UA113503C2 - Стійка до засухи рослина - Google Patents
Стійка до засухи рослина Download PDFInfo
- Publication number
- UA113503C2 UA113503C2 UAA201307591A UAA201307591A UA113503C2 UA 113503 C2 UA113503 C2 UA 113503C2 UA A201307591 A UAA201307591 A UA A201307591A UA A201307591 A UAA201307591 A UA A201307591A UA 113503 C2 UA113503 C2 UA 113503C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- shi
- sho
- still
- water
- nya
- Prior art date
Links
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims abstract description 14
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 383
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 374
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 246
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 193
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 claims description 162
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 100
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 89
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 88
- 230000005068 transpiration Effects 0.000 claims description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 50
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 claims description 46
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 claims description 44
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 42
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 37
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims description 37
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 36
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 27
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 26
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 22
- 101710135673 Retinal-specific phospholipid-transporting ATPase ABCA4 Proteins 0.000 claims description 16
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 16
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims description 12
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 10
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 240000005717 Dioscorea alata Species 0.000 claims description 7
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 5
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 5
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 5
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 claims description 4
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000007154 Coffea arabica Species 0.000 claims description 4
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 claims description 4
- 235000016213 coffee Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 3
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 3
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 3
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 claims description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 claims description 2
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 claims description 2
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 claims description 2
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 claims description 2
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims description 2
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000207199 Citrus Species 0.000 claims description 2
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 claims description 2
- 241001584859 Colocasia <moth> Species 0.000 claims description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 2
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 claims description 2
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 claims description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000000797 Hibiscus cannabinus Species 0.000 claims description 2
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 claims description 2
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000165082 Lavanda vera Species 0.000 claims description 2
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 claims description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 claims description 2
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 claims description 2
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 claims description 2
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 claims description 2
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 claims description 2
- 240000000907 Musa textilis Species 0.000 claims description 2
- 241000207836 Olea <angiosperm> Species 0.000 claims description 2
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 claims description 2
- 240000001890 Ribes hudsonianum Species 0.000 claims description 2
- 235000016954 Ribes hudsonianum Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000001466 Ribes nigrum Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 claims description 2
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 2
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019714 Triticale Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000609666 Tuber aestivum Species 0.000 claims description 2
- 241000750042 Vini Species 0.000 claims description 2
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 claims description 2
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000020226 cashew nut Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011487 hemp Substances 0.000 claims description 2
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 claims description 2
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000009758 senescence Effects 0.000 claims description 2
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000228158 x Triticosecale Species 0.000 claims description 2
- 244000005894 Albizia lebbeck Species 0.000 claims 6
- 241000159610 Roya <green alga> Species 0.000 claims 3
- 244000275904 brauner Senf Species 0.000 claims 3
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 claims 2
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 claims 2
- 241000581652 Hagenia abyssinica Species 0.000 claims 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims 2
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims 2
- CUCUKLJLRRAKFN-UHFFFAOYSA-N 7-Hydroxy-(S)-usnate Chemical compound CC12C(=O)C(C(=O)C)C(=O)C=C1OC1=C2C(O)=C(C)C(O)=C1C(C)=O CUCUKLJLRRAKFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100022958 Adenylate kinase 7 Human genes 0.000 claims 1
- 108050000848 Adenylate kinase 7 Proteins 0.000 claims 1
- 101500020117 Aedes aegypti Sialokinin Proteins 0.000 claims 1
- 241001116389 Aloe Species 0.000 claims 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 claims 1
- 244000226021 Anacardium occidentale Species 0.000 claims 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 claims 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 claims 1
- 235000010893 Bischofia javanica Nutrition 0.000 claims 1
- 240000005220 Bischofia javanica Species 0.000 claims 1
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000282421 Canidae Species 0.000 claims 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 claims 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims 1
- 244000201986 Cassia tora Species 0.000 claims 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 claims 1
- 241000543381 Cliftonia monophylla Species 0.000 claims 1
- 235000003913 Coccoloba uvifera Nutrition 0.000 claims 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 claims 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 1
- 235000018782 Dacrydium cupressinum Nutrition 0.000 claims 1
- 240000006055 Dacrydium cupressinum Species 0.000 claims 1
- 101150076104 EAT2 gene Proteins 0.000 claims 1
- 235000008247 Echinochloa frumentacea Nutrition 0.000 claims 1
- UOACKFBJUYNSLK-XRKIENNPSA-N Estradiol Cypionate Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H](C4=CC=C(O)C=C4CC3)CC[C@@]21C)C(=O)CCC1CCCC1 UOACKFBJUYNSLK-XRKIENNPSA-N 0.000 claims 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims 1
- 241001547860 Gaya Species 0.000 claims 1
- 101100277863 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) dksA gene Proteins 0.000 claims 1
- 101001030197 Homo sapiens Myelin transcription factor 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000589632 Homo sapiens N-acetylaspartate synthetase Proteins 0.000 claims 1
- 101000845685 Homo sapiens Protein Dok-7 Proteins 0.000 claims 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- 101000831624 Locusta migratoria Locustatachykinin-1 Proteins 0.000 claims 1
- 241000531897 Loma Species 0.000 claims 1
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 claims 1
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 claims 1
- 241001446467 Mama Species 0.000 claims 1
- 241000343235 Maso Species 0.000 claims 1
- 241001608711 Melo Species 0.000 claims 1
- 101100042271 Mus musculus Sema3b gene Proteins 0.000 claims 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 claims 1
- 102100038893 Myelin transcription factor 1 Human genes 0.000 claims 1
- 102100032380 N-acetylaspartate synthetase Human genes 0.000 claims 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims 1
- 101001098066 Naja melanoleuca Basic phospholipase A2 1 Proteins 0.000 claims 1
- 241001318330 Nenia Species 0.000 claims 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241001079606 Paches Species 0.000 claims 1
- 235000016496 Panda oleosa Nutrition 0.000 claims 1
- 240000000220 Panda oleosa Species 0.000 claims 1
- 240000004072 Panicum sumatrense Species 0.000 claims 1
- 241001659863 Panna Species 0.000 claims 1
- 241001668545 Pascopyrum Species 0.000 claims 1
- 241001387976 Pera Species 0.000 claims 1
- WHTBVLXUSXVMEV-UHFFFAOYSA-N Perfluidone Chemical compound C1=C(NS(=O)(=O)C(F)(F)F)C(C)=CC(S(=O)(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 WHTBVLXUSXVMEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000549435 Pria Species 0.000 claims 1
- 102100031135 Protein Dok-7 Human genes 0.000 claims 1
- 240000008976 Pterocarpus marsupium Species 0.000 claims 1
- 235000014548 Rubus moluccanus Nutrition 0.000 claims 1
- 238000004963 SAMO calculation Methods 0.000 claims 1
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 claims 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 claims 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 claims 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000838698 Togo Species 0.000 claims 1
- 235000006732 Torreya nucifera Nutrition 0.000 claims 1
- 244000111306 Torreya nucifera Species 0.000 claims 1
- 241000270506 Tupinambis Species 0.000 claims 1
- 101000577938 Xenopus laevis Midkine-B Proteins 0.000 claims 1
- 241001377938 Yara Species 0.000 claims 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 claims 1
- 235000011399 aloe vera Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims 1
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000018459 dissociative disease Diseases 0.000 claims 1
- 244000245171 dosh Species 0.000 claims 1
- 235000001159 dosh Nutrition 0.000 claims 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 claims 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims 1
- 210000000554 iris Anatomy 0.000 claims 1
- 206010023497 kuru Diseases 0.000 claims 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 claims 1
- 230000002475 laxative effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052754 neon Inorganic materials 0.000 claims 1
- GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N neon atom Chemical compound [Ne] GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 claims 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 claims 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NCAIGTHBQTXTLR-UHFFFAOYSA-N phentermine hydrochloride Chemical compound [Cl-].CC(C)([NH3+])CC1=CC=CC=C1 NCAIGTHBQTXTLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 claims 1
- 235000020079 raki Nutrition 0.000 claims 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 claims 1
- 239000002910 solid waste Substances 0.000 claims 1
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 claims 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 claims 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010187 selection method Methods 0.000 abstract description 2
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 51
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 38
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 33
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 28
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 27
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 27
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 102100028703 Protein maestro Human genes 0.000 description 20
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 19
- 230000004044 response Effects 0.000 description 19
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 230000008649 adaptation response Effects 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 12
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 10
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 10
- 230000014634 leaf senescence Effects 0.000 description 9
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 9
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 9
- 230000024346 drought recovery Effects 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 7
- UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N (4R)-3-[oxo-[(2S)-5-oxo-2-pyrrolidinyl]methyl]-4-thiazolidinecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1C(=O)[C@H]1NC(=O)CC1 UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 6
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 6
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 6
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 6
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 5
- 230000008641 drought stress Effects 0.000 description 5
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 5
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 5
- 241000271559 Dromaiidae Species 0.000 description 4
- 241001246312 Otis Species 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 4
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 4
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 4
- 101150096316 5 gene Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 235000015505 Sorghum bicolor subsp. bicolor Nutrition 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 230000002547 anomalous effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N h2o hydrate Chemical compound O.O JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000010801 machine learning Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000021048 nutrient requirements Nutrition 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000005549 size reduction Methods 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- FBOUIAKEJMZPQG-AWNIVKPZSA-N (1E)-1-(2,4-dichlorophenyl)-4,4-dimethyl-2-(1,2,4-triazol-1-yl)pent-1-en-3-ol Chemical compound C1=NC=NN1/C(C(O)C(C)(C)C)=C/C1=CC=C(Cl)C=C1Cl FBOUIAKEJMZPQG-AWNIVKPZSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 241000208223 Anacardiaceae Species 0.000 description 1
- 241000922536 Blackcurrant reversion virus Species 0.000 description 1
- 240000008564 Boehmeria nivea Species 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 244000188595 Brassica sinapistrum Species 0.000 description 1
- 235000018961 Docynia delavayi Nutrition 0.000 description 1
- 240000003693 Docynia delavayi Species 0.000 description 1
- 101100291267 Drosophila melanogaster Miga gene Proteins 0.000 description 1
- 235000009245 Elaeagnus multiflora Nutrition 0.000 description 1
- 240000000298 Elaeagnus multiflora Species 0.000 description 1
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 1
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 101001074548 Homo sapiens Regulating synaptic membrane exocytosis protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- VISKLVOLGCYFCW-UHFFFAOYSA-N Koenine Natural products C1=CC(C)(C)OC2=C1C(NC=1C3=CC(O)=CC=1)=C3C=C2C VISKLVOLGCYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000721701 Lynx Species 0.000 description 1
- 241001632414 Meum Species 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 241001440155 Obrima Species 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 241000269908 Platichthys flesus Species 0.000 description 1
- 101710134436 Putative uncharacterized protein Proteins 0.000 description 1
- 102100036266 Regulating synaptic membrane exocytosis protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000297179 Syringa vulgaris Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 230000007614 genetic variation Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 210000002768 hair cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 101150044508 key gene Proteins 0.000 description 1
- 238000004768 lowest unoccupied molecular orbital Methods 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000025508 response to water Effects 0.000 description 1
- 230000022676 rumination Effects 0.000 description 1
- 208000015212 rumination disease Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005204 segregation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/12—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield
- A01H1/122—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- A01H1/1225—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold or salt resistance
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/04—Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
- A01H5/10—Seeds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8262—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield involving plant development
- C12N15/8266—Abscission; Dehiscence; Senescence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8273—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold, salt resistance
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Botany (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Physiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Hydroponics (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
Винахід належить до способу отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду ефективніше, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду. Спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує локус Stg1 або Stg2 з сорго, який асоційований з фенотипом підтримування зеленим, який включає перемикання використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води.
Description
(57) Реферат:
Винахід належить до способу отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду ефективніше, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду. Спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує локус 51941 або
ЗІ42 з сорго, який асоційований з фенотипом підтримування зеленим, який включає перемикання використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води.
Дата подачі
Дана заявка пов'язана з тимчасовою заявкою США Мо 61/413902, поданою 15 листопада 2010 року, повний зміст якої включений в даний опис як посилання.
Галузь техніки
У даному описі описано отримання стійких до засухи рослин. Даний винахід дозволяє маніпулювання фенотипічною ознакою, званою в даному описі "підтримування зеленим", для отримання стійких до засухи рослин рекомбінантними способами, способами мутагенезу і/або способами схрещування і селекції. Також в даному описі описані системи практики керування обробкою культур для підвищення виходу культури і ефективності збирання урожаю в умовах обмеженого доступу води.
Рівень техніки
Бібліографічні деталі публікацій, що указуються автором в даний заявці, зібрані в алфавітному порядку в кінці опису.
Посилання на будь-який із документів рівня техніки в даному описі не є і не повинне тлумачитися як визнання або яка-небудь форма припущення, що цей документ рівня техніки формує частину загальної інформації в якій-небудь країні.
Збільшення людської популяції вимагає збільшення врожайності сільськогосподарських культур. Це є головною метою для рослинників і генетиків рослин. Один з підходів підвищення врожайності сільськогосподарських культур залучає селекцію ознак рослин, які сприяють вищому виходу зерна і стійкості (Зргіпдег, Майшге Сепеїйіс5 42:475-476, 2010). Цей підхід був названий "зеленим революцією". Інші підходи включають розвиток архітектури рослин, який привів, наприклад, до ідентифікації локусу кількісних ознак (ОТ), який кодує білок, подібний білку, зв'язуючому промотор лусочок 14 (О55РІ 14) в рисі, і який сприяє збільшенню виходу рису (ао єї а!., Майшге Сепеїїс5 42:541-544, 2010; Міцга еї а!., Майте Сепеїйс5 42:545-549, 2010).
Засуха являє собою одне з найважливіших обмежень продукції злаків по всьому світу. Сорго є сховищем механізмів стійкості до засухи, які включають С--фотосинтез, глибоке коріння і товстий віск листя, які забезпечують ріст в жарких і сухих умовах. Стійкість до засухи робить сорго особливо важливим в сухих регіонах, таких як країни Африки південніше Сахари, західно- центральна Індія, північно-східна Австралія і південні рівнини США. Враховуючи зростаючий
Зо тиск на доступність бідних водних ресурсів, ідентифікація ознак, асоційованих з виходом зерна в умовах засухи, стає більш важливою.
Механізм адаптації до засухи, ідентифікований в сорго, який приводить до збереження листя зеленими протягом більш тривалих періодів часу в ході наливання зерна в умовах засухи, відомий як "підтримування зеленим". Підтримування зеленим асоційовано з високим виходом зерна при засусі після цвітіння в сорго (Воїтеї! еї аї., Стор 5сі. 40:1037-1048, 20000; Каззапип єї а!., Еорпуїїса 72:351-362, 2010), пшениці (Т/йісут аевіїмит Г..) (Зрапо еї аї., 9У. Ехр. Вої. 54:1415- 1420, 2003; СНгівіорнег єї аїЇ., А!йв5і. у. Адгіс. Вев5. 59:354-364, 2008), рисі (Огула займа 1.)
ІЇКазпімаді еї аї., Ріапі Рпузіооду апа Віоспетівігу 44:152-157, 2006) і кукурудзі (Хеа тауз 1.) (2пепа еї аї., Ріапії Вгеєйд 128:54-62, 20091. Крім того, воно може прямо впливати на вихід зерна в умовах засухи шляхом підвищення стійкості до вугільної гнилі (Масгорпотіпа рпазеоїїпа |Тазві)
Сюоїд.) (Тепкоцапо єї аї., Тиєог. Аррі. Сепеї. 85:644-648, 1993; Сагисй еї аї., Ійї. богдпит апа
МіПеїв Мему/ві. 43:63-65, 2002). Це зменшує вилягання (Кедау еї аї., Єирпуїїса 159:191-198, 2008), що дозволяє рослинникам використовувати позитивну асоціацію між висотою рослини і виходом зерна (огаап еї аї., Тпеог. Аррі. Сепеї. 106:559-567, 2003). Підтримування зеленим є важливим критерієм селекції для програм виведення сорго, націлених на адаптацію до засухи як в США (Нозепомиу єї аї., Адгісє. Маїег Мапад. 7:207-222, 1983), так і в Австралії (Неп2еї! еї а!., А!йМзігаїіа Іпї. зогопит апа Міїїеїв Мемуві. 38:1-9, 1997).
На підтримку цієї ознаки отримані істотні докази (Воіїтеї! еї а)І., Стор сі. 40:1026-1037, 2000а;
ВоїтєїЇ апа Наттег, Стор сі. 40:1295-1307, 2000; Наїттів єї аї., У. Ехр. Вої. 58:327-338, 2007;
Спгібіорпег еї аіІ., 2008, вище; Мап Оо5іегот еї аї., Рій Стор5 Кев5. 115:19-28, 2010а і Мап
Оов5ієгот еєї аї., Рієїй Сторз Вев5. 115:29-38, 20105). Хоча цей механізм стійкості до засухи використовується фахівцями з розведення сорго в США і Австралії протягом 25 років, і широка фізіологічна основа цієї ознаки стає більш зрозумілою, причинні механізми і генетичні локуси, залучені до нього, до цього часу невідомі.
В умовах обмеження води вихід зерна є функцією транспірації (Т), ефективності транспірації (ТЕ) і індексу урожаю (НІ) ІРаззіоига, 4). А!йв5ії. Іп5ї. Адгіс. Зсі. 43:117-120, 1977). У цих рамках, вихід зерна пов'язаний з Т періоду після цвітіння (Тигпег, у. Ехр. Вої. 55:2413-2425, 2004;
Мапзспаді еї аї., Рипсії. Ріапі. Вісі. 33:823-837, 2006), оскільки НІ зростає із ростом частки загальної Т культури, що використовується після цвітіння (Раззіоцга, 1977, вище; Зайга5 апа 60 Соппог, Рієїй Стор Вев. 26:227-239, 1991; Наттег", Адгіс. осі. 19:16-22, 2006). Збільшена Т після цвітіння асоційована зі зниженням стресу, що викликається засухою, що може позитивно впливати на швидкість росту культури злаків під час цвітіння і, таким чином, число зерен (Апагаде сеї а!., Стор 5сі. 42:1173-1179, 2002; Мап Оовіегот і Наттег, Ріеій Стор5 Ке5. 108:259- 268, 2008). Якщо загальна кількість доступної води обмежена, Т після цвітіння може збільшуватися шляхом обмеження Т до цвітіння. Цього можна досягати шляхом обмеження розміру листяного покриву або генетично, або шляхом керування обробкою культур. Однак зменшення листяного покриву знизить загальну Т, тільки якщо ТЕ не буде порушена. Для сорго були описані значні генотипічні відмінності в ТЕ (Наттег еї аї., А!йві. У. Адгіс. Ве5. 48:649-655, 1997; Непаегзоп еї аї., А!йвії. У. Ріапі РНувіої. 25:111-123, 1998; МопіосК апа Наттег", у). Стор
Ргод. 2:265-286, 1999; Хіп єї аї., Рієїд Стор Вев. 111:74-80, 2009). Альтернативно використання води після цвітіння може збільшуватися при збільшенні загальної кількості води, доступної для культури, або шляхом більш глибокого укорінення, або шляхом зниження нижньої межі витягання води (Мапзсепаді еї аї., 2006, вище).
Ознака підтримування зеленим впливає на ряд із вказаних вище процесів в сорго. По- перше, підтримування зеленим знижує споживання води в період до цвітіння шляхом обмеження розміру листяного покриву (внаслідок зменшення кущіння і зменшення розміру листя).
По-друге, підтримування зеленим підвищує засвоюваність води шляхом збільшення співвідношення коріння:пагони. Існують деякі експериментальні дані про краще витягання води в лініях з ознакою підтримування зеленим, хоча потрібно більше досліджень. Ці кореневі відповіді також можуть бути пояснені посиленим транспортом ауксину (Умапод еї аї., МоїІесшаг
Ріапі 2(4))(823-831, 2009). По-третє, підтримування зеленим збільшує зеленість листя під час цвітіння, ефективно збільшуючи здатність до фотосинтезу, і, таким чином, ТЕ (за умови, що фотосинтез зростає пропорційно провідності). Збільшення зеленості листя є непрямим ефектом зниження маси листя, тобто в листках концентрується азот.
Виробництво більшої кількості продуктів живлення при меншій кількості води є одним з основних завдань, які в цей час стоять перед людством. Існує реальна і невідкладна потреба як в країнах, що розвиваються, так і в розвинених країнах, в ідентифікації генів і генних мереж, контролюючих адаптацію до засухи в сільськогосподарських рослинах. Це забезпечує
Зо збільшення адаптації до засухи в широкому діапазоні видів рослин, які вирощуються в оточуючих умовах з обмеженим доступом води по всьому світу.
Суть винаходу
Даний винахід стосується локусів кількісних ознак (ОТ), асоційованих з фенотипом підтримування зеленим і/або іншим чином сприяючих йому. ОТІ. позначають в даному описі як "підтримування зеленим (5194) Х", де Х являє собою число, що перевищує 1, яке відповідає області на хромосомі, асоційованій з фенотипом підтримування зеленим.
Як описано в даному описі, ОТ. ідентифікують генетичні області на сорго, які несуть локуси, кодуючі від однієї до деякої кількості білків або регуляторних агентів, таких як мікроРНК, які сприяють фенотипу підтримування зеленим. Модулювання експресії одного або декількох цих локусів в сільськогосподарській рослині забезпечує архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води рослиною на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури або збільшенню ефективності транспірації, тим самим, збільшенню індексу урожаю (НІ) і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води.
У одному варіанті здійснення локуси кодують білок РІМ, який асоційований з ауксином. Білки
РІМ являють собою ефлюксні переносники ауксину, які містять трансмембранні домени і, головним чином, локалізуються в плазматичних мембранах. Термін "РІМ" походить від "суцвіття в формі шпильки".
Термін "ЗБРІМп" використовують для опису такого гена в сорго, де п являє собою число, що визначає компонент ефлюксного переносника ауксину, і п дорівнює від 1 до 11. Вказівка на "ЗВРІМп" включає його гомологи і ортологи з інших рослин. Приклади локусів 5ВБРІМп в сорго включають локуси, наведені в таблиці 14А, такі як, але не обмежуючись ними, 5БРІМА і 5БРІМ2, або їх еквіваленти в інших рослинах. У даному описі описано, що модулювання експресії РІМ або експресія РІМ з конкретною поліморфною зміною сприяють вияву фенотипу підтримування зеленим. Даний винахід стосується РІМ з інших рослин, таких як рис. Буквений префікс у РІМ визначає його джерело (наприклад 56 - сорго; О5 - рис і т. д-. Положення ЗБРІМ в сорго визначається ІО-номером гена (див. таблицю 1А). Як приклади, 5БРІМА відповідає О5РІМУЬ, і
ЗБРІМ2 відповідає О5РІМЗа.
ЗрБРІМА і 5БРІМ2 є прикладами 5рРІМ, описаних в даному описі, відповідальних за ознаку бо підтримування зеленим в сорго, асоційовану з 51941, і 5942, відповідно, що приводить до ряду фенотипів, які забезпечують адаптацію до засухи шляхом зниженого використання води до цвітіння (внаслідок зменшення кущіння і меншого розміру листя), збільшеної засвоюваності води (внаслідок збільшення співвідношення коріння:пагони), збільшеної ефективності транспірації при м'якому дефіциті води (внаслідок вищої концентрації азоту в листках), збільшеної біомаси на площу листка при термінальному дефіциті води (внаслідок збільшення транспірації на площу листка), і збільшений вихід зерна, розмір зерен і стійкість до вилягання.
Інші приклади наведені в таблиці ТА і включають їх еквіваленти в інших рослинах.
Даний винахід стосується способу отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає модулювання рівня експресії існуючого або внесеного локусу суцвіття в формі шпильки (РІМ) у всіх або в окремій тканині рослини для сприяння фенотипу підтримування зеленим, який включає переключення використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води.
У даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, що кодує білок РіІМ, вибраний із ЗОРІМ1-11 або їх еквівалента з іншої рослини або їх функціонального гомолога або ортолога; або модулюючого експресію власного білка РІМ; де рівень і місце експресії РІМ сприяють фенотипу підтримування зеленим, який включає, серед інших, архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури, що приводить до збільшеного індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води.
Крім того, даний винахід стосується способу отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує білок РІМ сорго, вибраний із 5БРІМА і ББРІМ2 або їх еквівалента з іншої рослини, або який
Зо модулює експресію власного РІМ. Вказівка на модулювання включає збільшення і зниження рівня експресії. Більше того, може бути вибраний РІМ, що має бажаний профіль експресії у всіх або окремих тканинах в рослині.
У даному описі передбачений спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує продукт, асоційований або сприяючий фенотипу підтримування зеленим, що включає переключення використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води, і де продукт вибраний із переліку, що складається з ЗБРІМ1-11 або їх еквівалентів з іншої рослини, або який модулює експресію власного РІМ в рослині.
Також в даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду ефективніше, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує білок, вибраний із списку, що складається з 50РІМ4 і 5БРІМ2, або їх еквівалентів із іншої рослини, або який модулює експресію власного РІМ в рослині. Термін "введення" включає введення шляхом рекомбінантного втручання, а також за допомогою протоколу мутагенезу або схрещування з подальшою селекцією.
У даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину і/або батьківську рослину генетичного агента, який кодує два або більше білків РІМ або який модулює експресію двох або більше власних білків
РІМ в рослині. Приклади РІМ в сорго включають ЗБРІМ1-11, такі як ББРІМА і 5БРІМ2, або їх еквіваленти з іншої рослини. Наприклад, ЗОРІМА4 відповідає О5РІМ5, і ЗБРІМ2 відповідає
О5РІМЗа. ЗБРІМ і О5РІМ визначені в таблиці 1А.
Генетично модифіковані рослини і їх нащадки, що виявляють ознаку підтримування зеленим, також передбачені в рамках даного винаходу, також як і насіння, плоди і квітки і інший репродуктивний матеріал або матеріал розмноження.
У рамках даного винаходу передбачені як генетичний матеріал, який кодує білок РІМ або бо його функціональний гомолог або ортолог, який асоційований або сприяє фенотипу підтримування зеленим, який включає архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури або збільшенню ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води, так і агент, який модулює експресію РІМ.
