EA027487B1

EA027487B1 - Трансгенное растение вида solanum tuberosum с устойчивостью к phytophthora

Info

Publication number: EA027487B1
Application number: EA201500164A
Authority: EA
Inventors: Дитмар Юрген Шталь; Нора Темме
Original assignee: Квс Саат Аг
Priority date: 2012-08-08
Filing date: 2013-08-06
Publication date: 2017-07-31
Also published as: AR092075A1; DE102012016009A1; EP2882858B1; ZA201500831B; AU2013301984A1; US10760094B2; CA2881406A1; EP3456830A1; PL2882858T3; DE112013003952A5; WO2014023285A2; WO2014023285A3; US20180305712A1; BR112015002330A2; UA122376C2; EA201500164A1; US10030251B2; US20200347400A1; EP2882858A2; CN104583409A

Abstract

В изобретении представлено трансгенное растение вида Solanum Tuberosum с устойчивостью к Phytophthora. Изобретение касается трансгенного растения вида Solanum tuberosum с устойчивостью к оомицету рода Phytophthora, трансгенных частей такого растения, способа их получения и композиции для наружной обработки растений. С одной стороны, представлены нуклеотидные последовательности SEQ ID NOS: 1-43 из Phytophthora, относящиеся к механизму индуцированного растением-хозяином сайленсинга генов в растениях картофеля, а с другой стороны - фунгицид для обработки растений.

Description

Настоящее изобретение относится к трансгенному растению вида Зо1апит !иЬего8ит с устойчивостью к оомицету рода Рйу!орй!йога, трансгенным частям такого растения, способу его получения и композиции для наружной обработки растений.

До сих пор фитофтороз, возбуждаемый РНуЮрШНога тГеЦапх является наиболее распространенной и самой экономически значимой болезнью картофеля.

Во всем мире ежегодные потери урожая картофеля, вызываемые этим патогеном, достигают более 20%. Растет стоимость таких потерь. Это требует применения дорогостоящих средств химической защиты растений, так как природные защитные механизмы растений для борьбы с Р. шГе8!ап8, приостановки развития болезни и ее подавления не являются достаточными и не действуют постоянно.

Известно, что такие природные защитные механизмы растений, как гиперчувствительная реакция в месте поражения, лигнификация клеточных стенок, образование РК-белков (имеющих отношение к патогенезу) и синтез фитоалексинов способствуют повышению устойчивости, но одновременно всегда сопровождаются большими энергетическими затратами у зараженных растений, а значит, приводят к снижению их продуктивности. Природные защитные механизмы растений включают также экспрессию так называемых генов устойчивости (К-генов), генные продукты которых взаимодействуют с генами авирулентности (Άντ-гены) микробного патогена (ген-на-ген гипотеза) и таким образом включают специфические защитные реакции. Однако такая устойчивость может теряться в случае, когда, например, патоген Р. 1пГе81ап8 не участвует в синтезе Άντ-генов, поэтому распознавание патогена и последующая специфическая защитная реакция у растения-хозяина не проявляются.

Иге е! а1. (1998) показали, что двухцепочечная РНК (Й8-РНК) может запускать последовательностьспецифическую деградацию гомологичной РНК. Исходя из этого, вскоре были созданы трансгенные растения, которые в результате индуцируемого растением-хозяином сайленсинга консервативных и главных генов, например, у нематод или насекомых семейства Ьер14ор!ега и Со1еор1ега, по механизму РНКинтерференции (РНК-ί), способны проявлять устойчивость к этим паразитам ίη уйго и ίη νί\Ό.

Кроме того, было показано, что взаимодействие между растением-хозяином и фитопатогенным грибом может означать проявление индуцированного хозяином сайленсинга генов (Ьо8!-шйисе4 депе 811епсшд - НЮЗ) (ЕР 1716236).

Уап \Уе81 е! а1. (1999) вначале применили механизм сайленсинга генов Рйу!орй!йога для проведения функционального анализа этих оомицет-специфических генов.

В международной публикации \УО 2006/070227 впервые описано применение РНК-интерференции для борьбы с грибными патогенами на основании контакта άδ-РНК с грибными клетками вне грибной клетки. Здесь же предложен способ получения патоген-устойчивого растения. РНК-интерференция может быть направлена против одного или нескольких генов патогена, а также против нескольких патогенов. Гриб Рйу!орй!йога 1пГе8!ап8 назван в качестве возможного грибного патогена, а растение картофеля в качестве возможного растения-хозяина.

Предыдущие исследования дали начало гипотезе о том, что индуцируемый растением-хозяином сайленсинг генов не работает в отношении всех генов, поэтому для функционального сайленсинга важное значение имеет выбор целевых генов. Показано, например, что редуцирование Н+-АТФазы плазматической мембраны РпМА1 Рйу!орй!йога рага8Шса под действием индуцированного растением-хозяином сайленсинга генов не может быть значительным, чтобы обеспечить эффективную защиту от патогена (Ζ1ι;·ιπ§ е! а1., 2011). Это также свидетельствует о первостепенном значении выбора целевых генов для обеспечения надежной защиты от патогенов (Уш е! а1., 2011).

Недавно была предложена система скрининга, призванная облегчить выбор подходящих генов паразита для создания конструкций сайленсинга в целях получения растений, устойчивых к патогенам (ИЗ 2010/0257634). Авторы идентифицировали также подходящие тест-конструкции для индуцирования фитоустойчивости картофеля. Целевые гены для этого определяли либо на основании биоинформационного анализа геномных последовательностей, либо на основе гомологии между последовательностями главных генов и факторов вирулентности известных модельных организмов. В этом документе отсутствуют какие-либо указания на гены по данному изобретению для создания устойчивости к оомицету рода Р1у!орй!йога.

Способ получения трансгенных растений с устойчивостью широкого спектра действия против многочисленных грибов раскрыт в международной публикации \УО 2009/112270. По одному из вариантов осуществления способа по указанному изобретению устойчивость широкого спектра действия направлена против ипсши1а песа!ог, Р1а8торога ν^ί^со1а, Иготусе8 8рес., Рйакор8ога расйугЫ/к Егу81рйе 8р., а также против Р. шГе8!ап8.

В международной публикации \УО 2006/047495 раскрыто получение растений картофеля, устойчивых к Рйу!орй!йога 1пГе81ап8, по механизму РНК-1-индуцированного сайленсинга. С одной стороны, в данной публикации описано получение растений, несущих последовательности гена р-РНК Рйу!орй!йога 1пГе8!ап8 для РНК-интерференции.

Конструкция для сайленсинга, как показано в \УО 2006/047495, направленная против гена р-РНК Рйу!орй!йога 1пГе8!ап8, содержит 1-600 пар оснований (номер регистрации А454293), а также 32 п.о. кодирующего участка гена 18З р-РНК и целый кодирующий участок гена 5,8З р-РНК фузариозного патогена.

- 1 027487

При выборе целевых генов для механизма НЮ8, в целях применимости очень важно, чтобы она имела возможно более короткие, а предпочтительно вообще не имела, гомологии с генными последовательностями нецелевых организмов, превышающих 17 последовательных пар оснований. В противном случае при потреблении трансгенных растений, содержащих такие последовательности, или уборке урожая таких растений, экспрессия генов нецелевых организмов может подавляться (эффект выключения генов). Последовательность по АО 2006/047495 включает 32 п.о. гена 188 р-РНК Р. тГекШпк и имеет 100% сходство с гомологичной последовательностью гена 188 р-РНК человека (Ното кар1еик), свиней (8ик ксгоГа) и крупного рогатого скота (Вок Таитик). Ежегодное потребление картофеля в Азии в 2005 г. составило 26 кг на человека, в Северной Америке - 58 кг и в Европе - 96 кг (РАО8ТАТ). В свете высокого уровня потребления картофеля людьми и животными последовательности р-РНК РЕу1орЕ1Еота шГек1аик, описанные в АО 2006/047495 в качестве целевых генов для механизма НЮ8, делают содержащие их трансгенные растения непригодными для потребления в целях безопасности.

С другой стороны, в АО 2006/047495 раскрыто получение растений, которые несут последовательности гена катепсина В Му/ик ретысае и гена ΙΝΡ1 элиситина Р. шГекШпк для РНК-интерференции и таким образом проявляют устойчивость к двум растительным патогенам. Используемый при этом целевой ген ΙΝΡ1 кодирует элиситор. Устойчивость, основанная на элиситоре как факторе патогенности, не является преимуществом, так как ген ΙΝΡ1 элиситина не всегда требуется для заражения картофеля РЕу1орЕ1Еота иЕеЧапк (Катоип., 1998).

Целью настоящего изобретения является получение трансгенного растения вида 8о1апит ЩЬегокит, устойчивого к оомицету рода РЕу1орЕ1Еота, и при этом пригодного для потребления.

Согласно изобретению поставленная цель достигается тем, что первая и вторая двухцепочечные ДНК стабильно интегрируются в трансгенное растение, при этом первая ДНК включает (а) нуклеотидную последовательность в соответствии с 8ЕЦ ГО N08: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с 8ЕЦ ГО N08: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с одной из нуклеотидных последовательностей (а), (б) или (в) в жестких условиях.

Неожиданным образом было обнаружено, что первая ДНК этого типа особенно подходит для придания патогеноустойчивости растениям картофеля посредством индуцированного хозяином сайленсинга генов.

Первая и вторая ДНК стабильно интегрируются в геном трансгенного растения вида 8о1апит 1иЬегокит. Предпочтителен вариант стабильной интеграции обеих ДНК в хромосому растения. Однако возможна их интеграция и в экстрахромосомный элемент. Преимущество стабильной интеграции заключается в том, что эти ДНК могут передаваться следующим поколениям трансгенного растения.

Двухцепочечная ДНК состоит из кодирующей и некодирующей цепочек.

При этом нуклеотидная последовательность кодирующей цепочки второй ДНК является обратно комплементарной нуклеотидной последовательности кодирующей цепочки первой ДНК. Термин обратно комплементарная, применяемый здесь в отношении нуклеотидной последовательности в 5'-3' ориентации, означает нуклеотидную последовательность в 3'-5' ориентации, основания которой, согласно правилам спаривания оснований, соответствуют основаниям первой ДНК и располагаются в обратно/зеркальной последовательности. Например, если нуклеотидная последовательность кодирующей цепочки первой ДНК имеет вид а1дд11с, то обратно комплементарная нуклеотидная последовательность кодирующей цепочки второй ДНК имеет вид даассак Этот факт известен также как смысловая и соответствующая антисмысловая (обратно комплементарная) ориентация нуклеотидных последовательностей.

В частности, нуклеотидная последовательность кодирующей цепочки второй ДНК может быть обратно комплементарной нуклеотидной последовательности кодирующей цепочки первой ДНК по всей длине последовательности. В то же время она может быть только частично обратно комплементарной, т.е. обратно комплементарной по ограниченной длине. Нуклеотидная последовательность кодирующей цепочки второй ДНК может также быть обратно комплементарной по нескольким участкам, например двум или трем участкам своей длины по отношению к нуклеотидной последовательности кодирующей цепочки первой ДНК.

На основании полной или частичной обратной комплементарности нуклеотидных последовательностей кодирующих цепочек первой и второй ДНК образуется двухцепочечная РНК. Двухцепочечная структура РНК является результатом образования водородных связей между комплементарными нуклеотидами. Участки двухцепочечной РНК могут образовываться по одной цепочке нуклеиновой кислоты, частично комплементарной самой себе, либо по двум разным прерывистым комплементарным цепочкам нуклеиновой кислоты. Образование водородных связей может быть как интрамолекулярным, так и интермолекулярным.

Согласно настоящему изобретению первая ДНК включает одну из нуклеотидных последовательностей 8ЕО ГО N08: 1-43, при этом эти нуклеотидные последовательности являются нуклеотидными последовательностями выбранных целевых генов РЕу1орЕ1Еота 1пГек1апк. В группу этих целевых генов входят главные гены первичного метаболизма и синтеза аминокислот, в частности биосинтеза алифатиче- 2 027487 ских аминокислот (валина, лейцина, изолейцина) и биосинтеза глутамата, гены клеточной регуляции и сигнальной трансдукции, а также редокс-регуляции, гены сигнализации кальция, сигнализации О-белка, сигнализации МАР-киназы и факторов транскрипции, гены компонентов трансляционного аппарата, ген, выполняющий функции процессинга РНК, гены, кодирующие белки развития и дифференцировки, например, с функциями образования клеточных стенок, а также гены, которые кодируют транспортеры, канальные и мембранные белки. Перечень целевых генов Рйу1орй1йога, используемых для проектирования индуцированного хозяином сайленсинга генов, приведен в таблице.

№ пп/п	Целевой ген_Ш	Функция	Категория	Тип
1	Р1ТС_03410	Ацетолактатсинтаза	Биосинтез аминокислоты	А
2	Р1ТО_00375	Г аусторий-специфический мембранный белок (Ρίΐιχηρ 1)	Развитие/ дифференци-ровка	ϋ
3	Р1ТО_13490	Урокиназа	Биосинтез глутамата	С
4	Р1ТС_00146	Глюкозо-6- фосфатдегидрогеназа	Первичный метаболизм	С
5	ΡΙΤΟ_Οθ561	Биосинтез убихинона Со <29	Первичный метаболизм	В
6	Р1ТС_06732	Ацил-КоА-дегидрогеназа	Первичный метаболизм	в
7	РГГСг_07405	Пируваткиназа	Первичный метаболизм	в
8	Р1ТО_12228	Н АДН-цитохром-В 5 редуктаза	Первичный метаболизм	в
9	Р1ТО_15476	Малатдегидрогеназа	Первичный метаболизм	в
10	Р1ТО_18076	Фосфоглицератмутаза	Первичный метаболизм	в
11	Р1ТС 19736	Алкогольдегидрогеназа	Первичный	в

- 3 027487

			метаболизм
12	Р1ТО_20129	Ацил-КоА-дегидрогеназа	Первичный метаболизм	В
13	Р1ТС1 00221	Триптофансинтаза	Биосинтез аминокислоты	А
14	Р1ТС05318	N-(5 '-фосфорибозил) антранилат-изомераза	Биосинтез аминокислоты	С
15	ΡΙΤΟ13139	Треонинсинтаза	Биосинтез аминокислоты	С
16	Р1ТС_00578	Имидазолон-пропионаза	Биосинтез глутамата	С
17	ΡΙΤ015100	Гистидин аммоний-лиаза	Биосинтез глутамата	А
18	Р1ТО_1Ю44	Протеинфосфотаза	Передача сигнала	В
19	Р1ТО_21987	Протеинфосфотаза 2С	Передача сигнала	в
20	Р1ТО_01957	Кальциневрин-подобная каталитическая субъединица А	Сигнализация кальция	с
21	Р1ТС_02011	Субъединица В кальциневрина	Сигнализация кальция	с
22	Р1ТО_16326	Кальциневрин-подобная каталитическая субъединица А	Сигнализация кальция	с
23	Р1ТС_00708	Тиоредоксин	Редокс- регуляция	с
24	ΡΙΤΟ 00715	Тиоредоксин	Редокс- регуляция	с
25	Р1ТО_00716	Тиоредоксин	Редокс- регуляция	с
26	Р1ТО_09348	Глутаредоксин	Редокс- регуляция	с
27	ΡΠΌ 08393	РзОК.11 рецептор, сопряженный с О-белком	Сигнализация О-белка	ϋ
28	Р1ТО_Ю447	Гомолог стрессактивируемой протеинкиназы (8АРК)	Сигнализация МАР-киназы	ϋ
29	Р1ТО_06748	МуЪ-подобный ДНКсвязывающий белок	Фактор транскрипции	А
30	Р1ТО_19177	С2Н2-транскрипционный фактор (ΡδΟΖΡΙ гомолог)	Фактор транскрипции	Ώ
31	ΡΙΤΟ 06873	Аспартил-тРНК-синтетаза	Трансляция	В
32	Р1ТО_09442	408-субчастица рибосомного белка 821	Трансляция	в
33	ΡΙΤΟ 16015	Рибонуклеаза	РНК-процессинг	в
34	Р1ТО_09306	РпМаз2 гомолог	Развитие/ дифференцировка	ϋ
35	Р1ТО_03335	Каллоза-синтаза (Ркз 1/2 гомолог)	Образование клеточной стенки	ϋ
36	ΡΙΤΘ 05079	Г ликозилтрансфераза	Образование	ϋ
		(Ркз 1/2 гомолог)	клеточной стенки
37	Р1ТО_18356	Белок, связанный с синтезом бета-глюкана (ККЕ6 гомолог)	Образование Клеточной стенки	ϋ
38	ΡΙΤΟ 09193	Аквапорин	Канал	в
39	ΡΙΤ0 00562	Митохондриальный трикарбоксилатный переносчик	Транспортер	в
40	ΡΙΤΟ 08314	Суперсемейство белков АВС	Транспортер	в
41	Р1ТО_12289	Транслокация АТФазы с ионами Н или 1Та Р-типа	Транспортер	в
42	ΡΙΤΟ 12999	Транспортер МР8суперсемейства	Транспортер	в
43	ΡΙΤΟ 16478	Ацил-КоА-дегидрогеназа	Первичный метаболизм	в

Термин сайленсинг генов или сайленсинг означает процесс выключения генов. Сайленсинг может быть, например, транскрипционным или посттранскрипционным. Сайленсинг генов включает также антисмысловой механизм, РНК-ΐ и άδ-РНК.

Экспрессия нуклеотидной последовательности целевого гена РИуЮрЫюга ϊηΓοδΙαπδ селективно ингибируется путем сайленсинга генов. В этом случае целевая нуклеотидная последовательность может

- 4 027487 быть представлена необработанной молекулой РНК, последовательностью мРНК или рибосомной РНК.

Целевые гены были идентифицированы на основании (ί) общедоступных результатов исследований, например микроаррэй анализов дифференциации и заражения оомицетами, и общедоступных данных по исследованию метаболических процессов в ходе дифференциации и заражения оомицетами (ОгепуШе-Впддк е! а1., 2005, .Гийекоп е! а1., 2009а, .Гийекоп е! а1., 2009Ь) (Α), (ίί) результатов тщательного анализа сравнительных биоинформационных исследований (ВюМах ВюшГогтайс Ргате^огк) (В), (ίίί) результатов тщательного анализа метаболических путей, а также (ίν) оценки общедоступных данных, касающихся характеристики гомологичных генов в эукариотических организмах (Коетег е! а1., 1994, 1поие е! а1., 1995, Ма/иг е! а1., 1995, Ьекаде е! а1., 2004, Αν^оνа е! а1., 2008, Аапд е! а1., 2009, Ы е! а1., 2010, Аапд е! а1., 2010) (Ό).

При выборе целевых генов обращалось внимание на то, чтобы нуклеотидные последовательности этих генов были Р. тГеЧащ специфичными для исключения нежелательного сайленсинга генов растений и человека. Для этого белки выбранных целевых генов сравнивали с протеомом §о1апит ФЬегокит и §о1апит 1усорег8юит (программа В1ак!Х). Одновременно нуклеотиды в нуклеотидных последовательностях целевых генов сравнивали с геномом §о1апит ФЬегокит, §о1агшт 1усорег8юит (программа В1акШ), а также проводили общий поиск по подобию нуклеотидных последовательностей с помощью ΒΗδίΝ (критерии: ΒΠδίΝ; база данных: геномная последовательность человека + транскрипт; оптимальный результат: поиск сходных последовательностей (Ь1а81п)). Целевые гены считались весьма подходящими, если не имели гомологии с нуклеотидными последовательностями §о1апит ШЬегокит и §о1агшт 1усорег8юит, а также не имели или имели только частичную гомологию по коротким участкам последовательностей (< 17 нуклеотидов) в результате общего поиска по подобию с помощью В1азШ, чтобы взаимосвязь с нуклеотидными последовательностями эндогенных генов растений ингибировалась или не происходила.

В соответствии с настоящим изобретением используемые нуклеотидные последовательности могут быть разной длины. Например, длина одной нуклеотидной последовательности δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43 может составлять от 501 до 735 нуклеотидов.

Используемые нуклеотидные последовательности могут представлять собой один или несколько фрагментов одной или нескольких нуклеотидных последовательностей в соответствии с δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43. При этом фрагменты включают по крайней мере 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 100, 1100, 1200 или 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400 или 2500 последовательных нуклеотидов одной или нескольких нуклеотидных последовательностей в соответствии с δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43. Особенно походящим фрагментом является фрагмент нуклеотидной последовательности δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1, состоящий из 290 нуклеотидов.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения используются комбинации из двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти или более фрагментов из той же нуклеотидной последовательности δΕΟ ГО ΝΟ:1, либо из разных нуклеотидных последовательностей δΕΟ ГО ΝΟδ: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42 или 43. Предпочтительная комбинация состоит из фрагментов нуклеотидных последовательностей δΕΟ ГО ΝΟδ: 4, 23, 27 или 28, гены которых вовлечены в трансдукцию сигналов. Еще одна предпочтительная комбинация включает фрагменты нуклеотидных последовательностей δΕΟ ГО ΝΟδ: 3, 16 и 17 генов биосинтеза глутамата Р. шГе81ап8. Другие предпочтительные комбинации включают нуклеотидные последовательности или фрагменты нуклеотидных последовательностей генов образования клеточных стенок (δΕΟ ΙΌ ΝΟδ: 25, 36, 37), сигнализации кальция (δΕΟ ΙΌ ΝΟδ: 20, 21, 22), генов первичного метаболизма (δΕΟ ΙΌ ΝΟδ: 5, 6, 7), генов редокс-регуляции (δΕΟ ΙΌ ΝΟδ: 24, 25, 26), либо включают несколько нуклеотидных последовательностей или фрагментов нуклеотидных последовательностей генов-транспортеров в соответствии с δΕΟ ГО ΝΟδ: 39, 40, 41, 42. Еще другие предпочтительные комбинации включают нуклеотидные последовательности или фрагменты нуклеотидных последовательностей различных групп целевых генов, например генов сигнализации О-белка, сигнализации МАРкиназы, генов первичного метаболизма и редокс-регуляции (δΕΟ ГО ΝΟδ: 27, 28, 4, 23). Комбинирование нескольких целевых генов означает вероятность избежать возможную потерю устойчивости трансгенным растением вследствие естественной мутации оомицета.

Первая двухцепочечная ДНК, интродуцируемая в растение картофеля по данному изобретению, может иметь нуклеотидную последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях с одной из следующих нуклеотидных последовательностей: (а) нуклеотидной последовательностью δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43, либо (б) фрагментом по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43, либо (в) нуклеотидной последовательностью, комплементарной одной из нуклеотидных последовательностей, упомянутых в (а), (б) или (в). Примеры жестких условий: гибридизация в 4χδδΟ буфере при 65°С и отмывка несколько раз в 0,1χδδΟ при 65°С в течение около 1 ч. Используемый здесь термин жесткие условия гибридизации может также означать: гибридизация при 68°С в буфере, содержащем 0,25 М фосфата натрия (рН 7,2), 7% δΌδ, 1 мМ ΕΌΤΑ и 1% ΒδΑ, в течение 16 ч и отмывка в двух сменах буфера 2xδδС и 0,1% δΌδ при температуре 68°С.

- 5 027487

Более того, настоящее изобретение охватывает, в частности, такие фрагменты нуклеотидных последовательностей, которые включают несколько, например 1 или 2, нуклеотидов, не являющихся комплементарными последовательности целевого гена РкуЮрЫкога ίηίΌβΐαηβ. Изменения в последовательности, которые возникают, например, у оомицетов в результате генетической мутации, например, вследствие вставки, делеции или замены нуклеотидов, или генетического полиморфизма штамма РкуЮрЫкога ίηГс51;ш5 и которые приводят к неправильному спариванию на участке из 1, 2 или нескольких нуклеотидов, могут допускаться до тех пор, пока РНК, образующаяся в трансгенном растении картофеля, все еще способна интерферировать с РНК целевого гена из оомицета.

В соответствии с настоящим изобретением трансгенное растение картофеля вида 8о1аиит 1пЪеговит проявляет патогеноустойчивость к оомицету рода РкуЮрЫкога. Для определения степени устойчивости трансгенное растение картофеля сравнивали с контрольным растением, которое в идеале обладало генотипом, идентичным трансгенному растению, и выращивалось в идентичных условиях, но в котором отсутствовала ДНК, интродуцированная в трансгенное растение. Устойчивость можно определять, используя метод визуальной оценки по шкале от балла 0 (растение невосприимчивое) до балла 100 (растение очень восприимчивое). Предпочтительны трансгенные растения по данному изобретению с устойчивостью, вызывающей, по сравнению с контрольным растением, снижение пораженности поверхности растений по крайней мере на 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100% (см. оценка устойчивости трансгенных растений картофеля в условиях открытого грунта).

Род РкуЮрЫкога включает различные виды, например, а1ш, сасЮгит, еарвюц еитатопи. с11горН1Нога, с1апйевйпа, Ггадапае, Ьейга1апйга, Ыаек тГсЩиъ, 1ротоеае, иатса, кетоу1ае, тЫаЪШв, тедакагуа, тсойаиае, ра1т1уога, ратавШса, ркавеок, гатогит, рвеиойоквидае, сщегста, 5о.)ае или 1еп1аси1а1а.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения трансгенное растение картофеля проявляет устойчивость к РкуЮрЫкога шГевЫш.

Проводившиеся испытания в лабораторных и полевых условиях показали, что в результате ингибирования биосинтеза алифатических аминокислот валина, лейцина и изолейцина конструкцией, направленной против ацетолактатсинтазы из Р. 1пГе51ап5, пораженность фитофторой значительно падает, а устойчивость листьев существенно повышается. Комбинирование в одной конструкции нескольких целевых генов, например генов сигнализации О-белка, сигнализации МАР-киназы, первичного метаболизма, биосинтеза аминокислот и редокс-регуляции может приводить к еще большему повышению эффекта устойчивости, так как в этом случае использование патогеном альтернативных путей сигнализации и метаболических путей ингибируется комбинированной конструкцией с множественным действием.

Защитные свойства растений картофеля по данному изобретению против изолятов Р. 1пГе51ап5 с разной степенью агрессивности удивительным образом изменяются так, что растения приобретают устойчивость, которая эффективно и постоянно защищает их от этих наиболее важных патогенов.

Неожиданно было обнаружено, что приобретаемая устойчивость не требует от растений картофеля значительных энергетических затрат и не приводит к негативным изменениям их агрономических свойств. Опыты по культивированию растений в условиях, приближенных к полевым, не выявили какого-либо вредного воздействия на их качество. Тщательный выбор целевых генов Р. шГевЫщ, исключающий любую гомологию длиной более 17 последовательных пар оснований с генами нецелевых организмов (картофель, человек, свиньи, крупный рогатый скот), означает отсутствие ограничений на использование растений в качестве продукта питания и корма, а также отсутствие ограничений на посев, выращивание, уборку и переработку урожая. Эти растения можно свободно использовать в качестве сельскохозяйственных, продуктов питания или корма.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления изобретения двухцепочечная РНК представляет собой ιηί-РНК или βί-РНК. пи-РНК представляет собой короткую интеферирующую РНК и включает природные ιπΐ-РНК и синтетические пи-РНК, которые, например, можно получать рекомбинантным путем или синтезировать химическим путем, а также путем процессинга первичной пи-РНК. βίРНК представляет собой короткую интерферирующую РНК и включает природные βί-РНК и синтетические βι-РНК, которые, например, можно получать рекомбинантным путем или синтезировать химическим путем, а также путем процессинга Й5-РНК.

Из интродуцированной двухцепочечной ДНК у трансгенного растения продуцируется Й5-РНК, которая подвергается процессингу по механизму РНК-ί или сайленсинга эндогенных генов с образованием βι-РНК и ш1-РНК.

Для получения Й5-РНК может быть использована первая двухцепочечная ДНК с нуклеотидной последовательностью в соответствии с одной из 8ЕЦ ГО N03: 1-43 или ее фрагментом в смысловой ориентации и вторая двухцепочечная ДНК в антисмысловой ориентации, которые разделены интроном, не имеющим сходства с целевыми генами, о которых идет речь. Как пример, ДНК с нуклеотидной последовательностью 8ЕЦ ГО N0: 1 может быть направлена против гена ацетолактатсинтазы РкуЮрЫкога ίηГе51ап5. При экспрессии в растительной клетке образуется транскрипт РНК, который вследствие гомологии между смысловыми и антисмысловыми участками последовательности способен к спариванию и образованию Й5-РНК. Поскольку в области интрона недостает пар оснований, то Й5-РНК образует шпилькообразную структуру. йвНК со шпилькообразной структурой можно также получить при помощи

- 6 027487 одной двухцепочечной ДНК с нуклеотидной последовательностью в соответствии с одной из 8ЕО ГО N08: 1-43 в смысловой ориентации и другой - в антисмысловой ориентации различной длины. При этом нуклеотидная последовательность в смысловой ориентации может быть на почти 190 нуклеотидов длиннее, чем нуклеотидная последовательность в антисмысловой ориентации, и наоборот.

Определенные участки последовательности выбранных нуклеотидных последовательностей целевых генов амплифицируют, используя ПЦР, и клонируют в смысловой и антисмысловой ориентации в вектор, подходящий для синтеза шпилькообразных структур. При этом в один вектор могут быть клонированы несколько фрагментов с участками последовательностей разных целевых генов с целью образования комбинированной шпилькообразной конструкции. Векторы могут быть введены в растительную клетку при помощи методов трансформации, известных в области биотехнологии растений. Специалистам известно также, что, например, одна нуклеотидная последовательность какого-либо целевого гена может быть клонирована в один вектор в смысловой ориентации и эта же нуклеотидная последовательность этого же гена может быть клонирована в другой вектор в антисмысловой ориентации и затем введена в растительную клетку, например, путем ко-трансформации.

Механизм сайленсинга запускается бк-РНК, например, шпилькообразными структурами РНК или дуплексами генов. Из бк-РНК при помощи бк-РНК-специфической эндонуклеазы (бюет) образуются короткие бк-РНК, которые посредством более длинных нуклеотидных последовательностей преобразовываются в короткие фрагменты бк-РНК предпочтительно длиной 21-25 пар оснований, Этот процесс подобен процессу образования структур типа стебель-петля, а также процессу образования длинных комплементарных бк-РНК-предшественников. Белки ЛгдопаШе. как центральные компоненты комплексов сайленсинга, индуцированного РНК (К18С), связывают и разматывают κί-РНК и ιηί-РНК таким образом, что направляющая цепочка дуплекса специфически соединяется посредством спаривания оснований с тРНК и вызывает ее деградацию. При помощи ιηί-РНК процесс РНК-ί протекает сравнительно сходным образом с той лишь разницей, что получаемая ιηί-РНК содержит также частичные участки, которые не идентичны целевым генам.

