н. І і55, р. 77, 1985; Воєгпег єї аї., У. Іттипої., 147 (1):86-95, 1991; і патент США Мо 5,750,373.
Термін «химерне антитіло» призначений для того, щоб відноситися до антитіл, в яких послідовності варіабельної області одержані від одних видів, а послідовності константної області одержані від інших видів, наприклад, антитіло, в якому послідовності варіабельної області одержані від мишачого антитіла, а послідовності константної області одержані від людського антитіла.
Терміни «поліпептид», «олігопептид», «пептид» і «білок» використовуються тут взаємозамінним чином і відносяться до ланцюгів амінокислот будь-якої довжини. Наприклад, ланцюг може бути відносно коротким (наприклад, 10-100 амінокислот) або довшим. Ланцюг може бути лінійним або розгалуженим, він може містити модифіковані амінокислоти та/або може бути перериватися неамінокислотами. Терміни також охоплюють амінокислотний ланцюг, який був модифікований природно або шляхом втручання; наприклад, формування дисульфідного зв'язку, гліколізація, ліпідизація, ацетизація, фосфорилювання або будь-яка інша маніпуляція або модифікація, така як кон'югація з маркувальним компонентом. Також у визначення включені, наприклад, поліпептиди, що містять один або більше аналогів амінокислоти (у тому числі, наприклад, неприродні амінокислоти, і т.д.), а також інші модифікації, відомі з рівня техніки. Слід розуміти, що поліпептиди можуть існувати як одиночні ланцюги або асоційовані ланцюги. «Моновалентне антитіло» містить один антиген-зв'язуючий сайт на молекулу (наприклад, до або Раб). У деяких випадках моновалентне антитіло може мати більш, ніж один антиген- зв'язуючий сайт, але зв'язуючі сайти йдуть від різних антигенів. бо «Бівалентне антитіло» містить два антиген-зв'язуючих сайти на молекулу (наприклад, Ідсв).
У деяких випадках два антиген-зв'язуючих сайти мають однакові специфічності до антигену.
Однак бівалентні антитіла можуть бути біспецифічними. «Біспецифічне» або «двоспецифічне» являє собою гібридне антитіло, що має два різних антиген-зв'язуючих сайти. Два антиген-зв'язуючих сайти біспецифічного антитіла зв'язуються з двома різними епітопами, які можуть залишатися на тих самих або інших білках-мішенях. «Біфункціональне» являє собою антитіло, що має ідентичні антиген-зв'язуючі сайти (тобто ідентичні амінокислотні послідовності) у двох плечах, але кожний зв'язуючий сайт може розпізнавати два різних антигена.
Антитіла за винаходом можуть бути одержані із застосуванням методів, що добре відомі з рівня техніки, наприклад, рекомбінантних методів, методів фагового дисплею, синтетичних методів або комбінацій таких методів або інших методів, що добре відомі з рівня техніки (див., наприклад, дауазепа, 5.0., Сіп. Спет., 45: 1628-50, 1999 та РеїйПоизе, Е.А., еї аї, У. Мої. Віої., 373(4):924-40, 2007).
Як відомо з рівня техніки, «полінуклеотид» або «нуклеїнова кислота», як використовується взаємозамінним чином тут, відноситься до ланцюгів нуклеотидів будь-якої довжини і включає
ДНК та РНК. Нуклеотиди можуть являти собою дезоксирибонуклеотиди, рибонуклеотиди, модифіковані нуклеотиди або основи, та/або їх аналоги, або будь-який субстрат, який може бути включений у ланцюг ДНК- або РНК-полімеразою. Полінуклеотид може містити модифіковані нуклеотиди, такі як метильовані нуклеотиди та їхні аналоги. Якщо присутні, модифікація структури нуклеотиду може бути передана перед або після збірки ланцюга.
Послідовність нуклеотидів може бути перервана компонентами, що не є нуклеотидами.
Полінуклеотид може бути додатково модифікований після полімеризації, наприклад, шляхом кон'югації з маркувальним компонентом. Інші типи модифікацій включають, наприклад, «кепи», заміну одного або більше нуклеотидів природного походження аналогом, міжнуклеотидні модифікації, такі як, наприклад, з незарядженими зв'язками (наприклад, фосфонати метилу, фосфотриестери, фосфоамідати, карбамати і т.д.) та із зарядженими зв'язками (наприклад, фосфоротіоати, фосфородитіоати і т.д.), ті, що містять пендантні фрагменти, такі як, наприклад, білки (наприклад, нуклеази, токсини, антитіла, сигнальні пептиди, полі-і-лізин і т.д.), ті, що мають інтеркалятори (наприклад, акрідин, псорален і т.д.), ті, що містять хелатори (наприклад, метали, радіоактивні метали, бор, окислювальні метали і т.д.), ті, що містять алкілатори, ті, що мають модифіковані зв'язки (наприклад, альфа аномерні нуклеїнові кислоти і т.д.), а також немодифіковані форми полінуклеотиду(ів). Крім того, будь-яка з гідроксильних груп, що з самого початку присутня у цукрах, може бути заміщена, наприклад, фосфонатними групами, фосфатними групами, захищеними стандарнтими захисними групами, або активованими для одержання додаткових зчеплень з додатковими нулкеотидами, або можуть бути кон'юговані з твердими підкладками. 5- та 3-кінцеві ОН можуть бути фосфорильовані або заміщений амінами або фрагментами органічної кепуючої групи, що має від 1 до 20 атомів вуглецю. Інші гідроксили також можуть бути дериватизовані до стандартних захисних груп. Полінуклеотиди також можуть містити аналогічні форми рибозних або дезоксирибозних цукрів, які загалом відомі з рівня техніки, у тому числі, наприклад, 2'-О-метил-, 2-О-аліл, 2'і-фтор- або 2'-азідо- рибоза, аналоги карбоциклічного цукру, альфа- або бета-аномерні цукри, епімерні цукри, такі як арабіноза, ксилози або ліксози, піранозні цукри, фуранозні цукри, седогептулози, ациклічні аналоги й абазичні нуклеозидні аналоги, такі як метилрибозид. Один або декілька фосфодіефірних зв'язків можуть бути замінені альтернативними зв'язуючими групами. Ці альтернативні зв'язуючі групи включають, але без обмеження, варіанти здійснення, у яких фосфат замінений Р(О)5 («тіоатом»), Р(Б)5 («дитіоатом»), (О)МК» («амідатом»), Р(ОК,
РІФООК, СО або СН» («формацеталем»), у яких кожний К або К' означає незалежно Н або заміщений або незаміщений алкіл (1-20 С), що необов'язково містить простий ефірний зв'язок (-
О-), арил, алкеніл, циклоалкіл, циклоалкеніл або аралкіл. Не всі зв'язки у полінуклеотиді повинні бути ідентичними. Попередній опис застосовний до всіх згадуваних тут полінуклеотидів, у тому числі РНК і ДНК.
Як відомо з рівня техніки, «константна область» антитіла відноситься до константної області легкого ланцюга антитіла або константної області важкого ланцюга антитіла окремо або в комбінації.
Як використовується тут, «по суті чистий» відноситься до матеріалу, який щонайменше на 5095 чистий (тобто вільний від забруднюючих речовин), переважніше, щонайменше на 9095 чистий, переважніше, щонайменше на 9595 чистий, ще переважніше, щонайменше на 98905 чистий, і най переважніше, щонайменше на 9995 чистий. «Клітина-хазяїн» включає окрему клітину або культуру клітин, яка може бути або була бо реципієнтом для вектора(в) для включення полінуклеотидних вставок. Клітини-хазяїни включають потомка одиночної клітини-хазяїна, а потомок не обов'язково може бути повністю ідентичним (з точки зору морфології або комплементу геномної ДНК) початковій родинній клітині з огляду на природну, випадкову або умисну мутацію. Клітина-хазяїн включає клітини, що трансфектовані іп мімо з полінуклеотидом(ами) за даним винаходом.
Як використовується тут, «імунна клітина» відноситься до клітини гематопоетичного походження, функціонально задіяної в ініціацію та/або виконання вродженої та/або адаптивної імунної відповіді.
Як відомо з рівня техніки, термін «Рс-область» використовується для визначення С-кінцевої області важкого ланцюга імуноглобуліну. «Ес-область» може бути Ес-областю з нативною послідовністю або варіантною Ес-областю. Хоча межі Ес-області важкого ланцюга імуноглобуліну можуть варіюватися, Ес-область важкого ланцюга людського дос зазвичай визначають як таку, що простягається від амінокислотного залишку у положенні Суз226, або від
Рго230, до її карбоксильного кінця. Нумерація залишків у Ес-області зроблена за ЕЮ-індексом, як у Кабата. Кабаї єї аї., Послідовності білків, що являють імунологічний інтерес, 5Іп Еа. Рибіїс
Неацйи 5бегуїсе, Маїййопа! Іпвійшев ої Неапйй, ВеїШезаа, Ма., 1991. Ро-область імуноглобуліну загалом містить дві константні області, СН2 і СНЗ.
Як використовується у рівні техніки, «Ес-рецептор» і «БСК» описують рецептор, який зв'язується з Ес-областю антитіла. Переважним ЕсК є людьский ЕсЕ із нативною послідовністю.
Більш того, переважним Еск є той, що зв'язується з антитілом до (гамма-рецептор) і включає рецептори підкласів ЕсукіІ, Есукі! та Есукі, у тому числі алельні варіанти та, альтернативно, сплайсовані форми цих рецепторів. ЕсуКіІІ-рецептори включають ЕсукІА («активуючий рецептор») і ЕСУКІІВ («інгібуючий рецептор»), які мають подібні амінокислотні послідовності, які відрізняються в основному своїми цитоплазматичними доменами. Облік ЕСЕ зроблений у
Вамеїсі апа Кіпеї, Апп. Неу. Іттипо)ї., 9:457-92, 1991; Сареї еї аїІ., Імунометоди, 4:25-34, 1994; та де Наах еї аї., 9. Гар. Сіїп. Меа., 126:330-41, 1995. «РсК» також включає неонатальний рецептор, ЕсКп, який відповідає за трансфер материнських ДС до фетусу (Сиуег еї аї., 9.
Іттітипої., 117:587, 1976; та Кіт еї аї., 9. Іттипої., 24:249, 1994).
Термін «конкуруюче», як використовується тут щодо антитіла, означає, що перше антитіло або його антиген-зв'язуючий фрагмент (або частина) зв'язується з епітопом у такий спосіб, який достатньо подібний до зв'язування з другим антитілом або його антиген-зв'язуючою частиною, так що результат зв'язування першого антитіла з його родинним епітопом помітно зменшується у присутності другого антитіла у порівнянні зі зв'язуванням першого антитіла за відсутності другого антитіла. Може бути альтернатива, в якій зв'язування другого антитіла з його епітопом також помітно зменшується у присутності першого антитіла, однак це не є необхідним. Тобто перше антитіло може проявляти зв'язування другого антитіла з його епітопом без інгібування цим другим антитілом зв'язування першого антитіла з його відповідним епітопом. Однак за умови, що кожне антитіло помітно інгібує зв'язування іншого антитіла з його родинним епітопом або лігандом, у такий же, більший або менший ступінь, антитіла називають «поперечно конкуруючими» один з одним за зв'язування з їх відповідним(и) епітопом(ами). Як конкуруючі, так і поперечно конкуруючі антитіла входять в обсяг винаходу. Незалежно від механізму, за допомогою якого відбувається таке конкурування або поперечне конкурування (наприклад, стерична невідповідність, конформаційна зміна або зв'язування зі спільним епітопом або його частиною), фахівець у даній галузі техніки зрозуміє, базуючись на інформації, яка викладена тут, що такі конкуруючі талабо поперечно конкуруючі антитіла охоплені та можуть бути придатними для способів, розкритих тут.
Як використовується тут, «аутологічні» означає, що клітини, лінія клітин або популяція клітин, що використовуються для лікування пацієнтів, походять від зазначеного пацієнта або від сумісного донора антигену лейкоцитів людини (НІ А).
Як використовується тут, «алогенні» означає, що клітини або популяція клітин, що використовуються для лікування пацієнтів, не походять від зазначеного пацієнта, а походять від донора.
Як використовується тут, «лікування» являє собою підхід для одержання корисних або бажаних клінічних результатів. Для цілей даного винаходу, корисні або бажані клінічні результати включають, але без обмеження, одне або більше з наступного: зниження проліферації (або руйнування) неопластичних або ракових клітин, інгібування метастазів неопластичних клітин, скорочення або зменшення розміру ЕСЕКмПІ-експресуючої пухлини, ремісія ЕСЕКМІІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку), зниження симптомів, які є результатом ЕСЕКмМІІІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку), збільшення якості життя людей, що страждають від ЕСЕКмМПІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку), зменшення бо дози інших лікарських засобів, що потребуються для лікування ЕСЕЕМІІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку), затримка прогрессування ЕСЕЕмМІІІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку), лікування ЕСЕКмІПІ-асоційованого захворювання (наприклад, раку) та/"або пролонгування виживання пацієнтів із ЕСЕЕмМІ-асоційованим захворюванням (наприклад, раком). «Зменшення інтенсивності» означає зниження або усунення одного або більше симптомів у порівнянні з відсутністю введення ЕСЕКМмМІІ-специфічного САК. «Зменшення інтенсивності» також включає скорочення або зниження тривалості симптому.
Як використовується тут, «ефективна доза» або «ефективна кількість» лікарського засобу, сполуки або фармацевтичної композиції являє собою кількість, достатню для досягнення будь- якого одного або більше корисних або бажаних результатів. Для профілактичного застосування, корисні або бажані результати включають усунення або зниження ризику, зменшення важкості або затримку початкової стадії захворювання, у тому числі біохімічних, гістологічних та/або характерних симптомів захворювання, його ускладнень та проміжних патологічних фенотипів, що присутні під час розвитку захворювання. Для терапевтичного застосування, корисні або бажані результати включають клінічні результати, такі як зменшення частоти виникнення або зменшення інтенсивності одного або більше симптомів або станів (таких як, наприклад, мультиформа гліобластома), зниження дози інших лікарських засобів, що потребуються для лікування захворювання, покращення ефекту іншого лікарського засобу та/або затримка прогрессування ЕСЕКМмІІ-асоційованого захворювання у пацієнтів. Ефективна доза може вводитися за одне або більше введень. Для цілей даного винаходу, ефективна доза лікарського засобу, сполуки або фармацевтичної композиції являє собою кількість, достатню для виконання профілактичного або терапевтичного лікування прямим або непрямим чином. Як розуміють у клінічному сенсі, ефективна доза лікарського засобу, сполуки або фармацевтичної композиції може бути досягнута разом із іншим лікарським засобом, сполукою або фармацевтичною композицією, або може бути не досягнута. Таким чином, «ефективна доза» може бути врахована у контексті введення одного або більше терапевтичних агентів, а окремий агент може бути врахований як такий, що взятий в ефективній кількості, якщо, разом із одним або більше іншими агентами, може бути досягнутий або досягається бажаний результат. «Індивідуум» або «суб'єкт» являє собою ссавця, переважніше, людину. Ссавці також
Ко) включають, але без обмеження, приматів, коней, собак, котів, мишей і пацюків.
Як використовується тут, «вектор» означає конструкт, який здатний доставляти і, переважно, експресувати один або більше генів або послідовностей, що являють інтерес, у клітині-хазяїні. Приклади векторів включають, але без обмеження, вірусні вектори, вектори експресії оголеної ДНК або РНК, плазмідні, космідні або фагові вектори, вектори експресії ДНК або РНК, що асоційовані з катіонними конденсуючими агентами, вектори експресії ДНК або
РНК, що інкапсульовані у ліпосомах, та деякі еукаріотичні клітини, такі як клітини-продуценти.
Як використовується тут, «послідовність контролю експресії» означає послідовність нуклеїнової кислоти, яка спрямовує транскрипцію нуклеїнової кислоти. Послідовність контролю експресії може являти собою промотор, такий як конститутивний або індуцибельний промотор, або енхансер. Послідовність контролю експресії функціонально зв'язана з послідовністю нуклеїнової кислоти, що підлягає транскрипції.
Як використовується тут, «фармацевтично прийнятний носій» або «фармацевтично прийнятний ексципієнт» включає будь-який матеріал, який, при комбінуванні з активним інгредієнтом, забезпечує можливість збереження інгредієнтом біологічної активності та не реагує з імунною системою суб'єкта. Приклади включають, але без обмеження, будь-який стандарт фармацевтичних носіїв, такий як фосфатно-буферний соляний розчин, воду, емульсії, такі як емульсія олія/вода, і різні типи зволожуючих агентів. Переважними розчинниками для аерозольного або парентерального введення є фосфатно-буферний соляний розчин (РВ5) або фізіологічний розчин (0,995). Композиції, що містять такі носії, складені добре відомими традиційними способами (див., наприклад, Лікознавство, Кептіпдіоп, 181й еайіоп, А. Сеппаго, ей., Маск Рибіїзпіпуд Со., Еабіоп, РА, 1990; та Кетіпдіоп, Наука та практика фармації, 2151 Ей.
Маск Рибіїєпіпо, 2005).
Термін «Коп» або «Ка», як використовується тут, відноситься до константи швидкості асоціації антитіла з антигеном. Зокрема, константи швидкості (Коп/Ка та Ком/Ка) та рівноважні константи дисоціації можуть бути виміряні із застосуванням, наприклад, повнорозмірних антитіл і/або Рар- фрагментів антитіла та відповідного антигену.
Термін «Кок» або «Ка», як використовується тут, відноситься до константи швидкості дисоціації антитіла від комплексу антитіло/антиген.
Термін «Ко», як використовується тут, відноситься до рівноважної константи дисоціації 60 взаємодії антитіло-антиген.
Визначення констант швидкості асоціації та дисоціації, Коп та Кох відповідно, може бути зроблене із застосуванням біодатчика на основі поверхневого плазмонного резонансу для характеризації взаємодії аналіт/ліганд в умовах, при яких аналіт є моновалентним відносно зв'язування ліганду, який є імобілізованим при низькій ємності на поверхні датчика за допомогою реагенту захоплення. Аналіз виконується із застосуванням методології кінетичної титрації, як описано у Кагі5зоп еї аї., АпаІ. Віоспет 349, 136-147, 2006. Чіп датчика, реагент захоплення й аналітичний буфер, що використовуються для заданого аналізу, вибирають для забезпечення стабільного захоплення ліганду на поверхні датчика, мінімізації неспецифічного зв'язування аналіту з поверхнями, а також видачі аналіт-зв'язуючих відповідей, які підходять для кінетичного аналізу, згідно з рекомендаціями у Му52Ка, У. Мої. Кесодпії 12, 279-284, 1999.
Аналіт-зв'язуючі відповіді на одну взаємодію аналіт/ліганд мають подвійну опору та підігнані під «обмежену модель переносу маси» Ленгмюра 1:1 з Ка, Ка та Ктах як глобальними параметрами, як описано у Муз2Ка 85 Могіоп еї аї., Віорпуз. Спет 64, 127-137 (1997). Рівноважна константа дисоціації, Ко, виведена зі співвідношення кінетичних констант швидкості, Ко - Кон/Коп.
Переважно, такі визначення мають місце за 25 "С або 37 "С.
Посилання на «приблизне» значення або параметр тут включає (й описує) варіанти здійснення, які спрямовані на таке значення або параметр сам по собі. Наприклад, опис, що посилається на «приблизно Х», включає опис «Х». Числові діапазони включають числа, що визначають діапазон. Говорячи взагалі, термін «приблизно» відноситься до зазначеного значення змінної та до всіх значень змінної, які знаходяться у межах експериментальної похибки зазначеного значення (наприклад, у межах довірчого інтервалу 9595 для середнього значення) або у межах 10 відсотків від зазначеного значення, в залежності від того, яке з них більше. У місцях, де термін «приблизно» використовується у контексті періоду часу (років, місяців, тижнів, днів і т.д.), термін «приблизно» означає цей період часу плюс або мінус одну кількість наступного нижчого періоду часу (наприклад, приблизно 1 рік означає 11-13 місяців; приблизно 6 місяців означає 6 місяців плюс або мінус 1 тиждень; приблизно 1 тиждень означає 6-8 днів; і т.д.), або у межах 10 відсотків зазначеного значення, в залежності від того, яке з них більше.
Слід розуміти, що хоча варіанти здійснення описані тут з виразом «що містить», також
Зо передбачені інші аналогічні варіанти здійснення, що описані у сенсі «що складається з» та/або «що складається по суті 3».
У місцях, де аспекти або варіанти здійснення винаходу описані у сенсі групи Маркуша або іншого групування альтернатив, винахід охоплює не тільки всю групу, перелічену як одне ціле, але й кожний член групи окремо, а також всі можливі підгрупи основної групи, і також основну групу без одного або більше елементів групи. Винахід також передбачає точне вилучення одного або більше будь-якого елемента групи у заявленому винаході.
Якщо не визначено інше, всі технічні та наукові терміни, що використовуються тут, мають таке саме значення, як загалом розуміє фахівець у даній галузі техніки, до якої належить даний винахід. У випадку конфлікту, перевага віддається даному опису, у тому числі визначенням. По всьому даному опису та пунктам формули винаходу слово «містять» або варіації, такі як «містить» або «що містить», слід розуміти як такі, що передбачають включення зазначеного цілого або групи цілих, а не виключення будь-якого іншого цілого або групи цілих. Якщо іншого не вимагає контекст, терміни, що взяті в однині, включають множину, а терміни, що взяті у множині, включають однину.
Тут описані приклади способів і матеріалів, хоча при практичній реалізації або випробуванні винаходу можуть використовуватися способи та матеріали, які подібні або еквівалентні тим, що описані тут. Матеріали, способи та приклади є лише ілюстративними, а не обмежуючими.
ЕСЕВМПІ-специфічні САК та способи їх одержання
Винахід передбачає САК, які зв'язуються з ЕСЕКМІІ (наприклад, людським ЕСЕЕМІЇ (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 201, номер доступу: РОО533 Ідентифікатор функції МАК 066493 або Мо доступу СепВапк А)Мб9267)). ЕСЕКМПІ-специфічні САК, що передбачені тут, включають одноланцюгові САК та багатоланцюгові СА. САК мають здатність до переспрямовування специфічності й реактивності Т-клітин у напрямку ЕСЕНмМІШ не обмеженим МНС чином, використовуючи антиген-зв'язуючі властивості моноклональних антитіл. Не обмежене МНС розпізнавання антигенів надає Т-клітинам, що експресують САК, здатність до розпізнавання антигену, незалежного від процесування антигену, тим самим обходячи масштабний механізм виходу пухлини.
У деяких варіантах здійснення САК, що передбачені тут, містять позаклітинний ліганд- зв'язуючий домен (наприклад, одноланцюговий варіабельний фрагмент (5сСЕм)), бо трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен. У деяких варіантах здійснення позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен знаходяться в одному поліпептиді, тобто в одному ланцюгу. Багатоланцюгові САК і поліпептиди також передбачені тут. У деяких варіантах здійснення багатоланцюгові САК містять: перший поліпептид, що містить трансмембранний домен і щонайменше один позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, і другий поліпептид, що містить трансмембранний домен і щонайменше один внутрішньоклітинний сигнальний домен, причому поліпептиди збираються разом, формуючи багатоланцюговий САК.
У деяких варіантах здійснення ЕСЕКМІІІ-специфічний багатоланцюговий САК базується на високоафінному рецепторі для ІДЕ (ЕсєКіІ). ЕсєКІ, що експресований на тучних клітинах і базофілах, активує алергічні реакції. ЕСЕКІ являє собою тетрамерний комплекс, що складається з одиночної а-субодиниці, одиночної В-субодиниці та двох дисульфідно зв'язаних у-субодиниць.
А-субодиниця містить ІдЕ-зв'язуючий домен. ДВ- та у-субодиниці містять ІТАМ, які опосередковують сигнальну трансдукцію. У деяких варіантах здійснення позаклітинний домен
ЕсКа-ланцюга підданий делеції та заміщений ЕСЕКМПІ-специфічним позаклітинним ліганд- зв'язуючим доменом. У деяких варіантах здійснення багатоланцюговий ЕСЕЕмМІПІ-специфічний
САК містить 5сЕм, який специфічно зв'язується з ЕСЕЕМІІ, СОва-шарнір та ІТАМ ЕсКВ-ланцюга.
У деяких варіантах здійснення САК може містити, а може і не містити, ЕсКу-ланцюг.
У деяких варіантах здійснення позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить 5сЕм, що містить варіабельну область легкого ланцюга (МІ) і варіабельну область важкого ланцюга (МН) моноклонального антитіла, специфічного до антигена-мішені, з'єднаного за допомогою гнучкого лінкера. Одноланцюгові фрагменти варіабельної області одержані із застосуванням зв'язування варіабельних областей легкого та/або важкого ланцюга шляхом використання пептиду короткого зв'язування (Віга еї а!., Зсіепсе 242:423-426, 1988). Прикладом пептиду зв'язування є
Сб5-лінкер, що має амінокислотну послідовність ((505(05055)4 (ЗЕБЕО ІЮ МО: 202), що має міст приблизно 3,5 нм між карбоксильним кінцем однієї варіабельної області та амінокінцем іншої варіабельної області. Були розроблені та використовувалися лінкери інших послідовностей (Віга еї аї., 1988, вище). Загалом, лінкери можуть бути короткими, гнучкими поліпептидами і, переважно, містити приблизно 20 або менше амінокислотних залишків. Лінкери, у свою чергу, можуть бути модифіковані для додаткових функцій, таких як прикріплення лікарських засобів
Зо або прикріплення до твердих підкладок. Одноланцюгові варіанти можуть бути одержані рекомбінантним або синтетичним чином. Для синтетичного одержання 5сЕм може бути використаний автоматичний синтезатор. Для рекомбінантного одержання 5сЕм, придатна плазміда, що містить полінуклеотид, який кодує СЕМ, може бути введена в придатну клітину- хазяїна, або еукаріотичну, таку як клітини дріжджів, рослин, комах або ссавців, або прокаріотичну, таку як Е. соїї. Полінуклеотиди, які кодують 5СсЕм, що являє інтерес, можуть бути одержані шляхом рутинних маніпуляцій, таких як лігування полінуклеотидів. Одержуваний у результаті 5сЕм може бути ізольований із застосуванням стандартних методів очищення білків, відомих з рівня техніки.
У деяких варіантах здійснення позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить (а) МН- область, що містить (ї) МН-область, що визначає комплементарність, один (СОКІ), що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 62, 63, 64, 74, 75, 76, 80, 81, 82, 88, 89, 90, 93, 94, 95, 99, 100, 101, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 132, 133,134, 137, 138, 139, 143, 144 або 145; (і) МН-СОК2, що містить послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 65, 66, 68, 69, 70, 71, 77, 78, 83, 84, 86, 87, 91, 92, 96, 97, 98, 102, 103, 105, 106, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 127, 128, 130, 131, 135, 136, 140, 141, 146 або 147; та (ії) МН-СОКЗ, що містить послідовність, показану у ЗЕО
ІО МО: 67, 72, 73, 79, 85, 104, 107, 108, 114, 120, 126, 129, 142 або 148; та/або Мі -область, що містить (ї) МІЕ-СОК1, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 149, 154, 156, 159, 162, 165, 166, 168, 169, 170, 171, 173, 174, 176, 178, 181, 182, 185, 187, 190, 192, 195 або 198; (ії) МІ -
СО, що містить послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 150, 152, 155, 157, 160, 163, 172, 175, 179, 183, 186, 188, 191, 193, 196 або199; та (ії) М -СОКЗ, що містить послідовність, показану у
ЗЕО ІО МО: 151, 153, 158, 161, 164, 167, 177, 180, 184, 189, 194, 197 або 200. У деяких варіантах здійснення МН та Мі зв'язані разом за допомогою гнучкого лінкера. У деяких варіантах здійснення гнучкий лінкер містить амінокислотну послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 202.
У деяких варіантах здійснення позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить (а) МН- область, що містить (ї) МН-область, що визначає комплементарність, один (СОКІ), що містить послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 62, 63, 64, 74, 75, 76, 80, 81, 82, 88, 89, 90, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 137, 138 або 139; (її) МН-СОК2, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮ МО: 70, 71, 77, 78, 83, 84, 86, 87, 91, 92, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 127, 128, 140 або 141; та її) МН-СОКЗ, що містить послідовність, показану у ЗЕО ІЮО МО: 73, 79, 85, 114, 120, 126, 60 129 або 142, та/або (Б) Мі -область, що містить(ї) М-СОМК1, що містить послідовність, показану у
ЗБО ІО МО: 149, 156, 159, 162, 165, 182, 185, 187 або 195; (ії) МІ-СОК2 , що містить послідовність, показану у БЕО ІЮО МО: 152, 157, 160, 163, 183, 186, 188 або 196; та (ії) М -СОВЗ, що містить послідовність, показану у БЕО ІО МО: 153, 158, 161, 164, 184, 189 або 197.
В іншому аспекті передбачений САКЕ, який специфічно зв'язується з ЕСЕЕмМІІ, причому САК містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, що містить: МН-область, що містить МН-СОНІ,
МН-СОК2 та МН-СОКЗ з послідовністю УН, що показана у ЗЕО ІО МО: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 30, 32, 34, 35, 37, 39, 41, 43, 44, Аб, 48 або 50; та/або Мі -область, що містить
МІ-СОВІ1, МІ-СОК2 та МІ -СОКЗ з послідовністю МІ, що показана у 5ЕО ІО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 29, 31, 33, 36, 38, 40, 42, 45, 47, 49 або 51. У деяких варіантах здійснення МН та Мі зв'язані разом за допомогою гнучкого лінкера. У деяких варіантах здійснення гнучкий лінкер містить амінокислотну послідовність, показану у ЗЕО ІО МО: 202.
У деяких варіантах здійснення САК містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, що містить: МН-область, що містить МН-СОВІ, МН-СОМК2О та МН-СОКЗ з послідовністю МН, що показана у ЗЕО ІО МО: 5, 9, 11, 13, 15, 37, 39, 41, 43 або 48; та/або Мі -область, що містить МІ -
СОВІ, МІ-СОК2 та МІ-СОМЗ з послідовністю МІ, що показана у ЗЕО ІЮ МО: 6, 10, 12, 14, 16, 38, 40, 42 або 49. У деяких варіантах здійснення МН та МІ. зв'язані разом за допомогою гнучкого лінкера. У деяких варіантах здійснення гнучкий лінкер містить амінокислотну послідовність, показану у БЕО ІО МО: 202.
У деяких варіантах здійснення САК за винаходом містить позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, що має будь-яку одну з часткової послідовності легкого ланцюга, як перелічено у таблиці 1, та/або будь-яку одну з часткової послідовності важкого ланцюга, як перелічено у таблиці 1. У таблиці 1 підкреслені послідовності являють собою послідовності СОК відповідно до Кабата, а виділені жирним - відповідно до Чотіа. Різні тАр у таблиці 1 можуть також називатися тут різними «клонами» антитіл до ЕСЕЕМІПІ.
Таблиця 1
ОМУМТОТРІТІ ЗМТІБОРАБІЗСКВВОСІІ ЕМО О0О5ОРЕЇ МКРЕАБЗУКІЗСКТаМТЕТ
УХ5МОактТуУІМУМИ ОВРООБРКА МІ УК ОМ НУУКОЗНУКОІ ЕМІССаІЮРІМССТТУ тб2а7 |О5аМРОВЕТазавзатТОвтІКІЗАМЕАБЕОІ. | МОКЕКОКАТІ ТМОКО5ОТАУМЕЇ БІ ТЕО
СЕММСМООТНЕРІ-ТРСАСТКГ ЕК (5ЕО | БАУУУСАНСЕАМОЗМ СОСТ5МТУ55
ІО МО: 2 ЗЕОЮО МО: 1
ОМММТО5ЗРІ 5І РМТІ аЧ кадРАБІЗСК5З5ОБІ. | ОМОЇ МОБСАЕУККРОАБУКУЗСКАБЗСМТЕ
І УЗМчакТтУММуРООВРСОБРАВИ МІ МУЗ | ТОУТІ НУВОАРООСІ ЕУуМСсаіМРІМССТ пб2га7 |КСОоБамуРОВЕЗОаЗИаБаИтТоЕТІКІЗАМЕАЕ | ТУИМОКЕКОаАУТМТАОТЗТЗТУММЕЇІ 551 5 руауУсСМООтТнЕРІТРСССИТтТкКМвїК ЕОТАМУУСАВСЕАМОБУСОСТІ МТУ55
ЗЕО І МО: 4 ЗЕОЮО МО: З
ОМММТО5ЗРІ 5І РМТІ аЧ кадРАБІЗСК5З5ОБІ. | ОМОЇ МОБСАЕУККРОАБУКУЗСКАЗИМТЕ нвос7- ІУЗМчактУМУРООВРСООБРАВИМОМ5 | ТОУТІ НМУВОАРООСІ Еу/МСсасСІМРІТОССТ
Ів/ЕО КІ ОЗаУРОНЕЗазазато ТІ КІЗВУЕАЕ | ТУМОКЕКОВУТМТАОТЗТЗТУМУМЕЇ 551 5 руамуУсСаООтТнНЕРІ ТРЕССОИткмУгІКк ЕОТАМУУСАНОЕДОСЗУСОСТІ МТУ
ЗЕОІЮО МО: 6 ЗЕОІО МО: 5
ОМММТО5ЗРІ 5І РМТІ аЧ кадРАБІЗСК55О5І. | ОМОЇ МОБСАЕУККРОАБУКУЗСКАБЗСМТЕ пв2о7- ІХ5МОКТУТММРООАРИОЗРАВИМЕМ5 | ТОМТ-НУУВОАРООСІ ЕМО СІМ РІТССТ ні4л11-0М КІОМаУРОНЕЗазазато ТІ КІЗВУЕАЕ | ТУМОКЕКОВУТМТАОТЗТЗТУМУМЕЇ 551 5 руамУсСаООтТнНЕРІТРССаИткмвїКк ЕОТАМУУСАНСЕАЕСЗМСОСТІ МТУ
ЗЕО І МО: 8 ЗЕО ІЮО МО: 7
ЕММІ ТО5РАТІ БМЗРОЕВАТІ 5СНАЗОЗУ | ОМТІ КЕЗаРМИЇ КРТЕТІ ТІ ТСТУБЗОЕ5І ЗМ
ВЗМАМУМООКЗИаоОАРВІ МавтІВАТОИМ | РЕМСУБЗУЛВОРРОКАГ ЕМ РГАНІЕЗТОЕКВІ. 4229 |РАНЕБОаБаБЗОаИтЕНЕТІ ТІ ОБЕОБАМУМ КІ 5І ВЗА ТІ ЗКОТЗКБОУМІ ТМТММАРМУО
СсООУБОМРЕТРСРИТКМПІК (ЗЕО ІЮ ЗАТУУСАВНОЗЗММЕСМЕВЕМ СТОСТІ МТУ
МО: 10 З(ЗЕОІЮ МО: 9
ЕМУМТО5РАТІ БМ5РОЕВМТІ БСВА5БОЗ | ОМТІ КЕЗаРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
У55МЕАМ УООВРООАРВІ ЇЇ УМ АТТВАТ | АНМОУ5БУ/ЛВОРРОКАЇ ЕМ АНІЕЗТОЕКОВБІ
З2А1О0 агєанвЕзававзатЕМІ ТІ О5ЕОРБАЇМ | ВАБ5І ВЗА ТІ ЗКОТЗКЗОУМ ТМТММОРМО
ЕСООУКОМРЕТЕРСРОБКМУОІК(5ЕОІО | ТАТУЕЄСАВО55ЗММЕСУєОУМУСОСТІ МТУ
МО: 12) З
ЗЕО ІО МО: 11
Таблиця 1
ЕІМММТО5РАТІ 5БМЗРОЕВАТІ БСВУ5ЗО5БІ | ОМТІ КЕЗИаРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
САМІ АМ/МООКЕСОАРАВІ Уа АБЗТВАТСІЇ АВМЕУЗУЛАОРРОКАГ ЕМ СНІЕЗТОЕК5 2089 | РУВЕБаСО5ОИТтЕРБТІ ТІЗ5І О5ЕОБАІМЗС І УТ Вавітізкотнаиг ммс тМмМОРМО
ООМІУМРЕТЕСРИЕИТТМОІК ТАТУУСАВОЗЗМУЕСУЄОЕМИа РИНІТУ
ЗЕО ІО МО: 14 З (ЗЕО ІЮО МО: 13
ЕІМММТО5РАТІ 5БМЗРОИєЕВАТІ ЗБСВА5БОЗУ | ОМТІ КЕЗИаРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСОТУБаєБІ-ММ
ЗММІАМУООКРИИОАРАВ ІМС АЗТВАТОИ | АНМЕУ5У/ЛВОРРОКАЇ ЕМ/РАНІЕЗТОЕКЗЕ 14011 |МРАВЕЗа5БОБОаИатЕНЕ5БІ ТІЗБІ О5ЕОБЕАМУНІ ВТБ ВЗА ТІ ЗКОТЗКБЗОУМІ ТМТММОРМО
СсООУКОМРЕТЕРСРОИТКМЕЇК (ЗЕО ІЮ ТАТУУСАВО5ЗЗМУЕСУгО УМ СОС МТУ
МО: 16 ЗЕОІЮО МО: 15
ОМУМТО5РАТІ 5М5РИаєЕВАТІ ЗБСВА5БО5 | ОМТІ КЕЗаИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
УО5ОГАМУООРРООБРА ІМСАЗТВАТ | МАМЕОУЗУ/ЛВОРРОКАЇ ЕМ/РАНІЕ55ОЕКЗІ 21Е11 | аМРАНЕЗаБОаЗаИтТОгТІ ТІТ5І ЕЗЕОБГАМ | АВБВЗАІ ТІ ЗКОТЗКБЗОУМІ ТМТММОРУЮ
УУСООУМОМ/РЕТЕРСРОТКМПІК (ЗЕО ІС | ТАТУХСАВОЗЗММЕСМУЕВЕМУСОСТІ МТУ
МО: 18 ЗМ (ЗЕО І МО: 17
ЕМЕМТО5ЗРАТІ 5БМ5РОЕВАТІ 5БСВАЗОМІ | ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
СЗОГАМУОСОЗИОАРА І ІЗИаАЗТВАТС | МАМО УЗУ/ЛАОРРОКАЇ ЕМ/РАНІЕЗЗОЕКЗВБІ 49811 |МРТА!АЕЗОаЗзаБаИаТОЕТІ ТІ О5ЕОЕАМУУ| ААБЗЕВЗВІ ТІ ЗКОТЗКБЗОУМІ ТМТММОРУЮ
СсООУМОМРЕТЕСРИТКМПІК (ЗЕО І ТАТУУСАВОЗ5ЗМУЕСУєО УМУСОСТІ МТУ
МО: 20 З(ЗЕОІЮ МО: 19
ЕМУМТОЗРРМІ ЗМ5РИаєВАТІ ЗСВА5БО5 | ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
МІТЗМЕАМУУООВРООБРАІ І УАБТВАТ | АВНМОУ5У/ЛВОРРОКАЇ ЕМ АНІЕЗТОЕКВБІ
А6Е1О | аУРОаВЕЗОаБЗИаБИТЕМІТІ55І О5БЕОБАМ | АВВАБВЗАВІ ТІ ЗКОТЗКЗОУМ ІМТММОРУО
УЕСООУКОМРЕТЕСРОБКМПІК (ЗЕО ІС | ТАТУХСАВОЗЗММЕСУЕОУМУСОСТІ МТУ
МО: 22 З (ЗЕО ІО МО: 21
ЕМУММТО5ЗРАТІ 5БМ5РОЕВАТІ 5СВАЗО | ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБаОЕ5І ЗМ
У55МЕАМУООВРООБРА І І УАЗТНАТ | АВНМОУ5У/ЛВОРРОКАЇ ЕМ АНІЕЗТОЕКВБІ 12Н6 |суРОаВЕБавБаватЕМІТІЗБІ О5ЕОБЕАЇМ | ВА5І ВЗА ТІ ЗКОТ5КБОММІ ТМТММОРУЮ
ЕСООУКОМРЕТРСРОБКМОІК (5ЕОІО | ТАТУУСАВО55МУХЕСУгО УМ СОСТІ МТУ
МО: 24 З (ЗЕО ІЮ МО: 23
ЕМУММТО5ЗРАТІ БМ5РОЕВАТІ БСВАБЗО5З | ОМТІ ЕЕБаИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ 1949 УМАМІ А УООКРОаОАРАВІ ПРатЗтТВАТ | АВМЕОУЗУ/КОРРОКАРЕМРГАНІЕЗТОЕК5
СІРАВЕЗБО5БО5ОТЕРЕТІ ТІОБІ ОБЕН5ЗОІГ МІВ БІ ВАЗА ТІ ЗКОТЗКЗОУМІ ТМТММО РМ
УСООУМОМРЕТРОСРОТКМОІК (5ЕОІЮО | ОТАТУУСАНОЗЗМУЕЯСУгОУМУСОСТІ МТМ
МО: 26 З (ЗЕО ІЮ МО: 25
ЕМГМТО5РАТІ БМ5РОЕВАТІ ЗБСВАБОБЗМУ| ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ 5ІМЕАМУООВРООАРВИ ЇЇ ЕСАЗТВАТС | АКМОУ5У/ЛВОРРОКАЇ ЕМ АНІЕЗТОЕКВБІ 11811 | ІРОВЕБЗаБОаБаТЕМІТІЗ5І О5ЕОБАІМЕС | ВАЗЕВЗАТМЗКОТЗКЗОУМ ТМТЯММО РУ
ООУКОМРЕТЕСРОБКУЕЇІК (ЗЕО І МО: | ОТАТУУСУВОЗЗММЕСХМЕОУМСОСТІ МТУ 28 З (ЗЕО ІЮ МО: 27
РУМГТО5РАТІ БМ5РОЕВАТІ БСВАБЗОЗМ | ОМТІ ЕЕБИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБаОЕ5І ЗМ
МЗМАМУМООМРИаОАРВІ ЕРа5ЗЗТВАТИІ|Ї АНМЕУЗУВОРРОКАРЕМЕАНІЕЗТОЕК5 21Е7 | РАБЕБОаБО5БОТЕРТІ ТІМ5І ОБЕНБАМУМ | СВІ БІ АЗАГТІ ЗКОТ5КБОУМ ТМТММОРМ
СсООУМОМРЕТЕСРИТКМПІК (ЗЕО І ртАТУУСАВОЗЗММЕСУгОУМСОСТІ МТМ
МО: 29 З (ЗЕО ІЮ МО: 25
ЕМУММТО5ЗРАТІ 5БМ5РОЕВАТІ БСВАЗОЗ | ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ ТСТУБОЕ5І ЗМ
МІММІ А МООКРООАРАЦП ІМатТвТВАТО | РЕМСОУЗУ/ЛВОРРОКАЇ ЕМ/ЛІ СНІЕЗ5ОЕК5 1282 |ІРАВЕБа5Оа5ОатЕРЕТІ ТІЗ5І О5БЕОГАМУУ | МАГ 5І АЗАІ 5ІЗКОТЗКБОММІ ТМТММОРМ
СООУММУРЕТРСРИТКМПІК (ЗЕО ІЮ ртАТУУСУВОЗбЗМУсСаМЕвУМаОоа,ТтІ МТУ
МО: 31 З (ЗЕО ОО МО: 30
ЕІМММТО5РАТІ 5М5РОаєВТТІ БСВА5БОЗМУ | ОМТІ КЕЗОРМІ МКРІЕТІ ТІТСоТУСав5ІМ
СЗМІАМУООКРООАРАВІ УС АБТВАБО | РАМЕУЗУ/ЛАОРРОКАЇ ЕМ СНІЕЗЗОЕК5 11210 |МРАВЕЗаЗаБЗатЕНТІ ТІЗ5І О5ЕОБАМУ |В РІ АЗВІ 5ІЗКОТЗКБОММІ ТМТММОРУ
ЗСОЕУМММ/РЕТРСОСТКУЄБЇІК (5ЕОІО | ОТАТУУСАВОЗЗОУЕСУєрУМУСОСТІ МТМ
МО: ЗЗ3 З (ЗЕОІЮ МО: 32
Таблиця 1
МІММІ АМУ МООКРООАРАЦП ІМатТоТВАТО | РАЕМОУЗУІВОРРОКАРЕМІ СНІЕЗ5ЗОЕК5
ІРАВНЕЗОа5Ба5БОаТтЕНТІ ТІЗ5І О5ЕОЕАМУМ | УВІ ЗЕВЗВІ ЗІЗКОТЗКЗОУМЕХМТММОРа
СООУММУРЕТРСРИТКМПІК (ЗЕО ІЮ ОРАТУУСУВОЗЗММЕЕМЕО УМ СОСТІ МТМ
МО: 31 55 (ЗЕО І МО: 34
КІММТО5РАТІ БМ5РОЕВАТІ БСВАМОЇМ | ОМТІ КЕЗИРМІ МКРТЕТІ ТІ. ТСтТУЗзИОЕ5І5М 55МАММООКРООАРВІ І МЕаТОЗТВАТС | РАЕМСУБЗМ/І ВОРРОКАЇ ЕМ/РГАНІЕЗТОЕК5 2905 |ІРІВЕБа5О5ОТЕБЕТІ ТУ551 О5ЕОБГАМУМ | У5РОЗ ВО ВСТУЗКОТЗКБОММСТТММОРМ
СсООУМОМРЕТЕСРИТКМПІК (ЗЕО І ртАТУУСАВОЗЗМУЕСУгЕОУМСОСТІ МТМ
МО: 36 55 (ЗЕО І МО: 35
РІММТО5РІ ЗІ РУТРЕОЕРАБІЗСВНЗБЗОЗЕ | ЕМОЇ МЕЗО СИ МКРОСБІ ВІ ЗСЕАЗСОЕТЕ5
НЯКА!АМММІ ОМ Р ОКРООБРОЇ ІМ АЗМ | ВЗА МОУ УВОАРОКа! ЕУУУМаВІКЗКТОСС 3008 | ВАБСУРОВЕЗОСОИЗОИТОЕТІ КІЗАМЕАЕОВІ ТТОУУУРІ МавРИІЗАВОЗАМТІ МІ ОЇ ММК
УВУУУСМОАДООТРІТЕСОСТВЇ ЕК (ЗЕО| ТЕОТАУУУСТТУРаЗУСУМССОСТІ МТУ
ІО МО: 38 ЗЕО ІО МО: 37
РІМГТО5РІ 5І ЗМТРОЕРАБІЗБСНЗБВОБЗЕЇ. | ЕУМ МЕЗО СОЇ МКРОСІБІ ВІ ЗСЕАЗОЕТЕ5І
Х5МакМмМІОМРІ НКРИОБРОЇ МІ ОМ | МА/МЗУУВОАРОКИЇ ЕМО ВІКбІДАОСС 20Е12 | ВАБСЕУМРОВЕЗОЗаЗаИаоРІКІЗАМЕАЕОМ | АТОМААРУАМАРТІЗАВОЗАМТІ МГЕМНОЗІ
СУУУСМОАООТРІТРСОСТВІ БІК (5ЕО | КТЕОТАУУУСТТРОаМОАєОМУСсОоОСТММТ
ІО МО: 40 УЗ (ЗЕО І МО: 39
РІМГТО5РІ БІ РУТРІЕРАБІБСВАЗЗОЗІ. | ЕМОЇ МЕБМОМІ МКРОСБІ ВІ БСААБОРІЕМ
НАОСЕММІ СМУГ ОКРООБРОЇ І ІМІ АБЗ. | МАМУ УНОА РОКИ! ЕММІСВІКЗКбООСЯ 2689 | ВАЗауРОВЕЗаЗОБОаТОЕТІ КІЗАМЕАЕВ | ТТОМААРУКОВЕТІЗАВОЗКОТІ МІ ОММаї.
УВУУУСМОАГОТРІТЕСОСТВІ ЕК (5ЕО | КТГЕОТАУУЕЄСТТАРССРЕОУМ ОСТІ МТУ
ІО МО: 42 55 (ЗЕО ІЮ МО: 41
РІМГТО5РІ 5І ЗМТРОЕРАБІЗБСНЗБВОБЗЕЇ. | ЕУМ МЕЗО СОЇ МКРОСІБІ ВІ ЗСЕАЗОЕТЕ5І
У5МакКМмМІОМРІ НКРИОБРОЇ МІ ОЗМ | МА МЗУУВОАРОаКаТї ЕУУУОаВІКОІТОСС 3228 |ВАБЗБаУРОНЕЗОаЗаБЗаїОНІЇ КІЗАМЕАЕОМ ПОМААРУВМАСТІЗАВОЗАМТІ МІ ЕМНОІ КТ
СУУУСМОАООТРІТРСОСТВІ ЕІК (5ЕО | ЕОТАУУУСТТІРаМОВЕОМУсОосСАМУТУ5
ІО МО: 40 З (ЗЕО ІЮ МО: 43
РІМГТОЗРІ БІ ЗМТРОЕРАБІЗСВАЗТОЗІ І. | ЕММІ МЕЗССИЇ МКРОСБІ ВІ ЗСЕАЗОЕТЕ5,
Х5МОакМмМІОМ/РІ НКРООБРОЇ ПІР а,5ІВ | УГА МЗУУВОАРОКаИї ЕУУ/МОаВІКбІМОСС
З4Е7 | АБОМРОВЕЗИаБОЗИаТрНІКІЗАМЕАЕОМИа| АТОМА5РУАМАБТІЗАВОЗАММІ МГЕМНБЗ
МУМСМОАДООТРІТЕСОСТВІ ЕК (ЗЕО ІС | КТГЕОТАУУУС ПІР МОАєЕОМУСОСТІ МТ
МО: 45 УЗ (ЗЕО І МО: 44
РІМІ ТОРІ БІ РУТРОЕРАБІЗСН5ЗБВО5І І. | ЕМО МЕБОСІОЇ МКРОСБІ ВІ БСААБСОЕТЕТ
Х5ОВАММІ ОМ Р ОКРООБРНИ МІ а5УВ| МАУУМ5УУУВОАРОаКаї! ЕУУУаВІКЗКІВССЯ 2025 | АБИУМРОВЕЗОЗИаЗИаИТОвЕТІ КІЗВМЕАЕОМ | ГТОУМААРУКОВРІЗАООБКМТІ І ОММ5І К
СМУМУУСМОАГОІРІТРСОСТВІ ЕК (5ЕО ІФ ТЕОТАМУУСТТАРСОЯРЕЮУМ СОС УТ
МО: 47 З (ЗЕО ІЮ МО: 46
ЕГОБМГТОРРБАБатТРООВМТІЗОСВавз5ьв | ОМОЇ МОБОАЄЕУККРОЗЗУКУЗСКАЗОЮОТЕ
МавМмУУУМмоОоІ РИИТАРКІ ІМАММОВР. | Б5ЗМАІЗМ/МАОАРИОСІ ЕМ/МОМІРІЕЄСТАО (05) БОМРОВЕЗИаБКБИтвАБІ АІЗИЇ АЗЕОЕА | МАДОКЕОСАМТІТАСЕЗТЗТАММЕЇ 551 ВЕ руСААМООМІ Зам УгаТтаткі тм. ртАМУУСАВНТУНЕУХАасСУУсССсАМОРМ/С
ЗЕО І МО: 49 Ост МТУ55 (ЗЕО ІЮ МО: 48
РІОМТО5РБОБІ БАБМИОВМТІТ СВА5ЗОБІЗІ ЕМО ЕЗОСИЇ МОРССБІ ВІ ЗСААЗСОЕТЕ5
ЗМЕМУМООКРОКАРКИ ІМААЗБВІОЗИОМ | МХУАМ5У/УВОАРОКаї! ЕМмУЗОІЗаСсСОааВТ во РБВЕБОаБОБОИТОЕТІ ТІЗБІІ ОРЕОЕБАТУУ | УМАОБЗУКОВЕТІЗВОМ5КМТІ М ОММ5І ВА
СОФО5УЗТРІ ТЕРСОСТКМЕЇК (5ЕО ІЮ МО: | ЕОТАУУУСАВАСІ і УсасаУМРМОММУСОСТ 51 І МТУ55 (ЗЕО І МО: 50
Також тут передбачені СОБ-частини позаклітинних ліганд-зв'язуючих доменів САК з
ЕСЕРМІЇ (у тому числі СОК Кабата, Чотіа та СОК-контакті області). Визначення СОК-областей добре відомо з рівня техніки. Слід розуміти, що у деяких варіантах здійснення СОК можуть бути комбінацією СОМ о Кабата і Чотіа (що також називаються «комбінованими СК» або «розтягнутими СОК»). У деяких варіантах здійснення СОК являють собою СОК Кабата. У деяких варіантах здійснення СОМ являють собою СОР Чотіа. Іншими словами, у варіантах здійснення з більше ніж одним СОК, СОМ можуть бути будь-якими СОК з СОЕ. Кабата, Чотіа, комбінаційних СОК, або їхніх комбінацій. У таблиці 2 наведені приклади послідовностей СОК, передбачених тут.
Таблиця 2
ТОРУТІН (5ЕО ІЮ МО: 62) | ОВІОРІМОСТТУМОКЕКО (5ЕО | деатаз (5ЕО І МО: 67) (Кабат); ІО МО: 65) (Кабат) тб207 | аУТЕТО (ЗЕОО МО: 63). | БІОРІМОСТТУ (ЗЕО О МО: (Чотіа); 6б) (Чотіа)
ОУТЕТОМТІН (5ЕО І МО: 64) (розтягнутий)
ТОУТІН (5ЕО ІО МО: 62) | ІМРІМАЯТТУМОКЕКО (ЗЕО | деатаз (ЗЕО ІЮ МО: 67) (Кабат); ІО МО: 68) (Кабат) пб207 | ОМТЕТО (ЗЕОІЮ МО: 63). | ВІМРІМОСТТУ (ЗЕО ТО МО: (Чотіа); 69) (Чотіа)
ОУТЕТОМТІН (5ЕО І МО: 64) (розтягнутий)
ТОУТІН (ЗЕО І МО: 62) | ОМ/РІТаТТУМОКЕКО (ЗЕО | деаЕБсС:5 (5ЕО І МО: 72) (Кабат); ІО МО: 70) (Кабат) пб207-НІ14 | ОУТЕТО (5ЕО І МО: 63). | ІМ/РІТОСТТУ (ЗЕО ТО МО: (Чотіа); 71) (Чотіа)
ОУТЕТОМТІН (5ЕО І МО: 64) (розтягнутий)
ТОУТІН (5ЕОІО МО: 62) |9імріТдонупакіка (ЗЕО ІО | делОсІв (ЗЕО ІО МО: 73) (Кабат); МО: 70) (Кабат)
СМТЕТО (ЗЕОІО МО: 63) |9дімріТаону (ЗЕО І МО: пв2О7ЕО | (Чотіа); 71) (Чотіа)
ОУТЕТОМТІН (5ЕО І МО: 64) (розтягнутий)
ЗМРАМОМ5 (ЗЕОІО МО: | Ппіївідеквіківіт5(5ЕО ІО МО: | аззпуедчутаї (ЗЕО ІО МО: 74) (Кабат); 77) (Кабат) 79) 4209 СЕБІЗМРА (ЗЕОІО МО: | ізаекві (ЗЕО І МО: 78) 15) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБ5І БМРАМОИМ5 (5ЕО 10
МО: 76) (розтягнутий)
ЗМАНМИаМ5 (5ЕО ІО МО: | пізіаеквІвА5І 5 (5ЕО І | аззпуєдугам (ЗЕО ІЮ МО: 80) (Кабат); МО: 83) (Кабат) 85)
З2гАТ10 СЕБІ ЗМАВ (ЗЕОІО МО: | изІаекві (ЗЕО І МО: 84) 81) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБ5І БМАНМИМ5 (5ЕО 10
МО: 82) (розтягнутий)
ЗМАНМИаМ5 (5ЕО ІО МО: | пізІекзутТ5і ВО(ЗЕО І | аззпуєдутає (ЗЕО І МО: 80) (Кабат); МО: 86) (Кабат) 79) 2089 СЕБІ ЗМАВ (ЗЕОІО МО: | ізіаеквм (5ЕО ОО МО: 87) 81) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБ5І БМАНМИМ5 (5ЕО 10
МО: 82) (розтягнутий)
ММАНМИМ5 (ЗЕО ІО МО: | НіеідекзЕАтТ5І А5(ЗЕО ІО | аззпуеєчутам (ЗЕО І МО: 88) (Кабат); МО: 91) (Кабат) 85) 14С11 СЕБІММАВ (ЗЕОІО МО: | пізІаеквЕ (ЗЕО ІЮ МО: 92) 89) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБІ ММАВНМОИМ5 (5ЕО 10
МО: 90) (розтягнутий)
ЗМУАМИаМ5 (5ЕО ІО МО: | пізБзаєквІВА5БІ АБ(ЗЕО І | аззпуєдутає (ЗЕО І МО: 2111 93) (Кабат); МО: 96) (Кабат) 79)
СЕБІ ЗММА (ЗЕОІО МО: | нізБаєкві (ЗЕО І МО: 97) 94) (Чотіа); (Чотіа)
Таблиця 2
НИ: ківі ННЯ ПОЛОН
МО: 95) (розтягнутий)
ЗМУАМаМ5 (5ЕО ІО МО: | пізБаєквІВН5БІ АБ(ЗЕО І | аззпуєдутам (ЗЕО ІЮ МО: 93) (Кабат); МО: 96) (Кабат) 85) 49811 СЕБІ ЗММА (ЗЕОІО МО: | нізБаєкві (ЗЕО І МО: 97) 94) (Чотіа); (Чотіа) аЕБІ ЗМУ Мам5 (ЗЕО І
МО: 95) (розтягнутий
ЗМАНМИаМ5 (5ЕО ІО МО: | пізіаеквІвА5І 5 (5ЕО І | аззпуєдугам (ЗЕО ІЮ МО: 80) (Кабат); МО: 83) (Кабат) 85)
АбЕ1О СЕБІ ЗМАВ (ЗЕОІО МО: | пізІаекві (ЗЕО І МО: 84) 12Нн6 81) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБІ ЗМААМИам5 (ЗЕО І
МО: 82) (розтягнутий)
ЗМАНМИаМ5 (5ЕОІО МО: | ізаекзівіІ 5І 85 (ЗЕО ІЮ. | аззпуєдутам (5ЕО ІО МО: 80) (Кабат); МО: 98) (Кабат) 85) 19А9 СЕБІ ЗМАВ (ЗЕОІО МО: | изаекві (ЗЕО І МО: 78) 21Е7 81) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБІ ЗМААМИам5 (ЗЕО І
МО: 82) (розтягнутий)
ЗМАКМИаМ5(ЗЕОІО МО: | пізІаеквІВВ5І АБ (5ЕО ІО | аззпуєдугам (ЗЕО ІЮ МО: 99) (Кабат); МО: 83) (Кабат) 85) 11811 СЕБІ ЗМАК (ЗЕОІО МО: | изІаекві (ЗЕО І МО: 84) 100) (Чотіа); (Чотіа)
СЕБІ ЗМАКМОИам5 (5ЕО І
МО: 101) (розтягнутий)
ЗМРАМИаМ5 (5ЕОІО МО: |НІБ55ОЕКЗУВІ 5І 5 рзвмМчасмЕру (5ЕО І 74) (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 102) (Кабат) |МО: 104) 1282 СЕБІ ЗМРА (ЗЕОІО МО: /|НІБ5Б5ОЕК5М (5ЕО ІЮ МО: 15) (Чотіа); 103) (Чотіа)
СЕБІ ЗМРА МОМ (ЗЕО І
МО: 76) (розтягнутий)
ЗМРАМИаМ5 (5ЕОІО МО: | ПІЕЗБЗОЕКЗУВІ РІ АБЗ (5ЕОЇ 05506 МЕОМ (ЕС І 74) (Кабат); ІО МО: 105) (Кабат) МО: 107) 1110 СЕБІ ЗМРА (ЗЕОІЮО МО: | ПІЕ5БЗОЕК5БМУ (5ЕО І МО: 15) (Чотіа); 103) (Чотіа)
СЕБІ ЗМРА МОМ (ЗЕО І
МО: 76) (розтягнутий)
ЗМРАМИаМ5 (5ЕОІО МО: |НІБ55ОЕКЗУВІ 5І 5 О5БЗМУЕЕМЕОМУ (5ЕО І 74) (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 102) (Кабат) |МО: 108) 17614 СЕБІ ЗМРА (ЗЕОІО МО: /|НІБ5Б5ОЕК5М (5ЕО ІЮ МО: 15) (Чотіа); 103) (Чотіа)
СЕБІ ЗМРАМИам5 (ЗЕО І
МО: 76) (розтягнутий)
ЗМРАМИаМ5 (5ЕО ІО МО: | НІЕ5ТОЕКЗУ5РБЇ ВО(ЗЕО) аззпуєдутгам (ЗЕО ІЮ МО: 74) (Кабат); ІО МО: 106) (Кабат) 85) 2905 СЕБІ ЗМРА (ЗЕОІО МО: /|НІЕЗТОЕК5ЗУ (ЗЕО І МО: 15) (Чотіа); 87) (Чотіа)
СЕБІ ЗМРА МОМ (ЗЕО І
МО: 76) (розтягнутий) 5БАМ/М5 (ЗЕО ІЮ МО: 1093 ВІКОКТОССОТтТтОМММУРІ МО | МРаБМОМ (5ЕО ІЮ МО: (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 112) (Кабат). | | 114) 3008 91ТЕ5О (ЗЕО ІЮ МО: 110). |! ВІКЗОКТОСІСТ ТОМ (ЗЕО І (Чотіа); МО: 113) (Чотіа) 9 ЕЗОАМУМ5 (5ЕО ІЮ МО: 111) (розтягнутий)
Таблиця 2 5УАМУМ5 (ЗЕО ІО МО: 115)| ВІКЧІАрасАТОМААРУВМ | ПРЕМОАРОМ (5ЕО ІЮ МО: (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 118) (Кабат) |120) 20Е12 9ТЕБМ (5ЕО ОО МО: 116). | ВІКОЧІАрасАТОМ (5ЕО І (Чотіа); МО: 119) (Чотіа)
СЕТЕБМАМ/М5 (5ЕО 10
МО: 117) (розтягнутий)
ММАМУМ5 (ЗЕО І МО: ВІКОКЗрИасаТТтОМААРУКО | АРІСРЕЮОМ (5ЕО ІЮ МО: 121) (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 124) (Кабат) 126) 26во ОПЕММ (ЗЕО ІЮ МО: 122) | ВІКЗКЗОСаИТтТТтОмМ (5ЕО І (Чотіа); МО: 125) (Чотіа)
СЕРІЕММАМУМ5 (5ЕО 10
МО: 123) (розтягнутий) 5МАМ/М5 (ЗЕО ІО МО: 115)) ікК5падамідуаармт (ЗЕО ІЮ | ПРЕМООРОМ (5ЕО ІЮ (Кабат); МО: 127) (Кабат) МО: 129) 3208 9ТЕБМ (ЗЕОІО МО: 116) | (Кк5паддміду (ЗЕО ІЮ МО: (Чотіа); 128) (Чотіа)
СЕТЕБМАМ/М5 (5ЕО 10
МО: 117) (розтягнутий) 5УАМУМ5 (ЗЕО ІО МО: 115)! ВІКБІМОССОСАТОМАБРУВМ |ППРОМОАРОМ (5ЕО ІЮ МО: (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 130) (Кабат) |120)
ЗАЕ7 Я9ТЕБМ (5ЕО ОО МО: 116). | ВІКБІМОССОСАТОМ (5ЕО І (Чотіа); МО: 131) (Чотіа)
СЕТЕБМАМ/М5 (5ЕО 10
МО: 117) (розтягнутий)
Іпамлтв (ЗЕО ІЮ МО: 132). | ВІКОКІВСС ТТ ОМААРУКИ | АРІДСРЕЮОМ (5ЕО ІЮ МО: (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 135) (Кабат) 126) 2065 діти (5ЕО ІО МО: 133) ВІКЗ5КІОССИТТОМ (5ЕО ОО (Чотіа); МО: 136) (Чотіа)
ЧТ Ріпаумлтз (ЗЕО 10 МО: 134) (розтягнутий)
ЗОЗМАЇІ5 (ЗЕО ІО МО: 137). | МІРІЕТАЮМАОКРОС НТУНЕМАССУУаСаСАМОР (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 140) (Кабат) | (5ЕО ІЮ МО: 142) св СОТЕ55 (5ЕО ІЮ МО: 138) | МІРІЕЕТАЮМ (ЗЕО ІЮ МО: (Чотіа); 141) (Чотіа) 9ОТЕБЗМАЇІ5 (ЗЕО ІЮ МО: 139) (розтягнутий)
ЗМУАМ5 (ЗЕО ОО МО: 143)! ОІБОаСсОССАТУМАОБУКа Асі МацамМмМРМОІ (Кабат); (ЗЕО ІО МО: 146) (Кабат) | (5ЕО ІЮ МО: 148) в5 СЕТЕБМ (ЗЕО І МО: 144) | бІЗГСсСОССаВвТУМ (ЕС І (Чотіа); МО: 147) (Чотіа)
СЕТЕБММАМ5 (ЗЕО ІЮ
МО: 145) (розтягнутий)
Таблиця 2 пв2аи7 ЗЕО ІО МО: 149 ЗЕО ІО МО: 150 ЗЕО ІО МО: 151
ВАБОБУВ5ЗМІ А (ЗЕО І , ООМБОМ/РЕТ (ЗЕО І
Таблиця 2 1111000 0мО:15997111111111111 01611111 вО1
МО: 162 163 164)
МО: 165 163 161)
МО: 166 163 167)
МО: 168 163 167)
МО: 169 163 161)
МО: 170 163 161)
МО: 171 172 167)
МО: 173 163 161)
МО: 174 175 167) 17211 МО: 176 172 177)
МО: 178 179 180)
МО: 181 172 167)
ЗЕО ІЮ МО: 182 183 184 32ав ЗЕО ІО МО: 185 186 184
ЗЕО ІО МО: 187 188 189 взтОоБИ мЗМакКММмІ о , МОАООТРІТ (5ЕО ІО МО:
ЗЕОІЮ МО: 192 193 194
ЗЕО ІО МО: 195 ЗЕО ІО МО: 196 ЗЕО ІО МО: 197
ЗЕО ІЮ МО: 198 199 200
Винахід охоплює модифікації САК і варіанти поліпептидів за винаходом, що показані у таблиці 1, у тому числі функціонально еквівалентні САК, що мають модифікації, які не впливають значним чином на їхні властивості, а також варіанти, які мають підвищену або знижену активність та/або афінність. Наприклад, амінокислотна послідовність може бути мутована для одержання антитіла з бажаною афінністю зв'язування з ЕСЕРЕМІЇ. Модифікація поліпептидів являє собою рутинну практику у рівні техніки і не потребує докладного опису тут.
Приклади модифікованих поліпептидів включають поліпептиди з консервативними замінами амінокислотних залишків, однією або більше делеціями або приєднаннями амінокислоти, які суттєво і шкідливо не змінюють функціональну активність, або які витримують (посилюють) афінність поліпептиду для свого ліганду, або використовують хімічні аналоги.
Інсерції амінокислотної послідовності включають аміно- та/або карбоксил-кінцеві зшиття діапазоном від одного залишка до поліпептидів, що містять сотню або більше залишків, а також інсерції одиночного або декількох амінокислотних залишків всередину послідовності. Приклади кінцевих інсерцій включають антитіло з М-кінцевим метіоніловим залишком або антитіло, що зшите з епітопною міткою. Інші варіанти інсерцій молекули антитіла включають зшиття з М- або
С-кінцем антитіла фермента або поліпептида, що підвищує період напіврозпаду антитіла у кровотоці.
Варіанти замін мають щонайменше один видалений амінокислотний залишок у молекулі антитіла й інший залишок, що вставлений у це місце. Сайти, що являють найбільший інтерес для заміщаючого мутагенезу, включають гіперваріабельні області, але також передбачені ЕК- альтерації. Консервативні заміни показані у таблиці З під заголовком «консервативні заміни».