У одному прикладі генетичний матеріал вибраний із (і) агента, який кодує 5БРІМА; і (ії) агента, який модулює рівні експресії 5ОРІМ4 або його еквівалента з іншої рослини. У іншому прикладі генетичний матеріал вибраний із (ї) агента, який кодує 50БРІМ2; і (її) агента, який модулює експресію 5БРІМ2 або його еквівалента з іншої рослини.
Генетичний матеріал включає агент, який кодує білок 5БРІМ4 або ЗБРІМ2 або їх функціональний гомолог або ортолог, або їх еквівалент із іншої рослини, який асоційований або сприяє фенотипу підтримування зеленим, що включає архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури, або збільшенню ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води; і агент, який модулює експресію 5БРІМ4 або 5рРІМ2 або їх еквівалента з іншої рослини.
У даному описі описана система керування рослинництвом для зниження залежності від води або іншого підвищення ефективності використання води і збільшення виходу зерна або продукту. Система керування рослинництвом включає отримання адаптованої до засухи сільськогосподарської культури, що включає злакові рослини, з використанням вибору і модулювання експресії локусу РІМ або його функціонального еквівалента, як визначено в даному описі, окремо або в комбінації з введенням інших корисних ознак, таких як розмір зерна, розмір коріння, стійкість до солей, стійкість до гербіцидів, стійкість до шкідників і т. п.
Альтернативно або додатково, система керування рослинництвом включає отримання адаптованих до засухи рослин і сільськогосподарські процедури, такі як зрошування, вимоги до поживних речовин, щільність і геометрія насадження культури, боротьба з бур'янами, боротьба з комахами, аерація грунту, зменшення кущіння, підняття грядок і т. п. Приклади локусу РІМ включають 5БРІМ1-11 (таблиця 1А), такі як 5ББРІМА і ББРІМА, і їх еквіваленти з інших рослин.
Також в даному описі описана комерційна модель для підвищення економічної віддачі відносно виходу культури, причому модель включає отримання сільськогосподарських рослин, що мають архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води рослиною на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури, або збільшення ефективності транспірації, тим самим, збільшуючи НІ і вихід зерна в умовах обмеженого доступу води, отримання насіння отриманої сільськогосподарської рослини і розподіл насіння виробникам зерна для підвищення виходу і прибутку.
У даному описі використовуються наступні скорочення:
СІ довірчий інтервал,
СМми використання води культурою,
ОМ маса сухої речовини,
АГА площа зеленого листка, но висока щільність,
НІ індекс урожаю, нт високе кущіння,
НМ високий доступ води,
НН високий доступ води, висока щільність (проміжний дефіцит води), р
НМ. високий доступ води, низька щільність (найменший дефіцит води), р
ІА площа листка,
І низька щільність,
ІТ низьке кущіння,
ІМ низький доступ води,
Гн низький доступ води, висока щільність (найбільший дефіцит води), р
Гм. низький доступ води, низька щільність (проміжний дефіцит води), р
МІ. практично ізогенна лінія,
ОРІ РІМ з рису,
М
РАВ біомаса після цвітіння,
РАБ5 маса стебел після цвітіння,
М
РІМ суцвіття в формі шпильки,
РРВ співвідношення біомаси до':після цвітіння,
В
ОТ. локус кількісних ознак, во5 укриття від дощу,
ВМС відносний вміст води,
ОрРІ РІМ з сорго,
М щи питома маса листя,
ЗМІ. навчання статистичної машини, меуке підтримування зеленим, т транспірація, т2 пагін в пазусі листка 2,
ТЗ пагін в пазусі листка 3, т4 пагін в пазусі листка 4, ть пагін в пазусі листка 5, тб пагін в пазусі листка 6,
ТЕ ефективність транспірації, т5 термінальний стрес,
МРО дефіцит тиску пари,
МЛ що добре поливається.
У таблиці 1А представлена інформація про РІМ з сорго і рису.
Тволиця 1А
Детальний спне СТІ. Бір сорго і ! н.н. | пон. Перелов. Опублікова фГомеакоз | х схмв | (бне Довжина рудних ! Дкерена й з Узагальнений
ІВ гема сорго пвст сорго с рол МИНЕ ЕН хом й 102 пт! роро Публікація | вясля позКаченКя ур У Вів
Бо 000 му маю! 000001 мезо то | Васко | коридні я я у 5РІЧ3 ВБРІМІ о 58О2 327 зи ж ХЛ 191 лію 01209 835 се відза
ШІ ї і Мі1З/ЕЗ6бА | Напітапт єї тт нн м 35 і аг мі жоА5 З ши т НА са сор чу ВИШ ії. 811 | и2ю2 з хо шк шшшшш рен шен 111 5293 І лада і ва а о | есовля? | ких» з 113 2000. ває 82 Й ! | и нини Т9ОБИБІ | чгіпйлах сі зі й гтчннни що нт рення миши . зваі зів581 2009 | 2568 Зоя Що й
Її ТУ р оебвисі | вптув ня ОРцаюк Що
І 222 «Х ЗОЗ 2 2 2 2-1 518551 | 2 гова -о5 збі зр 2000 в 0 рда 75 ше Ей зай РЧШИ РИ НО в 113 кю вза м заз 51 Фо ги їклКо З і сп --------- 180 000 Хот 2000 хто с І шини ввіз |шнимю ов. зо
Ї ЩЕ оБаб/тияз | Спинка ве і і і 5 ГЕ МІЗ/ЕЗБ | Набхиални ек
О5РІЧІ зЗа-аї 45 З65 2489 5 00000026 їхні бю | талКю т ЕТ ше ши шишшч іш шк ни и ИН азаі жі о |кеенюю |в» 5
М ПТ 5 взвлоюю | бавиок ей
Ш -ктке рр З Ян нат що Й ! зи | взбитх?о | буйосні ет зі Й ни ШИ зві) А Шо |В ще й о -- сере я Ек ши ши 0 ...35581 6 (631361 зак ваза жхолУю 12 | маяк і ва| л| зва ЕЙ вові | МБІЗоЯІ ---
ЗБоздоЗ73 | 655350! 55323 Бе о кулимовче і си ухтналняя
Т Я ї | шк! ок» юне сне |ввще (ММ: 5 висот, ши ши ши де |оеюо зем в 1 ше ше та 3009 1 ЗЬРІНЄ зві ве зо вт! 00000 зв; лів гої ЗсьБ шкоді Ор і ПИ Я НИ Ес аю -.-4.158830 оз опктчити 28| 5ізв 212002 оз квізоня
БУЗОК | найзчаєн в п ! 2861 ВІзб1 | ною: щов3о І Кові пиши БЕ айЕ зай не й 3 лою 200 Тктоою |що денти одн |сюм явне | 5 ЛЮ еле на | 000011
Б 5 13 и" ; с-......341 0Д711 зі 22 ма ії мбізощі ! шишишишишишиши ІВ сон ей КН ЕНН ПОЩИННИ і ши | Й І 251 вії я міз і мвідьяу ек ек яю ж З не зв ШИН мшо же еннок за сврРІМІ і ЗМО за-на Фі 19 за 3 зв 8000 4 |що ТК ке Кабеа СТІ.
І 5 Е '
Ексай Р ЕІ РУШ Бог З НШНННЯ БЕ сій ен МАШІ РЧНИ РАННЯ
ВьНхюгО3 | 5втяу | 557 «Вт І . х Й Гая ве ов вини |звню | 5) и| шк | 000 жа вєї |ндют, кое нин ши и о о В ВО ; - ШИ: ше пише виш пан ВИН 25| гії зі дб: іа: | хамеж
Короткий опис креслень
Деякі фігури містять кольорові зображення або елементи. Кольорові фотографії доступні у 5 заявника патенту або у відповідному патентному відомстві. При отриманні з патентного відомства може накладатися мито.
На фіг. 1 представлене графічне зображення взаємозв'язку між кількістю стебел на м: і площею зеленого листя під час цвітіння в ряді практично ізогенних ліній, що мають різні інтрогресії 59.
На фіг. 2 представлене графічне зображення взаємозв'язку між кількістю стебел на м: і площею зеленого листя під час цвітіння для ряду інтрогресій 59 в генетичний фон КТх7000 з вирощуванням при двох щільностях культур (0-10 рослин/ме; НО-20 рослин/м3).
На фіг. 3 представлене графічне зображення гістограми передбачених величин для кількості стебел на рослину в популяції з точно картованим 5941, усереднене для трьох сезонів.
На фіг. 4 зображене табличне представлення гістограми кількості стебел на рослину на 44
ОАЕ для п'яти генотипів, вирощених при двох режимах доступу води. Генотипи включають
ЕТх7000 (рекурентна батьківська рослина), 6078-1 (донорська батьківська рослина), і три рослини, вибраних з популяції з точно картованим 5941. НУМ ЮО-високий доступ води, низька щільність (10 рослин/мг). І УМ ЮО-низький доступ води, низька щільність (10 рослин/м3).
На фіг. 5 представлене графічне зображення фенотипічного варіювання популяції з точно картованим 51941 за наявності 12.
На фіг. 6 представлене графічне зображення фенотипічного варіювання популяції з точно картованим 51941 за наявності Т3.
На фіг. 7 представлена гістограма наявності Т2 для восьми рекомбінантних рослин з високим кущінням і восьми рекомбінантних рослин з низьким кущінням з популяції з точно картованим 5191.
На фіг. 8 представлена гістограма загальної кількості пагонів на рослину для п'яти рекомбінантних рослин з високим кущінням і трьох рекомбінантних рослин з низьким кущінням з популяції з точно картованим 51941. Величина 2,5 була вибрана як довільне порогове значення
Зо між високим кущінням і низьким кущінням.
На фіг. 9А-О представлене графічне зображення розподілу розміру листків головного стебла і пагонів для КТх7000 і 6078-1 (591 МІУ), вирощених в лізиметрах в умовах низького і високого
МРО.
На фіг. 10 представлене графічне зображення розподілу розмірів листків головного стебла вВтТхХ7000, 6078-1 (591 МІМ) і трьох рекомбінантних рослин з популяції з точно картованим 5191, вирощених в полі в умовах обмеження доступу води і високій щільності (НО-20 рослин/м).
На фіг. 11 представлене графічне зображення розподілу розміру листків (11-6) для батьківських рослин популяції з точно картованим 5191, вирощених під захисним куполом. (с;
На фіг. 12 представлене графічне зображення розподілу довжини листків (11-6) для батьківських рослин популяції з точно картованим 5191, вирощених під захисним куполом.
Фігура 13 представлено графічне зображення розподілу ширини листків (1-6) для батьківських рослин популяції з точно картованим 5191, вирощених під захисним куполом.
На фіг. 14 представлене графічне зображення розподілу розміру листків (11-11) для батьківських рослин популяції з точно картованим 5191, вирощених під захисним куполом.
На фіг. 15 представлене графічне зображення розподілу довжини листків (11-10) для батьківських рослин популяції з точно картованим 5191, вирощених під захисним куполом.
На фіг. 16 представлена гістограма фенотипічного варіювання довжини /10 в підгрупі рослин популяції з точно картованим 51941, вирощених під захисним куполом.
На фіг. 17 представлена діаграма, що показує, що збільшеної доступності води під час цвітіння досягають шляхом зниження використання води за допомогою двох механізмів (зниження кущіння і менший розмір листків) в рослинах, що містять область 51941.
На фіг. 18 показано, що розмір листяного покриву модулюється як конститутивною, так і адаптивною відповідями, що контролюються геном(ами) в області 591.
На фіг. 19 представлене графічне зображення розподілу розміру листків головного стебла вВтТх7000, 6078-1 (5941 МІ) і трьох рекомбінантних рослин із популяції з точно картованим 5191, вирощених в полі в умовах обмеженого доступу води і високій щільності (НО-20 рослин/м).
На фіг. 20 представлене графічне зображення взаємозв'язку між площею листя 12 і загальною площею зеленого листя під час цвітіння для двох батьківських рослин (6078-1 і
ЕТх7000) і трьох рекомбінантних рослин із популяції з точно картованим 5191.
На фіг. 21 представлене графічне зображення взаємозв'язку між загальною площею зеленого листя (см2/м2) і використанням води культурою (мм) під час цвітіння для двох батьківських рослин (6078-1 і ЕТх7000) і трьох рекомбінантних рослин із популяції з точно картованим 5191.
На фіг. 22 представлене графічне зображення взаємозв'язку між площею зеленого листя і використанням води (Т) в чотирьох рослинах з ОТІ 519 і рекурентній батьківській рослині (КТх7000) в лізиметричних дослідженнях при двох рівнях МРО.
На фіг. 23 представлене графічне зображення гістограми фенотипічного варіювання
Зо "співвідношення коріння:пагони" для 6 в популяції з точно картованим 5941, вирощеної під захисним куполом.
На фіг 24 представлене графічне зображення тимчасового профілю сукупного використання води культурою для КТх7000 і 5941, вирощених в умовах низького доступу води і низькій щільності (20 рослин/м2). Вертикальна лінія означає цвітіння.
На фіг. 25 представлене графічне зображення взаємозв'язку між довжиною (мм) і зеленістю (БРАВ) листя 10 в популяції з точно картованим 51941, вирощеної під захисним куполом.
На фіг. 26 представлене графічне зображення взаємозв'язку між зеленістю листя (З5РАО) і фотосинтезом листя в підгрупі ліній з популяції з точно картованим 51941, включаючи батьківські рослини.
На фіг. 27 представлене графічне зображення взаємозв'язку між зеленістю листя (ЗРАЮ) |і
МУОЕ (Шісог) в підгрупі ліній із популяції з точно картованим 5091, включаючи батьківські рослини.
На фіг. 28 представлене графічне зображення взаємозв'язку між зеленістю листя (З5РАО) і
ММОЕ (Шісог) в чотирьох 519 Мі! (591, 592, 593 і 5194) і рекурентній батьківській рослині (АТХх7000).
На фіг. 29 представлене графічне зображення взаємозв'язку між транспірацією на площу листя і ефективністю транспірації в чотирьох 59 ОТ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000) в лізиметричних дослідженнях при двох рівнях МРО.
На фіг. 30 представлене графічне зображення взаємозв'язку між СУМО (мм) до і після цвітіння в підгрупі ліній з популяції з точно картованим 5141, включаючи батьківські рослини, вирощених в умовах високої щільності (НО) і низькій щільності (НО).
На фіг. З1А і В представлено графічне зображення профілів сукупного використання води для 5191 і КТх7000, вирощених в умовах ГМУНО.
На фіг. 32 представлене графічне зображення взаємозв'язку між СУМО (мм) до і після цвітіння в чотирьох 5І9Д ОСТІ і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах низького доступу води (Г/М) і низькій щільності (І.О).
На фіг. 33 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕ і РАВ в чотирьох 59
ОТІ ії рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/ме; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 34 представлене графічне зображення взаємозв'язку між С АА і РРВЕК в чотирьох
Ід ОТ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м?).
На фіг. 35 представлене графічне зображення взаємозв'язку між Сі АА і РАЗВ в чотирьох
Ід ОТ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м?).
На фіг. 36 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕ і РАВ в чотирьох 59
ОТІ ії рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/ме; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 37 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕК і РАЗМ в чотирьох
Ід ОТ і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/ме; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 38 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕ і виходом зерна в чотирьох 59 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 39 представлене графічне зображення взаємозв'язку між КЕУМУС при середньому наливанні зерна (РІ-2) і відносній швидкості старіння листя в чотирьох 519 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 40 представлене графічне зображення взаємозв'язку між відносною швидкістю старіння листя і площею зеленого листя в зрілому стані в чотирьох 5 ОТ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м).
На фіг. 41 представлене графічне зображення взаємозв'язку між відносним вмістом води (КЕУУС) при середньому наливанні зерна (РІ -2) і масою стебла в зрілому стані в чотирьох 59
ОТІ ії рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м?).
На фіг. 42 представлене графічне зображення взаємозв'язку між масою стебла після цвітіння (РАБМ) і біомасою після цвітіння (РАВ) в чотирьох 519 ОТІ. і рекурентній батьківській
Зо рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м).
На фіг. 43 представлене графічне зображення взаємозв'язку між біомасою стебла після цвітіння і виходом зерна в чотирьох 54 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м2;
НО-20 рослин/м3).
На фіг. 44 представлене графічне зображення взаємозв'язку між масою стебла після цвітіння (РАБМ) і біомасою після цвітіння (РАВ) в чотирьох 5191 ОТІ. і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури, яка була вирощені в експерименті в 2005 році (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 45 представлене графічне зображення взаємозв'язку між масою стебла після цвітіння (РАМ) і виходом зерна в чотирьох 5149 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м-), які були вирощені в експерименті в 2005 році.
На фіг. 46 представлене графічне зображення взаємозв'язку між масою стебла після цвітіння (РАБМ) і біомасою після цвітіння (РАВ) в різних лініях з точно картованим 51 і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м-).
На фіг. 47 представлене графічне зображення взаємозв'язку між вмістом води (КУМС) при середньому наливанні зерна (РІ/-2) і виходом зерна при різних комбінаціях 59 ОТІ і рекурентної батьківської рослини (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м7) в експерименті з вирощування в 2004 році.
На фіг. 48 представлене графічне зображення взаємозв'язку між водним потенціалом листя (МУР) РІ-2 при середньому наливанні зерна (бар) і виходом зерна (г/м7) в 591 ОТІ. (6078-1) і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м-).
На фіг. 49 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВАК і СМ в ході наливання зерна в чотирьох 519 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (ЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/ме; НО-20 (510) рослин/мг).
На фіг. 50 представлене графічне зображення взаємозв'язку між СМ в ході наливання зерна (мм) і виходом зерна (г/м7) в чотирьох 54 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 51 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕ і виходом зерна в чотирьох 59 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 52 представлене графічне зображення взаємозв'язку між СМ в ході наливання зерна (мм) і розміром зерен (мг) в чотирьох 54 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м3).
На фіг. 53 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВЕК і розміром зерен в чотирьох 59 ОТІ і рекурентній батьківській рослині (КЕТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м3).
На фіг. 54 представлене графічне зображення взаємозв'язку між РРВК і СУМ в ході наливання зерна в різних лініях з точно картованим 51941 і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/мг).
На фіг. 55 представлене графічне зображення взаємозв'язку між СМ в ході наливання зерна (мм) і виходом зерна (г/м?) в різних лініях з точно картованим 5091 і рекурентній батьківській рослині (КТх7000), вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (0-10 рослин/м-; НО-20 рослин/м).
На фіг. 56А-С представлене графічне зображення результатів дослідження імітаційної моделі культури сорго з використанням генетичного сорту Вивзіег із звичайними 2 пагонами/рослиною (НТ) проти Визіег тільки з 1 пагоном/рослиною (ІТ) у віртуальних навколишніх умовах з хорошим доступом води (М/ЛЛ/) і в умовах термінального стресу (Т5). Для обох віртуальних навколишніх умов були вибрані наступні параметри: щільність посіву 5 рослин/м? з відстанню між рядами 1 м; глибина грунту-1800 мм; РАМУС грунту-324 мм; без обмежень М.
Зо На фіг. 57А представлене графічне зображення диференціальної експресії 5БРІМА (кандидат 51941) в умовах хорошого доступу води. У умовах хорошого доступу води цей ген приглушується в молодих кореневих кінчиках Тх642 і 591 МІГ. в порівнянні з Тх7000.
На фіг. 57В представлене графічне зображення диференціальної експресії 5БРІМА (кандидат за 5191) в умовах дефіциту води. У умови дефіциту води цей ген активується в більшості тканин, але особливо в зростаючому листі Тхб42 і 51941 МІЇ. в порівнянні з Тх7000.
На фіг 57С представлене графічне зображення диференціальної експресії 5БРІМ2 (кандидат за 51д2) в умовах хорошого доступу води. У умовах хорошого доступу води цей ген слабо активований в тканинах стебла і коріння Тхб42 і 591 МІЇ. в порівнянні з Тх7000.
На фіг 570 представлене графічне зображення диференціальної експресії ЗБРІМ2 (кандидат за 5192) в умовах дефіциту води. У умовах дефіциту води цей ген активується в більшості тканин Тхб642 і 591 МІГ. в порівнянні з Тх7000.
Докладний опис
Протягом даного опису, якщо контекст не вказує на інше, слово "містять" або його варіанти, такі як "містить" або що "містить" потрібно розуміти як такі, що передбачають включення вказаного елемента або цілого числа або стадії способу або групи елементів або цілих чисел або стадій способів, але не виключення якого-небудь іншого елемента або цілого числа або стадії способу або групи елементів або цілих чисел або стадій способу.
Як використовують в даній заявці, форма однини включає множинні аспекти, якщо контекст явно не вказує на інше. Таким чином, наприклад, вказівку на "локус" включать один локус, а
БО також два або більше локусів; вказівка на "ауксин" включає один ауксин, а також два або більше ауксинів; вказівка на "опис" включає один або декілька аспектів, представлених в описі. Аспекти, описані в даному описі, охоплюються терміном "винахід". Всі аспекти, представлені, описані або заявлені в даному описі, входять в об'єм винаходу.
У даному описі описані ОТ, асоційовані і сприяючі фенотипу підтримування зеленим в культурі, включаючи злакові рослини. ОТ. позначають загалом як 5іІдХ, де Х являє собою число від 1 і вище, відповідне генетичному локусу або області генетичних локусів на конкретній хромосомі в сільськогосподарській рослині. Підобласть позначають як БідХт, де т являє собою алфавітне позначення області в БІДХ. У даному описі описано, що модулювання експресії БІДХ у всіх або окремих тканинах рослини забезпечує фізіологічну і генетичну мережу, яка індукує 60 або забезпечує переключення використання води сільськогосподарською рослиною на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури або збільшення ефективності транспірації, тим самим, збільшуючи індекс урожаю (НІ) і вихід зерна в умовах обмеженого доступу води. "Експресія" 5ІДХ включає активацію або пригнічення рівнів експресії (тобто модулювання експресії) локусу, а також вибір поліморфного варіанта, який експресується на вищому або нижчому рівні або який кодує більш або менш активний продукт у всіх або окремих тканинах в рослині. Фенотип може забезпечувати сам локус, або його функціональний еквівалент, такий як кКДНК, що кодує той же білок, який кодується локусом.
ОТ ідентифікують локуси, що кодують білки РІМ. Білки РІМ являють собою ефлюксні переносники ауксину, які містять трансмембранні домени і, головним чином, локалізовані в плазматичних мембранах. Термін "РІМ" походить від "суцвіття в формі шпильки". РІМ для сорго являє собою "ЗБРІМ". У даному описі описаний РІМ із будь-якої рослини (наприклад, О5РІМ із рису). Геномне положення 5рРІМ із сорго описано в таблиці 1А.
У даному описі передбачений спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує білок РІМ або його функціональну гомолог або ортолог; або який модулює експресію власного білка РІМ; де рівень і місце експресії РІМ забезпечує фенотип підтримування зеленим, який включає, серед інших, архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури, що приводить до збільшеного індексу урожаю і виходу зерен в умовах обмеження доступу води.
Крім того, в даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує білок 5БРІМ сорго, вибраний із 5БВБРІМ1-560БРІМІ11, або еквівалент із іншої рослини, або який модулює експресію власного РІМ. Приклади РІМ включають 5БРІМА4 і ЗБРІМ2 ії інші 5БРІМ, наведені в таблиці ТА і їх еквіваленти в іншій рослині, а також РІМ, що має особливо бажану поліморфну зміну, яка, наприклад, забезпечує змінений профіль експресії у вигляді підвищених рівнів білка РІМ. Прикладами РІМ в інших рослинах є О5РІМ5, який відповідає 5БРІМА, і
О5РІМЗа, який відповідає 5БРІМ2.
Генетичний агент може являти собою локус або геномну область або їх функціональний еквівалент, такий як КДНК або фрагмент геномної ДНК. Альтернативно агент може модулювати експресію власного локусу РІМ в конкретній рослині. Під "введенням" мають на увазі введення шляхом рекомбінантного втручання, шляхом мутагенезу або схрещування з подальшою селекцією.
Без обмеження технології, описаної в даному описі, якою-небудь конкретною теорією або способом дії, модулювання експресії РІМ окремо або в комбінації з генетичною або фізіологічною мережею змінює архітектуру рослини, посилюючи або іншим чином забезпечуючи ефективне використання води. У одному аспекті модифікована архітектура являє собою модифіковану архітектуру листяного покриву рослини.
Термін "потомство" включає пряме потомство, а також віддалених родичів рослини, за умови, що вони стабільно експресують ознаку підтримування зеленим, внесений раніше в батьківську рослину.
Вказівка на "сільськогосподарську рослину" включає злакову рослину. Сільськогосподарська культура, передбачена в рамках винаходу, включає сорго, пшеницю, жито, кукурудзу, ячмінь, рис, абаку, люцерну, мигдаль, яблуко, спаржу, банан, квасолю, чорну смородину, кормові боби, канолу, кеш'ю, маніоку, горох баранячий, цитрус, кокос, каву, кукурудзу, бавовну, інжир, льон, виноград, земляний горіх, коноплі, кенаф, лаванду, манго, гриби, оливки, цибулю, горох, арахіс, грушу, просо, картоплю, рами, рапс, плевел, сою, полуницю, цукровий буряк, цукрову тростину, соняшник, солодку картоплю, колоказію, чай, тютюн, томат, тритикале, трюфель і ямс. У одному прикладі, механізми сорго стійкості до засухи використовують для забезпечення стійкість до засухи в сорго, а також в інших сільськогосподарських рослинах. У одному прикладі генетично модифікована рослина використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду. Локуси РІМ, що є в кожній з вказаних вище рослин називають "власними"
РІМ. У даному описі описана активація і пригнічення власного РІМ або селекція РІМ, що має конкретний профіль експресії. "Власний" РІМ являє собою локус РІМ в батьківській рослині до маніпулювання (рекомбінантні способи, мутагенез або схрещування).
