UA125017C2 - Ліпосомальна ад'ювантна композиція - Google Patents
Ліпосомальна ад'ювантна композиція Download PDFInfo
- Publication number
- UA125017C2 UA125017C2 UAA201800567A UAA201800567A UA125017C2 UA 125017 C2 UA125017 C2 UA 125017C2 UA A201800567 A UAA201800567 A UA A201800567A UA A201800567 A UAA201800567 A UA A201800567A UA 125017 C2 UA125017 C2 UA 125017C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- vaccine composition
- virus
- composition according
- antigens
- liposomes
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 99
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims abstract description 74
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 123
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 82
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 claims abstract description 22
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 22
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims abstract description 22
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 86
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 86
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 86
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 43
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 40
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 40
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 38
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 38
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 claims description 24
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 23
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 21
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 20
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 19
- -1 1-hydroxypropyl Chemical group 0.000 claims description 17
- 102000011195 Profilin Human genes 0.000 claims description 15
- 108050001408 Profilin Proteins 0.000 claims description 15
- 210000003250 oocyst Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 13
- 229940124276 oligodeoxyribonucleotide Drugs 0.000 claims description 10
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 5
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 4
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 4
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 4
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 claims description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 3
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 claims description 2
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N Vitamin D2 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N dimethyl(dioctadecyl)azanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002061 ergocalciferol Drugs 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 claims description 2
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 claims description 2
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 claims description 2
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 claims description 2
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 claims description 2
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 claims description 2
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 claims description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 2
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 claims 1
- 208000009620 Orthomyxoviridae Infections Diseases 0.000 claims 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 31
- 244000309466 calf Species 0.000 description 22
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 20
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 19
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 19
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 19
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 19
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 18
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 18
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 18
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 18
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 18
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 17
- 230000004044 response Effects 0.000 description 16
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 15
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 14
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 14
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 12
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 11
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 11
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 9
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 9
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 9
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 9
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 7
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 229940074410 trehalose Drugs 0.000 description 7
- 206010022095 Injection Site reaction Diseases 0.000 description 6
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 6
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 6
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 5
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 4
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 4
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 3
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 3
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 3
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 description 3
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 3
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028732 Concatemer Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 2
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 208000000832 Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 2
- 208000006941 Laboratory Infection Diseases 0.000 description 2
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 206010051511 Viral diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 241000710886 West Nile virus Species 0.000 description 2
- 229920000392 Zymosan Polymers 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N avridine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CCCN(CCO)CCO)CCCCCCCCCCCCCCCCCC WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 206010015915 eye discharge Diseases 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 2
- 208000030175 lameness Diseases 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 2
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 2
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 2
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 1-acetyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPAZGLFMMUODDK-UHFFFAOYSA-N 6-nitro-1h-benzimidazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2N=CNC2=C1 XPAZGLFMMUODDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241001465677 Ancylostomatoidea Species 0.000 description 1
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000714230 Avian leukemia virus Species 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 241001118702 Border disease virus Species 0.000 description 1
- 206010006049 Bovine Tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 241000711443 Bovine coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000712462 Bovine ephemeral fever virus Species 0.000 description 1
- 241000713704 Bovine immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 241000711895 Bovine orthopneumovirus Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000680578 Canid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000711506 Canine coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000701157 Canine mastadenovirus A Species 0.000 description 1
- 241000712083 Canine morbillivirus Species 0.000 description 1
- 241000701931 Canine parvovirus Species 0.000 description 1
- 241001594994 Canine respiratory coronavirus Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 1
- 241000224483 Coccidia Species 0.000 description 1
- 208000003495 Coccidiosis Diseases 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000655 Distemper Diseases 0.000 description 1
- 206010013554 Diverticulum Diseases 0.000 description 1
- 101100478173 Drosophila melanogaster spen gene Proteins 0.000 description 1
- 208000006825 Eastern Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 201000005804 Eastern equine encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 206010014587 Encephalitis eastern equine Diseases 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000230501 Equine herpesvirus sp. Species 0.000 description 1
- 241000701087 Felid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 description 1
- 241000725579 Feline coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000711475 Feline infectious peritonitis virus Species 0.000 description 1
- 241000714165 Feline leukemia virus Species 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000701047 Gallid alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010034145 Helminth Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010023076 Isosporiasis Diseases 0.000 description 1
- 241000713326 Jaagsiekte sheep retrovirus Species 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 241000196329 Marchantia polymorpha Species 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 241000002163 Mesapamea fractilinea Species 0.000 description 1
- 101100412856 Mus musculus Rhod gene Proteins 0.000 description 1
- 101100513476 Mus musculus Spen gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000008896 Opium Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001219104 Ovine parainfluenza virus 3 Species 0.000 description 1
- 241001360472 Ovine progressive pneumonia virus Species 0.000 description 1
- 235000010678 Paulownia tomentosa Nutrition 0.000 description 1
- 240000002834 Paulownia tomentosa Species 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 241000202347 Porcine circovirus Species 0.000 description 1
- 241001135549 Porcine epidemic diarrhea virus Species 0.000 description 1
- 241000156302 Porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus Species 0.000 description 1
- 241000702619 Porcine parvovirus Species 0.000 description 1
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 description 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 241000765166 Tachyta Species 0.000 description 1
- 101100242191 Tetraodon nigroviridis rho gene Proteins 0.000 description 1
- 241000711484 Transmissible gastroenteritis virus Species 0.000 description 1
- 241000711508 Turkey coronavirus Species 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000005411 Van der Waals force Methods 0.000 description 1
- 241000710959 Venezuelan equine encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- CWRILEGKIAOYKP-SSDOTTSWSA-M [(2r)-3-acetyloxy-2-hydroxypropyl] 2-aminoethyl phosphate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCCN CWRILEGKIAOYKP-SSDOTTSWSA-M 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011126 aluminium potassium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007487 asymptomatic viral shedding Effects 0.000 description 1
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 229940076810 beta sitosterol Drugs 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 210000000080 chela (arthropods) Anatomy 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 230000020169 heat generation Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 125000002073 methionyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000004379 myopia Effects 0.000 description 1
- 208000001491 myopia Diseases 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004349 nearwork-induced transient myopia Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960001027 opium Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 229960005030 other vaccine in atc Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000079 pharmacotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940050271 potassium alum Drugs 0.000 description 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 208000012802 recumbency Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000009958 sewing Methods 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical group 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 1
- 229940074409 trehalose dihydrate Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011123 type I (borosilicate glass) Substances 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 239000000277 virosome Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
- A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
- A61K9/1273—Polymersomes; Liposomes with polymerisable or polymerised bilayer-forming substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Винахід належить до ліпосомальної ад'ювантної композиції, яка містить ліпосому, яка по суті є вільною від сапоніну, де ліпосома містить зовнішню ліпідну двошарову мембрану та внутрішню камеру, де зовнішня мембрана містить: четвертинну амонійну сполуку, стерин, фосфоліпід та гліколіпід. Крім того, винахід належить до вакцинної композиції, яка містить ліпосомальний ад'ювант за представленим винаходом.
Description
Перехресні посилання на СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
ІЇО001| Дана заявка претендує на пріоритет попередньої патентної заявки США Мо. 62/194,355, поданої 20 липня 2015 року, зміст якої є включеним в даний документ шляхом посилання у всій своїй повноті.
ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ
0002) Даний винахід стосується ад'ювантів для вакцини.
ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ
І0003) В галузі вакцинології антигени вводяться господарю таким чином, щоб стимулювати імунну відповідь на антиген, та, таким чином, на потенційного патогена. Індукування імунної відповіді залежить від багатьох чинників, серед яких, як вважають, є хімічний склад, характеристики та конфігурація антигену, стан здоров'я та стан імунної системи господаря, спосіб доставки та введення антигену. 0004) Імунна відповідь має багато аспектів, деякі з яких є продемонстрованими клітинами імунної системи, (наприклад, дендритними клітинами, В-лімфоцитами, Т-лімфоцитами, макрофагами, та плазматичними клітинами). Клітини імунної системи беруть участь в імунній відповіді за рахунок взаємодії з антигенами або іншими клітинами імунної системи, вивільнення цитокінів та реактивності до даних цитокінів. Адаптивна (надбана) імунна відповідь умовно (але без достатніх підстав) поділяється на дві основні категорії -- гуморальний та клітинно- опосередкований. Гуморальний компонент імунної відповіді включає продукування антитіл, специфічних до антигену. Клітинно-опосередкований компонент включає генерування гіперчутливості уповільненого типу та цитотоксичних ефекторних Т-клітин, специфічних до антигену. 0005) Ад'юванти представляють собою речовини, які використовуються для потенціювання імунної відповіді, коли їх застосовують в поєднанні з антигеном. Застосування ад'юванта в протоколі вакцинації може, наприклад, викликати імунну відповідь, яка є більш швидкою або значно більшою, ніж та, яку б може бути викликаною антигеном самостійно. Крім того, ад'юванти можуть використовуватись для спрямування імунної відповіді на специфічні імунологічні шляхи та служать засобами доставки антигену. 0006) Ліпосоми та ліпосомальні композиції є прикладами ад'ювантів. Як правило, ліпосоми
Зо можуть бути навантажені антигеном(ами) та/або іншими імуномодулюючими сполуками, або ліпосоми самі по собі можуть служити як самостійні ад'юванти. Антигени та/або інші імуностимулюючі сполуки можуть бути інкапсульованими всередині ліпосоми, та/або вони можуть бути приєднаними до ліпосоми або включеними в ліпідний бішар.
ІЇ0007| Чинники, які впливають на прийнятність наданої ліпосоми як засобу доставки в представлені наданої системи, залишаються незрозумілими. Таким чином, все ще існує потреба в засобах доставки, які забезпечують покращену ефективність. Така покращена доставка особливо стосується введення молекул, які стимулюють та/або викликають імунну відповідь, наприклад, антигенів та імуномодуляторів.
СУТЬ ВИНАХОДУ
0008) Представлений винахід стосується ад'ювантів для посилення ефективності вакцини.
ІЇ0009| В деяких аспектах винахід передбачає ліпосому, яка містить зовнішню ліпідну двошарову мембрану та внутрішню камеру, де зовнішня ліпідна двошарова мембрана містить: четвертинну амонійну сполуку; стерин; фосфоліпід; та гліколіпід формули І: -0-- СН о ух - о М
М ш- о Мн-85
Формула І, в якій Е! та В? незалежно представляють собою водень, або насичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; Х представляє собою -СНе-, -О- або -МН-; В? представляє собою водень, або насичений або ненасичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; Р3, Ви, та 2» незалежно представляють собою водень, -5042, -РОг2, -6ОС1-іо алкіл; Ко представляє собою Іі -аланіл, І-альфа-амінобутил, І -аргініл, І-аспаргініл, І-аспартил, І1- цистеїніл, І-глутаміл, І-гліцил, І-гістидил, І-гідроксипропіл, І -ізолейцил, І -лейцил, І! -лізил, І -
метіоніл, І -орнітиніл, І-фенілаланіл, І -проліл, І-серил, І-треоніл, І-тирозил, І -триптофаніл, та -валіл або їх О-ізомери. 0010) В деяких варіантах здійснення, четвертинна амонійна сполука представляє собою
РОА, стерин представляє собою холестерин, фосфоліпід представляє собою лецитин, та гліколіпід представляє собою М-(2-дезокси-2-І -лейциламіно-В-ЮО-глюкопіранозил)-М- октадецилдодеканоїламід або його ацетат. 0011) В деяких варіантах здійснення, ліпосома фактично не містить сапонінів.
І0012| В деяких варіантах здійснення, ліпосома додатково включає імуностимулюючий олігонуклеотид, вибраний з групи, яка складається з імуностимулюючого рибонуклеотиду, Сро олігодезоксирибонуклеотиду, та їх комбінації. В деяких варіантах здійснення, ліпосома не містить Сро олігодезоксирибонуклеотид.
ІЇ0013| В деяких варіантах здійснення, імуностимулюючий олігонуклеотид вводять в середину внутрішньої камери ліпосоми. В інших варіантах здійснення, імуностимулюючий олігонуклеотид асоціюється із зовнішньою поверхнею ліпосоми.
ІЇ0014| В деяких варіантах здійснення, зазначений імуностимулюючий олігонуклеотид включає будь-яку одну з ЗЕО ІЮ МО 1-14. 0015) В деяких аспектах, винахід передбачає ад'ювантну композицію, яка містить ліпосоми, як описано в даному документі. 0016) В деяких варіантах здійснення, ад'ювантна композиція фактично не містить сапонінів.
В деяких варіантах здійснення, ад'ювантна композиція фактично не містить Сро олігодезоксирибонуклеотид. 0017) В деяких аспектах, винахід передбачає вакцинну композицію, яка містить ефективну кількість антигенного компонента та ад'ювантну композицію, як описано в даному документі.
І0О0О18) В деяких варіантах здійснення, вакцинна композиція фактично не містить сапонінів.
І0019| В деяких варіантах здійснення, вакцинна композиція фактично не містить Сро. В деяких варіантах здійснення, антигенний компонент фактично вільної від Сро вакцинної композиції містить вірус з (-олЛРНК. 0020) В деяких варіантах здійснення, вірус з (-олЛРНК представляє собою вірус грипу. В деяких варіантах здійснення, вірус грипу представляє собою вірус свинячого грипу.
І0021| В деяких варіантах здійснення, антигенний компонент вводять в середину внутрішньої камери ліпосоми.
І0022| Антигенний компонент, у вибраних варіантах здійснення, прийнятних для великої рогатої худоби, може включати інактивовані віруси ВМОМ-1 та/"або ВМОМ-2 (та ВНУ-1). В інших варіантах здійснення, особливо прийнятних для сільськогосподарських птахів, антигенний компонент включає профілін.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
І0023) Визначення:
І0024| Терміни "близько" або "приблизно, " коли вони використовуються у зв'язку з вимірюваною числовою змінною, відносяться до зазначеного значення змінної та до всіх значень змінної, які знаходяться в експериментальній похибці вказаного значення (наприклад, в межах 9595 довірчого інтервалу для середнього значення) або в межах 10 відсотків від зазначеного значення, в залежності від того, яке є більшим, за винятком випадків, коли "приблизно" використовується по відношенню до часових інтервалів у тижнях, коли "приблизно
З тижні", становить від 17 до 25 днів, та коли від приблизно 2 до приблизно 4 тижнів становить від 10 до 40 днів.
І0025| Термін "супутня підвищена температура" стосується підвищення температури у вакцинованої тварини в межах одного дня вакцинації. У випадку великої рогатої худоби, термін стосується ректальної температури понад 103,5 "Р. 0026) Термін "антиген" у поєднанні з даним видом стосується патогенів, яку викликають інфекційне захворювання в зазначеному виді, або компонентів даних патогенів. Таким чином, наприклад, термін "антигени великої рогатої худоби" стосується патогенів, здатних викликати інфекційні захворювання у великої рогатої худоби, або компонентів даних патогенів. (0027) Термін "який фактично складається з" та подібний, що застосовується до ліпосом та ад'ювантних композицій за представленим винаходом, стосується композицій, які не містять додаткових ад'ювантних або імуномодулюючих агентів у кількостях, при яких зазначений агент виявляє ад'ювантні або імуномодулюючі ефекти, які можуть бути виміряні. (00281) Терміни "фактично не містить сапонін", "фактично є вільним від сапоніну" та подібні до них стосуються композиції, яка не містить сапонін у кількостях, при яких сапонін виявляє ад'ювантні або імуномодулюючі ефекти, які можуть бути виміряні. В деяких варіантах 60 здійснення, фактично вільні від сапоніну композиції містять сапонін в кількості недостатній для того, щоб викликати системну імунну відповідь, таку як підвищена температура. В деяких варіантах здійснення, фактично вільні від сапоніну композиції не містять ніякого сапоніну або містять сапонін в межах детектування або нижче.
І0029| Аналогічним чином, терміни "фактично не містить Сро дезоксирибонуклеотид", "фактично є вільним від Сро дезоксирибонуклеотиду" та подібні до них стосуються композиції, яка не містить Сро дезоксирибонуклеотид у кількостях, при яких Ср дезоксирибонуклеотид виявляє ад'ювантні або імуномодулюючі ефекти, які можуть бути виміряні. В деяких варіантах здійснення, фактично вільні від Сро дезоксирибонуклеотиду композиції не містять ніякого Сраї дезоксирибонуклеотиду або містять Ср дезоксирибонуклеотиду в межах детектування або нижче. Терміни "фактично не містить Сро дезоксирибонуклеотид", "фактично є вільним від Сро дезоксирибонуклеотиду" та подібні до них виключають вакцини, в яких сСро дезоксирибонуклеотид є природно присутнім в антигені.
ІООЗ0О| Термін "імуностимулююча молекула" стосується молекули, яка посилює імунну відповідь. 0031) Термін "ліпосома" стосується мікроскопічної сферичної частинки, утвореної ліпідним бішаром, який оточує водну камеру. (0032) Термін "парентеральне введення" стосується введення речовини, такої як вакцина, в організм суб'єкта через або шляхом, який не включає шлунково-кишковий тракт. Парентеральне введення включає підшкірне, внутрішньом'язове, транскутантне, інтрадермальне, внутрішньочеревне, внутрішньоочне та внутрішньовенне введення.
І0033| Терміни "терапевтично ефективна кількість" та "ефективна кількість" стосуються кількості антигену або вакцини, яка буде індукувати імунну відповідь у суб'єкта, який отримує антиген або вакцину, яка є адекватною для того, щоб запобігти або зменшити ознаки або симптоми захворювання, включаючи несприятливі наслідки для здоров'я або їх ускладнення, спричинені інфікуванням патогеном, таким як вірус або бактерія. Індукованим може бути гуморальний імунітет або клітинно-опосередкований імунітет або як гуморальний, так і клітинно- опосередкований імунітет. Імуногенність та ефективність вакцини у тварини можуть бути оцінені, наприклад, опосередковано шляхом вимірювання титрів антитіл, аналізів проліферації лімфоцитів, аналізів ЕГІЗРОТ ІЕМ гама, аналізів цитотоксичних Т-клітин або безпосередньо
Зо шляхом спостереження за ознаками та симптомами після виявлення штамів немутантного типу.