Якщо такі заміни призводять до зміни біологічної активності, то може бути введено більше суттєвих змін, що позначені як «приклади замін» у таблиці 3, або як описано далі з посиланням на класи амінокислот, та проскринінговано більше продуктів. У деяких варіантах здійснення варіанти замін антитіл, що передбачені тут, мають не більше, ніж 15, 14, 13, 12, 11,10,9,8, 7,6, 5, 4, 3, 2 або 1 консервативну заміну у МН- або Мі -області у порівнянні з опорним вихідним антитілом. У деяких варіантах здійснення заміни не знаходяться всередині СОК МН- або МІ - області.
Таблиця 3:
Амінокислотні заміни
Початковий залишок (амінокислота природного Консервативні заміни Приклади замін походження 771 л1ед 71777717 леи77777171717171717 сен; Маї; Меї; Аа; Ріє; Норлейцині ле Ї17717171717171717171717171711ле 77777777 |Норлейцин; Пе; Маї; Мей; Аа; Ріє
У деяких варіантах здійснення винахід передбачає САК, що містить позаклітинний ліганд- зв'язуючий домен, який зв'язується з ЕСЕЕМІЇ ії конкурує за зв'язування з ЕСЕЕМІ з антитілами, описаними тут, або САК, описаними тут (наприклад, таблиця 5А), у тому числі тб207, Нб2а7, пб2а7-НІ14/Л 1-ОМ, нб2а7-І 6/ЕО, 4209, З2А10, 2089, 14С11, 21Е11, 49811, 46Е10, 12Нб, 19А9, 21Е7, 11811, 1282, 11210, 17011, 2905, 3008, 20Е12, 2689, 3208, З34Е7, 2005, Сб та В5.
У деяких варіантах здійснення винахід передбачає САК, що містять СОК-частини антитіл до
ЕСЕВМП-антитіл на основі СОК-контактних областей. СОВ-контактні області являють собою області антитіла, які надають специфічності антитілу до антигену. Загалом, СОК-контактні області включають залишкові області в СОМ і зонах Верн'є, які стримані для одержання належної замкнутої структури для антитіла для зв'язування специфічного антигену. Див., наприклад, МаКаре еї аї., 9. ВіоЇ. Спет., 283:1156-1166, 2007. Визначення СОК-контактних областей добре відомо з рівня техніки.
Афінність зв'язування (Ко) ЕСЕВМПІ-специфічного САК, як описано тут, до ЕСЕКМІЇЇ, такого як ЕСЕЕМІЇ людини (наприклад, (5ЕО ІЮ МО: 201)) може становити від приблизно 0,001 до
Зо приблизно 5000 нм. У деяких варіантах здійснення афінність зв'язування становить приблизно будь-яке значення із 5000 нм, 4500 нм, 4000 нм, 3500 нм, 3000 нм, 2500 нм, 2000 нм, 1789 нм, 1583 нм, 1540 нм, 1500 нм, 1490 нм, 1064 нм, 1000 нм, 933 нм, 894 нм, 750 нм, 705 нм, 678 нм,
532 нм, 500 нм, 494 нм, 400 н, 349 нм, 340 нм, 353 нм, 300 нм, 250 нм, 244 нм, 231 нм, 225 нм, 207 нм, 200 нм, 186 нм, 172 нм, 136 нм, 113 нм, 104 нм, 101 нм, 100 нм, 90 нм, 83 нм, 79 нм, 74 нм, 54 нм, 50 нм, 45 нм, 42 нм, 40 нм, 35 нм, 32 нм, 30 нм, 25 нм, 24 нм, 22 нм, 20 нм, 19 нм, 18 нм, 17 нм, 16 нм, 15 нм, 12 нм, 10 нм, 9 нм, 8 нм, 7,5 нм, 7 нм, 6,5 нм, 6 нм, 5,5 нм, 5 нм, 4 нм, З
Нм, 2 нм, 1 нм, 0,5 нм, 0,3 нм, 0,1 нм, 0,01 нм або 0,001 нм. У деяких варіантах здійснення афінність зв'язування становить менше, ніж приблизно будь-яке значення із 5000 нм, 4000 нм, 3000 нм, 2000 нм, 1000 нм, 900 нм, 800 нм, 250 нм, 200 нм, 100 нм, 50 нм, 30 нм, 20 нм, 10 нм, 7,5 нм, 7 нм, 6,5 нм, 6 нм, 5 нм, 4,5 нм, 4 нм, 3,5 нм, З нм, 2,5 нм, 2 нм, 1,5 нм, 1 нм або 0,5 нм.
Внутрішньоклітинний сигнальний домен САК за винаходом відповідає за внутрішньоклітинний сигналінг після зв'язування позаклітинного ліганд-зв'язуючого домену з мішенню, даючи в результаті активацію імунної клітини й імунну відповідь. Внутрішньоклітинний сигнальний домен має здатність до активації щонайменше однієї з нормальних ефекторних функцій імунної клітини, в якій експресується САК. Наприклад, ефекторна функція Т-клітини може являти собою цитолітичну активність або активність хелперів, у тому числі секрецію цитокінів.
У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен для використання у
САК може являти собою цитоплазматичні послідовності, наприклад, але без обмеження, рецептору та корецепторів Т-клітини, які діють разом для ініціації трансдукції сигналу після зчеплення рецепторів антигену, а також будь-яку похідну або варіант цих послідовностей та будь-яку послідовність, яка має таку ж функціональну здатність. Внутрішньоклітинні сигнальні домени містять два різних класи цитоплазматичних сигнальних послідовностей: ті, що ініціюють антиген-залежну основну активацію, і ті, що діють антиген-залежним чином для забезпечення другорядного або костимулюючого сигналу. Основні цитоплазматичні сигнальні послідовності можуть містити сигнальні мотиви, які відомі як іммунорецепторні тирозинові активуючі мотиви
ІТАМ. ІТАМ являють собою добре визначені сигнальні мотиви, що знаходяться у внутрішньоцитоплазматичному кінцевому сегменті широкої кількості рецепторів, які служать як сайти зв'язування для тирозинових кіназ класу зук/7ар70. Приклади ІТАМ для використання у винаході можуть включати необмежуючі приклади тих, що одержані з ТСКС, РсКу, ЕСВВД, Еске,
СОоЗу, СО036, СОзє, СО5, с022, СО79а, СО79Б6 та СОбба. У деяких варіантах здійснення
Зо внутрішньоклітинний сигнальний домен САК може містити СОЗС (дзета) сигнальний домен, який має амінокислотну послідовність із щонайменше приблизно 7095, переважно, щонайменше 8095, переважніше, щонайменше 9095, 9595, 9795 або 9995 ідентичністю послідовності з амінокислотною послідовністю, показаною у 5ЕО. ІЮ МО: 205. У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен САК за винаходом містить домен костимулюючої молекули.
У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен САК за винаходом містить частину костимулюючої молекули, вибрану з групи, що складається з фрагменту 418 (СсепВапк. ААА5З133.) та СО28 (МР 006130.1). У деяких варіантах здійснення внутрішньоклітинний сигнальний домен САК за винаходом містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше 7095, переважно, щонайменше 8095, переважніше, щонайменше 90905, 9595, 9795 або 9995 ідентичність послідовності з амінокислотною послідовністю, показаною у
ЗЕО. ІЮ МО: 213 (сигнальний домен СО28) або 5ЕО). ІЮ МО: 204 (сигнальний домен 4-188).
САК експресуються на мембрані поверхні клітини. Таким чином, САК може містити трансмембранний домен. Придатні трансмембранні домени для САК, розкритого тут, мають здатність до (а) експресії на поверхні клітини, переважно, імунної клітини, такої як, наприклад, але без обмеження, клітини-лімфоцити або природні клітини-кілери (МК), та (Б) взаємодії з ліганд-зв'язуючим доменом і внутрішньоклітинним сигнальним доменом для спрямовування клітинної відповіді імунної клітини на попередньо визначену клітину-мішень. Трансмембранний домен може бути одержаний з природного або із синтетичного джерела. Трансмембранний домен може бути одержаний з будь-якого мембранозв'язаного або трансмембранного білка. Як необмежуючі приклади, трансмембранний поліпептид може являти собою субодиницю рецептору Т-клітини, таку як а, В, у або б, поліпептид, що становить СОЗ-комплекс, 1-2 рецептор р5о5 (ланцюг), р/7/5 (В-ланцюг) або у-ланцюг, ланцюг субодиниці Ес-рецепторів, зокрема, Есу рецептор ІІ або СО білки. Як альтерантива, трансмембранний домен може бути синтетичним і може містити переважно гідрофобні залишки, такі як лейцин і валін. У деяких варіантах здійснення зазначений трансмембранний домен одержаний з людського СОва- ланцюга (наприклад, МР 001139345.1). САК може додатково містити стебловий домен між позаклітинним ліганд-зв'язуючим доменом і зазначеним трансмембранним доменом. Стебловий домен може містити до 300 амінокислот, переважно, від 10 до 100 амінокислот, і 60 найпереважніше, від 25 до 50 амінокислот. Стеблова область може бути одержана з усіх або частини молекул природного походження, наприклад, з усіх або частини позаклітинної області сОр8, с04 або СО28, або з усіх або частини константної області антитіла. Як альтернатива, стебловий домен може бути синтетичною послідовністю, яка відповідає стебловій послідовності природного походження, або може бути повністю синтетичною стебловою послідовністю. У деяких варіантах здійснення стебловий домен являє собою частину людського СОва-ланцюга (наприклад, МР 001139345.1). В іншому конкретному варіанті здійснення зазначені трансмембранний і шарнірний домени містять частину людського СОва-ланцюга, що переважно має щонайменше 7095, переважно, щонайменше 8095, переважніше, щонайменше 9095, 95965, 9795 або 9995 ідентичність послідовності з амінокислотною послідовністю, показаною у 5ЕО ІЮ
ЗЕО: 210 і 5ЕО ІЮО МО: 208, відповідно. У деяких варіантах здійснення САК, що розкриті тут, можуть містити позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен, який специфічно зв'язує ЕСЕЕМІЇ, шарнірні й трансмембранні домени людського СОва, сигнальний домен СОЗС і сигнальний домен 4-188.
У таблиці 4 наведені приклади послідовностей доменів, які можуть використовуватися у
САК, розкритих тут.
Таблиця 4
Приклади послідовностей компонентів САК ле 000 иннкоратсянняь 1 пептид
ЕРКЗРОКТНТСОСРРСОРАРРМАСРБУРБІ ЕРРКРКОТІ МІАВТРЕМТС
МУМОУЗ5НЕОРЕМКЕММ УМО М ЕМНМАКТКРАЕЕОУМЗТУНУМ5 9С1 шарнір МІ ТМ НОСОМ МЕКЕУКСКМУ5МКАЇ РАРІЕКТІЗКАКСОРВЕРОМУ 209
ТГРРЗАОСЕЇТКМОМ5І ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИаОРЕММУКТТ
РРМГОБОРОБЕРІ У5КІ ТМОКЗРАМООССММЕЗСОУМНЕАІ НМНУТО
КБІ БІ РОК сова ІМІМАРІ ДИТСОМІ ГІ БІ МІТІ МО трансмембранний 210 (ТМ) домен злвв КАОСАККІ МІЕКОРЕМАРМОТТОЕЕВОС5САЕРЕЕЕЕСОСЕЇ. внутрішньоклітинний 203 сигнальний домен
ІБО созс ВУКЕЗАБАВАРАМООССОМОЇ УМЕЇ М А!АВЕЕМОМІ ОКАВНаВОР внутрішньоклітинний | ЕМСФСКРАВКМРОЕІ УМЕ ОКОКМАЕАМЗЕСМКаЕНАНИКИН 205 сигнальний домен раігмоаві 5ТАТКОТМОАІ НМОАГРРА
ІБО
Есе а-ТМ-ІС ЕРІРГІ ММІ-СРАМОТаї! РІБТОСОМТЕР І КІКАТАКОЕВІ І МРН!НРКРМ (трансмембра РКММ нний і ши 211 внутрішньоклітинний домен а-ланцюга
ЕсеКІ)
МОТЕБМАВАМІ А РОЕРБЗУРАРЕМІ ЕІБРОЕМБ5БОаНІ І К5АБОР
ЕсеєКІВ-ДІТАМ (В- РІНТУМІ ТМІ ККЕОСЕРІ ЯМТО ТАМІСІ СРЕТУМСОМІ ОІЗНІЕСОІ ланцюг Есе без ЕЗББЕКАСМРЕМСАЇЕЕ5ІЗОМІ БІЗЕВАМАТМУЇ УВОа5І САМТА5ЗБІ 212
ІТАМ) АИСатаптіІШМІКК5бІ АМІНІНВСОКЕРЕТКСЕМА5БЕБТЕІМУММІ РІ.
ТІ а аБАМ5І ТІССАСЕБЇ КОМКУРЕ 4188-ІС КАОСАККІ МІЕКОРЕМАРМОТТОЕЕВОС5САЕРЕЕЕЕСОСЕЇ. (косигнальний домен 204 злвв
Сора28-ІС вок! аанНЗОуУМММТРААВРОРТАКНУОРМАРРВАОБГААУНЬ (косигнальний домен 213 сСр2агв
Таблиця 4
Приклади послідовностей компонентів САК дек 000 Рнкююютатслюнь 0 (сигнальний пептид)
ЕсекіІ у-АІТАМ (у- ІГСЕРОЇІ СМІ ОАЕ Мам т МсВвІ КІОМАКААІТЗУЕК5 ланцюг Есе без 215
ІТАМ ава-рРг2А (а5а-Р2А | а5БСАТМЕЗІИЇ КОАСОМЕЕМРаР рибосомний 5кКір- 216 поліпептид) аза-т2А(ава-Т2А | а5аБєсаВавіЇ ТтоаОМЕЕМРОаР рибосомний 5Кір- 217 поліпептид)
У таблиці 5А наведені амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕЕмМПІ-специфічних САК за даним винаходом. У таблиці 5А послідовність сигнального/лідерного пептиду позначена жирним, а с5-лінкер (500055)4 (ЗЕО ІЮ МО: 202)| підкреслений.
Таблиця 5А
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКМПІ-специфічних САК
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця)
МАГ РУТА РІ АГ НААДВРОУММТОБРІ 5І РМТІ ОР Сова сигнальний
АБІЗСКЗЗОБИЇ МЗМаКТМІ ММРООВРИОБРААВИІМОМЗК | пептид; пб207-І 6/ЕО
Гго5амМмРовЕЗазазатТОвТІКкІЗАМЕАЕОУИаУМУСОООтТ | МІ (Таблиця 1 5ЕО ІЮ
НнЕРГТРаСОСТТКУЕІКСОСВвазССССОЗССЯСоБОСОСООМ МО: 6);а5-лінкер
ОГМО5ОАЕУККРОАБУКУЗСКАЗИОаМУТЕТОМТІ НУМВОАР | (ас) (ЗЕО ІЮ сосаГєУмМмастмРІТавСТтУМОКеЕКаВУТМтТАрТеТеТММ | МО: 202); нвос7- МЕ! 55І АБЕОТАУУУСАВСЕАОСОЗМ ОСТІ МТМО ТТР | нв2а7-І 6/ЕО УНН
Ів/ЕО АРАРРТРАРТІАБОРІ БІ АРЕАСАРААДССАМУНТРИЇ ОГАС | (Таблиця 1 ЗЕО ІЮ
РІМІМАРІ АСТССМІ ЛІ БІ МІТІ МСКА!САККІЇ МІЕКОРЕМА | МО: 5);
РМХОТТОЕЕраСЗСВЕРЕЕЕЕСИаСЕЇ ВУКЕЗАЗАВАРАХУ Сова шарнір;
СООСОМОЇ УМЕЇ МАВЕЕМОМ ОКАВНИАВОРЕМОСКРА СОва ТМ;
АКМРОЕСІЇ УМЕ ОКОКМАЕАУЗЕМКИаЕНА!НОКОНОС | сигнальний домен 4-
ГУМОВІ ЗТАТКОТУРАЇ НМОАЇ РРА 188; (ЗЕО ІО МО: 52) сигнальний домен
СОЗ дзета
МАГ РУТАГІ ГРІ АГ. НААВРОМТІ КЕЗОРМІИІІ КРТЕТІ Т Сова сигнальний
ГТоТУБаг5І ЗМРАМаузУМЛВОРРОКАЇ ЕМ/ЕАНІЕЄЗТОЕК | пептид;
ЗІ КІ 5І АЗАІ ТІ ЗКОТЗКБОМУМІ ТМІММАРМОЗБАТУМСАВ | 4209 МН (Таблиця 1 раззМУєахмогмаості мтиззасасзассавасиасе | ЗЕОЮО МО: 9); саасавзЕММІ ТО5РАТІ БМОРОЕВАТІ БСВАБОЗУВОМІ А | с5-лінкер;
МУООКБаОАРВ ІМаЗТІВАТаМРАВЕЗОаЗОаЗИТЕНЕТІТ | 4269 МІ (Таблиця 1 42029 ІЗБ ОБЕОБАМУУСООМЗОМРЕТЕРОРОИтТКкКМУОрІКТТТРАРА | ЗЕОІЮО МО: 10);
РРТРАРТІАБОРІ 5І АВРЕАСАРАДИСАМУНТАИЇІ ОБАСОІМІ | СОва шарнір;
МАРІ АЯТССОИМПІІІ БІ МІТІ МСКВСАККИЇ МІЕКОРЕМАРМО | СОва ТМ;
ТТОЕЕрОаС5СВЕРЕЕЕЕССОСЕЇ ВУМКЕЗАБАВАРАМООС сигнальний домен 4-
ОМОЇ УМЕІГ М В!вЕЕМОМІ ОКАВСАВОРЕМОСКРАВКМР | 1ВВ;
ОБСІ УМЕГОКОКМАЕАУЗЕСМКаєЕВААНИаКаТнОрасІ МОСС | сигнальний домен
І 5ТАТКОТУВАІЇ НМОАГРРА СОЗ дзета
ЗЕО ІО МО: 53
І ТоТУБаг5І зМАВМИамузУВОРРОКАГСЕМ І АНІЕЗТОЕК | пептид;
Таблиця 5А
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКМПІ-специфічних САК
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця)
ЗІВА5БІ АЗАЇІ ТІ 5КОТ5КБОМУМІ ТМІММОРМОТАТУРСАВ | 32АТ10 МН (Таблиця 1 розМУЕаУгруусості утиззасиасвсссовасиасе | ЗЕОЇЮО МО: 11); сацсавБЕУУМТО5РАТІ БМОРОЕВНМТІ 5СВАБОБУ5БОМЕА | С5-лінкер;
МУООВРООСАРВІ ГІЇ МЕАТТВАТОЇ РИВЕЗИаБОБИТЕМІИІ | 32А10 МІ (Таблиця 1
ТІЗБІ ОБЕОБРАІМЕСООУКОМУ РЕТРО РОЗКМОІКТТТРАРА | ЗЕО І МО: 12);
РРТРАРТІАБОРІ БІ АВРЕАСАРААДССАМНТАСІ ОБАСОІМІ | СОва шарнір;
МАРІ АЯТСОМИ І БІ МІТІ МСКВОВККІ І МІЕКОРЕМАРМО | СОва ТМ;
ТТОЕЕрОаС5СВЕРЕЕЕЕССОСЕЇ ВУМКЕЗАБАВАРАМООС сигнальний домен 4-
ОМОЇ УМЕЇ М ФАВЕЕМОМІ ОКАВОАОРЕМОСКРАВКМР | 188;
ОБОЇ УМЕ ОКОКМАЕАМЗЕМКОаЕНАНОаКа НОСІ МОСС | сигнальний домен
І 5ТАТКОТМОАЇ НМОАГРРА(ЗЕО ІЮ МО: 54) СОЗ дзета
МАГ РМТАТІ І РІ АГ. НАААРОМТІ КЕБСОРМІ МКРТЕТІ Т | СОва сигнальний
ГТСТУБаг5І БМААМИаузУВОРРОКАЇ ЕМ ИаніЄЗТОЕ пептид;
КБУБТОІ ВОВІТІЗКОТОАаИїІ УМ ТІ ТММОРМОТАТУМСАВ | 2089 МН (Таблиця 1, роЗМУєаМЕрЕМмаРаРІ МТУЗЗ,ССсСОосаЗОСОСсСеСОСсЯев | ЗЕОЮО МО: 13); сацса5БЕММТО5РАТІ 5М5РОЕВАТІ БСАУМ5ОБІСАМІ А с5-лінкер;
МУПОКРСОАРА МО АЗТВАТОІРУВЕЗОСИ5БИтЕРЕТІ ТТ | 2089 МІ (Таблиця 1, 2089 ІЗ5І ОБЕОБАІМ5СООМІ ММ РЕТРО РОТТМОІКТТТРАРАР ЗЕОІЮО МО: 14);
РТРАРТІАБОРІ 5І АРЕАСАВРАДОСАМНТВИЇ ОБАСОІМІ Сова шарнір;
МАРІ АСТСОМИ І БІ МІТІ МСКВОВККІ І МІЕЄКОРЕМАРМО | СОва ТМ;
ТТОЕЕрОаС5СВЕРЕЕЕЕССОСЕЇ ВУМКЕЗАБАВАРАМООС сигнальний домен 4-
ОМОЇ УМЕЇ М ФАВЕЕМОМІ ОКАВОАОРЕМОСКРАВКМР | 188;
ОБОЇ УМЕ ОКОКМАЕАМЗЕМКОаЕНАНОаКа НОСІ МОСС | сигнальний домен
І 5ТАТКОТУВАІЇ НМОАГРРА СОЗ дзета
ЗЕОІО МО: 55
МАГ РМТАТІ І РІ АГ. НАААРОМТІ КЕБСОРМІ МКРТЕТІ Т | СОва сигнальний
ГТоТУБагБІ ММАВМаУЗУЛАОРРОКАЇ ЕМ ЕАНІЄЗТОЕ пептид;
КЗЕАТ5І В5ВІ ТІ ЗКОТ5КБОУМІ ТМІММОРМОТАТУМСА | 14С11 МН (Таблиця 1, во55ММЕаУЕрумава Утуззасавазассв,сазавас ЗЕОІЮО МО: 15); засас5ЕІММТО5РАТІ 5М5РОЕВАТІ БСВАБОБМУ5ММІ. с5-лінкер;
АМУООКРООАРВ ИСАВТВАТаМРАНЕБОа5ЗОБИТЕБ5 | 14С11 МІ (Таблиця 1, 14С11 І ТІЗ5І О5ЕОБАУММЕСОСУКОМ РЕТРО РОТКМУЕБІКТТТРА ЗЕОІЮО МО: 16);
РАРРТРАРТІАБОРІ 5І АРЕАСАРАДОаСАМНТАСІ ОБАСО | СОва шарнір;
ІМІМАРІ ДИТСОМІ І 5І МІТІ МСКВОаАККІ І МІЕКОРЕМАР | СОва ТМ;
МОТТОЕЕраС5САЕРЕЕЕЕССОСЕЇ ВУКЕЗАЗАБАРАМО сигнальний домен 4-
ОСОМОЇ УМЕЇ М ФАВЕЕМОМІ ОКАВОВОРЕМОСКРЕАНВК | 188;
МРОЕСІ ММЕГОКОКМАЕАМУЗЕІЄМКО ЕН! ВНОИКИанораї м сигнальний домен
ОСІ БТАТКОТМОАІЇ НМОАІ РРА СОЗ дзета
ЗЕО О МО: 56
МАГ РУТА ГІ РІ АС. НААВРЕММІ МЕЗОСОІ МКРОСБІ. Сова сигнальний
ВІ 5СЕАБОаЕТЕ5УАМУМОУМУУВОАРИОаКаІ ЕМУМОаВІКВІАО пептид; саАТОМААРУВМАЕТІЗАВОБАМТІ МІ ЕМНОІ КТЕОТАМУ | 20Е12 МН (Таблиця 1, уУсСтТРОМОАРГОМУСсОСТМУТУЗЗССОСаСЗБОСОССеССЯС І ЗЕО ІО МО: 39); свсасас5БрІМІ ТОРІ БІ 5МТРОЕРАБІЗБСНОЗОВІ І ММ с5-лінкер;
СКМ ОМ/ РІ НКРООБРОГ ІМ аЗМААБаМРОВЕЗОа5Оав | 20Е12 МІ (Таблиця 1, 20Е12 СІОРІ"'КІЗВУМЕАЕОМа У МСМОАОСОТРІТЕСОСТВІ БІК ЗЕО ІЮ МО: 40);
ТТТРАРАРРТРАРТІАБОРІ 5І АРЕАСАРАДОСАМУНТНОЇ | СОва шарнір;
РЕАСОІМІМАРІ АЯСТСОМИ І БІ МІТІ МСКАОВККІ І МІРЕКО | СОва ТМ;
РЕМАРМОТТОЕЕООСЗСАЕРЕЕЕЕСОСЕЇ ВУКЕЗАБАО сигнальний домен 4-
АРАМООСОМОЇ УМЕЇ М 3АВЕЕМОМІ ОКАВОВОРЕМОС | 188;
КРАВКМРОЕБЕСЇ УМЕГ ОКОКМАЕАУЗЕІСМКОаЕВН НИКИ сигнальний домен
НОСІ МОСІ 5ТАТКОТМОАІ НМОАГРРА СОЗ дзета
Таблиця 5А
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКМПІ-специфічних САК
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця) 1111101 (8ЕОІЮМОЇ57)7777711111111111111
МАГ РУТА І РІ АГ І НААВРЕУМІ МЕЗБССОІ МКРОСБІ Сова сигнальний
ВІ ЗСЕАБаЄТЕЗМАММЗУУАОАРОКИаИїЇ ЕМУМОИаВІКВІТОСІ | пептид;
СМІОМААРУВМАСТІЗАВОЗАМТІ МІ ЕМНОЇІ КТЕОТАУМУ 3208 МН (Таблиця 1,
СстІРСОМОСРОМУСОСВАМУТУЗЗСОСсСаИаЗаСсОСЯаБаССЯСІ 5ЕОО МО: 43); за,асааврІМІ ТО5РІ БІ ЗМТРОЕРАБІЗСНЗЗОБІ І ЗМО со-лінкер;
КММІ ОМ РІ НКРООБРОЇ ІМ СЗМААБаМРОВЕЗОаБОаБО | 3208 МІ (Таблиця 1, 3208 ІОР'КІЗАМЕАЕОМаУУУСМОАОСОТРІТРСОСТВІ БІК ЗЕО ІЮ МО: 40);
ТТТРАРАРРТРАРТІАБОРІ 5І ВРЕАСВАРАДИСАМНТНИЇ | СОва шарнір;
ОЕАСОІМІМАРІ АСТСОМИ І ЗІ МТ МСКВОаВвККІЇ МІРЕКО | СОва ТМ;
РЕМАРМОТТОЕЕраСЗСВАЕРЕЕЕЕСИСЕЇ ВУКЕЗАБЗАО сигнальний домен 4-
АРАУМООСОМОЇ УМЕЇ М ФАВВЕЕМОМІ ОКАВОаВОРЕМОСС | 188;
КРАВКМРОЕСІ УМЕ ОКОКМАЕАУЗЕСМКИаЕНАНОКаИ сигнальний домен нрагмоаві ЗТАТКОТУОСАІЇ НМОАГ РРА СОЗ дзета (ЗЕО І МО: 58)
МАГ РУТА І РІ АГ І НААВРЕМОЇ МЕБУУСМІ МКРОСОЇ | СОва сигнальний
ВІ ЗСААЗСОРІЕММАМ М5УУВОАРИаКаї ЕМЛавВІКОКООС | пептид;
СТТОМААРУКОВЕТІЗАРОЗКОТІ М ОММСІ КТЕОТАМУЕ | 2689 МН (Таблиця 1,
СсТтТАРСОСРЕОМУСОСТІ СУТУИБЗ,ОСсСОСООоСЗасасвасосе | 5ЕОЇЮО МО: 41); сссавзрім ТОРІ БІ РУИТРЕЕРАБІЗСНЗВОБІІ НАрОЕ | Ссо5-лінкер;
ММ ОМ РГОКРООБРОЇ МІ А55ВАЗОаУРєРОВЕЗОЗОЗИТ 2689 МІ. (Таблиця 1, 26во РРЕТКІЗАМЕАЕОМамММУСМОА ОТРІТРСОСТВІ ЕК ЗЕО ІЮ МО: 42);
ТТТРАРАРРТРАРТІАБОРІ 5І ВРЕАСВАРАДИСАМНТНИЇ | СОва шарнір;
ОЕАСОІМІМАРІ АИСТСОМИ І ЗІ МТ МСКВОаВвККІЇ МІРЕКО | СОва ТМ;
РЕМАРМОТТОЕЕраСЗСВАЕРЕЕЕЕСИСЕЇ ВУКЕЗАБЗАО сигнальний домен 4-
АРАУМООСОМОЇ УМЕЇ М ФАВВЕЕМОМІ ОКАВОаВОРЕМОСС | 188;
КРАВКМРОЕСІ УМЕ ОКОКМАЕАУЗЕСМКИаЕНАНОКаИ сигнальний домен нрагмоаві ЗТАТКОТУОСАІЇ НМОАГ РРА СОЗ дзета
ЗЕО ІЮ МО: 59
МАГ РУТА І РІ АГ І НААВРЕМОЇ МЕЗСОССІ МКРОСОЇ | СОва сигнальний
ВІ ЗСЕАБаЕЄТЕЗВАМУМ5УМУУВОАРОаКаї ЕМУМаВІКОКТО | пептид; ваттОоМУМРІ МавРИІЗАБОБАМТІ МІ ОЇ ММІ КТЕОТАМУМ | 3008 УН (Таблиця 1,
СстТтуРаБУСУМСОСТІ МГТУЗОСсСасВасасвасосеИ | 5ЕОО МО: 37); саазріММтТоО5РІ 5І РУТРОЕРАБІЗСНЗБВОБІІЇ НМКАММ | Сс15-лінкер;
М ОМ ОКРООБРОГ ІМ АВМААЗаУРОВЕЗОаСсОЯБОИТО | 3008 МІ (Таблиця 1, зЗ008 ЕКІЗАУМЕАЕОМаУМУСМОАОСОТРІТРСОСТВІ ЕІКТТТР | ЗЕО І МО: 38);
АРАРРТРАРТІАБОРІ БІ АРЕАСАРААДССАМУНТАИГ ОБАС | СОва шарнір;
РІМІМАРІ АЯСТСОИМПІ БІ МІТІ МСКА!САККИЇ МІЕКОРЕМА | СОва ТМ;
РМХОТТОЕЕраСЗСВЕРЕЕЕЕСИаСЕЇ ВУКЕЗАЗАВАРАХУ сигнальний домен 4-
ОСООСОМОЇ УМЕЇ МЕАВЕЕМОМ ОКАНЯАВОРЕМИСКРА 188;
АКМРОЕСІЇ УМЕ ОКОКМАЕАУЗЕІМКИаЕНА!НОКОНОС | сигнальний домен
ГМО ЗТАТКОТУрАЇІ НМОАЇ РРА (5ЕО ІЮ МО: 60 СОЗ дзета
МАГ РУТА І РІ АГ І НААВРОМОЇ МО5БСАЕУМККРОаБЗОМ | СОва сигнальний
КУЗСКАБИаОТЕЗЗМАІЗУУУВОАРИОСІ ЕМУМОМИПРІРСТА | пептид; рУАОКРОС,АМТІТАРЕЗТЗТАУМЕЇ 55І А5ЕОТАМУУСАВ | Сб МН (Таблиця 1, нтУНЕМАССУУСаСсАМОРМУССОСТІ МУТУЗЗСОСОСО БОС | ЗЕО ІЮ МО: 48);
Сб зассазасасевБ О5МІ ТОРРЗАЗОаТРООВМТІЗОЗИа5 со-лінкер;
ЗЗМаЗМУУМММООЇ РаТтТАРКШУАММОВРБЗИаМУРОВЕБИ | Сб МІ (Таблиця 1,
ЗКБИатТ5АБІ АІЗаЇ ВЗЕОЕАВУМСААМУрОМІ 5СУУМРатТОа | 5ЕО ІО МО: 49);
ТКСТМІ ТТТРАРАРРТРАРТІАБОРІ 5І АВРЕАСАРАДОСАМ | СОва шарнір;
НтТвагоОгАСОІМІМАРІ АИТСОМИ І 5І МТ УСКвавккКіІ. СОва ТМ;
ГМЕКОРЕМАРМОТТОЕЕраСЗСВЕРЕЕЕЕСОИСЕЇ ВУКЕ сигнальний домен 4-
Таблиця 5А
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКМПІ-специфічних САК
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця)
ЗВАБАВАРАМООСОМОЇ УМЕІЇ М ЯА!АВЕЕУОоМІ ОКАВИаВо 1в8В;
РЕМаСКРАВКМРОЕІ УМЕЇ ОКОКМАЕАМУЗЕІМКОЕВ сигнальний домен вНа7аканраї моді 5ТАТКОТУрАІ НМОАГРРА СОЗ дзета
ЗЕО ІЮ МО: 61
У таблиці 5В наведені послідовності нуклеїнових кислот прикладів 5сЕбм ЕСЕКМІ- специфічних САК за даним винаходом. У таблиці 5В послідовність, що кодує СОва сигнальний/лідерний пептид, підкреслена.
Таблиця 5В
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКміПІ-специфічних зсЕм
АТОССТСОТОаССсСООТсАсСсастотастастасссстаассттастастасаса7астастоса соЄСтТаАтТатааТСАТтТОаАСсТСоАатТотоссостаТатттасосатсАсоСстаайаАСАаСССОа
ССАВСАТСТОСтТасСААдсАХаСсТоССАаАаСсСсТа|астТатАСТОСААСИаСААСАССТАТСТОа
ААТТаСОТТССАааСАсСАаАдосСаасСА,вАа,асоСстапАаАСсСТаАТСТАССАасстатстТАА аставбАдсАд,асса7асатасстаадтастсттавАддаСавпАТоСапААССОаАСТТТАСАС нвос7 тТаААСАтТоАааСсСсасаИтавА,ааАсАассАсатавасаТатТАСТАТтаСсаасССАСаАТАС 16/гО ССАСТТСССАСТаАСсСАТТТаВССОООССОСаСАССАдСатТапАспАТСАдАа,асадасАаадацА
СЕУ дасапвдасАасадасхдаСса,асавасааосзсасттасасссасааСсаабАаССАсватасСА астаатаСсАдаАХд,аСааАасСАсАсаатАдсаАласстаасасстоСсатаддсвататсттат
АдчвдассАаСаасСстТАСАСАТТСАССОАТТАТАСАСТОаСАСТОСТОаСсОСсаСА,аассссСстаС
СсСАСОасАстТасаатааАтТасадасвААтТотТаасстТАТСАССасАааААССАСАТАСААС
СсАаААдагттТАдасасАаАатаАСААТОАССАаасАСАСАТСТАССАССАСАСТаИтАТАТ сеалдеастатстла,асстасастСаАаСсАТАСАаССатТатАСТАТТаСОаССАсАсСасиаАа аСАСсАасСапАТоттасавАСАасааСАСССтТасатаАСАаТаТатсстствЕО І МО:228
АТОССТоОТОаССсСОтТоАссаестотастастасСсАастасооста,|астасСстаСАСасСАасСАА сеасстсАасатаАсоСстТаАд,асАасАа,ассасостатастТастаААдасСсСААСАСАСаАССсСтТ вАСАСТОАССтТаСАСАсаСтТатстаастСА,аСсСсТатсСААссСсСсСсаавАтасвсИ7асатаА,астТ вОАТСсАпАдСсАаа,асоосСстааСсАл,аасостааАаатТаа ТТ СасСССАСАТСТТ ТТ СТАССОАТ аАаАддадасстддастатссСТаАаАТсТАЧастаАСССсТаАаСАДасАСАСАТСТАА 4269 сласслд,аататастаАССАТОАСАААСАТааСсСССстТаТатасАСТССасССАСАТАСТАТТ
СЕУ ассасСсАпАдаАСАаСТоСААТТАСОСХсСИаасСстТАТттосАСТІ ТТ ТОасасСсСАас,саасСАСоста атТаАСсАататстл,аСсасассСсасАасасА,ааАтоС,асАа,асХасАа,асАаттассвасааСосо тоссассассассастоса,ад,аататастаАСсССАаАаСССТасСсСАСАСТатоСсОатат
СстТоСАСЯСаАдсАадасССАссстТаТттатассасСАаасСАатсатасаСАасСААТСТ сасстааТАСсСАааСАадАХдатоСбааоСАЧвасССсСААаАСстастаАТСТАТааСТоСАСС
АТсАЧсааССАСАасСаАХатассаасСсАасастотставААлаСавАтТоСааСАСАСАСТТТАС
ССстТОАСААТСТОСТОТоТаСсАСаСТтоСОсАасааАдттс,аоСаТтатАСТАТТаССАасСАССТАСТО таАстТавсссСт САС ТаассстаайСАСАААдасаТасАТАТСААДИ (5ЕО ІЮ МО: 229
АТОССТоОТОаССсСОтТоАссаестотастастасСсАастасооста,|астасСстаСАСасСАасСАА ваССАСАсСатТаАссСстТадАд,асАаа,атосассоосатастааТААасССТАСАСАСАСССТ вАСАСТОАССтТаСАсСАастТатосаастстоттаАааСААаСсассСсасСсатавасататстт вОаАТСАСОИСсАааСсоооСстааСААд,асооСставАаатаасТаСсССАСАТСТТТТОСАССОА зЗ2гА10 | ССАСААаТсСТАТОСОЯСАспСААл,асСстТаТасастосАвастаАСССтТаАаСААДасСАТАСАТОСА 5сЕм І ДХаТСТсАаатТасТастаАССАТОАСАААСАтТааАСоСсС,атасАТАССасССАСАТАСТТСО тасасСсАпАдаАСАасСстТоСААТТАСОСА,аСааТсСтТАТТТТаАттАсТасСаасСАс,аасСАСССтТ сатАсАдататстТАда,аСс,ааАдасАсалапАдаСсассАа,апсАссАавАттааосвасаасСоас сттасссассаСбсааАаа,аСаАдватТааТСсАТаАСССАаАаСССАаССАСАСТаДаСаИтТ стоосстасСбаАдадссатАасоста7атостатАавасСАТСТоАаАдаСаТтатосСтТСтТААСТ тсасстаайТАТсАаСАСАпАССАаасСсАаасСАССААдсастаТастастаТАСаспАссСААс
Таблиця 5В
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКміПІ-специфічних зсЕм
СсСАСААСАДасССАСАССЯАСТаСССсСЯвОаСАаса7ТттттоСасАттааАддасвасАССадаААТ
АТССТОАСААТСАСаСсТОоССТасАаатотадавАСсТСассСАТСТАТТТТТаИССАИаСАаИТтАс
АдасАатасасСсСАТТСАССТІТАасССсСсСсСбсасСАаСААдсатаспАСАТСАДО (5БО ІО МО: 230
АтеастотасссатоассастотастастассАстаассстастастаСсАСасАасАА вАССТСАСсИатТаАСсСсСстТадаасьатсасасостатастастААасССААСАаАалссстТ вАСАСТОАССТаСАСАССТОТСоТОИСТтоА,сСсТатоСААСасСсАлааатасасатадаст саАтТсАааасАаасоосставСААласосстасада тасстааасССАСАТСТТТАаСАССИА баАпАдатсТТАСАаСАСАТСССТОаАСАсСаСАсаАТСАССАТСТСОТААИСАТАСАдасСА сласстаатаатастаАССсСтТаАСАААСАтТасАасосСсатапАТАССассСАСАТАСТАТ 2гов9 | тТасасСсАасаспАСАастоСААТТАССЯАХСааастАТТоаАттт,еасааооствасттост 5сЕм їаатадссататстасСсассассассвсасттавАааадлаасАасаддаСсаавАд,аАасАсОИ дтосассассассавеасттаАааАтсатаАтАССсСА,атоосСстассСАСАСТатостатиа дассСсАавасадсАааАассАассстатстатТАсастатосСАатстТАтТвасСсасСсСААТСТ сасстастТАСсСАаасСсАаАдАааттовассАааСССсСААсастастадатстТАтааАасАТОС
АссАдаАаСсСАСАсаААтТосСсСсаталастстоСавАасаАд,аАтотасААдсСаАатттАс
СсСстТаАСААТСОТОСТОТоТаСАСАаСО,аАасвАСтттассСАТСТАСТОСТаССАасСАаИТтАСАТ
СстТАТТааСССсСТТСсАСАТТТОССССтТОааСАССАСАСТаслАтТАТСАДа (ЗЕО ІЮ МО: 231
АтеастотасссатоассастотастастассАстаассстастастасАсасАасАА вАССАСАСОатТадссСстадааалсАаасСацсАсосатастастаААассСстТАСАСАЧАСССТ вАСАСТОаАСсСТаСАСАССТОДОаСсвастстоССтТаААСААТасаалааатасасататост саАтТсАасаасАаасоосставСААлаасосостасалатасттсассСАСАТСТТТАасСсАССаА
СбаАадАдатосттСасСАСАТСТОТаАдаААлаСсАасСа7астадссСстаАдаСАдасАТАСААасА датосСсАасатаатастаАССАТаАСАААСАТасАасссСсатааАТАССассСАСАТАСТАТ 14311 | тТасасССАСАЧАСАаСтТоСААТТАСОСАХасастТАТТ ТСОАТТАСТОаСсОЯаСсСАасасСАТОСТ 5сЕм їаатадссататстасСсассассассвсасттавАааадлаасАасаддаСсаавАд,аАасАсОИ дтосассассасосаваеасттаАдаАтсатадтадлссСсАаатстСсСасСсСАСАСТОТОСТИата дасосстааСададсдасСсСсАСАСТОАИСТатАаасвсасстоСсСАатстатаАаСААСААТСТ сасстаптТАТСАсСАаААла,аСсСсАааасСсАааСАССААсастастадтстАСасАасАтос
АссАдадаССАСАсСадатТасСсАаСААааатстоСасАтотадсааСаваСАССадаТтттТА ,соСстТаАСААТСТОСТОТОТОСАатоСосАаасАСТТССССсатТатАТТТассСАССАаИТтАСА давАтТТасСсСАТТСАССТТ ТасСсСсСсСааСАСАдДАдастасАаАТСАДа (ЗЕО І МО: 232
АтеастотасссатоассастотастастассАстаассстастастасАсасАасАА саСсСсАсСАдастаААсСстаатасаатоссасСссасаСссасасстастаддасстаасааАТтоСо талсасстатт,аСсаАдааСАдасаасСсТСАССТТсАастАСсасстасататоставата сассАасассосСсавСсАдасаАдстаслатасиа тапсАСапАТСААатоСАТСИасСАСАС савдасдасСААССаАттАсасаасооСстТаТатаАаАААСАаИТ ТСАСААТСТССАаАСАСад
ТТСстТАвОаААТАСССТатАТСТаСсАСаАТасАСТоТСтТалАааАСАаАлапАСАсСсассСситТатА 2012 СТАТТаСАССАСААТСССТЯаСйСААСсОвАСсассттОаАТтТАТаТтОСсаваССАсСаасСАСААТИас
СЕУ талдсс,атааХастосасассассаСсосастотасаасАааадлсаАддаСсаавалацвсАааАааАА ссасасвасСсааСсаастоТаАСАТСОЯТасСстТаАСАСсА,атоосСсАСсТатосстатотатаАдс ссссассадасСстасСААаСАТСОТОоСТатАаАТСТАаСсССсСАаАааСсСсТаТастатАСТОСААСа
ССААСААТТАТСТИаСАТТаСТТОоСТасСсАСААлассАаасассАаатстосссАаастасталдлтст
АостасаАТСсТААТАасасАааасСацсиатассСсАааАассааТтсттасададасСааАТтоСИас
СсАТСаАСТТСАТССТадАаАТСАсаССАссатавасассаАасаАататавасСататАСТАТТ вСсАТОСАДСааССсСАаСАпАСАСССАТСАССТТССОЯССА,асааСАСААвАСТасАаатсСАА
С. (ЗЕО І МО: 233
АтеастотасссатоассастотастастассАстаассстастастасАсасАасАА сасСсАсСАдастаААсстаатаваатосасссассаасстастадаасстааСацчАТосс талсасстатт,аСсаАдааСАдасаасСТСАССТтсАастТАсасстасАататстаависата згав ісассдааоссссвасАлаасАаАстасчАаастасатавиасСацвАТСААатоСАТСАССОАС всем їапсдасоатаАТСОаАТтТАСсасАасАССТаИтаАпаАААСАспаТтасСАСААТСТОСАаАаАСаИахХ
ТТСстТАаОААТАСССТатАТСТаСАСАТасАСТОТСТаААаАСАаАдсаАСАсСассататА
СТАТТаТтТАССАСААТОССТааСААСИАСОАТТТоОАТАТатТОСОаССАаааСАаААТИас тадссстадастоссасса,асса,асоса7астотасадасАаааАдсаддаса,асАааада,ааАааАА
Таблиця 5В
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКміПІ-специфічних зсЕм авсасавсассасвасТСсТаАСАТтоатТастТаАСАСАаТоСсСсСсАСстТатососта|атстатТаАс ссос,ааСвАд,аССстТасСсАдасСАТСОТОСТатАаатТстТАа,ССАа,аАасстТастатАСТОСААСа
ССААСААТТАТСТОСАТТОасСТТтотТасСАСААДаСсСАЧчассАатстССсСАа,аСсТастаАТСТ
АСсССсСТапсаАТСТААТАаОсСаСАдаСа,асьиатасСсааасссатсоттасАдлдасСсапвАТтоСаС
САТСОАСТТСАТССТаААпАтТсА,СссасСсатаавсАасасаСАасАсаАсатасасСатТатАСТАТТ всСАТаСсАЧасСССАасСАаАСАСССАТСАССТТоСаССАааапСАСААСаАСТаспсАаАТСАА с (5ЕО ІО МО: 234
АТОССТоОТОаССсСОтТоАссаестотастастасСсАстасосста,|астасСстаСАСасСАасСАА свасСсАсАасатасаластасастасалатсттасаасстастаатададасстааСаспАТСТОСТ авдаастад,астаСсасАасСсАтТСаасСТТСсАТСТТТААСААТОССТОасСАТаИтостТаавИатТас ассдсассссСбвасСАд,асааАСстааАдатааАата,аасСааАТСсААпАдаСААаТоСадсСа вАаспААССАСАСАТТАСаСАасСАССТатаААаСпАССаТстТтсАСААТСТоТСаасаАСОсАТ
АССААССАТАСССТатАТОТасСАаАтТаААСаасстаААдаАСАаАасАСАССассиатТатА 2689 СсТстТаСАССАСАОСССССТОССЯаСсСссСтТттаАтАТТ,асааССАсСаасСАСАСТаатТад
СЕУ ссатадастоСапвАд,асАааадасАд,ассаС,ааАаасАхсасАа,аСсаваСбааоааовастст вассассоабвасСАаСаАСАтТатасСстАСАСсАаАа,асосттаИатооСстасСАатаАСосс ссавоеассХасстасстТстТАТСАЛОаСТатоасСсттТАа,асСАасАаасста|астасСсАсСса,аасАСас
СТТСААТТАСсСТОСаАТТаСТТТотТасСАСАдАда,аСсСАаа,васСАа то астТастаАТСТА тстаассТосСтстТАасАХа,асстта,аоатаССАвАСсАсатстосаасСсТсТаАСАаСаасСА
САаАСТТСАСССТаААвАТСАаСсАс,сАдатаслсвасссАасаалтатааааТатАСТАТТаС
АТаСсАдсчСаССсСтТасСАСАСАСССАТСАССТТСЯИаССАапаСАСААСАСТааАсСАТСАДО
ЗЕО ІО МО: 235
АТОССТоОТОаССсСОтТоАссаестотастастасСсАастасооста,|астасСстаСАСасСАасСАА сеасстадсеатасдастастасасаасСссвасасассасстатаАдласстаасадвАТосс таадсастатстасСсадааСАдаСаасТСАССтТтАаСспАСасСАатТасалтатставиата сасСсАавасосоСстааСААда,асаАстасвсАаатасватаааАСацпАТСААаАдаСААСАСАСАС саспапСАССАСАСАТТАСОЯТаатТассСсАСТалАссасСасСТ ТсАТСАТСТОССасСсаАСад тестова ААТАСССТатТАТСТаСАаТстадлдАСААТСТОААОаАСАсдапАтТАССассотТаТатА 3008 СстТАТТСАССАСАСТОаССАсСаТастоСстТАСсааСстТАТТаОСОСОаСоСбА,аааСАСАСсТОаатаАсс
СЕУ сталдастоссас,аассвсассасттасАаааАасАсаАдАдаСапсАассАавА,аадАдасась васавасовастоТаАСАТтоатаАТаАСАСАаТСсТоСАСТаАдаСсСстТасСссСАатТаАССсстТ са7абадасСсАаСссСсТоСАТтСоТТОИТтСсасттАаСсСА,адасста|астТасСАСААСАДаСасцАА
СААТТАССТОСАТТасатТтсотТасСсАааАдАдасстаасСАаатоссСстсАастастаАТСТАТСТ чваСсСАаСААтТАаадасстоСасАаатТасСсСАсаАСАааст став, сАсадАдасСасААСА вАСТТСАСССТОААаАТсАааСасАаатааАаа,аасосаАасассАсатаавасСаТатАСТАТТасСАТ абадчвассСАаСАСАСАССТАТСАССТТОСаССАа,СааСАСААаАСТацпсАспаАТСАДа (5ЕО
ІО МО: 236
АТОССТСОТОаСССООТсАсСсастотастастаєстотаасосСстастастаСАСасСАасСАДа аССАСсАдсатасластатасаатссадаСАсАааТаААдаАдАдасстаасАасСТСатТа
АдаатадастасСсАдсасстСсааСаАСАСАТТСТСоТАаСААСасСААТоАХаСсТасватасс
СсСсАсассостаасСАасасвсАстасаатавАтТавасатаАТСАТСОСССТАТСТТСОССАСС аССОаАСТАТаСССАпААХдатттсАасаассаааТаАСААТСАССассСапАТадаТатСсТтАСААа
САССаССсСтТАСАТОСАССТаТтоОСтТоТСтТОАвАТоСОаАаСАСАСАаССОаТатАСТАТТИаТа св ССАСИаСАСАССТАТСАССЯАДОатТАСсасСАа,саАасАТАСТАТОСАапАсаСААТавАТОСТТОаС
СЕУ впАСАааааСАСсАСстТастаасСсатадастсвасвассасаова7асттавА;а,апавАасАааА дассавдасАд,ааАда,асАХдаСсасвссавасаассасттаАа,аСстасСсАасАа,аата|астаАСсСсСАс
СсСАССТІОСаСсСтТотТапААСАССАСИасССАаАаа,асаТаАССАТтсА,аСсТа|астоСасАТСТАС
СТоСААСАТССЯЯаСТОСААТТАСсСОЯаТатАттОеатАССАаа,аСАастаССАааСАСАаСССССА
АСАТССТОаАТСТАССаСААСААТСАЛСССЯЯСАСССТТСТООСсОатТасССАаАТАСаАТТСТСТасаС
АасААлатоСсаасАссттассАасстаСААТотСсавассталва ттадапАСадОася
ССОаАТТАСТАТТОСЯССОЯССТОСОСАСОАТтТААСоСТОДаСсаастасатат тапСАСАСас
АССАДИаСТадсСАаТтаста (5ЕО ІЮ МО: 237
У таблиці 5С наведені приклади послідовностей нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕЕМІІ- специфічних САК за даним винаходом.