Термін "стійкість до засухи" включає витримування засухи, адаптацію до засухи, стійкість бо при засусі, знижену чутливість до умов засухи, збільшену ефективність використання води, а також здатність змінювати використання води на використання води в період після цвітіння або збільшену засвоюваність води в ході росту культури, тим самим збільшуючи НІ, і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води. Рослини, що виявляють стійкість до засухи, описують як "адаптовані до засухи рослини" або "рослини, що виявляють знижену чутливість до умов обмеженого доступу води". У даному описі описано, що стійкість до засухи індукується, забезпечується або іншим способом асоційована з фенотипом підтримування зеленим.
Термін "генетично модифікований", відносно рослини, включає спочатку отриману генетично модифіковану рослину, а також нащадків, прямих або віддалених, які стабільно експресують ознаку підтримування зеленим. Таким чином, в даному описі описані як класичні способи схрещування для введення генетичного агента, тобто ОТІ підтримування зеленим або його функціонального еквівалента, такого як КДНК або геномний Фрагмент, або агента, який активує або пригнічує (тобто модулює) експресію ОТІ., або білка, який кодується ними, так і технологія генетичної інженерії. Остання охоплюється термінами "способи генетичної інженерії" і "рекомбінантні способи". Маркери, що визначають підтримку зеленим, також можна піддавати скринінгу в протоколах схрещування для моніторингу перенесення конкретних генетичних областей. Більш того, конкретну область підтримування зеленим генетично вбудовують рекомбінантними способами в клітину рослини або в калюс рослини і паросток регенерують. "Генетично модифікована" рослина включає батьківську рослину або будь-яких нащадків, а також будь-які продукти рослини, такі як зерно, насіння, матеріал розмноження, пилок і зародкові клітини. Крім того, локус РІМ може експресуватися в одній конкретній тканині рослини, але не експресується або його експресія знижена в іншій тканині. Більш того, рослину можна піддавати мутагенезу, такому як генетичний, радіоактивний або хімічний мутагенез, і можна відбирати мутантні рослини з РІМ, що мають бажаний фенотип.
Вказівка на "фенотип підтримування зеленим" включає характеристики, вибрані із збільшеної пластичності архітектури листяного покриву, зменшеного розміру листяного покриву, збільшеної біомаси на одиничну площу листя під час цвітіння, вищої ефективності транспірації, збільшеного використання води в ході наливання зерна, збільшеного водного режиму рослини в ході наливання зерна, зниженого співвідношення біомаси до:після цвітіння, уповільненого старіння, збільшення виходу зерна, вищого розміру зерен і зниженого вилягання.
Зо У даному описі передбачений спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує продукт, асоційований або сприяючий фенотипу підтримування зеленим, який включає переключення використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури, або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води, і де продукт вибраний з переліку, що складається з 5БРІМ1-11, включаючи 5рРІМА і БрРРІМ, і інші
ЗБРІМ, наведені в таблиці 14А, або їх еквівалента з іншої рослини, або який модулює експресію власного РІМ в рослині.
Таким чином, в даному описі описане використання генетичного матеріалу, що кодує РІМ, або генетичного матеріалу, який модулює рівні власного РІМ для сприяння фенотипу підтримування зеленим.
У даному описі передбачені генетично модифіковані рослини, які проявляють фенотип підтримування зеленим внаслідок генетичної модифікації, а також насіння, плоди, квітки і інший репродуктивний матеріал або інший матеріал розмноження. Також передбачені вихідний матеріал коріння або вихідний матеріал розмноження. Це основано на припущенні, що насіння, плоди, квітки, репродуктивний матеріал або матеріал розмноження проявляють або можуть переходити на фенотип підтримування зеленим, введений в кінцевого батька(ів).
Вказівка на "агент, який модулює рівні експресії РІМ," включає промотори, мікроРнНК, гени і хімічні сполуки, які сприяють збільшеній або зниженій експресії гена у всіх або окремих тканинах або збільшеній або зниженій активності продукту гена, а також кДНК і геномні фрагменти. Агент також може являти собою інтрон геномного гена, який є частиною генетичної мережі, для сприяння модулюванню експресії.
Білок РІМ забезпечує градієнт ауксину в клітинах і містить трансмембранний домен і, головним чином, локалізований на плазматичній мембрані. Білки РІМ є обмежуючими швидкість факторами транспорту ауксину і забезпечують векторний напрямок для потоків ауксину. У даному описі описано, що щонайменше один із 5ід1 або 51942 кодує білок РІМ. Вважають, що введення 5141 або 51942 де помо в рослину або підвищення модулювання або експресії власних 51 або 5192 сприяють вияву одного або декількох ознак або підознак, асоційованих з бо фенотипом підтримування зеленим.
Як указано вище, білки РіІМ являють собою ефлюксні переносники ауксину, які опосередковують полярний транспорт ауксину (РАТ) з клітини в клітину в протилежність транспорту ауксину через ксилему (Казпойе еї аї., Ріапі Сеї! 13:1683-1697, 2000; Ркіті еї аї.,
Ситепі Оріпіоп іп Ріапі Віоіоду 6:7-12, 2003). Термін "РІМ" походить від суцвіття в формі шпильки, яке розвивається в Агабідорвзі5, коли транспорт ауксину є дефектним. У даному описі передбачений 5БРІМпП із сорго, де п являє собою число від 1 до 11, а також РІМ із будь-якої іншої рослини.
Також в даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує білок, вибраний із переліку, що складається з 5ББРІМ1-11, такого як ББРІМА і 5ББРІМ2 або інші 5Б0РІМ, наведені в таблиці 1А, або їх еквівалента з іншої рослини, або яке модулює експресію власного РІМ в рослині.
У даному описі описано, що 5БРІМА і 5ББРІМ2 сорго є основними генами адаптації до засухи, спільно з іншими ЗОБРІМ, а також їх еквівалентами з інших рослин. Відмінності в передачі сигналу ауксину пояснюють все з множини фенотипів, що спостерігаються в рослинах з профілем експресії РІМ. Фенотипи, які проявляють рослини ЗБРІМА або 5БРІМ2, наприклад, пояснюються змінами ефлюксу ауксину і включають зниження кущіння, листків менших розмірів (як в довжину, так і в ширину), зниження маси листя і збільшення співвідношення корінь:пагін.
Фенотипи, які проявляють рослини 5БРІМА або 5БРІМ2, наприклад, також можуть бути пояснені непрямо (або як наслідок цих прямих ефектів) і включають збільшену доступність води під час цвітіння, вищу концентрацію М в листі під час цвітіння, збільшену транспірацію і біомасу на одиницю площі листя, вищу ефективність транспірації, збереження площі зеленого листя в ході наливання зерна, збільшений індекс урожаю, вищий вихід зерна, вищий розмір зерен і збільшену стійкість до вилягання. У даному описі передбачено, що еквіваленти 5БРІМА і БВРІМ2 і інші БОРІМ функціонують серед інших основних видів злаків і сільськогосподарських культур для підвищення адаптації до засухи по всьому світу, де доступність води обмежує ріст культури після цвітіння.
Відповідно до вказівок в даному описі, модулювання експресії РІМ, вибраного з 5БРІМ1-11,
Зо таких як ББРІМА (51941) і ЗБРІМ2 (5192), або їх еквівалента з іншої рослини у всіх або окремих тканинах забезпечує адаптацію до засухи прямо і непрямо, що в кінцевому результаті приводить до вищого виходу зерна, більшому розміру зерен, і стійкості до вилягання в умовах обмеженого доступу води.
У одному прикладі фенотип підтримування зеленим залучає присутність декількох білків, таких як два або більше за 5БРІМ1-11, таких як 5БРІМА і ББРІМ2.
У даному описі описаний спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду більш ефективно, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує два або більше РІМ або їх функціональну гомолог або ортолог, які асоційовані або сприяють фенотипу підтримування зеленим, який включає зміну використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури, або збільшення ефективності транспірації що приводить до збільшення індексу врожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води; або агента, який модулює рівні експресію двох або більше РІМ.
Під "двома або більше" мають на увазі 2 або 3, або 4, або 5, або 6, або 7, або 8, або 9, або 10, або 11. Одиничний або множинні локуси РІМ також можуть експресуватися або бути інгібованими.
У одному прикладі генетичний матеріал вибраний із (їі) агента, який кодує 5БРІМА; і (ії) агента, який модулює рівні експресії ББРІМ4 або його еквівалента в іншій рослині. У іншому прикладі генетичний матеріал вибраний із (ї) агента, який кодує ЗБРІМ2; і (ії) агента, який модулює експресію 5БРІМ2 або його еквівалента в іншій рослині.
Збільшена доступність води під час цвітіння в рослинах, що містять область 541, забезпечується зниженням використання води за допомогою двох механізмів (зниження кущіння і менший розмір листя). Виявилося, що обидва механізми окремо знижують розмір листяного покриву в середньому приблизно на 995. Механізм "низького кущіння" переважає в умовах низької щільності, коли потенціал до кущіння є високим. Механізм "невеликого розміру листя" переважає в оточуючих умовах високої щільності, коли потенціал до кущіння є низьким. У сукупності, ці механізми забезпечують сільськогосподарські рослини із значною пластичністю відносно модифікації архітектури листяного покриву у відповідь на складність обмеження води.
Підтримування зеленим збільшує пластичність архітектури листяного покриву за допомогою конститутивних і адаптивних відповідей. Розмір листяного покриву у випадку 5941 або 5192 знижується приблизно на 5595, навіть коли доступ води не обмежений (конститутивна відповідь).
Розмір листяного покриву далі знижується (адаптивна відповідь) при м'якій засусі (1095) і більш важкій засусі (415905). Низьке кущіння, головним чином, є конститутивною відповіддю. Невеликий розмір листя є як конститутивною, так і адаптивною відповіддю.
Більше того, в даному описі описано, що область 51941 або 51д2 забезпечує адаптацію до засухи шляхом зниження розміру листяного покриву (внаслідок зниження кущіння і меншого розміру листя) і зниження використання води культурою під час цвітіння. Це показано за допомогою високої кореляції (г2-0,9) між розміром листяного покриву і використанням води культурою в дослідженнях із штучною засухою (укриття від дощу ІКО5БІ) і в лізиметричних дослідженнях.
Збільшеної доступності води під час цвітіння також досягають за допомогою збільшення засвоюваності води (краще витягання води і більш глибоке і більш латеральне поширення).
Підтримування зеленим збільшує біомасу на одиницю площі листя під час цвітіння.
Передбачаючи, що маса коріння еквівалентна (або щонайменше трохи менше), ці відмінності могли б бути пояснені відмінностями в транспірації (ТУ на одиничну площу листя ІСАЇ (ТЛА) і або ефективність транспірації (ТЕ). Лізиметричні дослідження вказують на те, що збільшення
ТЛА, а не ТЕ, ініціюють спостережувані збільшення біомаси на площу листка. Потрібно зазначити, що збільшення Т/ А відбувалося, тільки коли дефіцит води був достатнім, щоб зменшити площу листя. Коли дефіцит води був менш важким (тобто недостатнім, щоб зменшити площу листя), тоді відбувалося зниження Т/Л А, що приводило до вищої ТЕ.
Вищу ТЕ в лініях 5ІДХ, таких як 5941 або 5д2, також спостерігають, коли дефіцит води є менш складним. Вважають, що збільшення ТЕ шляхом інтрогресії 5ІД1 або 51д2 є наслідком а) пропорціонально вищої здатності до фотосинтезу в порівнянні з продиховою провідністю, внаслідок меншого розміру, меншої товщини листя і більш зеленого листя, і/або р) зниження транспірації при збереженні біомаси. Лізиметричні дослідження вказують на те, що обидва з цих механізмів приводять до вищої ТЕ в лініях 591, причому основним механізмом є зниження транспірації.
Зо У даному описі вважають, що зміна транспірації на одиничну площу листя є наслідком а) кількості продихів, Б) розміру отвору продихів, с) зміни часу відкриття і закриття продихів відносно МРО, і/або а) кількості клітин основи волосків (яка впливає на пограничний шар і, таким чином, Т/ГА). Інтрогресія 5941, наприклад, в КТх7000 модифікувала анатомію листя шляхом збільшення кількості клітин обкладки судинних пучків, оточуючих судинний пучок.
Відмінності в морфології листя є очевидними між КТх7000 і 5ІД1 або 592. У цьому випадку, в 5ід1 або 51д2 обкладка судинних пучків, оточуюча судинний пучок, була більш представлена і була меншого розміру. Також було менше продихів і більше клітин основи волоска на одиничну площу листя (листя 7 і 10) в 5191 в порівнянні з КТх7000.
Збільшеного використання води в ході наливання зерна досягають шляхом (ї) збільшеної доступності води під час цвітіння і (ії) збільшеної засвоюваності води (краще витягання води і більш глибоке або більш латеральне поширення) в ході наливання зерна.
Використання води культурою (СУМ) до цвітіння негативно корелювало з СУМ після цвітіння в експерименті з штучною засухою (укриття від дощу ІКО5І). Наприклад, в одному експерименті 2595 збільшення використання води після цвітіння (80 проти 60 мм) приводило до 2595 збільшення виходу зерна (400 проти 300 г/м2). Це відповідало 50 кг/га зерна на кожний додатковий мм доступної води.
ЗІД1 або 5ід2 проявляли збільшене використання води в період наливання зерна в умовах як низької, так і високої щільності в експерименті з укриттям від дощу (КО5). Це було наслідком, головним чином, (ї) зниженого використання води під час цвітіння в умовах високої щільності, і (ії) збільшеної засвоюваності води в ході наливання зерна в умовах низької щільності.
У даному описі описано, що 5ІДХ, такий як 5941 або 5942, забезпечує адаптацію до засухи тим, що він асоційований з продукцією біомаси до і після цвітіння. Область 5941 або 51942, наприклад, знижує співвідношення біомаси до:спісля цвітіння нижче критичного рівня, збільшуючи вихід зерна і стійкість до вилягання.
Відповідно до вказівок даного опису, експресія 5ІДХ, такого як 5941, 5942, 5193 і/або 594, сприяє одному або декільком їх наступних фенотипів: () уповільнене старіння листя (підтримування зеленим), вищий вихід зерна і стійкість до вилягання є наслідком вищого водного режиму рослин в ході наливання зерна (внаслідок збільшеного використання води в ході наливання зерна);
(і) інтрогресія 5ІДХ, наприклад, в фон КТх7000 збільшує водний режим рослини при середньому наливанні зерна, як показано по а) вищому відносному вмісту води (КУМС), і Б) нижчому водному потенціалу листя (І МУР); (ії) вищий вихід зерна і більший розмір зерен є наслідком збільшеної доступності води в ході наливання зерна; (м) вищий вихід зерна, більший розмір зерен, і збільшена стійкість до вилягання не є взаємовиключними (тобто 5ІДХ виявляє всі три ознаки); (м) переваги виходу і розміру зерен є відносно вищими при важкій термінальній засусі, чому при м'якій термінальній засусі; (м) користь генів підтримування зеленим, наприклад, в фоні КТх7000 (інбредні рослини) виникає при діапазоні виходу 1-3 т/га (12-229б5), а потім з меншою, але ще істотною користю при діапазоні виходу 3-4 т/га (8-1095). Однак було невелике погіршення, асоційоване з цими областями (2-495) при вищих виходах (5-8 т/га) внаслідок більш вологих умов. Потрібно зазначити, що ці діапазони виходів були б значно вищими в гібридах. Оскільки середній вихід зерна в сорго для гібридів в північній зерновій зоні становить приблизно 2,5 т/га, користь генів підтримування зеленим повинна бути значною. У гібридах не спостерігали зниження виходу зерна в більш вологих умовах (без обмеження води) завдяки підтримуванню зеленим; (мі) інтрогресія 5БІДХ, наприклад, в КТх7/000 також збільшує розмір зерен на 1195, в середньому, при важкій термінальній засусі. Не було впливу 5ІДХ ОТІ на розмір зерен при м'якій термінальній засусі або без засухи; і (мії) кожний з ключових механізмів 5ІДХ картується в певній області, вказуючи на те, що дія одного гена має множину плейотропних ефектів.
Крім того, в даному описі описана комерційна модель для підвищення економічного прибутку від продукції культури. Відповідно до цих ідей, передбачається комерційна модель для підвищення економічного прибутку від виходу культури, причому модель включає отримання сільськогосподарських рослин, які мають профіль експресії РіІМ, що приводить до сільськогосподарської рослини, що має переключення використання води рослиною на використання води в період після цвітіння або збільшенням засвоюваності води в ході росту культури, тим самим збільшуючи НІ і вихід зерна в умовах обмеженого доступу води, отримання
Зо насіння від отриманої сільськогосподарської рослини і розподіл насіння виробникам зерна для досягнення збільшеного виходу і прибутку. Вказівка на РІМ включає 5БРІМ1-11 такі як 5БРІМА і
ЗрРІМ2, а також їх еквіваленти з інших рослин.
У даному описі описана система керування рослинництвом для зниження залежності культури від води або іншого підвищення ефективності використання води і збільшення виходу зерна або продукту. Система керування рослинництвом включає отримання адаптованої до засухи культури, яка включає злакові рослини, з використанням вибору і модульованої експресії локусу РІМ або його функціонального еквівалента, як визначено в даному описі, окремо або в комбінації з введенням інших корисних ознак, таких як розмір зерен, розмір коренів, стійкість до солі, стійкість до гербіцидів, стійкість до шкідників і т. п. Альтернативно або додатково, система керування рослинництвом включає отримання адаптованих до засухи рослин (і сільськогосподарським процедурам, таким як зрошування, вимоги до поживних речовин, щільності і геометрія насадження культури, боротьба з бур'янами, боротьба з комахами, аерація грунту, зменшення кущіння, підняття грядок і т. п.
У даному описі описано, як індукувати або посилювати здатність до адаптації до засухи в рослині шляхом внесення де помо одного або декількох ознак фенотипу підтримування зеленим або збільшення, або зниження експресії існуючого одного або декількох локусів РІМ в рослині іабо селекції поліморфного варіанта РІМ із збільшеною або посиленою експресією або активністю продукту. Маніпулювання фенотипом підтримування зеленим можна провести окремо або як частина інтегрованої системи керування рослинництвом, яка може включати подальшу селекцію ознаки і/або удосконалення агрономічних технологій. Отримані культури використовують воду більш ефективно і мають вищий вихід зерна і збільшений розмір зерен.
Ідеї даного винаходу включають комерційні моделі для збору насіння від адаптованих до засухи або посилених сільськогосподарських рослин для розподілу фахівцям з вирощування для збільшення в кінцевому результаті виходу зерна.
У даному описі передбачається використання генетичного агента, кодую-чого білок РІМ або модулюючого рівні експресії власного білка РІМ, для виробництва адаптованої до засухи рослини.
ОТІ. ідентифіковані в рамках даного винаходу як несучі один або декілька локусів РІМ, де селекцію рівня їх експресії проводять за допомогою протоколів схрещування або шляхом бо генетичної інженерії, для забезпечення фенотипу підтримування зеленим.
Також в даному описі описані генетично модифіковані рослини і їх нащадки, які виявляють ознаку підтримування зеленим, а також насіння, плоди, і квітки і інший репродуктивний матеріал або матеріал розмноження.
У рамках даного винаходу передбачені як генетичний матеріал, який кодує білок РІМ або його функціональну гомолог або оортолог, який асоційований або сприяє фенотипу підтримування зеленим, який включає архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури або збілошенню ефективності транспірації, які приводять до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води, так і агент, який модулює рівень РІМ.
У одному прикладі генетичний матеріал вибраний із (ї) агента, який кодує 5БРІМ, наведений в таблиці 14А; і (ії) агента, який модулює рівні експресії 5БРІМ, наведеного в таблиці 1А, або його еквівалента з іншої рослини.
У одному прикладі генетичний матеріал вибраний із (їі) агента, який кодує 5БРІМА; і (ії) агента, який модулює рівні експресії ББРІМ4 або його еквівалента з іншої рослини. У іншому прикладі генетичний матеріал вибраний з (ї) агента, який кодує 50БРІМ2; ії (її) агента, який модулює експресію 5БРІМ2 або його еквівалента з іншої рослини.
Генетичний матеріал включає агент, який кодує РІМ, або його функціональний гомолог або ортолог, який асоційований або сприяє фенотипу підтримування зеленим, який включає архітектуру листяного покриву, який сприяє переключенню використання води на використання води в період після цвітіння або збільшенню засвоюваності води в процесі росту культури або збільшенню ефективності транспірації, які приводять до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеження доступу води. Активний агент включає агент, який підвищує або знижує рівні РІМ. Гени, які розглядаються також можна використовувати як маркери для перенесення областей геномів, які включають один або декілька з генів або їх еквівалентів з інших рослин, в конкретну рослину для включення в нього фенотипу підтримування зеленим.
Приклади
Аспекти, описані і передбачені в даному описі, далі описані за допомогою наступних необмежуючих прикладів.
Приклад 1
Ідентифікація гена 5Ідх
Був ідентифікований локус кількісних ознак (ОТ), який позначають в даному описі як 51, що є прикладом 5ІДХ, який підвищує або посилює ефективність використання води рослинами сорго. 591 кодує представник сімейства компонента 4 переносників вихідного ауксину, РІМА (або 5рЕРІМА) із сорго зернового.
Цей основний ген адаптації до засухи був точно картований в геномі сорго. Зміни ефлюксу ауксину можуть пояснити всі з множини фенотипів, спостережуваних в рослинах, які містять
ЗБРІМ4. Ген-кандидат (і промоторну область) секвенують в двох батьківських рослинах популяції з точним картуванням (КТх7000 і Тхб42) для ідентифікації однонуклеотидного поліморфізму. Також проводять визначення профілю експресії РНК в популяції з точно картованим 5191 для підгруп ліній, моментів часу і органів. Фенотипи, що проявляються рослинами ББРІМ4, які можуть бути пояснені безпосередньо змінами ефлюксу ауксину, включають знижене кущіння, менший розмір листя (як в довжину, так і в ширину), знижену масу листя і збільшене співвідношення коріння:пагони. Фенотипи, що проявляються рослинами
ЗБРІМ4, які можуть бути пояснені непрямо (або як наслідки цих прямих ефектів), включають збільшену доступність води під час цвітіння, вищу концентрацію М під час цвітіння, збільшену транспірацію і біомасу на одиницю площі листка, знижене співвідношення біомаси до:після цвітіння, вищу ефективність транспірації, збереження площі зеленого листя в ході наливання зерна, збільшений індекс урожаю, вищий вихід зерна, більший розмір зерен і збільшену стійкість до вилягання. Передбачається, що ЗОРІМ4 функціонує серед інших основних злакових і сільськогосподарських видів, підвищуючи адаптацію до засухи по всьому світу, де доступ води обмежує ріст культури після цвітіння. 591 (ЗБРІМ4) забезпечує адаптацію до засухи як прямо, так і непрямо, що в кінцевому результаті приводить до вищого виходу зерна, більшого розміру зерен і стійкості до вилягання в умовах обмеженого доступу води.
Збільшена доступність води під час цвітіння в рослинах, які містять область 541, забезпечується зниженням використання води за допомогою двох механізмів (зниження кущіння і менший розмір листя). Виявилося, що обидва механізми окремо знижують розмір листяного покриву в середньому приблизно на 995. Механізм "низького кущіння" переважає в умовах бо низької щільності, коли потенціал до кущіння є високим. Механізм "невеликого розміру листя"
переважає в оточуючих умовах високої щільності, коли потенціал до кущіння є низьким. У сукупності, ці механізми забезпечують сільськогосподарські рослини із значною пластичністю відносно модифікації архітектури листяного покриву у відповідь на складність обмеження води.
Підтримування зеленим збільшує пластичність архітектури листяного покриву за допомогою конститутивних і адаптивних відповідей. Розмір листяного покриву у випадку 5941 або 592 знижується приблизно на 5595, навіть коли доступ води не обмежений (конститутивна відповідь).
Розмір листяного покриву далі знижується (адаптивна відповідь) при м'якій засусі (1095) і більш важкій засусі (41595). Низьке кущіння, головним чином, є конститутивною відповіддю. Невеликий розмір листя є як конститутивною, так і адаптивною відповіддю.
Існує зв'язок між зменшеним розміром листяного покриву (за допомогою зниженого кущіння і меншого розміру листя) і зниженим використанням води культури під час цвітіння. Існує висока кореляція (г2-0,9) між розміром листяного покриву і використанням води культурою в дослідженнях з КОЗ і лізиметричних дослідженнях.
Збільшеної доступності води під час цвітіння також досягають за допомогою збільшення засвоюваності води (краще витягання води і більш глибоке і більш латеральне поширення).
Підтримування зеленим збільшує біомасу на одиницю площі листя під час цвітіння.
Передбачаючи, що маса коренів еквівалентна (або щонайменше трохи менша), ці відмінності могли б бути пояснені відмінностями в транспірації на одиничну площу листя (Т/ЛА) і/або ефективність транспірації (ТЕ). Лізиметричні дослідження вказують на те, що збільшення Т/Л А, а не ТЕ, ініціює спостережувані збільшення біомаси на площу листка. Потрібно зазначити, що збільшення Т/Л А відбувалося тільки в умовах низького МРО; Т/ А була насправді знижена в умовах високого УРО, приблизно як механізм утримання води.
Вищу ТЕ в лініях 51 також спостерігали в умовах вищого МРО. Збільшення ТЕ шляхом інтрогресії 541 може бути наслідком а) пропорційно вищої здатності до фотосинтезу в порівнянні з продиховою провідністю, внаслідок меншого розміру, меншої товщини листя і більш зеленого листя, і/або Б) зниження транспірації при збереженні біомаси. Лізиметричні дослідження вказують на те, що обидва з цих механізмів приводять до вищої ТЕ в лініях 51, причому основним механізмом є зниження транспірації.
Зміна транспірації на одиничну площу листка може бути наслідком а) кількості продихів, Б)
Зо розміру отвору продихів, с) зміни часу відкриття і закриття продихів відносно УРО, і/або а) кількості клітин основи волосків (яке впливає на пограничний шар і, таким чином, Т/ А).
Інтрогресія 541 в КТх7000 знижувала кількість продихів і збільшувала кількість клітин основи волосків на одиницю площі листка в листках 7 і 10; причому обидва механізми можуть зберігати воду шляхом зниження ТЛ А.