Захисний імунітет, який надається вакциною, може бути оцінений шляхом вимірювання, наприклад, зменшення клінічних ознак, таких як смертність, захворюваність, підвищена температура, вірусемія, вплив на клінічну патологію, загальний фізичний стан, та загальний стан здоров'я та активність суб'єкта. Кількість вакцини, яка є терапевтично ефективною, може варіювати в залежності від конкретного використовуваного ад'юванта, конкретного використовуваного антигена, або стану суб'єкта, та може бути визначеною кваліфікованим фахівцем у даній галузі. (0034) Винахід передбачає, зокрема, ліпосоми, які містять внутрішню камеру та зовнішню мембрану. Ліпосоми можуть мати середній розмір частинок від 50 до 500 нм. В деяких не обмежуючих варіантах здійснення, середній розмір частинок ліпосом становить 100-500 нм, або 150-450 нм, або 150-250 нм, або 300-400 нм, або 250-300 нм. В деяких варіантах здійснення, мембрана містить четвертинну амінну сполуку, фосфоліпід, стерин, та гліколіпід. В деяких варіантах здійснення, ліпосома фактично не містить сапонін.
І0035| В деяких варіантах здійснення, зовнішня мембрана фактично складається з або складається з четвертинної амінної сполуки, фосфоліпіда, стерина, та гліколіпіда. В інших варіантах здійснення, зовнішня камера ліпосоми не містить ніяких імуностимулюючих олігонуклеотидів таЛлабо інших імуномодулюючих сполук. Таким чином, в таких варіантах здійснення, ліпосома фактично складається з, або складається з внутрішньої камери, яка фактично складається з або складається з імунологічно інертного водного носія, де зазначена внутрішня камера є оточеною зовнішньою мембраною, яка фактично складається з, або складається з четвертинної амінної сполуки, фосфоліпіда, стерина та гліколіпіда. (0036) Четвертинні амінні сполуки представляють собою сполуки на основі амонію з чотирма вуглеводневими групами. На практиці, вуглеводневі групи, як правило, обмежуються алкільною або арильною групами. В наборі варіантів здійснення, четвертинні амінні сполуки складаються з чотирьох алкільних ланцюгів, два з яких представляють собою С10-С20 алкіли, та два, які залишилися, представляють собою С1-С4 алкіли. В деяких варіантах здійснення, четвертинний амін представляє собою диметилдіоктадециламонію (ОСА) бромід, хлорид або інший фармацевтично прийнятний противоіон.
І0037| Стерини мають спільне хімічне ядро, яке представляє собою стероїдну(і) кільцеву) бо структуруЇи)Ї, яке містить гідроксильну (ОН) групу, як правило, приєднану до вуглецю-3.
Вуглеводневий ланцюг жирнокислотного замісника варіює в довжину, як правило, від 16 до 20 атомів вуглецю, та може бути насиченим або ненасиченим. Стерини, як правило, містять один або декілька подвійних зв'язків в кільцевій структурі та також різні замісники, приєднані до кілець. Стерини та їх жирнокислотні складні ефіри є фактично нерозчинними у воді. Приймаючи до уваги дані хімічні подібності, існує, таким чином, ймовірність того, що стерини, які мають дане хімічне ядро, будуть мати подібні властивості, коли їх використовуватимуть у вакцинних композиціях за представленим винаходом. Стерини є добре відомими в даній галузі з рівня техніки та можуть бути комерційно придбаними. Наприклад холестерин є розкритим в Мегск
Іпдех, 121п Еа., р. 369. Прийнятні стерини включають, але не обмежуються цим, В-ситостерин, стигмастерин, ергостерин, ергокальциферол, та холестерин. 0038) Прийнятні гліколіпіди, як правило, представляють собою ті, які активують відповідь
Тп2. Гліколіпіди включають, але не обмежуються цим, ті, які охоплюються формулою І, та які, як правило, є описаними в патентній публікації США 20070196384 (Катазату еї аї). - 0-8 о; ух - о М
Ми - о МНн--К5
Формула
І0039| В структурній формулі І, К! та К2 незалежно представляють собою водень, або насичений алкільний радикал, який містить аж до 20 атомів вуглецю; Х представляє собою -
Сна-, -О- або -МН-; К2 представляє собою водень, або насичений або ненасичений алкільний радикал, який містить аж до 20 атомів вуглецю; КЗ, К4, та К5 незалежно представляють собою водень, -5042-, -РО42-, -5О0С1-10 алкіл; б представляє собою І -аланіл, І -альфа-амінобутил,
І -аргініл, І -аспаргініл, І -аспартил, І -цистеїніл, І -глутаміл, І -гліцил, І -гістидил, І -гідроксипропіл,
І-ізолейцил, І-лейцил, І! -лізил, І-метіоніл, І-орнітиніл, І-фенілаланіл, І-проліл, І-серил, І1- треоніл, І-тирозил, І -триптофаніл, та І -валіл або їх О-ізомери.
ІЇ0040| Приклади гліколіпіду включають, але не обмежуються цим, М-(2-дезокси-2-Ї - лейциламіно-В-О-глюкопіранозил)-М-октадецилдодеканоїламід (ВауйкФІ005, або 1005) або його сіль (наприклад, ацетатну). 0041) Лецитин може бути отриманий у вигляді суміші фосфатидів та тригліцеридів шляхом промивання водою неочищених рослинних олій, та відокремлення та сушіння отриманих в результаті гідратованих смол. Очищений продукт може бути отриманий шляхом
Зо фракціонування суміші нерозчинних в ацетоні фосфоліпідів та гліколіпідів, які залишаються після видалення тригліцеридів, та рослинної олії за рахунок промивання ацетоном.
Альтернативно, лецитин може бути отриманий з різних комерційних джерел.
І0042| Інші прийнятні фосфоліпіди включають фосфатидилхолін, фосфатидилгліцерин, фосфатидилінозитол, фосфатидилсерин, ацилфосфатидилетаноламін, дифосфатидилгліцерин, лізофосфатидилетаноламін, лізофосфатидилхолін, фосфатидинову кислоту, кардіоліпін та фосфатидилетаноламін. Фосфоліпіди можуть бути виділені з природних джерел або синтезовані за загальноприйнятими способами.
І0043| Ліпосоми, як описано в даному документі, дозволяють використовувати гнучкі співвідношення елементів зовнішньої мембрани. В деяких варіантах здійснення, масові співвідношення четвертинної амонійної сполуки: стерину: фосфоліпіду: гліколіпіду становлять 1: 0,75-1,25: 1,5-2,5: 1,5-2,5, відповідно. В деяких варіантах здійснення, масові співвідношення четвертинної амонійної сполуки: стерину: фосфоліпіду: гліколіпіду становлять 1: 1: 2: 2. (0044) В інших варіантах здійснення, загальна маса четвертинної амонійної сполуки та стерину становить приблизно половину (наприклад, 40 95, 45 9, 50 Фо, 55 9», 60 95) від загальної маси гліколіпіду та фосфоліпіду, за умови, що четвертинна амонійна сполука становить, щонайменше, приблизно 5 95 мас./мас. від загальної маси даних чотирьох сполук (четвертинної амонійної сполуки, стерину, фосфоліпіду, та гліколіпіду), та гліколіпід становить, щонайменше, приблизно 20 95 мас./мас. від загальної маси даних чотирьох сполук. (0045) В деяких варіантах здійснення, загальна маса четвертинної амонійної сполуки та стерину становить приблизно 10-40 95 (наприклад, приблизно 10 95, приблизно 15 95, приблизно 20 95, приблизно 25 95, приблизно 30 95, приблизно 33,3 95, приблизно 35 95, приблизно 40 95)
від загальної маси гліколіпіду та фосфоліпіду, за умови, що четвертинна амонійна сполука становить, щонайменше, приблизно 5 95 мас./мас. від загальної маси даних чотирьох сполуками (четвертинної амонійної сполуки, стерину, фосфоліпіду, та гліколіпіду), та гліколіпід становить, щонайменше, приблизно 20 95 мас./мас. від загальної маси даних чотирьох сполуками.
І0046| В деяких варіантах здійснення, імунологічно ефективна кількість ліпосом за представленим винаходом може бути введена як ад'ювант. В деяких варіантах здійснення, винахід передбачає вакцинну комбінацію, яка містить імунологічно ефективну кількість ад'ювантної композиції та антигенний компонент, як додатково описується нижче.
І0047| Маса виду пацієнта, в кінцевому підсумку, визначає дозу ад'ювантної композиції за представленим винаходом.
І0048| В деяких варіантах здійснення, прийнятна для великої рогатої худоби, коней та дорослих свиней, одна доза містить еквівалент 1000-3000 мкг зовнішнього мембранного компонента (тобто, загальна маса четвертинної амонійної сполуки, стерину, фосфоліпіду, та гліколіпіду), або еквівалент 1000-2000 мкг, або еквівалент 1000-1500 мкг, або еквівалент 1300- 1800 мкг, або еквівалент 1500-2000 мкг.
І0049| Маса ліпосомної композиції не може дорівнювати масі мембранного компонента внаслідок присутності внутрішньої камери, яка може містити імуностимулюючий олігонуклеотид, антигенний компонент, інші імуномодулятори, тощо. Застосування еквівалентів до ліпосомального мембранного компонента дозволяє проводити рівномірне дозування. Схема дозування, наведена в цьому відношенні, гарантує, що тварина великої рогатої худоби отримує, щонайменше, 200 мкг гліколіпіду та приблизно 50 мкг четвертинної амонійної сполуки.
І0О050| В деяких варіантах здійснення прийнятних для овець та кіз, одна доза містить еквівалент 300-1000 мкг зовнішньо мембранного компонента, наприклад, еквіваленти 300-500 мкг, або еквіваленти 400-500 мкг, або еквіваленти 4400-1000 мкг, або еквіваленти 5000-1000 мкг, або еквіваленти 600-1000 мкг, або еквіваленти 600-800 мкг.
І0О51) В деяких варіантах здійснення прийнятних для поросят, собак та кішок, одна доза містить еквівалент 100-400 мкг зовнішньо мембранного компонента, або еквівалент 100-200 мкг, або еквівалент 100-150 мкг, або еквівалент 130-180 мкг, або еквівалент 150-200 мкг. 0052) В деяких варіантах здійснення прийнятних для птиці, одна доза містить еквівалент 50-
Ко) 200 мкг зовнішньо мембранного компонента, або еквівалент 50-100 мкг, або еквівалент 50-75 мкг, або еквівалент 65-90 мкг, або еквівалент 75-100 мкг, або еквівалент 75-150 мкг.
ІЇ0053| Внутрішня сполука ліпосоми може містити антигени або інші імуномодулюючі молекули. В деяких варіантах здійснення, такі імуномодулюючі молекули, прийнятні для внутрішньої камери, включають, але не обмежуються цим, екстракти антигенів, субодиниці, синтетичні речовини, цілі клітини або віруси.
ІЇ0054| В деяких варіантах здійснення, активні фармацевтичні речовини можуть бути запаковані всередину ліпосоми. 0055) Імуномодулятори, які можуть бути запаковані, також включають, але не обмежуються цим, гмлТ, МРГ А, альфа-Са!-Сег, токсин холери, І Р5, ліпотейхоєві кислоти, полі ІС, флагелін, зимозан, хітин та модифіковані хітинові форми, бета-глюкани, авридин, інулін та модифіковані інулінові форми, етилен оксибурштинові ангідриди, плюронілові речовини, такі як І 121 та 1141, агоніст СО40, агоніст ТІ К5, а також будь-який агоніст ТІК, М-С5Е. 0056) В деяких варіантах здійснення, ліпосоми можуть нести різні молекули, які можуть використовуватись як маркери, включаючи, але не обмежуються цим, О5рА, О5рс, пертактин та інші.
І0057| В деяких варіантах здійснення, ад'ювантна композиція за представленим винаходом додатково містить імуностимулюючі олігонуклеотиди, такі як, наприклад, Сро олігодезоксирибонуклеотиди або імуностимулюючі олігорибонуклеотиди (ОКМ5), або їх химери.
Прийнятні необмежуючі приклади Сро олігодезоксирибонуклеотидів є проілюстрованими в ЗЕО
БО ІО МО 1-10, прийнятні необмежуючі приклади ОЕМ є представленими в ЗЕО ІЮ МО 11-13, та прийнятний необмежуючий приклад химерного імуностимулюючого олігонуклеотида є представленим в 5ЕО ІЮ МО: 14.
І0ОО58) Дані імуностимулюючі олігонуклеотиди, в деяких варіантах здійснення, є присутніми у внутрішній камері ліпосоми. 0059) В деяких варіантах здійснення, імуномодулюючі олігонуклеотиди є асоційованими із зовнішньою поверхнею ліпосоми. Асоціація може відбуватися за рахунок водневих зв'язків, електростатичних зв'язків, ліпофільних зв'язків, Ван-дер-Ваальских сил, та подібного.
І0О60О| В деяких варіантах здійснення, негативно заряджений імуностимулюючий олігонуклеотид є асоційованим із зовнішньою поверхнею ліпосоми за рахунок взаємодії з бо позитивно зарядженим четвертинним атомом азоту в четвертинній амонійній сполуці.
(00611 Сро олігодезоксирибонуклеотиди (також називаються як Сро дезоксирибонуклеотиди або Ср ОМ) представляють собою нещодавно описаний клас фармакотерапевтичних агентів, які характеризуються присутністю неметильованого Со динуклеотиду в контекстах специфічної нуклеотидної послідовності (Сро мотив). (Напвзеї ТТ,
Вагпез РУ (еаз): Мем Огидв Тог Азіпта, АйПегду та СОРО. Ргод Кезріг Кез. Вазеї, Кагдег, 2001, мої
З1, рр 229-232, який є включеним в даний документ у вигляду посилання). Дані мотиви Сро не спостерігаються в еукаріотичній ДНК, в якій СО динуклеотиди пригнічуються та, коли присутні, як правило, метилюються, але є присутніми в бактеріальній ДНК, якій вони надають імуностимулюючі властивості.
І0062| В деяких варіантах здійснення, ад'юванти за представленим винаходом використовують так званий імуностимулюючий олігонуклеотид, більш переважно, модифіковані імуностимулюючі олігонуклеотиди Р- класу, ще більш переважно, Е-модифіковані олігонуклеотиди Р-класу. Імуностимулюючі олігонуклеотиди Р - класу представляють собою олігодезоксирибонуклеотид Сро, який характеризується присутністю паліндромів, як правило, довжиною 6-20 нуклеотидів. Олігонуклеотиди Р-класу мають здатність спонтанно самозбиратися в конкатемери, або іп міго, та/або іп мімо. Дані олігонуклеотиди, в точному значенні, є одноланцюговими, але присутність паліндромів дозволяє утворення конкатемерів або, можливо, стовбурово-петлевих структур. Загальна довжина імуностимулюючих олігонуклеотидів Р- класу становить від 19 до 100 нуклеотидів, наприклад, 19-30 нуклеотидів, 30-40 нуклеотидів, 40-50 нуклеотидів, 50-60 нуклеотидів, 60-70 нуклеотидів, 70-80 нуклеотидів, 80-90 нуклеотидів, 90-100 нуклеотидів.
І0063| В одному аспекті винаходу імуностимулюючий олігонуклеотид містить 5 ТІК активаційний домен та, щонайменше, дві паліндромічні ділянки, причому одна паліндромічна ділянка представляє собою 5' паліндромічну ділянку з, щонайменше, 6 нуклеотидів в довжину, та з'єднану з 3 паліндромічною ділянкою з, щонайменше, 8 нуклеотидів в довжину, або безпосередньо, або через спейсер. (0064) Імуностимулюючі олігонуклеотиди Р-класу можуть бути модифікованими відповідно до методик, відомих в даній галузі. Наприклад, .«-модифікація відноситься до йод- модифікованих нуклеотидів. Е-модифікація відноситься до етил-модифікованого(их)
Зо нуклеотиду(ів). Таким чином, Е-модифіковані імуностимулюючі олігонуклеотиди Р-класу представляють собою імуностимулюючі олігонуклеотиди Р-класу, в яких, щонайменше, один нуклеотид (переважно 5" нуклеотид) є етильованим. Додаткові модифікації включають приєднання 6- нітробензімідазолу, О-метилування, модифікацію з проініл-дО, інозинову модифікацію, приєднання 2-бромвінілу (переважно, до уридину).
І0065| Імуностимулюючі олігонуклеотиди Р-класу також можуть містити модифікований міжнуклеотидний зв'язок, який включає, але не обмежуються цим, фосфодискладноефірні зв'язки та фосфоротіоатні зв'язки. Олігонуклеотид за представленим винаходом можуть бути синтезовані або отримані з комерційних джерел.
І0066| Олігонуклеотиди Р-класу та модифіковані олігонуклеотиди Р-класу є, крім того, розкритими в опублікованій заявці РСТ Мо УУМО2008/068638, опублікованій 12 червня 2008 року.
Прийнятні необмежуючі приклади модифікованих імуностимулюючих олігонуклеотидів Р-класу є представленими нижче (в 5ЕО ОО МО 1-10, и" стосується фосфоротіоатного зв'язку та " " стосується фосфодискладноефірного зв'язку). В 5ЕО ІЮО МО 11-14, всі зв'язки представляють собою або фосфодискладноефірні або фосфоротіоатні зв'язки.
ЗЕОІЮМО:15 о сало ст сто спис сао а з
ЗЕОІрМО 25 го стало А оса сао з міопія шмонси чонсимонси шмонсиснонсионснонсноноиси ше
ЗЕОІрМО:45Оу стат Ас сассасоасса з
ЗЕ МО:55 Є счтд'чсал'сс Алло саса сао ат
ЗЕОЮ МО: 6 5 ОСА тала Осс са сс ат
ЗЕОІ0 МО:7 5 БЕ срАчсттосАл с аа аа са З
ЗзЕОІЮМО:85О сота с сс сао ат з віхедвик он: и носимо си чонси шмонсиснонсиснононснонош си с
ЗЕОІЮМО: 105 сл сет сло са сао з зЗЕОЮ МО: 11 У-ООСООоСООСООВООСЮСОО-3"
ЗЕО ІЮ МО: 12 У-ООАООАООАООАООАООдОО-З
ЗЕО ІО МО: 13 У-АААСЯаСиСАаССААдасСАа-З! 5ЕО Ір МО: 14 5-4ТтаСсасатасасататататиз ОкстОстОатататат-з"
І0067| Доза імуностимулюючого олігонуклеотиду для застосування в ад'ювантних бо композиціях в кінцевому підсумку залежить від призначеного виду.