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК
АтаастотассСсатоАасосастотастастасссставастотастас | СОва тасдсастастсассостадтатасТСАТаАСТоАаИТтстоСсстТатст | сигнальний стассСсатсАссСстаасАСсАа,оосСсассАасСАТСТОСТасААСАаСТт |пептид; п6207-
СосСАсСАаСсСсТастатАСТССААСпасСААаАССТАТСТОААТТИаСТТО | 6/ЕО Му
САаСАвАсАассСссвсасСАаавдассствалдаАСТадгаТСстТАССАСИТат | (Таблиця 1 5ЕО
СстТАДаСстТааАСАссасосатасстаатсастстстасАдасСааАТО ПО МО: 6);
СсааААССаАСТТТАСАСТаААсСАтсАасСсСоссатасАасасСсАаАааіАсС | со-лінкер стасасататАСТАТТиаИСаИаССАааАтТАСССАСТТСССАСТИадсАТТ | (спаси) (ЗЕО таассеаСсааСАССАдаставпАвАТСААсаслаадасаслааАдассса о Мо: 202)|; дасдасадасАдлаСсассасссасасаасстаассасвасцвиасАасо | пб2а7-І 6/ЕО дастасластоаатасСса,аАдасСасасАаСАааАдсатаААаААасСстТассСо |МН (Таблиця 1 сстосатаддсататттатАдсассСАаСаайстТАСАСАТТСАСССИАТІ ЗЕО ІО МО: 5); тТАТАСАСТОаСАСТОаСЯ ТаСОССсСАСа,асооСстассесСАааис!саАСстТаасАст | СОва шарнір; саадтассАа,ааААтТотТааССтТАТСАССааАасААССАСАТАСААССА | СОва ТМ; вААДСТТТААСсСОаСАсСАсТаАСААТаАССАпацсАСАСАТСТАССА,СА) сигнальний нвос7- сАдатТатАТАТаОСАССТатТоТАаССТаСОаСтоСа,аАасАТАСАССССИТ | домен 4-188;
Ів/єО стТАСТАТТаСОССАСАСаСасАавасАсАаасаАтоттасааАсСАцИссІ сигнальний
АссСстТОатаАСАаТатостТСстТАССАСААССССАаСАССААСАССАССІ домен соЗ3
ТАССССтТасСсАССААСААТСОСЯССТоССАСССТОТатотТоТаТасСасСсСсСАсІ дзета дасСсАТатАааассаасАааСАаасАасАасСАаТаСАСАССАаасвиасСо тааАдстттасстасСаАТАТСТАСАТСТаСИаСАССАСТОааСАааААСА татассстастастастадасстТастСАТСАСССТатТАСТаСАДаС ссаассСсапАддадАда,аСстастТатАТАТСТТСААаасАассстТСсСАТаАаА ссс,атТасСАпАСААСССАсадлссАаасАсасстастостатаастос
СсАПАДАаАдАСАСИаАласисвастатаАаасталадатаддаттссСАа стотасСбадтТаСАССАасСАТАССАаСАаасаАСАСААТСАаСтТаИатАТА
АссАХасСстТадАаттаавеСАасасасСсвсАасасАатАатадсатастааАТАА сдасаадасАдааапАсСсСстадаАатаавсАаааСААдасстТАаасасСАА вААСССАСАасадлаавассТаТАСААТтадласСтасСАвААааАтТААаАТта ссссАдасСсСстТАТТОоСаАаАтоасасСАТОААаСсСаваСсадлаСа,ацАаААсас сасСсАдсаасСАСадлсааастатАСсСАааааАСТатСААССастАССА даспАТАСТТАССОСАСсасоСстТасАТАТаСсАаасСАСТаССТоСАдаатаАд
ЗЕО І МО:238
АтаастотассСсатТосАассастотастастассАастасосстастас | Сова тасАдСасдасСсАда,аостСАЧатадссСстаддасАаала,Саассстат | сигнальний сстТастаддаССААСАаАаАСССтТаАСАСТаАССТасСАСАСТИТСТ | пептид; састтодасстатоСААссссСсавАТОаСсСаСсатадаСсТацачАТСАаАсС | 4209 УН дасссостааСАлдсассстасаатаа т сассСАСАТСТТТТСТАСС) (Таблиця 1 5ЕО вАТаАДаАдАсСАааСсСстТадластатоссєтадаАтСстТАаасСстаАСсСсСтТОаА ПО МО: 9); вСАДаСАСАСАТСТААдСАа,аСсСсАсатаатастаАССАТОаАСАдАСАТИІ с5-лінкер; ссссстатааАСсТоСасССАСАТАСТАТТИаСасССАСаАаАСАасСтТосСАА 4209 Му тТАСЯДОаСОЯасСтТАТТТОССЯАСТІ ТТОАСсавасСсСсАа,асасСАСССсТаатТадсА | (Таблиця 1 ЗЕО 42а9 |(ататотдасвсасвалаасАасадтоС,асАа,асАаа,асАааалтстаасиаио | МО: 10); саесастоссассассасвастосвсАааатаатасСТаАСССАсАасі Сова шарнір; сСстассАсАСТатТоСОТатотоСсАааа,аСаАдпАаАдасССАСССТаТтстт |СОва ТМ; стасс,ессАаассАаатосатаСбасСсАасСААТтТааСсСсТаатАССАССА | сигнальний вААХСТОСОСаССАаСасссСААаАдСстТастаАТСТАТИаСТОССАССАТС | домен 4-188; дасасСсАсАдасАаатасСсАасСАсастсттасАдаСааАТоСаасА)| сигнальний
СсАВАСТТТАСССТаАСААТСТОСТОТСТОаСАСТоСаАасАТТТСИСС | домен соЗ3 стТатТАСТАТТаССАаСАатАСТОТадставсСсСссСстТСсАССТТТОИаССс | дзета таасСАСАДдастапайАТАТСААаАССАСААССССТасАССААдаасССА
ССААССССАаСАССТАСААТСсасСсААаСсСАассСАаАстатосСстададс ссадаасстатлаасстасаласдасАаасАаасСАааТаСсАСАссСасио
Зо
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК ссстаслсттасстасСа4тТАТСТАТАТСТаОСССАССАСТОССАСИад дсстатаасатастастасталасстасТтСАТСАСССТатАСТасСАА ссассасСбасААдадАаастастаТАТАТСТТСАдаСсАассстТТсАТаС сасссатасСсАСАСААССсСАа,асасАаасАасАатааста|астостатТАСАТТ состадасдасааадлсаавасаадтаталастадлацвсаталАаттст сасалдасасспАСаСАССАаСАТАССАаСАасааСАспААсСА,стат
АТААСОЯДаСтТаААТСТОаСсЯСС,асасАаАасАа,асасА,тАсаАс,тастааА тТААДСАЛСОСІДССаСасААдаАаАСССАпАаАтТасадаасСАдасССАСааялс
АААдаАдАССсСсСсСАааасАасвчасстатАСААтТадастаСАаААацАТАДСИ
АтаавсСсаАдсасстТАТСтТаАдаАтоааСАТадАласадаАдадааСасо саасСсАдаааАСАСсаАдСасАСтТаТатАССАсааАсТатСсСАССаТасААС
ААддасСАСАССТАТОАаТОаСССтТасАТАТИаСАСасАСТаСсСтТоСАдСаИТт
СА (ЗЕО І МО: 239
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСасдасСсАдааССАСАааИаталссстаддасвсьатСавассоссат) сигнальний сстаатаАдАдассСстТАСАаАаАСССтТаАСАСТаАССтТасСАСАИТИтТос | пептид; састотсототТаАаасСсААсассСсаСАтТавсоесататсттасАТСАСас |З2АТ10 УН дасссостааСАлдса7ассстасаатаастаасСсССАСАТСТТТТСОССАС |) (Таблиця 1 5ЕО баАСсаАпАдАатстТАТоСасАаААласстасастоСАсастаАСсста ПО Мо: 11);
АаСААааАТАСАТССААСТоТсАсатаатастаАССАТОаАСАААСАТ | с5-лінкер; садсссСсатасАтТАССасСссСАСАТАСТТСТОаСОЯССАаАсАСАаТстос |З2А10 Му
ААТТАСОСАасаасстТАТТТТадтТтТАСТасаваССА,ацасАсссСтастадсі (Таблиця 1 ЗЕО дататотдаСсаадавсАдс,ссАа,сАласСсааАа,аасАХасвсАаавАтставссо | МО: 12); ссассаеастотасссаасссаСссаСбМаСсаАасатааТСАТаАСССАада | Сова шарнір;
СсоСсАасСсСсАСАСТвАа,аСсататсостаавСсаАсАаасатаАсСстатосіІ СОва ТМ; татаасасСАТСотТоАсСАа,ССататосСТСстТААСТТсассСстТастАТСАССА | сигнальний вАаАССсАвассАааСАССААласстастастатАСацАасСААССАСА | домен 4-188;
АдадаСсСАСсАаасаАастасссаасСАаастттоСасАТСотТасдлдассаасА | сигнальний
ССаАСААТАТОСТаАСААТСАСаСТОоССТаСАатсТаАапачАСТТСИСОС | домен соЗ3
З2А10 | АТСТАТІТ "ТТТаССсАаСАатТАСАДСаСаАТтТааССАТТСАССТТ ТаСОСССІ дзета саСсАдаСАдастТацпАСАТСААВАССАСААССССтТасАССААДалссСАС
СААССССАаСАССТАСААТСЯССТОТСАСаСсСТоТОАаа,асСстТасСасссА сАдасСАтТатааасСАаасАдаСАаааАдсаАдаСАатасСАСАСААаасас стасдсттсасстасаАТАТСТАТАТСТОСОССАССТотТасСАаадАС статвасстастастастадасстааТСАТСАСССТатАТТаСАдДад сАдасСАдапсААдаАдАаастастатАСАТСТТСАдасСсАассСстТТтТАТИаСас
СсСАатасСАСАСААСССАсСадасвсаааАасвастаСсАаастатаиИтос
СстадАдадасаасасАаасасСсаасостатадастАаАаТаААатТттосСАа стотасСбадтаССССАасСсСтТАТСАаСАааасССАаААтоАаастатАс
ААссАхастадатотасасАаасаСсасцвАассАатаСсалсатастааАтА дадапсАдадапАдАдаапАТоСАЧаАаАдтТасад,сасСсАдасстАвасСиасСА
АВААСССАСАасааАаааасстатАТААтТадастасСАаАдасАСААаТАТ сассадаасСстТАСТоСадвАтоаасСсАтТадаааасАадаСааАаААа сааСсАдапсаАСАСссАтТеаасстатАатсАаасасстаТСстТАССассСАСА
АдапАСсАССтТАСсадтассстасСАТАТОаОСАСОСАСТаССТоСААИаИТт
ПА
ЗЕО І МО: 240
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСбасАдасСсААдаАСсстАаатаАСосСстадада,ацсАатоСаассстатТ | сигнальний 2089 сстаатТаААдасССААСАаАаАСССстТаАСАСТаАССтТасСАСАСТИТСТ | пептид; састтодасстатоСААСсасСАлаасАатасисСсатсаАаастасАатАаас | 2089 УН дасссостааСАдса7ассстасаатааставасССАСАТСТТТАаСсАС | (Таблиця 1,
СсАСсаАпААатсТТАСАаСАСАТОССТалаАааСАааАТСАССАТСТІ ЗЕО І МО: 13);
СТААССАТАСААССАСАССЯСССТОИатасастастаАСсСсСтТаАСАААСАТ |С5-лінкер;
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК савдсссСсатасАТтТАССасСссСАСАТАСТАТТИиСОЯССАСсОасАСАастос |2089 Му
ААТТАССЯАДСОСОаСтТАТТОСАТТ ТТ ТаВССОВТСОСТООаСТТоСТастаАс | (Таблиця 1, сататотлассассассассасттасадасАаааАдсаАдасСаадиаиі ЗЕО ІО МО: 14); дасдасАатосасоссассассвсастстаАааАтсатаАТадсссСАатссі СОва шарнір; сСстассАСсАСТатсТатОадассСсАааа,СадаАдаАасССАСССТатстт | Сова ТМ; стассататосСАатстТАтсаасасССААТСТЯДИССтТОаатТАССАССА | сигнальний вААСТТОСаВССАааСССсСААсСастастаАТСТАТаСАаСсСАТССАСС | домен 4-188; дадаССАСАасААтТоссСсатаадсаотСба,асвАа,сАсаАТСТацАА | сигнальний ссаАСТТТАСССТаАСААТСТОоСТОТоТаСАпвАаа,аСа,аАааАСТТТасо | домен соЗ3
АТСТАСТОСТаССАС,САСТАСАТСТАТТИИСССТТСАСАТТТОаССССТІ дзета васСсАССАСАатасАтТАТСААВАССАСААССССтТасСсАССААаасССАСс
СААССССАаСАССТАСААТСОИаСАдДассАаассСАстаТатосстадаАСсСА сАдасСАтТатлаасстасдасааадлацсАаа,аССсатасСАСАССАаАаао стасдсттта,асстТасСссАТАТСТАТАТСТаИСИаИСАССАСТЯИаСАсСадАС статаасатастастастодасстаайТСАТСАСССтТатАСТасААа сассасСааААсСААдасСТастатАТАТСТТСААласСсАаассстТТсАтаса ссссатасСАайАСААСССАасадасялацсчАссастасаастатсастто
СсСстТаААдада,асАасАассаАХассАатТаталасСсталаситадалатттдасс сатоСб,аСббадтасСАССАасСАТАССАИСАааасССАпААССАаТстатА тТААСССАДСаСТаААТСТОСЯССОацпсАаАсАсаластАссАсатастааАт
АдадасАаасасААдадаАдСССАаАаАтасиАааСАдаСсСАСацАаА
ААдаАдАССсСсСсСсАа,ацасАасасстатАСААТтТаластасСАпААааАСААаА таасСсада,аассСстТАтТАааСаАааАдтсассСАтаддаассялададаасСасс саасСсАдаасАСсАСсадтаасстатАсСсАа,аавсасстаТоСАССассА
САААДССАСАССТАТОАаТИАСССтТасАТАТОСАИССАСТасСсСтТоСААДСС тТаА
ЗЕО І МО: 241
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСбасАдасСААаАССАСАаасатаАСсСстадаацсАааАааСапАсСоСсСат | сигнальний сстаатаАдАдассСстТАСАаАаАСССстТаАСАСтТаАСсСтасАСАатаАас | пептид; вастстТоССтТаААСААТасСААсСаатаса;сататоСстасАТСАСИс |14С11 УН дасссостааСАдсассстасаатаа т сассСАСАТСТТТАИСАС |) (Таблиця 1, баАСсаАпАдАатосттСсасСАСАТСТОТаАдаААсСАааТстаАСсСстала!| ЗЕО І МО: 15); вСАДаСАТАСААДИаСААатоСсСАсатаатастаАССАТОаАСАААСАТО с5-лінкер; сАссссатапйАтТАССаССАСАТАСТАТТИаСаССАСаАСпАСАСсСтТОоСАА 14211 Му
ТтТАСОааАДаОаасСТАТТТССАТТАСТОССОСЯССсСАС,СааСАТОСТаа,тТаАСс | (Таблиця 1, статстАасассассаасаасттаавАасадасАаасАдасаадиасА!| ЕО ІЮО МО: 16); садсаАдтосассассаасаастстададтсатаАТаАСсССАаИтстсїі Сова шарнір; ссассАСсАСТОатТоТОТОаСсОоСсТваСаАаАдсАасССАСАСТОАаста | СОва ТМ; таасасстоссАаа,атотатаАаСААСААтотаассСстТаайТАТСАССАСА) сигнальний 14С11 І АасСсСАаааССАасСАССАдасстастаАТСТАСасАасСАТССАССАС | домен 4-188; дасСсАСсАдасаХатасСсАаасСАдаатстСапАТСТадСА,СаасСАСС | сигнальний слаттАасстАСААТоТОСТСОТСТаСАатТоСаАааАСТТСасСсат | домен соЗ3 атТАТТТ"ІТТаССАС,САС,ТАСААХССАТТаСйОССАТТСАССТТТОСССССа | дзета
ССАСАДДастапАвАТСААЧАССАСААССССТасСАССААаАССАСС
ААССССАасСАССТАСААТСЯСАТСССАЛАСОСЮССТСОТИатСототТададссАда дасСсАТатАааассаасАааСАаасАасАасСАаТаСАСАССАаасвиасСо тааАдстттасстасСаАТАТСТАТАТСТаССЬСАССТОТОДСаССАастлААСС татассстастастастадасстТааТСАТСАСССТаТАТТасАА0ОСа ссасСасАдадАдастастаТАСАТСТТСААласСАасстттАтТасСсасс
САСТаСАвАСААСССАасАасАаалссастастостатоаваттосс таАддадасАдасАасадсаАататадастаадааатаддаттососцва тотассаАтТассСсСАасстТАТСАаСАаацвасСсАаААССАастатАСА
АссАхастТадАттаав,аССо,ааАсАааАда,асАатТАсадсатастасАТАА
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК слдасаасапйААвАаАТоСАаАвАТасалаасСААласстоваАаАДА вААСССАСАасадласвсасстаТАТААТадастасАаААлацАСААдадта ссбосАдаасстТАСтТоСадаАдт,саСАТадАда,асалсАадааСаССовс сасСААдсаспАСАСсалтавостатАтсАса,оСстТаТатстТАССассСАСАА давАСсАССТАСаАтТассстасАТАТаСсАсасСсАСстТасстоСАдаста
А
ЗЕО ІЮ МО: 242
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСасдасСсАда,ССАсаАаастадасстаатацваатСвасСоиасао | сигнальний ссстастодаасстааСсавАтосстадлсастатстасаАсасААс | пептид; саасттсАсСсТтсАХастасасставАататостасатасасСсАаиИссо |20Е12 УН сос,саСсАдасадстасаатасватасцАСапАТСААатссСАТСаСА | (Таблиця 1, сАСсасдапсАаСААССаАттАСса,аСАасосостатаАаАААСАСИттсА | 5ЕО І МО: 39);
СААТСТОСАСАСАСаАТТСТАаСсСААТАСССТатАТСТасдьаАТтТасАс | а5-лінкер; тотСстТаААаАСАпАдапАСАССассататТАСТАТТаСАССАСААТСОСС | 20Е12 Му таасСсААСсаАдСсассттадтАтатасаасСАасваСАСААТастадсс |) (Таблиця 1, сталастоссассассасвастотавАаа,асАаасАсааддасСасдасцА!| ЕО І МО: 40); садсасддассасасасовсасвасСТсТаАСАтсатастаАСАСАИатсс |СОва шарнір; ссАСсСТОаТОоССТИатоТатаАдсоссСсосаСоАасСсСстТасСААасСАТСТОСТ |СОва ТМ; аТАпАТСТАаССАсСА,аоСтТастТатТАСТОСААСаасСААСААТТАТСТАа | сигнальний сАТТаСТТОоСТасСАСААдаССАсасСАатстоСССАаСТа|астаАТСТА)| домен 4-188; сстапсаАТСТААТАасСасСААл,аСа,!сзАастасСАпАссва7аттстотТасаА | сигнальний дасааАтоСааСАТССОСАСТТСАТОСТаААаАТСАсССсАааатасАсціа | домен соЗ3 2012 ссадасАататасасатаТАСТАТтТасСАТасСсааасСсССАасСАсСАСАСС | дзета
САТСАССТТССОаССАсСОаайСАСААДадстТасАаАТСсААаАССАСААСС
ССАаСАССААИаСССАССТАСАССТасСАССААССАТСаСАТСССАСС
СсАСТОТСОТСоТаАСсассталасСАтТатосасСсАаасАааСсАасаАааАас датасАсАсссассасставаєтттасстассАТАТСТАСАТСТОСС
СсСАССАСТаССАСалдАсСАТатассатастастастадасстастсАТ
СсАСССТатАСсТасСсААлсаСсасавасСацвАдаАластастатАТАТСТТСА дасаасстттТАтТаАдаАСсСАаатасСАаАСААСССАасАасвсАаавАссво стастостатааваттосСстаддадасаасаасяЯясСсаастатадаста дадатаддатттстАаасаасассСаАдТасАССАасСАТАССАаСАСаСИ вАСАЧААтТоАдастаТтАТААСсСАХастТадатотасвасСсацАаададаса стТАТОАСОЯТаСсТасйАТААХСАСАааассаАдАл,аавАсоСстаАдадтасаАд сасСсАдаСССсСааАпАААаАдАСССтТоАа,аАа,аавасстатАСААТадас тасАдаддасАСААаАатТаавссвАааСсСтТАТАССаАаАТОСаасСАТИадА сюасАдадаАдассассосса,СААдасаАСАСсаАдтаасстатАССАаиИо
СсСсТатоСАСАВССАССААДасАСАССТАТОАаТасссСстасАТАТасСАСєаИ
САСТаССТОСАДдОатТад
ЗЕО І МО: 243
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСасдасСсАда,ССАсаАаастадасстаатацваатСвасСоиасао | сигнальний ссстастодаасстааСсавАтосстадлсастатстасаАсасААс | пептид; саастТтсАсСсТтсАХастасасставАататстасиатасассАцвиасс | 32ав ун соссаСсАдасадстасаатасватасвасСапАТСААДатсССАТСАСС | (Таблиця 1, 32068 свАса,асАасасатТаАТСаАТТАСаСАаСАССтТатаАпАААСАСаИтасА | 5ЕО ІЮО МО: 43);
СААТСТОСАСАСАСаАТТСТАаСсСААТАСССТатАТСТасдьаАТтТасАс | а5-лінкер;
ТСТСТОААЧАСАСАавАСАССассататАСТАТТатАССАСААТССС | 3208 Му тааСААССаАССсАТТТоСАТтАТатТасСааоСАсааСАпААТа,тТаАсс | (Таблиця 1, сталастоссассассасвастотавАаа,асАаасАсааддасСасдасцА!| ЕО І МО: 40); садсасддассасасасовсасвасСТсТаАСАтсатастаАСАСАИатсс |СОва шарнір; ссАСсСТОаТОоССТИатоТатаАдсоссСсосаСоАасСсСстТасСААасСАТСТОСТ |СОва ТМ; атТадсатстАасСсАа,аАдассТастатАСТССААСсаСААСААТТАТСТаИ | сигнальний
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК сАТТаСТТТСтТаСАСААЛИ,аССАсСасСА,аТтоТоСССАасСтТастаАТСТА | домен 4-188; сстапсаАТСТААТАасСасСААл,аСа,!сзАастасСАпАссва7аттстотТасаА | сигнальний дасааАтоСааСАТССОСАСТТСАТОСТаААаАТСАсСоСсеСсатасАціа | домен соЗ3
САСАСОСАХСсатасаСататАСТАТТасАтТасСсааасСсССАасСАСАСАСС | дзета
САТСАССТТССОаССАсСОаайСАСААДадстТасАаАТСсААаАССАСААСС
ССАаСАССААИаСССАССТАСАССТасСАССААССАТСаСАТСССАСС
СсАСТОТСоТСоТаАСсасстадасСАтТатааасСАаасСсАааСАаасАаалас датаСсАСАСсСсАаадсасстасвАсттасстТасСсасАТАТСТАСАТСТОСО
СсСАССАСТаССАСалдАсСАТатассатастастастадасстастсАТ
СсАСССТатАСсТасСсААлсаСсасавасСацвАдаАластастатАТАТСТТСА дасаасстттТАтТаАдаАСсСАаатасСАаАСААСССАасАасвсАаавАссво стастостатааваттосСстаддадасаасаасяЯясСсаастатадаста дадатаддатттстАаасаасассСаАдТасАССАасСАТАССАаСАСаСИ вАСАЧААтТоАдастаТтАТААСсСАХастТадатотасвасСсацАаададаса стТАТОАССЯТИАСТапйАТААДСАСВОАХСаасаАдАа,аасвАтоСстадаАатааиАХ сасСсАдаСССсСааАпАААаАдАСССтТоАа,аАа,аавасстатАСААТадас тасАдаддасАСААаАатТаавссвАааСсСтТАТАССаАаАТОСаасСАТИадА сюасАдадаАдассассосса,СААдасаАСАСсаАдтаасстатАССАаиИо
СсСсТатоСАСАВССАССААДасАСАССТАТОАаТасссСстасАТАТасСАСєаИ
САСТаССТОСАДдОатТад
ЗЕО ІЮ МО: 244
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСасдасСсАда,ССсАсаАаастасаастааставчаатсттацвчаасат)| сигнальний сстаатадалдасстааСсасвАтототаАавасталастаСасСдасАТСС | пептид; сСастТтСсАТСТТТААСААТаИССсСтТасататоставастасассАааассссі 2689 ун савасСсАдсасАстааАаастааАатаасСапАТСсАдадаСААаТтссСадсі (Таблиця 1, саАдСпААССАСАСАТТАСа,аСАаасСАсСстаТатаААааАССаТстТСАСААТІ 5ЕО ІЮ МО: 41); стотосааАСаАтТАасСААСаАтТАСССтатАтТСотТасСсАаАтТалдАсаассі (15-лінкер; тТаААдаАСсАсаАдасАСАсСассататАСТСТасАССАСАСССОоСтТОааИ | 2689 М савассстТттТаАТАТТаСОсСаСсСсАаасасасСАСАСТОСТИаАСсСсаТтадас | (Таблиця 1, тосасдасАааадлааАд,аСсааСасАаасасАаа,аасАааСсааовасовасос | БЕО ІО МО: 42); стотавссасСсааСсасАаСаАСсАтсаИатастаАСАСАСАаСсСсСстТоСта! СОва шарнір; тосстассалатадсосссссасаХасстасстстТАтсАДастатсаст | СОва ТМ;
СстТАаСсСАсСАаасстастасСАсСс,аааАСаасСТТСААТТАССТОаСАТТа | сигнальний сттттТасСсАасдлдассаавассАаатосссоСсАастастаАТСТАТСТОаИІ домен 4-188; сстТостотТАсАаассттассатассСАаАСАааТтстосаастстаА | сигнальний
СсАХаСсааСАСАСАСТТСАСССТаААаАтоАасСАаадатасАаассяда | домен соЗ3 2г6в9 |їаАТтатасасСсататАСТАТТасСсАТасааасссСстТасСсАСАСАСССАТСАС) дзета стссасСсдаваСАСААадстТасАаАТСсААаАССАСААССССАССА
ССААЧОИССАССТАСАССТасСАССААССАТСаСАТСССАСССАСТИаТо тЄбтададссталдаа,состатааасСсАаасАааСАа,ацсАа,асАласСАатасАс
АдослдасеасставАсттасстасаАТАТСТАСАТСТОСасСАССТОТ саСсАдсаААСсАТатассатастастастадасстастСАТСАСССТа тТАСТаСААсСАсСАсСасСсАаасААсААдастастатАТАТСТТСААдИаСАаСс
ТТТАТОДаАССАатТасСАаАСААСССАсаАла,ааАаа,аасАсаастастос татаааттоССстТаААлаАдасвадааслаассАаасАтТатсаастадасатахд датттсссастотасСсаАтТасСсАССАасСАТАССАССАаааАСАаАА
СсСАасСстатАТААСаАдасСТаААтТстТасассавАвАаАа,саАаТАСадс стастапвАТААДаАдсаСаСсасСАаАаАтоСАаАааАатТасвасаасСАда сссСапАдаАААаАдАСССтТоАаасАаасасстТатАСААтТадастасСАаА давАСсАдадтаасСсвАда,аасстАтТАаСаАаАтоааСАтадАдасаАаА сгассассааасасСАдаасАСАСсадтаасстатассАаасвсасстатТо
САСАЧССАССААДасСАСАССТАТИаАТИАСССтТасСАТАТИаСАСОасСАСТас
СТоСААДСИатТад
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК 000101 ЦЕЮ МО:245)111111111
АтаастотассСсатТосАассастотастастасСсАстассостастас | Сова тасАдСасдасСсАадасосталастасаастасатацвАасаАааСсавасСоцасо | сигнальний ссстастодаасстааСсавАтосстадлсастатстасаАсасААс | пептид; с,аасттсАССТТТАсСаАСасАтТасалтатоставиатаСасСАсасс | 3008 ун сстааСсААлсасАСстТасвсаатаватасаАСааАТСААДаАаТсСААсСАСА | (Таблиця 1, сАсаасааСАССАСАСАттАСсатаатТассАСТаААСИаассСасттсА | 5ЕО ІО МО: 37); тТеАТСТоОССОИаСаАСВАТТСТоСОаСААТАСССТатАТСТасСАастТОаААС | с5-лінкер;
ААТСТОААСАСАсСАаасАтТАССаССататАСТАТТасАССАСАИаТасс | зврв М дасостоСстТАсСавастАТаскасСсАаасасСАСАСтТааТадсСаТтиаАас | (Таблиця 1, тоссассаеассаеассасттавАдсаАдсаАдсасААдаСсаавдасАласадас | ЕО ІО МО: 38); ддасасасасосаосоаСсТсТаАСАТсатаАТаАСАСАатстТосСАСТа | Сова шарнір; дасстасслатадсссставСсада,аССАасстоСАТстСттаТатсаст |СОва ТМ;
СстТАаСсСАсСАдассТасСстасСАСААСААаСацпААСААТТАССТасАТТИаСІ сигнальний тсотТасСсАапдлдасстааССАатоооСстАаСТастаАТСТАТСТИСО | домен 4-188;
САаСААТАЧАаСсСсТоСОесвАаатТассСАсаАСсАасатсттасАсасАасцА | сигнальний даСапйААСсСАаЧАСсСТТСсАСССтТаААаАтсАааСАааАдатасааассСси да | домен соЗ3 3008 дсатасаСататАСТАТТасСсАТтаСсАааасСсССАаСАСпАСАССТАТСАСС дзета теосвассалдаайсСАСААдаАСТааАСвАТСААаАССАСААССССАасСАС
САДССССАССТАСАССТасСАССААССАТСОСЯССТОСТСАСТССТСТатстТ
СстадаАдСсСАсАдааСсАтТаТатааасСАааСсаасАаасАсаАд,САатасСАСА
СсСАасасасасстааАстта,асстТасСсаАТАТСТАСАТСТаСИаСАССТОСТтТа сСсАдапААсАтТатассатастастастадасстааТСАТСАСССТатТ
АСстТасСсААСсАаАдааСАсаААдаАдАдастастаТАТАТСТТСААдИаСсАаТссс т сАТОАдДаАдСсСсСсатасСсАвАСААСССАацсАасАа,ааАсааста|астотт стТАасаттоССАадАаадасааадлсасасаасаадтаталастадацватадА ст"ттласссатоСбасСсаАТасСАССАССАТАССАХаСАаааАСАСААС
САасСстТатАТААССЯДастаААтТотТасасСсааАаасАаАдсаАаТАСаАса тастапАтТААлдаАдасАаасааААдсааАтоСАсАадлтасвссАаасСАдас стсапАпАААаААСССАСАсадлаавассТаТАСААтТадастТасСАадА саАСААДаАатТааСсСосАаааССсТАТтоТалаАтоаасСАТадла,аасАа да дассассасавасСАлдаавАСАСаАтасасстатАасСсАа,аасостадас
АСАВССАССАДаспАСАССТАТОАТОаСССтТасАТАТИСАСОСАСТаСс
ТОоСАДСИТаА
ЗЕО ІЮ МО: 246
АтаастотассСсатоАасосастотастастасстота,ассстастас | СОва тасАдСбасдасСсААда,ССАСсАаастасаастаатаСсАатоСОааАСасСАСА) сигнальний сатаАддадАаасстаасАаастоСатаддастадастасСсААаасстос | пептид; сасспАСАСАТТСТСтТАасСсААСасСсААТоАаСстТааватасрасСАаасос | Сб МН (Таблиця ставсСсАсаавАстасАаатааАатавасСаТаАТСАТСССТАТСТТОСО 11, ЗЕБО ІЮО МО:
САССЯаССаАСТАТаСССАаААа ТТ ТсдсасасСацвиатаАСААТСАСС 48); есоСОАтТаАдаТтСсТАСААасСАССассСстТАСАТаасАасТаЇтостотСтадаї с5-лінкер;
АТсСсСОСдапАСАСсСАХа,аСсСсататАСТАТТаТаСсСАпасСАСАССТАТСАСИЇ| Сб МІ. (Таблиця св датяСсасада,асАасАТАСТАТИСАСОАаСААТавпАТОоСТттасасАСА 1, 5ЕО ІЮ МО: сааСАСАСТастаАассСаталастоссассассассастотааАса | 49); дасдасддаСсасасдасАааасАласасАлаСсасасасСсасссвсастстадасті СОва шарнір; сСсАдалдосатастаАСССАаССАсСстосасстотапААСАССАСас | СОва ТМ; сАдспАдасаТаАССАТтСАа,аСсТа|астосасАТСТАасСТоСААСАТОССОИСТ | сигнальний
ССААТТАСОЯТатТАТТаИтТАССАХ,ССАаСсТассАааСАСАаСССССААСІ домен 4-188;
АТоСТОаАТСТАССОаСААСААТСАССОЯСОСТІСТОИССИаИтассСАСАТА | сигнальний
АТттотТоТОасСАаасСААлатоСаасСсАссттассАаасстаасСААТСТОСИ домен соЗ3 ссстадсатсотадасАаСадаассаАТТАСТАТТОСЯСТСЯССТаскцаА | дзета
СОАТААССТААДСОССОСЯаСТОСататтааСАСАааСАССАДасталасСА сТасСтТаАССАСААССССТасСАССААСАССАССААСАССАаСАССТАС
Таблиця 5С
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕКмМІІ-специфічних САК
САТСаСААХаССАа,аССАСсТатоССтаАаАСССвАсасостатАаасст абАдаСбАа,СсАсааАаСАаТасСАСАССАсИ,впс,аоСстацвАстта7асстас сСАТАТСТАТАТСТаСО(СЯСАССАСТОССАСОСААСАТатТаасСсата7астаст сстадасстааТСсАТСАСССТатАТТаСААаАааАасСасА,сААс,Ада стастаТАСАТСТТСААдасСАаасссттТАТасассстатасСАцпАСААСс ссАдссАа,ссАасаАассастасАа,статаа тоССАпААдаАапАааА ссоапад,ааАдтатадастадссатаААаатосссатстассСсаАТаСА
СсСАаСАТАТСАС,ССАСОапАСАСААТСАаСТатАСААСадастаААТСТ сасаСббаасА,аАд,сАда,ааАдатТАссАсастастацпАтТААда,аАд,аА,асОацААс саАдсостаАдаАтТапссАааСААасСАСапАпАААААСССССАс,асАс сасбСстатАТААТадасСстасСАсаААасАСААаАтТааоСпАпасстТАСТ
СстаАаАтТсааСАТаААсСацпАпАавАаасасассавапасСААдаапАСАСа
АТааоСстТатАТСАасСваССстТаАаСАСАаССАССАДапАСАССТАСИаА тассстТасСсАТАТаАСАЧСасСсАСТасССтТоСААдсСаТатаА
ЗЕО ІЮ МО: 247
Даун-регуляція або мутація антигенів-мішеней взагалі спостерігається в рукових клітинах, створюючи вислизуючі варіанти з втратами антигену. Таким чином, для гасіння вислизування пухлини та для того, щоб зробити імунну клітину специфічнішою до мішені, ЕСЕКМПІ- специфічний САК може містити один або більше додаткових позаклітинних ліганд-зв'язуючих доменів для одночасного зв'язування різних елементів у мішені, тим самим поповнюючи активацію та функцію імунної клітини. В одному варіанті здійснення позаклітинні ліганд- зв'язуючі домени можуть бути розташовані послідовно на одному і тому ж трансмембранному поліпептиді та, необов'язково, можуть бути розділені лінкером. У деяких варіантах здійснення зазначені різні позаклітинні ліганд-зв'язуючі домени можуть бути розташовані на різних трансмембранних поліпептидах, що складають САК. У деяких варіантах здійснення винахід відноситься до популяції САК, при цьому кожний САК містить інший позаклітинний ліганд- зв'язуючий домен. Зокрема, винахід відноситься до способу інжинірингу імунних клітин, що включає забезпечення імунної клітини й експресію на поверхні клітини популяції САК, при цьому кожний САК містить різні позаклітинні ліганд-зв'язуючі домени. В іншому конкретному варіанті здійснення винахід відноситься до способу інжинірингу імунної клітини, що включає забезпечення імунної клітини та введення у клітину полінуклеотидів, що кодують поліпептиди, які складають популяцію САК, кожний з яких містить різні позаклітинні ліганд-зв'язуючі домени.
Під популяцією САКЕ слід розуміти щонайменше два, три, чотири, п'ять, шість або більше САК, кожний з яких містить різні позаклітинні ліганд-зв'язуючі домени. Різні позаклітинні ліганд- зв'язуючі домени за винаходом можуть, переважно, одночасно зв'язувати різні елементи у мішені, тим самим поповнюючи активацію та функцію імунної клітини. Винахід також відноситься до ізольованої імунної клітини, яка містить популяцію САК, кожний з яких містить різні позаклітинні ліганд-зв'язуючі домени.
В іншому аспекті винахід передбачає полінуклеотиди, що кодують будь-який із САК і поліпептидів, що описані тут. Полінуклеотиди можуть бути одержані й експресовані за допомогою процедур, що відомі з рівня техніки.
В іншому аспекті винахід передбачає композиції (такі як фармацевтичні композиції), що містять будь-яку з клітин за винаходом. У деяких варіантах здійснення композиція містить
Зо клітину, що містить полінуклеотид, який кодує будь-який із САК, що описані тут.
Тут також описані вектори експресії та введення композицій полінуклеотиду.
В іншому аспекті винахід передбачає спосіб одержання будь-якого з полінуклеотидів, описаних тут.
Винахід також охоплює полінуклеотиди, що є комплементарними до будь-яких таких послідовностей. Полінуклеотиди можуть бути однонитковими (кодуючими або антисенсовими) або двонитковими, а також можуть бути молекулами ДНК (геномної, кКДНК або синтетичної) або
РНК. Молекули РНК включають молекули гяЯРНК, які містять інтрони і взаємно-однозначно відповідають молекулі ДНК, і молекули мРНК, які не містять інтрони. У полінуклеотиді за винаходом можуть, але не повинні, бути присутні додаткові кодуючі або некодуючі послідовності, а полінуклеотид може, але не повинен, бути зв'язаний з іншими молекулами та/або матеріалами підкладки.
Полінуклеотиди можуть містити нативну послідовність (тобто ендогенну послідовність, яка кодує антитіло або його частину), або можуть містити варіант такої послідовності. Варіанти полінуклеотиду містять одну або більше замін, додавань, делецій і/або інсерцій, так що імунореактивність кодованого поліпептиду не зменшується у порівнянні з нативною імунореактивною молекулою. Вплив на імунореактивність кодованого поліпептиду загалом може бути оцінений так, як описано тут. Переважно, варіанти проявляють щонайменше приблизно 7095 ідентичності, переважніше, щонайменше приблизно 8095 ідентичності, ще переважніше, щонайменше приблизно 9095 ідентичності, і найпереважніше, щонайменше приблизно 9595 ідентичності полінуклеотидній послідовності, яка кодує нативне антитіло або його частину.
Дві полінуклеотидні або поліпептидні послідовності називаються «ідентичними», якщо послідовність нуклеотидів або амінокислоти у двох послідовностях є такою самою при вирівнюванні для максимальної відповідності, як описано нижче. Порівняння між двома послідовностями, зазвичай, виконують шляхом порівняння послідовностей через порівняльне вікно для ідентифікації та порівняння локальних областей подібності послідовностей. «Порівняльне вікно», як використовується тут, відноситься до сегмента щонайменше у приблизно 20 безперервних положень, зазвичай від 30 до приблизно 75, або від 40 до приблизно 50, в якому послідовність може бути порівняна з опорною послідовністю з такою самою кількістю безперервних положень після того, як дві послідовності були оптимальним чином вирівняні.
Оптимальне вирівнювання послідовностей для порівняння може виконуватися (із застосуванням програми «Медаїїдп» у модулі «І азегдепе» програмного забезпечення для біоінформатики (ОМАЗТАК, Іпс., Мадізхоп, У), використовуючи типові параметри. Ця програма реалізує декілька схем вирівнювання, описаних у наступних посиланнях: ЮБауйпоїй, М.0О., 1978,
Модель еволюційної зміни білків - матриці для виявлення віддалених відношень. Іп Баупої,
М.О. (ед.) АйМаб5 ої Ргоїєїп бедиепсе апа Бтисіиге, Маїййопа! Віотедіса! НРезеєагсп Рошипааїйоп,
Муазнпіпдіоп ОС Мої. 5, Зиррі. 3, рр. 345-358; Неїп ., 1990, Комплексний підхід до вирівнювання та філогенів рр. 626-645 Меїпод5 іп Епгутоіоду мої. 183, Асадетіс Ргезв, Іпс., Зап Оівдо, СА;
Ніддіпв, О.С. апа 5Нагр, Р.М., 1989, САВІО5 5:151-153; Муегв, Е.МУ. апа Миїегк М/., 1988, САВІО5 4:11-17; ВобБіпзоп, Е.О., 1971, Сотбр. ТНеог. 11:105; бапіои, М., Мез5, М., 1987, Мої. Віої. Емої. 4:406-425; Зпеай, Р.Н.А. апа зокаї, К.К., 1973, Нумерична таксономія, принципи і практична реалізація нумеричної таксономії, Егеетап Ргез55, Зап Егапсіб5со, СА; УМіриг, УМ.9У. апа Гіртап, 0О.9., 1983, Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 80:726-730.
Переважно, «відсоток ідентичності послідовності» визначається шляхом порівняння двох оптимально вирівняних послідовностей у вікні порівняння з щонайменше 20 положеннями, причому частина полінуклеотидної або поліпептидної послідовності у вікні порівняння може містити додавання або делеції (тобто гепи), що становлять 20 відсотків або менше, зазвичай від 5 до 15 відсотків, або від 10 до 12 відсотків, у порівнянні з опорними послідовностями (що не містить додавань або делецій) для оптимального вирівнювання двох послідовностей. Відсоток обчислюється шляхом визначення кількості положень, в яких ідентичні основи нуклеїнових кислот або залишки амінокислот знаходяться в обох послідовностях, для одержання кількості співпадаючих положень, поділу кількості співпадаючих положень на загальну кількість Положень в опорній послідовності (тобто розмір вікна) і множення результатів на 100 для одержання відсотка ідентичності послідовності.
Також або як альтернатива, варіанти можуть бути по суті гомологічними нативному гену або його частині або комплементу. Такі варіанти полінуклеотиду здатні гібридизуватися у помірно жорстких умовах до послідовності ДНК природного походження, що кодує нативне антитіло (або комплементарної послідовності).
Придатні «помірно жорсткі умови» включають попереднє промивання у розчині 5 Х 55:, 0,595 505, 1,0 ммоль ЕОТА (рН 8.0); гібридизацію за 50 "0-65, 5 Х 550, протягом ночі; з подальшим промиванням двічі за 65 "С протягом 20 хвилин з кожним із 2Х, 0,5Х та 0,2Х 555, що містить 0,1 956 505.
Як використовується тут, «високо жорсткі умови» або «умови високої жорсткості» є такими, при яких: (1) використовується низька іонна сила та висока температура для промивання, наприклад, 0,015 ммоль натрій хлориду/0,0015 ммоль натрій цитрату/0,195 натрій додецилсульфату за 50 "С; (2) під час гібридизації використовується денатуруючий агент, такий як формамід, наприклад, 5095 (06/06) формаміду з 0,195 альбуміну бичачої сироватки/0,190 бо фіколу/0,195 полівінілпіролідону/50 ммль натрій-фосфатного буферу за рН 6,5 із 750 ммоль натрій хлориду, 75 ммоль натрій цитрату за 42 "С; або (3) використовується 5095 формаміду, 5 х
ЗзЗС (0,75 М Масі, 0,075 М натрій цитрату), 50 ммол натрій фосфату (рН 6,8), 0,195 натрій пірофосфату, 5 х розчину Денхардта, фрагментована ультразвуком ДНК з молок лососевих (50 мкг/мл), 0,196 505 та 1095 сульфату декстрану за 42 "С з промиваннями за 42"С у 0,2 х 550 (натрій хлорид/натрій цитрат) і 5095 формаміду за 55 "С з подальшим промиванням з високою жорсткістю, що складається з 0,1 х 55С, що містить ЕОТА за 55 "С. Фахівцю у даній галузі техніки буде зрозуміло те, яким чином слід регулювати температуру, іонну силу і т.д., як це необхідно для задовільнення факторам, таким як довжина вимірювального сенсора і т.п.
Фахівцю у даній галузі техніки буде зрозуміло, що у результаті дегенерації генетичного коду існує багато нуклеотидних послідовностей, які кодують поліпептид, як описано тут. Деякі з цих полінуклеотидів мають мінімальну гомологію з нуклеотидною послідовністю будь-якого нативного гену. Тим не менше, полінуклеотиди, які змінюються з огляду на відмінності у частоті використання кодону, конкретним чином передбачені винаходом. Крім того, алелі генів, що містять полінуклеотидні послідовності, що представлені тут, входять в обсяг винаходу. Алелі являють собою ендогенні гени, які були змінені в результаті однієї або більше мутацій, таких як делеції, додавання та/або заміни нуклеотидів. Одержувана в результаті мРНК і білок можуть, але не повинні, мати змінену структуру або функцію. Алелі можуть бути ідентифіковані із застосуванням стандартних технологій (таких як гібридизація, ампліфікація та/або порівняння послідовностей з бази даних).
Полінуклеотиди за даним винаходом можуть бути одержані із застосуванням хімічного синтезу, рекомбінантних способів або ПЛР. Способи хімічного синтезу полінуклеотидів добре відомі з рівня техніки і не потребують докладного опису тут. Фахівець у даній галузі техніки може використовувати послідовності, що представлені тут, а також комерційний ДНК- синтезатор для одержання бажаної послідовності ДНК.
Для одержання полінуклеотидів із застосуванням рекомбінантних способів, полінуклеотид, що містить бажану послідовність, може бути вставлений у придатний вектор, а вектор, у свою чергу, може бути введений у придатну клітину-хазяїна для реплікації й ампліфікації, як описано далі тут. Полінуклеотиди можуть бути вставлені у клітини-хазяїни будь-якими засобами, відомими з рівня техніки. Клітини трансформуються шляхом введення екзогенного
Зо полінуклеотиду шляхом прямого поглинання, ендоцитозу, трансфекції, Е-парування або електропорації. Одразу після введення, екзогенний полінуклеотид може зберігатися всередині клітини як неінтегрований вектор (такий як плазмід) або інтегрований у геном клітини-хазяїна.
Полінуклеотид, що був ампліфікований таким чином, може бути ізольований від клітини-хазяїна способами, що добре відомі з рівня техніки. Див., наприклад, Затюогоок еї аї., 1989.
Як альтернатива, ПЛР забезпечує можливість репродукції послідовностей ДНК. Технологія
ПЛР добре відома з рівня техніки й описана у патентах США Мо 4,683,195, 4,800,159, 4,754,065 та 4,683,202, а також ПЛР: Полімеразна ланцюгова реакція, Миїй5 еї аї. еа5., Вігкаизу'ег Ргез5,
Вовіоп, 1994.
РНК може бути одержана шляхом застосування ізольованої ДНК у придатному векторі та її інсерції у придатну клітину-хазяїна. Коли клітина реплікується, а ДНК транскрибується у РНК,
РНК потім може бути ізольована із застосуванням способів, добре відомих фахівцям у даній галузі техніки, як викладено вище, наприклад, у затьгоок еї аї!., 1989.
Придатні клонуючі вектори можуть бути сконструйовані відповідно до стандартних технологій або вони можуть бути вибрані з широкої кількості клонуючих векторів, доступних у рівні техніки. Хоча вибраний клонуючий вектор може варіюватися відповідно до клітини-хазяїна, призначеної для використання, корисні клонуючі вектри загалом матимуть здатність до самореплікації, можуть мати одиничну мішень для конкретної рестрикційної ендонуклеази, та/або можуть нести гени для маркера, який може бути використаний при виборі клонів, що містять вектор. Придатні приклади включають плазміди та бактеріальні віруси, наприклад, рОс18, рисС19, Вішпезсгірі (наприклад, рВ5 5Ки) та його похідні, тр18, тр19, рВК322, рмМВе,
СОоІЕ1, рСКІ1, КРА, фагові ДНК та шатл-вектори, такі як рбАЗ та рАТ28. Ці та багато інших клонуючих векторів доступні від комерційних підрядників, таких як ВіоКай, 5ігаїедепе та
Іпмітодеп.
Вектори експресії загалом являють собою здатні до реплікації полінуклеотидні конструкти, які містять полінуклеотид за винаходом. Передбачається, що вектор експресії повинен бути здатний до реплікації у клітинах-хазяїнах як епісоми або як невід'ємна частина хромосомної
ДНК. Придатні вектори експресії включають, але без обмеження, плазміди, вірусні вектори, у тому числі аденовіруси, адено-асоційовані віруси, ретровіруси, косміди та вектор(и) експресії, що розкритий(ї) у публікації заявки РСТ УМО 87/04462. Компоненти вектора загалом можуть 60 включати, але без обмеження, одне або більше з наступного: сигнальну послідовність; точку початку реплікації; один або більше маркерних генів; придатні транскрипційні контролюючі елементи (такі як промотори, енхансери і термінатор). Для експресії (тобто трансляції) зазвичай також потребується один або більше трансляційних контролюючих елементів, таких як сайт зв'язування рибосом, сайти ініціаціїї трансляції та стоп-кодони.
Вектори, що містять полінуклеотиди, які являють інтерес, можуть бути введені у клітину- хазяїна за допомогою будь-якої кількості придатних засобів, у тому числі електропорації, трансфекції з використанням хлориду кальцію, хлориду рубідію, фосфату кальцію, ДЕАЕ- декстрану або інших речовин; бомбардування мікрочастинками; ліпофекції та інфікування (наприклад, де вектор являє собою інфекційний агент, такий як вірус вакцини). Вибір введення векторів або полінуклеотидів завжди буде залежати від характеристик клітини-хазяїна.
Полінуклеотид, який кодує ЕСЕКМІПІ-специфічний САК, що розкритий тут, може знаходитися у касеті експресії або векторі експресії (наприклад, плазміда для введення у бактеріальну клітину-хазяїна або вірусний вектор, такий як бакуловірусний вектор для трансфекції клітини- хазяїна комахи, або плазміда або вірусний вектор, такий як лентивірус для трансфекції клітини- хазяїна ссавця). У деяких варіантах здійснення полінуклеотид або вектор може включати послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує рибосомні 5Кір-послідовності, такі як, наприклад, але без обмеження, послідовність, що кодує 2А-пептид. 2А-пептиди, що були ідентифіковані у підгрупі афтовірусів пікорнавірусів, обумовлюють рибосомний «стрибок» («5Кір») від одного кодону до наступного без утворення пептидного зв'язку між двома амінокислотами, що кодуються кодонами (див. (ЮоппейПйу апа ЄПой 2001; АїКіп5, УМІЇ5 еї а. 2007; богопіпа, УУчм еї аї. 2008)). Під «кодоном» слід розуміти три нуклеотиди на мРНК (або на кодуючій нитці молекули
ДНК), які транслюються рибосомою в один амінокислотний залишок. Таким чином, два поліпептида можуть бути синтезовані з однієї, суцільної відкритої рамки зчитування всередині
ІМРНК, коли поліпептиди відокремлені послідовністю 2А-олігопептиду, яка знаходиться у рамці.
Такі рибосомні 5Кір-механізми добре відомі з рівня техніки та відоме їх використання декількома векторами для експресії декількох білків, що кодуються одиночною інформаційною РНК.
Для спрямовування трансмембранних поліпептидів у секреторний шлях клітини-хазяїна у деяких варіантах здійснення у полінуклеотидній або векторній послідовності передбачена секреторна сигнальна послідовність (також відома як сигнальний пептид, лідерна послідовність,
Зо препропослідовність або препослідовність). Секреторна сигнальна послідовність функціонально зв'язана з трансмембранною послідовністю нуклеїнової кислоти, тобто дві послідовності зв'язані у коректній рамці зчитування та розташовані для спрямовування нового синтезованого поліпептиду у секреторний шлях клітини-хазяїна. Секреторні сигнальні послідовності загалом розташовуються у положенні 5' до послідовності нуклеїнової кислоти, що кодує поліпептид, який являє інтерес, хоча деякі секреторні сигнальні послідовності можуть бути розташовані у будь- якому іншому положенні у послідовності нуклеїнової кислоти, що являє інтерес (див., наприклад, УмеїЇсп еї аІ., патент США Мо 5,037,743; Ноїапа еї аІ., патент США Мо 5,143,830). У деяких варіантах здійснення сигнальний пептид містить амінокислотну послідовність, показану у
ЗЕБЕО ІЮ МО: 206 або 214. Фахівцю у даній галузі техніки буде зрозуміло, що з огляду на дегенерацію генетичного коду можлива значна варіація послідовності серед цих молекул полінуклеотиду. У деяких варіантах здійснення послідовності нуклеїнової кислоти за винаходом є оптимізованими кодоном для експресії у клітинах ссавця, переважно, для експресії у клітинах людини. Кодон-оптимізація відноситься до обміну у послідовності кодонів, що являє інтерес, які загалом є рідкими у генах із сильною експресією заданого виду, за допомогою кодонів, які загалом часті у генах із сильною експресією такого виду, такі кодони кодують ідентичні амінокислоти як кодони, які обмінюються.
Способи інжинірингу імунної клітини
Способи одержання імунних клітин для використання в імунотерапії передбачені тут. У деяких варіантах здійснення спосіб включає введення САК за винаходом в імунні клітини та наращування клітин. У деяких варіантах здійснення винахід відноситься до способу інжинірингу імунної клітини, що включає: забезпечення клітини й експресію на поверхні клітини щонайменше одного САК, як описано вище. Способи інжинірингу імунних клітин описані, наприклад, у публікаціях РСТ заявок на видачу патенту М/О/2014/039523, МО/2014/184741,
МО/2014/191128, МО/2014/184744 та УУО/2014/184143, кожна з яких включена сюди за допомогою посилання у всій своїй повноті. У деяких варіантах здійснення спосіб включає: трансформацію клітини із щонайменше одним полінуклеотидом, що кодує САК, як описано вище, й експресію полінуклеотидів у клітині.
У деяких варіантах здійснення полінуклеотиди присутні у лентивірусних векторах для стабільної експресії у клітинах. 60 У деяких варіантах здійснення спосіб може додатково включати етап генетичної модифікації клітини шляхом деактивації щонайменше одного гену, що експресує, наприклад, але без обмеження, компонент ТСЕК, мішень для імуносупресивного агенту, НІ А-ген та/або білок імунної контрольної точки, такий як, наприклад, РОСО1 або СТІА-4. Шляхом активації гену забезпечується, щоб ген, який являє інтерес, не експресувався у формі функціонального білка.
У деяких варіантах здійснення ген, що підлягає активації, вибраний із групи, що складається з, наприклад, але без обмеження, ТСКа, ТСКВ, аск, С052, ОК, РО-1 та СТІ А-4. У деяких варіантах здійснення спосіб включає деактивацію одного або більше генів шляхом введення у клітини рідкорозщепляюча ендонуклеази, що здатна вибірково деактивувати ген шляхом селективного розщеплювання ДНК. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза може являти собою, наприклад, ефекторну нуклеазу, подібну активаторам транскрипції (ТАГЕ-нуклеазу), або ендонуклеазу Сав59.
У деяких варіантах здійснення з рідкорозщепляючою ендонуклеазою використовується додатковий каталітичний домен для посилення її здатності до деактивації генів-мішеней.
Наприклад, додатковий каталітичний домен може являти собою фермент для процесингу кінців
ДНК. Необмежуючі приклади ферментів для процесингу кінців ДНК включають 5-3 екзонуклеази, 3-5 екзонуклеази, 5-3 лужні екзонуклеази, 5' флеп-екзонуклеази, гелікази, госфатазу, гідролази та незалежні від матриці ДНК-полімерази. Необмежуючі приклади такого каталітичного домену включають білюювий домен або каталітично активну похідну білкового домену, що вибрана з групи, яка складається з пЕгХОЇ (ЕХОЇТ НИМАМ), дріжджевого Ехої (ЕХОЇ УЕАСЗТ), Е. соїї ЕхоїЇ, ТКЕХ2 людини, ТКЕХІ миші, ТЕЕХІ людини, бичачого ТЕЕХ!1,
ТКЕХ!1 пацюка, тат (термінальної дезоксинуклеотиділтрансферази) ОМА2 людини, дріжджевого
ОМА2 (ОМА2 УЕАБ5Т). У деяких варіантах здійснення додатковий каталітичний домен може мати активність 3-5' екзонуклеази, а у деяких варіантах здійснення зазначений каталітичний домен являє собою ТЕЕХ, більш переважно, каталітичний домен ТКЕХ2 (М/О2012/058458). У деяких варіантах здійснення зазначений каталітичний домен кодується одноланцюговим ТКЕХ- поліпептидом. Додатковий каталітичний домен може бути зшитий з білюом зшиття нуклеази або химерним білком. У деяких варіантах здійснення додатковий каталітичний домен зшитий із застосуванням, наприклад, пептидного лінкеру.
У деяких варіантах здійснення спосіб додатково включає етап введення у клітини екзогенної
Зо нуклеїнової кислоти, що містить щонайменше послідовність, яка гомологічна частині цільової послідовності нуклеїнової кислоти, так що між цільовою послідовністю нуклеїнової кислоти та екзогенною нуклеїновою послідовністю має місце гомологічна рекомбінація. У деяких варіантах здійснення зазначена нуклеїнова кислота містить першу і другу частини, які гомологічні області 5 та 3 цільової послідовності нуклеїнової кислоти відповідно. Екзогенна нуклеїнова кислота може також містити третю частину, розташовану між першою і другою частинами, яка не має гомології з областями 5' та 3' цільової послідовності нуклеїнової кислоти. Після розщеплення цільової послідовності нуклеїнової кислоти між цільовою послідовністю нуклеїнової кислоти й екзогенною нуклеїновою кислотою стимулюється подія гомологічної рекомбінації. У деяких варіантах здійснення гомологічні послідовності всередині матриці донору можуть використовуватися щонайменше приблизно 50 парами основ, більше ніж приблизно 100 парами основ, або більше ніж приблизно 200 парами основ. Екзогенна нуклеїнова кислота може становити, наприклад, але без обмеження, від приблизно 200 пар основ до приблизно 6000 пар основ, переважніше від приблизно 1000 пар основ до приблизно 2000 пар основ. Спільні гомології нуклеїнової кислоти розташовані в областях, що фланкуються перед і після сайту розриву, а послідовність нуклеїнової кислоти, що підлягає введенню, розташовується між двома плечима.
У деяких варіантах здійснення нуклеїнова кислота послідовно містить першу область гомології послідовностям перед зазначеним розщепленням; послідовність для деактивації гену- мішені, вибраного з групи, що складається з ТСКа, ТСКВ, СО52, глюкокортикоїдного рецептору (СЕК), дезоксицитидинової кінази (аСК) та білка імунної контрольної точки, такого як, наприклад, білок програмованої смерті-ї (РО-1); та другу область гомології послідовностям після розщеплення. Етап введення полінуклеотиду може здійснюватися одночасно, перед або після введення або експресії рідкорозщепляючої ендонуклеази. У залежності від розташування цільової послідовності нуклеїнової кислоти, де була здійснена подія розриву, така екзогенна нуклеїнова кислота може бути використана для нокауту гену, наприклад, коли екзогенна нуклеїнова кислота розташована всередині відкритої рамки зчитування гену, або для введення нових послідовностей або генів, що являють інтерес. Інсерції послідовності шляхом застосування такої екзогенної нуклеїнової кислоти можуть використовуватися для модифікації наявного гену-мішені, шляхом корекції або заміни гену (зміни алелю, як необмежуючий приклад) бо або для ап- і даун-регуляції експресії гену-мішені (промотору зміни, як необмежуючий приклад),
корекції або заміни гену-мішені. У деяких варіантах здійснення деактивація генів, вибраних з групи, що складається з ТСКа, ТСКВ, СО52, СЕ, аск та білків імунної контрольної точки, може здійснюватися у точному геномному положенні за націлюванням специфічною ТАГЕ-нуклеазою, причому зазначена специфічна ТАГЕ-нуклеаза каталізує розщеплення і причому екзогенна нуклеїнова кислота послідовно містить щонайменше область гомології та послідовність для деактивації одного гену-мішені, вибраного з групи, що складається з ТСКа, ТОКВ, СО52, СК, асСК та білків імунної контрольної точки, який інтегрується гомологічною рекомбінацією. У деяких варіантах здійснення декілька генів можуть бути, послідовно або одночасно, деактивовані шляхом застосування декількох ТАГЕ-нуклеаз відповідно та специфічного націлювання одного визначеного гену та декількох специфічних полінуклеотидів для специфічної деактивації генів.
У деяких варіантах здійснення спосіб включає деактивацію одного або більше додаткових генів, вибраних із групи, що складається з ТСКа, ТСКВ, СО52, ОРГ, аскК та білків імунної контрольної точки. У деяких варіантах здійснення деактивація гену може виконуватися шляхом введення в клітини щонайменше однієї рідкорозщепляючої ендонуклеази так, що рідкорозщепляюча ендонуклеаза специфічно каталізує розщеплення у цільовій послідовності клітинного геному; і необов'язково, введення в клітини екзогенної нуклеїнової кислоти, що послідовно містить першу область голомогії послідовностям перед розщепленням, послідовність, що підлягає інсерції в геном клітини, та другу область гомології послідовностям після розщеплення; причому введена екзогенна нуклеїнова кислота деактивує ген та інтегрує щонайменше одну екзогенну полінуклеотидну послідовність, що кодує щонайменше один рекомбінантний білок, що являє інтерес. У деяких варіантах здійснення екзогенна полінуклеотидна послідовність інтегрується всередині гену, що кодує білок, вибраного із групи, що складається з ТСКа, ТСЕВ, С052, СК, аск та білків імунної контрольної точки.
В іншому аспекті етап генетичної модифікації клітин може включати: модифікацію Т-клітин шляхом деактивації щонайменше одного гену, що експресує мішень для імуносупресивного агенту, та нарощування клітин необов'язково в присутності імуносупресивного агенту.
Імуносупресивний агент являє собою агент, який супресує імунну функцію одним із декількох механізмів дії. Імуносупресивний агент може зменшувати ступінь та/або ненаситність імунної
Зо відповід. Необмежуючі приклади імуносупресивних агентів включають інгібітори кальциневрину, мішені рапаміцину, блокатори са-ланцюга інтерлейкіну-2, інгібітори інозинмонофосфатдегідрогенази, інгібітори редуктази дигідрофолієвої кислоти, кортикостероїди та імуносупресивні антиметаболіти. Деякі цитотоксичні імуносупресанти діють шляхом інгібування ДНК синтезу. Інші можуть діяти через активацію Т-клітин або шляхом інгібування активації клітин-хелперів. Способи за винаходом забезпечують можливість надання імуносупресивної резистентності Т-клітинам для імунотерапії шляхом деактивації мішені імуносупресивного агенту у Т-клітинах. Як необмежуючі приклади, мішені для імуносупресивного агенту можуть бути рецептором для імуносупресивного агенту, такою як, наприклад, але без обмеження, СО52, глюкокортикоїдний рецептор (СЕК), гени-члени сімейства
ЕКВР та гени-члени сімейства циклофіліну.
У деяких варіантах здійснення генетична модифікація у способі включає експресію, у забезпечених для інжинірингу клітинах, однієї рідкорозщепляючої ендонуклеази, так що рідкорозщепляюча ендонуклеаза специфічно каталізує розщеплення в одному гені-мішені, тим самим деактивуючи ген-мішень. У деяких варіантах здійснення спосіб інжинірингу клітин включає щонайменше один з наступних етапів: забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; вибір гену в Т-клітині, що експресує мішень для імуносупресивного агенту; введення в Т-клітину рідкорозщепляючої ендонуклеази, здатної до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву гену, що кодує мішень для імуносупресивного агенту, та нарощування клітин необов'язково у присутності імуносупресивного агенту.
У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; вибір гену в Т-клітині, причому ген експресує мішень для імуносупресивного агенту; трансформацію Т-клітини з нуклесновою кислотою, що кодує рідкорозщепляючу ендонуклеазу, здатну до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву гену, що кодує мішень для імуносупресивного агенту, та експресію рідкорозщепляючих ендонуклеаз у Т-клітинах; та нарощування клітин необов'язково у присутності імуносупресивного агенту.
У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза специфічно націлює СО52 або СК. У деяких варіантах здійснення ген, що вибраний для деактивації, кодує СО52, а бо імуносупресивний лікарський засіб містить гуманізоване антитіло, що націлене на антиген
СО52. У деяких варіантах здійснення ген, що вибраний для деактивації, кодує ОК, а імуносупресивний лікарський засіб містить кортикостероїд, такий як дексаметазон. У деяких варіантах здійснення ген, що вибраний для деактивації, являє собою ген-член сімейства ЕКВР або його варіант, а імуносупресивний лікарський засіб містить ЕК5БОб, що також відомий як такролімус або фуджиміцин. У деяких варіантах здійснення ген-ч-лен сімейства ЕКВР являє собою ЕКВР12 або його варіант. У деяких варіантах здійснення ген, що вибраний для деактивації, являє собою ген-член сімейства циклофіліну або його варіант, а імуносупресивний лікарський засіб містить циклоспорин.
У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза може являти собою, наприклад, мегануклеазу, нуклеазу цинкового пальця або ТАЇ Е-нуклеазу. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза являє собою ТАЇ Е-нуклеазу.
Також тут передбачені способи інжинірингу Т-клітин, що придатні для імунотерапії, причому способи включають: генетичну модифікацію Т-клітин шляхом деактивації щонайменше одного білка імунної контрольної точки. У деяких варіантах здійснення білок імунної контрольної точки являє собою, наприклад, РО-1 та/або СТІ А-4. У деяких варіантах здійснення спосіб генетичної модифікації клітини включає: модифікацію Т-клітин шляхом деактивації щонайменше одного білка імунної контрольної точки; та нарощування клітин. Білки імунної контрольної точки включають, але без обмеження, програмовану смерть 1 (РО-1, що також відомий як РОСО1 або
СОр279, номер доступу: ММ. 005018), антиген цитотоксичного Т-лімфоциту 4 (СТІ А-4, що також відомий як СО152, номер доступу СепВапк АЕБ414120.1), ГАЗ (що також відомий як СО223, номер доступу: ММ. 002286.5), ТітЗ (що також відомий як НАМСК2, номер доступу СепВапк:
УхХ049979.1), ВТ А (що також відомий як СО272, номер доступу: ММ. 181780.3), ВУ55 (що також відомий як СО160, номер доступу СепВапк: СК541888.1), ТІСІТ (що також відомий як М5ТМ3, номер доступу: ММ- 173799), В7Н5 (що також відомий як С10о1154, гомолог МІЗТА-гену мишей, номер доступу: ММ. 022153.1), ГАІК1 (що також відомий як СОЗ30О5, номер доступу СепВапк:
СтК542051.1), БІС ЕС10О (номер доступу СепВапк: АХ358337.1), 284 (що також відомий як сО244, номер доступу: ММ. 001166664.1), які прямо інгібують імунні клітини. Наприклад, СТІ А-4 являє собою білок на поверхні клітини, що експресований на деяких СО4 і СО8 Т-клітинах; коли зачеплений своїми лігандами (87-1 і В7-2) на антигенпрезентуючих клітинах, активація й
Зо ефекторна функція Т-клітин інгібуються.
У деяких варіантах здійснення зазначений спосіб інжинірингу клітин включає щонайменше один з наступних етапів: забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; введення в Т-клітину рідкорозщепляючої ендонуклеази, здатної до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву одного гену, що кодує білок імунної контрольної точки; та нарощування клітин. У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; трансфекцію зазначеної Т-клітини з нуклестовою кислотою, що кодує рідкорозщепляючу ендонуклеазу, здатну до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву гену, що кодує білок імунної контрольної точки; експресію рідкорозщепляючих ендонуклеаз у Т-клітинах; нарощування клітин. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза специфічно націлюється на ген, що вибраний із групи, що складається з: РО-1, СТІ А-4, І ДСЗ, Тіт3, ВТІ А, ВУ55, ТІСІТ, В7Н5, ГАІВТ, ІСІ ЕСТ10, 284, ТСКа та ТСКВД. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза може являти собою мегануклеазу, нуклеазу цинкового пальця або ТАЇ Е-нуклеазу. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза являє собою ТАЇ Е-нуклеазу.
У деяких варіантах здійснення винахід може бути особливо придатний для алогенної імунотерапії. У таких варіантах здійснення клітини можуть бути модифіковані способом, що включає: деактивацію щонайменше одного гену, що кодує компонент рецептору Т-клітини (ТОК) у Т-клітинах; та нарощування Т-клітин. У деяких варіантах здійснення генетична модифікація у способі базується на експресії у забезпечених для інжинірингу клітинах, однієї рідкорозщепляючої ендонуклеази, так що рідкорозщепляюча ендонуклеаза специфічно каталізує розщеплення в одному гені-мішені, тим самим деактивуючи ген-мішень. У деяких варіантах здійснення зазначений спосіб інжинірингу клітин включає щонайменше один з наступних етапів: забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; введення в Т-клітину рідкорозщепляючої ендонуклеази, здатної до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву щонайменше одного гену, що кодує компонент рецептору Т-клітини (ТОК); та нарощування клітин.
У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення Т-клітини, такої як з клітинної культури або зі зразку крові; трансфекцію зазначеної Т-клітини з нуклетїновою кислотою, що бо кодує рідкорозщепляючу ендонуклеазу, здатну до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК, переважно, шляхом двониткового розриву щонайменше одного гену, що кодує компонент рецептору Т-клітини (ТОК); експресію рідкорозщепляючих ендонуклеаз у Т- клітинах; сортування трансфектованих Т-клітин, які не експресують ТСК на їх клітинній поверхні; та нарощування клітин.
У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза може являти собою мегануклеазу, нуклеазу цинкового пальця або ТАЇ Е-нуклеазу. У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза являє собою ТАЇ Е-нуклеазу. У деяких варіантах здійснення
ТА Е-нуклеаза розпізнає та розщеплює послідовність, що кодує ТСКа або ТСКДВ. У деяких варіантах здійснення ТАЇЕ-нуклеаза містить поліпептидну послідовність, що вибрана з амінокислотної послідовності, показаної у ЗЕО ІЮ МО: 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224 або 225.
Поліпептидні послідовності ТАЇ Е-нуклеази:
ВереаїЇ ТАС Т01-І
ГТРООММАІАЗМИасСаТкод ЕТМОВІ І РМ СОАНИОИаГ ТРООУММАІАЗММИаСКОАЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГТРООММАІАВМИасиакоОАЕТМОВІ ЇЇ РМ СОАНОЇ ТРЕОУМАІАЗНОССОКОАІ ЕТМОВІ І РМІ С
ОАНаіг ТРЕОУМАІАЗНОССИКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГЕТМОАТ І РМ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗНОСОКОАГЕТМОВІ І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГЕТМОА І РМІ СОАНИа ТРООУММАІАЗММИаСаСКОАГЕТМОВІИЇ РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГЕТМОАЇ І РМІ СОАНИЇ ТРООУММАІАЗМаСсаИТкоАГЕТМОНВІ І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГЕТМОАЇ І РМІ СОАНИЇ ТРООУММАІАЗМаСсаИТкоАГЕТМОНВІ І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗНОСОКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОЇ ТРООММАІАЗМОаСИаВРАГЕ (5ЕО 10
МО: 218)
ВереаЇ ТРАС Т01-Н8
ГТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМ СОАНСОИГ ТРООСММАІАЗМИаСаТкОАГЕТМОВІ І РМ СО
АНСаГТРЕОУММАІАЗНОСОКОАЇ ЕТМОВІ І РМІ СОАНСОИЇ ТРЕОММАІАЗМІССКОАГЕТМОАТІ РМІ СО
АНСОИГТРООММАІАЗММИасакКОАГЕТМОВІ І РМІ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМІ С
ОАНаТагТтРООММАІАЗМасатакода ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИї ТРООУМАІАЗММИаскоАЕТМОВІИІ РМІ
СОАНаИаг ТРООУМАІАЗММИаскоАІ ЕТМОВІ І РМ СОАНИа ТРООММАІАЗМИасСаколдЕТМОВІ ЇЇ РМ
І СОАНагІ ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГ ЕТМОАТІ РМІ СОАНОЇ ТРЕОМУМАІАЗНОСОаКкКОАГЕТМОВИ РУ
І СОАНагІ ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГ ЕТМОАТІ РМІ СОАНОЇ ТРЕОМУМАІАЗНОСОаКкКОАГЕТМОВИ РУ
Коо) І СОАНаг тТРОСУМАІАЗММИаскКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОИЇ ТРООУМАІАЗМОаСаИТвВРАГЕ (5ЕО 10
МО: 219)
Вереаї ТАВС Т01-І.
ГТРООММАІАЗММИааТКОАЕТМОВІІЇ РМІ СОАНИЇ ТРОСУМАІАЗМИаСсСОИкКОАЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГ ТРООММАІАВММИаскКОАГЕТМОВІ І РМІ СОАНОИЇ ТРООУМАІАЗМИаСаТкоАГгЕТМОНВІ І РМІ С
ОАНаТагТтРООММАІАЗМасатакода ЕТМОВІІЇ РМ СОАНааї ТРООУМАІАЗМИасакола ЕТМОВІ І РМІ.
СОАНаТаг ТРООУМАІАЗММаскоАГЕТМОВІ І РМ СОАНСОИГ ТРЕОУММАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОАГТГІ РМІ.
СОАНаТаг ТРОСУМАІАЗММИасакоАГгЕТМОВІІ РМ СОАНОЇ ТРЕОМУМАІАЗНОСОаКкКОАГЕТМОВИ РУ
І СОАНаг ТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИИЇ ТРЕОММАІАЗМІСИСКОАГЕТМОА РУ
І СОАНагтТРОСОУМАІАЗМИасаколд ЕТМОВІІ РМ СОАНОаї ТРЕОУМАІАЗНОСИКкКОА ЕТМОВІИ Р
МІ СОАНИаг ТРЕОММАІАЗМІССКОАГЕТМОАТІ РМ СОАНИОЇ ТРОСОУМАІАЗМаСсСаВРАГЕ (5ЕО І
МО: 220)
Вереаї! ТАВС Т01-8
МРОВЗТУМ УГТРООММАІАЗММИаскоОАГЕТМОВІ І РМ СОАНСИастТРООСОММАІАЗМИаСаИТколАГгЕТ
МОВІ РМ СОАНИИаЇ ТРОСУМАІАЗММИаскоОАЕТМОВІ І РМ СОАНОЇ ТРООУМАІАЗММИасакКОА Е
ТМОВІ ГРМІ СОАНОИаГ ТРЕОУМАІАЗНОССОКОА ЕТМОВІ І РМІ СОАНСОИГ ТРЕОУМАІАЗНОСИКОАЇ.
ЕТМОВІ ГРМ СОАНОаЇ ТРООММАІАЗМИаСсаТакода ЕТМОВІ І РМ СОАНИЇ ТРООУМАІАЗМОССаКОА
ГЕТМОВІ ГРМ СОАНИаЇ ТРООУМАІАЗМИаСсИКОАЇЕТМОВІИЇ РМ СОАНИСИї ТРООСУМАІАЗМ-СаСІИКО
АГЕТМОВІ ГРМ СОАНСИастРООММАІАЗММИакОАГЕТМОВІ РМ СОАНИастРООММАІАЗММОСК
ОАГЕТМОВІ ГРМ СОАНОИа СТтРООММАІАЗММИаТкоОАЕТМОВІ ГРМ СОАНИаг ТРООММАІАЗМНОСС
КОАГЕТМОВІ І РМІ СОАНСИа Ст РООММАІАЗММИСКОАЕТМОВГЇ РМ СОАНИТс ТРООММАІАВМИс
САРАГЕ (5ЕО ІО МО: 221)
Вереа, ТАВС Т02-ІЇ
ГТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМІ СОАНОИГ ТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГТРЕОУММАІАЗНОСОКОАЇ ЕТМОВІ І РМІ СОАНСОИЇ ТРЕОММАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОАЇТ І РМІ СО
АНСаГТРЕОММАІАЗНОСОКОАЇ ЕТМОВІ І РМІ СОАНСИЇ ТРЕОМУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІ І РМІ С
ОАНаІг ТРЕОУМАІАЗНОССОИКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНИа г ТРООУМАІАЗММОИаТКкКОАЕТМОВІ І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗМІССКОАГЕТМОА І РМІ СОАНИа ТРООУММАІАЗММИаСаСКОАГЕТМОВІИЇ РМІ.
СОАНаИаг тТРООУМАІАЗММИасакоАГЕТМОВІ І РМ СОАНИа г ТРООММАІАЗМасСакоАгЕТМОВІ РМ
І СОАНагТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИИаї ТРОСУМАІАЗММИаскоОАГЕТМОВІ І Р (510) МІ СОАНИаг ТРЕОММАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІ І РМІ СОАНИаИаї! ТРОСУМАІАЗМаСсСВРАЇГ Е (5ЕО 10
МО: 222)
Вереа, ТАВС 702-818
ГТРООММАІАЗММИааТКОАЕТМОВІІЇ РМ СОАНИИЇ ТРОСУМАІАЗММИасакОАГЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГТРООММАІАВММИаскКОАГЕТМОВІ І РМІ СОАНИЇ ТРЕОУМАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОАТІ РМІ СО
АНаГТРООММАІАЗММИасаКкКОАГЕТМОВІ І РМІ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОАТ І РМІ СО
АНИаГТРООУММАІАВМасакоОАЕТМОВІ ЇЇ РМ СОАНСОИГ ТРЕОУММАІАЗНОССОКОА ЕТМОВІ І РМІ С
ОАНаТагТтРООМУМАІАЗМасакодІ ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИЇ ТРЕОММАІАЗНОСОКОА ЕТМОНВІ І РМІ.
СОАНаг ТРООУМАІАЗМасакода ЕТМОВІЇ РМ СОАНОИаЇ ТРООУМАІАЗММИаскоОАГЕТМОВИЇ РУ
ІГСОАНагтТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИаИаї ТРООУМАІАЗМОасСИкКОАГЕТМОВІИ Р
МІ СОАНаг тТРООУМАІАЗМИасаколаІ ЕТМОВІІ РМІ СОАНаї ТРООУМАІАЗМОаСсаИвВРАЇГ Е (ЗЕО 10
МО: 223)
Вереа! 0052 Т02-І
ГТРООММАІАЗМИасСаТкод г ЕТМОВІ І РМ СОАНОЇ ТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГТРЕОУММАІАЗНОСОКОАЇ ЕТМОВІ І РМІ СОАНИа ТРОСОУМАІАЗМИаСсСИТкоОАГЕТМОВІІ РМІ С
ОАНаіг ТРЕОУМАІАЗНОССИКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗНОСОКОА ЕТМОВІ І РМІ.
СОАНаг ТРООУМАІАЗМасакода ЕТМОВІЇ РМ СОАНОЇ ТРЕОУМАІАЗМІСОСКОАГЕТМОАТІ РМ.
СОАНаіг ТРЕСОУМАІАЗНОССОКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОИЇ ТРООММАІАЗМасСаТкоОАГгЕТМОВІ РУ
І СОАНаг ТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИИЇ ТРЕОММАІАЗМІСИСКОАГЕТМОА РУ
ІГСОАНагтТРЕОУМАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІІЇ РМ СОАНИИЇ ТРЕОММАІАЗНОСОКОАГЕТМОНВІ І Р
МІ. СОАНИаг ТРЕОММАІАЗМІССКОАГЕТМОАТІ РМ СОАНИИГ ТРООМУММАІАЗМасСИВРАГЕ (5ЕО 1
МО: 224)
Вереа:! 0052 Т02-8
ГТРООММАІАЗМИасСаТкод ЕТМОВІ І РМ СОАНИОИаГ ТРООУММАІАЗММИаСКОАЕТМОВІ І РМІ СО
АНСаГТРЕОУММАІАЗНОСОКОАЇ ЕТМОВІ І РМІ СОАНИа ТРОСОУМАІАЗМИаСсСИТкоОАГЕТМОВІІ РМІ С
ОАНаІг ТРЕОУМАІАЗНОССОКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНИаЇ ТРООУМАІАЗМИасСаИТкоАГгЕТМОНВІ І РМІ.
СОАНаг ТРООУМАІАЗМасакода ЕТМОВІЇ РМ СОАНИИЇ ТРЕОУМАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОА І РМІ.
СОАНаіг ТРЕОУМАІАЗНОСОКОАГЕТМОВІ І РМ СОАНОИЇ ТРЕОУМАІАЗНОССОИКОАЕТМОВІ РМ
І СОАНаг ТРОСОУМАІАЗМИасакоА ЕТМОВІ І РМ СОАНОИа ТРООММАІАЗММИасСКкКОАГЕТМОВІ І Р
МІ СОАНаг ТРОСОУМАІАЗМИасакол ЕТМОВІІ РМ СОАНИОЇ ТРЕОММАІАЗМІССКОАЇ ЕТМОА І Р
Коо) МІ СОАНИаг ТРЕОММАІАЗНОСОИКОА ЕТМОВІ І РМІ СОАНИаИаї! ТРОСУМАІАЗМаСсСВРАЇГ Е (5ЕО 10
МО: 225)
В іншому аспекті інший етап генетичної модифікації клітини може бути способом нарощування ТСКа-дефіцитних Т-клітин, що включає введення ртТа (що також відомий як ргееТтсСка) або його функціонального варіанту в Т-клітину та нарощування клітин необов'язково шляхом стимуляції СОЗ-комплексу. У деяких варіантах здійснення спосіб включає: а) трансформацію клітин з нуклеїновою кислотою, що кодує щонайменше фрагмент рта, для підтримування експресії на поверхні СОЮЗ; Б) експресію зазначеного рТа у клітинах; та с) нарощування клітин необов'язково шляхом стимуляції СОЗ-комплексу.
Також тут передбачені способи одержання Т-клітин для імунотерапії, що включають етапи способу нарощування Т-клітин, передбаченого тут. У деяких варіантах здійснення рта- полінуклеотидна послідовність може бути введена випадковим чином або шляхом гомологічної рекомбінації. У деяких варіантах здійснення інсерція може бути асоційована з деактивацією гену тека.
Можуть використовуватися різні функціональні варіанти рТа. «Функціональний варіант» пептиду відноситься до молекули, що по суті подібна всьому пептиду або його фрагменту. «Фрагмент» ртТс. або його функціональний варіант відноситься до будь-якого піднабору молекули, тобто коротшого пептиду, ніж рТа повної довжини. У деяких варіантах здійснення рта або функціональні варіанти можуть бути, наприклад, рТай повної довжини або версією сС- кінцевого вкороченого ртТа. С-кінцевий вкорочений ртТа не має одного або більше залишків на С- кінці. Як необмежуючі приклади, версія С-кінцевого вкороченого ртТа не має 18, 48, 62, 78, 92, 110 або 114 залишків з С-кінця білка. Варіанти амінокислотних послідовностей пептиду можуть бути одержані шляхом мутацій у ДНК, що кодує пептид. Такі функціональні варіанти включають, наприклад, делеції з, або інсерції або заміни, залишків всередині амінокислотної послідовності.
Також може бути зроблена будь-яка комбінація делеції, інсерції та заміни для одержання фінального конструкту за умови, що фінальний конструкт має бажану активність, зокрема репаративний синтез функціонального СОЗ-комплексу. У переважному варіанті здійснення щонайменше одна мутація вводиться у різні версії рТа, як описано вище, для впливу на димеризацію. Як необмежуючий приклад, мутований залишок може являти собою щонайменше
УМуА4бК, 022А, К24А, К102А або МК117А білка рТй людини або вирівняні положення із бо застосуванням методу СГО5ТАЇ МУ на сімействі рТа або гомологічному члені. Переважно, рТа або його варіант, як описано вище, містять мутований залишок У/46К або мутовані залишки р22А, К24А, К102А та К117А. У деяких варіантах здійснення зазначений ртТа або варіанти також зшиті із доменом сигнальної трансдукції, таким як СО28, ОХ40, ІСО5, С027, СО0137 (4- 188) та СО8, як необмежуючі приклади. Позаклітинний домен ртТа або варіантів, як описано вище, може бути зшитий з фрагментом ТСКоа-білка, зокрема трансмембранним (і внутрішньоклітинним доменом ТСКа. Варіанти ртай також можуть бути зшиті з внутрішньоклітинним доменом ТСКа.
