UA122960C2 - Силосний інокулят для обробки силосу, спосіб обробки силосу, силос та виділені штами cncm i-4784 та cncm i-4785 для використання в обробці силосу - Google Patents

Силосний інокулят для обробки силосу, спосіб обробки силосу, силос та виділені штами cncm i-4784 та cncm i-4785 для використання в обробці силосу Download PDF

Info

Publication number
UA122960C2
UA122960C2 UAA201601498A UAA201601498A UA122960C2 UA 122960 C2 UA122960 C2 UA 122960C2 UA A201601498 A UAA201601498 A UA A201601498A UA A201601498 A UAA201601498 A UA A201601498A UA 122960 C2 UA122960 C2 UA 122960C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
silage
smsm
effective amount
stability
depository number
Prior art date
Application number
UAA201601498A
Other languages
English (en)
Inventor
ШВАН Розан ФРЕЙТАС
Авіла Карла Луіза Сілва
АВИЛА Карла Луиза СИЛВА
Пінту Жозе Кардозу
ПИНТУ Жозе КАРДОЗУ
Ерік Шво
Эрик ШВО
Ренато Шмідт
Ренато ШМИДТ
Original Assignee
Данстар Фермент Аг
Універсідаді Федерал Ді Лаврас
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Данстар Фермент Аг, Універсідаді Федерал Ді Лаврас filed Critical Данстар Фермент Аг
Publication of UA122960C2 publication Critical patent/UA122960C2/uk

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K40/00Shaping or working-up of animal feeding-stuffs
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K30/00Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
    • A23K30/10Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder
    • A23K30/15Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging
    • A23K30/18Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging using microorganisms or enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/30Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for swines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/80Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87Re-use of by-products of food processing for fodder production

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)

Abstract

Винахід стосується силосного інокуляту, що містить ефективну кількість Lactobacillus hilgardii для консервування силосу, де вказаний силос, який містить ефективну кількість, покращує аеробну стабільність силосу при одночасному збільшенні кількості отриманої сухої речовини. Винахід також стосується способу обробки силосу, що включає додавання до силосу силосного інокуляту, та стосується силосу, що містить ефективну кількість Lactobacillus hilgardii для консервування силосу. Також винахід стосується виділених штамів Lactobacillus hilgardii з депозитарними номерами CNCM I-4784 та CNCM I-4785 для використання в обробці силосу.