0068) Наприклад, в деяких варіантах здійснення прийнятних для великої рогатої худоби, овець або дорослих свиней, одна доза ад'ювантної композиції за представленим винаходом буде містити від приблизно 50 до 400 мкг (наприклад, 50-300, або 100-250 мкг, або від приблизно 50 до приблизно 100 мкг для дорослих свиней та від приблизно 100 до приблизно 250 мкг для великої рогатої худоби) імуностимулюючого олігонуклеотида.
І0069)| В деяких варіантах здійснення прийнятних для тварин-компаньонів або поросят, одна доза ад'ювантної композиції за представленим винаходом буде містити від приблизно 5 до 100 мкг (наприклад, 10-80 мкг, або 20-50 мкг) імуностимулюючого олігонуклеотида.
І0070| В деяких варіантах здійснення прийнятних для домашньої птиці, одна доза ад'ювантної композиції за представленим винаходом буде містити від приблизно 0,1 до приблизно 5 мкг (наприклад, 0,5-3 мкг, або 0,9 - 1,1 мкг) імуностимулюючого олігонуклеотида.
ІЇ0071| Способи одержання ліпосом є добре відомими в даній галузі. Коротко кажучи, компоненти ліпосоми розчиняють та змішують в органічному розчиннику, наприклад, метиленхлориді, та потім розчинник видаляють шляхом висушування для того, щоб одержати плівку. Плівку пізніше повторно гідратують, використовуючи водне середовище (наприклад, воду або буфер), яке необов'язково містить сполуками, які повинні бути включені всередину внутрішньої камери ліпосом. В різних варіантах здійснення, сполуки можуть включати імуностимулюючі олігонуклеотиди, інші імуномодулятори, та/або антигенний компонент.
І0072| Стадія повторної гідратації супроводжується обробкою ультразвуком та/або екструзією для зменшення розміру пухирців, які утворюються під час стадії повторної гідратації. 0073) Існують дві основні методики обробки ультразвуком: зондова/накінечникова обробка ультразвуком та обробка ультразвуком в ванні. Зондова/накінечникова обробка ультразвуком має високу енергію споживання, яка призводить до значної генерації тепла, тому необхідним є застосування крижаної бані для того, щоб підтримувати температуру ліпосомальної дисперсії для того, щоб попередити розкладання ліпіду. Альтернативно, енергія ультразвуку може бути опосередковано розподілена на ліпосомну суспензію, використовуючи ультразвукову ванну, де температуру легше контролювати, але втрати енергії є порівняно високі. Обробка ультразвуком, як правило, дає невеликі пухирці (710 нм), які спонтанно зливаються протягом часу, що послаблює стрес високої кривизни мембрани.
Зо І0074| Спосіб екструдування включає пропускання ліпосомної суспензії через мембрану з визначеним розміром пор. Даний спосіб є переважним, оскільки визначений розмір пор сприяє однорідності розміру частинок в межах ліпосомної популяції, хоча екструдування нижче температури ліпідного переходу може бути складним внаслідок жорсткості мембрани. Ліпосомні суспензії часто піддають екструзії декілька разів, щоб досягти низької полідисперсності у кінцевому продукті. 0075) Бажаним може бути отримати стабільний протягом зберігання препарат з ліпосом. В деяких варіантах здійснення, такий стабільний протягом зберігання препарат з ліпосом створюють шляхом висушування при заморожуванні. Коротко кажучи, суху плівку, описану вище, повторно гідратують у водному буфері, який містить кріопротектор та ліопротектор, такий як сахароза, трегалоза, або їх комбінації. В інших варіантах здійснення, кріопротектор та ліопротектор додають після стадії повторної гідратації. Повторно гідратований препарат потім ліофілізують, використовуючи способи добре відомі в даній галузі. Отриманий в результаті ліофілізований препарат є стабільним протягом зберігання. В потрібний час, він може бути повторно гідратованим прийнятним буфером.
І0076| Додаткові імуномодулятори, включаючи, але не обмежуються цим, імуностимулюючі олігонуклеотиди та антиген(и) можуть додаватись або перед висушуванням при заморожуванні, або під час кінцевого приготування.
І0077)| В деяких варіантах здійснення, антигени змішуються з ліпосомальною композицією після того, як ліпосоми за представленим винаходом є відновленими. В інших варіантах здійснення, ліпосоми, додаткові імуномодулятори та антигенний компонент одержують та сушать разом. 0078) В деяких варіантах здійснення, додаткові імуностимулюючі сполуки є присутніми в композиціях за представленим винаходом. Такі додаткові імуностимулюючі сполуки можуть бути присутніми всередині внутрішньої камери ліпосом, та/або асоційованими із зовнішньою поверхнею ліпосом, та/або незалежно від ліпосом, в ад'ювантних композиціях за представленим винаходом.
ІЇ0079| Прийнятні необмежуючі приклади таких додаткових імуностимулюючих сполук включають, але не обмежуються цим, декілька класів ад'ювантів, таких як мінеральні солі, наприклад, алюмокалієві квасці, гідроксид алюмінію, фосфат алюмінію та фосфат кальцію; бо поверхнево-активні агенти та мікрочастинки, наприклад, неіонні блок-полімерні поверхнево-
активні речовини, віросоми, сапоніни (наприклад, Осії А, 25-21 та ОРІ-0100), протеосоми, імунні стимулюючі комплекси, спів-хелати, піридин, вітамін А, вітамін Е; бактеріальні продукти, такі як
КІВІ ад'ювантна система (Кірі Іпс.), каркас клітинної стінки Мусобасіегішт рпїеї (ОеїохФ)),, мураміл дипептиди (МОР) та трипептиди (МТР), монофосфорилліпід А (МРГІА), бацила
Кальметта -- Герена (БЦЖ), теплові лабільні ентеротоксини Е. сої), холерний токсин, трегалози диміколат, цитокіни та гормони, наприклад, інтерлейкіни (1-1, 11 -2, 11/-6, 1-12, 1-15, 11-18), гранулоцитарно-макрофагальний колонієстимулюючий фактор, дегідроепіандростерон, 1,25- дигідрокси вітамін 03; поліаніони, наприклад, декстран; поліакрили (наприклад, поліметилметакрилат, КАРБОПОЛФОЗА Р); носії, наприклад, правцевий анатоксин, дифтерійний анатоксин, субодиниця В холерного токсину, мутантний тепловий лабільний ентеротоксин ентеротоксигенної Е. соїї (гмлТ), протеїни теплового шоку; емульсії олія-у-воді, наприклад,
АМРНІСЕМФ (Нуагопісз5, О5А); полікатіонні носії (наприклад, ОЕАЕ декстран або ОАЕ декстран), та емульсії вода-в-олії, такі як, наприклад, та неповні ад'юванти Фрейнда.
ІЇ0080| Інші прийнятні імуномодулятори включають Альфа-СаІ-Сег. І РБ, ліпотейхоєві кислоти, полі ІС, флагелін, зимозан, хітин та модифіковані хітинові форми, бета-глюкани, авридин, інулін та модифіковані інулінові форми, етиленоксибурштинові ангідриди, плюронілові речовини, такі як 121 та 1141, агоніст СО40, агоніст ТІ К5, а також будь-який агоніст ТІ агоніст.
Антигени та захворювання
ЇОО81| В деяких варіантах здійснення, ліпосомальна ад'ювантна композиція за представленим винаходом може бути скомбінована з антигенним компонентом, таким чином утворюючи вакцинну композицію за представленим винаходом. Антигенний компонент вакцин за представленим винаходом може бути присутнім всередині внутрішньої камери ліпосом, та/або асоційованим із зовнішньою поверхнею ліпосом, та/або незалежно від ліпосом. (0082) В деяких варіантах здійснення, вакцинна композиція фактично не містить сапонін. В додаткових варіантах здійснення, вакцинна композиція фактично не містить дезоксирибонуклеотид Сро. 0083) Переважними є варіанти здійснення, в яких вакцинна композиція фактично не містить дезоксирибонуклеотид Сро, якщо антиген у вакцині містить цілий вірус з олРНК (вірус з або
Зо (УолЛРНК, або (-олРНК), послідовності яких є імуностимулюючими, незважаючи на спрямований ТІ К7/8. Такі стимулюючі послідовності ТІ КЕ 7/8 включають поліо або (зИ-збагачені олЛРНК послідовності. Неї Е, Нетпті Н. еї аї., 2004. Зсіепсе 303(5663):1526-9. бівроїа 55., Каївно
Т. ета, 2004. бсіеєпсе 303(5663):1529-31. (0084 Віруси, які містять такі послідовності включають, але не обмежуються цим, різні віруси грипу (наприклад, вірус грипу великої рогатої худоби, вірус грипу собак, вірус грипу коней, вірус свинячого грипу та подібні). В конкретних переважних варіантах здійснення, антигенний компонент вакцини фактично вільний від Ср ОМ містить вірус грипу. 0085) Антигенний компонент може включати, в різних ілюстративних варіантах здійснення, антигени великої рогатої худоби, козині антигени, свинячі антигени, антигени домашніх птахів, антигени коней, собачі антигени, антигени коней та котячі антигени.
І0086| Антигени можуть представляти собою будь-яку з широкого діапазону речовин, здатних до вироблення бажаної імунної відповіді у суб'єкта, включаючи, але не обмежуються цим, один або декілька вірусів (інактивованих, ослаблених, та модифікованих живих), бактерій, паразитів, нуклеотидів (включаючи, але не обмежуються цим, антигени на основі нуклеїнової кислоти, наприклад, ДНК вакцини або мРНК вакцини), полінуклеотидів, пептидів, поліпептидів, рекомбінантних протеїнів, синтетичних пептидів, протеїнових екстрактів, клітин (включаючи, пухлинні клітини), тканин, полісахаридів, вуглеводів, жирних кислот, ліпотейхоєвої кислоти, пептидогліканів, ліпідів, або гліколіпідів, індивідуально або в будь-якій їх комбінації.
І0087| Антигени, які використовуються з ад'ювантами за винаходом також включають імуногенні фрагменти нуклеотидів, полінуклеотидів, пептидів, поліпептидів, які можуть бути виділені з організмів, зазначених в даному документі, або хімічно або біологічно виготовлені. (0088) Живі, модифіковані живі та ослаблені вірусні штами, які не викликають захворювання у суб'єкта були виділені у невірулентній формі або були ослаблені, використовуючи способи, добре відомі в даній галузі, включаючи серійний пасаж в прийнятній клітинній лінії або вплив ультрафіолетового світла або хімічного мутагену. Інактивовані або вбиті вірусні штами представляють собою ті, які були інактивованими, використовуючи способи, відомі кваліфікованому фахівцю в даній галузі, включаючи обробку формаліном, бета-пропіолактоном (ВРУ), пероксидами, бінарним етиленіміном (ВЕЇ), стерилізуючим випромінюванням, теплом або іншими такими способами. 60 І0089| Два або більше антигенів можуть бути поєднаними для того, щоб отримати полівалентну композицію, яка може захистити суб'єкт проти широкого діапазону захворювань, які викликаються патогенами. На даний час, комерційні виробники вакцин, а також кінцеві споживачі, віддають перевагу полівалентним вакцинним продуктам. Незважаючи на те, що звичайні ад'юванти часто обмежуються різними антигенами, з якими вони можуть ефективно використовуватись (або моновалентно, або полівалентно), ад'юванти, описані в даному документі, можуть ефективно використовуватись з широким діапазоном антигенів, як моновалентно, так і полівалентно. Таким чином, антигени, описані в даному документі, можуть поєднуватись в єдину композицію, яка містить ад'юванти, описані в даному документі.
ЇО090О| Приклади бактерій, які можуть використовуватись, як антигени з ад'ювантними композиціями, описаними в даному документі, включають, але не обмежуються цим,
Асіпеюбасієг саІсоасеїїсив5, Асеюбасієг разегціапив, Асііпорбасійи5 ріеигорпештопіає, Аеготопав5
Нуагорніа, Аїїсусіобасійи5 асідосаІдагпиє, Атаедіориє шідідиє, ВасйШи5 ритійшв5, Васйив5 вівагоїпепторнйив5, Васійи5 5иБій5, Васійши5 ептосаїепшацв5, Вогаєїейа Бгопспізеріїса,
ВигКПоїдетіа серасіа, ВиїкпоїЇдетіа діштає, Сатру!обасієг соїї, Сатруобасієг Тейи5, Сатруіобасівг |єЇшпі, Сатруобасієг Нуоіпієзвіїіпаії5, СнІатуаїйа реійнасі, Спіатуаїйа іаспотаїів, Спіатуаорнійїа 5рр.,
Спготобасієтішт мізсовит, ЕгузіреЇоїнгіх пивзіорайпіває, І івіейа топосуїодепевз, ЕНпісніа сапів,
Еб5сПепіснпіа соїї, Наеторпйи5 іпПшепгає, Наеторнпійй5 5отпив, Неїїсобасіег 5иі5, Іамвопіа іпігасеїПІшіагіх, Іедіопенйа рпешторпПіййа, Могахеїїза 5р., Мусобрасіййт ромі5, Мусоріазта пуорпеитопіає, Мусоріазта тусоїде5 зирер. тусоїдез І С, Сіовігідіит рептгіпдепв, Одогірасієг депіісапі5, РавієгеїПа (МаппПеїтіа) наетоїуїїса, Разієшгейа типосіда, Рпоютабаиз Іштіпезсепв,
Рогрпуготопах ашає, Рогрпуготопаз діпдімаїї5, Ротрпуготопаз заїїмоза, Ргоріопібасієтіит аспев,
Ргоїєиє миЇдагіїх, Рвепдотопаб5 мізсопвзіпепбіїх, Рвзепдотопаб5 аєгидіпоза, Рзепдотопав
ТПогезсепе С9, Реєепдотопа5 Пиогезсепе 5ІКМ/У1, Реєидотопавз їаді, Реепдотопав Ішеоїа,
Рзепдотопавх оІеомогап5, Рзепдотопав 5р В11-1, Аїсаїїде5 ешгорпив5, РзусПпгобасіеєг іттобіїв,
Кіскейвіа ргоу/а?екії, Кіскейвіа гіскейбії, ЗаІтопеїІа епіегіса всі серологічні варіанти, включаючи, наприклад: Заітопейа епіегіса Турпітигішт, ЗаіІтопеїйа епієгіса Вопоогі, ЗаІтопейПа епієгіса бибійп,, заіІтопейПа епіегіса СпоіІегаєзиці5, та ЗаІтопеїйІа епієгіса Мемрогі, Зегтайна тагсезсепв, зріпціпа ріаїепвізх, тарпуіїососсиб5 ацгеив5, 5іарпуіососсив ерідептідіє, єтарпуіососсив ПНуїсив, зігеріотусев абриб5, бігеріотусе5 сіппатопеив, бйМеріососсив регіз, Зперіососси5 виців,
Зо зігеріотусев ехіоїїа(е5, Бігеріютусевз зсабієз, ЗиМоЇорив асідосаідатіии5, Зуеспосувіїв 5р., Мірто споїегає, Во!їтеїїа ригдаоетгі, Тееропета аепіїсоїа, Тгеропета тіпшит, Теропета рпадедепів,
Тгтеропета геїіпдеп5, Тгеропета міпсепії, Тгеропета раїїадіит, Тгиерегейа руодепе5 та
І еріозріга зресіеєв5, такі як відомі патогени І еріозріга сапісоїа, Геріозріга дгірроїуроза, І еріозріга
Нагадаю, І еріозріга рогареїегзепії пага|о-ромів, І еріозріга рогареїегзепії пага|о-рга)йно, І еріозріга іпіеггодапв, Геріозріга ісїегопаетоггтпадіає, Іеріозріга ротопа, та І еріозріга бБгаїбзіама, та їх комбінації. 0091) Як інактивовані віруси, так і ослаблені живі віруси можуть використовуватись в ад'ювантних композиціях. Деякі приклади вірусів, які можуть використовуватись як антигени включають, але не обмежуються цим, пташині герпесвіруси, герпесвіруси великої рогатої худоби, собачі герпесвіруси, герпесвіруси коней, вірус котячого вірусного ринотрахеїту, вірус хвороби Марека, овечі герпесвіруси, свинячі герпесвіруси, вірус епизоотичної діареї свиней (РЕБУ), вірус псевдосказу, пташині параміксовіруси, респіраторно-синцитіальний вірус великої рогатої худоби, вірус чумки собак, собачий паравірус грипу, собачий аденовірус, собачий парвовірус, паравірус З великої рогатої худоби грипу, овечий вірус парагрипу 3, вірус чуми, вірус прикордонної хвороби овець, вірус вірусної діареї - хвороби слизових великої рогатої худоби (ВМОМ), ВМОМ типу І, ВМОМ типу ІІ, вірус класичної чуми свиней, пташиний вірус лейкозу, вірус імунодефіциту великої рогатої худоби, вірус лейкозу великої рогатої худоби, туберкульоз великої рогатої худоби, вірус інфекційної анемії коней, вірус імунодефіциту кішок, вірус лейкозу котячих (Ре М), вірус ньюкаслської хвороби, овечий вірус прогресуючої пневмонії, овечий вірус легеневої аденокарциноми, собачий коронавірус (ССУ), пантропний ССУ, собачий респіраторний коронавірус, коронавірус великої рогатої худоби, котячий каліцивірус, котячий кишковий коронавірус, котячий вірус інфекційного перитоніту, свинячий вірус епідемічної діареї, свинячий вірус гемагглютинуючого енцефаломієліту, свинячий парвовірус, свинячий цирковірус (РСУМ) типу І, РСМ типу ІІ, свинячий вірус репродуктивний та респіраторний синдром (РКК5), вірус трансмісивного гастроентерита, корона вірус індюків, вірус ефемерної лихоманки великої рогатої худоби, вірус сказу, ротовірус, вірус везикулярного стоматиту, лентивірус, пташиний грип, риновіруси, вірус грипу коней, вірус свинячого грипу, вірус собачого грипу, вірус котячого рипу, вірус грипу людини, вірус східного енцефаліту коней (ЕЕЕ), вірус венісуельського енцефаліту коней, вірус західного Нілу, вірус західного енцефаліту коней, вірус імунодефіциту бо людини, вірус папіломи людини, вірус вітряної віспи, вірус гепатиту В, риновірус та вірус кору,
та їх комбінації.