Інтрогресія 591, наприклад, в ЕТх7000 модифікувала анатомію листя шляхом збільшення кількості клітин обкладки судинних пучків, оточуючих судинний пучок. Збільшена кількість клітин в обкладці судинних пучків також може приводити до збільшеної фотосинетичної асиміляції і, таким чином, ТЕ.
Відмінності в морфології листя (наприклад, листя 7 і 10) є очевидними між КТх7000 і 591. У цьому випадку, в 591 обкладка судинних пучків, оточуюча судинний пучок, була більш представлена і була меншого розміру. Збільшена кількість клітин в обкладці судинних пучків також може приводити до збільшеної фотосинетичної асиміляції і, таким чином, ТЕ.
Збільшеного використання води в ході наливання зерна досягають шляхом (ї) збільшеної доступності води під час цвітіння і (ії) збільшеної засвоюваності води (краще витягання води і більш глибоке або більше латеральне поширення) в ході наливання зерна. а) Збільшена доступність води під час цвітіння
Використання води культурою (СУМ) до цвітіння негативно корелювало з СУМ після цвітіння в експерименті з КОБ5. Наприклад в одному експерименті 2595 збільшення використання води після цвітіння (80 проти 60 мм) приводило до 2595 збільшення виходу зерна (400 проти 300 г/м). Це відповідало 50 кг/га зерна на кожний додатковий мм доступної води. р) Збільшена засвоюваність води в процесі наливання зерна
Рослини з 591 проявляли збільшене використання води в ході періоду наливання зерна в умовах як низької, так і високої щільності в експерименті з КО5. Це було наслідком, головним чином, (ї) зниженого використання води під час цвітіння при високій щільності, і (ії) збільшеній засвоюваності води в ході наливання зерна при низькій щільності.
Область 5191 забезпечує адаптацію до засухи через зв'язок між продукцією біомаси до і після цвітіння. Область 5191 знижує співвідношення біомаси до:після цвітіння нижче критичного рівня, збільшуючи вихід зерна і стійкість до вилягання.
Наслідком вищого водного режиму рослини в ході наливання зерна (внаслідок збільшеного використання води в ході наливання зерна) є уповільнене старіння листя (підтримування зеленим), вищий вихід зерна і стійкість до вилягання.
Інтрогресія 5941 в фон КТх7000 збільшувала водний режим рослини при середньому наливанні зерна, як показано по а) вищому відносному вмісту води (КУУС), і Б) нижчому водному потенціалу листя (МУР).
Вищий вихід зерна і більший розмір зерен є наслідком збільшеної доступності води в ході наливання зерна.
Вищий вихід зерна, більший розмір зерен і збільшена стійкість до вилягання не є взаємовиключними (тобто 591 проявляє всі три ознаки).
Переваги виходу і розміру зерен є відносно вищими при важкій термінальній засусі, ніж при м'якій термінальній засусі.
Дослідження вказують на те, що найбільша користь генів підтримування зеленим, наприклад, в фоні КТх7000 (інбредні рослини) виникає при діапазоні виходу 1-3 т/га (12-2295), а потім з меншою, але ще істотною користю при діапазоні виходу 3-4 т/га (8-1095). Однак було невелике погіршення, асоційоване з цими областями (2-495), при вищих виходах (5-8 т/га) внаслідок більш вологих умов. Потрібно зазначити, що ці діапазони виходів були б значно вищими в гібридах. Оскільки середній вихід зерна в сорго для гібридів в північній зерновій зоні становить приблизно 2,5 т/га, користь генів підтримування зеленим повинна бути значною. У гіоридах не спостерігали зниження виходу зерна в більш вологих умовах (без обмеження води) завдяки підтримуванню зеленим.
Інтрогресія 5941 в КТх7000 також збільшує розмір зерна, в середньому, на 1195 при важкій термінальній засусі. Не було впливу цього ОТІ. на розмір зерен при м'якій термінальній засусі або без засухи.
Кожний з ключових механізмів 591 картується в одній і тій же області, вказуючи на те, що дія одного гена має множину плейотропних ефектів.
Приклад 2
Зниження кущіння (фізіологічні дослідження МІГ. в полі)
Дані показують вплив 5191 на кущіння в умовах як високого доступу води (НМ), так і
Зо низького доступу води (М). Відмінності в розвитку листяного покриву до цвітіння здебільшого були наслідком варіювання кущіння серед ліній. Кількість стебел на м: під час цвітіння була найкращим загальним показником ефекту кущіння на динаміку листяного покриву. Кількість стебел на м? була еквівалентною при обох водних режимах (12,89), вказуючи на те, що зниження кущіння є конститутивною ознакою. Генотипи варіювали значно (Р«е0,001) по цьому параметру, знаходячись в діапазоні від 8,59 до 16,67. Однак генотип і умови не взаємодіяли значно по цьому параметру.
Кількість стебел на м: аналізували відносно їх статусу 519 і середні значення для категорій представлені в таблиці 1. АТх7000 утворювало на 4195 більше (Р«0,05) стебел/м-, ніж В35 (14,07 проти 10,00). Інтрогресія області 5941 окремо в КТх7000 (6078-1) значно зменшувала кількість стебел/м2 (Р«0,05) в порівнянні з КТх7000 (9,40 проти 14,07). У порівнянні з 591 тільки, додаткові інтрогресії або 51ід2, або 51944, збільшували кількості стебел до 10,49 (комбінація 1,2) і 10,74 (комбінація 1,4). Потрібно зазначити, що три близьких ізолінії, що не містили областей 519 (2212-3, 2235-11 і 6120-16) також проявляли високе кущіння, еквівалентне Тх7000. Таким чином, загальне ранжування кущіння в цих лініях являє собою зщд1-835«:5144«5192«5ІдДЗ«немає«КТх7000.
Під час цвітіння кількість стебел високо корелювала (г2-0,71) із загальною площею зеленого листя (СІ АА; фіг. 1).
Таблиця 1 пиши о Область5ії |: / пиши пиши
І І50О(005) | | 406
Кількість стебел на м? в рекурентній батьківській рослині (КТх7000) і різних лініях, що містять інтрогресії 5ІЧ41 ОТІ,, як окремо, так і в комбінації з іншим ЗІ ОСТІ.
Відмінності в площі зеленого листя під час цвітіння (Сі АА), головним чином, були наслідком відмінностей в їх площі зеленого листя пагонів під час цвітіння (СГААЇ), оскільки ОГГААЇ високо корелювала з СІ АА (1--0,78), в той час як площу листя основного стебла не корелювала.
Площу зеленого листя пагонів під час цвітіння аналізували відносно статусу 519 і середні значення по категоріях представлені в таблиці 2. В ЕТх7000 СІ ААї була практично у вісім разів більше (Р«0,05), ніж в В35 (15460 проти 1980). Інтрогресія області 5941 окремо в КТх7000 (6078- 1) значно знижувала СІ ААЇ (Р«0,05) в порівнянні з КТх7000 (3121 проти 15460). У порівнянні з 51 окремо, додаткові інтрогресії або 5192, або 5194, збільшували СІ ААїЇ до 4187 (комбінація 1,2) ії 4797 (комбінація 1,4). Всі лінії, що містили 591 (в будь-якій комбінації) не відрізнялися значно (Р«0,05) по СІ ААЇ від 5941 окремо. Потрібно зазначити, що С ААЇ в трьох близьких ізолініях, що не містили областей ід (2212-3, 2235-11 і 6120-16) не значно відрізнялася від
ЕТх7000. Таким чином, ранжування по значно відмінній (Р«0,05) СІ ААЇ в цих лініях являє собою в35-5191-51д4«5142-5ІДЗ«немає-КкТх7000.
Таблиця 2 пагонів пи НИ зай цвітіння 11111711 смуму областья!! 331 0 пиши пиши і 50(0,05) | - | Баба
Площа зеленого листя пагонів під час цвітіння в рекурентній батьківській рослині (КТх7000) і різних лініях, що містять інтрогресії 291 ОТ, як окремо, так і в комбінації з іншими 519 ОТ.
Площа зеленого листя і стебел на м: під час цвітіння високо корелювала в умовах високої (НО) і низької (І.О) щільності в експерименті з укриттям від дощу (фіг. 2). Інтрогресія областей 51 або 5щ41а в ЕТх7000 знижувала кількість стебел на м: і СІ АА при обох щільностях.
Приклад З
Зниження кущіння (дослідження з точним картуванням)
Популяцію з точно картованим 5191 вирощували в полі в умовах високої і низької щільності протягом трьох послідовних років. Кількість стебел на рослину вимірювали під час цвітіння кожний рік і був проведений комбінований аналіз для цих років. У загальному КТх7000 продукувало на 4795 більше стебел на рослину, ніж 6078-1 (1,85 проти 1,26; фіг. 3).
Зо У цих дослідженнях в полі картували ознаку (кількість стебел на рослину). Довільна величина 1,54 стебел на рослину забезпечила оптимальне розділення між високим і низьким кущінням для цілей картування (тобто рекомбінантні рослини з менше ніж 1,54 стебел мали генотипи ВВ, в той час як рекомбінантні рослини з більше ніж 1,54 стебел мали генотипи ТТ).
Покрокове вивчення маркерів виявило, що набуття функції (низьке кущіння) досягалося в трьох генотипах (10564-2, 10704-1 і 10620-4). Одна рекомбінантна рослина (10568-2) проявляла фенотип високого кущіння, в той час як три інших (10620-4, 10704-1 ї 10564-2) проявляли фенотипи низького кущіння. Ген компонента 5 ефлюксного переносника ауксину був запропонований як ген-кандидат.
Приклад 4
Зменшення кущіння (дослідження з точно картованим 5191 в КО5)
Підгрупу рослин популяції з точно картованим 51941 вирощували в полі з укриттям від дощу (КО5) в умовах високого і низького доступу води, причому кожні умови доступу води поділяли на високу і низьку щільність. Це забезпечило чотири водних режими із зростаючими рівнями дефіциту води: НМЛО (найменший дефіцит):НУУнНОсІ УМ О«І М/НО (найбільший дефіцит).
Кількість стебел на рослину вимірювали на 44 добу після появи на поверхні на кожній ділянці землі. Відмінності були найбільш очевидними в умовах низької щільності (103, оскільки проявлення кущіння максимізоване в цих умовах. У середньому, КТх7000, 10568-2 і 10709-5 продукували на 2795 більше стебел на рослину, ніж 6078-1 і 10604-5 в умовах ЛУМО (2,05 проти 1,62; фіг. 4), і на 2395 більше стебел в умовах НУМІО (1,49 проти 1,22).
Приклад 5
Зменшення кущіння (дослідження з точно картованим 5191 під захисним куполом)
Три додаткових дослідження з точним картуванням було проведено на популяції 591 в контрольованих умовах, під захисним куполом. У цих дослідженнях кущіння аналізували більш детально в порівнянні з попередніми дослідженнями в полі. Підраховували загальну кількість пагонів і, більш конкретно, кількість пагонів від пазухи листя 2 (12), З (Т3) і 4 (Т4). Присутність або відсутність Т2 було найкращим індикатором загального потенціалу до кущіння для даної рекомбінантної рослини. Т2 також було найкращою ознакою для застосування з метою точного картування гена.
У цьому експерименті загальна кількість пагонів являла собою суму 12, ТЗ і Т4, де Т2 являв собою пагін від пазухи листка 2 (і т. д. для ТЗ і Т4), включаючи повторні пагони. У цьому дослідженні спостерігали значне генотипічне варіювання для всіх із ознак, пов'язаних з кущінням (таблиця 34), з спадковістю, головним чином, вище 30.
Таблиця 3 х - В я в. я
Е - 8. а 5 - Еш ши ни и ШИ й Бех я сі г НГ їх
Кущіння
Шегто тах 2.151 001 0658 0557 376559 0081 шва ООНа ргезепсе Т2 0408 0000 0204 0316 110.676 0.038 ем З) ргезепсе ТЗ 0901 щоб 0.080 0183 31.51 0.007 ОІД ргевепсе 14 0,831 о5 0132 0237 43787 0004 10 851 діеаї Т 1858 во о.880 0.6558 56.558 0117 ІО. вет, о ви 0003 1 0226 0332 59,334 0.027 вхо кеви не
Бо т 2442 0002 2.006 0386 58.005 0242 М ХИАІКЮ..
Ві. А Т тай 50.259 оно 39.356 4.716 12482 4510 ВІВ
У таблиці З представлене узагальнення передбачених середніх значень, значення Р і спадковості ознак кущіння, виміряних в урожаї 11. Значущі відмінності (Р«е0,05) виділені жовтим кольором, в той час як спадковість 220 виділена зеленим.
Окремий аналіз даних 12, ТЗ і ТА виявив, що 6078-1 не продукувало пагонів Т2 ні в одному з чотирьох повторень дослідження, в той час як КТх/000 продукувало пагони Т2 в 2 із 4 повторень дослідження (фіг. 5).
Відмінності були також очевидними в кількостях Т3. 6078-1 продукувало пагін ТЗ в 1 із 4 повторень дослідження, в той час як КТх7000 продукувало пагін ТЗ у всіх 4 повтореннях дослідження (фіг. б).
Зо Кількості пагонів Т4 також варіювали серед генотипів. 6078-1 продукувало пагін ТА в З із 4 повторень дослідження, в той час як КТх7000 продукувало ТА у всіх із 4 повторень дослідження.
Таким чином, інтрогресія 5941 по суті перешкоджала зростанню пагонів Т2 і ТЗ в фоні КТх7000.
Лінії, які продукували пагін Т2 в 0-2 повтореннях дослідження (група низького кущіння; 8 рекомбінантних рослин), відділяли від ліній, які продукували пагін Т2 в 3-4 повтореннях (група високого кущіння; 8 рекомбінантних рослин) (таблиця 4, фіг. 7|.
Таблиця 4 . . максимальна (11) (11) і пагонів (1.11)
У таблиці 4 показана наявність пагонів (Т1-Т13) і загальна кількість пагонів для восьми рекомбінантних рослин з високим кущінням (перші вісім рядків) і восьми рекомбінантних рослин з низьким кущінням (інші вісім рядків) із популяції з точно картованим 5191.
Набуття функції (низьке кущіння) досягається в рекомбінантній рослині 10604-1-157-5.
Набуття функції (низьке кущіння) також досягається в трьох рекомбінантних рослинах (10604-1- 195-5, 10604-1-56-7, 10604-1-477-4).
У цьому експерименті використовували підгрупу ліній для підтвердження області кущіння.
Використовували більше повторень на рекомбінантну рослину (20) для подальшого зниження дисперсії помилок і збільшення потужності розрізнення серед ліній. Результати показали наявність гена ефлюксного переносника ауксину.
Для подальшого точкового встановлення гена низького кущіння проводили аналіз точки перегину для ліній, які, відповідно до їх генотипу (ВВ або ТТ), "активувалися" або "пригнічувалися" в області, яка являє інтерес. Був очевидний чіткий перегин, який розділяє лінії, які продукували загальну кількість пагонів »2,5 (група високого кущіння; 5 рекомбінантних рослин) і рослини, які продукували загальну кількість пагонів «2,5 (група низького кущіння; З рекомбінантних рослини) (таблиця 5, фіг. 81.
Таблиця 5
Загальна пагонів 10604-1-502-11-2 | 000 | 0079| 000 | 00 | 000 | 00 | 279 ло604-1-110-2. | ол |067| 000 | 00 | 000 | 00 | 272 10604-1-359-3. | 005 |063| 000 | 700 | 005 | ї00 | 268 10604-1-318-1,.. | 006 |0,59| 000 | 700 | 000 | 00 | 265 10604-1-502-142-1 | 000 | 0058| 000 | 00 | 000 | 00 | 258 1о604-4-8-1..юЙ.Й | 000 |0053| 000 | 700 | 000 | 00 | 242 10604-1-157-5 | 000 |047| 000 | 700 | 000 | 095 | 242 10604-ї-222-1. | 000 |045| 000 | т00 | 000 | 00 | 240
У таблиці 5 представлена наявність пагонів (Т1-14), включаючи повторні пагони, і загальну кількість пагонів для п'яти рекомбінантних рослин з високим кущінням (перші п'ять рядків) і трьох рекомбінантних рослин з низьким кущінням (інші три рядки) з популяції 3 точно картованим 5191.
Набуття функції (низьке кущіння) досягається в рекомбінантній рослині 10604-1-157-5. Ген
РІМА4 в сорго зерновому (який позначається в даному описі як "ЗБРІМА"), таким чином, є переконливим кандидатом на роль гена низького кущіння 5191.
Приклад 6
Менший розмір листя
Загалом, інтрогресія області 51941 в ЕТх7000 знижувала розмір листя (довжину і ширину) в умовах хорошого доступу води і в умовах обмеження доступу води, що вказує на конститутивну дію гена. Однак зменшення розміру листя, головним чином, було вищим в умовах обмеженого доступу води, що вказує, в деякому ступені, на адаптивну (індуцибельну відповідь) в доповнення до конститутивної відповіді. Таким чином, 591 забезпечує два механізми зниження розміру листяного покриву: а) зниження кущіння і 5) зниження розміру листя. У сукупності, ці два механізми забезпечують достатній ступінь пластичності для рослини, щоб модифікувати архітектуру рослини у відповідь на фактори навколишнього середовища і/або керування рослинництвом.
Серія лізиметричних досліджень є особливо інформативною при оцінці профілів розміру листя при варіюючих рівнях дефіциту тиску пари (МРО) (фіг. 9А-0). Хоча горщики регулярно зрошували в обох експериментах, розмір листяного покриву відрізнявся серед сезонів, приблизно внаслідок сезонних відмінностей в температурі і МРО, що забезпечує умови високого (1,8 кПа) і низького (1,3 кПа) МРО. Для головного стебла і найбільшого пагона (Т3), зменшення розміру листя було значущим в умовах високого і низького МРО (фіг. 9А-Ю), хоча зменшення починалося пізніше при низькому МРО в порівнянні з високим МРО в головному стеблі (112 проти 1/9) і ТЗ (17 проти І 5).
Однак для інших пагонів (14-16), розподіл розміру листя значно відрізнявся серед експериментів. У той час, як не було відмінностей в розмірі листя між ЕТх7000 і 6078-1 при високому УРО, листки 6078-1 були значно меншими при низькому УРО. Це вказує на адаптивну (індуцибельну) відповідь зниження розміру листя при певних умовах навколишнього середовища для пагонів Т4-16.
Таким чином, при низькому дефіциті води інтрогресія 5941 в КТх7000 приводила до меншого розміру листя в головному стеблі і найбільшому пагоні (Т3), але не в Т4-Т6. Ця відповідь може
Зо забезпечувати максимізацію уловлювання світла рослиною в пізніх пагонах, коли умови є сприятливими. При високому дефіциті води інтрогресія 51941 в КТх7000 приводила до меншого розміру листя у всіх пагонах. Ця відповідь забезпечила б значне зниження розміру листяного покриву рослини в умовах обмеженого доступу води.
Приклад 7
Менший розмір листя (дослідження з укриттям від дощу)
Проводили експерименти з укриттям від дощу (КО) для оцінки впливу області 5941 при двох щільностях культури, тим самим створюючи два рівні дефіциту води (висока щільність - високий дефіцит; низька щільність - низький дефіцит). Як правило, кущіння було низьким або було відсутнім при НО (20 рослин/м3) і було нормальним при ГО (10 рослин/м3).
Розмір листяного покриву був меншим обидва роки в умовах високої щільності (НО), що відображає вищий дефіцит води, що забезпечується цими умовами. Обидва роки при більш м'якому (СО) і більш важкому (НО) дефіциті води розмір листя, головним чином, був меншим в 6078-1 (5941) в порівнянні з КТх7000. Виключенням був випадок, коли профіль розподілу розміру листя був схожим для 6078-1 і КТх7000 при більш м'якому дефіциті води (І.О), і в той же час листки були значно меншими в 6078-1 (менше на аж до 1895) при вищому дефіциті води (НО), що вказує на адаптивну відповідь рослин 5941 на збільшення дефіциту води. Насправді, інтрогресія області 5941 в КТх7000 зменшувала розмір чотирьох найбільших листків 110-113) в середньому на 16,595 при більш важкому дефіциті води (НО). Оскільки відбувалося невелике кущіння при кожному генотипі в цих умовах, зменшення розміру листя в 6078-1 повинне було значно зменшити розмір листяного покриву і, таким чином, використання води культурою (передбачаючи схожу транспірацію на одиницю площі листка).
Потрібно зазначити, що механізм зменшення розміру листя, асоційований з 51941, мабуть, діє як в присутності (СО), так і у відсутність кущіння (НО), однак, мабуть, найкращим чином проявляється при НО, де є одиничне стебло і умови високого дефіциту води.
Приклад 8
Менший розмір листя (дослідження з точно картованим 5191 з укриттям від дощу)
Підгрупу рослин популяції з точно картованим 5191 вирощували в полі з укриттям від дощу (КО5) в умовах високого і низького доступу води, причому кожні умови доступу води поділяли на високу і низьку щільність. Це забезпечило чотири водних режими із зростаючими рівнями бо дефіциту води: НУМ'Ю (найменший дефіцит) «НУУНО«І УМ О«І МУНО (найбільший дефіцит).
Площу кожного листка, що повністю виріс, на головному стеблі вимірювали для всіх генотипів при всіх умовах.
Інтрогресія цілої області 5941 (6078-1) і, більш конкретно, меншої області, що позначається 10604-5, приводила до зменшення розміру листя 9-13 в умовах низького доступу води і високої щільності (фіг. 10). Наприклад, в порівнянні з КТх7000, І 11 були на 995 і 1695 менше в 10604-5 і 6078-1, відповідно. Оскільки кущіння було неістотним в цих умовах, відмінності в розмірі листяного покриву були по суті наслідком відмінностей в розмірі листя.
В умовах низької щільності на розподіл розміру листя впливало кущіння, що приводило до деякого перекривання в порівнянні з умовами високої щільності (див. фіг. 10). Однак потрібно зазначити, що 10604-5 продукувало листя менших розмірів 9 відносно 10709-5, 10568-2 і
КТхХ7000 в умовах як НО, такі ГО.
Як ген-кандидат для гена "малого розміру листя" картований ген компонента 5 ефлюксного переносника ауксину.
Приклад 9
Менший розмір листя (дослідження з точним картуванням під захисним куполом)
Площа листя значно варіювала (Р«е0,001) серед генотипів із спадковістю, яка досягає 60 для листків 4 і 5. Інтрогресія області 541 в КТх7000 знижувала площу листків 1-6 (фіг. 16).
Наприклад, площа 1 6 була на 2295 більше в ЕТх7000 (67,4 см), ніж в 6078-1 (55,3 см"), хоча ця відмінність не була значущою при рівні Р-0,05. Площа 16 знаходилася в діапазоні від 47,8 см? до 93,9 см? (1.50 10,051-221) із спадковістю 42.
Відмінності в площі листків були наслідком в більшому ступені відмінностей в довжині листків (фіг. 17), ніж в ширині листків (фіг. 13). У той час як площа листків зростала експоненціально із збільшенням кількості листків (фіг. 16), довжина листків зростала лінійно (фіг. 12). Взаємозв'язок між шириною листка і кількістю листків був параболічний (фіг. 13). Таким чином, розходження в площі листків між 6078-1 і ЕТх7000 із збільшенням кількості листків було, головним чином, наслідком розходження в довжині листків між цими генотипами. Це вказує на те, що функція генів, що зменшують розмір листків, більш ймовірно, асоційована з ростом клітин (довжина листка), ніж з поділом (ширина листка).
Алометричний взаємозв'язок в популяції з точно картованим 51941 між площею листка (п) і
Зо площею листка (пя1) вказує на значну зміну приблизно у листка 8 (одночасно з початком цвітіння). Після цього збільшення розміру листків відбувалося з меншою швидкістю.
Інтрогресія області 5941 в КТх7000 знижувала площу листків 9-11 (фіг. 14), а також листків 1-6 (розглянуто вище). Площа 19 значно варіювала (Р-0,06) серед генотипів, знаходячись в діапазоні від 234 до 300 см, із спадковістю 21 (таблиця 6). Площа Г9 була на 895 вище в
ЕТх7000 (263 см), ніж в 6078-1 (244 см) |фіг. 14). Схожі тенденції були очевидними для листків 10 ї 11. їй ш Таблиця 6 с о . ж Ка
Е я З й - в. -Е й БВ Я - г ШЕ:
Розмір лястя мини го
ІВ СІА 54122 88.256 10874 17358 23255 7 ТА 103457 0317 213237 14083 34156 153447 ШОН? И 18 БА 178459 0179 535125 19265 12982 7853 5.31 19 ПІА 286.844 673230 18676 09724 АБ
МО ОА 342758 0506 1029389 9.381 397 0455 111 біА 383.550 0.374 848.058 7.582 За98 1440
Мі пу 1855 0592 0.058 12.372 900 по0а
Зм 18 1 5оов3 ГЛООЗЙ 17372 З073 8.22 0956 18.041
У таблиці 6 узагальнено представлені середні значення, значення Р і спадковість для ознак розміру листків, виміряних в урожаї 1 11. Значні відмінності (Р«е0,05) виділені жовтим кольором, в той час як спадковість 220 виділена зеленим кольором. СГ А - площа зеленого листя. ОУМ - маса сухої речовини. ЗІ МУ 19 111 - питома маса листя.
Найбільше варіювання площі зеленого листя в урожаї листків 11 було наслідком відмінностей в кущінні. Однак листки 9-11 були менше у 6078-1 в порівнянні з КТх7000. Ці відмінності були значущими (Ре0,05). Потрібно зазначити, що як "низьке кущіння", так і "малий розмір листя" були асоційовані з однією і тією ж областю, що вказує на можливість того, що один ген контролює обидві ознаки архітектури листяного покриву.
Приклад 10
Листки менших розмірів (дослідження з точним картуванням під захисним куполом)
Кількість і довжина листків лінійно корелювали для батьківських рослин популяції з точно картованим 591 (фіг. 15). Інтрогресія 51941 в КТх7000 привела до зниження довжини листків 8- 10, причому І-10 на 795 коротше в 6078-1, ніж КТх7000 (550 проти 592 мм).