После заражения растения-хозяина РНуЮрШНога тГеЧапк между растением-хозяином и оомицетами может происходить обмен образующейся в растении РНК, которая направлена против одной или нескольких РЬуЮрЬШога-специфических целевых последовательностей. У оомицетов эти РНК могут вызывать последовательность-специфический сайленсинг одного или нескольких целевых генов. В этом процессе возможно участие белков и белковых комплексов, таких как бюетк, К18С (комплекс сайленсинга, индуцированного РНК), а также РНК-зависимой РНК-полимеразы (КбРР).

Известно, что эффект κί-РНК в растениях будет продолжаться, если КбРР будет синтезировать новые κί-РНК из деградированных фрагментов т-РНК. Этот вторичный или транзитивный процесс РНК-ί способен приводить к усилению сайленсинга, а также вызывать сайленсинг различных транскриптов, в которые входят эти высококонсервативные последовательности.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения первая ДНК и вторая ДНК оперативно связаны по крайней мере с одним промотором.

Промотор представляет собой нетранслируемую последовательность ДНК обычно в направлении вверх по течению от кодирующего участка, содержащего сайт связывания РНК-полимеразы и инициирующего транскрипцию ДНК. Промотор включает специальные элементы, которые функционируют как регуляторы экспрессии генов (например, ак-регуляторные элементы). Термин оперативно связанный означает, что ДНК содержащая интегрированную нуклеотидную последовательность, связывается с промотором таким образом, что он обеспечивает экспрессию этой нуклеотидной последовательности. Интегрированная нуклеотидная последовательность может связываться с последовательностью сигнала терминации транскрипции в направлении вниз по течению в качестве еще одного компонента.

Промотор может быть растительного, животного или микробного происхождения. Он может быть синтетического происхождения и может выбираться, например, из одной из следующих групп промоторов: конститутивных, индуцибельных, специфичных для развития, клеточно-специфичных, тканеспецифичных или органоспецифичных. Если конститутивные промоторы проявляют активность в большинстве ситуаций, то индуцибельные промоторы экспрессируются только в ответ на какой-нибудь сигнал, индуцируемый биотическими стрессами, например, такими как воздействие патогенов, либо абиотическими стрессами, такими как холод, засуха или применение химикатов.

Примерами промоторов являются конститутивный промотор СаМУ 358 (ВепГеу е1 а1., 1990), а также промотор С1, который проявляет активность в зеленой части ткани (§1аЫ е1 а1., 2004).

Первая и вторая ДНК могут также оперативно связываться с двойным промотором, например, таким как двунаправленный активный промотор ТК1' и ТК2' (8аНо е1 а1., 1991).

Кроме того, первая и вторая ДНК могут каждая в отдельности оперативно связываться с промотором.

Использование двух промоторов, каждый из которых фланкирует молекулу нуклеиновой кислоты как с З'-конца, так и с 5'-конца, вызывает экспрессию соответствующей индивидуальной цепочки ДНК, в которой происходит образование двух комплементарных РНК, которые гибридизуются и образуют одну бк-РНК. Более того, два промотора могут располагаться таким образом, что один из них дает начало

- 7 027487 транскрипции выбранной нуклеотидной последовательности, а второй дает начало транскрипции нуклеотидной последовательности, комплементарной первой нуклеотидной последовательности. В результате транскрипции обеих нуклеотидных последовательностей образуется άδ-РНК.

Кроме того, возможно расположение двунаправленного промотора, который вызывает экспрессию двух нуклеотидных последовательностей в обоих направлениях, при этом одна нуклеотидная последовательность считывается в направлении 3 '-конца, а вторая нуклеотидная последовательность считывается в направлении 5'-конца. В результате комплементарности обеих нуклеотидных последовательностей образуется άδ-РНК.

Настоящее изобретение относится также к частям трансгенного растения вида 8о1апит ШЬсгохит.

В контексте данной заявки термин части трансгенного растения, в частности, означает семена, корни, листья, соцветия, а также клетки растения по данному изобретению. Термин клетки следует понимать как означающий, например, изолированные клетки с наличием клеточной стенки и их агрегаты, а также их протопласты. Термин трансгенные части трансгенного растения означает также части, урожай которых можно собирать, например, клубни картофеля.

Более того, настоящее изобретение касается способа получения трансгенного вида 8о1апит шЬсго8ит с устойчивостью к оомицету рода РНуЮрШНога.

В биотехнологии растений известны подходящие методы трансформации растительных клеток. Каждый из этих методов может быть использован для инсерции выбранной нуклеиновой кислоты, предпочтительно в вектор, в растительную клетку с целью получения трансгенного растения согласно настоящему изобретению. Методы трансформации могут включать методы прямой и косвенной трансформации и использоваться для трансформации двудольных растений и прежде всего для трансформации однодольных растений. К подходящим методам прямой трансформации относятся РЕО-индуцированный захват ДНК, перенос ДНК в составе липосом, биолистические методы бомбардировки частицами, электропорация и микроинъекция. Примерами методов косвенной трансформации являются методы трансформации, индуцированной агробактериями, или заражения вирусами с использованием вирусных векторов.

Предпочтительным используемым методом трансформации является индуцированный агробактериями перенос ДНК при помощи бинарных векторов. После трансформации растительных клеток производят отбор трансформированных клеток по одному или нескольким маркерам с введенной ДНК по данному изобретению и содержащих гены, предпочтительно индуцирующие устойчивость к антибиотикам, например ген неомицинфосфотрансферазы II (ΝΡΤΙΙ), обеспечивающий устойчивость к канамицину, и ген гигромицинфосфотрансферазы II (ΗΡΤΙΙ), обеспечивающий устойчивость к гигромицину.

Трансформированные клетки регенерируют в целые растения. После переноса ДНК и регенерации осуществляется проверка полученных растений методом количественной ПЦР на присутствие в них ДНК по данному изобретению. Затем следуют тесты на устойчивость этих растений к Рйу1орй1йога шГс51ап5 ίη уйго и в условиях теплицы. В дальнейшем соответственно подготовленным персоналом могут проводиться стандартные фенотипические исследования в условиях теплицы и открытого грунта. Исследуемые трансформированные растения можно высаживать сразу в грунт.

Способ получения трансгенного растения вида 8о1апит ШЬсгохит с устойчивостью к оомицету рода РЬу1орй1йога согласно данному изобретению состоит из следующих шагов:

(ί) получение трансформированного растения первой родительской линии, содержащего первую двухцепочечную ДНК, которая стабильно интегрирована в геном родительского растения и включает (а) нуклеотидную последовательность в соответствии с δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с δΕΟ ГО ΝΘδ: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с одной из нуклеотидных последовательностей (а), (б) или (в) в жестких условиях;

(ίί) получение трансформированного растения второй родительской линии, содержащего вторую двухцепочечную ДНК, которая стабильно интегрирована в геном родительского растения, при этом нуклеотидные последовательности кодирующих цепочек первой и второй ДНК частично или полностью обратно комплементарны друг другу;

(ίίί) скрещивание растения первой родительской линии с растением второй родительской линии;

(ίν) отбор растения, в геноме которого первая двухцепочечная ДНК и вторая двухцепочечная ДНК стабильно интегрированы для придания патогеноустойчивости к оомицету рода Рйу1орЫйота так, что при этом может образовываться двухцепочечная РНК.

Согласно данному изобретению эта άδ-РНК представляет собой нуклеотидную последовательность или фрагмент нуклеотидной последовательности δΕΟ ГО ΝΟδ: 1-43 Рйу1орй1йога ίηΓοδΙηηδ.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения двухцепочечная РНК может быть т1РНК или δί-РНК.

Изобретение касается также композиции для наружной обработки растений.

Композиция для наружной обработки растений готовится следующим образом. Она включает двухцепочечную РНК, в которой одна ее цепочка соответствует транскрипту двухцепочечной ДНК, содер- 8 027487 жащей (а) нуклеотидную последовательность в соответствии с 8ЕЦ ГО N08: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с 8Е0 ГО N08: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с одной из нуклеотидных последовательностей (а), (б) или (в) в жестких условиях.

Двухцепочечная РНК для приготовления композиции согласно данному изобретению может быть получена ίη νίίτο с использованием известных специалистам методов. Например, двухцепочечная РНК может быть синтезирована ίη νίίτο непосредственно по РНК-матрице. Двухцепочечная РНК может быть также синтезирована по матрице двухцепочечной ДНК с формированием т-РНК-транскрипта, который, например, затем образует шпилькообразную структуру.

Композиция по данному изобретению может использоваться в качестве фунгицида для обработки растения или его семян. В этом случае композиция используется для блокировки роста патогена, подавления его размножения и обработки зараженных растений. Например, композиция как фунгицид может применяться в виде спрея для опрыскивания или путем иного известного специалисту стандартного способа наружной обработки растительной ткани, либо для опыления почвы или добавления в почву до или после прорастания растений.

Еще одним вариантом применения композиции по данному изобретению является ее использование для предпосевной обработки семян. Для этого композицию вначале добавляют в субстрат-носитель и затем обрабатывают семена в комбинации, включающей двухцепочечную РНК и субстрат-носитель, при этом субстрат-носитель обладает, например, РНК-стабилизирующим эффектом. Таким образом, стабильность РНК и в результате ее воздействие на выбранные целевые гены Ρΐινίορίιΐΐιοηι ίηΓοβΙαηβ могут усиливаться, например, вследствие таких химических модификаций, как замена рибозы на гексозу. Липосомы, которые инкапсулируют молекулы РНК, могут использоваться в качестве РНК-стабилизаторов.

В идеальном варианте осуществления изобретения растениями, подлежащими обработке композицией, являются растения вида 8ο1аηит ЩЪеговит.

Все вышесказанное в отношении получения растения по настоящему изобретению и способа его получения относится также к композиции.

Изобретение иллюстрируется ссылками на следующие чертежи и перечни последовательностей.

Фиг. 1 - плазмида рРНК-ί как пример вектора, который может быть использован для образования шпилькообразных конструкций, направленных против целевого гена.

Вектор содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена ΑίΑΑΡ6, кодирующего аминокислотную пермеазу ΛπΦίύορβίβ (Ъайапа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 2 - плазмида рРНК-1_Р1ТО_03410 как пример вектора, содержащего фрагмент интрона в смысловой-антисмысловой ориентации для образования άβ-РНК, направленной против целевого гена (здесь Р1ТО_03410). Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена ΑίΑΑΡ6, кодирующего аминокислотную пермеазу ΑπΦίάορβίβ ШаПапа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 3 - плазмида рРНК-^_ΗIΟ8_СοΑ как пример вектора, содержащего различные определенные последовательности фрагмента интрона в смысловой-антисмысловой ориентации, который должен приводить к образованию άβ-РНК, направленной против различных целевых генов. Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена ΑίΑΑΡ6, кодирующего аминокислотную пермеазу ΑπΦίάορβίβ (НаНапа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 4 - плазмида ρΟΒТУ/ЕсοΚI_каη. Бинарная Τί-плазмида, которая использовалась в качестве вектора клонирования.

Фиг. 5 - плазмида ρΟΒΤУ/ЕсοΚI_каη_ΡIΤΟ_03410. Бинарная Τί-плазмида, которая использовалась для трансформации, индуцированной агробактериями.

Фиг. 6 - плазмида ρΑΜ которая использовалась в качестве вектора клонирования.

Фиг. 7 - плазмида ρΛМ_ΗIΟ8_СοΑ, как пример одной из плазмид, использовавшейся в качестве вектора клонирования.

Фиг. 8 - плазмида ρ95Ρ-Νοβ. Бинарная Τί-плазмида, которая использовалась в качестве вектора клонирования.

Фиг. 9 - плазмида ρ95Ν_ΗΙ08_№Α. Бинарная Τί-плазмида, которая использовалась для трансформации, индуцированной агробактериями.

Фиг. 10 - плазмида ρ95N_ΗIΟ8_άΡ-РНК-^_ΡIΤΟ_03410 как пример бинарного вектора для образования άβ-РНК, направленной против целевого гена (здесь ΡΙΤ0_03410), с использованием двух промоторов СаМУ 358, каждый из которых фланкирует молекулу нуклеиновой кислоты с 3'-конца и 5'-конца.

Фиг. 11 - побег трансгенного растения на селективной среде на стадии регенерации после трансформации.

Фиг. 12 - диагностическое тестирование на основе ПЦР на трансгенность растений картофеля (ΡΚΗ4) после трансформации бинарным вектором ρΟΒΤУ/ЕсοΚI_каη_ΡIΤΟ_03410. Детекция смыслового

- 9 027487 фрагмента (370 п.о.) (праймер 8334 5'-АТСССАСТАТССТТСССААС-3'х 81259 5'ТТСАТАТСССССААССССАСАСААСАСАТСС-3') и антисмыслового фрагмента (450 п.о.) (8329 5'СТААСССТТТСТТАТАТССТСААС-3'х81259 5'-ТТСАТАТСССССААССССАСАСААСАТСС-3'). Реакционная смесь: РСК-Ма81егМ1х, РСК топПоппд. Маркер: ТгаскК™ 1 КЬ ДНК Ьаббег.

Фиг. 13 - детекция δί-РНК в трансгенных растениях картофеля после трансформации бинарным вектором рСВТУ/ЕсоК1-каи_Р1ТС_03410 (А) и бинарным вектором ρ95Ν_ΗΙΟ8_ΡΓΓΟ_00375 (В). Детекцию проводили методом Нозерн-блот гибридизации с использованием радиоактивно меченного зонда άδРНК_Р1ТС03410 (А) или радиоактивно меченного зонда άδ-РНК_ΡIТС00375 (В). А: Многократное использование различных проб линий РК-Н4_Т007 и Т011. В: Однократное использование проб линий РКН2_Т040, Т045, Т047 и Т049.

Фиг. 14А - плазмида ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_00375 как пример вектора, содержащего фьюжн конструкцию, включающую репортерный ген люциферазы и тестовый целевой фрагмент Р1ТС_00375 для механизма ΗΙΟ8. Вектор дополнительно содержит двойной промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, кодирующую последовательность гена 1ис РЬоЬиш ρνΓΗΐίδ, который кодирует люциферазу и выделен из модифицированного интрона Р1У2 картофельного гена 8(-Ь81 (Ескеδ е( а1., 1986, Уаисаииеу!: е( а1., 1990), еще один сайт множественного клонирования, а также Nоδ-терминатор гена нопалинсинтазы АдгоЬасЮпит ЩтеГааещ.

Фиг. 14В - плазмида ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_03410 как пример вектора, содержащего фьюжн конструкцию, включающую репортерный ген люциферазы и тестовый целевой фрагмент Р1ТС_03410 для механизма ΗΙΟ8.

Фиг. 15А - относительная активность люциферазы трансгенных линий картофеля генотипа ВаШса со стабильной интеграцией конструкции НЮ8_РНК-1, направленной против гена Р1ТС_03410 Р. ίηΚδΡπίδ. после бомбардировки частицами, нагруженными вектором ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_03410. В: Ва1Ьса (нетрансгенный контроль); Т003, Т005: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 15В - относительные показатели образования спорангиев Р. ίηΚδΚπίδ у трансгенных линий на основе ΗΙΟ8. Линии картофеля сорта ВаШса трансформировали с помощью конструкцией РНК-ί для образования άδ-РНК, направленной против гена ΡIТС_03410 Р. ίηΚδΚπίδ. После заражения Р. ίηΚδΡιηδ методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом ВаШса (в среднем в 4-кратной биологической повторности). В: ВаШса (нетрансгенный контроль); Т003, Т005: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 16А - относительная активность люциферазы трансгенных линий картофеля генотипа Иет^ со стабильной интеграцией конструкции ΗIС8_РНК-^, направленной против гена ΡIТС_03410 Р. пгЖЦпъ, после бомбардировки частицами, нагруженными вектором ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_03410. Η: №πτκδ (нетрансгенный контроль); Т004, Т011: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 16В - относительные показатели образования спорангиев Р. ίηΚδΚπίδ у трансгенных линий на основе ΗΙΟ8. Линии картофеля сорта Иет^ трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования άδ-РНК, направленной против гена ΡIТС_03410 Р. ίηΚδΚπίδ. После заражения Р. ίηΚδΡιηδ методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом ВаШса (в среднем в 4-кратной биологической повторности). Н: Иет^ (нетрансгенный контроль); Т004, Т011: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 17А - относительная активность люциферазы трансгенной линии картофеля генотипа ^еδ^^ее со стабильной интеграцией конструкции ΗIС8_РНК-^, направленной против гена ΡIТС_03410 Р. нгЖЦнъ, после бомбардировки частицами, нагруженными вектором ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_03410. Ό: ^еδ^^ее (нетрансгенный контроль), Т098: трансгенная линия картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 17В - относительные показатели образования спорангиев Р. шГе81аи5 у трансгенной линии на основе ΗΙΟ8. Линию картофеля сорта ^еδ^^ее трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования άδ-РНК, направленной против гена ΡIТС_03410 Р. ίηΚδΚπίδ. После заражения Р. ίηΚδΡιηδ методом изолированных листьев у этой линии отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом ВаШса (в среднем в 4-кратной биологической повторности). Ό: ^еδ^^ее (нетрансгенный контроль); Т098: трансгенная линия картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 18А - относительная активность люциферазы трансгенных линий картофеля генотипа ^еδ^^ее со стабильной интеграцией конструкции ΗIС8_РНК-^, направленной против гена РП’0_00375 Р. нгЖЦнъ, после бомбардировки частицами, нагруженными вектором ρАВМ-7081ис^_άδ-РНК.ΡIТС_00375. Ό: ^еδ^^ее (нетрансгенный контроль); Т042, Т044, Т047, Т049: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

Фиг. 18В - относительные показатели образования спорангиев Р. ίηΚδΚπίδ у трансгенных линий ΗΙΟ8. Линии картофеля сорта ^еδ^^ее трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования άδ-РНК, направленной против гена ΡIТС_00375 Р. ίηΚδΡιηδ. После заражения Р. ίηΚδΡιηδ методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом ВаШса (в среднем в 4-кратной биологической повторности). Ό: ^еδ^^ее (нетрансгенный контроль); Т042, Т044, Т047, Т049: трансгенные линии картофеля на основе ΗΙΟ8.

- 10 027487

Фиг. 19А - степень пораженности трансгенных линий картофеля генотипа Негтез со стабильной интеграцией конструкции НЮ8_РНК-1, направленной против гена ΡΙΤΟ_03410 Р. тГез!апз после заражения растений Р. игГезйшз в условиях, приближенных к естественным. Серый треугольник: ВаШса, Пезисе и Киззе! ВитЬапк (нетрансгенный контроль); черный квадрат: растения генотипа Негтез; сплошная линия: Неттез (нетрансгенный контроль); пунктирная линия: РК-Н-4-7 и штриховая линия: РК-Н-4-11: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 19В - фотодокументирование степени пораженности трансгенных линий РК-Н-4-7 и РК-Н-4-11 картофеля генотипа Негтез со стабильной интеграцией конструкции НЮ8_РНК-1, направленной против гена Р1ТС_03410 Р. тГезйтз после заражения растений Р. шГез!апз в условиях, приближенных к естественным, по сравнению с нетрансгенным контролем Негтез. Фотографии сделаны через 32 дня после заражения.

Фиг. 20 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез1аиз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Киззе! ВитЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_03410 Р. тГезйшз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Киззе! ВигЬаик (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Киззе! ВитЬапк (нетрансгенный контроль); Н-4-Т084, Н-4-Т096: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 21 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез1апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Негтез трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК под контролем конструкции двойного промотора НЮ8_б-РНК-1_Р1Т0_03410, направленной против гена Р1ТС_03410 Р. пгГезйшз. После заражения Р. шГезйшз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Негтез (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Негтез (нетрансгенный контроль); Н-23Т0003, Н-23-Т026, Н-23-Т038, Н-23-Т062, Н-23-Т063, Н-23-Т066: трансгенные линии картофеля на основе НЮ5.

Фиг. 22 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез1апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Киззе! ВитЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК1_НЮ8_СоА для образования бз-РНК, направленной против генов Р1ТС_00146, Р1ТО_08393, Р1ТО_10447 и Р1ТС_00708 Р. пгГезйшз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Киззе! ВитЬапк (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Киззе! ВитЬапк (нетрансгенный контроль); Н-13-Т050, Н-13-Т053, Н-13-Т036, Н-13-Т032: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 23 - относительные показатели образования спорангиев Р. игГез!апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Киззе! ВитЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_06748 Р. шГез!апз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Киззе! ВигЬапк (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Киззе! ВитЬапк (нетрансгенный контроль); Н-15-Т008, Н-15-Т010: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 24 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез!апз у трансгенной линии на основе НЮ8. Линию картофеля сорта Киззе! ВигЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_09306 Р. шГез!апз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этой линии отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Киззе! ВигЬапк (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Киззе! ВигЬапк (нетрансгенный контроль); Н-10-Т111: трансгенная линия картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 25 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез!апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Киззе! ВигЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_09193 Р. шГез!апз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Киззе! ВигЬапк (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Киззе! ВигЬапк (нетрансгенный контроль); Н-12-Т194, Н-12-Т195, Н-12-Т222, Н-12-Т239: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 26 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез!апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Пезисе трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_09193 Р. шГез!апз. После заражения Р. шГез!апз методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Пезисе (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Пезисе (нетрансгенный контроль); Н-12-Т187, Н-12-Т216, Н-12-Т237, Н-12-Т245: трансгенные линии картофеля на основе НЮ8.

Фиг. 27 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГез!апз у трансгенных линий на основе НЮ8. Линии картофеля сорта Киззе! ВигЬапк трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бз-РНК, направленной против гена Р1ТС_19177 Р. шГез!апз. После заражения Р. игГез!апз

- 11 027487 методом изолированных листьев у этих линий отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Ри55с1 ВигЬапк (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Кикке! ВигЬаик (нетрансгенный контроль); Н-9-Т271, Н-9-Т305, Н-9-Т308: трансгенные линии картофеля на основе НГ08.

Фиг. 28 - относительные показатели образования спорангиев Р. шГекНик у трансгенной линии на основе НЮ8. Линию картофеля сорта Оемгсе трансформировали с помощью конструкции РНК-ί для образования бк-РНК, направленной против гена РГГО_19177 Р. шГекГаик. После заражения Р. шГекНик методом изолированных листьев у этой линии отмечено уменьшение количества спорангиев по сравнению с нетрансгенным сортом Оемгсе (в среднем в 3-кратной биологической повторности). Пекшее (нетрансгенный контроль); Н-9-Т280: трансгенная линия картофеля на основе НГС8.

Фиг. 29 - плазмида р95Ы_РНК-1_РГТО_06748 как пример вектора, содержащего фрагмент интрона в смысловой-антисмысловой ориентации для образования бк-РНК, направленной против целевого гена (здесь РГТС_06748). Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена А1ААР6. кодирующего аминокислотную пермеазу АгаЫ6ор515 Шайаиа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 30 - плазмида р95Ы_РНК-1_РГТС_09306 как пример вектора, содержащего фрагмент интрона в смысловой-антисмысловой ориентации для образования бк-РНК, направленной против целевого гена (здесь РГТС_09306). Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена А1ААР6, кодирующего аминокислотную пермеазу АгаЫ6ор515 1ПаПаиа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 31 - плазмида р95Ы_РНК-1_РГТО_09193 как пример вектора, содержащего фрагмент интрона в смысловой-антисмысловой ориентации для образования бк-РНК, направленной против целевого гена (здесь РГТС_09193). Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена А1ААР6, кодирующего аминокислотную пермеазу АгаЫ6ор515 1ПаПаиа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Фиг. 32 - плазмида р95Ы_РНК-1_РГТС_19177 как пример вектора, содержащего фрагмент интрона в смысловой-антисмысловой ориентации для образования бк-РНК, направленной против целевого гена (здесь РГТС_19177). Вектор дополнительно содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена А1ААР6, кодирующего аминокислотную пермеазу АгаЫ6ор515 1ПаПаиа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358.

Примеры осуществления изобретения

Подготовка конструкций.

Определенные участки последовательностей выбранных целевых генов амплифицировали, используя ПЦР, и клонировали в смысловой и антисмысловой ориентации в вектор рРНК-ί, подходящий для системы шпилькообразных структур (фиг. 2). Таким образом несколько фрагментов, несущих участки последовательностей разных целевых генов, могут быть клонированы в вектор для образования комбинированной шпилькообразной конструкции (фиг. 3).

С матрицы геномной ДНК РНуЮрЫНога тГекйпъ участок последовательности длиной 290 п.о. кодирующей области гена РГТ0_03410 амплифицировали с помощью ПЦР, расщепляли по сайтам рестрикции Хйо1 и 8та1, введенным в последовательности праймеров, и клонировали в вектор рРНК-ί (праймер 1: с§с1с§а§§с1§§а1с1с§с§с1§а§§1, праймер 2: #да1а1сдсддааддсдададаса1сд). Этот вектор содержит промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, интрон гена А1ААР6, кодирующего аминокислотную пермеазу АгаЫборкЫ 1йаНаиа, еще один сайт множественного клонирования, а также терминатор СаМУ 358. Вектор расщепляли с помощью Хйо1 и ЕсГ136П. Фрагмент вектора 4098 кб сепарировали электрофорезом в агарозном геле и затем выделяли. Раствором для лигирования трансформировали клетки Е. сой штамма ХЬ1- В1ие (81га1а§еие, Ьа1о11а, СА). Этот же фрагмент РГТ0_03410 затем клонировали в плазмиду рРНК-1_РГТ0_03410-5еике в антисмысловой ориентации. После этого снова амплифицировали фрагмент геномной ДНК РНуЮрЫНога тГекйнъ с помощью ПЦР, расщепляли по сайтам рестрикции Хйо1 и 8та1, введенным в последовательности праймеров, и лидировали в вектор рРНК-1_РГТ0_03410_5еике, который был расщеплен 8та1-8а11 и затем линеаризирован (фиг. 1). Фрагмент гена с интроном в смысловой-антисмысловой ориентации (РНК-1-РГТ0_03410) вырезали из вектора рРНК-ί и клонировали в вектор рОВТУ/ЕсоКГ_каи (фиг. 4). После этого оба вектора рОВТУ/ЕсоКГ_каи и рРНК-1_РГТ0_03410 расщепляли с помощью НшбГГГ и лигировали до образования плазмиды р0ВТУ/ЕсоКГ_каи_РГТ0_03410 (фиг. 5). В альтернативном варианте конструкции НГО8-РНК-1, такие как НГО8-СоА, сначала клонировали в вектор рАМ (ДНК С1оши§ 8егуюе е.К., Гамбург) (фиг. 6). Оба вектора рАМ и рРНК-1_РГТ0_03410 расщепляли с помощью НшбГГГ и лигировали до образования плазмиды рАМ_НГО8_СоА (фиг. 7). Из вектора рАМ фрагмент НГО8_СоА встраивали в вектор р95Р-Ыо5 (ДНК С1оши§ 8егуюе е.К., Гамбург) путем переваривания под действием фермента 8й1 и лигирования (фиг. 8) до образования плазмиды р95Ы_НЮ8_СоА (фиг. 9), которую использовали для трансформации картофеля.

Кроме вышеописанного вектора, подходящего для синтеза шпилькообразных структур, какой-либо отрезок кодирующего участка целевого гена картофеля можно заставить экспрессироваться с помощью двух противоположно (обратно) ориентированных промоторов (фиг. 10). Возможен и вариант сайлен- 12 027487 синга генов посредством искусственных шюто-РНК конструкций (аш1-РНК) с использованием протокола АеЬ тюто-РНК Эе8щпег8 (ΑΜΌ3). Искусственные т-РНК представляют собой одноцепочечные 21-тег РНК, которые можно синтезировать с целью специфической для желаемых генов негативной регуляции экспрессии в растениях. Регуляция происходит, как и в случае с 81-РНК, посредством расщепления тРНК. Эти конструкции РНК-ί затем клонируются в бинарный вектор и подвергаются индуцированной АдгоЬас1егшт ШтеГааещ трансформации в растениях картофеля.

Трансформация и регенерация.

Трансформацию растений картофеля осуществляли по модифицированному протоколу Ре1 е! а1. (2009) с использованием антибиотика канамицина. Донорский материал культивировали в 80 мл среды Μ8(Ό) (25°С; фотопериод день/ночь - 16/8 ч; 2000 лк) в течение 3-4 недель. Для трансформации (С1) из донорского материала вырезали междоузлия в качестве эксплантов длиной 0,5 см. Экспланты культивировали в чашках Петри с 10 мкл среды Μ8(Ό) (15-20 эксплантов на чашку) и 70 мкл культуры АдтоЬас1егшт 1ите£ас1еи8, которую наращивали в течение ночи при 28°, а до этого подвергли трансформации конструкцией НЮ8_РНК-1, являющейся частью бинарного вектора, например ρ95Ν, смесь инкубировали в течение 2 дней при 25°С в темноте. Затем экспланты высушивали на фильтровальной бумаге и помещали в чашки Петри на среду М8А с селективным антибиотиком (400 мг/л тиментина + 75 мг/л канамицина), которые герметично закрывали и культивировали в течение 2 недель (25°С; фотопериод день/ночь - 16/8 ч; 2000 лк) (С2). Операцию селекции повторяли раз в две недели до регенерации побегов (из С3). Регенерированные побеги (фиг. 11) инкубировали на среде Μ8 (30 г/л сахарозы) с селективным антибиотиком (250 мг/л тиментина +100 мг/л канамицина), чтобы стимулировать у них процесс корнеобразования. С помощью ПЦР проводили проверку факта вставки конструкции, подлежащей трансформации, и, таким образом, факта присутствия нуклеиновых кислот по данному изобретению. Использование праймеров Во2299 (5'-ОТООАОАООСТАТТСООТА-3') и Во2300 (5'-ССАССАТОАТАТТСООСААО-3') приводило к амплификации фрагмента ДНК длиной 553 п.о. бактериального гена ΝΡ^Ι, кодирующего неомицинфосфотрансферазу. С помощью ПЦР осуществляли детекцию фрагмента в смысловой и антисмысловой ориентации, чтобы убедиться, что вставка конструкции была полной (фиг. 12). ПЦР проводили с использованием 10 нг геномной ДНК, праймера в концентрации 0,2 мкМ при температуре отжига 55°С в МиШсус1ет РТС-200 (Μ1 Ке8еатсЬ, Аа1егЮ\уп. США). Размножение побегов, давшее положительный результат ПЦР, проводили на питательной среде Μ8 с добавлением 30 г/л сахарозы и 400 мг/л ампицилина.