І0092| Приклади пептидних антигенів включають ВогаеїегПйа Бгопспізеріїса рб8, спЕн, пептиди ІДЕ, Ееї а1, та ракові антигени, та їх комбінації. Приклади інших антигенів включають нуклеотиди, вуглеводи, ліпіди, гліколіпіди, пептиди, жирні кислоти, ліпотейхоєву та тейхоєву кислоту та пептидоглікани, та їх комбінації.
І0093| Приклади паразитів, які можуть використовуватись як антигени з ад'ювантними композиціями, описаними в даному документі, включають, але не обмежуються цим, Апаріазта,
ЕРазсіоїа Пераїйійса (печінковий сисун звичайний), Соссідіа, Еїтегіа 5рр., Меозрога сапіпит,
Тохоріахзта допаїйїї, «іагайа, Оігойагіа (серцевий гельмінт), Апсуїовіота (анкілостоматиди),
Соорегіа, Наетопспи5 сопіогіи5 (гемонхус), О5іегіадіа о5іейаді (шлунковий гельмінт),
Оістуосаціивз мімірагои5 (легеневі гельмінти), Ттгурапозота 5рр., І еізптапіа 5рр., Тгіспотопав5 5рр., Стуріозрогідішт раг/шт, Варевзіа, Зспізіозота, Таєпіа, 5ігопдуіоіїдев5, Азсагів, ТгіспіпеПа,
Загсосузіїх, Натітопаїа, та Іборбога, та їх комбінації. Крім того, розглядаються зовнішні паразити, включаючи, але не обмежуються цим, кліщі, включаючи види Іходе5, КпПірісерпа!ш5,
Рептасепіог, Атбіуотта, Воорпійи5, Нуаїтта та Наетарпузаї 5, та їх комбінації. (0094) Кількість антигена, використовуваного для індукування імунної відповіді будуть варіювати в значній мірі в залежності від використовуваного антигена, суб'єкта та рівня бажаної відповіді, та може бути визначеною кваліфікованим фахівцем у даній галузі. Для вакцин, які містять модифіковані живі віруси або ослаблені віруси, терапевтично ефективна кількість антигена, як правило, знаходиться в діапазоні від приблизно 102 інфекційної дози в тканинній культурі (ТСІБ)5О до приблизно 1010 ТСІО5О, включно. Для багатьох таких вірусів, терапевтично ефективна доза, як правило, знаходиться в діапазоні від приблизно 102 ТСІЮ5О до приблизно 108 ТСІО5О, включно. В деяких варіантах здійснення, діапазони терапевтично ефективних доз становлять від приблизно 103 ТСІЮО5О до приблизно 106 ТСІОЮО5О, включно. В деяких інших варіантах здійснення, діапазони терапевтично ефективних доз становлять від приблизно 104 ТСІО50О до приблизно 105 ТСІО5О, включно.
І0095| Для вакцин, які містять інактивовані віруси, терапевтично ефективна кількість антигена, як правило, становить щонайменше приблизно 100 відносних одиниць на дозу, та часто в діапазоні від приблизно 1 000 до приблизно 4 500 відносних одиниць на дозу, включно.
В інших варіантах здійснення, терапевтично ефективна кількість антигена знаходиться в діапазоні від приблизно 250 до приблизно 4 000 відносних одиниць на дозу, включно, від приблизно 500 до приблизно З 000 відносних одиниць на дозу, включно, від приблизно 750 до приблизно 2 000 відносних одиниць на дозу, включно, або від приблизно 1 000 до приблизно 1 500 відносних одиниць на дозу, включно.
І0096| Терапевтично ефективна кількість антигену в вакцинах, які містять інактивовані віруси, також можуть вимірюватись по відношенню до відносної активності (КР) на мл.
Терапевтично ефективна кількість часто знаходиться в діапазоні від приблизно 0,1 до приблизно 50 КР на мл, включно. В інших варіантах здійснення, терапевтично ефективна кількість антигена знаходиться в діапазоні від приблизно 0,5 до приблизно 30 КР на мл, включно, від приблизно 1 до приблизно 25 ЕР на мл, включно, від приблизно 2 до приблизно 20
ЕР на мл, включно, від приблизно З до приблизно 15 ЕР на мл, включно, або від приблизно 5 до приблизно 10 ЕР на мл, включно.
І0097| Кількість клітин для бактеріального антигену, який вводиться у вакцину, знаходиться в діапазоні від приблизно 1х106 до приблизно 5х1010 колонієутворюючих одиниць (КУО) на дозу, включно. В інших варіантах здійснення, кількість клітин знаходиться в діапазоні від приблизно 1х107 до 5х1010 КУО/доза, включно, або від приблизно 1х108 до 5х1010 КУО/доза, включно. В ще інших варіантах здійснення, кількість клітин знаходиться в діапазоні від приблизно 1х102 до 5х1010 КУО/доза, включно, або від приблизно 1х104 до 5х109 КУО/доза, включно, або від приблизно 1х105 до 5х109 КУО/доза, включно, або від приблизно 1х106 до
БО 5х109 КУО/доза, включно, або від приблизно 1 х 106 до 5 х 108 КУО/доза, включно, або від приблизно 1х107 до 5х109 КУО/доза, включно. (0098) Кількість клітин для паразитарного антигену, який вводиться у вакцину, знаходиться в діапазоні від приблизно 1х102 до приблизно 1х1010 на дозу, включно. В інших варіантах здійснення, кількість клітин знаходиться в діапазоні від приблизно 1х103 до приблизно 1х109 на дозу, включно, або від приблизно 1х104 до приблизно 1х108 на дозу, включно, або від приблизно 1х105 до приблизно 1х107 на дозу, включно, або від приблизно 1х106 до приблизно 1х108 на дозу, включно.
Ексципієнти 0099) Ад'ювантна композиція та/або вакцинні композиції можуть включати фармацевтично бо прийнятний носій. Як використовується в даному документі, "фармацевтично-прийнятний носій"
включає будь-який та всі розчинники, дисперсійні середовища, покриття, стабілізуючі агенти, розріджувачі, консерванти, антибактеріальні та протигрибкові агенти, ізотонічні агенти, агенти, які сповільнюють адсорбцію, та подібні. Носій(ї) повинен/повинні бути "прийнятним(ими)" в сенсі сумісності з іншими компонентами композицій та не шкідливими щодо суб'єкта. Як правило, носії повинні бути стерильними та не містити пірогенів, та їх вибирають в залежності від способу введення, який буде використовуватися. Кваліфікованим фахівцям в даній галузі є добре відомим, що для переважних композицій фармацевтично прийнятний носій, який міститься в композиціях представляє собою ті фармацевтичні носії, які затверджені відповідно до нормативних актів, оприлюднених Міністерством сільського господарства Сполучених Штатів (США) або Адміністрацією США по харчовим продуктам и лікарським речовинам, або аналогічною державною агенцією в інших країнах крім США. Таким чином, фармацевтично прийнятний носій для комерційного виробництва композицій представляє собою носій, який вже є затвердженим або буде затвердженим відповідним державним органом в США або в іноземній державі.
Введення композицій 00100) Розміри доз композицій, як правило, знаходяться в діапазоні від приблизно 1 мл до приблизно 5 мл, включно, в залежності від суб'єкта та антигена. Наприклад, для собачих або котячих, як правило, використовуваною є доза приблизно 1 мл, тоді як у великої рогатої худоби, як правило, використовуваною є доза приблизно 2-5 мл. Однак, дані ад'юванти також можуть бути сформульованими в мікродозах, при цьому використовуватись можуть дози приблизно 100 мкл.
ЇО0101| Способи введення для ад'ювантних композицій включають парентеральне, пероральне, ороназальне, інтраназальне, інтратрахеальне, підшкірне, внутрішньом'язове, транскутантне, інтрадермальне, внутрішньочеревне, внутрішньоочне, внутрішньовенне введення та введення в яйце. Будь-який прийнятний пристрій можуть використовувати для введення композицій, включаючи шприці, крапельниці, безголкові ін'єкційні пристрої, пластирі, та подібні. Спосіб та пристрій, які вибирають для застосування будуть залежати від композиції ад'юванта, антигена та суб'єкта, та вони є добре відомими кваліфікованому фахівцю.
Застосування композицій 00102) Ад'ювантні композиції, описані в даному документі, є легкими стосовно виготовлення та стабільними протягом, щонайменше, 18 місяців при 4 "С. Препарати можуть бути стабільними, наприклад, протягом приблизно 18 місяців, або від приблизно 18 до приблизно 24 місяців при 4 "С. В іншому варіанті здійснення препарати є стабільними протягом, щонайменше, приблизно 24 місяців при 4 "С. Прискорені процедури дослідження також показують, що препарати, описані в даному документі, є стабільними протягом, щонайменше, двох тижнів при 37 "С, що відповідає приблизно 24 місяцям при 4 "С. 00103) Ад'ювантні композиції, описані в даному документі, можуть безпечно та ефективно бути введені широкому колу суб'єктів. Несподівано було встановлено, що ад'ювантні композиції, описані в даному документі, демонструють покращення безпеки у порівнянні з іншими ад'ювантними композиціями.
І00104| Наступні приклади є представленими як ілюстративні варіанти здійснення, але вони не повинні розглядатися як такі, що обмежують обсяг винаходу. Багато змін, варіантів, модифікацій та інших використань та застосувань даного винаходу будуть очевидними для кваліфікованого фахівця в даній галузі.
ПРИКЛАДИ
Приклад 1 - Характеристика ліпосом 00105) ОСКІ. ліпосоми (які містять ОСА, холестерин, Вау?К1005 та лецитин) доводили до кінцевої концентрації 50, 50, 100 та 100 мкг/мл ОБА, холестерина, К1005 та соєвого лецитина, відповідно. 00106) Сполуки додавали в 250 мл круглодонну колбу та заповнювали до кінцевого об'єму 5 мл хлороформу безводного класу (Зідта-Аїагісй, Рооіє, ЮБогбеї, ОК), використовуючи 1 мл розчинника піпеточним дозатором загетмМ (Зідта-Аїйгісп). Розчинник видаляли, використовуючи роторний випарник (Виспі, Ріам/ї, Зм/йгепапа) при 55"С в вакуумі (КМЕ
Мешибрегаєг, Уміпеу, Охгогазпіге, ОК) протягом 1 години до утворення сухої білої ліпідної плівки.
Ліпосоми повторно гідратували або подвійною дистильованою водою (даН2О) з власного модифікованого очищувача води Орійоп 3, включаючи зворотний осмос для надвисокої чистоти (ЕГ ОА І арумагег, УМусотре, ВисКіпопатезпіге, ОК), або фосфатним сольовим буфером (РВ5;
Зідта-Аїагісп), відновленим з таблеток з 4аНгО.
І00107| Після повторної гідратації, ліпосоми обробляли насадкою піпетки з шириною отвору бо 1 мл (ММУК, Гийегмогій, І еісезієгпіге, ОК) для зменшення фрагментації. Потім, ліпосомну суспензію обробляли ультразвуком у ванні (Загозе 5сіепійіс Іпбігитепів, РегімаІеє, МідаІезех, ОК) протягом 1 години та/або екструдували аж до 3-х разів через 100 нм полікарбонатну нуклеопорову трекову мембрану У/пайтапф (бідта-Аагісп) з використанням міні-екструдерної кювети, оснащеної двома 1 мл шприцями. Полікарбонатна мембрана збоку контактувала з 10 мм підложкою фільтра. 00108) Оброблені ультразвуком ОСКЇГ. ліпосоми (середній діаметр - 1,14 мкм) були значно більшими (у 5,44-разів), ніж екструдовані ліпосоми. Обробка ультразвуком з подальшою екструзією в значній мірі не впливала на розмір пухирців в порівнянні з екструдованими зразками (209,6 нм). Полідисперсність екструдованих ліпосом була в 2,10 разів нижчою, ніж оброблених ультразвуком ліпосом. Комбінація обробки ультразвуком та екструзії в значній мірі підвищувала ОСКІ. полі дисперсність в 1,42 рази в порівнянні з екструдованими ліпосомами.
І00109| Для того, щоб оцінити колоїдну стабільність ліпосом у водному розчині, ОСКІ. ліпосоми, гідратовані в аанН2О, оцінювали протягом 4 тижнів. Примітно, приблизний термодинамічний еквівалент 2 років при 4 "С представляє собою зберігання протягом 4 тижнів при 37 "С, таким чином, мотивуючи оцінку стабільності продукту як при 4, так і при 37 "с.
Оцінювали як порожні (-0О0М") ОСІ ліпосоми, так і ОСКІ ліпосоми, навантажені ілюстративним імуностимулюючим олігонуклеотидом Сро ОМ (ї-00М"), для того, щоб визначити вплив аніонних нуклеїнових кислот на катіонну ліпосомальну колоїдну стабільність. В даному документі, ОЮМ навантажували за рахунок повторного гідратування ліпідної плівки розчином ЯаН20О та ООМ. Розмір та полідисперсність ОСКГ. ліпосом, гідратованих в 44Н20О (177 нм, 0,24) були статистично подібними до тих, які гідратовані в РВ5 (210 нм, 0,17). 001101 При 4 "С, 4У-О0М ОСТ. ліпосоми зазнали незначного збільшення в діаметрі в 1,10- та 1,01-разів через 28 днів, відповідно. Ліпосоми, які містять ОЮМ (ї«О0М ліпосоми) (417 нм) були в значній мірі більшими, ніж ліпосоми, які не містять ОЮМ (-О0ОМ ліпосоми) (177 нм).
Аналогічним чином, в незначній мірі зменшувалась полідисперсність в 1,08- та 1,03-рази для ж/-
ООМ ліпосом через 28 днів, відповідно, хоча полідисперсність на 28 день в значній мірі була більш високою в 7ООМ ліпосомах (в 1,23 рази) в порівнянні з -ЮОМ протилежностями. 00111) На противагу цьому, агрегаційна поведінка ліпосом спостерігалася через 28 днів при зберіганні при 37 "С. 4/-О0ОМ ліпосоми зазнали значного збільшення в діаметрі в 3,24 та 2,00 рази через 28 днів, відповідно, але стабілізувалися після 21-ого дня. Хоча «ОМ ліпосоми були більшими (в 1,46 разів на 28-й день), ніж -ОЮОМ ліпосоми внаслідок ОЮМ- опосередкованої компенсації заряду та втрати колоїдної стабільності, тенденції стабільності протягом часу були якісно подібними. Однак, дестабілізація -О0ОМ ліпосом виникала після 7-го дня, тоді як у -«ЮОМ ліпосом, стабільність зберігалася до після 14-го дня. Крім того, полідисперсність /-0О0М ліпосом була статистично подібною через 28 днів, зазнавши значного зменшення в 1,92 та 1,50 рази, відповідно, щодо полідисперсності в порівнянні з пухирцями на 0-й день. 00112) Дані результати свідчать про необхідність розробки технологій для збереження ліпосоми та також свідчать про те, що більше потужні способи обробки ультразвуком та/або екструзією, які в результаті призводять спочатку до меншого розміру ліпосоми, можуть компенсувати початкову агрегацію ліпосом.
ІЇ00113| Порівнювали розміри ліпосом, отриманих з використанням мікрофлюїдизації (Містойнідісв Согр., Моде! 110ЕН) та обробки ультразвуком. Коли стадію обробки ультразвуком замінювали на мікрофлюїдизацію, формулювання давало ліпосоми, які мають середній діаметр приблизно 59 нм.
ІЇ00114| Дані результати демонструють, що ліпосоми, отримані з використанням мікрофлюїдизації, можуть мінімізувати агрегацію ліпосом, які можуть потенційно бути викликані за рахунок додавання ОЮМ або ОРБМ.
Приклад 2 - Стабільність ліофілізованих ліпосом 00115) Ліофілізацію проводили з використанням сублімаційної сушарки Юига-бюр (5Р
Зсіепійіс, Ірем/ісп, ЗМийМОїК, ОК). Зразками наповнювали 10 мл циліндричні типу І скляні флакони для висушування при заморожуванні (Зспой, гапйога, єгапогазпіге, ОК) перед тим, як проводити ліофілізацію. Параметри ліофілізаційного циклу були наступними. Зразки заморожували протягом 30 хвилин при 5 "С, 30 хвилин при -5"7С та 60 хвилин при -40 "С, всі зі швидкістю лінійної зміни 1,00 "С/хв. Первинну сушку проводили протягом 59 хвилин при -37 "С, 59 хвилин при -28"7С, 59 хвилин при -23 "С та 552 хвилин при -21 "С, всі зі швидкістю лінійної зміни 0,50 "С/хв. Вторинну сушку проводили при 20 "С протягом 360 хвилин зі швидкістю лінійної зміни 0,10 "С/хв. Всю сушку проводили з тиском камери 57 мТорр. Альтернативний цикл первинної сушки проводили при 57 мТорр протягом 59 хвилин при -38 "С, 59 хвилин при -38 "С, 59 хвилин при -37 "С та 552 хвилин при -35 "С, всі зі швидкістю лінійної зміни 0,50 "С/хв. бо Ліофілізовані зразки герметично закривали 14 мм фармацевтичного класу бутилкаучуковими пробками для висушування при заморожуванні (Різпег Зсіепіййс, Гопдпрогоцой, ГІ еісевіегвПіге,
ОК) та Рагайт МФ (5ідта-Апагісн).
І00116| Ліопротектори О-маніт, О-(-)-глюкозу, О-(-)-фруктозу, сахарозу, О-(-)-трегалози дигідрат (бідта-Аїдгісй) або Б(ї)-маннозу (Асго5 Огдапісх) розчиняли в данг2оО або РВ5 та додавали до ліпосомної суспензії до кінцевої концентрації 2-4 95 мас./0б6. перед ліофілізацією, як зазначено. 00117) За відсутності цукрів, З44Н20- та РВ5З-регідратовані ліпосоми становили «210 нм перед ліофілізацією. Без ліопротекторів, ліофілізація підвищувала розмір ліпосоми в 3,55- та 6б,05-разів в 4анг2оО- та РВзЗ-регідратованих зразках, відповідно. ОСКІ ліпосоми, повторно гідратовані в Ч4аН2О або РВУ5, не зазнавали значних змін розміру після додавання З 95 сахарози, 4 95 маніта або їх комбінації, що свідчить про те, що агрегація, яка спостерігається після ліофілізації, не була викликана безпосередньо за рахунок додавання ліопротекторайів).
