UA121014C2 - Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora - Google Patents
Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora Download PDFInfo
- Publication number
- UA121014C2 UA121014C2 UAA201501119A UAA201501119A UA121014C2 UA 121014 C2 UA121014 C2 UA 121014C2 UA A201501119 A UAA201501119 A UA A201501119A UA A201501119 A UAA201501119 A UA A201501119A UA 121014 C2 UA121014 C2 UA 121014C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- dna
- transgenic
- nucleotide sequence
- plant
- double
- Prior art date
Links
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 title claims abstract description 155
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 136
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 title abstract description 93
- 241000233614 Phytophthora Species 0.000 title abstract description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 241000233654 Oomycetes Species 0.000 claims abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 146
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 87
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 87
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 72
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 54
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims description 25
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 13
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 12
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 claims description 4
- 244000304337 Cuminum cyminum Species 0.000 claims 2
- 235000007129 Cuminum cyminum Nutrition 0.000 claims 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims 2
- 241000408551 Meza Species 0.000 claims 2
- BQIFCAGMUAMYDV-DHBOJHSNSA-N 1-(2-chloroethyl)-3-[(2r,6s)-2,6-dihydroxycyclohexyl]-1-nitrosourea Chemical compound O[C@H]1CCC[C@@H](O)C1NC(=O)N(CCCl)N=O BQIFCAGMUAMYDV-DHBOJHSNSA-N 0.000 claims 1
- 244000005894 Albizia lebbeck Species 0.000 claims 1
- 241001529795 Boiga Species 0.000 claims 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 claims 1
- 201000002531 Karyomegalic interstitial nephritis Diseases 0.000 claims 1
- 241000468053 Obodhiang virus Species 0.000 claims 1
- 241001424341 Tara spinosa Species 0.000 claims 1
- 241000750042 Vini Species 0.000 claims 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 claims 1
- 101150116749 chuk gene Proteins 0.000 claims 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims 1
- 244000145841 kine Species 0.000 claims 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 claims 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 abstract description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 29
- 238000012226 gene silencing method Methods 0.000 abstract description 11
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 abstract description 3
- 241000233622 Phytophthora infestans Species 0.000 abstract 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 70
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 59
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 43
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 40
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 27
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 24
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 23
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 21
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 21
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 20
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 20
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 13
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 230000019525 primary metabolic process Effects 0.000 description 13
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 10
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 108050005273 Amino acid transporters Proteins 0.000 description 8
- 102000034263 Amino acid transporters Human genes 0.000 description 8
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 8
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 6
- 101150051897 his5 gene Proteins 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 5
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 4
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 4
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 4
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 4
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 3
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 3
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 3
- 101100018846 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) IME1 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000002933 Thioredoxin Human genes 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 108700022487 rRNA Genes Proteins 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 3
- 229940094937 thioredoxin Drugs 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 3
- 108010000700 Acetolactate synthase Proteins 0.000 description 2
- 108010001058 Acyl-CoA Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102000002735 Acyl-CoA Dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 101100162657 Alternaria alternata AMT5 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 101710117545 C protein Proteins 0.000 description 2
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- 101710114192 Elicitin Proteins 0.000 description 2
- 241000234830 Eupteryx aurata Species 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- -1 aliphatic amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 2
- 230000028956 calcium-mediated signaling Effects 0.000 description 2
- 238000012993 chemical processing Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 2
- 239000005712 elicitor Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 108010058731 nopaline synthase Proteins 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004260 plant-type cell wall biogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- PQMFVUNERGGBPG-UHFFFAOYSA-N (6-bromopyridin-2-yl)hydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC(Br)=N1 PQMFVUNERGGBPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010070892 1,3-beta-glucan synthase Proteins 0.000 description 1
- OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 2,4-D Chemical compound OC(=O)COC1=CC=C(Cl)C=C1Cl OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101100088077 Arabidopsis thaliana RKS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100053984 Arabidopsis thaliana ZRK1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091026821 Artificial microRNA Proteins 0.000 description 1
- 108010065272 Aspartate-tRNA ligase Proteins 0.000 description 1
- 102100026198 Aspartate-tRNA ligase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010029692 Bisphosphoglycerate mutase Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108020004394 Complementary RNA Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000017278 Glutaredoxin Human genes 0.000 description 1
- 108050005205 Glutaredoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101001074548 Homo sapiens Regulating synaptic membrane exocytosis protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000875780 Homo sapiens Ubiquinone biosynthesis protein COQ4 homolog, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 102000013460 Malate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 101100460719 Mus musculus Noto gene Proteins 0.000 description 1
- 101000606416 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Acyltransferase PE Proteins 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 101710096342 Pathogenesis-related protein Proteins 0.000 description 1
- 102000011025 Phosphoglycerate Mutase Human genes 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N Phytoalexin Natural products COC1=CC=CC=C1C1OC(C=C2C(OCO2)=C2OC)=C2C(=O)C1 IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006831 Protein phosphatase 2C Human genes 0.000 description 1
- 108010047313 Protein phosphatase 2C Proteins 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101150053079 RIM2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100036266 Regulating synaptic membrane exocytosis protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 101100468779 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RIM2 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000008406 SarachaNachtschatten Nutrition 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000207763 Solanum Species 0.000 description 1
- 235000004790 Solanum aculeatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 235000008424 Solanum demissum Nutrition 0.000 description 1
- 235000018253 Solanum ferox Nutrition 0.000 description 1
- 235000000208 Solanum incanum Nutrition 0.000 description 1
- 235000013131 Solanum macrocarpon Nutrition 0.000 description 1
- 235000009869 Solanum phureja Nutrition 0.000 description 1
- 235000000341 Solanum ptychanthum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017622 Solanum xanthocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 241000623377 Terminalia elliptica Species 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102100035953 Ubiquinone biosynthesis protein COQ4 homolog, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 101100187345 Xenopus laevis noto gene Proteins 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000680 avirulence Effects 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 108010002685 hygromycin-B kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 239000000280 phytoalexin Substances 0.000 description 1
- 150000001857 phytoalexin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 244000000003 plant pathogen Species 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000006697 redox regulation Effects 0.000 description 1
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8282—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for fungal resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
- C12N2310/141—MicroRNAs, miRNAs
Landscapes
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Винахід стосується трансгенної рослини виду Solanum tuberosum зі стійкістю проти ооміцету Phytophthora infestans, в геном якої стабільно інтегровані дволанцюгова перша ДНК, яка відповідає послідовності SEQ ID NO: 1 або її фрагмент із щонайменше 21 послідовного нуклеотиду, і дволанцюгова друга ДНК, причому вказані перша і друга ДНК є повністю або частково зворотно-комплементарними відносно одна до іншої; способу одержання вказаної трансгенної рослини, композиції для зовнішнього застосування на рослинах, яка містить вказані першу і другу ДНК.
Description
Цей винахід має відношення до трансгенної рослини виду Зоїапит їшбего5ит зі стійкістю до ооміцетів роду Рпуїорпїйога, трансгенних частин рослини цього типу, способу її одержання, а також композиції для зовнішнього застосування на рослинах.
Навіть зараз фітофтороз пасльонових, спричинюваний Рпуїорпїпога іпіезіап5, залишається найбільш поширеним і найбільш економічно важливим захворюванням картоплі.
По всьому світу згаданий патоген спричинює втрату частини врожаю, яка становить більше 20 95. Це означає необхідність застосування дорогих хімічних засобів захисту рослин, тому що природні механізми захисту картоплі, які протидіють Р.іпієвіап5, або які сповільнюють й обмежують поширення цього патогену, є недостатніми або не постійними.
Відомо, що природні механізми захисту рослин, такі як реакція гіперчутливості на місці інфекції, лігніфікація клітинної стінки, продукування РЕ-білків (патогенез-зв'язаних білків) і синтез фітоалексинів, сприяють посиленню стійкості, але їх завжди супроводжує втрата енергії і, отже, зниження продуктивності уражених рослин.
Природні механізми захисту рослин також включають експресію так званих генів стійкості (В-генів), генні продукти яких взаємодіють з мікробними генами авірулентності (Амг-гени) (гіпотеза "ген-на-ген") і, отже, індукують специфічну реакцію захисту. Проте, якщо патоген, такий як Р.іпт'езіап5, може уникнути синтезу Амг-гена і розпізнавання патогену, ця стійкість може бути порушена і, отже, подальша специфічна захисна реакція в рослині-хазяїні не відбувається.
Ріге аг аІ. (1998) довели, що дволанцюгова РНК (а5КМА) може спричинювати сіквенс- специфічну деградацію гомологічної РНК. Виходячи з цих результатів, були створені трансгенні рослини, які, внаслідок РНК-інтерференції (КМАЇї) за рахунок індукованого рослиною-хазяїном глушіння консервативних і основних (незамінних) генів, наприклад, від нематод видів
І ерідорієга та СоіІегорієга, можуть мати стійкість до цих комах-шкідників як іп міїго, так і іп мімо.
Крім того, взаємодія рослини-хазяїна та фітопатогенних грибів може являти собою застосування теорії індукованого хазяїном глушіння гену (НІС5) для індукування стійкості (ЕР 1 716 238).
Для здійснення функціональних досліджень РАпуїорпійога Мап УуУебхї еї аїЇ. (1999) застосовують метод глушіння генів на цих ооміцет-специфічних генах.
Вперше застосування РНК-інтерференції для контролю грибкових патогенів на основі
Зо контакту Я5КМА з грибковими клітинами поза грибковою клітиною було описано у УМО 2006/070227. У цій заявці запропонований спосіб одержання стійкої до патогену рослини. Отже,
РНК-інтерференція може бути спрямованою як проти одного або більше гену(-ів) патогену, так і проти декількох патогенів. І Рпуїорпїнога іп'еєтап5 зазначений як можливий грибковий патоген, а картопля як можлива рослина-хазяїн.
Попередні дослідження дозволили висунути гіпотезу, яка полягає в тому, що індуковане рослиною-хазяїном глушіння генів не діє для кожного гену, і для функціонального глушіння важливе значення має вибір гену-мішені Так, наприклад, РоМАї до Н--АТФази цитоплазматичної мембрани РПуїорпїйога рагазйіса не може бути зменшений індукованим рослиною-хазяїном глушінням гену настільки, щоб забезпечити ефективний захист від певного патогену (2папад еї аї., 2011). Отже, вибір генів-мішеней також є важливим для ефективного захисту проти патогенів (хіп еї аї., 2011).
З метою створення рослин, стійких до патогенів, нещодавно була запропонована система скринінгу (05 2010/0257634), призначена для полегшення вибору прийнятних паразитарних генів для генно-інженерних конструкцій для глушіння. Автори також запропонували ідентифікацію відповідних експериментальних генно-інженерних конструкцій для індукування фітостійкості у картоплі Для цього гени-мішені визначали на основі результатів біоінформаційних аналізів геномних послідовностей або на основі гомології послідовностей між основними генами або факторами вірулентності відомих модельних організмів. Згаданий документ не містить жодних ознак описаних у цьому винаході генів, які зумовлюють стійкість до ооміцетів роду Рпуорпіпога.
У МО 2009/112270 описаний спосіб одержання трансгенних рослин зі стійкістю проти численних грибів. За одним з прикладів застосування способу за цим винаходом згадана стійкість спрямована проти Опсіпша песайог, Ріазторога міййсоЇїа, Оготусе5 5рес., РпакКорзога распугпігі, Егузірпе 5р., а також Р. іптебїапв.
Крім того, у МО 2006/047495 описане створення стійких до Рпуорпїпога іп'есїап5 рослин картоплі за рахунок КМАї-індукованого глушіння. Були створені рослини, що несуть послідовності гену рРНК РВПпуїорпїйога іп'ебїап5 для РНК-інтерференції. Описана в УМО 2006/047495 генно-інженерна конструкція для глушіння, спрямована проти гену рРНК
Рпуорпнога іптезіап5, включає пари нуклеотидів 1-600 (номер депонування А.)854293), а разом бо з ними 32 п.н. кодувальної ділянки 185 рРНК, а також повну кодувальну ділянку 5,8 5 рРНК гена патогену фітофторозу. При виборі генів-мішеней для стратегій НІС5 для застосування важливо, щоб вони мали максимально короткі або не мали жодних гомологій довжиною більше ніж 17 послідовних пар нуклеотидів з послідовностями генів нецільових організмів, або ж, у разі їх присутності, щоб експресія генів нецільових організмів при споживанні трансгенної рослини або її зібраного врожаю могла бути знищеною ("позацільовий" ефект). Проте послідовність, описана у УМО 2006/047495, містить 32 п.н. 185 рРНК Р. іпіезіап5, яка має 100 95 ідентичність з гомологічною послідовністю 185 рРНК гену людини (Ното заріеп5), свиней (515 5сгога) і великої рогатої худоби (Во5 їайги5). Споживання картоплі населенням Азії в 2005 р. становило 26 кг на людину, населенням Північної Америки - 58 кг на людину, населенням Європи - 96 кг на людину (статистика Продовольчої і сільськогосподарської організації (ЕАО) ООН - ЕАОБТАТ). Виходячи з високого рівня споживання картоплі людиною і тваринами, послідовності РРНК Рпуїорпїпога іптебїап5, описані у М/О 2006/047495 як гени-мішені НІС5, є непридатним для споживачів з міркувань безпеки.
З іншого боку, за УМО 2006/047495 були створені рослини, які несуть послідовності гену катепсину В Муи5 регзісає і гену еліситину Р.іпіеєвіап5 ІМЕ1 для РНК-інтерференції і, отже, мають стійкість до двох патогенів рослин. Ген-мішень ІМЕ1, використаний в згаданих рослинах, кодує елісітор. Стійкість, заснована на елісіторі як факторі патогенності, не є бажаною, оскільки ген елісітину ІЇМЕЇ не завжди є необхідною умовою для інфікування картоплі Ріуїорніїйпога іптезіапо (Катоип еї а!., 1998).
Отже, метою цього винаходу є створення трансгенної рослини виду Зоїапит їибегозит, яка є стійкою до патогенного мікроорганізму, ооміцету роду Ріпуїорпіїпога, і, крім того, є придатною для споживання.
У цьому винаході зазначену мету досягають за рахунок того, що дволанцюгова перша і друга ДНК стабільно інтегруються в трансгенну рослину, причому згадана перша ДНК містить (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає послідовностям 5ЕО ІЮ МО: 1-43; або (Б) фрагмент з щонайменше 15 послідовних нуклеотидів нуклеотидної послідовності, що відповідає послідовностям 5ЕО ІЮ МО: 1-43; або (с) нуклеотидну послідовність, яка є комплементарною одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б); або (4) нуклеотидну послідовність, яка за жорстких умов гібридизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (Б) або (с).
Зо Встановлено, що перша ДНК цього типу є особливо придатною для надання рослинам картоплі стійкісті до патогену індукованого хазяїном глушіння гену.
Перша і друга ДНК стабільно інтегруються в геном трансгенної рослини виду боЇїапит їмбегозит. За варіантом, якому віддають перевагу, згадані ДНК стабільно інтегруються в хромосому рослини. Проте, вони також можуть бути інтегровані в екстрахромосомний елемент.
Перевага стабільної інтеграції полягає в тому, що ДНК може передаватись наступним поколінням трансгенної рослини.
Дволанцюгова ДНК складається з кодувального і некодувального ланцюгів.
Крім того, нуклеотидна послідовність кодувального ланцюга другої ДНК є зворотним комплементом нуклеотидної послідовності кодувального ланцюга першої ДНК. Термін "зворотний комплемент" відносно нуклеотидної послідовності в 5-3 напрямку означає нуклеотидну послідовність в 3-5" напрямку, в якій, відповідно до правил спарювання основ, основи відповідають основам першої ДНК і мають зворотну/віддзеркалену послідовність. Якщо нуклеотидною послідовністю кодувального ланцюга першої ДНК є, наприклад, аФдднс, то зворотною комплементарною нуклеотидною послідовністю кодувального ланцюга другої ДНК є даассаї. Це також відомо як смислова і відповідна їй антисмислова (зворотнокомплементарна) орієнтація нуклеотидних послідовностей.
Зокрема, нуклеотидна послідовність кодувального ланцюга другої ДНК може бути зворотним комплементом нуклеотидної послідовності кодувального ланцюга першої ДНК по всій довжині послідовності. Проте, вона також може бути лише частково зворотнокомплементарною, тобто зворотнокомплементарною на обмеженій довжині. Нуклеотидна послідовність кодувального ланцюга другої ДНК також може бути зворотнокомплементарною нуклеотидній послідовності кодувального ланцюга першої ДНК на більш ніж одній ділянці, наприклад, на двох або трьох ділянках своєї нуклеотидної послідовності.
Починаючи з повністю або частково зворотних комплементарних нуклеотидних послідовностей для кодувального ланцюга першої і другої ДНК, одержують дволанцюгову РНК.
Дволанцюгова структура РНК виникає внаслідок утворення місткових водневих зв'язків між комплементарними нуклеотидами. Дволанцюгові ділянки РНК можуть бути сформовані на одному нуклеїновокислотному ланцюгу, який є частково комплементарним самому собі, або на двох різних несуцільних комплементарних нуклеїновокислотних ланцюгах. Отже, утонення бо місткових водневих зв'язків може бути як внутрішньомолекулярним, так і міжмолекулярним.
За цим винаходом перша ДНК містить нуклеотидну послідовність, що відповідає послідовностям 5ЕО ІЮ МО: 1-43, при цьому ці послідовності являють собою нуклеотидні послідовності вибраних генів-мішеней Рпуїорійнога іптебзїап5. Група, утворена цими генами- мішенями, містить основні гени первинного метаболізму, а також синтезу амінокислот, зокрема біосинтезу аліфатичних амінокислот (валін, лейцин, ізолейцин), а також біосинтезу глутамату, гени регуляції клітинного циклу і сигнальної трансдукції, а також регуляції окисно- відновлювального потенціалу, передачі сигналу кальцієм, передачі сигналу С-білками, передачі сигналу за участю МАР-кіназ та транскрипційних факторів, а також гени компонентів системи трансляції, гени з функціями процесингу РНК, гени, які кодують білки з функцією контролю розвитку і диференціювання білків, наприклад, з функціями утворення клітинної стінки, а також гени, які кодують білки-транспортери, каналотвірні білки і мембранні білки. Узагальнення цих генів-мішеней Рпуоріївога, які використовуються для розробки індукованого хазяїном глушіння гену, наведені в Таблиці 1.
Таблиця 1 гену-мішені гаусторія-специфічний ср. ог (то оо | оморанний блок (Війти) ооеитокідиференцяця 0 5 РІО 00561 (убіхінон -біосинтезбілка СОСО (первинний метаболізм. |В 6 о РІТО 06732 ацил-СоА-дегдрогеназа первинний метаболзм. |В 7 РІТО 07405 (піруваткназа первиннийметаболзм. |В 8 о рРІТО 12228 МАОН-цитохром В5 редуктаза (первинний метаболізм. |В 9 РІТО 15476 малатдегдрогеназа первиннийметаболзм. |В 10 РІТО 18076 (фосфогліцератмутаза первинний метаболзм. |В 11 РІТО 19736 (алкогольдегідрогеназа первинний метаболзм. |В 12 | РІТО 20129/ ацил-СоА-дегідрогеназа первинний метаболзм. |В ізомераза 18 РІТО 11044 (протеїнфосфатаза сигнальнатрансдукця./ |В 19 (РІТО 21987 (протеїнфосфатаза2С сигнальнатрансдукцяї/ |В озортаято|няни Пн в 23 ІРІТИа 00708 |тіоредоксин відновлювального ІФ) потенціалу оеортавтєф|няни 0 Пеня в 24 ІРІТа 00715 |тіоредоксин відновлювального (о; потенціалу озортавтеф|няни Пеня в
ІРІТа 00716 |тіоредоксин відновлювального ІФ) потенціалу оюортавююф|ннннюєм Сен 26 ІРІТа 09348 |глутаредоксин відновлювального ІФ) потенціалу оте ай ші ілііні СИНІЙ (28 |РІТО 10447 |гомолог ЗАРК (стрес-активованіпередача сигналу з участю -:/ зу
07111111 (протеїніназиу////////// (таржназ////:// оте дю ато тнют 5 31 РІТО 06873 (аспартил-тРНК-синтетаза трансляця.д//-/-: ІВ
За РІТО 09442 40Зрибосомнийбілок521 трансляця. /-: ІВ 33 РІТО 16015 (рибонуклеаза // процесингрнк/:/// ІВ: 34 РІТО 09306 (РоМава-томолог 0 розвиток/диференціаця |0 35 РІТО 03335 калозосинтаза(РКке1/2-гомолог) утворення клітинної стінки |0 Чл. палю | Крретнни Фбувинтносььв гомолог) білок, асоційований із синтезом . а. зт (то твове сота пюкана(КвЕвомолод еорення клітинної сіни 0 38 РІТО 09193 аквапорин, 0 утворенняканалв./-/ |В ГО носій мітохондріального
В тр ЗНІШШІ ШИ 40 РІТО 08314 (білоксуперродини АВС транспортер |В
ЕИСІЕ іноннинаййня Й ЗШ 42 РІТО 12999 транспортерсуперродини МЕЗ (транспортер: |В 43 |РІТО 16478 |(ацил-СоА-дегідрогеназа (первинний метаболзм. |В
Термін "глушіння генів" або "глушіння" описує процеси відключення генів. Глушіння може бути, наприклад, транскрипційним або посттранскрипційним. Глушіння генів також включає антисмислову технологію, ЕМАї або азКМА.
Експресія нуклеотидної послідовності гена-мішені в Рпуїорпїнога іпіезіап5 селективно інгібується глушінням гену. У цьому випадку нуклеотидною послідовністю-мішенню може також бути молекула непроцесованої РНК, послідовність мРНК або рибосомної РНК.
Гени-мішені були визначені (ї) загальнодоступними дослідженнями експресії, такими як дані мікрочіпів щодо, наприклад, процесів диференціації або інфекції ооміцетів, « загальнодоступними даними по дослідженню метаболічних процесів під час диференціації або інфекції ооміцетів (СгепміПе-Вгідд5 еї аї., 2005, Уиаеїзоп еї аї., 2009а, Уиаеї5оп еї аї., 200960) (А), (ії) порівняльними біонформатичними дослідженнями в поєднанні з доскональним аналізом (біоінформаційна мережа ВіоМах) (В), (ії) аналізом метаболічних шляхів у поєднанні з доскональним аналізом (С), а також (ім) оцінками публічно доступних даних стосовно визначення характеристик гомологічних генів еукаріотичних організмів (Коетег еї аї., 1994,
Іпоце еї а!., 1995, Магитг єї а!., 1995, І езаде еї аї., 2004, Амгома єї а!., 2008, Мапа еї а!., 2009, Іі єї а!., 2010, Мапа еїаї., 2010) (0).
Щоб виключити небажане глушіння генів рослин і людини, при виборі генів-мішеней необхідно слідкувати, щоб нуклеотидна послідовність цих генів була специфічною для Р. іптезіап5. Для цього вибрані гени-мішені порівнюють за їх білками (програма ВіавзіХ) з протеомом Зоіапит їибрегозит і Боіапит Іусорегбісцт. Разом з цим, послідовності генів- мішеней порівнюють за їх нуклеотидами (програма ВіазіМ) з геномом Зоїапит Ішбегозит,
БоЇапит Іусорегвісит і загальною програмою ВіахіМм (критерії: програма ВіавбіМ; бази даних: геноміка людиниктранскрипт; оптимізація до: дещо подібних послідовностей (програма Біавіп)).
Гени-мішені вважають прийнятними у разі відсутності у них нуклеотидних гомологій з 5оїапит їшбегозит і оїапит Іусорегзісит і якщо вони не мають або мають лише часткові гомології в загальній програмі ВіабіМ лише на коротких ділянках послідовності («17 нуклеотидів), завдяки чому взаємодія з ендогенними нуклеотидними послідовностями рослин інгібується або не відбувається.
Зо Призначені до використання за цим винаходом нуклеотидні послідовності можуть мати різну довжину. Так, нуклеотидні послідовності однієї з послідовностей ЗЕО ІЮ МО: 1-43 можуть мати довжину від 501 нуклеотида до 735 нуклеотидів.
Призначені до використання нуклеотидні послідовності можуть також бути одним або більше фрагментом(-ами) однієї або більше нуклеотидної(-их) послідовності(-ей) з-посеред послідовностей 5ЕО ІЮ МО: 1-43. Тому, фрагменти містять щонайменше 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1100, 1200 або 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400 або 2500 послідовних нуклеотидів однієї або більше нуклеотидної(-
их) послідовності(ей) з-посеред послідовностей ЗЕО ІЮ МО: 1-43. Особливо прийнятним фрагментом є фрагмент нуклеотидної послідовності зЕО ІЮ МО: 1 з 290 нуклеотидів.
У певному варіанті здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, використовують комбінації двох, трьох, чотирьох, п'яти, шести, семи, восьми, дев'яти, десяти або більше фрагментів однієї і тієї ж нуклеотидної послідовності, наприклад, послідовності ХЕО ІЮО МО: 1, або різних нуклеотидних послідовностей, наприклад, послідовностей ЗЕО ІО МО: 1,2, 3,4, 5,6, 7,8,9,10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42 або 43. Перевагу віддають комбінації, яка містить фрагменти нуклеотидних послідовностей 5ЕО ІЮ МО: 4, 23, 27 і 28, гени яких беруть участь у сигнальній трансдукції. Перевагу також віддають комбінації, яка містить фрагменти нуклеотидних послідовностей ЗЕО ІЮ МО: 3, 16 і 17; це гени біосинтезу глутамату Р. іп'евіап5. Крім того, певні переваги забезпечують комбінації, які включають нуклеотидні послідовності або фрагменти нуклеотидних послідовностей генів для формування клітинної стінки (послідовності «ЕО ІЮ МО: 25, 36, 37), передачі сигналу кальцієм (послідовності зБЕО ІЮО МО: 20, 21, 22), генів первинного метаболізму (послідовності ЗЕО ІЮО МО: 5, 6, 7), генів регуляції окисно-відновлювального потенціалу (послідовності ЗЕО ІО МО: 24, 25, 26), або які містять декілька нуклеотидних послідовностей або фрагментів нуклеотидних послідовностей генів транспортерів з послідовностей ЗЕО ІЮО МО: 39, 40, 41, 42. Перевагу також віддають комбінаціям, які включають нуклеотидні послідовності або фрагменти нуклеотидних послідовностей різних груп генів- мішеней, наприклад, генів передачі сигналу С-білками, передачі сигналу за участю МАР-кіназ, первинного метаболізму та регуляції окисно-відновлювального потенціалу (послідовності ХЕО
ІО МОБ: 27, 28, 4, 23).
Комбінування декількох генів-мішеней означає уникнення ймовірності того, що стійкість трансгенної рослини може бути зруйнованою природною мутацією ооміцетів.
Перша дволанцюгова ДНК за цим винаходом, введена в рослину картоплі, може містити нуклеотидну послідовність, яка гібридизується за жорстких умов з однією із таких нуклеотидних послідовностей: (а) нуклеотидною послідовністю, що відповідає одній з послідовностей ЗЕО 10
МО: 1-43, або (Б) фрагментом із щонайменше 15 послідовних нуклеотидів в нуклеотидній послідовності, що відповідає одній з послідовностей 5ЕО ІЮО МО: 1-43, або (с) нуклеотидною
Зо послідовністю, яка є комплементарною одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (б), або (с).
Приклади жорстких умов: гібридизація в 4х55С2 (МасСікцитрат натрію) при температурі 65 С з подальшим кількаразовим промиванням в 0,1х55С при температурі 65 "С протягом приблизно 1 год. Термін "жорсткі умови гібридизації"? вжитий у цьому описі, також може означати гіоридизацію при температурі 68 "С в 0,25 М розчині фосфату натрію, рН 7,2, 795 505 (додецилсульфат натрію), 1 мМ розчині ЕОТА (етилендіамінтетраоцтова кислота) і 1 95 ВБА (бичачий сироватковий альбумін) протягом 16 год. з подальшим дворазовим промиванням 2хЗЗС і 0,1 95 505 при температурі 68 "С.
Цей винахід також включає фрагменти нуклеотидних послідовностей, які мають декілька, наприклад, 1 нуклеотид або 2 нуклеотиди, що не є комплементарними послідовностями гена- мішені Рпуорпйнога іптезіап5. Варіації послідовностей (наприклад, варіації, які відбуваються в ооміцетах), засновані на певній генетичній мутації, наприклад, додаванні, делеції, заміні або поліморфізмі в штамі Рпуїорпйнога іпіезіапв, і які призводять до хибного парування на ділянці з 1, 2 або більше нуклеотидів, можуть бути допущені за умови, що РНК, утворена трансгенною рослиною картоплі, все ще може впливати на РНК гену-мішені, яка утворена ооміцетом.
За цим винаходом трансгенна рослина виду Зоїапит їшБрегозит має патогеностійкість до ооміцету роду РпуїорпїШога. Для визначення стійкості трансгенну рослину картоплі порівнюють з контрольною рослиною, яка в ідеалі має однаковий генотип з трансгенною рослиною і була вирощена в ідентичних умовах, але яка не містить ДНК, яка була введена в трансгенну рослину.
Стійкість може бути визначена за шкалою в оптичних балах, за якою надаються бали від 0 (не сприйнятлива) до 100 (дуже сприйнятлива). За варіантом здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, трансгенні рослини за цим винаходом мають стійкість, яка, в порівнянні з контрольною рослиною, призводить до зниження розповсюдження інфекції по поверхні рослин на щонайменше 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100 відсотків (дивись умови "визначення стійкості трансгенних рослин картоплі за умов на відкритому повітрі").
Рід Рпуїорпїйога включає різні види, наприклад, види аїпі, сасіогит, сарбісі, сіппатоті, сіторпїйпога, сіапаевіїпа, Падагіає, Пеагаіапага, ідаві, іптезіап5, іротоєає, ігапіса, Кепоміає, тікарії5, тедакКагуа, пісойапає, раїІтімога, рагазіїїса, рпазеоїї, гатогит, рхеподоїзидає, диегсіпа, 5зоЇає або іепіасціаїйа. бо У варіанті здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, трансгенна рослина картоплі має стійкість до Рпуїорпїнога іптТеєїапв.
Інгібування біосинтезу аліфатичних амінокислот валіну, лейцину та ізолейцину за рахунок генно-інженерної конструкції, спрямованої проти ацетолактатсинтази Р. іп'езїап5, призводить до істотного зниження зараження фітофторозом і різкого збільшення стійкості листя за лабораторних і польових умов. Об'єднання кількох генів-мішеней (наприклад, генів передачі сигналу О-білками, передачі сигналу за участю МАР-кіназ, первинного метаболізму, біосинтезу амінокислот і регуляції окисно-відновлювального потенціалу) в одній генно-інженерній конструкції спричинює подальше збільшення стійкості, оскільки патоген інгібується множинною дією комбінованої генно-інженерної конструкції на використання альтернативних шляхів передачі сигналів і метаболізму.
Встановлено, що захисна сила рослин картоплі за цим винаходом проти ізолятів Р. іптТевіапь5 різної агресивності змінюється так, що з'являється стійкість, яка ефективно і постійно захищає рослини проти цього найважливішого з патогенів.
Також було виявлено, що стійкість не супроводжується значним зниженням енергетичної цінності або негативними змінами агрономічних властивостей рослини картоплі. Випробування з вирощування в умовах, наближених до польових, не справило жодного негативного впливу на якість рослин. Ретельний відбір генів-мішеней Р. іп'ебїап5, що виключає будь-яку гомологію, що охоплює більш 17 послідовних пар нуклеотидів, з генами нецільових організмів (картоплі, людини, свиней, великої рогатої худоби) означає, що не існує жодних обмежень щодо використання рослин як корму або продукту харчування і жодних обмежень щодо посіву, вирощування, збирання або обробки цієї сільськогосподарської культури. Згадані рослини можна вільно використовувати як сільськогосподарські, харчові або кормові рослини.
За варіантом здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, згадана дволанцюгова
РНК являє собою тікМА або 5ікМА.
Термін "тікМА" описує малу інтерферуючу РНК і включає природно продуковані тікМА і синтетичні тікМА, які, наприклад, можуть бути одержані засобами рекомбінантного або хімічного синтезу або процесингом первинної тікМА.