Description

Даний опис стосується силосу, зокрема силосних інокулятів і способу застосування силосних інокулятів для підвищення аеробної стабільності силосу.
Силос являє собою ферментований корм з високим вмістом вологи для згодовування жуйним тваринам, таким як тварини, які ремигають, типу рогата худоба і вівці. Силос ферментують і зберігають в силососховищі, процес називається силосуванням. Силос частіше за все отримують з трави або злакових культур, які включають пажитницю, кострицю, люцерну, кукурудзу (маїс) або сорго. Силос отримують з суцільної рослини або її частини. Силос також можна отримати з багатьох інших польових культур, що включають цукрову тростину, і іноді, коли він отриманий, використовують інші назви, такі як, наприклад, вівсяний силос для вівса, сінаж для люцерни. Іноді використовують суміш, таку як овес і горох.
У останні роки виробництво силосу і пов'язане з ним рослинництво розвинулося до такої міри, що можна виділити цілий ряд різних процесів. Такими процесами є: (ї) силосування молодої трави з особливо низьким вмістом сухої речовини, наприклад, менше 25 95; (ії) силосування більш зрілих трав з більш високим вмістом сухої речовини, або силосування молодої трави з високим вмістом сухої речовини, але отриманої пров'ялюванням; і (ії) силосування суцільного маїсу, що включає стебла і качани, звичайно із вмістом сухої речовини близько 35 95, і цілих зернових культур, наприклад, пшениці, із вмістом сухої речовини 45-50 95.
У той час як ці процеси загалом дають хороший вихід, вони не обходяться без проблем.
Особливо у випадках (ії) і (ії) постійно виникає одна з основних проблем. Це явище відоме як аеробне псування. Процес аеробного псування відбувається при відкритті силососховища, коли матеріал піддається впливу повітря. Його можна розділити на окремі фази. Спочатку початкова фаза, на якій дріжджі і іноді оцтовокислі бактерії розмножуються з поглинанням консервуючих органічних кислот, підвищенням рн силосу, і температура починає зростати. Після первинного підвищення рН відбувається друга фаза, на якій спостерігається активність бактерій і пов'язане з нею збільшення температури. Подальша фаза включає активність різних мікроорганізмів, в тому числі грибів.
У таких силосах, які мають значний вміст сухої речовини, тобто більший 30 95, проблема псування є особливо гострою. Псування спостерігається в більшій або меншій мірі, як тільки силосний бурт відкривається і піддається впливу повітря.
Зо Біологічні добавки, такі як бактеріальні інокуляти, широко використовуються для поліпшення процесу силосування, переважно для збільшення об'єму і швидкості виробництва молочної кислоти і запобігання аеробному псуванню. У патенті США Мо 6326037, виданому Мапп і інш., забезпечуються способи і композиції для поліпшення даної ситуації. Зокрема, приведений там опис оснований, щонайменше частково, на визначенні процесу аеробного псування, як тісно пов'язаного з нагріванням в бурті під впливом надходження повітря. Подальше дослідження такого силосу показало високу концентрацію термофільних грампозитивних бактерій, що включають бацили, дріжджів і плісеней. Це очевидно свідчить про початок повторного бродіння, схожого на те, яке відбувається при компостуванні (головного бродіння, яке є процесом силосування). На цій стадії бродіння переважають дріжджі і плісняви. З'ясовано, що для запобігання псуванню трьома основними групами мікроорганізмів, які необхідно убити або придушити їх розвиток, є спороутворювальні бактерії, дріжджі і гриби. Усунення тільки однієї групи може привести до зростання інших груп, отже, псування не відвертається.
Таким чином, Мапп пропонує для запобігання псуванню використовувати обробку мікроорганізмами, які, щонайменше, насамперед придушують мікроорганізми, які викликають аеробне псування, зокрема дріжджі, і на поверхні силосу гриби. Мікроорганізм, здатний до цього, також може придушувати розвиток інших мікроорганізмів, що викликають псування, і може бути визначений скринінгом. Мікроорганізм видів І асіобасіїйи5 рисппегі, який відповідає цій вимозі, депонований в Національних колекціях промислових і морських бактерій 13 лютого 1996 року. Йому присвоєний інвентарний номер 40788.
Незважаючи на те, що обробки з використанням І асіобасійи5 Бисппегі знижують псування силосу, вони роблять це тільки в обмеженій мірі. Відповідно, залишається потреба у вдосконаленій обробці силосу, зокрема для підвищення аеробної стабільності силосу з одночасним збільшенням кількості отриманої сухої речовини.
Суть винаходу
У одному аспекті пропонується спосіб обробки силосу. Спосіб включає додавання до силосу силосного інокуляту, що містить ефективну кількість І асіорасійи5 Ппіїдагаїї для консервування силосу. Силосний інокулят є ефективним для запобігання або зниження аеробного псування.
У іншому аспекті пропонується силосний інокулят, що містить ефективну кількість
І асторасіїи5 піїдагаїйї для консервування силосу. бо У одному аспекті силосного інокуляту силосний інокулят додатково містить носій.
У додатковому аспекті пропонується силос, що містить ефективну кількість Гасіобрасійи5 пПіїдагаїй для консервування силосу.
У одному аспекті способу в силосному інокуляті і силосі Іасіобасійи5 Піїдагаї є, щонайменше, одним зі штаму І асіорбасійи5 Ппіїдагаїй 51151, що має інвентарний номер СМСМ І- 4784, зареєстрованого 26 червня 2013 року, і штаму Гасіорасійи5 Піїдагай 51-52, що має інвентарний номер СМСМ 1-4785, зареєстрованого 26 червня 2013 року, або їх генетичних еквівалентів. Вказані штами були депоновані І айетапіа 5АБ5 19 ге ае5 Вгідцейіег5, 31702
Віадпас Седех, Франція.
У одному аспекті способу силосний інокулят додатково містить носій.
У ще одному аспекті пропонується виділений штам І асіорасійиз5 Ппіїдагаїй, штам 51/51, що має інвентарний номер СМСМ 1-4784, зареєстрований 26 червня 2013 року, або його генетичні еквіваленти.
У іншому аспекті пропонується виділений штам І асіорасійив5 Піїдагаїй, штам 51/52, що має інвентарний номер СМОСМ 1-4785, зареєстрований 26 червня 2013 року, або його генетичні еквіваленти.
Докладний опис