ІЇ00118| Для ліпосом, повторно гідратованих в РВ5, розмір ліпосом в значній мірі збільшувався (в 2,00 рази) тільки в зразках без ліопротектора після циклу заморожування.
Однак, після повного циклу ліофілізації, розмір ліпосоми в значній мірі збільшувався в 6,05-, 3,03-, 5,15- та 4,13-разів для зразків без ліопротектора, з З 95 сахарози, з 4 95 маніта та з комбінацією, відповідно. Аналогічним чином, полідисперсність в значній мірі підвищувалася в 2,61-, 2,61-, 2,85- та 2,79-разів для ОСРЕЇ. без ліопротектора, з З 95 сахарози, з 4 95 маніта та з комбінацією, відповідно, в порівнянні з попередньо ліофілізованими контролями.
Ї00119| Для ліпосом, повторно гідратованих в аанН2О, розмір пухирця після циклу заморожування збільшувався в значній мірі протягом попередньої ліофілізації контролів в 17,90- та 11,45 разів для ліпосом без ліопротекторів та з 4 95 маніту, відповідно, тоді як ліпосоми з З 95 сахарози або комбінацію з З 95 сахарози та 4 95 маніту зазнали незначних змін. Після повного циклу ліофілізації, розміри ліпосом помірно змінилися в 3,55-, 0,88-, 3,48- та 1,47- разів для зразків без ліопротектора, з З 95 сахарози, з 4 95 маніта та з комбінацією, відповідно.
І00120)| Дані результати демонструють, що ліпосоми, повторно гідратовані в аангоО, мають кращу колоїдну стабільність в порівнянні з тими, які повторно гідратовані в РВ5, як проілюстровано незміненим розміром пухирця після ліофілізації, та що З 9о сахарози можуть бути більш ідеальним ліопротектором для забезпечення гарної колоїдної стабільності.
Зо І00121| Стосовно оптимізації схеми ліофілізації для 4ангО-регідратованих ОСКІ. ліпосом, оцінювали вплив б відомих цукрових ліопротекторів (індивідуально та в комбінації) в концентрації 2 95 мас./об. на розмір пухирця та полідисперсність.
І00122| Сахарозу, глюкозу, маніт, трегалозу, фруктозу та маннозу досліджували як ліопротектори. Тільки 2 95 маніту як ліопротектору в значній мірі підвищувала розмір пухирця (в 39,66 рази) та полідисперсність (в 2,95 рази). Однак, незважаючи на те, що ліофілізація зі всіма іншими цукрами не призвела в результаті до значної зміни розміру, продукти ліофілізаційно захищені з використанням глюкози, фруктози та/або маннози опадали у водонепроникний, щільні шари цукру та ліпосом, які важко було повторно гідратувати. Відповідно до літератури, ліпосоми, ліофілізаційно захищені з використанням сахарози або трегалози, запобігали зміні розмірів частинок та в результаті призводили до таблетки, яка могла б бути відновленою в ліпосомальну дисперсію з гарною колоїдною стабільністю. (00123) ОСКЇ. також був ліофілізованим з комбінаціями цукрів. Дане дослідження показало, що тільки 2 95 сахарози, 2 о трегалози та 2 95 сахарози/2 95 трегалози підтримують гарну колоїдну стабільність після ліофілізації та досягали фармацевтично елегантної структури таблетки. Однак, комбінація з 2 95 сахарози/2 95 трегалози, як виявилося, не була переважною з точки зору стабільності розміру ліпосом та полідисперсності в порівнянні з ліофілізаційним захистом з 2 95 сахарози або 2 95 трегалози самостійно.
Приклад З - вакцина ІВК/ ВМОМ (00124) Як повідомлялося, ад'ювант ОціЇ-А викликає системну імунну відповідь, яка часто супроводжується тимчасовою підвищеною температура. Така підвищена температура, як вважається, є пов'язаною зі зменшенням молочної продуктивності у лактуючих корів. Метою даного дослідження було оцінити вплив ліпосом, які не містять сапонін на імунну відповідь, викликану ліпосомами та можливі побічні ефекти, викликані ад'ювантами.
І00125| Для даного дослідження використаними були восьмимісячного віку голштинські телята-бички. Потенційні досліджувані тварини були серологічно перевіреними, та ті, у яких титри нейтралізації сироватки (ЗМ) «1:22 для ВМОМ-1 та ВМОМ-2 були прийнятними, зараховувались у дослідження. Крім того, тварини не були персистентно інфікованими (РІ)
ВМО, як визначалося, застосовуючи біопсію з перфоратором для взяття проб тканин вушної раковини та імуногістохімію. Тварини знаходилися в середовищі, в якому контролювалися бо температура та вологість та отримували комерційну дію та воду міської системи за бажанням.
(00126) Акліматизація розпочалася приблизно за один тиждень до 0-го дня дослідження.
Телята отримували ОКАХХІМО та ОЕСТОМАХФ перед завантаженням.
І00127| Досліджувані тварини, які втрачали своє значення, ставали ушкодженими, або померли через обставини, непов'язаними з дослідженням, були виключені з дослідження та відповідного аналізу даних. Тварини, які втратили своє значення, піддавалися евтаназії. 00128) Тварин вакцинували на нульовий день та на 28-й день шляхом підшкірного введення 2 мл вакцини, як підсумовується в таблиці 1.
Таблиця 1
ВАКЦИНАЦІЯ
Ад'ювант (на дозу) тої | 9 |Сольовийрозчин, Відсутній 77711111
Оїйй А який містить Оці А (250 мкг), холестерин (250 мкг), ОСА (100 мкг), то? а 'ювант твВМО КАРБОПОЛФ (0,0375 95 об./06.), ВАУК1005Фацетат (1 ад 000 мкг), Сро (5ЕО ІЮО МО: 8, 65 95 гомогенність, 100 и2-тіВК мкг)
Ліпосоми, які містять холестерин (250 мкг), ОСА (250 1 тоЗ в ОСНВІлтвВУрУ УктівК мкг), К1005 ацетат (500 мкг), лецитин (500 мкг) ровом (низький) . тої | 9 ЗТВМОМ УУнтІВе ОСКЇ ліпосоми як в ТО3, 25 мкг ОКМ.
ОС ліпосоми, як в ТО3, 100 мкг ОКМ (5ЕО ІЮ МО: 11, то5 осНіхСразовметвВУрУ з фосфоротіоатними зв'язками), Сро (5ЕБО ІЮ МО: 8, и2-тіВК : 65 95 гомогенність). тов ОСВІ-ОВМ (високий) ОСІ ліпосоми, як в ТО3, 100 мкг ЗЕО ІЮО МО: 11, з ятптвВУОМ 25ітіІВК фосфоротіоатними зв'язками
ОМ А, який містить), , тої |в. ад'ювант -ВМОМ'І г-др5З Рдювант як в Т02 00129) На 49-й день тварини були контрольно заражені нецитопатичним вірусом вірусної діареї - захворювання слизових великої рогатої худоби типу 2 (штам 24515). Кожна тварина отримувала приблизно 4,88 І 09101050 на дозу в 5 мл, яку вводили інтраназально (2,5 мл на ніздрю), використовуючи аерозольний інгалятор зі стиснутим газом.
І00130| В групах Т02-Т06, антигенний компонент містив 4500 Ум.Од./вірус попередньо інактивованого модифікованого ВМОМ 7» та модифікований ІВК (8,0 Іс910ТС1050). (00131) Тварин контрольно заражували на 48-й день, застосовуючи 5 мл ВМОМ-2 штаму 24515 (4,88 Г0910ТСІ050 на дозу) інтраназально (2,5 мл на ніздрю), використовуючи аерозольний інгалятор зі стиснутим газом.
І00132| Середні значення ректальної температури, отримані за способом найменших квадратів, та діапазони після першої та другої вакцинацій показані в таблиці 2.
Таблиця 2
Аналіз середніх значень ректальної температури, отриманих за способом найменших квадратів для фази вакцинації
ПД нижня ники пе чни п В о ПОЛО ПНО Я ПОЛОН ПОВНЕ 102,42 | 102025 | 101,62 | 101,62 | 102,32 | 102,6а5 | 101,92 | 101885 | 101,95 | 101,82 102,52| 103,42 | 101,62 | 101,62 | 102,52 | 102225 | 103,42 | 102,25 | 101,825 | 102,15 102,4а | 102225 | 101,72 | 101,52 | 102,22 | 102,4а5 | 101,98) 102,05 | 101825 | 101925 102,52 | 102025 | 101,82 | 101,82 | 102,32 | 102,85 | 101,92 | 101,85 | 101,8а5 | 101,82 102,22 | 101,82 | 101,62 | 101,72 | 102,02 | 102,4а5 | 102,02 | 1018285 | 101,8а5 | 101,82 102,12 | 102025 | 101,52 | 101,52 | 102,22 | 102,5а5 | 101,82 | 101,6а5 | 101,95 | 101,72 102,32 | 102,45 | 101,72 | 101,52 | 102,12 | 102,08 | 102,55) 101,52 | 101,62 | 101,82
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
ІЇ00133| Ректальні температури для деяких суб'єктів з Т02 та Т07 показали тимчасове підвищення на наступний день як після першої, так і другої вакцинації. Підвищення ректальних температур у тварин в групі Т02 було в значній мірі більш високим (Р«е0,10), ніж в інших групах
(ТО1, ТО3, Т04, ТО5, ТО6, та Т07) протягом першого дня після першої вакцинації. 00134) Після першої вакцинації, чотири з 9 тварин в групі Т02 мали температури більш високі, ніж 103,5 "Е (три мали температури, які перевищували 104,0 "Р). На відміну від цього, жодна з тварин в групі ТО5 не мала температуру, яка перевищувала 102,5 "Е протягом першого дня після першої вакцинації (дані не показані). 00135) Після другої вакцинації підвищення ректальних температур в групах 702 та Т07 було в значній мірі (Р«0,10) більш високим, ніж у контролів та вакцинованих (Т03, Т04, ТО5, та ТОб), однак, підвищені ректальні температури були короткочасними (Таблиця 2). Індивідуальні відповіді в групі Т02 знаходились в діапазоні від 101,1 до 104,5 "Р. П'ять з дев'яти тварин в групі
Т02 мали температури, які перевищували 103,5 "Е (та інша тварина мала температуру 103,5 "Р) після другої вакцинації. Тільки три з дев'яти тварин в групі Т02 мали температуру нижче 103,5 "Е протягом першого дня після другої вакцинації. На відміну від цього, жодна з композицій
ОСКІ не викликала підвищення ректальних температур, які перевищували 103,7 "Р.
Індивідуальні відповіді в групі ТО5 знаходились в діапазоні від 101,4 до 102,6 "РЕ (дані не показані).
І00136| Фебрильна реакція спостерігалася (» 104,5"Є) у 8 з 8 тварин в групі ТО1 після контрольного зараження; це відповідає критеріям результатів для успішного контрольного зараження. Ректальні температури в усіх вакцинованих групах були в значній мірі більш низькими (Ре0,10) на 53-їй день дослідження в порівнянні з контролями (через 4 дні після контрольного зараження), та з'явилися деякі відмінності в наступні дні (дані не показані). В контрольній групі, у відповідь на контрольне зараження, спостерігалося типове двофазне підвищення ректальної температури.
І00137| Присутність клінічного захворювання ВУМОМ (тварина повинна була мати клінічну оцінку 2 2) після контрольного зараження визначалась відповідно до наступної системи оцінки: 0 - ніяких клінічних ознак 1 - Клінічні ознаки в цілому не є специфічними для гострої інфекції ВМО. Клінічні ознаки можуть включати виділення з носа, ненормальне дихання та легку млявість. 2 - Клінічні ознаки в цілому є помірними за ступенем та специфічними для гострої інфекції
ВМО. Клінічні ознаки можуть включати виділення з носа, ненормальне дихання, млявість, схуднення, виділення з очей, підвищене слюновиділення, діарею, дегідратацію, кульгавість та/або небажання рухатись.
З - Клінічні ознаки в цілому є тяжкими за ступенем та характерними для гострої інфекції
ВМО. Клінічні ознаки можуть включати виділення з носа, ненормальне дихання, млявість, схуднення, виділення з очей, підвищене слюновиділення, діарею, підвищене травмування, дегідратацію, лежаче положення, кульгавість та/або небажання рухатись. 00138) Не існувало ніяких суттєвих відмінностей між контрольною групою та вакцинованими групами. 00139) Лейкопенія (00140) Результат дослідження відповідав критеріям достовірного дослідження, оскільки 100 95 з
ТО1 (контролі) мали лейкопенію при застосуванні 2 40 96 зменшення та 75 95 контролів мали « 4000 клітини/мкл. Не існувало суттєвих відмінностей між кількістю тварин, у яких розвивалась лейкопенія 2 40 95 зменшення кількості білих кров'яних клітин в порівнянні з фоном після контрольного зараження в ТО01 у порівнянні з вакцинованими групами лікування 702, ТО3, Т04,
ТО5, ТОб, та Т07 (Р«х0,10). Однак, клінічна лейкопенія (« 4000 клітини/мкл), яка є більш релевантним визначенням, була виявленауб 3 8 (7590), у239(22295),у138(12,599),у339 (33,390),у 439 (44490), у4394(444905),тау зб в ТО1, 02, ТО3, Т04, ТО05, ТОб, та 707, відповідно (Таблиця 3).
Тривалість лейкопенії була значно довшою (Р:х0,10) в групі ТО1 при застосуванні 240 95 зменшення в порівнянні з усіма вакцинованими та значно довшою (Ре0,10) при застосуванні « 4000 мкл в порівнянні з вакцинованими групами 702, ТО3, ТО05, ТО6, та Т07 (Таблиця 4).
Таблиця З
Підсумок фази лабораторного зараження щодо лейкопенії
Лейкопенія (зменшення 40 95 або більше) Лейкопенія (« 4000 клітин на мікролітр)
Група тої | 0 | 0 | 8 | 00 | 2 | 25 | 6 | 5 то2 | 1 | пл | 8 1 889 | 7 | 778 | 2 | 222 тоз3 | 2 | 25 | 6 | 75 | 7 | 875 | 1 | 125 то4 | 1 | 11 | 8 | 889 | 6 | 667 | з | з33 то5 | 0 | 0 | 9 | ло | 5 | 556 | 4 | 444 тоб | 0 | 0 | 9 | ло | 5 | 556 | 4 | 444 07 | 2 | з33 | 4 1 667 | 6 | 667 | 0 | о
Таблиця 4
Тривалість лейкопенії (зменшення 40 95 або більше) « 4000 клітини на мікролітр
Ї5Зв Вище Ї5Зв Вище
Група Стандартна | Нижче Стандартна | Нижче
МТ | середньому охибка 9095 СІ 902 | середньому | охубка 90 95 СІ 20.2 днів СІ днів СІ 0,818 | 8 /1007| 365 | 1179 0,771 0,522 0,818 0,095 | 0 | оз 0,771 0,522 0,771 0,799 0,771 0,522 0,944 | 090 | 41 | 0 | 01 | 02 | 02
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10) 001411 Вірусемія 00142) Всі експериментальні вакцини захищали проти вірусемії. В деяких групах існував повний захист (102 та Т05 - обидві, які містять Срео) та в інших - частковий (ТО3, Т04, ТОб, та
Т07). Кількість заражених вірусом тварин в ТО1 була в значній мірі більш високою, ніж кількість в
Т02, ТО03, Т04, Т05, ТОб та Т07 (Р«х0,10) (Таблиця 5). В групах 702 та ТО5 ніякої вірусемії не спостерігалось. Однак, існувала відмінність між кількістю заражених вірусом тварин в групах
ТО3, Т04, та ТОб, які не містили ніякого ОКМ, низьку дозу ОКМ та високу дозу ОКМ в порівнянні з контролями.
Таблиця 5
Підсумок фази лабораторного зараження щодо виділення вірусу
Група
ВОЛІ ПО ПО ПОН КОН ПОН КО: ЗОН КОН С Те с
РІДИН ПИ ТИН ПОН Го'о ПОНЯТЬ ООН КОН хо то Ї7777171717176111111117117111117175 | 21|141111250
ВЕ: ПО ПИ ПОН Сто ПОН ПОН ОН КОН х НН
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
І00143| Тривалість вірусемія для групи ТО1 була в значній мірі більшою ніж у всіх вакцинованих груп (від Т02 по Т07) (Р«0,1) (Таблиця 6). Телята в Т07 отримували вакцину, яка містить ОціЇ-А, який містить ад'ювант ї- рекомбінантний др53 антиген вірусу ВМОМ-1, та були також частково захищеними та мали в значній мірі більш коротку тривалість вірусемії в порівнянні з ТО1. Для даних телят контрольне зараження відбувалося іншим біотипом вірусу
ВМОМ (тип 2), яке відображає те, що існував частковий перехресний захист між антигеном
ВМОМ-1 др53 та штамом контрольного зараження.
Таблиця 6
Дні з позитивним вірусовиділенням тої 77777786 17711041 Ї7117111741 11111189 02 щ то2 | 77777709 777771 0268 | 7703 | 703 2 щ «Ф"("Іі то5 | 77777709 777771 0268 | 7703 | 03 2 2щ Ф"(" тоб | 77/07 | 0268 | 777704 |. 09 2 2щ «К"КИ«/("
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (р«х0,10) (00144) 5М Титри (00145) На 49-й день, перед контрольним зараженням всі групи тварин з Т02 по Т07 мали
ЗМ титр до ВМОМ-1, ВУПУ-2, та тільки групи з Т02 по Т06 мали антитіла до антигену ІВК г 1:8.
Всі вакцини, як було визнано, мали адекватну ефективність, оскільки вони відповідали вимогам 2 1:8. Після першої та другої вакцинації середні значення, отримані за методом найменших квадратів, 5М титрів до ВМОМ-1 та 2 (на 28-й та 49-й день) представлені в таблиці 7. Всі вакциновані тварини мали в значній мірі більш високі 5М титри, ніж контрольна група, та існували значні відмінності між 5М титрами вакцинованих груп. Ліпосомальні вакцини (від ТОЗ по
ТО6) індукували в значній мірі більш низькі ХМ титри до ВМОМ-1 та 2, ніж вакцини, в які була добавлена як ад'ювант композиція, яка містить Осії А (Т02). Додавання ОКМ5 або Сро до даних препаратів не покращувало дані відповіді. Вакцина др53, в яку була добавлена як ад'ювант композиція, яка містить ОціЇ А, також індукувала високі 5М титри на 49-й день до антигена
ВМУОМ-1, але більш низький до антигена ВМОМ-2. 5М титри до ВМОМ-1 групи Т07 в значній мірі не відрізнялися від титрів Т02, але були титри до ВМОМ-2. Після контрольного зараження ВМОМ- 2, ЗМ титри всіх вакцинованих груп підвищувались, тоді як у телят з групи ТО1 розвивалися первинні відповіді на антитіла (на 63-й день).