Термін "біІКМА" описує малу інтерферуючу РНК і включає природно продуковані 5ікМА і синтетичні 5іЕМА, які, наприклад, можуть бути одержані засобами рекомбінантного або
Зо хімічного синтезу або процесингом 85ЕМА.
Трансгенна рослина продукує аО5КМА з введеної дволанцюгової ДНК, яка зазнає процесингу за рахунок інтерференції ендогенної РНК або механізмів глушіння з формуванням 5ікМА та тіВвВМА.
Для одержання а5КМА можуть бути використані перша дволанцюгова ДНК з нуклеотидною послідовністю, яка відповідає одній з послідовностей ЗЕО ІЮО МО: 1-43 або її фрагменту в смисловій орієнтації, та друга дволанцюгова ДНК в антисмисловій орієнтації, що відокремлені інтроном, який не має подібності зі згаданими генами-мішенями. Наприклад, ДНК може бути орієнтована з нуклеотидною послідовністю 5ЕБО ІЮО МО: 1 проти гену ацетолактатсинтази
Рпуорпїога іп'естап5. При експресії в рослинній клітині утворюється РНК-транскрипт, який, завдяки гомології між смисловими і антисмисловими ділянками послідовності, може зливатися з утворенням а5КМА. Унаслідок відсутності пар нуклеотидів на ділянці інтрону а85КМА утворює шпілечну структуру. Дволанцюгову РНК зі шпілечною структурою можна також одержати за допомогою однієї дволанцюгової ДНК з нуклеотидною послідовністю, що відповідає одній з послідовностей 5ЗЕО ІЮО МО: 1-43 в смисловій орієнтації, ії другої в антисмисловій орієнтації різної довжини. Тому, нуклеотидна послідовність у смисловій орієнтації може бути приблизно на 190 нуклеотидів довшою за нуклеотидну послідовність в антисмисловій орієнтації, або навпаки.
Певні ділянки послідовності вибраних нуклеотидних послідовностей генів-мішеней ампліфікуються внаслідок ПЛР та клонуються як в смисловому, так і в антисмисловому напрямку в вектор, придатний для синтезу шпілечної структури. Тому, декілька фрагментів з ділянками послідовності різних генів-мішеней можуть бути клоновані у вектор для побудови комбінованої шпілечної генно-інженерної конструкції. Ці вектори можуть бути введені в клітину рослини методами трансформації, відомими в галузі біотехнології рослин. Фахівцеві в цій галузі буде зрозуміло, що, наприклад, вибрана нуклеотидна послідовність гена-мішені також може бути клонована в один вектор в смисловій орієнтації і нуклеотидна послідовність гена-мішені може бути клонована в другий вектор в антисмисловій орієнтації з подальшим введення в клітину рослини, наприклад, котрансформацією.
Механізм глушіння виникає з а5КМА, наприклад, з шпілечних генно-інженерних структур РНК або з генних дуплексів. Дволанцюгові РНК під впливом а5КМА-специфічної ендонуклеази (дайсер (дісег)) продукують малі а5КМА, які процесуються під впливом довших нуклеотидних бо послідовностей в невеликі О5КМА переважно з 21-25 пар нуклеотидів. Процес є аналогічним як для структури типу "стовбур-петля" (первинна тікМА), так і для попередників довгої комплементарної азкМА. Білки Агдопації, як центральні компоненти комплексів РНК- індукованого глушіння (КІЗС), зв'язують і розплітають 5ікМА і тікМА так, що випереджаючий ланцюг дуплексу специфічно зв'язується паруванням нуклеотидів з мРНК і спричинює її деградацію. За допомогою птікМА, КМАї сричинює порівняно аналогічний процес, з тією різницею, що продукована тікМА також містить часткові ділянки, які не є ідентичними генам- мішеням.
Після зараження рослини-хазяїна РПуїорпїйога іптезїап5 між цією рослиною-хазяїном |і ооміцетами може відбутись обмін РНК, утвореними в рослині, які Є спрямованими проти однієї або більше Рпуїорпїйпога-специфічної(-их) цільової(-их) послідовності(-ей). В ооміцетів ці РНК можуть призвести до сіквенс-специфічного глушіння одного або декількох генів-мішеней. У цьому процесі можуть брати участь білки та білкові комплекси, такі як дайсери, КІЗС (комплекс
РНК-індукованого глушіння), а також РНК-залежна РНК-полімераза (КакРр).
Відомо, що ефект 5зікМА продовжується в рослинах, коли КакР синтезує нові 5ікМА з деградованих фрагментів мРНК. Ця вторинна або транзитивна КМАЇї може посилити глушіння, а також призвести до глушіння різних транскриптів, коли вони поділяють ці висококонсервативні послідовності.
У певному варіанті здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, згадані перша ДНК і друга ДНК є функціонально зв'язаними із щонайменше одним промотором. "Промотор" являє собою нетрансльовану послідовність ДНК, зазвичай розташовану вище від кодувальної ділянки, яка містить сайт зв'язування для РНК-полімерази та ініціює транскрипцію ДНК. Цей промотор містить спеціальні елементи, які функціонують як регулятори експресії генів (наприклад, сіз-регуляторні елементи). Термін "функціонально зв'язана" означає, що ДНК, яка містить інтегровану нуклеотидну послідовність, зв'язана з промотором так, що це уможливлює експресію цієї нуклеотидної послідовності. Згадана інтегрована нуклеотидна послідовність може бути нижче зв'язана з термінатором сигналу як один з компонентів.
Промотор може бути рослинного, тваринного або мікробного походження або ж він може бути синтетичного походження і може, наприклад, бути вибраний з однієї з таких груп промоторів: конститутивні, індуцибельні, розвитково-специфічні, клітиноспецифічні,
Зо тканиноспецифічні або органоспецифічні У той час як конститутивні промотори активні в більшості умов, індуцибельні промотори виявляють експресію в результаті індукуючого сигналу, який, наприклад, може бути обумовлений біотичними стресорами, такими як патогени або абіотичними стресорами, такими як холод або сухість, або хімічні речовини.
До прикладів промотерів належать конститутивний промотор Саму 355 (Вепгеу еї аї., 1990), а також промотор С1, який є активним в зеленій тканині (еапйі еї а!., 2004).
Згадані перша і друга ДНК також можуть бути функціонально зв'язаними з подвійним промотором, наприклад, двонаправленим активним промотором ТК та ТК2' (Заїйо еї а1., 1991).
Крім того, кожна з першої та другої ДНК може бути функціонально зв'язана з промотором.
Використання двох промоторів, кожен з яких фланкує 3'-кінець і 5-кінець молекули нуклеїнової кислоти, забезпечує експресію відповідного окремого ланцюга ДНК з утворенням двох комплементарних РНК, які гібридизуються, і утворюють а5КМА. Крім того, два промотори можуть бути розташовані так, що один промотор спрямований у напрямку транскрипції певної нуклеотидної послідовності, а другий промотор спрямований у напрямку транскрипції нуклеотидної послідовності, яка є комплементарною першій нуклеотидній послідовності.
Утворення а5ЕМА відбувається протягом транскрибування обох нуклеотидних послідовностей.
Крім того, двонаправлений промотор може бути розміщений так, щоб забезпечувати експресію двох нуклеотидних послідовностей у двох напрямках, при цьому одна нуклеотидна послідовність зчитується в 3'-нсапрямку, а друга нуклеотидна послідовність зчитується в 5'- напрямку. Дволанцюгова РНК може утворюватись, поки обидві нуклеотидні послідовності є комплементарними одна іншій.
Цей винахід також має відношення до частин трансгенної рослини виду Зоїапит їибегозит.
Термін "частини" трансгенної рослини, вжитий у цьому описі, зокрема, означає насіння, коріння, листя, квіти, а також клітини рослини за цим винаходом. Тому термін "клітина" слід розуміти як такий, що означає, наприклад, ізольовані клітини з клітинною стінкою або їх агрегати, або протопласти. Термін "трансгенні частини" трансгенної рослини також означає ті частини, які можуть бути зібрані у вигляді врожаю, наприклад, бульби картоплі.
Крім того, цей винахід має відношення до способу одержання трансгенної рослини виду зоЇапит їшбегозит, яка проявляє стійкість до ооміцетів роду Рпуїорпїпога.
Певні способи трансформації рослинних клітин є відомими в галузі біотехнології рослин. бо Кожен з цих способів може бути застосований для введення вибраної нуклеїнової кислоти, за варіантом здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, у векторі, в рослинну клітину з метою одержання трансгенної рослини за цим винаходом. Способи трансформації можуть включати прямі або непрямі способи трансформації і можуть застосовуватись до дводольних рослин і, насамперед, для однодольних рослин. Відповідні прямі способи трансформації включають ПЕГ-індуковане поглинання ДНК, трансформацію, індуковану ліпосомами, біолістичні методи, які включають бомбардування мікрочастинками, електропорацію або мікроін'єкції. До прикладів непрямих способів належать метод Адгобрасієгішт-індукованої трансформації або вірусної інфекції через вірусні вектори.
Перевагу віддають способу Адгобрасіегішт-індукованого перенесення ДНК за участю бінарних векторів. Після трансформації рослинних клітин, із застосуванням одного або більше маркерас-ів) вибирають клітини, які були трансформовані в рослині ДНК за цим винаходом, і які включають гени, які переважно індукують стійкість до антибіотиків, такі, як ген неоміцинфосфотрансферази І МРТЇЇ, який індукує стійкість до канаміцину, або ген гігроміцинфосфотрансферази ІІ НРТТІЇ, який індукує стійкість до гігроміцину.
Потім трансформовані клітини регенерують в цілі рослини. Після перенесення ДНК і регенерації одержані рослини можуть бути перевірені, наприклад, із застосуванням кількісної
ПЛР, на наявність ДНК за цим винаходом. Далі стійкість цих рослин до Рпуїорпїнога іпіегїапь5 випробують іп мійго і в теплиці. Стандартні додаткові фенотипові дослідження можуть проводитися персоналом, що має відповідну підготовку, в теплиці або на відкритому повітрі. Ці досліджувані трансформовані рослини можуть вирощуватись безпосередньо.
За цим винаходом спосіб одержання трансгенної рослини виду ЗоЇапит шрегозит, яка виявляє стійкість до ооміцетів роду Рпуїорпїйпога, включає такі стадії: () одержання першої трансформованої батьківської рослини, що містить першу дволанцюгову ДНК, стабільно інтегровану в геном батьківської рослини, яка містить (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає певній послідовності з 5ЕО ІЮО МО: 1-43; або (Б) фрагмент із щонайменше 15 послідовних нуклеотидів нуклеотидної послідовності, що відповідає певній послідовності з ЗЕО 10 МО: 1-43; або (с) нуклеотидну послідовність, комплементарну одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б); або (4) нуклеотидну послідовність, яка гибрідизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (б) або (с) за
Зо жорстких умов; (і) одержання другої трансформованої батьківської рослини, що містить другу дволанцюгову
ДНК, стабільно інтегровану в геном батьківської рослини, при цьому нуклеотидні послідовності кодувального ланцюга першої та другої ДНК є частково або повністю зворотнокомплементарними одна відносно іншої; (ії) схрещування першої батьківської рослини з другою батьківською рослиною; (ім) вибір рослини, в геномі якої перша дволанцюгова ДНК і друга дволанцюгова ДНК є стабільно інтегрованими, для забезпечення патогеностійкості до ооміцетів роду Рпуїорпївога, з метою одержання з цієї рослини дволанцюгової РНК.
За цим винаходом таким умовам відповідає нуклеотидна послідовність або фрагмент нуклеотидної послідовності, що відповідає певній з послідовностей 5ЕБО ІО МО: 1-43
Рпуюрпннога іпіевіапв.
У варіанті здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, згаданою дволанцюговою
РНК може бути тівМА або 5ікМА.
Цей винахід також має відношення до композиції для зовнішнього нанесення на рослини.
Цю композицію одержують для зовнішнього нанесення на рослини. Вона містить дволанцюгову РНК, у якій один ланцюг цієї РНК відповідає транскрипту дволанцюгової ДНК, що включає (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає певній послідовності з «ЕО ІЮО МО: 1-43; або (5) фрагмент із щонайменше 15 послідовних нуклеотидів нуклеотидної послідовності, що відповідає певній послідовності з 5ЕО 10 МО: 1-43; або (с) нуклеотидну послідовність, комплементарну одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б); або (4) нуклеотидну послідовність, яка гибрідизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (б) або (с) за жорстких умов.
Дволанцюгову РНК для одержання композиції за цим винаходом можна одержати іп міїго способами, відомими фахівцям у цій галузі Наприклад, дволанцюгова РНК може бути синтезована формуванням РНК безпосередньо іп міго. Дволанцюгова РНК також може бути синтезована з дволанцюгової ДНК, наприклад, утворенням транскрипту мРНК, який потім утворює шпілечну структуру.
Композицію за цим винаходом можна застосовувати як фунгіцид для певної рослини або її насіння. Тому згадана композиція призначена до застосування для протидії росту патогенного 60 мікроорганізму, для обмеження розповсюдження патогенного мікроорганізму або для обробки уражених рослин. Наприклад, композицію можна використовувати як фунгіцид для обприскування у вигляді спрею або для нанесення в інший спосіб, відомий фахівцеві в цій галузі для зовнішнього нанесення на рослинну тканину, або для розпилювання, або змішування з культиваційним субстратом до того або після того, як рослини проросли.
Нижче в цьому описі композицію за цим винаходом використовують як засіб для попередньої обробки насіння. Тому цю композицію спочатку змішують з субстратом-носієм, і наносять на насіння в комбінації, яка включає дволанцюгову РНК і субстрат-носій, при цьому цей субстрат-носій має, наприклад, РНК-стабілізувальну дію. Отже, стабільність РНК і її дія на вибрані гени-мішені РІуїорпїйога іпіебїап5 можна посилити, наприклад, хімічними модифікаціями, такими як заміна рибози гексозою. Ліпосоми, які інкапсулюють молекули РНК, також можна використовувати як стабілізатор РНК.
Найприйнятнішими рослинами для обробки цією композицією є рослини виду ЗоіЇіапит
Трего5ит.
Наведений вище опис рослини і способу за цим винаходом також має відношення до цієї композиції.
Нижче цей винахід описаний з посиланням на фігури і послідовності:
Фіг. 1: Плазміда рКМАї як типовий представник вектора, який може бути використаний для формування шпілечних генно-інженерних конструкцій проти гена-мішені. Цей вектор містить промотор Саму 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену ЛІДААРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорзі5 (паІапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор
Саму 355.
Фіг. 2: Плазміда рЕМАї РІТО 03410 як типовий представник вектора, який містить смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент для формування а5КМА проти гена- мішені "у цьому описі РІТО 03410). Крім того, цей вектор містить промотор СамМмМ 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у АгаБрідорзів
Інаіїапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор СаММ 355.
Фіг. 3: Плазміда РКЕМАїЇ НІС5 СоА як типовий представник вектора, який містить різні певні послідовності в смисловому Ффрагменті-інтрон-антисмисловому фрагменті, який має обумовити утворення а5КМА проти різних генів-мішеней. Крім того, цей вектор містить промотор Саму
Зо 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у
Агарідорзів Іпайііапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор Самм 355.
Фіг. 4: Плазміда рОвТМ/ЕсоКІ! Кап. Бінарна Ті-плазміда, яку використовують як вектор клонування.
Фіг. 5: Плазміда рРОВвВТМ/ЕсоКІ Кап РІТО 03410. Бінарна Ті-плазміда, яку використовують для Адгорасіегішт-індукованої трансформації.
Фіг. 6: Плазміда рАМ, яку використовують як вектор клонування.
Фіг. 7: Плазміда рАМ НІбС5 СоА як приклад плазміди, яку використовують як вектор клонування.
Фіг. 8: Плазміда ро5Р-Мо5. Бінарна Ті-плазміда, яку використовують як вектор клонування.
Фі. 9: Плазміда р9еОБ5М НІС5Б СоА. бБінарна Ті-плазміда, яку використовують для
Адгорасіегіит-індукованої трансформації.
Фіг. 10: Плазміда ро5М НІС5З ОРЕМАі РІТО 03410 як зразковий представник бінарного вектора для утворення а5КМА проти гена-мішені (у цьому описі РІТО 03410) із використанням двох промоторів Саму 355, кожен з яких фланкує 3'- і 5'-кінець молекули нуклеїнової кислоти.
Фіг. 11: Паросток трансгенної картоплі в селективному середовищі після трансформації на стадії регенерації.
Фіг. 12: Діагностична ПЛР для перевірки трансгенності картоплі (РЕК-Н4) після трансформації бінарним вектором РОВТМ/ЕсоКІ Кап РІТС 03410.
Виявлення смислового фрагмента (370 п.н.) (праймер 5334 5'-АТСССАСТАТССТТСаСАДИ- 00 3'х51259 5-ТТВАТАТСИаССОСААСаСспАпАсСАСАТОС-3 і антисмислового фрагмента (450 п.н.) (5329 5-СТААдасат ПОТ ТАТАТаСТСААС-3х51259 5- таАТАТССаССОСОСААдваасСаАСпАсСАСАТОСИ-3). Розчин: РСК-Мавіегміх, моніторинг ПЛР. Маркер:
Ттаски"м 1 КЬ ОМА І адаег.
Фіг. 13: Виявлення 5ікМА в трансгенних рослинах картоплі після трансформації бінарним вектором РОВТМ/ЕсоКІ Кап РІТО 03410 (А) і бінарним вектором ро5М НІСЗ РІТО 00375 (В).
Виявлення здійснюють засобами назерн-блот-гібридизації з радіоактивно міченим зондом а5зКМА РІТО03410 (А) або з радіоактивно міченим зондом азКМА РІТО00375 (В). А: багаторазове застосування різних зразків з ліній РК-Н4 Т007 і Т011. В: одноразове застосування зразків з ліній РК-Н2 71040, Т045, 047 і Т049. бо Фіг. 14 А: Плазміда рАВМ-7051исі азКМА.РІТО 00375 як типовий представник вектора, що містить гібридну генно-інженерну конструкцію, що складається з репортерного гена люциферази та фрагмента досліджуваного НІС5 гена-мішені РІО 00375. Крім того, вектор містить подвійний промотор Саму 355, сайт множинного клонування, кодувальну послідовність для Ішс-гена Ріоїїпи5 ругаїїх, яка кодує люциферазу, відокремлену з модифікованого інтрону
РІМ2 гена картоплі ЗІ 51 (ЕсКе5 єї а) 1986, Мапсаппеуї еї аЇ. 1990), додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор Мо5 з гену нопалінсинтази Адгорасіегійт
Іштегасіепв5.
Фіг. 14 В: Плазміда рАВМ-7051Іисі а5КМА.РІТО 03410 як типовий представник вектора, що містить гібридну генно-інженерну конструкцію, що складається з репортерного гена люциферази та фрагмента досліджуваного НІС5 гена-мішені РІТО 03410.
Фіг. 15 А: Відносна активність люциферази в трансгенних лініях картоплі генотипу Вайса зі стабільною інтеграцією генно-інженерної конструкції НІ КМАї проти гена РІТО 03410 Р. іптебіїап5 після бомбардування вектором рАВМ-7051йсі а5АМА.РІТЯ 03410. В: Вайса (нетрансгенний контроль), Т003, Т005: трансгенні НІСЗ-лінії картоплі.
Фіг. 15 В: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєвїап5 на трансгенних НІС5-лініях. Лінії картоплі сорту Вайіса трансформують КМАЇїі-конструкцією для утворення а5КМА проти гена Р. іптебіап5 РІТО 03410. Після інфікування Р. іп'езіап5 у випробуванні з відокремленим листям, ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Вайса (середнє 4 біологічних повторень). В: Вакіса (нетрансгенний контроль), Т003, Т005: трансгенні
НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 16 А: Відносна активність люциферази в трансгенних лініях картоплі генотипу Негтез зі стабільною інтеграцією генно-інженерної конструкції НІЗ5 КМАЇї проти гена РІТЄ 03410 Р. іптебіїап5 опісля бомбардування вектором рАВМ-7051Шсі а5АМА.РІТЯ 03410. НН: Негтев (нетрансгенний контроль), Т004, Т011: трансгенні НІСЗ-лінії картоплі.
Фіг. 16 В: Відносне продукування спорангіїв Р. іптезїап5 на трансгенних НІОСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Негте5 були трансформовані КМАїі-конструкцією для утворення а5КМА проти гена Р. іп'еєбіап5 РІТО 03410. Після інфікування Р. іп'ехіап5 у випробуванні з відокремленим листям, ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Вайіса (середнє 4 біологічних повторень). Н: Нептез (нетрансгенний контроль), Т004,
Зо Т011: трансгенні НІСЗ-лінії картоплі.
Фіг. 17 А. Відносна активність люциферази в трансгенних лініях картоплі генотипу Оевбігеє зі стабільною інтеграцією генно-інженерної конструкції НІЗ5 КМАЇї проти гена РІТЄ 03410 Р. іптебіап5 опісля бомбардування вектором рАВМ-7051исі а5АЕМА.РІТ 03410. 0: Оебвігее (нетрансгенний контроль), Т098: трансгенна НІС5-лінія картоплі.
Фіг. 17 В: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєвїап5 на трансгенних НІС5-лініях. Лінії картоплі сорту ЮОевзігее були трансформовані КМАЇі-конструкцією для утворення а5Е2ЕМА проти гена Р. іп'еєбіап5 РІТО 03410. Після інфікування Р. іп'ехіап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом
Вашса (середнє 4 біологічних повторень). 0: Юебвігее (нетрансгенний контроль), 7098: трансгенна НІСЗ-лінія картоплі.
Фіг. 18 А. Відносна активність люциферази в трансгенних лініях картоплі генотипу ЮОебігее зі стабільною інтеграцією генно-інженерної конструкції НІЗ5 КМАЇї проти гена РІТЄ 00375 Р. іптебіїап5 опісля бомбардування вектором рАВМ-7051исі а5АМА.РІТИ 00375. 0: Оевігеє (нетрансгенний контроль), Т042, Т044, Т047, Т049: трансгенні НІСЗ-лінії картоплі.
Фіг. 18 В: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєвїап5 на трансгенних НІС5-лініях. Лінії картоплі сорту Оевзігее були трансформовані КМАїЇ-конструкцією для утворення а5Е2ЕМА проти гена Р. іпіезіїап5 РІТО 00375. Після інфікування Р. іп'еєїап5 у дослідженні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом
Вайціса (середнє 4 біологічних повторень). Ю: Юезігее (нетрансгенний контроль), 7042, Т044,
Т047, Т049: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 19 А: Рівень інфекції в трансгенних лініях картоплі генотипу Непте5 зі стабільною інтеграцією конструкції НІС КМАЇ проти гена РІТО 03410 Р. іпт'еєїап5 після зараження рослин
Р. іп'еєтап5 за умов, подібних до умов на відкритому повітрі. Сірі лінії з трикутниками: Вайіса,
Резігее і Ких5еї Виграпк (нетрансгенні контролі), чорні лінії з квадратами: рослини генотипу
Негптез: суцільна лінія: Нептез (нетрансгенний контроль), пунктирна лінія: РК-Н-4-7 і штрих- пунктирна лінія: РК-Н-4-11: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 19 В: Фотографічне підтвердження ступеню зараження трансгенних ліній картоплі РК-Н- 4-7 ії РК-Н-4-11 генотипу Нептез зі стабільною інтеграцією конструкції НІ ЕМАЇ проти гена
РІТа 03410 Р. іптебїап5 після зараження рослин Р. іп'есїап5 за умов, подібних до умов на бо відкритому повітрі, в порівнянні з нетрансгенними контрольними рослинами генотипу Негптезв.
Фотографії зроблені через 32 дні після інфікування.
Фіг. 20: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'езіап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Ки55еї Виграпк трансформують КМАЇ-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гена Р. іп'еєбіап5 РІТО 03410. Після інфікування Р. іп'ехіап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом
Кизхзеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Ких55еї ВиграпкК (нетрансгенний контроль), |Н- 4-Т084, Н-4-Т096: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 21: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'езіап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Негпте5 були трансформовані КМАЇї-конструкцією для утворення азКМА із застосуванням подвійної паромоторної генно-інженерної конструкції НІЄ5 аРАКМАЇії РІТО 03410 проти гена Р. іптесіїап5 РІТО 03410. Після інфікування Р. іпіезіап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Негтев5 (середнє З біологічних повторень). Негте5 (нетрансгенний контроль), Н-23-Т0003, Н-23-1026, Н-23-1038, Н-23-1062, Н-23-Т063, Н-23-1066: траносгенні
НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 22: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Ки55еї Вигрбапк трансформують КМАЇї-конструкцією НІСЗ СоА для утворення азЕМА проти генів Р. іп'евіап5 РІО 00146, РІТО 08393, РІТО 10447 і РІТО 00708. Після інфікування Р. іп'еєтап5 у дослідженні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Киззеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Ких55еї Виграпк (нетрансгенний контроль), Н-13-Т050, Н-13-Т053, Н-13-
Тт036, Н-13-Т032: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 23: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Ки55еї Виграпк трансформують КМАїЇ-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гену Р. іп'ебїап5 РІТО 06748. Після інфікування Р. іп'езїап5 у випробуванні з відокремленим листям, ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Кихзеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Киб55еї Виграпк (нетрансгенний контроль), Н-15-1008, Н-15-Т010: трансгенні НІС5З-лінії картоплі.
Фіг. 24: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії
Зо картоплі сорту Киззеї Вигбапк трансформують КМАїЇ-конструкцією для утворення а5КМА проти гену Р. іпФЇезіап5 РІТО 09306. Після інфікування Р. іп'ебіап5 у дослідженні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв у порівнянні з нетрансгенним сортом
Кизхзеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Ки55еї Виграпк (нетрансгенний контроль), Н- 10-1111: трансгенна НІОС5-лінія картоплі.
Фіг. 25: Відносне продукування спорангіїв Р. іпїезіап5 на трансгенних НІОС5З-лініях. Лінії картоплі сорту Ки55еї Виграпк трансформують КМАЇ-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гену Р. іпТ'ебіап5 РІТЄ 09193. Після інфікування Р. іпї'еєтап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв у порівнянні з нетрансгенним сортом
Кизхзеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Ки55еї Виграпк (нетрансгенний контроль), Н- 12-1194, Н-12-1195, Н-12-1222, Н-12-Т239: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 26: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Оезігее трансформують АМАЇ-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гену Р. іптебіап5 РІТЄ 09193. Після інфікування Р. іп'езіап5 у випробуванні з відокремленим листям, ці лінії виивляють знижене продукування спорангіїв у порівнянні з нетрансгенним сортом ЮОевігее (середнє З біологічних повторень). Юезігее (нетрансгенний контроль); Н-12-1187, Н-12-1216, Н- 12-1237, Н-12-1245: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 27: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Ки55еї Виграпк трансформують КМАЇ-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гену Р. іп'ебіап5 РІТОЄ 19177. Після інфікування Р. іпї'еєтап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виявляють знижене продукування спорангіїв у порівнянні з нетрансгенним сортом
Кизхзеї Виграпк (середнє З біологічних повторень). Ки55еї Виграпк (нетрансгенний контроль), Н- 9-1271, Н-9-1305, Н-9-1308: трансгенні НІС5-лінії картоплі.
Фіг. 28: Відносне продукування спорангіїв Р. іп'еєтап5 на трансгенних НІСЗ-лініях. Лінії картоплі сорту Оезігее трансформують ЕМАЇі-конструкцією для утворення а5ЕМА проти гену Р. іптебїап5 РІТО 19177. Після інфікування Р. іп'євіап5 у випробуванні з відокремленим листям ці лінії виивляють знижене продукування спорангіїв в порівнянні з нетрансгенним сортом Юебвігее (середнє З біологічних повторень). Оезігее (нетрансгенний контроль); Н-9-1280: трансгенна
НІС5-лінія картоплі.
Фігура 29: Плазміда ро5М КМАЇї РІТО 06748 як типовий представник вектора, який містить бо смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент для утворення а5КМА проти гену-мішені
(у цьому описі РІТО 06748). Крім того, цей вектор містить промотор Самм 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорвів
ІНаійапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор Самм 355.
Фіг. 30: Плазміда ро5М КМАї РІТО 09306 як типовий представник вектора, який містить смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент для утворення а5КМА проти гену-мішені (у даному випадку РІТО 09306) Крім того, цей вектор містить промотор Самм 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорвів
Інаіїапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор СаММ 355.
Фіг. 31: Плазміда ро5М КМАї РІТО 09193 як типовий представник вектора, який містить смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент для утворення а5КМА проти гену-мішені (у цьому описі РІТО 09193). Крім того, цей вектор містить промотор Самм 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорвів
Інаіїапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор СаММ 355.
Фіг. 32: Плазміда роО5М КМАї РІТО 19177 як типовий представник вектора, який містить смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент для утворення а5КМА проти гену-мішені (у даному випадку РІТО 19177) Цей вектор додатково містить промотор Самм 355, сайт множинного клонування, інтрон з гену АЇДАРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорвів
Інаіїапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор СаММ 355.
Приклади варіантів здійснення цього винаходу
Одержання генно-інженерних конструкцій
Певні ділянки послідовності вибраних генів-мішеней ампліфікують під впливом ПЛР, і клонують як в смисловому, так і в антисмисловому напрямку в вектор рЕМАЇ, який є придатним для системи шпілечних структур (Фіг. 2). Так, декілька фрагментів з ділянками послідовності різних генів-мішеней можуть бути клоновані у вектор для одержання комбінованої шпілечної генно-інженерної конструкції (Фіг. 3).
Розпочинаючи з геномної ДНК РВуїорпїШога іпт'еєтап5, ділянку послідовності з 290 п.н. кодувальної ділянки гена РіТтс 03410 ампліфікують під впливом ПЛР, розщеплюють рестриктазами Хпої! та Зтаї на сайтах розщеплення, вставлених із застосуванням праймерних послідовностей, і клонують у вектор реЕМАЇї (праймер 1: сдсісдаддсіддагсісдсосідададі, праймер 2:
Зо нодагасодсоддааддсдададасаїсо). Цей вектор містить промотор Самм 355, сайт множинного клонування, інтрон з гена АЇААРб, який кодує пермеазу амінокислот у Агарідорзів аїїапа, додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор Самм 355. Цей вектор розщеплюють рестриктазами Хпо! та ЕсіІ1З61ї, ії фракцію (4,098 т.п.н.) вектора відокремлюють електрофорезом у агарозному гелі, після чого виділяють. Лігувальний розчин трансформують в штамі Е.соїї ХІ.1-рІне (компанія 5ігаїадепе, ГауоМПа, штат Каліфорнія). Після цього той самий фрагмент РІТО 03410 клонують в плазміду рРЕМАії РІТО 03410 бепзе в антисмисловому напрямку. Для цього фрагмент знову ампліфікують з геномної ДНК Рпуїорішога іп'евіапе5 під впливом ПЛР, розщеплюють рестриктазами Хпої та Зтаї на сайтах розщеплення, вставлених праймерними послідовностями, після чого лігують у вектор РКМАї РІТО 03410 5епзе, який був розщеплений Зта!-За! з подальшим переведенням у лінійну форму (Фіг. 1). Смисловий фрагмент-інтрон-антисмисловий фрагмент гену (КМАЇ-РІТО 03410) відщеплюють від вектора реМАЇї, і клонують у вектор РОВТМ/ЕсоКіІ Кап (Фіг. 4). Для цього обидва рОовтТУ/Есокі Кап і рАеМАїЇ РІТО 03410 розщеплюють НіпаПй! і олігують так, що утворюється плазміда равтТМ/ЕсоВіІ Кап РІТО 03410 (Фіг. 5). Альтернативно генно-інженерні конструкції НІСЗ-ВМАЇ, такі як НІБ-СОА, спочатку клонують у вектор рАМ (компанія ОМА Сіопіпуд Зегмісе е.К., Гамбург) (Фіг. 6). Для цього як рАМ, так і рКМАї РІТО 03410 розщеплюють Ніпаїй, ії лігують так, що утворюється плазміда РАМ НІОБЗ СОоА (Фіг. 7). З вектору РАМ фрагмент НІС5 СоА інтегрують у вектор ро5Р-Моз (компанія ОМА Сіопіпд Зегуісе е.К., Гамбург) шляхом гідролізу 5РЇ| і лігування (Фіг. 8) так, що утворюється плазміда ро5М НІС СоА (Фіг. 9), яку використовують для трансформації картоплі.