Для цілей картування відбирали "тих, що відхиляються представників" популяції з точно картованим 5191. Два генотипи проявляли особливо довгі листки (10604-1-157-5 і 10604-1-318- 1) ї три генотипи проявляли особливо короткі листки (10604-1-222-1, 10604-1-501-327-3 і 6078- 1).
Набуття функції (короткі листки) досягалося рекомбінантною рослиною 10604-1-222-1. Ген "малого розміру листя" приблизно картується в тій же області, що і ген "низького кущіння".
Для цілей картування відбирали "тих, що відхиляються представників" популяції з точно картованим 51091 (фіг. 16). Три генотипи проявляли особливо довгі листки (10604-1-157-5, 10604-1-318-1 ії КТх7000) і два генотипи проявляли особливо короткі листки (10604-1-222-1 і 6078-1).
При покроковому дослідженні маркерів набуття функції (короткі листки) досягалося в рекомбінантній рослині 10604-1-222-1. Таким чином, знову ген "малого розміру листя" картується в тій же області, що і ген "низького кущіння". Потрібно зазначити, що довжина листків в19 і 110 картується в тій же області.
Поясненням цьому є один ген з множиною плейотропних ефектів. Збільшена доступність ауксину може пояснити як фенотип низького кущіння, так і фенотип малого розміру листя, які спостерігаються в рослинах, що містять цю область. Ген компонента 5 ефлюксного переносника ауксину розташований в заданій області і, таким чином, ідентифікований як кандидат.
Приклад 11
Зо Підтримування зеленим підвищує пластичність архітектури листяного покриву за допомогою конститутивної і адаптивної відповідей
Збільшений доступ води під час цвітіння досягається шляхом зниження використання води за допомогою двох механізмів (зниження кущіння і менший розмір листя) в рослинах, які містять область 51941, фіг. 17). Обидва механізми окремо, очевидно, зменшують розмір листяного покриву в середньому приблизно на 995. Механізм "низького кущіння" домінує в оточуючих умовах низької щільності, коли потенціал до кущіння є високим. Механізм "малого розміру листя" переважає в умовах високої щільності, коли потенціал до кущіння є низьким. У сукупності, ці два механізми забезпечують сільськогосподарські рослини із значною пластичністю для модифікації архітектури листяного покриву у відповідь на складність обмеження води.
Підтримування зеленим проявляє як конститутивні, так і адаптивні відповіді (фіг. 18). Розмір листяного покриву в 5Ід1 знижений приблизно на 595, навіть коли доступ води не обмежений (конститутивна відповідь). Розмір листяного покриву далі знижується (адаптивна відповідь) при м'якій засусі (-1095) і більш важкій засусі (х1595). Низьке кущіння, головним чином, є конститутивною відповіддю, хоча менший розмір листя у пагонах у відповідь на збільшення дефіциту води є адаптивною відповіддю. Малий розмір листя є як конститутивною, так і адаптивною відповіддю.
Приклад 12
Зв'язок між зменшеним розміром листяного покриву (шляхом зниження гілкування і меншого розміру листя) і зниженням використання води культурою під час цвітіння
Зниження використання культурою води під час цвітіння може бути викликане а) меншим розміром листяного покриву з еквівалентною транспірацією на одиницю площі листка, б) еквівалентним розміром листяного покриву з нижчою транспірацією на одиницю площі листка, або с) меншим розміром листяного покриву і нижчою транспірацією на одиницю площі листка.
КОЗ і лізиметричні дослідження вказують на те, що в умовах високого дефіциту води, область 5941, і, зокрема, рекомбінантна рослина, яка містить ген-кандидат 541 (10604-5), проявляли нижче використання води культурою внаслідок меншого розміру листяного покриву, а не нижчої транспірації на одиницю площі листка. Спостерігали високу кореляцію (г2-0,9) між розміром листяного покриву і використанням води культурою в дослідженнях з КОЗ і в лізиметричних 60 дослідженнях.
(а) Економія води внаслідок меншого розміру листя
Кущіння було незначним в цьому експерименті внаслідок високої щільності культури. Таким чином, відмінності в розмірі листяного покриву були наслідком відмінностей в розмірі листя (фіг. 20), на що вказує висока кореляція між розміром листка 12 і загальною площею зеленого листя під час цвітіння (фіг. 21).
У свою чергу, площа зеленого листя під час цвітіння високо корелювала з використанням води культурою під час цвітіння (фіг. 22). Відносно ЕТх7000 обидві з двох ліній, які містили ген- кандидат 51941 (6078-1 і 10604-5), мали менший розмір листя (І10-І13), нижчу площу зеленого листя під час цвітіння (СІ АА) і нижчим використанням води культурою під час цвітіння. (Б) Економія води внаслідок зменшеної транспірації на одиницю площі листка (лізиметричні дослідження)
Транспірація (Т) є результатом добутку площі листка (ГА) і транспірації на площу листка (ТЛА). В умовах високого МРО, ГА була схожою між 5941 і ЕТх7000 (11795 проти 11628 смуУ), а
ТЛА була меншою в 51, ніж в Тх7000 (2,60 проти 2,85), що привело до меншого використання води на рослину (Т) в 5941, ніж в КТх7000 (30,7 проти 32,8 І). Таким чином, економія води в 5191 (в умовах з високим МРО) досягалася повністю шляхом зниження Т/| А, що вказує на те, що ця стратегія конститутивного збереження води забезпечувалася 5191. У цьому випадку, вища ефективність транспірації (ТЕ) в 5191 була наслідком еквівалентної біомаси і нижчої транспірації.
Більш широкий аналіз, що порівнює чотири 519 ТІ (5191, 5942, 593 і 5194) з КТх7000 допоміг виявити перспективність відповіді 5941. В умовах високого МРО, ТЛА позитивно корелювала з Т. Однак в умовах низького МРО, Т/ А негативно корелювала з Т (г2-0,52). Площа зеленого листя і транспірація позитивно корелювали в умовах як високого, так і низького МРО (фіг. 22). В обох експериментах ЗД ОТ зменшував площу зеленого листя і транспірацію в порівнянні з КТх7000. (с) Економія води внаслідок зниженої площі листя
Транспірація (Т) є результатом добутку ГА їі Т/Л А. В умовах низького МРО, ГА була на 3195 меншою в 5091, ніж в ЕТх7000 (4898 проти 7082 см"). Це відповідало невеликому збільшенню на 995 Т/ А в 5191 в порівнянні з КТх7000 (5,15 проти 4,70). Сумарний результат склав зниження
Зо на 2295 використання води на рослину (Т) в 51941 в порівнянні з КТх7000 (25,6 проти 32,7 л), головним чином, внаслідок зменшеного розміру листяного покриву. Збільшення ТЛА, яке проявляв 51941, саме по собі може являти собою механізм адаптації до засухи, який охолоджує листя і забезпечує продовження фотосинтезу.
Пластичність в Т/Л А, мабуть, особливо важлива для регуляції водного режиму рослини. В умовах високого МРО, зниження ТЛА в ЗЩІ було ключовим механізмом зниження Т і збільшення ТЕ. В умовах низького МРО збільшення Т/ А в 591 може забезпечити підтримку функції листя шляхом охолоджування.
Лізиметричні дослідження на підгрупі рослин із точно картованим 5941 забезпечують додаткову оцінку цієї області. В умовах високого МРО, ГА на рослину була менше в 10604-5 (положення гена-кандидата 5941), ніж в ЕТх7000 (10283 проти 11628 см"), в той же час ТЛА була еквівалентна в 10604-5 і КТх7000 (2,86), що приводило до меншого використання води на рослину в 10604-5, ніж в КТх7000 (28,0 проти 32,8 л). Таким чином, економії води в 10604-5 досягали повністю шляхом зниження розміру листяного покриву.
В умовах низького МРО ГА на рослину була меншої у всіх лініях 591 в порівнянні з ЕТх7000, що приводило до економії води у всіх лініях 5ІдД1. Таким чином, було важко точно картувати цю область, оскільки всі рекомбінантні рослини відповідали аналогічно 6078-1. (8) Імітація агрономії
Вивхіег висівали в кількості 5 рослин/м2 з відстанню між рядами 1 м. Глибина грунту-1800 мм; РАМУС грунту-324 мм; без обмеження М. Результати представлені На фіг. 56А-0.
Умови нт Високе кущіння (2 пагони/рослина)
ІТ Низьке кущіння (1 пагін/рослина)
ММ Хороший доступ води (початок з 10095 профілю і доступу дощу) т5 Термінальний стрес (початок з профілю з половинним наповненням (162 ммі і без доступу дощу після саджання).
Приклад 13
Збільшена доступність води під час цвітіння також може бути досягнута за допомогою збільшеної засвоюваності води внаслідок кращого витягання води і/або більш глибоке або більше латеральне поширення коріння в рослинах, що містять область 5Іа41
Маса коріння і співвідношення коріння:пагони (фіг. 23) була вищою в 51, ніж ЕТх7000 на стадії листка 6. Існувала виражена трансгресивна сегрегація цих ознак в популяції з точно картованим 5941. Співвідношення між масою коріння і співвідношенням коріння:пагони вказує на можливість подальших генетичних досягнень відносно цих ознак.
Співвідношення маси коріння на площу листка можна використати як індекс адаптації до засухи на стадії сходів, оскільки воно об'єднує в собі здатність рослини засвоювати воду (маса кореня) із здатністю рослини використовувати воду (площа листя). Вищий індекс вказує на велику здатність засвоювати на одиницю площі листка. Рослина з 591 проявляла вищу масу коріння на площу листка відносно КТх7000 внаслідок як вищої маси кореня, так і меншої площі листя.
Вище співвідношення маси коріння на площу листка, що проявляється 51941 на стадії 16, може пояснити, чому воно використало більше води раніше при рості культури (20-50 БАЕ) в порівнянні з КТх7000 в умовах ГУМОЮ (фіг. 24). Проте, незрозуміло, чи була збільшена засвоюваність води в ході наливання зерна, що проявляється ЗІ91, в порівнянні з КТх7000 (фіг. 24) наслідком кращого витягання води і/або більшого поширення коріння.
У експерименті з камерою для коріння в Сацйоп, Оцеепзіапа, А!цзігаійа (Мап Оозієют вї аї., 2010, вище), гравіметрична нижня межа витягання води була на 0,2695 нижчою для гібридів АЗ5 (підтримування зеленим), ніж для гібридів ЛО) 39 (старіючі). АЗ5 містить область 51, в той час як АОЇ 39 не містить її. Передбачаючи об'ємну густину 1,3 г см і глибину грунту 150 см, це може потенційно збільшити доступну воду в полі на »5 мм протягом життєвого циклу культури.
Приклад 14
Підтримування зеленим збільшує біомасу на одиницю площі листя під час цвітіння.
Передбачаючи, що маса коріння еквівалентна (або щонайменше не є значно меншої), ці відмінності можна було пояснити відмінностями в транспірації на одиницю площі листка і/або ефективність транспірації
Біомаса головного стебла на одиницю площі листка (В/ А) під час цвітіння була на 2495 вище в 5191, ніж в ЕТх7000 в умовах низького дефіциту води (35,2 проти 26,2 г/м2/см3) і високого дефіциту води (40,6 проти 31,4 г/мг/см7) (таблиця 7). В/Л А головного стебла під час цвітіння була на «1495 вище в умовах високого дефіциту води відносно умов низького дефіциту води як
Зо в ЗІД1, так і в КТх7000, тобто В/ А росла із збільшенням дефіциту води. Потрібно зазначити, що
В/ А пагонів була еквівалентна в 591 і КТх7000 в умовах низького і високого дефіциту води.
Таблиця 7
Біомаса головного й . .
Біомаса пагонів на Загальна біомаса на стебла на одиницю одиничну площу листка під | одиницю площі листка під площі листка під час ль с.
Статус Мо цвітіння час цвітіння час цвітіння 5 піній (г/мг/смг)х1000 (г/мг/сме)х1000 (г/ме/сме)х1000
Низький Високий Низький . . Високий води води води дефіцит води | дефіцит води води ба! зе І
Мо овевй| | 00111111 нин шишиш ши шини пиши Пили Пол 551 8551 551 55 1 55 | 5
У таблиці 7 представлена біомаса головного стебла, пагонів і загальна біомаса на площу листка для КТх7000 (рекурентна батьківська рослина) і ряду практично ізогенних ліній, які містять різні інтрогресії 591, вирощених в умовах високого і низького дефіциту води в Віюеїа,
Омеепзіапа, А!йзігаїа.
Детальне вимірювання використання води вказує на те, що вища біомаса на одиницю площі листка, що спостерігається в лініях 591 ВііоеїЇа, ймовірно, була наслідком вищої транспірації на одиницю площі листка, а не ТЕ.
Низький дефіцит води 5Ід1 і КТх7000 проявляли еквівалентну В/ А при низькому дефіциті води. Однак Т була на «-Т9Ус нижче в 51941, внаслідок на 1095 нижчої Т/ А, яка, в свою чергу, збільшувала ТЕ на «9965 (фіг. 45). Таким чином, в 51941 зберігалася біомаса, але вода використовувалася менше в порівнянні з КТх7000.
Високий дефіцит води
При високому дефіциті води В/ А була на «695 вищої в 591 в порівнянні з ЕТх7000. УЛ А позитивно корелювала з Т/ А, але не з ТЕ. Таким чином, вища В/ А, 591, що виявляється, була наслідком вищої Т/ А. Як правило, В/ А позитивно корелювала з Т/ А і негативно корелювала з
ТЕ при високому дефіциті води.
У цьому випадку, 591 використало на «2295 менше води, ніж КТх7000 в період до цвітіння.
Таким чином, 51941 мало б значно більше води, доступної для наливання зерна, незважаючи на нижчу біомасу під час цвітіння.
Приклад 15
Збільшена ТЕ внаслідок інтрогресії 591 може бути наслідком а) пропорційно вищої здатності до фотосинтезу в порівнянні з продиховою провідністю завдяки меншому розміру, меншій товщині листя і більш зеленому листю або Б) внаслідок зниження транспірації на площу листка при збереженні біомаси на площу листка
У популяції з точно картованим 51941 довжина і зеленість (РАВ) листка 10 високо негативно корелювали (г2-0,72, фіг. 25). Таким чином, зменшення розміру листка в цій популяції збільшувало концентрацію азоту в листі. Інтрогресія 5941 в фон КТх7000 знижувала довжину
Ї10 на 795 (від 592 до 550 мм) і збільшувала І 10 БРАВО на «495 (від 47,1 до 48,9).
Зеленіші листки можуть збільшувати здатність до фотосинтезу, і, таким чином, ефективність використання води. У підгрупі рослин популяції з точно картованим 5191, фотосинтез збільшувався при збільшенні величини 5РАЮ до досягнення плато при 5РАЮ «48,5 (фіг. 26).
Однак лінія (6078-1) з найвищою величиною 5РАЮ (51,6) проявляла відносно низький рівень
Зо фотосинтезу (32,1 МДж/м"/доба). Цей результат або а) є аномальним, або б) вказує на реальне зниження фотосинтезу при високих величинах 5РАЮ.
Зеленість листя (5РАЮ) і УМОЕ (на основі індексу, обчисленого для програмного забезпечення І ісог) позитивно корелювали в підгрупі рослин популяції з точно картованим 5191 (фіг. 27). Жодна з інтрогресій 591 не досягала величини для 6078-1 (0,8), незважаючи на відносно високий 5РАО в ізогенних лініях 10604-5 і 10709-5 (МІГ).
У порівнянні з ЕТх7000 і іншими 519 ОТ, 591 проявляв більш зелені листки (вищу величину
ЗРАВБВ) і вищу УШЕ (на основі індексу, обчисленого за допомогою програмного забезпечення
Гісог) (фіг. 281.
Приклад 16
Збільшена ТЕ за допомогою інтрогресії 541 може бути наслідком а) пропорційно вищої здатності до фотосинтезу в порівнянні з продиховою провідністю, завдяки меншому розміру, меншій товщині листя і більш зеленому листю або б) внаслідок зниження транспірації на площу листка при збереженні біомаси на площу листка
Ефективність транспірації (ТЕ) негативно корелювала з транспірацією на площу листка (ТЛА) в умовах низького і високого МРО (фіг. 29) в ряді 59 МІГ, включаючи рекурентну батьківську рослину (КТх7000). Однак ранжування 519 МІГ. відносно КТх7000 залежало від умов
МРО. Наприклад, ТЛА в 5191 була нижчою відносно КТх7000 в умовах високого МРО, але вищою, ніж в КТх7000, в умовах низького МРО.
У умовах високого МРО, нахил негативної кореляції між ТЛА і ТЕ був крутим, так що невелике зниження ТЛА від 2,9 мм/сме (5194) до 2,6 мм/сме (591) приводило до значного збільшення ТЕ від 4,2 г/мг/мм (5194) до 5,1 г/м2/мм (51941) |фіг. 291. Градієнт був менш крутим в умовах низького МРО, так що було потрібне шестикратне зниження ТЛА на одиничне збільшення ТЕ в порівнянні з умовами високого МРО (1,2 проти 0,2 одиниць). Потрібно зазначити, що для еквівалентного ТЕ, 5Щ1 проявляв вищу Т/ А, ніж КТх7000 (5,1 проти 4,6 мм/см2) при низькому МРО. Це може забезпечити механізм листю 591 залишатися холоднішими при певних умовах навколишнього середовища.
Приклад 17
Зміни транспірації на одиницю площі листка могли бути наслідком а) кількості продихів, Б) отворів продихів, с) змін часу відкриття і закриття продихів відносно УРО і/або 4) кількості клітин бо основи волосків (яка впливає на пограничний шар і, таким чином, Т/ А)
Інтрогресія 591 в КТх7000 по-різному впливала на Т/ А, в залежності від умов МРО.
Відносно КТх7000, в 51941 Т/ А збільшувалася на «995 при низькому МРО і Т/ А знижувалася на -1095 в умовах високого МРО. Т/ А, серед іншого, може регулюватися а) кількістю продихів на одиницю площі листка, б) розміром отворів продихів, с) часом відкриття і закриття продихів і/або 4) кількістю клітин основи волосків (яка впливає на пограничний шар і, таким чином, Т/ А).
Проводили вимірювання двох із цих чотирьох компонентів (а і 4). В одному експерименті з укриттям від дощу окремі листки збирали після умов високої щільності з контролем зрошування, кутикули видаляли і отримували зображення поверхні кутикули. Ці зображення використовували для визначення а) кількості продихів на одиницю площі листка, Б) кількості епідермальних клітин на одиницю площі листка і с) кількості клітин основи волосків на одиницю площі листка.
У той же час, отримували поперечні зрізи листків. Попередній аналіз цих даних вказує на те, що інтрогресія 591 в КТх7000 модифікувала анатомію листків. Відмінності в морфології листків (наприклад, листків 7 і 10), є очевидними між ЕТх7000 і 5941. У цьому випадку, в 5941 обкладка судинних пучків, оточуючих судинний пучок, була більш представлена і була меншого розміру.
Збільшення кількості клітин в обкладці судинних пучків також може приводити до збільшення фотосинтетичної асиміляції (РМАЗ 2007) і, таким чином, ТЕ.
Приклад 18
Збільшеного використання води в ході наливання зерна досягають шляхом (ї) збільшеної доступності води під час цвітіння і (ії) збільшеної засвоюваності води (краще витягання води і більш глибоке або більше латеральне поширення) в ході наливання зерна а) Збільшена доступність води під час цвітіння
Використання води культурою (СУМ) до цвітіння негативно корелювало з СУМ після цвітіння в експерименті з КОЗ5 (фіг. 30). Наприклад, економія 20 мм води до цвітіння (165 проти 185 мм) забезпечувала використання додаткових 20 мм після цвітіння (80 мм проти 60 мм).
Таким чином, вся вода, збережена до цвітіння, використовувалася культурою після цвітіння.
Загалом, 2595 збільшення використання води після цвітіння в цьому експерименті приводило до 2595 збільшення виходу зерна (400 проти 300 г/м"). Це перетворювалося в 50 кг/га зерна на кожний додатковий мм доступної води. Хоча ці дані підтверджують ідею про те, що збільшене використання води в ході наливання зерна досягається шляхом збільшення доступності води
Зо під час цвітіння, це не пояснює збільшення засвоюваності води в процесі наливання зерна. р) Збільшена засвоюваність води в ході наливання зерна 591 проявляло збільшене використання води в період наливання зерна в умовах як низької, так і високої щільності в експерименті з укриттям від дощу (КО5). Це було наслідком, головним чином, (ї) збільшеної доступності води під час цвітіння в умовах високої щільності і (ії) збільшеної засвоюваності води в ході наливання зерна в умовах низької щільності (фіг. З1А і В).
У дослідженні КТх7000 їі чотирьох 519 МІ. (5191, 51942, ЗЩДЗ і 594), СМ до і після цвітіння негативно корелювали в експерименті КО5 в умовах низької щільності (фіг. 32). У цьому випадку, економія «25 мм води до цвітіння (168 проти 191 мм) приводила до використання «-50 мм після цвітіння (135 мм проти 86 мм), що вказує на те, що як збільшена доступність води (25 мм), так і засвоюваність (25 мм) були в рівній мірі важливими. Однак ЗЩЧ1 був аномальним в цьому прикладі, оскільки високе використання води після цвітіння було асоційоване з високим використанням води до цвітіння. Поясненнями для цієї аномалії 92941 є а) помилка в даних про використання води до цвітіння, б) помилка в даних про використання води після цвітіння або с) відсутність помилок у вимірюваннях води (5191 просто відповідав по-різному відносно інших
МІУ). Дослідження даних по біомасі виявило, що по деякій причині рослина з 51 продукувала вищу біомасу до цвітіння в умовах ГУМІ О в порівнянні з іншими МІГ, вказуючи на те, що профілі використання води до цвітіння просто відображали продукцію біомаси в цьому експерименті.
Проте, цей приклад забезпечує доказ збільшеної засвоюваності води для 51941 в період наливання зерна.
Приклад 19
Зв'язок між продукцією біомаси до і після цвітіння
У умовах низької щільності (І.О) зниження біомаси до цвітіння на 2395 (від 700 до 640 г/м) збільшувало біомасу після цвітіння більш ніж в два рази (від 200 до 425 г/м"). В умовах 10, рослина з 5941 продукувала схожу біомасу до цвітіння з ЕТх7000 (610 г/м"), але продукувала меншу біомасу після цвітіння (265 проти 327 г/м"). Однак в умовах НО, 591 і ЕТх7000 продукували схожу біомасу до цвітіння (840 г/м), однак рослина з 5941 продукувала велику біомасу після цвітіння (195 проти 17 г/м).
Взаємозв'язок між СІ АА і співвідношенням біомаси до:після цвітіння є критичним у випадку 5941. СІ АА повинна бути зворотно зменшена до «3 для забезпечення доступності достатньої бо кількості води для наливання зерна, і в цьому складається критична роль гена 5141. У цьому експерименті 591 досить знижував СІ АА для досягнення співвідношення біомаси до:спісля цвітіння «З в умовах ГО, але не в умовах НО. Потрібно зазначити, що в умовах НО інтрогресія 991 в ЕТх7000 знижувала СІ АА від 31200 до 29300 см"/м-, знижуючи співвідношення біомаси до:після цвітіння від 8,2 до 6,5 (але, проте, не до «3). Це підкреслює важливість відповідних стратегій керування рослинництвом, таких як щільність культури при максимально обмежених ресурсах води.
Негативний взаємозв'язок між СІ АА і масою стебла після цвітіння також є важливим у випадку 5941. Нижча СІ АА, і, таким чином, зменшене використання води під час цвітіння, були асоційовані з вищою масою стебла після цвітіння (компонент стійкості до вилягання).
Інтрогресія 541 в КТх7000 збільшувала масу стебла після цвітіння в умовах як І 0 (незначне збільшення) і НО (значне збільшення).
Взаємозв'язок між співвідношенням біомаси до:після цвітіння (РРВЕК) і біомасою після цвітіння є інформативною. Умови двох щільностей забезпечують безперервний діапазон РРВК від «2 до »8. Знижування РРВК від »8 до «3 приводило до поступового збільшення біомаси після цвітіння. Однак подальше зниження РРВК нижче за З приводило до відносно різкого збільшення біомаси після цвітіння, приблизно, оскільки більше води було доступно в ході наливання зерна, коли співвідношення РРВЕК знижувалося нижче за 3. Інтрогресія 591 в
ЕТх7000 збільшувала біомасу після цвітіння в умовах НО, але не 10.
Взаємозв'язок між співвідношенням біомаси до:після цвітіння (РРВЕ) і масою стебла після цвітіння є в рівній мірі інформативним. Маса стебла після цвітіння є компонентом стійкості до вилягання. Аналіз цього компонента забезпечує деяке розуміння того, як інтрогресії 519 впливають на стійкість до вилягання. Зниження РРВЕК від »8 до «4 приводило до поступового збільшення маси стебла після цвітіння. Однак подальше зниження РРВЕК нижче 4 приводило до відносно різкого збільшення маси стебла після цвітіння. Інтрогресія 5941 в КТх7000 збільшувала масу стебла після цвітіння в умовах як І О (незначне збільшення), так і НО (значне збільшення).
Взаємозв'язок між РРВЕ і виходом зерна був менш очевидним в цьому експерименті. Хоча вихід зерна був вищим в 51941, ніж в ЕТх7000 при обох щільностях, вищий вихід можна було пояснити тільки нижчим РРВЕ в 5191 при НО.
У цьому експерименті досліджували дві інтрогресії 5941: а) 6078-1 (суцільна область 51) і
Зо р) 10946-5 (рекомбінантна рослина, яка охоплює приблизно 1/3 області 5ІД1 між маркерами 5рОЗОСМ116 і БрОЗОСМ106).
Зниження біомаси до цвітіння на 2095 (від 920 до 735 г/м-) збільшувало біомасу після цвітіння приблизно на 10095 (від 200 до 400 г/м2) |фіг. 40). Як правило, біомаса до цвітіння відповідала КТх7000-5щ42»25193-5194» 5191 і біомаса після цвітіння відповідала 0 5ІЮ155143-519455192»8Тх7000.