Згідно з даним описом були виділені і очищені молочнокислі бактерії, які поліпшують аеробну стабільність силосованого корму. Зокрема, Іасіобасійн5 Піїдагаїй, як встановлено, підвищують аеробну стабільність силосу. Крім того, при інокуляції силосу штами І асіорасійи5 піїдагай приводять до отримання силосу, який є добре консервованим, і в якому початок повторного бродіння, пов'язаного з аеробним псуванням і нагріванням, знижений або відвернений.
Штами за даним описом були виділені з силосу з цукрової тростини (Засспагит 5рр.). Після очищення і виділення штамів були проведені таксономічні дослідження для ідентифікації штамів. Два з них були ідентифіковані як І асіорасійи5 Підагаїй, і їм присвоєні номери з урахуванням прототипу 51ІЇ 51 і 51 52.
Таким чином, даний опис стосується силосних інокулятів і способу застосування силосних інокулятів для підвищення аеробної стабільності силосу.
Термін "ефективна кількість для консервування силосу", в значенні, що використовується тут, потрібно розуміти як такий, що стосується кількості, яка є, щонайменше, достатньою для консервування силосу. Таким чином, кількість є, щонайменше, достатньою для поліпшення стабільності силосу, але переважно є кількістю, достатньою для поліпшення стабільності силосу з одночасним збільшенням кількості отриманої сухої речовини.
Термін "аеробна стабільність", в значенні, що використовується тут, потрібно розуміти як
З5 такий, що стосується кількості годин, протягом яких температура силосу залишається стабільною до підвищення більше ніж на 22С в порівнянні з температурою навколишнього середовища.
Тепер буде зроблене посилання на варіанти здійснення, описані тут. Зрозуміло, що таким чином не передбачається обмеження об'єму розкриття. Крім того, зрозуміло, що дане розкриття включає будь-які зміни і модифікації в проілюстрованих варіантах здійснення і включає подальші застосування принципів розкриття, які звичайно приходять в голову фахівцям в тій галузі, до якої належить дане розкриття.
У одному варіанті здійснення пропонується спосіб обробки силосу. Спосіб включає стадію додавання в силос силосного інокуляту, що містить ефективну кількість І асіобасійив5 Піїдагаїї для консервування силосу. Силосний інокулят є ефективним для запобігання або зниження аеробного псування.
Також пропонується силосний інокулят, що містить, щонайменше, штам Гасіобасійив5 пПіїдагаїй. Зокрема, силосний інокулят містить ефективну кількість видів Гасіобасійи5 Ппіїдагаїй для консервування силосу.
У одному варіанті здійснення способу і силосних інокулятів, описаних вище, штам
Іасіобасійи5 піїдагаї може бути виділеним штамом ІасіобасіШи5 Піїдагайїй СМСМ 1-4784, зареєстрованим 26 червня 2013 (51І 51), СМОМ 1-4785, зареєстрованим 26 червня 2013 (51І 52), або їх генетичними еквівалентами. Зрозуміло, що також передбачаються мутанти або генетичні еквіваленти штамів СМОСМ 1-4784, зареєстрованого 26 червня 2013 (51151), ії СМОМ 1-4785, зареєстрованого 26 червня 2013 (51 52), які зберігають функціональну активність відносно підвищення аеробної стабільності корму, як описано в даному описі.
Незалежно від способу, яким викликані мутації або генетичні еквіваленти, критичним питанням є те, що вони виконують функції відносно підвищення аеробної стабільності силосу, як описано для батьківських видів і/або штаму. Іншими словами, даний опис включає мутації, 60 що приводять до таких незначних змін, як, наприклад, незначні таксономічні зміни.
Силосні інокуляти згідно з даним описом можуть знаходитися або в рідкій або твердій формі і можуть містити додаткові штами бактерій. Силосні інокуляти згідно з даним описом можуть містити відповідний носій або можуть бути використані як отримані. У твердій формі силосний інокулят може містити твердий носій. Відповідний носій може бути у водній або неводній рідкій формі або в твердій формі. Приклади носія у водній або неводній рідкій формі включають воду, масла і парафіни. Приклади носія в твердій формі включають органічний або неорганічний носій, такий як, наприклад, мальтодекстрин, крохмаль, карбонат кальцію, целюлоза, сироватка, подрібнені кукурудзяні качани і діоксид кремнію. Тверду композицію можна наносити безпосередньо на корм у вигляді легкого порошкового напилення, або, якщо вона виділена на рідкому носії, її можна успішно розпилювати на корм. Зрозуміло, що можна використати будь- який інший відповідний носій для цілей даного опису.
З'ясовано, що інгібуюча речовина може бути вторинним метаболітом. Таким чином, його повний ефект не може бути помічений, якщо, при використанні в силосі, силос відкривають дуже рано. Силос переважно зберігають закритим, щонайменше, 30 діб, і більш переважно, щонайменше, 45 діб. Оптимальні періоди можуть залежати, зокрема, від об'єму силосної маси, а також від природи матеріалу, що силосується.
Матеріали, які підходить для силосування згідно з даним описом, схильні до аеробного псування. Матеріали звичайно містять, щонайменше, 2095 по вазі сухої речовини. Такі матеріали включають, наприклад, жито або звичайні трави, маїс, в тому числі високовологу кукурудзу, суцільну рослину кукурудзи, люцерну, пров'ялені трави, пшеницю, бобові рослини, сорго, соняшник, ячмінь, іншу суцільну круп'яну культуру і іншу польову культуру, таку як цукрова тростина. Силос може знаходитися в пакунках (форма особливо схильна до аеробного псування), мішках з обмеженою кількістю кисню, бункерах, силосних вежах, силососховищах з обмеженою кількістю кисню, мішках, пакетах або будь-якій іншій відповідній формі для зберігання, яка може бути схильна до аеробного псування. У одному варіанті здійснення силосний інокулят за даним описом можна використати з будь-яким відповідним кормом для тварин, або твердим або рідким, для згодовування тваринам, таким як, наприклад, свині, домашня птиця або жуйні тварини.
Наступні приклади служать для подальшого опису і визначення винаходу і не призначені для обмеження винаходу яким-небудь чином.
Приклади
Приклад 1