Детекция процессированных двухцепочечной РНК и 81-РНК.

В трансформированных растениях экспрессирующиеся шпилькообразные или двухцепочечные РНК подвергали процессингу по механизмам РНК-ί в природных растениях таким образом, что эти молекулы РНК деградировались в короткие одноцепочечные РНК. Эти 81-РНК размещаются на т-РНК соответствующего целевого гена в оомицетах и вызывают сайленсинг этого гена. В результате срабатывает механизм самозащиты растения от воздействия патогенов. Исходя из этой концепции, можно получать трансгенные растения картофеля с повышенной устойчивостью к Р. 1и1е81ап8.

Особенность трансформации растений картофеля конструкциями для экспрессии шпилькообразных или двухцепочечных РНК должна заключаться в том факте, что процессинг получаемых в результате 68РНК в 81-РНК предпочтительно происходит по механизмам РНК-ί в природных растениях. Для определения фрагментации 68-РНК из трансгенных растений выделяли целую РНК по методике с использованием тризола (С1ютс/уп8к1 ап6 8ассП, 1987). К 15 мкг целой РНК/пробу добавляли формамид, смесь денатурировали и разделяли электрофоретически в 1%-ном агарозном геле с 10%-ным формальдегидом в 1хМОР8 буфере (0,2 М ΜΟΡ8 (соль натрия), 0,05 М №ОАс, 0,01 М БИТА в ИЕРС 6Н₂О (рН 7,0) с ΝηΟΗ). Выделенную РНК переносили из геля на нейлоновую мембрану (положительно зараженную), используя метод Нозерн-блоттинга, в 20х88С буфер (цитратно-солевой буфер), осуществляли гибридизацию с радиоактивно меченным зондом, комплементарным последовательности фрагмента целевого гена, присутствовавшего в смысловой и антисмысловой ориентации в конструкции, встроенной в растения путем трансформации. С использованием прибора фосфоимиджер проводилась маркировка и детекция фрагментов РНК, комплементарных последовательности фрагмента 68-РНК.

Особенность трансформации растений картофеля конструкциями для экспрессии шпилькообразных или двухцепочечных РНК должна заключаться в том факте, что процессинг получаемых в результате 68РНК в 81-РНК предпочтительно происходит по механизмам РНК-ί в природных растениях. Для определения фрагментации 68-РНК из трансгенных растений выделяли целую РНК по методике с использованием тризола (С1ютсхуп8к1 ап6 8ассП, 1987). К 15 мкг целой РНК/пробу добавляли формамид, смесь денатурировали и разделяли электрофоретически в полиакриламидном геле с 15% буферной системой Тп8/борная кислота/ЕЭТА (ТВЕ) и мочевая кислота в 0,5хТВЕ. Перенос выделенной РНК из геля на нейлоновую мембрану (нейтральную) осуществляли с помощью Тапк-блоттинга в 0,5хТВЕ, осуществляли гибридизацию с радиоактивно меченным зондом, комплементарным последовательности целевого гена, присутствовавшего в смысловой и антисмысловой ориентации в конструкции, встроенной в растения путем трансформации. С использованием прибора фосфоимиджер проводилась маркировка и детекция

- 13 027487

81-РНК, комплементарных отрезкам последовательности фрагмента 68-РНК.

В различных трансгенных линиях картофеля, например, таких как РК-Н4 или РК-Н2, детектировались указанные 81-РНК (фиг. 13А, В). Это говорит о том, что конструкции, встроенные в растения путем трансформации, узнаются и процессируются по механизмам РНК-ί в растениях таким образом, что образуются 81-РНК против целевых генов Н1О8 Р. тГс51ап5. приводящие к сайленсингу этого гена в патогене.

Оценка устойчивости трансгенных растений картофеля методом изолированных листьев.

Для тестирования устойчивости трансгенного картофеля по листьям трансгенные растения, полученные ίη νίΐΓΟ, культивировали в теплице в 5 л горшках. Через 6-8 недель из каждого растения вырезали по 2 боковые доли листа и помещали в герметичные пластиковые боксы на влажные маты Огобап так, чтобы листовой стерженек был погружен во влажный субстрат Огобап. Таким образом обеспечивалась высокая влажность. Боксы инкубировали при 18°С с фотопериодом день/ночь (солнечный свет, февральсентябрь). Доли инокулировали суспензией зооспор РНуЮрЫНога 1пГс51ап5, которую наносили в виде капель (объемом 10 мкл; 10⁴ зооспор/мл). Через 24 ч крышки боксов приоткрывали для обеспечения мягкой циркуляции воздуха. Спустя 6 дней осуществляли визуальную оценку в баллах и проводили прямой подсчет количества зооспор. Визуальная оценка показала степень пораженности и повреждения долей листьев Р. 1пГс81ап8. Прямой подсчет спорангиев позволил дать количественную оценку репродуктивной способности патогена в растениях. Для этого предварительно зараженные доли листа инкубировали в 5 мл пробирках типа Ра1соп на шейкере в течение 2 ч до открепления спорангиев от листа. Подсчет спорангиев проводили под микроскопом с помощью счетной камеры ТНоша.

В различных линиях картофеля на основе Н1О8, полученных путем трансформации растений разных генотипов, отмечалось уменьшение количества спорангиев после заражения Р. тГс81ап8 (6 точек/дюйм) (фиг. 15В-18В). Это говорит о том, что репродуктивная способность патогена у трансгенных растений ограничена.

Ген Р1ТО_03410 тестировали в качестве целевого гена Н1О8, используя генетический фон картофеля сортов ВаШса, Негте8 и Пе81гее, а также Ри88с1 ВигЬапк, с помощью вектора, показанного на фиг. 5. Результаты анализа этих трансгенных растений методом изолированных листьев показали, что у трансгенных растений сорта Ри88е1 ВигЬапк репродуктивная способность патогена ограничена по сравнению с контрольными нетрансгенными растениями (фиг. 20). В качестве альтернативы векторам, подходящим для синтеза шпилькообразных структур, в растения картофеля сорта Негте8 вводили вектор, показанный на фиг. 10, который содержит целевой ген Р1ТО_03410, и трансгенные линии исследовали методом изолированных листьев (фиг. 21). И в этом случае также показано, что у трансгенных растений репродуктивная способность Р. тГе81ап8 ограничена по сравнению с контрольными нетрансгенными растениями.

Растения картофеля сорта Ри88е1 ВигЬапк, трансформированные комбинированным вектором, направленным против генов Р1ТО_00146, Р1ТО_00708, Р1ТО_10447 и Р1ТО_08363 (фиг. 3), тестировали также методом изолированных листьев. Было найдено, что у трансгенных растений репродуктивная способность Р. тГе81ап8 ограничена по сравнению с контрольными нетрансгенными растениями (фиг. 22).

Аналогичным образом анализ методом изолированных листьев показал, что репродуктивная способность Р. тГе81ап8 у трансгенных растений сорта Ри88е1 ВигЬапк ограничивается при трансформации вектором, показанным на фиг. 29-32, который направлен против генов Р1ТО_06748 (фиг. 23), Р1ТО_09306 (фиг. 24), Р1ТО_09193 (фиг. 25) или Р1ТО_19177 (фиг. 27).

Даже у трансгенных растений сорта Пе81гее, трансформированных вектором, показанным на фиг. 31 или 32, который направлен против гена Р1ТО_09193 (фиг. 25) или гена Р1ТО_19177 (фиг. 27), анализ методом изолированных листьев показал ограничение репродуктивной способности Р. шГе81ап8 по сравнению с контрольными нетрансгенными растениями.

Тест-система транзиентной экспрессии векторов РНК-ί в листьях картофеля.

ВпсН е1 а1. (2010) была разработана тест-система транзиентной экспрессии для изучения функциональности векторов РНК-ί, направленных против выбранных последовательностей целевого гена Р. шГе81ап8. Посредством ко-бомбардировки вектор РНК-ί, нацеленный на целевой ген, транзиентно экспрессировался в листьях картофеля вместе с фьюжн конструкцией, состоящей из репортерного гена люциферазы и тестируемого целевого фрагмента. Если процессинг конструкции 68-РНК происходит в векторе РНК-ί, то должно обеспечиваться образование 68-РНК и образование в результате их процессинга 81РНК. Эти 81-РНК должны не только вызывать деградацию транскриптов фрагмента целевого гена, но и вызывать появление сплавленных транскриптов репортерного гена, так что с помощью функциональной конструкции РНК-ί можно наблюдать снижение активности люциферазы. Плазмида рАВМ-7081ис1 включает двойной промотор СаМУ 358, сайт множественного клонирования, кодирующую последовательность гена 1ис РНоОпи8 ругаЙ8, который кодирует люциферазу и выделен из модифицированного интрона Р1У2 гена 81-Ь81 картофеля (Еске8 е1 а1., 1986, Уапсаппеу! е1 а1., 1990), еще один сайт множественного клонирования, а также Ыо8-терминатор гена нопалинсинтазы АдгоЬасЮпиш ЦппеГааещ. Амлифицированный с помощью ПЦР фрагмент участка кодирующей последовательности, например гена Р1ТО_03410, клонировали в плазмиду рАВМ_7081ис1, которая была также клонирована в вектор рРНК-ί для получения конструкции 68-РНК (фиг. 14А).

Тест-систему транзиентной экспрессии можно использовать не только для оценки общей функцио- 14 027487 нальности конструкции РНК-ί, но и для исследования различных участков последовательности какоголибо гена, что касается эффекта его сайленсинга, и в конечном итоге для выбора наилучших участков последовательности гена в целях его оптимального сайленсинга. Кроме того, бомбардировка частицами трансгенных растений, стабильно трансформированных конструкцией РНК-ί, может служить для определения эффективности сайленсинга генов в отдельных трансгенных линиях картофеля на основе НЮ8, которая может значительно различаться в зависимости от места вставки конструкции. В различных трансгенных линиях картофеля на основе НЮ8, которые получены трансформацией различных генотипов картофеля и которые демонстрируют снижение количества спорангиев после заражения Р. тГек1апк, отмечается также сокращение активности люциферазы (фиг. 15А-18А). Это говорит о функциональности конструкций НЮ8, процессированных до δί-РНК, в том, что касается сайленсинга последовательности целевого гена в трансгенных растениях.

Если каждая кодирующая последовательность генов, подлежащих сайленсингу комбинационной конструкцией, например рРНК-1_Н1О8-СоА (целевые гены: Р1ТО_08393, Р1ТО_00146, Р1ТО_10447, Р1ТО_00708), клонирована в вектор рАВМ_7081ис1 за кодирующей последовательностью гена 1ис Р1ю1шик рутайк (рАВМ_70§1цс1_Р1ТС_08393, рАВМ_7081ис1_Р1ТС_00146, рАВМ_7081ис1_РГГС_10447, рАВМ_7081ис1_Р1ТС_00708), и вместе с вектором рРНК-1_НЮ8_СоА должна транзиентно экспрессироваться в листьях картофеля, то эффективность сайленсинга комбинационной конструкции можно анализировать по разным целевым генам. Это также возможно путем бомбардировки трансгенных растений, стабильно трансформированных комбинационной конструкцией РНК-ί, частицами отдельных фьюжн конструкций, состоящих из репортерного гена люциферазы и тестовых кодирующих последовательностей различных целевых генов.

Активность люциферазы определяли с помощью Эпа1 Ьисйегаке® Керойет Аккаук (Рготеда, МаппНеип) (δΟιιηίάΐ е1 а1., 2004).

Оценка устойчивости трансгенных растений картофеля в условиях открытого грунта.

Для тестирования устойчивости трансгенных растений в условиях открытого грунта трансгенные растения культивировали в начале года (март) из растений ίη νίΙΐΌ в условиях теплицы в ячеистых поддонах в течение 3 недель. Эти растения затем пересаживали в теплицу с крышей из проволочной сетки прямо в грунт, создавая тем самым для растений естественные условия - температуру, солнечное освещение, осадки и влажность, схожие с полевыми условиями. Растения высаживали на 3 грядки так, чтобы на каждую грядку приходилось по 6 растений. Через 8 недель одну боковую долю листа из 2 растений каждой грядки инокулировали Р. шГейапк путем опрыскивания (750 мкл; 10⁴ зооспор/мл). Доли листьев помещали под пластиковые мешочки для обеспечения повышенной влажности и активации заражения. Через 2 дня пластиковые мешочки снимали. Раз в неделю осуществляли визуальную оценку в баллах и фотодокументирование роста спор гриба РНуЮрШНога шГейапк в условиях теплицы. Критериями для визуальной оценки пораженности вначале служили только пораженные доли листа (0 баллов: отсутствие пораженности; 1 балл: слабое поражение (поражение проявляется на '/₂ части всех долей); 2 балла: поражение более '/₂ поверхности долей листа; 3 балла: поражение всей поверхности долей листа), затем распространение поражения на растение и на всю грядку (4 балла: распространение поражения на другие листья растения; 6 баллов: распространение поражения на другие растения; 8 баллов: распространение поражения на большую часть растений; 10 баллов: 10% растений поражены/погибли; 20 баллов: 20% растений поражены/погибли; 100 баллов: 100% растений поражены/погибли).

В различных трансгенных линиях картофеля на основе Н1О8 (РК-Н-4-7, РК-Н-4-11), полученных путем трансформации картофеля генотипа Негтек, отмечено значительное уменьшение степени пораженности РНуйорЫНога шГеЧапк по сравнению с трансформируемым генотипом Негтек, который культивировали, высаживали и инфицировали в качестве контроля точно так, как трансгенные растения. Уменьшение степени пораженности сначала характеризовалось значительным снижением способности патогена вызывать поражение инокулированных долей листьев (подсчет через 21 день после заражения: РК-Н-4-7 - 3,3; РК-Н-4-11 - 3,2; Негтек - 7,6) и позднее значительным снижением способности патогена к размножению в этих растениях (подсчет через 32 дня после заражения: РК-Н-4-7 - 26; РК-Н-4-11-15; Негтек - 80) (фиг. 19А и В).

С помощью описанных тестов можно не только продемонстрировать процессинг конструкции Н1О8 в к1-РНК в трансгенных растениях картофеля, но и функциональность этих конструкций в отношении сайленсинга последовательности целевого гена в этих растениях, а также определить количественно повышение их устойчивости к Р. шГеЧапк по снижению образования спорангиев патогена на этих растениях-хозяевах. Поскольку идентификация функциональных целевых генов Н1О8 не представляется возможной без тщательного тестирования их функциональности, то детально описанные здесь методы анализа особенно подходят для определения генов, которые эффективны в конструкции Н1О8 и для получения устойчивых растений на основе НЮ8.

- 15 027487

Список последовательностей <110> КМ5 5ΑΑΤ АС <120> Трансгенное растение вида 5о1апит ТиЬегозит с устойчивостью к РНуторНтКога <130> Юл/5 0199 ϋΕ <160> 43 <170> РатепИп уегзтоп 3.5 <210> 1 <211> 1042 <212> ДНК <213> РКуГорИтИога 1пТе51ап5 <400> 1

сдгсаадагд	стдсддаддг	стдтдстдсс	дтгддсасдг	сдтдссттсс	сдсддтссдс	60
ддсгадссга	дсдссдгссг	дгдсгдсгсс	саад!ас11Т	1сасдтдсс1	ГсадсдШдс	120
ддадсадад!	садсддсатд	тдатсдссдс	дстддгсдтс	аассадсстд	дттдгсгддс	180
сдадатсдсс	аассгсисд	ссдстсдадд	ТаасТагсда	Тасдсааада	сдстддссас	240
аддада!ссТ	ааасатддтд	1да1дсаддс	1асаага11д	асад!с1дд!	ТдТдддТсдс	300
асддаддтсд	аддадс!с1:с	ссдтатдасд	дгтдГсдТса	асддсастдс	дсададГдтт	360
д!саасд!ас	дтатадгаа!	тасададаса	ддадсадсад	дтдаттдаса	стсаатдтдт	420
стттдсада!	даадаадсад	стсдаддатд	тсдтдтатдт	тдстдтддтс	аататссгда	480
дсадгддсаа	даасдсТдаа	аадаастасд	тсдадсдсда	сстдатдстд	дссааддТд!	540
ссасддссдд	гасдгсддас	дсгдатстда	тассстасса	ссассддаа!	тсдтдаасат	600
ддассгдасд	Сааасасщд	с1ддгд1д1д	гдстддсгас	ададдсгдда	тстсдсдстд	660
адд!дд!дда	дсттдссаас	сгдтгсдасд	ссааддтдат	тдасдтдсда	ссдсассадд	720
Патддгаса	ас!ддс!ддс	асссстддтс	дсаПдаддс	атиттддас	стдстааадс	780
сдс1ддд!а!	сасададатс	сассдсадид	дддтсапдс	датддсгсдс	адсассадтд	840
Тдассдасда	ссТдддсда!	сссгсдасд!	«дадддсдс	сасдсдаасд	сттстддасд	900

- 16 027487

аддссдахда	сдаададххс	дахдхсхсхс	дссХХссдсс	хддахаахах	дххддхадад	960
ХХаХдаХсаХ	дссаХсассх	ххххсххсда	ХаддасПд!	дссхдахдас	ааххдсадса	1020
аддаасдхдс	хадсдаадах	Ϊ9				1042

<210> 2 <211> 3072 <212> ДНК <213> РКуХорНхНога тпРезХапз <400> 2

ахддхдсхсс	дадсддххсд	дсхдахсдхс	саддсахсхс	хдсхссхдса	адхдсхссад	60
ХдХддсдссХ	ссдхаасхдд	ХдсХсаадха	аахдаааасх	ххдадаасас	хдадсххасс	120
Хсдаасдаха	аасхдддаас	адхддсхссд	дссдасаХсс	сдхсххсаса	адасдадааХ	180
схсаадааас	аддаададсд	хддсххсххх	дасхддхххд	дсаахддсда	сдасасдссх	240
дссссддсхд	схдасдасаа	схссддхааа	хахдсдасха	сдасассдах	сссхддсасд	300
дсхдсдсддс	сдхсхасдад	хадхсхдахд	ХсааадХаХд	дхадхахдсх	сддхдасххх	360
асхааадаса	сдасдссддс	схсддаадсс	дахдадсдса	саасдадсдс	асдхадсдсх	420
дссасссдхд	ссассХсдда	схссхсххса	ддхадхассх	схддсадсдс	ддсадсадаа	480
дхсаадссда	ададааадаа	дассаадаад	ссХдХддХХд	ссдссдсдхс	Хдааадсдда	540
дададхдсаа	дхдасдасда	Хдссадсдад	дсдадсдсХХ	сдддсадхда	ддсааадссс	600
аадаададда	саассаадаа	дасдаддаад	ссддХсдхад	сХдсХдсдХс	дасдхсхдаа	660
хссдаддахд	ссхсдасдхс	ХдааХссдад	дахдсххсдд	дсадхдаддс	ааадссхаад	720
аадаадасаа	ссаадаадас	хадааддссд	дхадсадсхд	схдсахсдас	дХсхдааХсд	780
даддахдсхх	сдддсадсхс	ддасдадхсд	ддаадсдасд	ахсхдхсдда	хсхдсхсддс	840
адсхсддсдд	дххссддаад	сдаадахдас	ахдхсддссс	ххсхсддхад	сдсдддаддх	900
хссдддасхд	асдасдссхх	ахсадсхсхд	схддддхсдд	дадХсддхдд	схсдддхадх	960
ахдсххадхх	хсдаадасхх	хахдаадаах	ХасддХадса	хдххсддххс	дддаадхадх	1020

- 17 027487

дс1д!сдасс	Гдггсддада	сссдадсасд	ссссадааса	асасдаИда	сдасдаада!	1080
а£са£сс£сд	дсдааскдка	сддгддсаад	дадсасддсд	асдссггсгс	ддасагсадд	1140
аасаксаадг	££дд£сада£	дагсскдаас	а£1асад££с	дсддГсаада	дсдсдгдда!	1200
гссаккддга	££асад£да£	дасгсаадаа	дсгдггддга	ассггдгдса	сддгддгдаа	1260
ддкддГассд	ааддаШсак	гдаассддад	асдддгдаса	стаггдагас	сд£сдаад£а	1320
сасгдддаса	адаасааддд	саадасдГдс	акстгсгасс	гсаадагддс	дасигсгддс	1380
ддкаадасда	Щдсдасддд	аасдаадасд	дссаасадсд	ссдксагсаа	дссдсссаад	1440
ддсгассадс	££дс£дда££	ссагддгсдг	дссадкадгг	с£дд£агс££	ггдгаггддг	1500
ддаа£с££са	ссаадсаада	сдсдасддаг	сисдсадкса	сддасдгдаг	ддсса£с£сс	1560
адСаадддсх	сссссдагаг	сгасаасхас	дасассасса	ггсд£аасгд	ддгдддассг	1620
сГададасад	сдадкдасаа	сдсс1д11ас	садаададад	исдасдгсад	садсааддда	1680
а£д£д£ссд£	сддд£Г1саа	сааддасдас	дасаддкдса	гсасссаакд	гссгсгсаас	1740
гассссаид	асгдсггдаг	ддадгдсагд	ссгсааааса	дгдасгдсас	ссад££да£Г	1800
д£сдс£аадд	«Гссдссдг	сд££дсгд£с	дспгааакд	ссдсгасдаг	дддтаГсГГс	1860
ддГасдсГдд	£ддсгдсст.а	садаассдсг	аасгхгдсгс	ГсассГдсдс	саГсаасдщ	1920
дкдаасдсГд	гсаадСсдсг	даигасгас	сгдсдкгаса	адсадассгг	дагсссдасс	1980
асддасасдд	адаад££да£	ддасааддсд	щссадсгдс	ада££д£са£	£с££дас££д	2040
сс£с£ддс£а	£С£д££С££д	ссгдддсагс	аадаггссгс	сгаадсгсса	дггсгсддсг	2100
асса«с£дд	сгдгсдгдгс	ддссашдгс	а£да£ддс£д	£са1дд£сдд	£даддссс£с	2160
ггсдсдгсдк	сдаасаасдг	сагдсгсагд	сггсдгдадг	сдддсдсгш	таасас££с£	2220
дстсгдаасд	дадасасса£	£дадс££да£	асдггссгса	асассаадаа	сддсасдгдг	2280
ддПасдада	гдадаасисг	сасгаассдс	дгсагдддса	аддисгасда	ааГссдкаас	2340
аасасдссда	а£дс£да£дс	сда!да!д1а	сд1д11дадд	1дадсаад1с	д!сса1са11	2400
асддаГдаса	гссссаггдг	дассаассас	1дса1ддд1д	агатсгддас	саасаадасд	2460

- 18 027487

ддсдсдгсд!	сдгасаадас	дсдсаассгд	с!дсд!аада	ссс1сад1д!	аапдидас	2520
садс!сд!Гд	аддасддГас	дассдагагд	ддгаадсагд	Гдассаадаа	ддадааддс!	2580
с£сдаа£ас£	сдаа!а1ддд	гсписдгд	с1дгсса1д!	гсдагссдас	дддгаггдсс	2640
1дда1ддсИ	ссдадСИсд!	дсадсссанг	гдгддассса	с1дад1асс!	дддгдадагс	2700
дагдагддга	сдсгдгасда	сдсГсХдддГ	ссааасасдд	йсдассаддс	дггссгддда	2760
адсйасддгд	гдгддаадаа	даадддгдаг	ддсгссдгса	сддгггаси	сдададсдт	2820
дасаадИсс	с1д£д1с1д1	ддйдаГсасд	1ссдд£ддгд	асаадсгсаа	ддаддисаад	2880
дсдссХдсга	асддсаасд!	сасдгддаса	1с1асдд1дд	аддадспдд	Хдасаадас!	2940
стасспд	ассдсгддсд	1сс1ддхс1с	тддссгдс	сгддгасддд	сддгддпсд	3000
сгасгдагд!	ддаисссдсд	агсдхсьдад	ддГддссадс	цдпспса	ГдсгсдсИд	3060
аагдпадс!	аа					3072
<210> 3 <211> 2405 <212> ДНК <213> рКуСорКгИога тпРезйапБ
<220> <221> т15С_-Геа£иге <222> (949)..(1048) <223> η 15 а, с, д, ог ΐ
<400> 3 а!д1са1ссд	Гадасидад	нахссгдсдс	аасддсахсс	сддссдадс!	дссддсдсас	60
ссдддсаасс	ассссдассс	дасдсгдссс	ааддсиссдс	ассдсаасаг	сдасддгсгд	120
иссааддасд	агсгсдтдсг	ддссдхдсад	аасдсдгхас	ддгасгхссс	сдададдис	180
сасдссасгс	Гддсисссда	дИсдсдсад	даасгсаадд	асдадддсса	са!с1аса!д	240
сассдсисс	дгсссдгдса	д!асдада!д	ааддсд!асс	ссаИдасса	агасссддсс	300
ааагдсааас	аддсадсгад	1а1са1дс11	а!да£са1да	асаассисда	ссдгсдсдИ	360
дсасадИсс	ссаассасс!	дд£сас11ас	ддгддсаасд	дгадгдгсп:	ссадаасгдд	420

- 19 027487

дсасадтас! гддьддссаь дсдскассГд тссдаастса сддаасадса дасдсгсдгс	480
агдтастсгд дтсасссьа! дддтггдтьс ссгадисдхс сгдсадстсс асдгатддта	540
дгдассаасд дхстаагдаг ссссаасХас Тссасасдсд сгсадТасда сааддссГас	600
дстатдддта асасссадта сддхсадагд асгдстддса дстастдсга саиддгссд	660
садддСаттд гасасддгас дассаггасг дтасгдаааа ссьастдасд аддгстаХдд	720
сддтьсадат дададсааХс 1ассТ1сс11 стадааааах дсХааасааГ ГссадГдда!	780
дцдгагадд истьдасаак сааьаььдсс ссстасдаи «дТсаагаг 1аасаа1сад	840
ΐΐΐΒΐίίσίΐ ссаагсссгд атласадь даддатьтсд ададтдддаа сдЬддаааса	900
ааагсаггдт саааШдад сдадссПАс тсдссдагдс садаседдпп ηηηηηηηηηη	960
ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη	1020
ηηηηηηηηηη ηηηηηηηηηη ппппппппдс дгсатсьссд дТдГсаЬсСс сдТсасЬдса	1080
дадагсдасд ааГсЬдсадт даадаадсдг сасдаасадд дсТдддТТда сдаддЬсдГд	1140
адсдассгдд асдсстдгдт сд!1сд1а1с сдТдаддсаа аадссааддд сдаддьддтд	1200
адсиддсд! ассасддсаа сдгсдгсас! стдддаас дЬсгсдссда сдаддсгдаа	1260
дстасдддсд адстдстсдт ддадстсддс тсддассада с!1ссс1аса саасссдгтс	1320
аасддсддсх асгасссддг ссадидгсд Исдаддад! стсадсдсдь сагддсгдаа	1380
дасссддадс дспссадда астддгасад дадгстстдс дхсдисасдс тдгсдсгатс	1440
аассдгсгда садссааддд саСдсддггс Гдддассасд дТаасТсдТС ссГаЬЬддад	1500
дсасаасдСд ссддсдсдда сдсдссдсд! сссддСдтСа адсссдадда ддсгдсСдСс	1560
гсдасгасьд сссссаадса ссссадссас дсссаддаса ьсасдддсда сасгстсссд	1620
сиддтсд дсссдИссд с1ддд1с1дг асдГсдддИд ассасдсдда ссгдсадаад	1680
асадасдсса Пдсидсссд ЬдГдагдсдс дадссдссдд ссдаассдда адьдссддас	1740
сдддгсдсдд сгсадсгдсд гдасааспд сдсгддаид аддстдсада ддадаасааа	1800
сТддГсдТдд даьсддаддс дсдьагссгд тасдсгдасс дьдтдддьсд сддсасдагс	1860

- 20 027487

дссанддсдг	Есаасдссдс	гд-ЕддсЕадс	ддсдадсЕсЕ	сддсасссдЕ	сдЕдсЕсадс	1920
сдсдассасс	асдасдксад	сддсассдас	ад-ЕссдССсс	дЕдадасдЕс	дааЕдЕдасд	1980
дасддсгсдд	сЕССсгдСдс	сдасасддсд	д-Едсадаасд	сдсЕдддсда	сдссдсЕсдс	2040
ддадссасдс	ддассдсасс	дсасаасддс	ддсддСдссд	дсЕддддсда	ддЕсаЕдаас	2100
ддгддсгссд	даагддгасг	ддасддсЕсд	даЕдасдсдс	дсдадааддс	ддсдЕдсаЕд	2160
сксддсСддд	асдгсаасаа	сддсд-Еддса	сдссдсдсд-Е	дддсдсдсаа	сдссаасдсд	2220
сдсССсдсСа	ЕЕдадсдсда	даЕдааддсд	дасссЕЕСдд	ЕасдЕЕЕдЕЕ	ЕддЕЕасдад	2280
сггдадасг!	гддаадсдгг	адаипааг	дЕд-Едсд-Еа!	сЕЕЕдЕддЕа	ЕЕдсадсЕда	2340
сддкдасдси	ддссаасдад	дссдасдасд	сдадсдЕдсд	ЕдасдсЕдЕд	адсаадсЕсЕ	2400