Розмір листяного покриву, на який вказує СІ АА, здебільшого визначав співвідношення біомаси до:після цвітіння (фіг. 34). В умовах як високої, так і низької щільності, інтрогресія 591 в фон КТх7000 знижувала СІ АА, яка, в свою чергу, знижувала співвідношення біомаси до:після цвітіння до «3, забезпечуючи достатню доступність води для наливання зерна в цих умовах обмеження доступу води.
Розмір листяного покриву, на який вказує СІ АА, був визначальним фактором маси стебла після цвітіння (РАМ) |фіг. 35). В умовах як високої, так і низької щільності, інтрогресія 5941 або 5ЩТа в фон ЕТх7000 знижувала СІ АА, яка, в свою чергу, збільшувала РАБМ. Приблизно на 40 г/м2 більше резервів стебел використовувалося при НО в порівнянні з І О, що відображає вищий стрес, що забезпечується цими умовами.
Взаємозв'язок між співвідношенням біомаси до:після цвітіння (РРВЕК) і біомасою після цвітіння (РАВ) була високою (фіг. 36). Умови двох щільностей забезпечують безперервний діапазон РРВЕК від «1,5 до 24. Зниження РРВК від «4,5 до «3,5 не надавало впливу на РАВ.
Однак подальше зниження РРВЕ нижче «3,5 приводило до відносно різкого збільшення РАВ, приблизно, оскільки більше води було доступно в ході наливання зерна, коли співвідношення
РРВЕ знижувалося нижче 3,5. Інтрогресія 591 в КТх7000 знижувала РРВЕ нижче З при НО 10, тим самим збільшуючи РАВ в умовах обох щільностей.
Співвідношення біомаси до:після цвітіння (РРВЕ) також впливало на стійкість до вилягання (фіг. 37). У цьому випадку, масу стебла після цвітіння (РАЗМ) використовують як замісник для стійкості до вилягання. У умовах високої і низької щільності РРВК негативно корелювало з біомасою стебла після цвітіння. Отже, високе співвідношення біомаси до:спісля цвітіння підвищувало кількість резервів стебел, ремобілізованих в ході наливання зерна, таким чином, знижуючи біомасу стебла і збільшуючи імовірність вилягання. У порівнянні з КТх7000, 5щ1а значно знижував кількість мобілізованих резервів стебел при ГО (5 проти 65 г/м2) і НО (-80 бо проти 140 г/м-). У порівнянні з ЕТх7000, 5941 значно знижував кількість мобілізованих резервів стебел при НО (80 проти 140 г/м2), але не ГО. Ступінь мобілізованих резервів стебел була вищою при НО, ніж при І 0, відображаючи вищий дефіцит води при НО. Наприклад, відмінність в мобілізації резервів стебел між НО і ГО було двократним в КТх7000 (приблизно 140 проти 70 г/м).
Вихід зерна залишався низьким (на рівні 4,2 т/га) доти, доки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «3 (НО) або «2,5 (І 0) |фіг. 38). Нижче цих критичних величин вихід зерна значно збільшувався при кожному покроковому зменшенні цих співвідношень, причому ступінь збільшення виходу зерна був трохи вищим при І 0, ніж при НО.
Це вказує на те, що доступність води після цвітіння була тісно пов'язана з Сі АА до цвітіння і біомасою, і що певне зниження СІ АА було потрібне для забезпечення належної доступності води для наливання зерна. При обох щільностях 5191 знижував співвідношення біомаси до:після цвітіння нижче критичних рівнів, що приводило до збільшення виходу, що становить 2890 (І) і 22965 (НО), відносно КТх7000. Ці дані забезпечують критичний зв'язок між дією гена
ЗІ91 (зменшений розмір листяного покриву під час цвітіння) і виходом зерна при термінальній засусі. Потрібно зазначити, що інтрогресія 5Ід1а мала деякий вплив на зниження РРВЕ (НО і
ІО) ї збільшення виходу зерна (тільки ГО) відносно КТх7000, але не в тому ж ступені, як у випадку 591. Таким чином, із цього експерименту відсутні переконливі дані, що ключовий ген 51 розташований в області 5ід'а. Це підтверджує докази, представлені раніше, оскільки найбільш значний кандидат для 591 (5БРІМ4) розташований вище за інтрогресії Та.
У цьому експерименті досліджували чотири інтрогресії 591: а) 6078-1 (ціла область 51); Б) 10709-5 (рекомбінантна рослина, яка охоплює приблизно 1/3 області 51941); с) 10604-5 (рекомбінантна рослина, яка охоплює приблизно 3/4 області 51) і а) 10568-2 (рекомбінантна рослина, яка охоплює практично 1/2 області 591).
У умовах низької щільності (І 0), біомаса до цвітіння варіювала тільки на 595 (від 522 до 552 г/м2) серед генотипів, і в той же час біомаса після цвітіння варіювала практично в два рази (від 173 до 313 г/м-). Це вказує на те, що на значні відмінності в біомасі після цвітіння впливало щось, відмінне від біомаси до цвітіння, наприклад, відмінності в засвоюваності води. Наприклад, як 10709-5, так і ЕТх7000 продукували «550 г/м? біомаси до цвітіння, але в той же час рекомбінантна рослина 591 (10709-5) продукувала на «6095 більше біомаси після цвітіння.
Зо В умовах високої щільності (НО), біомаса до і після цвітіння високо негативно корелювала.
Інтрогресія 5941 в КТх7000 знижувала біомасу до цвітіння на 995 і збільшувала біомасу після цвітіння на 23905.
Використання води культурою (СУМ) під час цвітіння в більшому ступені відрізнялося між генотипами, ніж біомаса до цвітіння. При комбінуванні даних НО і 0, біомаса після цвітіння (РАВ) залишалася низькою (на рівні «150 г/ме) доти, поки СУМ під час цвітіння не знижувалося нижче «180 мм. Нижче цієї критичної величини РАВ збільшувалася для кожного покрокового зниження СУМ аж до рівня 175 мм, причому РАВ досягала плато на рівні приблизно 310 г/м.
Подальше зниження СУМ) під час цвітіння нижче 175 мм не приводило до додаткової РАВ.
Розмір листяного покриву, на який вказує СІАА, по більшому ступені визначав співвідношення біомаси до:після цвітіння (РРВЕ). В умовах як високої, так і низької щільності, інтрогресія 5941 (або конкретних рекомбінантних рослин, таких як 10709-5)3 в фон КТх7000 знижувала СІ АА, яка, в свою чергу, знижувала співвідношення біомаси до:після цвітіння, тим самим збільшуючи доступність води для наливання зерна в цих умовах обмеженого доступу води. Величина РРВК для 6078-1 виявилася аномальною (дуже високою) оскільки цей генотип знаходиться значно вище лінії регресії СОГАА/РРВЕ.
Розмір листяного покриву, на який вказує СІ АА, був визначальним фактором маси стебла після цвітіння (РАБМ). В умовах високої щільності інтрогресія 591 (або рекомбінантні рослини
ЗІ9Ч1, такі як 10604-5 і 10709-5) в фон КТх7000 знижувала СІ АА, що, в свою чергу, збільшувало
РАБМ. Приблизно на 60 г/м? більше резервів стебел використовувалося при НО в порівнянні з
І.О, відображаючи вищий стрес, що забезпечується цими умовами.
Взаємозв'язок між співвідношенням біомаси до:після цвітіння (РРВЕК) і біомасою після цвітіння (РАВ) був високим. Умови двох щільностей забезпечують безперервний діапазон РРВК від «2 до »5, хоча нахил регресії був вищим для І 0, ніж для НО. При НО зниження РРВЕ від «6 до «3,5 приводило до поступового збільшення РАВ від «130 г/м? (КТх7000) до «180 г/м2 (10604- 5). Подальше зниження РРВК нижче «3 в умовах ГО приводило до більш крутого збільшення
РАВ, приблизно, оскільки вода була більш доступною в ході наливання зерна, коли співвідношення РРВЕК знижувалося нижче за 3.
Співвідношення біомаси до:після цвітіння (РРВЕ) також впливало на стійкість до вилягання.
У цьому випадку, масу стебла після цвітіння (РАБМ) використовують як замісник для стійкості бо до вилягання. У умовах високої і низької щільності РРВК негативно корелювало з біомасою стебла після цвітіння. Отже, високе співвідношення біомаси до:після цвітіння підвищувало кількість резервів стебел, ремобілізованих в ході наливання зерна, таким чином, знижуючи біомасу стебла і збільшуючи імовірність вилягання. У порівнянні з КТх7000, 5941 значно знижувало кількість мобілізованих резервів стебел при НО (4100 проти 160 г/ме). Ступінь мобілізованих резервів стебел був вищим при НО, ніж при ГО, відображаючи вищий дефіцит води при НО. Наприклад, відмінність в мобілізації резервів стебел між НО їі ГО була більш ніж двократною в ЕТх7000 (приблизно 160 проти 60 г/м"). Цікаво, що РАБМ зростала при зниженні
РРВЕ протягом всього діапазону РРВК (1,5-6), в той час як вихід зерна, і в меншому ступені
РАВ, тільки збільшувалися, коли РРВЕ знижувалося нижче «3. Це вказує на те, що відносно невелика економія води до цвітіння була все ще здатна підвищувати стійкість до вилягання, хоча до отримання відповіді у вигляді виходу зерна була потрібна вища економія води.
Вихід зерна залишався низьким (на рівні 3,1 т/га) доти, доки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «3. Нижче цієї критичної величини вихід зерна значно збільшувався при кожному покроковому зменшенні цього співвідношення. Оскільки жодна з інтрогресій 591 не знижувала РРВК до «3 в умовах НО, в цих умовах не було реалізовано переваг 5941 відносно виходу. В умовах 10, деякі з інтрогресій 5191 знижували РРВК нижче критичного рівня, що приводило до збільшення виходу на 1295 (10568-2) і 595 (10709-5), відносно КТх7000. Ці дані забезпечують критичний зв'язок між дією гена 51941 (зменшений розмір листяного покриву під час цвітіння) і виходом зерна при термінальній засусі.
СМУО в ході наливання зерна залишалося низьким (на рівні -60 мм) доти, поки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «3,5 (фіг. 39). Нижче за цю критичну величину СУМУ в ході наливання зерна зростало значно при кожному покроковому зниженні цього співвідношення. Оскільки жодна з інтрогресій 541 не знижувала РРВК до «3,5 в умовах НО, в цих умовах збілошення СУМО в ході наливання зерна не реалізовувалося для рекомбінантних рослин (91. У умовах І О деякі з інтрогресій 51 (ії ЕТх7000) знижували РРВЕК нижче критичного рівня, збільшуючи СУМІ в ході наливання зерна аж до «80 мм в порівнянні з початковим рівнем при НО (60 мм).
Взаємозв'язок між СМ в ході наливання зерна і виходом зерна був позитивним (фіг. 40).
Однак кореляція між цими параметрами була відносно низькою (г2-0,23), можливо, внаслідок
Зо високо змінного характеру вимірювання води в грунті в польових умовах.
Приклад 20
Уповільнене старіння листя (підтримування зеленим) є наслідком вищого водного режиму рослини в ході наливання зерна (внаслідок збільшеного використання води)
Водний режим рослин визначали на РІ/-2 (два листи нижче подовженого листка) при середньому наливанні зерна з використанням двох методологій: водний потенціал листя (І ММР) і відносний вміст води (КУУС). ЇМ/Р вимірювали в полі за допомогою глибинного манометра.
Після визначення І МУР в полі зразок того ж листка вміщували на лід і протягом двох хвилин переносили в лабораторію на відстані 300 м для визначення ЕМ/С стандартними способами.
ВМС РІ-2 негативно корелювало з відносною швидкістю старіння листя при середньому наливанні зерна в умовах як високої, так і низької щільності в ряді 519 МІГ, включаючи рекурентну батьківську рослину. Кореляції для НО і ГО були паралельними, однак відрізнялися приблизно на 0,35 одиниць старіння листя, тобто для даного рівня КУУС, наприклад 70, відносна швидкість старіння листя становила 2,1 і 2,45 для ГО і НО, відповідно. Інтрогресія області 5941 в ЕТх7000 збільшувала КУУС при середньому наливанні зерна (РІ -2) і знижувала відносну швидкість старіння листя як при НО, так і при ГО, хоча вплив був вищим при НО.
У свою чергу, відносна швидкість старіння листя високо негативно корелювала з площею зеленого листя в зрілому стані (СІ АМ) в умовах НО і ГО (фіг. 49), причому вищі рівні старіння листя проявлялися при НО. 51941 продукувало більше ніж в два рази більше САМ, ніж КТх7000 при НО (2106 проти 859 см/м) і на 1995 більше СІ АМ при ГО (2145 проти 1725 см"/м"), також див. фіг. 42.
Приклад 21
Збільшена стійкість до вилягання є наслідком вищого водного режиму в ході наливання зерна (внаслідок збільшеного використання води)
Вища маса стебла в зрілому стані є компонентом стійкості до вилягання. КУУС при середньому наливанні зерна (РІ -2) високо негативно корелювало з масою стебла в зрілому стані в ряді 5іДд МІ, вирощених в умовах обмеженого доступу води при двох щільностях культури (фіг. 43). Інтрогресія 5941 в КТх7000 збільшувала ЕМУС при середньому наливанні зерна (РІ-2) і масу стебла в зрілому стані при НО і ГО, причому вищим вплив був при НО.
Відносно КТх7000, 59441 збільшувало масу стебла в зрілому стані на 995 при І О (224 проти 203
Зо г/м2) і на 2995 при НО (286 проти 204 г/м2). Таким чином, користь 5941 з точки зору стійкості до вилягання зростала із ростом рівня дефіциту води.
Біомаса після цвітіння, головним чином, складається з а) маса стебла після цвітіння (РАБМ) - показник мобілізації резервів стебла і компонент стійкості до вилягання, і Б) виходу зерна.
Фахівці з вирощування зерна вимагають максимізації як виходу зерна, так і стійкості до вилягання, тобто вони не хочуть одного за рахунок іншого. Маса стебла після цвітіння високо лінійно корелювала з РАВ в умовах НО і І О (фіг. 44). У той час як 5ІЧ1 мав невеликий вплив на
РАЗМ при більш м'якій засусі (І.О), кількість маси сухої речовини, переміщеної з стебла в ході наливання зерна, була значно меншою в 51941 в порівнянні з ЕТх7000 (85 проти 139 г/м2) при більш важкій засусі (НО). Це приводило до більшої маси стебла в стані дозрівання в 51 відносно КТх7000 (286 проти 204 г/м2), яка, в свою чергу, повинна забезпечувати збільшену стійкість до вилягання.
Хоча кореляція між РАЗМ і РАВ була високою при НО і ГО (фіг. 43), кореляція між виходом зерна і РАВ була низькою в умовах обох щільностей (фіг. 44). Інтрогресія 5941 в ЕТх7000 збільшувала вихід зерна в умовах НО і ГО, хоча РАВ була вищою тільки при НО. Потрібно зазначити, що вищий вихід зерна в 5191 в порівнянні з ЕТх7000 (290 проти 184 г/м") при НО досягався при значно менших резервах стебел в 5191, чому у КТх7000 (85 проти 139 г/м), вказуючи на те, що потреба у вуглеці в ході наливання зерна здебільшого задовольнялася поточною фотоасиміляцією і резервами стебел в 51 і КТх7000, відповідно.
Потенційне зіставлення між РАБМ і виходом зерна подано На фіг. 45. При НО, 5191 досягало найвищого виходу зерна при будь-який інтрогресії (290 г/м2) при збереженні втрат стебел до 85 г/ме. Відносно КТх7000, 591 оптимізувало відповідність між РАБМ і виходом зерна. Подальше зниження утилізації резервів стебла в 51924 (38 г/м) приводило до нижчого виходу зерна (263 г/м2). При ГО, 51 також досягало високого виходу зерна відносно ЕТх7000 (282 проти 214 г/ме) при використанні небагато менших резервів стебла (46 проти 50 г/м).
Таким чином, при обох щільностях 5191 досягало вищого виходу зерна і стійкості до вилягання, ніж КТх7000.
Взаємозв'язок між РАМ і масою стебла в зрілому стані був відносно невеликим для різних інтрогресій БІД при НО і ГО, хоча КТх7000 знаходилося нижче регресійної лінії в обох випадках.
Зо Для даного рівня утилізації резервів стебла (наприклад «140 г/м? при НО або 50 г/м2 при І 0), інтрогресія області 5ІД в КТх7000 значно збільшувала масу стебла в зрілому стані, вказуючи на те, що був важливий деякий інший фактор (наприклад, міцність стебла) у доповнення до кількості використаних резервів стебел.
Маса стебла після цвітіння (РАБМ) високо лінійно корелювала з РАВ в умовах НО і 10 (фіг. 46). Кореляції НО і ГО були практично паралельними, хоча і з відмінністю приблизно на 50 г/м, тобто для даного рівня РАВ, наприклад, 300 г/м, РАЗМ складала на «50 г/м2 менше при НО, ніж при ГО (- 100 проти -50 г/м-). Це відображає вищий рівень стресу в умовах НО. В умовах НО, як 591, так і 5ідта використовували «80 г/м? резервів стебел в порівнянні практично з 140 г/м? в
ЕТхХ7000, і в той же час 5941 продукувало на «2895 більше РАВ, ніж 5Щ41а, для еквівалентного використання резервів стебел. При І 0, обидва із ЗІд1а і в меншому ступені 5941, збільшували
РАВ відносно ЕТх7000. Однак, в той час як 5ЩтТа використало на «60 г/м" менше резервів стебел, ніж ЕТх7000, 51 використало на «20 г/м? більше резервів стебел, ніж ЕТх7000.
Вихід зерна позитивно корелював з РАВ при НО і 0. При НО, 5191 перевершував за виходом КТх7000 на 2495, хоча рослина з 5ід1а була еквівалентною КТх7000 за виходом зерна.
При СО, 591 і 5Ід1а перевищували за виходом КТх7000 на 4295 і 20905, відповідно.
У цьому експерименті не було відповідності між РАЗМ і виходом зерна, оскільки кореляція між цими параметрами була позитивною і лінійною при обох щільностях культур (фіг. 47). При
НО рослина з 5941 проявляла найвищу масу стебла і вихід зерна із всіх інтрогресій 59, вказуючи на те, що вихід зерна і стійкість до вилягання не є взаємовиключними.
Взаємозв'язок між РАБМ і масою стебла в зрілому стані позитивно корелювала при НО і негативно корелювала при ГО. При НО, як РАБЗМ, так і маса стебла при дозріванні були значно вищими в 51941, ніж в КТх7000. При І 0, маса стебла в зрілому стані була вищою в 51941, ніж в
ЕТх7000 (314 проти 271 г/м"), хоча рослина з 5і941 використала більше резервів стебел в порівнянні з ЕТх7000 (87 проти 66 г/м"). Загалом, рослина з 51 збільшувала масу стебла в зрілому стані на 2295 (НО) і 1695 (0) відносно КТх/000. Також, 5Щ4та використало значно менше резервів стебел, ніж КТх7000 при обох щільностях культур.
Маса стебла після цвітіння (РАБМ) високо лінійно корелювала з РАВ в умовах НО і 10 (фіг. 48). Генетичне варіювання у використанні резервів стебел після цвітіння знаходилося в діапазоні «-30-110 г/ме в умовах ГО, ії «100-160 г/м в умовах НО, відображаючи вищий рівень бо стресу в умовах НО. В умовах НО батьківська рослина Зі9Ч1 (6078-1) і дві рекомбінантних рослини 5191 (10604-5 і 10709-5) використали значно менше резервів стебел в порівнянні з
ЕТх7000 (4100 проти 160 г/м), і в той же час продукували більше РАВ, ніж КЕТх7000 (170 проти 130 г/м). В умовах І О тільки одна з рекомбінантних рослин 5941 (10568-2) використала значно менше резервів стебел, ніж ЕТх7000 (430 проти 60 г/м7), і продукувало більше РАВ, ніж
КтТх7000 (310 проти 230 г/м).
Вихід зерна позитивно корелював з РАВ в умовах ГО і негативно корелював в умовах НО, хоча загалом (в сукупності НО і ГО), взаємозв'язок був позитивним, причому КТх7000 (НО) відрізнялося від інших.
У цьому експерименті не було відповідності між РАЗМ і виходом зерна, оскільки кореляція між цими параметрами була позитивною і лінійною для обох щільностей культур. В умовах НО батьківська рослина 5141 (6078-1) проявляла високу масу стебел і високий вихід зерна в порівнянні з іншими інтрогресіями 5ід1. ЕТх7000 було аномальним в умовах НО, проявляючи низьку масу стебла і високий вихід зерна. При ГО 10709-5 і 10568-2 проявляли високу масу стебел і вихід зерна відносно ЕТх7000.
Взаємозв'язок між РАЗМ і масою стебла у дорослому стані позитивно корелювала при обох щільностях. При НО, як РАБЗМ, так і маса стебла в зрілому стані були значно вищими в 6078-1 і 10709-5, ніж в ЕТх/000. При Ї0О, тільки одна рекомбінантна рослина 5щ41 (10568-2) перевищувала КТх7000 у відношенні РАЗМ і маса стебла в зрілому стані.
Приклад 22
Вищий вихід зерна є наслідком вищого водного режиму рослини в ході наливання зерна
Інтрогресія 5941 в фон КТх7000 збільшувала водний режим рослини при середньому наливанні зерна, на що вказує а) вищий відносний вміст води (КУУС) в РІ -2 при ГО їі НО, нижчий водний потенціал (МУР) в РІ--2 при ГО їі НО. У загальному, в цьому експерименті рослини мали більший стрес при ГО, чому при НО, на що вказує нижче КУУС при ГО. Однак сприятливий вплив ЗІЩДЧ1 на водний режим рослини був більш вираженим при НО, де ЕМУС складало на 2695 вище в 5191, ніж в КТх7000.
ЕМУС при середньому наливанні зерна в РІ -2 позитивно корелювало з виходом зерна при
НО ї ГО. При вищих рівнях дефіциту води для рослини (КЕМ/С«73), вихід зерна був вищим при 10, ніж при НО, для даного рівня КУУС. ЕМУС і вихід зерна були вищими в 5941, ніж в ЕТх7000
Зо при обох щільностях культури. Наприклад, в 591 при НО, збільшення КУУС на 2695 було асоційоване із збільшенням виходу зерна на 5895, відносно КЕТх7000.
Водний потенціал листя (І МУР) ЕС-2 при середньому наливанні зерна негативно корелював з виходом зерна в умовах НО і ГО (фіг. 49). При обох щільностях 591 проявляло нижчий І МУР (менший стрес) і вищий вихід зерна відносно КТх7000. Ці дані, разом з даними КМ/С забезпечують переконливий доказ зв'язку між вищим водним режимом рослин в ході наливання зерна і збільшеним виходу зерна завдяки області 591.
Приклад 23
Вищий вихід зерна і більший розмір зерен є наслідком збільшеної доступності води в ході наливання зерна
Критичним для гіпотези про функцію 5191 є зв'язок між використанням води до і після цвітіння і, отже, зв'язок між використанням води після цвітіння і виходом зерна. Ген 5941 має невелику цінність в польових умовах, оскільки відсутній зв'язок між збільшеною доступністю води в ході наливання зерна і або виходом зерна, або розміром зерна.
По-перше, важливо встановити зв'язок між співвідношенням біомаси до:після цвітіння (РРВЕ) і використанням води культурою (СУМ) в ході наливання зерна. СУМ в ході наливання зерна залишалося низьким (на рівні 85 і 95 мм для ГО їі НО, відповідно) доти, поки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «З і 2,5 для 10 і НО, відповідно (фіг. 50). Нижче за цю критичну величину СМ/О в ході наливання зерна значно зростало при кожному покроковому зниженні цього співвідношення. При обох щільностях, інтрогресія 591
БО знижувала РРВЕ досить, щоб досить збільшилося СМ відносно КЕТх7000.
По-друге, важливо показати зв'язок між СМ/О в ході наливання зерна і виходом зерна. Як правило, ці параметри були позитивно асоційованими в експерименті КОБ, крім двох окремих відмінних результатів при ГО (5142 і 593) Іфіг. 511. Інтрогресія 5941 в ЕТх7000 збільшувала як
СМ в ході наливання зерна, так і вихід зерна при обох щільностях культури.
Нарешті, зв'язок між РРВЕ і виходом зерна в умовах обмеженого доступу води завершує картину (фіг. 51). Вихід зерна залишався низьким (на рівні «410 г/м2) доти, поки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче -2,7 (фіг. 52). Нижче за цю критичну величину вихід зерна значно збільшувався при кожному покроковому зниженні цього співвідношення. При обох щільностях інтрогресії 591 знижували РРВК досить, щоб значно збільшити вихід зерна відносно КТх7000. Ці дані вказують на критичний зв'язок між дією гена 5Щ1 (зменшений розмір листяного покриву під час цвітіння) і виходом зерна в умовах термінальної засухи.
СУМ в ході наливання зерна позитивно корелювало з розміром зерна в умовах як НО, так і
ГО (фіг. 53). Інтрогресія 5941 в ЕТх7000 значно збільшувала розмір зерен в умовах НО, але не
ГО.
Взаємозв'язок між РРВЕ і розміром зерна в умовах обмеженого доступу води вказує на важливість збереження води до цвітіння як визначальний фактор розміру зерен (фіг. 54). Розмір зерен залишався низьким (на рівні 17 і 17,5 мг для НО ії ГО, відповідно) доти, поки співвідношення біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «2,7 (фіг. 54). Нижче за цю критичну величину розмір зерен значно збільшувався при кожному покроковому зниженні цього співвідношення. У умовах НО, але не І 0, інтрогресії 591 знижували РРВЕ досить, щоб значно збільшити розмір зерен відносно КТх7000. Ці дані вказують на критичний зв'язок між дією гена
ЗІ91 (зменшений розмір листяного покриву під час цвітіння) і розміром зерен в умовах термінальної засухи.
СМ в ході наливання зерна залишалося низьким (на рівні «58 мм при НО) доти, поки зниження біомаси до:після цвітіння не знижувалося нижче «3,5. Потрібно зазначити, що РРВЕ. не знижувалося нижче критичного порога при будь-якому генотипі у випадку НО, таким чином,
СУМ в ході наливання зерна залишалося відносно низьким для всіх генотипів в цих умовах.