Силос отримували з використанням свіжозібраної цукрової тростини з рослин, яким було приблизно 12 місяців. Цукрову тростину збирали вручну і нарізували з використанням лабораторного подрібнювача (Ріппеїго, модель: РР-47) до наближеної довжини 30 мм. З кг подрібненого матеріалу змішували з інокулятами і витримували в пластикових відрах з ПВХ (міні-силососховищах, 10 см в діаметрі і 60 см в довжину), які закривали герметичними кришками, що містять клапани ВОМЗБЕМ для випускання газу. Матеріал в силососховище пресували до щільності приблизно 630-19,9 кг/м3. Міні-силососховища витримували при кімнатній температурі і аналізували через 61 добу зберігання, і готували три повторності для кожного силососховища.
Силос отримували з використанням І асіорасійи5 ріапіагит 5134 (І. ріапіагит звичайно використовують як силосний інокулят) і штамів І асіобасійи5 Піїдагай 51-51 (СМОСМ 1-4784, зареєстрованого 26 червня 2013 року) і 51.52 (СМСМ 1-4785, зареєстрованого 26 червня 2013 року) як інокулятів. Штами І асіорасіШиз ріапіагит і Іасіобасійи5 Ппіїдагадії виділяли з силосу з цукрової тростини і ідентифікували з ідентичністю послідовності 98 95. Силос без інокулятів використовували як контроль. Інокуляти культивували по методу Аміїа і інш. (Вплив місцевого і промислового штаму Гасіобасіїйи5 рисппегі на якість силосу з цукрової тростини, Сгаз5 Рогаде
Зсі 6:384-394, 2009). Потім в кінцевій культурі підраховували кількість клітин на агарі Ое Мап
Кодоза Зпагре (Охоїдй СМ3З61, Бейзінгсток, Гемпшир, Англія), і концентрацію культури доводили до Ід 9 КУО/мл. Культуру змішували з 80 мл стерильної дистильованої води і розпилювали на подрібнену цукрову тростину до кінцевої концентрації Ід 6 КУО/г трави. Контроль отримували з такою ж кількістю води без бактерій. Для кожної обробки використовували індивідуальний розпилювач для запобігання перехресному забрудненню.
Реєстрували вагу повних і пустих силососховищ. Після герметизації силососховища витримували при кімнатній температурі (в середньому 252С) і захищали від сонячних променів і дощу. Через 61 добу силосування повні силососховища зважували до відкриття. Втрати сухої речовини (СР) розраховували з використанням ваги і вмісту СР в свіжому кормі і силосі.
Інокуляція з використанням ГІ асіобасійи5 ріапіагит (5134) привела до отримання силосу з бо низьким вмістом СР, більш високими втратами СР і більш високим вмістом НДК в порівнянні з іншими штамами і контролем. У силосі, інокульованому штамами І асіобасійи5 Ппіїдагаїй І! 51 і 91.52, виявили більш низькі втрати СР в порівнянні з 51І 34 і контролем (Таблиця 1). Інокуляція цими ж штамами також привела до отримання силосу з більш високим вмістом СР і більш низьким вмістом НДК. Інокуляти не впливають на значення рнН і вміст розчинних вуглеводів в силосі.
Таблиця 1
Хімічний склад силосів з цукрової тростини на 61 добу силосування без інокулянтів і з різними інокулянтами
СР? Втрати СР| НДКУ ВРВе МК: Дріжджі
Обробки силосу (г/кг свіжого (96) г/кг СР рн 09 КУО/г матеріал
ІІ 51 червня 2013 року 5ІІ 52р
СМСМ 1-4785, зареєстрований 26 259,ва 15,39р 616,76 21,1 | 3,66 | 8,40а 4,836 червня 2013 року р - вміст сухої речовини; с - свіжий матеріал; а - нейтрально-детергентна клітковина; є - водорозчинні вуглеводи; ї - молочнокислі бактерії.
Середні значення з різними буквами в колонці значно відрізняються (р«е0,05).
Аналітичний метод
У добу відкриття відбирали два зразки з кожного міні-силососховища, і увесь вміст міні- силососховища гомогенізували. Один зі зразків зважували і висушували у вентильованій печі при 552С протягом 96 год.; інший зразок використовували для приготування водного екстракту для визначення значення рН, оцінювали мікробіологічне обсіменіння і визначали кінцеві продукти бродіння.
Висушені зразки подрібнювали на млині типу УміЇеу з використанням сита 30 меш і зберігали в маркованих пластикових банках. Зразки аналізували на вміст СР (АОАС (1990) Офіційні методи аналізу. 15-е видання. Вашингтон, округ Колумбія, США: Асоціація офіційних хіміків- аналітиків), водорозчинних вуглеводів (ВРВ) фенольним методом (Оибоїз М, СіПез5 КА, Натійп
УК, Кебрег5 РА, Зтійїй Е (1956) Колориметричний метод визначення цукрів і споріднених сполук
Апа!І Спет 28: 350-356) і нейтрально-детергентної клітковини (НДК), як описано Ноїідеп (Порівняння методів визначення перетравлюваності сухої речовини іп міго для десяти кормів. «/
Оаїту сі 82:1791-1794; 1999) з використанням аналізатора клітковини АпКкот (АМКОМ
Тесппоіоду Согрогаїйоп, 20 Раїгроп, Нью-Йорк, О5А) і виражали на основі СР.
Концентрації етанолу, 1,2-пропандіолу і молочної, оцтової, пропіонової і масляної кислот вимірювали методом ВЕРХ по Сагмаййо і інш. (Вплив додавання пропіонової кислоти і
І асюбвасійи5 Бисппегі (5172) на ферментативні і мікробіологічні властивості силосу з цукрової тростини з або без обробки оксидом кальцію. (згає5 Богаде Зсі аоі:. 10.1111/.).1365-
Зо 2494.2012.00863 х). Кислоти, етанол і 1,2-пропандіол ідентифікували порівнянням їх часу втримування з часом утримування відомих стандартних зразків. Концентрації ідентифікованих сполук визначали методом зовнішнього калібрування. Обладнання для ВЕРХ (Зпітай7и модель
ІЇС-10АЇ; 5пітаай7и Согр., Токіо, Японія) було оснащене подвійною системою виявлення, що складається з ультрафіолетового детектора (ШМ-Мів5РО-10Аї) і детектора показника заломлення (КІЮ 10А). Для хроматографічного розділення використовували іоновиключну колонку виробництва Зпітайли (Зпіт-Раск 5СВ-10О1Н, 7,9 ммх30 см), яка працює при 5096.
Рухома фаза включала 100 мм розчин хлорної кислоти при швидкості потоку 0,6 мл/хв. Кислоти виявляли УФ-поглинанням (210 нм). Етанол і 1,2-пропандіол ідентифікували з використанням детектора показника заломлення. Значення рН вимірювали потенціометром (Ехрапдотаїйс
ВесКтап 55-2).
Як показано в таблиці 2, силос, інокульований штамами 5ІЇ 51 і 51 52, з найнижчою втратою
СР мав більш низьку концентрацію етанолу, ніж 51-34 і контроль. Штам 51/34, який привів до отримання силосу з найбільшою втратою СР, виробляв найбільшу кількість молочної кислоти. У силосі, інокульованому штамами 5151 і 51/52, також відмічали більш високі концентрації оцтової кислоти і 1,2-пропандіолу в порівнянні з 51-34 і контролем. Концентрації пропіонової кислоти були так само низькими, порівнянними з силосом, інокульованим 51-34, і контрольним силосом.
Таблиця 2