У деяких варіантах здійснення версії рТй можуть бути зшиті з позаклітинним ліганд- зв'язуючим доменом. У деяких варіантах здійснення рТа або його функціональний варіант є зшитим з фрагментом одноланцюгового антитіла (5СЕм) що містить легкий і важкий варіабельний фрагмент специфічного до антигену-мішені моноклонального антитіла, зв'язаного гнучким лінкером.
Термін «ТСКа-дефіцитна Т-клітина» відноситься до ізольованої Т-клітини, яка не має експресії функціонального ТСКоа-ланцюга. Це може бути виконано різними засобами, як необмежуючі приклади, шляхом інжинірингу Т-клітини таким чином, що вона не експресує будь- який функціональний ТСКа на своїй клітинній поверхні, або шляхом інжинірингу Т-клітини таким чином, що вона продукує дуже малий функціональний ТСКа-ланцюг на своїй поверхні, або шляхом інжинірингу Т-клітини для експресії мутованої або вкороченої форми ТСКа-ланцюга.
ТСКа-дефіцитні клітини більше не можуть нарощуватися через СЮОЗ-комплекс. Таким чином, для вирішення цієї проблеми та для забезпечення можливості проліферації ТСКа-дефіцитних клітин, рТа або його функціональний варіант вводять в клітини, тим самим відновлюючи функцінальний СОЗ-комплекс. У деяких варіантах здійснення спосіб додатково включає введення в зазначені Т-клітини рідкорозщепляючих ендонуклеаз, здатних до селективної деактивації шляхом розщеплення ДНК одного гену, що кодує один компонент рецептора Т- клітини (ТСК). У деяких варіантах здійснення рідкорозщепляюча ендонуклеаза являє собою
ТАЇ Е-нуклеазу.
В іншому аспекті сконструйовані Т-клітини, що одержані способами, описаними тут, можуть бути введені в контакт з біспецифічними антитілами. Наприклад, Т-клітини можуть бути введені в контакт з біспецифічними антитілами ех мімо перед введенням пацієнту або іп мімо після
Зо введення пацієнту. Біспецифічні антитіла містять дві варіабельні області з різними властивостями антигену, які полегшують зближення сконструйованих клітин з антигеном- мішенню. Як необмежуючий приклад, біспецифічне антитіло може бути спрямоване проти пухлинного маркеру та антигену лімфоциту, такого як, наприклад, але без обмеження, СОЮЗ, і має потенціал для переспрямовування й активації будь-яких циркулюючих Т-клітин проти пухлин.
У деяких варіантах здійснення полінуклеотиди, що кодують поліпептиди за даним винаходом, можуть являти собою мРНК, яка вводиться безпосередно в клітини, наприклад, шляхом електропорації. У деяких варіантах здійснення для транзієнтної пермеабілізації живих клітин для доставки матеріалу в клітини може використовуватися технологія сурРиїзе.
Параметри можуть бути модифіковані для визначення умов для високої ефективності трансфекції з мінімальною смертністю.
Також тут передбачені способи трансформації Т-клітин. У деяких варіантах здійснення спосіб включає: введення Т-клітини в контакт з РНК та застосування до Т-клітини швидкої імпульсної послідовності, що складається 3: (а) електричного імпульсу з напруженням у діапазоні від приблизно 2250 до 3000 В на сантиметр; (Б) ширини імпульсу 0,1 ме; (с) інтервалу імпульсу приблизно від 0,2 до 10 мс між електричними імпульсами з етапів (а) і (5); (а) електричного імпульсу з діапазоном напруження від приблизно 2250 до 3000 В з шириною імпульсу приблизно 100 мс й інтервалом імпульсу приблизно 100 мс між електричним імпульсом етапу (Б) і першим електричним імпульсом етапу (с); і (е) чотирьох електричних імпульсів з напруженням приблизно 325 В з шириною імпульсу приблизно 0,2 мс й інтервалом імпульсу 2 мс між кожним із 4 електричних імпульсів. У деяких варіантах здійснення спосіб трансформації Т-клітини включає введення зазначеної Т-клітини в контакт з РНК та застосування до Т-клітини швидкої імпульсної послідовності, що містить: (а) електричний імпульс з напруженням 2250, 2300, 2350, 2400, 2450, 2500, 2550, 2400, 2450, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900 або 3000 В на сантиметр; (б) ширину імпульсу 0,1 мс; (с) й інтервал імпульсу приблизно від 0,2, 0,5,1,2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 мс між електричними імпульсами з етапів (а) і (5); (4) один електричний імпульс з діапазоном напруження від приблизно 2250, 2250, 2300, 2350, 2400, 2450, 2500, 2550, 2400, 2450, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900 або 3000 В з шириною імпульсу 100 мс й інтервалом імпульсу 100 мс між електричним імпульсом етапу (Б) і першим бо електричним імпульсом етапу (с); і (е) 4 електричні імпульси з напруженням приблизно 325 В з шириною імпульсу приблизно 0,2 мс й інтервалом імпульсу приблизно 2 мс між кожним із 4 електричних імпульсів. Будь-які значення, що включені у діапазон значень, описаний вище, вважаються розкритими у даній заявці. Середовище для електропорації може бути будь-яким придатним середовищем, відомим з рівня техніки. У деяких варіантах здійснення середовище для електропорації має провідність у діапазоні від приблизно 0,01 до приблизно 1,0 мілісіменса.
У деяких варіантах здійснення, як необмежуючі приклади, РНК кодує рідкорозщепляючу ендонуклеазу, один мономер рідкорозщепляючої ендонуклеази, такої як напів- ГАЇ Е-нуклеаза,
САК, щонайменше один компонент багатоланцюгового химерного антигенного рецептору, ртТа або його функціональний варіант, екзогенну нуклеїнову кислоту та/або один додатковий каталітичний домен.
Сконструйовані імунні клітини
Винахід також передбачає сконструйовані імунні клітини, що містять будь-який із полінуклеотидів САК, що описані тут. У деяких варіантах здійснення САК може бути введений в імунну клітину як трансген через плазмідний вектор. У деяких варіантах здійснення плазмідний вектор може також містити, наприклад, селективний маркер, який забезпечує ідентифікацію та/або селекцію клітин, які отримав вектор.
Поліпептиди САК можуть бути синтезовані іп 5йи у клітині після введення полінуклеотидів, що кодують поліпептиди САК в клітині. Як альтернатива, поліпептиди САК можуть бути одержані за межами клітин і потім введені в клітини. Способи введення полінуклеотидного конструкту в клітини відомі з рівня техніки. У деяких варіантах здійснення способи стабільної трансфекції можуть використовуватися для інтеграції полінуклеотидного конструкту в геном клітини. В інших варіантах здійснення способи транзієнтної трансфекції можуть використовуватися для транзієнтної експресії полінуклеотидного конструкту, при цьому полінуклеотидний конструкт не інтегрується в геном клітини. В інших варіантах здійснення можуть використовуватися вірус-опосередковані способи. Полінуклеотиди можуть вводитися в клітину за допомогою будь-яких придатних засобів, таких як, наприклад, рекомбінантні вірусні вектори (наприклад, ретровіруси, аденовіруси), ліпосоми і тому подібне. Способи транзієнтної трансфекції включають, наприклад, але без обмеження, мікроін'єкцію, електропорацію або бомбардування частинками. Полінуклеотиди можуть бути включені в вектори, такі як,
Зо наприклад, плазмідні вектори або вірусні вектори.
Також тут передбачені ізольовані клітини та клітинні лінії що одержані описаними вище способами інжинірингу клітин, що передбачені тут. У деяких варіантах здійснення ізольована клітина містить щонайменше один САК, як описано вище. У деяких варіантах ізольована клітина містить популяцію САК, при цьому кожний САК містить інші позаклітинні ліганд- зв'язуючі домени.
Також тут передбачені ізоловані імунні клітини, що одержані відповідно до будь-якого одного зі способів, що описані вище. Будь-яка імунна клітина, що здатна до експресії гетерологічних
ДНК, може бути використана з метою експресії САК, що являє інтерес. У деяких варіантах здійснення імунна клітина являє собою Т-клітину. У деяких варіантах здійснення імунна клітина може бути одержана з, наприклад, але без обмеження, стовбурової клітини. Стовбурові клітини можуть бути дорослими стовбуровими клітинами, стовбуровими клітинами ембріонів, що не відносяться до людських, конкретніше стовбуровими клітинами, що не відносяться до людських, стовбуровими клітинами пуповинної крові, клітинами-попередниками, стовбуровими клітинами кісткового мозку, індукованими плюрипотентними стовбуровими клітинами, тотипотентними стовбуровими клітинами або гематопоетичними стовбуровими клітинами. Представниками людських клітин є клітини СЮОЗ4ж. Ізольована клітина також може бути дендритною клітиною, дендритною клітиною-кілером, огрядною клітиною, МК-клітиною, В-клітиною або Т-клітиною, вибраною з групи, що складається із запальних Т-лімфоцитів, цитотоксичних Т-лімфоцитів, регуляторних Т-лімфоцитів, Т-лімфоцитів пам'яті або Т-лімфоцитів хелперів. У деяких варіантах здійснення клітина може бути одержана з групи, що складається з Т-лімфоцитів СО4- і Т- лімфоцитів Сов.
Перед нарощуванням і генетичною модифікацією, джерело клітин може бути одержане від суб'єкта за допомогою широкого ряду необмежуючих способів. Клітини можуть бути одержані з ряду необмежуючих джерел, у тому числі мононуклеарних клітин периферійної крові, кісткового мозку, тканини лімфовузла, пуповинної крові, тимусної тканини, тканини з сайту інфекції, асцитів, плеврального випоту, тканини селезінки та пухлин. У деяких варіантах здійснення може бути використана будь-яка кількість Т-клітин, доступна та відома фахівцям у даній галузі техніки. У деяких варіантах здійснення клітини можуть бути одержані від здорового донору, від пацієнта, у якого діагностували рак, або від пацієнта, у якого діагностували інфекцію. У деяких бо варіантах здійснення клітини можуть бути частиною мішаної популяції клітин, які являють різні фенотипічні характеристики.
Також тут передбачені клітинні лінії, що одержані з трансфектованої Т-клітини відповідно до будь-якого з описанх вище способів. Також тут передбачені модифіковані клітини, що є резистентними до імуносупресивної терапії. У деяких варіантах здійснення ізольована клітина за винаходом містить полінуклеотид, що кодує САК.
Імунні клітини за винаходом можуть бути активовані та нарощені перед або після генетичної модифікації Т-клітин із застосуванням способів, які загалом описані, наприклад, але без обмеження, у патентах США 6,352,694; 6,534,055; 6,905,680; 6,692,964; 5,858,358; 6,887,466; 6,905,681; 7,144,575; 7,067,318; 7,172,869; 7,232,566; 7,175,843; 5,885,223; 6,905,874; 6,797,514; 6,867,041; та публікації заявки на видачу патенту США Мо 20060121005. Т-клітини можуть бути нарощені іп міго або іп мімо. Загалом, Т-клітини за винаходом можуть бути нарощені, наприклад, шляхом контакту з агентом, який стимулює ТСК-комплекс СОЗ та костимулюючу молекулу на поверхні Т-клітин для створення сигналу активації для Т-клітини. Наприклад, для створення сигналу активації для Т-клітини можуть бути використані такі хімічні речовини, як кальцій- іонофор А23187, форбол 12-міристат 13-ацетат (РМА) або мітогенні лектини, такі як фітогемаглютинін (РНА).
У деяких варіантах здійснення популяції Т-клітин можуть бути стимульовані іп міго шляхом контакту з, наприклад, антитілом до СОЗ або його антиген-зв'язуючим фрагментом, або антитілом до СО2, імобілізованим на поверхні або шляхом контакту з активатором протеїнкінази С (наприклад, бріостатином) разом із кальцій-іонофором. Для костимуляції допоміжної молекули на поверхні Т-клітин використовується ліганд, який зв'язується з допоміжною молекулою. Наприклад, популяція Т-клітин може бути введена в контакт з антитілом до СОЗ і антитілом до СО28 в умовах, що є придатними для стимуляції проліферації
Т-клітин. Умови, що є придатними для культури Т-клітин всередині придатного середовища (наприклад, мінімальне підтримуюче середовище або середовище КРМІ 1640 або Х-Мімо 15 (Гопга)), яке може містити фактори, що є необхідними для проліферації та життєздатності, у тому числі сироватку (наприклад, фетальну бичачу сироватку або сироватку людини), інтерлейкін-2 (ІІ -2), інсулін, ТЕМ-у, 1-4, 1-7, СМ-С5Е, 1-10, 1-2, 1-15, ТОЕр та ТМЕ, або будь- які інші добавки для росту клітин, що відомі фахівцю у даній галузі техніки. Інші добавки для
Зо росту клітин включають, але без обмеження, поверхнево-активну речовину, плазманати та відновлювацчі, такі як М-ацетил-цистеїн та 2-меркаптоетанол. Середовище може включати КРМІ 1640, АІМ-М, ОМЕМ, МЕМ, а- МЕМ, Б-12, Х-Мімо 10 та Х-Мімо 20, Оріїйті;ег, із доданими амінокислотами, піруват натрію та вітаміни, що є вільними від сироватки або із доданою придатною кількістю сироватки (або плазми), або визначений набір гормонів і/або кількість цитокіну(ів), достатнього(їх) для росту та нарощування Т-клітин. Антибіотики, наприклад, пеніцилін та стрептоміцин, включені тільки до експериментальних культур, а не до культур клітин, які підлягають інфузії суб'єкту. Клітини-мішені підтримуються в умовах, що є необхідними для підтримування росту, наприклад, придатній температурі (наприклад, 37" С) й атмосфері (наприклад, повітря плюс 595 СО»). Т-клітини, які були піддані різним значенням часу стимуляції, можуть проявляти різні характеристики.
У деяких варіантах здійснення клітини за винаходом можуть бути нарощені шляхом сокультивації з тканиною або клітинами. Клітини також можуть бути нарощені іп мімо, наприклад, у крові суб'єкта після введення клітини суб'єкту.
У деяких варіантах здійснення ізольована клітина за даним винаходом містить один деактивований ген, що вибраний із групи, яка складається з СО52, СК, СК, РО-1, СТІ А-4,
ГАСЗ, Тіт3, ВТГА, ВУ55, ТІСІТ, В7Н5, ГАІКІ!, 5ІСГЕС10, 284, НА, ТСКа та ТСКВД і/або експресує САК, багатоланцюгового САК та/або трансгена ртТа. У деяких варіантах здійснення ізольована клітина містить полінуклеотиди, що кодують поліпептиди, що містять багатоланцюговий САКЕ. У деяких варіантах здійснення ізольована клітина за даним винаходом містить два деактивованих гена, що вибрані з групи, яка складається з: СО52 та ОК, СО52 та
ТСКа, СОК52 та ТСЕВД, СЕ та ТСКа, СК та ТСЕВД, ТСКа та ТСКВ, РО-1 та ТСКа, РО-1 та ТОК,
СТІ А-4 та ТСКа, СТІ А-4 та ТСЕВ, І АОЗ та ТСКа, І АОЗ та ТОВ, Тіт3З та ТСКа, ТітЗ та ТСЕВ,
ВТІА та ТСКа, ВТ А та ТСКВД, ВУ55 та ТСКа, ВУ55 та ТСЕВД, ТІСІТ та ТСКа, ТІСІТ та ТОК,
В7Н5 та ТСКа, В7Н5 та ТОВ, І АІКІ та ТСа, ІГ АІКІ та ТСКВ, 5ІСІ ЕС10 та ТСКа, ІСІ ЕС10 та
ТСЕВ, 284 та ТСКа, 284 та ТСКВ та/або експреує САК, багатоланцюгового САК та/або трансгена рта.
У деяких варіантах здійснення ТОК роблять не функціональним у клітинах за винаходом шляхом деактивації гену ТСКа та/або гену(ів) ТСКВ. У деяких варіантах здійснення передбачений спосіб одержання модифікованих клітин, що одержані від індивідууму, в якому бо клітини можуть проліферувати незалежно від сигнального шляху головного комплексу гістосумісності (МНС). Модифіковані клітини, які можуть проліферувати незалежно від сигнального шляху МН та які можуть бути одержані даним способом, входять в обсяг даного винаходу. Модифіковані клітини, що розкриті тут, можуть бути використані для лікування пацієнтів, що потребують цього, від реакції «хазяїн проти трансплантата» (Нис) і захворювання «трансплантат проти хазяїна» (Сун); таким чином, в обсяг даного винаходу входить спосіб лікування пацієнтів, що потребують цього, від реакції «хазяїн проти трансплантата» (Нуибс) і захворювання «трансплантат проти хазяїна» (сМНО), що включає лікування зазначеного пацієнта шляхом введення зазначеному пацієнту ефективної кількості модифікованих клітин, що містять деактивовані гени ТСКа та/або ТСКВ.
У деяких варіантах здійснення імунні клітини конструюють резистентними до одного або більше препаратів для хіміотерапії. Препарат для хіміотерапії може бути, наприклад, аналогом пуринового нуклеотиду (РМА), тим самим роблячи імунну клітину придатною для лікування раку, в якому комбінується адоптивна імунотерапія та хіміотерапія. Приклади РМА включають, наприклад, клофарабін, флударабін і цитарабін окремо або в комбінації. РМА метаболізуються за допомогою кінази дезоксицитидину (аск) в моно-, ди- та трифосфатний РМА. Їх трифосфатні форми конкурують з АТР за синтез ДНК, діють як проапоптотичні агенти та являють собою потентні інгібітори рибонуклеотидредуктази (КМК), яка залучена у продукцію тринуклеотиду.
Тут передбачені ЕСЕРмМІ-специфічні САК-Т-клітини, що містять деактивований ген асСК. У деяких варіантах здійснення аСК-нокаутні клітини одержані шляхом трансфекції Т-клітин із застосуванням полінуклеотидів, що кодують специфічну ТАГ- -нуклеазу, спрямовану проти генів аск, шляхом, наприклад, електропорації мРНК. асСК-нокаутні ЕСЕКМПІ-специфічні САК-Т- клітини є резистентними до РМА, у тому числі, наприклад, клофарабіну та/або флударабіну, та зберігають Т-клітинну цитотоксичну активність у напрямку ЕСЕКмМПІ-експресуючих клітин. В іншому прикладі препарат для хіміотерапії може бути, наприклад, СО52-націленою молекулою, такою як моноклональне антитіло до СО52 (наприклад, алемтузумаб). СО52 являє собою білок, що присутній на поверхні лімфоцитів, а антитіла до СО52 можуть індукувати апоптоз і лізис імунних клітин через антитіло- та комплементзалежну цитотоксичність, що призводить до лімфодеплеції. Тут передбачені ЕСЕКмМПІ-специфічні САК-Т-клітини, що містять деактивований ген СО52. У деяких варіантах здійснення СО52-нокаутні клітини одержані шляхом трансфекції
Зо Т-клітин із застосуванням полінуклеотидів, що кодують специфічну ТАЇ -нуклеазу, спрямовану проти гену СО52, шляхом, наприклад, електропорації мРНК. СО52-нокаутні ЕСЕКмМПІ-специфічні
САВ-Т-клітини є резистентними до молекул, специфічних до СО52, у тому числі, наприклад, алемтузумабу, і зберігають Т-клітинну цитотоксичну активність у напрямку ЕСЕЕМІІ- експресуючих клітин у присутності молекул, специфічних до СО52.
У деяких варіантах здійснення ізольовані клітини або клітинні лінії за винаходом можуть містити рТа або його функціональний варіант. У деяких варіантах здійснення ізольована клітина або клітинна лінія може бути додатково генетично модифікована шляхом деактивації гену тека.
У деяких варіантах здійснення САК-Т-клітина містить полінуклеотид, що кодує суїцидальний поліпептид, такий як, наприклад, КОК8. Див., наприклад, УМО2013153391А, яка включена сюди у всій свої повноті за допомогою посилання. У САК-Т-клітинах, що містять полінуклеотид, який кодує суїцидальний поліпептид, суїцидальний поліпептид експресується на поверхні САК-Т- клітини. У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид містить амінокислотну послідовність, показану у БЕО ІЮ МО: 226.
СРУБМРБОІ СБИаСІСИЗЕЇ РТОСТЕЗМУЗТМУЗРАКРТТТАСРУЗМРБОЇ СБсССОЗРАРАРРТРА
РТІАБОРІ БІ АВРЕАСАРАДССАМУНТАИаї ОБГАСОЇМІМАРІ АЯТСОМИ І 5
ГМТТМСОМНАМАААУСКСРАРМ (ЗЕО ІЮО МО. 226).
У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид може також містити сигнальний пептид на амінокінці. Коли суїцидальний поліпептид експресується на поверхні САК-Т-клітини, зв'язування рітуксимабу з К-епітопами (тобто епітопом, що розпізнається рітуксимабом -
СРУБМРБІ С (5ЕО ІЮО МО: 256)| поліпептиду викликає лізис клітини. Більше, ніж одна молекула рітуксимабу може зв'язуватися у розрахунку на один поліпептид, що експресований на поверхні клітини. Кожний К-епітоп поліпептиду може зв'язуватися з окремою молекулою рітуксимабу.
Делеція ЕСЕКмМІЇ-специфічних САК-Т-клітин може проводитися іп мімо, наприклад, шляхом введення рітуксимабу пацієнту. Рішення щодо делеції перенесених клітин може бути результатом небажаних ефектів, що були виявлені у пацієнта, які відносяться до перенесених клітин, як, наприклад, коли виявлені неприйнятні рівні токсичності.
У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид може містити один, два, три або більше епітопа, що розпізнаються антитілом (наприклад, рітуксимаб). бо У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид може бути забезпечений у
ЕСЕВМПІ-специфічній САК-Т-клітині у поліпептиді, який відокремлений від поліпептиду, що містить САК. У деяких варіантах здійснення суїцидальний поліпептид може бути забезпечений у
ЕСЕВМПІ-специфічній САК-Т-клітині у тому ж поліпептидному ланцюгу, що і поліпептид САК. У
САК, що містять суїцидальний поліпептид, суїцидальний поліпептид, зазвичай, забезпечений у позаклітинній частині САК.
У САК, що містить суїцидальний поліпептид, суїцидальний поліпептид може містити, наприклад, одну або більше копій амінокислотної послідовності епітопу, що розпізнається рітуксимабом |ІСРУЗМРБІ С (5ЕБО ІО МО: 256)» Суїцидальний поліпептид може бути розташований в інших положеннях у САК. Наприклад, суїцидальний поліпептид може бути М- кінцевим до 5сЕм або він може бути С-кінцевим до 5сЕм у САК. У деяких варіантах здійснення суїцидальний пептид може знаходитися між 5сЕм і шарнірною областю САК. У деяких варіантах здійснення САК може містити більше, ніж один суїцидальний поліпептид. Наприклад, САК може містити суїцидальний поліпептид, що є М-кінцевим до 5сЕм, і суїцидальний поліпептид, що є С- кінцевим до 5СЕм. Кожний з цих поліпептидів може містити одну або більше копій епітопу, що розпізнається рітуксимабом. Наприклад, САК може містити перший суїцидальний поліпептид у положенні, що є М-кінцевим до 5сЕм, причому перший суїцидальний поліпептид містить одну копію епітопу, що розпізнається рітуксимабом, і другий поліпептид у положенні, що є С-кінцевим до 5сЕм, причому другий суїцидальний поліпептид містить дві копії епітопу, що розпізнається рітуксимабом.
Також тут передбачені нуклеїнові кислоти, що кодують ЕСЕРВМІПІ-специфічні САК, які містять послідовність суїцидального поліпептиду в САК.
У прикладі суїцидальний поліпептид у тому самому поліпептидному ланцюгу, що і ЕСЕЕМПІ- специфічний САК, може мати послідовність, яка описана тут як «суїцидальна послідовність
К2». Суїцидальна послідовність К2 містить дві копії епітопу, що розпізнається рітуксимабом
ІСРУЗМРБЗІ С (5БО ІО МО: 256)). Такі ЕСЕКМІІ-специфічні САК можуть називатися тут «ЕСЕКМІПІ-К2 САК». У таблиці 50 наведені амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКМІ-В2
САК за даним винаходом. У таблиці 50 послідовність сигнального/лідерного пептиду позначена жирним, б5-лінкер ((50(0505)4 (БЕО ІЮ МО: 202)| підкреслений, а суїцидальна послідовність К2 виділена жирним і підкреслена. У таблиці БЕ наведені приклади послідовностей нуклеїнових кислот, що кодують приклади ЕСЕКМмМИІ-К2 САК за даним винаходом.
Таблиця 50:
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКмМПІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця)
МАГРМТАПІІ РІ АГ І НААВРОМТІ КЕЗОРМІ МКРТЕТІ ТІ | СОва сигнальний тТеТтУБаг5І ММАВМамуЗУЛАОРРОКАЇ ЕМ РАНІЄЗТОЕКО | пептид;
ЕВТ5І ВЗА ТІ ЗКОТ5КБОММІ ТМТГММОРМОТАТУМСАНО 14С11 МН (Таблиця 1,
Зз5ЗМУЕсУгриусосі Утиззасасаазаасавасасвссьх| БОЮ МО: 15); сСОазЕІММТО5РАТІ 5БМОРОЕВАТІ БСНАБОЗУЗММІ АМУМО | Ссі5-лінкер;
ОКРИОаОАРАП ІМаАЗТВАТаУРАНЕЗИаЗОЗаИатЕН5БІ ТІ 14С11 М. (Таблиця 1, 14с11- | ОБЕОРГАМУУЕСООУКОМ/РЕТРОРОТКУЕІКаЗзСссаЗСРУ | 5ЕОІЮ МО: 16); до зМРЗ сЗзасеазСсРУЗМРЗІ СЗаСООаЗІТТРАРАРРТРА )| суїцидальна
РТІАБОРІ БІ АРЕАСАРААССАМНТВИЇ ОБАСОЇМІМАРІ А послідовність К2; аТСОамМ БІ МТ МСКВа КК І МІЕКОРЕМАРМОТТОЕЕ Сова шарнір; расзСсвЕРЕЕЕЕСССЕЇ ВУКЕЗАЗАВАРАМООСОМОЇ ММ | СОва ТМ;
ЕМ аАРЕЄЕМОМІ ОКАВИВОРЕМСОЕСКРАВКМРОЕСІ ММЕ | сигнальний домен 4-
ГОКОКМАЕАУЗЕСМКаЕнАНОКИаИнраї мові 5 ТАТКОТ 188;
МОАЇ НМОАЇІ РРА сигнальний домен СОЗ
ЗЕО ІЮ МО: 248 дзета
МАГРМТАПІІ РІ АГ І НААВРОМТІ КЕЗОРМІ МКРТЕТІ ТІ | СОва сигнальний зЗ2гА10- | ТСТУБЗОаЕ5І БМАВМОаУЗУЛАОРРОКАГЕУМІ АНІЕЗТОЕК5БІ | пептид; г ВААБІ АЗАІ ТІ ЗКОТ5КЗОММІ ТМІММОРМОТАТМЕСАНОВ | 32А10 МН (Таблиця 1
ЗзМУєаУгруусості утизвассасазасссвасававасі ЗЕО ІЮО МО: 11); сОазЕМУМТО5РАТІ 5БМ5РОЕВМТІ БСВАБОБЗУЗОЗМЕАМУМ | С5-лінкер;
ОСООВРСООАРВІ Г.МСАТТВАТа РОВЕЗаБаБОаТЕМІСТІЗО | 32А10 МІ. (Таблиця 1
Таблиця 50:
Амінокислотні послідовності прикладів ЕСЕКмМПІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
САН Амінокислотна послідовність САК (Компоненти по порядку від М-кінця до
С-кінця)
ГОЗЕОБРАЇМЕСООУКОМ РЕТРаРОЗКУІКОЗасОсавСРУ | 5ЕО ІЮО МО: 12); 5яРЗ сЗзасаа5СРУЗМРОЗІ ССС СОЗІТТРАРАРРТРА | суїцидальна
РТІАБОРІ БІ АРЕАСАРААССАМНТВИЇ ОБАСОЇМІМАРІ А послідовність К2;
СТСамМП 5І МІТІ УСКвВОаАККІ МЕЕКОРЕМАРМОТТОЕЕ Сова шарнір; расзСсвЕРЕЕЕЕСССЕЇ ВУКЕЗАЗАВАРАМООСОМОЇ ММ | СОва ТМ;
ЕМ аАРЕЄЕМОМІ ОКАВИВОРЕМСОЕСКРАВКМРОЕСІ ММЕ | сигнальний домен 4-
ГОКОКМАЕАУЗЕСМКаЕнАНОКИаИнраї мові 5 ТАТКОТ 1вВ;
МПА НМОАЇГРРА(ЗЕО ІЮ МО: 249) сигнальний домен СОЗ дзета
МАГРМТАГІІ РІ АГ НААВРЕМОЇ МЕЗУУСМІ МКРОСБІ А | СОва сигнальний
І ЗСААБИагвІєММАМУМЗУУВОАРаКаИгеЕУМмаТнвІКЗКЗОсж»яй пептид;
ТТОМААРМКОВЕТІЗАВОЗКОТІ М ОММаІ КТЕОТАМУЕСТ | 2689 УН (Таблиця 1,
ТтТАРОаРЕОУМСОСТІ УТУИЗБСОСОСОСЗзССОСаСОСССИВИС ЗЕО І МО: 41); аавріМмгтТоО5РІ БІ РУТРаЕРАБІЗБСНЗЗОВІ І НАОСЕММУ! | Сі5-лінкер;
ОМРГОКРООБРОГ ІМ АБ5БВАБаМРОВЕЗОаЗОБОТОБТІ | 2689 М (Таблиця 1, 2689- КІЗАМЕАЕОМамМмУУСМОАГОТРІТРСОСТВІ БІК ЗЕО І МО: 42); до азасеоаЗСРУЗМРЗІ СЗСсСОоабЗСРУЗМРЗІ СЗаСОС5І | суїцидальна
ТТРАРАРРТРАРТІАБОРІ 5І АРЕАСАРААДЕСАМУНТВа о | послідовність Кг;
АСОІМІМАРІ ДИТСОИМИ І 5І МІТІ МСКАСАККІ І МІЕКОРЕ Сова шарнір;
МАРМОТТОЕЕрОаС5ЗСВЕРЕЕЕЕСОСЕЇ ВУКЕЗАБЗАБАРА | СОва ТМ;
УООСОМОЇ УМЕІ М АВЕЕМОМІ ОКАВЯВОРЕМИаСКРА сигнальний домен 4-
АКМРОЕСІ УМЕГ ОКОКМАЕАУЗЕІСМКОаЕВНАННИКИаХНнОСІ | 1ВВ;
МОСІ 5ТАТКОТУОАЇ НМОАІ РРА сигнальний домен СОЗ
ЗЕО ІЮ МО: 250 дзета
МАГРМТАГІІ РІ АГ НААВРЕМОЇ МЕЗСССІ МКРОСБІ А | СОва сигнальний
І 5ЄСЕАБаЕєТтТЕЗВАМ МЗУУУВОАРОКаї ЕУУМавІКЗКТра пептид;
СТТОМУМРІ МЕ АРИІЗАООБАМТІ МІ ОЇ ММІ КТЕОТАММ УС 3008 МН (Таблиця 1, тУР2азУСУМмСавОоСстІ УтТУЗасасзасава7За,СИавОас ЗЕО І МО: 37); аавріМмМтТоО5РІ БГРМТРИаЕРАБІЗСНЗЗОБІ І НМКАММУЇ | Сі5-лінкер;
ОМРГОКРООБРОГ ІМ АВМВАЗИУРОВЕЗОаСсСОБОТОЕТІ | 3008 Мі (Таблиця 1, зорв- КІЗАМЕАЕОМаУУМСМОАООТРІТРСОСТВІ ЕІКОЗСаССОС | 5ЕО ІО МО: 38); до 5СРУЗМРБЗІ СЗСОСОЯЗСРУЗМРБЗІ СЗаСССОЗІТТРАРВАР | суїцидальна
РТРАРТІАБОРІ 5І АРЕАСАРААССАМУНТВИї ОБАСОІМІМ послідовність К2;
АРІ АСТССОМИ І БІ МІТІ МСКАСАККСЇ МІЕКОРЕМАРМОТТ | СОва шарнір;
ОЕЕРИСЗСАЕРЕЕЕЕСИаСЕЇ ВУКЕЗАЗАВАРАМООСОМ СОва ТМ;
ОЇ УМЕІ МФВ ВЕЕМОМІ ОКАВАВОРЕМИСКРАВКМРОЕ сигнальний домен 4-
СІ ММЕГОКОКМАЕАУЗЕМКаЕнННОСКИаТНнОраї МОСіТ | 1вВ;
АТКОТУБАЇІ НМОАЇГ РРА (5ЕО ІО МО: 251) сигнальний домен СОЗ дзета
Таблиця 5Е
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕК МІІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
АтаасСАстТассаасталссаоссостастастасєсттаассстас | Сова тастасдСса,асАдасСАаАССССАпатаАСАСТОаААсасАСсАсСС | сигнальний 14011-82 соссосатастаайТаААаССтТАСАСаАСАСАСТаАСССТОаАСста | пептид;
САСАСТОАаССс,СастСстоССтТаААСААТаСААласАтТасвассита | 14211 УН тостапАтТсАасаСАаССАССтааСААвсассстацвАатаст ос | (Таблиця 1,
СССАСАТСТТ ТАйСАССОСАСОСАСААДаТСОСТТТСИаСАСАТСТСТа | БЕО ІЮ МО: 15); 5О0
Таблиця 5Е
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕК МІІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
АаААдаСАасастАСССстаАаСААасАТАСААаСААатосСАці | ао-лінкер; тастастТаАССАТаАСАААСАтТапАсоСстаТатацвАтТАССасСсСАС |14С11 Му
АТАСТАТТиТаСССОЖСЮСАСАССТОСААТТАССАСаСаасСтТАТТТСИ | (Таблиця 1,
АТттТАСТаСС:4ьЬОССАСОвасАтТоСсТаЇсталссататотлаСаасСиосі| БЕО ІЮ МО: 16); ссассастотасаа,аада,ааАдсадллаСавАасАааАсцАтосСасі суїцидальна ссессасвастсТаАвАТСаТаАТаАСССАаТоСССАасСсСАСА| послідовність статотаталассСсАаасасАааАааАасАасСсСАсостатсттасАасии | Н2; сстТоССАаатотТатаАаСААСААТОТОаССТасТАТСАаСАСААДИ СОва шарнір; сстаасСсАдвассСсСААд,вастастаАТСсТАСапАаСААасСАССА| СОва ТМ; вАаСААСАасаАХатасстасСАдаа т тстоСацсАТСТаАСАаССа | сигнальний
САССОСАСТТТСТСоТаАСААТСТОСТОтТотТасСсАс,САасСаАасАСТ | домен 4-188; тсессататАттттатсАасСАаТтАСААаСАТТааССАТТСАСОС | сигнальний тптаасссСааСАСААдАсСатасАаАТСААа,асастоСбасАсаАа домен соЗ3 слдапАТоСТасссСсСтТАТТОСААСССТІОТОТатТаСАа,СасАСО | дзета дасдасАдастатСсСАТАСТОСААТОССТОССТОаТОАСТОСОас сасапйАСаАТосСАССАСААССССАаСАССТАЧАССАССААСОС
САаСАССААСААТСОСАТоССАССССТОТОИ ТСсТОТОаСС,СаСССаА саСсАТасСааасСАааСсАа,аСАасавасваСсасСаТасСАСАССАИасИас сстапАсттасстасСасАТАТСТАТАТСТаСИаСАССАСТОС,САС вААССТИаТасСаТастастастадасСстастСАТСАСССТатА тасддасаса,аасСбасвААаАдастастатТАСАТСТТСААасСАС сСсТтТАТОСОЯСССАаТтасСАаАСААСССАсСалсаАдасвсАсасст сстостатсасттооСстТадАдадсаАдасАаасяаасАтатааст ссасатадаатттоссастотасСсадтасссСсАасстТАТСАС
САСОСИССАСААССАастатАСААСаАастадаттаавассСсоаА сдадасАаТАСсаАСатаставАТААаАХ,асАсапаААпАпАТОС
СсададтасадсасАдасстоааАпАААаАДАСССАСАааадиаса
ССстТатТАТААТОДИаСТаСАСААдаспАСААаАатТаа,аосвАсасстАС тЄтТаАдаАтТсааСАТаААДааасАа,сАааАдсасассосацваСААасаАд
СсАССАТаССсСсТатАТСАСДаССТатоСАССасССАСАААСИАСА
СсСстТАСаАтТассстасСАСАТаСсАасСасостасСсСтоСАдаатТад
ЗЕО ІЮ МО: 252
АтаасСАстТассаасталссаоссостастастасєсттаа!ссстас | Сова тастасдСса,асдасСАаАССССАпатаАСАСТОаАдАаСсАаТоСаИаИі сигнальний сссса,атастаайТаААаССтТАСАпАСпАСАСТаАСССтТаАСстас | пептид;
АсСАсталассастотсттаАаСААСасСААдс,ааАатасвасатат | З2АТо0 УН сставаАТсАааасСАааСсСАсСстааСсАлаа,ассСстаавАатаастоасі | (Таблиця 1 5ЕО
СССАСАТСТ ТТССАССОАСПАпААаТсСтТАТССОИаАСАдаТасста І МО: 11); сестосссасСстаАсоСтТаАаСААдаспАТтТАСАТССААатстТСАса | с5-лінкер; тастастТаАССАТаАСАААСАТапАсоСстТаТатацвАТАССассСАС |З2А10 Му
АТАСТІОТОаТаСсСсСсОаасАСАаСТоСААТТАСОСА,СИаСссСтТАТТТТа | (Таблиця 1 ЗЕО
АТТАСТаОСССССАСсОаасСАсоСстастаАасАаататстАааСацАааИ | о Мо: 12);
З2А10-82 | АаСОАССпАдАлаСа,асАасаАасаАхааАтсАсИаСсаваСа,асовастстаці суїцидальна ссассассасАадаСссАЧватасТСАТОАСССАаТтсСтТССАасСсАС | послідовність
АстадссататосСсСАвалсаасСсасСсаталсосставдастасса |Не; сабстотТсАсСАасаСататосТСстТААСТТсаСсСстаатТАТСАаСАасСіІ Сова шарнір; сассСапАсАдааСАССАлаастастастатАСааАСасСААССА |СОва ТМ;
САдДадасСААСАсСИа!сстасстааСАаваТ тт оСсаастстаасАа | сигнальний
СсааСАССОаАСпААТАТОСТОаАСААТсАЛаСстТоССстасСАцдасСаИда | домен 4-188; вАСТТсаССАТСТАТТТТТаТсСАаСАаТтТАСААСааАТТааСсССсСАТТОСЇ сигнальний
АосТІТаавоосС,сСасСстоСААда,аатТацпАСАТСААСсСацаАТоСацАс | домен соЗ3 сласАдапАТсТТассссСтТАТТСТААСССТАаСсСстТа,атастосСаціА)| дзета садсаАдапАТОСТатосСАТАСТСОТААТССАТОССТОаТтаСАсаСа садасдасАасаАТСТАССАСААССССАаСАССТАСАССАССААС
Таблиця 5Е
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕК МІІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
СсоСАасСАСССАСААТСООЯССТСОТСАасСстТоталасстасасссСА сАдасСАтаслдааоСАаСАасСсАасаАдасАасСАаТасСАСАССАСИ сасстасАсттсасстасаАТАТСТАТАТСТаСОаСАССАСТОас
САСОСОаССТОТОССЯТОаИСсТастастатооСтТаатСАТСАСССТ асТАТТаСААдсаСАсСАсСасСАаасААсАдастастатТАСАТСТТСАдОаС дасстттТАТаСОЯСССАаатТасСАВАСААСССАсадасАаавАсас стасластатоссаттоССстТадАдаАадаадсаласасасаастатад сстаАдадатаААатттоСсАсатстассаАтТасссСАасСсСтТАТС дасадааасССАпААтТоАастТатТАСААСсвсАасСТаААтТотТацвасСАс ссасадасаатАаСсадлсатастапАТАдадааАдаАдасАСасад тосбаАаАтТасааааСААласстА,сасСаСААаААСССАСАааИА саасСстТатАТААТалаСстасАаААааАСААааАтаассаАаиос тТАСТоТаАаАтТоааСАТададасадлалаСасвсАвАлаасасСААдОа вСаАСАССЯАТаасстатАтТоАасавасстаАасСАССаТсСссСАСААдСС
АСАССТАСОАТаСсоСсТасСсАСАТОСАССЬСССТассСтТоСААДСОСИТИ
А
ЗЕО ІЮ МО: 253
АтасвссстасслатадссессстастастассСАСстаассстасі| СОва тастасдса,асСбасСАаАСсСсТВАСсСОатТасбАа,СстватацсАсСАССтТ | сигнальний саассатастааталдлдасСа,асАаастотстаАаасСтТадаст | пептид; абасАаСАТССааСсСТТСАТСТТТААСААТОаССТОаАТатТОоСтТаці 2689 УН стадаАдСАаааСАССАаасСАласа7асстааадатавАтавасАса | (Таблиця 1,
АТСААпАдасСсААда ТтеСсСаАдС,саАа,пААССАСАСАТТАСасСАаТсСАС | 5ЕО І МО: 41); ссатаАдАдапАССастТсСАСААТСТСТОсСОапАСаАТАасСАдацА | с5-лінкер; тТАСССТаТАТСТаСАСАТаААСОССССТаААпАСАсСАсСаАСАСС | 2689 Му соа,ататАСТТСТасСсАССАСАаССССАсСаСааСсСсСсСстТТтОАТТ | (Таблиця 1,
АТттассаССАсаасАСсАСстааталссаталастоСасдасцлАсі | БЕО ІЮ МО: 42); сдасдадассаСса,ацАаа,асАЧаасАааСсаасосаСсосаСва7астотааос | суїцидальна сасассасбАдаСаАСАТоСТастаАСАСАаАаСССАСТИатТОос | послідовність стасстатадсссСАда,асаада,аооСсасстстТАТтСАаСсТатСаст | кг; Сова
СстТАаСсСАсСАаасстастасСАсСа,асасаАСаасСТ т СААТТАССТасаА | шарнір; тааЙтттСтасСсАпйААла,аСсСстааССАЧвАаСССАСАасСтТастаАТСТІ СОва ТМ;
АТСТОаССТОСТоТАаАаСАТОССССЯАаС,СТасстТаАСАаваттстосїІ сигнальний ааАтТотТаАСАаСааСАСАвАСТТСАСССТаААпАТСТОССИаса | домен 4-188; тасадсасСсАапАаа,ааАтТа7атасаааТАСТАтТасСсАТаСАСаассст | сигнальний 2689-82 |пСАСАСАССААТСАССТТОСсИаССАсСааСАСАСвСастТасАсАТС | домен соЗ3
ААдсаавАтТоСасАа,ааАааАапАТСТТасСсСсСсСтТАСТСТААСССТА | дзета сосстатасд,аСсс,сасСса,авАааАапАТСТТатсСАТАТТСТААТОСА дасстатасдаса,асаасАавАаспААдаСАССАСААССССтТасА
ССААЧАСССССТАСАССАИаСАССТАССАТСЯСАТОССАаТассАСТ стоттассассбосАаасСАтТатТАсасСсАаасАдаСАаасасАааАас датТаСАСАССАСОССаостасАСТ ТасстассАТАТСТАСАТСТ сапСАССАСТаССАасСААсСАТатассастастастастадасст саТСАТСАСССТатТАСТаСААсСАсаАасаСаСАсаААсаАдастаста
ТАТАТСТТСААдаСАаасстТптТАТИаАСаСССАатТасСсАсСАСААСССА садссАассАассаастастостатааатТтоССАаААд,АаааАсад савсасаалдтаталастасасаталалатсссаваетстассСаАТт всСАССТаСАТАССАаСАсСОапАСАСААСсСАасСтТатАТААСаАИС тТаААТСТаССОССС,аАпАпАасаАаТтАСсАСссТастацвАТтТААдаАС сласаадСсасаАатТостАаадтТаассаааСААдасссСсацАаААА вААСССТоАсСаАа,ссассТатАСААТаАлаСТасСАаААласАСАда
АтаасСсаАдсСасстАТоСаАСАТСОСаСАТаААаСваАаАаАаас сссссавааСсАдапаАСсАСсСаАтТаасстаТатАССсАаааасстТатстТА
СсСАаССАССААлаСАСАССТАТИАТИСССТаСАСАТОИСАССОСССТ
Таблиця 5Е
Послідовності нуклеїнових кислот прикладів ЕСЕК МІІ-специфічних САК із суїцидальною послідовністю К2
ОБО оетстетссттт вв
ЗЕО ІЮ МО: 254
АтааСсАстТассадатадсаасостастастассттвассстас | Сова тастасдСа,асАдасСАпАССАвАасатасАааставатацвАи,тТоса | сигнальний сласласостаатадд,асСАаа,асАаестсстадаастатсттаї пептид; ссадапсСсАасСа,сТсАсстттАаСсалсасстацдататостаа | 3008 УН стадаАдСАаааСАССАаасСАласИ7асстаадатааватасвиасСАсца | (Таблиця 1,
АТСААпАаСААспСАСАпСАСа,ааСиайСАССАСАСЧСАТТАССЯТастТас | БЕО І МО: 37);
СстТотТаААдСсаВаССсааТ гСАТСАТСТОССаСаАСаАТтТсТСаацААТІ с5-лінкер;
АсостТатАТСТасСАаСТаААСААТСТаААпАСАпАааАТАССаИасі 3008 Му са,ататАСТАТТаСАССАСАССТаССТООаСТоСТАСОСаСТАТТИаСсИЇ (Таблиця 1, соСсАдапваСАСАСТасаталссаталастосавасва7асаиасИаст |З ЕО І МО: 38); ставдасааадааАдасСсасАаассАаасасАасасАядасаавасассас | суїіцидальна вастстТаАСАТСИаТаАТаАСАСАаТСТоСАСТОАаССтТассАстТІ послідовність вАССССАсСаАлсАасстасстоСАтТотСТОатоасСтТсТАассАа | Вг; тооСсТастаСАСААСААдаСапААСААТТАССТааАТТаСТТОСТт | СОва шарнір; вСАСАдасСАавсассбА,тотоооСАасТастаАТСТАТСТОааСс |СОва ТМ; даСААТАСАСаССТОСаасАстасСсАпАСАваттсттасАа,аИАа | сигнальний вАдаСаспААСАпАСТТСАСССТаААаАтоАа,ассаСатасАсас | домен 4-188; дада7сАаса,атасаСсататАСТАТТасСсАТаСсАа,аассСАасСАСАСА | сигнальний
СсССАТСАССТТІ ТааССАСаспААсоСвса,астТацпАпАТСАдаааст | домен СОЗ дзет зорв-н2г | сСбасдасаа,аадааАТоСсТассстТАСТОСААСССАТСТОСТИта |а салаСсасАдсаАаааАапАТСТТатоСАТАТТССААТССТТОССтТаИТт сстоСасдаадаадапААдаСАССАСААССССТасСАССАдаАсс
СССТАСАССАаСАССТАССАТСЯСАТСОССАСОСССТОТОТСоТСТаС сасСсадасасСсАТтатаасоСсАаасАаасасассасасСсатасСАСА сСАасасасеасстааАстта7асстасСсаАТтТАТСТАСАТСТАСИСАСС
АстааСсдасААСсАтТатаассатастастастатсттаатсСАТС
АссСстТатАСтТасСсАдадаАд,аасСАааААаААасСтТастатАТАТСТТ
СсСАДССАССССТТСАТИаССОЯСОСССЯТасСАЧАСААСССАасадааслас сассастасластатвсаттооСтТадАдаАаааАда,ааАааадааА татадеастасасатаддаттАасоссатСаССаАтТасАССАа
САТАССАССАСИааССАСААССАасСтТаТатАТААСаАдастаААТСТ савасСасАаадасАасаалатАСсасАсатаставчАтТАдадлаавАасвснцо
Адс,асаАТоСсТаАвАТасСаАлааСААлаССсТоапАпАААпААСССА
САсадссасстатАСААтТаласСстасАаАдАдасАСААадтаассс дааСсСстТАТАаСаАаАтоаасСАтТадалассаАладалвасасССо(а вСАдасаАСсАСаАтТаасстаТатАсСсАааавасстТатсСАСАаССАС
СААДССАСАССТАТОАТОИСССТасСАСАТИИСАСаССсСтТасСссСАССА даатаА
ЗЕО ІЮ МО: 255
Терапевтичні варіанти застосування
Ізольовані клітини, що одержані способами, описаними вище, або клітинні лінії, що одержані від таких ізольованих клітин, можуть бути застосовані як лікарський засіб. У деяких варіантах здійснення такий лікарський засіб може бути застосований для лікування раку, у тому числі солідних пухлин і пухлини рідких тканин. У деяких варіантах здійснення рак являє собою
ЕСЕВМПІ-пов'язаний рак (наприклад, будь-який ЕСЕКМПІ-експресуючий рак), у тому числі, але без обмеження, гліобластому (наприклад, мультиформну гліобластому), анапластичну астроцитому, гігантоклітинну гліобластому, гліосаркому, анапластичну олігодендрогліому, анапластичну епендимому, анапластичну олігоароцитому, карциному хороїдного сплетення, анапластичну гангліогліому, пінеобластому, пінеоцитому, менінгіому, медулоепітеліому, епендимобластому, медулобластому, супратенторіальну примітивну нейроектодермальну пухлину, атипову тератоїдну/рабдоїдну пухлину, змішану гліому, рак голови та шиї,
недрібноклітинний рак легень, рак молочної залози, рак яєчників, рак простати, медулобастому, колоректальний рак, рак анального каналу, рак шийки матки, рак нирок, рак шкіри, рак підшлункової залози, рак печінки, рак сечового міхура, рак шлунка, рак щитовидної залози, мезотеліому, рак матки, лімфому або лейкемію.
У деяких варіантах здійснення лікарський засіб, що описаний тут, може бути застосований для 1) інгібування росту або прогресування пухлини у суб'єкта, який має злоякісні клітини, що екпресують ЕСЕЕМІЇПІ; 2) інгібування метастазів злоякісних клітин, що експресують ЕСЕЕМІЇЇ, у суб'єкта; і 3) індукування регресії пухлини у суб'єкта, який має злоякісні клітини, що екпресують
ЕСЕВМІІІ.
У деяких варіантах здійснення ізольована клітина за винаходом або клітинна лінія, що одержана від ізольованих клітин, може бути застосована у виробництві лікарського засобу для лікування раку у пацієнта, який потребує цього.
Також тут передбачені способи лікування пацієнтів. У деяких варіантах здійснення спосіб включає забезпечення імунної клітини за винаходом пацієнту, який потребує цього. У деяких варіантах здійснення спосіб включає етап введення трансформованих імунних клітин за винаходом пацієнту, який потребує цього.
У деяких варіантах здійснення Т-клітини за винаходом можуть піддаватися стійкому нарощуванню Т-клітин іп мімо і можуть продовжувати діяти протягом тривалого періоду часу.
Способи лікування за винаходом можуть бути спрямовані на зменшення інтенсивності, повне видужання або профілактику. Спосіб за винаходом може являти собою частину лікування аутологічною імунотерапією або алогенною імунотерапією. Винахід особливо придатний для алогенної імунотерапії. Т-клітини від донорів можуть бут трансформовані у неалореактивні клітини із застосуванням стандартних протоколів і репродуковані за необхідністю, тим самим продукуючи САК-Т-клітини, які можуть бути введені одному або декільком пацієнтам. Така терапія САК-Т-клітинами може бути зроблена доступною, як «готовий до використання» терапевтичний продукт.
Клітини, які можуть бути застосовані з розкритими способами, описані, наприклад, у попередньому розділі. Лікування може бути застосоване для лікування пацієнтів, у яких діагностували, наприклад, рак. Типи раку, які можна лікувати, включають, наприклад, типи раку,
Зо які пов'язані з ЕСЕЕМІЇЙЇ, у тому числі будь-який із перелічених вище типів раку. Типи раку, які підлягають лікуванню за допомогою САК та САК-Т-клітин за винаходом, включають, але без обмеження, деякі пухлини рідких тканин і солідні пухлини, такі як мультиформна гліобластома, рак голови та шиї, недрібноклітинний рак легень, рак молочної залози, рак яєчників і рак простати. Також включені типи пухлин/раку у дорослих і типи пухлин/раку у дітей.
У деяких варіантах здійснення лікування може проводитися у комбінації з однією або більше терапіями проти раку, вибраними з групи терапії антитілами, терапії кон'югатом антитіло- лікарський засіб, хіміотерапії, націленої терапії, терапії цитокінами, терапії вакцинами, терапії онколітичними вірусами, терапії дендритними клітинами, генотерапії, терапії наночастинками, терапії гормонами, хірургічної резекції, терапії лазерним випромінюванням, областей лікування пухлини та променевої терапії. Наприклад, САК і САК-Т-клітини за винаходом можуть бути введені пацієнту разом із (наприклад, перед, одночасно або після) 1) стандартом лікування, у тому числі випромінюванням, хірургічною резекцією, хіміотерапією (наприклад, темозоломід, прокарбазин, кармустин, ломустин, вінкристин і т.д.), терапією антитілами, такою як бевацизумаб, анти-ангіогенною терапією та/або областями лікування пухлини; 2) вакциною, у тому числі ЕСЕКмМІПІ-вакциною; 3) терапією кон'югатом антитіло-лікарський засіб, у тому числі, але без обмеження, кон'югатами лікарського засобу, які націлені на сімейство рецепторів НЕК, таких як ЕСЕК, НЕК2, НЕКЗ та НЕК-4; 4) націленою терапією, такою як інгібітори кіназ (наприклад, еверолімус); і 5) імунотерапіями, у тому числі, але без обмеження, антитіла до РО- 1, РО-ІТ, РО-12, А1ВВ, ТІМ3З, ГАСЗ, ТІСІТ, ОХ40, НУЕМ, ВТ А, 2040, 0047, С5Е1В, С5Е1,
МАКСО, І. 8, СХСОКА й СТІ А4.
У деяких варіантах здійснення лікування може бути введене пацієнтам, які піддаються імуносупресивному лікуванню. Дійсно, винахід переважно базується на клітинах або популяції клітин, які були зроблені резистентними щонайменше до одного імуносупресивного агенту (наприклад, циклоспорину, азатіоприну, метотрекстау, мікофенолату та ЕК5БОб) з огляду на деактивацію гена, що кодує рецептор для такого імуносупресивного агенту. У даному аспекті імуносупресивне лікування повинно допомагати у селекції та нарощуванні Т-клітин за винаходом у пацієнта. Введення клітин або популяції клітин за винаходом може здійснюватися будь-яким зручним способом, у тому числі шляхом аерозольної інгаляції, ін'єкції, прийому всередину, трансфузії, імплантації або трансплантації. Композиції, що описані тут, можуть бути бо введені пацієнту підшкірно, внутрішньошкірно, внутрішньопухлинно, внутрішньочерепно,
внутрішньовузлово, внутрішньомозково, внутрішньом'язово, шляхом внутрішньовенної або внутрішньолімфатичної ін'єкції або внутрішньобрюшинно. В одному варіанті здійснення композиції клітин за винаходом, переважно, вводять шляхом внутрішньовенної ін'єкції.
У деяких варіантах здійснення лікування може бути введене пацієнтам, які піддаються режиму лімфодеплеції. Деплеція імунних регуляторних елементів за допомогою цитотоксичних агентів або повне випромінювання тіла може посилити антипухлинну активність САК і САК-Т- клітин за даним винаходом. Наприклад, цитотоксичний агент у режимі лімфодеплеції включає, але без обмеження, флударабін, циклофосфамід і/або алемтузумаб.
У деяких варіантах здійснення введення клітин або популяції клітин може включати введення, наприклад, від приблизно 107 до приблизно 10 клітин на кг маси тіла, включаючи всі цілі значення кількості клітин у межах цих діапазонів. У деяких варіантах здійснення введення клітин або популяції клітин може включати введення від приблизно від 105 до 105 клітин на кг маси тіла, включаючи всі цілі значення кількості клітин у межах цих діапазонів. Клітини або популяції клітин можуть бути введені в одній або більше дозах. У деяких варіантах здійснення зазначена ефективна кількість клітин може бути введена як одинична доза. У деяких варіантах здійснення зазначена ефективна кількість клітин може бути введена як більше, ніж одна доза протягом періоду часу. Час введення знаходиться у компетенції лікуючого лікаря і залежить від клінічного стану пацієнта. Клітини або популяція клітин можуть бути одержані з будь-якого джерела, такого як банк крові або донор. Коли потреби індивідуума змінюються, визначення оптимальних діапазонів ефективних кількостей заданого типу клітин для конкретного захворювання або станів знаходиться у межах знань у даній галузі техніки. Ефективна кількість означає кількість, яка забезпечує терапевтичну або профілактичну користь. Доза, що вводиться, буде залежати від віку, стану здоров'я та ваги реціпієнта, типу супутнього лікування, якщо наявне, частоти лікування та природи бажаного ефекту. У деяких варіантах здійснення ефективну кількість клітин або композиції, що містить ці клітини, вводять парентерально. У деяких варіантах здійснення введення може являти собою внутрішньовенне введення. У деяких варіантах здійснення введення може проводитися безпосередньо шляхом ін'єкції у пухлину.
Набори
Винахід також передбачає набори для застосування у представлених способах. Набори за винаходом включають один або більше контейнерів, що містять полінуклеотид, що кодує
ЕСЕВМПІ-специфічний САК, або сконструйовану імунну клітину, що містить полінуклеотид, що кодує ЕСЕКмМІПІ-специфічний САК, як описано тут, й інструкції по застосуванню відповідно до будь-якого зі способів за винаходом, що описані тут. Загалом, ці інструкції містять опис введення сконструйованої імунної клітини для описаних вище терапевтичних способів лікування.
Інструкції щодо застосування сконструйованих імунних клітин, як описано тут, загалом включають інформацію щодо дозування, схеми дозування та шляху введення для призначеного лікування. Контейнери можуть являти собою стандартну дозу, групові упаковки (наприклад, багатодозові упаковки) або дози субодиниць. Інструкції що поставляються у наборах за винаходом, зазвичай являють собою письмові інструкції на маркуванні або аркуші-вкладиші (наприклад, листі паперу, що включений в набір), але також прийнятними є машинозчитувані інструкції (наприклад, інструкції, що зберігаються на магнітному або оптичному диску для зберігання).
Набори за даним винаходом знаходяться у придатній упаковці. Придатна упаковка включає, але без обмеження, ампули, флакони, банки, гнучку упаковку (наприклад, пластикові або ущільнені майларом пакети) і тому подібне. Також передбачені упаковки для застосування у комбінації зі специфічним пристроєм, таким як інгалятор, пристрій для введення через носову порожнину (наприклад, атомайзер) або пристрій для інфузії, такий як мінінасос. Набір може мати стерильний отвір для доступу (наприклад, контейнер може мати пакет для внутрішньовенного розчину або ампулу, що має стопор, який може бути проткнутий голкою для підшкірної ін'єкції). Контейнер також може мати стерильний отвір для доступу (наприклад, контейнер може мати пакет для внутрішньовенного розчину або ампулу, що має стопор, який може бути проткнутий голкою для підшкірної ін'єкції). Щонайменше одним активним агентом у композиції є ЕСЕКМмМПІ-антитіло. Контейнер може додатково містити другий фармацевтично активний агент.
Набори можуть необов'язково забезпечувати додаткові компоненти, такі як буфери та довідкову інформацію. Зазвичай, набір містить контейнер і маркування або аркущії)-вкладищії) на контейнері або у зв'язку з ним.
Для всіх цілей сюди включений вміст попередніх заявок на видачу патенту США Мо бо 62/281,533 (що подана 21 січня, 2016 р.) та 62/431,758 (що подана 8 грудня, 2016 р.).
Депонування біологічних зразків
Зразки матеріалів за даним винаходом були задепоновані в Американській колекції клітинних культур, 10801 Опімег5йу Вошцемага, Мапазза5, Ма. 20110-2209, О5А, . Вектор 7, що має номер доступу АТСС Мо являє собою полінуклеотид, що кодує варіабельну область легкого ланцюга, а вектор ,що має номер доступу АТСОС Моб /-:/ , являє собою полінуклеотид, що кодує варіабельну область важкого ланцюга. Депонування були зроблені на основі положень Будапештського договору про міжнародне визнання депонування мікроорганізмів з метою патентної процедури та інструкції до нього (Будапештський договір). Це передбачає зберігання життєздатної культури депонування протягом 30 років з дати депонування. Депонування буде зроблене АТСС доступним, виходячи з положень Будапештського договору, а також на основі договору між Пфізер, Інк. та АТСС, який передбачає перманентну та необмежену публічну доступність потомства культури депонування після видачі відповідного патенту США або після відкриття публічного доступу до будь-якої заявки на видачу патенту США або іншої країни, у залежності від того, що наступить раніше, та передбачає доступніть потомства для того, хто визначений Комісаром США по патентам і торговельним маркам, який має на це право, відповідно до 35 0.5.0. 5 122 та правил
Комісара, відповідно до нього (включаючи 37 С.Р.М. 5 1.14 з конкретним посиланням на 886 ОС 638).
Уповноважена особа за даною заявкою погодилася, що якщо культура матеріалів за депонуванням помирає або втрачається, або знищується при культивуванні за придатних умовах, матеріали будуть швидко замінені за повідомленням на інші такі самі матеріали.
Доступність депонованого матеріалу не слід тлумачити, як ліцензію на практичну реалізацію винаходу у протиріч правам, що надані від імені будь-якого уряду відповідно до його патентного законодавства.
Наступні приклади пропонуються лише з метою ілюстрації та їх не слід розглядати, як будь- яке обмеження обсягу винаходу. Дійсно, різні модифікації винаходу на додаток до показаних й описаних тут стануть ясними для фахівця у даній галузі техніки з наведеного вище опису, і вони входять в обсяг прикладеної формули винаходу.
Приклади
Зо Приклад 1: Визначення афінності для рекомбінантного мишачого-людського химерного антитіла до ЕСЕРМІЇЇ та гуманізованих антитіл
У даному прикладі визначали афінність химерних і гуманізованих антитіл до ЕСЕКМмМІ за 25"С та 37 "С.
Мишаче (т) антитіло до ЕСЕЕМІЇ, тб2057, що сгенероване з гібридом, секвенували та субклонували у придатні вектори для експресії як мишачі-людські химерні антитіла. СОК мишачого антитіла тб2057 пересаджували на людський каркас й експресували як рекомбінанте антитіло людського ІдсС1, пб2057. Афінні варіанти пб2057 одержували шляхом включення мутацій у САК важких і легких ланцюгов. Афінності рекомбінантного химерного антитіла тб257 до ЕСЕКМІЇІ і гуманізованих антитіл пб2057 вимірювали на біосенсорі Віасогетм Т200 для поверхневого плазмонного резонансу, що оснащений зв'язаним сенсорним чіпом СМА високої чистоти специфічним до людського Ес (СЕ Неайпсаге Іпс., Різсаїажау, МУ). Антитіла до ЕСЕЕМІЇ потім захоплювалися областю, специфічною до людського Ес. Мономерний 8-гістидиновий мічений людський позаклітинний домен ЕСЕКМІИ потім ін'єктгували як аналіт 10-кратними серіями розведення з верхньою концентрацією у 1000 нм. Афінність антитіл до ЕСЕЕМмМІЇ проти людського ЕСЕЕМІЇ вимірювали як за 25 "С, так і за 37 "С (таблиця 6). Жодне з цих антітил не продемонструвало помітне зв'язування з 1000 нм 8-гістидиновим міченим рекомбінантним білком ЕСЕКМІЇ дикого типу за тих самих умов аналізу.
У таблиці 6 варіанти п6207 описані з посиланням на варіацію важкого ланцюга, а потім на варіацію легкого ланцюга. Наприклад, клон антитіла «пб2057-ЕО/Л б» відноситься до клону пбв207, що містить варіацію «БО» у важкому ланцюгу (що також зветься тут, як «пб257-ЕО») і варіацію «Іб» у легкому ланцюгу (що також зветься тут, як «пПб207-І 6»). Ці амінокислотні послідовності важкого ланцюга та легкого ланцюга представлені в таблиці 2. Також у даній заявці варіант пб2057 може зватися варіантом важкого ланцюга або легкого ланцюга, якщо він написаний спочатку - так, наприклад, обидва «пб207-ЕО/Л 6» та «пб207-І 6/ЕО» відносяться до антитіла, яке містить важкий ланцюг п6207-ЕО і легкий ланцюг пб257-І 6.
Таблиця 6
Приклад 2: Визначення афінності для людських антитіл до ЕСЕЕМІЇЇ
У даному прикладі визначали афінність різних людських антитіл дДОЕСЕКМІІ за 37 "С.
Для генерування людських антитіл до ЕСЕЕМІЙ, трансгенних мишей АїЇїмамаб (Біехі5 ГІС,
Зап Егапсі5со, СА) імунізували за схемою чергування з клітинною лінією гліобластоми пацюків з фіксованим параформальдегідом, що експресує ЕСЕРЕмМІ, Б98-прРЕСЕВМ (Атегісап Туре
Сийиге СоПесіоп, Мапаззавз, МА) і пептиди (ЗЕО ІЮО МО: 227: СО5ОБОЇ ЕЕККОМУУМТОН), що спрямовані на область зв'язування у ЕСЕКМІІІ. Гібридоми генерували із застосуванням стандартних методів. Для визначення афінності зв'язування та специфічності цих гібридом до
ЕСЕМКМІЇЇ, антитіла у культуральних супернатантах захоплювали за допомогою області, специфічної до Ес миші із застосуванням біосенсору Віасоге "м Т200, що оснащений сенсорними чіпами СМ4, специфічними до мишачого Ес (Віасогетм АВ, Оррзаїа, Зууедеп - тепер СЕ
Неайрсаге). Мономерний 8-гістидіновий мічений людський позаклітинний домен ЕСЕЕМІЇЇ потім ін'єктували як аналіт 10-кратними серіями розведення, починаючи з верхньої концентрації у 1000 нм. Афінність антитіл до ЕСЕРЕМІІЇ проти людського ЕСЕРМІЙІ вимірювали за 37 "С (таблиця 7). Жодне з цих гібридомних антітил не продемонструвало помітне зв'язування з 1000 нм 8- гістидиновим міченим рекомбінантним білком ЕСЕРЕмМ/ дикого типу за тих самих умов аналізу.
Таблиця 7 1111111192АТО | 6б54ЕНОЯ | 6б2бЕ04 | 96
Приклад 3: Специфічність зв'язування антитіл до ЕСЕКмМИ з ЕСЕКмМП-експресуючими клітинними лініями шляхом проточної цитометрії
У даному прикладі продемонстрована специфічніть клітинного зв'язування антитіл
ДОоЕСЕКМІ з ЕСЕКмМІПІ-екпресуючими клітинами.