Як альтернатива описаному вище вектору, який є придатним для синтезу шпілечних генно- інженерних структур, експресію частини кодувальної ділянки гена-мішені рослини картоплі можна ініціювати двома протилежно (зворотно) орієнтованими промоторами (Фіг. 10). Крім того, може бути також передбачене глушіння генів штучними мікроРНК-конструкціями (атікКМА) з використанням протоколу УУеб тісгоМА Оезідпег5 (М/МОЗ3). Штучні тікМА являють собою 21- членні одноланцюгові РНК, які можуть бути синтезовані для конкретної негативної регуляції бажаних генів у рослинах. Регуляція відбувається так само, як з 5ікМА, через розщеплення
МРНК. Після цього згадані ЕМАЇї генно-інженерні конструкції клонують в бінарний вектор, і трансформують в картоплі внаслідок Адгобасіегіит (шптегасіепз-індукованої трансформації. бо Трансформація та регенерація
Трансформацію картоплі здійснюють за модифікованим протоколом, розробленим Реї еї аї., (2009), із застосуванням канаміцину як антибіотика. Матеріал донора культивують у 80 мл середовища М5(О0) (середовище Мурасіге і Скуга, модифіковане гормоном 2,4-Д (2,4- дихлорофеноксіоцтова кислота)) (25 "С; цикл 16 год. день/8 год. ніч; 2000 люкс) протягом 3-4 тижнів. Для трансформації (С1) міжвузля вирізають з донорського матеріалу у вигляді приблизно 0,5 см експлантатів. Їх культивують у чашках Петрі з 10 мл М5(О2) (15-20 експлантатів на чашку) разом з 70 мкл культури Адгобрасіегішт іштегїасієп5, яку перед тим культивують протягом ночі при температурі 28 "С, і яку раніше трансформують НІС5О-ЕМАЇ генно-інженерною конструкцією як частиною бінарного вектору, такого, наприклад, як ро5М, інкубований при температурі 25 "С протягом 2 днів в темряві. Далі, експлантати сушать на фільтрувальному папері, і поміщають в чашки Петрі на середовище М5МУУ з селекційним антибіотиком (розчин тиментину (400 мг/л)кьрозчин канаміцину (75 мг/л)), які герметично закривають, і культивують протягом 2 тижнів (25 "С; цикл 16 год. день/8 год. ніч; 2000 люкс) (С2). Цю селекційну стадію повторюють кожні 2 тижні до регенерації паростків (3 С3). Регенеровані паростки (Фіг. 11) інкубують на середовищі М5 (розчин сахарози (30 г/л)) разом з селекційним антибіотиком (розчин тиментину (250 мг/л)укрозчин канаміцину (100 мг/л) для утворення коренів, і перевіряють з використанням ПЛР на інтеграцію призначеної для трансформації генно- інженерної конструкції і, тим самим, на присутність нуклеснових кислот за цим винаходом.
Використання праймерів Во2299 (5-4ТасАсАсастТАТТСОСсТА-3) і Во2300 (5-
ССАССАТОАТАТТСОИССААС-3) обумовлює ампліфікацію фрагмента ДНК (553 п.н.) бактеріального гена МРТЇЇ, який кодує неоміцинфосфотрансферазу. Крім того, на підтвердження того, що генно-інженерна конструкція є повною, із застосуванням ПЛР виявляють смисловий та антисмисловий фрагменти (Фіг. 12). ПЛР здійснюють з використанням 10 нг геномної ДНК, при концентрації праймера 0,2 мкМ при температурі відпалу 55 "С в
Мийісусієг РТО-200 (компанія М.) Кезеагсп, УМмаїегіомп, США). Розмноження паростків, які дають позитивний результат в ПЛР, здійснюють на середовищі М5жрозчин сахарози (30 г/лукрозчин ампіциліну (400 мг/л).
Виявлення процесованої дволанцюгової РНК і вікМА
У трансформованих рослин експресовані шпілечні структури або дволанцюгові РНК
Зо процесуються природними рослинними КМАїЇі-механізмами так, що ці молекули РНК деградують у дрібні одноланцюгові РНК. Ці біБМА відкладаються на мРНК відповідного гена-мішені в ооміцетів і, отже, спричинюють глушіння цього гену. І отже, рослини вимушені захищати самих себе від патогенів, що атакують. За цією технологією можуть бути одержані трансгенні рослини картоплі, які мають підвищену стійкість до Р. іптТевіапв.
Трансформація рослин картоплі генно-інженерними конструкціями для експресії шпілечних структур або дволанцюгових РНК призводить до того, що одержані а5КМА процесуються до рівня 5зіКЖМА, нехтуючи природними рослинними механізмами РНкК-інтерференції. Для визначення фрагментації азКЕМА сумарну РНК було виділено з трансгенних рослин з використанням тризолового методу (Спотслуп5кКі апа Засоспі, 1987). Суміш сумарна РНК/зразок (15 мкг) доповнюють формамідом, денатурують, і відокремлюють засобами електрофорезу в 1 95 агарозному гелі з 10 95 формальдегіду в їхХМОР5З буфері (0,2 М МОРЗ (натрієва сіль), 0,05
М МаОАс, 0,01 М ЕОТА в ОЕРС анго, рн 7,0 в присутності Маон). Відокремлену РНК переносять з гелю на нейлонову мембрану (позитивно заряджену), використовуючи метод назерн-блотингу в 20х55С буферу (фізіологічний розчин-натрійцитратний буфер). РНК гіоридизують з радіоактивно міченим зондом, комплементарними послідовностями фрагмента гена-мішені, присутнього в смисловому або в антисмисловому напрямку в генно-інженерній конструкції, трансформованій у рослинах. Так само фрагменти РНК, комплементарні послідовності фрагмента а5КМА, мітять, і виявляють фосфовізуалізатором.
Трансформація рослин картоплі генно-інженерними конструкціями для експресії шпілечних структур або дволанцюгових РНК призводить до того, що одержані а5еЕМА процесуються до 5ікМА, нехтуючи природніми рослинними механізмами РНК-інтерференції. Для визначення фрагментації О5ЕМА до 5ікМА сумарну РНК виділяють з трансгенних рослин тризоловим способом (Спотслуп5Кі апа Засспі, 1987). Суміш сумарна РНК/зразок (15 мкг) доповнюють формамідом, денатурують, і відокремлюють засобами електрофорезу в поліакриламідному гелі з 15 95 трис-буферу/борної кислоти/ЕОТА (ТВЕ) і сечової кислоти в 0,5х ТВЕ. Відокремлену РНК переносять на нейлонову мембрану (нейтральну) з гелю, використовуючи Тапк-блотинг в 0,5хТВЕ. РНК гібридизують з радіоактивно міченим зондом, комплементарним послідовності фрагмента гена-мішені, присутнього в смисловому або в антисмисловому напрямку в генно- інженерній конструкції, трансформованій у рослинах. Так само 5ікМА, комплементарні ділянкам бо послідовності фрагмента а5КМА, мітять, і виявляють фосфовізуалізатором.
Такі БвіЕМА можна виявити в різних трансгенних ліній картоплі, таких як лінії РЕ-НА або лінії
РА-Н2БіКМА (Фіг. 13 А, В). Це свідчить, що генно-інженерні конструкції, трансформовані в рослинах, розпізнаються і процесуються рослинними КМАїі-механізмами, завдяки чому можуть утворюватись 5ікМА проти НІС5 генів-мішеней Р. іптезіап5, і ці генно-інженерні конструкції мають здійснювати глушіння цього гену в патогені.
Визначення стійкості трансгенних рослин картоплі у випробуванні з відокремленим листям
Для випробування стійкості листків трансгенної картоплі трансгенні рослини вирощують з іп міго рослин у теплиці в 5 л горщиках. Через 6-8 тижнів відрізають по 2 листки з простоперистого листа кожної рослини картоплі, і вміщують їх в герметичний пластиковий ящик на вологий субстрат Сгодап так, що стебло листка знаходиться у вологому субстраті Сгодап. Це забезпечує високий рівень вологості. Ящики інкубують при температурі 18 "С за програмою чергування світла і темряви (сонячне світло, лютий-вересень). На листки з простоперистого листа картоплі наносять краплі суспензії зооспор Рпуїорпїнога іптевіапз (10 мкл; 1027 зооспор на мл). Через 24 год. кришку ящиків трохи відкривають для забезпечення легкої циркуляції повітря в ящиках. Через 6 днів здійснюють оптичну та кількісну оцінку зооспор. Оптична оцінка свідчить про ступінь зараження і руйнування листків простоперистого листа картоплі патогеном
РПпуїорпїнпога іпіезіап5. Визначення кількості спорангіїв дозволяє зробити кількісну оцінку репродуктивної здатності збудника в рослині Для цього раніше інфіковані листки простоперистого листа картоплі інкубують у 5 мл води в пробірках РаїЇсоп на шейкері протягом 2 год., що забезпечує струшування спорангій з листка. Після цього кількість спорангій визначають із застосуванням лічильної камери Тома під мікроскопом.
У різних лініях картоплі НІС5, одержаних трансформацією різних генотипів картоплі, після інфікування Р. іп'езїтап5 реєструють зменшену кількість спорангіїв (б точок на дюйм) (Фіг. 15 В- 18 В). Це свідчить про зниження репродуктивної здатності патогену на трансгенних рослинах.
Ген РІТО 03410 випробовують як ген-мішень для НІСЗ на генетичному фоні картоплі сортів
Вайса, Нептез і Оебзігеє, а також сорту Ки55еї ВиграпкК, використовуючи вектор, показаний на
Фіг. 5. Випробування з відокремленим листям, здійснюване на цих трансгенних рослинах сорту
Кивзеї Виграпк, свідчить про обмеження репродуктивної здатності патогену на трансгенних рослинах у порівнянні з нетрансгенними контрольними рослинами (Фіг. 20).
Зо Альтернативно векторам, придатним для синтезу шпілечних структур, вектор, показаний на
Фіг. 10, з геном-мішенню РІТО 03410 вводять в рослини картоплі сорту Нептезв, і трансгенні лінії досліджують у ході випробування з відокремленим листям (Фіг. 21). І знову виявляють, що репродуктивна здатність Р. іпі'езїап5 на трансгенних рослинах обмежена в порівнянні з нетрансгенними контрольними рослинами.
Рослини картоплі сорту Киззеї Виграпк, трансформовані комбінованим вектором проти генів
РІТО 00146, РІТО 00708, РІТО 10447 та РІТО 08363, як показано на Фіг. 3, також досліджують у випробуванні з відокремленим листям. Виявляють, що репродуктивна здатність Р. іпТеєтапз5 на цих трансгенних рослинах обмежена в порівнянні з нетрансгенниими контрольними рослинами (Фіг. 22).
Так само випробування з відокремленим листям свідчить про обмеження репродуктивної здатності Р. іпїеєтап5 на трансгенних рослинах сорту Ки5ззеї Виграпк при трансформації вектором відповідно до Фіг. 29, Фіг. 30, Фіг. 31 або Фіг. 32, спрямованим проти генів РІТО 06748 (Фіг. 23), РІТО 09306 (Фіг. 24), РІТО 09193 (Фіг. 25) або РІТО 19177 (Фіг. 27).
Навіть на трансгенних рослинах сорту Оебзігее, трансформованих вектором, як показано на
Фіг. 31 або Фіг. 32, спрямованим проти гену РІТО 09193 (Фіг. 25) або РІТО 19177 (Фіг. 27), випробування з відокремленим листям свідчить про обмеження репродуктивної здатності Р. іптезїапз в порівнянні з нетрансгенними контрольними рослинами.
Транзієнтна тест-система для КМАЇ-векторів у листях картоплі
Транзієнтна тест-система відповідно до Вігсп еї аї., (2010) призначена для дослідження функціональності ЕМАЇї-векторів проти вибраних послідовностей генів-мішеней Р. іптевіапв.
Завдяки співбомбардуванню, КМАЇї-вектор, цілеспрямовано доставлений до гену-мішені, транзієнтно експресується в листках картоплі разом з гібридною генно-інженерною конструкцією, що складається з репортерного гена люциферази і фрагмента досліджуваної мішені. При процесуванні генно-інженерної конструкції а5КМА в КМАЇ-векторі має забезпечуватись утворення азЕМА і кінцеве утворення 5ікфкМА. Ці 5ікМА мають не лише спричинювати деградацію транскрипту фрагмента гена-мішені, але й призводити до виникнення гібридного транскрипту гена-репортера з тим, щоб за участі функціональної ЕМАЇі-конструкції могло спостерігатись зниження активності люциферази. Плазміда рАВМ-7О51Іисі містить подвійний промотор Саму 355, сайт множинного клонування, кодувальну послідовність для Іс бо гену Ріоїїпиз ругаїї5, який кодує люциферазу, відокремлену від модифікованого інтрону РІМ2 гену картоплі 51-І 51 (ЕсКез еї аї., 1986, Мапсаппеуї єї аї., 1990), додатковий сайт множинного клонування, а також термінатор Мо5 з гену нопалінсинтази Адгобасіегійт їшптегїасіеп5. ПЛР- ампліфікований фрагмент ділянки кодувальної послідовності, наприклад, гену РІТО 03410, клонують в цій плазміді рАВМ-705Іисі, яка також була клонована в рЕкМАЇі-векторі для одержання а5КМА-конструкції (Фіг. 14А).
Ця транзієнтна тест-система може бути використана не лише для перевірки загальної функціональності ЕМАЇ-конструкції але також для того, щоб дослідити різні ділянки послідовності гена відносно його здатності до глушіння і, нарешті, з її допомогою можна вибрати найкращі ділянки послідовності гена для оптимального глушіння. Крім того, бомбардування трансгенних рослин, стабільно трансформованих ЕМАЇ-конструкцією, може сприяти визначенню ефективності глушіння окремих трансгенних НІС5-ліній картоплі, які, наприклад, можуть істотно відрізнятися в залежності від сайту інтеграції для певної конструкції. У різних трансгенних НІС5Б- ліній картоплі, які одержують трансформацією різних генотипів картоплі, і які після зараження Р. іптебїтап5 виявляють знижену кількість спорангіїв, можна також оцінити зниження активності люциферази (Фіг. 15 А-18 А). Це свідчить про функціональність НІС5-Конструкцій, процесованих до 5БіКМА, щодо глушіння послідовності гену-мішені в трансгенних рослинах.
Коли кодувальні послідовності гену, які мають бути заглушені комбінованою генно- інженерною конструкцією, такою як рЕМАї НІС5Б-СоА (гени-мішені: РІТО 08393, РІТО 00146,
РІТО 10447, РІТО 00708), кожна з яких клонується у вектор РАВМ 7051исі позаду кодувальної послідовності для ІМС гену РІоїіпив5 ругаїї5 (РАВМ 7051исі РІТО 08393, рАВМ 705І1исі РІТО 00146, рАВМ 705Іисі РІТО 10447, рАВМ 7051исі РІТО 00708) і разом з вектором рКМАї НІС5 СоА, мають транзієнтно експресуватись в листі картоплі, ефективність глушіння комбінованої генно-інженерної конструкції може бути проаналізована на різних генах- мішенях. Це також можливо при бомбардуванні трансгенних рослин, стабільно трансформованих комбінованою ЕМАїі-конструкцією з окремих гібридних генно-інженерних конструкцій, що складаються з репортерного гена люциферази і досліджуваних кодувальних послідовностей різних генів-мішеней.
Визначення активності люциферази здійснюють із застосуванням Юпаї І исітегазе? Керопег
Аззауз (компанія Рготеда, Мапппеїт) (Зспптіай еї а!., 2004).
Зо Визначення стійкості трансгенних рослин картоплі за умов на відкритому повітрі
Для випробування стійкості трансгенних рослин картоплі за умов на відкритому повітрі трансгенні рослини спочатку вирощують на початку року (березень) з іп міго рослин в теплиці протягом З тижнів в багатогорлих горщиках. Далі, ці рослини висаджують в теплицю з сітчастим дахом в природний грунт, завдяки чому рослини опиняються в умовах впливу навколишнього середовища, наприклад, температури, сонячного світла, опадів і вологості, порівнянних з польовими умовами. Рослини висаджують на З ділянки по 6 рослин на кожній. Через 8 тижнів на один листок простоперистого листа картоплі кожної з 2 рослин на ділянці розпиленням наносять
Р. іптехіап5 (750 мкл; 107 зооспор на мл). Ці листки поміщають у пластикові пакети для забезпечення високого рівня вологості та сприяння розвитку інфекції. Через два дні ці поліетиленові пакети знімають. Поширення бурої фітофторозної гнилі (Рпуюрнйнога іптевіапв) в теплиці щотижня оцінюють оптичним способом і документують фотографічно. Критерії для оцінки інфекції спочатку призначають лише для інфікованих листків простоперистого листа картоплі (0: інфекція відсутня, 1: невелика інфекція (інфікованою є половина від заражених листків), 2: інфекція більше ніж на половині листків, 3: інфекція на всіх листках простоперистого листя картоплі), а потім для поширення інфекції на рослину і на всю ділянку (4: інфекція поширюється також на деякі інші листя рослини, 6: інфекція поширюється також на інші рослини, 8: інфекція поширюється також по суті на інші рослини, 10: 1095 рослин інфіковано/знищено, 20: 2095 рослин інфіковано/знищено, 100: 10095 рослин інфіковано/знищено).
У різних трансгенних НіІС5-ліній картоплі (РК-Н-4-7, РА-Н-4-11), одержаних за рахунок трансформацій генотипу картоплі Непте5, виявляють значне зниження ступіню зараження цих рослин під час інфікування Рпуїорпїнога іптезіап5 у порівнянні з трансформаційним генотипом
Нептезв, який як контроль культивують, висаджують й інфікують так само, як трансгенні рослини.
Знижений ступінь інфікування спочатку проявлявся в значно зниженій здатності патогену до зараження інокульованих листків (бальна оцінка через 21 день після інфікування: РЕ-Н-4-7: 3,3;
РІВ-Н-4А-11: 3,2; Нептез 7,6) і пізніше - в значно зниженій здатності до поширення патогену на ці рослини (бальна оцінка через 32 дні після інфікування: РЕ-Н-4-7: 26; РА-Н-4-11: 15; Нептев: 80) (Фіг. 19 А, В).
Ці випробування не лише можуть описати процесинг НІС5-конструкцій в трансгенних бо рослинах картоплі до 5ікМА, але також функціональність цих генно-інженерних конструкцій щодо глушіння послідовності гена-мішені в цих трансгенних рослинах, і підвищену стійкість цих рослин до Р. іпіеєтап5 можна кількісно охарактеризувати зниженим продукуванням спорангіїв патогену на цих рослинах-хазяях. Оскільки визначення функціональних НІС5 генів-мішеней є неможливим без ретельного випробування їх функціональності, ці випробування, докладно розкриті в цьому описі, є особливо корисними для визначення генів, які є ефективними в НІС5Б- конструкції, а також для одержання стійких НІСЗ-Ррослин.
Посилання
Амгома АО, Воеміпк РОС, Мошйпа М, СтепміПе-Ві/ідов (У, мап УМеві Р, Вітсй РА, М/пізвоп 50 (2008)
А поме! Рпуїорпїнога іптевіап5 паивіогпйт-в5ресіїс тетрбргапе ргоївїп і5 гедцітей їТог іпіесіоп ої роїай. Сеї| Місторіо!. 10(11):2271-84.
Вій Ва, 5пеп В, Замжуєг ВУ, Нийпег Е, ТисКег МО, Веїгпег АБ (2010) Емаїйайоп апа арріїсайоп ої а Іпсітетазе Тивіоп зувівт ог гаріа іп мімо апа|увзіб ої АМАЇ їагдеїз5 апа сопвігисів іп ріапів. Ріапі Віотесппої 9. Мау 1; 8(4):465-75. Ерир 2010 дап 19.
Віасктап ІМ, АпйКажша М, Матада 5, 5илакі Т, Нагіпат АВ (2011) Ідепійісайоп ої а тавіідопете ргоївіп їтот Рпуїорпійога пісоїапає. Ргоїїві. 162(1):100-14.
Вепієу, Р.М., ВНеп, Г.., апа Спа, М.-Н. (1990). Сотбіпаютіа! апа зупегдівіїс ргорепіевз ої СамМ 355 еппапсег зираотаїіп5. ЕМВО 9. (9), 1685-1696.
СпотслгупьеКкі Р, Зассні М. (1987) біпдіє-зїер теШйой ої ВМА ізоїайоп ру асіа дпапіаіпійт
ІШіосуапаїе-рпепо!-спіотоїопт ехігасіоп. Апаї! Віоспет. 162(1):156-9.
ЕсКев Р., Козанйі 5., Зепеї! у., УМіПптіїег Г. (1986) Івоїайоп апа сНагасієгігайноп ої а Іїдні- іпдисіріє, огдап-5ресіїїс депе їот роїаю апа апаїувів ої їз ехргеззіоп айег їаддіпд апа їгапвтег іо їобрассо апа роїайо 5Ппоої5. МоІесшаг апа Спепега! Сепеїййсв 205 (1) 14-22, БОЇ: 10.1007/В8г02428027.
НКіге А, Хи 5, Мопідотегу МК, Ковіаз ЗА, Огімег ЗЕ, Мейо СО. (1998) Роїепі апа зресіїс депеїїс іпіебєгтепсе бу доцбіве-зїтапдеа АВМА іп Саепогарайв еієдапе. Маїште Бер 19; 391(6669):806-11.
СтепміПе-Вгідд5 МУ, Амгома АОС, Вгисе СВ, УМШіатв А, М/піззоп 5С, Вігсп РЕ, мап У/езі Р (2005)
Еіемаїєд атіпо асіа рбіозупіпевів іп Рпуюрнїнога іптевіапо диппду арргеззогішт Тогтаїййоп апа роїа іптесііоп. Рипда! Сепеї Віої!. 42(3):244-56.
Коо) Іпоце 5В, ТаКемакі М, ТаКазика Т, Міо Т, Адаснпі М, Рції М, Міуатоїйо С, Агізама М, Ригиісні У,
МУаїапаре Т (1995) СнНагасієгігайоп апа депе сіопіпд ої 1,3-Ббеїа-ЮО-діисап зупіпазе Пот засспаготусез сегемівіає. Еиг ) Віоспет 231(3):845-54.
Усдеівоп Н5, Магауап ВО, Ай-Ропд АМ, Кіт К5 (2009а) Сепе ехргезвіоп спапдев ашгіпа азехиа! зрогшаїоп Бу Пе Іаїе Бідні адепі Рнпуїорптога іптевіап5 оссиг іп дівстеїє їетрогаї віадев.
Мої Сепеї Сепотісв. 281(2):193-206.
Уцаєї!зоп Н5, Тапі 5, Магауап НО (2009р) Меїабоїїс адаріайоп ої Рпуюрнпнога іпіевіапв дигіпа дгоУМА оп Ієсамез, шШврегз апа апйїсіа! тедіа. Мої Ріапі Раїйої. 10(6):843-55.
Катоцп 5, мап УУезі Р, МеезПпоймегв МО, де Стоої КЕ, Сбюомегз БЕ. (1998). Вевівіапсе ої пісойапа репіпатіапа о рпуїюрнінога іп'евіап5 і5 тедіаїєд ру Ше гесодпіноп ої Пе еїїсног ргоївіп
ІМЕ1. Ріапі Сеїї. зер; 10(9):1413-26.
Ї езаде б, баїси АМ, Мепага Р, 5Впаріго У, Нив55еїп 5, Вихзеу Н (2004) Апаїувзібв ої реїа-1,3- діисап аззетбріу іп Засспаготусев сегемівіає ивіпд а 5упіпеїйс іпівегасіоп пеймок апа айегеа вепзіймну о сазроїипадіп. Сепеїісв. Мау; 167(1):35-49.
ПА, Мапа У, Тао К, опа 5, Ниапа О, Оаї Т, 7Непа Х, ММапду м (2010) Р5БАК'Т, а 5ігев5-
Асіїмаїєд МАР Кіпазе ої Рпуюрпїтога зоіає, І Недшітей Ттог 2оо5роге Міаріїйу апа Іптесіп ої зоуреап. Мої Ріапі Містобе Іпієгасі. 23(8):11022-31.
Ма?гиг Р, Могіп М, Вадіп5Ку МУ, еІ-ЗПетбеїпі М, Сіетаз ЗА, Мієївеп УВ, Роог Е (1995) ОійНегепіаї ехргезвіоп апа їшпсійоп ої їмо потоіодоив зиБрипії5 ої уєаві 1,3-бета-О-діисап зупіпазе. Мої Сеї!
Віо!. 15(10):5671-81.
Ре! МА, Ровієї 5У, Рак ТН, Вівїтап Н, мап АгКеї Сї, дхопе5 УС, Мап Еск НУ, дасорзеп Е,
Міззег ВО, Мап дег Мо55еп ЕДС (2009) Марріпд апа сіопіпа ої Іаіе Біїдні гезізтапсе депе5 пот зЗоЇапит мепішгії ивіпд ап іпіег5ресіїіс сапаїдаге депе арргоасі. МРМІ 22:601-615.
Воетег" Т, Рагамісіпі С, Рауюп МА, Вивзеєу Н (1994) Спагасіеєгігайноп ої їйе уєаві (1--6)-реїа- діисап Біозупіпеїйс сотропепів, Ктебр апа 5Кптр, апа депеїіс іпівгасіопе Беїмеєп Ше РКС1 раїпулау апа ехігасеїІшШіаг таїйгіх аззетбіу. У Сеї! Віої. 127(2):567-79. зЗаїйо, К., Мата?гакі, М., КапекКо, Н., Мигаковні, І., РиКида, У., апа мап Мопіади, М. (1991).
Тів5це-5ресіїйс апа в5ігез55-еппапсіпуд ехргеввіоп ої Ше ТА рготоїег ог таппоріпе 5упіпавзе іп їапздепіс тедісіпаї! ріапів. Ріапіа 184, 40-46. зЗептіді К., Небрегпе В., Китавсй 9., Мепів5 В., ані 0.9. (2004) Зирргезвіоп ої рпепуїаІапіпе 60 аттопіа Іуазе ехргеззіоп іп зидаг реєї Бу Ше їшпда! раїйодеп Сегсозрога Беїфсоїа і5 тедіаїесй аї
Ше соге рготоїег ої пе депе. Ріапі Мо). Віо!., 55: 835-852. зані 0.9., Кіоов, 0.0О., апа Нені, В. (2004). А зидаг ревї спіогорпуї! а/ь Біпаїпа ргоївіп моїй ої а-рох ІїКе єІетепів сопіег вігопу апа Ієаї зресіїіс геропег депе ехргеззіоп іп ігап5здепіс зидаг реві.
ВМО Віоїесппоїіоду 4531: 12.
Мапсаппеуї (с., Зсптідї А. О'Соппог-бЗапсне; А., ММУПптішег Ї., Воспа-5оза М. (1990)
Сопвігисійп ої ап іпігоп-сопіаіпіпд таег депе: вріїсіпу ої Не іпігоп іп ігапздепіс ріапів апа їїв ибе іп топіогіпу еапу емепібв іп Адгобрасієгійт-теаіаїєй ріапі ШМапвіоптайоп. Мої Сеп Сепеї. 229(2):245-5.
Мап Меві Р, Катоцп 5, мап ї Кіоовзієгї МУ, Сомег5 Е (1999) Іпіегписієаг депе взііепсіпд іп
Рпуїоріннога іпіевзіап5. Мої! СеїІ. Маг; 3(3):339-48.
Мапа У, Оои 0, Мапа Х, Ії А, Зпепод У, На С, Спепд В, Спеп Х, 2пепд Х, УМапд У (2009) Те
Р5еСЯЕТ депе епсодіпд а С2Н2 ліпс Ппдег ргоївіп іє гедицігей ог агоУлЛи, демеортепі апа раїйодепевів іп Рпуїорпійога 50діає. Містор Раїпод. 47(2):78-86.
Мапа У, Її А, Мапд Х, 7Напа Х, 7пао МУ, Бош 0, 7Непа Х, Мапд м (2010) СаРА11, а риїаїййме земеп-напотетрьгапе С ргоївіп-соирієд гесеріог, сопітоії 2005роге демеіортепі апа мігшепсе ої
Рпуїоріннога зо)ає. ЕиКагуої Сеї! 9(2):242-50.
Міп С, Удигдепзоп У Е, Ниїбеп 5 Н (2011) ОемеІортепі ої а Нозві-Іпдисей ВМАЇ бЗузіет іп їйе
М/пеаї Зійре Ниві Рипдив5 Риссіпіа віййоптів 7. вр. Тийісі. МРМІ 24(5): 554-561. доі:10.1094/МРМІ- 10-10-0229. Є 2011 Тпе Атегісап Рпуїораїйо!одіса! Зосієту. 2папд М, У/апо 0, Хи К, Мепа У, Оцап «У, еї а. (2011) Ргодисійоп ої азвВМА 5едиепсез іп Ше
Нові Ріапі Іє Мої Бийісієпі о Іпйіаї Сепе Зйепсіпд іп ШТесСоопігіпд Оотугеїе Раїйподеп
Рпуюрнінога рагазіїса. РІ о5 ОМЕ 6(11): е28114.
ЕР 1716238 (Вауєг 5.А.5.) МЕТНОЮ БРОт МОБІРМІМа СЕМЕ ЕХРАВЕЗБІОМ ОБГ А
РНУТОРАТНОСЕМІС ГОМОИБ.
МО 2006/070227 (Оємдеп М.М.) МЕТНОЮ РОВ СОМ/М-ПЕСИОГАТІМИ СЕМЕ ЕХРАЕББІОМ ІМ
ЕОМ.
МО 2009/112270 (І еірпі2-Іп5ійШш г РПапгепдепеїікК апа КипигрПапгепіогзспипу) МЕТНОЮ
ЕОВ САЕАТІМИ ВАВОАО-5РЕСТАОМ ВЕБІЗТАМСЕ ТО ГРОМИ ІМ ТААМЗОЕМІС РІ АМТ5. 5 2010/0257634 (Мепдаплга Іпс.) ВІСА55АМ РОВ СЕМЕ БІГЕМСІМИС СОМЗТВОСТ5.
Ко) МО 2006/047495 (Мепдапга Іпс.) МЕТНОЮО5З АМО МАТЕВІАЇ5 РОВА СОМЕЕВВІМС
ВЕБІЗТАМСЕ ТО РЕБ5Т5 АМО РАТНОСЕМ5 ОБ РІ АМТ5.