Молочна, оцтова, пропіонова і масляна кислоти, і етанол, і 1,2-пропандіол з силосів з цукрової тростини на 61 добу силосування без інокулянтів і з інокулянтами І асіобасіїйи5 піїдагаїї
Молочна Оцтова Пропіонова Масляна Е 1,2-пропан- танол Я (г/кг СР) (г/кг СР) (г/кг СР) (г/кг СР) (г/кг СР) контроль 46бба 975 | ЗИ 1 006 |137б0а| 176
ІІ 51
СМСМ 1-4784, зареєстрований 26 34,6р 19,7а 4,06 1,26 39,9с 3,27а червня 2013
ЗІ 52
СМСМ 1-4785, зареєстрований 26 31,40 22,5а 416 1,360 44 4с 3,9ва червня 2013
Мікробіологічний аналіз
Зразки (70 г) свіжого корму і силосу з цукрової тростини через 61 добу інкубації змішували з 630 мл 0,1 95 стерильної пептонної води і перемішували в орбітальному шейкері при 120 об./хв. протягом 20 хв. Потім отримували 10-кратне розведення для кількісного визначення різних груп мікроорганізмів. Молочнокислі бактерії (МКБ) підраховували з використанням агару МК5 (Ое
Мап Кодоза Зпагре, Ойїсо, Детройт, Мічіган, США), що містить 0,1 95 цистеїн НСІ (Мегск,
Дармштадт, Німеччина) і 0,4 95 циклогексимід (0,4 905) (бідта), після анаеробної інкубації (Апаегосеп; Охоїд, Бейзінгсток, Великобританія). Планшети інкубували при З09С протягом 48 год. Дріжджі і міцеліальні гриби підраховували на середовищі Оіспіогап Козе Веподаї
СПпіогатрпепісої (ОВС, ЮОйсо; Весіоп ОісКіпзоп, Спаркс, Мериленд, США) після інкубації планшетів при 282С протягом 72 год. Для всіх мікроорганізмів підраховували тільки планшети, що містять від ЗО до 300 КУО.
Визначення аеробної стабільності силосу
Через 90 діб силосування відкривали міні-силососховища, і відбирали зразки в трьох повторностях приблизно З кг з кожного міні-бункера і вміщували в пластикові відра по 5 кг для визначення їх аеробної стабільності. Термометр вміщували в силосну масу на глибину 10 см на 7 діб. Контейнери витримували в приміщенні з контрольованою температурою 262 (ж1,59С).
Температуру силосу реєстрували кожні 8 год. Температуру навколишнього середовища вимірювали з використанням термометра, розташованого поруч з відрами. Аеробну стабільність визначали як кількість годин, протягом якої температура силосу залишалася стабільною до підвищення більше ніж на 22С в порівнянні з температурою навколишнього середовища.
Таблиця З
Аеробна стабільність силосу з цукрової тростини з інокулятами
Аеробна Максимальна Час досягнення
Обробки силосу стабільність температура максимальної год. Ще) температури (год.
ІІ 51
СМСМ 1-4784, зареєстрований 26 26,7-4,6 44,0-41,0 50,759,2 червня 2013 року
ЗІ 52
СМСМ 1-4785, зареєстрований 26 21,324,6 44,3ж1,5 48,0--16 червня 2013 року
Як показано в таблиці 3, температура контрольного силосу була стабільною приблизно протягом 21,3 год., в той час як силос, інокульований штамами 51/51 і 51/52, втратив стабільність температури через 26,7 і 21,3 год. відповідно після відкривання силосу. Час досягнення максимальної температури був більшим для обох штамів 51/51 і 51/52. Таким чином, штами ЗІ 51 і 5ІЇ 52 привели до отримання силосу з чудовою стабільністю температури відносно силосу, інокульованого 51-34, і контрольного силосу.
Силос, інокульований штамом ІГасіобрасійи5 ріапіагит 51/34, який виробляє молочну кислоту, втратив стабільність температури через 24 год. Однак, штам 51/34 привів до отримання силосу з більш високим вмістом етанолу, більш високим вмістом дріжджів і більш високими втратами СР. Штами 51ІІ 51 ї 5ІЇ 52 забезпечують більш хороші властивості силосу, такі як менша популяція дріжджів, більш низький вміст етанолу і менші втрати СР.
Приклад 2. аеробна стабільність кукурудзяного силосу
Кукурудзяний силос отримували в міні-силососховищах, як описано в прикладі 1, з використанням І асіорасіїййи5 рисппегі МСІМВ 40788 (патент США Мо 6326037, виданий Мапи і інш.), ГасіорасішШи5 ріапіагит 51-34 і штамів ІасіорасшШив5 Піїдагай 51/51 (СМСМ 1-4784, зареєстрований 26 червня 2013 року) і 51/52 (СМСМ 1-4785, зареєстрований 26 червня 2013 року) як інокулятів. Силос без інокулятів використовували як контроль. Інокуляти культивували, як описано в прикладі 1.
Через 90 діб силосування міні-силососховища відкривали, і відбирали зразки приблизно З кг з кожного міні-силососховища і вміщували в пластикові відра по 5 кг для визначення аеробної стабільності. Реєструючий пристрій вміщували в силосну масу на глибину 10 см на 7 діб.
Температуру навколишнього середовища вимірювали з використанням реєструючого пристрою, розташованого поруч з відрами. Дані по аеробній стабільності силосів наведені в таблиці 4.
Таблиця 4
Аеробна стабільність силосу з цукрової тростини з інокулятами
Максимальна Час досягнення Аеробна
Доза . ж
Г о, (С) температури (год.) (год.) 11111110 Середнє |Середнє /// |Середоє/:УО
Контроль. | зе | 342 | 723 | 723 | 42,7 | 427 1 38,0 372 21,8
ІІ 51 1 31,0 133,1 73,68
СМСМ 1-4784, зареєстрований 26 30,9 138,3 13,05 червня 2013 року 2 30,8 143,5 72,3
ЗІ 52 1 30,8 132,2 49,0
СМСМ 1-4785, зареєстрований 26 32,05 112,3 53,35 червня 2013 року 2 33,3 92,5 57,7 1 33,7 85,5 42,8
Доза 1-105 КУО/г; 2105 КУО/г
Як показано в таблиці 4, температура контрольного силосу була стабільною приблизно протягом 42,7 год., в той час як силос, інокульований штамами 51/51 і 51/52, втратив стабільність температури через 73,05 і 53,35 год. відповідно після відкривання силосу. Силос, інокульований 51/34, був стабільним протягом 17,4 год. Силос, інокульований Іасіобасійн5 рисппегі МСІМВ 40788, був стабільним протягом 60,5 год. Штами 5151 і 51/52 привели до отримання силосу з чудовою стабільністю температури відносно силосу, інокульованого 5ІЇ. 34, і контрольного силосу. Штами 51/51 ії 5ІЇ 52 також привели до отримання силосу з чудовою стабільністю температури відносно силосу, інокульованого МСІМВ 40788.
У той час як винахід був описаний застосовно до конкретних варіантів здійснення, повинно бути зрозуміло, що можливі подальші модифікації, і цей опис призначений для охоплення будь- яких варіантів, застосувань або адаптації винаходу, слідуючи загалом принципам винаходу і включаючи такі відхилення від даного розкриття, які підпадають під відому або звичайну практику в даній галузі, до якої належить винахід, і які можуть бути застосовані до істотних ознак, сформульованих вище, і наступних в об'ємі прикладеної формули винаходу.