Для оцінки специфічності клітинного зв'язування антитіл до ЕСЕЕМІІЇ, сгенерованих від мишей АїЇїмаМар, використовували три ізогенні гліобастомні клітинні лінії пацюків і людську клітинну лінію раку: 98 (не експресує будь-яку форму людського ЕСЕ), Е98-ЕСЕНУ (експресує ЕСЕК дикого типу), Е98-прЕСЕКМІ! (експресує ЕСЕРМІЇЇ) ії А431 (клітинна лінія епідермоїдної карциноми з надмірною експресією ЕСЕК дикого типу), при цьому всі одержані від Американської колекції клітинних культур (Мапабхза5, МА). Для забарвлення клітин 500000 клітин інкубували з 50 мл гібридомних супернатантів протягом 45 хвилин за 4 "С, промивали зв'язуючим буфером (РВЗ (натрій-фосфатним буфером) ї- 0,595 ВЗА (альбуміном бичачої сироватки)) з подальшою інкубацією вторинного антитіла кози, специфічного до Ес миші, і кон'югованого з РІТС, від даскзоп ІттипокКезеагсі І арогайогіе5 (М/еві Ссгоме, РА). У таблицях 8А і 88 показано, що середні флуоресцентні інтенсивності (МЕ!) ЕСЕКМмМІ-антитіл (за виключенням клону 20055) на ЕСЕКмМІПІ-експресуючій клітинній лінії були щонайменше у 10 разів вище, ніж на неекспресуючих клітинних лініях. На фіг. 1А, фіг. 18 і фіг. 1С показані приклади ЕАС5З-гістограм зв'язування трьох ЕСЕРМІ-специфічних клонів, які були клоновані й експресовані як рекомбінантні антитіла людського Ідс1, 4259 (фіг. ТА), 32А10 (фіг. 18) і 3208 (фіг. 1С), з трьома лініями Е98-клітин.
Таблиця 8А 71111117 в98 | Б98-ЕОРВУМ | ого8-ЕОРВМШ | лаз : Чо Чо Чо / Тільки2Ав | 170 | 06 | 202 | 7,7 | 258 | 23 | 592 | 04 49811 | 7156 06 | 185 | 1,3 | 2980 | 985 | 599 | 08 лан | 7157 | 005 | 188 | 7,99 | 3445 | 9893 | 569 | 08 л1в'ї | 7161 | 06 | 187 | 7,7 | з391 | 982 | 589 | ї2 лава | 7156| 04 | 185 | 1,5 | 2749 | 979 | 571 | 08 717011 | 7157 | 06 | 184 | 7,5 | 3357 | 981 | 556 | 07 і л4с11 | 7157| 04 | 185 | 73 | з2гіз | 982 | 580 | 08
Таблиця 8В 77771711 в98 | во8-ЕСРВмМ | ого8-ЕОЕНМИ | ля позитивна позитивна позитивна позитивна 2012 | зЗ81 | 60 | 348 | 34 | 3976 | 979 | 302 | 26 і З4Е7 | 485 | 69 | 371 | 40 | 4128 | 985 | 294 | 11
Ці результати демонструють специфічність зв'язування антитіл до ЕСЕРМІЇЇ з клітинами, які експресують ЕСЕЕМІ.
Приклад 4: Визначення афінності для повністю людських антитіл до ЕСЕЕмМІІз фагової бібліотеки
У даному прикладі визначали афінність різних людських антитіл до ЕСЕЕмМП за 25 "0.
Людські антитіла до ЕСЕКМІІ секвенували та субклонували у придатні вектори для експресії як рекомбінантні людські антитіла І(дс1. Афінності антитіл вимірювали за 25 "С (таблиця 9) на біосенсорі Віасоге"м Т200 для поверхневого плазмонного резонансу, що оснащений зв'язаним сенсорним чіпом СМ4, специфічним до людського Бс (ЗЕ НеайПсаге Іпс., Різсайаулау, МУ).
Антитіла до ЕСЕКМмМІІЇ захоплювали специфічнімі до людського Ес. Мономерний 8-гістидіновий мічений людський позаклітинний домен ЕСЕКМІИ потім ін'єктгували як аналіт 10-кратними серіями розведення, починаючи з 1000 нм. Серед двох антитіл тільки Сб продемонструвало зв'язування, що є дуже слабким, але піддається виявленню, з 1000 нм 8-гістидиновим міченим рекомбінантним білком ЕСЕКУ дикого типу за 25 "С.
Таблиця 9
Приклад 5: Визначення афінності для рекомбінантних форматованих антитіл до ЕСЕЕМІЇ з одноланцюговим Ем
У даному прикладі визначали афінність різних рекомбінантних антитіл до ЕСЕКмМІЇ з одноланцюговим Ем за 37 "С.
Для перетворення традиційного антитіла у оодноланцюговий Ем (5сЕм) фрагмент, варіабельну область важкого ланцюга і варіабельну область легкого ланцюга зв'язували разом за допомогою лінкеру (340005)4 (ЗЕО І МО: 202). Фрагмент 5сЕм потім зшивали з Ес- фрагментом людського ЇД01 для полегшення рекомбінантної експресії й очищення. Афінності білків зшиття 5сЕм-Рс вимірювали за 37 "С на біосенсорі Віасогетм Т200 для поверхневого плазмонного резонансу, що оснащений зв'язаним сенсорним чіпом СМ4, специфічним до людського Ес (СЕ Неайнсаге Іпс., Різсаїажау, МУ), як описано вище. Білки 5сЕм-Ес захоплювали областю, специфічною до людського Ес. Мономерний 8-гістидіновий мічений людський позаклітинний домен ЕСЕКМІЇ потім ін'єктували як аналіт 10-кратними серіями розведення, починаючи з 1000 нм. У таблиці 10 показано, що переформатовані 5сЕм білки зшиття зберігають зв'язування з ЕСЕКМІІ і те, що афінності білків 5сЕм-Ес як у НІ. (з варіабельною областю важкого ланцюга на М-кінці), так і у ІН (з варіабельною областю легкого ланцюга на М-кінці), орієнтаціях є порівняними з їхніми аналогами у традиційних антитіл, що перелічені у таблицях
Зо 6, 7 і 9. Ці білки 5сЕм-Ес також випробували на зв'язування з 1000 нм 8-гістидиновим міченим рекомбінантним білюом ЕСЕКМ/ дикого типу за 25 "С, але жоден з них не продемонстрував значне зв'язування.
Таблиця 10
Таблиця 10
Приклад 6: Продукція та виявлення ЕСЕКМмІІІ-специфічних Т-клітин химерного антигенного рецептора (САК)
У даному прикладі визначали експресію та антигензв'язуючу специфічність ЕСЕКМІЇІ- специфічних САК-Т-клітин.
РВМС від здорових донорів, що надані АїЇЇСеїї5 (АІатеда, СА), розморожували відповідно до специфікації постачальника і культивували протягом ночі у середовищі Х-Мімо"М-15 (І оплга,
УумаїКегемійе, МО), в яке додано 595 сироватки людини. Т-клітини активували протягом З днів у середовищі Х-Мімо"М-15 (І опа), в яке додано 20 нг/мл людського 1-2, 595 людської сироватки, й активаторі Т-клітин з ЮОупабеааз СО3/С028 при співвідношенні гранула:клітина 1:1 (Ше
Тесппоодіех, Сагієрай, СА). Т-клітини потім трансдукували за допомогою біцистронного лентивірусного вектора, що містить ВЕР-Т2А-ЕСЕВмМІІ-специфічну касету для експресії САКЕ, під контролем промотору ЕЕТа при множинності зараження (МОЇ), що становить 5. У даному конструкті ЕСЕКмМІПІ-специфічний САК соекспресується з ВЕР (синім флуоресцентним білком) для полегшення виявлення ЕСЕНМІПІ-специфічного САК. ЕСЕРЕмМПІ-специфічні САК містили УН- та Мі-послідовності різних анти-ЕСЕРЕМІІ клонів (п6207-І 6/ЕО, 14311, 2089, З2А10, 42029, Сб, 20Е12, 2689, 3008 та 3208; що описані у будь-якому місці тут). САК-Т-клітини утримували у культурі протягом періоду до 14 днів після трансдукції. Відсоток клітин, що експресують
ЕСЕВМПІ-специфічний САК, піддавали моніторингу з плином часу (на День 4, 9 ї 14 після лентивірусної трансдукції первинних Т-клітин) шляхом проточної цитометрії із застосуванням
ВЕР (синього флуоресцентного білка) для виявлення (фіг. 2А) (що визначено відсотком ВЕР- позитивних життєздатних клітин).
Для визначення специфічності САК до зв'язування рекомбінантні білюиим ЕСЕБМПІ-тЕс та
ЕСЕВ-тЕс, які складаються з позаклітинного домену людського ЕСЕКМмМІІІЇ або людського ЕСЕК дикого типу відповідно, що зшиті з доменом мишачого Ідс1, продукували у клітинах НЕК293.
Специфічність зв'язування з мішенню визначали шляхом інкубування різних ЕСЕЕКМІЇІ- специфічних САК-Т-клітин з білююм ЕСЕКмМІП-тЕс або ЕСЕК-тЕс з подальшим ПЕ-міченим вторинним антитілом кози, специфічним до Ес миші (даскзоп ІттипокКезеагсії) й аналізували за допомогою проточної цитометрії на день 4 після трансдукції Т-клітин з векторами, що кодують
Ко) САК, які містять різні ЕСЕЕмМІПІ-специфічні клони (п6207-І 6/ЕО, 14311, 2089, З2А10, 4209, Сб, 20Е12, 2689, 3008 та 3208). Як показано на фіг. 28, САК-Т-клітини, що містять МН- та МІ - послідовності клонів пб2057-І 6/ЕО, 14С11, 2089, 32А10, 4209, 20Е12, 2689 та 3008, зв'язуються з ЕСЕКМПІ-тЕс, але по суті не зв'язуються з ЕСЕК-тЕс. На день 14 після трансдукції визначали кореляцію експресії САК, як виявлено за допомогою ВЕР на клітинах і зв'язування рекомбінантного ЕСЕКМПІ-тЕс клітинами. Ілюстративний набір даних показаний на фіг. 2С, на якій показана експресія САК, які містять десять різних ЕСЕКМПІ-специфічних клонів (п6207-
І 6/ЕО, 14С11, 2089, 32А10, 4209, Сб, 20Е12, 2689, 3008 та 3208) у САК-Т-клітинах на День 14 після трансдукції, як визначено виявленням ВЕР на клітинах і зв'язуванням рекомбінантного
ЕСЕВМПІ-тЕс клітинами.
Ці результати демонструють, що САК-Т-клітини, які містять САК, що містять МН- та Мі- послідовності клонів пб2057-І 6/ЕО, 14С11, 2089, 32А10, 4209, 20Е12, 2689 та 3008, зв'язуються з ЕСЕРЕМІІ-тЕс, але по суті не зв'язуються з ЕСБЕК-тЕс.
Приклад 7: Залежна та незалежна від мішені дегрануляція ЕСЕКмМІЇ!-специфічних САК-Т- клітин
У даному прикладі визначають активність дегрануляції ЕСЕКмМІІ-специфічних САК-Т-клітин у присутності та відсутності ліній ракових клітин з експресією мішені.
П'ять клітинних ліній використовували для оцінки активності дегрануляції САК-Т-клітин.
Лінію клітин раку легень у людини МСІ-Н522 і лінію клітин гліобластоми О87МО одержували з
Американської колекції клітинних культур (Мапабхза5, МА) і культивували у середовищі КРМІ 1640 з додаванням 1095 деактивованої нагріванням бичачої сироватки (Медіасесйп Іпс.,
Мапаззав, МА). Оскільки більшість ліній ракових клітин не експресують ЕСЕЕМІЇ, МСІ-Н522 (що не експресує рівень ЕСЕК або ЕСЕРКМІ, що може бути виявлений) трансдукували за допомогою лентивірусного вектору, що кодує ген ЕСЕММИ повної довжини (ЗЕБО ІЮО МО: 201) для генерування «МСІ-Н522-ЕСЕКМІЇ», що експресує низький рівень ЕСЕКМІ. Для генерування ізогенних ліній клітин людської гліобластоми, які експресують різні білюи ЕСЕК, ендогенний ген бо
ЕСЕК дикого типу з ОО87МО був спочатку нокаутований для генерування ЕСЕК-нульової клітинної лінії «087-КО». Клітину 087-КО потім трансдукували з лентивірусним вектором, що кодує ген ЕСЕК дикого типу повної довжини (номер доступу МР 005219) для одержання надмірно експресуючої ЕСЕК клітинної лінії, «087-КО-ЕСЕКмі». Подібним чином генерували «087-КО-ЕСЕКМИЇ» (що надмірно експресує ЕСЕРМІ) з Ш0Ш87-КО шляхом лентивірусної трансдукції з вектором, що кодує ген ЕСЕКМІіЇЇ повної довжини (ЗЕО ІЮ МО: 201).
Для аналізу дегрануляції 100000 Т-клітин, що експресують різні ЕСЕКМмМІІ-специфічні САК (що містять клони пб207-І 6/ЕО, 14С11, 2089, 32А10, 42059, Сб, 20Е12, 2689, 3008 та 3208), інкубували у 96-лункових планшетах з рівною кількістю ракових клітин, що експресують різні рівні білка ЕСЕЕМІЇЇ або білка ЕСЕРУМ. Сокультури тримали у кінцевому об'ємі, що становив 100 мл у середовищі Х-Мімо"М-15 (Гопла, УМаїКегеміІе, МО), протягом б годин за 37 "С з 595 СО».
Забарвлення СО107а виконували під час стимуляції клітин шляхом додавання флуоресцентного антитіла до СО107а (Мікепуї Віоїес, Зап Оієдо, СА) на початку сокультури разом із кінцевою концентрацією 1 мг/мл анти-СОр49а (ВО Ріагтіпдеп, Зап Оіедо, СА), 1 мг/мл анти-С0О28 (Мійепуї Віоїес) ії їх розчину монензину (еВіозсіепсе, зап Оіедо, СА). Після 6- годинного періоду інкубування, клітини забарвлювали за допомогою фіксованого барвника життєздатності і кон'югованого флуорохромом антитіла до СО8 (Мінепуї Віоїес) й аналізували прточною цитометрією. Активність дегрануляції визначали як Фо життєздатних/СО8/ВЕР/СО107а- клітин, а також шляхом визначення сигналу середньої інтенсивності флуоресценції (МЕЇ) для забарвлення СО107а серед клітин СО8ч/ВЕРк. Аналізи дегрануляції здійснювали на день 14 після трансдукції САК. На фіг. З показані результати від двох РВМСОС-донорів для кожного ЕСЕКмМІІ-специфічного САК. Окрім САК-Т-клітин, що містять клони Сб та 3208, збільшення активності дегрануляції (у порівнянні з САК-Т окремо) спостерігали лише тоді, коли ЕСЕКмМПІ-специфічні САВ-Т-клітини сокультивували з клітинними лініями, які експресують ЕСЕЕМІІЇ, такими як МСІ-НЬ522-ЕСЕРЕмМІІ та О87-КО-ЕСЕВМІП.
Ці результати демонструють, що ЕСЕКмМПІ-специфічні САК-Т-клітини проявляють активність дегрануляції у присутності ЕСЕКмМП-експресуючих клітин пухлини, але не проявляють активність дегрануляції у присутності клітин пухлини, які не експресують ЕСЕЕМІЇ.
Приклад 8: Секреція інтерферону гамма (ІЄМу) у ЕСЕКмМІПІ-специфічних САК-Т-клітинах
Зо У даному прикладі показаний рівень секреції ІЕМу у ЕСЕВМІП-специфічних САК-Т-клітинах після сокультивування ЕСЕКМПІ-специфічних САК-Т-клітин з клітинними лініями, що експресують білок-мішень.
ЕСЕВМПІ-специфічні САК-Т-клітини, що експресують САК, що містять різні ЕСЕКМПІ- специфічні клони (п6207-І 6/ЕО, 14С11, 2089, 32А10, 42059, Сб, 20Е12, 2689, 3008 та 32608), інкубували у 96-лункових планшетах (100000 клітин/лунку) разом із рівною кількістю клітин, що експресують різні рівні білків ЕСЕЕМІЇ або ЕСЕРУМ (клітини МСІ-Н522, МСІ-Н522-ЕСЕВМН, 087-
КО, 087-КО-ЕСЕКУЙ та 087-КО-ЕСЕКМІІЇ; кожна описана вище у прикладі 7). Сокультури тримали у кінцевому об'ємі, що становив 100 мл у середовищі Х-Мімо"М-15 (І опа), протягом 18 годин за 37 "С з 595 СО»2. Потім збирали і заморожували супернатант. ІЕМу у супернатанті вимірювали за допомогою ЕГІ5А-набору Нитап ІБЕМ-датта Опцапікіпе (НО взувіетв,
Міппеєароїї5, ММ) ввідповідно до специфікацій виробника. Як показано на фіг. 4, для більшості
САВ-Т-клітин рівень секреції ІРМУу корелює з кількістю ЕСЕКМИ, що експресується сокультивованими клітинами: низький експресор МСІ-Н522-ЕСЕКМІІІ індукував невелику кількість ІЕМу, високий експресор О87-КО-ЕСЕРМІЇІ індукував велику кількість ІЕМу. Т-клітини, що експресують ЕСЕКМІІ-специфічний клон 3208 САК не секретували суттєві рівні ІЕМу з усіма умовами випробування. З іншого боку, ЕСЕРмМІІ-специфічні САБК-Т-клітини клону Сб секретували високі рівні ІЕМуУ після сокультивування з клітинами 087-КО-ЕСЕКУл або 087-КО-
ЕСЕВМІІІ.
Ці результати демонструють, що для більшості ЕСЕКмМПІ-специфічних САБ-Т-клітин рівень секреції І(ІЕМукорелює з кількістю ЕСЕЕМІЇ, що експресується сокультивованими клітинами.
Приклад 9: Цитотоксичність ЕСЕКмМІІІ-специфічних САК-Т-клітин
У даному прикладі визначали рівень цитотоксичності ЕСЕКмМПІ-специфічних САК-Т-клітинах після сокультивування ЕСЕКМПІ-специфічних САК-Т-клітин з клітинними лініями, що експресують білок-мішень.
ЕСЕВМПІ-специфічні САК-Т-клітини, що експресують САК, що містять різні ЕСЕКМПІ- специфічні клони (пб207-І 6/ЕО, 14С11, 2089, З2АТ10, 4209, С6, 20Е12, 2689, 3008 та 3208), висіювали у 9б-лункові планшети (400000 клітин/лунку) разом із 20000 клітин-мішеней, що експресують різні рівні білюьа ЕСЕЕМІІ. Клітинами-мішенями були: ШВ7-КО-ЕСЕНВУМ, МСІ-Н52г2-
ЕСЕЕМІ та О087-КО-ЕСЕЕМІЇЇ, що описані вище. Цільові (ЕСЕКМІІ-позитивні: МСІ-НЬ22-ЕСЕВМ! бо та 0087-КО-ЕСЕЕМІЇ) та контрольні (ЕСЕКмМІПІ-негативні: О87-КО-ЕСЕРМИ) клітини висіювали та маркували за допомогою флуоресцентного внутрішньоклітинного барвника СЕБЕ перед їх сокультивуванням з ЕСЕКмМІІ-специфічними САК-Т-клітинами. Сокультури інкубували протягом 4 годин за 37 "С з 595 СО». Після цього періоду інкубування клітини маркували за допомогою фіксуючого барвника життєздатності й аналізували проточною цитометрією. Визначали життєздатність кожної популяції клітин (ЕСЕКмМІПІ-позитивних клітин-мішеней або ЕСЕЕМІІ- негативних клітин-мішеней) й обчислювали 95 специфічного клітинного лізису. Аналізи цитотоксичності здійснювали через 14 днів після САК-трансдукції Т-клітин. Всі ЕСЕЕМПІ- специфічні САК-Т-клітини, за виключенням 32058, були здатні до викликання лізису як низькорівневих експресуючих мішень клітин (МСІ-НЬ522-ЕСЕКМІІІ), так і високорівневих експресуючих мішень клітин (Ш87-КО-ЕСЕЕМІІ), до різних ступенів. Крім того, ЕСЕЕМІІ- специфічні САК-Т-клітини клону Сб викликали лізис клітин, що експресують як ЕСЕК дикого типу, так і ЕСЕЕМІЇ! (фіг. 5).
Ці результати демонструють, що ЕСЕКмМПІ-специфічні САК-Т-клітини ефективно вбивають клітини, які експресують ЕСЕЕМІЇІ.
Приклад 10: Іп мімо випробування ЕСЕКМПІ-специфічних САК-Т-клітин у моделі О0О87-КО-
ЕСЕВМ
У цьому прикладі показана антипухлинна активність ЕСЕКмМІІ-специфічних САК-Т-клітин у ксентрансплантатній моделі ЗВМ підшкірного Ш87-КО-ЕСЕВМІ.
Три мільйони 087-КО-ЕСЕММІ клітин ОВМ-пухлини (що описані вище) імплантували підшкірно М5С-мишам віком 5-6 тижнів (Часкзоп І абогаїогу, Засгатепіо, СА). Об'єм пухлини вимірювали раз на тиждень за допомогою циркулю та обчислювали за наступною формулою:
Об'єм пухлини - (довжина х ширина?) / 2. На день 8 після імлпантації пухлини тварин рандомізували за розміром пухлини по п'ять тварин на групу та вводили одиничну дозу у 6 мільйонів САК-позитивних ЕСЕКМІПІ-специфічних САК-Т-клітин (що експресують ЕСЕЕМПІ- специфічний клон 14С11, 32А10 або 2689; клони описані у будь-якому місці тут) або еквівалентну загальну кількість нетрансдукованих Т-клітин за допомогою ін'єкції болюсу через хвостову вену. На фіг. б показано, що 14С11, 32А10 та 2689 ЕСЕКМПІ-специфічні САК-Т- клітини, але не нетрансдуковані Т-клітини, інгібували ріст 087-КО-ЕСЕВМІЇ ксенотрансплантатної пухлини іп мімо.
Зо Ці результати демонструють, що ЕСЕКМміІІ-специфічні САК-Т-клітини ефективно інгібували ріст пухлини ЕСЕКмІПІ-експресуючих клітин іп мімо.
Приклад 11: Експресія поверхні ЕСЕКмМПІ-специфічних САК, що містять суїцидальну послідовність К2
У даному прикладі показана експресія ЕСЕКмМІИІ-специфічних САК, що містять суїцидальну послідовність К2 у Т-клітинах.
Суїцидальна послідовність К2 являє собою суїцидальну послідовність, що базується на
СО20 епітопі та містить дві тандемні копії епітопу, що розпізнає рітуксимаб. Послідовність К2 вставляли між 5сЕм і СОва! Ішарнірною послідовностями різних ЕСЕКмМІПІ-специфічних САК, що описані у будь-якому місці тут (14311, 32А10, 3008 та 2689) для генерування різних ЕСЕЕМІІ-
К2 САК (що тут називаються як «14С11-К2», «32А10-К2», «3008-К2» та «2689-К2», відповідно). Т-клітини трансдукували за допомогою лентивірусного вектора, що містить касету для експресії ЕСЕКМИПІ-К2 САК, під контролем промотору ЕЕТа при множинності зараження (МОЇ), що становить 5 або 25 (для клонів 2689-К2 та 3008-82). САВ-Т-клітини утримували у культурі протягом періоду до 14 або 15 днів після трансдукції. САК-експресію піддавали моніторингу з плином часу (на день 4, день 9/10 та день 14/15 після трансдукції Т-клітини) проточною цитометрією із застосуванням біотінільованих рекомбінантних білків: ЕСБЕКМПІ-тЕс або рітуксимабу у клітини (що кон'юговані з Е7-Гіпктм Зуйо-МНО-55-Віоїп; ПепторРівНег, умактат, МА), з подальшим ПЕ-кон'югованим стептавідином (ВО Віозсіепсе5, Зап Оіедо, СА).
Відсотки САК-позитивних клітин, що виявили за допомогою біотінільованого ЕСЕЕМПІ-тЕс та біотінільованого рітуксимабу, показані на фіг. 7 і 8 відповідно. Зв'язування з нетрансдукованими
Т-клітинами (МТ) надавали як контроль.
Ці результати демонструють експресію у Т-клітинах ЕСЕКМІІ-специфічних САК, що містять суїцидальну послідовність Ка.
Приклад 12: Цитотоксичність ЕСЕКмМІПІ-специфічних К2 САК-Т-клітин
У даному прикладі показана цитотоксичність ЕСЕКМПІ-специфічних К2 САК-Т-клітин після сокультивування з клітинними лініями, що експресують мішень.
Аналізи цитотоксичності здійснювали так, як описано у прикладі 9, із застосуванням
ЕСЕВМН-Н2 САВ5 14С11-82, З2А10-82, 3008-К2 та 2689-К2, які описані у прикладі 11. Всі випробувані ЕСЕКМІ-специфічні К2 САК-Т-клітини були здатні до викликання лізису як бо низькорівневих експресуючих мішень клітин (МСІ-НЬ522-ЕСЕКМІІІ), так і високорівневих експресуючих мішень клітин (087-КО-ЕСЕРЕМІЇП), до різних ступенів (фіг. 9).
Ці результати демонструють, що ЕСЕКМмМПІ-специфічні К2 САК-Т-клітини ефективно вбивають клітини, які експресують ЕСЕЕМІЇІЇ.
Незважаючи на те, що розкриті рішення були описані з посиланням на різні варіанти зстосування, способи, набори й композиції, слід розуміти, що різні зміни та модифікації можуть бути зроблені без виходу за межі рішень, що викладені тут, та винаходу, що заявлений нижче.
Наведені вище приклади забезпечені для поліпшеної ілюстрації розкритих рішень та вони не призначені для обмеження обсягу рішень, що представлені тут. Незважаючи на те, що дані рішення були описані на цих наведених як приклад варіантах здійснення, фахівцю у даній галузі техніки буде явним чином зрозуміло, що можливі численні варіації та модифікації цих наведених як приклад варіантів здійснення без зайвих експериментів. Всі такі варіації та модифікації знаходяться у межах обсягу даних рішень.
Всі посилання, що зазначені тут, у тому числі патенти, заявки на видачу патенту, статті, книжки і тому подібне, а також посилання, що зазначені тут у такій мірі, що вони не є ранніми, включені сюди у повному обсязі за допомогою посилання. У випадку, якщо одне або більше джерел літератури та подібних матеріалів відрізняється від або входить у протиріч з даною заявкою, включаючи, але без обмеження, у частині визначення термінів, використання термінів, описаних технологій і тому подібного, перевага віддається даній заявці.
У наведеному вище описі та прикладах докладно викладені деякі конкретні варіанти здійснення винаходу та описаний найкращий варіант здійснення, що передбачений авторами винаходу. Однак слід розуміти, що незалежно від того, наскільки докладним може здатися наведений вище текст, винахід може бути реалізований на практиці багатьма способами, при цьому винахід слід тлумачити відповідно до прикладеної формули винходу та будь-яких її еквівалентів.
Перелік послідовностей «110» ПФАЙЗЕР ІНК.
Вонг, ОЇ Кван
Зо Чоу, Джойс Ч
Дюсо, Матильда Бруннхільд Ц
Сміт, Юліанна Ц 120» Химерні антигенні рецептори, що націлені на варіант І рецептора епідермального фактора росту -1305 АГсам-006/02УО 333466-2071 -1405 РСТ/В2017/050108 -1415 2017-07-27 -1505 5 62/431,758 -1515 2016-12-08 -1505 5 62/281,533 -1515 2016-01-21 «1605» 277 «170» РаїепіНп мегвіоп 3.5 «2105» 1 «2115 115 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт (510) «4005 1
Сім мМаї Сіп Геи Сп Сп Бег СПу Рго Сім І еи Ма! Гуз Рго Сіу Аа 1 5 10 15 зЗег Ма! Гуз Пе Зег Сув Гув Тиг Зег Су Тук ТНг Рпе ТНг Авр Туг 20 25 0)
ТАгГ еи Ні Тр Ма! Гуз Сіп Зег Нів Ма! Гуз 5ег І еи Спи Тгр Пе 35 40 45 сСіу Спу Пе Авр Рго Пе Авп Спу Спу Тиг Тиг Туг Авп ап Гу Рпе 50 55 бо
Гуз Спу Гуз Аа ТАг І єи ТАг Маї Азр Гуз 5ег Зег 5ег ТНиг Аа Туг 65 70 75 80
Меї Сім І ви Агу 5ег І еи Тйг Зег Спи Авр Зег Аїа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Аа Аг Сіпу Сім Аа Меї Авр 5ег Ттр Сіу Сіп Спу ТНг Зег Ма! ТНг 100 105 110 Маї Зег Зег 115 -2105 2 00«2115 112 «2125 РВАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 2
Азр Маї Ма! Меї Тиг Сіп ТАг Рго І єи Тиг Геи Зег Ма! Тиг Пе Спу 1 5 10 15
Сп Рго Аа 5ег Пе бег Суз І уз бег бЗег Сп 5егі єи І еи Туг Бег 20 25 0)
Азп Стпу Гуз Тиг Туг І єи Авп Тр Гей Гей Сп Агу Рго Спіу Сіп бег 35 40 45
Рго Гуз Агу Г єи Іе Туг І єи Маї Зег Гуз І еи Авр 5ег Сіу Маї Рго 50 55 60 60 Авр Агу Ре Тнг Стпу 5ег СПу 5ег СПу ТАиг Авр Ре ТНг Геи Гуз Пе
65 70 75 80 зЗег Агу Маї Спи Аа Спи Авр ГГ еи Спу Рпе Туг Туг Суз Ма! Сип Авр 85 90 95
ТАг Ні РнНе Рго І єи Тнг Рне Сіу Аа Спіу Тнг Гуз Гей Спи Ї єи Гуз 100 105 110 «2105» З «2115 115 «2125 РВАТ -213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» З
Сп Маї Сій І єи Маї Сіп бЗег Сіу АІа Спи Маї Гуз Гуз Рго Сіу Аа 1 5 10 15 зЗег Ма! Гуз Маї Бег Суз Гуз Аа бег Спіу Туг Тиг Ре ТНг Авр Туг 20 25 0)
ТАг ей Ніз Ттр Маї Агу Сп Аа Рго Спу Сип Спу Гей Спи Ттр Меї сСіу Спу Пе Авп Рго Пе Авп Спу Спу Тк Тнг Туг Авп ап Гу Рпе 35 50 55 60
Гуз Спіу Ага Маї ТАиг Меї ТАг Агу Авр Тпг Бег Тниг 5ег Тниг Ма! Туг 65 70 75 80 40
Меї Сі І єи Зег 5ег І єи Ага бег Сім Авр ТНг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95 45
Аа Ага Сіпу Сім Аа Меї Ар 5ег Тгтр Спу Сп СПу ТАг ГГ еи Маї ТНг 100 105 110 Маї Зег 5ег 115 «-210» 4 «2115 112 «2125 РВАТ 213» Штучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«400» 4
Азр Маї Ма! Меї Тиг Сп 5ег Рго Гей Зег ГГ еи Рго Маї ТНг І еи Спу 1 5 10 15
Сп Рго Аа 5ег Пе бег Суз І уз бег бЗег Сп 5егі єи І еи Туг Бег 20 25 0)
Азп сту Гуз Тиг Туг І єи Авп Ттр РНе Сп Сп Агу Рго Спу Сп Бег 35 40 45
Рго Ага Ага Г єи Іе Туг І єи Маї Зег Гуз І еи Авр 5ег Сіу Маї Рго 50 55 60
Авр Ага Рпе 5ег Спу 5ег СПу Зег Спу ТАиг Авр Ріє ТНг Геи Гуз Пе 65 70 75 80 зег Агу Маї Сім Аа Спи Ар Маї Спу Ма! Туг Туг Суз Ма! Сіп Азр 85 90 95
Тиг Ні Ре Рго Геи Тиг Ре Спу Счу Спу ТАг Гуз Маї Сім Пе Гув 100 105 110
Зо «2105» 5 «2115 115 «2125 РВАТ -213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 5
Сп Маї Сій І єи Маї Сіп бЗег Сіу АІа Спи Маї Гуз Гуз Рго Сіу Аа 1 5 10 15 зЗег Ма! Гуз Маї Бег Суз Гуз Аа бег Спіу Туг Тиг Ре ТНг Авр Туг 20 25 0)
ТАгГеи Ніз Ттр Маї Агу Сп Аїа Рго Спу Сип Спу Гей Спи Ттр Меї 35 40 45
Сіу Спу Пе Тр Рго Пе Тиг Спу Спу ТАг Тнг Туг Авп ап Гуз Рпе 50 55 60
Гуз Спіу Ага Маї ТАиг Меї ТАг Агу Авр Тпг Бег Тниг 5ег Тниг Ма! Туг 65 70 75 80 60
Меї Сі І єи Зег 5ег І єи Ага бег Сім Авр ТНг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Аа Аго Сіпу Спи Аа Сп Сіу Зег Тгр Спу Сп Спу ТНг ГГ еи Маї ТНг 100 105 110
Маї бЗег 5ег 115 «2105» 6 15. «2115 112 «2125 РВАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 6
Азр Маї Ма! Меї Тиг Сп 5ег Рго Гей Зег ГГ еи Рго Маї ТНг І еи Спу 1 5 10 15
Сп Рго Аа 5ег Пе бег Суз І уз бег бЗег Сп 5егі єи І еи Туг Бег 20 25 0)
Зо
Азп сту Гуз Тиг Туг І єи Авп Ттр РНе Сп Сп Агу Рго Спу Сп Бег
З5
Рго Ага Ага Г єи Пе Туг Сп Маї Зег Гуз І еи Авр 5ег Стпу Маї Рго 60 40 Авр Ага Рпе 5ег Спу 5ег СПу Зег Спу ТАиг Авр Ріє ТНг Геи Гуз Пе 65 70 75 80 зег Агу Маї Сім Аа Спи Ар Маї Спу Ма! Туг Туг Сувз Спу Суп Авр 45 85 90 95
Тиг Ні Ре Рго Геи Тиг Ре Спу Счу Спу ТАг Гуз Маї Сім Пе Гув 100 105 110 50 -2105 7 «2115 115 «2125 РВАТ 55 -213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «4005 7
Сп Маї Сій І єи Маї Сіп бЗег Сіу АІа Спи Маї Гуз Гуз Рго Сіу Аа 1 5 10 15 зЗег Ма! Гуз Маї Бег Суз Гуз Аа бег Спіу Туг Тиг Ре ТНг Авр Туг 20 25 0)
ТАгГеи Ніз Ттр Маї Агу Сп Аа Рго Спу Сип СпПу Гей Спи Ттр Меї 35 40 45
Сіу Спу Пе Тр Рго Пе Тиг Спу Спу ТАг Тнг Туг Авп ап Гуз Рпе 50 55 бо
Гуз Спіу Ага Маї ТАиг Меї ТАг Агу Авр Тпг Бег Тниг 5ег Тниг Ма! Туг 65 70 75 80
Меї Сі І єи Зег 5ег І єи Ага бег Сім Авр ТНг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Аа Аго Спу Спи Аа Спи Сіу Зег Тгр Спу Сп Спу ТНг ГГ еи Маї ТНг 100 105 110 Маї Зег Зег 115 «210» 8 00«2115 112 «2125 РВАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005» 8
Азр Маї Ма! Меї Тиг Сп 5ег Рго Гей Зег ГГ еи Рго Маї ТНг І еи Спу 1 5 10 15
Сп Рго Аа 5ег Пе бег Суз І уз бег бЗег Сп 5егі єи І еи Туг Бег 20 25 0)
Азп Авр Гуз Тпиг Туг Тиг Авп Тр Ре Сп Сп Агу Рго Спу Сп Зег 35 40 45
Рго Ага Ага Г єи Пе Туг Спи Маї Зег Гуз І еи Авр Маї Сіпу Маї Рго 50 55 60 60 Азр Агу Ріє бег Сіу Зег Сіу бег Спіу Тиг Авр РнНе Тнг І єи ГІ уз Пе
65 70 75 80 зег Агу Маї Сім Аа Спи Ар Маї Спу Ма! Туг Туг Сувз Спу Суп Авр 85 90 95
Тиг Ні Ре Рго Геи Тиг Ре Спу Счу Спу ТАг Гуз Маї Сім Пе Гув 100 105 110 «210» 9 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 9
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Маї І еи Геи Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Гей Зег Авп Рго 20 25 Зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си
Тер Рне Аїа Ні Пе РнНе 5ег Тнг Авр Сім Гуз 5егі єи Гуз І еи Бег 35 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 40
Маї Геи Тнг Меї Тниг Азп Меї Аїа Рго Маї Авр 5ег Аа Тиг Туг Туг 85 90 95 45
Сув Аа Аго Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Рпе Авр РНе Ттр Су 100 105 110
Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тниг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 10 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«4005» 10
Спи Маї Ма! І єи Тнг Сп 5ег Рго Аа Тнг І єи бег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг І еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! Агу 5ег Авп 20 25 0)
Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Гув Зег Су Сп Аїа Рго Аго І єи Геи Іе 35 40 45
Туг ачпу Зег ТНг Пе Аго Аїа Тнг Сіу Маї Рго Аа Ага Рне 5ег Спу 50 55 бо
Зег сапу 5ег Спу Тиг си Рне ТНг І еи Тнг Пе 5ег Зег І еи СіІп Зег 65 70 75 80 сій Авр РНе Аїа Маї Туг Туг Суз Сп Сп Туг 5ег Авр Тр Рго Ріе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105
Зо «2105 11 «2115 121 «212» РВАТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 11
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тр еи Ага Ніз Пе Рне 5ег ТНг Авр Сім І ув 5ег Пе Агу Агу 5ег 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 60
Ма! Гей Тнг Меї Тит Азп Меї Авр Рго Маї Азр ТНг Аа Тигк Туг Рпе 85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105 12 «2115 107 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 12
Спи Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа Тнг І єи бег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Маї Тиг ГГ еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! 5ег Зег Авп 20 25 зо
Зо
Рпє Аа Тр Туг Сіп Сп Агу Рго Сіу Сп Аїа Рго Аг Г еи ГГ еи І єи 35
Туг ачу Аа Тиг Тнг Ага Аа Тиг Спу І еи Рго Спу Ага РНе 5ег Су бо 40 Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Авп Пе Гей ТНг Пе бег 5ег І ви Сп Бег 65 70 75 80
Сім Ар Ре Аїа Іе Туг Рне Суз Сіп Сп Туг І уз Авр Тр Рго Рпе 45 85 90 95
ТАг Рне Су Рго Сіу Зег Гуз Ма! Авр Пе ГГ ув 100 105 50 «2105 13 «2115 121 «212» РАТ 55 -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «4005» 13
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 Зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Пе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тр Геи Су Ні Пе Ре Зег Тиг Авр Си Гуз Зег Туг Зег Тиг Зег 50 55 бо
І еи Агу Су Агу Пе Тнг Пе 5ег Гуз Ар Тпг 5ег Ага ау ГІ єи Маї 65 70 75 80
Ма! Геи ТНг ГГ еи Ти Азп Меї Ар Рго Маї Азр ТНг Аа Тиг Тут Туг 85 90 95
Сув Аа Аго Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Рпе Авр РНе Ттр Су 100 105 110
Зо Рго Сіу Рнє І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 14 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 14
Сі Пе Маї Меї Тиг Сіп 5ег Рго Ага ТНг Геи Зег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг Геи Зег Суз Агу Маї Зег Сіп Зег Пе СпПу Аа Авп 20 25 Зо
Ї еи Аа Тр Туг СіІп Сп Гув5 РНе Стпу Сп Айа Рго Ага Геи І єи Пе 35 40 45
Туг апу Аа 5ег ТНг Агу Аа Тиг Сту Пе Рго Маї Ага РНе 5ег Спу 50 55 бо 60 Спіу Спу бЗег Спу Тиг Спи Рне Тнг І єи Тни Пе бег 5ег І ви Сп Бег
65 70 75 80 сій Авр РНе Ага Пе Туг Зег Су Сп Сип Туг Пе Туг Тгтр Рго Ріе 85 90 95
Тиг Рпе ау Рго Стпу Тиг Тиг Маї Авр Пе Гуз 100 105 «2105» 15 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 15
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи Авп Авзп Аа 20 25 Зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си
Тер Ре Аїа Ніз Пе Рне 5ег Тниг Ар Сім Гуз 5ег Ріє Агу Тиг Зег 35 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 40
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95 45
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110 ап Су Пе І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 16 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«4005» 16
Сі Пе Маї Меї Тиг Сіп 5ег Рго Ага ТНг Геи Зег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
См Ага Аа ТНг Гей бег Суз Агу Аа бег Сп бег Ма! бЗег Азп Авп 20 25 0)
Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Гув Рго Стпу Сп Айа Рго Аго І єи Геи Іе 35 40 45
Туг апїу Аа 5ег Тниг Агу Аа Тиг Сту Маї Рго Айїа Агу РНе 5ег Спу 50 55 60
Зег Авр 5ег Спу Тиг Спи Рне з5ег ГГ еи Тнг Пе бег Зег І еи Сп 5ег 65 70 75 80
Сім Ар Ре Аїа Маї Туг Рне Суз Сіп Сп Туг Гуз Авр Тгр Рго Рне 85 90 95
Тиг РНе ау Рго Сіпу Тниг Гуз Маї Спи Пе Гув 100 105
Зо -2105 17 «2115 122 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 17
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Маї 20 25 зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тер Рне Аїа Ні Пе РнНе 5ег 5ег Авр Си І ув бег Пе Агу Ага 5ег 50 55 60
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 60
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95
Сув Аа Аго Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Рпе Авр РНе Ттр Су 100 105 110
Сіп СЧУу ТНг І єи Маї Тниг Маї Зег бег Ап 115 120 «2105» 18 «2115 107 «212» РВАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 18
Азр Меї Маї Маї Тиг Сп 5ег Рго Аа ТнНг І єи 5ег Маї Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг І еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! Спу Зег Авр 20 25 Зо
Зо
Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Рго Рго Спу Сіп 5ег Рго Агу Г еи І єи Пе
З5
Туг апїу Аа 5ег Тниг Агу Аа Тиг Сту Маї Рго Аа Агу РНе 5ег Спу бо 40 Зег Сіу Зег Сіу Тиг Азр Ре Тнг І єи Тнк Пе Тнг 5ег І еи Сім бег 65 70 75 80 сій Авр РНе Аїа Маї Туг Туг Суз Сп Сп Туг Азп Авр Тр Рго Рпе 45 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 50 «2105» 19 «2115 121 «212» РВАТ 55 -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «400» 19
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Маї 20 25 зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Пе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тер Рне Аїа Ні Пе РнНе 5ег 5ег Авр Си І ув бег Пе Агу Ага 5ег 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Зо Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 20 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 20
Сім Меї Сіи Маї Тнг Сп 5ег Рго Аа ТАг І еи 5ег Маї Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тпг ГГ еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сп Авп Пе Сіу Зег Авр 20 25 0)
Ї еи Ага Тр Туг Сіп Сп Сп Зег Спу Сп Айа Рго Аго І єи Геи Іе 35 40 45 зЗег Спіу Аіа 5ег ТНиг Аго Аа Тнг Стпу Маї Рго Тнг Агу Ре Зег Спу 50 55 бо 60 бЗег Сіу бег Спу Тиг Азр Ре Тнг І єи Тнг Пе Тнг 5ег І еи Сп бег
65 70 75 80 сій Авр РНе Аїа Маї Туг Туг Суз Сп Сп Туг Азп Авр Тр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 «2105 21 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 21
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 Зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си
Тр еи Ага Ніз Пе Рне 5ег ТНг Авр Сім І ув 5ег Пе Агу Агу 5ег 35 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 40
Ма! І еи Пе Меї ТНг Азп Меї Авр Рго Маї А5р Тиг Аїа ТНг Туг Туг 85 90 95 45
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105 22 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«4005» 22
Спи Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Рго Авп І еи 5ег Маї Зег Рго Сіу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг І еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! Тиг Зег Авп 20 25 0)
Рпє Аа Тр Туг Сіп Сп Агу Рго Сіу Сіп Зег Рго Агу І єи І єи Гей 35 40 45
Туг апу Аа 5ег Тниг Агу Аа Тиг Сту Маї Рго Спіу Агу Рне 5ег Су 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Авп Пе Гей ТНг Пе бег 5ег І ви Сп Бег 65 70 75 80 сій Авр РНе Аїа Маї Туг Рне Суз Сіп Сп Туг Гуз Авр Тгр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Спу Зег Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105
Зо «2105» 23 «2115 121 «212» РВАТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 23
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 зо
Агу Меї Сіу Маї Зег Тр Іе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тр еи Ага Ніз Пе Рне 5ег ТНг Авр Сім І ув 5ег Пе Агу Агу 5ег 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 60
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 24 «2115 107 «212» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 24
Спи Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа Тнг І єи бег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг І еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сп Сіу Ма! 5ег Зег Авп 20 25 зо
Зо
Рпє Аа Тр Туг Сіп Сп Агу Рго Сіу Сіп Зег Рго Агу І єи І єи Гей 35
Туг апу Аа 5ег Тниг Агу Аа Тиг Сту Маї Рго Спу Агу Ре Зег СПУ бо 40 Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Авп Пе Гей ТНг Пе бег 5ег І ви Сп Бег 65 70 75 80
Сім Ар Ре Аїа Іе Туг Рне Суз СіІп Сп Туг Гуз Авр Тр Рго Рпе 45 85 90 95
ТАг Рне Су Рго Сіу Зег Гуз Ма! Авр Пе ГГ ув 100 105 50 «2105» 25 «2115 121 «212» РАТ 55 -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «400» 25
Сіп Ма! Тит Геи Сім См Бег Спу Рго Маї І єи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 зо
Агу Меї Сіу Маї 5ег Тр Іе Ага Сп Рго Рго Сту Гуз Аа Рго Сі 35 40 45
Тер Рне Аїа Ні Пе РнНе 5ег Тнг Авр Сім Гуз Зег І еи Агу І єи бег 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу Гей Тпг Геи 5ег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Зо Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 26 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 26
Спи Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа Тнг І єи бег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг ГГ еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! Авп Агу Авп 20 25 0)
Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Гув Рго Стпу Сп Айа Рго Аго І єи Геи Іе 35 40 45
Рпе Стпу Тиг Зег ТНг Ага Аа Тнг Спу Пе Рго Айїа Агу РНе Зег Спу 50 55 бо 60 бЗег Сіу бег Сіу Тиг Спи Рне ТНг І єи Тнг Пе Авр 5ег І єи Сп 5ег
65 70 75 80
Сім Нів Зег Спу Геи Туг Туг Суз Сп Сп Туг Азп Авр Тр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 «2105» 27 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 27
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит єи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи 5ег Авп Аа 20 25 Зо
Коо) Гуз Меї ау Маї 5ег Тр Іе Агу Сп Рго Рго Сіу Гуз Аа І еи Спи
Тр еи Ага Ніз Пе Рне 5ег ТНг Авр Сім І ув 5ег Пе Агу Агу 5ег 35 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу ГГ еи Тит Меї Зег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80 40
Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95 45
Сув Маї Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Рне Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сп СЧУу ТНг І єи Маї Тнг Маї Зег 5ег 115 120 «2105» 28 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«4005» 28
Сім Ма! І єи Меї Тнг Сп Зег Рго Ага ТНг ГІ еи Зег Маї 5ег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг І еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! 5ег ТАг Авп 20 25 0)
Рпє Аа Тр Туг Сіп Сп Агу Рго Сіу Сп Аїа Рго Аг Г еи ГГ еи І єи 35 40 45
Рпє Сту Аа 5ег ТАг Агу Аа Тниг Сіпу Пе Рго Сіу Агу РНе 5ег Спу 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Авп Пе Гей ТНг Пе бег 5ег І ви Сп Бег 65 70 75 80 сій Авр РНе Аа Іе Туг Рпе Суз Сп Сп Туг Гуз Авр Тр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рпе аїу Рго Спу Зег Гуз Ма! Спи Пе Гув 100 105
Зо «2105» 29 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 29
Азр Маї Ма! І єи Тиг Сп 5ег Рго Аа ТиАг І єи 5ег Маї Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тиг ГГ еи Зег Суз Агу Аїа 5ег Сіп Зег Ма! Абп 5ег Авп 20 25 зо
Ї еи Ага Тр Туг Сіп Сп Авп Рго Спу Сіп Аа Рго Ага Гени І єи Пе 35 40 45
Рпе Стпу Бег Зег ТНг Аго Аа Тиг Спу Пе Рго Аа 5ег РНе 5ег Спу 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Ре ТНг І єи Тнг Пе Авп 5ег І єи Сп 5ег 65 70 75 80 60
Сім Ні Зег Аа Маї Туг Туг Суз Сп Сп Туг Авп Авр Тр Рго Ріе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 «2105» 30 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 30 ап Ма! ТигГеи Гуз Спи Зег Спу Рго Маї Геи Маї Гув Рго Тнг Си 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег Геи Зег Авп Рго 20 25 0)
Агу Меї ау Маї Зег Тгр Іе Агд Сп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си
Зо
Тр єи Сту Нів Пе РНе 5ег Зег Авр Сім І уз Зег Туг Агу І єи 5ег бо
З5
Ї еи Агу 5ег Агу І еи Зег Пе Бег Гуз А5р ТНг Зег Гуз Зег ап Маї 65 70 75 80 40 Ма! Геи Тнг Меї Ти Азп Меї Ар Рго Маї А5р ТНг Аа Тпг Туг Туг 85 90 95
Суз Маї Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спіу Спіу Туг Рне Азвр Туг Тр Спу 45 100 105 110
Сіп Спу ТАг І єи Маї ТАиг Ма! Зег Зег 115 120 50 «2105 31 «2115 107 «212» РВАТ 55 -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «4005 31
Спи Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа Тнг І єи бег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тпг ГГ еи 5ег Суз Агу Аа 5ег Сіп 5ег Ма! Пе Авп Авп 20 25 0)
Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Гув Рго Стпу Сп Айа Рго Аго І єи Геи Іе 35 40 45
Туг ачпу Тиг Зег ТАг Агу Аа Тниг Азр Пе Рго Аїа Агу РНе 5ег Спу 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Рне ТНг І єи Тит Пе бег 5ег І єи Сіп Бег 65 70 75 80 сій Авр РНе Аа Маї Туг Туг Суз Сіп Авр Туг Азп Авп Тр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 00«2105» 32 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 32 ап Ма! Тиг І еи Гуз Спи Зег Спу Рго Маї Геи Маї Гуз Рго Пе Спи 1 5 10 15
ТАгІ єи Тнг І єи ТАг Суз Тнг Маї Суз Сіу Рне 5ег І єи Зег Авп Рго 20 25 0)
Агу Меї ау Маї Зег Тгр Іе Агд Сп Рго Рго Спу Гуз Аа І еи Си 35 40 45
Тр еєи Сту Ніз Пе РНе 5ег Зег Авр Сім І уз Зег Туг Аг9 І еи Рне 50 55 бо
Ї еи Агу 5ег Агу І еи Зег Пе Бег Гуз А5р ТНг Зег Гуз Зег ап Маї 65 70 75 80 60 МаїЇ Геи Тк Меї ТНг Азп Меї Азр Рго Маї Азр ТНг Аа Тпг Туг Туг
85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авр Туг Спи Сіу Туг Рне Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сіп Спу ТАг І єи Маї ТАиг Ма! Зег Зег 115 120 «2105» ЗЗ3 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» З3
Сі Пе Маї Меї Тиг Сіп 5ег Рго Ага ТНг Геи Зег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага ТАг ТАг ГГ еи Зег Суз Агу Аа 5ег Сп 5Зег Маї СПу Зег Авп 20 25 Зо
Коо) Ї еи Ага Тр Туг СіІп Сп Гув Рго Стпу Сп Айа Рго Аго І єи Геи Іе
Туг апїу Аа 5ег Тниг Агу Аа 5ег Сіу Маї Рго Айїа Агу Рне 5ег Спу 35 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Рне ТНг І єи Тит Пе бег 5ег І єи Сіп Бег 65 70 75 80 40 сій Авр РНе Аїа Маї Туг 5ег Сув СіІп См Туг Авп Авп Тр Рго Ріе 85 90 95 45
Тиг Рне Су Сіп Спу Тиг Гуз Маї Спи Пе Гув 100 105 «2105» 34 «2115 121 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «220» бо «221» тівс Теайшге
«ре2» (83)..(83) «223» Хаа сап ре апу пашгайПу осситіпд атіпо асій «4005» 34
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТАгГеи Тнг Ге Тиг Суз ТАиг Маї Ре Стпу РНе 5ег Геи 5ег Авп Рго 20 25 0)
Агу Меї ау Маї Зег Тгр Пе Агд Сп Рго Рго Спу Гуз Аа Рго Спи 35 40 45
Тр єи Сту Нів Пе РНе 5ег Зег Авр Сім І уз Зег Туг Агу І єи 5ег 50 55 60
Ї еи Агу 5ег Агу І еи Зег Пе Бег Гуз А5р ТНг Зег Гуз Зег ап Маї 65 70 75 80
Ма! Рне Хаа Меї Тнг Азп Меї Авр Рго Сіу Авр Рго Аа Тнг Туг Туг 85 90 95
Суз Ма! Агу Авр 5ег Зег Азп Туг СПи СП Туг РНе Азвр Туг Ттр Спу 100 105 110
Сіп Спу ТАг І єи Маї ТАиг Ма! Зег Зег 115 120 «2105» 35 «2115 121 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 35
Сіп Ма! Тиг ГГ еи Гуз Сім Бег Сну Рго Ма! І еи Ма! Гуз Рго ТАг Спи 1 5 10 15
ТигГеи Тит еи Тнг Суз Тиг Маї Зег Спу РНе 5ег І еи Зег Авп Рго 20 25 0)
Агу Меї ау Маї Зег Тгр І еи Ага Сіп Рго Рго Сіу Гуз Аа І еи Спи 35 40 45 60 Тер Ре Аа Нів Пе Ріє 5ег ТНг Ар Сім Гув 5ег Туг Зег Рго 5ег
50 55 бо
Ї еи Агу Су Агу І єи ТНг Маї Зег Гуз Авр ТАг Зег Гуз Зег Сп Маї 65 70 75 80
Ма! Геи ТНг ГГ еи Ти Азп Меї Ар Рго Маї Азр ТНг Аа Тнг Тугк Туг 85 90 95
Сув Аа Агд Ар 5ег Зег Авп Туг Спи Сіу Туг Ре Авр Туг Тгтр Спу 100 105 110
Сіп СІу ТАг І єи Маї ТАиг Ма! бег Зег 115 120 «2105» 36 «2115 107 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 36
Коо) Гуз Пе Маї Меї Тнг Сіп Зег Рго Аа ТнНг І єи 5ег Ма! Зег Рго Спу 1 5 10 15
Сім Ага Аа Тпг І еи 5ег Суз Агу Аїа Азп ап Пе Маї 5ег 5ег Авп 20 25 0)
Ї еи Аа Тр Туг Сп Сп Гуз Рго Спу Сіп Аїйа Рго Агу І! єи Г еи Маї 35 40 45
Рпе Стпу Тнг Зег ТНг Ага Аа Тнг Спу Пе Рго Пе Ага Рне 5ег Спу 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Спи Рне ТнНг І єи Тнг Маї Зег 5ег І єи Сп бБег 65 70 75 80 сім Ар Ре Аїа Маї Туг Ма! Су Сп Сіп Туг Азп Авр Тр Рго Рпе 85 90 95
Тиг Рне аїу Рго Стпу ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз 100 105 «2105» 37 «2115 118 60 0о«212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005» 37
Сім Маї Сіп Г еи Ма! Спи Зег Сіу Сіу Спу Геи Маї Гуз Рго Спу Спу 1 5 10 15 зег І ви Аго І єи 5ег Суз Сіи Аа Зег Сіу Рпе Тнг Ре 5ег Ар Аа 20 25 0)
Тр Меї 5ег Тгр Маї Аго ап Аа Рго Стпу Гуз СПу Г еи Спи Тр Маї 35 40 45 ау Ага Пе Гуз 5ег Гуз ТНиг Авр Сіу Спу Тнг Тиг Авр Туг Маї Маї 50 55 60
Рго І еи Авп Су Агу Ре Пе Пе Зег Агу Авр Авр 5ег Агу Авп ТНг
Х65 70 75 80
Ї ви ТугГеи Сп Гей Авп Авп Геи Гуз ТНг Спи Авр ТНг Аа Маї Туг 85 90 95
Зо
Туг Сув ТАг Тиг Маї Рго Спу Зег Туг Сіу Туг Ттр Су Сп Су ТАг 100 105 110
З5
Ї еи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 40 «2105» 38 «2115 112 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність 45 «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» З8 50 Ар ЇІе Ма! Меї Тиг Сп 5ег Рго Геи Зег І єи Рго Маї Тиг Рго Спу 1 5 10 15
Сім Рго Аа 5ег Пе бег Сувз Агу 5ег Зег Сп Зег І еи Геи Нів Авп 55 20 25 0)
Гуз Агу Азп Авп Туг І еи Авр Тр Ре І єи Сп Гуз Рго Спу Сп ег 60
Рго Сіп І єи І єи Пе Туг І ей Аа 5ег Азп Агу Аа бег Сіу Маї Рго 50 55 бо
Азр Агу Ре Бег Спу Спу СПу Зег СПу ТАг Азр РНе ТнНг І еи Гуз Пе 65 70 75 80
Бег Ага Маї Сім Аїа Сіи Авр Маї Спу Маї Туг Туг Суз Меї Сп Аа 85 90 95
Сіп Сп ТАг Рго Пе ТНк Рпе Спу Сіп Спу ТНг Ага Геи Сім Пе Гув 100 105 110 «2105» 39 «2115» 120 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 39
Сім Маї Авп Геи Маї Сім Зег Сіу Спу Спу Геи Ма! Гув Рго Сіу Спу 1 5 10 15
Зо зег І ви Аго І єи 5ег Суз Сіи Аа Зег Сіу Рпе Тнг Рпе Зег Туг Аіа 20 25 0)
З5
Тер Меї 5ег Тгр Маї Аг ап Аа Рго Стпу Гуз СПу Геи Сім Тер Маї 40 ау Ага Іе Гуз 5ег Пе Аа Авр Стпу Спу Аа Тнг Ар Туг Аа Аа бо
Рго Маї Ага Авп Агу Ре ТНг Пе 5ег Ага Авр Авр Зег Агу Авп ТНг 45 65 70 75 80
Ї ви ТугГеи Спи Меї Нів 5ег І еи Гуз ТАиг Сім Авр Тнг Аа Маї Туг 85 90 95 50
Туг Сув ТАиг Тит Пе Рго Стпу Ап Авр Аїа Ре Ар Меї Тгр Сіпу Сп 100 105 110 55
Сіу Тнг Меї Маї Тнг ма! 5ег Зег 115 120 60 0о«210» 40
«2115 112 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 40
Авр Іе Маї І єи Тиг Сп 5ег Рго Геи Зег І єи Зег Ма! Тиг Рго Спу 1 5 10 15
Спи Рго Аа 5ег Пе бег Суз Агу 5ег бег Сп 5егі єи І еи Туг Зег 0)
Азп сту Гуз Авп Туг І єи Авр Тр Рне І! єи Нів Гуз Рго Спу Сіп бег 35 40 45 20
Рго Сп І еи Геи Пе Туг Гей Спіу Зег Азп Аго Аа 5ег Сіу Маї Рго 50 55 60 25
Азр Агу Ріє бег Сіу Зег Сіу бег Спу Пе Азр РнНе Пе І єи ГГ уз Пе 65 70 75 80
Бег Ага Маї Сім Аа Сіи Азр Маї Спу Ма! Туг Туг Суз Меї Сп Аїа 85 90 95
Сіп Сп ТАг Рго Пе ТНк Рпе Спу Сіп Спу ТНг Аг Гей Си Пе Гув 100 105 110 «2105 А «2115» 119 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 41
Сім мМаї Сіп І єи Ма! Спи Зег Тгтр Стпу Ма! І еи Маї Гуз Рго СПу Спу 1 5 10 15 зЗег І ей Ага І єи бег Суз Аа Аа бег Спіу РНе Пе РНе Авп Авп Аїа 20 25 0)
Тр Меї 5ег Тгр Маї Аг ап Аа Рго Сту Гуз Спу Геи Спи Тр Пе 35 40 45 60 сапу Аго Пе Гуз Зег Гуз Зег Азр Спу Спу Тиг ТНг Азр Туг АЇа Аіа
50 55 бо
Рго Маї Гуз Ар Аг РНе Тнг Пе 5ег Ага Авр Авр 5ег Гуз Авр ТНг 65 70 75 80
Ї ви ТугГеи Сп Меї Азп Су ГГ еи Гуз Тиг Сім Авр Тнг Аа Маї Туг 85 90 95
Рпе Суз Тниг Тниг Аїіа Рго Спу Стпу Рго Рпе Азр Туг Ттр Спу Сп Спу 100 105 110
Тиг Ге Маї Тниг Ма! бег Зег 115 «2105» 42 «2115 112 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 42
Авбр ЇІе Маї І єи ТАг Сп 5ег Рго Геи зЗег І єи Рго Маї Тиг Рго Спу 1 5 10 15
Сім Рго Аа 5ег Пе бег Суз Агу бег Зег Сіп Зегі ей ей Ні Ага 20 25 0)
Азр Сіпу Ре Авп Туг І єи Ар Ттр РНе ГГ еи Сп Гуз Рго Спу Сіп Зег 35 40 45
Рго Сіп І єи І єи Пе Туг І єи Аа бег Зег Ага Аа бег Сіу Ма! Рго 50 55 бо
Азр Агу Ре Зег Спу 5ег А5р 5ег Спу ТНиг Авр РНе ТнНг І єи Гуз Пе 65 70 75 80
Бег Ага Маї Сім Аїіа Сіи Авр Маї Спу Маї Туг Туг Сув Меї Сіп Аа 85 90 95
Ї еи Сп ТНк Рго Пе Тнк Рпе Стпу Сип Спу ТАг Ага Гей Спи Пе Гув 100 105 110 «210» 43 «2115» 120 60 0о«212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005» 43
Сім Маї Авп Гей Маї Сіи Зег Сіу Спу Спу Геи Маї Гув Рго Сіу Спу 1 5 10 15 зег І ви Аго І єи 5ег Суз Спи Аіа Зег Сіу Рпе Тнг РНе Зег Туг Аіа 20 25 0)
Тр Меї 5ег Тгр Маї Аго ап Аа Рго Стпу Гуз СПу Г еи Спи Тр Маї 35 40 45 ау Ага Пе Гуз 5ег Пе ТАг Авр Сіу Сту Ма! Пе Азр Туг Аа Аіа 50 55 60
Рго Маї Ага Авп Агу Суз ТНг Іе 5ег Агу Авр Авр 5ег Агу Авп ТНг
Х65 70 75 80
Ї ви ТугГеи Сім Меї Нів 5ег І еи Гуз ТНг Сім Авр Тнг Аа Маї Туг 85 90 95
Зо
Туг Сув ТАг Тит Пе Рго Стпу Авп Ар Авр РНе Азвр Меї Тгр Сіу Сп 100 105 110
З5
Сіу Аго Меї Ммаї ТАг Ма! Бег Зег 115 120 40 «2105» 4А «2115» 120 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність 45 «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 44 50 См Маї Авп І єи Маї Спи Зег Сіу пу СПу І еи Маї Гуз Рго Спчу Су 1 5 10 15 зег І ви Аго І єи 5ег Суз Сіи Аа Зег Сіу Рпе Тнг Рпе Зег Туг Аіа 55 20 25 0)
Тр Меї 5ег Тгр Маї Аго ап Аа Рго Стпу Гуз СПу Г еи Спи Тр Маї 60
Сіу Ага Іе Гуз Зег Пе Авзп Авр Спу СПу Аа Тнг Авр Туг Аа 5ег 50 55 бо
Рго Маї Ага Авп Агу РНе ТНг Пе 5ег Ага Авр Авр 5ег Агу Азп Меї 65 70 75 80
Ї ви ТугГеи Спи Меї Нів 5ег І еи Гуз ТАиг Сім Авр Тнг Аа Маї Туг 85 90 95
Туг Сув ТАиг Тит Пе Рго Стпу Ап Авр Аа РНе Азр Меї Тгр Сіпу Сп 100 105 110
СІу Ти еи Маї Тнг Маї 5ег 5ег 115 120 «2105» 45 «2115 112 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 45
Азр Іе Маї І єи Тиг Сп Зег Рго Геи Зег І єи Зег Ма! Тиг Рго Спу 1 5 10 15
З5
Сім Рго Аа 5ег Пе бег Сувз Агу Зег Тиг Сп 5ег Геи І еи Туг Зег 20 25 Зо 40 Авп Су Гуз Азп Туг І єи Азвр Тр РнНе І єи Нів І уз Рго Сіу Сіп 5ег
Рго Сіп І єи І єи Пе Рне І єи Сіпу бег Пе Агу Аа 5ег Сіу Маї Рго 45 50 55 бо
Азр Агу Ріє бег Сіу Зег Сіу бег Спу Пе Азр РнНе Пе І єи ГГ уз Пе 65 70 75 80 зЗег Аг Маї Спи Аа Спи Ар Маї Сіпу Маї Туг Туг Суз Меї ап Аа 85 90 95
Сіп Сп ТАг Рго Пе ТНк Рпе Спу Сіп Спу ТНг Аг Гей Си Пе Гув 100 105 110 60 0о«210» 46
«2115» 119 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 46 си Маї Сип Ї еи Ма! Спи Зег СПу Спу Авр ГІ єи Маї Гуз Рго Счу Су 1 5 10 15 зЗег І ей Ага І єи бег Суз Аа Аа бег Спіу Рне Тнг Рне ТНнг Авп Аа 0)
Тр Меї 5ег Тгр Маї Аго ап Аа Рго Стпу Гуз СПу Г еи Спи Тр Маї 35 40 45 20
Сіу Ага Іе Гуз Зег І уз Пе Авр Стіу Спу Тиг ТАг Авр Туг Аа Аіа 50 55 60 25
Рго Маї Гуз Спу Ага РНе Іе Пе 5ег Агу Авр Авр 5ег Гуз Авп ТНг 65 70 75 80
Гей Зегі ви Сіп Меї Авп 5ег І еи Гуз ТНг Спи Авр ТНг Аа Меї Туг 85 90 95
Туг Сув ТАиг ТАг Аа Рго Сіпу Спіу Рго Рпе Авр Туг Тгр Спу Сп Спу 100 105 110 зег І ви Ма! Тиг Ма! Зег Зег 115 «2105» 47 «2115 112 «2125 РВАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 47
Азр Іе Маї І єи Тиг Сп Зег Рго Геи Зег І ви Рго Маї Тнг Рго Спу 1 5 10 15
См Рго Аа 5ег Пе бег Суз Агу 5ег бег Сп 5егі єи І єи Туг Бег 20 25 0) 60 Авр Аг Агу Авп Туг Гей Авр Тр РНе ГГ еи Сп Гуз Рго Сіу Сп бег
35 40 45
Рго Нів І є І єи Пе Туг І єи Спу бег Туг Агу Аа бег Сіпу Маї Рго 50 55 60
Азр Агу Ре 5Бег Спу 5ег Спу 5ег Спу ТНиг Авр РНе ТнНг І єи Гуз Пе 65 70 75 80 зЗег Аг Маї Спи Аа Сім Ар Маї Сіпу Маї Туг Туг Суз Меї ап Аа 85 90 95