ЛІСТИНГ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 КВС СААТ АГ -1205 ТРАНСГЕННА РОСЛИНА ВИДУ 5О1АМИОМ ТИОВЕВОБОМ ЗІ СТІЙКІСТЮ ДО
РНУТОРНТНОВА
«1305 КМ/5 0199 СЕ -1605» 43 «170» РаїепіНп мегвіоп 3.5 -2105 1 «2115 1042 «2125 ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе -4005 1 сдісаадаю сідсддадаї сіддсідсс дндасасої содідсснНес сдсдаіссдс (10) дасіадссіа дсдссдіссі дідсідсісс саадіасіїї іїісасдідссі ісадсундс 120 даадсададі садсддсаю ідаїсдссодс дсдднаіс аассадссід андісіддс 180 сдадаїсдсс аассісіїсуд ссдсісдадао їаасіаїсда іасодсааада сдсіддссас 0240 бо аддадаїссі ааасаїдаоїо щдаїдсаддодс їасаазацо асадісіддаі їдідодісдс 300 асдаададаісд аддадсісіс ссдіаїдасао дійдісдіса асддсасідс дсададіяан 360 дісаасаїас діагадіааї І(асададаса ддадсадіаяд аідайдаса сісаацдідї 420 і сшодсадаї даадаадсад сісдаддаю ісоіоащі сідідодіс аайаіссіда 480 дсадщдодсаа даасосідаа аадаасіасяа іІсдадсосда ссідаюсід дссаадаіді 540 ссасдодсс99 їасдісддас дсдаїсіда іасссіасса ссассодаа ісдідаасаї 600 ддаассідасо їааасаща сіддііої9 дсіддсіас ададдсіюдда ісісдсусід 6бо аддіддідда дсідссаас сіднсдаса ссааддщда! дасаїдсда ссдсассадд 720 й нпаюдаіаса асіддсідас ассссіддіс дсайдаддс айшодас сідсіааадс 780 содсіддаїаї сасададаїс сассдсадід дддісанодс даїдодсісдсадсассадід 840
Щщассдасда ссідддсдаї сісісдасаї Ндаддоасос сасосдаасо сісіддасу 900 аддссдаїда сдаададнс даїдісісіс дссіссодсс Юдаїаайа! дчпддіадад 960 надаїсаї дссаїсассі (шсНсда їаддасної дссідаїдас аандсадса 1020 7 аддаасодідс іІадсдуаадаї ід 1042 -2105 2 «2115 3072 «212» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 2 адодідсісс дадсдоансо дсідаїсдіс саддсаїсіс Ідсіссідса адідсіссад (610) 7 тїдІщдасассі ссдіаасідо дсісаадіа ааідаааасі Ндадаасасідадснцасс 120
Ісдаасодаїа аасідддаас адіддсіссу дссдасаїсс сдіснсаса адасдадааї 180 сісаадааас аддаададсяо ддснсй дасіддшо дсаадосда сдасасудссі 240 дссссддсід сідасдасаа сіссддіааа їіаїдсдасіа сдасассдаї сссіддсаса 300 дсідсодсдас сдісіасдад їадістюаїо ісааавіац діадіаїсісодідасш 360 7 асіааадаса сдасоассдас сісддаадсс даїдадсоса саасдадсдс асдіадсоасі 420 дссасссодід ссассісдда сіссіснса додіадіассі сіддасадсдс ддсадсадаа 480 дісаадссда ададааадаа дассаадаад ссідідоно ссдссосдіє дааадсудда 540 дададідсаа дідасдасда Ідссадсдад адсдадсосії сдддсадіда ддсааадссс 600 аадаададда саассаадаа дасдаддаад ссодаісаїад сідсідсдіс дасдісідаа 660 7 іссдаддад ссісдасдіс Юааїссдад даїдсійсодо дсадідаддас ааадссіаад 720 аадаадасаа ссаадаадас іадааддссо діадсадсід сідсаїсдас дісдааїса 780 60 дададаїдсії сддасадсіс ддасдадісд ддаадсдасо аїсідісода ісідсісддс 0840 аадсісддсду днссддаад сдаадаїдас аїдісддссс Псісддіад сосдоддадаї 900 іїссдддасід асдасодссії аїсадсісю сіддодіс9д9 дадісоддідо сісддаїаді 960 і адснцади ісдаадасії їіаїдааодааї їасддіадса іднсодне дадаадіаді 1020 дсідісдасс щісддада сссдадсасд ссссадааса асасуданда сдасдаадаї 1080 аїсаїссіся дсдаасщдіа сддіддсаад дадсасоддсоу асдссійсіс ддасаїсаду 1140 аасаїсааді Нддїсадаї даїссідаас апйасаднс дсддаісаада дсосоїддаї 1200 їссандаїа Насадюаї дасісаадаа дсідйподіа ассндідса сддіддідаа 1260 й дУщаїассо ааддаїйсаї даассддад адддщдаса сіайдаїас сдісдаадіа 1320 сасідддаса адаасааддао саадасощс аїсйсіасс Ісаадацдс дасісіддс 1380 ддіаадасда Насдасо99д9 аасдаадасд дссаасадсо ссдісаїсаа дссодссосаад 1440 доустіассадс Посіддай ссащаїсої дссадіадії сідаїаісії потайоді 1500 ддааїсіїса ссаадсаада сдсдасодаї сісдсадіса сддасодідаї ддосаїсісс 1560 7 адіаадддсі сіссідаїаї сіасаасіас дасассасса Нсдіаасід ддідддассі 1620 сіададасад сдадідасаа сдссіднас садаададад ісдасдісад садсааддда 1680
Зо ащдідіссдї сддашсаа сааддасдас дасаддідса ісасссаа!д іссісісаас 1740
Тассссайна асіодсіїдаї ддадіосаїд ссісааааса дідасідсас ссадідан 1800 дісдсіаадд Шссдссодї соносідіє асшаааю ссосіасдаї додіаїснс 1860 7 ддасодсідд ддсідссіа садаассдсі аасшосіс Ісассідсос саїсаасай 1920 дюаасодсід іІсаадісдсі дашасіас сідсунаса адсадассії даїсссдасі 1980 асддасасдо адаадідаї ддасааддсд Нсосадсідс адайдісайісндасня 2040 ссісідосіа ісідйсцо ссідддсаїс аадайссіс сіаадсісса дисісдасі 2100 ассайнсіда сідісдціс дассанцоїс адацосіод ісаїддісда дадодсссіс 2160 7 псодсдісої сдаасаасої саїдсісаю сісдюдасаії сдддсдсшіаасаснсі 2220 дсісідаасд дадасассаї юассіїдаї асуйнссіса асассаадаа сддсасдщі 2280 дунасдада юдадаасісі сасіаассдс дісаюдаса адцісіасда ааіссдіаас 2340 аасасдссда адсідаїдс сдаюдащіа содідідадо юдассаадіс діссаїсанй 2400 асддащдаса іссссацої дассаассас ідсадада!о9 аїасіддас саасаадасд 2460 7 дососаісаї сдіасаадас дсдсаассід сідсдіаада сссісадідї аапундас 2520 садсісуна аддасоддіас дассдаїаю одіаадсаїд дассаадаа ддадааддсі 2580 бо сісдааїасі сдаагаюдао ісшсоіо сідіссащі Ісдаїссдас дддіацодсс 2640 юдаадаосії ссдаднсді дсадсссай (дддассса сідадіассі ддудідадаїс 2700 чаюдаюдсаоа соасідіасда сдсісіддді сіааасасдод Іісдассаддс айссіддда 2760 і адсіасдагю шіодаадаа даадддщаї досіссдїса сдашШасії сдададчідй 2820 дасаадйнсс сідідісіі даїдаїсасо іссддідаї асаадсісаа ддаддісаад 2880 дюссідсіа асддсаасодї сасдіддаса істїтасдащо аддадснода дасаадасі 2940 сшассно ассосіддсо іссіддісіс Шоадссідс сіддіасдд9 содідансЯ 3000 сіасюайці ддаїсссодсо аїсдієдаяд доїддссадс Наїйсіїса їдсісдсцЯ 3060 й ааюцнадсі аа 3072 «2105» З «2115» 2405 20. «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «220» «221» тівс ївєайшге 25 «22» (949).1048) «223» п являє собою а, с, у абої «4005 З ащісаїссу іадасідад іаїссдсос аасддсаїсс сддссдадсі дссддсдсас (610) 7 ссдддсаасс ассссдассс дасдсідссс ааддсіссдс ассдсаасаї сдасдаісід 120 іїссааддаса аїсісдідсі ддссдадсад аасдсонНас ддіасіссс сдададдане 180
З5 сасдссасіс Іддсісссда діісдсдсад даасісааду асдаддосса саїсіасаюд 240 сассдсенсс дісссдідса діасдадаю ааддсдіасс ссайдассаайасссддсс 300 ааадсааас аддсадсіад їагсащсії аїдаїсаїда асаассісда ссдісдсуай /З36о0 7 дсасадісс ссаассассі ддаїсаснас ддідосаасо діадіцісн ссадаасідд 420 дсасадіасі (ддіддссаї дсосіассід іссдаасіса сддаасадса дасосісдіє 480 45 ашіасісід дісасссіаї ддашаонс ссіадісдіє сіюсадсіссасдіадаіа 540 дюассаасо дісіааюаї ссссаасіас Іссасасосяо сісадіасда саадоссіас 600 дсіааодіа асасссадіа содісада асідсідоса осіасідсіа сайдаїссу 660 7 садддїану іасасудіас дассанасі діасідаааа ссіасюдаса адчадісіаїд9 720 сддансадаї дададсааїс їассіїссії сіадаааааї дсіааасаай іссадіддаї 780 55 онаїаїадяо іспдасааї сааїайусс сссіасдаїй дісааїаї їІаасааїсад 840 шашсії ссааїсссю аїшасаді даддашсо ададідддаа сдіддаааса 900 аааїсаної сааашодад сдадссніс іІсдссдадс садасіддпп пппппппппп 960 пппппппппп пппппллипи ппплплпплипп пппппппппп ппипиплплппп ппппплппппи 01020 ппппплпппп ппплппппппп ппппппппс дісаїсісся дідісаїсіс сдісасідса 1080 дадаїсдасу ааїсюсаді даадаадсодї сасдаасада одсіддонда сдадаісдід 1140 адсдассідд асдссідюі сойсдіаїс сддадодсаа аадссаадодд сдадаїдаю 1200 аасідосодї ассасддсаа саісдісасії стддааас дісісдссда сдаддсідаа 1260 "7 дсіасдадсо адсідсісодї ддадсісддс Ісддассада сісссіаса саасссайс 1320 аасддсддсі асіасссдді ссадноісод нНсдаддасді сісадсосої саддсідаа 1380 дасссддадс дсіссадда асіддіасад дацдісісідс дісдїсасодс ідісдсіаїс 1440 аассдісіда садссаадда саїдсданс щдадасіасо діаасісуН ссіайддад 1500 дсасаасоїд ссддсдсодда сошіосої сссдоїювна адсссдадда досіосідіс 1560 7 ісдасіасід ссшаадіа сссіаднас діїсаддаса ісаддосда сацнсісд 1620 спадушсо діссонссо сідддісці асаїсддою ассасдсдда ссідсадаад 1680 асадасдсса пусідсссо дщдаїдсодс дадсюсіда ссдаассдда адідссодас 1740 сдддісоасо99 сісадсідсу дасаасну сдсіддано аддсідсада ддадаасааа 1800 сіддісдаща дагсоддадодс дсдіаїссід їасосідасс дідідодісд сддсасдаїс 1860 7 дссащасоаї ісаасдссдс дддсіадс ддсдадсісі сддсасссді сдідсісадс 1920 сдсдассасс асдасдісад сддсассдас адіссунсс дідадасдіс даадідасд 1980 дасдасісдд сцпісідідс сдаїадасо дідсадаасд сосідддсда сдссусісдс 2040 ддадсіасодї ддаїсосасі дсасаасддс ддсдаідісод дсіддддсда ддісаїдаас 2100 ддщасіїсо даащдаїасі ддасдодсісу даїдасосодс дсдадаадодс додсодсад 2160 7 сісддесю99 асдісаасаа сддсощаса саїсодїідсої дадсдсодсаа сдссаасдсуд 2220 содснесдсіа дадсодсда дзадаадосо дчасссщшод їасошонідонасдад 2280 спдадасії їіддааосаїйї адаїшааї діоіощіаї сшдідата Пдсадсща 2340 сддаюасодсі ддсіаасдад дссдасдасд сдадсдюса їдасосідід адсаадсісї 2400 їстад 2405
«-210» 4 «2115 1735 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
«400» 4 адсісісдс адснааасу садайсасс сідддасдас дндісадас сдаадаадаа (610) дассасісда ддаїсассаї дадссшес аасадсааса діассадсіс спдсссссї 120 60 діддасдадс ассасоддсід Юадіассю даїасоддсдс дасодаїсії іаасдас 180 дсдісдадсо аіїсіддссаа даадаадасо іаїссдісодс Ісшщососі сіасассаїд 240 ддсіассідс сдаасасодс ддісаїсої досіасдсіс дсадсодссаа дааїдадсс 300 даснссодса содсааайос дсссіддаїс аадссіаада сасссдаддс сдадасісдс /36о0 ааддадодссі Іссісаасаа дідсаїсіас сдсадсдоса ааїасдасіс аасідаадаї /-420
"7 дюдасаадо іаадсаадда дадададоса пддаадаад сссаїддаїс дссідіддсс 480 аассдссісі Істасійсдс саїсссдссс асадісісо дсссаїсдод сасдадсаїс 540 аадааддсдд сасщдассас дсоїданоЯ аассдісіса ісдісдадаа дссашоддс 600 сасдаїсіса асісдіїсда сааднцісї саддасаща осососідіа садсдаадас 660 дадаїсіасс діаїсодаїса сіасндддс ааддаааїяд дсадаасії дсісаюна 720
7 содснеддса адсааїсії сдадсссай Юдаассодса асіасадідіс садіодасс 780 аїсасшса аддаадасаї сддсасісад дассоасодіюд дсіаснсда сісунсоді 840 аїсаїссоїд асдісаюса даассассід сіісадаідс щісаснодї ддссаддад 900 ссассааїсс аадсідсідд Юасаасіас іссаасіава Ііссдідаюа дааддісаад 960 дюсйнаасі дсандадсс іаїсаадас дадаасассяо іссідддсса діаїдааддс 1020
7 адсааддаєдс Ісаасдадсс дддсіассіс даддасссда сдаїдсссаа дддаїсадід 1080 асссссассі Ісдссасадс юйащшіаї дісаасаасс сдсонодіс айссЯ 1140 нсаїсаюа адодсідаїаа ддссіїдаас даасдсаадо дідадаїссо щідсаайс 1200 сдсссдссіс сіддадсоса дсасіщдне ссадчдідіса адаїсссадіасаададйд 1260 оюсідсдіс їасадссдда дааадссодіс їасндаада даасдісаа дадіссідді 1320
7 сідсадассс аддсодаїсіс аадсдадсід дасідісдї асдссдадсао Пасдаддаї 1380 дсададдідс сддасодссіа сасісдсна аїссіддасу дсіосаїдо їаадсадасс 1440 дсансоащс дідадасода дсіссдідсі дса(ддаада іспсасдсс айдсідаас 1500 дадайдада сдсадаадої даадссосід садіатасді Ісдодсісоса ддссссаад 1560 дададсдасд адстущдаа сададсіддс Нсосадіасс ассаддосда аїассадідд 1620
7 садссдсдід їдсдсасіас садідсасіа їадонадісі сшодійда дсасааадаї 1680 дсссоддааді сіддсаїааа їіаюадай дадссадсіа діснсааїа аддда 1735
«2105 5 «2115 1245 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
60 «4005 5 дададсіаа аадідсіаса ддаацдісосі аїсаїддсої саадаацдісі сдіссдссдс (610) ісддсосодіс ісдссасідс саїсдсіасії аадсдсадсі ісуйсосос содсіссдсд 120
Ісддідаасс іссадідсії Іісадасадса сссодссасіс дссадасссоу ісцйсададі 180 асдсадасаа дсіссадсда дадссдссс аааасудаді ссссадіада сссададсад 240 сісансещао ссааддсісї ддассадю ашсссасо ддїасона дошаадчід зо "7 сіаїаааадс даадаїаїсс їадднаїаа сдсісісдаа дсаадаїо дссандада 360 сістадсадс ддсдссасд даїсндасі асссісодаї ддсісасддс айссадс 420 дсоддаадсіаї щшащшодід данаїша іддасісдід ісісдссаад сіасдсдада 480 сдсщдаці саасасддаа аадндсадд ссаїдасоді дасідаасаої сісаадшща 540 дсдісідсас дсдісідсад адфсіюддадс сідіднодс їасаюдсса саддсіаїяа (610)0) 7 ссапддсос ісіассдсад аасдсассід діасідсааа дадасіддсс садсісісдд 660 адааа!сід діасіїсдсі ддюдасааді ссасддаїсі аїсадіас ассаадсдсу 720 сіансісас дддсаїсіас дсіадсасд9у адсющшаї дсюдааюас аадісдссда 780 аснссадда сасдюдааї пспддасс дссдщдідда сдааасодаїс саасісддад 840 аасідссіса даасдіасодї даадсідн дадісісна їаадосцад сідпдасяї 900 7 дасіаасіас Пощідес аїсідідісєї дадсадсюа асодаїдідасдоддадасс 960 адчаноддодс їдсадісддї дінсодсі аідасдісдс посддаїсс ісюдссаді 1020 садаїсаїсі сдаасісдсс Шдадісаа діссдаасс сдашсадс щідддсаді 1080 аюдіссіс ссісдоної агсддесіції дссісіддаа дссашад саассіасі 1140
Істдсіддас аїдасоддіаї ддсдйсаад Ісдааддас юдасдааай іаассаадад 1200 7 сндадаадс ісддсддссі Іасосдаді даасдасдда асіаа 1245 «210» 6 «2115 1461 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 6 ссасдіссад сісаадссаа Ндссаюсі діссдсіасі сдссдссНа сдсдаїсісі (610) 7 дсдісдсссі їсдсасідо даїдссодссі сдадіссіса Нсосісссс ісасісадсі 120 аїссдаддад дааассащі Ісааддасас адісдссс9д9у Нсдсддсю асддчцвіадс 180 іссдааїдціє сдсдссаїдд асасадсдда ддададдас саїдсіаїса сасдаддасі 240 ансодадааї ддасідсіді сддіададаї сссадсадас їасддадата дсдаддссіс 300 дисаюдаас сісідсда сіайдадда асідіссааа діддаїсссо ісаїдддасі 360 60 дсісдддаї сіасадааса садндідаа саасаісіс сіддідадід аададіасда 420 пдаїайсі ааанйсщіа дсідассай дідйодсадоу дсасддсас ддасдадсад 480 ааадааааді ассідссдад асісадсоса дасаїддідс дідсаїсааташодаааї 540 андідаїаа їасіаатайц діасодідії діадаїсдас аашсіднідісададдс 600 тддаїсадодї адідасосодї ісдсдсідаа дасасддоасу даддссісдс сддасдддад 6бо "7 сіасіасісс аїсасіддіс адаадайіод даїсіссаас дссдадіасі сіддсоїдіа 720 сподідс дссаацдіда асссдіссаа ддосіасаад даїаісасої дсшаїсоаї 780 ддассдадас аддааддас юддаздаїсод іІаадсссдаа дадаадсісуд дсаїссдсудс 840 аїсдісдаса щісссдіса сасідасдда щідаададіс ссдааддада асайсіддд 900 ададсіддас аадддаїаса адаїсдсааї садсасоно ааїдааддас дсайдосаї 960 7 тдсдісасад адсідддас юдсісадодо адістасдас садасойос сотаснуй 1020 сдадсоассаа садіїсддсі сісссаїсдду ададійссад дсдаїсадс ассаайадс 1080 ддаддсадсао сісдаїаісЯ адасддсдсу Шойноао їаїаасдсад содсдісісаа 1140 ддашсіддс саассдунсо Ісааасаддс дсіадаса аадсисаїд ссісдсоді 1200 ддсададаад асдосаїсса адідсаїсда дсідсідда доасайдосі Нассааціа 1260 7 спдсноса дадааайсі аїсаїдасодс ааадаїсодда дсіаісіасу ааддаассад 1320
Іаасаїсад сідасдасда Пдсдаадсі юідісодад дааіасаада ддіаайдаа 1380 дсуюаїс сідіасісад аснодаїссі діадсааас сааасаадіа асашссод 1440 адаасдадсод Мадаассада 1461 -2105 7 «2115 1580 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 7 адсідсдіс дісндсссі ссдіассдід аадсснеїд їдсдсаасії сдссіссдсс бо ісддадсідї асаадаассс дсдсадсісс ааднсадса дассаадаї сдідассасі 120 аїсддссссяо ідісддадса дсіддасаїд сіасадаада Іісасддасдаадоашусдаї 180 7 аїса(дсодса Нааснсіс асасдссдад їасдасдада ссНосідсоу сдісасіаас 240 сИпсодссі дісдсддсої дсасдссдад одісаддсса аайсаассіасаїдссоаю -зо00 сіасасдаса ссаааддасс сдадаїссої асдддіаада (дсдідасодуд саадааааїс 360 асонадада аіддсаацдіс даїдідсіс асдассдасс сддсшсда дспдаддаі 420 ассдссдаса аднсіасді їасдіаїсад саднадссоу ааассонаа ддіддосдаї 480 60 асадднас їаїсдасодо ссНаїссоді сісассідіа сдісадіЯд9 їааддаюдад 540 ацйасдідсс асаїссасаа їІассдаддаа аїсоддіаасс діаадоадіді ааассісссд 600 дошоаїсо ісдаоносс іосісіаїсі даїааддаса аасдсдассі дданадоді 660 дісдадсасо аїаїсдасії іаіїсасододсс ісдйсаїсс діааддссад сдасдідаас 720
Ісдаїссаїї сайсоїддо ададідсодії аадааасасі дддаїаассаассідднас 780 "7 андссссіа адаїсаїсіс іаадаїсдад аассісдаад діаїссадаа снідаддад 840 аїссісдаду ссісддада саїсаюююі дсссддосу аштддаоюї сдаадідссд 900 дсасадаадо Іссідасаїа ссадаадаю адаїддасс дсідіаасдс сдісддаааду 960 ссдонаця іддсдасоса даїдсісдаа іІссадсада асаасссосо ссссасодсаЯаї 1020 дссдаадідї сддащшісодд сааїдссодід сюддасдаса соддасідсді саїдсісаді 1080 7 додсдавдісдд сісадддсаа діасссдаїс дадісюі9д9 ссасдаюаа сасодідаїс 1140 ааддаддссу ассадсіссі асісаадссі аасіассадду ссаадійсса днпсдадссу 1200 сссасдісдоу асаїсдадіс адссдідісо ісддсадіса адасддссаа сдадаїдсас 1260 дсдсадсісс Щщайодіодсі сасссдіасс дайасасод сссдааадді содссаадіас 1320 ааассдасід дссддїсаї дідсісасс ассдасснца адаісдоассо ісадсіссад 1380 7 аїссассодса дісідтассс ддаддосса дасіассід ассдідсссс дасіассдсу 1440 дадассаїсд сісасдссаа даададаодда шюайідісід ссддсдассо ідісаїсад 1500
З5 аїсадсддсд асаадсіцдісє ддасдаїсіс ддссдддааа іссісаїс9ду сдісдсідас 1560 діссадіаад асддадасаа 1580 «210» 8 «-2115 900 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «-4005» 8 адіодісда сдаюаїсаї двсдунНсоссі асдсаддсса адіссдідісє дсдсадсдса бо спащаос9а саддіащас їдсдйсаосі дссісісса дідШессіс іасісдсідс 120 даададдада адіссаадді ддсундадс сссааддаді іссунсні сасідідсоаї 180 7 ааадндада ссоаїдаасіа саасасдаад содсоїдасді ісдсісцос сасасссдад 240 сасдадаїда дісісасдас дссіааідс спадчосіс дідссааддіадасдасаад /-З00 асадідддс дссссіасас дссідісаас дідаасдасу адааддуаш спддадсіс 360 діадісаадд уднасссаса доадааасдсіс адсаадсаса іІсдідсадсісааадаадда 420 дасісісну асадааа9до ісссшесс аадісаайн асіассссаа саддіасаад 480 60 адсаїсддса щдаїсосіда сддсіссдді аїсассссса дсідсадсі саїсааддсс 540 ашодссдса асссддадда ссдсассдад аїсасодсідс шасідсадідісісддаа 600 даадаїаїса іІссідсдада адаадюдад дссаїдащці ассідіассс дсадаїсісс 660 дюаїссасод ідсісадсаа сссдіссдсс дадіддаадо чіснцасадо сіпсдідієс (720 ааддадайда ісдааааціа саїдссддад ссдісадасод асаассісді дідідїдїдс 780 "7 ддіссіссдс сааюа!йщіа ссасдісісуд ддідасааду сдааддасад дісісадддс 0840 даасдсаад дісідсідаа адасадаас іасассісса сісаадідн саадішаа 900 -210» 9 «2115 1245 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «400» 9 дісдадсаса адассаасас іссюдсасса Юасіасссі саадаїсдісє дДШНСсСсДСЯ (610) ссдсесддсеса аапйдсдіас Ісуносідс сісісадіас діссдісісс Нессісна 120 ідіснсісс агасссіаас дісісассаї дндсадісії дсаїсддсса сдіснсоЯдс 180 сссаассадс дсдаюдадсі дсдссідсід дасаїсдаас ссдсссадда адсосндад 240 досдісаада ддасдсісса ддасідідсс нсаассіад ддасосіаї саїссссаса 300 7 дссдаїста адасідсн сааддасосод дасдісдсаа іссісдіддо сдудснссосЯ 360 сдсаадсаад дсаїдсадсд сааддаїсід анйдадаада адіадсса іШаадоасі 420
З5 садддадсід сіаїсдасса діісоассадії сдсдасона аддіоспді діддссааї 480 ссадссааїа сдаасідссі сайдссаїд дадаасдсас ссадсаїссс дсддсудсааї 540 несісддсас Ідасдсдісї ддассаюаа сошососі суНссіаді ддадааддіє 600 7 аасдадассс ааадсссдаа аднасдісу ааддасодіса асаадаїсої даїсіддоадс 660 ааїісасісда дсасдсааді дсссдасодіс асдаасосад аадідаадоад ссадссяасії (720 даїаадаїса ісісддасаа дданподасі дадаадаадс ісдісаадда сдідсаддад 780 содсддідсад ссаїсайнаа дасісдсаад сісісдадсу ссаїісдасідссоассоЯсі 840 асддсдссс ассідсдсда сідднсааї ддсіссаада асддсдадсі сдідісіаїд 900 й дссащшаосі сддасддсаа саадіасдаді дідсссдада досісаша сісуднссса 960 дісаадідсуд сдддсаасда сасатасдад дддщаасо діснсоссаї сісдссдсЯаї 1020 аїсдасдсаа Юаїдааадс сасідсдсад дадсідасад аддадааддс сдасосідіюд 1080 даздаїссідї сдсдссадід адсадіайс адсіааіадс ддасдащда саасдісдіє 1140
Тасассссаї Іісдацйці Ісісссаца дадсідсії сааїсдшШа Шодассаїс 1200 60
Тааассааїйї аашснаої їапасдай іІспайдаа ааааа 1245 «2105 10 «2115 1280 00«2125 ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 10 ащісдісії сайндіса дсіаїссаад сдсуідсщдс адіаїснся асаюадсаї (610) "7 ссасаїсдіс ташсссіс саїсддісда адасосааас іІсссаддсаї ааассісдас о 120 ддаадаїсіс адсддщаїйд дсосдідай адссдсаадоу юйНссдаїдсасассасас 180 асіасісдсуд аааасдасса їасійсідіє ддссаддаїа ассісідддудадсідсасаа /--240 сддссдіси Шадснаї Шадсдадс саасадоно ідссісайо дссасоїдн 300 сасдсасдїіа сдісасодіді досісайці іІааїацааа даїсссойо аадасдаааа 360 7 дснсщшаос ддсаїсаїд сдсіиссада сонойцосі сдіссндіс дсасіадіса 420
Ісдссседії Ісадасссід ісіссассса дсдадіссаа соїдссунс асісйсуді 480 асдіссс9д99 сісшааа сааддіассс сдіссдідда дайссассіїсааайсаа 540 досаїсіс9д9 дсіасідас аасдісасаї ддасддаці адасдссіасайодсідсас 600 дадссосіса аддсодчас аїсаадноі Іссіснон асдісадда даадоассісс 660 7 асаасдісдс сдаадссасі їІасддсассд аадссіддда садайсіас адсааасіад 720 сдааайавас Ідасдссаад Пдасдааас Ндддаюдса асаддсідісє ааадсдісдд 780
З5 аааддаїсда сдаддадсії аадададдас ІФадссіюдзда ддаадчісаїд ошссссдї 840 юдададсодіас асіасагасу дсаащдаїсо сдідссадаа іІісассасдад аїсссдаадс 900 ддісдадда ашддссссдс дадассаїса дсодісідсас дідсдаснца сдсддсасса 960 7 Ісіссдссаа дассдаядсід іасссаадіа Ісдасісаяд ідаїасіда адідадсад 1020 асссащої9 дасодссюаї саїсащдада ссдадсідса саїсаасдас сдсудсісдса 1080
Існссідаа ссосадісіс їасддісаса адісадідсо пода дідасдсаса 1140 дюдасіаас сассдссдсо адсоціса Поддссаїсо іаадіасаді ойосдасдд 1200 сддаадідаї ассунссід сндаадаса ссасоддідса сасдаїссід ісдаїснсї 1260 7 сіддіааада адасаїщдіад 1280 «2105 11 «2115 1016 «212» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 11 ашдісдіссі аїсдідсющі ссааднодіа аадідасіа аддасіссо сдссосіасс (610) 60 адааїсдіда дідіссссда асіасссасс дсідддсссу асадсаїсаї юшНаадаас 120 суснсно9у даанаасіс дассдасдіс ааіїснасда аїдздсайфщіа ісаїдасаад 180 сідссаше їІсасадасої даадаса даісісдіса сідаддісду дадіаасдіє 240 асдасідщда аадідддсда сдсідісаю їассадасодс ддодадссіаїдсодасіас 300 діасаадідс ссдідісддс сдссаїсаад аїсссададс щісдаадаа содсістассд 360 "7 аноасадвідо дсоддсаїсіс дсадіссаїс сснодааї дісісдаїда дадаадієд 420 аададассао Нсндідас дсідсідсі дддддаассо дасааціді сдіасадсіс 480 дссааасцу сіддсаасса юпНаїсодс асіассадсі сідасдадаа адддадосі 540
Пдасдааас ідддсідсда ссдідіааіа аапасааса аддадааюді сддсдашід (610)0) сіааадаадд адіаїссдаа ддадіадас аїсдішсо адіссайо9д адасдасад 6бо 7 пссодсід сідісдаїаа саносадіс сдіддісдіа іІсаїсаада ддсНсаїс 720
Ісдсдадіаї (ддадассаа адасаадасяд асіссссаад дссдссісса сідсіаїсді 780 дддаадсдаа саадаадай сідадааді сідсносаї ссдаддосіс Псадіаїс 840 аснщдадда асасайсда дадсасасодд адсданодсі даадсісайадсдадддса 900 соандаадсс (ддсондас сссасіасодї асаадааай сдадіссай ссдаадсаа 960 7 Ісдассдсаї айсдсссаї даааащіад дсааасісаї сдіададсіс дадіай 1016 «2105 12 «2115 267 «212» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «-4005 12 адддсаадс асасддадсуд адссааддад адіссайса адсадсацдіс даїдаїссіс (610) 7 дюссіащо асасассадд сддсаддіс дідаадссса ідсаїдіснідоасіасдас 120 дасдсассодс асоддасасаї ддагадсід нсааддасо ідсдідідсс днисадсаас 180 аюйцасіса діюдаадаісд сддсшодаЗд аїсосісадо аїсдісндод ассіддссЯї 240 аїссассасі діа(дсдадс саїсіда 267 «2105 13 «2115 1147 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 13 адсдсаааа їанйдааїа! щдшандовна ааассюдиіс гпдосаїссі іадассааї (610) тТасаонаїї дадідсщШа адсдддасад асдіссасіа сдісасасіс адааїсісса 120 сасаадсаас адассдасас ааїдадсадао (дсдадіддс аісссадсаа спсдідсаа 180 60 ашадссії днаїацаа нодіаїаасод ддсашід садассдасо аїсісададда 240
Наїсодссда дсддаадасс аасаасасід сддсшсаї сасснсдід сссідсдасі 300