Claims (10)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Силосний інокулят, що містить ефективну кількість /асіобасітив Ніїдагаїї для консервування силосу, де вказаний силос, який містить ефективну кількість, покращує аеробну стабільність силосу при одночасному збільшенні кількості отриманої сухої речовини.
2. Силосний інокулят за п. 1, в якому Гасіобастиз Ніїдагаїї є щонайменше одним з Гасіобастив Піїдагаїї з депозитарним номером СМСМ 1-4784 і Гасіобасти» ПНіїдагаїї з депозитарним номером СМСМ 1-4785, або їх генетичних еквівалентів.
3. Спосіб обробки силосу, що включає додавання до силосу силосного інокуляту, що містить ефективну кількість / асіобасійив5 Ніїдагаїї, де вказаний силос, який містить ефективну кількість, покращує аеробну стабільність силосу при одночасному збільшенні кількості отриманої сухої речовини.
4. Спосіб за п. 3, в якому /асіобасійив Ніїдагаїї є щонайменше одним з / асіобастиз пНіїдагаїї з депозитарним номером СМСМ 1-4784 і Гасіобасти» пНіїдагаїї з депозитарним номером СМСМ 1- 4785, або їх генетичних еквівалентів.
5. Спосіб за п. З або 4, в якому силос являє собою силос зі звичайних трав, маїсу, люцерни, пров'ялених трав, круп'яних культур або цукрової тростини.
6. Спосіб за будь-яким з пп. З або 4, в якому силос знаходиться в пакунку, мішку, бункері, силосній башті або силососховицщі.
7. Силос, що містить ефективну кількість /асіобастйи»в Ніїдагаї! для консервування силосу, де вказаний силос, який містить ефективну кількість, покращує аеробну стабільність силосу при одночасному збільшенні кількості отриманої сухої речовини.
8. Силос за п. 7, в якому /асіобасійив Ніїдагаїї є щонайменше одним з Г/Гасіобасійив5 Ппіїдагаїї! з депозитарним номером СМСМ 1-4784 і Гасіобасти» пНіїдагаїї з депозитарним номером СМСМ 1- 4785, або їх генетичних еквівалентів.
9. Виділений штам /асіобасійив ПНіїдагоїї з депозитарним номером СМСМ 1-4784 або його Зо генетичні еквіваленти для використання в обробці силосу.
10. Виділений штам /асіобасшив Ніїдагаї з депозитарним номером СМСМ 1-4785 або його генетичні еквіваленти для використання в обробці силосу. 00 КомпютернаверсткаГ. Паяльніково (00000000 ДП "Український інститут інтелектуальної власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601
UAA201601498A 2013-07-18 2014-07-03 Силосний інокулят для обробки силосу, спосіб обробки силосу, силос та виділені штами cncm i-4784 та cncm i-4785 для використання в обробці силосу UA122960C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP13177054.7A EP2826385A1 (en) 2013-07-18 2013-07-18 Stability of silage inoculants and methods for improving aerobic stability of silage
PCT/IB2014/062814 WO2015008185A1 (en) 2013-07-18 2014-07-03 Stability of silage inoculants and methods for improving aerobic stability of silage