гсгад 2405 <210> 4 <211> 1735

<212> ДНК <213> РКуЕорЬЕЬога тггРезЕапз
<400> 4 аЕдсЕсЕсдс	адсЕЕааасд	садаЕЕсасс	сЕдддасдас	дЕЕдЕсадас	сдаадаадаа	60
дассасЕсда	ддаЕсассаЕ	дадссЕЕЕсс	аасадсааса	дЕассадсЕс	сЕЕдсссссЕ	120
дЕддасдадс	ассасддсЕд	ЕдадЕассЕд	даЕасддсдс	ЕдасдаЕсЕЕ	ЕдЕааЕсддс	180
дсдЕсдддсд	аЕсЕддссаа	даадаадасд	ЕаЕссдЕсдс	ЕсЕЕЕдсдсЕ	сЕасассаЕд	240
ддсЕассЕдс	сЕдаасасдс	ддЕсаЕсдЕд	ддсЕасдсЕс	дсадсдссаа	дааЕдаЕдсс	300
дасЕЕссдсд	сдсаааЕЕдс	дсссЕддаЕс	аадссЕаада	сасссдаддс	сдаддсЕсдс	360
ааддаддссЕ	ЕссЕсаасаа	дЕдсаЕсЕас	сдсадсддса	ааЕасдасЕс	аасЕдаадаЕ	420
дЕдддсаадд	Еаадсаадда	даЕддаддса	ЕЕддаадаад	сссаЕддаЕс	дссЕдЕддсс	480
аассдссЕсЕ	ЕсЕасЕЕсдс	саЕсссдссс	асадЕсЕЕсд	ЕдсссаЕсдд	сасдадсаЕс	540
аадааддсдд	сасЕдассас	дсдЕддЕЕдд	аассдЕсЕса	ЕсдЕсдадаа	дссаЕЕЕддс	600

- 21 027487

сасдагсгсд	асгсдпсда	саадпдгст	саддасакдд	дсдсдскдга	садсдаадас	660
дадагстасс	дтагсдатса	стасидддс	ааддааакдд	тдеадааест	дс1сд!д11д	720
сдсИсддса	агдсаагсп	сдадсссап	гддаассдса	астасдкдгс	садкдкдасс	780
аТсасииса	аддаадасат	сддсасксад	ддссдсддкд	дскасИсда	с1сд11сдд1	840
аксаТссдТд	асдтсакдса	даассасстд	сИсаддтдс	ТдСсасПд!	ддссакддад	900
ссассаатсс	аадскдскдд	тдасаастас	иссаастака	ГссдкдаГда	дааддксаад	960
дтдснаас!	дсаИдадсс	таксаадагс	дадаасассд	Гсскдддсса	дкакдааддс	1020
адсааддадс	гсаасдадсс	дддс!асс1с	даддасссда	сддтдсссаа	дддаксадкд	1080
асссссасск	ксдссасадс	1д11а1д1а1	д-Ссаасаасс	сдсд«ддтс	гддгдпссд	1140
ИсаЕсатда	аддседдтаа	ддссидаас	даасдсаадд	дгдадагссд	гдкдсааггс	1200
сдсссдссгс	сгддадсдса	дсас11д11с	ссаддгдгса	адагсссад!	асаададИд	1260
дкдскдсдтс	касадссдда	ддаадссдтс	касккдаада	кдаасдгсаа	дадгссхддг	1320
сгдсадассс	аддсдатст.с	аадсдадсгд	дасПдхсд!	асдссдадсд	«асдадддг	1380
дсададдгдс	сддасдсска	сасгсдсид	агсскддасд	1дс1дсд1дд	гаадсаддсс	1440
дсаТТсдТдс	дгдакдасда	дс1ссд1дс!	дсакддаада	тспсасдсс	аггдсгдаас	1500
дадапдада	сдсадааддк	даадссдскд	садгатасдт	ксддстсдсд	гддссссаад	1560
дададсдасд	адсгддкдаа	сададстддс	иссадтасс	ассадддсда	акассадгдд	1620
садссдсдкд	кдсдсаскас	садгдсаста	1адд11д1с1	ситддида	дсасааада!	1680
дсссддаад!	скддсакааа	1а1да1дд11	дадссадска	дкскксаака	аддда	1735

<210>	5
<211>	1245
<212>	ДНК
<213>	рКуСорНгНога тгтРезгапз
<400>	5

дддадсттаа аадгдскаса ддаадксдс! агсагддсдг саадаадкс! сдкссдссдс 60

- 22 027487

хсддсдсдхс	хсдссасхдс	сахсдсхасх	аадсдсадсх	ХсдХХсдсдс	сдсххссдсд	120
хсддхдаасс	хссадхдсхх	Хсадасадса	сссдссасХс	дссадасссд	хсххсададх	180
асдсадасаа	дсхссадсда	хдадссдссс	аааасддадх	ссссадХада	сссададсад	240
схсаххсхдд	ссааддсхсх	ддассаХдХд	ахххсссасд	ддхасдххах	ддхххаадхд	300
схахаааадс	даадахахсс	хаддххдхаа	сдсхсхсдаа	хдсааддхдд	дссаххдадд	360
схсхадсадс	Хддсдссасд	дахсххддсх	асссххсддх	ддсХсасддс	ахдххссадс	420
дсддадсхах	хдахххддхд	даххахххха	хддасхсдхд	хсхсдссаад	сХасдсдада	480
сдсхдаххдх	саасасддаа	аадххдсадд	ссахдасддх	дасхдаасдх	схсаадхххд	540
дсдхсхдсас	дсдхсхдсад	аХдсХддадс	схдхдххддс	хасахддсса	саддсхахдд	600
ссаххддсдс	хсхассдсад	аасдсассхд	дхасхдсааа	дадасхддсс	садсхсхсдд	660
ахдааахсхд	дхасххсдсх	ддхдасаадх	ссасддаХсХ	ахсахддхас	ассаадсдсд	720
схаххсхсас	дддсахсхас	дсхадсасдд	адсхдхххах	дсхдаахдас	аадхсдссда	780
асххссадда	сасдхдддах	ххсххддасс	дссдХдХдда	сдааасдахс	саасХсддад	840
аасхдссхса	даасдхасдх	даадсХдХХХ	дадхсхсхха	хааддсххад	схдххдасдх	900
дасхаасхас	ххдхдхдсхд	дхсхдхдхсх	дадсадсхда	асдаХдхддс	хдддахддсс	960
адхаххдддс	хдсадхсддх	дххххсддсх	дХдасдхсдс	ххдсдддхсс	хсхддссадх	1020
садахсахсх	сдаасхсдсс	хххдадхсаа	дХХссдаасс	сдахххсадс	хдхдддсадх	1080
дХддХХссХс	ссХсддХХдХ	ахсддсхдхх	дссхсхддаа	хдссахххад	саахссхасх	1140
хсхдсхддас	ахдасддхах	ддсдххсаад	хсдааддахс	хддасдааах	хаассаадад	1200
сххдадаадс	ХсддсддссХ	хдасдсдадх	даасдасдда	асхаа		1245

<210> 6 <211> 1461 <212> ДНК <213> РКуХорНхЬога тпРезхапБ <400> 6 ссасдхссад схсаадссаа ххдссахдсх дхссдсхасх сдссдссхха сдсдахсхсх 60

- 23 027487

дсдьсдсссь ЬсЬдсасЬдд даьдссдссь сдадьссьса ььсдсьсссс ЬсасЬсадсЬ	120
аьссдаддад дааассаьдь ьсааддасас адьсдсссдд ЫсдсддсЬд асдьддьадс	180
ьссдааьдьс сдсдссаьдд асасадсддд ддадаьддас саьдсьаьса сасдаддась	240
аььсдадааь ддасьдсьдь сддьададаь сссадсадас ьасддаддьа дсдаддссгс	300
дььсаьдаас сьсьдсььда сЬаЫдадда дсьдьссааа дьддаьсссд ьсдьдддась	360
дсьсдьддаь сьасадааса садыдьдаа саасдьсььс сьддьдадьд аададьасда	420
ььддьаььсь аааььсьдьа дсьдассаьь дьдььдсадд ьдсасддсас ддасдадсад	480
ааадаааадь ассьдссдад асьсадсдсд дасаьддьдс дьдсаьсааь аьььддаааь	540
аыдьдаьаа ьасьааьаьь дьасддьдьь дьадаьсддс адьььсьдьь ьдьсададдс	600
ьддаьсаддь адьдасдсдь ьсдсдсьдаа дасасдддсд даддссьсдс сддасдддад	660
сьасьасьсс аьсасьддьс адаадаьдьд даьсьссаас дссдадьась сьддсдьдьа	720
сыддьдЫс дссааЬдЬдд асссдьссаа дддсьасаад ддьаьсасдь дсьььаьсдг	780
ддассдадас аьддааддас Ьддадаьсдд ьаадсссдаа дадаадсЬсд дсаьссдсдс	840
аьсдьсдаса ЬдЬсссдЬса сасьдасдда ЬдЬдааддЬс ссдааддада асаььсьддд	900
ададсьдддс аадддаьаса адаьсдсааь садсасдььд ааьдааддас дсаььддсаь	960
ьдсдьсдсад аьдсьдддас ьддсьсаддд адьсьасдас садасдььдс сдьасьгдьь	1020
сдадсдссаа садььсддсь сьсссаьсдд ададььссад дсдаьдсадс ассааьаьдс	1080
ддаддсадсд сьсдаьаьсд адасддсдсд ьььдььддьд ьаьаасдсад сдсдьсьсаа	1140
ддаьдсьддс саассдььсд ьсааасаддс ьдсьаьддсд аадсЫсаЬд ссьсдсдьдь	1200
ддсададаад асддсаьсса адьдсаьсда дсЬдсЫдда ддсаььддсь ььассаадьа	1260
сыдсььдсд дадаааььсь аьсдьдасдс ааадаЬсдда дсьаьсьасд ааддаассад	1320
ЬаасаЬдсад сЬдасдасда ььдсдаадсь ьдьдьсддад дааьасаада ддЬааЬЬдаа	1380
ьдьсдьдакс сьдьасьсад асььдаьссь ьдьадсааас сааасаадьа асаьььссдд	1440
адаасдадсд Ыадаассад а	1461

- 24 027487 <210> 7 <211> 1580 <212> ДНК <213> РКуЮрКгКога 1п6е51ап5 <400> 7

атдсгдсдгс	дГсИдссс!	ссдгассдгд	аадсспсТд	ТдсдсаасИ	сдссгссдсс	60
гсддадсгдг	асаадаассс	дсдсадсгсс	аадтгсадса	Гдассаада!	сдгддссас!	120
атсддссссд	ьдгсддадса	дстддасагд	ссасадаада	гсасддасда	аддгшдсдг	180
аТсагдсдса	Шаасисис	асасдссдад	гасдасдадд	ссШдсгдсд	сдГсасГаас	240
сИсдЕдсс!	дТсдсддсдг	дсасдссдад	ддгсаддсса	ааисаассс	асдтдссдьд	300
сТасасдаса	ссаааддасс	сдадаксд!	асдддгаада	сдсдсдасдд	саадаааагс	360
асдИадада	дтддсаадгс	дд!дд1дс!с	асдассдасс	сддсСПсда	дсгсдадддг	420
ассдссдаса	адистасд!	1асд1а1сад	садИадссд	ааассдИаа	ддТдддсдаг	480
асадгдИас	гаТсгдасдд	ссиагссд!	с!сасс1д1а	сдгсадгддд	гааддатдад	540
аНасдгдсс	асагссасаа	гассдаддаа	агсддгаасс	дгаадддгдг	ааассгсссд	600
ддтдатсд	Гсдадидсс	гдсгсгагсг	дагааддаса	аасдсдассг	ддаИдддд!	660
дтсдадсасд	агагсдасш	гатсдсддсс	гсдпсаСсс	дгааддссад	сдасдгдаас	720
гсдагссди	сдИсдГддд	ададгдсдп	аадааасас!	ддддГаасса	ассСддПас	780
апдсссста	адатсатстс	гаадагсдад	аассссдаад	дгахссадаа	сшедаддад	840
агссгсдадд	ссгсддагдд	сагсатдтд!	дсссдгддсд	ангдддгдт	сдаадТдссд	900
дсасадаадд	1сс1даса1а	ссадаадагд	агддгддасс	дсгдгаасдс	сдгсддааад	960
ссддИаид	гддсдасдса	датдс!сдаа	Гссатдсада	асаасссдсд	ссссасдсд!	1020
дссдаадгдг	сддагдгсдд	саатдссдгд	стддасддсд	сддасгдсдг	сагдс-ссад!	1080
ддсдадгсдд	сЁсадддсаа	дгасссдагс	дадгсгдгдд	ссасдатдаа	сасддтдатс	1140
ааддаддссд	ассадсгсс!	асгсаадссг	аасгассадд	ссаадШсса	дПсдадссд	1200

- 25 027487

сссасдгсдд	асдксдадкс	адссдкдгсд	гсддсадгса	адасддссаа	сдадагдсас	1260
дсдсадсксс	рдаигдгдси	сасссдгасс	ддггасасдд	сссдааадд!	сдссаадкас	1320
ааассдаскд	гдссддгсаг	дгдссгсасс	ассдасскга	аддксддссд	хсадсиссад	1380
акссассдсд	дкскдкассс	ддкддкдссд	даскассид	ассдкдсссс	дасгассдсд	1440
даддссаксд	сксасдссаа	даадакддда	РддкГдкскд	ссддсдассд	гдгсдгсдгд	1500
арсадсддсд	асаадсгдкс	ддасдакскс	ддссдддааа	гссгсагсдд	сдгсдскдас	1560
дкссадкаад	асддадасаа					1580

<210> 8 <211> 900 <212> ДНК <213> РНурорЬкЬога тггРезкапз <400> 8

акдкддГсда	сдакдагсас	дсдд«сссг	асдсаддсса	адгссдгдкс	дсдсадсдсд	60
с«дьддсдд	садд!а!ддс	гдсдисдсг	дссисгсса	дгдтссгс	гасгсдсгдс	120
даададдада	адгссааддг	ддсдпдадс	сссааддадг	гссдггсшг	саскдгдсд!	180
ааадидада	ссдгдааска	саасасдаад	сдсдкдасд!	ксдсксгьсс	сасасссдад	240
сасдадагдд	дксхсасдас	дссгадидс	спагддсгс	дидссааддс	адасддсаад	300
асадкддкдс	дссссгасас	дсс!дгсаас	дгдаасдасд	адааддд!!!	с«ддадс!с	360
дгадгсаадд	дпасссаса	дддааадсгс	адсаадсаса	гсдгдсадсг	сааадаадда	420
дасгсгсггд	асакдааадд	ГссскГЬссс	аадкксаакк	аскассссаа	саддрасаад	480
адсаксддса	1да1сдскдд	сддсгссддг	ахсассссса	Сдсгдсадс!	саксааддсс	540
аплдссдса	асссддадда	ссдсассдад	аксасдскдс	1д1ас1дсад	кдгсгсддаа	600
даадагагса	1сс1дсд1да	адаадгддад	дссаТдаГдг	ассгдгассс	дсадаГсксс	660
дгдагссасд	гдсгсадсаа	сссдкссдсс	дадгддаадд	дгсггасадд	сисдкдгсс	720
ааддадагда	гсдаааадга	сагдссддад	ссдгсадасд	асаассгсд!	дгдхдгдгдс	780
ддиссгссдс	саахдасдга	ссасдгсСсд	ддСдасаадд	сдааддасад	дссгсадддс	840

- 26 027487 даасгдсаад дгсидсгдаа адасагдаас гасассгсса стсаадтди саадппаа 900 <210> 9 <211> 1245 <212> ДНК <213> РНуЮрКхНога тпРезСапз <400> 9

дгсдадсаса	адассаасас	Тсстдсасса	сдассасссс	саадаСсдСс	дсссссддсд	60
ссдссддсса	аапдсдг.ас	гсдидсгдс	сссссадсас	дсссдссссс	сссссссссд	120
1д1сис1сс	агасссгаас	дгстсассат	дссдсадссс	дсассддсса	сдсссссддс	180
сссаассадс	дсдгддадс!	дсдсстдсгд	дасаСсдаас	ссдсссадда	адсдсССдад	240
ддсдтсаада	Гддадстсса	ддас!д!дсс	сссаасссад	сддасдссас	сасссссаса	300
дссдаюдд	адасгдст	сааддасдсд	дасдСсдсаа	сссссдСддд	сддссссссд	360
сдсаадсаад	дсагдсадсд	сааддаюд	ассдадаада	асдсадссас	ссссааддсс	420
садддадсгд	сгагсдасса	дПсдссад!	сдсдасдССа	аддсдсссдс	сдсддссаас	480
ссадссаага	сдаасгдссг	саидссагд	дадаасдсас	ссадсаСссс	дсддсдсааС	540
шсгсддсас	гдасдсдИс!	ддассагдад	сдсссдсдсс	сдссссСадс	ддадааддСс	600
аасдадассс	ааадсссдаа	адиасдгсд	ааддасдсса	асааддСсдс	даСсСддддс	660
аагсасгсда	дсасдсаад!	дсссдасд-сс	асдаасдсад	аадсдааддд	ссадссдсСС	720
дагаадаТсд	ссгсддасаа	ддапдддст	дадаадаадс	ссдссаадда	сдСдсаддад	780
сдсддгдсад	ссагсапаа	ддсСсдсаад	сСсСсдадсд	ссасдссддс	сдссдссдсс	840
аСсддсдссс	асстдсдсда	сСддССсааС	ддссссаадд	асддсдадсс	сдСдСсСаСд	900
дссатдс!	сддасддсаа	саадСасддС	дсдсссдадд	ддсссассса	сгсдССссса	960
дгсаадгдсд	сдддсаасдд	сдсдСасдад	дсддсдаасд	дСссссссаС	сСсдссдсдС	1020
аИсдасдсаа	1да1дааадс	сасСдсдсад	дадсСдасад	аддадааддс	сдасдссдсд	1080
дадагссгд!	сдсдссадтд	адсадсассс	адссаасадс	сддасдасдд	саасдссдсс	1140

- 27 027487

гасассссаг гсдатгггтг гсксссана гдадсгдсгг саагсдпса гггдассакс	1200
Гааассааш ааттгспдг ТаггасдаИ; гсггаПдаа ааааа	1245
<210> 10 <211> 1280 <212> ДНК <213> РИугорНгНога тпРезгапз <400> 10 агдисдтстг сагигдтса дскаГссаад сдсдгдстдс адкаксПсд асаГдадса!	60
ссасаксдкс гапгссстс саксддйсда адасдсааас Тсссаддса! ааассСсдас	120
ддаадаСсСс адсддсдасд дсдсдсддсс адссдсаадд Сдссссдасд сасассасас	180
ассасСсдсд аааасдасса саеССсСдСс ддссадддса асссссдддд адсСдсасаа	240
сддссдСсСС сссадсссас сссадсдадс саасаддссд сдссссассд дссасдСдСС	300
сасдсасдса сдссасдсдс дсдсссассс саасассааа дассссдССд аадасдаааа	360
дсссссссдс сддсассасд сдсссссада сдссдссдсс сдсссссдсс дсассадсса	420
ссдссссдсс ссаддссссд ссСссассса дсдадСссаа сдсдссдССс ассссссддс	480
асдссссддд сссесссааа сааддсассс сдсссдсдда дассссассС ссааасссаа	540
ддсаСсСсдд дссасссдас аасдСсасдС ддасддаСдС адасдсссас аССдссдсас	600
дадссдсСса аддсдСддас дссаадссдс сссссссссг асдСсаСдда дааддссСсс	660
асаасдСсдс сдаадссасс Сасддсассд аадссСддда садассссас адсааассад	720
сдааасасас Сдасдссаад ссдасдааас ссдддасдса асаддсСдСс ааадсдссдд	780
аааддаСсда сдаддадссс аадададдас сдадсссдда ддаадссдсд дсссссссдс	840
сддадсдсас асСасасасд дсаасдассд сдсдссадаа ссассасдад ассссдаадс	900
ддСсдасдда асддссссдс дадассаСсд дсдСсСдсас дсдсдассса сдсддсасса	960
СсСссдссаа ддссдадссд сасссаадса ссдассссад сдасасссдд адсдасдсад	1020
асссдсддсд дасдсссдаС саСсдСдада ссдадссдса сассаасдас сдсдсСсдса	1080
СсССсссдаа ссдсдСсссс сасддссаса адссадсдсд сдпддсдсд дсдасдсаса	1140

- 28 027487

дгддастаас	сассдссдсд	ахдсдхдхса	ХХддссаХсд	ХаадхасадХ	дХХдсдасдд	1200
сддаадтдаг	ассдххссхд	сххдаадаса	ссасддхдса	сасдаХссХд	хсдахсххсх	1260
стддхааада	адасахдхад					1280
<210> 11 <211> 1016 <212> ДНК <213> РНуЮрЬгйога тпРезтапз
<400> 11 агдгсдиссг	ахсдхдсхдх	ссаадххдха	аадххдасха	аддасххссд	сдссдсхасс	60
адааксдгда	дХдХссссда	асхасссасс	дсхдддсссд	асадсахсдх	хдххаадаас	120
сдсГГсГГдд	дааххаасхс	дассдасдхс	аахсххасда	ахддсахдха	Хсахдасаад	180
сгдссдгтгс	хсдсдддсдх	хдааддхдса	ддхсхсдхса	схдаддхсдд	дадхаасдхс	240
асдасТдгда	аадгдддсда	сдсхдхсахд	хассадасдс	ХдддадссХа	Хдсддасхас	300
дгасаадгдс	ссдхдхсддс	сдссахсаад	агсссададс	Хдхсдаадаа	сдсхсХассд	360
дХТдсадгдд	дсддсдхсхс	ХдсдхссаХс	хдссххдаах	дхсхсддхда	дахдаадхсд	420
аахдадассд	ххсххдхдас	хдсхдсхдсх	дддддаассд	дасадхххдх	сдхасадсхс	480
дссааасПд	схддсаасса	хдххахсддс	асхассадсх	схдасдадаа	адхддаддсх	540
ггдасдааас	хдддсхдсда	ссдхдхааха	ааххасааса	аддадаахдх	сддсдахдхд	600
скааадаадд	адхахссдаа	Хддадхадас	ахсдххххсд	адхссаххдд	аддсдасахд	660
ххссдхдсхд	схдхсдахаа	саххдсадхс	сдхддхсдха	хсахсаадах	хддсххсахс	720
хсдсдадхах	хддадассаа	адасаадасд	асхссссаад	дссдссхссд	схдсхахсдх	780
дддаадсдаа	саадаадахх	схдахдаадх	схдсххссах	ссдадддсхс	ххсахдхахс	840
асхххдадда	асасаххсда	дадсасасдд	адсдаххдсх	даадсхсахх	адсдадддса	900
сдххдаадсс	хддсдххдас	сссасхасдх	асаадааахх	сдадхссахх	ссдаахдсаа	960
ХсдассдсаХ	дххсдсссдх	даааахдхад	дсааасхсах	сдхададсхс	дадхад	1016

- 29 027487 <210> 12 <211> 267 <212> ДНК <213> РНуЮрКгКога тпТезгапз <400> 12

ардддсаадс	асасддадсд	адссааддад	адРссаИса	адсадсадгс	дагдагссгс	60
дгдссгагдд	асасассадд	сдГдсаддГс	дгдаадссса	1дса1д1сП	гддсгасдас	120
дасдсассдс	асддасасаГ	ддагагдсгд	исааддасд	рдсдгдгдсс	дггсадсаас	180
дгдигдсгсд	дрдааддгсд	сддсШдад	атсдсгсадд	агсдгстгдд	ассгддссд!	240
аиссассас!	дГаСдсдадс	сагсгда				267

<210> 13 <211> 1147 <212> ДНК <213> РКуюрКгНога тпТезгапз <400> 13

а!дсдсаааа	1атгдаа1аг	гдаггддПа	ааасс1дд!с	11ддса1сс1	гагдассаа!	60
гасадиап	дадгдсгиа	адсддддсад	асд£ссас!а	сдгсасасгс	адаагсгсса	120
сасаадсаас	адассдасас	ааСдадсадд	ТдсдадГддс	аХсссадсаа	сИсдСдсаа	180
атадссп	дпагапаа	1Гд1а1аасд	тддсатдид	садассдасд	агсгсададд	240
«агсдссда	дсддааддсс	аасаасастд	сддсШса!	сасс11сд!д	сссгдсддсг	300
1саадас1аа	ддссдасаса	дсддасассс	Иссдддасс	дсадсдсддс	ддсдсдааса	360
гсагададдг	дддсаИссд	гасгсддасс	сасаддссда	гддсссдасс	агссадсдсд	420
сасассаддг	дддсдГддас.	садддсагса	сдсгдса!да	сдгсссддсс	асадгдадсд	480
аддсдсдаас	1аадддсс11	ассасдссгд	тддтдсиа!	дддс!ас±ас	аасаасаси	540
гдсадгасдд	сдаад!сааа	агсгдссссд	асдсссадаа	аддгасдссг	дгаагсдасс	600
асаддадада	Шдгдддсг	сааааастда	саагааасдг	а!11д1адс1	ддддтддасд	660
дапсанаг	гдгддасссд	ссдссгдадд	аддсааадас	дсссадгдас	дасдсадсга	720

- 30 027487

адсасддасг	рдсдгасаис	ссдггддрдр	ссссаасдас	дасддаддад	сдраьдаадс	780
гсаРсдасгс	ддрддсасаг	ддгрррдрдр	аидсдгдад	гсгсассддг	дгсасдддсд	840
стсдгаасда	дсгдссгссд	аассрсдасд	сдисарддс	саададГаад	идсиисд	900
сдсШадП	гаНПаап	дГсдадсГаа	сдгддрссст	гдаисдсгд	садисдрдс	960
саасдгдаад	сасссистсд	стсиддси	сддгсрдрсд	асссдссадс	асисдиса	1020
адссадсдсд	сидсддасд	дсдидгдаг	сддсгсдаад	аидгсаада	гсаксдадда	1080
сдсдссрдас	асадссасдс	дрдсгдссаа	гдрддаддса	Црдссаада	дсаГсдГдаа	1140
сссггад						1147

<210> 14
<211> 1917
<212> ДНК
<213> РКуЮрКгКога тпКезгапз
<400> 14
агдддрааса	гссгддадда	дагсдсадсд	садсдссдгс	гддасдгддс	ддссдссаад	60
саддгсагар	ссдссда!да	1с1ддссаад	аадагсдадс	асдсддадд!	сдПИсддс	120
•ссдасссгдс	ссдгдсида	ссдсснаас	дсасссасдд	гдсдтссддс	адгдсаддда	180
агсрддадаа	даагсгдсд!	сгаасдсадс	1ассдс1д1а	сгдгапт	гссидгаи	240
1а1ддсадад	ададдддрдд	1ссдасд1дд	с!с1ддс1дс	сдадтаад	сдрдсдадсс	300
ссадсааадд	рдасатсдсс	асддадсьса	агс1дсд!да	дсаадгдсад	дссгасдсса	360
асдсаддгдс	садга1да1с	гссдгасгда	сададсссаа	дгддтаад	ддаЕсдсЬад	420
асдасагдад	ддсадсссдд	даддгддгсд	адддсагдад	исадсдгсс!	дсса1сс1дс	480
дсааддаЫ!	сагсагсдас	дгдгассадг	гдсгддаддс	ссдсдсПас	ддадсддаи	540
дсдрдпдс!	сатсдыдсд	сгдсгдгссс	аддадсадсг	Ьагсдадсгс	апдасд1ас	600
д!сдссссдс	ПдсасГаса	гдгадгддд!	11ас1д1аса	сгдасаадсс	Тсггдггддг	660
Идгаддсса	сссасаа1с!	сддрагдгдс	дс!с1ддгсд	аддгдаасад	сагссаддад	720
сгддасапсд	с!с!ддс1дс	дадддстсда	стсаиддсд	Ьсаасаассд	сдагсгссдс	780

- 31 027487

асдЕЕЕаадд	ЕадасаЕдаа	сасдасддсЕ	сдсдЕЕдсад	асдсЕаЕЕсд	ЕдадсдЕддд	840
сЕЕЕсдсЕдд	дасдЕдасдд	сдЕЕасдсЕс	ЕЕЕдсЕсЕса	дЕддсаЕЕсд	сЕсдсасдса	900
дасдЕддЕса	адЕасдадаа	дЕдсддсдсс	сддддсаЕсг	ЕддЕдддсда	дЕасЕЕдаЕд	960
аададЕддЕд	аЕаЕЕдссдс	дасддЕдаад	даЕсЕсЕЕдс	адааЕдЕдас	дсдЕсасасс	1020
дадЕсдддсд	ааЕЕсдсЕЕЕ	ддсЕссЕссд	сЕЕдссааад	ЕдЕдсддсдЕ	сасдасадЕд	1080
дадЕасдсдс	ЕддсддссЕЕ	дсдЕааЕддЕ	дссааЕаЕда	ЕЕддЕаЕсаЕ	саЕддсддаа	1140
сасЕсасссс	дсЕаЕдЕсса	адЕддаддаа	дссааддсса	ЕЕдсссаддс	ЕдЕдЕдддад	1200
ЕаЕддддадс	дсасдддссс	ЕаЕЕсЕсЕса	дасаЕЕдЕдд	адасЕсасЕЕ	ддасддсаад	1260
аасдасЕддЕ	ЕЕсаЕадааа	ЕдЕссЕЕдсд	ЕЕдсдЕдаад	сЕЕдсЕсдсд	ЕдсассЕсЕс	1320
дЕддЕсддад	ЕдЕЕЕдЕсаа	саадасадсЕ	дссдадаЕда	асдсдасЕдс	аааддаааЕс	1380
ддасЕддасЕ	ЕддЕасадсЕ	асасддсдас	даддддЕЕЕс	адаЕСЕдсад	ддасаЕЕаад	1440
Еассссасса	ЕЕсдсдсдЕЕ	дсаЕсЕдссс	дасассасдс	ЕсЕдсдасдд	сдЕддасдса	1500
даадссдЕЕс	ЕасадсаддЕ	Есаддааддс	сЕЕдссаасЕ	асаЕЕсЕдсЕ	ЕдаЕасдасс	1560
дЕдаадддЕс	адсадддсдд	сасЕддсдЕс	асаЕЕсдасЕ	ддаадаЕЕдс	адссаЕсЕЕЕ	1620
дсдсаддсас	дасЕЕсссЕд	ссЕсаЕддсЕ	ддЕддссЕЕа	ссссЕдадаа	сдЕддЕдаад	1680
дсЕсЕаЕсдд	ЕсддЕсассс	сдЕЕддддЕд	даЕдЕЕадса	дЕддадЕдда	адЕдаааддЕ	1740
ЕсассЕддЕд	ЕдааддаЕаЕ	ддасааддЕд	асЕдсдЕЕсс	ЕаааддсЕдЕ	дааддаЕЕас	1800
сЕсЕсдаЕЕд	сЕасдсЕЕаа	даЕсдаддад	дадасддааа	ссЕададада	дасссЕсдда	1860
дЕдЕЕсЕааЕ	сааЕдадддс	сасЕааЕдаа	дЕдсЕЕЕЕас	дЕЕасдадсЕ	ЕддаЕдс	1917