Іїсаадасіаа ддсідасаса аіддасайнс Нсідадасі дсадсдсдудс ддсоасдааса 360 їсаїададаої ддасайнссо їасісддасс сасаддссда дасссдасс аїссадсяасяа 420 сасассадаї дддсддчцдас садддсаїса сдсідсаюа сдіссідосс асадідадсу 480 "7 аддсдсдаас їааддоссії асіасдссід даїдсцаї ддосіасіасаасаасаш 540 тдсадіасд9 сдаацдісааа аїсідссссу асдсссадаа аддіасоссі діааїсдасс 600 асаддадада Шоідододсі сааааасіда сааіїааасої ашдіадсі ддддюдасаяа 660 дайсайнаї щодассід ссдссідадд аддсааадас дсісадідас дасдсадсіа 720 адсасддасі дсдіасаїс ссунддіді ссссаасдас дасддаддаад соїаїдаадс 780 7 Іісаїсдасіс ддіддсасаї аддаішо щі апосаїдад ісісассдді дісасддасяа 840 сісдіаасда дсідссіссд аассісдасо сунНсадаос саададіаад Нусішса 900 сасшави їашааїй! дісдадсіаа сдідаїсссі їІдайсосід саднсаїдс 960 саасдюаад сасссісіса сіспддси судісідісод асссдссадс асійсднса 1020 адссадсодсд спдсддаса асойощдаї сдосісдаад айдісаада ісаїсдадда 1080 7 сдсдссідас асадссасас дідсідссаа діддадодса Шоссаада дсаїсддаа 1140 сссНад 1147 «2105» 14 «2115 1917 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 14 адоддіааса іссіддадда даїсдсадсу садсоссдіс (ддасддчдс ддссдссаад (10) саддісаїаї ссдссдаюа ісіддссаад аадаїсдадс асасддадаї содїшсдас 120 ісдасссідс ссдідснда ссдссіїаас дсасссасода дсдіссддс аддсаддда 180 аїсіддадаа дааїсідсоді стаасдсадс їассосідіа сідїанш іссндїай 240 тадасадад адададаа іссдасоаіда сісіддсідс сдадшаад соідсдадсс 300 й ссадсааадод Юасаїсдсс асддадсіса аїісідсдіда дсаадідсад дссіасдсса 360 асдсаддідс садіаїдаїс іІссдіасіда сададсссаа діддшаад доаїсодсіад 420 асдасадад дасадсссодд дадащдаїса аддосаюая ісадсодіссі дссаїссідс 480 дсааздадаїй саїсаїсдас дідїассаді їдсіддадоас ссодсосНас ядадсодай 540 асаюйосі саїсоносу сідсідісєсс аддадсадсі їаїсдадсіс айдасдїас 600 60 дісдссссдс Носасіаса іадшюавді Насідіаса сідасаадсс ісйуноаЯі 660 паїаддсса сссасааїсі судіашідс дсісіддісд адддаасад саїссаддад 720 сіддасаїсо сісіддсідс даддасісода сісайдосо Ісаасаассо сдаїсіссдс 780 асдашааФдяо гїадасаїдаа сасдасдасі сдсойудсад асдсіанся дадсдщад 840 сшсо9дсща дасощдасоо сонасосіс Шосісіса діддсансо сісдсасаса 900 "7 дасдіддіса адіасдадаа дідсдоасдсс сдддасаїсі юддіддосда аїасндад 960 аададшщадіо аїайдссдс дасдаїдаазд даїсіснос адаацідас дсдісасасс 1020 дадчісддосод аайсосій досіссіссуд спдссааад осо дсої сасдасадід 1080 дадіасдсдс Іддсддссії дсдіаадаї дссаагатюа Подіаїсаї саїддсддаа 1140 сасісасссс дсіащісса адіддаддаа дссааддсса пдсссаддс ішіаїдодад 1200 7 тададдадс дсасддассс тайсісіса дасацодіда адасісасії ддасддсаад 1260 аасдасідді Нсагадааа щіссноса Посощдаад сносісосо їдсассісіс 1320 дюдісадад ющшоісаа саадасадсі дссдадаа асодсдасідс аааддаааїс 1380 ддасюдасі ддіасадсі асасдасдас дададаціс адаїсідсад ддасацаад 1440
Тассссасса Нсдсдсдії дсаїсідссс дасассасдс іІсідсдасда сдіддасдса 1500 7 даадссдіс іасадсададі Іісаддааддс спдссаасі асайсідсі Щагасдасс 1560 дюаадддіс адсаддодсодо сасіддсдіс асайсдасі ддаадацйос адссаїсш 1620 дсодсаддсас дасіїсссід ссісаїддсі дащддссна ссссдадаа саїддідаад 1680 одсістаїсда ісддісассс сойддаа дашюнадса аідаадідда адідааадді 1740 їсассіддід дааддаїаї ддасааддю асідсонсс їаааддсідї дааддайас 1800 7 сісісдано сіасдсійаа даїсдаддад дадасодааа ссіададада дасссісдда 1860 діднсіааї сааюдадоддс сасіааюдаа дідсішас днНасодадсі ддаїдс 1917 «2105» 15 «2115» 1494 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 15 аддідсасі аїсдіадіас ісдсддсоддс діссдсддсес Надстнда дсаддсадд (610) сюасаддсі дюдснеосда ссудіддссю сідаїасссу аадсідасда днеоссіасод 120 снессадсід адсосідда дчаадіядосо ісіснісді ассаддааїї ддссдїюддад 180 дісадсдсс Шісайда сдаааодсдазд аїсісдсадїд ассадсідсод дасдсною 240 ассаададії асаасодсдас сасодйссодс іІссдадацда ддсоссоді одісаадоїдд 300 60
Зо асддаїсааа дсіддідсі дадсісно саїддсссса суашоссі ааддатаїс 360 дсісіссаді Ясіаддсаа ссійсдад Шсцаа адсосаадаа сдаддсоусід 420 ссісідасд сіссіаааса ссадаїсаса дісаїддосо ссассісадуд сдасассуді 480 адсісддсса їагасддісі ссдасддсаад дадаасцдісод аддіднсаї ссіснсссс 540 чададісодід дадсоссаї Іісадсадсда садаїдасіа сідтанодда ссадаасаїс 600 "7 сасаасаїд9 сідідаадода сасдійсдас дасідссадао сіаїсдісаа ддассншй 660 дссаасдсід асісааддс саадіасаас сіаддідссу іІсаасісдаї їаасщодса 720 соіаїснодд сдсадаїсої аїасіасдіс юдддссіасі іссдідсіса сдасдадодді 780 оанадсоадсо адуноссії сіссдіссса асаддсаасі Іісддідасаї ссідссодді 840 нстасдсса адаадсісду дкнсоссайн досаадсіда Ноїдосіас саасдадаас 900 7 даїаїіссідс ассдсціїї сіссасадда аааіассасс дссдсдасаї сдадсасасд 960 ашссссді ссаддасаї нодсадідісд адіаасщо аасопнаїсі сисусісід 1020 іссддсдада ассасодасаї істасдсддс їддадсадо сшсдадса дасіааїдад 1080 сісасдаїсі сдддсдадсі дсісіссаад дсасаадасд адаюодсаїс сіадсодд 1140 сіпсаддадс аддідсдсіс састаноса дадіасаааа сдаїдсаїса діассіснс 1200 7 дасссдсаса дсаосіай9до сдсадсадсі дссаїдсасі Пдіссадда аассйдса 1260 дасаадссаа асісддсодді адідіадіс ддсасідссс асіасддсаа діиссісссс 1320 дюдідісда аддсасіадод шісдсюдаяд ісададано адсаасассс даїссісаад 1380 дсдсюддааї сасідсссас ссддешсс дидссадса асісдадіда аасідіддсі 1440 дадсаїайс дсаадайаї (дсідадаад аасдасдаад ссюіадіда да 1494 7 «2105 16 «2115 1299 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
«4005» 16 ададсісді Іссдіснся їайдссаас дсдсдссада ісднНсааді пдуідсдаас (10) дасдадссдї Наадасс9ду сдсддсссаа аадада!сідо сідідсісда даадсдіса 120 7 сндісащ9 асааддсадоу іаадаїсдсс Нсонодіс сідссосіда сдіададаад 180 щасідадса сдсадсідса дсссодщдадс Шдадаацда асоіддасосісдідасад 240 дісдіасідс сода ддадсодсас асдсасссад дідаадсод саассдідіє 300 аасдадщшо ссаюдаадсі ддсідоасосі ассіасаїдо аадійсасда дадсдасадс 360 ддсаїсааса асасддідсод Ісасассаад аададнсад ааасідадсі дноддадсія 420 60 сідсдіасдс дасіадассд саносої адсуддіасда сосцаїсдаадсдаададс 480 ддаїасддіс Ісдадасіда сасідадсіс аадаїсідс дідішаса сіссудсаїся 540 асдадщдаса асодсасассс щіддадаїс дідіссаасі ассіддогд9 їсасісодії 600 ссідасддса дасідсідс дадассасо даддаїаса ісасдаадса дайссідсі 660 спдюсадд ссаадаадда сддсассаїс іІсдсссодааї Ісаїсдасоаі дпсідсдад 720 "7 ааддд ші Ісдадсасаа сдасісісас соїайсіад аддсадасаа дааддсяддда 780 пддасайца аснссасодо ІФаїдаздаїу щдіссдаюс адіссддіас спддсдоаса 840 асісідддсу сссддсааї сісдсасіді дадасіда сідсідаддаіснсадусі 900 аддсадсдс асаадссада дссідіанс дссдїосіс їдссіасіас саадіайаіс 960 сідаадсідс ссааїссдсс адсасдсдас аїдаїсосід ссодіднсос іоносісід 1020 7 ддсадщасі асаасссдаа сосісанос сшссаїдо сасідассаї даасаїддса 1080 діоді Ісдоїаїас садааддаяд осісцдіад дсдссассаї саасдссусі 1140 дссіссаїса ассддісодс їіасісасддс адісісдада ісддсаадса ддасдасід 1200 діссідаїдс дідсіасдса дюддададсад аїсаїсіасо аааддоасда ссосіостай 1260 даасасдіад даадаадодо адндісіас асдаадіай 1299 7 -2105 17 «2115» 1846 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
З5 «4005 17 дсаасдааса адісісцсуд йПссаснос дісассіс дісдісада ссаїсдссаа (10) нсдаасасо аадісідадс ісайсідда сддсдацісі сісщідсід аадассюді 120 7 дсадсідісєс аадддадаса сдадааїсіс дсіаадісаа даадссіддаадсодсдіддс 180 пощассої даддісаїщо асаагассі сааддасаад асісоідідо сдїасддтаї 240
ТІаасасодддс Псддасісі Ісіссаасої сацаїісддс сссдадаадсісасададії 300 дсаддаааас сісаїссдсі сдсасісдіс даоасасадоас дадссунода сайсудсіса 360 дасдсаїаїд сідсісдсдс дсдїаїсаа ідіандодсі аадддасасі сддадаїсся 420 7 дюсасасі сіддадсадс Іааїадасдс сшаасодсс дасідісіді ссдіддідсс 480 адссададдс асідідадсо ссісдддсда сидасіссо сіадсасасс Поудсасісдуд 540 тащдадодої дааддассса іддддаїаа ддаюдадаїдої саднсдіса садсдаддс 600 сіссааддісє сюдссаадс асддасідаа дссідіїсад сісддадсаа аддааддієї 660 досіаїдаїс аасддсасас аасісаїсас дісдаддаї асічадосодо Наїссдідс 720 60
Іїсадаасдіс дсіаасідсу сідаїаісдс сдісдсацо асасісдадао дсісдсЯд9 780 тасщісаас дссіїссасс содсдіайса дсадсссді ссдсасасію дссадасі 840 сунодссісо сдіансоса сасіасіасу (Юдсідасаас ссдіссдадс щйссадіад 900 ссасаасіас дааддааадяа (дсаддасос сіасасісіа сойдідсоус сісадаідса 960 сддасандід сасдасасда ісаасисаої асоддіаіо сіддасоісд адаїдаасад 1020 "7 Ідссасадас аассссаїдд ісйсасодда їадідссдад дісасдасоо аїсідісісс 1080 нсааноас асодаагсаад іІсаадсссаа саїсдаасад діадаасасу адаїсасдда 1140
Іїстідааюдас дссааддада адаїсаадся іІсйаадодсі спуноусас адаадсадаа 1200 дссідюдодаа сасссддсд9 сддаіадаа дсосасаїсо дасасойсі ассдіддсда 1260 сддюасій дісаїсісід дсдоасаасії ссасддсдад їаіїссддсіа аддідсдда 1320 7 сіассіддса айддіаїсс асдадайос їадсонаді дадсодісдіа Ндадсдісї 1380 адідаассса асдсісадса ассідссоддс Шесісоїд ссададоадсо дісідаасіс 1440 ддчішагд аносісасі діасддсадс сосісіддії їісададааса адаїдсісас 1500 асасссадїса Ісддюдчдасі сдаїсісіас дадюдадсс ааддаддасс асаїдісдаї 1560 ддчадасцй дсідсісдіа аддсдснНас двуанпаюдазд сашісдада сідіїіаанос 1620 7 тайдадай сюдсасдсої дісаадсссі щдасносід сдіссосідс діасдасдда 1680 доусісноаа дсідіссасод дасіддіасд сасссдсоїд дсіадудщшо асааддаїсд 1740 спсаюаад сссдасацо асдссдідсі ддассісаїї сотадіддад сіаїсідсда 1800 соандіадсі ссойсцоі саааасідса соїдісадда сшаа 1846 «2105» 18 «2115 1218 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 18 ссдсасадад саасідссас іаддсаїсаї дсідсассда снддссдсс дсісдасідс бо саснсосдсс садсоддісас юсодссдаїс адссадаса ссассосадс дссаайссії 120 їсашсадс ісдісадсас дсаадссоддс аїсфодаї дсісадаасс дсдіадсід9 180 7 Тдсідссісс НШссСІд9 асдссааддс соашосаад додсаадсоасісюдсацоду 240 саадаасаас адсддіаця дадсіаассс ддссасас дадоадданй сойсиссії /-з00 сасассідас аіддідадсо9 юдсідасода сдісддідаї ддаасдада асдасаїдда 360
Іїссаддсаад аїаїісдсодсі сдсіааідсу саасдсддса Нашоідсадсадсадас 420 додссаагадс дададіосса ссасодсааса донседдсі сасдосіаса адсаддсусі 480 60 дсіддащдас дадаодадао содддіадсас дасадссіді аїсддадасідаадсадіє 540 дісюадддс ааасссдідс Ндадіасіс даассісдда дайсіддсісдіддісаї 600 ссдсаасддс дадаїааїсі іссдсадіаа ашсадаой сдаайдасі опддааачю 6бо асадіадаад аднасідас дасонасії їадтанац дасодідсісс діассаасід 720 дсааадаїсс сісідсддй їІаадсадіаї ддідсіано адаасассс ідаїдаїіа 780 "7 адісідсіс дсашодаї асїіашаю сіюдадасад їасаацдсіа асддоачанд 840 сіссаддсда асісддащюа дайдасоїд саадасодад ассісдпдіасіадссасі 900 чадащшій доадасаасії сдсссссдас сіссадааад сісснсдса діїсссддіа 960 адайсщша ссдссощії сдадсіассї діаайцасю асшаше їсонацді 1020 сідстаціс їІассаїадсс дадсісісс ддсдаадаї айдаїсадо даасісдса 1080 7 їсщнаїд99 аюцнайос ададаасссс дасаадосід ссдаааайаї сдіссіддсс 1140
Ісдсіссдсс асаасснаа дсссдасдас аїсасідісу ісаїддсааа доаїадісаїд 1200 аюддсаїсаа адсщіад 1218 «2105» 19 «2115 735 «2125» ДНК 00«213» Рпуюрітога іпіевіап5 «4005» 19 адаадсаді їасідсадсс даїсісонс ісюдіасід сдадиоаи сдісої9аїа (610)
З5 дсааадсаас дсаадааасд сідссдідсс ааїдасаадду аада(дасдс юНааддас 120 дасдаадада сідадасадс ададдасдаа сіддасдаду аадассаасс сасдсдасід 180 тасдщдасса ашідддасда сідісдадсі чнноїдса сідсадасодс снадсадіє 240 7 дасаюдасда соддаїсасаа ддсдісдсіа ссддсідаас аддадсдіаї сдаддсдіса /-З00 дудщасіїсд дсасаасодд ссдасіддас досансідс адаїсіссса ддснсоді 360 дасндоасдс асааасадда ддссасійд діодісасос садашідаї ддадсаїсіс 420 дюаасссаї сддассади сндсідсії дсаадідасо досіснсда саїдноасу 480
Ісдсадсаад сідісаасії осідсої ааасіисада сссаюддада сдіссаасіс 540 й дсадсісада адсюдідсі сааддсдсаа дснаснсд сасасдаїаа саїсадшщід (610)0) даісаноїдо сундаасса даааддщдас осоаїщдааа!г аасадсдасісіайдасі 660 асддаадаїс ддадассдас даадаадсад аааасссдда даїсаадсіс дадаїсаад 720 ааацаюаа саада 735 «2105» 20 60 0«211» 1845
«2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 20 адсдасодса аддадассаа ддаюнойна асодсісдаад аддідсосда ддеснсдад (610) садсадасдс сосіддссої сааддасосду сідддщіса Нсададодс дсадіїсаїс 120 адаассіду адссдаассі ідіддссдід сддсааадад снсаасаїа щшіишодда 180 "7 даїаїссаюд дссаднсїа сдассідаїд садсідаїдо асоссунод сойоссдас 240 пдоассдадс дідащісса асо сідддадасі асоюддассод сддодссіс 300
Ісдідсдаад даїдсісіа ісідсіасід сісаадаїсс дашіссда сааадноЯй 360 сіссіссдід дсааїсасда дідсдааса ашсаїссі істасддай ісодсаасуаяд 420 щіааддодда адіасддсаї сісадссіас їІассаснсі ідіссідні ссааїсдаю 480 7 ссадіщдасію сосідсідіс сасдісдсої дадсааднс діаїдса содіддссіс 540 їсасссдадс Юаааасааї сдаадасай сааасіаюод ассдасддсд ддаааїсссії 600 ассасдаддс юнаїдсда ссішаї9до Ісддасссда адаснсодса сасісдсдаї 660 дюдасдсад адаідасас іІсадссадда дддадссса аїсаддсссо ддаїдсісс 720 іїасіаснса айсдоасддс апнсдад нШадодса ссаасаадсі дсідісдаїд 780 7 спсуддсас ададнсда ддаїдааддс Нсасадїаїс асіїсаасіс дсаддадчіаї 840 саадасдсідо агасісдаді ддасаацдісс аїгдссіссас ісайассаї ШиИсЯдсу 900 ссдаасіасі дсдасадсіа сддсаасаса дссоссіай їдсісносоу дааїдаассі 960 неісдідда ааассадса аайаасісс дсдддасаїс садссссасс дайдсдадс 1020 дсадаасдад даїссдасаї аіддсдасіа йсааїсааа суоанподссай ссісссадса 1080 7 адсааддааї Іісшдадда адчішоїдо9 Надсадаад дасдасдасо ісцасааді 1140 дааадсасс сасаадсіаї ссдааадад подаїдасо аадідаасаа агдадаайу 1200 діадаадааа сдссаасодсод садсісддду ссадсдісіс сіссісдааї ссассдсада 1260 ссцсшоа діааісідда сдадасссаа асддасдадс діссаадісі дснНасіссд 1320 саададаїдао асасаайнаа дсідашшй ісайааща асасодад садсподаа 1380 7 сісадсісда сіааадідіс Ісадісаї! сісааїанс юадюаааа ааісадсасі 1440 дсддасдсдао аддснайці ддадсшо дасіасдасс дсаасодаді даїддашс 1500 дсодаїайс щісдддаї їдссдідаїд ааддсдааєс дсаасаадса сдадісдадс 1560 сдасіссіда айддссаас щіасададс дащідсоса їдйдасісд дддааци 1620
Іссадіааад іспосіаю асісдсайс ддсідснас їасдсдаїаі аїсдієссса 1680 60 аадсадсдаа аадідаїсаа дісадїсдісд аїссдадідс ддосісадс дісдсіадіє 1740 сідтасаща доадсдаїй дісаддосда чадсогддсі ддсіосодсі Шсісісїд 1800 саасдсодсід Ісддаацаї дасдсадсда Нсдіаїсаа адіад 1845 «2105 21 «2115» 1489 «2125» ДНК «213» Рпуюрптога іпіевіап5 «4005 21 адаїдссдс ддддсеНасс ассасдаддс ссассіддса дшсссасс їасіадіай (610) дсддсідіас ссссідсада содідссусі дсадсісді!ї ісддсаадсі сісю/4даад 120 дЧойосою сдшщоассії аааааадсід ддаадсю асасідсада сссоїаюід 180 аадсісасда іІсддсасодса даасдіасад асіааддісс аадсаддсда ддсаадасу 240 7 ссідадша аїдадассії сдасісааї апдсаассоу адааддаодсі сдіддісдаа.ї -:З300 дшдадасс аадааааадду аддасаадас сдонсаїдо сдсадодсдаа ддіддадаїс 360 дмїсощас їаїсааадад юдсшоаа дощдасодісо адсіасдддасосдадаас 420 адсссідсся ддаадсідас даїсойосс аадісасда адсссдааай юдсусдаса 480 ддасссдіса аддсіссасс саддссссі ссдаїасісї саддіссідс адіддсіссо 540 7 пдсссссад дадсодаас сдіаїсіції ссіддідсодс дссандос ассдієсдаа 600 ссдссісдад асссдаасд9у сааднсасс дасааддада Нсісдадоасашйааадсс 660
З5 шоаїсща агсасааїаа сіаїдідддї асюсддааа іссдссаїді дсіааїаааі 720 айддсдада содссіасада сдаадаацдіа дадаааюшюа ісаададаї ідасааддаї 780 ддсдаюддсс аддщадсії Ідссдадш їасосдаод ЧПасдааадод даадсадссс 840 7 ссасссддаї щадідісас їасадсісії ссддадааад сідсадсіссіддадддса 900 дшсодосо сісаддссаї Ісадснсоді ааісадсдса аааїддсосіддаачадні 960 дсасодсдаїа асддіаїсаа асссдададі дідаадаадо сдіасаадсу айссаадсс 1020 асадаїааад аддаїсдда ссадаїсдас їасісддаді ісїідсдаддг осідсадою 1080 даїссаїсдс сасадідсда дзааддіднсе саднойнсо асаащдасаа дасоадаісдда 1140 7 аїсдасдісс дддадіїсаї данйдсуна ісіаашса сдодідсіда дааддаддад 1200 ааасіаааді іІсасайссії сдідшоаї даададвчціа асодідіда сасдсдасаа 1260 даасюдаїйда адаїссюаа додсдаассас адассісіа дсдааісдда адідсдсудс 1320 ааддсддаса сіацйащіс ссааддоадаї ааддасдоаса асддаднаї сісдійсдас 1380 дадіїсісад пПддадсаа даадшссі ааїанноці Ісссадссіа сасдсіадді 1440 60
Зб асдассааад апйадааїас ссдаюддааїйа сааїаїссії аїсісісді 1489 «2105 22 «2115 2862 00«2125 ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 22 адодсіадса адсісаасдс діссіддсс дсддоссід сдаасдссаа сдідсссадс (610) "7 ссдсссаада садсоассдас саїдад8Оосо НПсссдсадс Ндадисаа ддаадсдссс 120 дадаасдадуд дсдсансдс ссссассасод ссдсадссдс ссдідаюдсо ісдісдссад 180 сдсаааааїйа ассссадссі саадсіддад сіддасісда ассаддааса дасадассі 240 дададаїйдаїс дадаїаїдіс дсдісснсос ссісіааада дсісаїддс сдсссаадса 300 дссдссуна адсідааддс асадасддад аадсасдаїа ісссаасасс адасндоася 360 7 сдсасаадса дсдддіссда дсіюддасодсс аадісддада сдадасссаї дсдсадасс 420 адсаїасаад осісодсасса ссдісосаїд іссассдаса саасосіайіаассддіаї 480 сідсдісаас аадсадассі ддаїанаді сасдасасдд Юсадіаш сосааайдіє 540 ссддісана ссдссасідс адсідссдйї дадсісда ааїдсдаааг дадічіддаї 600 ааіаасдссд асдаддадса сдсдаїсаїс діасаддаас ссдаддадаї ссПдсідісє / 6б6о 7 пссдасісд даддсассаї сссідідієс адідсдсіду ааандіасу асдадсіасд 720 аассісадд сасіададса даасодісаїс Іісдансоїд сдссоїасас ісіадіядад 780
З5 даїсіссаса ассадіїсса ддасносіс даасісйсс дадіасасодд сісіссідсс 840 дюдасаасс сойсцоії ссіаддюдас їаїдїддасс аїдосоідіс Нпсдідсчая 900 агааіснаї! дсіснодс сісааадід дсшсссода асадідісєса Шайудсда 960 7 додсааїсасд адідісддад Шодадіаса ІШасдді Іссдідссда аїдссісаад 1020 аадіасддас сідїдсісіа Іаассдіаю аїсаадідії Іісдададіаї дссасідасі 1080 дсасдасісду адасадсдса сддсасайе сіддсідіас агдддсоддасі дісдсссдаї 1140 айсаднсдуд юадоддасаї їІаасддасаа ддаассодсі Наддадсс їдаассааас 1200 ддаасісідї дсдасндйї атодісадаї ссідсдааду дсдаадсіса ддадсаддад 1260 7 ддосассса аїдддатюса ддсіосісд йПсасаша аїдаасодсос сідісдсдаа 1320 шесдаадс дсаасаассі ссіддссай діасодідсіс агдаасідда адаааайдді 1380 їаїааддадс асшсдаса сдааддадас сасасадаад аадасдадда сдддааасід 1440 дсістассід сдойоїдас даідішса дсіссддаді асідсаасас даассасааї 1500 дісдасосда сдсідааааї ісссідддаа адасаааа!о дісдісідсі дсадіаїсад 1560 60 садсаїааас дсадісааю Нссдацдіїї даднсасос дадссадсда ддадасаядся 1620 дссаадасої Псіддадда даашодссо псндссода йдасіша сдасндою 1680 аашідщіс дасадсідсд дсісасісіїї дадададсад сдадіаїсас сссадсассі 1740 дсисадаас сіайсдсаа дсідісосії дідісдісдс щідідсосс адсаасіаді 1800 сіддааасда ддаїсдадда ддаадассса дадсісссяа ідісдссасс їдснсідса 1860 "7 ссадсаааїд аадіддадаа ддаадсіаса дсаасісіда адасадчідод сдадісанЯ 1920 саддайдд9 ааснайда дасдаададі дісдадайно асасіаддаа ддідаадааа 1980 дасаадаада аддадааааа ддадаааааа сіюдааддада адаїсдаааа даадаадсаа 2040 ааддасаада адаадюдда їасдадісда айосіадсд днддаадсі сідсссіддд 2100 шоїасосі Істїасдассд сіаснсіса ададасадіа Фаадаадад сдадссддад 2160 7 аїсассісад сіссіддсса іІсїіаддсаад содссаїсої ддаїсісааа сіасааааса 2220 ссішадас дсісдасне дассддсдад дсссссассд асасідааас ідісдасасс 2280 діснодасі сіассоддісс Ідсісдасда аададіаюа соданодаї дсссадсся 2340
Ісднсдадс аддаіддсоса дсідасдаас асдсинсада дісасацсс сдідсадісєд 2400 аасоддсдіса ашіайсас дааддсасад Іддсаадсіс дааайноіа сисісдаїс 2460 7 сіддаїсідд аддсааща сошідаю даадададсі ісоцонНсі ссісдсадад 2520 саадасадсо діддайноад пааадідаа дюдаоддаші дзаашоно сіаашааа 2580 понано9а юнашідс ададсаїас дсдасідаад асдаасідад істднда 2640 даадісащдд асідсаасодс сдасааїа аїсасідадс аадашсн осіайсдса 2700 їТассдадссі їіасідсдад даааааадсі сіасаїдасі ссдасіададідіосаддад 2760 7 сддааїсдаа сідасдїіадс даадіаюаа сааїдссада Надааїсса садіадсдсу 2820 дсаїаїдссс аіаадаада асдадаааї!с їайаднода аа 2862 «2105» 23 «2115» 984 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 23 ащіссдсдс сдассіїсса ісдаїсайс сдсаашос адснссаад ісаасадісєс (610) аадсіссааа ссдааасаад адідаюаїс дсаашсода садсідадда Шсосасісї 120 дссдіддссу сідсдасіса даадссонад дпдссщії ісіссдсодсс діддідсдас 180 донасааді ддідасосс сааддіддас аадсіадссу аддадснодс сдадассдуіє 240 їсдашосса дддаюадвіос Іаддадсас дадасонаї дсдаадаадчіддаадіддас 300 60 адсісссдс асіїссосаї діасадддас ддсаадана ддоїдасіа сасдадсісс 360 ааднсдаса ададчвдацдіс сшаїссос дассашіодо сіссіааіасідідсаддад 420 ассдаддааа сассідаадд сдадонаса даддааасда сддадаадда дсідсдааа 480 дадааддаая ідісадсіда ддсідсдаса дааддсісаа адаадсодсса ддадсоаїюдаа 540 даддаддада сдааїдасда дсаддіддсі аадааддсса адасддадда ддадусдісєд 600 "7 асаддаддсю адаадодсідс аасіасуддад ссадсідада аддндадда адсддсаасд 6бо даддадассд адасдасіда аааддайса ісадаадада адаїсдаадс їдсісссЯай (720 дадаадісід ааасддсс99 дааадасасі дсіссадісд агдсідсідсідснааасу 780 асасідсісї дасшодсагю аїдісіаааї сдасддасаї сісідіддо сіадсюдддо 840 дсщдайдаї ссадсюааа іІсаадацдаа асааіааааа аадаадіац Наїддсдаї 900 7 ТСН дідсссдаїа Іссісдасаї діїсідаайа сащіасай дсісідссі 960
Існдісада асаадюдда аїдс 984 «2105» 24 «2115 501 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «400» 24 саадсадіюа адсіааддаа саасаадаїс ааасааасса іасассіаїс їіасдаюссі бо дісдадаїса асасссссда ададнсаас дссдсіаїсуд дсдадаадаа дсідасудіс 120
З5 даюсадіїсі сідсдссдід дідсдасодс їдсаада!до їддсссссаа ддідассааа 180 сідаюдададі сддаснсодс Дасаїсаад Неосісаада дадсосдда ддадсіадаяд 240 чашсесїосод аддадаїсда сдісдасадс Носсаасді Іссдсощіа сааддасадс 300 7 даааідосдао сдіснасої дадсіссаад Шоаадаадо їададсадії саїссудщад 360 аадсдаавдї аадсодщдасд дсдашосо ассдісіаїс ааадсісдсод саддідаїєс 420 тасадодсцо9 адассіасу сіаададдїі адададсдад дадцшодіссссддсан 480 дсодіаїсдас адіддасюда а 501 «2105» 25 «2115» 734 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 25 дасаадсаді даадсіааду аасаасаада ісадаасааас саїасассса ісіаададс (610) сюісдадаї саасассссс даададієса асдссдсіаї сддсдадаад аадсідасда 120 іїсдюсаді!ї сісїідсдссу Ююдідсдоса дсідсаадаї ддіддссссс ааддідасса 180 60 аасщаюдда адісддасіїс дсідасдіса адіссісаа ддаідадсосоу даддадсіад 240 аддашеїд сдаддадаїс дасдісдаса дсісссаас дінссосоідіасааддаса 300 дсдааадіддс ддсдіснас дщдадсісса аашодадаа ддіададсад псаїссую 360 адаагдсдаа діаадсущда сдасдашо сдассвдісіа ісааадсісд сдсадоюа 420
Істасаадсі щдаюдассіа содсіаадацд діддададсо адідадшо діссссддса 480 "7 посдіаїсд дсадіюддасі даадодаїйсі асіааїаза щдааайаддааассайна 540 асдаадассс дадссісаяд аосісайсіс аассддаааі аїадассодса дсддіссса 600 ддаддасааа їададісійс їідандасії асддодіада ддісосаїд сдасдааді / 6б6о0 саїааааада сдсісаюса дсаашодсс сдсагдсодсі ааасідссоу сасадіадая 720 юіадодоодіс чавчі 734 «2105» 26 «2115 1448 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 26 сісдадссса адсдасаа дсоадсдаюда сіюддсадиої ддіаадсойї сададчіада (610) сдсадісда сдаддсаасо дсодсдсдаді сдасдсіаїс сдуідадшс Ннесідддссд 120 7 аашсасда ддссідссої сссааюдас адсддасої ддідаїдсос садсісдсда 180 сісідсассс іІсдсаїссдс Нсосісаада ддсддссда даадайссо даосісісда 240 адсашса даїсоссдіа дідсссасії Ісдісдісдс асадодадісдс дссдідсідд 300 асааасісда ддасоссааї діддссдаас юдссаадсо соіддаціїсідадсаада 360 дсодюдссаа дадсадсісс асаїссдсді ссасадссда ддасдссссоу ааассосіда 420 7 ащдасодсодсі сдааїассої сісаадаадс Ісаїсадсос дїсасссдісаїдсісйса 480 щдааддосаа іІссдасддад сссаадідсу дсшадіса асадацдю дсосіднда 540 45 асдаадаааа даїссаайнс ддсассщу асаїссісаа ЮДЧасдасоаа дідсдісаад (100) дасісаадса дійссаас ддсссасії асссісадсі сіадідаа одсісосіса 660 поадсоддасі ддасаїсдіє ааддадаюа адіссдаддя аїссаїсдіс дадсаасіад 720 7 дасісасдаа даасдісдад чзаддсюдаад сідссіїсса адададісіс сддсасісд 780