Таблиця 7
Середні значення, отримані за методом найменших квадратів, титру до ВМОМ-1а та ВМОМ2 5М тоб | 19176 | 7675 | 157655 | а | 6» | 3552 | 540589
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
Таблиця 8
Середні значення, отримані за методом найменших квадратів, титру ІВК 5М
ВА
Групи
РІДИНИ ПИ: СИМ ПО: ля КО т: я НО: тло
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10) (00146) Реакції в місці ін'єкції 00147) Середні значення реакції в місці ін'єкції, отримані за методом найменших квадратів, (ІК) як для лівого, так і для правого боку шиї, показані в таблицях 9 та 10. На 1-й день, невеликі реакції спостерігались у всіх шести групах вакцинації, але спадали. Найбільші реакції на місцях спостерігались в 702 та Т07 на 29-й, 41,8-й та 16,3-й день, відповідно. Існували значні відмінності між реакціями в місці ін'єкції в певні дні. Всі вакцини були безпечними, оскільки реакції в місці ін'єкції швидко розсмоктуються.
Таблиця 9
Середнє середніх по групам щодо реакцій в місці ін'єкції (лівий бік шиї)
Група Об'єм реакції в місці ін'єкції у лівий бік шиї на день
РУ 0 1 1 1 2 | 3 | 7 1 28 | «8 тоз | 005 | Зб» | бе | б | ї5а | 009 | 005 то4 | ола | 062 | гаю | а | 98 | 045 | 048 то5 7 | солае | 008 | ла | бе | 003 | бла | бла тоб | омла | 062 | 8ля | За | 03 | 0а | ол то7 | 00а | 649 | бо | 98 | 2г7а | 038 | ла
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (р«х0,10)
Таблиця 10
Середнє середніх по групам щодо реакцій в місці ін'єкції (правий бік шиї)
Група Об'єм реакції в місці ін'єкції в правий бік шиї на день
РУ тої 7777771 008 1 005 | 008 | 005 | 003 | 008 то2 7777 | 000817 41,86 | лб5е | 17,06 | 1745 | т5а 9 тоз 77777008 172,65 | 308 | бБ» | 52 | 008 94 то4 77770008 177385 їла | т85 | 73177704 то5 77777 | 00817772 | 072 | 085 | 083 | 73 тоб 777777 | 00817285 | 208 | БО» | 32 | 088 9 т07 7777 | 008 | 1655 | 5бе | ліде | 58а | 008 2
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (р«х0,10) 00148) Клітинно-опосередкований імунітет (00149) Аналіз ЕГІБРОТ ВМОМ ІЄМ гама мав високий фон в групі ТО1 перед контрольним зараженням та, тому, вважається ненадійним для демонстрування індукування відповідей СМІ на дані вакцини до даного антигена (дані не показані). Однак, аналізи на антигени ІВ були відображенням індукування СМІ відповідними вакцинами (дивіться таблиці 11-13, відповіді на убитий антиген ІВК, вторинні імунні відповіді на пептиди ОВ та дО ІВК в групах з Т02 по ТО06). В цілому найбільш високі відповіді в групі вакцинування 102 та групі ТО5, які мали Сро в складі.
Після контрольного зараження відповіді не покращувалися, оскільки контрольне зараження представляло собою контрольне зараження вірусом ВУОМ. Можливо, подібні відповіді СМІ були індуковані вакцинами щодо антигену ВМОМ.
Таблиця 11 70.17 | 36 | 58 тої 777777771111111111111111711111065711117111 157,85 | л153а | 156 тбо2 7777777771717171717111111117111111065117111 235,65 | 459,79 | гі153 704 777777777171717171711111111711111106571111711лваБ» | з178; | 42880
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
Таблиця 12 яв І-Ш ри - бої 77771111111111111111171111100977 1771 7127,88. | 13555 | 1138
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (ре0,10)
Таблиця 13 70.17 | 3 | 58
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
Ї00150| Ефект вакцини спостерігався на розвиток та тривалість вірусемії. Всі експериментальні вакцини захищали проти вірусемії. Повний захист спостерігався в деяких групах (Т02 та ТО5, які містили Сро), тоді як в інших групах (Т03, Т04, Т06 та Т07) спостерігався частковий захист. Профілі ректальної температури свідчать про транзиторне підвищення на перший день після як першої, так і другої вакцинації для груп обробки 102 та Т07 в порівнянні з контрольною ТО01. Ліпосомальні вакцини індукували більш низьке підвищення ректальної температури в порівнянні з Т02 та Т07, які мали ОціЇ-А, який містив ад'ювант. Даний Омції А, який містить ад'ювант, як правило, індукує одноденне підвищення температури безпосередньо після вакцинації. Останнє є особливо важливим для молочних корів, тому що підвищена температура, яка супроводжує вакцинацію, часто в результаті призводить до неприйнятного падіння кількості молока. Ліпосомальні композиції індукували стабільне антитіло, а також Т- клітинні відповіді (навіть ліпосоми без додаткових імуномодуляторів). Ліпосомальні вакцини індукували в значній мірі більш низькі ЗМ титри до ВМОМ-1 та 2 та антиген ІВЕК в порівнянні з вакцинами, які містять Опції А, хоча досягнуті рівні розглядалися в захисному діапазоні для даних відповідних захворювань (титри ЗМ ВМОМ-1 - 1:256-512; ВМОМ-2:ж5256 або більші; титр ЗМ ІВА - 1:32).
І00151| В кінцевому підсумку, ліпосомальні композиції забезпечують безпечну та нову можливість для доставки вбитих антигенів для захворювань, які потребують не тільки антитіл, але й СМІ а також для захисту. Композиції порівнювали з вакцинами, які містять ОціЇ-А, щодо ефективності. Вплив Сро на ефективність був відтворюваним, однак, ОКМ не був ефективним у підвищенні імунітету проти контрольного зараження ВМОМ.
Приклад 4 - Вірус свинячого грипу 00152) Метою даного дослідження було оцінити імунну відповідь та ефективність декількох
ЗІМ-вакцин (Вбитий вірус, рНіІМ15 НЗМ2), які містять нові ад'ювантні композиції та імуномодулятори. Ефективність визначали як за імунологічними параметрами (гуморальний та клітинний), так і за кінцевими точками ефективності, включаючи клінічні ознаки, вірусемію, безсимптомне вірусовиділення та ураження легенів. 00153) Тварини. 00154) Для даного дослідження використовували тритижневого віку (21-4/- З днів) свиней обох статей. Тварини не мали в анамнезі впливу РЕКЗУ, Мусоріазхта пуорпештопіає. Тварини або їх продуктивності не мали в анамнезі вакцинації проти або впливу будь-якого серотипу ІМ.
Тварини прибували на місце за від чотирьох до семи днів перед вакцинацією та годували стандартним раціоном з водою за бажанням. 00155) Свині були вакцинованими композиціями з таблиці 14 на нульовий день (лівий бік шиї) та 21 (правий бік шиї) та проведено контрольне зараження вірусом НЗМ2 ІМ/12 на 35-й день.
Таблиця 14
Експериментальна модель 20 96 АМРНІСЕМФ ж Сро (5ЕО ІЮ МО: 8, 50 то 10 мкг/доза)-С040 агоніст (анти-СО40 моноклональне 2 мл в.м. антитіло, клон 2А5С7РІ1О8, 250 мкг /доза 10 95 ЗР олія - Сро (5ЕО ІО МО: 8, 50 мкг /доза)-С040 рніМмІ; |тхХо (Сро (5ЕО ІО МО: 8, 50 мкг /доза-ОєБАЕ Декстран тоб 10 120НА |(10 мг/доза) -ОКАКЕОЇ Ф 6МЕ. (45 95 об./06.), БРАМФОВ8О 2 мл в.м. нзМ2 6,3 95 об./06.) 4 ТМУЕЕМФВО (1,45 95 об./об.)
ОСІ ліпосоми (Холестерин (250 мкг), ОСА (250 мкг),
ВАУК1005Ф ацетат (500 мкг), лецитин (500 мкг))
ОСІ ліпосоми (холестерин (250 мкг), ОБА (250 мкг), тов 10 ВАУК10059 вільний від основи (500 мкг), лецитин (500 2 МпвМ мкг)) - Сро (5ЕО ІЮ МО: 8, 50 мкг /доза) - СО40 агоніст що (250 мкг /доза) "4 95 суброзчин на основі сквалану, розбавлений в 10 разів для кінцевого продукту (0,4 95 олія) 00156) Сироватку крові збирали для аналізу інгібування гемагглютинації (НАЇ) на 35-й та 40-
Зо й день, та цільну кров збирали для аналізу ЕГІБРОТ (ІЄМу) на 28-й, 35-й та 40-й день. Свиней піддавали евтаназії на 40-й день (через 5 днів після контрольного зараження), та оцінювали відсоток закріплення для кожної частини (лівої краніальної, лівої середньої, лівої каудальної, правої краніальної, правої середньої, правої каудальної та тридаточної) та записували як відсоток від О до 100 95.
І00157| Жодна з вакцинацій в результаті не призводила до системних побічних ефектів або неприйнятних реакцій в місці ін'єкції (дані не показані). (00158) НАЇ титри показані в таблиці 15.
Таблиця 15
НІ титри (35-й день, перед контрольним зараженням, 40-день після контрольного зараження)
СсАОЗ-НІМІ нНамгуас нзМмагх-ІМла2 нНЗзМмагм-ІМл2 (вакцинафі)035 (вакцина 42) 035 (контрольне (контрольне зараження) 035 зараження) 040 значення значення значення значення то2 | 4645 | 110,5 | гове 32 | 96 | 1809 | 755,65 | 1724 тоз | 2845 6705 | 137,85 | 2758 | 98 | 2928 | зеїль | 113,5 аЗначення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються від ТО1 (рх0,10);
Неспарене Т дослідження з корекцією Уелша (СтгарпРай Ргізт, Версія 6.04). н.д., не детектований; н.3., не застосовуваний.
І00159| Оцінки ураження легенів представлені в таблиці 16.
Таблиця 16
Підсумок оцінки ураження легенів (40-й день) аЗначення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються від ТО1 (рх0,10);
Неспарене Т дослідження з корекцією Уелша (СгарпРай Ргіхт, Версія 6.04). МТХ представляє собою групу невакцинованих, контрольне незаражених свиней. 00160) Група Т04 мала найвищий титр НАЇ до одного з вакцинних штамів (НІТМ'І), тоді як
Т07 мала найвищий титр до іншого штаму (НЗНг), незважаючи на те, що титри в групах Т02-108 були в значній мірі більш високими, ніж в контрольній групі ТО1. (00161) Всі вакцини (за виключенням Т08) мали тенденцію зменшувати ГІ 5 через 5 днів після контрольного зараження. Група Т06 (ТХО) мала тенденцію демонструвати найбільш низькі показники ураження легенів. (00162) Клітини, які секретують пептид-специфічний ІЕМ-гама до протеїнів МР грипу, та клітини, які секретують ІЕМ-гама специфічний до цільного вірусу грипу (обидві визначені з використанням ЕГІЗРОТ), представлені в таблицях 19 та 20, відповідно. Пептиди в в пулах є 16- мерними з 12-амінокислотним перекриттям. Чотири пули містять послідовність МР пептида з М- кінця (пул 1) до С-кінця (пул 4). Послідовності пептидів представлені в таблицях 17 та 18.
Таблиця 17
МР пептидні пули, використовувані для ІЕМ-у ЕГІБРОТ (пули 1 та 2)
МАТОСТКАЗУЄОМЕТО 45 ВОАММОИаєЕрАТАІ ТНІ 16 СТКАЗМЕОМЕТаСЕНО 46 МОаЕВАТАаІ ТНІМІМУН 17 ЗУЄЕОМЕТаСЕВОВАТЕ 47 АТАСІ ТНІМІМУНЗМІ М 18 МЕТаСЕВОВБАТЕЇІКА5 48 ІТНІМІМ/НЗМІ МОАТУ 19 СЕВОВАТЕІКАЗУС ВМ 43 МІМНЗМІ МОАТУОВТА
РАТЕІКАЗ УСАМУСИЇ 50 ЗМІ МОАТУОВТВАГУВ 21 ІКАгуУавнМмУсшОТІіВЕМ 51 рАТУОВТВАЇ УНТОМО 22 манвмусаісвЕмМомМо 52 ОВТВАЇ УВТОМОРАМСО 23 УуааТаийвВЕМІоМсСтТЕЇ Кк 53 А УВТаМОРАМО5І МО 24 САЕМІОМСТЕЇГ КІ БУ 54 тТамоРАмМОо5ІМОа5тІ.
ІОМСТЕГ КІ 5ОМЕСВІ 55 РАМОБІ МОС5ТІ РАН5 26 ТЕГ КІ 5ОМеВПОМ5 56 ЗІ МОС5ТІ РАНБОадДАС 27 І 6ОМЕСВИПОМОІТІЕ 57 аЗТІ РАНИ ААДСААУК 28 ЕВВПОМ5ІТЕВММІ. 58 РАВ5ЗаААдСААУКОУСИТ 23 ІОМОППЕВММІ ЗАБО 59 САДПААдУКИаТМатТІАМЕ
ПІПІЕВММІ БАРОЕНАМ (610) ААУКаМатІАМЕІВМ
З1 ВАММІ БАРОЕВАМКУМІ Е 61 сСУаТтАМЕІВМІКВНО 32 ЗАРОЕВАМКМІ ЕЕНРБЗ 62 ІАМЕГІВМІКАСІМОВ
З ЕВАМКМІ ЕЕНРЗАСКО 63 АМІКАСІМОВМЕУМУВ 34 КМ ЕЕНРЗАСКОРККТ 64 ІКВСІМОАВМЕУВИаЕМИ
ЕНРБЗАСКОРККТОааРІ 65 ІМОАМЕУ ВСЕМСВАТА 36 акреРкктааРІУААМ 66 МЕУВаЕМОаВАТАААМЕ 37 РККТасСРІУАВУраТкм 67 сСЕМаВвАТВААМЕНМОСМ
З8 саРІМАВУракКУ МАЕ 68 ВАВАТАЕААМЕВМСМІЇ Ка 39 УвАУракммвЕІ мо 69 ААХМЕНМСМІЇ КаИКРОТ
РОаКУ/МАЄЕПІ МОКЕЕЇ 70 АМСМІКаквРОтТААОВ
А МАБЕПІ МОКЕЕІВВУМУ 71 І. КОКЕОТААОВАММО 42 ІГ'МОКЕЕІВВУМ ВОМ 72 КЕОТАДОВАММООМУВЕ 43 КЕЕІВВУМУВОАММИаЕО 73 ААОВАММООМУВЕЗАМР 44 АВАВУМУВОАММаЕВАТАС 74 АММООУВЕЗАМРОаМАЕ
Таблиця 18
МР пептидні пули, використовувані для ІЕМ-у ЕГІБРОТ (пули З та 4) 75 ОМВЕЗАМРОМАЄБЇЕОІ. 105 ВамМОІА5МЕММЕАМО5 76 ЗАМРОМАЄЕЇЕОГ ІРА 106 ІАБМЕММЕАМО5ЗМТІ Е 77 СМАБЕЇІЕОПГ ІБР АВЗАЇ. 107 ЕММЕАМО5МТІ ЕІ ВЗА 78 ІЕОМПРГАВЗАЇ МІ ВО 108 АМО5МТІ ЕІ АЗАУМУ/АЇ 79 ІГГАВБЗАЇ М На ЗМУАН 109 МТ ЕГАЗАУМ АВТ
ВБЗАЇ МІ НаЗМАНКЗОЇ. 110 СГ вА5АУЖМАІвТАЗааМТ 80 МЕНазмАНКЗОСЇ РАСУ 111 УМАвТАЗОССМТМООВ 81 ЗМАНКЗОЇ РАСУМИЇ А 112 вТАЗасМТМООВАЗАС 82 КЗСІ РАСУМОЇ АМАБа 113 вамМТМООВАБАСОЇБМ 83 РАСУМааЇ АМАБСНОБГЕ 114 МООВАБАСОЇЗМОРТЕ 84 Уа АМАБСОНОГЕВЕСУ 115 АБАСОЇЗМОРТЕВМОВ 85 МАБЕНОРЕВЕСУБІ Ма 116 ОІ5МОРТЕЗМОВМІ РЕ 86 НОРЕНКЕСУ5І МОРЕ 117 ОРТЕЗМОВМІ РЕЕВАТ 87 ВЕСУ5І МОІОРЕКО ОО 118 ЗМОВМІ РЕЕВАТІМАА 88 ЗІ МАІОРЕКЦ ОМБОМ 119 МГРЕРЕВАТІМААЕЗИОМ 89 ІОРЕКССОМЗОМ ЕІ 120 ЕВАТІМААЕЗОММЕСА
Таблиця 18
МР пептидні пули, використовувані для ІЕМ-у ЕГІБРОТ (пули З та 4) 90 КО ОМБОМЕБІ ІВРМЕ 121 ІМААЕЗСЕаММЕС АТОМ 91 МЗОМЕБИА!АРМЕМРАН 122 ЕБаММчЕСАТЗОМАТЕМ 92 ЕБІАРМЕМРАНКЗОЇ. 123 МЕСАТЗОМАТЕМІНММ 93 АРМЕМРАНКЗОЇ МУМА 124 Т5ОМАТЕМІВММЕЗАК 94 МРАНКБОЇ МУМАСНЗА 125 ВАВТЕМІВММЕЗАКРЕПІ. 95 КБОЇ МУМАСНЗААРЕО 126 ІАММЕЗАКРЕБВІ 5ЕОС 96 МУУМАСН5ЗААРЕЕПІ ВУ 127 ЕЗАКРЕВІ 5ЕОСВНИМЕ 97 СНЗААРЕОІ ВУ55РІВ 128 РЕОПІ БРОВВОМЕЕЇІ 50 98 АРЕОІАУЗЗЕНОаККМ 129 ЗЕОСВОаМЕЕЇІ 5ОЕКАТ 99 ІГАМ55БІВОаККМІРВа 130 ВОаМЕЕЇ ЗОЕКАТ5РІМ 100 ЗЕРІВОаККМІРВИКІ ЗТ 131 ЕГЗОЕКАТОРІМРЗЕО 101 СККМІРВОКІ БТНОМО 132 ЕКАТОРІМРЗЕОМЗМЕ 102 ІРВОКІ БТАЕМОІАБМ 133 ЗРІМРЗЕОМЗМЕСаЗУЕ 103 КІ ЗТВАМОІАЗМЕММЕ 134 РОєОМЗМЕеЕаБМЕРОаОМ 104 135 МЗМЕСЗМУЕРОДНКЕЕХ 136 С5УРЕСДНКЕЕМО5
Таблиця 19
ІЕМ-у ЕСІБРОТ МР пептидні пули (40-й день)
Среетряве Гететенаття пететяня ти мете значення значення значення значення похибка похибка похибка похибка то2 | 6ббе | 16,79 | 2842 | 6,598 / б684ае | 20,38 | 408а | 1019 аЗначення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються від ТО1 (рх0,10);
Неспарене Т дослідження з корекцією Уелша (сгарпРаа Ргізт, Мег. 6.04).