<210> 15 <211> 1494 <212> ДНК <213> РНуЕорпЕЬога тгтбезЕапз <400> 15 аЕддЕдсасЕ аЕсдЕадЕас Есдсддсддс дЕссдсддсс ЕЕадсЕЕЕда дсаддсддЕд 60

- 32 027487

схдасдддсх	хддсххссда	ссдхддссхд	схдахасссд	аадсхдасда	дххсссхасд	120
сххссадсхд	ахдсдсхдда	даадхдддсд	хсхсхххсдх	ассаддаахх	ддссдхддад	180
дхсахдсдсс	ххххсаххда	сдааадсдад	аХсХсдсдХд	ассадсХдсд	ХдадсХХдХд	240
ассаададхх	асаасдсдас	сасдххссдс	ХссдаХдадд	ХддсдссддХ	ддХсааддхд	300
асддахсааа	ХдсХддХдсх	хдадсхсххс	сахддсссса	сдхххдссхх	ХааддаХахс	360
дсхсхссадх	ххсхаддсаа	ссххххсдад	хххххсххаа	адсдсаадаа	сдаддсдсхд	420
ссххсхдасд	схссхаааса	ссадаХсаса	дХсдХдддсд	ссассхсадд	сдасассддХ	480
адсХсддсса	хахасддхсх	ссдсддсаад	дадаасдхсд	аддхдххсах	ССХСХХСССС	540
дадддхсдхд	хдадсдссах	Хсадсадсда	садахдасха	схдхаххдда	ссадаасахс	600
сасаасдхдд	схдхдааддд	сасдХХсдас	дасХдссадд	схахсдХсаа	ддассххххх	660
дссаасдсХд	асххсааддс	саадхасаас	сХаддХдссд	хсаасхсдах	хаасхххдсд	720
сдхахсххдд	сдсадахсдх	дхасхасдхс	хдддссхасх	хссдхдсхса	сдасдадддх	780
дххадсддсд	аддХХдссХХ	сХссдХссса	асаддсаасх	хсддхдасах	ссХХдссддХ	840
ххсхасдсса	адаадсхсдд	хдххсссахх	ддсаадсхда	ххдхддсхас	саасдадаас	900
дахахссхдс	ассдсххххх	схссасадда	аааХассасс	дссдсдасах	сдадсасасд	960
ахххссссдх	ссахддасах	ххдсдхдхсд	адхаасхххд	аасдххахсх	сххсдсхсхд	1020
хссддсдада	ассасдасах	хсхасдсддс	хддахдсадд	схххсдадса	дасхаахдад	1080
схсасдахсх	сдддсдадсх	дсхсхссаад	дсасаадасд	адаХддсаХс	дхахдсддхд	1140
сххсаддадс	аддхдсдсхс	сасхаххдсд	дадхасаааа	сдахдсахса	дхассхсххс	1200
дасссдсаса	дсдсхаххдд	сдсадсадсх	дссаХдсасх	ххдхссадда	хаассххдса	1260
дасаадссаа	асХсддсддх	адХХдХадхс	ддсасХдссс	асХасддсаа	дххссхсссс	1320
дхддхдхсда	аддсасхадд	хдхсдсхдад	хсададаххд	адсаасассс	даХссХсаад	1380
дсдсхддаах	сасХдсссас	ссддсХХХсс	дххдссадса	асхсдадхда	аасхдхддсх	1440
дадсахаххс	дсаадаххах	ХдсХдадаад	аасдасдаад	ссхдхадхда	ххда	1494

- 33 027487 <210> 16 <211> 1299 <212> ДНК <213> РНу£орН1Нога тпРе51ап5 <400> 16

агдадсгсд£ гссдгсггсд гагидссаас дсдсдссада £сд!1саад£ 1£д£дсдаас	60
ддсдадссд! ГГаадассдд сдсддсссаа аадда£с!дд с1д!дс£сда даа£дсд£са	120
с1;£дгсд1дд асааддсадд гаадагсдсс ггсдггддгс сгдссдсгда сдрададаад	180
гддс£дадса сдсадсгдса дсссдгдадс тдадаадд асдгддасдс £сд!даса1д	240
д£сд£ас!дс сдддгг££д£ дда!дсдсас асдсасссад гдгддадсдд саассд1:д1с	300
аасдадШд ссагдаадс! ддс!ддсдс£ ассраса!дд аадИсасда дадсддсддс	360
ддсагсааса асасдд!дсд гсасассаад аададИсад ааасГдадс! дИддадсГд	420
сгдсдгасдс дас!адассд са£д11дсд£ адсдд!асда сдсИайсда адсдаададс	480
дда!асдд!с 1сдадас1да сас!дадс1с аадагдсгдс дгдИНаса сгссдсагсд	540
асдддгдаса асдсасассс 1д£ддада1с д!д1ссаас! ассгдддгдд 1сас1сдд11	600
сс£дасддса РдасгдсСдс Гдаддссасд даддагайса гсасдаадса да1Гсс1дс!	660
с«д1дсадд ссаадаадда сддсасса!с 1сдсссдаа1 исагсдасд! дССсГдсдад	720
аадддгдгд! гсдадсасаа сдас!с!сас сдгапстад аддсаддсаа дааддсддда	780
срддасана асгсссасдд Сдагдадагд 1д£ссдагдс адгссддгас сггддсддса	840
ас£с£дддсд сссд+дсааг сйсдсасгдр дадагдсгда с£дс£дадда ГсГИсаддс!	900
арддсадсдс асаадссада дссгдгаирс дссдгдсггс рдссгасгас саадгагагс	960
с!даадс1дс ссааНссдсс адсасдсдас а!дагсдс1д ссдд1д11сс 1д11дс1с1д	1020
ддсадгдас! асаасссдаа сдсгсаидс стссагдд сасСдасса! даасагддса	1080
1д1д1дс1д1 1сдд1агдас са!дааддад десепдгад дсдссасса! саасдссдс!	1140
дсс!сса!са ассдд!сддс 1ас1сасддс адгсгсдадд гсддсаадса дддсдаспд	1200
д!сс1да1дс дгдсгасдса дгдддадсад а1сагс1асд ааагдддсда сссгссгап	1260

- 34 027487 даасасдтад гдаадааддд адггдтсьас асдаадтад 1299 <210> 17 <211> 1846 <212> ДНК <213> РНуЮрНгНога тпТе5Гап5 <400> 17

дсаасдааса	адгсТсТТсд	стссастгсс	дтсассгс	дтсдгсаьдд	ссаьсдссаа	60
гтсдаасасд	аадСсьдадс	ссдггсгдда	сддсдадГск	сьсьдгдс1д	аадассьддк	120
дсадсгдгсс	аадддадаса	сдадаагсгс	дс!аад!саа	даадсстдда	адсдсдгддс	180
«дгддссдг	даддГсдЬдд	асаагагсс!	сааддасаад	асгсдгдгдд	сд1асдд1аь	240
таасасдддс	1гсддас1сг	Ьскссаасд!	санагсддс	сссдадаадс	ссасададгс	300
дсаддаааас	сгсагссдс!	сдсасгсдтс	1ддсасаддс	дадссдпда	сасгсдсгса	360
дасдсдтагд	сгдсгсдсдс	гдсдгакаа	гдгагьддсг	аадддасас!	сддддагссд	420
ТдТдсасасЬ	сГддадсадс	гааьадасдс	стиаасдсс	дас1д1сьд!	ссдьддгдсс	480
адссададдс	асгдгдддсд	ссгсдддсда	сгтддстссд	сгадсасасс	пдсасгсдд	540
1а1дагдддг	дааддассса	гдхдддагаа	ддтддагдд!	садпсдгса	исадсдаддс	600
скссааддСс	ссддссаадс	асддасгдаа	дссгдпсад	сгсддадсаа	аддааддгс!	660
ддсьатдагс	аасддсасас	аасьсатсас	дгсддгдддг	дсгдаддсдд	тгдгссдгдс	720
ИсадаасдЬс	дсгаасьдсд	с1дагассдс	сдтсдсаид	асаскдадд	гдсссгдсдд	780
Тас1дьсаас	дсспссасс	сдсдгаггса	гдсадсссдг	ссдсасасбд	дссадагдсг	840
сдттдсстсд	сд!а11сдса	сасгасгасд	гдсгдасаас	ссдгссдадс	гдпссдгад	900
ссасаасГас	дааддааадд	гдсаддасдс	сгасасгсга	сдтхдгдсдс	сгсаддгдса	960
сддсаидСд	сасдасасда	гсаасисдг	асдгддтдрд	с!ддасд!сд	адардаасад	1020
гдссасадас	аассссагдд	испсасддд	надгдссдад	дгсасдасдд	а1с1дтс1сс	1080
псааггдас	асдаагсаад	гсаадсссаа	сагсдаасад	дгадаасасд	адаьсасдда	1140

- 35 027487

хсхдаахдас	дссааддадд	адахсаадсд	ХсХХааддсХ	сххдххдсас	адаадсадаа	1200
дссхдхддаа	сасссддсдд	сдддхахдаа	дсдсасахсд	дасасдххсх	ассдхддсдд	1260
сддхддсххх	дхсахсхсхд	дсддсаасхх	ссасддсдад	ХаХссддсХа	аддхдсхдда	1320
схассхддса	аХХддХаХсс	асдадаххдс	ХадсдххадХ	дадсдХсдХа	ххдадсдхсх	1380
адхдаассса	асдсХсадса	ассХдссддс	хххссхсдхд	ссададддсд	дхсхдаасхс	1440
дддххххахд	аХХдсхсасХ	дхасддсадс	сдсХсХддХХ	Хсддадааса	аддхдсхсас	1500
асасссдхсд	ХсддХддасХ	сдахсхсхас	дадХддадсс	ааддаддасс	асдхдхсдах	1560
дддаддсХХХ	дсХдсХсдХа	аддсдсххас	ддХХдХддад	сахдхсдада	схдхадххдс	1620
ХаХХдадаХХ	схддсадсдх	дхсаадсссх	ХдасХХдсХд	сдхссдсхдс	дХасдасдда	1680
ддсхсххдаа	дсхдхссасд	дасхддхасд	сасссдсдхд	дсхаддхххд	асааддахсд	1740
сххсахдаад	сссдасаххд	асдссдХдсХ	ддассХсдХХ	сдхадхддад	сХаХсХдсда	1800
сдххдхадсх	ссдххсххдх	саааасхдса	сдХдхсадда	схххаа		1846

<210> 18 <211> 1218 <212> ДНК <213> РКуХорНхНога 1п6е5Хап5 <400> 18

ссдсасадад	саасхдссас	хаддсахсах	дсхдсассда	сххддссдсс	дсхсдасхдс	60
сасххссдсс	садсддхсас	Хдсдссдахс	адссахдасд	ссассдсадс	дссаахссхх	120
ХсаХХХсадс	хсдхсадсас	дсаадссддс	ахсхххддах	дсхсадаасс	дсдхадсхдд	180
хдсхдссХсс	хххххссхдд	асдссааддс	сдхххдсаад	ддсаадсдсх	дхдсаххддд	240
саадаасаас	адсддхаххд	дадсхаассс	ддссасахдс	ддддаддаХХ	сдххсххссх	300
сасассхдас	дхддхдддсд	хддсхдасдд	сдхсддхддх	хддаасдада	асддсдХдда	360
хссаддсаад	ахахсдсдсх	сдсхаахдсд	саасдсддса	ххахххдхдс	адсадсадас	420
ддссаахадс	дададхдсса	ссасдсааса	ддххсхддсх	сасддсхаса	адсаддсдсХ	480
дсхддахдас	даддхддадд	сдддхадсас	дасадссхдх	ахсдхдадас	хдаадсадхс	540

- 36 027487

дхсхдадддс	ааасссдхдс	ххдадхасхс	даассхсдда	даххсхддсх	хсдхддхсах	600
ссдсаасддс	дадахаахсх	хссдсадхаа	ахххсаддхх	сдааххдасх	дххдддадхд	660
асадхадаад	адххасхдас	ддсдххдсхх	хадхаххахд	дасдхдсхсс	дХассаасХд	720
дсааадахсс	схсхдсддхх	хаадсадхах	ддхдсхаххд	адаахсассс	хдахдахдха	780
адхсхдсххс	дсахххддах	асхахххахд	схддадасад	хасаахдсха	асддххаххд	840
схссаддсдд	асхсдддхда	даххдасдхд	саадасддад	ассхсдххдх	асхадссасх	900
дахддхдххх	дддасаасхх	сдсссссдас	сХссадааад	схссххсдса	дххсссддха	960
адаххсххха	ссдссдхдхх	сдадсхассх	дхааххасхд	асхххдхххс	хсдххаххдх	1020
схдсхахххс	хассдХадсс	дахдсхсхсс	ХддсдаадаХ	аххддхсадд	хдаасхсдса	1080
хсххххдхдд	ахдххаххдс	ададаасссс	дасааддсхд	ссдаааахах	сдхссхддсс	1140
хсдсхссдсс	асаассххаа	дсссдасдас	ахсасхдхсд	хсдхддсааа	ддхадхсдхд	1200
ахддсахсаа	адсхдхад					1218

<210> 19 <211> 735 <212> ДНК <213> РНухорНхНога п'ггРезХапз <400> 19 ахдаадсадх ХасХдсадсс дахсхсдххс хсхддхдсхд сдадхдхдхх сдхсдхддхд 60 дсааадсаас дсаадааасд схдссдхдсс аахдасаадд аадаХдасдс хдххааддас 120 дасдаадада схдадасадс ададдасдаа схддасдадд аадассаасс сасдсдасхд 180 хасдхддсса ахдхдддсда схдхсдадсх дххххдхдса схдсадасдс сххадсадхс 240 дасахдасда сддахсасаа ддсдхсдсха ссддсхдаас аддадсдХаХ сдаддсдхса 300 ддхддсххсд хдсасаасдд ссдасхддас ддсаххсхдс адахсхсссд хддсххсддх 360 дасХХддсдс асааасадда ХддссасХХд дхддХсасдс садахдхддх ддадсаХсХс 420 дхдаасссдх сддассадхх сххдсхдсхх дсаадхдасд ддсхсххсда сдхдххдасд 480

- 37 027487

Ьсдсадсаад	сгдгсаасгь	ьдгдсьдсдь	ааасььсада	сссаьддада	сдьссаасьс	540
дсадсьсадд	адсьддьдсь	сааддсдсаа	дсыасЫсд	сасасдаьаа	саьсадьдьд	600
дьсаььдгдд	сдььдаасса	даааддЬдас	дсдьдаааьд	аасадсддсЬ	ьсьаььдась	660
асддаадаьс	ддадассдас	даадаадсад	аааасссдда	даьсаадсьс	дадаьссаад	720
аааЬЬаЬдаа	саада					735

<210> 20 <211> 1845 <212> ДНК <213> РНуЬорНьНога тпРезЬапз <400> 20

аьдсдасдса аддадассаа ддьдььдььд асдсьсдаад аддьдсдсда ддссььсдад	60
садсадасдс сдсьддссдь сааддасдсд сьдддгдьса ььсаьдаддс дсадЫсаьс	120
аьдаассьдд адссдаассь ьдьддссдьд сддсааадад сььсаасаьа ьдьььььдда	180
даьаьссаьд дссадььсьа сдассьдаьд садсьдаьдд асдссдЬЬдд сдььдссдас	240
ььддссдадс дгдаЬдЬсса дсьддьдьы сьдддадась асдЬддассд сддддссЬЬс	300
ьсдьдсдаад ьдаьдсьсьа ьсьдсьасьд сьсаадаьсс даььььссда сааадььдьь	360
сьссьссдьд дсааьсасда дьдсдааьсд аьысаьссь ьсьасддаьь ьсдсаасдад	420
ЬдЬаадддда адЬасддсаь сьсадссьас ьассасььсь ЬдЬссЬдЬЬЬ ссааЬсдаьд	480
ссадьддсьд сдсьдсьдьс сасдьсдсдь дддсаадЫс ЬдьдЬдЬдса сддЬддссЬс	540
ьсасссдадс ЬдаааасааЬ сдаадасаьь сааасьаьдд ассдасддсд ддаааьсссь	600
ассасддддс ьдььаьдсда ссььььаьдд ьсддасссда адасььсдса сасьсдсдаь	660
дЬддасдсад аддьддасас ьсадссадда Ьдддадссса аьсаддсссд ьддаьдсгсс	720
ьасьасььса аььсддсддс аььдььсдад ыьыаддса ссаасаадсь дсьдьсдаьд	780
сЫсд!дсас аЬдадИсда ддаьдааддс «сасдгаьс асысаасгс дсаддадгаь	840
саададсьдд агасьсдадь ддасаад!сс аьдссьссас ьсаььассдь ьььььсддсд	900
ссдаасьас! дсдасадсьа сддсаасасд дссдссьаи гдсгсиссд дааьдаасс!	960

- 38 027487

Пс1сд1ддд	ааасссадса	аанаастсс	дсдддасасс	садссссасс	даидсдадс	1020
дсадаасдад	дасссдасаг	д!ддсдас1а	11саа1сааа	сдссдссасс	ссссссадса	1080
адсааддаа!	ТсШдадда	адипдгдд	ССадсадаад	дасдасдасд	гсиасаад!	1140
дааакдсасс	сасаадссас	ссдааадакд	Иддагдасд	аадкдаасаа	агдддаанд	1200
дкадаадааа	сдссаасдсд	садстсдддд	ссадсдСссс	ссссксдаас	ссассдсада	1260
ссистда	дгаагсгдда	сдадасссаа	асддасдадс	дчзссаадгсс	дссгассссд	1320
саададатдд	асасаассаа	дссдакдссс	СсаС1ааСдд	асасддаСдд	садсПддаа	1380
с1садсгсда	скааадсдсс	ГсадИсаИ	с1саа!а11с	1ддд1даааа	ааксадсасС	1440
дсддасдсдд	аддстаГЁ!	ддагдстд	даскасдасс	дсаасддад!	дд!ддаСС1с	1500
дсддаЕанс	СдСсдСдддс	кдссдсдасд	ааддсдаасс	дсаасаадса	сдадгсдадс	1560
сдасгссгда	диддссаас	СдГасададс	ддгдгдсдса	ТдИдасТсд	1ддда11111	1620
тссадГааад	1с11дс1а1д	дсксдсаис	ддсТдсИас	1ас:дсда1а1	1а1сд1ссса	1680
аадсадсдаа	аадсдассаа	дгсдгсдгсд	асссдадкдс	СдддсСсадс	дксдсХадгс	1740
сСдгасагдд	сдддсдсасс	дСсадддсда	дадсдеддск	ддсСдсддсС	сссссссстд	1800
саасдсдсгд	ГсддааПа!	дасдсадсда	исдкассаа	адгад		1845

<210> 21 <211> 1489

<212> ДНК
<213> РКуСорКсНога тпбезсапз <400> 21 асдагдссдс ддддсИасс ассасдаддс	ссасссддса	дссссссасс	сассадсдс!	60
дсддсСдСас	ссссгдсадд	сддсдссдсг	дсадсссдсс	СсддсаадсС	сиссдсдаад	120
дгдпдсдгд	сдтдасс!	аааааадсрд	ддаагдсгдд	асаскдсада	сссд!а!д1д	180
аадсСсасда	•Ссддсасдса	даасдкасад	ас1аадд!сс	аадсаддсдд	сддсаадасд	240
сссдадШа	акдадассИ	сдасПсаа!	апдсаассд	адааддадсг	сдкддЕсдаа	300

- 39 027487

дЕЕЕдддасс	аадааааадд	аддасаадас	сддЕЕсагдд	сдсаддсдаа	ддЕддадагс	360
дЕдЕсдЕддс	ЕаЕсаааддд	ЕддсЕЕЕдаа	ддЕдасдЕсд	адсЕасддда	Есдсдадаас	420
адсссЕдссд	ддаадсЕддс	даЕсдЕЕдсс	аадЕЕсасда	адсссдаааЕ	Еддсдсдаса	480
ддасссдЕса	аддсЕссасс	саЕддссссЕ	ссдаЕасЕсЕ	саддЕссЕдс	адЕддсЕссд	540
ЕЕдсссссад	дадсдааЕдс	сдЕаЕСЕдЕЕ	ссгддЕдсдс	ЕдссаЕЕддс	ассдЕссдаа	600
ссдссЕсдад	асссдаасдд	саадЕЕсасс	дасааддада	ЕЕсЕсдаддс	аЕЕЕааадсс	660
ЕЕЕдаЕсЕдд	аЕсасааЕаа	сЕаЕдЕдддЕ	дсЕдсддааа	ЕссдссаЕдЕ	дсЕааЕаааЕ	720
аЕЕддсдадд	сдссЕасада	сдаадаадЕа	даЕдаааЕда	ЕсаадаЕддЕ	ЕдасааддаЕ	780
ддсдаЕддсс	аддЕдадсЕЕ	ЕдссдадЕЕЕ	ЕасдсдаЕдд	ЕЕасдааадд	даадсадссс	840
ссасссддаЕ	ЕдддЕдЕсас	ЕасадсЕсЕЕ	ссддадааад	сЕдсадсЕсс	ЕддаддЕдса	900
дЕЕЕсдддсд	сЕсаддссаЕ	ЕсадсЕЕсдЕ	ааЕсадсдса	аааЕддсдсЕ	ддаададЕЕЕ	960
дсасдсдаЕа	асддЕаЕсаа	асссдададЕ	дЕдаадаадд	сдЕасаадсд	аЕЕссаадсс	1020
асадаЕааад	аЕддаЕсддд	ссадаЕсдас	ЕасЕсддадЕ	ЕсЕдсдаддЕ	дсЕдсаддЕд	1080
даЕссаЕсдс	сдсадЕдсда	дааддЕдЕЕс	садЕЕдЕЕсд	асааЕдасаа	дасдддЕсдд	1140
аЕсдасдЕсс	дддадЕЕсаЕ	даЕЕдсдЕЕд	ЕсЕааЕЕЕса	сдддЕдсЕда	дааддаддад	1200
ааасЕааадЕ	ЕсдсдЕЕссЕ	сдЕдЕЕЕдаЕ	даадаЕддЕа	асддЕдЕдаЕ	сасдсдасаа	1260
даасЕдаЕда	адаЕссЕдаа	ддсдаассас	аЕддссЕсЕа	дсдааЕсдда	адЕЕдсдсдс	1320
ааддсддаса	сЕаЕЕаЕдЕс	ссааддддаЕ	ааддасддсд	асддадЕЕаЕ	сЕсдЕЕсдас	1380
дадЕЕсЕсад	ЕЕдЕдадсаа	даадЕЕЕссЕ	ааЕаЕЕЕЕдЕ	ЕсссадссЕа	сасдсЕаддЕ	1440
асддссааад	аЕЕадааЕас	ссдаЕдааЕа	сааЕаЕссЕЕ	аЕсЕсЕсдЕ		1489

<210> 22 <211> 2862 <212> ДНК <213> РИуЕорКЕКога тп±е5Еап5 <400> 22 аЕддсЕадса адсЕсаасдс дЕЕссЕддсс дсддЕдссЕд сдаасдссаа сдЕдсссадс 60

- 40 027487

ссдсссаада	садсдссддс	сдгдагддсд	ггсссдсадс	пдадгисаа	ддаадсдссс	120
дадаасдкдд	дсдсатссдс	ссссассасд	ссдсадссдс	ссдгддгдсд	исдгсдссад	180
сдсааааата	ассссадссг	саадсгддад	сгддасгсда	ассаддааса	гдасадасст	240
даддатдасс	дадагагдгс	дсдсссТ1сс	сстсгааада	дсткаГддс	сдсссаадса	300
дссдссдпа	адсгдааддс	асадасддад	аадсасдаСа	Тсссаасасс	адасИддсд	360
сдсасаадса	дсдддгссда	дсгддасдсс	аадтсддадд	сдддасссаг	дсдсагддсс	420
адсдтасаад	дсгсдсасса	ссдгсдсдтд	иссассдаса	саасдсгатг	гаассддкат	480
сгдсдксаас	аадсадассг	ддасаггадг	сасдасасдд	гдсадсагсс	сдсааагдхс	540
ссддСсагга	ссдссасГдс	адстдссдгг	дагдстсгдд	аагдсдаааг	дадгдгддас	600
аагаасдссд	асдаддадса	сдсдаГсаГс	дтасаддаас	ссдаддада!	ссидсгдгс	660
ггссдасгсд	даддсассаг	сссгдгдисс	адгдсдсгдд	ааандтасд	асдадссасд	720
аассГсакдд	сасгададса	даасдгсагс	гсдаисдгд	сдссдгасас	исгадгдддд	780
дагсгссасд	дссадггсса	ддасттдстс	даасгсисс	дадсасасдд	стсгссгдсс	840
дгддасаасс	сдттсттдтг	сстаддгдас	гагдгддасс	дгддсдгдгс	с±сдсдсдад	900
агаагстга!	гдсисггддс	сисааадгд	дсгггсссдд	асадгдссса	щтатгдсда	960
ддсаансасд	адгдгсддад	тттдадтаса	ггтгасдди	ГссдТдссда	асдссГсаад	1020
аадкасддас	с1д!дс1сга	гаассдтагд	аТсаадТдгс	гсдададка!	дссаскддст	1080
дсасдасгсд	адасадсдса	сддсасдИс	скддсгдгас	аТддсддасг	дгсдсссдаг	1140
ангсадггсд	гдддддасаг	Гаасддасаа	дтдаассдс!	Натддадсс	гдаассааас	1200
ддадсгсгдг	дсдасггдгг	дгддгсадаг	ссТдсдаадд	дсдаадсСса	ддадсаддад	1260
гдддсассса	агдддагдсд	гддсгдсгсд	Псасата	аСдаасдсдс	схдссдсдаа	1320
гггстдаадс	дсаасаассг	ссгддссаи	дгасдгдсгс	агдаастдда	адаааагддг	1380
гагааддадс	асИксдаса	сдааддадас	сдсасадаад	аадасдадда	сдддааастд	1440
дсгс1асс1д	сддпдтдас	ддхдгтса	дсгссддад!	асгдсаасас	даассасаа!	1500

- 41 027487

дхсддсдсда	сдсХдаааах	ХсссХдддаа	адасаааахд	дхсдхсхдсх	дсадХахсад	1560
садсахааас	дсадхсаахд	ххссдадххх	дадххсасдс	дадссадсда	ддадасддсд	1620
дссааддсдХ	ХХсХддадда	дааХХХдссд	ххсххдссда	ххдасхххха	сдасххддхд	1680
ааХдХдХдХс	ддсадсхдсд	дсхсасхсхх	дадададсад	сдадхахсас	сссадсассх	1740
дсххсадаас	схаххсдсаа	дсхдхсдсхх	дхдхсдхсдс	хдхдхдсдсс	адсаасхадх	1800
сХддааасда	ддахсдадда	ддаадассса	дадсххсссд	хдхсдссасс	ХдсХХсХдса	1860
ссадсааахд	аадхддадаа	ддаадсхаса	дсаасхсхда	аддсадхддд	сдадХсдХХд	1920
саддаххддд	аасххдххда	дасдаададх	дхсдаддххд	асасхаддаа	ддХдаадааа	1980
дасаадаада	аддадааааа	ддадаааааа	схдааддада	адаХсдаааа	даадаадсаа	2040
ааддасаада	адаадхддда	хасдадхсда	аххдсхадсд	дххддаадсх	схдсссхддд	2100
ХХХдХасдсХ	хсхасдассд	схасххсхса	ададасадха	хдаадаадад	сдадссддад	2160
ахсассхсад	сХссХддсса	хсхаддсаад	сддссдхсдх	ддахсхсааа	сХасааааса	2220
ссххххадас	дсхсдасххс	дассддсдад	дсссссассд	асасхдааас	хдхсдасасс	2280
дхсххддасх	сХассддХсс	хдсхсдасдд	аададхахда	сддаххддах	дсссахдссд	2340
хсдххсдадс	аддтддсдса	дсхдасдаас	асдсххсадд	дхсасаххсс	сдхдсадхсд	2400
аасддсдХса	ахдхаххсас	дааддсасад	Хддсаадсхс	хдаадххдха	сххсхсдахс	2460
схддахсхдд	ахддсаахдд	сдххххдахд	даадададсх	хсдххдххсх	ссхсдсадад	2520
саадасадсд	дХдддХХдад	ххааадхдаа	дхдаддахдх	даахххдххд	схаахххааа	2580
ххдххдххдд	ХдХХдХдХдс	адахдсаХас	дсдасхдаад	асдаасХдад	хсхдххдахд	2640
даадхсахдд	асХдсаасдс	сдасаахахд	ахсасхдадс	аадахххсхх	дсхаххсдса	2700
Хассдадссх	ХасХдсдахд	даааааадсх	схасахддсх	ссдасхадад	хдхдсаддад	2760
сддаахсдаа	схдасдхадс	даадхахдаа	саахдссада	ххадаахсса	садхадсдсд	2820
дсаХаХдссс	ахаахдаада	асдадааахс	хаххадххда	аа		2862

- 42 027487 <210> 23 <211> 984 <212> ДНК <213> РНухорНхНога тпЕезХапз <400> 23

ахдхссдсдс	сдассххсса	хсдахсаххс	сдсаахххдс	адсххссаад	хсаасадхсс	60
аадсХссааа	ссдааасаад	адХдаХдаХс	дсаахххсда	садсХдадда	хххссасхсх	120
дссдХддссд	схдсдасхса	даадссдххд	дххдссхдхх	хсхссдсдсс	дхддхдсддс	180
ддххдсаадх	Хддхддсдсс	сааддхддас	аадсхадссд	аддадсххдс	сдадассдХс	240
ХсдХХХдсса	дддХдадХдс	хдаддадсас	дадасдххах	дсдаадаадХ	ддаадХддас	300
адсХХсссдс	асххссдсдх	дхасадддас	ддсаадаххд	хдддхдасха	сасдадсхсс	360
аадххсдаса	аддхддадхс	схххахссдс	ддссахдхдд	схссхаахас	хдхдсаддад	420
ассдаддааа	сассхдаадд	сдаддххасд	даддааасдд	сддадаадда	хдсхдсдааа	480
даддаддаад	хдхсадсхда	ддсхдсдасд	дааддсхсаа	адаадсдсса	ддадсдхдаа	540
даддаддада	сдаахдасда	дсаддхддсх	аадааддсса	адасддадда	ддаддсдхсд	600
асддаддсХд	адааддсхдс	аасхасддад	ссадсхдада	аддххдадда	адсддсаасд	660
даддадассд	адасддсхда	аааддаххса	Хсадаадада	адахсдаадс	хдсхсссдхх	720
дадаадхсхд	ааасддссдд	дааадасасх	дсхссадхсд	ахдсхдсхдс	хдсххааасд	780
асасхдсхсх	дсхххдсахд	ахдхсхааах	сдасддасах	сххсхдхддд	схадсхдддд	840
дсхдаххдах	ссадсхдааа	хсаадахдаа	асаахааааа	аадаадхахх	ххахддсдах	900
ίσΐΐΐΐρΐΐΐ	дХдсссдаХа	хссхсдасах	дххсхдааха	саХдхасаХд	хдсхсхдссх	960
хсххдхсада	асаахдхдда	ахдс				984