Ісаасіссдс їссадіодсід сісйсаїда аадаоссаїсс діссдадссс аааїдсдоасі 840 55 Надсаадаа дасадісаад сіссіасодїд ассассадаї юддсіїсаді ісунсдаса 900
Іїсндадіда сдадсацдаїу содісааддіс Паадаацдії сіссаасіду ссіасдіасс 960 сдсадсідіа сдісаадддс ааасісоно дідддсюда їаїссідаас дададдсдд 1020 аддасддсда ссісадідаа садспдодсу ддадаадаа ддссаадаад дадаасаааї 1080 асдаасадсі ааісаассдс асісдсдіса даїснсаї саадддаасу ссссадсадс 1140 сдсадідща сисадісос аадсісодїду асаїссідда сдссдаддос йсаадіася 1200 асіасшоа саїссісасу дасдасадсо дсдісадоад асідааддад сасісдаасі 1260 ддсссасдії сссдсадсії їІасдісааід дсдадідаї сдасодасід дасаїсдюс 1320 "7 адсадсідса ддаддасода даасісодссд адсісаадда діадасдасс аддісаїссї 1380
Ісдсдіаааа сдааіасада аааїсацшс існаїссід сащідіаю сіддоашдда 1440 що9шаа 1448 «2105» 27 «2115 1106 «2125» ДНК 20. «213» Рпуюрптога іпіевіап5 «4005 27 дісддаадад дісдісддіс діссаюсаяд сідсадасодї юдсдїіасодс саїсіссддс (610) дсснсасдс юсшесаї їаїссцісду ддадаосіса ісіддасаса спдсідіас 120 ааїіссдісад ссддсаїссу саадсасоїд аїссдсаїсс ісададі ссссашас 180 дсосіаасаої ссіасаддс дсіддайс аасдадісса аасіонон сдадасідід 240 7 содсддаїсюії асдаадссії сдсдсістаї Ісашсасі дспссідді сдадіаїст 300 ддащассааї ссунНстадс аадсассаїд сдсіссаадс сдсадаїдасасасдісцйс збо
З5 сешедсі дідїасадсс діддісса досдодсаацді Іссідсдїса аассассаїс 420 досаїсійдс адіасайнсс санаадсід спащдадса ісдісаїдсі саїсасдадс 480 пдасадоїо їаїасддада аддададсіс аїдаассссс іадщдадсіа сдудсіасуід 540 7 тдсшаїсс Ісадідсдієс дясадасдаща дсасщшасі дісідсідаїайснссас 600 ддаадсісасуд аддаоноса дсссаюдсодо ссаїддссса аднссіддс сайааддса 660 анйасї Насоаїтасю дсадісдаїс адайцадід даснаїаад дісдадаїс 720 аіїсісддада адщдосаїаї сддсідісса дасідсідду асосісадаа ааїсудссісс 780 дсасюдааюд асшоісаї сідсдісдад агсідадсі йдссацйос ссассасіас 840 й дсснсдсда Ндаадасії Шаїсоссо ісаддіасодд садоюнаа ісїдссдісї 900 ісдаасдіса аддсассасі дсіддссааї Шаюдасо сіаїсаасодї дасддасодїд 960
Ісдасадасс Ісаадаасіс ссддаасдаяд айсісасса адааасаддс дсіддсідсс 1020 ааднсдадс оасаїдаасіс дасіїсассї ддіддідоса дішааа дсдісадна 1080 ааадддадся агасадіаад сасасд 1106 60
«2105» 28 «2115» 2007 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе і «4005» 28 ададсісас аддасддсдс іддісдсдса Іісдаддаса адааддада сддсодщіас (610) дюасдаада ассдсісдсі снсіссаїд ддсідсасод дсааддсдаї їссаадссяї 120 "7 іїсддісс99 ссоїддоїй ссдсісддес дасдідаїас аддаадддаїа Шосісаад 180 саддассідс даснааааї діддісссос сдсіасша їасідсдасі сдаддадсда 240 сасаюдасіс їаддоїана їіассадсаад дасісісіда сшШаїдсіс сдадасдссс 300 аїсддассад дасаснаїї дддасасдіс аасасдасса аагасссдсо ісдїсісдад 360 пососідса діасааацдаї саїддіасіс дадасодадо ассаааацдіс діаїдаадсс 420 7 ддаадаасо сссіссаада адсдаїасдс ддаассасу ссаюдідсс йсаааадас 480 додсацдчішо Ісасдіасдд даадсаадсо ассдаддата їдааасаада ддаасдсаді 540 сдсдссдаду сддссаадаа дсідсдадад аадсадсдад сддасдадодс сдссудссдос 600 дссаасоссу ссааїааасс саааїа!сід сссдсдасас дссссдоадас дсаайдснй 660 адасаїсда агасаадай щдадайссс ісісашсод аагащісаа аассаїсддсе 720 7 Ісддасассі асоададісої саїсіссдсі асдадсісдс ааасаддсас сасддіддса 780 анаадааса іссадсдсдс дісдасдас сідасддасуд ссаадсдсаї Тіасдсдад 840 анаадсіса ідсдссасії даассасаад дсдадсна дддчюдадда сашісдад 900 сссдіддсос іщдіссаадії сдаадасоїд їасандюї сссаайдаї додсіасадаї 960 сіссассдсо ісаїстасіс дадасасдсд сідісддасо аасасаїсдс сісісаюд 1020 7 Тассадаїдс ддодссаї даадіасодїд сасісддсса асадїдаїсса ссдадассід 1080 аадссдісса асдіссіддї даасдссаас Ідсдадсіса адаїсідсда снсддасід 1140 дсдададдсод Шіссссда адаададсід даайдасад аагасдіаді сасаадаюд 1200 їассдадсоас сддадагсаї дсюдоадіді аюаадіаса сісдддадаї ддасдієсдд 1260 їссаддасі діаїснсдс сдадаїцдаїй іІсдсдсаадс сісішссс дадасаддасє 1320 7 тТасандаїс адсюдсаїсі саїсаїаас дсосіддоаоаод сіссааасда ссаддаїсіс 1380 тасншоа дсаасдсосо дсіаддаад Нсаїдаасу ссдаднсоса даадсосдда 1440 сссаасссда сдаадссісії ддасдсасаїд нНсодсадаї!ї соссіссада сосістддаї 1500 нпасюсада ададсіщдаї дандасссу ааїаадсода НМадідідда сдаддсосід 1560 дсссаїссодїі асндасідс даїссддааї аддаддасо адасдассодс сасісдадс 1620 60 псдано асшдадаа сдадааацу асдааасссод дсідсадаяд асідаїсідд 1680 дасдадаїда дасашсса сссюаадід ддсдасдада садсдасдда дддадаїдас 1740 адсадіцісд сіассасдса дасіісіаїс асасссдіда сассідідас ссссдсіасу 1800 діададсаад асасаасада дасдасааді дасадсісду асдссссіді сааддіаїсд 1860 асдссаасад сдісададда адссаадсса даадасдаад асддддааса асасадсасс 1920 "7 ааіадсдаса адаїссаїад дасадасааа сідасадасу сасадасдсу асаададдсос 1980 додсдаассад сісдддааві сдсаїаа 2007 «2105» 29 «2115 2053 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 29 дсісаадсса дадіссааас дсісдісаа сдсссайса асдсісдадс аасддсідаї (610) ассдасаїда ассдіаадсі ддадсісаїд дадсіддаса дсддсдоасос садсосіаас 120 адсадсааса діддаадссс садіссдасі сісдассідс двсаїсдсіс дансдаді 180 адсадіаасс ададдадоща даїдссісії дісдддоно сссасаассс адасдіасді 240 соісідсси ісістацшо їадідагаді ашісасої адасоашоді їасадсідад /-З00 7 нпанщдадо одсаасідсаа сасаїддада садсадсасду ассадсадса адіаддсад 360 ссссдаддад їсашоодід аададдасда ддасаасаас аадаадасдд сдсдісдсаа 420
З5 дассдасісс аасадсаадс діссдіддас асдсдаддад ааідасаадс ісаїдсаасі 480 сдісаадсад їасддсдсса адсосіддіс ісісаїсдсс аїдсассідс саддссуії 540 сддіаадсаа Ідссдідада даїддсасаа ссасндааї ссдїісддісс дсааддасудс 600 7 аддасдасі даададдасі ащісаїсії сдадідссас аадааюдіду дсаассаад 6бо ддссдадаїй іІссаадаці (дссдодсад дасодасааї дссаїсаааа ассдсіасіа 720 сісдассаїд сдісдсаїдс ададдсадіс ааіссдсааа аааддіссса дсоідаца 780 саададсаїс содсдіддсоі садісасадіс дісісссдід саааасааса ассаааюда 840
Іссідсіссс адссадсдаї сшдасідд саїдсаасас садідссас сдсаасааса 900 й дснссдсас сдадддаща дшссааїс сасаїаїсаа сдосісИсі сддадодссіс 960 дададасодсс дсасдсодіда дісссдсідс Нсдаайнаа подададда ісдаїасіаа 1020 сіанаїдої дноаїааї аадсаддаї додсаасісда їадіддасн аасодйса 1080 аасаюдацйці ссдсаїсасі асдасаассс асдадісі асссдсіааа сддаддіадс 1140
Ішсааасд ддаюаассс ддасіаїаді сдісссащі ссадасвіс дісісссідс 1200 60
Ісддідіссс ссдссдаїда ісідааісаї аасадссада асдадассн їдасіасуай 1260 ссдаюдсааї сісдаїсса дсуащіасода ісаїсіадіє сдуноїдаї ддасасіссї 1320 ссйсдасої сааіаддсаї дадаасіса сснасоддсі сдссідсаадісасаїсаа 1380 садсаасадс сюдсаасіа садайїддса ддааасссаї айсіаасаа саасдудссдї 1440 дддашіасі надддасодіс (ддосносі садсааїасс діссідаїдс сссідіааас 1500 "7 дісссасаса адсдссіссі сдасдієсад ддансасаас дідаташю даадааїдаї 1560 адсссідіаї сддіадсадс ассдаїайс сдсддїас сддсдасоса саїдсадсаа 1620 ддісаадіса дсдаассдаї ддсайдсад садіссаадс садсійссаї дссасідіаї 1680 аддсаадсдс сдааїаддояо ісаснсаас адсаддадс адаїаддас ддаїдацдса 1740 таїсюідаї юдассдсса Ндюдсаїо сіссідаїад асідсаї(даа асааашаа 1800 7 аоцанасі Іассааадас адіддснсї снасісцй аспдонаа спцшісодс 1860 пдаїсіаса дсддшсас днадаїадс шіадсіссї даїсдадно спацаааї 1920 адсассасії андасадаяд айдаїацна ааагдаай пшисадасі ааїаїацад 1980 сідаїайцас аїдіассааа ащдісааас! ааіадсідас танадшо аааааддсдс 2040 саааасаадс їаа 2053
Зо «2105» 30 «2115 1173 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
З5 «4005 30 адсндодсу асдіадасад Шсодсоої сідддіссса Пссдіссаї даасдс99ід (610) пддадаадс дсасдісааяд ісадішсс анйадсісос дсідссссос діссаїдаді 120 7 дісісдадіа сіддідіції ааасасаасі опасасдда дсдададсос адідасадаї 180 адднодааяд саасіассда іІааїдааддс сааддаїсід сассааддді дісіассаса 240 асюсадада даїсщаої9до саасассааяд іасаддасс ссасіасддаоа сдасіасаюд /-З00 їТасссддаса асдісаадсс сададсис їіасдасааас аасдісноаї дсадаадай 360 асдаїдснс ссадісааїйа іІсідсоаїдодс сісаддасо іІсаїсадсаа діассадсоса 420 7 даїасідіас дісадаїсда сдасдаддс їасдсонсо аїсідддіса даїдаасдад 480 аагасідщі дадсіаїсад дасіасадїа ааддасісда данодадсіодаддаїас 540 ацааагсас іІсаассааас їдсіайдас спдсідссо аідаддаїсо асаюддадаа 600 асщдісіда сддссдсаад (дсоддсіаса сссассадса дідсодунсд ссасіидасс 660 дасасіста сдадаасас діссаада!цо ісідісаїса сіааїаасда дааійсадааї (720 60 ааайссідд аасаддідда даїдіайсс ааасссаааяд іІдассаадіс дсдуідіааад 780 сссадсаада адсассадід іссдасуюі аасаадсааї Іссдсддасо сіссдадсід 840 садаассаїа іІсадаасіса сасаддсдад аадссасіса ааїідсісдіа сдсдддаюс 900 асдаадсдаї аїдсасасад сісдааїсід сддсасасду адсдаасаса сдссуддааїа 960 аадссдіаїа саїщдісасіа сдасддсідс дддаададсі Ісдсссасіс ідіаїсасі 1020 "7 ааддаасаїа Шоддаюдса дсаддайс садсссіасо дідіссаїа сдадддас 1080 садаадааді Насодсадої сісаааші дсссдасаса адаадасдса сдадааддаа 1140 дасаасдаас асісданда дадсоаїааї їад 1173 «2105 31 «2115 754 «2125» ДНК 20. «213» Рпуюрптога іпіевіап5 «4005 31 адайнаадс ісасддссоо щідіссаад ааассдіса ісдащдюіа щісасісіс (610) адідідсссуд асадссссді аснадсасу дсасадаада асдаддадсі даасдісдад 120 ааднснсо даїсадсаа дасісідссі даайдссії ссаддіадаа дасдсідссс 180 дссссдасдс спсдісаад дсаасддаїс сісстасдіюд аасдісддісіддаддаїсд 240 7 Ісісаасісс сдіссдену ассдсаїас ассідссаас садідіаїсаадсосаюса /-З00 ддссоасідю доссадсіді Іссудсай ссісаїссад сдсдаснсоу ддадассса 360
З5 сасасссаад сюдісасід дсдссіс99д9 дадсддадсс аасідсіса сасісаадіа /- 420 сіпсданад дасдісаїсі юдсісадад іссдсадаад їасаадсада дасаїдідс 480
Тїдсідсідої сісдадсосу Ююйпсодадаї сддсссудіс Недідсід адаасісдад 540 7 сасдсассді сасашіюдсад аднсощад ісіддаїсід дадацасіа Пааддадса 600 сіассасдад діссюдадоу юйсісода ссідіасаїс їасаїісуд адосндаа 660 ддаасоцас дссаасдааї ддсіасіаї саасааїсад іасссойсоудадссоусісаа 720 діасайнаад ссдісдсеНа ісаїсаасії стад 754 «2105 32 «2115» 659 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 32 дадсіссаїд ісаїсідсда СТтОДдасодо адсісісіаї іадаанс аасідасісї (610) адасаадіаа ссаїдсадаа сдаддссддс садісдаїсо асаїсіасаї сссдсдсаад 120 датасагаі юсдсддіа асшааїгїас дсісададсі асіддадсіа асідаіасі 180 60 одастанодісі дісаїсона їаіадсісдї ддассаассо саїссіддсуд дссааддасс 240 асодссісдаї дсадаїсаас дісддсс9дсод даасоссаа сдосодісіс асдодідадчі /з00 сддасассії содсісндсі ддстасанс дссассасодо даддосдас аддссаїса 360 ссдадсідас Ісассаддсд дасдссаада асіаадсада ссаадійціс дідаїсдсдс 420 оасідсідсід сдаадіддад одсонса ісіасдісіа дсіддсади саддадосід 480 "7 дюайасда їашіаїсаа садатасвціс ідідаїсдсі ддсаддаай дсудіассояї 540 сдудснНагда дісданді юсодаойсо ассісдссії Ндашоаї сддащіадча (610)0) сНадіаїй аасісіддсс аасддасдад саадааїааа діаднсааа сссдісада 659 «2105 33 «2115 1049 «2125» ДНК 20. «213» Рпуюрптога іпіевіап5 «4005 З3 сісдадсдса адасдаїсіс сдсіаїсдсс ссассащії сдссадсне дссасідссс (610) їсаїсдсне сасісіссду сссісдадсо садссоссас саасіаїдсс ддідасіддс 120 пссдісдда ссссассаас садідідідд аїащшаосіс сдсіссдісс аадасдідсс 180 їсаснсдда сосідссідс сісдссааді сдадіссс ддодсдаснс дасіайадд 240 7 Іссіддадса дсісійсдід ссдсаднсі дссдідассі дсіааадодді дісдасісса 300 сіашсодса ссаааасаїс даїашіасс сдаасддсас адссідсодїд дададчіа збо
З5 їсаададіда дсісасдаїй сасодісідї ддсссаана саасдаддс їасдідадсі 420 дсдсааїсс дадсісадсду діддссаасд ассснаїаа сдссдсідас псодсідссу 480 сссааадсад ссіасісасс ассаїддою адаадідодді ддасосіасуд ссаадссасіа 540 7 сдіасдаайс дсіаюсдад аїсіасаасс асдадіїсса даадсасоді сісідсіаїд (610)0) ссдсідасда сосідайцнас аїсісддсід сідісасдіа сисасідсіасусідадса 660 сддсоддассод саїсадіїса дссассдадс адаїсаасаа діддоасадсі садісдасдс 720 сісадасдас іІсідссдад анйдадодсіс іІстїасддсса садідіса діонасі 780 сддсідщюаа ддсаасаас саасідісдо сіаїссдіас дідсіасдадаадссдасаа 840 й асаїсасдад сдадададсо іІссдсдсада Ндасідсдс адссдсдасод дссассіссї 900 сонсіссої адсіссоді дасісдссда іІсасісідас Ідсаїасаса дсссссассі 960 сддснесдаї дсааїіаадсі ссдасдаїад адсдасоадію садісідсіа діаїааадн 1020 сааюсасса днаснааа ааїдіасса 1049 «2105» 34 60 0«2115» 1203
«2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 34 адассааді дадддоцної адддсасіа асасідсщі іадсдасдсс їадшадчд (610) сіадасоссі дссссаасаа діднссдда сасдасаааї дсддісісаа дасдісідс 120 сааюсаїдс адаасіддаї садсоддідаї дсісдоддіс досааціос дісасісдс 180 "7 дсдюдсаад агасадсаса дсоасдасдас дасдсасасі ассасдсада аіддсадс 240 сдсддаасої ддаїсдадс їасюдадаа ідсасаїдід асодсаддай саїсддсадс 300 доусщісдас даадсавіо Іісссааюдас ідсадідодсс асдодсасою дазшай збо дадааанодд сдасодаїас ддсссасаад садайо9о9до дадідодсадо ісдіаааїас 420 асясщо99д9 ассаададаа даїсаюдас дсоіащід асдссаасіа сдааддісас 480 7 данасісда ідсодсісоїд Ісстададдс дасдаїссіс ассссдааісааїасдас 540 адоюдсааяд сіацайсі даїаадаосі ддасддщдадо доїасндас діасіаїдаї 600 ссдіасддса адсдіаїгас їасддадааа аїсасодсна діддаасосі дадідісдсі /6бо
Шшсаассаа садасдада їассасащі дсааасанс адааддсудсі ссдссоша 720 ссдаасаасоу ідсісаасас адісасідю діадсюно асаддіта дсснсаад 780 7 содсісдасс саасддасіс чподавнаї ддаасунаа асаааанйдіааадасдас 840 дсюдсасдсої асдсаддаас сддаасісаа айааадсда юідсдадаї дайшасу 900
Ісддадссо99 дсасіас9да аіагсадаа! посіддай дсаанос сдсодсаюдс 960 даїасіаадд дссадсассс дсНасіасі ддідіаасої сідасасіу сдісданааа 1020 даадісіаїс сддідасдсі щоасасдадс аасаїсно ссдаадаїас іссадсдїаї 1080 7 сдіссанда ссдадсісас сдадідідсі ддісдсддса ссідсдасіа сдасасадда 1140 асаюдсдаді аяснсосоада ссасаюдддс ндоасаїдсс адаадсадда адсосісдіє 1200 тай 1203 «2105» 35 «2115 7947 «2125» ДНК «213» Рпуюрптога іпіевіап5 «4005 35 аддсдсосд сіссддсаса апддсдсад сійасіад суддсосідсі дсідісадсд (610) адіщдазда сунанодсс іаїсасдаас дсдсідсадс дідсссдсса ааассісасд 120 дссндсадс ддсааюддаї сдаїссоддас асддасссса аднсіасаа саїаісадіс 180 сссааддаїд ссіїсаасії сддіддсаас ісдадсіаса асаасдадіа саадсісаїс 240 60 нсісддаса адшаайаяд сіссаадсдс асднсдадії сдадшсда сіссаааїдда /-з00 асдасадіса ассіссдсда їассассаас адддосадс асіасннці дссссадосі 360 дюсадаїсд асааддосаа ссісаїсаїс асдассісса адсссаааса дсосіассді 420 додсасіааді асдісадсда асщідсад асаддааса аднисіднНа сассддсдудс 480 тасдісдадо їааддоссаї іІсідсссдас аадіддодіа іссссддсас діддссідсі 540 "7 аіїсіддаїса юдасааїаї сддссоїдса ссайссісо даїсссадда содіасуаюа 600 ссдіддадсі іІсдасіайцу сдсссссіас діддадааду ссдадаадді саадсадаад 6бо аїсааїдссі ддасааїсі дассаасааа сасдасаадо ааїсдіаїсс адададіас 720 досндаасс ссшсадодо Ісдіддадсс асддааайсяа адіданда адсдсадан 780 содсісою ададссідс ансаїсісс асдісссідс адаїссдісс садісідіас 840 7 даюдаїагдс дсссддсне ададісосіс ссідсіссід дасаададіа ссадддісіс 900 аадзшоддю адіїсасдаа ааїісааіадс дасіасіасо дідададо ссісдасісс 960 ашсддсіс дасасадсі сдадіссааї дсднсаасді судссасії дпссдссід 1020 дасюдісіс сіддісссда адонасаї!ї сдаддідда (ддасаасад сісаїдйс 1080 даааїсссід даїссдсдсі дааїаадідд сіадасід іссссссісо ссадаїсссс 1140 7 дюдаодссіа днаїсісаї ісідадіасд дсідшсоо адааднсісіссассос 1200 дададсада Шаїаасіс дсіаїддссс Іссаасша сдаїсдасіа сдіасудсдіє 1260
Іаїсааддса асссдаассад діаїасійсод дідддаса аїіссддаадс сіасссдасу 1320 аааданода ісіасдссса сссадіддаа їасддісісс соїддіаі йсасіасаї 1380 дюдасаїсд дісідсідса ісішсосі аідонаа сосідсідду їсісйсад 1440 7 дсонссадїд дсасдіссса ассдаадаю Подісадсої асдссадсіс айдідосід 1500 асюсадссії Шаюадасдс іІсйаднса адсдсссссод їадасснос Подайсад 1560 асдсосна сдщдісніа садосідаїта снддсодіс Шоноси одідїасссд 1620 ашсасно9 дідсаацдсі юдасідіаї дасададіда їадсіадсса айсдідссі 1680 посщісіа сдсдсодідаї сасідсана сіданодід ддодаасос дсіаддаїсї 1740 7 дсіссасада Ісдасасдаа дсасоунаїд ансідісда ссісшосі ддіадшо 1800 оасашсідс ісістщіагс дсіюда адщдаадосо айацйодсіда даадсдюо 1860 ааісісдсід дснсації сааіддіаас аасдаїдасс асоддоні сіддсасдааа 1920 тандсесща сдащшіаа! ісідсіїдіс діасісадід сддідадсасіасдуіадчда 1980
Тассіссдіа їасаїдосої дасоасідсдс ассаасссос ддадоссаа айсссосдсу 2040 60 дюїсадсаа днсідасоас дсддоаснод адассіда!й аїдадсоодо саїддадаад 2100 асіасддщда айшшсіс дссаїссаад сідссдіаса асадсадса дисадіасс 2160 аїснссаїа ісдсідщдаа соадсадсодс ісдшдасі Іссаасіда саасцссдс 2220 аассадасду аасасанаї ддідснеїс ассаасаасі сдасдааадад содааайсі 2280
Тассдсаадс їдсасдац дащішсс аасіасааса асіддідсід саадснаад 2340 "7 аїссадссіс щаасідддо сдадсадсда ссассдсадао діддісісас аагддіддас 2400 дадаїдісдд юаасноїо ісіднене Шаїсюодо дідаддссад саассідсяаї 2460 сасісдссід адійссідід Шссідш сасаадацда аадаадади сссдіссдіє 2520 сдісасісад адсдсдаддс ддаїасійї нодаїасод юддідасасс ідісіасддс 2580 подсюдаадо сідадаїдас сааацдіас дассададоу ассдісасаа сіасдасдас 2640 7 нсаасдаді існесіддас даададащці сідаадіа асіасаааса сдаададаїє 2700 айщдашо9о сдісасссаа іссоддсіаїд аїсіасааас адаадсадса дсаасдісаа 2760 ддісіщдасід дсспддадс ссааааддсі сдадаюдас ісаасдоюад сісдаасддс 2820 їссаасної Ісаасаадсо ісааацдіай дссдадддаї Ісассдадісє ідссаадасд 2880 псондада адсдіасоаю дсідсіассу сідсдсодсії Ісаассодіаї сісаасс 2940 7 сасдісаїса сойссасії спддсаа!д сісдсонсЯ сдааідадса ададаюдас 3000 нпссаддасд ссдсаадаї їаісісдадс асшоаїйаї сісаснсії дсіддасай 3060 насущда!йд дасісдасаї Шсдсіції їіасдасдадс ассодааацдіайсісаад 3120 дсодсоансса щдаїдсощі ашеїосаї сіддсісна ддідодісас дісдаюйна 3180 тасіюдаіаю соддаасаїа сддіддідсс щшоаюдосасді соїасіасді дассдсдатд 3240 7 сіанссасу дссаддссі данаасідс дісаїдсаад іІдаїдссідудіснассаас 3300
Іддасасддс дсасддсой сіссщії дсашаїсс дідасацої дадіссдад 3360 аассдсеНаї асдвюдащюа саасодідсід даїссодаді сдаюаодсоаї аддсіассад 3420 псенсдда ідісодсіайї ддсподаад Нагаснсо дсіасдаднідадаїсіас 3480 ссдсноща їдссдадсії Ісдсщаї дсідассасу ддадаасаа сдідадсаїд 3540 й ацасдасад шйссісаї сіссіааас юддаїдссаї ісцсідої дисідсай 3600 дасацасда шШоддаасіс даїсідда дсайсасодо діасунсої ддсінісЯ 3660
Ісдсдсана дідадансо сааснсасс соасайсодаї сідсонсад ісаїосідід 3720 дадсаша асдсааадодї дайдсдсда адсіссаада сдддасіїса асісісддас 3780 адсаашдаоса сдісаїащда аїсдасагїса діаддісасоу адаїсіїда сдідносс 0 3840 60 ддададсоо аїссдасадіс ссдссіссід Пдсадсосс ддасаїсадс ссаїдасдас 3900 дадасіссаї їасідісц сісдсдісдс ааасадасдс сіасддадсо ссаадсідсі 3960 сдісассдса адідднсіс опсісідю дссідддаса сіаїсаїсда їадсаїддсос 4020 дсддаюдай даїсісааа сааддадааа ісісідсцс ашссассоу спдасдас 4080 їТассадсдсу ааашассі дссдсаднс саасійдсід знпусисда даасшасу 4140
"7 Ісдсасанс Пдаїаша сісдісдаас аасддсаацда ісісададсо іосідсаа 4200 дасааасіас Іддааайсі садідаїаас ссааїдодідо аддадісасі даададата 4260 ададсно сдаасідаді дсідоанааї дідсподіс ссідісасос даашдацід 4320 аадіасаїса саїдіаідсі саасісодідд дссасісодю оідідносо ососаас 4380 подсаааадд дасіссаю їддссодсосі Нддсдадії даїсісодсі спдааддсес 4440
7 аасдіссдад даддаадад саасдссаад аїаїсссід Псдсааада сссаїссдас 4500 тасдснсді асдадшсс дсаасадісї адсіссіасс діссійсдіс дддоснНасі 4560 аадісідсаа діасдасада ісідісдіса Пододдісісу аассассісо іІсаїадісді 4620 дусісща пососдіаї їдсасаїа садсадсада сосасааасс адсідісаас 4680 ааддсаадс Насісаїйс іаїсіссадс ісісасаїса Ідсадайсо сдадсосую 4740
7 соіасунсс їдааїсц9д9 аааддадай сіддсссасо іссасдадса адассссдуд 4800 псосідааа дсаадддааї Нсоддаїсода Ндасоїдда НснНасаса ддадсдудаї 4860 шашіо9дао асдаїіаана їасдддюаа саааїсасіс Ісасадсой ідададссас 4920 ассдацідао юйаїсдса ісідсасдда сійдассі Ідсадаада! дасодад 4980 ссссадісдї асдадсісод Ісдссдсно сіднснсо їдаансосі дисаюддас 5040
7 адссдсцо сіссдсідсі сдаддааа аадісддда дсдісаїсасіссонсіаї 5100 дссдаадасао Нсідіасіс садааадда!ї пПддааадса аасаддасодісіддасую 5160 сасасдсіді щшісідса дасдсщіас аадсдадасі дддадааси сподадсдї 5220 дюаадссіа адаадаасаї сіддааадас ссддадасід сдаїсдадії дсоїадідо 5280 дснсісідс доддссадас асідісасої асддідсадао діаїдащіа сддідаадсі 5340
7 дссайсай дсіддсіда даїсдаасаа днссссаас адааасіїда ддадіїдаїс 5400 аасасаааді ісасаїасої ддаддссідс саааша!цд дасдісадаа даадаасаас 5460
55 дасссдаадд сдадідасаї тадншна сідсассдаї Ісссіаасії дсдсоіддса 5520 тТасаїсдаю аддіссодюі даасіассаа ааддаасаді саїаснсіс ддідсісаїс 5580 аадддсддсу аддаасісдо сісадіїсас дадаїсіасс дсдідсадісі дссіддсааї 5640 ссіаїсндд дсдадддсаа ассідадаас садаасдсад ссанації сасісдсдді 5700 дааааїсідс аддсіаїсда їіаїдаассад даїддаїаїс Ндаададаа спдаададю 5760 сдааассіас Ісдаадацдії їідасаадддї асддсадасс ддссдіасас даїсдідаді 5820 аїсссддадс асаїайнсас дадіадчіцю адсісосідд сааасіаса додсосідсад 5880 дадасаїсодї Нащдасосі аадісаасдї асонодсос діссдсідсу їадссадїсю 5940 "7 сасіасддіс аїісссдаїді днисаасааа сщшісійса їІаасосащо сддіацадс 6000 ааддссадіа адддіаїсаа ссісадідаа даїаїсто сідосіасаа сааноїаї 6060 сащасодії ссдідасцій сссддадіас ассаадідсуд дасаадддасо щащідодда 6120 адсадсада ісіасаадії сдаддсааад Падсдсада аідсадсіда дсааїсдсіа 6180 їсдсудасяо ідіассдіаї Іадссадсої сісдаснн іІсаасйноії дісднсіас 6240 7 Тасаассаїд дддснсїа ссіддсдаїйу ісааїсаїса ісюддасіді діасшсід 6300 сідїтасідса аснацодсду юсасідсю ісдоандачдча діонподсода ісдідаассд 6360
Фашцосіаа діаадсюса дідащдсії ддаїсддіда сайсисасіасідсдсса 6420 сідсіюрдсда сдашсаді сдадсдіддс Шаадоасо99 сондаасода даїсанціє 6480 сіднсдіда сіддадассс дсщіасне сішссаса Пдодсасдаа айддійсіас 6540 7 псоддасада сданснодс щаїдососс аадіаїсдю сдассддссо їддансаогд 6600 асааадсасі снснида дадсщшаї сошсїіаса сіадсадсса ссісіаїдсі 6660
З5 дсадюдада Носсайод дсшссай їастасаацді ісасддісду сааісадіас 6720 нсососіда саїддісодсі адасноїд Недідісаї ддіасіддіє дссонсюаЯ 6780 нсаасссас юдсдісда аддістщас опаддадо асіссдісіацдайсааа 6840 7 даадсою дщдасаовдідо їаасссідаї сааісоідда адосоідди сааададдад 6900 аасоасдїасі Шсдасдсі Ісдассдщда іссаадасаї дсапйасдаї сааддасаїюд 6960 сіднсдсої даїсдссоі сісіаїсісі Ісдасдадід асааа!аїса сісдаїсцу 7020 асддааасса сдідасійсс дсідснаїс дснаїсда додссосоді діаїснцаді 7080 дсададодсід Існенсас сісдісдсді Іісадодсдада ссддуснаїісдсіссід 7140 7 аадсіссійс їіфдащдацої дсіддососі адісідайс іІсдсшсаї сіасдсоддас 7200 дааашдіоодс адаюсідсії дадіащада іаїсісодсід садсіаїдодо сідйодосо 7260 спдюаїсс Поддіадсаа сісдсусн оподаасоус Шасійсоаї ісаїдасудсс 7320 оюсідадії душсасі дадісісай сідносісії сддсосісіа сдйссддудс 07380 аадаїссада саїдасіасі діасааїіааї двсшдадіс двщдасоідді дайдаадаї 7440 60 айсдсдад ссаасісдад сааїдаюаа содсдаїщдаїоз аїсідісаді дсадсадад 7500 сдсіссаїса Іссндадса дсадсоцше аїсаасосіс дасідсіад сдасадсдад 7560 асщдасаїсс дсддадсща іссюддаад ааадаадаїйс іІааїдсасдсіададсдас 7620 аасасдсіда асдсддіасі даддаазац ісддадісда аасісадідс дсідсаддас 7680