ІЇ00163| МР протеїн є, як правило, високо консервативним серед 5ІМ штамів, та, тому, ефективна відповідь СМІ, швидше за все, призводить до кращої ефективності перехресного захисту.
Таблиця 20 антиген вторинної імунної відповіді ІЕМ-у ЕГІБРОТ (40-й день) о шшетшняі ше | сша (контрольне зараження) (вакцина 41) (вакцина 52) значення похибка значення похибка значення похибка
Таблиця 20 антиген вторинної імунної відповіді ІЕМ-у ЕГІБРОТ (40-й день) шиття | ше |. ше (контрольне зараження) (вакцина 41) (вакцина 52) значення похибка значення похибка значення похибка аЗначення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються від ТО1 (рх0,10);
Неспарене Т дослідження з корекцією Уелша (сгарпРаа Ргізт, Мег. 6,04).
І00164| Група Т07 (ОСРКЇІ -ліпосоми) забезпечувала найбільш високі відповіді ІЕМ гама до трьох з чотирьох пептидних пулів МР протеїну та до двох з трьох цілих вірусів, які досліджували.
Єдиною групою, в якій спостерігалася відповідь ІЄМ-у після вакцинації (попереднє контрольне зараження), була Т06 (ТХО) (дані не показані).
І00165)| Додавання агоніста СО40 та Сро однотипно мали тенденцію знижувати титри, а також збільшувати / І. 5, особливо в контексті ліпосомальної композиції. 00166) Взяті в цілому, дані результати свідчать про те, що вакцина, в яку добавлені як ад'ювант ЮОСКІ ліпосоми, є настільки ж ефективною як препарат 7102 (експериментальна композиція, аналогічна до комерційної вакцини) щодо зниження показників ураження легень. В той же час, ОСРЕЇ. ліпосоми є набагато більш ефективними в активуванні відповіді СМІ, ніж інші вакцини, які досліджуються, таким чином, можливо, забезпечують більш широкий перехресний захисний потенціал та підвищують тривалість імунітету, ніж комерційний продукт.
Приклад 5 Розвиток імунітету до Еї/тегіа тахіта після вакцинації профіліном
І00167| Мета дослідження полягала в оцінці впливу різних ад'ювантів (власні розробки 2оеїі5) на розвиток імунітету до Еїітегіа тахіта після вакцинації профіліном.
І00168| Курчата, які щойно вилупилися з яйця були придбані з інкубатора Лонгенкера (ГопдепесКег5 Паїспегу) Еїйплабрешіомп, РА. Курчат забезпечували кормом та водою за бажанням. Птахів тримали в брудерних гніздах в оснащенні, яке не містило Еїітегіа, та переносили у великі висячі клітки в окремому місці, де вони були інфіковані та утримувалися до кінця експериментального періоду.
І00169| Очищений профілін (50 мкг/доза) змішували з різними ад'ювантами, як представлено в таблиці 21.
Таблиця 21 мкг профіліну ж ОціЇ-А (50 мкг/доза), холестерин (50 мкг/доза), Сро (5 мкг/доза) 50 мкг профіліну ж ОціЇ-А (50 мкг/доза), холестерин (50 мкг/доза), ОСА (50 мкг/доза), карбопол (0,05 95), ВАУК10056 вільна основа (100 мкг/доза) 50 мкг профіліну - ОціЇ-А (50 мкг/доза), холестерин (50 мкг/доза), ОБА (50 мкг/доза),
Т07 |карбопол (0,05 95), ВАУК1005Ф (100 мкг/доза), Сро (5ЕО І МО: 8; 65 95 чистота, 5 мкг/доза) 50 мкг профіліну - ОСВІ (І ус) (ОБА (12,5 мкг/доза), холестерин (12,5 мкг/доза),
ВАУК10059 (25 мкг/доза), лецитин (25 мкг/доза)) 50 мкг профіліну - ОСВІ «Сро (ЗЕО ІО МО: 8; 65 95 чистота, 5 мкг/доза) (ліо) (ОСА (12,5 мкг/доза), холестерин (12,5 мкг/доза), ВАУК1005Ф) (25 мкг/доза), лецитин (25 мкг/доза)) 50 мкг профіліну - Сро (ЗЕО ІЮ МО: 8; 65 95 чистота, 25 мкг/доза), ОЕАЕ-Декстран (500 мкг/доза), 45 95 об./о6б. Огакео! 6УВ, брап-80 (6,3 95 об./06.), Тмееп-80 (1,45 95 об./об.) 00170) Птахи були імунізовані двома підшкірними ін'єкціями (0,5 мл на дозу) профіліну плюс ад'ювант на 1-й день та потім на 7-й день життя. Через сім днів після другої імунізації (14 денного віку), птиці (за виключенням в групі Т01) контрольовано заражували 1х104 спорульованого ооциста Еїітегіа тахіта. 00171) Збільшення маси тіла визначали на 6-й день та на 15-й день після контрольного зараження. Крім того, визначалися ооцисти, які виділялися в фекалії з 6-9-ого дня після контрольного зараження Сироваткові антитіла проти профіліну оцінювали за допомогою ЕГІЗА. 00172) Контрольні групи: ін'єкції РВЗ5 та ніякого контрольне зараження (невакцинований без контрольного зараження контроль), ін'єкції РВЗ та контрольне зараження на 14-й день (невакцинований з контрольним зараженням контроль), профілін/без ад'юванта та контрольне зараження на 14-й день (антигенний контроль). 00173) Для того, щоб оцінити результати ураження, шість птахів / група були евтанізовані через 6 днів після контрольного зараження. Отримували приблизно 20 см кишкових сегментів, які простягаються на 10 см передньої та задньої до дивертикулуму, та розрізали вздовж.
Кишковий вміст обережно видаляли. Оцінка в діапазоні від 0 до 4 надавалась в залежності від тяжкості ураження. 00174) Для того, щоб оцінити продукування ооцистів в фекаліях, фекалії з кожної групи (8 птахів/група; 4 клітки з 2 птахів/клітка) збирали окремо через від 6 до 9 днів після контрольного зараження. Починаючи з 6 днів після контрольного зараження, були встановлені збірні клітки, та а доглядачам тварин було доручено не очищати фекалії. Фекальні випорожнення збирали з кожної клітки збору ооцистів, в яких тримали по 2 птахів на клітку. Піддони для збирання поміщали під кожну клітку на З дні, починаючи з 6 дня після ін'єкції, та фекальний матеріал збирали у великі пластикові баночки. Фекальні випорожнення в кожній баночці подрібнювали в блендері з водою, та два по 35 мл випадкових зразків було взято з кожного зразка. Для того, щоб підраховувати ооцисти кокцидії, спочатку були зроблені різні розбавлення для того, щоб визначити оптимальне розбавлення для підрахунку ооцистів для кожного зразка. Ооцисти підраховували мікроскопічно. Загальна кількість виділення ооцистів на курча розраховували, використовуючи формулу: загальна кількість ооцистів/птах - (кількість ооцистів х коефіцієнт розбавлення х об'єм зразка фекалій/об'єм камери для підрахунку)/ кількість птахів на клітку. 001751 Зразки крові (4 птахів / група) збирали на 9-й день після контрольного зараження
Зо Еїітегіа для вимірювання відповіді на антитіла. Зразкам крові давали згортатися при 47 протягом 4 годин, та сироватки відокремлювалися. Зразки сироватки досліджували на антитіла проти Еїтегіа, використовуючи ЕГІЗА. Коротко кажучи, мікротитрувальні планшети покривались протягом ночі 200 нг/лунка рекомбінантного кокцидіального антигена, промивали РВЗ-0,05 95
Тмееп, та блокували РВ5-1 95 ВЗА. Додавали сироваткові розбавлення, інкубували при постійному обережному струшуванні, промивали, та зв'язані АБ детектували з використанням кон'югованого з пероксидазою кролячого анти-курячого ІдсС (Бідта) та специфічного до пероксидази субстрата. Оптичну густину (000) вимірювали при 450 нм, використовуючи мікропланшетний рідер (Віо-Рай, Вісптопа, СА). (00176) Всі значення виражаються у вигляді середнього значення х ЗЕМ. Відмінність між середніми значеннями вважалася значною при р « 0,05.
І00177| Негативний контроль та контроль з контрольним зараженням в значній мірі відрізнялися через б днів, але не через 15 днів після інфікування. Через б днів після контрольного зараження втрата маси у контролі з контрольним зараженням у порівнянні з негативним контролем становила приблизно 1595. Жодна обробка не відрізнялася ні від ад'ювантного контролю або від контролю з контрольним зараженням, але обробки Т05, Т06 та
ТО8 також не відрізнялося від негативного контролю.
І00178| Трохи менше 6095 птахів мали оцінку ураження 2 або більш високу. Жодна композиція в значній мірі не відрізнялася від контролю контрольного зараження. Група Т09 була найбільш невдалим виконавцем. Т04 була кращим виконавцем.
І00179| Як правило, кажучи про зменшення « 1 Ід на виході не вважається біологічно релевантним, але все ще може свідчити про активний імунітет. Тільки композиції, які давали в значній мірі менше, ніж контроль з контрольним зараженням, були ТО05 та Т09.
І001801| Відповідь на антитіло, як правило, не вважається такою, що має відношення до імунітету щодо кокцидіозу, тому не може корелювати з іншими критеріями. В зазначених вище експериментах в групі Т07 викликалась відповідь на антитіло, яка була більш високою, ніж відповідь, викликана або негативним (у невакцинованих, неінфікованих птахів), позитивним контролем (у невакцинованих, інфікованих птахів), або птахів, вакцинованих тільки антигеном. В групах Т05, Т06 та Т08-Т10 викликались більш високі відповіді на антитіло, ніж у негативного контролю (у невакцинованих, неінфікованих птахів). бо І00181| Результати підсумовані в таблиці 22. Підвищення маси тіла, рівень антитіл у сироватці (виражений як до неінфікованого контролю) та показники ураження, продукування ооцистів (виражений як 9о інфікованого контролю) після імунізації птахів двома підшкірними ін'єкціями профіліну плюс різні ад'юванти на 1-й день та 7-й день після народження та наступне контрольне зараження 1 х 104 ооцистами Еїтегіа тахіта у віці 14 днів.
Таблиця 22
Продукування ооцистів,| Показники ураження, титр АВ У
Група о Від контролю Фо від інфікованого Фо від інфікованого сироватці й контролю, день 6 контролю, день 6 (00450), 75 від " " контролю тої | лою | 100 Ї 77777077 17771717171711011111111711111лоо то2 | 85 | 96 | (хв лоб | 777777/сл1оо0 7/1 1890 тоз3 | 86 | 96 | щ(хБ 83. | 7777/7637 171930 тоб | 83 | 90 | щБКК 74 2 щ Ї щ щ-(Б74 | 268 7т07 | 92 | 96 | щБ83 | 42 | зо то | 86 | 95 | (Жж 56 | юю 95..ЮЙЮЙЙЮЙЮЙ.|.ЮСс2го5щ ло | 86 | 87 | щ ліз! 77777763 712690
Приклад 6 - Вакцина ВМОМ/ІВЕ, в яку добавлено як ад'ювант ОСКІ «бро 00182) В даному прикладі оцінювали ад'ювантну ефективність ОСІ ліпосом з Сро (без
ОЕМ). Крім того, порівнювалися різні способи навантаження ліпосом. 00183) Експериментальна модель була наступною (Таблиця 21): з фер ня тестя вок негативний контроль
ОпціЇ-А (250 мкг), холестерин (250 мкг), ОБА (100
Опції А, який містить мкг), КАРБОПОЛО (0,0375 90 об./об.), то2 ад'ювант (дро3 з ВМОМ 1 та | ВАУК1005Фацетат (1 000 мкг), ЗЕО ІЮ МО: 8 (100 вУри г) мкг, 65 95 гомогенність) ж 10 мкг кожного з рекомбінантних ВМОМ 1 та 2 др 53
ОСТІ «т (сахароза ліофіл. |Холестерин (250 мкг), ОСА (250 мкг), ВАУК1005Ф то без антигена) - твурМм 1, вільна основа (500 мкг), лецитин (500 мкг), ЗЕО твУрМ 2 та тіВвКк ІО МО: 8 (100 мкг, 65 95 гомогенність)
ОСІ (не ліофіл)у тВМОМ то 9 (вмоувтатюно ев
ОСІ «т (активне то5 навантаження з антигеном, |в тТо3 потім сахароза ліофіл.) тв 1, твУру 2 та тівк
Холестерин (250 мкг), ОСА (250 мкг), ВАЖК10055 тов рені-окм (сахароза вільна основа (500 мкг), лецитин (500 мкг), ЗЕО ліофіл.) ТВУОМ 1, ТВУОМ 2 || МО: 11, з фосфоротіоатними зв'язками (100 8. тІВВ б Р
МКГ) (00184) Вакцини в групах Т03-Т06 також містили твмО1 (4 500 ум.од./доза) - ВМОМІ1 (4 500 ум.од.), ВМОМ 2 (4 500 ум.од.), тівк 10810910 ТСІО5О (попередньо інактивована доза). 001851) Здорові голитинські телята (віком 6-7 місяців, серонегативні щодо ВМОМІ, ВМОМ2 та
ІВК) були включені в дане дослідження (п-9 на групу обробки). Телятам вводили 2 мл призначеної вакцини підшкірно на 0-й та 28-й день. Вірулентне ВМОМ2 контрольне зараження (4 мл (5,14 Год10ТсСІ050 на дозу) інтраназально) проводили на 49-й день. Проводили клінічна спостереження, та вимірювали місця ін'єкцій та ректальні температури с початку до кінця кожної вакцинації. Зразки крові збирали для підрахунку білих кров'яних клітин, вірусемії та серології через 63 дні. 00186) Всі телята в групах Т02, ТО3, Т04 та Т06 досягали титрів 1:38 проти ВМОМ-1а та
ВУрМ2 перед контрольним зараженням, в порівнянні з 22,1 та 11,1 95 телят в Т05. Вважається, що завдяки активному навантаженню, використовуваному в ТО05, більшість антигенів була видалена з вакцинного препарату. Таким чином, тварини в групі ТО5 отримували менше антигена, ніж тварини в групах ТО3, Т04 та Т06. Тому, інтерпретація спостережень за групою
ТО5 повинна тлумачитись обережно.
І00187| Незважаючи на зазначене вище, титри ВМОМ-1а та ВМОМ2 для ТО5 були в значній мірі більш низькими, ніж для інших вакцинованих груп на 28-й, 49-й та 63-й день. Ніякі телята в
Т02 або ТО05 не досягали титрів 1:8 проти ВНМ перед контрольним зараженням, та дані групи також мали в значній мірі більш низькі титри в порівнянні з іншими вакцинованими групами на 28-й, 49-й та 63-й день. Середні значення, отримані за методом найменших квадратів, для 9дро3-1 ЗЕС було в значній мірі більш високим для Т02 в порівнянні з всіма іншими групами обробки на 0-й, 35-й та 56-й день, та середні значення, отримані за методом найменших квадратів, для др53-2 ЗЕС були в значній мірі більш високими для 102 на 35-й та 56-й день.
І00188)| Вірусемія спостерігалася у всіх телят в ТО1 та ТО5. Ні у кого з телят в групі Т02 не розвинулася вірусемія після контрольного зараження. В групах ТО3, 104 та Т06 у 22,2, 33,3 та 33,3 95 телят розвинулася вірусемія; дані групи в значній мірі не відрізнялися від 702.
Тривалість вірусемія була в значній мірі довшою в ТО1 та ТО05 в порівнянні з всіма іншими групами обробки. При визначенні лейкопенії за 40 95 зниженням рівня М/ВС від вихідного, 22,29У5 телят в групі Т02 були лейкопенічними після контрольного зараження, тоді як лейкопенічними були всі телята в усіх групах. Телята в групах ТО1 та Т05 мали в значній мірі довшу тривалість лейкопенії в порівнянні з усіма іншими групами (8,6 днів, нуль днів, 0,2 дні, 0,7 днів, б,/ днів, та 0,8 днів для груп Т01-Т06, відповідно). Тільки легкі ознаки клінічного захворювання спостерігались після контрольного зараження в даному дослідженні. В контрольній групі ТО1, 22,2 95 телят мали клінічні оцінки 22 після контрольного зараження, тоді як 11,1 95 телят в групі ТО5 мали клінічні оцінки 22 після контрольного зараження. Жодне з телят в будь-якій іншій групі обробки не мало клінічні оцінки 22 після контрольного зараження.
І00189| Тимчасові підвищенні температури спостерігались в 102 на 1-й та 29-й день.
Температури всіх інших телят були нормальними протягом всього дослідження.