Ї еи Сп Пе Рго Пе Тнк Рпе Спу Сип Спу Тиг Ага Гей Спи Пе Гув 100 105 110 «2105» 48 «2115» 126 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 48
Сп Маї Сіп І еи Маї Сип Зег Спу Аа Сіи Ма! Гуз Гуз Рго Сіу Зег 1 5 10 15 зЗег Ма! І уз Ма! Зег Суз І уз Аа Зег Сіу Азр Тиг РНе 5ег 5ег Авп 20 25 Зо
Аа Іе 5ег Тр Маї Агу Сіп Айїа Рго Спу Сіп Спу Ї и Сім Тур Меї 35 40 45
Сіу Ма! Пе Пе Рго Пе Рне Сіу ТАг Аа Авр Туг Аа Сп Гуз Рпе 50 55 60
Сіп Спу Аг Маї Тк Пе Тнг Аа Азвр Сім Бег Тнг 5ег Тнг Аа Туг 65 70 75 80
Меї Сі І єи Зег 5ег І єи Ага бег Сіи Авр ТНг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Аа Ага Ні Тиг Туг Ніз Спи Туг Аа Спу Спу Туг Туг Спу Сіу Аа 100 105 110
Меї Азвр Рго Тгр Спу Сп Спу ТНг ГГ еи Ма! Тниг Маї Зег Зег 115 120 125 60
«210» 49 «2115 112 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 49 сій Геи Сп Зег Ма! Геи ТНг Сп Рго Рго 5ег Аа Зег Спіу ТНг Рго 1 5 10 15
Сіу Сп Аг Маї Тк Пе Зег Суз бег Сіу бЗег Зег 5ег Авп Пе Спу 0) 20 Зег Азп Туг Маї Туг Ттр Туг ап Сп Геи Рго Спіу Тнг Аа Рго Гуз
Пе Геи Пе Туг Агу Авп Авп ап Ага Рго Зег СіПу Маї Рго Ар Ага 25 50 55 60
Ре бег Спу 5ег І ув бег Спу ТНг бег Аа 5ег І єи Аа Пе Зег Спу 65 70 75 80
Зо
Ї еи Агу бег Си Авр Си Аїа Ар Туг Туг Суз Аа Ага Тр Авр Авр 85 90 95
З5
Авп Гей Зег Спіу Тгр МаїЇ Рне Спу Тиг Спу Тиг Гуз І єи ТНг Ма! І еи 100 105 110 40 «2105» 50 «2115 123 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність 45 «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 50 сім МаїЇ Сіп ей Гей СПи Зег Сіу СПу СпПу Гей Маї Сп Рго Сіу Спу 1 5 10 15 зег І ви Аг І єи 5ег Суз Аїа Аа 5ег Спіу Рпе ТНг Рне Зег Авп Туг 20 25 0)
Аа Меї 5ег Тгр Маї Ага Сп Айа Рго Спу Гуз Спу І еи Сім Тер Маї 35 40 45 60 зЗег Авр Пе бБег Сіу Спу СПу Су Ага ТНг Туг Туг Аа Авр 5ег Маї 50 55 60
Гуз Спіу Ага Ре Тнг Пе 5ег Агу Авр Авп 5ег І ув Авзп ТНг Гей Туг 65 70 75 80
Ї еи Сп Меї Авп 5ег І ви Агу Аа Сіи Авр ТНг Аа Маї Туг Туг Суз 85 90 95
Аа Аг Аїа Су І єи Геи Туг Спу СЧу Спу Маї Туг Рго Меї Авр ІПе 100 105 110
Тр Стпу Сп Слпу ТНг ГГ еи Маї ТАг Ма! Зег Зег 115 120 «2105 51 «2115 107 «2125 РВАТ -213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт
Коо) «4005 51
Азр Пе Сип Меї ТАг Сп Зег Рго Зег Зег І ви Зег Аа 5ег Ма! СПу 1 5 10 15
З5
Азр Аг Маї Тпг Пе Тнг Суз Агу Аа бег Сп Зег Пе 5ег 5ег Туг 20 25 0) 40 Ї еи Авп Тгр Туг Сп Сп Гуз Рго Спу Гуз Аїйа Рго Гуз І єи І еи Пе
Туг АІа Аа 5ег 5ег І єи Сп 5ег Спу Ма! Рго 5ег Ага РНе 5ег Спу 45 50 55 бо
Зег Сіу Зег Сіу Тиг Азр Ре Тнг І єи Тнг Пе Зег 5ег І єи Сп Рго 65 70 75 80 сій Авр РНе Аа Тнг Туг Туг Сув Сип Сп Зег Туг Зег ТНг Рго І єи 85 90 95
Тиг Рне Су Сіп Спу Тиг Гуз Маї Спи Пе Гув 100 105 60 0о«2105 52
«2115 491 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 52
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Ні Аїа Аїа Аг Рго Азр Маї Маї Меї Тиг Сіп Зег Рго І єи Зег І еи 0)
Рго Маї Тиг Гей Спу Сп Рго Аа 5ег Пе 5ег Суз Гуз Зег Зег Сп 35 40 45 20 зегі ви Геи Туг Зег Авзп Спу Гуз Тнг Туг І єи Авп Тр РНе Сп Сп 50 55 60 25
Агу Рго Сіу Сп Зег Рго Аго Ага І єи Пе Туг Сп Маї Зег Гуз І єи 65 70 75 80
Абр бег Спу Маї Рго Азр Агу РНе бЗег Спіу Зег Спу Зег СПу Тиг Авр 85 90 95
Рпе Тниг Геи Гуз Пе Зег Агу Маї Сім Аа Сім Ар Маї Спу Ма! Туг 100 105 110
Туг Сувз Спу Сіп Авр ТНг Нів Рне Рго Гей Тнг Рне Сіу Спу Спу ТАг 115 120 125
Гуз Ма! Спи Пе Гуз СПУ Спу Сіу Спу Зег Сіу Спу Спу Счіу Зег Су 130 135 140
Спіу Сіу Спу Зег Сіу Спу Спу Спіу Зег Сп Маї Спп І ей Маї Сіп бБег 145 150 155 160 апу Аа Сіи Маї Гуз Гуз Рго Сіу Аа 5ег Маї Гуз Ма! Бег Суз Гув 165 170 175
Аа 5ег СпПу Туг Тит Ре Тнг Ар Туг ТНг І єм Ні Тгтр Маї Ага Сіп 180 185 190
Аа Рго Спу Сип СПУ Гей Спи Тгр Меї Спіу Спу Пе Тгр Рго Пе ТНг 195 200 205 60 сСіу Спу Тик Тнг Туг Авп Сп Гуз Ре Гуз Сіу Агу Ма! Тиг Меї Тнг 210 215 220
Агу Авр ТНг Зег ТНг Зег ТНг Ма! Туг Меї Сім І єи Зег Зег І еи Ага 225 230 235 240
Зег Сім Ар ТНг Аа Маї Туг Туг Суз Аа Ага Спу Сім Аа Сп Спу 245 250 255 зЗег Тр Сіу Сип Спу ТНг ГГ еи Маї Тнг Маї Зег 5ег Тнг ТНг ТНг Рго 260 265 270
Аа Рго Ага Рго Рго Тнг Рго Аїа Рго ТАг Іе Аа 5ег Сп Рго Гей 275 280 285 зег І ви Агу Рго Спи Аа Суз Агу Рго Аїа Аа Стпу Стпу Аа Маї Ні 290 295 00
Тпиг Агу саму Геи Авр Ріє Аа Суз Азр Іе Туг Пе Ттр Аа Рго Г еи 305 з10 315 з20
Аа Сіу ТНг Суз Спіу Ма Гец Ї еи Ї ви бег І еи Ма! Пе ТНг Гей Туг 325 330 335
Сув Гуз Агу Су Ага Гуз Гуз І еи ГГ еи Туг Пе Ре Гуз Сп Рго Рпе 340 345 350
Меї Агу Рго Маї Сіп Тик ТНг Сп СПи СПми Авбр Спу Суз Зег Сув Аг9 355 360 365
Ре Ро Сім Спи Сі Си Сбіу Спіу Суз См І и Агу Ма! Гуз Рне 5ег 370 375 380
Агу Зег Аа Ар Аїйа Рго Аїа Туг Сп Сп СПу Сп Авп Сп Гей Туг 385 390 395 400
Авп Сім Гей Авп І ви Спу Аго Аг Спи Сім Туг Авр Маї Геи Авр Гуз 405 до 415
Аго Аг Сіу Агу Авр Рго Спи Меї Спіу Спіу Гуз Рго Агу Аг Гув Авп 420 425 430
Рго Сіп Сіи Спу І еи Туг Азп Ст Гей Сі Гуз Авр І уз Меї Аа Спи 435 440 445 60
Аа Туг Зег Сім Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи Ага Агу Ага Спу Гув Спу 450 455 460
Ні Авр Су І єи Туг Сп Спу Ї еи Зег ТНг Авіа Тниг Гуз Ар ТНг Туг 465 470 475 480
Авр Аа! єм Ні Меї ап Аа І ви Рго Рго Аг9 485 490 «2105 53 15. «2115» 492 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 53
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіп Маї ТНг Гей Гуз Спи бег Спіу Рго Ма! І єи 20 25 0)
Зо
Ї еи Гуз Рго Тиг Сім ТАг Гей ТНг І єи Тнг Суз Тнг Ма! Зег Сіу Рне
З5 зег І ви 5ег Авп Рго Агу Меї Сіу Маї 5ег Тр Іе Агу Сіп Рго Рго 60 40 СПУ Гуз Аа І єи Спи Тер Рне Аїа Ні Іе РНне 5ег Тнг Азр Си ГГ ув 65 70 75 80 зегі єи Гуз І єи 5ег І еи Агу Зег Агу І єи Тиг і еи Зег Гуз Авр ТНг 45 85 90 95 зег Гуз 5ег Сп Маї Ма! Геи ТАиг Меї Тниг Авп Меї Аїа Рго Маї Азр 100 105 110 50 зЗег Аіа Тниг Туг Туг Сув Аа Агу Авр 5ег Зег Авп Туг Спи СПу Туг 115 120 125 55
Рпе Авр Ре Тр Сіпу Сіп Спу ТАг ГГ еи Маї ТАиг Ма! Зег Зег СПу Спу 130 135 140 60 0 Спу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу Зег СПу Счіу Спу
145 150 155 160
Спу бег Си Маї Ма! І еи Тнг Сіп 5ег Рго Аа Тнг І єи 5ег Ма! Зег 165 170 175
Рго Счпу Спи Агу Аа Тнг Гей Зег Суз Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! Ага 180 185 190 зЗег Авп І єи Аа Ттр Туг Сп Сп Гув Зег Спу Сп Аа Рго Ага Гей 195 200 205
Ї ем Пе Туг Спу Зег ТНг Пе Агу Аїа Тнг Стпу Маї Рго Аїа Агу Ріе 210 215 220
Бег Сіу бег Сіу бЗег Спу Тиг Сім РНе Тнг І єи Тнг Пе бег 5ег І єи 225 230 235 240
Сіп Зег Сім Авр РНе Аїа Маї Туг Туг Суз Сп Сп Туг Зег Авр Тр 245 250 255
Рго Ре Тнг Ріє Су Рго СПУ ТНг Гуз Маї Авр Пе Гуз Тиг ТАг ТНг 260 265 270
Зо
Рго Аа Рго Аг Рго Рго Тнг Рго Аа Рго ТНг Пе Аїа 5ег Сп Рго 275 280 285
З5
Ї еи Зег І єи Агу Рго Сім Аа Суз Агу Рго Аїйа Аа Стпу Сіпу Аїа Маї 290 295 зо00
Ні Тнг Аго сту І еи Авр РНе Аа Суз Ар Іе Тут Пе Тгр Аа Рго 305 з10 315 з20
Ї еи Аіа Спіу Тнг Суз Сіу Ма! ей ей Ї ви Бе І єи Ма! Пе Тнг І еи 325 з30 335
Туг Суз Гуз Ага Сіу Ага Гуз Гуз І єи І єи Туг Пе РНе Гуз Сп Рго 340 345 350
Рпе Меї Агу Рго Маї Сіп Тнг Тнг Сп Сі СП Авр Спіу Суз бЗег Сувз 355 360 365
Ага РНе Рго Спи Сіи Стіи Стіи СПІу Сіу Сувз Сі І еи Агу Ма! Гув Рпеє 370 375 380 60 Бег Агу бег Аіа Ар Аа Рго Аа Туг Сп Сип СТу Сп Авп Сп І еи
385 390 395 400
Туг Азп Си Гей Авп І єи Стпу Агу Ага Спи Спи Туг Авр Маї І еи Азр 405 до 415
Гуз Агу Аго Спу Агоу Авр Рго Сім Меї Сіу Спу Гуз Рго Ага Агу Гуз 420 425 430
Авп Рго Сп Спи Спу І єи Туг Азп Спи І еи Сп Гуз Авр І уз Меї Аа 435 440 445
Сім Аїа Туг 5ег СИПм Пе Спу Меї Гуз Спу Спи Агу Аго Аг ау Гув 450 455 460 ау Ні Авр Су І єи Туг Сип Спу Гей 5ег ТАг Аа Тниг Гуз Авр ТНг 465 470 475 480
Туг Авр Аїа І єм Ні Меї Сіп Аа Г еи Рго Рго Аг9 485 490 «2105 54 «211» 492 00 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 54
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіп Маї Тнг Гей Гуз Спи бег Спіу Рго Маї І єи 20 25 0) ма! Гуз Рго Тнг Си ТНг І еи ТНг І єи ТАг Суз Тнг Ма! Зег Спу Рпе 35 40 45 Бег еи Зег Авп Аа Агу Меї Сіу Маї Зег Тгр Пе Ага Сп Рго Рго 50 55 бо
Сіу Гуз Ага І єи Сііи Тгр І еи Айва Ніз Пе Ре 5ег Тиг Авр Сі Гув 65 70 75 80 зЗег Пе Агу Агу з5ег Гей Агу Зег Аго І єи ТНг ГГ еи Зег І уз Авр ТНг 85 90 95 (516)
зЗег Гуз 5ег Сп Маї Ма! Геи Тиг Меї Тниг Азп Меї Авр Рго Маї Авр 100 105 110
Тиг Ага ТАг Туг Рпе Суз Айа Агу Авр 5ег Зег Азп Туг Спи СПу Туг 115 120 125
Рпе Авр Туг Ттр Спу СіІп Спу ТНг ГГ еи Маї Тнг Ма! Зег Зег Сіу Су 130 135 140
СпІу Су Зег Сіу Спу Спу Спу бег Сіу Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Су (145 150 155 160
Спу бег Си Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа ТнНг І єи 5ег Ма! 5ег 165 170 175
Рго Спу Спи Агу Маї Тиг Гей Зег Суз Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! 5ег 180 185 190 зЗег Авп РНе Аа Тр Туг Сп СіІп Ага Рго Стпу Сіп Аа Рго Ага Гей 195 200 205
Коо) Ї ей І єи Туг Сіу Аа Тниг ТНиг Ага Аа Тиг Стпу Геи Рго Сіу Агу Рпе 210 215 220
Зег Сіу Зег Сіу Зег Спу Тиг Спи Авп Пе І и Тнг Пе бег 5ег і еи
ДЦ225 230 235 240
Сіп Зег Сім Авр РНе Аїа Іе Туг Рпе Суз СіІп Сп Туг Гуз Авр Тр 245 250 255
Рго Ріе Тнг Ріє ау Рго Су 5ег І уз Маї Авр Пе Гуз Тиг ТАг ТНг 260 265 270
Рго Аа Рго Аг Рго Рго Тнг Рго Аа Рго ТНг Пе Аїа 5ег Сп Рго 275 280 285
Геи Зегі єи Агу Рго Спи Аа Суз Агу Рго Айа Аїа Сіпу Сіпу Аа Маї 290 295 00
Ні Тнг Аго сту І еи Авр РНе Аа Суз Ар Іе Тут Пе Тгр Аа Рго 305 з10 315 з20
Ї еи Аіа Спіу Тнг Суз Сіу Ма! І ей ей Ї еи 5ег І єи Ма! Пе Тнг І еи 325 330 335 60
Туг Суз Гуз Ага Сіу Ага Гуз Гуз І єи І єи Туг Пе РНе Гуз Сп Рго 340 345 350
Рпе Меї Агу Рго Маї Сип Тнг ТТН Сп Спи СТ Авр Спіу Суз Зег Сувз 355 360 365
Ага РНе Рго Сіиш Сіи СПіи Сіи СІу Сіу Суз Сі І еи Агу Маї Гув Рпе 370 375 380 зЗег Агу 5ег Аа Авр Аа Рго Аа Туг Сп Сип СПу Сип Авп сп Гей 385 390 395 400
Туг Азп Си Гей Авп І єи Стпу Агу Ага Спи Спи Туг Авр Маї І еи Азр 405 до 415
Гуз Агу Аго Спу Агоу Авр Рго Сім Меї Сіу Спу Гуз Рго Ага Агу Гуз 420 425 430
Авп Рго Сп Спи Спу І єи Туг Азп Спи І еи Сп Гуз Авр І уз Меї Аа 435 440 445
См Аа Туг Зег Сім Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи Агу Агу Ага Спу Гув 450 455 460
Сіу Ні Азр Сту ГГ еи Туг Сп Спу Геи Зег Тнг Аа Тнг Гуз Авр ТНг 465 470 475 480
Туг Авр Аїа І єм Ні Меї Сіп Аа Г еи Рго Рго Аг9 485 490 «2105» 55 «211» 492 «212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 55
Меї Аа І еи Рго Маї Тк Аа І! єи І єи І єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї еи 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіп Маї Тнг Гей Гуз Спи бег Спіу Рго Маї І єи 20 25 Зо 60 Маї Гув Рго Тиг Спи Тиг Гей Тит Геи ТАиг Суз Тнг Маї Зег Сіу Рпе
35 40 45 зег І ви 5ег Авп Аа Агу Меї Сіпу Маї Зег Тгтр Пе Аго Сп Рго Рго 50 55 60
Сіу Гуз Аа Геи Си Тгр І еи Су Ні Пе Рпе 5ег ТНг Авр Сім Гув 65 70 75 80 зЗег Туг Зег Тпг Зег І єи Агу Сіу Ага Пе ТАг Пе Зег Гуз Авр ТНг 85 90 95 зЗег Агу Су І еи Маї Ма! Геи ТАг І єи Тиг Азп Меї Азвр Рго Маї Азр 100 105 110
Тиг Аа Тиг Туг Туг Сув Аа Ага Авр 5ег Зег Авп Туг Спи Спу Туг 115 120 125
Рпе Авр Ре Тр Сіу Рго Сіу РНе Г еи Маї Тниг мМаї Зег Зег Сіу Спу 130 135 140
СпІу Су Зег Сіу Спу Спу Спу бег Сіу Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Су 145 150 155 160
Зо
Спіу бБег Спи Пе Маї Меї Тнг Сп бег Рго Аа Тнг І еи 5ег Ма! Зег 165 170 175
З5
Рго Спу Спи Агу Аа ТНг І еи Зег Суз Агу Ма! Зег Сп бег Пе Су 180 185 190
Аа Авп і єи Аа Тгр Туг Сп Сп Гув Ре Сту Сп Аа Рго Ага Гей 195 200 205
Ї ем Пе Туг Сапу Аїа 5ег Тниг Агу Аа Тиг Спу Пе Рго Маї Агу Ріе 210 215 220
Зег Сіу Спу Спу бег Спу Тиг Сім Рне Тнг І єи Тни Пе бег 5ег і еи 225 230 235 240
Сіп Зег Сім Авр РНе Аїа Іе Туг 5ег Суз Сп Сп Тут Пе Туг Тр 245 250 255
Рго Ре Тнг Ріє Сіу Рго Спу Тиг Тнг Маї Ар Іе Гуз Тиг Тк Тнг 260 265 270 60 Рго Аїа Рго Агу Рго Рго Тнг Рго Аїа Рго ТНг Пе Аа бег Сп Рго
275 280 285
Ї еи Зег І єи Агу Рго Сім Аа Суз Агу Рго Аїйа Аа Стпу Сіпу Аїа Маї 290 295 00
Ні Тнг Аго сту І еи Авр РНе Аа Суз Ар Іе Тут Пе Тгр Аа Рго 305 310 315 з20
Ї еи Аіа Спіу Тнг Суз Сіу Ма! ей ей Ї ви Бе І єи Ма! Пе Тнг І еи 325 330 335
Туг Суз Гуз Ага Сіу Ага Гуз Гуз І єи І єи Туг Пе РНе Гуз Сп Рго 340 345 350
Рпе Меї Агу Рго Маї Сіп Тнг Тнг Сп Сі СП Авр Спіу Суз бЗег Сувз 355 360 365
Ага РНе Рго Сіи Сіи СПіи Стіи СІу Сіу Сувз Сі І еи Агу Ма! Гуз Рне 370 375 380 зЗег Агу 5ег Аа Авр Аа Рго Аа Туг Сп Сип СПу Сип Авп сп Гей 385 390 395 400
Зо
Туг Азп Си Гей Авп І єи Спу Агу Ага Спи Спи Туг Авр Ма! Гей Ар 405 до 415
З5
Гуз Агу Аго Спу Агоу Авр Рго Сім Меї Сіу Спу Гуз Рго Ага Агу Гуз 420 425 430
Авп Рго Сп Си Спу Геи Туг Авп Спи Гей Сп Гув5 Авр Гуз Меї Аа 435 440 445
Сім Аїа Туг 5ег СИПм Пе Спу Меї Гуз Спу Спи Агу Аго Агу Сіу Суб 450 455 460
Сіу Ні Азр Сту ГГ еи Туг Сп Спу Геи Бег Тиг Аа ТАг Гуз Авр ТНг 465 470 475 480
Туг Авр Аїа І єм Ні Меї Сіп Аа Г еи Рго Рго Аг9 485 490 «2105 56 «211» 492 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність 60
«223» Синтетичний конструкт «4005 56
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Ні Аїа Аїа Аг Рго Сіп Маї ТНг Геи Гуз СПми Бег СПу Рго Маї! І еи 20 25 0) ма! Гуз Рго Тнг Си ТНг І еи ТНг І єи ТАг Суз Тнг Ма! Зег Спу Рпе 35 40 45 зег І еи Авп Азп Аїа Аго Меї Су Маї Зег Ттр Пе Агу Сп Рго Рго 50 55 60
Сіу Гуз Авіа І єи Спи Тр РНе Аїа Ніз Пе РНе 5ег Тиг Авр Сім Гуз 65 70 75 80 зЗег Рпє Агу Тиг 5ег І еи Агу Зег Аго І еи Тиг і еи Зег Гуз Авр ТНг 85 90 95
Бег Гуз Зег Сп Маї Ма! Геи Тнг Меї Тиг Азп Меї Авр Рго Маї Азр 100 105 110
Тиг Ага ТАг Туг Туг Суз Аа Агу Ар 5ег Зег Азп Туг Спи Спу Туг 115 120 125
Рпе Авр Туг Ттр Спу Сп Спу Пе Геи Маї Тнг Ма! Зег Зег Спу СПУ 130 135 140
СпІу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу бег Сіу Спу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу 145 150 155 160
Спіу бБег Спи Пе Маї Меї Тнг Сп бег Рго Аа Тнг І еи 5ег Ма! Зег 165 170 175
Рго Счпу Спи Агу Аа Тнг І еи Зег Суз Агу Аа 5ег Сп 5ег Ма! Зег 180 185 190
Азп Авп Гей Аа Ттр Туг Сп Сп Гув Рго Стпу Сіп Аа Рго Ага І еи 195 200 205
Ї ем Пе Туг сапу Аїа 5ег Тнг Агу Аа ТНг Сіу Ма! Рго АІа Агу Рпе 210 215 220 60 зЗег Сіу Зег Азр Зег Сіу Тиг См Рпе 5ег І єи Тнг Пе Зег Зег І еи 225 230 235 240
Сіп Зег Сім Авр РНе Аїа Маї Туг Рне Суз Сп Сп Туг Гуз Авр Тр 245 250 255
Рго Ріе Тнг Ріє Сту Рго Спу ТНиг Гуз Маї Спи Пе Гув5 Тиг ТНг ТНг 260 265 270
Рго Аа Рго Ага Рго Рго Тнг Рго Аа Рго ТНг Пе Аїа 5ег Сп Рго 275 280 285
Ї еи Зег І єи Агу Рго Сім Аа Суз Агу Рго Аїйа Аа Стпу Сіпу Аїа Маї 290 295 00
Ні Тнг Аго сту І еи Авр РНе Аа Суз Ар Іе Тут Пе Тгр Аа Рго 305 з10 315 з20
Ї еи Аіа Спіу Тнг Суз Сіу Ма! ей ей Ї ви Бе І єи Ма! Пе Тнг І еи 325 330 335
Туг Суз Гуз Агу Су Аго Гуз ГГ уз І еи ГГ еи Тут Пе Ріє Гуз Сип Рго 340 345 350
Рпе Меї Агу Рго Маї Сіп Тнг Тнг Сп Сі СП Авр Спіу Суз бЗег Сувз 355 360 365
Ага РНе Рго Спи Сіи Стіи Стіи СПІу Сіу Сувз Сі І еи Агу Ма! Гув Рпеє 370 375 380 зЗег Агу 5ег Аа Авр Аа Рго Аа Туг Сп Сип СПу Сип Авп сп Гей 385 390 395 400
Туг Азп Си Гей Авп І єи Стпу Агу Ага Спи Спи Туг Авр Маї І еи Азр 405 до 415
Гуз Агу Аго Спу Агоу Авр Рго Сім Меї Сіу Спу Гуз Рго Ага Агу Гуз 420 425 430
Авп Рго Сп Спи Спу І єи Туг Азп Спи І еи Сп Гуз Авр І уз Меї Аа 435 440 445
Сім Аїа Туг 5ег СИПм Пе Спу Меї Гуз Спу Спи Агу Аго Агу Сіу Суб 450 455 460 60
Сіу Ні Азр Сту ГГ еи Туг Сп Спу Геи Зег Тнг Аа Тнг Гуз Авр ТНг 465 470 475 480
Туг Авр Аїа І єм Ні Меї Сіп Аа Г еи Рго Рго Аг9 485 490 «2105 57 «211» 496 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 57
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Ада Аа Ага Рго Сі Маї Авп І еи Ма! Си бег Сіу Спу СпУу І еи 20 25 0) маї Гуз Рго Спу СПу Зег І еи Агу І єи Бег Сувз СП Аа Зег Сіу Рпе
Зо
Тиг Ре 5ег Туг Аїа Тгтр Меї 5ег Ттр Маї Аго Сп Аа Рго Сіу Гув бо
З5
СІУуУ Г єи Сім Тгр Маї Спу Ага Пе Гуз Зег Іе Аа Ар Стпу Сіу Аіа 65 70 75 80 40 Тпиг Авр Туг Аа Аа Рго Маї Агу Азп Аго Ріє ТНг Пе 5ег Агу А5р 85 90 95
Авр 5ег Ага Азп ТНг Гей Туг І еи СПи Меї Нів 5ег І єи Гуз ТАг Си 45 100 105 110
Азр Тпг Аа Маї Туг Туг Суз Тиг ТАг Пе Рго Сіу Авзп Ар Аа Рпе 115 120 125 50
Азр Меї Ттр Сіу Сіп Сіу Тнг Меї Ммаї Тнг Маї Зег Зег Сіу Спу Спу 130 135 140 55
Спу бБег Су Спу Спу Спу Зег Спу Спу Спу Спу Зег СПУ Спу Счу Спу 145 150 155 160 60 зЗег А5р Іе Ма! Гей ТНг Сп 5ег Рго І єи 5ег І єи Зег Ма! ТНг Рго
165 170 175
Спу Спи Рго Аа 5ег Пе 5ег Сувз Ага бег 5ег Сп 5ег І єи І єи Туг 180 185 190 зЗег Авп Су Гуз Азп Туг І єи Азр Тгр РНе Геи Нів Гув Рго Спу Сп 195 200 205 зЗег Рго Сп І еи Г еи Пе Туг І еи СПу бег Авп Агу Айїа бег Спу Маї 210 215 220
Рго Авр Аг Ріє 5ег Спіу Зег Спу Зег Спу Пе Авр Ре Пе І єи Гуз 225 230 235 240
Пе бег Ага Маї Спи АІа Спи Авр Маї Спу Ма! Туг Туг Суз Меї Сп 245 250 255
Аа Сіп Сп Тнг Рго Пе Тиг Рпе Спу Сп Спу Тиг Аго Гей Си Пе 260 265 270
Гуз Тиг Тк ТАг Рго Айа Рго Агу Рго Рго ТНг Рго Аа Рго Тик Пе 275 280 285
Зо
Аа 5ег Сп Рго ГІ єи 5ег І ви Агу Рго Сім Аа Суз Ага Рго Аа Аіа 290 295 00
З5
Сіу Спу Аїа Маї Ні Тнг Ага Су Геи Авр РНе Аїа Суз Азр Пе Туг 305 з10 315 320
Пе Тір Аіа Рго І єи Аа Сіу Тнг Суз Стпу Ма! І єи Геиц І єи 5ег І ей 325 330 335 ма! Ме Тиг І єи Туг Суз Гуз Аг Саіу Агу Гуз Гуз Гей ГГ еи Туг Пе 340 345 350
Рпє Гуз Сіп Рго РНе Меї Ага Рго Маї Сип Тиг ТНг Сп СП Спи Авр 355 360 365 сСіу Суз Зег Сув Агу Рпе Рго Спи Спи Спи спи Сіу Сіу Сувз Спи Гей 370 375 380
Аго Маї Гуз Рпе 5ег Агу 5ег Аа Авр Айа Рго Аа Туг Сп Сіп Спу 385 390 395 400 60 Сп Авп ап І єи Туг Азп Си І єи Авп ГГ еи Спу Агу Агу Спи Си Туг
405 до 415
Азр Маї І єи Авр Гуз Ага Агу Сапу Ага Авр Рго Сіи Меї Спу Спу Г ув 420 425 430
Рго Аго Агу Гуз Авп Рго Сіп Сіи Спу І еи Туг Авп Сім І єи Сп Гув 435 440 445
Азр І уз Меї Аа Си Аа Туг Зег СПи Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи Ага 450 455 460
Аго Аг Сіу Гуз Спу Ні Авр Су І єи Туг Сп СпПу Г еи Бег ТНг Аа 465 470 475 480
Тиг Гуз Азр Тнг Туг Авр Аа ГГ еи Нів Меї Сп Аїа Гей Рго Рго Ага 485 490 495 «2105 58 25. «2115» 496 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «4005 58
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Аа Г ви І єи І єи Ро І єи Аіа Її еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сі Маї Авп І еи Ма! Си бег Сіу Спу СпУу І еи 20 25 Зо маї Гуз Рго Спу СПу Зег І ви Аго І еи 5ег Суз Сім Аа бег Спу Ре 35 40 45
Тиг Ре 5ег Туг Аїа Тгтр Меї 5ег Ттр Маї Аго Сп Аа Рго Сіу Гув бо 50 сі у Ге Спи Тер Маї Спу Ага Пе Гуз Зег Пе ТНг Азр Стпу Спу Маї 65 70 75 80
Пе Ар Туг Аа Аїа Рго Маї Агу Авзп Агу Суз Тнг Пе 5ег Ага А5р 55 85 90 95
Азр Зег Агу Азп ТНг ГГ еи Туг Гей Спи Меї Ні 5ег Гей Гуз Тит Спи 100 105 110 60
Азр Тпг Аа Маї Туг Туг Сувз Тиг ТНАг Пе Рго Сіу Авп Авзр Ар Рпе 115 120 125
Азр Меї Ттр Сіу Сип Сіу Агу Меї Маї Тнг Маї 5ег Зег Сіу СПУ СПу 130 135 140 сапу Зег СіІу Су Спу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу 145 150 155 160 зЗег А5р Іе Ма! Гей ТНг Сп 5ег Рго І єи 5ег І єи Зег Ма! ТНг Рго 165 170 175
Спу Спи Рго Аа 5ег Пе 5ег Сувз Ага бег 5ег Сп 5ег І єи І єи Туг 180 185 190 зЗег Авп Су Гуз Азп Туг І єи Азр Тгр РНе Геи Нів Гув Рго Спу Сп 195 200 205 зЗег Рго Сп І еи Г еи Пе Туг І еи СПу бег Авп Агу Айїа бег Спу Маї 210 215 220
Коо) Рго Авр Аг Ріє 5ег Спіу Зег Спу Зег Спу Пе Авр Ре Пе І єи Гуз 225 230 235 240
Пе Бег Агу Маї Сім Аа Спи Азр Маї Спу Ма! Туг Туг Суз Меї Сп 245 250 255
Аа Сіп Сп Тнг Рго Пе Тиг Рпе Спу Сп Спу Тиг Аго Гей Си Пе 260 265 270
Гуз Тиг Тк ТАг Рго Айа Рго Агу Рго Рго ТНг Рго Аа Рго Тик Пе 275 280 285
Аа 5ег Сп Рго ГІ єи 5ег І ви Агу Рго Сім Аа Суз Ага Рго Аа Аіа 290 295 00 Спу Сіпу Айва Маї Ні5 Тиг Аго Су І еи Ар Ре Аїа Суз Азр Іе Туг 305 З10 315 з20
Пе Тр Аїа Рго ГІ єи Аа Спіу Тниг Сув Стпу Ма! І єи Геиц І ви 5ег І єи 325 330 335 ма! Ме Тиг І єи Туг Суз Гуз Аг Саіу Агу Гуз Гуз Гей ГГ еи Туг Пе 340 345 350 60
Рпє Гуз Сіп Рго РНе Меї Ага Рго Маї Сіп Тиг Тк Спп Спи спи Авр 355 360 365 сСіу Суз Зег Сув Агу Рпе Рго Спи Спи Спи спи Сіу Сіу Сувз Спи Гей 370 375 380
Аг Маї Гуз Рпе Зег Агу 5ег Аа Азвр Аїа Рго Аа Туг Сп Сп Спу 385 390 395 400
Сіп Авп Сп Гей Туг Авп Си І еи Авп Гей Стпу Агу Агу Спи Си Туг 405 до 415
Азр Маї І єи Авр Гуз Ага Агу Сапу Агу Авр Рго Сім Меї Спу Спу Гув 420 425 430
Рго Аго Агу Гуз Авп Рго Сіп Сіи Спу І еи Туг Авп Сім Гей Сп Гув 435 440 445
Азр Гуз Меї Аа Сі Аа Туг Зег Сіи Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи Агу 450 455 460
Аго Аго Спу Гуз Спу Ні Авр сту Геи Туг Сіп СпПу Гей Зег ТНг Аа 465 470 475 480
Тиг Гуз Азр Тиг Туг Авр Аа ГГ еи Нів Меї Сп Аа ГІ еи Рго Рго Ага 485 490 495 «2105» 59 «2115 495 «212» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 59
Меї Ага Г еи Рго Маї Тниг Ага Г ви І еи І ви Рго ГІ еи Аа ГГ єи І ви І єи 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіи Маї Сіп І єи МаїЇ Спи бег Тгтр Стпу Ма! І ей 20 25 0) маї Гуз Рго Спу СПу Зег І еи Агу І єи 5ег Суз Аа Аа 5ег Спіу Ре 35 40 45 (510) Пе Рпе Авп Авп Аа Ттр Меї зег Ттр Маї Аго Сіп Аа Рго Сіу Гуз
50 55 60
Су Г єи Сім Тгр Пе Стпу Аг Іе Гуз 5ег Гув 5ег А5р Спіу Спу ТНг 65 70 75 80
Тпиг Авр Туг Аа Аа Рго Маї Гуз Авр Аго РНе Тнг Пе 5ег Ага А5р 85 90 95
Азр Зег Гуз Авр ТНг ГГ еи Туг Гей Сп Меї Азп Сту Гей Гуз ТНг Спи 100 105 110
Азр Тпг Аа Маї Туг Рне Суз Тпг Тниг Аїа Рго Сіу Спу Рго Рпе Азр 115 120 125
Туг Тр слу СіІп Спу Тиг Ге Маї Тниг Ма! Зег Зег Сіу Спу Спу Спу 130 135 140 зЗег Сіу Сіу Спу Спу Зег СПу Спу пу Спу Зег Спу СЧу Спу Спу зег (145 150 155 160
Азр Іе Маї І єи Тиг Сп Зег Рго Геи Зег І ви Рго Маї Тнг Рго Спу 165 170 175
Зо
Сім Рго Аа 5ег Пе бег Суз Агу 5ег бег Сп 5егіІ ей Гей Ні Ага 180 185 190
З5
Азр Сіпу Ре Авп Туг І єи Ар Ттр РНе ГГ еи Сп Гуз Рго Спу Сіп Зег 195 200 205
Рго Сп І єи Ге Пе Туг Гей Аїа 5ег Зег Аг Аа 5ег Спу Ма! Рго 210 215 220
Азр Агу Ре Зег Спу 5ег А5р 5ег Спу ТНиг Авр РНе ТнНг І єи Гуз Пе 225 230 235 240 зЗег Аг Маї Спи Аа Спи Ар Маї Сіпу Маї Туг Туг Суз Меї ап Аа 245 250 255
Ї еи Сп ТНк Рго Пе Тнк Рпе Стпу Сип Спу ТАг Ага Гей Спи Пе Гув 260 265 270
ТА Тнг Тек Ріо Аа Рго Агу Рго Рго ТНг Рго Аїа Рго Тк Пе Аїа 275 280 285 60 Бег Сп Рго І єи Зег І еи Агу Рго Сім Айїа Суз Агу Рго Аіа Аа Спу
290 295 100)
Су Аїа Маї Ні Тниг Агу Стпу Геи Авр Ріє Аа Суз Авр Іе Туг Пе
Й ЩД(- З05 з10 315 з20
Тур Аа Рго Г єи Аа Стпу ТАиг Суз Стпу Ма! Геи І еи Гей Зег І єи Маї 325 330 335
Пе Тиг Геи Туг Суз Гуз Ага Стпу Ага Гуз Гуз І еи І еи Тут Пе Рпе 340 345 350
Гуз Сп Рго Ріє Меї Агу Рго Маї Сіп ТАг Ти Сп Спи Спи Авр Су 355 360 365
Сув 5ег Сув Агу Рпе Рго Сім Сі Сім Сіи Сіу Сіу Суз Си Гей Аг9 370 375 380 маї Гуз Рне Зег Агу 5ег Аа Авр Аїа Рго Аа Туг СіІп Сіп Сіу Сп 385 390 395 400
Азп ап Г еи Туг Азп Сім ГГ еи Авп І єи Стпу Ага Ага Сім Спи Туг Авр 405 до 415
Зо
Ммаї Геи Авр Гуз Аг Аго Сіу Агу Авр Рго Спи Меї СПу Спу Гуз Рго 420 425 430
З5
Аг Ага Гуз Авп Рго СіІп Спи Спу Геи Туг Азп Си ГГ еи Сп Гув А5р 435 440 445
Гуз Меї Аїа Ст Аа Туг Зег Спи Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи Ага Ага 450 455 460
Аг сту Гуз Сіу Ніз Авр Су І еи Туг Сіп Спу ГГ еи Зег ТНг Аа ТНг 465 470 475 480
Гуз Азр ТНг Туг Авр Аа І єи Ні Меї Сп Аїа І єи Рго Ріо Ага 485 490 495 «210» 60 «211» 494 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт (510) «4005» 60
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіи Маї Сіп І єи Ма! Спи бег Спу Спу Су І єи 20 25 Зо
Маї Гуз Рго Спу Спіу б5ег І єи Аг І єи Зег Суз Сі Аа бег СПУ Рие 35 40 45
Тиг Рне 5ег Авр Аа Ттр Меї 5ег Тр Маї Агу Сп Аа Рго Сіу Гув 50 55 60
СІУу Г єи Сім Тгтр Маї Спу Аго Пе Гуз Зег Гуз ТНг Азр Спу СпПУ ТАг 65 70 75 80
Тпиг Авр Туг Маї Маї Рго І еи Авп Спу Ага РНе Іе Пе Зег Ага Ар 85 90 95
Авр 5ег Ага Азп ТНиг Гей Туг І єи Сп І єи Авп Авп І єи ув ТАг Сім 100 105 110
Ав5р ТАг Айа Маї Туг Туг Суз Тиг ТАг Маї Рго Спу Бег Туг Спу Туг 115 120 125
Тер Сту Сп Стпу ТАг Гей Маї Тниг Маї Зег Зег Спу Сіу Спу Спу Зег 130 135 140
Спту Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Спіу Спу бег Спу Спу Спу Спіу Зег А5р 145 150 155 160
Пе Маї Меї Тниг Сіп 5ег Рго І єи 5ег І єи Рго Ма! Тнг Рго Спу Си 165 170 175
Рго Аїа 5ег Пе бег Сувз Агу 5ег бег Сп 5егі єи І єи Ні Авп І ув 180 185 190
Аг Авп Авп Туг І єи Авр Тр Ре Г єи ап Гув Рго СПу Сіп Бег Рго 195 200 205
Сіп Гей Гей Пе Туг І єи Аа бег Азп Агу Аа 5ег Сіу Маї Рго Ар 210 215 220
Агу Ре Зег Сіу Спу Спу Зег СПу ТНиг Авр Ріє ТНиг ГГ еи Гуз Пе 5ег 225 230 235 240 (516)
Аго Ма! Сім Аа Спи Авр Маї Стпу Маї Туг Туг Суз Меї Сіп Аа Сп 245 250 255
Сіп Те Рго Пе Тит Ріе Стпу Спіп Спу ТАг Аг Гей Спи Пе Гув ТНг 260 265 270
Тиг Тниг Рго Айа Рго Ага Рго Рго ТНг Рго Аїа Рго Тнг Іе Аа 5ег 275 280 285
Сп Рго І єи 5ег І еи Ага Рго Сім Аїа Суз Ага Рго Аа Аа Спіу Спу 290 295 100)
Аа Маї Ні Тнг Ага Сту Гей Авр Ре Аїа Суз Авр Іе Туг Пе Тр 305 з10 315 з20
Аа Рго ГІ еи Аа Спу Тиг Су Стпу Ма! Гей І еи Гей Зег І єи Ма! Пе 325 330 335
ТигГеи Туг Суз Гуз Агу Спу Ага Гуз Гуз І єи Гей Тут Пе Ре Гуз 340 345 350
Сп Рго Ре Меї Ага Рго Маї Сіп ТА Тк Стп Спи Сім Авр СПу Сув 355 360 365 зЗег Суз Агу Рпе Рго Спи Спи Спи сти СМІу Спіу Суз Си І еи Ага Маї 370 375 380
Гуз Рпе 5ег Аг 5ег Аа Азвр Аїйа Рго Аїа Туг Сіп Сп Сіу Сп Авп 385 390 395 400
Сіп Гей Туг Азп Спи Гей Авп Гей Стпу Агу Ага Спи См Туг Авр Маї 405 до 415
І еи Авр Гуз Агу Аго сапу Агу Авр Рго Спи Меї СпПу Спу Гуз Рго Ага 420 425 430
Ага Гуз Азп Рго Сп Спи Спу І и Туг Авп Си І ви Сп Гуз Авр І уз 435 440 445
Меї Ага Сім Аа Туг Зег Сім Пе Спіу Меї Гуз Спу Спи Агу Агу Ага 450 455 460
Сіу Гуз Спу Нів Ар Су І єи Туг Сп СПУ Гей Зег ТАг Аа Тнг Гув 465 470 475 480 60
Ар ТНг Туг Авр Аїа І єи Ні Меї Сп Аа Гей Рго Рго Аг9 485 490 «2105 61 «-2115 502 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 61
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Ні Аїа Аїа Аг Рго Сіп Маї Сп І еи Маї Сп Зег Спу Аа Спи Маї 20 25 0)
Гуз Гуз Рго Спу бЗег Зег Маї Гуз Маї бег Суз І уз Аіа Зег Сіу А5р
Тиг Рне 5ег Зег Авзп Аа Іе Зег Ттр Маї Ага Сіп Аа Рго Спу Сп 60
Зо
СІУу Г єи Сім Тгтр Меї Сіу Ма! Пе Пе Рго Пе РНе Сіу ТНг Аа А5р 65 70 75 80 35
Туг Аіа Сіп Гуз Рпе Сп Спу Агу Маї Тнг Пе ТНг Аа Авр Сім Зег 85 90 95 40 ТАгЗег ТНг Аіа Туг Меї Спи І єи Зег Зег Гей Агу 5ег Сіи Ар Тйг 100 105 110
Аа Ма! Туг Туг Сув Аїа Ага Ніз ТАг Туг Ніз Спи Туг Аіа Спу Спу 45 115 120 125
Туг Туг ау Спу Аа Меї Авр Рго Тгр Спу Сіп Спу ТАг ГГ еи Маї Тиг 130 135 140 50 маї Зег Зег Спу Сіу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу 145 150 155 160 55
Спу бБег Су Спу Спу Спу Зег Сім ей Сп Зег Ма! Гей Тиг Сп Рго 165 170 175 (510) Рго Бег Аа 5ег Спу Тиг Рго Сіу Сіп Агу Маї Тнг Пе бег Суз 5ег
180 185 190
Сіу Зег Зег Зег Авп Пе Спіу 5ег Авп Туг Маї Туг Ттр Туг ап Сп 195 200 205
Ї еи Рго Су ТНиг Аа Рго Гуз Іе І еи Пе Туг Агу Авп Авп Сп Аг9 210 215 220
Рго Зег Сіу Маї Рго Авр Агу Ре Зег СПу Зег Гув Зег Спіу Тиг Бег 225 230 235 240
Аа 5ег І еи Аа Пе 5ег Спу Геи Агу Зег Си Авр Сім Аа Авр Туг 245 250 255
Тут Суз Аа Аа Тр Авр Авр Авп І ви бег Спу Тр Ма! Рне СІуУ ТНг 260 265 270 сСіу Тит Гуз ГГ еи Тнг Ма! І єи ТАг Тпг ТТН Рго Аа Рго Аг Рго Рго 275 280 285
ТАг Рго Айа Рго ТНг Іе Аа 5ег Сп Рго І єи Зег І еи Агу Рго Си 290 295 00
Зо
Аа Суз Агу Рго Айа Аїа Сіпу Сіу Ага Маї Ні5 Тнг Ага Су І еи А5р 305 з10 315 з20
З5
Рпє Аїа Суз Азр Іе Тут Пе Ттр Ага Рго І єи Аа Спу Тиг Сув Спу 325 330 335
Ма Гец Ге еи Зег І єи Ма! Пе Тиг Геи Туг Суз Гуз Ага Сіу Ага 340 345 350
Гуз Гуз Гей Гей Туг Пе РНе Гуз Сіп Рго РНне Меї Ага Ро Маї Сп 355 360 365
Тиг Тиг ап Спи Спи Ар Спу Суз Зег Сувз Агу РНе Рго Спи С1и Спи 370 375 380
Стій Счу Спу Суз Сі І еи Агу Ма! І ув Рне 5ег Агу 5ег Аа Авр Аа 385 390 395 400
Рго Аа Туг Сп Сп Спіу Сп Авп ап І еи Туг Авп Си І єи Авп Ї ви 405 до 415 60 сапу Агу Аго Сім Спи Туг Авр Маї І єи Авр Гуз Агу Ага Стпу Ага Ар
420 425 430
Рго Спи Меї Спу Стпу Гуз Рго Ага Ага Гуз Авп Рго Сп СПИ СпПу Гей 435 440 445
Туг Авп Си ГГ еи Сп Гуз Авр Гуз Меї Аа Ст Аа Туг Зег Спи Пе 450 455 460
Сіу Меї Гуз Спу Спи Ага Аго Аго Спу Гу Спу Ні Авр Су І єи Туг 465 470 475 480
Сіп Спу І и Зег ТНг Аа Тнг Гуз Авр Тиг Туг Авр Ага ГГ еи Ні Меї 485 490 495 ап Аа еи Рго Рго Аг9 500 «2105» 62 «-2115 6 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «4005» 62
ТАг Авр Тут ТА Гей Ніб 1 5 «2105» 63 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 63
Сіу Тут Тиг РНе Тиг Авр 1 5 «2105» 64 «2115 10 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «400» 64
Сіу Тут Тиг Рне Тнг Авр Туг Тнг І єи Нів 1 5 10 «2105» 65 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 65
Сіу Пе Авр Рго Пе Авп Спу Спу Тг Тнг Туг Авп сп Гуз Ре Гув 1 5 10 15 су «2105» 66 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «-4005 66
Сіу Пе Авр Рго Пе Авп Спу Спу Тит Тнг Туг 1 5 10 «2105» 67 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 67
Сіу Спи Аа Меї Авр 5ег 1 5 «2105» 68 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «-4005» 68
Сіу Пе Авп Рго Пе Авп Спу Сіу Те ТНг Туг Авп Сп Гуз Ре Гуз 1 5 10 15 спіу «2105» 69 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 69 ау Пе Авп Рго Пе Авзп Стпу Спу ТНиг ТАг Туг 1 5 10 «2105 70 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «-4005 70
Сіу Пе Тгр Рго Пе Тиг Спу Спу ТАг Тк Туг Авп Сп Гуз Ре Гув 1 5 10 15 спіу «2105 71 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 71
Ссіу Пе Тгр Рго Пе Тиг Спу Спу Тиг Тнк Тут 1 5 10 «2105 72 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність (516)
«223» Синтетичний конструкт «4005 72
Сіу Спи Аіа Спи Спу Бег 1 5 «2105 73 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 73 ау Сім Аа Сп Спу Зег 1 5 «210» 74 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «4005» 74 зЗег Авп Рго Агу Меї Спу Маї Зег 1 5 «-2105 75 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 75
Сіу Ре Зег І еи Зег Авп Рго Агд 1 5 «2105 76 «2115 12 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «4005 76
Спу Рне 5ег Гей 5ег Азп Рго Ага Меї Сіу Маї 5ег 1 5 10 «-2105 77 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 77
Ні Пе Рне 5ег ТАиг Авр Сім Гуз 5ег І еи Гуз І еи Зег І ви Ага зег 1 5 10 15 «2105 78 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 78
Ні Пе Рпе 5ег Тиг Авр Сім Гуз Зег І ви 1 5 10 «2105» 79 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 79
Авр 5ег 5ег Азп Туг Си Спіу Туг Рпе Азр Ре 1 5 10 «2105» 80 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-400» 80 зЗег Авп Аа Агу Меї Сіу Ма! Зег 1 5 (516)
«2105 81 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 81
Сіу Ре Зег І еи Зег Азп Аа Ага 1 5 «2105» 82 «2115 12 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 82
Спу Рне 5ег І еи 5ег Азп Аа Агу Меї Сіу Ма! 5Зег 1 5 10
Зо «-2105» 83 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 83
Ні Пе Рне 5ег Тиг Авр Сім Гуз Зег Пе Агу Аго 5ег І єи Ага зег 1 5 10 15 «2105» 84 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 84
Ніз Пе РНе 5ег Тнг Авр Сі Гуз бег Пе 1 5 10 «2105» 85 «2115 11 60 «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005» 85
Азр Зег 5ег Азп Туг Си Сіу Туг Рне Авр Туг 1 5 10 «2105» 86 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005» 86
Ні Пе РНне 5ег Тнг Азр Спи Гуз 5ег Туг Зег Тиг Зег І еи Ага сіу 1 5 10 15 «-2105» 87 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 87
Ні Пе Рне 5ег Тиг Авр Сім Гуз Бег Туг 1 5 10 «2105» 88 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005» 88
Авп Авп Аа Агу Меї Стіу Маї Зег 1 5 «210» 89 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
«4005» 89
Сіу Рне Зег І еи Авп Авп Аїа Ага 1 5 «2105 90 «2115 12 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 90
Спу Рне 5ег Гей Авп Авп Аа Агу Меї Сіу Маї Зег 1 5 10 «2105 91 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт
Коо) «400» 91
Ні Пе Рне 5ег ТАиг Авр Сім Гуз бег Рпє Агу ТАг 5ег І еи Агу 5ег 1 5 10 15 «2105» 92 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 92
Ніз Пе РНне 5ег Тнг Авр Сі Гуз бег Рпеє 1 5 10 «2105 93 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 93 60 Бег Авп Маї Агу Меї Сіу Маї 5ег
1 5 «2105» 94 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 94
Сіу Ре Зег І еи Зег Азп Маї Ага 1 5 «2105 95 «2115 12 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 95
Спу Рне 5ег І еи 5ег Азп Маї Агу Меї Сіу Маї Зег 1 5 10
Зо «2105 96 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005» 96
Ні Пе РНе 5ег бЗег Авр Сім І уз Зег Пе Агу Агу 5ег І ей Агу 5ег 1 5 10 15 «2105» 97 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 97
Ніз Іе РНе 5ег бЗег Авр Сім І уз Зег Пе 1 5 10 бо «-2105» 98
«2115» 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 98 10. Нів Пе Рне 5ег ТАиг Авр Сім Гуз Зег І ви Аго І еи 5ег І ви Агу Бег 1 5 10 15 «2105» 99 «211» 8 «212» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 99 зЗег Авп Аа Гуз Меї Сіу Маї Зег 1 5 -2105 100 «211» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 100
Сіу Рне Зег І єи Зег Авп Аа ГГ уз 1 5 «2105» 101 «2115 12 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 101
Спу Рне 5ег І еи 5ег Азп Аа І уз Меї Сіу Ма! 5ег 1 5 10 «2105 102 «2115» 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність (516)
«223» Синтетичний конструкт -4005» 102
Ні Пе РНе 5ег бЗег Авр Сім І уз Зег Туг Ага І єи 5ег І ей Агу 5ег 1 5 10 15 -2105 103 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 103
Нів Пе Рпе 5ег Зег Авр Си Гуз 5ег Туг 1 5 10 «2105» 104 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «400» 104
Азр Зег 5ег Азп Туг Сіу Спу Туг Рне Авр Туг 1 5 10 -2105 105 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 105
Ні Пе РНе 5ег 5ег Авр Си І уз Зег Туг Агу І єи РНе І еи Агу бег 1 5 10 15 -2105» 106 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «4005» 106
Ніз Пе РНе 5ег Тнг Авр Сі Гуз бег Туг Зег Рго 5ег І єи Ага Сіу 1 5 10 15 2105» 107 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 107
Азр Зег 5ег Авр Туг Си Спу Туг Рне Авр Туг 1 5 10 -2105» 108 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -400» 108
Абр бег 5ег Авп Туг Спи Си Туг РНе Авр Туг 1 5 10 -2105» 109 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 109 зЗег Авр Аа Ттр Меї Зег 1 5 «2105 110 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 110
Сіу Рпе Тиг Рпє Зег Азр 1 5 (516)
«2105 111 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 10. «4005 111
Сіу Рпе Тит Ріє Зег Азр Аа Ттр Меї Зег 1 5 10 «2105 112 «2115» 19 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 112
Ага Пе Гуз Зег Гуз ТНг Азр Стпу СпПу ТНиг ТАг Ар Туг Маї Маї Рго 1 5 10 15
Коо) Ї еи Авп Стпу «2105 113 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 113
Ага Пе Гуз Зег Гуз ТНг Азр Стпу Спу Тиг ТАг Авр Туг 1 5 10 «2105» 114 «2115 7 00«212» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 114 маї Рго Спу 5ег Туг Спу Туг 1 5 (516)
-2105 115 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 115 зЗег Туг АІа Ттр Меї Зег 1 5 «2105 116 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 116
Сіу Рпе Тит Рне Зег Туг 1 5
Зо «2105 117 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 117 ау Рпе Тниг РНе 5ег Туг Аа Ттр Меї Зег 1 5 10 «2105» 118 «2115» 19 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 118
Ага Пе Гуз Бе"! Пе Аа Авр Сіу Спіу Аа Тниг Авр Туг Аа Аа Рго 1 5 10 15
Ма! Ага А5п (516)
«2105» 119 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 119
Ага Пе Гуз Зег Пе Аа Азр Сіу Спу Аа Тиг Авр Туг 1 5 10 «2105» 120 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 120
Пе Ро Сіпу Азп Авр Аа Ріє Азр Меї 1 5
Коо) «2105 121 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 121
Авп Авп Аа Тгтр Меї 5ег 1 5 «2105 122 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 122
Спу Рпе Пе Рне Авп Авзп 1 5 «2105 123 «2115 10 60 «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005 123
Сіу РНе Іе РНе Авп Авзп Аїа Ттр Меї 5Зег 1 5 10 «2105» 124 «2115» 19 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 124
Ага Пе Гуз Зег Гуз Зег Авр Спу Спу ТНиг ТАг Авр Туг Аа Аа Рго 1 5 10 15
Ма! Гуз Азр
Зо «2105» 125 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 125
Аго Пе Гуз Зег Гу5 Зег Азр СПу СПу Тиг ТНг Азр Туг 1 5 10 «2105 126 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 126
Аа Рго Сіпу Спіу Рго РНе Азвр Туг 1 5 «2105» 127 «2115» 19 (510) «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005» 127
Ага Пе Гуз Зег Пе Тиг А5р Сіу Спу Ма! Пе Азвр Туг Аа Аа Рго 1 5 10 15
Ма! Ага А5п «2105 128 «2115 13 «212» РАТ -213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 128
Ага Пе Гуз Зег Пе Тиг Ар Стпу Спу Ма! Пе Ар Туг 1 5 10 00 «2105» 129 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 129
Пе Рго Слпу Ап Авр Авр РНє Авр Меї 1 5 -2105» 130 «2115» 19 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 130
Ага Пе Гуз Зег Пе Азп Ар Стпу Сіу Аа Тиг Ар Туг Аа 5ег Рго 1 5 10 15
Ма! Ага А5п (516)
«2105 131 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 131
Ага Пе Гуз Зег Пе Авп Ар Сіпу Спіу Аа ТНг Авр Туг 1 5 10 «2105 132 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 132
ТАг Авп Айа Ттр Меї 5ег 1 5
Зо «2105 133 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 133
Спіу Рпе Тнг РНне Тнг Азп 1 5 «2105 134 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 134
Сіу Рпе Тит Ріє ТНг Авп Аа Тгр Меї Зег 1 5 10 2105 135 «2115» 19 60 «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005 135
Ага Пе Гуз Зег Гуз Пе Авр Спу Спу ТНиг ТАг Авр Туг Аа Аа Рго 1 5 10 15 маї Гув Спу -2105 136 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 136
Ага Пе Гуз Зег Гуз Пе Авр Спу Спу Тиг ТНг Азр Туг 1 5 10
Зо «2105» 137 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 137
Бег бег Авп Аа Пе 5ег 1 5 -2105» 138 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 138
Спіу Ар Тниг РнНе 5ег 5ег 1 5 «2105» 139 «2115 10 60 «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005 139
Сіу Азр Тит Ріе 5ег Зег Авп Аа Пе Зег 1 5 10 «2105» 140 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 140 ма! Ме Пе Рго Пе РНе Стпу ТАг Аа Ар Туг Аїа Сіп Гув Ріє Сіп 1 5 10 15 спіу
Коо) «2105 141 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 141 ма! Ме Пе Рго Пе РНе Стпу ТАг Аа Авр Туг 1 5 10 «2105 142 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 142
Ні5 Тнг Тут Ніз Спи Туг Аа Спу Спу Туг Туг Спу Спу Аа Меї Азр 1 5 10 15
Рго (516)
«2105» 143 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 143
Зег Азп Туг Аа Меї 5ег 1 5 «2105» 144 «-2115 6 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 144
Спіу Рпе Тнг Рне 5ег Азп 1 5
Зо «2105» 145 «2115 10 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 145 ау Рпе Тниг Рне 5ег Авп Туг Аа Меї Зег 1 5 10 «2105 146 «2115 17 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 146
Азр Пе Зег СПу СПу Сіу Спу Аго ТАг Туг Туг АІа Авр 5ег Маї Гуз 1 5 10 15 спіу (516)
«2105» 147 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 147
Азр Пе Зег СПу Спу СПу Спу Аго Тиг Туг Туг 1 5 10 «2105» 148 «2115» 14 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 148
Аа СІУу Гей ГГ еи Туг Спу Спу Спу Ма! Туг Рго Меї Авр Іе 1 5 10 «210» 149 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 149
Гув Бег Бег Сп бег І ви Гей Туг Зег Авп Су Гуз ТАг Туг Гей Авп 1 5 10 15 «2105» 150 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 150
Ї еи Маї Бег Гуз І еи Авр 5ег 1 5 -2105 151 «2115» 9 60 0о«212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005 151 маї Сіп Ар Тиг Нів Рне Рго Геи ТНг 1 5 «-2105 152 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 152
Сіп маї Зег Гуз І єи Авр 5ег 1 5 2105 153 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 153
Спу Сіп Авр ТНиг Нів Рнеє Ро Гей ТНг 1 5 «2105» 154 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 154
Гуз Зег Бег Сп 5ег І єи Гей Туг Зег Авп Авр Гуз ТАг Туг Тиг Авп 1 5 10 15 «2105 155 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
-4005 155
Сіи мМаї Зег Гуз І єи Ар Маї 1 5 «2105 156 «2115 11 «212» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 156
Аг Аа 5ег Сп 5ег Маї Агу 5ег Авп І ви Аа 1 5 10 «2105 157 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт
Зо «4005 157
Сіу Зег ТАг Пе Аго Аа ТНг 1 5 2105» 158 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005» 158
Сіп Сп Туг Зег Авр Тгр Рго Рпе Тнг 1 5 «2105 159 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 159 60 Аг Айва бег Сп бег Ма! бег Зег Азп РНе Аїа
1 5 10 -2105» 160 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 160
Сіу Аа Тиг Тиг Агу Аа Тнг 1 5 «2105» 161 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 161
Сіп Сп Туг Гуз Авр Тгр Рго Ре Тнг 1 5
Зо «2105 162 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 162
Аг Маї Зег Сп Зег Пе Спу Аа Авп І еи Аа 1 5 10 -2105 163 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 163
Сіу Аа 5ег ТНг Ага Аа Тиг 1 5 (510) «2105» 164
«2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 164
Сп Сп Тут Пе Туг Тгтр Рго Ріє ТНг 1 5 -2105» 165 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 165
Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! 5ег Авп Азвп І єм Аа 1 5 10 -2105» 166 «2115 11
Зо «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 166
Ага Аа 5ег Сп б5ег МаїЇ Спу бег Азр І єи Аа 1 5 10 «2105» 167 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 167
Сіп Сп Туг Авп Авр Тр Рго Ре ТНг 1 5 -2105» 168 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність (516)
«223» Синтетичний конструкт «4005» 168
Ага Аа 5ег Сп Авп Пе Спіу бег Азр І єи Аа 1 5 10 -2105» 169 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 169
Агу Аа 5ег Сп 5ег Ма! ТНг Зег Азп РНе Аїа 1 5 10 -2105» 170 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «4005 170
Аг Аа 5ег Сп Спу Ма! Зег Зег Авп Рпе Аа 1 5 10 -2105 171 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 171
Аг Аа 5ег Сп 5ег Маї Авп Агу Азвп І єи Аа 1 5 10 «-2105 172 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт (510) «-4005 172
Сіу Тнг Зег ТНг Аг Аа Тиг 1 5 -2105 173 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 173
Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! 5ег Тиг Азп РНе Аїа 1 5 10 «2105» 174 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 174
Зо Ага Аа 5ег Сіп 5ег Ма! Азп 5ег Авп І єи Аа 1 5 10 «-2105 175 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 175
Сіу Зег Зег ТАг Ага Аа ТНг 1 5 -2105 176 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 176
Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! Пе Авп Авп ГГ еи Аа 1 5 10 (516)
«2105 177 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 177
Сіп Авр Туг Авп Авп Тр Рго Рпе ТНпг 1 5 -2105 178 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005 178
Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! Спу Зег Авп І єи Аа 1 5 10
Зо «2105» 179 «2115» 8 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 179 ау Аа 5ег ТНг Аг Аа 5ег Спу 1 5 -2105» 180 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 180
Сіп Си Туг Авп Авп Тр Рго Ре ТНг 1 5 «2105 181 «2115 11 (510) «212» РАТ
-213» Штвтучна послідовність «223» Синтетичний конструкт «4005» 181
Аг Аа Авп Сп Пе Маї Зег Зег Авп ГГ еи Аа 1 5 10 «2105 182 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 182
Ага бег Зег Сіп ЗегіІ ей Ї еи Ні Авп І уз Агу Азп Авзп Туг Гей Ар 1 5 10 15 -2105» 183 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 183
Ї еи Аа 5ег Азп Агу Аа 5ег 1 5 «2105» 184 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» 223» Синтетичний конструкт «400» 184
Меї Сіп Аа Сіп Сп Тне Рго Ме ТНг 1 5 -2105» 185 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» бо «223» Синтетичний конструкт
-4005» 185
Ага бег Зег Сп Зег І ей Ї ей Туг бег Азп Су Гуз Азп Туг І ей Ар 1 5 10 15 -2105» 186 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 186
Ї ви Спу Зег Авп Аг Аїа 5ег 1 5 «2105» 187 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт
Коо) «400» 187
Ага бег Зег Сп Зег І ей Гей Ні Агу Авр Сіу Рне Азп Туг І ей Ар 1 5 10 15 -2105» 188 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт -4005» 188
Ї еи Аа 5ег 5ег Ага Аа 5ег 1 5 «2105» 189 «2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 189 60 Меї аСіп Ага І єи Сп ТНг Рго Пе Тнг
1 5 -2105» 190 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 190
Ага бег Тиг Сп 5ег І єи І єи Туг бег Азп Су Гуз Азп Туг І еи Азр 1 5 10 15 «2105» 191 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 191
Ї ви Спу Зег Пе Агу Аа 5ег 1 5
Зо «2105 192 «2115 16 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 192
Ага бег Зег Сп Зег І ей Ї ей Туг Зег Азр Агу Агу Авп Туг І єи Азр 1 5 10 15 -2105» 193 «2115 7 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 193
Ї єм Сіу Зег Туг Агу Аа 5ег 1 5 60 «2105» 194
«2115» 9 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 194
Меї аСіп Ага І єи Сп Пе Рго Пе ТНг 1 5 -2105» 195 «2115 13 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 195 зЗег Сіу Зег Зег Зег Авп Пе Спіу бег Азп Туг Ма! Туг 1 5 10 -2105» 196 «2115 7
Зо «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 196
Агу Авзп Авп ап Агу Рго Бег 1 5 «2105» 197 «2115 11 «212» РАТ -213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 197
Аа Аа Тгр Авр Авр Ав І єи 5ег Спу Тр Маї 1 5 10 -2105» 198 «2115 11 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність (516)
«223» Синтетичний конструкт «400» 198
Аг Аа 5ег Сп 5ег Пе 5ег Зег Туг І еи Авп 1 5 10 2105» 199 «2115 7 «212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 199
Аа Аа 5ег 5ег І єи Сп 5ег 1 5 «2105» 200 «2115» 9 «212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний конструкт «400» 200
Сіп Сп бег Туг Зег ТАг Рго І єи ТНг 1 5 «2105» 201 «2115» 943 «212» РАТ «213» Ното зарівеп «400» 201
Меї Агу Рго 5Зег Спу ТАг Аа Сіу Айа Аа ГГ еи І єи Аа ГІ єи І еи Аа 1 5 10 15
Аа Геи Сув Рго Аа 5ег Ага Аа І ви Спи Спи Гуз Г ув Спу Авп Туг 20 25 Зо маї Ма! Тнг Азр Ні Сіу бег Суз Маї Ага Аіа Суз Сіу Аа Авр 5ег 35 40 45
Туг Спи Меї Спи Спи Авр Стпу Маї Агу Гуз Суз І уз І уз Суз СПИ СПУ 50 55 60 (516)
Рго Суз Аго Гуз Ма! Суз Авп Сіу Пе Спу Пе СЧу Спи РНе Гуз Ар 65 70 75 80 зегІеи ЗегпПе Авп Аа Тнг Авп Пе Гуз Нів Ре Гуз Авп Суз ТНг 85 90 95 зЗег Пе Зег Спу Авр ГІ єм Нів Пе І єи Рго Маї Аа Рне Агу Спу А5р 100 105 110 зЗег Рпе Тиг Ні Тнг Рго Рго Геи Авр Рго СіІп Сіи Гей Авр Пе Гей 115 120 125
Гуз Тнг Ма! Гуз Спи Пе ТАг Спу Ре ГГ еи ГІ єи Пе Сіп Аа Ттр Рго 130 135 140 сій Авп Аго ТАг Авр Гей Нів Аа РНе Сім Авп І єи Спи Пе Пе Аг 145 150 155 160
СІу Ага Тниг Гуз Сіп Ні Спу Сіп Рне 5ег І ви Аа Маї Ма! 5ег І еи 165 170 175
Азп Пе ТНг Зег І єи Спу Гей Ага 5ег І еи І уз Спи Пе бег Азр Сіу 180 185 190
Азр Ма! Пе Пе бег Спіу Авп Гуз Авп І єи Суз Туг Аіа Авп ТНг Пе 195 200 205
З5
Авп Тр Гуз Гуз Геи Рпе Спу Тиг Зег Спу Спп Гу Тит Гуз Пе Пе 210 215 220 зЗег Авп Агу Сіу Сім Авп Бег Суз Гуз Аа Тиг Спіу Сіп Маї Суз Ніб 225 230 235 240
Ааї єи Сув бег Рго Сім Сіу Сувз Тр Сіу Рго Сім Рго Ага Авр Суз 245 250 255 ма! Зег Суз Ага Азп Маї Зег Агу Сіу Агу Спи Сув Маї Авр І уз Сув 260 265 270
Авп І си Ї єи Спи Спіу СП Рго Ага Сіи РНе Маї Спи Авп бег Сім Сув 275 280 285
Пе Сп Сув Нів Рго Спи Суз І ви Рго Сп Аа Меї Авзп ІПе Тиг Суз 290 295 00 60
Тиг сапу Ага сту Рго Авр Авп Суз Пе Сіп Суз Аа Ні Туг Пе Авр 305 з10 315 з20 ау Рго Ні5 Сув Ма! Гуз Тнг Суз Рго Аа Стпу Ма! Меї Спу Спи Авп 325 330 335
Азп ТпигГеи Маї Ттр Гуз Туг Аіа Ар Аа Су Ні Маї Суз Нів Гей 340 345 350
Сув Нів Рго Азп Суз Тиг Туг Сіу Сув ТНиг Спу Рго СІУу І ви Спи Спіу 355 360 365
Сув Рго Тниг Авп ау Рго Гуз Іе Рго Зег Пе Аа Тиг Спу Меї Маї 370 375 380
Су АіІаї ей ей ец Ге Ї єи Маї Маї Аа І ви Спу Пе Спу І еи Рне 385 390 395 400
Меї Агу Аго Ага Ніз Пе Маї Ага Гуз Ага Тпг І еи Агу Аго ГГ еи Ї ви 405 до 415
Сіп Сім Ага Сім Гей Маї Сім Рго ГІ еи ТАг Рго бег Спу Спи Аа Рго
Ко) 420 425 430
Азп ап Аа ГІ єи І еи Ага Іе Геи Гув Спи Тиг Спи РНе Гуз Гуз Пе 435 440 445
З5
Гуз Ма! Геи Спу Бег Спу Аіа Рне Сіу Тниг Ма! Туг Гуз Спу Геи Тр 450 455 460
Пе Рго Спи СПу Спи Гуз Маї Гуз Пе Рго Маї Аа Іе Гуз Сім Гей 465 470 475 480
Агу Спи Аа Тиг Зег Рго Гуз Аа Авп Гуз С1Іи Пе І еи Авр Сіи Аа 485 490 495
Туг Ма! Меї Аа 5ег Ма! Азр Азп Рго Ні Ма! Суз Аг Гей І ей Спу 500 505 510
Пе Суз Геи ТНг Зег ТНг Маї Сіп Гей Пе Тнг Сп Геи Меї Рго Ріе 515 520 525
Спіу Суз І ей І еи Авр Туг Маї Аг Сім Нів Гуз Азр Азп Пе Спу 5ег 530 535 540 60
Сіп ТугІ єи Гей Авзп Тгр Суз Маї Сип Пе Аа Гуз Спу Меї Авп Туг 545 550 555 560
Геи Спи Авр Агу Ага І єи Маї Ніз Агу Азр І еи Айа Аа Агу Авп Маї 565 570 575
Ї еи Ма! Гу Тнг Рго Сіп Нів Маї Гуз Пе Тнг Азр Рне Су ГІ єи Аа 580 585 590
Гуз І еи Ї ви Спу Аа Спи Спи Г ув Спи Туг Ніз АІа Спи Сіу Спу Гуз 595 600 605 маї Рго Іе Гуз Тгтр Меї Аа ГГ еи Сти Зег Пе І єи Ні Аго Пе Туг 610 615 620
Тиг Ні Сіп Зег Авр Маї Тр Зег Туг Спіу Маї Тнг Маї Тгтр Сім І єи 625 630 635 640
Меї Тиг РНе Сіу Зег Гуз Рго Туг Авр С1у Пе Рго Аа 5ег Сім Пе 645 650 655
Зег Бе Пе Геи Спи Гуз Спу Спи Агу І еи Рго Сп Рго Рго Пе Суб 660 665 670
ТА Пе Азвр Маї Туг Ме! Пе Меї Маї! Гуз Суз Ттр Меї Пе Авр Аа 675 680 685
З5
Азр Зег Аг Рго Гуз Рпє Ага Сім Гей Пе Пе СПм Рпе 5ег Гув Меї 690 695 700
Аа Ага Ар Рго Сіп Ага Туг І єи Маї Пе Сіп Спу Авр Спи Агу Меї 705 710 715 720
Нів І еи Рго 5ег Рго Тниг Ар 5ег Азп РНе Туг Аго Аа І еи Меї А5р 725 730 735 сій Сім А5р Меї Ар Авр Маї Маї Авр Аа Азр Сти Туг І еи Пе Рго 740 745 750
Сіп Сп Чу Ре РНе 5ег Зег Рго Зег ТАг Зег Агу Тиг Рго І еи І єи 755 760 765 зЗег ЗегіІ ви Зег АІа Тиг 5ег Авп Авп 5ег ТАг Маї Аа Суз Пе Азр 770 775 780 60
Агу Азп ау Гей Сп бЗег Суз Рго Пе Гуз Спи Авр Зег РнНе І єи Сп 785 790 795 800
Ага Туг Зег Зег Авр Рго Тиг Сіу Аа Геи ТАиг Спи Авр Зег Пе Авр 805 810 815
Азр Тпиг РНе Геи Рго Маї Рго Сім Туг Пе Авп Сп 5ег Ма! Рго Гуз 820 825 830
Аг Рго Аїа Стпу 5ег Маї Сп Авп Рго Маї Туг Ні Авп ап Рго Гей 835 840 845
Авп Рго Аїа Рго 5ег Ага Авр Рго Ні Туг Сп Авр Рго Ні 5ег Тиг 850 855 860
Аа Маї Сіу Авп Рго Спи Туг І еи Азп ТНг Маї Сп Рго Тнг Суз Маї 865 870 875 880
Авп бег ТНг Рпе Авр 5ег Рго Аїа Ні Тгр Аа Сіп І ув Спу Бег Нів 885 890 895
Сіп Пе Зег І єи Авр Авп Рго Авр Туг Сп Сп Ар Ре Рне Рго Гуз 0) 900 905 910
Сім Айїа Гуз Рго Авзп Сту Пе Ре Гуз Спу 5ег ТНг Аіа Спи Авп Аа 915 920 925
З5
Сім Тугі єм Ага Маї Аїіа Рго Сіп бег Зег Сіи РНе Пе Спу Аа 930 935 940 «210» 202 «2115» 20 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 202
СпІу Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Спіу Спу бег Спу Спу Спу Спу Зег Спу 1 5 10 15 Сіу Спу Спу бег 20 «2105 203 бо «2115 42
«2125 РВАТ «213» Ното зарівеп «400» 203
Гуз Агу Сіу Ага Гуз Гуз І еи ГГ еи Туг Пе РНе Гуз Сіп Рго Рпе Меї 1 5 10 15