Ісдісдайс дісідсаддс саїсащісо даддаддадс дсааддссдс асаасдсаад 7740 "7 садсаасаад аададсадад асісассдад дсаддаайда асісдісой дісдсодсася 7800 соісдідссі ісіссасдад сдашсісс дссаїсссдс дааюдсіад сссосіасаді 7860 сцосіссіа сісаддаїдд Нссдсідса сссдісаасс дссссасіаа судайНсідсі 7920 дсісасддад сНаїссіда щідіад 7947 «2105 36 20. «2115» 6744 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 36 аддссасда сдсссддсда саададдас сддсдссдсо ссддсіссаа сіаснссад бо сісдаюдсдо ассдсаадсу саасасдісс аасаассдса дсаасіасдд сдасадссої 120 дасасснсяо дадассаосії задсіда дадаїдсіс сісссаасас асадддсдас 180 7 аассадаїдс дсддсдаї9 спасададс дчасшосоо асдаадідісє даїсданій 240 тдсідсдадо їасідіасаа саадіїсддс Псосадісад осадідідда саассадсудс 300 дадсасдідс Ідсідсіай ддссаайсс ааддсусдід ссаадсссса ддасссісся 360 ддасассаса ісдісасдсі дсасааааад сісаїдадса асіасасдда аїддідссад 420 нсаїсдаса йсссадсаї сісдіасісуд ддасадссас адддадассі саадаасссі 480 7 сідсасащод асапцаїдсі сносідна сіаїддддад адосіддіаа сідаддсаї 540 аюдссідаді дссісідсіта снаїассас садісдсіаа асподсідаа ссаддасис 600 сісддісадс адааадіасс щаадонодо їасйааддс аддідаїдсо ссссаїсідд 660 ааддадасої сіаасаїдса даддаадаас адспдоадса адааснода дсасасссаа 720 дюсасаасі асдасдаїаї саасдадіа! нсіддаааа ааасідісі їаасуіддаї 780 7 дісасдсада Іісддсдадда асідассаад ааодсасасса адасаїасіасдадсассдс 840 адіаїснса сдсісдіасі даасіасіас саїашнс аднсаасаї даднсаю 900 адяодіссіда дасдаїс9дд стШаїсісу дссаїсісдс сіадсддадо асадсадідд 960 нсдсісаді Ісдддістаї дададаадід дідадссії ассадаааса ддасойаад 1020 сідасстаса тададацнаї аїсдсссіс Іссісдаїдо дансідсаа дассдіссіс 1080 60 дааадсаїдіс асддаюдаса сЦасісасі дссадщаді сдїсасадас дісдісісЯї 1140 їсднсаасі асдатддідс сс сдаатюсісї ддааддсос дисосіддс 1200 ашсдаосі даїдаїсіа сассссдійу аїсасдадса адаасасада асідсісдаї 1260 ааддсідсас соддсдісіді (дссіасаїс сідссіддсу саснанаї сдісдідсад 1320 дссщшосіс саїсоЯдної аассаааїсд Шосддсса адшаїссо дадоддадаа 1380 "7 асддсіасу Нндассосаа саїддсодссії ссасдадсі ассадсісаа діасаїсасі 1440 педдаїса Неіддас одсідаадосо Недісісаї асисайсіадісдссса 1500 пдайсісс сдісасддс сашасдаяд аддадсісу адіасодіад саайшной 1560
Ісднеосаса асісддаді саїсдсідсо сіаїддсідс сідідаїсії саїсійсаас 1620 тасдайассс адашасії тассдідне саддсіасас Нодідасоїісадодісіс 1680 7 аїсадаада сюдсдадаї Ісасддсаїс ааддадаца ссааддсні ссдіддасі 1740 ссасаасісї Ндассадаа ддчнаюасс ааїсіддсіс дсісдаасда сдсідсодудсі 1800 дасддаїсід сідсідсайа ссадісосаа аїдаюсідс дсИсдідої сдістддаас 1860 дадайцоіса асісднссд сдаадддас сіддоддасо асааддадодс їдссаїссід 1920 садіаїдаса іІссададсіс дддсдасоїд нсдаассід ідйссціс ддсдддіааа 1980 7 сідаюдадаад сісіддасіа сасдойнаад айоссаадад аадаїааоддо сдасісдсад 2040 сипсаадюі асаддіоса дааддацої сіаїсддсід дсдсадсі сисасадсс 2100 адсашюіасд даїддадаос іІсдсіддас адідасдаю садасайсі їдадсосід 2160 сдісаааїдоу аддсдацос Ідсдаасадс адцсаїда дсасонща сдссаададі 2220 сіадідсадс ідсдсасаді сісдаюдад йпссіддаад сідідада ісідсссдас 2280 7 ссддаюсас адіссісоса саїдасаїсо ісісдадідс асассаюдо аоногсаї 2340 аасісдіда ссаадада ааассідсіс аасодсіайс дсаййнсодс саассдссся 2400 дадсісоасід ссааднсад саасісіаад Псідсісда дсдссаасда сіасдідш 2460 осідсісої дссісодаа ссіднссас аасдасасід сдаїдодідс юсіасссдяї 2520 дсоассісі Ідаїдісдсі сдадааддсс дадсіаюс сссдідідссідадосісаа 2580 7 соїсдісна дашсаї даадісісії Пдаюдаса ісссосадії дасдісідюд 2640 ааддадайцс асісойсіс сдісдідасу ссунсіаса аідааадчіді днНдаїсіса 2700 пдісададс Юдаасодаїсс дсюддссаас сасссоддісі Ііссадаадаї ддаддадаад 2760 ддсаадааса Насіайсі даадіасід айассаїсс ассссдадда дідададаас 2820 пшодаас діанодаці дадсасідса даддааодсас аадссаасіа сссдсіддаа 2880 60 аїссаїсідї ддосаїсдіа ссоїддісаа асссіддсас аїасіднса аддіаїдаю 2940 сідїасдадао адсіаїсаа дайсіїсас Ідасідада поднсаадісссддсаад 3000 соадсддадс адаадсаддс Ісаасндад дасаїддідс чісюаади сісдіасай 3060 ддсощіс аддаюіасод їаадсаїсдс дсададддса аддсссаддс сдаїдаїаїс 3120 дасіаїсідс ісаадасдіа сссдаассід сдідідссі асдісдасас саїсдюаю 3180 "7 дасддащдаоса адсадісда сасдаїюно аїсаададід ааддсааїда аайдссдаа 3240 дшассасі асдадсідсс ддадасссяа айсцодід ааддіаадсс сдадаассад 3300 аасаасдсдс Нсосайсас дсаїддсдаа їассіссада сдайдаїаі даассадсад 3360 сасіаснсу аддадідієї даадацссд садснса ідасідсіда ссідсассосі 3420
Іссаадааас сідідіссаї тапддіаг сдідадсаса Шісасоддо їаасосіса 3480 7 Ісдсідісаа адшаацісє дададсаддад сідаїйсо дасосідіс ісадсоїід 3540 сіддссдасс сдсідіаі Ісоіїадвсас їасддісасс ссдаїаші сдасаадаїс 3600 ацйдсіагдс сісдщаїда адщіссаад дсіссаадоу дсанаасії дісїідаддаї 3660 аюйсосід дішаасіс дасаснсаї дааіо9 дасодсасої ддадисаїд 3720 садшіодіа ададчісдіда юдосісід їсдсадац ссашйсда додіаадсід 3780 7 дсіаасодід сіддсдадас аісісісдсі содадосіс аїсдіаод ссаднсад 3840 даснснсс дісідаасіс саїдіасіас Ісдсасасда ацісіасіи сдссасоюдда 3900 ащдасаацоя ісасдассії сдідіасаїд їасідсаадд ютасндас ісіадсддаї 3960 дюсадсадс аданцідіа сдаїадаас асдассосід Ідаїсассда даасаїсдса 4020 аасааснсд асддасаці дісассдаї сідаадосід дсідаасас дсадісіас 4080 7 аїссаадссд діасшссі садснеоса сісащіаї шіаснсодо їдааддадас 4140 псоаюсаса аіадасісо айсаїсдас аїдаїсаїса сосідадсссідссНсНс 4200 дюйссадад ісддіасдас даїдсасіас псдасааса асаїсдідса сддідасоасс 04260 аадіаїсада сіасаддісд ддснсаад ашсссодід адасосідаг осідсідіас 4320 ааддсдїаю саадсіссса сіаїсдааад дссюддадс ісаїсддон дідісцогд 4380 7 тасащасої ісддіаац Пасаїсіді сддассдаїд сддсідссаа сдасаасасі 4440 шасаїссо асіасідіда дасідсісад дснасдада їдсадасоуй сісддідідЯа 4500 нсаїсісса Існдідаді адщдадісса Пссісіса асадщасодод ісіддасіас 4560 аддаааасса аддіддаїаї ссадсадідд юдсашіода ющшосссс сдаадасіас 4620 ааддасдасу асссддссаа саадддадас їддатадоасі ддіддаадода сдаїсіддад 4680 60 садсідсася дсіссаасаї даїсісдсдс дісасддіса іІссіссдсда дідісдссас 4740 нссідсіса щісіасої дудсіасасіс дадасодіссо асдісашіа сдіддсдїас 4800 1сойсодІд сідсддісас дасдайцой сідснадсо юднссадд сшодіад 4860 додсаюдсодсі ссаїдадссс ддащдасосос дсідідаїсі асаддддас сдісдсадсс 4920 асдщасода ссіаснсії дассаснодд аїсоюсідо асіддааай саадіасдсс 4980 "7 ащісдсісї дднсодсста соаїддсідсо сісіасодіа Ісаасдадід спссдсад 5040 тддаашсс саадсісдіс даїсдсіддс апйосідіді їссадсадсіасаднссіс 5100 псдасша ісісідсаї юдіаїйодаїс аїісссдсно дадісащіс дідсаїсссд 5160 пссюддааса ісаїссадас дсдіаюдаїйд їасаасдаад дсісіссаа додісаїдісї 5220 дснснсос авдіадссії сісісїіддса дссисаїдо даассідда соддіаісдді 5280 7 дісдасщас щйсаасії дсідісаасд сіддадсаді сідсдадш сдсааднас 5340 дісдісасої асдаїддсої ссіаадідда аасдідддсо аїддсассас дасдїасаюд 5400 сістасддіа ссідідідаї дадіасдаїс аісосідасі Іссісаасіи сцссіддаї 5460 саїсдісща сіайдноас дадідадісіс Нсадіасос ісоддіаді ддсідісаді 5520 дссаасдаса аїсіссдйс дасодсідсю агдссідсдіа ісдаїсідсі їддадссісд 5580 7 тдсдаїайс ідсіассдіс дндассаїс їасаїсійсо адаїсісдас сааддадад 5640 сдаддсааазд ссашниоїй дсідддааїс ддсісаїса їісддсадш одсіддоасддс 5700
З5 ашсдсда ссдідаасса асщада!гдао аїсіддсада сошаосідс сідсаїсад 5760 аїсдсссідд ісасдссаді сдісаащіюд Псссадада діссоїасід ддідсіддаї 5820 сдсаадддсі дддасдссід дааадссіді сісоНаїсс ідсдісаїаа ассідаїдіє 5880 й саададдадс ісааддісаї дсдадаадад дааасддсад аїдаадодсуда сдссддсдсеос 5940
Тасаадйнсс ісаїсддісі сносісаїу сісдідіссі сісідасіасіддшсосіс 6000 аасоссіїса ісадсіасаа дададсдадс дадіасасдд ассаадасса осідіїсоїд 6060 аасоасдаща сдсюсадаї сіссдаїдсі дсдаїсодсса ісісіасаї сдасаадсід 6120 дассасааді сдайсісїї сддаасоцо аїсссіаїсо сіаісі ос щдодсансід 6180 7 доусинсаасд адаасісада даїдсіддда дасааададо осісдодісі діассісаді 6240 спдіадіса ідсісаюіа сисисаю доадсідаса сдадсісідс ісідіддієс 6300 дсаюсаїсод дсашнсаа їасісдсддс сососсісої ссассассаї дсіднсоусі 6360 аїснесйес ддсоддаїаї дддстасодіс тасндсаса сддасдасіс даюаюсад 6420 аасдааїзай ссіаїсісіа сдссаїсоса ддснсадія ісдісосссі ддідсідна 6480 60 аддодсдсад дсассаадаа даасоадсцдіс аїсідіасса адісадаадсісадсодсдаї 6540 сдсдассдіа ісасісдіаї дсдідссдаа сдідсаадіс дсаасасоусу дасодссідда 6600 асюсдсдсс адсддааїйсі садісоасоїд содіссааді сдаасодсідд сддссадсод 6660 ддсаасдсдо сдсаїддс99 щасіассаа ашіасдааа сасссодссаа сдсідсдссу 6720 ссдсісаїдс асдсдсодссс діад 6744 7 «-2105 37 «2115 2462 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе й «4005» 37 ансдадада ННсдаас ісдасаїсо пдсаассаї аасцдссід сайаадаю (610) сіссісаасі діасссащс сдадсассса ісдасісідс садіасдац сисассааа 120 7 дішадісс асаадаааад ссдааасдіа сащісдіаа сдудаадссді дсдассцй 180 ассонсодід сдсіддісіс асдіадсійс айсіссійс Псссіадссадсааадаса 240 ісісссаада їаіїсссадса апдісіаїс дднаадайс ааддадіааа аїдсасісод9 зо00 сасіднсіс дідсісаасії Пддсшоа ісасдадн даїсіссіса дадсоїдссу 360 асісдаїдаї саааїсісодд ісіддайда дссссіддаї ддасундасасссссдада 420 7 дюсасісаа сдісасодісод Іісдсддадаяд агасоюдас ойодісаїаодсдасдааї 480
Наасойнсс Іддодсоїааї Шасдсссяо айсоддаїса садіюдасоу дсунпадааа 540 їдсссдасода іщдісаадса дсісісдааї асіасадсії сааїаїдасс даїассдіаа 600 сддааїсодда содісаюаї дісйссдда їааадацаї ддаададдас аасаїсассі 660 асасдацід даасасаїас дсіаадссід сддашсда дасссаїсас аїдіасіасс 720 7 дадссоддіаї ддідсааїсс ддаасаааї ісідцсса аддаддааду аїддаадчідд 780 дасісааїї ассадсааса ассадсісіа діаассссда іаїдодідас аїсаааддіє 840 дсдісаадас даасадснс їаїсссасодї аддссідаіа! Ндосісіа ддаааїсіад 900 дасдадсісї ансісссаа іІсдассадіє ддашдідадсс пддаднас дасуааї 960 асдаааааїй! сдааїссаді сааадааїса дідсодщіда сддіааїсса ддаадіддаї 1020 7 щааїдсіса ісааддасда ддадсдссоду ааагада!сі асюдаадда ддадоаіад 1080 ссаїсіссас аадіаїссад дісодсіссід даадсссда іааайссді аїсайудсіс 1140 ссасддайїда іІаааацдіссс Нсідсдісі Ісасддсосда дідіасіасіайдддсіа 1200 асшессща даїсссадсс ааадсдіасд аадсісдада Надааадс юдіаїсаад 1260 дастіасодіа сдсіссаааї асісшаїа дсссадндо садсідаїд саадаїссса 1320 60 ааасддащдсі дсааадсс дадааадхосі ісасіїсіаа їасдідіааа ддадісааюд 1380 сощіссадс Нсоадащас ддаїасісся ашадасії даїсдасддо аааддоссід 1440 ацасіддда доНаасааа дааддсдосі сіаїдссоді їапйаасода асасдддад 1500 сшссіаюд дасссюдас аднссааса аааааїнс сісіссоНа даїдсддаад 1560 аасссаадад їаааднаїд даассансяо адіаїсадаї ддасдсссідіссдсіаан 1620 "7 додссадіїса дсісдсадса їагасаацдії адідаааїйа ссаадісдаа їдоддісаюд 1680 дсісасаадод Пасайсдс юдаїдаїсо аддатаної дайшодаа айссадссуд 1740 адісддісда даашдісса саадаюсід ссаадіссаа сссіаадааа сісаїднод 1800 аадаасссаї діасаїдаїй Нсаасодісу сісщісаас іаднпддудіассасдссас 1860 сдааїссадо дісдссаїі сдіддадад ддадсаацс дсаасаїаас дсіаша 1920 7 асдашесс сашнсаїд аадаїсдасі асайсдіаї сіаїсаддаї сісісноса 1980 асіссасдаї ддсіаїсдад дідасссоді сіасісаїсс дасіааасаа ддаїсдадда 2040 аїсасайда дадіадад асдасддада агааашюдаї дадойсас ддіддадсса 2100 айдсаадас ІФаїаасдас щіасоддіса діасійсіса сашідаса ддоааайціа 2160 дсаадаааса іІсдсідіада ідсддаїсії ссдаїосно додіддісса сойдсасаа 2220 7 сіссасіадс Юаїасадсд ааіддадаад дсисодасс ассаасадн айасдадсі 2280
Іданодідс ансдісай дідсіно9о Ісшщаїдаої діасаадаа аддассаас 2340 дсадсаадаа додсдаїщаїд доадсіддода Насісаасс адсаайсіс іссаадаїсд 2400 ададчдасода саїсссасді ісаааіаааа дссададсодо сісддаддаї ааддідаїді 2460 ад 2462 «2105» 38 «2115 942 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 38 адодсіссас ідссаїссдс аассндасс асасссдасод ддсіссіді сасадсіасс (10) ассдссісдс адсссНсда сдассіадії дасааддісуд ададідаосіа дсдосіаїд 120 7 ссіассассс саааддсоді ддсісссне ссаассісса аассдсаадд ісіссадсоді 180 псдссоуне ададсоїдса ссідсдсдаяд юсісодссод аднссісду сасснсЯїс 240 адагсаісі Ісддіаддодо сдісаасаас саадідасса асісасасда сдссаасадс 300 асдщосіса дсаїсааїаї дідсіддада апйдощіас ісаїсодсоді сіасідсісс 360 дададсаїса діддіосіаа ссісаасаса дссощасдїі ддсасайцо соіасадс 420 60 сдістассаї ддіддааадс асссддуйНас аїдаїсісас адсіайдод сусснсіді 480 ддадсцса Наїсіасої саїдсадіас садаассіса асдісайда сссдіаїсдс 540 дадассасас ададсадсії сісдасдіаї ссдадсдаса асаїсіссаа сіасасадсс 600 нстасассу адіїсаїсдо їасідсіаю сідідсіса діаїсіасос саїсасддас 660 аадсдсааса даїсідсс94 ісісдюддчаої ісіссснсу ссцсідісї ааіїдаєсаю 720 "7 дсондадса ддссшо9о садаасасд досіасодсід Юаасссідсасдідасис 780 ддсссссдса іІснсасддс саїсасоадос дддасісса адаісшШас сасісддаас 840 їастаснсі ддаїсссдаї сдщддссодаї іІсіаїдддсу даацйосідо осіддасіс 900 таїсдасідс Подаоадаї ссассассса ссссісісадї ад 942 «2105» 39 «2115 1636 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 39 ащіссдасу ассаадідсс ассуннсу сісддіасда аасассцнас асдсадасд бо їдсадсодсас адіїсадада ідасіаасід дссадсідс сдсіасуіюі ашассада 120 їІаадссосос сасдаїасії сдасодїасодї сдаісдаа соїааашо содадсісяі 180 7 дісдссааад їІасдісааас ааддіадасу аддааааад ідіодсісіа аасаїсадс 240 щадасша ддщасісі Ісіаадсісуд дадсадайс адсасдсдас дсадасісід 300 даддасійсс дсаасддіаа ааїісдссссі даїсаднса аддаїсодаасшодааї збо сісдссада аїасдаааса адсдасада адіассаа спуідаш посідасяї 420 шодідага айдааїсда їашщіадсої асдадасідс саїдсасссі садасіддсд 480 7 адасаднісс дасідідн сддсідісду сфсдідсс Юдаасаї сссашоса 540 пдосащсі дсісдсіссї дссасддіаї діааадісії дсідсасно іаасааїадс 600 шаїшаа Шшаааїйдсі саснааага дсцасаді дддааасас даїснсда 660 сааюдоцйа ассададсіа садсдссдді нсаасіасу сіаассдсаа сдссадсаді 720 даасаддаса асіссассаї снсадіасу ааднсісда дсіааїддс снсінсад 780 7 сонсіааса сддсістщо саїсдіаса сададісдіа сдсіассодсоу асосісаїді 840 спосісдас їассайдаї сіддаїаада даюдадаа адссаадада сшісіссса 900 дсасдсойе сіссісдда аадднаааа сідсіаааю ссоаадсід іїдсіссЦаї 960 дюасідаа! шодаосід сааснодаїс адаїдданос Шсоносі дісасдадся 1020 саддідсіїї саасдссоід Ісдагсасі Ісаасдадії ссадіасаї9 їададідісї 1080 60 юдсасюдодаа агадаїйдсі днддсіса Нддадідю сщдаїдсоун асадададуд 1140 аайдаїаєс аддасдадс асддадайці Іісасдддсді їсаойоссо сіддасдіса 1200 дісасіддс саадіддсас ісасосдіаї дсдсіассс адсссадіа сдіссісдса 1260 пдасаадсії сісподаї даанагцціс їаагайцдаої ддасноддас адішосід 1320 сісссдссаї ассідїтаюа даїсадааяд аааассааса ісаїдсссаа дассаадіас 1380 "7 ссдаадсно сідсддадсі сдаїасаїдс апашсід ссаїадіссуд сддіаащюад 1440 сіааснаїй! дсдісісідс сідсаїсіаї дагадісдід Наасода!ці дісідюоЯаЯдЯа 1500 їдссадссс адсосідідд сосісцссс дсаднддда асдашсодо сідасадсяї 1560 тщадаадодаа Нссдаїсіс дддіддаїсо саасоддссад сссайсодіс асисаїста 1620 саасаадада аїстда 1636
«2105» 40 «2115» 960 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе
«4005» 40 ададсассд ссааіааада адсаїсіссс НОїдДдадс Нсдссдісі ідзасщосд (610) нсдссааад Насіаіс9до доссаасіс аїсааїсдсі дсадсаїда ссссосіасі 120 7 дсідасосса юдаадасда сдаїсдадіс сідсудщдасо Юааїсіаас дсідсадісї 180 ддісадсодсс їюйодісої ддадоааї ддадсіддса ааадсасосіасісадіаїс 240 пдасддса адсассідас дасідасдас асддсосіда іспсодісдадасадсис 300 сдюдасасода сасісаасдс Шааддасі Псонадід ссдасіддод дсадсосіся 360 дідасунсд саасдсасдс ааїдддснас ісддсідаса дсоадідда адааадаю 420 7 асдааасідс ададідааса сссддадсда содссааааді іасідаадої удносдтай 480 дасссаааді ддсдшШаса ісоссідіса дасддісаас дісдссосаїісадсісш 540 сіддсдсіас щадассіїс дсадсісаїс діасіддасо аадчіосіюдоад аадсісдас 600 аїсаїсісдс дсдаааасої асіддсаїйс сіаааддадо ааасададасісдасаадсс 660 асддунодс їадссасдса саїснсдаї дддасддасо ісідддсаїс ісаїдідсід 720 7 тазайсаїс дсдотасщі ддансїтаї даїссдайс адсадідіасідаюдадда 780 аадаїсссда діаїаадаї ддюддаасас ддсіасої аддаайдус сдасдасдас 840 садюдаааї дсдадасодаї дддсссааді даїдаднсод ассідддсаа сдсдсадаас 900 сдсдсаддад ддіадссда сдаїсдасід датдідісо аїдісассасаїсуійнаа 960 «2105 А бо «2115 510
«2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005 41 ададсдасзу діасіаадсі сайдссодід аїсддадасод аадасассодї сасдддасн (610) аїссісдс99 дідісдоасса іІсдаасддсс дадддаасса асшсісді сдісааассс 120 тдідсаісдо сайсссдаа аддайші їааадснад апаасіасіаасасдсдіє 180 "7 асаїасдасд діосідсадс їасіссааїс іІссосіайо аддссадш ссодасосіс 240
Ісдадссдід асдаїаїсодс аайаїссіс аїсаассадс асдіасддса ссіадная 300 аасссасісії даддіаїаад ссшШаїди Шсісасіс осідатананошоду 360 садуносід аддадаїсся ісассісіс аасасдіасд асаадассайісссасддую 420 сіададаїсс сдадсааада сісдссНас дасссадсіа аддасіаїаі садаадсус 480 7 дюааїсіса (дснодадо ададчісдюда 510 «2105» 42 «2115 1491 «212» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 42 адяоісдсід аадасдсдаї днсасддаа дсдаадасдс ссааддсс9д9 сдащіссад (610) 7 дссдоасадаї ссдісссдсі сісдссдасс Псідайса дссісдсоді дсідсіссю 120 сісссссс аднсддсі аісодісддс садсісаасс Ісасдассіи саасдасдаа 180
З5 дасдадідса асдсдсдасс іІстадісдас ддаасдідсс ісадшщшесс содісайадс 240 адсасддаа! ддассіщдаї сддаасоса юддвданціаяд дсодіаюдаг сдоддацдісіс /З00 донаїдаосо Наїсіссда асаошсдадї сдсаадаадо їапосідос даасуссдіє 360 7 дісашіїдо ссддсдсіі сайсааосо адіасдісда діаісісдді ішШаддіс /-420 ддасаїаїсо Ісдссддаї сосдісддаї щіосдасод діадаюда досіасаїс 480 адідадана сасссссдая ісіссдіаас Ісдіасоддса сойсаїдса додіаїсісіс 540 ісідссодіа існадіаді дассаїсаді НШсСсу сддаїассад їадсддасда (610)0) аддіасаїсуд ссдсашсс сонснНаас дссдацісі ісподсун содсассунс 660 7 оНснодіад ададісссдс діддсіно9 дааааддадсу ассдддадса дсодадс9а 720 дадаїсдсса дасшасодд сисдацс дісссадіад сасідасоїд даддаасса 780 ддіаїсааїа сідассідда дісададдаа сідідсдудсу аасадсасдааддсддсаса 840 пдісасідс дШсосс дсісшаїс аадсаасідс погдосісіїоддідіаїса 900 дсдсосаас ааснас9до іаїсаасдсу аіддсіай асісдіссода іаїснсісд 960 60 даюдсадода щісоддаїда Ісощюдаї досдісаїсо ідіасоідсі даюйцасіа 1020 ссдасдаща сіднососу анпдісддад сдансдоса ассдасддсіісідснасі 1080 даасіддссд ддашщШаї їадідсіаса одіаїаасії додсоснос дпдісдаїс 1140 дадаїасісі сіаісдісиї сададіаса Псоносді іспсісюдс дадсоюдвад 1200 ссденаїсі адссіаїсас ддссдсодсід Нсасддасі сдаїасосос сасідссаїс 1260 "7 Іїстаюідса іІсшаїсаа Нодаїадс аасідаїса Подсдісід снпсссдіас 1320 дісісддаїд содсіадасда діасаадші діссссша ддідассас сдсідсош 1380 пенснса сісадішо даїсссддад асідсаддіа ададсассда ддадаїссаа 1440 дссасунсс даїсіаддаа адсісадаад ссдащаща юпааасію а 1491 «2105 43 20. «2115 2462 «2125» ДНК «213» РНуїорпїнога іпі'ебвіапе «4005» 43 поаюсіасі сдадідссії снсіссаюд асдсадсаад асунсодсса ддсдсіддас бо дсссссдсаї іадсадссіа саїссасісуд сдасідддід саїсдсасда сдссаїсдсад 120 іссаїссдіє адіссадса юдссадісс аасссдасодїі ассісндас ааюдссддс 180 7 Ісдааадсса адідддіаії дсдїаадаад ссдсасддіс адаїссідсс дісадсісас 240 дссдіададс дсдааїаїся ііїсіадад асісюдадс асісддадді одсссунссс 300 сассідіі гдсіадіда адассссааа дісанддса сассцсіа ссісаддаа 360
Тасаїасаю дісдіаїсії ссаадассса ісдсідссю дсанааасс їаїдіаїсдс 420 їасдссащі асадсісддс адіадасдсуд ПоаднНааді дсасдадсі ддасіасаад 480 7 аадаїсддас щдассодасії сддісдсссс дадаацдіасі дссассдідісоющасдсудс 540 тддацдцісдас аадіссааад (ддссадаад аісшадід ааосіддаді дааддадаас 600 ссдаадаюа сдсадсідса асунодсід дадсадаасо ссдасдасдс сдадаадоасс 660 асдассадід ссдадддадс дадіаїсдіс сасддадасі іссосайда саасааїс 720 пссасссда сддадссіса ондасс айсюдасі дддадсісїд асіаїсддс 780 7 ааїссдйсї сддашіадс сасанодсу ісддссіаса дасідссасі ддасаасісд 840 аасасаагса щдасассіда ісісісодаї дсіссднда адасасісдод саїсссаїся 900 дачадюааї! шідсіадо сіасідісаї сдідссадас ддНсссісіасссасісад 960 асдаддсай шісаїда даюдаїсодіа їассдснсо садссаїсід ссасдаїіа 1020 тТасдсссдсд сасідсісда саасдсдісд Іісддссааса саодсаїдідс саадасдася 1080 60 аддассдас існдоссаї дадсдасодас аїсадасо саїсддсідаашассся 1140 дадссоддадс дасодсасаї Істдссонсе ссдаїссадіс сісаїдсісї дсадаїдіас 1200 аадаадсідс їааадішо ссадаассода дідіассссо сідадіссді ссасацосі 1260 садаїсосса аддсдадада адааддасд9 дадідосада дідідссіссідНандаа 1320 дадсісаада сддаадссаа ддсосіддда сісюдаасс ісйссідсс їсадіЧію 1380 "7 дюссадсіс юдаддсаа (ддассадас дісаасіасо діддадассі дасдааїсіс 1440 дадіасддас ісащідіда доїсадада содсіссайцо днодасісс ддадаціс 1500 аасідсісад сасссдаїас сддсаасаїд дадаїснода сдсдонсід сасідіддад 1560 садаадсаїс адіддснаої іІссіснсії сааддащдада іссдаїсоїд Шсосдад 1620 асддаадаадс ддіддсне дісддасо асдаасаїсод адасососаї діасдсдас 1680 7 даасадсодіс аадаайасої саїсааіддс сасаадісі асаїсісідд адсіддадас 1740 ссасдаюдса адаїсаної дсісаддодс аадсасасда аасдадссаа ддададієса 1800 нсаадсадс адісдащдаї ссісдідссі аїддасасас ссддсдідса ддісодаад 1860 сссаїдса!д ісшоддсіа сдасдасдса ссдсасддас асаїддадаї дсідйсаад 1920 дасдщсоіо ідссонсад саасатца сісддщдаад дісдсддси дадаїсусі 1980 7 саддсісдіс Кддассідд ссдіаїссас сасішціадс дадссаїсодду адсідсідад 2040 сандісну адсщдатюаої дсадсдадсс аадасасоса садсунсаа одсадсіссід 2100 дссдадааїс сосісдідід нсдсадаї!ї дссаадісдс опощаан ддасадсося 2160 соснонНода содсіссаддс Ідсасаїсад аїддасаадс асдоасаасаа ддіддсоасаа 2220 саддссаїсяа сіаїдаїсаа даїсаїдодсо ссіаасащо сасіддасоді сідсдассда 2280 7 дссаїссада іІссасдасаос Нсіддсоїд адісаддасі пдіссідіс Насідіас 2340 дссдсссідс дсасдсіасо іаїсдссдас ддассддаю аадідсасаї дсоддассаїс 2400 дсаааасісд адсідадсса сісдаадіо іІаададаааї діааддсааа адсаадсоїд 2460 аа 2462
Claims (52)
- ФОРМУЛА ВИНАХОДУ й 1. Трансгенна рослина виду бо/апит Ішбегозит або її частина, в геном якої стабільно інтегровані дволанцюгова перша ДНК і дволанцюгова друга ДНК для надання патогеностійкості проти ооміцету РРуїорнійога /іпієвіапх, причому нуклеотидні послідовності кодувального ланцюга згаданих першої ДНК і другої ДНК є повністю або частково зворотно- комплементарними відносно одна до іншої, так що з них може бути одержана дволанцюгова РНК, яка відрізняється тим, що перша ДНК містить: (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає послідовності ФЕО ІЮ МО: 1; або (Б) фрагмент із щонайменше 21 послідовного нуклеотиду нуклеотидної послідовності, що відповідає послідовності БЕО ІЮ МО: 1; або(с) нуклеотидну послідовність, яка є комплементарною одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б); або (а) нуклеотидну послідовність, яка гібридизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (р) або (с) за жорстких умов.