Таблиця 22
Середні значення ректальної температури, отримані за методом найменших квадратів, для фази вакцинації, "ЕЕ обробки 0о0 01 02 (0/5) 07 28 23 20) 31 35
Коо)
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10)
Таблиця 23
Середні значення ректальної температури, отримані за методом найменших квадратів, для фази контрольного зараження, "Е обробки | 47 48 49 50 51 52 53 54 55
Група обробки День 56 | День 57 | День 58 | День 59 | Деньбо | Деньб1і | День 62 | День 63 102,65 | 103,55 | 1045са | 05,2 | 1045 | ТО3,85 | 103,25 | 102,55 101,8а | т102,5а | 102,3а | 102,52 | 102,5а | 10242а | 101,5а | 101,8 25 102,65 | 103,4 | 103,75 | то3,5а5 | 102,62 | 102,02 | 101,62 | 02,1 102,85 | 102,95 | 103,35 | 104,99 | 103,85 | 102,6а | 101,62 | 101,72 102,95 | 104,6с | то509 | 10529 | т10553с ) 10435 | 102,65 | 102,4 5 102,45 | ч102,8а | 103,25 | 1042 | 103,0а | 102,0а | 101,62 | 101,72
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10) 00190) Аналіз окремих тварин показав, що в групі Т02 (в які добавлені як ад'ювант Опії А, який містить ад'ювант), чотири тварини мали температуру понад 103,5Е після першої ін'єкції та дві тварини мали температуру понад 103,5Е після другої ін'єкції. Крім того, одна тварина мала температуру 103,2 Є на 1-й день (через день після першої вакцинації) та п'ять мали температури в діапазоні 103,0-103,4 Е на 29-й день (через день після другої вакцинації). На відміну від цього, жодна з тварин, вакцинованих з ад'ювантами, які не містять Опції А, не мала температуру понад 103,5 Е або після першої, або після другої вакцинації. Двоє мали температури в діапазоні 103,0-103,4 Р.
І00191)| В даному дослідженні не спостерігалось ніяких реакцій в місці ін'єкції 2200 см3.
Група ТО02 (в які добавлені як ад'ювант Опції А, який містить ад'ювант) мала в значній мірі більші реакції в місці ін'єкції на 2-й, 7-й та 29-й день в порівнянні з всіма іншими групами обробки.
Вимірювані реакції в місці ін'єкції були ще присутніми на 49-й день в 102 (друга ін'єкція) та ТО6 (перша ін'єкція).
Таблиця 1
Середні значення реакції в місці ін'єкції, отримані за методом найменших квадратів, після першої вакцинації (см)
Група обробки День 00 День 01 День02 | Деньо3З | День07 | День28 | День 49 тої | 00 | 002 | 002 | 002 | 00 | 00 | 008 то2г | 009 | 202 | 54 | 57» | 72 | 02 | 008 тоз | 00 | 032 | ї78 | тї2а | ТО» | 00 | 008 то4 | 009 | 042 | 21» | 00 | 20» | 00 | 008 то5 | 00 | 002 | 002 | 002 | 00 | 00 | 008 тоб | 008 | 122 | 3935 | 42» | 21» | 00 | 062
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (р«е0,10)
Таблиця 25
Середні значення реакції в місці ін'єкції, отримані за методом найменших квадратів, після другої вакцинації (см)
Група обробки тої 77777 | 002 | 008 | 00 | 038 | 00а | 00 то2 77 | 002 | 35885 | 58» | 549 | 83» | 02 то3 77777 | 002 | 242 | 04 | 36 | 988 | 00 т0о4 77 | 002 | 098 | 2 | 51 | 79а | 008 то5. юю | 002 | 008 | 00 | 00 | 002 | 00 тоб 777 | 002 | т2е | тет | 308 | 39» | 00а
Значення з різними верхніми індексами в значній мірі відрізняються (рх0,10) 00192) Загалом, вакцинні кандидати 702, ТО03, Т04 та Т06 відповідали критеріям результату для забезпечення титрів ВМОМ2 »1:8 у всіх телят. Кандидат на вакцину Т02 також забезпечив 100 95 захист проти вірусемії та повний захист проти лейкопенії (як виміряно за 40 956 зниженням рівня МУВС). Телята в даній групі зазнали тимчасового підвищення температури та реакції в місці ін'єкції.
00193) Всі публікації, які наводяться в описі, як патентні публікації, так і непатентні публікації, свідчать про рівень кваліфікованості фахівців у даній галузі, до якої даний винахід відноситься. Всі дані публікації є включеними в даний документ у повному обсязі у вигляді посилання в тій самій мірі, як у випадку, коли кожна окрема публікація була б конкретно та індивідуально вказана як така, що включена у вигляді посилання.
І00194| Незважаючи на те, що винахід в даний документ описується з посиланням на конкретні варіанти здійснення, слід розуміти, що дані варіанти здійснення є тільки ілюстрацією принципів та застосувань представленого винаходу. Тому слід розуміти, що численні модифікації можуть бути зроблені в ілюстративних варіантах здійснення, та що інші варіанти можуть бути розроблені не відходячи від задуму та обсягу представленого винаходу як визначено в наступній формулі винаходу.
Claims (22)
1. Ліпосома, яка по суті є вільною від сапоніну та яка містить зовнішню ліпідну двошарову мембрану та внутрішню камеру, де зовнішня мембрана містить: а) четвертинну амонійну сполуку, яка складається з чотирьох алкільних ланцюгів, два з яких являють собою Стіо-Сгоалкіли та два, що залишились, являють собою С1-Сзалкіли; р) стерин, вибраний з групи, яка складається з ДВ-ситостерину, стигмастерину, ергостерину, ергокальциферолу та холестерину; с) фосфоліпід; та а) гліколіпід формули І: - 0-68 о ух - о М Ми Ю- о Мн- 5 ; Формула в якій К' являє собою водень або насичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; Х являє собою -СН»е-, -0- або -МН-; В? являє собою водень або насичений, або ненасичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; КЗ, В" та К? незалежно являють собою водень, -5042, -РОг-, -СОСі-оалкіл; КЗ являє собою І -аланіл, І-альфа- амінобутил, І -аргініл, І -аспаргініл, І -аспартил, І -цистеїніл, І-глутаміл, І -гліцил, І -гістидил, 1 - гідроксипропіл, І -ізолейцил, І -лейцил, І -лізил, І -метіоніл, І -орнітиніл, І -фенілаланіл, І -проліл, Зо І-серил, І-треоніл, І -тирозил, І -триптофаніл, та І -валіл або їх О-ізомери.
2. Ліпосома за п. 1, де четвертинна амонійна сполука являє собою ЮА (диметилдіоктадециламоній), стерин являє собою холестерин, та гліколіпід являє собою М-(2- дезокси-2-І -лейциламіно-б-ЮО-глюкопіранозил)-М-октадецилдодеканоїламід або його сіль.
З. Ліпосома за п. 1 або 2, яка додатково містить, у внутрішній камері, імуностимулюючий олігонуклеотид, вибраний з групи, яка складається з імуностимулюючого рибонуклеотиду, СрО олігодезоксирибонуклеотиду, та їх комбінації.
4. Ліпосома за п. 3, в якій зазначений імуностимулюючий олігонуклеотид містить будь-яку одну з ЗЕО І МО: 1-14.
5. Ад'ювантна композиція, яка містить ліпосому відповідно до будь-якого одного з пп. 1-4.
6. Ад'ювантна композиція за п. 5, де зазначена ад'ювантна композиція по суті не містить сапонін.
7. Вакцинна композиція, яка містить ефективну кількість антигенного компонента та ад'ювантну композицію за п. 5 або п. 6.
8. Вакцинна композиція за п. 7, де зазначена вакцинна композиція по суті не містить сапонін.
9. Вакцинна композиція за п. 7 або 8, в якій антигенний компонент знаходиться всередині внутрішньої камери.
10. Вакцинна композиція за будь-яким одним з пп. 7-9, в якій антигенний компонент є вибраним з групи, яка складається з антигенів великої рогатої худоби, козиних антигенів, свинячих антигенів, антигенів птиці, антигенів коней, собачих антигенів та котячих антигенів.
11. Вакцинна композиція за будь-яким одним з пп. 7-10, в якій імуностимулюючий олігонуклеотид містить Сро олігодезоксирибонуклеотид.
12. Вакцинна композиція за п. 8, в якій антигенний компонент містить ІВК, ВМОМ-1 та ВМОМ-2, та де вакцинна композиція по суті не містить сапонін.
13. Вакцинна композиція для застосування в способі індукування імунної відповіді проти вірусу діареї великої рогатої худоби (ВМОМ) у великої рогатої худоби, де спосіб включає введення зазначеній великій рогатій худобі вакцинної композиції відповідно до п. 12.
14. Вакцинна композиція для застосування за п. 13, де зазначена імунна відповідь індукується без супутньої підвищеної температури.
15. Вакцинна композиція за п. 11, в якій антиген містить антиген птиці.
16. Вакцинна композиція за п. 15, в якій антиген являє собою профілін.
17. Вакцинна композиція для застосування в способі попередження виділення ооциста Е/тепла у тварини - домашньої птиці, інфікованої Е/тела, який включає введення зазначеній тварині вакцинної композиції за п. 16 перед зазначеним інфікуванням.
18. Вакцинна композиція за п. 10, в якій антигенний компонент містить вірус з олРНК, та де вакцинна композиція по суті не містить Сро олігодезоксирибонуклеотид.
19. Вакцинна композиція за п. 18, в якій вірус з ОЛлРНК являє собою вірус грипу.
20. Вакцинна композиція за п. 19, в якій вірус грипу являє собою інактивований вірус свинячого грипу (ІМ).
21. Спосіб отримання ліпосоми за п. 1, де спосіб включає: а) розчинення в органічному розчиннику четвертинної амонійної сполуки, стерину, фосфоліпіду та гліколіпіду формули І: ВВ- 0-56 о ух - о М хи - о Мн-5 ; Формула в якій К' являє собою водень або насичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; Х являє собою -СіН2-, -0- або -МН-; ЩВ2г являє собою водень або насичений або ненасичений алкільний радикал, який має аж до 20 атомів вуглецю; КЗ, В", та КЕ» незалежно являють собою водень, -5042, -РОг-, -СОСі-оалкіл; КЗ являє собою І -аланіл, І-альфа- амінобутил, І -аргініл, І -аспаргініл, І -аспартил, І -цистеїніл, І-глутаміл, І -гліцил, І -гістидил, 1 - гідроксипропіл, І -ізолейцил, І -лейцил, І -лізил, І -метіоніл, І -орнітиніл, І -фенілаланіл, І -проліл, І -серил, І-треоніл, І -тирозил, І -триптофаніл та І -валіл або їх О-ізомери; р) видалення органічного розчинника та утворення плівки; Зо с) регідратування плівки у водному розчиннику, таким чином, утворюючи регідратовану композицію; а) мікрофлюїдизування регідратованої композиції.
22. Спосіб за п. 21, в якому водний розчинник містить імуностимулюючий олігонуклеотид. 0 КомпютернаверсткаВ. Мацело 00000000 ДП "Український інститут інтелектуальної власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601 Зо
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562194355P | 2015-07-20 | 2015-07-20 | |
PCT/US2016/042882 WO2017015252A1 (en) | 2015-07-20 | 2016-07-19 | Liposomal adjuvant compositions |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA125017C2 true UA125017C2 (uk) | 2021-12-29 |
Family
ID=56555804
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UAA201800567A UA125017C2 (uk) | 2015-07-20 | 2016-07-19 | Ліпосомальна ад'ювантна композиція |
Country Status (28)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP3325015B1 (uk) |
JP (1) | JP6975132B2 (uk) |
KR (1) | KR102085968B1 (uk) |
CN (1) | CN107847603B (uk) |
AR (1) | AR105393A1 (uk) |
AU (1) | AU2016297529B2 (uk) |
BR (1) | BR112018001318B1 (uk) |
CA (1) | CA2992892C (uk) |
CL (1) | CL2018000155A1 (uk) |
CO (1) | CO2018000496A2 (uk) |
CY (1) | CY1124319T1 (uk) |
DK (1) | DK3325015T3 (uk) |
ES (1) | ES2878475T3 (uk) |
HK (1) | HK1250338A1 (uk) |
HR (1) | HRP20210872T1 (uk) |
HU (1) | HUE054422T2 (uk) |
LT (1) | LT3325015T (uk) |
MX (1) | MX2018000879A (uk) |
PH (1) | PH12018500146A1 (uk) |
PL (1) | PL3325015T3 (uk) |
PT (1) | PT3325015T (uk) |
RS (1) | RS62015B1 (uk) |
RU (1) | RU2736642C2 (uk) |
SI (1) | SI3325015T1 (uk) |
TW (1) | TWI655002B (uk) |
UA (1) | UA125017C2 (uk) |
WO (1) | WO2017015252A1 (uk) |
ZA (1) | ZA201800285B (uk) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TW202206098A (zh) * | 2020-08-11 | 2022-02-16 | 美商碩騰服務公司 | 抗冠狀病毒疫苗 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3521994A1 (de) * | 1985-06-20 | 1987-01-02 | Bayer Ag | N-(2-aminoacylamido-2-desoxy-hexosyl)-amide-, -carbamate und -harnstoffe, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung in arzneimitteln |
US5556637A (en) * | 1990-08-06 | 1996-09-17 | A. Nattermann & Cie. Gmbh | Water containing liposome system |
BR9809381A (pt) * | 1997-04-30 | 2000-07-04 | Merieux Oravax | Composição de vacina anti-helicobacter compreendendo um adjuvante do tipo th1 |
US8088388B2 (en) * | 2002-02-14 | 2012-01-03 | United Biomedical, Inc. | Stabilized synthetic immunogen delivery system |
EP1547581A1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-06-29 | Vectron Therapeutics AG | Liposomal vaccine for the treatment of human hematological malignancies |
ES2315880T3 (es) * | 2004-07-07 | 2009-04-01 | Statens Serum Institut | Composiciones y procedimientos para estabilizar formulaciones adyuvantes con base lipidica usando glucolipidos. |
US7749520B2 (en) * | 2004-07-07 | 2010-07-06 | Statens Serum Institut | Compositions and methods for stabilizing lipid based adjuvant formulations using glycolipids |
MY159370A (en) * | 2004-10-20 | 2016-12-30 | Coley Pharm Group Inc | Semi-soft-class immunostimulatory oligonucleotides |
BRPI0706709B8 (pt) * | 2006-01-26 | 2021-05-25 | Pah Usa 15 Llc | composição e processo para preparar a composição |
DK3056214T3 (da) * | 2008-06-27 | 2019-05-13 | Zoetis Services Llc | Hidtil ukendte adjuvanssammensætninger |
US20120052088A1 (en) * | 2009-04-30 | 2012-03-01 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | Pneumococcal vaccine and uses thereof |
TR201808222T4 (tr) * | 2009-09-03 | 2018-07-23 | Pfizer Vaccines Llc | PCSK9 aşısı. |
JP6034285B2 (ja) * | 2010-05-28 | 2016-11-30 | ゾエティス・ベルジャム・エス・アー | 抗原および免疫調節ワクチンおよびコレステロール、ならびにその使用 |
US20140112979A1 (en) * | 2011-07-04 | 2014-04-24 | Statens Serum Institut | Methods for producing liposomes |
CN102973506B (zh) * | 2011-09-05 | 2015-06-03 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 阳离子脂质体及其制备方法 |
LT3542819T (lt) * | 2013-05-14 | 2021-11-10 | Zoetis Services Llc | Naujos vakcinos kompozicijos, apimančios imunostimuliuojančius oligonukleotidus |
BR112016005948A2 (pt) * | 2013-09-19 | 2017-09-26 | Zoetis Services Llc | adjuvantes com base em óleo |
FR3012964A1 (fr) * | 2013-11-12 | 2015-05-15 | Seppic Sa | Vaccins adjuves pour vaccination aviaire in ovo |
-
2016
- 2016-07-19 BR BR112018001318-8A patent/BR112018001318B1/pt active IP Right Grant
- 2016-07-19 SI SI201631259T patent/SI3325015T1/sl unknown
- 2016-07-19 TW TW105122775A patent/TWI655002B/zh active
- 2016-07-19 EP EP16745318.2A patent/EP3325015B1/en active Active
- 2016-07-19 KR KR1020187004751A patent/KR102085968B1/ko active IP Right Grant
- 2016-07-19 WO PCT/US2016/042882 patent/WO2017015252A1/en active Application Filing
- 2016-07-19 RU RU2018102114A patent/RU2736642C2/ru active
- 2016-07-19 CN CN201680042420.3A patent/CN107847603B/zh active Active
- 2016-07-19 CA CA2992892A patent/CA2992892C/en active Active
- 2016-07-19 PT PT167453182T patent/PT3325015T/pt unknown
- 2016-07-19 UA UAA201800567A patent/UA125017C2/uk unknown
- 2016-07-19 AU AU2016297529A patent/AU2016297529B2/en active Active
- 2016-07-19 DK DK16745318.2T patent/DK3325015T3/da active
- 2016-07-19 PL PL16745318T patent/PL3325015T3/pl unknown
- 2016-07-19 AR ARP160102185A patent/AR105393A1/es unknown
- 2016-07-19 HU HUE16745318A patent/HUE054422T2/hu unknown
- 2016-07-19 MX MX2018000879A patent/MX2018000879A/es unknown
- 2016-07-19 RS RS20210785A patent/RS62015B1/sr unknown
- 2016-07-19 ES ES16745318T patent/ES2878475T3/es active Active
- 2016-07-19 JP JP2018502803A patent/JP6975132B2/ja active Active
- 2016-07-19 LT LTEP16745318.2T patent/LT3325015T/lt unknown
-
2018
- 2018-01-16 ZA ZA2018/00285A patent/ZA201800285B/en unknown
- 2018-01-18 PH PH12018500146A patent/PH12018500146A1/en unknown
- 2018-01-19 CO CONC2018/0000496A patent/CO2018000496A2/es unknown
- 2018-01-19 CL CL2018000155A patent/CL2018000155A1/es unknown
- 2018-07-27 HK HK18109762.7A patent/HK1250338A1/zh unknown
-
2021
- 2021-06-01 HR HRP20210872TT patent/HRP20210872T1/hr unknown
- 2021-07-14 CY CY20211100637T patent/CY1124319T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6667704B2 (ja) | 油性アジュバント | |
JP6294938B2 (ja) | 新規なアジュバント組成物 | |
US10456459B2 (en) | Liposomal adjuvant compositions | |
EP4218808A2 (en) | Adjuvant and vaccine compositions | |
UA125017C2 (uk) | Ліпосомальна ад'ювантна композиція | |
ES2938847T3 (es) | Composiciones para la inducción de la respuesta inmunitaria |