<210> 24 <211> 501 <212> ДНК <213> рЬуХорЬхНога тггРе5Хап5 <400> 24 саадсадхда адсхааддаа. саасаадахс ааасааасса хасассхахс хасдахдссх 60

- 43 027487

дЕсдадаЕса	асасссссда	ададЕЕсаас	дссдсЕаЕсд	дсдадаадаа	дсЕдасддЕс	120
дЕдсадЕЕсЕ	сЕдсдссдЕд	дЕдсддсддс	ЕдсаадаЕдд	Еддсссссаа	ддЕдассааа	180
сЕдаЕддадЕ	сддасЕЕсдс	ЕдасдЕсаад	ЕЕссЕсаадд	Едадсдсдда	ддадсЕадад	240
даЕЕЕсЕдсд	аддадаЕсда	сдЕсдасадс	ЕЕсссаасдЕ	ЕссдсдЕдЕа	сааддасддс	300
даадЕддсдд	сдЕсЕЕасдЕ	дадсЕссаад	ЕЕЕдадаадд	ЕададсадЕЕ	саЕссдЕдад	360
ааЕдсдаадЕ	аадсдЕдасд	дсдаЕЕЕдсд	ассдЕсЕаЕс	ааадсЕсдсд	саЕддЕдаЕс	420
ЕасаддсЕЕд	аЕдассЕасд	сЕаадаЕддЕ	ддададсдад	ЕдадЕЕЕддЕ	ссссддсаЕЕ	480
дсдЕаЕсддс	адЕддасЕда	а				501

<210> 25 <211> 734 <212> ДНК <213> рЬуЕорКЕНога тггРезЕапз <400> 25

дасаадсадЕ	даадсЕаадд	аасаасаада	Есааасааас	саЕасассса	ЕсЕаадаЕдс	60
сЕдЕсдадаЕ	саасассссс	даададЕЕса	асдссдсЕаЕ	сддсдадаад	аадсЕдасдд	120
ЕсдЕдсадЕЕ	сЕсЕдсдссд	ЕддЕдсддсд	дсЕдсаадаЕ	ддЕддссссс	ааддЕдасса	180
аасЕдаЕдда	дЕсддасЕЕс	дсЕдасдЕса	адЕЕссЕсаа	ддЕдадсдсд	даддадсЕад	240
аддаЕЕЕсЕд	сдаддадаЕс	дасдЕсдаса	дсЕЕсссаас	дЕЕссдсдЕд	Еасааддасд	300
дсдаадЕддс	ддсдЕсЕЕас	дЕдадсЕсса	адЕЕЕдадаа	ддЕададсад	ЕЕсаЕссдЕд	360
адааЕдсдаа	дЕаадсдЕда	сддсдаЕЕЕд	сдассдЕсЕа	ЕсааадсЕсд	сдсаЕддгда	420
ЕсЕасаадсЕ	ЕдаЕдассЕа	сдсЕаадаЕд	дЕддададсд	адЕдадЕЕЕд	дЕссссддса	480
ЕЕдсдЕаЕсд	дсадЕддасЕ	дааддаЕдсЕ	асЕааЕаЕаЕ	ЕдаааЕадда	аассаЕЕЕЕа	540
асдаадассс	ЕдадссЕсад	дсЕсаЕЕсЕс	аассддаааЕ	аЕадассдса	ЕдсддЕссса	600
ддаддасааа	ЕададЕсЕЕс	ЕааЕЕддсЕЕ	асддддЕадд	ЕддЕсдсаЕд	сдасдаадЕЕ	660
саЕааааада	сдсЕсаЕдсд	дсааЕЕЕдсс	сдсаЕдсдсЕ	ааасЕЕдссд	сасадЕадад	720

- 44 027487

ЕдЕаддддЕс дадг 734 <210> 26 <211> 1448 <212> ДНК <213> РНуЕорЬЕНога тпбезЕапз <400> 26

сЕсдадссса	адсдасаагд	дсддсддЕда	сЕддсадЕдЕ	ддЕаадсдЕЕ	сададЕдЕдд	60
сдсадЕЕсда	сдаддсаасд	дсдсдсдадЕ	сдасдсЕаЕс	сдЕдадЕЕЕс	ЕЕсЕдддссд	120
ааЕЕЕсасда	ддссЕдссдЕ	сссааЕддас	адсЕддасдЕ	ддЕддЕдсдс	садсЕсдсда	180
сЕсЕдсассс	ЕсдсаЕссдс	ЕЕссЕсаадд	Еддсддссда	ддадаЕЕссд	дадсЕсЕсдд	240
адсдЕЕЕЕса	даЕсдссдЕа	дЕдсссасЕЕ	ЕсдЕсдЕсдс	асадддЕсдс	дссдЕдсЕдд	300
асааасЕсда	дддсдссааЕ	дЕддссдаас	Еддссаадсд	сдЕддаЕдЕЕ	сЕдадсаада	360
дсдЕддссаа	дадсадсЕсс	асаЕссдсдЕ	ссасадссда	ддасдссссд	ааассдсЕдд	420
аЕдасдсдсЕ	сдааЕассдЕ	сЕсаадаадс	ЕсаЕсадсдс	дЕсасссдЕс	аЕдсЕсЕЕса	480
Едаадддсаа	Ессдасддад	сссаадЕдсд	дсЕЕЕадЕсд	асадаЕддЕд	дсдсЕдЕЕда	540
асдаадаааа	даЕссааЕЕс	ддсассЕЕЕд	асаЕссЕсаа	Едасдасдаа	дЕдсдЕсаад	600
дасЕсаадса	дЕЕЕЕссаас	ЕддсссасЕЕ	асссЕсадсЕ	сЕаЕдЕдааЕ	ддсЕсдсЕса	660
ЕЕддсддасЕ	ддасаЕсдЕс	ааддадаЕда	адЕссдаддд	аЕссаЕсдЕс	дадсаасЕад	720
дасЕсасдаа	даасдЕсдад	даддсЕдаад	сЕдссЕЕсса	адададЕсЕс	сдЕдсасЕсд	780
ЕсаасЕссдс	ЕссадЕдсЕд	сЕсЕЕсаЕда	ааддссаЕсс	дЕссдадссс	аааЕдсддсЕ	840
ЕЕадсаадаа	дасадЕсаад	сЕссЕасдЕд	ассассадаЕ	ЕддсЕЕсадЕ	ЕсдЕЕсдаса	900
ЕсЕЕдадЕда	сдадсаддЕд	сдЕсааддЕс	ЕЕаадаадЕЕ	сЕссаасЕдд	ссЕасдЕасс	960
сдсадсЕдЕа	сдЕсаадддс	ааасЕсдЕЕд	дЕдддсЕдда	ЕаЕссЕдаас	дадаЕддсдд	1020
аддасддсда	ссЕсадЕдаа	садсЕЕддсд	Еддадаадаа	ддссаадаад	дадаасаааЕ	1080
асдаасадсЕ	ааЕсаассдс	дсЕсдсдЕса	ЕдаЕсЕЕсаЕ	саадддаасд	ссссадсадс	1140
сдсадЕдЕдд	сЕЕсадЕсдс	аадсЕсдЕдд	асаЕссЕдда	сдссдадддс	ЕЕсаадЕасд	1200

- 45 027487

асхасхххда	сахссхсасд дасдасадсд хдсдхсаддд асхдааддад сасХсдаасХ	1260
ддсссасдХХ	сссдсадсхх хасдхсаахд дсдадххдах сддсддасхд дасахсдхдс	1320
адсадсхдса	ддаддасдда даасхсдссд адсхсаадда дхадасдасс аддхсахссх	1380
Хсдсдхаааа	сдаахасада ааахсахххс хсххахссхд сахдхдхахд схдддхххда	1440

ХддХХХаа 1448 <210> 27 <211> 1106

<212> ДНК <213> РНухорНхНога тпТезХапз
<400> 27 дхсддаадад	дхсдхсддхс	дХссаХдсад	сХдсадасдХ	хддсдхасдс	сахсхссддс	60
дссххсасдс	хдсхххссах	хахссхххсд	ддаХддсХса	ХсХддасаса	сххдсхдхас	120
аахссдхсад	ссддсаХссд	саадсасдХд	аХссдсахсс	хсахдахддх	ссссахххас	180
дсдсХаасдХ	ссхасахддс	дсХддХаХХс	аасдадхсса	аасХдХХдХХ	сдадасхдхд	240
сдсдахсхдх	асдаадссхх	сдсдсхсхах	хсдхххсасх	дсххссхддх	сдадХаХсХд	300
ддхддссаах	ссдххсхадс	аадсассахд	сдсХссаадс	сдсадаХдас	асасдхсххс	360
ссхххсхдсх	дХдХасадсс	дхддхссахд	ддсддсаадХ	хссхдсдхса	аассассахс	420
ддсахсххдс	адхасаххсс	саХХаадсХд	сХХаХдадса	ХсдХсаХдсх	сахсасдадс	480
ххддсаддхд	хахасддада	аддададсхс	аХдаассссс	ХадХдадсХа	сддсхасдхд	540
хдсхххахсс	хсадхдсдхс	дсадасдХдд	дсасхххасх	дхсхдсхдах	аХХсХХссас	600
ддадсхсасд	аддадххдса	дсссахдсдд	ссаХддссса	адххссхддс	саХХааддса	660
аХХаХХХХсХ	ххасдхасхд	дсадхсдахс	ахдаххадхд	дасххдхаад	хдхсддддхс	720
аХсХсддада	адхддсахах	сддсхдхссд	дасХдсХддд	асдсхсадаа	аахсдссхсс	780
дсасхдаахд	асхххдхсах	схдсдхсдад	ахдсхдддсх	ххдссаххдс	ссассасхас	840
дссххсдсда	ххдаадасхх	хххдхсдссд	хсаддхасдд	саддхдххад	хдхдссдхсх	900

- 46 027487

ссдаасдсса	аддсассасс	дссддссааС	сссасддасд	сСассаасдС	дасддасдсд	960
ссдасадасс	ссаадаассс	ссддаасдад	асссссасса	адааасаддс	дссддссдсс	1020
аадсссдадс	дсасдаассс	дассссассС	ддсддсддса	сдссссааса	дсдссадсса	1080
ааадддадсд	асасадсаад	сасасд				1106

<210> 28 <211> 2007 <212> ДНК <213> РНусорНсКога ч'пРезсапз <400> 28

асдадсссас	аддасддсдс	сддссдсдса	СсСдаддаса	адаасддада	сддсдсдсас	60
дСдасдаада	ассдсСсдсс	сссссссасд	сддссдсасд	дсааддсдас	Сссаадссдс	120
сссддсссдд	ссдСддсдсс	ссдсссддсс	дасдсдасас	аддаадддСа	сссдсссаад	180
садддсссдс	дасссаааас	дсддссссдс	сдссасссса	сассдсдасс	сдаддадсда	240
сасаСдассс	СадддСасСа	Сассадсаад	дасгсгссда	ссссасдссс	сдадасдссс	300
аСсддассад	дасасссдсс	дддасасдсс	аасасдасса	аасасссдсд	ссдСсСсдад	360
ссдсдссдсд	дсасаааддс	сасддсассс	даддсддадд	ассаааадСс	дсасдаадсс	420
сддаадаасд	сссСссаада	адсдаСасдс	сддаассасд	ссасддсдсс	ССсаааадас	480
ддсадссссд	ссасдгасдд	даадсаадсд	ассдаддаса	саааасаада	ддаасдсадс	540
сдсдссдадд	сддссаадаа	дсСдсдадад	аадсадсдад	сддасдаддс	сдссдссдсс	600
дссаасдссд	ссаасааасс	сааасасссд	сссдсдасас	дссссдддас	дсаасдсссс	660
аСдасассда	асасаадасс	сдадассссс	ссссассссд	аасасдссаа	аассаСсддс	720
СсдддсдссС	асддадссдс	саСсСссдсс	асдадсссдс	ааасаддсас	сасддсддса	780
ассаадааса	Сссадсдсдс	дсссдасдас	ссдасддасд	ссаадсдсас	сдсасдсдад	840
ассаадссса	Сдсдссассс	даассасаад	СдсдсдсССд	дддсддадда	сасгсссдад	900
сссд!ддсдс	1дсссаадсс	сдаадасдСд	сасассдсдс	сссаассдас	ддссасадас	960
ссссассдсд	ссасссассс	дадасасдсд	ссдссддасд	аасасассдс	сссссссасд	1020

- 47 027487

Сассадасдс	сдсдсдссас	даадсасдсд	сасссддсса	асдСдаСсса	ссдадассСд	1080
аадссдСсса	асдСссСддС	даасдссаас	сдсдадссса	адассСдсда	ссссддассд	1140
дсдададдсд	ССССссссда	адаададссд	даассдасад	аасасдсадс	сасаадаедд	1200
сассдадсдс	сддадаСсаС	дссддддсдс	асдаадсаса	сссдддаддс	ддасдСсСдд	1260
сссасдддсс	дСаСссссдс	сдадаСдаСд	Ссдсдсаадс	ессссссссс	дддасаддас	1320
сасассдасс	адсСдсассг	сассасдаас	дсдссддддд	ссссааасда	ссаддаСсСс	1380
саесссссда	дсаасдсдсд	сдесаддаад	ССсаСдаасд	ссдадсссса	даадсдсдда	1440
сссаасссда	сдаадссСсС	ддсдсасасд	ССсдсадаСС	сдссСссада	сдссссддас	1500
ссассдсада	адасдссддс	дассдасссд	ааСаадсдда	ссадсдсдда	сдаддсдссд	1560
дсссасссдС	асСГддсСдс	дасссддаас	дсддаддасд	адасдассдс	сасССсдадс	1620
сссдассссд	асСССдадаа	сдадааассд	асдааасссд	сдссдсадад	ассдасссдд	1680
дасдадасда	ддсассссса	сссСдаадСд	ддсдасдада	садсдасдда	дддадасдас	1740
адсадСдСсд	сСассасдса	ддсссссасс	асасссдсда	сасссдсдас	ссссдссасд	1800
дсададсаад	асасаасада	дасдасаадс	дасадсссдд	асдсссссдС	сааддСаСсд	1860
асдссаасад	сдСсададда	адссаадсса	даадасдаад	асддддааса	асасадсасс	1920
аасадсдаса	адасссасад	дасадасааа	ссдасадасд	сасадасдсд	асаададдсс	1980
ддсдаассад	сСсдддаадс	сдсасаа				2007
<210> 29 <211> 2053 <212> ДНК <213> РКусорНсКога тпРезсапз
<400> 29 дсссаадсса	дадсссааас	дсСсдсссаа	сдсссаССса	асдсСсдадс	аасддссдас	60
ассдасаСда	ассдСаадсС	ддадсСсаСд	дадссддаса	дсддсддсдс	садссссаас	120
адсадсааса	дсддаадссс	садСссдасс	сссдасссдс	сдсассдссс	сдасссдадс	180

- 48 027487

адсадраасс аддддддьда да!дсс1с11 дРсддддИд сссасаассс адасд1асд1	240
сдРсРдссРР гсгсгапгд гадгдагадг аписасдг адасдигд! гасадсгдад	300
Паиидадд дсаасЬдсаа сасарддадд садсадсасд ассадсадса адРаЬддсад	360
ссссдаддад ссаРРРддсд аададдасда ддасаасаас аадаадасдд сдсдгсдсаа	420
дассдасгсс аасадсаадс дрссдгддас асдсдаддад аатдасаадс тсагдсаасР	480
сдгсаадсад гасддсдсса адсдсьддрс 1с1са1сдсс ардсассьдс саддссдрд!	540
сддраадсаа РдссдРдада даРддсасаа ссасРГдааь ссдссддксс дсааддасдс	600
агддасддсь даададдасг агдгсагсгр сдадрдссас аадаардгдд дсаассаард	660
ддссдадаИ 1ссаада1д1 гдссьддсад дасддасааг дссаГсаааа ассдс!ас1а	720
с!сдасса1д сдГсдсардс ададдсадтс ааиссдсааа аааддРссса Ьдсдгдагдд	780
саададсагс сдсдгддсд! садгсасдрс дгсьсссдгд саааасааса ассаааЬддд	840
РссРдсРссс адссадсда! с!11дас1дд сардсаасас садССдссас сдсаасааса	900
дспссдсас сдаддддгда дРГГссааРс сасаьаьсаа сддсРсшсР сддаддссгс	960
гддддасдсс дсасдсдгда дгсссдсгдс ПсдааПаа иддададда 1сда1ас1аа	1020
сраггарддр дИдаРаРас аагдсаддаг ддсаастсда 1адрддасИ гдаасдИса	1080
аасагдардг ссдсагсась асдасаассс асдагддьс! асссдсгааа сддаддРадс	1140
иисааасд ддагдаассс ддасгагадь сдгсссард! ссагдасдис дгсгсссСдс	1200
гсддрдгссс ссдссдаРда 1сгдаа1са1 аасадссада асдадасси гдасгасди	1260
ссдагдсааЬ сисдаьсса дсдЬдРасдд Ьсарссадгс сддсгдгда! дддсасРсс!	1320
ссисдасд! саагаддсаг дахдаасгса ссиасддс! сдссСдсаад ссасагссаа	1380
садсаасадс сгддсаасга сагдагддса ддааасссаг аИсгаасаа саасдьдсдг	1440
дддагдгас! РРдддасдРс Рдддспдс! садсаарасс дрссрдагдс сссгдгааас	1500
дрсссасаса адсдссРссг сдасдрссад ддисасаас дрдагагдгд даадаагдаг	1560
адсссхдгах сддгадсадс ассдагапс сдсддгагдс сддсдасдса саьдсадсаа	1620

- 49 027487

дд£саад!са дсдаассдар ддсаггдсад садиссаадс садсггсса! дссас!д1аг	1680
аддсаадсдс сдаа!а!ддд гсасгссаас адсаиддадс аддгагддас ддагда!дса	1740
Га£сГд1да£ Сддассдсса ГГдГддсаГд с1сс£да£ад ас1:дса!даа асааангаа	1800
адггаггасг 1ассааадас ад!ддс£1с£ сиасйсгйг асИддИаа с£1Г£Р1сдс	1860
ГйдагсГаса дсддгтсас д£Радд£адс ГдйадсГссР да!:сдад££д с£1а£Рааа1	1920
адсассасгг дгрдасаддд агсдагагса ааасдааггг ггггсадас! аагасаггад	1980
с£дайа££ас а£д£ассааа а£д!сааас£ аасадсйдас 1а££ад£££д аааааддсдс	2040
саааасаадс 1аа	2053

<210> 30 <211> 1173 <212> ДНК <213> РНу1орН1Нога ч'п-безГапз <400> 30

агдсссддсд	асдйадасад	«Гсддсддр	сгдддиссса	иссдгссаг	даасдсдд!д	60
1Гддадаадс	дсасд!саад	Ссадттсс	аНадсСсдс	1дс£дссссс	дгссдгдад!	120
д£с!сдад!а	С1ддгдгд«	ааасасаасг	дссасасдда	дсдададсдс	адрдасадаг	180
адгдггдаад	саас£ассда	1аа1дааддс	сааддарссд	сассааддд!	дгсгассаса	240
ас!дсададд	ддгсгддгдд	саасассаад	Сасасддасс	ссасСасддд	сдасгасагд	300
1асссддаса	асдгсаадсс	сагдадсИс	гасдасааас	аасдсспдг	дсадаадап	360
асда!дс11с	ссадрсаага	Иссдсдгддс	сСсагддасд	гсагсадсаа	дгассадсса	420
дайасгдгас	дхсадахсда	сдасдагддс	1асдсдггсд	ахсгдддгса	дагдаасдад	480
аагасгдгдг	дддс!агсад	1дасгасд1а	ааддасгсда	1да11дадс1	ддагддагас	540
аггааагсас	Гсаассааас	1дс1а11дас	стдсСдссд	дгдаддаисд	аса!ддадаа	600
ас!дпс1да	сддссдсаад	1дсддс1аса	сссассадса	дгдсддпхд	ссаспдасс	660
дасас!с!дд	сдагдаасас	дгссаадагд	1сгд1са1са	с!аа!аасда	даатсадаат	720
ааапссгдд	аасаддгдда	дагдгаИсс	ааасссааад	1дассаад1с	дсдидгааад	780

- 50 027487

сссадсаада	адсассадЕд	ЕссдасдЕдЕ	аасаадсааЕ	Ессдсддасд	сЕссдадсЕд	840
садаассаЕа	ЕсадаасЕса	сасаддсдад	аадссасЕса	ааЕдсЕсдга	сдсдддаЕдс	900
асдаадсдаЕ	аЕдсасасад	сЕсдааЕсЕд	сдЕдсасасд	адсдаасаса	сдссддааЕа	960
аадссдЕаЕа	саЕдЕсасЕа	сдасддсЕдс	дддаададсЕ	ЕсдсссасЕс	ЕдЕаЕсасЕЕ	1020
ааддаасага	ЕЕЕддаЕдса	ЕдсаддаЕЕс	садсссЕасд	ЕдЕдЕссдЕа	сдадддаЕдс	1080
садаадаадЕ	ЕЕасдсаддЕ	сЕсаааЕЕЕЕ	дсссдасаса	адаадасдса	сдадааддаа	1140
дасаасдаас	асЕсдаЕЕда	дадсдаЕааЕ	Еад			1173

<210> 31 <211> 754 <212> ДНК <213> РКуЕорНЕНога тпРезЕапз <400> 31

аЕдаЕЕаадс	Есдсддссдд	ЕдЕдЕссаад	аааЕссдЕсд	ЕсдаЕдЕдЕа	ЕдЕсасЕсЕс	60
адЕдЕдсссд	асадссссдЕ	асЕЕадсасд	дсасадаада	асдЕддадсЕ	даасдЕсдад	120
аадЕЕсЕЕсд	ЕддЕсадсаа	дасЕсЕдссЕ	дааЕЕдссЕЕ	ссаддЕадаа	дасдсЕдссс	180
дссссдасдс	сЕЕсдЕсаад	дсаасддаЕс	сЕссЕасдЕд	аасдЕсддЕс	ЕддаддаЕсд	240
ЕсЕсаасЕсс	сдЕссдсЕЕд	ассЕдсаЕас	ассЕдссаас	садЕдЕаЕса	адсдсаЕсса	300
ддссдсЕдЕд	ддссадсЕдЕ	ЕссдЕдсаЕЕ	ссЕсаЕссад	сдсдасЕЕсд	Еддадассса	360
сасасссаад	сЕддЕсдсЕд	дсдссЕсддд	дадсддадсс	аасЕдсЕЕса	сасЕсаадЕа	420
сЕЕсдаЕЕад	дасдЕсаЕсЕ	ЕддсЕсадад	Ессдсадаад	Еасаадсада	ЕддсдЕдЕдс	480
ЕдсЕдсЕддЕ	сЕсдадсдсд	ЕдЕЕсдадаЕ	сддсссддЕс	ЕЕсЕдЕдсЕд	адаасЕсдад	540
сасдсассдЕ	сасаЕдЕдсд	адЕЕсдЕддд	ЕсЕддаЕсЕд	дадаЕдасЕа	ЕЕааддадса	600
сЕассасдад	дЕссЕддадд	ЕдЕЕсЕсдда	ссЕдЕасаЕс	ЕасаЕЕЕЕсд	аЕддсЕЕдаа	660
ддаасдЕЕас	дссаасдааЕ	ЕддсЕасЕаЕ	саасааЕсад	ЕасссдЕЕсд	адссдсгсаа	720
дЕасаЕЕаад	ссдЕсдсЕЕа	ЕсаЕсаасЕЕ	сЕад			754

- 51 027487 <210> 32 <211> 659 <212> ДНК <213> РНуЬорКьКога тпРезьапз <400> 32

дддсьссаьд	ьсаьсьдсда	сьььддасдд	адсьсьсьаь	ьдьадааыс	аасьдасьсь	60
адасаадьаа	ссаьдсадаа	сдаддссддс	садьсдаьсд	асаьсьасаь	сссдсдсаад	120
ьддьдсдьаь	Ьдсдсгддгд	асьььааьас	дсьсададсь	асьддадсьа	асьддьдсьь	180
дсьаььдьсь	дьсаьсдыа	ьаьадсьсдь	ддассаассд	саьссьддсд	дссааддасс	240
асдссьсддь	дсадаьсаас	дьсддссдсд	Ьдаасдссаа	сддсдьсььс	асдддьдадь	300
сддасассп	сдсгспдсг	ддсГасаИс	дссассасдд	ьдадддсдас	аьддссаиса	360
ссдадсьддс	ьсдссаддсд	дасдссаада	асьаадсада	ссаадььдьс	дьдаьсдсдс	420
дсьдсьдсьд	сдаадьддад	ьдьдсдььса	ьсьасдьсьа	дсьддсадьь	саддаддсьд	480
дьдаььасда	ьаьдьаьсаа	садаьасдьс	ЬдЬдаЬсдсь	ддсаддааы	дсддьассдь	540
сдсььаьдда	дьсддььдьь	ЬдсдддЬЬсд	ассьсдссьь	ььдаыгьдаь	сдддьдьадд	600
сЫадЬаЫЬ	аасьсьддсс	аасддасдад	саадааьааа	дьадььсааа	сссдьсада	659

<210> 33 <211> 1049 <212> ДНК <213> РпуЬорбьНога тпРезьапз <400> 33

сгсдадсдса	адасдаьсьс	сдсЬаЬсдсс	ссассаьдьь	сдссадсььс	дссасьдссс	60
ьсаьсдсььс	сасьсьссдд	сссьсдадсд	садссдссас	саасьаьдсс	ддьддсьддс	120
ььссдьсдда	ссссассаас	садьдьдьдд	аьаьььдсьс	сдсьссдьсс	аадасдьдсс	180
ЬсасИсдда	сдсьдссьдс	сьсдссаадг	сда!дд!ссс	дддсдасПс	дас!а!а1дд	240
гссьддадса	дс1с1гсдьд	ссдсадпсг	дссдгдасс!	дсгааадддт	дгсдасгсса	300
сьаыгсдса	ссаааасаьс	даьаьдьасс	сдаасддсас	адссьдсдьд	дададьдгдд	360

- 52 027487

ХсаададХда	дсхсасдахх	сасддхсхдх	ддсссааХХа	саасдаХддс	хасдхдадсх	420
дсхдсаахсс	дадсхсадсд	дхддссаасд	асссххахаа	сдссдсхдас	ххсдсхдссд	480
сссааадсад	ссхасхсасс	ассахдддхд	адаадхдддх	ддасдсхасд	саадссасха	540
сдхасдаахс	дсхахдсдад	ахсхасаасс	асдадХХсса	даадсасддХ	схсхдсхахд	600
ссдсхдасда	сдсхдаххас	ахсхсддсхд	сХдХсасдХа	сххсасхдсх	асдсхдадса	660
сддсддассд	сахсадххса	дссассдадс	адахсаасаа	дхдддсадсх	садхсдасдс	720
схсадасдас	хсхддссдад	аххдаддсхс	хсхасддсса	садхдхсахд	дхдххдхдсх	780
сддсхдхдда	Хддсаасаас	саасХдХсдд	схахссдхас	дхдсхасдад	аадссдасаа	840
асахсасдад	сдадддадсд	хссдсдсада	ххдасхдсдс	адссдсдасд	дссассхссх	900
сдххсхссдх	ахдсхссддх	дасХсдссда	хсасхсхдас	хдсахасаса	дсссссассх	960
сддсххсдах	дсаахаадсх	ссдасдахад	адсдасддхд	садхсхдсха	дхахааадхх	1020
саахдсасса	дххасххааа	аахдхасса				1049

<210> 34 <211> 1203 <212> ДНК <213> РКуХорКхКога п'пбезхапз <400> 34 ахдассаадх ддддддххдх адхддсасха асасхдсхдх хадсдасдсс хадхххадхд 60 схаддсдссх дссссаасаа дхдххссдда сасддсааах дсддхсхсаа хдасдхсхдс 120 саахдсаХдс адаасхдддх сддсддхдах хдсхсдддхс ддсаахдхдс дххсасхсдс 180 дсдхддсаад ахасадсаса дсдсдасдас дасдсасасх ассасдсада ахдхддсадс 240 сдсддаасдх дхдахсдадс хасхддадаа ХдсасаХдХд асдсаддахх сахсддсадс 300 ддсхдхсдас даахдсадхд хсссаахдас хдсадхддсс асддсасдхд хдадхххахх 360 даддааххдд сдасддахас ддсссасаад сддаххдддд дадХддсадд хсдхааахас 420 асдсхххддд ассаададаа дахсахдддс хдсдхахдхд асдссаасха сдааддхсас 480 даххдсхсда хдсдсхсдхд хссхададдс дасдахссхс Хдассссдаа хсаахасдас 540

- 53 027487

аСддСдсаад	ссассассес	сдасааддсс	ддеддсдадд	ддсасссдас	дСасСаСдаС	600
ссдсасддса	асдсдсасас	сасддадааа	ассасдсССд	дсддаасдсс	дадСдСсдсС	660
ссссаассаа	садасдаСда	сассасасдс	дсааасассс	адааддсдсс	ссдссдссса	720
ссдаасаасд	СдсСсаасас	адссассдсд	дсадссдссд	асаддсссса	сдсссссаад	780
сдссссдасс	саасддассс	дссддддсас	ддаасдССаа	асаааассдс	ааасдасдас	840
дссдсадсдс	асдсаддаас	сддаасссаа	ассааадсда	сдсдсдаддс	дасссссасд	900
Ссддадссдд	дсассасддд	дсассадаас	ССдсСддаСС	дсаасдссдс	сдсдсасддс	960
дасассаадд	дссадсассс	дсссассасс	ддсдсаасдс	ссддсасссд	сдСсдССааа	1020
даадсссасс	сддСдасдсС	сддсасдадс	аасаСдсССд	ссдаадасас	сссадсдсас	1080
сдсссассда	ссдадсСсас	сдадсдсдсс	ддссдсддса	ссСдсдасСа	сдасасадда	1140
асасдсдадс	дссссдсддд	ссасаСдддс	ССддсасдсс	адаадсадда	адсдсгсдСс	1200