- 2. Трансгенна рослина за п. 1, яка відрізняється тим, що згадана дволанцюгова РНК являє собою тіВвМА або зівмМА.
- 3. Трансгенна рослина за п. 1, яка відрізняється тим, що згадані перша ДНК і друга ДНК функціонально зв'язані зі щонайменше одним промотором.
- 4. Частина рослини за п. 1, яка відрізняється тим, що вона є насінням або клітиною.
- 5. Спосіб одержання трансгенної рослини виду бо/апит (шрегозит, яка має стійкість до ооміцету Рруторнпікога іпіевіапв, який включає: () одержання трансформованої першої батьківської рослини, що містить першу стабільно інтегровану в геном батьківської рослини дволанцюгову ДНК, яка містить: (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає послідовності ФЕО ІЮ МО: 1; або (Б) фрагмент із щонайменше 21 послідовного нуклеотиду нуклеотидної послідовності, що відповідає послідовності БЕО ІЮ МО: 1; або (с) нуклеотидну послідовність, яка є комплементарною одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б); або (а) нуклеотидну послідовність, яка гібридизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (р) або (с) за жорстких умов; (і) одержання трансформованої другої батьківської рослини, що містить другу стабільно інтегровану в геном батьківської рослини дволанцюгову ДНК, при цьому нуклеотидні послідовності кодувального ланцюга згаданих першої ДНК та другої ДНК є частково або повністю зворотно-комплементарними відносно одна до іншої; (ії) схрещування згаданої першої батьківської рослини зі згаданою другою батьківською рослиною; (м) вибір рослини, у геномі якої дволанцюгова перша ДНК і дволанцюгова друга ДНК є стабільно інтегрованими для забезпечення патогеностійкості до ооміцету Ррутюрнійога іпіевіапв, з метою одержання з них дволанцюгової РНК. Ко)
- 6. Спосіб за п. 5, який відрізняється тим, що дволанцюгова РНК являє собою тівМА або 5івМА.
- 7. Композиція для зовнішнього застосування на рослинах для надання їм стійкості проти РРуїорнійога іпіезіапх, яка містить дволанцюгову РНК, причому ланцюг цієї РНК відповідає транскрипту дволанцюгової РНК, що містить (а) нуклеотидну послідовність, що відповідає послідовності ФЕО ІЮ МО: 1, або (Б) фрагмент щонайменше з 21 послідовного нуклеотиду нуклеотидної послідовності, що відповідає послідовності БЕО ІЮ МО: 1, або (с) нуклеотидну послідовність, яка є комплементарною одній з нуклеотидних послідовностей (а) або (Б), або (а) нуклеотидну послідовність, яка гібридизується з однією з нуклеотидних послідовностей (а), (р) або (с) за жорстких умов.
- 8. Композиція за п. 7, яка відрізняється тим, що має форму спрею.
- снення 0000 Прометор вима вектов мААРе ітром М 355 термінатою ГІ й З вБЕМА смисловий РТС ВЗ . рАНАСТО 0316 ; і МААРЬ інтрон З я зах зх - . пн Ч5ЕМА азуневноениий РИ ЕН 355 термінатов де вени ОЗ ТОМ я жк Ше Р Я смисловий й Б яИБОЮВ сенеловий й ТЯ РО ННЯ) смнеловий
- І.
- І! ВТО 03393 смисловий ПВНАГ НІВ СОА , м у й МАДРЬ інтен і Зввра "ВИС ОБ353 зитисмисловнії 355 Термінатор З 1 ВО АЯ? знтвемиєловий х ВОЛЮ янтнемнеловнй РІЗ ОВМЬ дитнсвисловий
- ФІГ. 3 «Діва межи І Я Мох промохор ОСВТУ/ЕСОВ кап ін ! с Норавз межа
- ФІГ. я
- «Юва межа и че 0 Моз промотор і 5 555 прометов рОВТолЕсоВкаа МО ОЗ ЯКМА емивеловай ВГ ЗЗЯТ М кі МАХРО інтром 2 - а ЧеНМЖА вазнесмигеловви РТ
- З. я М мае і ЗВ Термінатор Ярава межа
- ФГ. 5 віпані з що і кох ах ВО Я ОС ее рам в р У вм, СлівВкість до ампінліну хх ож У
- ФІГ. 6 ше сук ТОВЩА 355 промо однннніннененоюв 0 ЕГО 0046 смисловий -й де шо ча Те пр смисловний й Б Є 10357 смисвовни Я и ка с У Я ОРІОН смію ВАМ сСвА в Кк, ліМАРЬ інтмн о Ї в я є й Бу Шк: и Шо ой хх ВТ пз внінесмислонВ й Ка х Х х ВиО 30447 витнемиасноннй ва гене СИ ЗИ Й МЛ, ХХ ВІТО 00905 актнсмиолоной ВВНВНУ РТ 0ПО145 зитнемусловий з тепмінитю соб хе я пл шк Моз прометор ЛІВА МЕЖА ; Ш - ї ЩЕ чи .
- З ВВ й Е 355 терен гов зе ЗУ й З вин 4 шо т і А г, З вача у я . вок 00 ПРАВА МІЖА . рЯ5Р-МОЄ дю жо м:
- да Ше ЛІВА МЕЖА Я Ж МО5 примотоїв / Я нов - ва ніх Сод 355 Термінатор У М нітзаВ У я ЗУ промовою ь ях РО ОВ смисловий З хх РІТО, 00908 сепиотовий Ше наше У МТ НМ емнолоний яті х х , Му ФМ ладу зуту В ПРАВА МЕЖА ТК ЩЕ 08363 смисловий З 535 АМААРЕ нтрон З вменйй 1 РІТО ОВЗ6 зитисмисловнй БО ВПО о цМматантисмволютй 11 ВТО ОО антнемислови й 3 теру гук пухініх ун ко риувт г ще м 4вантисмнолонни 355 термінатор дк. бух
- ФГ. 5 За вромотою КЕ | чаАМА РЕ із й « З - птн гУТу 354 промов і Н Я Ше ам й ц ОМ ссссссооцій Дь, РЕ вк НИ ей ар ПРАВА МЕЖА Мов промотор й Шо ДВА МЕЖА Я У о ВчУМ НОБУРВМАІ РІО ОБО я ВК гу фо пи с Й п о НК : Ж т 5 ШИ ; з Ох й ве їх г й зве.
- Б ОО и а ча НН с Б в к Ше іе ж , хокУкк шкі як й як: Во Оу НЕ КК Еш ВІ
- ПЛР. свЗХ БоВо ПЛР. соб х віщо тая зеуугих зр я ско ; Шк ММ ша НЕ
- В.
- Ше» ще ме МО «воовюєвюнея» с: х вавацивн ЗВ ВО с в» я з ФГ 1
- 7-7 "ОО Зх З ЩО 0 ОК ВЕ.
- Б х.
- МН, в Її Ж с п ЗК НЕ ж нь в ше ЕЕ й Ф ш ши о НН Ша З Ж 0 деееюке ши п З ЛЕО ши Й яко КОЖ і, зо 45 47 45 нн.
- і. п ду ОХ оч З ме деможюовюдини: 01 ОДАНЕННЙ 55 прометор й о люскюві А Мч Кі іде екзан З Кк оввх мех дяк сш ьоя пов-тернінии» ОЗАМА РО ПУБ смисловий ЧА однини 0 ТІОЯВНІННИ ЗО5-промотор К й З, зпєЕюоні равм-тобо хана РІО ОМ ь -і Ккзан ліве З Моє зерміватор ОеВМА РІТО 03440 смисловий Ух Во У Е й З ГА хе і . | КМИН в
- В.
- У ВЕЖ зе детекторів с МОЯ яко с.
- хо.
- ВЕК ї с СХ ї а. о я З з КОХ ВЕК де нн ВВ сонне ша ше ше й й Бк.
- В 5 о ОХ що КК ж МО ко ЗСУ ВХ КЕН я о о. о м й о 5. о їла шк Не Б: НАЙ Кк в тим то5 ще х ФА
- ЗНЗ. пух ур тт х яких МЕ КЗ МВ ефе ВК ух ж що Де КЗ ПЕК хо ЕМ МОЯ г ПКНКН ПЕКИКН м НКУ Се 553 5555 М ОКО ОХ КЗ ЕНН ЕШКННЯ їх В Я - У я КЗ НКИ ВНУ т х Не Я Ко іш о е МЕЖ фс В юююсюєюю о ВОНО кю оюююю ко южккккикх що х У їі ИН МНЕ БУ і ПК ВО ща Н КОХ КК ння с ; КОХ КО ме ха. | кш-Е КОН ОК Б Н ЕНН ВО ОК мі 5 ОКХ Б ОХ ГО нн: ши м сс лк вк Же чук шок - В пн Б жі.
- Я хх За ГО 5В ЗАЛОЗ 2 са.
- В: ше 1 ВВ щі | НК беж ОК Не ї В і "а 1 ВО т ІЗ з їх 5.
- ВО - 0 киш я у ї ВО Ж : НИ я. 1-4 : ИН У Ії ож їі ВО Ж У ї УНК Ме зе : ПИ те У : ЕОВНУ БУ У ВХ Х ОХ Ж ЩІ ча : КИ ; ха У : ПОНИНІ : "их Ж : ОВ Н що 1.
- В і З що СОН фе Дт фен - Б і Зно ККХ : ІЗ СОНЯ : ВОК ї ек 1 ЕЕ Я з ме ВО о дев й-е 1 М с; ШУ ТО ЗОН ЕНН Ж іс : ВХ МНК КЕШ КО х ПН ОХ НИ Кай т ї ВО В м : ККННОННКИ НК КО ОМ І В ВХ КЕКЕНІ й х в.о кн ни С НН г «ук а чи Кк нн пе тка «й г. й ЗІГ. 16А с ЗА З ООЖ Я» я ве Зо ще Н КК КИ рах ДНК ВО т ЗО ЩО 2 ПК КОНЯ мс ПИККНК Кох КЗ ФВ пре Вт няння зе ПИ УКХ Ко КН НИ ТК КК ПНЯ ія НН ДО В щш о Бо КК СХ хх З КЕНЕ ш 5 ХО їх си ПОН ПОН Б 5 пе о ВЕ: ІМ Же ОК ВО ЕК КУ ОХ МК З "Те 5 ОБ ЗУ ж ПЕСНЯ ЗОВ ЗО Ше ше шен ие ра УМ ЗХ КИ Я КО С СЕ з ЗХ ОО дО г Н В ПЕКИ ДОУННННя хх Н З ОКХ СУ хо Н ЗНО КК ВО
- А о. о пише ще ше М Еж тав то ам щй є ФІГ 16 я ! Ж | кох і нин З : В с і КМИН т- їх і ВЕК Я ЗМ 0 ВК де м тих КО і КОКО «як МУ і ОК я с ПШЕИННИИИН Я вся і НИКИ ЖЖ ххх ї НН Ж і ВОК КК яко ох Н еВ ЕЕ і ХО що З і НН КУ ї КК і зх х ї НИК І БО В Ї НН ж х Ж З ї КИНЕ 3 Б Ж я нн НИ ПИ БК ! о о. о Я ДЕКО ех Ме ж Н КВК У УЗН Її НН ЕНН яко м ін ОК Ох ОС ; Дон До наш Е; Пн НН В ВИ, дб ВК коню В оконях га кур ух ї о тов КЗ ще в «ке ж ОВ. ох ЗУ Я з» КЗ ШЕ зх ЕК хе КК ге ЕНН жк я хх М У КН Х ЕН КЗ ве сл «вх 0 ЗЕ Ж ФС КЕ КЕН хе ММ М ОХ У ЕХ ву ЕХ Ко СОКОЕХ їх ЗБ ХУ НН З я КЕ ЗО їх з -е о З в СОЯ: шк: вини т ЕН Гу ВХ ще і СКК п З ЕН КІ ЕК вх ЕНН та ПИШИ Ж ОБОВ.
- НУ ку Ех о нн К о Еху ОХ - ПИНКИК х Ко м Її ЕНН денну ЕНН мч ЇЗ т ск х.
- Й - а Б і Ж і Ї
- ЕЗ .
- В Е но В Ї : і Бе Н МК ! Н Ж ПО і :
- М... | ; ЩОЖ ОВ фр ремні Я. ще Ж І | Й я .
- В я СЕ І 5 ах 5 о НК ШИ ЯН КУ Ж ії Б Я Ку о м хх 1 ЖЕ КОННН Кок Еш х Ж 1 ах ПКУ ОКУ ся о НЕ ЕНН НИ КУ Мох ЕК ОХ ння я ТОЖ і ЕНН Кн КМ ще ЖЕ ї 5 Соя Бе 5 В Е В р ССС мав Ес навнннни СОУ кто сх: КЕ НН ЕК ИН ПЕ Я ОО З 5 ї еОа В ху НК ПК У і Я х НК ше ке С БУ Е ЕКОН и ИН ща ЕК СЯ КИ ПЕК не о ку ще до мих Ко СК до КУ і В Са 5 У 5 МО зх до З за МУ К -е НЕ 5 М ВО 5 ХЕ ння КК МУ КИ Я х Вар ен В сою с НИ ИН М.
- ОК с - хх т « те п ст пише В В 5 пкя я Мне У в зо фу Ку и КЕ (о | І - 1 ЗА ї й 5 й с вп о о о п о ов вони ано ев х сх США: зни нн ння Е Б як 15 с НУ п п а а шк | НИЖ ЖК ОО хх КЕ КЕ що х й дж ну ча КЗ ЧЕ т А ВИ ш я КЕ ш ДН За Я ч-Ж ж с с НН НИ с п З З тА та ЖЕ У
- КК. х в-ва їх ях ФГ КВ зе ВИЛА вая і ли 2 : Х Ки їЕ Я ож сн ТЕМА. ж 75 М пон поповнено знннвваннн ХЕ і оо КУ Н Зо, ї рей і ЗНА ск НЦЕМТ я ! Якою й ВІНВАКХ : ор З НЕКАЕХ Н Ей й і : КБ ї й : й й В ДЕНОАСІЯМУ Ду претіннтннттннннксксннновкнтстникн ни п в в в В й ин: і ма що ! Кот вуж і их прдеей де ве о Вена : ПН ення се м на ай ИЙ 7 ї8 ЗХ їй 35 Дж жвя коКе ве :ч Хож-я ж ГО А
- Немпех ВАННА в-ва її ОКО КК ОК КО: С сх З ОО хх Те сх БАН ГО ов і (В ки ЗО уник нттх и о Є та в- о кажана ан а а А а а а а а а а а З ко. о ФОБО Ян Кивзаї нате НА ТАюВ Бинаве
- ФІГ. 20 ж Я ВО Ж ві Еш их 8 р - ВО ви а а р а а а В ї ВО Ж ! В они ЗОВ во Н 5 У СО КК, КЕ СК Еш -ее Б Бе о о. і -- ХХ КК КАК КЕКвнеи ХО СХ Ж й чн КН о НН о Но НН НН НН ЗИ в де яке ТІ НО я г КЗ У - я ще ге «и Як а КІ Б ки ко «7 ях я КУ КИ СЯ Ко Ко м Я х ах о щи КЗ щу т не хх к НЯ С ще ж К в -х ву Бех о Всю 75 -
- ПФГ. 3 ОВ тр МОХ пн нн м по пр р о п п п п по о п п пп п пп й і СО ши.
- Я ші ОО Ну КЗЗ п ВВ т а
- 52.1 ше шини ж лааШЮВМНИИО ПОН ща р- ОКХ сс нн ВО нн В нн ня К У КК ДОНУ УКХ МКУ ПИ Кк й рення ин не УКХ плат кннння МУК их ВК Я неккккктуннннння УМХ ченні кий ря ОНР Не ТЯЮе МУК ВиогоаикШен пен ши нн 7 пен в 5О пе о. пн в ВВ З о 1 Шлш ше ше ЕЙ: - фан МО пинннунняни ВОК. ХХ подинлнннку Ки ват На АБУ О Вина к ЧНО ШО й | о. ОО ння о ! п 6. шашиши ше ше шин с Шон ши шк КЗ : о. о. я З В я о Козве 0 АТОЄТАТ ВиповокГ.Я х . що М ШЕ. 3 о 0 о сен шен шини шишнни шиненни шк З щу Б о о о ше шен шен ше ее с щ о. о о сЕВ. . Пуєннн ВКККХ кенеккуйняня ХК. ння КК плчккжрчнкняя ИН плннюдннння Кен пнях Міиваві ОВетаТ- Ом ної а МЕ Тева АВТО БутанФГ. 25 по ВО ЩОБ ее 11 ення б і ДО Я а з ВЕН ш : Ен ЩОДО сере нти Мов ї ОКУ Х КІ ; о щк Ж і о лова У ло о с ро НЕ Фентях ЗХ стнтнеруненну ВУХ пери нт ВОВК чення Вивхеї мата нач МитоВвик с НЕ мк зн АКая Н ЗО щ 0 ВО ЗОВ ЩН Н МОХ ВЕК -ЖЕ 1 ПИШНЕ ОКО ВВ Кі 055 0. о Боян В Ж і КК КО УК МОВ ж Я ВОК КЕ ВОК СОККя ж о о о с шщЕ Б о що НУ «ення ИНОКИНИК пан МОХ ння У М ккнк киян ОХ сонячну ие УТА ЗТ МТУ ВиавеФІГ. хе | с Ми сен нн ве ої ши В В М НО В в що | с ХНА Ох ОО бен 0110 ення В о : 0 хз нини ши 08 ше «а | с с ни шини ши шани шини ши З : Ох 0 щ | 1 сГІ. прннннннях ОМ пн ері ОО кмину Севітев вчив «КЕ хх Ух смФГ. 5ЛІВА МЕЖА Мов промохтер шення МО я ь оду ернінатерК. З ї си ї урн ЗВ преметор ! БУША РО БКУЯВ і. ллкнносонно 11 ЕЗ ОВУ емнелОоВИЙ ї г не МАЕ ів З Ьч а песеетню ГЕО ОБО антисмаєлвий крану ів а 355 тевмівитов І й і ові х Х ПРАНА МЕЖА 7ФІГ. 29 ЛІВА МЕЖА Мов прометор Й з с св керів Її, те ОНЇ . о ЗБ вромото : БО5М МАГ РІО ОО 0, й ? 000007 РІТО 09308 смнеловай і Е нн ВІДАВ троВ З З у й пеня ВЕГО ОВО витнемнеловий ПРАВА МЕЖА З ФоД і ВА М БЖА Мов шумно в Я й 5. є Ж Мр я Ж Й ДУБ зерна у роб МАТ ОБІ "7 Ніл . і я 355 прометор З ДО РЕГООВЛОЗ смнеловнй Кк ння ДІААРЬ інтвов Х в щи о Кк зді т ВІТО ОУН зитнемиеловий г: и а чу уж вус ч сут сви хукя ВНИЗ з Я термі В ПРАВА МЕЖА м термнитор С у ВОК «ої и | || - ще ЛІВА МЕЖА Мов прометор в. ПД, й Фе р терміниторЯ У. Ся НО В, й ши о оомакААТЬ У» ки й : й СЗТ ЗУ смисловий ї ден АВААРО інтрон З що. Ком Пп нлоюю з я хх г За м ТО 19177 затненисловий пе 355 Термінатор ПРАВА МЕЖА рі У! ФІГ
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE102012016009.7A DE102012016009A1 (de) | 2012-08-08 | 2012-08-08 | Transgene Pflanze der Art Solanum tuberosum mit Resistenz gegenüber Phytophthora |
| PCT/DE2013/000446 WO2014023285A2 (de) | 2012-08-08 | 2013-08-06 | Transgene pflanze der art solanum tuberosum mit resistenz gegenüber phytophthora |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA121014C2 true UA121014C2 (uk) | 2020-03-25 |
Family
ID=49123606
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201501119A UA121014C2 (uk) | 2012-08-08 | 2013-08-06 | Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora |
| UAA201906232A UA122376C2 (uk) | 2012-08-08 | 2013-08-06 | Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201906232A UA122376C2 (uk) | 2012-08-08 | 2013-08-06 | Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10030251B2 (uk) |
| EP (2) | EP3456830A1 (uk) |
| CN (2) | CN104583409B (uk) |
| AR (1) | AR092075A1 (uk) |
| AU (1) | AU2013301984A1 (uk) |
| BR (1) | BR112015002330A2 (uk) |
| CA (1) | CA2881406A1 (uk) |
| DE (2) | DE102012016009A1 (uk) |
| EA (1) | EA027487B1 (uk) |
| PL (1) | PL2882858T3 (uk) |
| UA (2) | UA121014C2 (uk) |
| WO (1) | WO2014023285A2 (uk) |
| ZA (1) | ZA201500831B (uk) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102012016009A1 (de) | 2012-08-08 | 2014-02-13 | Kws Saat Ag | Transgene Pflanze der Art Solanum tuberosum mit Resistenz gegenüber Phytophthora |
| WO2016097331A1 (en) * | 2014-12-19 | 2016-06-23 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Plant protection from a pest or pathogen by expression of double-stranded rnas in the plastid |
| EP3101135A1 (en) | 2015-06-01 | 2016-12-07 | Universität Hamburg | Method of conferring resistance against a fusarium plant disease |
| CN105861509B (zh) * | 2016-06-21 | 2019-04-19 | 南京农业大学 | 一种疫霉诱导性人工合成启动子pmp3及其重组表达载体和应用 |
| CN105861508B (zh) * | 2016-06-21 | 2019-04-19 | 南京农业大学 | 一种疫霉诱导性人工合成启动子pmp2及其重组表达载体和应用 |
| CN106119246B (zh) * | 2016-06-21 | 2019-04-19 | 南京农业大学 | 一种疫霉诱导性人工合成启动子pmp1及其重组表达载体和应用 |
| CN113151281A (zh) * | 2021-05-30 | 2021-07-23 | 中国农业大学 | 靶向沉默辣椒疫霉纤维素合酶3的植物表达载体及其应用 |
| CN114854753B (zh) * | 2021-05-30 | 2024-04-26 | 中国农业大学 | 靶向沉默辣椒疫霉氧化固醇结合蛋白1的植物表达载体及其应用 |
| CN113564174B (zh) * | 2021-07-16 | 2023-07-25 | 山西大学 | 苹果黄蚜Cat-B基因及其核酸干扰剂制备方法与应用 |
| CN114805506B (zh) * | 2022-05-18 | 2023-08-04 | 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) | 寄生疫霉无毒基因PnAvr8、编码蛋白及其应用 |
| CN115976051B (zh) * | 2022-11-16 | 2024-04-30 | 西北农林科技大学 | 马铃薯StRTP7基因及其在抗病育种中的应用 |
| CN117384943B (zh) * | 2023-12-07 | 2024-02-27 | 西北农林科技大学深圳研究院 | 一种小麦丙酮酸激酶TaPKc及其应用 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999058696A1 (en) * | 1998-05-12 | 1999-11-18 | Institute Of Molecular Agrobiology | Disease resistant transgenic plants |
| BRPI0416713B8 (pt) | 2003-12-23 | 2020-02-04 | Bayer Sas | métodos de produção de uma planta ou de uma célula vegetal resistente a um fungo fitopatogênico, métodos para inibir ou reduzir a expressão de um gene de fungo e uso de uma construção |
| WO2006070227A2 (en) | 2004-10-04 | 2006-07-06 | Devgen Nv | Method for down-regulating gene expression in fungi |
| CN101056981A (zh) * | 2004-10-04 | 2007-10-17 | 德福根有限公司 | 负调节真菌中基因表达的方法 |
| KR20070085421A (ko) | 2004-10-21 | 2007-08-27 | 벤간자 아이엔씨 | 식물들의 해충들 및 병원균들에 대한 내성을 제공하기 위한방법들 및 물질들 |
| US8299318B2 (en) * | 2007-07-05 | 2012-10-30 | Ceres, Inc. | Nucleotide sequences and corresponding polypeptides conferring modulated plant characteristics |
| DE102008014041A1 (de) | 2008-03-13 | 2009-09-17 | Leibniz-Institut für Pflanzengenetik Und Kulturpflanzenforschung (IPK) | Verfahren zur Erzeugung einer Breitband-Resistenz gegenüber Pilzen in transgenen Pflanzen |
| US20100257634A1 (en) | 2009-04-03 | 2010-10-07 | Venganza Inc. | Bioassay for gene silencing constructs |
| AU2012320554B2 (en) * | 2011-10-04 | 2017-11-09 | Bayer Intellectual Property Gmbh | RNAi for the control of fungi and oomycetes by inhibiting saccharopine dehydrogenase gene |
| DE102012016009A1 (de) | 2012-08-08 | 2014-02-13 | Kws Saat Ag | Transgene Pflanze der Art Solanum tuberosum mit Resistenz gegenüber Phytophthora |
-
2012
- 2012-08-08 DE DE102012016009.7A patent/DE102012016009A1/de not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-08-06 UA UAA201501119A patent/UA121014C2/uk unknown
- 2013-08-06 EA EA201500164A patent/EA027487B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-08-06 EP EP18197772.9A patent/EP3456830A1/de not_active Withdrawn
- 2013-08-06 CN CN201380041856.7A patent/CN104583409B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-08-06 DE DE112013003952.4T patent/DE112013003952A5/de not_active Withdrawn
- 2013-08-06 CN CN201810390969.2A patent/CN108546713A/zh active Pending
- 2013-08-06 WO PCT/DE2013/000446 patent/WO2014023285A2/de active Application Filing
- 2013-08-06 CA CA2881406A patent/CA2881406A1/en not_active Abandoned
- 2013-08-06 BR BR112015002330A patent/BR112015002330A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-08-06 PL PL13759425T patent/PL2882858T3/pl unknown
- 2013-08-06 US US14/420,106 patent/US10030251B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-08-06 UA UAA201906232A patent/UA122376C2/uk unknown
- 2013-08-06 AU AU2013301984A patent/AU2013301984A1/en not_active Abandoned
- 2013-08-06 EP EP13759425.5A patent/EP2882858B1/de not_active Not-in-force
- 2013-08-08 AR ARP130102819A patent/AR092075A1/es unknown
-
2015
- 2015-02-05 ZA ZA2015/00831A patent/ZA201500831B/en unknown
-
2018
- 2018-07-05 US US16/027,855 patent/US10760094B2/en active Active
-
2020
- 2020-07-23 US US16/936,886 patent/US20200347400A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| UA122376C2 (uk) | 2020-10-26 |
| AU2013301984A1 (en) | 2015-02-26 |
| WO2014023285A2 (de) | 2014-02-13 |
| CA2881406A1 (en) | 2014-02-13 |
| ZA201500831B (en) | 2016-01-27 |
| DE102012016009A1 (de) | 2014-02-13 |
| EP3456830A1 (de) | 2019-03-20 |
| US20180305712A1 (en) | 2018-10-25 |
| US10030251B2 (en) | 2018-07-24 |
| PL2882858T3 (pl) | 2019-05-31 |
| EA201500164A1 (ru) | 2015-05-29 |
| EP2882858B1 (de) | 2018-10-10 |
| EP2882858A2 (de) | 2015-06-17 |
| BR112015002330A2 (pt) | 2017-11-07 |
| EA027487B1 (ru) | 2017-07-31 |
| US20200347400A1 (en) | 2020-11-05 |
| CN108546713A (zh) | 2018-09-18 |
| US20150225738A1 (en) | 2015-08-13 |
| US10760094B2 (en) | 2020-09-01 |
| CN104583409B (zh) | 2018-04-03 |
| CN104583409A (zh) | 2015-04-29 |
| DE112013003952A5 (de) | 2015-06-03 |
| WO2014023285A3 (de) | 2014-05-01 |
| AR092075A1 (es) | 2015-03-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA121014C2 (uk) | Трансгенна рослина виду solanum tuberosum зі стійкістю до phytophthora | |
| US20230062179A1 (en) | Methods for generating new genes in organism and use thereof | |
| Zou et al. | OsEXPB2, a β-expansin gene, is involved in rice root system architecture | |
| CN106573963B (zh) | 疫霉属抗性的属于茄科的植物 | |
| CN103201385A (zh) | 下调昆虫害虫中的基因表达 | |
| US20180346923A1 (en) | Methods and Compositions for Plant Pest Control | |
| US20190040410A1 (en) | Methods and Compositions for Plant Pest Control | |
| Van den Berg et al. | Advances in understanding defense mechanisms in Persea americana against Phytophthora cinnamomi | |
| CN104320968A (zh) | 棉花PHYA1 RNAi改善陆地棉的纤维品质、根伸长、开花、成熟和产量潜力 | |
| WO2016130020A1 (en) | Plant resistance genes | |
| US20170349907A1 (en) | Methods to Monitor Post-Translational Gene Silencing Activity in Plant Tissues/Cell Types Relevant for Pathogen Entry, Propagation or Replication | |
| JP2016052296A (ja) | 赤かび病抵抗性植物、その作製方法及びその利用 | |
| CN106336453B (zh) | 一种棉花抗黄萎病相关蛋白GaRPL18及其编码基因与应用 | |
| CN110747203B (zh) | 基因OsBBX14在提高水稻白叶枯病抗性中的应用 | |
| Khot | Silencing parasitism effectors of the root lesion nematode, Pratylenchus thornei. | |
| US10947558B2 (en) | Compositions and methods for inducing resistance to soybean cyst nematode via RNAi | |
| Perrineau | Regulation of class III peroxidases and respiratory burst oxidase homologs by biotic and abiotic stress in maize (Zea mays L.) | |
| Steele | The Transcriptional Regulation of Host Recognition and Prehaustorium Development in Triphysaria versicolor | |
| Sayooj | Expression profiling of micro RNAs associated with water stress in banana (Musa spp.) | |
| Carreño et al. | Transcriptomic profiling against Globodera pallida in resistant and susceptible potato roots | |
| Dombrovsky et al. | Rapid defense mechanism suppression during viral-oomycete disease complex formation | |
| Carreño et al. | Perfil del transcriptoma de raíz de papa resistente y susceptible a Globodera pallida | |
| Hoang | The role of posttranslational hypusination of the eukaryotic translation initiation factor 5A in Zea mays and Fusarium graminearum | |
| Hoang | and Fusarium graminearum | |
| Anwer | Genome-wide-association studies (GWAS) on the interaction between the cyst nematode Heterodera schachtii and Arabidopsis thaliana |