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA122960C2 true UA122960C2 (uk) 2021-01-27

Family

ID=48793120

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201601498A UA122960C2 (uk) 2013-07-18 2014-07-03 Силосний інокулят для обробки силосу, спосіб обробки силосу, силос та виділені штами cncm i-4784 та cncm i-4785 для використання в обробці силосу

Country Status (12)

Country Link
US (2) US20160165929A1 (uk)
EP (2) EP2826385A1 (uk)
JP (2) JP6937975B2 (uk)
CN (1) CN106028829B (uk)
AU (1) AU2014291752B2 (uk)
CA (1) CA2918169C (uk)
CL (1) CL2016000123A1 (uk)
MX (1) MX2016000632A (uk)
RU (1) RU2708448C2 (uk)
TR (1) TR201600640T1 (uk)
UA (1) UA122960C2 (uk)
WO (1) WO2015008185A1 (uk)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2826385A1 (en) * 2013-07-18 2015-01-21 Danstar Ferment AG Stability of silage inoculants and methods for improving aerobic stability of silage
CN107912614B (zh) * 2017-12-13 2021-03-30 内蒙古自治区农牧业科学院 一种青贮饲料浸提液制备方法及在青贮饲料检测中的应用
CN109430540A (zh) * 2018-10-30 2019-03-08 齐鲁工业大学 一种藜麦青贮饲料的制备方法
CN109730201A (zh) * 2019-03-05 2019-05-10 黑龙江省农业科学院草业研究所 一种提高苜蓿脂溶性维生素e的青贮方法
CN110367382A (zh) * 2019-07-31 2019-10-25 江苏省农业科学院 一种防止全株大麦二次发酵的青贮方法
CN111053157A (zh) * 2019-12-30 2020-04-24 金塔县金畜源牧业有限公司 一种青贮饲料裹包制作工艺
CN111534456B (zh) * 2020-04-03 2021-12-14 中国科学院微生物研究所 一种复合乳酸菌剂及其在甘蔗尾叶青贮中的应用
CN111690573B (zh) * 2020-07-22 2023-05-09 湛江银恒生物科技有限公司 一种可用于动物肠道益生菌的希氏乳杆菌及其发酵制备的酵素和应用
CN111925972B (zh) * 2020-09-09 2022-04-05 天津市农业科学院 一种希氏乳杆菌及其应用
CN115669809A (zh) * 2022-10-17 2023-02-03 湖南农业大学 一种玉米青贮添加剂