сад 1203 <210> 35 <211> 7947

<212> ДНК
<213> РНуСорКсКога тпТезсапз
<400> 35 асддсдсдсд	ссссддсаса	ассддсдсад	сссссассад	сддсдссдсС	дссдСсадсд	60
асдсдсдадд	сдссассдсс	сассасдаас	дсдсСдсадс	дСдсссдсса	ааассСсасд	120
дссссдсадс	ддсаасддас	сдасссддас	асддасссса	адссссасаа	сасассадсс	180
сссаадддСд	сссссаасгс	сддсддсаас	ссдадссаса	асаасдадса	саадсСсаСс	240
сссссддасд	адсссаасад	сСссаадсдс	асдССсдадс	сдддСССсда	сСссаааСдд	300
асддсадСса	ассСссдсда	сассассаас	аеддддсадс	ассаессссс	дссссаддсС	360
дСдсадаСсд	асаадддсаа	ссссассасс	асдассссса	адсссаааса	дсдсСассдС	420
ддсасСаадС	асдссадсдд	Сдссдсдсад	асаеддааса	адССсСдССа	сассддсддс	480

- 54 027487

хасдхсдадд хаадддссах хсхдсссддс аадхддддха хссссддсас дхддссхдсх	540
аХсХддаХса хдддсаахах сддссдхдсд ссаХХссХсд даХсссадда сддхасдхдд	600
ссдхддадсх хсдасхаххд сдсссссхас дхддадаадд ссдадааддх саадсадаад	660
аХсааХдссХ дХддсаахсХ дассаасааа сасдасаадд аахсдхахсс ададаХдхас	720
ддсххдаасс ссхххсаддд хсдхддадсс асддаааХсд ахдхдаххда адсдсадахх	780
сдхдсхсдхд аХдадссХдс аххсахсхсс асдхсссхдс адаХссдХсс садхсхдхас	840
дахдахахдс дсссддсххс ададхсдсхс ссхдсхссхд дасааХддХа ссадддХсХс	900
аадхххддхд адххсасдаа аахсаахадс дасхасхасд дХдадаХддд ссхсдасхсс	960
ахххсддсхс хдасасадсх сдадхссаах дсдххсаадх сдххссасхх дххссдссхд	1020
дасХддХсХс сХддХсссда аддХХасаХХ сдаХддХдда Хддасаасад сХХсдХдХХс	1080
дааахсссхд дахссдсдсх даахаадхдд дхаддхдсхд хссссссхсд ссадахсссс	1140
дхддадссха дххахсхсах хсхдадхасд дсхдхххсдд адаадххсхс Хссассдхдс	1200
дахдддсада хххдхаасхс дсхахддссс хссаасххха сдахсдасха сдхасдсдхс	1260
Хахсааддса асссдаассд дхахасххсд дхдддахдса ахссддаадс схасссдасд	1320
ааадаххдда хсХасдссса сссадхддаа хасддхсхсс сдхддхахдх ХХсасХасдХ	1380
дхддасахсд дхсХдсХдса хсххххсдсх дхддххаахд сдсхдсХддд хсхсххсахд	1440
дсдХХссдХд дсасдхссса ассдаадаХд ххдхсадсдх асдссадсхс дххдхддсхд	1500
асхдсадссх хххахддадс хсххадххса адсдсссссд хадассххдс ххддаххсад	1560
асхдсдсххд сдхдхсхдхд сдддсХддХа сххддсддхс хххдххдсхх ддхдхасссд	1620
дхххсдсххд дхдсаахдсх хддасхдхах ддсддддхда хадсхадсса аххсдхдссх	1680
ххдсхдхсха сдсдсдхдах сасхдсахха схддххддхд хдддаахсдс дсхаддахсх	1740
дсхссасада хсдасасдаа дсасдххдхд аххсхдхсда ссхсхххдсх хддхадхххд	1800
дсдхххсхдс хсхсхдхахс дсхдхдддхд адхдааддсд ахаххдсхда даахдсдхдд	1860
аахсхсдсхд дсххсахххх саахддхаас аасдахдасс асдхдддххх схдсасдааа	1920

- 55 027487

хаххдссхдд сдахдхахах хсхдсххдхс дхасхсадхд сддхдадсас хасдхахдда	1980
ХассХссдХа хдсдхддсдх дасдсхдсдс ассаасссдс дХдаддссаа дХХссссдсд	2040
дхдхсадсаа дххсхдасдс дсдддсххдд адассхдахд ахдахдсддд сдХддадаад	2100
асхасддхда аххххххсхс дссаХссаад схдссдхаса асахдсадса дХХсадХасс	2160
ахсххссдха хсдсхдхдаа сдхдсадсдс хсдхххддсх хссаасххда саасххссдс	2220
аассадасдд аасасдххдх ддхдсххсхс ассаасаасх сдсдааадад сддаааХссХ	2280
хассдсаадс хдсасдаххх ддхдххххсс аасХасааса асхддхдсхд саадсххаад	2340
ахссадссхс хдаасхдддд сдадсадсда ссассдсадд дхддхсхсас аахддхддас	2400
дадахдхсдд хддасххдхд хсхдххсххс хххахсхддд дхдаддссад саассхдсдх	2460
сасхсдссхд адххссхдхд хххссхдххх сасаадахда аадаададхх сссдхссдхс	2520
сдХсасХсад адсдсдаддс хддахасххх ххддахасдд ХддХдасасс ХдХсХасддс	2580
ххдсхдаадд схдадахдас ххсааадхас дассахдадд ассдхсасаа схасдасдас	2640
ххсаасдадх хсххсхддас даададахдх схдаадхахд асхасаааса сдаададдхс	2700
аххдахххдд сдхсасссаа хссддсхахд ахсхасааас адаадсадса дсаасдХсаа	2760
ддХсХдасХд дссххддадс ссааааддсх сдаддхддас хсаасддХдд схсдаасддс	2820
ХссаасХХдХ Хсаасаадсд хсааадхахх дссдадддах ХсассдадХс Хдссаадасд	2880
ххсдххдада адсдхасдхд дсХдсХассд схдсдсдсхх хсаассдхах сххсаасххс	2940
сасдхсахсд сдххссасхх сххддсаахд схсдсдххсд сдааХдадса ададахддас	3000
ххссаддасд ссхдсаадах хахсхсдадс асхххдахах схсасххсхх дсхддасахх	3060
ххасдхдахд дасхсдасах хххсдсхдхх хасдасдадс ассддааадх аххсхсаахд	3120
дсдсдххссд хдахдсдхдх дхххсхдсах схддсхсххд хддхддхсас дхсдахдхха	3180
ХасХддХаХд сдхдддсдха сддхддхдсс хддхддсадх сдхасхасдх дассдсддхд	3240
схаххссасд хдссаддссх даххаасхдс дхсахдсаад хдахдссхдд хсххассаас	3300
хддасасддс дсасддсдхх хдсхссхдхх дсахххахсс дхдасаххдх дадХссдаХд	3360

- 56 027487

аассдсххах	асдхдддхда	саасдХдсХд	дахссддадх	сдахдадсдх	аддсХассад	3420
ХХсХХсХдда	хдхсдсхахх	ддсххддаад	ххахасххсд	дсхасдадхх	хдадахсхас	3480
ссдсххдхдд	ХдссдадсХХ	хсхдсхдхах	дсхдассасд	Хддадаасаа	сдхдадсахд	3540
аххасдасад	хдххссхсах	сххссхааас	хддахдссдх	хсххсххддх	дххсхдсдхх	3600
дасаххасда	хххддаасхс	дахсхддахд	дсаххсасдд	дхасдххсдх	хддсххххсд	3660
хсдсдсаххд	дхдадаххсд	саасХХсасс	сдсдххсдах	схдсдххсад	хсдхдсхдхд	3720
дахдсаххха	асдсаааддх	даххдсдсда	адсхссаада	сдддасххса	асхсхсддас	3780
адсаахддса	сдхсдхахдд	ахсдасахса	дхаддхсасд	аддхдсххда	хсдхдххдсс	3840
ддхддхдсдд	ахссдасдхс	ссдссхссхд	ххдсадсдсс	ддасахсадс	ссахдасдас	3900
дадасХссдх	хасхдхсххх	схсдсдхсдс	ааасадасдс	схасддадсд	ссаадсхдсх	3960
сдхсдссдса	адхддххсхс	дххсхсхдхд	дссхдддаса	схахсахсда	хадсахдсдс	4020
дсддахдахх	ХдаХсХсааа	сааддадааа	хсхсхдсххс	ахххссассд	хсххдасддс	4080
хассадсдсд	ааахххассх	дссдсадххс	саасххдсхд	дххдсххсда	даасхххасд	4140
хсдсасаххс	ххдахаххха	схсдхсдаас	аасддсаадд	Хсхсддадсд	хдхдсхдсаа	4200
дасааасхас	хддаааххсх	садхдахаас	ссаахддхдд	аддадхсасх	хдаададаха	4260
ХдддадсХХд	сдаасхдддх	дсхддххаах	дхдсххддхс	ссхдхсасдс	даахдахдхд	4320
аадхасахса	сахдхдхдсх	саасхсдхдд	дссдсхсдхд	дхдхдххссд	хдсдсхдаас	4380
ххдсаааадд	хддсхссахд	хддссдсдсх	ххддсдддхх	хдахсхсдсх	сххдааддсс	4440
аасдхссдад	дахддаадад	саасдссаад	дххахсссхд	ХХсдсааада	сссахссдас	4500
хасдсххсдх	асдадхххсс	дсаасадхсх	адсхссхасс	дХссХХсдХс	ддддсХХасх	4560
аадхсхдсаа	дхасдасадд	хсхдхсдхсд	ххдддхсхсд	аассассхсд	хсдхадхсдх	4620
ддсхсхддхд	ххдсдсдхах	хдсасдхахд	садсадсада	сдсасааасс	адсХдХсаас	4680
аахддсаадс	ххасхсаххс	хахсхссадс	хсхсасахса	хдсадаххсд	сдадсдсдхд	4740
сдхасдххсс	хдаахсххдд	аааддадахх	схддсссасд	Хссасдадса	адассссдхд	4800

- 57 027487

ЕЕсдсЕдааа дсаадддааЕ ЕЕсддаЕсдд ЕЕдасдЕдда ЕЕсЕЕасаса ддадсдЕддЕ	4860
ЕЕЕаЕдЕддд асдаЕааЕЕа ЕасдддЕдаа саааЕсасЕс ЕсасадсдЕЕ Едададссас	4920
ассдаЕдЕдд ЕдЕЕаЕсдса ЕсЕдсасдда сЕЕЕЕдассЕ ЕдсадаадаЕ ЕдаЕдсддад	4980
ссссадЕсдЕ асдаЕдсЕсд ЕсдссдсЕЕд сЕдЕЕсЕЕсд ЕдааЕЕсдсЕ дЕЕсаЕддас	5040
аЕдссдсЕЕд сЕссдсЕдсЕ сдаддаааЕд аадЕсдЕдда дсдЕсаЕсас ЕссдЕЕсЕаЕ	5100
дссдаадасд ЕЕсЕдЕасЕс садаааддаЕ ЕЕддааадса аасаддасдд ЕсЕддасдЕд	5160
сасасдсЕдЕ ЕдЕЕсЕЕдса дасдсЕдЕас аадсдадасЕ дддадаасЕЕ сЕЕддадсдЕ	5220
дЕдаадссЕа адаадаасаЕ сЕддааадас ссддадасЕд сдаЕсдадЕЕ дсдЕаЕдЕдд	5280
дсЕЕсЕсЕдс дЕддссадас асЕдЕсасдЕ асддЕдсадд дЕаЕдаЕдЕа сддЕдаадсЕ	5340
дссаЕЕсдЕЕ ЕдсЕддсЕда даЕсдаасаа дЕЕссссаас адааасЕЕда ддадЕЕдаЕс	5400
аасасааадЕ ЕсасдЕасдЕ ддЕддссЕдс саааЕЕЕаЕд дасдЕсадаа даадаасаас	5460
дасссдаадд сдадЕдасаЕ ЕдадЕЕЕЕЕд сЕдсассдаЕ ЕсссЕаасЕЕ дсдсдЕддса	5520
ЕасаЕсдаЕд аддЕссдЕдЕ даасЕассаа ааддаасадЕ саЕасЕЕсЕс ддЕдсЕсаЕс	5580
аадддсддсд аддаасЕсдд сЕсадЕЕсас дадаЕсЕасс дсдЕдсдЕсЕ дссЕддсааЕ	5640
ссЕаЕсЕЕдд дсдадддсаа ассЕдадаас садаасдсад ссаЕЕдЕЕЕЕ сасЕсдсддЕ	5700
даааагсЕдс аддсЕаЕсда ЕаЕдаассад даЕддаЕаЕс ЕЕдаададаа сЕЕдаадаЕд	5760
сдааассЕас ЕсдаададЕЕ ЕдасаадддЕ асддсадасс ддссдЕасас даЕсдЕдддЕ	5820
аЕсссддадс асаЕаЕЕсас дддЕадгдЕд адсЕсдсЕдд сааасЕасаЕ ддсдсЕдсад	5880
дадасдЕсдЕ ЕЕдЕдасдсЕ аадЕсаасдЕ асдЕЕддсдс дЕссдсЕдсд ЕадссдЕсЕд	5940
сасЕасддЕс аЕсссдаЕдЕ дЕЕсаасааа сЕЕЕЕсЕЕса ЕаасдсдЕдд сддЕаЕЕадс	6000
ааддссадЕа адддЕаЕсаа ссЕсадЕдаа даЕаЕсЕЕЕд сЕддсЕасаа сааЕЕдЕаЕд	6060
сдЕддсддЕЕ ссдЕдасЕЕЕ сссддадЕас ассаадЕдсд дсаадддасд ЕдаЕдЕддда	6120
аЕдсадсада ЕсЕасаадЕЕ сдаддсааад ЕЕадсдсадд дЕдсадсЕда дсааЕсдсЕа	6180
ЕсдсдЕдасд ЕдЕассдЕаЕ ЕадссадсдЕ сЕсдасЕЕЕЕ ЕсаадЕЕдЕЕ дЕсдЕЕсЕас	6240

- 58 027487

сасаассасд сдддссссса сссддсдаСд ссаассасса СсСддассдС дсассссссд	6300
сСдСасСдса асССаССдсд СдсасСдсСд СсддССдадд дСдССддсдд СсдСдаассд	6360
дсассдесаа дСаадсСдса дссдасдссс ддассддсдд сассссссас Сассдсдсса	6420
ссдссддсда сдассссадс сдадсдсддс сссааддсдд сдссдаасда дассассдсс	6480
есдсссдсда сСддаддссс дссдсасссс сссссссаса ссддсасдаа асддссссас	6540
ССсддасада сдаССсССдс СддСддсдсс аадсассдсд сдассддссд сддасссдсд	6600
асааадсасг ссссссссда сдадссссас сдсссссасд ссадсадсса ссСссаСдсс	6660
дсадсддада ссдссассдд дссссссдсс сассасаадс ссасддСсдд сааСсадСас	6720
сссдсдссда саСддссдсс асддсссдсд сссдсдссас ддсассддсс дссдссссдд	6780
ССсаасссас Сддсдгссда асддсссдас дссасддадд асссссдссс асддсссааа	6840
сддасдсдсд дсдасддсдд саасссСдас саассдсддд аддсдсддсс сааададдад	6900
аасдсдСасс ссссдасдсС ссдассдсдд сссааддсдс дсассасдас саадддсдСд	6960
ссдсссдсдс СдаСсдссдс сСсгассгсС ссдасдадсд асааасасса сседассссд	7020
асддааасса сдсддссссс дссдсссасс сдсссассда сддссдсддС дсассссадс	7080
дсададдсСд ссссссссас сСсдСсдсдг Ссдддсдада ссдддсССдс ссдсссссСд	7140
аадссссссс сддсдассдс дссдддсдсС ддсссдассс ссдессссас ссасдсддас	7200
ддсасдсддс адасдссдсс дадсасддда Сассссдсгд садсСасддд сСдССдддсд	7260
сссдсдассс ССддСадсаа сСсдсдсССС дссддаасдс СССасССсдС СсаСдасдсс	7320
дсдссдддсс СддСССсдсс дадссссасс ссдссдсссс сддсдсссса сдссссдддс	7380
аадасссада сасддссасс дсасаасаас десссдадсс дСддсдСддс дассдаадас	7440
ассссдсдад ссаасссдад саасдасдаа сдсдасдасд асссдссадс дсадсадаСд	7500
сдссссасса СссССдадса дсадсдсссс аСсаасдсСс СдассдсСад сддсадсдад	7560
асСдасаСсс дсддсдссдд ссссдддаад ааадаадасс саасдсасдс сасдадсдас	7620
аасасдсСда асдсддсасс даддаасасд ссддадСсдд аасссадсдс дссдсаддас	7680

- 59 027487

гсдгсдаис	дгскдсаддс сагсагдгсд даддаддадс дсааддссдс асаасдсаад	7740
садсаасаад	аададсадад асссассдад дсаддаасда асгсдссдсс дссдсдсасд	7800
сдтсдСдссг	Сссссасдад сдагггсгсс дссаксссдс Гдаатдскад сссс!асад!	7860
сИдстссЕа	сксаддасдд иссдсСдса сссдСсаасс дссссаскаа сддсгссдсс	7920
дсгсасддад	спагссгда гдкдгад	7947

<210> 36 <211> 6744 <212> ДНК <213> РНу1орК1Кога тпбезЕапз <400> 36

аГддссасда	сдсссддсдд	саада!ддас	сддсдссдсд	ссддскссаа	скассгссад	60
сгсдагдсдд	ассдсаадсд	саасасдгсс	аасаассдса	дсааскасдд	сдасддссдг	120
ддсассССсд	дадассдсп	дадсссдасд	даддсдсссс	сссссаасас	асадддсддс	180
аассадагдс	дсддсддСдд	сиасадддс	дасспдсдд	асдаадкдис	дагсдагисг	240
СдсСдсдадд	кассдсасаа	саадсссддс	ссссадссад	дсадкдкдда	саассадсдс	300
дадсасдСдс	гдсбдсгагг	ддссааНсс	ааддсдсдГд	ссаадсссса	ддассскссд	360
ддасассасд	Ссдссасдс!	дсасааааад	сгсатдадса	ассасасдда	атддгдссад	420
ССсаСсддсд	ССсссадса!	сссдгасСсд	ддасадссас	адддадассг	саадаасссс	480
ссдсасакдд	асаПасдсс	ссссссдид	сИаСддддад	аддсгддЕаа	сггдаддсаг	540
аСдсскдадС	дссссСдсга	сссдсассас	садСсдссаа	асССдсСдаа	ссаддасссс	600
схсддгсадс	адааадгасс	Гдааддпдд	саснааддс	аддтддсдсд	ссссагсгдд	660
ааддаддсд!	ссаасасдса	даддаадаас	адсидддса	адаасидда	дсасасссаа	720
дсдсдсаас!	асдасдакаг	саасдадгаг	Иссддаааа	аагассдсс!	1аасд1дда1	780
дссасдсада	гсддсдадда	дсгдассаад	аадсасасса	адасасасса	сдадсассдс	840
адхагсиса	сдсгсдгаси	даасгасгас	сд!а1««с	адИсааса!	дасдсссасд	900
агддгсскда	гддсдагсдд	сигагсссд	дссагсГсдс	сгадсддадд	асадсадкдд	960

- 60 027487

сссдсссадс ссдддсссас дддадаадсд дссдадсссс ассадаааса ддасдССаад	1020
ссдассСасд сддддассдс дгСсдсссСс Сссссдасдд дассссдсаа дассдСссСс	1080
даадсдСдСс асддаСддса сссасссасс дссадсдадС сд1:сасадас дссдссссдс	1140
СсдССсаасс асддСддСдс ссССдСддСС сдааСдсСсС ддаасддсдс дССсдсСддс	1200
асссссддсс сдасдассса сассссдССд ассасдадса адаасасада асСдсссдаС	1260
ааддссдсас сддсдсссдг сдсссасасс ссдсссддсд сасссассас сдСсдсдсад	1320
дессссдссс сассддссдс аассаааСсд СССдсддсса адСССаСссд сдадддадаа	1380
асдСдсСасд ссддссдсаа сасддсдссс ссассдадсс ассадсСсаа дсасассасс	1440
ссссддасса ССсСдгдддс дсгдааддсд сссдссссас ассссасссс адсссдссса	1500
ссддсгсСсс сдссдссддс сасссасдад асддадсссд адСасддСад еаасдссдсс	1560
СсдССссаса ассссддадс саСсдсСдсд ссдСддссдс есдсдасссс сасссссаас	1620
Сасдасассс адасссассс Сассдсдсгс саддссасас ссддсддсдс СсадддСсгс	1680
ассасдаада ссддсдадас Ссасддсасс ааддадасса ссааддссгс ссдсдсддсс	1740
ссасаасСсС ССдассадаа ддссдСдасс аасссддссс дсссдаасда сдсСдсддсс	1800
дасддаСсСд ссдссдсаса ссадСсдсаа аСдаСдсСдс дссссдсддс сдсссддаас	1860
дадассдсса асссдссссд сдааддсдас ссддсддасд асааддаддс СдссагссСд	1920
садСасдаса сссададсСс дддсдасдСд сссдаасссд сдсссесссс ддсдддСааа	1980
ссдасддаад сссСддасСа сасддссаад ассдссаадд ааддсааддд сдасссдсад	2040
ссссаадСдс асасддсдса дааддассдс ссаСсддсСд сдсдсадссс сССсасадсс	2100
адсаСдСасд СдаСддаддс Сссдссдддс адсдасдасд садасасссС СдаСдсдсСд	2160
сдссаааСдд аддсдассдс Сдсдаасадс адСССсаСда дсасдсссда сдссаададс	2220
сСадСдсадс Сдсдсасадс сссдаСддад сссссддаад ссдСдаСдда Сссдсссдас	2280
ссддаСдсдс адСссСсдса сасдасассд ссссдадсдс асассасддд адссдсдсдс	2340
аассссдсда ссаадагдда ааассСдсСс аасдссаССс дсасссгсдс саассдсссд	2400

- 61 027487

дадсЕсдсЕд ссаадЕЕсад саасЕсЕаад ЕЕсЕдсЕсда дсдссаасдд сЕасдЕдЕЕЕ	2460
дсЕдсЕсдЕд дссЕсдЕдаа ссЕдЕЕссас аасдасасЕд сдаЕдддЕдс ЕдсЕасссдЕ	2520
дсдЕассЕсЕ ЕдаЕдЕсдсЕ сдадааддсс даЕдсЕаЕдс сссдЕдЕдсс ЕдаддсЕсаа	2580
сдЕсдЕсЕЕд дЕЕЕЕЕЕсаЕ даадЕсЕсЕЕ ЕЕдаЕддаса ЕсссдсадЕЕ дасдЕсЕдЕд	2640
ааддадаЕдс асЕсдЕЕсЕс сдЕсдЕдасд ссдЕЕсЕаса дЕдааадЕдЕ дЕЕдаЕсЕса	2700
ЕЕдЕсддадс ЕдаасдаЕсс дсЕддссаас сасссддЕсЕ ЕссадааддЕ ддаддадаад	2760
ддсаадааса ЕЕасЕаЕЕсЕ даадЕаЕсЕд аЕЕассаЕсс ассссдадда дЕдддадаас	2820
ЕЕЕЕЕддаас дЕаЕЕдаЕдЕ дадсасЕдса даддаадсас аадссаасЕа сссдсЕддаа	2880
аЕссдЕсЕдЕ дддсдЕсдЕа ссдЕддЕсаа асссЕддсас дЕасЕдЕЕса аддЕаЕдаЕд	2940
сЕдЕасдадд аЕдсЕаЕсаа даЕЕсЕЕсас ЕддсЕЕдада ЕЕддЕЕсаад Есссддсаад	3000
Есддсддадс адаадсаддс ЕсаасЕЕдад дасаЕддЕдс дЕсЕдаадЕЕ сЕсдЕасаЕЕ	3060
ЕдЕдсдЕдЕс аддЕдЕасдд ЕаадсаЕсдс дсададддса аддсссаддс сдаЕдаЕаЕс	3120
дасЕаЕсЕдс ЕсаадасдЕа сссдаассЕд сдЕдЕЕдссЕ асдЕсдасас саЕсдЕдаЕд	3180
дасддЕддса адсадЕЕсда сасддЕдЕЕд аЕсаададЕд ааддсааЕда ааЕЕдссдаа	3240
дЕЕЕассдсЕ асдадсЕдсс Еддадасссд аЕЕсЕЕддЕд ааддЕаадсс сдадаассад	3300
аасаасдсдс ЕЕссаЕЕсас дсдЕддсдаа ЕассЕссада сдаЕЕдаЕаЕ даассадсад	3360
сасгасЕЕсд аддадЕдЕсЕ даадаЕдссд садсЕЕсЕдд ЕдасЕдсЕда ссЕдсасссЕ	3420
Ессаадааас сЕдЕдЕссаЕ ЕаЕЕддЕаЕд сдЕдадсаса ЕЕЕЕсасддд ЕаасдсЕЕса	3480
ЕсдсЕдЕсаа адЕЕЕаадЕс дЕддсаддад сЕддЕдЕЕсд ЕдасдсЕдЕс ЕсадсдЕдЕд	3540
сЕддссдасс сдсЕдЕаЕдЕ ЕсдЕаЕдсас ЕасддЕсасс ссдаЕаЕЕЕЕ сдасаадаЕс	3600
аЕЕдсЕаЕдс сЕсдЕддЕдд адЕдЕссаад дсЕЕссаадд дсаЕЕаасЕЕ дЕсЕдаддаЕ	3660
дЕдЕЕсдсЕд дЕЕЕЕаасЕс дасдсЕЕсдЕ ддЕддЕдЕдд ЕдасдсасдЕ ддадЕЕсаЕд	3720
садЕдЕддЕа адддЕсдЕда ЕдЕддсЕсЕд ЕсдсадаЕЕЕ ссаЕдЕЕсда дддЕаадсЕд	3780
дсЕаасддЕд сЕддсдадас дЕсЕсЕсдсЕ сдЕдаддсЕс аЕсдЕаЕддд ссадЕЕсаЕд	3840

- 62 027487

дасЕЕсЕЕсс дЕсЕдаасЕс саЕдЕасЕас Есдсасасдд дЕЕЕсЕасЕЕ сдссасдЕдд	3900
аЕдасааЕЕд ЕсасдассЕЕ сдЕдЕасаЕд ЕасЕдсаадд ЕдЕасЕЕддс ЕсЕадсдддЕ	3960
дЕдсадсадс адаЕЕдЕдЕа сдаЕаЕдаас асдассдсЕд ЕдаЕсассда даасаЕсдса	4020
аасаасЕЕсд асдддсдЕдЕ дЕЕсассдаЕ сЕдааддсЕд ЕдсЕдаасас дсадЕЕсЕас	4080
аЕссаадссд дЕасЕЕЕссЕ саЕдсЕЕссд сЕсаЕдЕдЕд ЕдЕасЕЕсдд Едааддаддс	4140
ЕЕсдЕдсдсд дЕаЕдасЕсд аЕЕсаЕсдас агдаЕсаЕса сдсЕдддссс ЕдссЕЕсЕЕс	4200
дЕдЕЕссадд ЕсддЕасдас даЕдсасЕас ЕЕсдасааса асаЕсдЕдса сддЕддсдсс	4260
аадЕаЕсадд сЕасаддЕсд ЕддсЕЕсаад аЕЕЕсссдЕд адасдсЕддЕ дсЕдсЕдЕас	4320
ааддсдЕаЕд саадсЕссса сЕаЕсдааад дссЕдддадс ЕсаЕсдддЕЕ дЕдЕсЕЕдЕд	4380
ЕасагддсдЕ ЕсддгааЕЕЕ ЕЕасаЕсЕдг сддассдагд сддсЕдссаа сдасаасасЕ	4440
ЕЕЕдсдЕссд асЕасЕдЕда дасЕдсЕсад дсЕЕасдддд ЕдсадасдЕЕ сЕсддЕдЕдд	4500
ЕЕсаЕсЕсса ЕсЕЕдЕдддЕ ддЕдддЕссд ЕЕссЕсЕЕса асадЕдасдд ЕсЕддасЕас	4560
аддаааасса аддЕддаЕаЕ ссадсадЕдд ЕдсаЕдЕдда ЕдЕЕЕдсссс сдаадасЕас	4620
ааддасдасд асссддссаа саадддаддс ЕдддЕаддсЕ ддЕддааддд сдаЕсЕддад	4680
садсЕдсасд дсЕссаасаЕ даЕсЕсдсдс дЕсасддЕса ЕссЕссдсда дЕдЕсдссас	4740
ЕЕссЕдсЕса ЕдЕЕсЕасдЕ ддсЕасасЕс дадасдЕссд асдЕсаЕдЕа сдЕддсдЕас	4800
ЕсдЕЕсддЕд сЕдсддЕсдс дасдаЕЕдЕЕ сЕдсЕЕддсд ЕдЕЕссаЕдд сЕЕЕддЕаЕд	4860
ддсаЕдсдсЕ ссаЕдадссс ддЕдасдсдс дсЕдЕдаЕсЕ асаЕддддас сдЕсдсадсс	4920
аЕсдЕдасдд ссЕасЕЕсЕЕ ддссасЕЕдд аЕсдЕдсЕдд асЕддаааЕЕ саадЕасдсс	4980
аЕдЕсдсЕсЕ ддЕЕсдссЕа сдЕддсЕдсд сЕсЕасддЕа ЕсаасдадЕд сЕЕссдсаЕд	5040
ЕддадЕЕЕсс саадсЕсдЕс даЕсдсЕддс аЕЕдсЕдЕдЕ ЕссадсадсЕ асадЕЕссЕс	5100
ЕЕсдасЕЕЕа ЕсЕЕсЕдсаЕ ЕддЕаЕдаЕс аЕсссдсЕЕд ЕддЕсаЕдЕс дЕдсаЕсссд	5160
ЕЕссЕдааса ЕсаЕссадас дсдЕаЕдаЕд Еасаасдаад дсЕЕсгссаа ддЕсаЕдЕсЕ	5220
дсЕЕсЕЕсдс адЕаЕдссЕЕ сЕсЕсЕддса дссЕЕсаЕдд дааЕссЕддд сддЕаЕсддЕ	5280