Ага Рго Маї Сіп Тит Тнг Сп Ст Сім Абр Спу Суз бег Сувз Агу Рне 20 25 0)
Рго Си Ст СЯи Стій СПу Спу Сув Спи Ї еи 35 40 «210» 204 «2115 42 «212» РАТ «213» Ното зарівеп «400» 204
Гуз Агу Сіу Ага Гуз Гуз І еи ГГ еи Туг Пе РНе Гуз Сіп Рго Рпе Меї 1 5 10 15
Ага Рго Маї Сип Тит Тнг Сп Ст Сім Авр Спіу Сув бЗег Суз Агу Ре
Ко) 20 25 Зо
Рго Си Ст СЯи Стій СПу Спу Сув Спи Ї еи
З5 «2105» 205 «2115 112 «2125 РВАТ 40 «2135» Ното 5арієп «400» 205
Агу Ма! Гуз Ре 5ег Ага 5ег Аа Авр Аїа Рго Аа Туг Сіп Сіп СІу 1 5 10 15
Сп Авп Сп Гей Туг Авп Си І єи Авп ей С1у Ага Агу Спи Спи Тут 20 25 0)
Азр Маї І єи Ар Гуз Ага Ага Сапу Агу Авр Рго Сіи Меї Спу Спу Гув 35 40 45
Рго Аго Агу Гуз Авп Рго Сіп Сіи Спу І еи Туг Авп Сім І єи Сп Гув 50 55 60 60 Авр Гу Меї Аа Сіи Аїа Туг Зег Сім Пе Сіу Меї Гуз Спу Сім Агу
65 70 75 80
Аго Аг Сіу Гуз Спу Ні Авр Су І єи Туг Сп СпПу Г еи Бег ТНг Аа 85 90 95
Тиг Гуз Азр Тиг Туг Авр Аа ГГ еи Нів Меї Сп Аа ГІ еи Рго Рго Ага 100 105 110 «2105» 206 «2115 21 «212» РВАТ «2135» Ното 5арієп «400» 206
Меї Ага Г еи Рго Маї Тнг Аа ГІ ви І еи ГІ ви Рго Г еи Аа І еи І єи Гей 201 5 10 15
Ні Аа Аїа Ага Рго -2105» 207 «2115 16 «212» РВАТ 00 «213» Ното 5арієп «4005» 207
СІУ І єм Аа Маї Зег Тнг Пе 5ег Зег Ре РНе Рго Рго Спу Туг Сп (1 5 10 15 «2105» 208 «2115» 45 «212» РАТ «213» Ното зарівеп «400» 208
ТА Тнг Тек Ріо Аа Рго Агу Рго Рго ТНг Рго Аїа Рго Тк Пе Аїа 1 5 10 15 зег Сп Рго І еи Зег І єи Ага Рго Спи Аа Суз Агу Рго Аїа Аа Спу 20 25 Зо
Су Аїа Маї Ні Тниг Агу Стпу Гей Авр Ріє Аа Суз Авр 35 40 45 «2105» 209 «2115 231 «212» РВАТ 60 0 «213» Ното зарієеп
«400» 209
Спи Рго Гуз Зег Рго Авр Гуз ТНг Ні Тнг Су Рго Рго Суз Рго Аа 1 5 10 15
Рго Рго Маї АІа Сіпу Рго 5ег Маї Рнеє І єи РНе Рго Рго Гуз Рго І ув 20 25 0)
Азр Тпиг ГГ еи Меї Іе Аїйа Аго Тиг Рго Сіи Маї Тниг Суз Маї Ма! Ма! 35 40 45
Азр Маї 5ег Ні Сіи Авр Рго Спи Маї Гуз РНе Авп Тр Туг Ма! Авр 50 55 60 ау Маї Сіи Маї Ніз Авп Аа Гуз Тнг Гуз Рго Агу Сім Спи Сп Туг 65 70 75 80
Азп Зег ТНиг Туг Агу Маї Ма! 5ег Ма! І єи Тнг Ма! І еи Ні Сип Азр 85 90 95
Тр Геи Авп Сіу Гуз Сім Туг Гу Суз Гуз Маї 5ег Авп Гуз Ага І єи 100 105 110
Зо
Рго Аа Рго Іе Сім Гув ТНг Пе Зег Гуз Аа І уз Спу Сп Рго Аг9 115 120 125
З5
Сім Рго Сіп Маї Туг Тиг ГГ еи Рго Рго 5ег Аг Авр Си І ви Тит Гув 130 135 140
Авп ап Маї 5ег І еи Тнг Суз ГІ ви Ма! Гуз Сіу Рпе Туг Рго Зег Азр 145 150 155 160
Пе Аа Маї Спи Тгтр Спи Зег Азп Стпу Сп Рго См Авп Авп Туг Гуз 165 170 175
Тиг Тниг Ріо Рго Маї І ви Авр Зег Авр Сіу Зег Рпеє Рне І єи Туг Зег 180 185 190
Гуз Геи ТАг Маї Авр Гуз 5ег Ага Тр Сп Сп СПу Авп Маї Рпе Зег 195 200 205
Сув Зег Ма! Меї Ніз Сі АПа Г еи Нів Авп Ні Туг Тиг Сп Гуз 5ег 210 215 220 60 Гей Зегі еи Зег Рго Сіу Гув
225 230 «210» 210 «2115» 24 «212» РВАТ «213» Ното зарівеп «400» 210
Пе Тук Пе Ттр Аїа Рго І еи АІа Спіу ТНг Суз Сіу Ма! Г еп ец ЇЇ еи 1 5 10 15 зЗег І ей Ма! Ме Тиг Гей Туг Суз «2105 211 20 «2115 52 «212» РВАТ «213» Ното зарівеп «4005» 211
Рпе Ре Пе Рго Г еи ГІ єи Маї Маї Іе І еи Рне Аїа Маї Авр ТАиг Спу 1 5 10 15
Коо) Ї еи РНе Іе Зег Тнг Сп Сип Сіп Маї Тиг Рне Г еи Г єеи Гуз Пе Гув 20 25 Зо
Агу Тнг Ага Гуз Сіпу РНеє Ага Геи ГІ ви Авп Рго Нів Рго І уз Рго Авп 35 40 45
Рго Гуз Ап Ап 50 «2105» 212 «2115 215 «212» РВАТ «2135» Ното 5арієп «4005» 212
Меї Авр Тниг Спи Бег Азп Ага Ага Аїа Авп І єи Айа І єи Рго Сп Спи 501 5 10 15
Рго 5ег Зег Маї Рго Аа Рпеє Сіи Ма! І еи СпПи Пе 5ег Рго Сп Си 20 25 Зо маї Зег Зег Спу Ага Геи І єи Гуз 5ег Аа Зег 5ег Рго Рго ГІ еи Нів 35 40 45 60
Тиг Тер Геи Тк Маї Геи Гуз Гуз Спи Сіп Сім РНе Геи Спу Ма! ТНг 50 55 бо ап Ше Гей Тнг Аа Меї Пе Суз Геи Су Рпє Стпу ТНиг Маї Ма! Суб 65 70 75 80 зЗег Ма! І еи Авр Іе 5ег Ніз Пе Спи Спіу Авр Пе РНе 5ег 5ег Рне 85 90 95
Гуз АІа Су Туг Рго РНе Тр Сіу Аа Пе Рпєе Ре 5ег Пе Бег Спу 100 105 110
Меї ГГ еи Бе" Пе Пе 5ег Сім Агу Ага Авп Аа ТНг Туг Геи Маї Ага 115 120 125
Сіу Зег І єи Спу Аа Авп Тнг Аа 5ег 5ег Пе Аіа Сіу Спу Тиг Спу 130 135 140
Пе ТНиг Пе Геи Пе Пе Авп Гей Гуз Гуз Зег І еи Аа Тут Пе Нів 145 150 155 160
Пе Ні бЗег Суз Сп Гуз Рпе Рне Сім ТНг Гуз Суз Рне Меї Аа 5ег 0) 165 170 175
Ре 5ег Тнг Спи Пе Маї Ма! Меї Меї І єи Рне Гей Тнг Пе Гей Спіу 180 185 190
З5
Ї еєи Сіу 5Бег Аа Маї 5ег І єи Тнг Пе Суз Спу Аіа Спу Спи Си Ї ей 195 200 205
Гуз Спу Авп Гуз Маї Рго Сіи 210 215 «210» 213 «2115 А «212» РВАТ «213» Ното зарієп «400» 213
Аг Зег Гуз Агу зЗег Агу Сіу Спіу Ні Зег А5р Туг Меї Азп Меї ТНг 1 5 10 15
Рго Аго Агу Рго Су Рго Тнг Аго Гуз Нів Туг Сп Рго Туг Аа Рго 20 25 Зо бо Рго Агу Авр Ріє Аїа Аа Туг Ага 5ег
35 40 «2105» 214 «2115 18 «212» РВТ «213» Ното зарівеп «400» 214
Ме! Пе Рго Аїа Маї Ма! І еи І еи І єи Геи ГГ еи Геи Маї Спи Сп Аа 1 5 10 15
Ада Аа «2105» 215 «2115 43 «212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 215
Ї ви Спу Сім Рго Сп І єи Суз Туг Пе І и Ар Аїа Іе І єи Рпе Гей з30 1 5 10 15
Туг сту Пе Маї! І єи ТНг І єи Геи Туг Суз Ага Геи ГГ уз Пе Сіп Маї 20 25 Зо
Ага Гуз Аа Аа Пе Тниг Зег Туг Спи Гув Зег 35 40 «210» 216 «2115 22 «212» РВТ «213» Ното зарівеп «400» 216
Спу бег Спу Аа Тиг Азп РнНе 5ег І єи І єи Гуз Сіп Аа Спу Авр Маї 1 5 10 15 сій Си Авп Рго Спу Рго 20 «2105» 217 «2115 21 «212» РВТ «213» Ното зарівеп (516)
«4005» 217 сСіу Зег Сіу Спи Сіу Агу Спу Зег І єи Геи Тиг Сувз Спу Авр Маї Си 1 5 10 15
Сі Авп Рго сіу Рго 20 «210» 218 «2115 530 «2125 РВАТ «213» Ното зарівеп «400» 218
Ї еи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 0)
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сіп Сіп Маї Маї Айа Пе Аа Зег Авп Авп Спу 35 40 45
Спу Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи ГГ еи Рго Ма! Г еи Сув 50 55 60
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 65 70 75 80
Спу Спу Спу Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага І єи І єи Ріо Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сім С1п Маї Маї Аа Пе Аа 100 105 110 зег Ні Азр Стпу СПУ Гуз Сіп Аа І єи СП Тнг Маї Сип Аго І єи Гей 115 120 125
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 130 135 140
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу 145 150 155 160
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 165 170 175 60
Ммаї Аа Іе Аа 5ег Ні5 Авр Спу Спу Гуз Сп Аа ГГ еи Спи ТНг Маї 180 185 190
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Си 195 200 205
Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Авп Пе Стпу Су ГГ уз Сп Айа І ви Спи 210 215 220
Тнг Маї Сп Айа І єи Гей Рго Маї І еи Суз Сп Аа Ніз Спу Геи ТНг 225 230 235 240
Рго Сти СіІп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Нів Азр Стпу Спу Гуз Сп Аа 245 250 255
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аго Г еи ГГ еи Рго Ма! І еи Суз Сіп Аїа Ні Су 260 265 270
Ї єи ТНиг Рго Спи Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Пе Сіу Спу Гуз 275 280 285 ап Аа є Си Тнг Маї Сіп Айа І єи І еи Рго Маї Геи Суз Сіп Аіа 290 295 00
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сіп Сіп Маї Маї Айа Пе Аа Зег Авп Авп Спу 305 з10 315 320
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 325 330 335
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 340 345 350
Пе СЧПу Спу Гуз Сп Аа І еи Спи Тнг Ма! Сп Аа ГІ еи І еи Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380 зЗег Авп Сіу Спіу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи Тиг Ма! Сп Агу Гей ЇЇ еи 385 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 405 до 415 60
Пе АІа бег Авп Пе Сіу Спу Гу5 Сіп Аа Гей Спи ТАг Маї Сип Аа 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї 435 440 445
Маї Ага Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Гуз Сп Аа І еи Сім Тнг Маї 450 455 460
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Си 465 470 475 480
Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Ніз Азр Сіу СПУ Гуз Сп Аа І єи Спи 485 490 495
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 500 505 510
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Гей Спи 530 «210» 219 0о«2115 530 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 219
Ї єи ТНиг Рго Сі Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу Спу Г ув 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 0)
Ніз Су І єи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Азп Сіу Спу 35 40 45
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 50 55 бо 60 Сп Аа Ні СТУ І єи Тне Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніб
65 70 75 80
Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аа Ні С1у І єи Тиг Рго Сім Сітп Маї Маї Аа Пе Аа 100 105 110 зЗег Авп Пе Спіу Спу Гуз Сіп Аа І еи Спи Тнг Маї Сп Айа Г еи І єи 115 120 125
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Ні Сту І ви ТАг Рго Сп Сіп Маї Ма! Аіа 130 135 140
Пе Аа 5ег Авп Авп Спу Стпу Гуз Сп Аа Геи Спи Тег Маї Сип Ага 145 150 155 160
Ї еи Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Айа Нів СПУ Геи Тнг Рго Спи Сіп Маї 165 170 175 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 180 185 190
Зо
Сп Ага І єи І єи Рго Маї Гей Суз Сп Аа Ні СІу І єи Тнг Рго Сп 195 200 205
З5
Сп Маї Маї Аа Іе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз Сп Ада І ей Спи 210 215 220
ТигМаї Сип Агу ГІ ви Геи Рго Маї І єи Суз Сп Аїйа Нів Спу Гей ТНг 225 230 235 240
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Авп Спу Спу Гуз С1тп Аа 245 250 255
Ї ви Спи ТАг Маї ап Аго Г еи ГГ еи Рго Маї І еи Суз Сіп Аїа Ні Су 260 265 270
Ї єи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Азп Стпу Стпу І ув 275 280 285
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 290 295 00 (510) Ні СУУ І єи Тнг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Іе Аїа Зег Авп СпПу Спу
305 з10 315 з20
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 325 330 335
Сп Аа Ніз СТУ І єи Тне Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 340 345 350
Пе СЧПу Спу Гуз Сп Аа І еи Спи Тнг Ма! Сп Аа ГІ еи І еи Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аа Ні С1у І єи Тиг Рго Сім Сітп Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380 зЗег Ні Азр Сіу Сіпу Гуз Сп Аа І еи Спи ТАг Ма! Сіп Аді ей Ї ей 385 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 405 а410 415
Пе АІа бег Авп Пе Сіу Спу Гу5 Сіп Аа Гей Спи ТАг Маї Сип Аа 420 425 430
Зо
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 435 440 445
З5 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 450 455 460 ап Аг єи ГГ еи Рго Маї Гей Суз Сіп Аа Ні Су І еи ТНг Рго Сп 465 470 475 480
Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Авп Авп Сіу Сіу Гуз Сп Аа Гей Си 485 490 495
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 500 505 510
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Ї еи Си 530 60 0о«210» 220
«2115 530 «212» РВАТ 213» Штгтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 220
Ї еи Тиг Рго Сп Сп Маї Маї Айа Іе Аа бег Авп Авп Стпу Спу Гув 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 0)
Ніз СІУу І єи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Азп Сіу Спу 20
Сіу Гуз Сп Айа І єи Сім ТАг Маї Сп Аго І єи Гей Рго Ма! І еи Суб бо 25
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 65 70 75 80
Зо Авп Сіпу Спіу Гуз СіІп Аа І ви Спи ТАг Ма! СІп Аку Гей Гей Рго Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 35 100 105 110 зЗег Авп Сіу Спіу Спу Гуз Сп Аа І єи СПм Тниг Маї Сіп Агу Гей є 115 120 125 40
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Сп Сп Маї Маї Аа 130 135 140 45
Пе АІа бег Авзп Спу Спу Спу Гуз Стп Аа І еи Спи ТНг Маї Сіп Ага 145 150 155 160 50 Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї 165 170 175 маї Аа Іе Аа бег Абзп Спіу Спу Спу Гуз Сп Аа Геи Си ТНг Маї 55 180 185 190
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Сп 195 200 205 60
Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Азп Авп Сіу Стпу Гуз Сп Аа І єи Си 210 215 220
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 225 230 235 240
Рго Си Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Авп Пе Спу СПу Гув Сп Аа 245 250 255
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аа І єи Геи Рго Маї І єи Суз Сп Аїйа Нів Спу 260 265 270
Ї єи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Азп Стпу Стпу І ув 275 280 285
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 290 295 00
Ніз Су І єи Тнг Рго Сім Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу 305 з10 315 з20
Зо Спіу Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи ГГ еи Рго Маї І еи Суб 325 330 335
Сіп Айа Нів Су Гей Тнг Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Нів 340 345 350
Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сім С1п Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380 зЗег Авп Пе Спіу Спу Гуз Сіп Аа І еи Спи Тнг Маї Сп Айа Г еи І єи 385 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Сп Сп Маї Маї Аа 405 до 415
Пе АІа бег Авзп Спу Спу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи Тнг Маї Сіп Аго 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 435 440 445 60 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 450 455 460
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Си 465 470 475 480
Сп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авзп Пе Спу Спу Гуз Сп Айа І ви Спи 485 490 495
Тнг Маї Сп Айа І єи Гей Рго Маї І еи Суз Сп Аа Ніз Спу Геи ТНг 500 505 510
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Ї еи Си 530 «2105» 221 «2115 539 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 221
З5
Авп Рго ап Агу Зег ТНг Маї Тр ТУГІ єи Тниг Рго Сп Сп Маї Маї 1 5 10 15
Аа Пе Аіа 5ег Авзп Авп Стіу Сіу Гуз Сіп Аа І еи Спи ТНг Маї Сп 20 25 0)
Аго Г еи Геи Рго Маї Геи Суз Сіп Аа Нів Слу І еи ТАг Рго Сп Сп 35 40 45
Ммаї Маї Ага Іе Аа 5ег Азп Спу Спу Спу Гуз Сп Аа І ви Спи ТНг бо 50 маї Сп Аг І єи І єи Рго Маї Гей Суз Сіп Аа Нів Спіу Гей Тнг Рго 65 70 75 80 55
Сп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бЗег Азп Азп Сту Спу І уз СіІп Аа І єи 85 90 95 60 Спи Тк Маї Сп Аго Ге ГГ еи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ні Спу Гей
100 105 110
ТАг Рго Сіп СіІп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Азп Авп Сіу Спу Гуз Сп 115 120 125
Аа Геи Сім Тиг Маї Сіп Аг Г еи І єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Нів 130 135 140
СУ Г єи Тнг Рго Сім Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ні Авр Спу СПу 145 150 155 160
Гуз Сіп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи І єеи Рго Маї І єи Сув Сп 165 170 175
Аа Ніз Слпу Геи Тиг Рго Спи Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр 180 185 190
Стпу Спу Гуз Сп Аа І єи Спи ТАг Маї Стій Агу І єи І єи Рго Маї І ей 195 200 205
Суз Сп Аа Ніз Спу Г еи Тнг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег 210 215 220
Зо
Авзп Спу СпПу Спу Гуз Сп Айа І єи Спи ТНг Маї Сп Агу ГІ єи Гей Рго 225 230 235 240
З5 маї Геи Сув Сіп Аа Ні Спу І еи ТНиг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Пе 245 250 255
Аа бег Авп Сіу Спу Спу Гуз Стп Аа ГГ еи Спи ТНг Маї Сіп Агу Гей 260 265 270
Ї еи Рго Маї І еи Суз Сп Аїа Нів Спу І еи Тнг Рго Сип Сп Маї Маї 275 280 285
Аа Іе Аїа 5ег Авп Спу Спу Спу Гуз Сіп Аа І ви См Тниг Маї Сп 290 295 00
Ага І єи І єи Рго Маї І єи Сувз Сп Аа Ні Стпу І ви Тне Рго Сп Сп 305 з10 315 320
Ммаї Маї Ага Іе Аа 5ег Азп Спу Спу Спу Гуз Сп Аа І ви Спи ТНг 325 330 335 60 Маї Сип Аго Ге ГГ еи Рго Маї І еи Су Сп Аа Ні Су І еи ТНиг Рго
340 345 350
Сп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бЗег Азп Азп Сту Спу І уз СіІп Аа І єи 355 360 365
Спи ТАг Маї Сіп Ага І єи І еи Рго Маї І єи Суз Сп Аа Ні СТУ І єи 370 375 380
ТАг Рго Сіп СіІп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Азп Авп Сіу Спу Гуз Сп 385 390 395 400
Аа Геи Сім Тиг Маї Сіп Ага Гени ГГ еи Рго Маї І єи Суз Сіп Аїа Нів 405 до 415 ау Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї Маї Ага Пе Аа 5ег Авп Авп Стпу Спу 420 425 430
Гуз Сіп Аа І ви Спи Тниг Маї Сп Агу ГГ еи ГГ еи Рго Маї І єи Сув Сіп 435 440 445
Аа Ні СІу Г еи Тниг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Ага 5ег Авп Спіу 450 455 460
Зо
Сіу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи ТАг Маї Сіп Ага ГІ єи ГГ еи Рго Маї І еи 465 470 475 480
Суз Сп Аа Ні Спу І єи ТНг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег 485 490 495
Авп Авп Су Сіу Гуз Сп Аа Геи Си ТНг Маї Сп Ага Геи І еи Рго 500 505 510 ма! І еи Сувз Сп Аа Ні СПУ І еи Тне Рго Сп СіІп Маї Маї Аїа Пе 515 520 525
Аа 5ег Абп Сіу Спу Спу Агу Рго Аа Гей Си 530 535 «2105» 222 «2115 530 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт 60 «400» 222
Ї єи ТНиг Рго Сі Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу Спу Г ув 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 0)
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сім Сіїп Маї Маї Аа Іе Аїа Зег Ні Азр Спу 35 40 45
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 50 55 60
Сп Аа Ні СТУ І ви Тне Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Нів 65 70 75 80
Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сім С1п Маї Маї Аа Пе Аа 100 105 110
Бег Авп Пе Сіпу Спу Гуз Сп Аа І єи Спи ТАг Маї Сій Аа І єи І єи 115 120 125
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 130 135 140
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага 145 150 155 160
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 165 170 175 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 180 185 190
Сп Аг єи ГГ еи Рго Маї Гей Суз Сіп Аа Ні С1у І еи ТНг Рго Спи 195 200 205
Сіп Маї Маї Айа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сип Аа І еи Си 210 215 220
Тнг Маї Сп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Нів Спу Гей Тит 225 230 235 240 (516)
Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Азп Сіу Спу І ув Сп Аа 245 250 255
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аго Г еи ГГ еи Рго Ма! І еи Суз Сп Аа Ні Спу 260 265 270
Ї еи Тиг Рго Сіи Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Авп Пе Сіу Спу Гув 275 280 285
Сп Аа І еи Сім ТАг Маї Сп Аа І єи І єи Рго Ма! І еи Суз СіІп Аа 290 295 00
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сіп Сіп Маї Маї Айа Пе Аа Зег Авп Авп Спу 305 з10 315 з20
Сіу Гуз Сп Айа І еи Сім ТНг Маї Сіп Ага ГГ еи Гей Рго Ма! Геи Сув 325 330 335
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 340 345 350
Зо Авп Сіпу Спіу Гуз Сп Аа І еи Спи ТАг Маї Сип Агу І ей Ге Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380 зЗег Авп Спу Сіу Спу Гуз Сп Аа І єи Сім Тиг Маї Сіп Агу Гей ЇЇ єи 385 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 405 до 415
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї 435 440 445 маї Аа Іе Аа 5ег А5п Авп Спу Стпу Гуз Сип Аа Геи Сім ТАг Маї 450 455 460
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Си 465 470 475 480 60
Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Ніз Азр Сіу СПУ Гуз Сп Аа І єи Спи 485 490 495
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 500 505 510
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Ї еи Си 530 «2105» 223 «2115 530 «212» РАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 223
Ї єи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Азп Стпу Стпу І ув 1 5 10 15
Зо
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 зо
З5
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сіп Сіп Маї Маї Айа Пе Аа Зег Авп Авп Спу 40 ау Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи ГГ еи Рго Маї І еи Суб 60
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа бег Авп 45 65 70 75 80
Азп Стпу СПУ Гуз Сіп Аа І ви Сім Тнг Маї Сіп Агу Гей ГГ еи Рго Маї 85 90 95 50
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сім С1п Маї Маї Аа Пе Аа 100 105 110 55 зЗег Авп Пе Спіу Спу Гуз Сіп Аа І еи Спи Тнг Маї Сп Айа Г еи І єи 115 120 125 (510) Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Сп Сп Маї Маї Аа
130 135 140
Пе Аа 5ег Авп Авп Спу Стпу Гуз Сп Аа Геи Спи Тег Маї Сип Ага 145 150 155 160
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 165 170 175 маї Аа Іе Аа 5ег Авп Пе Сіу Спу Гуз Сп Аа Геи Сіи Тнг Маї 180 185 190
Сп Айа І єм Гей Рго Маї Геи Суз Сп Аа Ніз Спу І єи ТНиг Рго Сп 195 200 205 ап Маї Маї Аа Іе Аа Зег Азп Спу СПу СПу Гуз Сп Аа Геи Сіи 210 215 220
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 225 230 235 240
Рго Сти Сіп Маї Маї Айа Іе Аа 5ег Ніз Азр Спу Спу Гуз Сп Аа 245 250 255
Зо
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аго Г еи ГГ еи Рго Ма! І еи Суз Сіп Аїа Ні Су 260 265 270
З5
Ї еи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бЗег Азп Спіу Спу Спу Г ув 275 280 285 ап Аа єи Си Тнг Маї Сіп Аг ГГ еи ГГ еи Рго Маї І еи Сувз Сіп Аа 290 295 00
Ніз Су І єи Тнг Рго Сім Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу 305 з10 315 з20
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 325 330 335
Сіп Айа Нів Су І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Іе Аїа 5ег Авп 340 345 350
Спу Спу Стпу Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага І єи І єи Рго Маї 355 360 365 60 Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Стпу І еи ТНг Рго Сіп СіІп Маї Маї Аа Пе Аа
370 375 380 зЗег Авп Авп Сту Спу Гуз Сіп Аа І ви Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи Ге
ЩД З85 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 405 до 415
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї 435 440 445
Маї Ага Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Гуз Сп Аа І еи Сім Тнг Маї 450 455 460
Сіп Ага Г еи І єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи Тнг Рго Сп (465 470 475 480
Сп Маї Маї Аа Іе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз Сп Ада І ей Спи 485 490 495
Зо
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 500 505 510
З5
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
ТГеп Си 530 «210» 224 «2115 530 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 224
Ї еи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 0) 60
Ніз Су І єи Тнг Рго Сім Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу 35 40 45
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су 50 55 60
Сп Аа Ні СТУ І ви Тне Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Нів 65 70 75 80
Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аа Ні С1у І єи Тиг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 100 105 110 зЗег Авп Сіу Спіу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи Тиг Ма! Сп Агу Гей ЇЇ еи 115 120 125
Рго Ма! Геи Суз Сп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сп Маї Ма! Аіа 130 135 140
Коо) Пе Аа 5ег Ні Авр Спу Стпу Гуз Сіп Аа ГГ еи Спи Тнг Маї Сип Ага 145 150 155 160
Ї еи Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи Тнг Рго Спи Сп Маї 165 170 175 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 180 185 190
Сп Ага І єи І єи Рго Маї І єи Суз Сп Аа Ні Спу І еи ТНг Рго Сп 195 200 205
Сп Маї Маї Аа Іе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз Сп Ада І ей Спи 210 215 220
ТАг Маї Сіп Агу ГІ єи Геи Рго Маї І єи Суз Сп Аїа Ні Су І еи ТНг 225 230 235 240
Рго Си Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Авп Пе Спу СПу Гув Сп Аа 245 250 255
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аа І єи Геи Рго Маї! І еи Суз Сп Аїа Ні Спу 260 265 270 60
Ї єи ТНиг Рго Сі Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу Спу Г ув 275 280 285
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сп Аго І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 290 295 00
Ні СУУ І єи Тнг Рго Сіп Сіп Маї Маї Аа Іе Аїа Зег Авп СпПу Спу 305 310 315 з20
Сіу Гуз Сп Айа І єи Сіи ТАг Маї Сп Ага ГІ єи ГГ еи Рго Маї Геи Су 325 330 335
Сп Аа Ні СТУ І ви Тне Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Нів 340 345 350
Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сім С1п Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380
Бег Авп Пе Сіпу Спу Гуз Сп Аа І єи Спи ТАг Маї Сій Аа І єи І єи 385 390 395 400
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 405 до 415
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 435 440 445 маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Гуз Сіп Аа Геи Стпи ТНг Маї 450 455 460
Сп Аг єи ГГ еи Рго Маї Гей Суз Сіп Аа Ні Су І еи ТНг Рго Си 465 470 475 480
Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Азп Пе Спіу Спу Гуз Спп Аа І ей Си 485 490 495
Тнг Маї Сп Айа І єи Гей Рго Маї І еи Суз Сп Аа Ніз Спу Геи ТНг 500 505 510 (516)
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Ї ви Спи 530 «2105» 225 «2115 530 «212» РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» 223» Синтетичний конструкт «4005» 225
Ї еи ТНиг Рго СіІп Сіп Маї Маї Аа Пе Аа бег Азп Спіу Спіу Спу Гуз 1 5 10 15
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 20 25 Зо
Ні СУУ І єи Тниг Рго Сіп Сіп Маї Маї Айа Пе Аа Зег Авп Авп Спу
Зо
Сіу Гуз Сп Айїа І єи Сім ТАг Маї Сіп Аго І еи ГГ еи Рго Ма! І еи Су бо 35
Сіп Айа Нів Су Гей Тнг Рго Спи Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Нів 65 70 75 80 40 Азр Сіу Сіу Гуз СіІп Аа І єи Спи ТАг Маї Сіп Агу І єи І єи Рго Маї 85 90 95
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 45 100 105 110 зЗег Авп Сіу Спіу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи Тиг Ма! Сп Агу Гей Гей 115 120 125 50
Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Спи Сіїп Маї Маї Аа 130 135 140 55
Пе Аа 5ег Ніз Азр Сіу Су І уз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сип Агу 145 150 155 160 (510) Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Сп Сіп Маї
165 170 175 маї Аа Іе Аа бег Ап Спіу Спу Спу Гуз Сіп Аа І еи Спи ТНг Маї 180 185 190
Сп Ага І єи І єи Рго Маї І єи Суз Сп Аа Ні Стпу І и Тнг Ро Сіп 195 200 205
Сп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Азп Сіу Сіу Спу Гуз Сп Айа І єи Спи 210 215 220
ТАг Маї Сіп Ага І єи І єи Рго Маї І єи Суз СіІп Аа Ні СІУу І ви ТАг 225 230 235 240
Рго Си Сіп Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Азп Пе Спу СПу Гуз Сп Аа 245 250 255
Ї ви Спи Тнг Маї Сіп Аа І єи Геи Рго Маї І єи Суз Сп Аїйа Нів Спу 260 265 270
Ї єи ТНиг Рго Си Сіп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ні Азр Спу Спу Г ув 275 280 285
Зо
Сп Аа І єм Спи ТНг Маї Сіп Аг І єи Гей Рго Маї Геи Суз Сіп Аа 290 295 00
Ніз Су І єи Тнг Рго Сім Сп Маї Маї Аа Пе Аа 5ег Ніз Азр Спу 305 310 315 з20 ау Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи ГГ еи Рго Маї І еи Суб 325 330 335
Сіп Айа Нів Су Геи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп 340 345 350
Спу Спу Стпу Гуз Сп Аа І єи Спи Тнг Маї Сп Ага І єи І єи Рго Маї 355 360 365
Ї еи Суз Сп Аїа Ніз Спу І еи Тнг Рго Сіп Сп Маї Маї Аа Пе Аа 370 375 380 зЗег Авп Авп Сту Спу Гуз Сіп Аа І ви Спи Тнг Маї Сп Агу ГГ еи Ге 385 390 395 400 (510) Рго Ма! Геи Суз Сіп Аа Нів Сту І єи Тниг Рго Сп Сп Маї Маї Аа
405 до 415
Пе АІа бег Авзп Спу Спу Спу Гуз Сп Аа Геи Спи Тнг Маї Сіп Аго 420 425 430
Ї ей Г єи Рго Маї І єи Суз Сіп Аа Ніз Спу Геи ТНг Рго Спи Сіп Маї 435 440 445 маї Айа Іе Аа 5ег Авп Пе Сіу Спу Гуз Сп Аїа Геи Сіи ТАг Маї 450 455 460
Сп Айа І єм Гей Рго Маї Геи Суз Сп Аа Ніз Спу І єи ТНг Рго Сі 465 470 475 480 ап Маї Маї Аа Іе Аа 5ег Ні Азр Сту Су І уз Сіп Аа І єи Спи 485 490 495
Тнг Маї Сп Ага Г еи ГІ єи Рго Маї І еи Суз Сіп Аа Ні Спу Геи ТНг 500 505 510
Рго Сп СіІп Маї Маї Аа Іе Аа бег Авп Сіу Спу Спу Ага Рго Аа 515 520 525
Зо
Ї еи Си 530
З5 «210» 226 «2115 135 «2125 РВАТ «213» Ното зарівеп 40 «400» 226
Сув Рго Туг Зег Авп Рго 5ег ГГ еи Суз Зег Сіу Спу Сіу Спу Бег Спи 1 5 10 15 45
Ї еи Рго ТАг Стіп Сіу Тик Ре Зег Авп Маї Зег Тиг Азп Маї Зег Рго 20 25 0) 50
Аа Гуз Рго Тнг ТАг ТНг Аа Суз Рго Туг Зег Авп Рго 5ег І ви Суб 55 Зег СПу Счу СПу Спу Зег Рго Аа Рго Аго Рго Рго ТиАг Рго Аа Рго 60
ТА Пе Аа 5ег Сп Рго І єи 5ег І еи Ага Рго Сім Аіа Суз Ага Рго 60 65 70 75 80
Аа Аа Сіу Сіу Аа Маї Ніз Тнг Агу Су І єи Азр Рне Аа Суз Азр 85 90 95
Пе Тук Пе Ттр Аїа Рго І єи Аа Спіу Тнг Суз СПУ Маї І еи І єи І єи 100 105 110 зег І ви Ма! Пе ТАг І єи Туг Сув Авп Ні Ага Авп Ага Ага Ага Маї 115 120 125
Суз Гуз Суз Рго Агу Рго Пр 130 135 «2105» 227 «2115» 19 «2125» РАТ 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 227
Сув Спу Зег Сіу Бег Спу Геи Спи Си Гуз Гув Сіу Азп Туг Ма! Ма!
Зо 1 5 10 15
ТАг А5р Ніб «2105» 228 «2115» 804 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 228 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссссіддсіс Ідсідсідса сдсідсісдс (610) ссідащююа ісаюдасіса дісіссссід Ісісідсссо Ісасссіддд асадсссдсс 120 адсаїсіссі дсаададсіс ссададссю сідіасісса асддсаадас сіаїсюааї 180 дайссадс ададасссду ссададсссі сддадасіда Ісіассаодді дісіїаадсід 240 дасадсдаса ідссідаїсу снсісюда адсоудаїсс9 даассдасі асасідаая 300 аїсадссддд ааддсада ддасаюдос дюїасіай дсдоссаддаїасссасис 360 ссасідаса! Нддсдос9ду сассаадаї дадаїсаадчо дчаддадаадо аадсддадда 420 60 ддаддаадсду дсдасадсода сісіддсддс ддсдасадсс аддідсадсі ддідсададс 480 ддадсададду юаадаадсс ддсдссісс ддаадаіді сндіааддс садсдудсіас 540 асайсассд анаїасасі дсасіддаою сддсаддссс сіддссадод асюдачдчіда 600 ащдддаддаа ісіддссіаї сассддадда ассасаїаса ассадаадіааддосада 660 дюасаащда ссадддасас аїсіассадс асадщіаїа ддадсідісіадссідсудс 720 іссдаддаїа садссдідіа сіайосдсс ададдсдада сасадоддаїс пПддадасад 780 ддсасссіду Ідасадіодіс сісі 804 «2105» 229 «2115» 807 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 229 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсю ссасіддсессс юсідсідса сдсадсаадчд (610) ссісаддіда сссдаадда дадсддсссі дідсіюдсіда адссаасада дасссюдаса 120 сідассідса садідісідд снсадссід Іссаассссс ддаїдосої даосіддаїс 180
Зо адасадсссс сюдсааддс ссіддадідо нсдсссаса іспшсіас сдаадаад 240 адссідаадс щісссідаяд аїсіаддсід асссідадса аддасасаїсіаададссад /-з00 дюдідсіда ссаїдасааа саїіддссссії діддасіссу ссасаїасіа Посдссада 360 дасадсісса айасдадда сіашсдас Шддадсс аддосасссі ддідасадаія 420
Істадсдасу дчаддаддаїс сддадаадда ддаїсідасоу дсддсоддсіс сддсдудсяддс 0480 дасіссдадд 4Юдідсідас ссададсссі дссасасіцді ссдідісісс аддсдадада 540 дссасссіді сндіадддс садссадісс дідсдсадса аїсіддссід діассадсад 600 аадіссддсс аддссссаад асюсюаїйс іаїддсісса ссаїсаддас сасаддадід 6бо ссадсасодсі Ісісіддаад сддаїссдодас асададша сссідасааї сіссісісіЯ (720 садіссдаду ашсодссоді діасіайодс садсадіасі сідасіддсс спсассш 780 ддсссіддса саааддаюда їаїсаад 807 «2105» 230 «2115» 807 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт бо
«400» 230 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссасададіда сссідаадда діссддасссс дідсюдіда адссіасада дасссідаса 120 і сідассідса садідіссдод сісісісід адсаасоссс дсаїддосоі діснодаїс 180 аддсадсссс сюдсааддс ссіддадідо сіддсссаса Іспіссас сдасдадаад 240 істаїссдда даадссідсу сіссадасід асссідадса аддаїасаїс саадісісад 300 дюдідсіда ссаїдасааа саїдчдасссс діддайассо ссасаїасії сідсдссада 360 дасадсісса айасдадда сіашіда! їасюдадсс аддосасссі ддідасадід 420 й Ісїадсодад даддаддаад содадоадоа оддаїсідосо дсодсдосісідосодсоддс 0480 дасадсдада ддісащдас ссададссса дссасасіда дсдідісссс додсдадача 540 дюасссді ссідіаддос аїсісададс дідіссісіа аснсоссід діаїсадсад (100) адассаддсс аддсассаад дсідсідсід іїіасддадсаа ссасаададс сасаддасід 6бо сссддсадаї Шссддаїс (ддаадсддс ассдадааїа Ііссдасааї садсісссю 720 7 садісюадо аснсдссаї станшос садсадіаса аддайдоудссайсасстш 780 ддссссддса дсааддаюда саїсаад 807
Зо «2105 231 «2115» 807 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність
З5 «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 231 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс ідсідсідса сдсадсаада бо ссісаддіда сссдаадда діссддсссі дідсддіда адссаасада дасссідаса 120 сідассідса садідісідд снсадссід Іссаасосаа ддацддосаї дадсіддаїс 180 7 аддсадсссс сюдсааддс ссіддадідо сідддссаса Ісшадсас сдасдадаая 240
Існасадса саїсссдад аддсададаїс ассаїсісіа аддайасаад сададудссія 300 дюдідсіда сссідасааа саїддасссс діддаїассу ссасаїасіа Пдсдссаду 360 дасадсісса айасдадда сіашсдаї Ішоддосс сідасіссі ддідассоїюд 420
Ісїадсо99с9 дсодсодосіс юддаддадда дд9аадсодад даддадодаїс сдосддсддс 0480 7 дусісдада ісдідаюдас ссадіссссі дссасасюї сідідадсссаддсдадада 540 дссасссіді сндіаддої дісссадісії аїсддсодсса аїсіддссід діассадсад 600 бо ааднсддсс аддссссааяд асідсідаїс їІаддадсаї ссассададс сасаддааїс 660 сссдщаздої ісіссддаду аддаїсюда ассдадша сссідасааї сіссісісід 720 сададсдадад асшоссаї сіасіссідс садсадіаса істайдодсс сисасаші 780 ддсссіддса ссасадідда їаїсааа 807 «2105 232 «2115» 807 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 232 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс ідсідсідса сдсадсаада бо ссасаддіюда сссідаадда дадсодассс аїдсіддіда адссіасада дасссідаса 120 сідассідса садідадсод9 сисісссід аасааїдсаа ддаддосоі діссіддаїс 180 аддсадсссс сюдсааддс ссіддадідоу Нсдсссаса Іісшадсас сдасдадаад 240
Іссшсдса саїсістад аадсадосід асссідадса аддаїасаад саадісссад 300 дюдідсіда ссаїдасааа саїдчдасссс діддайассо ссасаїасіа Пдсдссада 360
Зо дасадсісса айасдадда сіашсдаї їасідддоасс аддосаїссі ддідассоаїд 420
Істадсоддсо дсододсодсіс юдадаадода ддаадсодад даддаддаїс сдосоддсодс 480 дасісюада ісддащдас ссадісіссс дссасасіді сідїідадсссіддсдадада 540 дссасасіда дсідіадддс сісссадісї дїдадсааса аїісіюдссід діаїсадсад 600 аадссаддсс аддсассаад дсідсідаїс їасддадсаї ссассададс сасаддадчід 660 ссадсаацдодї ісіссддаїс Щщасадсддс ассдадша дссюдасааї сіссісісід 720 садіссдадо асіїсдссодї дїаншос садсадіаса аддайдудссайсассш 780 ддссссддса сааадаюда даїсаад 807 «2105» 233 «211» 819 «2125 ОМА 213» Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 233 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссададаюда ассюдідда діссддсддас ддссіддщда адссщдас9о аїсссюадад 120 60 сдісц9су аддсаадс9ду сісассіїс адсіасдссі ддащіссід ддідсдссад 180 дсссссддса адддаасідда чюдаїдодда соддаїсаасді ссаїсдсадасодаддадса 240 ассдайнасд садссссіді дадааасаду Нсасааїсі ссададасда Псіаддааї 300 і асссідіаїс ддадайса сісісідаад асададдаса ссдссдідіа стайдсасс 360 асааїсссю дсаасдасдс сшодаїа ддадссадао дсасаадаї дассаїдадс 420
Іссддсдосо дсодосісюдо аддаддадда адсодаддад даддааосод д99сдосодс 0480
Ісідасаїсяа ідсідасаса діссссасід Ісссідісід їдасссссо9д сдадссідса 540 адсаїсіссі діадаїсіад ссададссід сідіасісса асдосаадаа Наїсюдаї 600 й їдонссідс асаадссаду ссадісіссс садсідсюа ісіассюда аїсіааіїад99 6бо дсаадсоддаяд Ідссадассо днсісюда адсддаїссу дсаїсдасії саїссідаад 720 аїсадсадду юдадодссда ддаюідодос дідіасіай дсаїдсадудс ссадсадаса 780 сссаїсассі ісддссадда сасаадасід дадаїсаад 819 «2105» 234 «211» 819 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 234 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс двсідсідса сдсадсаадчд (610) 7 ссададаюда ассюдідда діссддсддас ддссіддщда адссщдас9о аїсссюадад 120 сюісц9су аддсаадс9ду сісассіїс адсіасдссі ддаюіссід ддідсдссад 180 дсссссддса ададасідда діддаїддос сддаїсааді ссаїсассда сддадосоїд 240 аїсдацнасду садсассюї дадааасадо ідсасааїсі ссададасда йсіаддааї 300 асссідіаїс ддадайса сісісідаад асададдаса ссдссдідіа стайдіасс 360 7 асааїсссю дсаасдасда Шсдаїа їдддодссадо дсадаадоді дассуідадс 420
Іссддс9д9с9 дс99сісіду аддаддадда адсодадоад даддааосод д999с99сЯдс 0480
Ісідасаїсяа ідсідасаса діссссасід Ісссідісід їдасссссо9д сдадссідса 540 адсаїсіссі діаддісіад ссададссід сідіасісса асддсаадаа Чаїсіддаї 600 тдощшсїдс асаадссаду ссадісіссс садсідсіда ісіассідду аїсіааіач9 6бо 7 дсаадсоддаяд Ідссадассо днсісюда адсддаїссу дсаїсдасії саїссідаад 720 аїсадссдсу ддадоасада ддасдддас дідіасіацй дсаїдсаддс ссадсадаса 780 бо сссаїсассі ісддссадда сасаадасід дадаїсаад 819
«2105» 235 «211» 816 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 235 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссадададс адсюдоада дчіснддадс дчосіддюа адссіддсда аїсісщада 120 сюадсідсд садсаїссда сісаїсій аасаафссі ддаїдіссід ддідсдссад 180 дсссссддса адддасідда діддаїсддс сддаїсаада дсаадісєссда сддаддаасс 240 асадацасд садсассіді дааддассос Нсасааїсі сісдддасда адсааддаї 300 асссідіаїс їідсадаюаа сддссідаад асададдаса ссдссдідіа сіисідсасс 360 асадссссід дсддсссійї щдшанандо ддссадддса сасіддідас соідадсісс 420 9ддадд929929 даадсодс99 аддадосадс досадсодсо осісідасод сддсодсадс 480 дасаїсаїдс дасасадаяд сссісідісс сідссадща сссссддсда дссідссісї 540
Зо аїсадсідіс дсісіадсса дадссідсід сассдддасо дсіїсаана ссюданод (610)0) шесдсада адссаддсса діссссссад сідсдаїйсі аїсіддссіс сісїададсс 660
Істддсддс садасадді сіссддсісі дасадсддса садасисас ссідаадаїс 720 адсададіюду аддссдадда щідадсоїо їасіайдса дсаддсссідсадасассс 780 аїсассійсЯ дссадддсас аадасіддад аїсааа 816 «2105» 236 «2115» 813 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 236 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссщдаддащдс адсіддода дадсоддсдас ддссіддда адссіддс9ду аїсссщада 120 сдісц9су аддсагадсду сісассій адсдасдсаї ддаїдіссід ддідсдссад 180 дссссіддса адддасідда діддаїщдаода содаїсаада дсаадасада сддсддсасс 240 асаданасод юдідссасі даасддссдс Нсаїсаїсі сссдсдасда псісддааї 300 бо асссідіаїс їідсадсюдаа сааїсідаад асададдаїа ссдссдідіа сіайдсасс 360 асадідссад дсіссіасду сіайддддс саддосасас іддюдассаї дадсіссддсе 420 99с99с99с! сіддадда9у аддаадсода д99299299аа 9с99999с99 соОсісідас 480 і аїсдідащда сасадісісс асщадссід ссадідассс сіддсдадсс адссіссаїс 540 існдісосі сіадссадад ссідсідсас аасаадсода асаацассі дданоднш 600 сідсадаадс сіддссадіс сссісадсід сідаїсіаїс Іддссадсааіададссісс 660 ддадідссад асадайсіс їддаддадда адсддаасад асіїсасссі даадаїсадс 720 ададіддадао ссдаддасодї аддасаїас тапосаюс аддсссадса дасассіаїс 780 ій ассісдасс адддсасаад асіддадаїйс аад 813 «2105» 237 «2115 837 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 237 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссісіддссс ідсідсідса сдсадсаада (610)
Зо ссасаддідс адсіддіодса діссддадса даддідаада адссіддсад сіссддаад 120 додадсідса аддссіссду сдасасанс ісіадсаасд сааїсадсід ддідсдссад 180 дссссіддсс ададасідда діддаддодс дідаїсаїсс сіаїсійс9дд сассдссдас 240 7 їаїдсссада адшсадад ссоаддідаса аїсассодссу аюдадісіасаадсассдсс 300 тасаюдадс ідіссісісї дадаїссдад дасасадссо шіасіайоу дссаддсас 360 ассіаїсасд адіасдсада аддаїасіаї ддаддадсаа (ддаїссцо9 дддасадддс 0420 асасіддіда ссудідадсіс сддсдасоддс досісіддад дчаддадааад содадаадда 480 ддаадс9999 дсдасодсіс Ідадсідсад адсдідсіда сссадссасс Пссоссісї 540 7 ддаасассад дссададдаї дассаїсадс ідсіссддаї сіадсіссаа саїсдудсісс 600 аацасощі айддіасса дсадсідсса ддсасадссс ссаадаїссі даїстассдс 660 аасааїсадс ддсснса саїдссадаї адансісід дсадсаадіс сддсассісї 720 дссадссідд сааїсіссдд ссщдадасі даддасдада ссдацасіа Пдсудссудсс 780 вв тщадасодаїа ассідадс99 сідддш досасаддса ссаадсідас адідсід 837 «2105» 238 «2115 1476 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «4005» 238 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссссіддсіс Ідсідсідса сдсідсісдс (610) ссідащююа ісаюдасіса дісіссссід Ісісідсссо Ісасссіддд асадсссдсс 120 адсаїсіссії дсаададсіс ссададссід сідіасісса асддсаадас сіаїсідааї 180 дайссадс ададасссду ссададсссі сддадасіда Ісіассаодді дісіїаадсід 240 дасадсдаса ідссідаїсу снсісюда адсоудаїсс9 даассдасі асасідаая 300 й аїсадссддд ааддсада ддасащюдос дюїасіай дсддссаддаасссаснс 360 ссасідасаї Нддсдос9у сассаадаї дадаїсаадчо дчаддадаадо аадсддадда 420 ддаддаадсду дсдасадсода сісіддсддс ддсдасадсс аддідсадсі ддідсададс 480 ддадсададду юаадаадсс їддсдссісс ддаадаці сндіаадодс садсдудсіас 540 асансассу анаїасасі дсасідддюд сддсаддссс сіддссаддо асіддадчіда (610)0) 7 ащдддаддаа ісіддссіаї сассддадда ассасаїаса ассадаадіааддосада 660 дюасаащда ссадддасас аїсіассадс асадщіаїа ддадсідісіадссідсудс 720
Зо іссдаддаїа садссдідіа сіайдсдсс ададдсдада сасаддодаїс Кудодасад 780 ддсасссіду дасадіцдіс сісіассаса ассссадсас саадассассіассссідса 840 ссаасааїсяо ссісссадсс ісідісісю сосссададо саїдіаддсс адсадсадда 900 7 даадсадіс асассаддда ссіддасій дссідсдаїа ісіасаїсію ддсассасід 960 дсаддаасаї діддсаіосі дсідсщдадс сіддісаїса сссідіасід саадсдсдас 1020 сддаадаадс дсіщдіаїаї сісаадсад сссисаюа дасссдідса дасаасссад 1080 дадааддасо дсідсіссід їаддносса даадаададо ададсдосід дадсщдада 1140 дюдаадції ссадаісідс сдаїдсасса дсаїассадс адддасадаа іІсадсідіаї 1200 7 аасдадсда аїсюдодсад дсдсдададад їагдасадідс їддаїаадад дададдаадда 1260 дасссюада (дддадасаа дссіаддсдс аадаасссас аддадддссі діасаадад 1320 сідсадаадо агаадаїдндс сдаддссіаї Іссдадаїсд дсаїдаачоад сдадсодача 1380 аддддсаада дссасдасдо дсідіассад ддасідісаа ссодсіассаа ддаїаснас 1440 вв дасдсссідс аїаюдсаддс асідссісса аддюда 1476 «210» 239 «2115 1479 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 239 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссісаддіда сссдаадда дадсддсссі дідсіюдсіда адссаасада дасссюдаса 120 сідассідса садідісідд снсадссід Іссаассссс ддаїдосої даосіддаїс 180 адасадсссс сіддсааддс ссіддадідд псдсссаса Ііснисіас сдададаад 240 адссідаадс щісссідаяд аїсіаддсід асссідадса аддасасаїсіаададссад /-з00 й дюдідсіда ссаїдасааа саїіддссссії діддасіссу ссасаїасіа Посдссада 360 дасадсісса айасдадда сіашсдас Шддадсс адддсасссі ддідасадід 420
Істадсдасо9 даддадааїс сддадаадаа доагсдаса асоддсодсіссдодсоддсддс 0480 доусіссдадо ддідсщдас ссададсссї дссасасіді ссдідісісс аддсдадада 540 дссасссіді снудіадддс садссадісс дідсдсадса аїсіддссю діассадсад (610)0) 7 аадіссддсс аддссссаад асюдсідаїс іаддсісса ссаїсаддоас сасаддадід 6бо ссадсасодсі Ісісіддаад сддаїссдодас асададша сссідасааї сіссісісіЯ (720
Зо садіссдаду ашсодссоді діасіайодс садсадіасі сідасіддсс спсассш 780 ддсссіддса саааддюда іаїсаадасс асаассссід сассаадудсс ассаасссоса 840 дсассіасаа Ісдсаадсса дссасідісс сідадасссо аддссідіад дссідсадса 900 7 ддаддадсад юсасасссд сдассіддас Шоссідсо аїасіайаі сідддсасса 960 сіддсаддаа ссідддсої дсідсідсю адссіддіса Ісасссідіа сідсаадсудс 1020 ддссоддаада адсісідіа іаїснсаад садсссиса дсдодсссдї дсадасаасс 1080 саддаддазда аїдасідсіс сідіаданс сстаддадо аддадодада ашідадсд 1140 аддаюааві Шсісддад сдссдасоса ссадсаїасс адсадддаса даассадсід 1200 7 Таїаасдадс юааїстад ссддададад дадіасдаса юсіддаїаа даддадддда 1260 ададасссад ададддадо саадссасду адааадаасс сссадда9дод ссідіасааї 1320 дадсдсада аддаїаадаї ддссдаддсс їайсідада іІсдосаїдаа дададададу 1380 сдссддддса адддасасда соддасідіас садддасіді ссассдсаас аааддасасс 1440 я таїдаїдссс ідсаїадса ддсасідссі ссааддащда 1479 «2105» 240 «2115 1479 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 240 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс юдсідсідса сдсадсаадчд (610) ссасададіда сссідаадда діссддасссс дідсюдіда адссіасада дасссідаса 120 сідассідса садідіссдод сісісісід адсаасоссс дсаїддосоі діснодаїс 180 аддсадсссс сюдсааддс ссіддадідо сіддсссаса Іспйнссас сдасдадаад 240 істаїссдда даадссідсу сіссадасід асссідадса аддаїасаїс саадісісад 300 й дюдідсіда ссаїдасааа саїдчдасссс діддайассо ссасаїасії сідсдссада 360 дасадсісса айасдадда сіашіда! їасюдадсс аддосасссі ддідасадід 420
Істадсддад дчаддаддаад сддаддадода додаїсіддсо дсдодсодосісіддсдасадс 0480 дасадсдада ддісащдас ссададссса дссасасюда одсдідісссс юдсодадада 540 дюасссді ссідіаддос аїсісададс дідіссісіа аснсоссід діаїсадсад (610)0) 7 адассаддсс аддсассаад дсідсідсід їіасддадсаа ссасаададс сасаддасю 6бо сссддсадаї Шссодаїс ддаадсддс ассдадааїйа іссідасааї садсісссід 720
Зо садісюадо аснсдссаї станшос садсадіаса аддайдоудссайсасстш 780 ддссссдрудса дсааддюда саїсаадасс асаассссід сассаадассассаасссса 840 дсассіасаа іІсоссісіса дссісідадс сідсдсссад адосаїдіадодссадсадса 900 7 ддаддадсад юсасасаад дддссіддас Нсассідсо аїаїсіата сідддсассі 960 сіддсаддаа ссідщддсої дсідсідсю адссіддіса Ісасссідіа Пудсаадада 1020 ддсаддаада адсідсщіа саїсіїсаад садссішШа Ідсдсссаді дсадасаасс 1080 саддаддадд асдасідсад сідісдонс ссідаададо адааддосоо сідідадсід 1140 ададюдааві Шссаддіс Ідссдаюсс ссадссіаїс адсадддсса дааїсадсід 1200 7 Тасаасдадс юдааєсюдда саддсодсдад дадіасдаса ідсіддаїаа дчаддададда 1260 адддаїссад ада(дддадо саадссіадд сдсаадаасс сасаддадод ссідіаїааї 1320 дадсюдсада аддасаадаї ддссдаддсс їасіссдада ісддсадаа дддададсяд 1380 адаадддаса адддасасода їддссщіаї саддассіді сіассдссас аааддасасс 1440 я тТасдаїдссс дсаїацдса ддсасідссі ссааддащда 1479 «2105 241 «2115 1479 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «4005» 241 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс ідсідсідса сдсадсаада (610) ссісаддіда сссдаадда діссддсссі дідсддіда адссаасада дасссідаса 120 сідассідса садідісідд снсадссід Іссаасосаа ддацддосаї дадсіддаїс 180 аддсадсссс сюдсааддс ссіддавдідо сідддссаса Ісшадсас сдасдадаая 240
Існасадса саїсссдад аддсададаїс ассаїсісіа аддаїасаадсададдссід 300 й дюдідсіда сссідасааа саїддасссс діддаїассу ссасаїасіа Пдсдссаду 360 дасадсісса айасдадда сіашсдаї идадосс сіддсіссі ддідассоуд 420
Істадсдасо дсддсоддсіс ддаддаадда ддааадсддад даддаддаїс сододсоддсддс 480 дусісдада ісдідаюдас ссадіссссі дссасасюї сідідадсссаддсдадада 540 дссасссіді снуїадодді дісссадісї аїсддсдсса аїсюдссід діассадсад (610)0) 7 ааднсддсс аддссссааяд асідсідаїс їІаддаодсаї ссассададс сасаддааїс 660 сссдщаздої ісіссддаду аддаїсюда ассдадша сссідасааї сіссісісід 720
Зо сададсдадад асшоссаї сіасіссідс садсадіаса істайдодсс сисасаші 780 ддсссіддса ссасадідда їаїсаадасс асаассссід сассааддсс ассаасссоса 840 дсассіасаа іІсадсаадсса дссасідісс сідадассад аддсаїдіад оссідсадса 900 7 ддаддадссод Ідсасассад аддссіддас Шоссідсо аїаїгсіаїаі сіддудсасса 960 сіддсаддаа ссідддсої дсідсідсю адссіддіса Ісасссюїа сідсаадсдс 1020 ддссоддаада адсісідіа іаїснсаад садсссинса дсоссссдідсадасаасс 1080 саддаддадо асдасідсад сідісдонс ссідаададо адаадоддазда аідадсід 1140 аддаюааві Чадссддіс сдссдаюдса ссадсаїасс адсадддсоса даассадсід 1200 7 Таїаасдадс юааїстад ссддададад дадіасдаса юсіддаїаа даддадддда 1260 ададасссад ададддадо саадссасду адааадаасс сссадда9дод ссідіасааї 1320 дадсюдсада аддасаадаї ддссдаддсс їаїадсдада іІсдасаїдаа дддадададд 1380 сдссдддаса адддасасда їддссідіас садддссіді ссассдссас аааддасасс 1440 я тадаїдссс ідсаїашдса оддсасідссі ссааддащда 1479 «2105 242 «2115 1479 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 242 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс ідсідсідса сдсадсаада бо ссасадаїда сссідаадда дадсодассс аїдсіддщда адссіасада дасссідаса 120 сідассідса садідадсод9 сисісссід аасааїдсаа ддаддосоі діссіддаїс 180 аддсадсссс сюдсааддс ссіддадідоу Нсдсссаса Іісшадсас сдасдадаад 240
Іссшсдса саїсістад аадсадосід асссідадса аддаїасаад саадісссад, 300 й дюдідсіда ссаїдасааа саїдчдасссс діддайассо ссасаїасіа Пдсдссада 360 дасадсісса айасдадда сіашсдаї їасідддоасс аддосаїссі ддідассоаїд 420
Істадсдасо дсддсоддсіс ддаддаадда ддааадсодад даддаддаїс сддсдасоадс 480 дусісдада ісдідаюас ссадісіссс дссасасіді сідідадсссіддсдадада 540 дссасасіда дсідіадддс сісссадісї дїдадсааса аїісіюдссід діаїсадсад 600 7 аадссаддсс аддсассаад дсідсідаїс їасддадсаї ссассададс сасаддадчід 660 ссадсаададї ісіссддаїс дасадсдас ассдадша дссідасааї сіссісісіЯ (720
Зо садіссдадо асіїсдссодї дїаншос садсадіаса аддайдудссайсассш 780 ддссссддудса саааддіюдда даїсаадасс асаассссід сассаадассассаасссоса 840 дсассіасаа ісосаїссса дссісідісї сідадассад адодсаїдіад дссадсадса 900 7 ддаддадсад юсасассад дддссіддас Шоссідсо аїаїсіатаг сіддосассі 960 сіддсаддаа ссідддсої дсідсідсю адссіддіса ісасссідіа Пдсаадсдс 1020 ддссоддаада адсісідіа саїсіїсаад садссіша ідсдсссаді дсадасаасс 1080 саддаддада асдасіодсіс сідісоадійс ссідаадада аддададаздо ашідадсід 1140 аддаюаааі Шсссодіс Ідссдаїдсс ссадссіаїс адсаддодсса даассадсід 1200 7 Тасаасдадс юдаасідда ссддададад дадіасдасо сіддаїаа дзаддаддода 1260 ададаїссад ада(дддадо саадссіс9ду адааадаасс сасаддадод ссідіаїааї 1320 дадсюдсада аддасаадаї ддссдаддсс їасіссдада ісддсаюдаа дддадачачя 1380 сдссдддааса адддасасда іддссідіаї саддассідї сіассдссас аааддасасс 1440 я тТасдаїдссс дсаїацдса ддсасідссі ссааддащда 1479 «2105» 243 «2115 1491 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 243 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссададаюда ассюдіода діссддсддас ддссіддда адссщдасо9до аїсссідада 120 сюісц9су аддсаадс9ду сісассіїс адсіасдссі ддаюіссід ддідсдссад 180 дсссссддса адддаасідда чюдаїдодда соддаїсаасді ссаїсдсадасодаддадса 240 ассдайнасд садссссіді дадааасаду Нсасааїсі ссададасда Псіаддааї 300 й асссідіаїс ддадайса сісісщдаад асададдаса ссдссодідіа стайдсасс 360 асааїсссю дсаасдасдс сшодаїа ддадссадао дсасаадаї дассаїдадс 420 іссдосддсу дсодсісюа аддадоадоа адсддаддад даддааосод д99с9досодс 0480
Ісідасаїсяа ідсідасаса діссссасід Ісссідісід дасссссудоа сдадссюдса 540 адсаїсіссі діадаїсіад ссададссід сідіасісса асддсаадаа Чаїсіддаї 600 7 їдонссідс асаадссаду ссадісіссс садсідсюа ісіассюда аїсіааіїад99 6бо дсаадсддад Ідссадассо апсісюда адсоддаїссяа осаїсдасії саїссідаад 720
Зо аїсадсадду юдадодссда ддаюідододс дюїасіай дсаїдсадос ссадсадаса 780 сссаїсассі ісддссадда сасаадасід дадаїсаада ссасаасссс адсассаадда 840 ссассіасас сідсассаас саїсодсаїсс садссасіді сістадодсс ідадасаїдї 900 7 сддсосадсад саддаддадс адіодсасасс сасаддссюдод асшоссід сдаїаісіас 960 аїсідддсас сасіддсада аасаїюддс аідсідсідс дадссідді саїсасссід 1020 тТасідсаадс дсддссддаа чаадсідсід їаїаіснса адсадссішй аїдадасса 1080 дюсадасаа сссаддададаа ддасдосідс Іссюіадаої ісссідаада ддаддаддасє 1140 досюідадс дададщаа дшсіадду адсдссдаїд сассадсаїа ссадсаддда 1200 7 садааїсадс шагаасда дсдааїйсід ддссодадад аддадіаа сдідсюдаї 1260 аададдаддо даадддассс дадаїдода ддсаадсссс ддадааадаа сссісаддад 1320 доуссідіаса ададсідса дааддасаад аїддссдадао ссіаїадсда даїсдоасаїд 1380 аадддадада ддсдсс9дддд саадддасас дашюдссідї ассаддуссі діссасадсс 1440 я ассааддаса ссіаюаїйдс ссідсаїац садасасідс сіссааддаю а 1491 «2105» 244 «2115 1491 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 244 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссададаюда ассюдідда діссддсддас ддссіддщда адссщдас9о аїсссюадад 120 сюісц9су аддсаадсду сісассіс адсіасдссі ддащдіссід ддідсдссад 180 дсссссддса ададасідда діддаїддос сддаїсааді ссаїсассда сддадосоїюд 240 аїсдацнасду садсассюї дадааасадо ідсасааїсі ссададасда йсіаддааї 300 й асссідіаїс ддадайса сісісідаад асададдаса ссоссадїдіа сіайдіасс 360 асааїсссю дсаасдасда Шсдаїа їдддодссадо дсадаадоді дассуідадс 420 іссдосддсу дсодсісюа аддадоадоа адсддаддад даддааосод д99с9досодс 0480