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0311469A3 (en) * 1987-09-02 1990-05-30 Plant Genetic Systems N.V. Transformed lactic acid bacteria
ES2162243T3 (es) 1996-02-15 2001-12-16 Biotal Ltd Microorganismos y su utilizacion en el tratamiento de alimentos para animales y ensilado.
US6337068B1 (en) * 1998-06-26 2002-01-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactorbacillus buchneri compositions for improving aerobic stability of silage
US6403084B1 (en) * 2000-11-03 2002-06-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Mixed cultures for improved fermentation and aerobic stability of silage
US20040028665A1 (en) * 2002-01-08 2004-02-12 Garner Bryan E. Compositions and methods for inhibiting pathogenic growth
RU2243999C2 (ru) 2002-12-27 2005-01-10 Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" Штамм бактерий lactobacillus buchneri 600 для силосования зеленой массы кукурузы и консервирования плющеного зерна
US20100080783A1 (en) * 2004-11-22 2010-04-01 Watson James B Microbial feed additive
US20080095890A1 (en) * 2004-11-22 2008-04-24 Watson James B Microbial feed additive
US20090081330A1 (en) * 2006-03-02 2009-03-26 Lallemand, Usa, Inc. Treatment of sugarcane silage with bacterial additives
US20090028993A1 (en) * 2006-12-11 2009-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1326 and its use to improve aerobic stability of silage
EP2826385A1 (en) * 2013-07-18 2015-01-21 Danstar Ferment AG Stability of silage inoculants and methods for improving aerobic stability of silage

Also Published As

Publication number Publication date
CL2016000123A1 (es) 2016-12-30
EP2826385A1 (en) 2015-01-21
RU2016105235A3 (uk) 2018-07-12
US20160165929A1 (en) 2016-06-16
MX2016000632A (es) 2016-11-10
JP2019170389A (ja) 2019-10-10
CA2918169C (en) 2022-07-26
AU2014291752B2 (en) 2018-03-22
US11767502B2 (en) 2023-09-26
TR201600640T1 (tr) 2019-02-21
JP6937975B2 (ja) 2021-09-22
CA2918169A1 (en) 2015-01-22
RU2708448C2 (ru) 2019-12-06
CN106028829B (zh) 2020-10-16
EP3027043A1 (en) 2016-06-08
RU2016105235A (ru) 2017-08-23
NZ715997A (en) 2022-03-25
AU2014291752A1 (en) 2016-02-18
CN106028829A (zh) 2016-10-12
JP2016524911A (ja) 2016-08-22
WO2015008185A1 (en) 2015-01-22
US20210198758A1 (en) 2021-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA122960C2 (uk) Силосний інокулят для обробки силосу, спосіб обробки силосу, силос та виділені штами cncm i-4784 та cncm i-4785 для використання в обробці силосу
Driehuis et al. Fermentation characteristics and aerobic stability of grass silage inoculated with Lactobacillus buchneri, with or without homofermentative lactic acid bacteria
Muck Effects of corn silage inoculants on aerobic stability
Dong et al. Effects of calcium propionate on the fermentation quality and aerobic stability of alfalfa silage
Amanullah et al. Effects of microbial additives on chemical composition and fermentation characteristics of barley silage
Cai et al. Effect of NaCl‐tolerant lactic acid bacteria and NaCl on the fermentation characteristics and aerobic stability of silage
JPH0448413B2 (uk)
Vu et al. Dynamics of fungal community during silage fermentation of elephant grass (Pennisetum purpureum) produced in northern Vietnam
McEniry et al. The microbiological and chemical composition of baled and precision-chop silages on a sample of farms in County Meath
Costa et al. Adding corn meal into mixed elephant grass–butterfly pea legume silages improves nutritive value and dry matter recovery
US20140186929A1 (en) Compositions and methods comprising a combination silage inoculant
Jatkauskas et al. The effects of silage inoculants on the fermentation and aerobic stability of legume-grass silage.
Nkosi et al. Laboratory evaluation of an inoculant for ensiling whole crop maize in South Africa
dos Santos et al. Effect of urea on gas and effluent losses, microbial populations, aerobic stability and chemical composition of corn (Zea mays L.) silage.
de Jesus et al. Nutritive value of sugarcane silages added with increasing levels of acetic acid.
McEniry et al. Manipulating the ensilage of wilted, unchopped grass through the use of additive treatments
Kung Managing the aerobic stability of silages.
König Effects of ensilability traits of forage legumes and additives on silage quality assessed by fermentation pattern and qPCR quantification of clostridia
Aamod et al. Evaluation of bacillus circulans in imparting aerobic stability to silage
Auerbach et al. Prevention of Penicillium roqueforti—associated aerobic deterioration of maize silage by various additives
de Jesus et al. Nutritional value of sugarcane silages added with different acetic acid doses
SILVA et al. Fermentative profile of maize silage inoculated with Lactobacillus buchneri.
De Lima et al. Quality of re-ensiled sorghum silages after prolonged periods of environmental exposure.
Wahyudi et al. Application of Lactobacillus inoculant from various rice paddy (Oryza sativa) to total mixed ration silage microbial composition
Zhang et al. Isolation of Bacillus velezensis from Silage and Its Effect on Aerobic Stability and In Vitro Methane Production of Whole-Plant Corn Silage