Однак, оскільки генотипи знижувалися нижче за цю критичну величину в умовах ГО, СМ в ході наливання зерна значно збільшувалося при кожному покроковому зниженні цього співвідношення. Тільки у однієї рекомбінантної рослини 51941 (10709-53 СММО збільшувалося в ході наливання зерна відносно КТх7000.
Головним чином, СМ/О в ході наливання зерна і вихід зерна позитивно корелювали при використанні комбінованого набору даних від обробок НО і ГО 3 генотипами, які використовували більше води і продукували більше зерна в умовах ГО. Однак взаємозв'язок між цими параметрами не був дуже високим. Також конкретні рекомбінантні рослини 591 відповідно не перевершували за виходом КТх7000 в умовах НО і 10. Див. фіг. 55.
Приклад 24
Аналіз генів ОТІ. і РІМ
Коо) Аналіз ОТ.
Дані про ОТІ підтримку зеленим отримували від 7 випробувань (Сгавіа еї аї., 1999;
Наийх тапп еї аї., 2002; Кебреде еї а!., Тпеогеїісаї! і Арріїєа Сепеїіс5 103:266-276, 2001; 5ііпіпмаз єї а!., Тнеог Аррі Сепеї 118:703-717, 2009; Зириані еї аї., Тпеог Арр Сепеї 101:733-741, 2000; Тао єї аІ,, Тнеог Аррі Сепеї 100:1225-1232, 2000; Хи єї аІ., Чепоте 43:461-469, 2000). Із 7 випробувань 47 індивідуальних ОТІ. було ідентифіковано і нанесено на консенсусну карту сорго (Масе еї аї.,
ВМС Ріапі Віої. 9:13, 2009). Там, де оцінені довірчі інтервали (СІ) для ОТІ. для однієї і тієї ж ознаки перекривалися, ці ОТ. групували в мета-ОТІ. Таким чином, було ідентифіковано дев'ять мета-ОТІ. для підтримування зеленим. ОТ. для тієї ж ознаки класифікували як окремий ОТІ, якщо їх СІ не мав загальної області і середня відстань між ОТ. становила менше або дорівнює 15 см один від одного.
Статистичний машинний аналіз із навчанням (ЗМІ) ОТ. (Ведо еї аІ., ВМС Сепеїйсз5 9:35, 2008) проводили на наборі з понад 500 записів у випробуванні руї чоловічих рослин сорго
РЕБОІ. 23 ідентифікованих ОТІ. з імовірністю «0,05 також були нанесені на консенсусну карту.
Аналіз гена РІМ
Проводили пошук всіх доступних генів РІМ в рисі і Агарідорзі5 через МОВІ (м/млму.пебі.ого).
Всього були ідентифіковані послідовності для 9 генів РІМ рису (О5РІМІ1, О5РІМІТЬ, О5РІМ'Іс,
О5РІМ2, О5РІМЗа, О5РІМЗЬ, О5РІМ4, О5РІМ5, О5РІМО) і З генів РІМ Агабідорвів (АТРІМІ, АТРІМ2,
АТРІМ4). Всі гени (білкова послідовність) піддавали пошуку в ВІГАБТ проти УОЗ сорго (м/мли.дгатепе.ого) і було ідентифіковано 100 найкращих результатів. Зіставляли оцінку в балах (величина 5: показник схожості для послідовності запиту з показаною послідовністю), величину
Е (імовірність того, що випадковим чином існує інше вирівнювання із схожістю, більшою ніж даний показник 5), 9010 і довжину гомології послідовності для кожних із 1200 найкращих результатів. Взаємозв'язок між 4 показниками аналізували і показник 5 відбирали як головний показник для оцінки імовірності схожості послідовностей. Після аналізу розподілу величин показника 5, було виявлено З категорії показників 5 (21000; »499 і «1000; «499) і був складений перелік із 11 генів сорго з показниками х»499 (тобто в перших 2 категоріях) (таблиця 8).
Таблиця 8 зрО29029210| О5РІМб |"схожий із білюоом О50990505400" "схожий із можливим компонентом За ефлюксного переносника
ЗрОЗа032850| О5РІМІ |"схожий із передбачуваним неохарактеризованим білком "схожий із можливим компонентом 5 ефлюксного переносника "схожий із можливим компонентом б ефлюксного переносника
ЗрО49028170| О5РІМІ |"схожий із компонентом 1 ефлюксного переносника ауксину " "схожий із можливим компонентом 165 ефлюксного переносника "схожий із можливим компонентом 4 ефлюксного переносника "схожий із передбачуваним компонентом 30 ефлюксного переносника з0Б109004430| О5РІМІ1 ауксину " "схожий із можливим компонентом 1с ефлюксного переносника "схожий із можливим компонентом 2 ефлюксного переносника
Порівняння
Із 11 ідентифікованих ортологів РІМ, 10 (90,995) вирівнювалися з відомим ОТІ для підтримування зеленим. Тільки один із 11 генів РІМ сорго (56039043960 у 5ВІ-03, не вирівнювався ні з одним із повідомлених ОТ... Із 79 нанесених на карту ОТГ. (23 5МІ--ОТІ і 56 з літератури/мета-ОТІ), 30 (3895) вирівнювалися з ортологами РІМ.
Приклад 25
Аналіз РІМ2, РІМЗ, РІМА і РІМ5
Джерело підтримування зеленим ВТхб42 (В35), і практично ізогенні лінії (МІ), що містять 91, 5942, 594 ОТ, а також протиставлювану старіючу лінію Тх7000, вирощували в кореневих трубах в теплиці.
Метою експерименту було вимірювання рівнів експресії генів, які ідентифіковані в даному описі як гени-кандидати підтримування зеленим в умовах хорошого доступу води і після застосування до рослин стресу у вигляді засухи, щоб побачити, чи були які-небудь відмінності в експресії підтримування зеленим в порівнянні зі старіючими рослинами.
Експеримент поділяли на дві частини: стрес при ранній засусі (Приклад 1) і стрес при пізній засусі (Приклад 2).
Результати для стресу при ранній засусі представлені в таблиці 9.
Таблиця 9 ід ОТ.
ОрРІМ2 5роЗ9029320 О5РІМЗа Кандидат 5ід2
ОБРІМЗ 5р039032850 О5РІМІ Верхній бід! ОТІ.
ОБРІМА 5р039037350 О5РІМЬ Кандидат 591
ОрРІМ5 5р039043960 О5РІМб Нижній 5БюЮ!1 ОТІ.
Основні відмінності в експресії цих генів РІМ узагальнено представлені нижче (таблиця 10 і фіг. 57А-0).
Таблиця 10
Відповідь на УУО Диференціальна експресія
МУ: низький в МЛМ: вищий Тх7000 проти ВТхб642 і 5191
ЗБРІМА іо пах, високий в Нижча експресія В порні длилят З |У: низький в в більшості УМО: Вищий в 8191 і ВТхб42 проти ТХТ000 листках, високий в в листі, стеблах і верхньому корінні (фіг. корінні 2
УМ: високийв ММУ: вищий в 5ідг/ВТХб42 проти ТХ7000 листках, низький в : г. ПУЛ ст, Збільшення в в стеблі і корінні (фіг. 3)
ЗБРІМ2 корінні 2. І В . . (кандидат 592) ЛО: високий в корінні, зниження ІМУО: вищий в ВТхб42 і в меншому ступені
І - |в стеблах в 5ід2 проти Тх7000 в більшості тканин, листках, низький в : . лий за винятком старого коріння (фіг. 4) корінні
СЬРІМЗ сомежене. сере Обмежена МУр: трохи вищий в ВТхб42/591 проти р ред відповідь на ММО |Тх7000 тканин
УМ: високий в - |Збільшення в МЛМ: Вищий в 51 (і в значно меншій листках, низький в с, що корінні корінні, мірі в Тхб42) проти Тх7000 особливо у
ЗБРІМЬ5 ри - відсутність верхньому молодому корінні
Мр: високий в . й М - с. пистках низький в ачних змін в Мр: Вищий в 591 (і в меншій мірі)
Й листках ВТх642 проти Тх7000 в стеблі корінні
Перспективні профілі були ідентифіковані для 5БРІМА і ББРІМ2, 591 і да, відповідно.
У обох випадках експресія цих генів була вищою в лініях підтримування зеленим в порівнянні із старіючою лінією у відповідь на дефіцит води.
Ці два гени РІМ продемонстрували і відмінності в тканинній специфічності. хОРІМ4, головним чином (серед всіх умов) вище експресувався в корінні і стеблах і менше експресувався в листках, в той час як БВБРІМ2, головним чином, продемонстрував вищу експресію в листках і стеблах і нижчу експресію в корінні).
Фахівцям в даній області зрозуміло, що аспекти, описані в даному описі, допускають зміни і модифікації, відмінні від конкретно описаних. Потрібно розуміти, що ці аспекти включають всі такі зміни і модифікації. Аспекти, описані в даному описі, також включають всі стадії, ознаки, композиції і з'єднання, що згадуються або вказані в даному описі, окремо або в сукупності, і будь-які і всі комбінації двох або більше стадії або ознак.
Фахівцям в даній області зрозуміло, що аспекти, описані в даному описі, допускають зміни і модифікації, відмінні від конкретно описаних. Потрібно розуміти, що ці аспекти включають всі такі зміни і модифікації. Такі аспекти також включають всі стадії, ознаки, композиції і сполуки, що згадуються або вказані в даному описі, окремо або в сукупності, і будь-які і всі комбінації двох або більше стадій або ознак.
Посилання
Нацхтапп еї аї., Тлеогетіса! апа Арріїед Сепегіс 106:133-142, 2002
Непдегзоп еї аї., Ливі. ./. РІапі РЛувзіої. 25:111-123, 1998
Неплеї!! ег аі., Амзітаїїа Іпі. бокяпит апа МіПеїх Меузві. 38:1-9, 1997
Лао еї аЇ,, Маїипге Сепеїйіс» 42:541-544, 2010
Логдап сеї аї., Треок. Аррі. Сепеї. 106:559-567, 2003
Казвіумарі єї аї., РІапті Рлузіо!ору апа Віосвпетівзігу 44:152-157,2006
Каззанип еї аї/., Енирпугіса 72:351-362, 2010
Кебеде еї аі., Тпеогеїйса! апа Арріієд Сепегсйсз 103:266-216, 2001
Іеузег, Сиптепі ВіоЇору 16:54242-КА33, 2001
Масе есеї а!., ВМС Ріапі Віо!. 9:13, 2009
Мапзгспваді єг а!.,, Еипсі. Ріапі. Віої. 33:823-837, 2006
Міга ег аї., Маїшкте Сепеїгйїс5 42:545-549, 2010
Мотіоск ап4 Наттег, ./. Стор Ркеовї. 2:265-286, 1999 /Рарапоу еї аї., Тгєпах іп Ріапі 5сіепсе 19(4):170-177, 2005
Раззіочга, «/. ливі. пі. Артіс. всі. 43:117-120,1977
Зб
Апагаде еї аі.,, Стор сі. 42:1173-1179, 2002
Ведо єї аї., ВМС Сепегїіс» 9:35, 2008
Вепкомха еї аі., Сей 115:591-602, 2003
Воїтєї! ег аї., Скор бсі. 40:1026-1037, 2000а
Воїтеї! ег аї., Стор бсі. 40:1037-1048, 20005
Воїте!І апа Наттег, Стор бсі. 40:1295-1307, 2000
Саттаго ег аї., РІаті РбузіоЇорду 142:254-264, 2006
Сігізсорбег е!ї аї., А иві. ./. Артіс. Ке5. 59:354-364, 2008
Стаса сеї аі,, МоіЇесиіак апа Сепекаі! Сепегіся 262:579-588,1999
Еогевіал апа Уагопо, Ріапі Рнухіоіору, 2009
Епіті єї аї., Ситтепі Оріпіоп іп Ріапі Віоіору 6:7-12, 2003 бат ег аї., Іти. богтяйит апд МіПеї» Меум/5і. 43:63-65, 2002
Наттег єї аї., Анмхі. ./. Артіс. Ке5. 48:649-655, 1997
Наттег, Артіс. бсі. 19:16-22, 2006
Наттіз єї аі., ./. Ехр. Вої. 58:327-338, 2007
Кавіоне еї аї., Ріалі Сей 13:1683-1697, 2000
Кедду сг аї,, Еирбпуйса 159:191-198, 2008
Кеїіпагй: еї аї,, РіІаті Се 12:507-518, 2000
Козепоуу еї аї., Артіс. Шаїє" Мапар. 7:207-222, 1983
Задгаз апа Соппог, РієЇй Стор» Кев. 26:227-239, 1991 брапо єї аї., /. Ехр. Во. 54:1415-1420, 2003 5ргіпрег, Магике Сепегс5 42:475-476, 2010 5гіпіпхав ег аі., Гпеогк Аррі Сепеї 118:703-717, 2009 5иМибидві ег аї., Тпеогк Аррі Сепеї 101:733-741, 2000
Тао егаї., Тпеок Аррі Сепеї 100:1225-1232, 2000
Тепкоцапо єї аі., Тпеок. Аррі. Сепеї. 85:044-648, 1993
Тигпег, ./. Ехр. Вої. 55:2413-2425, 2004
Уап Оозгегоп есеї а!., Кієїд Стор Ке». 115:19-28, 2010а
Мап Оовіетот еї аї., КієЇа Стор» Кех. 115:29-38, 20105
Мап Оовіегот апі Наттег, Ріє!4 Скору Кев. 108:259-268, 2008
Уапв еї аї., МоЇІесиіак Ріапі 2(4):823-831, 2009
Хіп еса)!., Ріезіа Стор Кез. 111:74-80, 2009
Хи егаї., бепоте 43:461-469, 2000 2Непа егаї., Ріапі Вгеєа 128:54-62, 2009
Claims (5)
1. Спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка використовує воду ефективніше, ніж не модифікована генетично рослина того ж виду, причому спосіб включає введення в рослину або батьківську рослину генетичного агента, який кодує локус 591 або 51д42 з сорго, який асоційований з фенотипом підтримування зеленим, який включає перемикання використання води на використання води в період після цвітіння або збільшення засвоюваності води в процесі росту культури, або збільшення ефективності транспірації, що приводить до збільшення індексу урожаю і виходу зерна в умовах обмеженого доступу води.
2. Спосіб за п. 1, де локус ЗЩ1 кодує білок суцвіття в формі шпильки (РІМ), вибраний з ЗБРІМЗ, ЗБРІМА або ЗБРІМ10.
3. Спосіб за п. 1, де локус 51942 кодує білок РІМ, який являє собою 5БРІМ2.
4. Спосіб за п. 1, де локус 591 кодує білок РІМ, який являє собою 5БРІМА.
5. Спосіб за п. 1, де генетичний агент являє собою область геному рослини, вибрану так, щоб вона мала конкретний профіль експресії РІМ.
б. Спосіб за п. 1, де генетично модифікована рослина являє собою рослину сорго.
7. Спосіб за п. 1, де генетично модифікована рослина вибрана з пшениці, вівса, маїсу, жита і рису.
8. Спосіб за п. 1, де генетично модифікована рослина вибрана з абаки, люцерни, мигдалю, яблука, спаржі, банана, квасолі, чорної смородини, кормових бобів, каноли, кеш'ю, маніоки, гороху баранячого, цитруса, кокоса, кави, кукурудзи, бавовни, фіги, льону, винограду, земляного горіха, конопель, кенафу, лаванди, манго, грибів, оливок, цибулі, гороху, арахісу, груші, проса, картоплі, рами, рапсу, плевелів, сої, полуниці, цукрового буряку, цукрової тростини, соняшнику, солодкої картоплі, колоказії, чаю, тютюну, томата, тритикале, трюфеля і ямсу.
9. Спосіб за п. 1, де фенотип підтримування зеленим додатково включає фенотип, вибраний із збільшеної пластичності архітектури листяного покриву, зменшеного розміру листяного покриву, збільшеної біомаси на одиницю площі листка під час цвітіння, вищої ефективності транспірації, збільшеного використання води в ході наливання зерна, зниженої продукції біомаси до і після цвітіння і уповільненого старіння.
10. Спосіб за п. 1, де фенотип підтримування зеленим додатково включає більший розмір зерен. Хвіхінх «Є |. ОН Ес ня ДО МОЮ ув и си ж о | Ве о: дою ода НН т - ж ей нан в 5 35 та 128 ча їво та 20.0 Кількість стебел па ми
«Фк.
С ВВОдЮ жо но Н С очам мен Н с ВК: Б ПО « : Ко ж й певна а З ВІ і Тож ; Я як с З ФИ Ох ОО Ведення я - Й Й й й М КТ ЗАВ Й ФО АВОЮЮ ря п В Ко По ня ОТ КОН Ки 7 КЗ є | ие ща А КУ ОВ Н х . ЕК Я По КАТ кі МОВ й" АК . хо У кт я пи ня Те МН НК ЯН раки У іх - пен ПО о ОМА дов о - ЗБ в ше ПІК сема ОН т пе ци ну й х , Го І В КЕ оно: ВІ і БОБ Ж ши фани ВО Бо ЗВО ре є: Б Б ВМ ОО ее ДК нов В г в М шо в ЗО ше с Я мех вк он МО ОА 2 еВ ОО Я о ОВУ ОО зо : ЕН С о 15.00 20.00 зв. ов зо Жількість сп х з ня Зою жість стебел на м при А :
Фіг. пня І поновив поповнив опо в попити ововввнник Тачне квотуван ру : тування и Е і Е ! ГОЮ деку , ! НЕО Ще он сим кан ви ! ! р Б о емо те А і ід БЕ піде. нки ко де УК ся А ОО і ж я ее ще по В. «КО о ИН ЗВО ; іх ХУ Сей тв КК их и в ок НК І СНІ ' 4 Пи НН А пр ззтучі ку - УДК еВ ХВ І Ж яю ів д Біевке хущивня кю Високе киці в НВ ПО ОН одн ВВ ХЕ НОВ їЕ Ко КЕ ОБОХ с ВН в они Ха І Ж зво сх З ШЕ ОН ще оо о НО КО ши У оо НУ КО СХ ЗОЛЖККО одКх усна но Мо Н КЕН що а ШК. МКК щи: ВУ ВК У б З дО. один вени МИНЕ ВАХ В КМ ни ес ки НН ВХ БО МНК. г Ж ж оф У Б й В р АС ВОК акт еВ. тонн Я МВ ТОН на Ко; Ват СА я в - с ! Ос с, ЗБОНЯ я СВК зе СВК ВВ ов звів я в! КЕН В й їх ї шо но В МОВ Же ЯК МК Бе св ВЕ. Ії ірвооя ОБ, ха ВІ НУЄ ОК ВЕ 0. й ї Ж ою и и с В 5 тиф а ве ее Б ВЕ МК КІ ПО ша З Я У ВО порок В р ме МН Аа жа я о ! пе В НК й ВК ЖК Я і ПАСКА Й і ША: Я я шо а. я І і здо ОІВ ОХ у НА БОЖЕ Ж ня р і ' тю І НОВО "В ще ще еВ я Як: ЕН: Н мо. ОО В КО ШО и и печі же ний ий ' нини кияни Фк Ки Я Ї
Фуг. 3
! сен, і Зв А і Е Н Н ВЛ денну му т тк гетхдври кол я ! и о НЕ ох ЗЕ
РЕ. 0 і НК ПИ КОКС: ще ЕЯН а НН ши щи Ж Я Я ХУЙ бот. ду ОК 4 два Мой о о пи КН сов сим о Бе еВ те Ус З аа й 3 і їх ше и Шо о ОК і іх ши и ЯК: т і ОБ нова з ЩЕ і іх І. ВШ я о па че У вБш шо и нм й КОВО іх г: ВК УВУ ЖИМ 0 со х ; СошНЙ дн ОКХ я ши шо ше ОЖІ К о їх СО ВК 0 пе р Я у ди 0 Ма Ж ВК ї ре БО: З Б сек Ве ОВ в ши Б 5 с - М я ш аю ШКО А хі ЖБК ОВ В Бех В: ВИ Ві ну - ШЕ їй ув Б не Бе 0 ЕХ а Ку Мо ВШ сла ЗБИВ ОМС ИсВЙ й ; ТЕМ нюжег ей зеове 0впуі ШИ о Бевотнп (низхідний порядок) «Фіг. Я унісон пропооосоосопюосоготосооповосовооссотоосстеоооскоТооотТоотоососнор кн вотрногенкннклнй, і І і ' , ва ї Н ке Ге сохне І ММ яті НО ТТ ! ой З хм Вемша о и у: і МЕ М В у В ВВ Н БО лов а На и тео о: ВИ УННААХЄ І ово нен Нв с В ов В ИН соні ШІ беше5 НН
КЕ... ВЖю рен бе ко МИНЕ НН: Ко ки Ой Я Кк и З ДЕ: ї та НАЕК КЕ те З ЯК З НКУ, В Я КЕНЕ ТЕН ГА ВЕ кт. ВОНО шо ВВ оо Б еВ її ЗЕ: і Е З І ш АЮ я Я До КЕ і; УНН НІ) і ЗАВ ї і щ Ер ОМ С АВ ІТК хрін В ІОВ КО й я ІНН І ЧЕ: щи Ї РЕ КОВО г УВК за І и ОНИ : г ЛЮ ДУ ВАНН Нв Бе ШАТИ Ів : І 5 пе НН в и ве НН р ооо ВИ ХНН я я ПЕН тво НН ЕЕ Не ДОК: АК ВНЯН ЧТ Тр ТЦ ВЕН НН БІ ОЛОЮ Бей Ах ІБН ВАК НО, Я сх веде КІ НЕ ЗЕ, Ж я у мив тегу Ви Кох ВОВК М КО те Я канви жк ЕЕ Мак а в ба ве ВК х ТК Я ре Ви А: АЙ Ще в ООН вежі нн КО ФМ сс тн нн Ж озуу ел нн ' іенотии с нисхідний зорядокі У оючдлллттллянлкчая Ана А АААААААДАДААААААААКААААААААААААААА ААААААКААААААААААААААААДАААААХ АЛАНА АААААААААААААААЛАНААНЯ:
Фіг. 5 піккпадяндтетт сн чкяячкттннк п нн ХА Що сети ов ож а и Аква еорован ек, З ЗУ ПО Ки ВХ :. АВОВОКОВЙ КМ шия ши С Ду: "АВМ Ка й ші янв НВ Б У КВ НН КК ЗМ зт її ЦІ ї п . . ою я т НН? ТНК У ах і. іа а пн Ї ЯН ж ложі ЗВУ нн НІ НН, І овю Гр ЯН ву Его І НБН Кк нн НО, Ще БЕН ї ши НН ЕНН Е Б УННаВ НОМ ин вна УНН аНН ій З ою БЕТА ЗИ НН и ї СД Є. МІ ЕКО ІЗ КК С ЗНУ ВІКОН ВН СКК БЕН ВН - Ва Ве ! Її: НН ІВШННЕЖМИІКІЯ о, Е Б БЕН Ж ІБН нн пан ВІ НН поні НН НЕ ке ЩЕ ЕВ НН ї КОН НН МНН ті шо НН, НАННЯ КОМЕННАКВК АКА НЕА ЯКА АКМНАКАВАНИК ча ВЕЖ иЖекИ Ви ПЕК: МІ м ни уз тювтя мм я В; 65 В ЕМ І ТОЖ 7 30 55 76 1555 25 93 31 35 37 53 ЯЗ 46 й іГеногноу б знеманнй порздоаха Фе т ОН іх: С. ЗНраех хи Ме Е Ше ее и се 0 0 й 5 В і Н о Ж. ву КО о. Н зву ЗОВ океан МОБ й і Н т В ОН КОМ кисні ж В Фо ббоююінико 00 бюмеюшеню Шев ее Я й і тож о ЗО ще ВИ Як: Я о я сей бю ЕК В с 5 щі своя а Б мой ше я і ох й хи Ж мо: ке ША. ки КЕ й се Ї
МЕН. ЕЕ "Ор В й й же 5 Ж НОЯ БВ 5 СВ її нон, ЕК Ії й її Я ан ей ек я БОНН Жейе ж. кое жу и и В: : сою око с свВВ и меха ох я . А мя ков аву м ! : КЕ Меу 7. око МВВ Зк З Ес - МК. Ка й : о у ай й й я яя жа з : Я СИ Б : ; В Й й я я ее КЗ й: ! з КХ я і іежтиеівнаюоденв норядююр о 11 З - дФнг.?