Ісідасаїсяа ідсідасаса діссссасід Ісссідісід їдасссссод9д сдадссідса 540 адсаїсіссі діаддісіад ссададссід сідіасісса асддсаадаа Чаїсіддаї 600 7 тдощшсїдс асаадссаду ссадісіссс садсідсіда ісіассідду аїсіааіада 6бо дсаадсоддаяд Ідссадассо днсісюда адсддаїссу дсаїсдасії саїссідаад 720
Зо аїсадссдсд ддадоасада ддасощдадс аідіасіай дсаюдсадус ссадсадаса 780 сссаїсассі ісддссадда сасаадасід дадаїсаада ссасаасссс адсассаадда 840 ссассіасас сідсассаас саїсодсаїсс садссасіді сістадодсс ідадасаїдї 900 7 аддссадсад саддаддадс адідсасасс ададдссідд асшоссід сдаїаїсіас 960 аїсідддсас сасіддсада аасаїюддс аідсідсідс дадссідді саїсасссід 1020 тТасідсаадс дсддссддаа чаадсідсід їаїаіснса адсадссішй аїдадасса 1080 дюсадасаа сссаддададаа ддасдосідс Іссюіадаої Ісссідаада ддаддадоадс 1140 досюідадс дададщаа дншсіада адсдссдаїд сассадсаїа ссадсаддда 1200 7 садааїсадс шагаасда дсдааїйсід ддссодадад аддадіаа сдідсюдаї 1260 аададдаддо дааддодаїсс дададодода доасаадсссс ддадааадаа сссісаддад 1320 доуссідіаса ададсідса дааддасаад аїдассдадо ссіаїадсда даїсддсад 1380 аадддадада ддсдсс9дддд саадддасас дашюдссідї ассаддуссі діссасадсс 1440 я ассааддаса ссіаюаїйдс ссідсаїац садасасідс сіссааддаю а 1491 «210» 245 «2115» 1488 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 245 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссадададс адсюдоада дчіснддадс дчосіддюа адссіддсда аїсісщада 120 сюадсідсд садсаїссдао снсаїсій аасаафссі ддаїдіссід ддідсдссад 180 дсссссддса адддасідда діддаїсддс сддаїсаада дсаадісєссда сддаддаасс 240 асадацасд садсассіді дааддассос Нсасааїсі сісдддасда адсааддаї 300 й асссідіаїс їідсадаюаа сддссідаад асададдаса ссдссдідіа сісідсасс 360 асадссссід дсддсссійї щдшананод ддссадддса сасіддідас соідадсісс 420 99даддаддад даадсд9с99 аддадосадс д9с99с99с9 осісідос99 сддсддсадс 480 дасаїсаїдс дасасадаяд сссісіщісс сідссадща сссссоддсда дссідссісї 540 аїсадсідісє дсісіадсса дадссідсід сассдддасу дсисаана ссідданда (610)0) 7 шесдсада адссаддсса діссссссад сідсдаїйсі аїсіддссіс сісїададсс 660
Істддсддс садасадді сіссддсісі дасадсддса садасисас ссідаадаїс 720
Зо адсададіда аддссдадда щідадсоїо їасіайдса дсаддсссідсадасассс 780 аїсассійсЯ дссадддсас аадасіддад аїсаадасса саассссадсассааддсоса 840 ссіасассю сассаассаї содсаїсссад ссасідісіс їдадассіда ддссідіадч9 900 7 ссадсадсад даддадсаді дсасассадду ддссіддасі Пуссідсда їаїсіасаїє 960 дадсассіс одсаддаас ашідаса сідсіюдсща дссіддісаї сасссідіас 1020 тдсаададад дсаддаадаа дсідсщіаї аїспсаадс адссішШаї дадассааід 1080 садасаассс аддаддадда содсідсісс їдіадунсс сідаададда ддадддадда 1140 тдщадсіда ддаюаасдії Псссддісі дссдаїдсас садсаїасса дсадддасад 1200 7 аассадсідї аїаасдадсі дааісіддас сддадададо адіасдасдї осіддааад 1260 аддсдсдоса дадаїссада даддосоддс аадссссдда дааадаассс ісаддадддс 1320 сідїасааід адсідсадаа ддасаадаїд дссдаддссі аїадсдадаї сддсаюаад 1380 ддадададдс дссддоадсаа дддасасдаї ддссідіасс адддссідісє сасадссасс 1440 я ааддасассі аюафщдсссі дсаїадсад одсасідссіс сааддща 1488 «2105» 246 «2115» 1485 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 246 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссасіддссс їдсідсідса сдсадсаадд бо ссщдаддащдс адсіддода дадсоддсдас ддссіддда адссіддс9ду аїсссщада 120 сдісц9су аддсагадсду сісассій адсдасдсаї ддаїдіссід ддідсдссад 180 дссссіддса адддасідда чддаїдаода содаїсаада дсаадасада сддсддсасс 240 асаданасод юдідссасі даасддссдс Нсаїсаїсі сссдсдасда псісддааї 300 й асссідіаїс їідсадсюдаа сааїсідаад асададдаїа ссдссдідіа сіайдсасс 360 асадідссад дсіссіасду сіайддддс саддосасас іддідассої дадсіссддс 420 99с99с99сї сіддадоадо аддаадсода 99а99299аа 9с99999с99 соОсісідас 480 аїсдідащда сасадісісс асщадссід ссадідассс сіддсдадсс адссіссаїс 540 існдісосі сіадссадад ссідсідсас аасаадсода асаацассі дданоднші 600 7 сідсадаадс сіддссадіс сссісадсід сідаїсіаїс Іддссадсааіададссісс 660 ддадідссад асадайсіс їддаддадда адсддаасад асіїсасссі даадаїсадс 720
Зо ададіддадао ссдаддасодї аддасаїас тапосаюс аддсссадса дасассіаїс 780 ассисдасс адддсасаад асіюдадаїйс аадассасаа ссссадсасс ааддссассі 840 асассідсас саассаїсдс сісссадссі сідісісіда дассададдс аїдіаддсса 900 7 дсадсаддад дадсадідса сассадддас сіюдасшо ссідсдаїаї сіасаїсідд 960 дсассісда саддаасаг юдсаюсід сідстадсс юдісаїсас ссідіасідс 1020 аадададаса ддаадаассі дсідіаїас Нсаадсадс ссисаїдад асссдідсад 1080 асаасссадд аддаддасодао сідсісної адднсссад аададдадда дададдаці 1140 дадсщаддо дФаадшад ссддіссдсс дадсассад саїассадса дадасадаас 1200 7 садсщіаїа асдадсідаа ісідддссд9 адададдаді асдасадсі ддаїаададда 1260 аддддаа9додд аїссададаї дддаддсаад ссісддадаа адаасссаса ддаддудссід 1320
Тасааїдадс дсадаадда саадащдасс дадодссіай сідадаїсодд саїдаадода 1380 дададдасдсс ддддсаадодд асасдадс сідіассаду дссідадсас адссассаад 1440 я дасассіаюд аїдсссідса іаїдсаддса сідссіссаа ддаюа 1485 «2105» 247 «2115 1508 «2125 ОМА 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Синтетичний конструкт «400» 247 адяосісідс ссдісассдс ісідсідсід ссісіддссс їдсідсюдса сдсадсаадад (610) ссасаддідс адсіддіодса діссддадса даддідаада адссіддсад сіссддаад 120 додадсідса аддссіссду сдасасанс ісіадсаасд сааїсадсід ддідсдссад 180 дссссіддсс ададасідда діддаддодс дідаїсаїсс сіаїсійсдо сассдссдас 240 їаїдсссада адшсадад ссоаддідаса аїсассдссу аюдадісіасаадсассдсс 300 й тасаюдадс ідіссісісї дадаїссдад дасасадссо шіасіайоу дссаддсас 360 ассіаїсасд адіасдсада аддаїасіаї ддаддадсаа (ддаїссцо9 дддасадддс 0420 асасюдіда ссудідадсіс сддсдасодс досісіддад дчаддадааад содадаадда 480 ддаадс9999 дсдасодсіс Ідадсідсад адсдідсіда сссадссасс Пссоссісї 540 ддаасассад дссададдаї дассаїсадс ідсіссддаї сіадсіссаа саїсдудсісс 600 7 аацасощі айддіасса дсадсідсса дасасадссс ссаадаїссі даїсіассдс 660 аасааїсадс ддсснсща саїдссадаї адайсісю дсадсаадіс сддсассісї 720
Зо дссадссідд сааїсіссдд ссщдадасі даддасдада ссдацасіа Пдсудссудсс 780 щФадасдага ассюадсда сідддчон додсасаддса ссаадсідасадідсщасс 840 асаассссід сассаадасс ассаасасса дсассіасса Ісдсаадсса дссасідієс 900 7 сідадасссд аддссідіад дссідсадса ддаддадсад їдсасассад ддассіддас 960 шассдса аїаїсіаза! сюдасасса сіддсададаа саїдіддсді дсідсідсід 1020 адссіддіса іІсасссідіа Ндсаадада дасаддаада адсідсідіа саїсйсаад 1080 садсссщша їдсосссюї дсадасаасс саддаддадо асдасідсад сідісдуне 1140 ссадаададоа аддадададу ашцодадсід ададідааді Шсссддіс дссдадса 1200 7 ссадсаїаїс адсадддаса дааїсадсід їасаасдадс Юааїсіддуд ссддададад 1260 дадіасдасд Ідсіддаїаа дзаддаддодда адддасссід ададддадо саадссасдд 1320 адааааассс ссаддададс сідіаїаац адсідсадаа ддасаада дссдаддссі 1380 асісідада! сддсаїдаад ддадададдс дссдддоасаа дддасасдаї додссідіаїс 1440 адддссідад сасадссасс ааддасассі асдаюсссі дсаїадсад дсасідссіс 1500 7 сааддащда 1508 «2105» 248 бо «2115 529
«2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 248
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 101 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіп Маї Тнг Гей Гуз Спи бег Спіу Рго Маї І єи 20 25 0) ма! Гуз Рго Тнг Си ТНг І еи ТНг І єи ТАг Суз Тнг Ма! Зег Спу Рпе 35 40 45 зег І еи Авп Азп Аїа Аго Меї Су Маї Зег Ттр Пе Агу Сп Рго Рго 50 55 60
Сіу Гуз Аа І еи Спи Тр РНе Аїа Ні Пе РНе 5ег Тиг Авр Си ГГ ув 65 70 75 80 зЗег Рпє Агу Тиг з5ег І еи Агу Зег Аго І еи Тиг ей Зег Гуз Авр ТНг 85 90 95 зЗег Гуз 5ег Сп Маї Ма! Геи Тиг Меї Тниг Азп Меї Авр Рго Маї Авр 100 105 110
З5
Тиг Ага ТАг Туг Туг Суз Аа Агу Ар 5ег Зег Азп Туг Спи Спу Туг 115 120 125
Рпе Авр Туг Ттр Спу Сп Спу Пе Геи Маї Тнг Ма! Зег Зег Спу СПУ 130 135 140 су Спу бБег Спу Спу Спу Спу бег Сіу Спу Спу Спу Зег Сіу Спу Спу 145 150 155 160
Спіу бБег Спи Пе Маї Меї Тнг Сп бег Рго Аа Тнг І еи 5ег Ма! Зег 165 170 175
Рго Счпу Спи Агу Аа Тнг І еи Зег Сувз Агоу Аа 5ег Сп 5ег Ма! 5ег 180 185 190
Азп Авп Гей Аа Ттр Туг Сп Сп Гув Рго Стпу Сіп Аа Рго Ага І еи 195 200 205 60
Ї ем Пе Туг сапу Аїа Зег Тнг Аг Аа ТНиг Сіу Маї Рго Аа Агу Рпе 210 215 220
Бег Сіу бег Азр б5ег Спіу Тиг Спи РНе 5ег І єи Тнг Пе 5ег 5ег і єи 225 230 235 240
Сіп Зег Сім Авр РНе Аїа Маї Туг Рне Су Сіп Сп Туг Гуз Авр Тр 245 250 255
Рго Ріе Тит Ріє Сту Рго Спу Тниг Гуз Маї Спи Пе Гув Спу Бег Спу 260 265 270
СпІу Спу Спу бЗег Суз Рго Туг 5ег Азп Рго 5ег І єи Сув бег Спіу Спу 275 280 285 сСіу Спу Зег Сув Рго Туг 5ег Авп Рго 5ег Геи Сув Бег Сіу Сіу Спу 290 295 00
Су Зег ТНиг ТАг ТНг Рго Айа Рго Аго Рго Рго Тнг Рго Аїа Рго ТНг 305 з10 315 з20
Пе Аїа 5ег Сіп Рго І єи Зег І ей Агу Рго Сім Аа Суз Агу Рго Аа 325 330 335
Аа Сіу Сіу Аїа Маї Ні Тнг Агу Сіу І єи Авр Ре Аа Суз Азр Іе 340 345 350
З5
Ту Пе Тер Ага Рго Геи Аа Спу Тниг Суз Спу Ма! Г еи Ї єи Геи 5ег 355 360 365
Ї еи Ма! Пе Тнг ГГ еи Туг Суз Гуз Агу Сіу Агу Гуз Гуз ГГ еи ЇЇ еи Туг 370 375 380
Пе Ре Гуз Сіп Рго Рне Меї Аго Рго Маї Сип ТАиг ТАг Сп Спи Си 385 390 395 400
Азр Спіу Суз Зег Суз Агу РНе Рго Спи Спи си Ти (бу Сіу Суб Спи 405 до 415
Ї еи Агу Маї Гуз РНе Зег Агу Зег Аа Ар Аа Рго Ага Туг Сп Сп 420 425 430
Стпу Сп Авп Сп І еи Туг Азп Си Гей Авп І ви Спу Агу Ага Спи Спи 435 440 445 60
Туг Авр Маї І єи Авр Гуз Аго Агу Сіу Агу Авр Рго Спи Меї Спу Спу 450 455 460
Гуз Рго Ага Аг Гуз Авзп Рго Сіп СПши Спу Гей Туг Авп Сім Ї ви Сп 465 470 475 480
Гуз Ар Гуз Меї Аїа Сім Аа Туг бег Си Пе Сіу Меї Гуз Спу Спи 485 490 495
Аг Агу Аго Сіу Гуз Сіу Ні Авр Су ГГ еи Туг Сп Спу І ви Зег ТНг 500 505 510
Аа Тиг Гуз Авр ТАг Туг Ар Аа І єм Ні Меї ап Аа Геи Рго Рго 515 520 525
Аг9 «210» 249 «2115 529 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 249
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Айва Аа Ага Рго Сіп Маї Тнг Гей Гуз Спи бег Спіу Рго Маї І єи 20 25 0) ма! Гуз Рго Тнг Си ТНг І еи ТНг І єи ТАг Суз Тнг Ма! Зег Спу Рпе 35 40 45 зег І ви 5ег Авп Аа Агу Меї Сіпу Маї Зег Тгтр Пе Аго Сп Рго Рго 60 50
Сіу Гуз Ага І єи Сііи Тгр І еи Айва Ніз Пе Ре 5ег Тиг Авр Сі Гув 65 70 75 80 55 Бе ПІПе Ага Агу 5ег І еи Агу 5ег Ага Гей Тпг І еи Зег Гуз Авр ТНг 85 90 95 зЗег Гуз 5ег Сп Маї Ма! Геи Тиг Меї Тниг Азп Меї Авр Рго Маї Авр бо 100 105 110
Тиг Ага ТАг Туг Рпе Суз Айа Агу Авр 5ег Зег Азп Туг Спи СПу Туг 115 120 125
Рпе Авр Туг Ттр Спу СіІп Спу ТНг ГГ еи Маї Тнг Ма! Зег Зег Сіу Су 130 135 140
СпІу Су Зег Сіу Спу Спу Спу бег Сіу Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Су 145 150 155 160
Спу бег Си Маї Ма! Меї Тнг Сіп 5ег Рго Аа ТнНг І єи бег Ма! Зег 165 170 175
Рго Спу Спи Агу Маї Тиг Гей Зег Суз Аг Аа 5ег Сп 5ег Ма! 5ег 180 185 190 зЗег Авп РНе Аа Тр Туг Сп СіІп Ага Рго Сіпу Сіп Аа Рго Ага І еи 195 200 205
Ї ей І єи Туг Сіу Аа Тниг ТНиг Ага Аа Тиг Стпу Геи Рго Сіу Агу Рпе 210 215 220
Зо
Зег Сіу Зег Сіу Зег Спу Тиг Спи Авп Пе І єи ТАг Пе бег 5ег І єи 225 230 235 240
Сп Бег Сім Азр Ре Аа Пе Туг Ре Суз Сіп Сп Туг Гуз Авр Тр 245 250 255
Рго Рпе Тит Ріє Сіу Рго Стпу 5ег Гуз Маї Авр Пе Гуз Спу Зег Спу 260 265 270
СпІу Спу Спу бЗег Суз Рго Туг 5ег Азп Рго Зег І еи Суз Зег Сіу Спу 275 280 285 сСіу Спу Зег Сув Рго Туг 5ег Авп Рго 5ег Гей Сувз 5ег Сіу СПу Су 290 295 00
Сіу Зег ТАг Тнг Тнг Рго Аа Рго Агу Рго Рго Тнг Рго Аїа Рго ТНг 305 з10 315 з20
Пе Аа 5ег Сп Рго І ви 5ег І ви Ага Рго Сім Аа Су Агу Рго Аа 325 330 335
Аа Сіу Сіу Аїа Маї Ні Тнг Аго Стпу Гей Авр Ре Аа Суз Авр Іе бо 340 345 350
Ту Пе Тер Ага Рго Геи Аа Спу Тиг Суз Спіу Ма! Геи І еи Гей Зег 355 360 365
Ї еи Ма! Пе Тнг І еи Туг Суз І уз Ага Сіу Аг Гуз Гуз І еи І еи Туг 370 375 380
Пе Ре Гуз Сіп Рго Ріє Меї Ага Рго Маї Сіп ТАг ТАК Сп Спи Си 385 390 395 400
Ар Спу Суз бег Сувз Агу Рпе Рго Спи Спи Сі Сб сту Спу Суз СПИ 405 до 415
Ї еи Агу Маї Гу РНе Зег Агу Зег Аа Ар Аїа Рго Ага Туг Сип Сп 420 425 430
Стпу Сп Авп Сп І еи Туг Азп Си Гей Авп І єи Спу Агу Ага Спи Спи 435 440 445
Туг Авр Маї І єи Авр Гуз Аго Агу Сіу Агу Авр Рго Спи Меї Спу Спу 450 455 460
Зо
Гуз Рго Ага Аг Гуз Авзп Рго Сіп СПши Спу Гей Туг Авп Сім Ї ви Сп 465 470 475 480
Гуз Авр Гуз Меї Аа Сіи Аа Туг Зег Сім Пе Сіу Меї Гуз СПу Спи 485 490 495
Аг Агу Аго Сіу Гуз Сіу Ні Авр Су ГГ еи Туг Сп Спу І ви Зег ТНг 500 505 510
Аа Тиг Гуз Авр ТАг Туг Ар Аа І єм Ні Меї ап Аа Геи Рго Рго 515 520 525
Аг9 «2105» 250 «2115 532 «2125 РВАТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «400» 250 60
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Нів Ада Аа Ага Рго Сіи Маї Сіп І єи МаїЇ Спи бег Тгтр Сіу Ма! І єи 20 25 0) маї Гуз Рго Спу СПу Зег І еи Агу І єи 5ег Суз Аа Аа 5ег Спіу Ре 35 40 45
Пе РНе Авп Азп АїПа Тгр Меї 5ег Тгр Маї Ага Сіп Аа Рго Сіу Гув 50 55 60
Су Г єи Сім Тгр Пе Стпу Аг Іе Гуз 5ег Гув 5ег А5р Спіу Спу ТНг 65 70 75 80
Тпиг Авр Туг Аа Аа Рго Маї Гуз Авр Аго Ріє ТНг Пе 5ег Агу А5р 85 90 95
Ар 5ег І уз Авзр ТНг І еи Туг І ви Сп Меї Авп Су І єи Гуз ТАг Си 100 105 110
Азр Тпг Аа Маї Туг Рне Суз Тнг Тнг Аа Рго Спу Спіу Рго Рне Азр
Ко) 115 120 125
Туг Ттр Сіу Сп Спу ТНг Ге Маї Тнг Маї бег Зег СІу Спу Спу Спу 130 135 140
З5 зЗег Сіу Сіу Спу Спу зег СПу СПу чу Спіу Зег пу Сіу Счу Счу зег 145 150 155 160
Азр Іе Маї І єи Тиг Сп Зег Рго Геи Зег І ви Рго Маї Тнг Рго Спу 165 170 175
Сім Рго Аа бег Пе Зег Суз Ага 5ег Зег Сіп Зегі ей І єи Ні Аг 180 185 190
Азр Сіпу Ре Авп Туг І єи Ар Ттр РНе ГГ еи Сп Гуз Рго Спу Сіп Зег 195 200 205
Рго Сіп І єи І єи Пе Туг Гей Аа 5ег Зег Ага Аа 5ег СпПу Маї Рго 210 215 220
Азр Агу Ре Зег Спу 5ег А5р 5ег Спу ТНиг Авр РНе ТнНг І єи Гуз Пе 225 230 235 240 60 зЗег Аг Маї Спи Аа Спи Ар Маї Сіпу Маї Туг Туг Суз Меї ап Аа 245 250 255
Гей Сип Тк Рго Пе Тиг Рпе Спу Сип Спу ТАг Ага Гей Спи Пе Гув 260 265 270
Спу бБег Су Спу Спу Спу Зег Суз Рго Туг Зег Авп Рго 5ег І єи Суз 275 280 285
Зег Сіу Спу Спу Спу Зег Суз Рго Туг бег Азп Рго 5ег І єи Суз 5ег 290 295 00
Сіу Спу Спу Спу Зег Тиг ТАг Тнг Рго Ага Рго Аг Рго Рго Тнг Рго 305 310 315 з20
Аа Рго ТНг Пе Аа 5ег Сіп Рго І єи 5ег І єи Агу Рго Сі Аа Суб 325 330 335 Агу Рго Аа Аіа Спу Сіу Аа Маї Ні ТАиг Аг Су І еи А5р Ре Аїа 340 345 350
Суз Авр Іе Ту Пе Тр Аа Рго І еи Аа Спу ТНг Суз Сту Маї І єи 355 360 365
Ї ей Ї єи 5ег Геи Ма! Пе ТНг Геи Туг Суз Гуз Агу Су Ага Гуз Гув 370 375 380
Ї еи І єи Тут Пе РНе Гуз Сіп Рго РНне Меї Аго Рго Маї Сіп Тиг ТАг 385 390 395 400
Сп Спи Си Азр Спу Суз бег Сув Агу Рпе Рго Сім Спи Сі сти пу 405 до 415 ау Суз Сіш І єи Ага Маї Гуз Рне 5ег Агу 5ег Аа Авр Аа Рго Аа 420 425 430
Туг ап Сп Спу Сп Авп Сп Гей Туг Авп Си Гей Авп Гей С1пу Аг9 435 440 445
Аг Спи Сім Туг Авр Маї І еи Ар Гуз Аго Ага ау Ага Ар Рго Сі 450 455 460
Меї Спу Спу Гуз Рго Аго Ага Гуз Авп Рго Сп Спи С1у І еи Туг Авп 465 470 475 480 (516)
СпІш Гей Сп Гуз Авр І уз Меї Аа Сіи Аа Туг бег Сіи Пе Сіу Меї 485 490 495
Гуз Счу Сім Ага Аго Аго ау Гуз Спу Ні Авр Су І єи Туг Сіп СПу 500 505 510
Ї еи Зег ТАиг Аа ТНиг Гуз Ар ТАг Туг Авр Аа І єи Ні Меї Сіп Аа 515 520 525
Ї еи Рго Ріо Аг9 530 «-2105 251 -2115 531 «212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «-4005 251
Меї Аа І еи Рго Маї Тиг Ада ГГ еи ГГ еи ГІ єи Ро І еи Аіа! еп Ї ей Ї ей 1 5 10 15
Зо
Нів Айва Аа Ага Рго Сіи Маї Сіп І єи Ма! Спи бег Спу Спу Су І єи 20 25 Зо
Маї Гуз Рго Спу Спіу 5егіІ єи Агу І єи Зег Суз Сі Аа бег СПУ Рие 35 40 45
Тиг Рне 5ег Авр Аа Ттр Меї 5ег Тр Маї Агу Сп Аа Рго Сіу Гув 50 55 60
СІУу Г єи Сім Тгтр Маї Спу Аго Пе Гуз Зег Гуз ТНг Азр Спу СпПУ ТАг 65 70 75 80
Тпиг Авр Туг Маї Маї Рго І еи Авп Спу Ага РНе Іе Пе Зег Ага Ар 85 90 95
Авр 5ег Ага Азп ТНиг Гей Туг І єи Сп І єи Авп Авп І єи ув ТАг Сім 100 105 110
А5р ТАг Аа Маї Туг Туг Суз Тиг ТАг Маї Рго Спу Бег Туг Спу Туг 115 120 125
Тер Сту Сп Стпу ТАг Гей Маї Тниг Маї Зег Зег Спу Сіу Спу Спу бег бо 130 135 140
Спту Спу Спу Спу бЗег Спу Спу Спіу Спу бег Спу Спу Спу Спіу Зег А5р 145 150 155 160
Пе Маї Меї Тниг Сіп 5ег Рго І єи 5ег І єи Рго Маї Тнг Рго Спу СИ 165 170 175
Рго Аїа 5ег Пе бег Сувз Агу 5ег бег Сп 5егі єи І єи Ні Авп І ув 180 185 190
Агу Авп Авп Туг І єи Авр Тр Ре І єи ап Гуз Рго Спу Сіп бег Рго 195 200 205
Сіп Гей Гей Пе Туг І єи Аа бег Азп Агу Аа 5ег Сіу Маї Рго Ар 210 215 220
Агу Ре Зег Сіу Спу Спу Зег СПу ТНиг Авр Ріє Тнг ГГ еи Гуз Пе 5ег 225 230 235 240
Аго Ма! Сім Аа Спи Авр Маї Стпу Маї Туг Туг Суз Меї Сіп Аа Сп 245 250 255
Зо
Сіп Те Рго Пе Тит Ріе Сту Сіп Спу Тиг Аг Гей Спи Пе Гув Спу 260 265 270
Бег Сіу Сіу Спу Спу бег Сув Рго Туг Зег Азп Рго 5ег І єи Сув 5ег 275 280 285
СпІу Сіу Спу Спу бег Сув Рго Туг 5ег Азп Рго 5ег І еи Суз бЗег Спу 290 295 К10)0)
Сіу Спу Спу Бег Тит Тиг ТАг Рго Аа Рго Аго Рго Рго ТНг Рго Аа 305 310 315 з20
Рго Тнг Пе Аа 5ег Сп Рго І еи Зег І єи Ага Рго Сім Аа Су Аг9 325 330 335
Рго Аїа Аа Сіу Сту Аа Маї Ні Тнг Ага Су Гей Авр РНе Аа Суз 340 345 350 А5рІе Ту Пе Тгр Аа Рго І єи Аа Спіу Тиг Суз Стпу Ма! Гей Ї еи 355 360 365
Ї єи 5ег І єи Ма! Пе ТНг І єи Туг Суз Гуз Ага Сіу Ага Гуз І уз І еи бо 370 375 380
Ї єи Тут Пе РнНе Гуз Сіп Рго Рне Меї Ага Рго Маї Сип Тнк Тнг Сп 385 390 395 400
Сім Сі Авр Спіу Суз бЗег Суз Ага Ріє Рго Спи Спи Ст Ст Чу Спу 405 АТО А15
Суз Си І ви Агу Маї Гуз Рне 5ег Ага 5ег Аа Азр Аа Рго Аа Туг 420 425 430 ап Сп Спу Сіп Авп ап Гей Туг Авзп Сім Гей Авп І єи Стпу Ага Ага 435 440 445 сін Сі Туг Авр Маї І еи Авр Гуз Агу Аго Сіу Аго Авр Рго Сім Меї 450 455 460
Сіу Спу Гуз Рго Аго Агу Гуз Авп Рго Сп Спи СПу І еи Туг Авп Спи 465 470 475 480
Ї еи Сп Гуз Авр І уз Меї Аа Спи Аїа Туг 5ег Сім Пе СПіу Меї Гуз 485 490 495
Зо сСіу Спи Агу Аг Аг ау Гуз Спу Нів Азр Су Гей Туг Сп Спу Гей 500 505 510
Бег Тпг Аа Тпиг Гуз Авр Тиг Туг Авр Аа Геи Нів Меї Сіп Айа І єи 515 520 525
Рго Ріо Аг 530 «2105 252 «2115» 1590 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005 252 аддсасідс садідассдс ссідсідсід ссісіддссс їдсідсідса сдсадссада (610) ссссаддіда сасідаадда дчадсодсссс аїдсіддда адссіасада дасасідасс 120 сідассідса садідадсод9 сисісссід аасааідсаа ддаддосоі діссддаїс 180 аддсадссас сіддсаадас ссіддадіду Нсдсссаса Ісшадсас сдасдадаая 240 бо їссшсдса саїсістад аадсадосід асссідадса аддайасаад саадісєссад 300 дюдідсіда ссаїдасааа саїдвдасссі діддаїассяо ссасаїасіа Нудідсссда 360 дасадсісса айасдаддо сіашсодаї іасіддддсос аддосаїссі ддідассою 420 і Ісїадсо99с9 дсодсодосіс юддаддадда дд9аадсодад даддадодаїс сдосддсддс 0480 доусісщдада ісдіщдаюдас ссадісссса дссасасіцді сідїідадсссаддададада 540 дссасссіді сндсадддс сісссадісї ддадсааса аїсіддссід діаїсадсад (100) аадссіддсс аддссссаад асіосідаїс їасддадсаа дсассададс аасаддадід 660 ссідсаацдаї ісіссддаїс дасадсдас ассдадці сісідасааї сіссісісід (720 й сададсдада асисдссодї діаншої садсадіаса аддайдосс айсасснші 780 ддссссддса саааддаюда даїсаадддс Ііссддаддаад даддаїссід ссссіайсс 840 аассснсіс їдїдсадс9д9 аддаддадада адсідіссаї асіссааїсс сісссідідс 900 іссддсдосо даддаїссас сасаасссса дсассіадас сассаассссадсассааса 960 аїсдсаїссс адссісідіс Ісідсддсосс дадасаїдса ддссадсадс аддсдоасодсс 1020 7 дюсасасса дддоссідда сшоссідс даїаїсіаа ісідддсасс асіддсадда 1080 ассідідоасо дсідсідсі дадссіддіс аїсасссіді айдсаадсод сддссддаад 1140
Зо аадсідсщі асаїснсаа дсадссції аддсдсссад їдсадасаас ссаддаядад 1200 дасдасідсі ссідісдай сссідаадаяд даддададад дашюдаосідсодсдідаад 1260 ішсссддї сідссдаїдс сссадссіаї садсаддодсс адаассадсі діасаасдад 1320 7 сідааїсідд дссддадада ддадіасдас адсіддага ададдаддду аададаїссс 1380 дададддад дсаадссісу дадааадаас ссасаддада одссідіаіаа дадсідсад 1440 ааддасаада Іддссдаддс сіасісюдаєд аісддсаюа адддададад дсдссддоадс 1500 аадддасасу аддссідіа Ісаддассід Іссассодсса саааддасас сіасдаїдсс 1560 сідсасащдс аддсссідсс Іссааддщда 1590 «2105» 253 «2115 1590 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 253 аддсасідс садідассдс ссідсідсід ссісіддссс їдсідсідса сдсадссада (610) ссссаддіда сасдаадда діссддсссс ддсіддда адссіасада дасасдасс 120 60 сідассідса садідадсод9 снсісісід адсаасодсаа ддаддосоі діссіддаїс 180 аддсадссас сіддсаадас ссіддадіду сіддсссаса Іспшіссас сдасдадаад 240 істаїссдда даадссідсу сісссддсід асссідадса аддаїасаїс саадісісад 300 і дюдідсіда ссаїдасааа саїдвдасссі діддаїассо ссасаїйасі сідідсссду 360 дасадсісса айасдадда сіашіда! їасюдадсс аддосасссі ддідасадід 420
Ісіаддсддад даддаддаад сддаддадода додаїсаддсао дсдосододсісідосдоасоддс 0480 додсадсдадао даїсаїдас ссадісісса дссасасіда дсдідісссс аддададсодс 540 додасссіда дсідссдддс сісісададс дідіссісіа аснсдссід діаїсадсад (610)0) й сддсссддас аддсассаад дсідсідсід їІасддадсаа ссасаададс аасаддссід 66о0 ссіддсадої Шссддсіс (ддсадсоддс ассдадааїйа іІссідасааї садсісссід 720 сададсдадао асіисдссаї стаді садсадіаса аддандудссайсассш 780 дуссссддсі ссааддідда саїсааддда Іссддаддаяд дададаїсно сссосіайсі 840 аасссіадсс ідідсіссдд аддаддадада іссідіссаї асісіааїсс аісссідідс 900 7 адсддаддад даддаїсіас сасаасссса дсассіадас сассаассссадсасссаса 960 аїсдссісіс адссісщад ссідсдссса даддсаїдса ддссадсадс аддаддадса 1020
Зо дюсасасса дддодссідда спсдссідс даїаїсіаа іІстюдасасс асіддсадда 1080 ассідід9со дсідсідсі аісссідаїс аїсасссіді апдсаадад аддсаддаад 1140 аадсідсщі асаїснсаа дсадссйції агдсдсссад дсадасаас ссаддаддад 1200 7 дасдасідса дсідісодії сссідаадад даададдадсо дсідщдадсі дададідаад 1260 пнссадодї сідссдаїдс сссадссіаї садсадддсс адааїсадсі діасаасдад 1320 сідааїсідд дсаддсдсда ддадіасдас дідсіддата ададдадада асодсдаїссс 1380 дададддад дсаадссіад дсдсаадаас ссасаддадо дссідіаїаа дадсюсад 1440 ааддасаада Іддссдаддс сіасісюад аісддсаюа адддададсод дадааддоддс 1500 7 аадддасасу аддссідіа Іісаддассюд адсассдсса саааддасас сіасдаїдсс 1560 сідсасащдс аддсссідсс Іссааддащда 1590 «2105» 254 «2115 1599 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Синтетичний конструкт «4005» 254 бо аддсссдс садщдассдс ссідсідсід ссасюдссс юсідсідса сдссдссада (610)
ссщдаддаюдс адсіддода дадсідаддс дідсіддіда адссаддадо сісісдадад 120 сюадсідсд садсаїссда сісаїсій аасааїдссі ддаїдіссід дададасад 180 і дсассаддса адддссідда чіддаїсддс аддаїсаада дсаадіссдассодаддаасс 240 асадацасд садсасссодї дааддассдс Нсасааїсі сісдддасдаадсааддаї -З00 асссідіаїс їідсадаюаа сддссідаад асададдаса ссдссдідіа сісідсасс 360 асадссссад дсддссссії щФананодо ддссадддса сасідаїдас сдідадсісс 420 9929929929 даадсо9с99 аддадосадс 99с99с99с9 осісід9с99 содсддсадс 480 й дасаїсаїдс дасасадад сссасідісс сідссідща ссссаддада дсссуссісї 540 аїсадсідіс дсістадсса дадссідсід сассдддасоу дсісааца сстдданйоуд 600 шесдсада адссіддсса дадсссасаяд сідсідаїсі аїсідоссіс сістададса 660
Іїссддадідс сідасадди сіссддаїсі дасадсддса садасійсас ссідаадаїє 720 їсссдсоща аддсададда юідадсо9ід їасіайоса дсаддсссідсадасасса 780 7 аїсассійсЯ дссадддсас асддсюдад аїсаадоадаї ссддаддачо аддаїснос 840 сессіасісіїа асссіадссі дідсадсддс ддааддаддаї сидіссаїа йсіааїса 900 адссдюса дсдддададу аддаадсасс асаассссід сассаадасс ссосіасасса 960 дсассіасса Ісдсаїссса дссасіцісї сідсддссса адосаїдіад дссадсадса 1020 ддаддадсад юсасассад дддссіддас Шоссідсо аїаїсіасаї сідддсасса 1080 7 сіддсаддаа сактаосої дсідсідсід адссіддіса іІсасссідіа сідсаадада 1140 ддсаддаада адсідсщіа іаїснсаад садссіша дсудсосаді дсадасаасс 1200 саддаддадао асдасідсіс стіадднс ссадаададо аддадоддазда айідадсід 1260 сдсдущдаасді Шсссддіс дссдаїдса ссідсаїасс адсадаодаса даассадсід 1320
Таїаасдадс юааїстад ссддададад дадіасдаса юсіддаїаа даддадддда 1380 7 содсдаїссід ададддада саадссссда адааадаасс сісаддадда ссідіасааї 1440 дадсюдсада аддасаадаї ддссдаддсс їайссдада ісддсаїдаа дддачачада 1500 сдссдддаса адддасасда їддссідіас садддссіді сіасадссас сааддасасс 1560 таїдаїдссс дсасаїдса ддсссідсса ссааддіюда 1599 «2105» 255 «2115 1596 «2125 ОМА -213» Штвтучна послідовність бо «220»
«223» Синтетичний конструкт «400» 255 аддсасідс садідасадс ссідсідсід ссісіддссс Ідсідсідса сдсадссада (610) і ссадададс адсюдіода діссддадда ддссіддіда адссаддадад сісссдада 120 сдісц9су аддссадс9ду снсассій адсдасоссі ддаїдіссід ддідадасад 180 дсассаддса аддоссідда діддоіддос аддаїсаада дсаадасада сддсддсасс 240 асаданцасо дідссісї даасддссда саїсаїсі сссосдасда нНсісддааї 300 асссідіаїс їідсадсюдаа сааїсідаад асададдаїа ссдссдідіа сіайдсасс 360 й асадідссід дсіссіасду стайдддос садддсасас іддідассоії дадсіссяддс 420 99с99с99с! сіддадда9у аддаадсода д99299299аа 9с99999с99 соОсісідас 480 аїсдідащда сасадісісс асідадссід ссадідассс саддададсс їдссіссаїс 540 існдісосі сіадссадіс ссідсідсас аасаадсдда асаацассіддайдонс 600 сідсадаадс саддссадіс Іссссадсід сідаїсіаїс Іддссадсаа!ададссісс 660 7 ддадідссад асадайсіс їддаддадда адсддаасад асіїсасссі даадаїсадс 720 сдасдюадада сададдасаї дддсущіас їайдсаїдс аддсосадса дасасссаїс 780
Зо ассшддсс адддаасссд асіддадаїс аадоддсіссуд даддаддаадо аїссідсссі 840
Тасіссаасс саїсісщід садсддадда ддаддаїсії діссайацс сааїссйсс 900 сідідсіссу даддаддада аадсассаса ассссідсас саадассссосіасассадса 960 7 ссіассаїсу саїсссадсс ісідісісід сддсссдадо сашіаддсс адсадсадас 1020 дусдссадїдс асассадддо ссіддасій дссідсдаїа істасаїсід ддсассасідї 1080 дсаддаасаї діддсаіосі дсідсідісі сіддісаїса сссідіасід саадададдс 1140 аддаадаадс ідсідіаїа!ї сисаадсад сссійсаїдс ддсоссдідса дасаасссад 1200 дадааддасу дсюсаавсід ісдойсссії даададдада адададда щдадсідсудс 1260 7 дюдаадшщша дссддіссос сдаїдсасса дсаїассадс адддссадаа ссадсідіаї 1320 аасдадсюда аїсюдодссд дадададдад їасдасощдс їддаіаадад даддадасас 1380 даїссіада (дддадосаа дссісддада аадаасссас аддаддоссі діасааїдад 1440 сідсадаадд асаадаюдс сдаддссїаї адсдадаїсд дсаюааддо адададдсдс 1500 сдддасаадод дасасдаїдд ссдіассад доссідісса садссассаа ддасасстаї 1560 7 дадсссідс асаїдсаддс ссідссасса аддщда 1596 «2105 256 бо «2115» 9
«212» РВТ -213» Штвтучна послідовність «020» «223» Синтетичний конструкт «4005» 256
Суз Рго Туг Зег Авп Рго 5ег І єи Суз

Claims (32)

1 5 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Химерний антигенний рецептор (САК), що специфічний до варіанта ПШ рецептора епідермального фактора росту (ЕСЕКМІІ), який містить ЕСЕКМІІ-зв'язуючий домен, трансмембранний домен і внутрішньоклітинний сигнальний домен, в якому ЕСЕКмМПІ-зв'язуючий домен містить: а) варіабельну область важкого ланцюга (МН), що містить три області, які визначають комплементарність: визначаюча комплементарність область МН 1 (МН СОКІ), визначаюча комплементарність область МН 2 (МН СОК2), визначаюча комплементарність область МН З (УНН СОКЗ) моноклонального антитіла 4209, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С- кінця МН СОКІ1, МН СОК2 і МН СОКЗ, де МН СОК містить одну амінокислотну послідовність із ЗЕО І МО: 74-76, МН СОКЗ2 містить одну амінокислотну послідовність із ФЕО ІЮ МО: 77-78 і МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 79; та варіабельну область легкого ланцюга (МІ), що містить три області, що визначають комплементарність: визначаюча комплементарність область МІ 1 (МІ СОК'І), визначаюча комплементарність область МІ. 2 (МІ. СОК2), визначаюча комплементарність область МІ З (МІ СОМКЗ) моноклонального антитіла 42059, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОК1, МІ СОК2 і МІ СО, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕО І МО: 156, М СОК2 містить Ко) амінокислотну послідовність ЗЕО І МО: 157 і М СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 158, або р) область УН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СО і МН СОКЗ антитіла 32А10, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ1, МН сОКа2 і МН СОКУ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із «ЕО ІО МО: 80- 82, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із «ЕО ІЮ МО: 83-84 ії МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 85, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ, М СОК2 ії М СОКЗ антитіла 32А10, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОКІ, М СОМ2 і МІ СОКЗ, де МІ. СОМ містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 159, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 160 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 161, або с) область УН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СОК2 і МН СОКЗ антитіла 2089, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ, МН сОКа2 і МН СОКУ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із «ЕО ІО МО: 80- 82, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ФЕО ІЮ МО: 86-87 ії МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 79, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ, М СОК2 і М СОКЗ антитіла 2089, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМКІ1, МІ СОМ2 і МІ СОКЗ, де МІ. СОКІ містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 162, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 163 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 164, або а) область УН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СО і МН СОКЗ 14С11, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ1, МН СОКО2 і МН СОКЗ, де МН СОК містить одну амінокислотну послідовність із БЕО ІЮО МО: 88-90, УН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ЗЕО І МО: 91-92 ії МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 85, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ1, МІ СОМК2 і МІ СОКЗ 14С11, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕСОО ІЮ МО: 165, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 163 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 161, або е) область МН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СОР і бо МН СОокЗ 3008, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ1, УН СОК2 і
МН СОКЗ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із «ЕО ІЮО МО: 109-111, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ЕС ІЮО МО: 112-113 ї МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 114, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОК1, МІ СОК2 і М СОКзЗ 3008, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 182, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 183 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 184, або І) область МН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СОН і МН СОКЗ 20Е12, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОК1, МН СОКО2 і МН СОКЗ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із 5ЕО ІЮО МО: 115-117, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ЕС ІЮ МО: 118-119 ї МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 120, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ1, МІ СОК2 ії МІ СОКЗ 20Е12, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 185, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 186 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 184, або 9) область УН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОК1, МН СОК2 і МН СОКЗ 2689, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ1, МН СОК2 і МН СОКЗ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із БЕО ІЮ МО: 121-123, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ЕС ІЮ МО: 124-125 ії МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 126, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ, М СОМ ї МІ СОКЗ 2689, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 187, М СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 188 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 189, І) область УН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОМК1, МН СОК2 і МН СОкЗ Сб, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОК1, МН СО і МН СОКЗ, де МН СОКТ містить одну амінокислотну послідовність із зЕО ІЮ МО: 137-139, МН СОК2 містить одну амінокислотну послідовність із ЕС ІЮ МО: 140-141 ї МН СОКЗ містить Ко) амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 142, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОКІ, М СОК2 ї МІ СОКЗ Сб, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 195, МІ СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 196 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 197, або ї) область МН, що містить три області, які визначають комплементарність: МН СОКІ1, МН СО і МН СОКЗ 1282, розташовані послідовно у напрямку від М-кінця до С-кінця МН СОКІ1, МН СОК2 і МН СОКЗ, де МН СОКІ містить одну амінокислотну послідовність із «БО ІЮ МО: 74-76, МН СОВ2 містить одну амінокислотну послідовність із ЗЕО ІЮ МО: 102 або 103 і МН СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 104, та область Мі, що містить три області, що визначають комплементарність: МІ СОМК1, МІ СОК2 ії М СОКЗ 282, розташовані послідовно в напрямку від М-кінця до С-кінця МІ СОМК!, М СОК2 і мМ СОКЗ, де МІ СОК1 містить амінокислотну послідовність 5ЕОО ІЮ МО: 176, М СОК2 містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 172 і МІ СОКЗ містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 177.
2. ЕСЕВМПІ-специфічний САБК за п. 1, в якому внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигналь ний домен СОЗ-дзета.
3. ЕСЕВМПІ-специфічний САК за п. 1, в якому внутрішньоклітинний сигнальний домен являє собою перший внутрішньоклітинний сигнальний домен, а САК додатково містить другий внутрішньоклітинний сигнальний домен.
4. ЕСЕВМПІ-специфічний САК за п. 3, в якому перший внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен СОЗ-дзета, а другий внутрішньоклітинний сигнальний домен містить сигнальний домен 4-188.
5. Виділений полінуклеотид, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, яка кодує ЕСЕЕМПІ- специфічний САК за п. 1.
6. Рекомбінантний вектор експресії, що містить полінуклеотид за п. 5.
7. Виділена сконструйована імунна клітина, що експресує на мембрані своєї клітинної поверхні ЕСЕВМПІ-специфічний САК за п. 1.
8. Виділена сконструйована імунна клітина за п. 7, де імунна клітина одержана від здорового донора.
9. Виділена сконструйована імунна клітина за п. 7, де імунна клітина одержана від пацієнта. бо
10. Фармацевтична композиція, яка містить виділену сконструйовану імунну клітину за п. 7.
11. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 1, де ЕСЕКМПІ-зв'язуючий домен є одноланцюговим варіабельним фрагментом (5сЕм).
12. ЕСЕРМІП-специфічний САК за п. 1, де позаклітинний ліганд-зв'язуючий домен містить одноланцюговий варіабельний Фрагмент (5сЕм), який містить область МН і МІ, вибрану з групи, що складається з: ї) область МН, що містить амінокислотну послідовність зЕО ІО МО: 9, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 10 (42059); ії) область УН, що містить амінокислотну послідовність зХЕО ІЮ МО: 11, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 12 (32А10); ії) область МН, що містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 13, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 14 (2089); їм) область УН, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 15, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 16 (14С11); м) область УН, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІО МО: 37, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 38 (3008); мі) область УН, що містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 39, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО 1Ю МО: 40 (20Е12); мії) область МН, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 41, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 42 (2689); мії) область МН, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 48, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО: 49 (Сб); та їх) область УН, що містить амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 30, і область МІ, що містить амінокислотну послідовність зЕО ІЮ МО: 31 (1282).
13. ЕСЕВМІ-специфічний САКЕ за п. 12, де САК містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 53-57 і 59-61.
14. ЕСЕВМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 53.
15. ЕСЕВМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 54.
16. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 55.
17. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність 5Е0 ІЮ МО: 56.
18. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 57.
19. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 59.
20. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 60.
21. ЕСЕНМПІ-специфічний САК за п. 13, де САК містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 61.
22. Виділений полінуклеотид, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, яка кодує ЕСЕЕКМИІ- специфічний САК за будь-яким із пп. 2-4 і 11-21.
23. Виділений вектор експресії, що містить полінуклеотид за п. 22.
24. Виділена сконструйована імунна клітина, що експресує на мембрані своєї клітинної поверхні ЕСЕВМПІ-специфічний САКЕ за будь-яким із пп. 2-4 і 11-21.
25. Виділена сконструйована імунна клітина, що містить полінуклеотид за п. 22 або вектор експресії за п. 23.
26. Виділена сконструйована імунна клітина за п. 24 або 25, де імунна клітина одержана від здорового донора.
27. Виділена сконструйована імунна клітина за п. 24 або 25, де імунна клітина одержана від пацієнта.
28. Фармацевтична композиція, яка містить виділену сконструйовану імунну клітину за будь- яким із пп. 24-27.
29. Виділена сконструйована імунна клітина за будь-яким із пп. 7-9 і 24-27 для застосування як лікарського засобу.
30. Застосування виділеної сконструйованої імунної клітини за будь-яким із пп. 7-9 і 24-27 для приготування лікарського засобу для лікування раку.
31. Застосування за п. 30, де рак являє собою ЕСЕЕМІІІ-пов'язаний рак, який вибирають із бо групи, що складається з мультиформної гліобластоми, анапластичної астроцитоми,
гігантоклітинної гліобластоми, гліосаркоми, анапластичної олігодендрогліоми, анапластичної епендимоми, анапластичної олігоароцитоми, карциноми хороїдного сплетення, анапластичної гангліогліоми, пінеобластоми, пінеоцитоми, менінгіоми, медулоепітеліоми, епендимобластоми, медулобластоми, супратенторіальної примітивної нейроектодермальної пухлини, атипової тератоїдної/рабдоїдної пухлини, змішаної гліоми, раку голови та шиї, недрібноклітинного раку легень, раку молочної залози, раку яєчників, раку простати, медулобастоми, колоректального раку, раку анального каналу, раку шийки матки, раку нирок, раку шкіри, раку підшлункової залози, раку печінки, раку сечового міхура, раку шлунка, раку щитовидної залози, мезотеліоми, раку матки, лімфоми і лейкемії.
32. Спосіб інжинірингу імунної клітини, що включає: а) забезпечення імунної клітини та р) експресію на поверхні клітини щонайменше одного ЕСЕКМмМІІІ-специфічного САК за будь-яким із пп. 1-4, 11-21. з як ІН ї Д У НО во 01000001 ШЕ БОВІЕОРН негативний) 1 0100001 ЖжЕба ЕСЕ гр В і рова ах Ежен чх і о Є1Бов єОеЕня ше ш « щз її ! У ГИ Ж до ях У і ЇХ ях тт осонні пкт стру - -і з'пе яаз г с шає зо 10 ок
Фіг. 1А 1895 с. і І рої Не Н ва В ї А : 5 ЩІ | Шров(БСЕВ негатнвнюй а ще: 1 Її пакоустще сі и ше 01000000 ВЕБОВ.ЕОРНуй «0 з рі : ПЕ ЕЕ й щ їі я Ох ' ЕЙ «Хутро я й ве рент паурнче су вевня 0105 309 409 ча5
Фіг. 18
UAA201808794A 2016-01-21 2017-01-10 Химерний антигенний рецептор, що націлений на варіант iii рецептора епідермального фактора росту UA125252C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662281533P 2016-01-21 2016-01-21
US201662431758P 2016-12-08 2016-12-08
PCT/IB2017/050108 WO2017125830A1 (en) 2016-01-21 2017-01-10 Chimeric antigen receptors targeting epidermal growth factor receptor variant iii

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA125252C2 true UA125252C2 (uk) 2022-02-09

Family

ID=57868301

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201808794A UA125252C2 (uk) 2016-01-21 2017-01-10 Химерний антигенний рецептор, що націлений на варіант iii рецептора епідермального фактора росту

Country Status (22)

Country Link
US (3) US10259876B2 (uk)
EP (1) EP3405481B1 (uk)
JP (2) JP6823659B2 (uk)
KR (1) KR102479606B1 (uk)
CN (1) CN108699124A (uk)
AU (1) AU2017208834B2 (uk)
BR (1) BR112018014585A2 (uk)
CA (1) CA2954014A1 (uk)
DK (1) DK3405481T3 (uk)
EA (1) EA201891641A1 (uk)
ES (1) ES2942362T3 (uk)
IL (1) IL260666B2 (uk)
MX (1) MX2018008978A (uk)
MY (1) MY192474A (uk)
NZ (1) NZ744821A (uk)
PH (1) PH12018501473A1 (uk)
RU (1) RU2751662C2 (uk)
SA (1) SA518392058B1 (uk)
SG (2) SG11201805872SA (uk)
TW (2) TWI755547B (uk)
UA (1) UA125252C2 (uk)
WO (1) WO2017125830A1 (uk)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017075537A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Aleta Biotherapeutics Inc. Compositions and methods for treatment of cancer
CA3003144A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Aleta Biotherapeutics Inc. Compositions and methods for tumor transduction
BR112018014585A2 (pt) * 2016-01-21 2018-12-11 Pfizer receptores de antígeno quiméricos que direcionam o receptor do fator de crescimento epidérmico variante iii
ES2904593T3 (es) 2016-01-21 2022-04-05 Pfizer Anticuerpos monoespecíficos y biespecíficos para la variante III del receptor del factor de crecimiento epidérmico y CD3 y sus usos
JP2020511462A (ja) 2016-12-03 2020-04-16 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド キナーゼ阻害剤との組み合わせで治療用ｔ細胞を使用するための方法および組成物
MX2019014268A (es) 2017-06-02 2020-08-03 Juno Therapeutics Inc Artículos de manufactura y métodos para tratamiento usando terapia celular adoptiva.
WO2019195586A1 (en) * 2018-04-06 2019-10-10 The Regents Of The University Of California Methods of treating egfrviii expressing glioblastomas
EP3827075A4 (en) * 2018-07-26 2022-08-03 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. NEF-CONTAINING T LYMPHOCYTES AND THEIR PRODUCTION METHODS
CN109265561B (zh) * 2018-09-25 2021-05-25 山东兴瑞生物科技有限公司 抗EGFRvⅢ安全型嵌合抗原受体、其制备方法、利用其修饰的NK细胞及应用
US20220033848A1 (en) * 2018-11-19 2022-02-03 Board Of Regents, The University Of Texas System A modular, polycistronic vector for car and tcr transduction
TW202039544A (zh) * 2018-12-01 2020-11-01 美商艾洛基因醫療公司 靶定ｂ細胞成熟抗原之嵌合抗原受體及其使用之方法
CN113621062A (zh) * 2018-12-21 2021-11-09 豪夫迈·罗氏有限公司 与cd3结合的抗体
CN111454358A (zh) * 2019-01-18 2020-07-28 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 一种嵌合抗原受体及其应用
WO2020190771A1 (en) * 2019-03-15 2020-09-24 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric adaptor and kinase signaling proteins and their use in immunotherapy
EP3994173A1 (en) * 2019-07-02 2022-05-11 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
US20220288118A1 (en) * 2019-07-31 2022-09-15 Forty Seven, Inc. Depletion regimes for engineered t-cell or nk-cell therapy
CN111019959B (zh) * 2019-12-30 2022-09-13 北京立康生命科技有限公司 一种体外转录mRNA的核苷酸分子、呈递细胞及应用
WO2021150936A1 (en) * 2020-01-22 2021-07-29 City Of Hope Oncolytic virus compositions including il-15 complex and methods for the treatment of cancer
EP4263590A1 (en) 2020-12-21 2023-10-25 Allogene Therapeutics, Inc. Protease-activating cd45-gate car
EP4284918A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Allogene Therapeutics, Inc. Knockdown or knockout of one or more of tap2, nlrc5, beta2m, trac, rfx5, rfxap and rfxank to mitigate t cell recognition of allogeneic cell products
WO2024026445A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Allogene Therapeutics Inc. Engineered cells with reduced gene expression to mitigate immune cell recognition
WO2024027835A1 (zh) * 2022-08-05 2024-02-08 北京鼎成肽源生物技术有限公司 靶向EGFRvIII的抗体及其在细胞免疫治疗的应用
CN116284435A (zh) * 2022-09-19 2023-06-23 卡瑞济(北京)生命科技有限公司 EGFRvIII嵌合抗原受体及其用途

Family Cites Families (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4754065A (en) 1984-12-18 1988-06-28 Cetus Corporation Precursor to nucleic acid probe
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
GB8611832D0 (en) 1986-05-15 1986-06-25 Holland I B Polypeptide
US5037743A (en) 1988-08-05 1991-08-06 Zymogenetics, Inc. BAR1 secretion signal
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
CA2137558A1 (en) 1992-07-17 1994-02-03 Wayne A. Marasco Method of intracellular binding of target molecules
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
ATE373078T1 (de) 2000-02-24 2007-09-15 Xcyte Therapies Inc Gleichzeitige stimulation und konzentration von zellen
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
EP1266009B1 (en) * 2000-02-25 2008-12-31 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES ANTI-EGFRvIII SCFVS WITH IMPROVED CYTOTOXICITY AND YIELD, IMMUNOTOXINS BASED THEREON, AND METHODS OF USE THEREOF
WO2008045437A2 (en) 2006-10-09 2008-04-17 The General Hospital Corporation Chimeric t-cell receptors and t-cells targeting egfrviii on tumors
AU2011319725A1 (en) 2010-10-27 2013-05-30 Cellectis Method for increasing the efficiency of double-strand break-induced mutagenesis
US9249217B2 (en) 2010-12-03 2016-02-02 Secretary, DHHS Bispecific EGFRvIII x CD3 antibody engaging molecules
JP5947311B2 (ja) 2010-12-09 2016-07-06 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア 癌を治療するためのキメラ抗原受容体改変ｔ細胞の使用
PL2694549T3 (pl) * 2011-04-08 2019-01-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeryczne receptory antygenowe anty-wariant III receptora czynnika wzrostu naskórka i ich zastosowanie do leczenia raka
GB201206559D0 (en) 2012-04-13 2012-05-30 Ucl Business Plc Polypeptide
US20150017136A1 (en) 2013-07-15 2015-01-15 Cellectis Methods for engineering allogeneic and highly active t cell for immunotherapy
CA2876133C (en) 2012-06-07 2017-06-06 Duke University Human bispecific egfrviii antibody engaging molecules
JP2015524255A (ja) * 2012-07-13 2015-08-24 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア 二重特異性抗体を共導入することによってｃａｒｔ細胞の活性を強化する方法
KR102141259B1 (ko) 2012-09-04 2020-08-05 셀렉티스 멀티―체인 키메라 항원 수용체 및 그것의 용도들
AU2013204922B2 (en) * 2012-12-20 2015-05-14 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
DK2958943T3 (da) * 2013-02-20 2019-12-09 Univ Pennsylvania Behandling af cancer ved anvendelse af humaniseret anti-EGFRvIII kimær antigenreceptor
EP3721902A1 (en) 2013-03-14 2020-10-14 The Scripps Research Institute Targeting agent antibody conjugates and uses thereof
CA2912375C (en) 2013-05-13 2023-03-14 Cellectis Methods for engineering highly active t cell for immunotherapy
AU2014267436B2 (en) 2013-05-13 2019-07-04 Cellectis CD19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
DK3004337T3 (da) 2013-05-29 2017-11-13 Cellectis Fremgangsmåde til konstruktion af T-celler til immunoterapi ved brug af RNA-guidet Cas nuklease-system
TR201904121T4 (tr) 2013-07-09 2019-04-22 The Government Of The United States As Represented By The Secretary Of The Dept Of Health And Human İnsan bispesifik egfrviii antikoru birleştirme molekülleri.
DK3030581T3 (da) 2013-08-07 2021-04-12 Affimed Gmbh Antistofbindingssteder, der er specifikke for egfrviii
JP2017504601A (ja) * 2013-12-20 2017-02-09 セレクティスＣｅｌｌｅｃｔｉｓ 免疫療法のためにマルチインプットシグナル感受性ｔ細胞を操作する方法
CN107074973A (zh) 2014-07-29 2017-08-18 辉瑞大药厂 用于癌症免疫疗法的EGFRvIII特异性嵌合抗原受体
TWI744242B (zh) 2015-07-31 2021-11-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Egfrviii及cd3抗體構築體
BR112018014585A2 (pt) 2016-01-21 2018-12-11 Pfizer receptores de antígeno quiméricos que direcionam o receptor do fator de crescimento epidérmico variante iii
ES2904593T3 (es) 2016-01-21 2022-04-05 Pfizer Anticuerpos monoespecíficos y biespecíficos para la variante III del receptor del factor de crecimiento epidérmico y CD3 y sus usos

Also Published As

Publication number Publication date
IL260666B (en) 2022-10-01
US20190144550A1 (en) 2019-05-16
EA201891641A1 (ru) 2019-01-31
BR112018014585A2 (pt) 2018-12-11
PH12018501473A1 (en) 2019-03-11
SG10202111458RA (en) 2021-11-29
RU2018130088A3 (uk) 2020-07-29
US10259876B2 (en) 2019-04-16
JP6823659B2 (ja) 2021-02-03
US20220227874A1 (en) 2022-07-21
AU2017208834B2 (en) 2021-09-02
MX2018008978A (es) 2019-01-10
TWI634125B (zh) 2018-09-01
SA518392058B1 (ar) 2023-02-12
US20170210811A1 (en) 2017-07-27
AU2017208834A1 (en) 2018-08-09
JP7198797B2 (ja) 2023-01-04
ES2942362T3 (es) 2023-05-31
TW201920237A (zh) 2019-06-01
SG11201805872SA (en) 2018-08-30
IL260666A (en) 2018-09-20
TW201734038A (zh) 2017-10-01
RU2018130088A (ru) 2020-02-25
EP3405481A1 (en) 2018-11-28
NZ744821A (en) 2023-06-30
IL260666B2 (en) 2023-02-01
CN108699124A (zh) 2018-10-23
JP2021036873A (ja) 2021-03-11
TWI755547B (zh) 2022-02-21
US11267892B2 (en) 2022-03-08
KR20180099890A (ko) 2018-09-05
DK3405481T3 (da) 2023-04-17
EP3405481B1 (en) 2023-01-18
WO2017125830A1 (en) 2017-07-27
MY192474A (en) 2022-08-23
KR102479606B1 (ko) 2022-12-21
RU2751662C2 (ru) 2021-07-15
CA2954014A1 (en) 2017-07-21
JP2019506394A (ja) 2019-03-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA125252C2 (uk) Химерний антигенний рецептор, що націлений на варіант iii рецептора епідермального фактора росту
US20230110249A1 (en) Antibodies and vaccines for use in treating ror1 cancers and inhibiting metastasis
US20210277117A1 (en) Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
US11485782B2 (en) Anti-claudin 18.2 antibodies
BR112020015662A2 (pt) Receptores de antígeno quimérico direcionados a cd70
UA125818C2 (uk) Химерні рецептори антигенів на основі однодоменних антитіл і способи їх застосування
CN107922471A (zh) 靶向ny‑eso‑1肽/mhc复合物的构建体及其用途
UA124417C2 (uk) БІСПЕЦИФІЧНИЙ КОНСТРУКТ АНТИТІЛА, ЩО ЗВ'ЯЗУЄ EGFRvIII І CD3
CN107849132A (zh) 人源化的和亲和力成熟的针对FcRH5的抗体和使用方法
EA018301B1 (ru) Фармацевтические композиции, содержащие антагонистическое моноклональное антитело к cd40, и их применение
JP2008278814A (ja) アゴニスティック抗ヒトｇｉｔｒ抗体による免疫制御の解除とその応用
JP5723270B2 (ja) 抗カドヘリン抗体
CN107847570A (zh) 靶向hpv16‑e7肽/mhc复合体的构建体及其用途
CA2831111A1 (en) Cd37-binding molecules and immunoconjugates thereof
CN108778327B (zh) 用于癌症治疗的钙粘蛋白-17特异性抗体和细胞毒性细胞
US20220185910A1 (en) Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (psma) and uses thereof
CN103649121B (zh) 针对adp-核糖基环化酶2的抗体
Ammons et al. In vitro and in vivo pharmacology and pharmacokinetics of a human engineered™ monoclonal antibody to epithelial cell adhesion molecule
CN111542547B (zh) 对bdca2抗原具有特异性的嵌合抗原受体
CN107474139B (zh) 一种靶向人肿瘤干细胞的单克隆抗体及其应用
JP2015196665A (ja) 中和活性を有する抗ｌｒ１１モノクローナル抗体、及びそれを含有してなる医薬
US20230149544A1 (en) Methods of using anti-psgl-1 antibodies in combination with jak inhibitors to treat t-cell mediated inflammatory diseases or cancers
US20220089719A1 (en) Constructs targeting labyrinthin or a portion thereof and uses thereof
JP2015199725A (ja) 中和活性を有する抗ｌｒ１１モノクローナル抗体、及びそれを含有してなる医薬
Aldeghaither Identifying Molecular Mechanisms of Resistance to Antibody Dependent Cell Mediated Cytotoxicity (ADCC)