- 63 027487

дхсддсхддс	хдххсаасхх	дсхдхсаасд	схддадсадх	схдсдадххх	сдсаадХХас	5340
дхсдхсасдх	асдахддсдх	ссхаадхдда	аасдхдддсд	ахддсассас	дасдхасахд	5400
схсХасддХд	ссхдХдХддХ	дддхасдахс	ахсдсхддсх	хссхсаасхх	сххссхдддх	5460
сдхсдхсхдд	сХаХХдХХдс	дддхддхсхс	ххсадхасдс	хсддхахддх	ддсхдхсадх	5520
дссаасдасд	ахсхссдххс	дасдсхдсхд	ахдссхддха	хсддхсхдсх	Хддадссхсд	5580
ХдсддХаХХс	ХдсХассдХс	дххддссахс	хасахсххсд	адахсхсдас	сааддадахд	5640
сдаддсааад	ссахдххдхх	дсХдддааХс	ддсххсахса	хсддсадххх	дсхдддсддс	5700
аххххсдсда	ссдХдаасса	дсХдддаХдд	ахсхддсада	сдхххдсхдс	схдсахсдхд	5760
ахсдсссхдд	хсасдссадх	сдхсаахдхд	ххсссадада	дхссдхасхд	ддхдсхддах	5820
сдсаадддсх	дддасдссхд	ХдаадссХдх	схсдххахсс	хдсдхсдхаа	ассхдахдхс	5880
саададдадс	хсааддхсах	дсдадаадад	дааасддсад	ахдааддсдд	сдссддсдсс	5940
хасаадххсс	хсахсддхсх	сххссхсахд	схсдхдхссх	схсхдасхас	хддхххссхс	6000
аасдссХХса	хсадсхасаа	дддадсдадс	дадхасасдд	ассаадасса	дсхдххсдхд	6060
аасдсдахдд	сдсхдсадах	схссддхдсх	дсдахсдсса	хсххсхасах	сдасаадсХд	6120
дассасаадх	сдаххсхсхх	сддаасдххд	ахсссхахсд	схахсхдхдс	хддсаххсхд	6180
ддсххсаасд	адаасхсада	дахдсхддда	дасааададд	дсхсдддхсх	дхассхсадх	6240
сххдхадхса	хдсхсахдха	сххсххсахд	дддсхдддса	сдадсхсхдс	хсхдхддхсс	6300
дсахдсдхсд	дсахдххсаа	Хасхсдсддс	сдсдссхсдх	ссассассаХ	дсхдххсдсх	6360
ахсххсххсс	хддсддахах	дддсхасдХс	ХасХХдсаса	сддасдасхс	дахдахдсад	6420
аасдаахахх	ссхахсхсха	сдссаХсдса	ддсххсадхд	хсдхсдсссх	ддхдсхдхха	6480
ахдддсдсад	дсассаадаа	даасддсдхс	ахсхдхасса	адхсадаадс	Хсадсдсдах	6540
сдсдассдха	хсдсхсдхах	дсдхдссдаа	сдхдсаадхс	дсаасасдсд	дасдссхдда	6600
асХдсдсдсс	адсддаахсх	садхсдсдхд	сддХссаадХ	сдаасдсхдд	сддссадсдд	6660
ддсаасдсдд	сдсахддсдд	ХддсХассаа	ахдХасдааа	сасссдссаа	сдсхдсдссд	6720

- 64 027487 ссдсгсагдс асдсдсдссс дгад 6744 <210> 37 <211> 2462 <212> ДНК <213> РНуГорКгКога ч'пбезтапь <400> 37

антсдадада	итсдаас	исгдасагсд	гтдсаассаР	аасгрдссрд	саргааддгд	60
сгсстсаасг	дгасссагдс	сдадсассса	РсдасСсГдс	садРасдагд	сггсассааа	120
дгиггадгсс	асаадаааад	ссдааасдга	сагдгсдгаа	сддаадссд!	дсдассгггг	180
ассдисдгд	сдсгддисгс	асдтадсис	аИсГссис	псссгадсс	адсаааддсд	240
РсРсссаада	кагсссадса	ассдссгагс	дд-сбаадагс	ааддад±ааа	акдсасссдд	300
сдсгд±1сгс	дтдсгсаасг	«ддс-тда	гсасдадт	ддгсгссгса	дадсдтдссд	360
асгсдатдаг	саааГсйсдд	гстддаИда	дсссстдддр	ддасдгтдас	асссссдада	420
дтдсастсаа	сдрсасдбсд	бсдсдбддад	агасдгддас	дргддгсагд	адсдасдаа!	480
НаасдТРсс	1дддсд1аа1	ИРасдсссд	дИсддаГса	сакдтддасд	дсдИадааа	540
гдсссдасдд	Рдгсаагдса	дсгсгсдаар	асгасадсиг	саагаидасс	дагассдкаа	600
сддааксдда	сддгсдрддг	дРсРРссдда	РааадаРРаР	ддаададдас	аасарсассг	660
асасддбдтд	даасасдГас	дсгаадссрд	сдддрр-ссда	дасссаРсас	агдгастасс	720
дадссддбак	ддгдсаахсс	сддаасаааг	СсгдСГСсса	аддаддаадд	агддаадгдд	780
Тддсгсаагг	ассадсааса	ассадсесга	дгаассссда	гардддкдас	агсаааддгс	840
дсдгсаадас	даасадсИс	кагсссасдг	ддссгддгаг	пддспсга	ддааассгад	900
дасдадсРск	аррсрсссаа	рсдассадгс	ддаРдГддсс	ргддадргас	дасдаагдид	960
асдааааан	сдаагссадг	сааадаагса	дсдсдгдгда	сддСаатсса	ддаадгддат	1020
гдаагдсгса	гсааддасда	ддадсдссдд	ааагадагст	асгддаадда	ддаддгдгад	1080
ссагсгссас	аадтагссад	дгсдстссгд	дааТдсссда	гааатгссдт	агсактдсгс	1140

- 65 027487

ссасддахда	хаааадхссс	ххсхдсдхсх	хсасддссда	дхдхасхасх	аххддхдсха	1200
асхххссхдд	дахсссадсс	ааадсдхасд	аадсхсдада	ххахдааадс	хддхахсаад	1260
дасхасддха	сдсхссааах	асхсхххдха	дсссадххдд	садсххдахд	саадахссса	1320
ааасддХдсХ	Хдсааахдсс	дадаааддсх	хсасххсхаа	хасдхдхааа	ддадхсаахд	1380
сдхдХссадс	ххсдддхдас	ддахасхссд	аХХХаддсХХ	дахсдасддд	ааадддссхд	1440
аххасхдддд	ддххаасааа	дааддсддсх	дхахдссддх	хаххаасдда	хасасдддад	1500
схххссхахд	ХдасссХдас	адххссааса	ааааахдххс	схсхссдхха	ддхдсддаад	1560
аасссаадад	хааадххахд	даассаххсд	адхахсадах	ддасдсссхд	хссдсхаахх	1620
ддссадххса	дсхсдсадса	хахасаадхх	ахдхдаааха	ссаадхсдаа	хдддхсахдд	1680
дсХсасаадд	ххасаххсдс	хддахддхсд	аддахаххдх	дахххххдаа	аххссадссд	1740
адхсддхсда	даахдххсса	саадахдсхд	ссаадхссаа	сссхаадааа	схсахдххдд	1800
аадаасссах	дхасдхдахх	ххсаасдхсд	схсхдхсаас	хадххддддх	ассасдссас	1860
сдааХссадд	дхсдссахдх	сдхддадахд	ддадсаахдс	дсаасахаас	дсхахххдхд	1920
асддхххссс	сахдххсахд	аадахсдасх	асаххсдхах	схахсаддах	схсхсххсса	1980
асхссасдах	ддсхахсддд	хдхдасссдх	схасхсахсс	дасхааасаа	хддахсдадд	2040
ахсасаххда	хдадхахдад	асдасддада	ахааахддах	ХдаддХХсас	ддхддадсса	2100
аххдсаадас	хдахаасдас	хдхасддхса	дхасххсхса	саххххдасд	дддаааХдХа	2160
дсаадаааса	хсдсхдхада	хдсддахсхх	ссддхдсххд	дддхддхсса	сдххдсасаа	2220
схссасхадс	хдахасадсд	аахддадаад	дсххсддасс	ассаасадхх	аххасдадсх	2280
ХддХХддХдс	аххсдхсахх	дхдсххххдд	ХсХХХдХддХ	дхасаадаха	аХддассаас	2340
дсадсаадаа	ддсдахддхд	ддадсхддда	ххасхсаасс	адсааххсхс	хссаадахсд	2400
адахддасда	саХсссасдХ	хсааахаааа	дссададсдд	схсддаддах	ааддхддхдх	2460

ад 2462 <210> 38

- 66 027487 <211> 942 <212> ДНК <213> РНухорНхНога тпРезХапз <400> 38

ахддсхссас хдссахссдс аассххдасс асасссдасд хддсхссхдх сасадсХасс	60
ассдссхсдс адсссххсда сдассхадхх дасааддхсд ададхддсха хдсддсхахд	120
ссХассассс саааддсддх ддсхсссххс ссаассХсса аассдсаадд хсхссадсдх	180
ххсдссдххс ададсдХдса ссХдсдсдад хдсххсдссд адххссхсдд сассххсдхс	240
ахдахсдхсх хсддхахддд сдхсаасаас саадхдасса асхсасасда сдссаасддс	300
асдхддсхса дсахсаахах дхдсхддддд аххддхдхас хсахсддсдх схасхдсхсс	360
дадддсахса дхддхдсхаа ссхсаасаса дссдхдасдх хддсасаххд сдхдхасддс	420
сдхсхассах ддхддааадс асссддххас ахдахсхсас адсхаххддд сдссххсхдх	480
ддадсхххса ххахсхасдх сахдсадхас садаассхса асдхсаххда сссдхахсдс	540
дадассасас ададсадсхх схсдасдхах ссдадсдаса асахсхссаа схасасадсс	600
ххсхасассд адххсахсдд хасхдсхахд сххдхдсхса дхахсхасдс сахсасддас	660
аадсдсааса дахсхдссдд хсхсдхдддх хсхсссххсд ссххсхдхсх аахдахсахд	720
дсдххдддса ХддссХХХдд сахдаасасд ддсхасдсхд хдаасссхдс асдхдасххс	780
ддсссссдса ХсХХсасддс сахсдсдддс хддддсхсса аддХсХХХас сасХсддаас	840
хасхасххсх ддаХсссдах сдхддссдах Хсхахдддсд дааххдсхдд хдсхддасхс	900
ХаХсддсХдс ХХдХддадаХ ссассассса ссссхсхсдх ад	942

<210> 39 <211> 1636

<212>	ДНК
<213>	РНухорНхНога тпбезхапз
<400>	39
аХдХссдасд ассаадхдсс ассдХХХХсд схсддхасда аасассХХас асдсахдасд 60
хдсадсдсас адххсадада ХдасХаасхд дссахдсхдс сдсхасдхдх аХХХассада 120

- 67 027487

хаадссдсдс сасдаХасхх сдасдхасдх сддхсддхдд сдХаадХХХд сддадсХсдх	180
дхсдссааад хасдхсааас ааддхадасд ахддааааад хдхддсхсха аасахсахдс	240
хддддсххха ддхддсхсхх хсхаадсхсд дадсадаххс адсасдсдас дсадасХсХд	300
даддасххсс дсаасддХаа аахсдссссх ддхсадххса аддахдсдда асХХХддааХ	360
сххсдссадд дхасдаааса ахдсдасадд ахддхассаа сххдхддххх ххдсхдасдх	420
хххддхдаха аххдаахсда хахдхадсдх асдаддсХдс сдхдсасссх садасхддсд	480
адасадХХсс ддсХдХдХХХ сддсХдХсдд сХХХсдХдсс ХдХдаасаХХ сссаХХХдсд	540
ххддсахдсх дсхсдсхссх дссасддхах дхааадхсхх дсхдсасххд хаасаахадс	600
хххаххххаа хххааахдсх сасххаааха хдсххасадх хдддааасас дахсххсхдд	660
саахдддхха ассададсха садсдссддх ххсаасхасд схаассдсаа сдссадсадх	720
даасаддаса асхссассах сххсадхасд аадххсхсда хдсхаахддс сххсхххсад	780
сдххсхааса сддсхсхххд сахсдхахса сададхсдха сдсхассдсд асдсхсдхдх	840
сххдсхсдас хдссдххддх схдддхаада хддхддадаа адссаадада схххсхссса	900
дсасдсдххс сххссхсдда ааддххаааа сХдсХаааХд ссдаахдсхд хдсхссххах	960
дхдасхдаах ххххдддсхд саасххдахс адахддххсс хххсдххдсх дхсдсдадсд	1020
саддхдсххх саасдссдХд хсдахдсдсх хсаасдадхх ссадхасдхд хададхдхсх	1080
хдсасхддаа ахахдахдсх дххдхдсхса ххддадхдхд дхдахдсдхх асадададдд	1140
ааххдахахс аХддасдадс асддадахдх хсасдддсдх хсадххдссд схддасдхса	1200
дхсдсххддс саадхддсас хсасдсдхах хдсдсхассс ахдсссадха сдхссхсдса	1260
ххдасаадсх сххсххдддх дааххахдхс хаахаххддх ддасххддас адххххдсхд	1320
схсссдссдх ассхдхахда дахсаХдаад аааассааса ХсаХдсссаа ддссаадхас	1380
ссдаадсххд схдсддадсх сддхасдхдс аххахххсхд ссахадхссд сддхаахдад	1440
схаасххахх дсдхсхсхдс схдсахсхах дахадхсдхд ххаасдахдх дхсхдхдддд	1500
хдссахдссс адсдсхдхдд сдсхсххссс дсадххддда асдахххсдд схдасадсдх	1560

- 68 027487

Едаддаддаа ЕЕссдаЕсЕс дддЕддаЕсд саасддссад сссаЕЕсдЕс асЕЕсаЕсЕа 1620 саасааддда аЕсЕда 1636 <210> 40 <211> 960 <212> ДНК <213> РНуЕорНЕНога тпЕезЕапз <400> 40

аЕдадсассд	ссааЕааада	адсаЕсЕссс	ЕЕЕдЕддадс	ЕЕсдссдЕсЕ	ЕаасЕЕЕдсд	60
ЕЕсдссааад	ЕЕасЕаЕсдд	ЕддссаасЕс	аЕсааЕсдсЕ	ЕдсадсаЕда	ссссдсЕасЕ	120
дсЕдасдсса	Еддаадасда	сдаЕсдадЕс	сЕдсдЕдасд	ЕдаагсЕаас	дсЕдсадЕсЕ	180
ддЕсадсдсс	ЕдЕЕддЕсдЕ	дддЕддЕааЕ	ддадсЕддса	ааадсасдсЕ	асЕсадЕаЕс	240
ЕЕддсЕддса	адсассЕдас	ддсЕдасдас	асддсдсЕда	ЕсЕЕсддЕсд	адасадсЕЕс	300
сдЕдасасда	сасЕсаасдс	ЕЕЕааддасЕ	ЕЕсдЕЕадЕд	ссдасЕдддд	дсадсдсЕсд	360
дЕддсдЕЕсд	саасдсасдс	ааЕддсЕЕас	ЕсддсЕдаса	ЕддсддЕдда	адаааЕдаЕд	420
асдааасЕдс	ададЕдааса	сссддадсда	сдссаааадЕ	ЕасЕдааддЕ	дЕЕдсдЕаЕЕ	480
дасссааадЕ	ддсдЕЕЕаса	ЕсдссЕдЕсд	дасддЕсаас	дЕсдссдсдЕ	ЕсадсЕсЕЕЕ	540
сЕддсдсЕас	ЕдадассЕЕс	дсадсЕсаЕс	дЕасЕддасд	аадЕдсЕддд	ааЕдсЕсдас	600
аЕсаЕсЕсдс	дсдаааасдЕ	асЕддсаЕЕс	сЕаааддадд	ааасададас	Есдасаадсс	660
асддЕдЕЕдс	Еадссасдса	саЕсЕЕсдаЕ	дддасддасд	ЕсЕдддсаЕс	ЕсаЕдЕдсЕд	720
ЕаЕаЕЕсдЕс	дсддЕасЕдЕ	ЕдддЕЕсЕаЕ	ддЕссдаЕЕс	адсадЕдЕас	ЕдаЕддаддд	780
аадаЕсссда	ЕдЕаЕааддЕ	ддЕддаасас	ЕддсЕасдЕд	аддааЕЕддс	сдасдасдас	840
сдЕдЕддааЕ	дсдаддсддЕ	дддсссаадЕ	ддЕдадЕЕсд	ассЕдддсаа	сдсдсадаас	900
сдсдсаддад	ддЕаЕдссда	сддЕсдасЕд	ддЕддЕдЕсд	аЕдЕсассас	аЕсдЕЕЕЕаа	960

<210>	41
<211>	510
<212>	ДНК
<213>	РНуЕорНЕНога тпбезЕапз

- 69 027487 <400> 41

агдадсдасд	дГасГаадс!	саидссдгд	агсддадасд	аадасассд!	сасдддсП!	60
агссгсдсдд	дгдссддсса	Гсдаасддсс	дадддаасса	асигстсдг	сдрсааассс	120
гдгдсдгсдд	саггсссдаа	аддаГППГ	гааадсггад	ассаасгас!	аасасдсдгс	180
асагасдасд	д1дсгдсадс	гасгссаагс	гссдсгаид	аддссадт	ссддасдсгс	240
ГсдадссдСд	асдага£сдс	аапагссгс	а!саассадс	асдгасддса	ГссГадПад	300
аасссасгсг	даддгагаад	сстагдп	тсгсасгс	дсПдаГап	аидтддд	360
садд«дс!д	аддадагссд	гсасспсгс	аасасдгасд	асаадасса!	гсссасддгд	420
сгададагсс	сдадсааада	стсдссиас	дасссадсга	аддас1а!а!	сагдаадсдс	480
дгдаачзсгса	гдсиддадд	ададгсдгда				510

<210> 42 <211> 1491

<212> ДНК
<213> РНугорЬгКога тпРезГапз
<400> 42 а!дд!сдс1д	аадасдсдд!	дисасддаа	дсдаадасдс	ссааддссдд	сдагдгссад	60
дссддсада!	ссдгсссдсг	с!сдссдасс	ПсГддПса	дссгсдсддг	дсгдс1сс1д	120
С1СССС11СС	адИсддсГд	дгсддгсддс	садс!саасс	1сасдасси	саасдасдаа	180
дасдадгдса	асдсдсдасс	гсгад-ссдас	ддаасдГдсс	гсасдспсс	сддгсаСадс	240
адсасддаа!	ддассИдаг	сд£даасдсд	1дда11д1ад	дсддгагдаг	сдддадгсгс	300
ддггдгддсд	11агс1ссда	асдРГРсдд!	сдсаадаадд	£а£1дс£ддс	даасдссдгс	360
дгсагд«дд	ссддсдсгд!	саисаадсд	адгасд!сда	д1а1с1сдд!	1111а1дд1с	420
дддсдгагсд	1сдссдд1а1	сдсдгсдддг	ГдГдсдасдд	дгагддгддд	1ддс1аса1с	480
ад!дада11а	сасссссдад	1с1ссд1аас	1сд1асддса	сдисагдса	ддгагс1с1с	540
гсгдссддга	гспадгадг	дасса!сад!	гггггсггсд	сдда!ассад	гадсддсгдд	600
аддгасайсд	ссдсаШсс	сд!Гс11аас	дссддтсГ	гсгсддсдп	сдсассдис	660

- 70 027487

дггсМдКад ададпсссдс дхддсиид даааадддсд ассдддадса рдсддадсдд	720
дадаРсдсса дастасдд сисдатс дисссадгад сасгдасдкд дагддаасса	780
ддРаЬсааРа сРдассГдда дрсададдаа срдрдсддсд аасадсасда аддсддсаса	840
ггдрсдсрдс 1д1111сдсс дс!с111а1с аадсаасрдс 11;д1ддс1с1 ьддгдгаьса	900
дсРдсдсаас аасиасддд гатсаасдсд дгдрдсиаи асРсдтссда 1а1с11с1сд	960
даРдсаддда 1д1сдда1дд Гсдрдкдддр ддсдрсахсд 1д1асдьдс1 даРдПасра	1020
ссдасдардд срдррдсдсд аррдрсддад сдаРРсддса ассдасддсР РсРдсРРасР	1080
ддасРддссд ддардрррар Радрдсрасд ддрагаасгр рддсдсррдс дррдрсддрс	1140
даддгасРсР срарсдрсрр сардддраса ррсдррдсдр РсРРсРсРдс дадсдрдддд	1200
ссдсРРаРсР адссгарсас ддссдсдсрд РРсасддасР сддРасдсдс сасРдссдРс	1260
РсРаРдрдса РсРРРаРсаа РРдддГаГдс аасРРдаРса РРддсдРсгд сРРсссдРас	1320
дрсгсддард сдсРадасда драсаадррр дРссссРРРа рддрдассас сдсРдсдРРР	1380
ррсррсррса срсадррррд даРсссддад асрдсаддра ададсассда ддадаРссаа	1440
дссасдггсс даРсРаддаа адсРсадаад ссддрддрдд рдрраадсрд а	1491

<210> 43 <211> 2462 <212> ДНК <213> рКуГорКгЬога тпРезРапз <400> 43

РРдРдсРасР	сдадрдссрр	сггсгссард	асдсадсаад	асдррсдсса	ддсдсрддас	60
дсссссдсар	радсадссра	сарссасрсд	сдасрдддрд	сарсдсасдд	сдссарсдсд	120
РссаРссдРс	адггссадса	рддссадрсс	аасссдасдр	ассгсРРдас	аарддссддс	180
Рсдааадсса	адрдддрдрр	дсдраадаад	ссдсасддРс	адарссрдсс	дРсадсРсас	240
дссдрададс	дсдаарарсд	рдррсгадад	дсРсРддадс	асгсддаддр	дсссдРРссс	300
сдсдсрдрдр	рдсрардрда	адассссааа	дгсаРРддса	сассРРРсРа	ссРсарддаа	360

- 71 027487

ХасаХасахд	дхсдхахсхх	ссаадассса	хсдсхдссхд	дсаХХааасс	хахдхахсдс	420
ЬасдссаьдЬ	асадсЬсддс	адхадасдсд	ххддььаадх	ХдсасдадсЬ	ддасХасаад	480
аадаЬсддас	хддссдасхх	сддхсдсссс	дадаадхасх	дссассдхдх	сдхдасдсдс	540
хддадхсдас	аадхссааад	хддссадаад	дХсХХХадХд	аадсхддадх	дааддадаас	600
ссдаадаЬда	сдсадсьдса	асдххддсхд	дадсадаасд	ссдасдасдс	сдадааддсс	660
асдассадьд	ссдадддадс	дадхахсдхс	сасддадасх	хссдсаххда	саасахдахс	720
ььссасссда	сддадссЬсд	хдхдххддсс	аххсхддасх	дддадсХдХд	хасхахсддс	780
ааьссдььсь	сддахдхадс	сасаххддсд	хсддссхаса	дасхдссасх	ддасаасХсд	840
аасасааЬса	хдасдссхдд	хсхсхсддах	дсхссдххда	адасасХсдд	сахсссахсд	900
дададХдааХ	хдххдсхадд	схасхдхсдх	сдхдссадас	ддххсссхсх	асссасхсад	960
асдхддсахх	ХХХХсаХддд	дахдахсдха	хассдсххсд	садссахсхд	ссасддхдха	1020
хасдсссдсд	сасХдсхсдд	саасдсдХсд	Хсддссаасд	садсахдхдс	саадасдасд	1080
ахддассдас	хсххддссах	дадсдасдас	ахсахддасд	сахсддсхда	хахххасссд	1140
дадссддадс	хдасдсасах	хсхдссдххс	ссдахссдхс	схсахдсхсх	дсадахдхас	1200
аадаадсХдс	хааадххххд	ссадаассда	дхдхассссд	схдадхссдх	ссасаххдсх	1260
садаЬсдсса	аддсдадада	адааддасдд	дадхддсада	дХдХдссХсс	хдххаххдаа	1320
дадсхсаада	сддаадссаа	ддсдсхддда	схсхддаасс	хсххссхдсс	хсадхдхдхд	1380
дхдссадсхс	хддахддсаа	Хддассадас	дхсаасхасд	дхддадассх	дасдаахсхс	1440
дадьасддас	хсахдхдхда	ддхсахддда	сдсхссаххд	ХдХХддсХсс	ддаддххххс	1500
аасхдсхсад	сасссдахас	сддсаасахд	дадахсххда	сдсддххсхд	сасхдхддад	1560
садаадсаЬс	адьддсььдь	хссхсххсхх	сааддхдада	хссдахсдхд	хххсдсдахд	1620
асддадаадс	дхдхддсххс	дхсддахдсд	асдаасахсд	адасдсдсах	хдхасдсдас	1680
даасадсдХс	аадааХасдХ	саХсааХддс	сасаадххсх	асахсхсхдд	адсхддадас	1740
ссасдахдса	адахсаххдх	дсхсахдддс	аадсасасдд	аасдадссаа	ддададхсса	1800

- 72 027487

сссаадсадс	адСсдасдас	ссссдсдссс	асддасасас	ссддсдсдса	ддссдсдаад	1860
сссагдсаСд	СсСССддсга	сдасдасдса	ссдсасддас	асасддадас	дссдсссаад	1920
дасдгдсдсд	Сдссдсгсад	саасдсдссд	сгсддСдаад	дссдсддссс	сдадассдсс	1980
саддсссдсс	ссддасссдд	ссдсасссас	сассдсасдс	дадссассдд	адсСдсСдад	2040
сдссдссгсд	адссдасддс	дсадсдадсс	аадасасдса	садсдсссаа	дсадссссСд	2100
дссдадаасс	сдсссдСдСд	ССсдсадаСС	дссаадСсдс	дссдсдаасс	ддасадсдсд	2160
сдсггдССда	сдсСссаддс	сдсасагсад	аСддасаадс	асддсаасаа	ддсддсдсаа	2220
саддссассд	ссасдассаа	даСсдСддсд	сссаасасдд	сассддасдс	сСдсдассда	2280
дссаСссада	сссасддсдс	ссссддсдсд	адСсаддасС	ссдссссдсс	ссасссдсас	2340
дссдссссдс	дсасдссасд	СаСсдссдас	ддассддасд	аадсдсасас	дсддассасс	2400
дсаааасссд	адссдадсса	сссдаадссд	Саададааас	дсааддсааа	адсаадсдгд	2460

аа 2462

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Трансгенное растение вида 8ο1аηит ШЪегозит или часть такого растения, в геном которого стабильно интегрированы первая двухцепочечная ДНК и вторая двухцепочечная ДНК для придания патогенной устойчивости к оомицету рода Ρйуίορйίйο^а, при этом нуклеотидные последовательности кодирующих цепей первой и второй ДНК полностью или частично обратно комплементарны друг другу так, что это приводит к образованию двухцепочечной РНК, отличающееся тем, что первая ДНК включает:

(а) нуклеотидную последовательность в соответствии с 8Е0 ГО N08: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с 8Е0 ГО N08: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с нуклеотидной последовательностью в соответствии с (а), (б) или (в) в жестких условиях.
2. Трансгенное растение по п.1, отличающееся тем, что эти растения проявляют устойчивость к Ρйуίορйίйο^а шГезШпз.
3. Трансгенное растение по п.1, отличающееся тем, что двухцепочечная РНК представляет собой т1-РНК или 31-РНК.
4. Трансгенное растение по п.1, отличающееся тем, что первая ДНК и вторая ДНК оперативно связаны по крайней мере с одним промотором.
5. Часть растения по п.1, отличающаяся тем, что она представляет собой семя или клетку.
6. Способ получения трансгенного растения вида 8ο1аηит (нЪегозит по п.1, проявляющего устойчивость к оомицету рода Ρйуίορйίйο^а, состоящий из следующих шагов:

(ί) получение трансформированного растения первой родительской линии, содержащего первую двухцепочечную ДНК, которая стабильно интегрирована в геном родительского растения и которая включает:

(а) нуклеотидную последовательность в соответствии с 8Е0 ГО N08: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с 8Е0 ГО N08: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с нуклеотидной последовательностью в соответствии с (а), (б) или (в) в жестких условиях;

(ίί) получение трансформированного растения второй родительской линии, содержащего вторую двухцепочечную ДНК, которая стабильно интегрирована в геном родительского растения, при этом нуклеотидные последовательности кодирующих цепей первой и второй ДНК частично или полностью обратно комплементарны друг другу;

- 73 027487 (ίίί) скрещивание растения первой родительской линии с растением второй родительской линии;

(ίν) отбор растения, в геноме которого первая двухцепочечная ДНК и вторая двухцепочечная ДНК стабильно интегрированы для придания патогенной устойчивости к оомицету рода Рйу!орй!Нога так, что при этом может образовываться двухцепочечная РНК.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что указанная устойчивость является устойчивостью к РНу!орй!Нога тГезШпз.
8. Способ по п.6, отличающийся тем, что двухцепочечная РНК представляет собой тпРНК или зп

РНК.
9. Композиция для наружной обработки растений для придания растению 8о1апит !иЬегозит устойчивости к оомиценту рода Рйу!орй!Нога, содержащая двухцепочечную РНК, одна цепочка которой соответствует транскрипту двухцепочечной ДНК, включающей:

(а) нуклеотидную последовательность в соответствии с 8ΕΡ ГО N08: 1-43, либо (б) фрагмент по крайней мере из 15 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности в соответствии с 8ΕΡ ГО N08: 1-43, либо (в) нуклеотидную последовательность, комплементарную одной из нуклеотидных последовательностей (а) или (б), либо (г) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с нуклеотидной последовательностью в соответствии с (а), (б) или (в) в жестких условиях.
10. Композиция по п.9 для придания устойчивости к оомицету рода Рйу!орй!Нога, в частности к РНу!орй!Нога тГезШпз.