Дт нт ві ка ГО Вжоке кун : У у 1 Н пи , гзучучінкя ох мех го ДЯ оо и я ! : х імен ок МОЖЕ куп иняЯ З Як 5 Мизьке КУЩІННЯ 5 і КЕ; нен ВК ІКОХ ЗИМА ооо судив с Мово с ово І ЕОМ зав ВОК СОМ он КВ ван о і РОЙ Ол вороеєковв о НН 5 п ЕВ Б ОС ре вах о ННЯ в КН Ко ДЕКО «У кВ 20 КК ро й 5 а НО. ве в а З «З За МЛ ОХ УК ЗВ Хо ОВ сок Ко Ко Он В В ОН ВК ВВ КУ 7 щЩ І В пок НЯ ТОЙ 2 ПЕК МК ВВ Н Мой 1 НЯ уся КК УВВНЯХ хОКоВ б. . У УМО Я і ж ТЕ с І ВК сих, КО дим п Ех шт І ду Ір о В фі в'я М в Ве ох де а Шо с ВЕ: Ж о ! З за ВЕК о «М а ро В НВ ов З Туя КО: ОВ Н і і, Вк На Но ВИ ок В ! в І ВК КО КВ. сх ВО ще ЕК СУК. В і У а І ВОМС 8 КУ уки -- ДН М У Н Мт ДВ ВК и НОЯ кутки НИ Мох дак Н ши о о МН їв МК -Вко ШИ НН ше | і ША М си: й В В ве яю щи В 0 В ОН с КН и ОМ: ША а і: НН о: Е ни о ос ше й а В за МОЖНО В М - ВН ВАВ ДК: ЗА - Й й Би ЗХ НАННЯ. одоюЯ. ож. МЖК» Зодояе. жан ОЩ» я Зима ог Мамі Ява ме вяо0ж0м роз . Й й ТГевотни (низхідний пирядожі п сруг фік. 8 з плн чно тн ененнетннння, ООН кодовою ОО г КН Н му я п нн : АВ р ТАТодо ПУЛУ Ми а й ЗОН що Нове вве НІ 2 и КВК Женя п АНА и : НУ НИ НЯ пк ВМО 0 Ж цьо на а НН сп оте Ве КОН Ши нн А ВК Пе ми ша кн 5 ОО Ж за НОЮ НН ех оо В ВШ ОКОеЮ Коко ди Вик ннн Не Н ШО Б Но ве под на НОЙ -Я 5. ОО НО я ПАНЕ С ВНЗ СК ОА ЧЕ М М ОО бенптеетвх а ша п ВИН ЗБ Ми і ни НИ яй ж «А хх ПИВ : Коша Во Во ИН КВ ИН ІОВ фемосудуюттттт КК ков он їх Тих Ж пед ве УА ВО ООН фососожетєю т ти ВВ те НО оо ЗОВ оон ИЙ Ж НК ОКО ВА тет в ов Й Не М аив ОД НН АН о пок МО око М с с ВН ЗИ Н ЄМ УМО НЕ о ТО Н Н КК Кк ЛОМКНИ КИ о ВВ м і Н ї а БУМ М сн ВВ З КУ: о Н я У у і і воно вв вою І Кількість ли шк
Чнг. ЗА пи мож оо вкюамо го. ! Н 5 тт НИ м АЕН ї : хо Кік АВ УМО я зам Н нон и ОМ Кай а Мова Ух КК В Ок я оре ШЕ її г» М оси 000 МН М и Кан ОУН : НЯ ее тоЮє я я у ІК ДА ЗХ і ИЙ ; ОК ОН в СО Ноя КК со КВ ВК НК КО Кк. М ЗУ кох ХВОЯ ! ї ді ЗВО ОВК и НС: хо ОК В КК В С: : Ка ПО ОВ ДУ Зх КН ее с З їх НІ. Я С 15 ПЕК КО КА КВ Мн МІВ МО НН СІ Не ОМ с. В МЕ М Н Шо а ННЯ їв Ом А в КІ нею о М УМ Ку ї Най МН с и В і їж МОЯ ОЗ оси: ОМ Я УНН Ї іо КО 3556 ММ ел іш КОХ ОЕХ КА ЕК Кс СХОВАВ реД и ВЕ МИ НУ а УМ окр МО ех тей і ОО ПЗВ ЗО ОВ ВИВИИ М Еш ек 00 0 ШЕ ШИ Ха С о о НК : жи жи В НН В и а В В С З 1 гі» здуу мхуечя ї ! Кількість дистків 24 оч же
Янг. В
: і : Н ; Н 0400 мероохувтттюю х о Н ї ТТ ся М дО ТАЖ СО Н і зва 1 ще ЖК ас НК щу ЗД оВИ, ВО Н Н ЗБ хх Я ШИ о вна С ВИНИ ВКМ і ин у З ЗВ м фон ! ней ва М Кр о вх АВК : Ж пом еі ху то ЗК Ох со вада Н ІЩЕ ОДИД фену тити сов де КК ВОК кю Н р У ЕЛУ ОК А ПВ МАК, ЄМшнн ! НИК о ик В, ! НЯ КАН М йо ШОУ УжИХ мих дея з ' іш 2 воскова С нм пігдняяяц яння Н НУ о и ат У В ИН Н М їн 0 НВ ОВНИ Ш ІМ ХХ МУК Вей нн ВК МВВ нон тя птн В Н ШН КО ВА ВЕ ВИН: ОНИ З ЧИН: : іш ин и МНН» пс хо НАНННь СЛ Н Ж оз ДН НН В НКИ Н ' ї-! МО мм в Вт і НК КИТ ОО ОО оо ши У ! 18 че НО ОХ ОО ее Я го АНЯ ! 1 55 НК сенсу Он КАК хо нак Кант В : Н ПК и ВЕ ! Г пошана ВО ХХ ща Код ик о Н Н І ОМ КК КВ КО зних З Н ; о ТМ р а са Н Н тов С НМ НН у ВН ї і о: ЗДО В КЕ ВЕ: і Н 3 з ; Я - ; І 3458756. Й Кількість писк і Мдькить пики Н нич аа а а а і а В ВО . м ФС : попи панни ; ' о дб пігмент Е ЩЕ 5 з но нн Но Екон НН о А о ОН ОХ ї ко пе ТКМКХ ОДНЕ ке аОнЯ о ХК Н І ж ": З ХВ их ди Б А Н од в З Я в ОВК Н НАШИ Ов ах ох У Я дит 7 у: МИ Н р Ки тн нан о имоозни У кодааня Хе Н НУ КИМ МЖК ВЗ Кс НОМ ВК : РЕ ооо ах м СВЙ «сдьтх гТ МОЗ ТОВ , НЯ КИ п НН Ве ЗИ Н х ЧИ пе ОНИ ШЕ, ЕС Ася . Ве Я ; КОЮ фон ке В Ван ях КК М ЗИ у НУ т при М МК, з КВ ДІ Б ; ЕД МКК В Я М КВ ТКА ; ід «ПОХЖНАХ КО ву ни он КО ЕК ! Ще ов ЗЕ. ще о клі В ОК ОВ З і ; ще ЗВ ОВ и Ш АЛУАВК В : їв чех ХХ о МО оно КВ: Н
Н ж. ЗНЙ З: оо НН НВ АК НН ЗХ ли й 2 ЖЖ КО я Н : Ся Ж . Ен ас УМЖИЖУТИ ВМ АВК І НЯ а о а ЗНО МЕ Н НУ КОД и ож ЩО Я 3 На ОН а ОВ Я ОО А ще Н і-е в. ен я КД мі В ВН о: ї і се ооо ДЯК хи ОК о зано Н : п и сх ВВ Зо ос ОВ : и о я ЗОМ ОК Кр УЗИ Й Я В ВО вл В і 8 ОБУ ЖК ок ОК ВЕК ЗОНИ Н : а З у 5 і ' чу Н і з 23 3 3 578 ви: і фер шоу сині і Н Біпьжнсть двстЖіВ Н о а а по в 3 в
Фіг. ОО пор пою сумне совет Е А о А ОНИ Я ро р Я ЯН КЕ нік ни ВК томи І НЕ РИ о о масо Брвс! і СБ ака поет ОХ ов Сх ЗО пи Я Сука І о о со В -і Н і НАМ Я БО ВЕ Н їх ДО ня ОТО и НН Н 1 щ Б ж ОКУ Ох и і рак ЗХ дюбаедіки ЯК 1 ш 9 мон о НЕ Ой є щ С ЖУК ту Ух ОДИН Н ! їй 2 - КН ДМК ХЕ и ФО МУЗИ ОС ЯН ї НЕ 2 о ТТ ОМ Е НУ М З лк ТК МИ ху СВ ОКХ мех Ки ! Н я Кв «КЗ - ОНИ ен НК І Мом Ку УЗ ух пн МОХ и Н В що НН 15 «03 БЕК у В оо і ро В НК: Ж ри о КО УОЗ Ку Н ї- о в і - 5 «ВАХ ов КВ Ши, КК их гм М р За ов т НИ Кок р Ас УК : БО Ж о нн п в еко КО В С АОС У Н і Н х і ! 4 з х у 4 і їх 5 4 5 6 7 8 85 103335 13 34 5 Е : 2, НИ Й НИ Н Н Еп»Кеєть дестТКе і і Н Р Я фр. 10 оожкляжтюжнчнк гос чжжкжнннжно шо оохечнжжлнь се рас: миамв пЕсзечен ті в фен УЖ ТМКА м. У ЗБ й ф-т КБ ОВ ОБ ми Ше -а о В. гля що Мох "В о - ех СК Ко сор ря ША : що 5 ше : нео Й питні зву Ех КК СО не шик ро о. х їй п 5 ООН кат п: вк сх оту Х шен о ОК ше ТЗ НО кров що У УКХ ОКА ОК ше щу ше с Мо фр» пе о ЕК М, о веНШя ОО. Ж ДК коню нтнсті ше ва ; я - ст се КО ОН ЕХО пи у вух: В і М Ше КЕ КЕ Кок о - скління ЗХ ТОНУ ОВД Ян ШК Ух ОХ о т ія тю МАМ ОХ ОВ еХ Ко М сани Пю-НО, : со я ККУ КК В МЕ х -4 з т ло еко ж АМКУ Я ПОКИ А р: - а М ня сука и п - хі м еВ з КК М д ск : о - КО в в я а
Е в. ОК. ХК се ВІЙ т у що пт ово ЗУ Зник МНК ск : З ок ПЕ Нео Не жи КВ З пежннн . 5 оса МИ ХО !
я . Ох хо Ко и МК УКХ й. НН св ВЕ и вок ВКА МК моля Но. сю шо : МЕ Км ще Ето ТОЖ ! х і Б С БШНН ї й о а щі і15 ій | в ї Кількість й Ш й Фнкнсжея плоттю твою НИ 5 НСТКІВ тет коттое д а не лекцнклет чт КТ АВААНАНАРА Ід тетентени ї Н пескиснючнння і чн уоггеотоововоогоговововооогоововоооововоговоог ласо. : ! й роєкнтктнтеодтве нн покюттдссювюк Н : і К ! ОО ста й і Под ее Ме ПЕ ГБН Ми ов ме и вве . . ле ії в о а У ру Ма. те . п, Вся виш 5 я 250 ще ЗДУ Же о в на Я У Я Медик. ЕК МОН он ; ОО и М ШОЕ 0 З с с пе АСК НЕК сви ХА « оо ОНИ де на вая: г в. МОЖ я о АН МИ У к МУК ех ОЗНА Мов п и їх : о :: не а НИ ЗО Кен ; ш її. оБнкв ОЕВеК се ЗРО У : вв. що с ОК й У о а : 5 і ко. УВО си: ЕВ ЗХ ок нн : | о шо стя о Ма ех З Я: сини х І: КН с А о В Со ЗО В ОЗ пе Мо ОКО х УК ЗХ Тек В. їй : ш ес осн Бу БОТИ клю о ово ВНД й ш ій ВЕ Кк моя ШИ я
5 В. Уже Ех В хх овконн ВО с вин і ших НЯ «5 о ,
; 5. СІЙ пф шо ех Шо ХІД Н й п . г Ви ЕМ СНО Н й 12 3 ни но тк і І! 5 й 15 18 і Н хізвкісї» листю Й | Ш Ів ДВеТКІВ Н панаА НА А Кч АННА АНТ КАНА АААРААААНАААР КА НААН ТАН, ши
Чнг. 13 «їх Н й ЩО уж м кни УК ту ше ши об во ще і КЕ Я . Пн чи ОО Ве Н ЗОВ 2. - БЕХ ОБ ОК ВВ ро ГУ риму: х хх. дет, шина Б ЩІ. з пок З я лк Уч АЖ НК ЛМ МУ ї ; т а ЕН ота в У сок НН Б - і Ти нік кін прищ Ще б вою д т нЕ сксац не ЕК кос р жк оч Ми ор Ох
Ко. ЗК ери Ах пли ОХ ЗХ БИ ри ій в Ко ХМ шо сій сл Ге ТеТОЮЮ й і В ВК я ЖІ СТ СУК ПТ уч ї Б шк с І в ТІЛ КМ ж ОО одн НИНІ в у в щен Ай с в сш саван КО Тен С м МНН нн гово У ЗУ БІ | Що Ши ньо лом ее ОБ п ее: М НЕ с МУ Ме, в и тт я ОО т тн Я ШЕ ОЯ Вус Зах ДОЗ по ПОПИ Ж ОХ з хе Б ОНИ КК ОО НУК Не й а 12 З 14 | в й 15 Кількість я ч щ ВаАльКтТЬ ДИКА валова ввваваннвнавняя і панни нажина АНААААААНАНАМ 7 падала нАнАААНННя сен що далялняк
Фр.
: ау жу ШИ ' ' й й : їде ОСОВИЙ Ші- ше Не Го КАК ок: ЗД п ООН я ві т. с ох Що пежеу кокон Н о зві и У з ОЗ чн ВАН Мені У І с шо й ее м Б ! шо дез Б еко я пу о ре п. 5 воввня Яр. ! ж за пік оз нин КА Кен Еи НЕ РЕМЕД вх яту Бе й А Ми Н хх ХО о дк о КК що с. й. Я. ї Ж В ЯНня З ТІ Ви ЗД ж їж оо ДОМ нин ше т Бо у ни
Е . Ден: ща ТЕО За т МА Н І НИ Нв фло де Ше ОКО УК «ЯК іх ТНИХ Ноя их пп феекутитнинтляя кое ДЯ тн НЕ інн 1 КА: Ж ва о ж несе Кк і ; . Я я НЕ но ШЕ ТК ання це нн НИ влас нн МЕ ЗИ В и лк ЯК вм р УК 1-5 я ДІВ р ОДН ЗИ З К т УТ ЖКХ Седниння Н Хв ДВ 0 Кз ин і ; ; ие а ХК. Би ОВ : р вв пай ДЯ о жена тететненя совка ХК ВВ їде х - ООН сети І Н док ЗО ня Кітті КУ жо гі Н ЕІ БУ с ЩІ мо ж Федик й : ші Я ле І ик ї А м м тент ях ї Й а ; екон й : щ вільні ом для : ден кість листків стеки яТьЖіЄТтЬ жк ів єсаліувного сте і ТКНих повного СТЕХМІВ. сокжжжжккююют межа ж мч ! пАчАААКААААННя т уоакАААДНААА АКА и ! Щш пнжчяАкАлянАКт о ЕЗса «поток ОЦЕ М ОК АК сх ОУН ТІ лу шк р п ЗЕ Еш Ко хх 1 - Ноя В ВВВ МАВ що Ко - ! не З хунтючнянкю БА о ся В с секр . з ке о п Я ВВ и» - Ши З ем лит і 5 ЩО щі ве г. с ще ВО. УБІНИ У МЕМ зи ВХ : що о ин ооо я Ваши З ЖЕ в
Е в. ка З вл де ши і Б МО ЗХ Киеет сов шо й і. ря КК ж. М ікних СК ай Он ї і: ПОКИ и ЕЕ йо ник, МОЙ ОМ ВСУ ОЙ плоска кю рон ше а ої вав р ДО нн в нн ах СОВИ нти ща Ії 3) 5 вот жа ше З ше Ж зві М. Трниеня ше І і Шк БАНК ос. зав х г я ОО хо ен В т и шо ВЕС Я кН : і зу КІ Я сення миши ВН ЗК с ЩОКУ Бан же як й ц Й сом ОО з "Б З Я ї до і НН ПИ ши це щі понжжттннинкічАн Канн а хв АКА КАЛ, пр зх жжжжжжтжя ій і ! ! Й Й З Сп тоже потік отці кл ітькі й і і Алан ААААААНААААА тв неТКВ й долахллмяяят кни порнннннннн т. 1о т пеонесстноотоппнопнопноннн онко кнто пек пнтнанотснсосенютнн, Н аз і і Ву, вудку р тут мет Й "Ві й Довії листки Ох 2 си Жороткі листки Е і В Мо т УМ ШКО АННУ І Есе во мо сне нн Б нн зн ше ве: Ди ве КИ В А : "ЩЕ В ву и ке ВИЙ ї зе АБ кю о ння Я ВО що о а НС « и шин шишше ее НН с ех їх КЕ Я: БА ЯК НИКА ЗНА ОНА ВК НЕ Вк с со ОО ее М вия "я Вес в З В в: ВВ - з ВЕ ЖЕ В. З шва їі прин ре «ву В В «АВ В КО сі Не ди ще Ох Я - З й ВО АОС ВЕОО ЯКХ ОВ До М хе В ЯКУ ЯК: ТО зм в. ЩЕ СА іх ВО, ЕЕ а во я я ши Рош ваз 1. т ж шо а Рон и Я В й у с. М - ори На о Я ЗШ ХВ жов ГЕ с. ЕЕ З ЗВО й ввів нн нн
ЕІ. КІ 4 КУ ІНК В ЕХ. -- КА - Я с Ку «ой С: КН ОКА Ти 2 и ие КН дом ак оАЙ ах иа ик. г а ді КОД ОСИ з о А Ма МИ Ед С ка КК я ре УМ щ Ше ке Ка вх Я кл: як ох ок і: я Аг са Я ще Ех Ф і й : Генорни (низхідний порядою ІЗ
Фі. 15 Щі Знижене викаристаннх води я й яння Ши нн : сив се я ре овй ра Знижеь мівнізкии: У ох ШИНИ ВЕКОорнетання воля Ку одежа У нк; Кох ОА й : ГУ - ЧЕ НИЙ он тврнняй і Ж Ше же. КО ДЕ й ШО і та о: З К г г ун пав х ше ї Ще. З 5 й щі о 7 І нн З Е : ях й що Я Менший розмір У, ян З ї Ще М рослини (519) я і ЖК ль : А енд дднкнднтнння ой Я м лак і ше ки Й пи ЕЇ ше ПИ о є х х. Н р ст. Механізм бхвзькоОге «Механізм МЕМ, іч хУВИВня СА й і чоюзміруУ листю" с- що в й ВЕ ек дики і о Ще ник. | Збільшене | Ж дн з - І я І кни м - «Петенцівч де жувиння й» 0 гзуткієть 1000 Вбієнціая до кувиння Є» й пор р. І Й і ХМ петтУ й те ВИСОКИМ ПОЕМ Ї. джнннлютекужтьнннннннтнни вчи мазки (НО т
Чиг.17
Експерименти ма Же їз КО сту п Бажжкнй стрес, Мизький Ум, «нраж і - кОВСТитТУгВВНа кереднів стрею, серодея рожева с у здатен зриви здаптитняа І: вівеовідь» Да ЕЯВНИ ВНУ . ; кешНИ відповідь ІДНОВІДЬ Х КО кет фоКюсті у Уют аку тут ну УК СО ОКО КОД о у учи нд й
Ух. Б В Я -їЙ тлу г Й твня Дай ой ше хх. до 480005 кокон ово зниження СНОКА В Оргво з їх ЛЮ ОН яко Ж С о в ИН но ВК Вас с Шо в не: ОА ВН В о їх ЗО БЕ ДО ОО КК о нм, ЩО ОН я ЕЗ "ВО о А й с Бе Й КОД Др К КОКО вовк пит кр ВИ В в - БО ПИВ НХ с ВОМ он.
й г. о у не М ду й З : В Бо: ЗА Я КК В кв СОМИ Ка Ж ЗО008 Б ет п ев ВЕ ОВ Е у як: скл ТКУ ВАВ С Ома з ЗО МОХ - Я лани СК ВИ КОН В КК о У Ку ЩО З ВЕ нн КС: ша БУ Сон: В х У ау ВВ - Як: ше: ЗК НИ В с НЕ А о ВНТ С о МК КВаВЙ У т Я Зк МОН г. В КА В я як Ко - ЛОЮ РЕ рн и ВНІ шва НЕ В нш х й ДК жо ке фер і НВ ЗМИВ УКВ ВВ В ДИСК І піс ї яка. У. шк НИ З КО ОВ Ж ДЕ с ВО щООТЯКО Ж ев ШЕ ПЕ ков МНН Ж х В й ШИ 5 ВО сссж еко. ВЕ ВМЕОКН ВЕ доб ВК В нн ВНУ Ба оо Й х шк Вр Ое і рис о о и вис. ВК ВИ не З У о НН Ки ВЕ, да Я З Е оо Ан НА В о В З я ща: 73 ш. б з денс В В На З. МНН ВО: ся ШОВКУ ши пак. 7 ВДЗН т. З ї й о КЕНОЕНЗ я ЯКУ ООН Я СОСНИ щй Ж ЩЕ З 893939 Я ; Ше ї ЕЕ ЖЕ Е , - роя - - Ж - - Гн експерименку т ще їй Фі рення : МАНО рова това ту т кт ; ак. ши он ИВЖН вжи З ші й ЕД КО З ВК Ох с інв СУ ПЕ СТУ се 1 ї пит Ух ЗАИНИШНИ БО с НН оо ЗД свя я Біхое Пс НЕ В х ФДИУ КОХ Х мен ех ВОВК Ах ве "-- зав яр го ПО о І НК й Я 7 ож ЕКОВ у кликати Ку у: сх вх 2 кі 106045 ще ВА о Ж Ой ша по вар о скла В Я А о ОВО Я юс - НН х ІМ ММ і А В В КІ Я М ІН ОКХ В рн т ЩО ен сення ТЖТВЮОЮ. ща ІЗ ес Мих МА у м 2 ро ДУ ДК и о З ш Н нн ОЧИН НО СОДУ Ко я і 5 для ля АВ ово ОМ ОО и УК М сни ; сн В я но УКЯКУ, ш ІНН У Бе КОКО ВО ДН І Ул ОН - Мотрі у В Е.С Енн нн НВК пі НИ Мн и В В Во КИ ме ло НЕК КК ВВ ИЙ сх во п оиааканни А о подши о КК ва Кт т ЗИ НВ КЕ ОО ВН Я ЕЙ ИН 5 ЕКЗ ек У в М А КК ки КА ВК КУКІ дур вені В пон ни У ! : і жк 7 т 2 3 48878 51011515 148 15 ; Кількшсть ДистКіВ і і. і
Фі. 19
; ПК КА нн і , Н Не Висока щільність Н а ЗНА ПИЛЬНЄТЬ Н 1-Х г нижня й : м Ж ос; НН НН Ко во ква оо вх Й Фо х тод хх До СУХО 7 яко; КУМ Н
1 о. КЕ ВУЗ ТОК Кс пл 7 РКК ї ТАЖ 00 ЖК Дно ку В ними м ржитикю ДЯ і 1 Н хи ПАМ» "Ж и УМ» ВКМ а ВН Н ТЕ КОС тдІху іт кВ я ит сту ЛУ дей: КОБЮ Н іш «ля Кос УК ШК М СК и С КА Н ЖОВ веетее в е В ВВК ВС Ще РОМОМ 00 и с В о І ВК 1 ОВО КТК дрон М її ї ОС ОНИ їй сх хо В Ко НН КЕ Н іш сямюв ССО Кн КМ ПВ ГЖООЗНЮЮ десяту тт ее в НС п . Не ше СУД ТЕ ПИТ: З СГ КВ Н 1 РОЛУ о ВК ШЕ іщ МО І ом Ем ре нн Кен кс ВА Н їй ЗОНИ ВЕ 75. ЗК ю ОДЕЖУ... Ж : УЧИ КК ПМД сс АМС у вий 0 : 1 Зони НН СВ НН В: КНЕ МИ Її «ся КИ шк Й «СХ ши АНЕК ОК. ї Н Еш ЗОБОВ ге: ООН Фен ву вне вн кн ння ШЕ ж Ки СНИ хо о а НЕ ВИ : Іщес КО зЮ? . ВЕД МК СН Н з ЖЕ У со. М Й НИ У З АИМНЯ і : ів ЖОЮ прут ВВ нн ГШ я ої УКУММІ Н і М лЕщ КОХ Хо ОКО нн м З дер ФО Я Н й ТК кое ну ЗВ ТИВНИМ Н їх ВОМ Я. хо КИ КК НК ! ГУ 200 9 С В: пп. М СЯ ме ИЙ З Не : В ; : ко А СО ЗХ о і ко Н ННЯ з і : іКкЯ ЗО ЗО Ка ЗО ж яю ЯМ: ТК Н І Пивмна двстка 12 Я ок ща:
Фіг. 20 : і 15 Ввсока хнільність ож зов 105682 І : му з орсраююв 1 ек к ха им Не ОВ Повне З Ред Не я Ро ЕЕМИ МКУ сі: о ОКО Бр Н Ко шен. о ма вд зе ОВК НК Н Н Ж мя еВ ГхЗ КК БОЯ ши щх УК ке отоав Кс су МКК Е! І ВХ в ВИ Пп І ВВ и Кн, ра ще ие ОВУ Ко ст В ВИК ії щ мок Ж В ВХ и ЗО їх Я сон и КОВО ВВ Н : Б і МК ПО Е КТ У Н 15 Ро Он НИ 0 ЖОВ ОНУК Н і й НН КК ШТ Ж ХХ ОО Н г ДА КВК о СО АВ ВЕК Н ЩО ВЮ Бема и мен ' я КМ ТАК Ко СОВИ рр а НЯ шк о ким Н ї КЕ АТ ТОК Я шо Х КИ Жм ши ХОМ ЧН Н Н хе Гу КАХ ОУН о СИ 2 ДК В Н Не КО ХНУ НИ р Жук квОжН ГУБА Ох МОЯ 15 ше о а а о РО 185 зе о В ов КО ВА Й овоч Ж 0 В: ВЕ Н ї ПКУ й у ІМЦ Щолі. спо... ВО Н Н і ОА: - АОС ННЯ "КІ ВВЕ ! їж РОК 2 МЕЖ АВК ЗО і НЕ яв ІОВ ВИ ще ОЕМ - ім А АВМ Н щі по КК т ее Кк с ВЕ і НО і пОХжМОВ й п НИ НН ЗИ Н Н З : а ОКО КИ хиТЖ. М хан МИ полей Н Б т ТІ Се Зх М. или хі як ЕХО: Н сш : пон ЖИ Ох о З г свя с Н НК ті Ех о и ди Н ! - а нн В КН Н о ве КА і НЯ з на зе жі бдоявой о Зоо зЗівою З За. рай гу. РИ Н Н ще п ке ках Н Н Клош зеленого дистя ря Ам і Н ІЗ й 7 ї Зі» Зі чні. хі : Укфахуєугстчухстиї пелет, ЕМ ЇДИ зму ! МВ уИичНЕ Лесхидження СУК ЗюЮ7 рені Н Н Н Я : ж УФК кв тт т т ння УМ м ОККО ми г Ву ли пвввв КК : М ТА Пе и Ти дення М Ну о ВН сх ВН ; пли ЗО о КО ККУ Во ТОНИ Н Ной п ШЕ неї Щи Сай гі І її Ку ру ен ОК ВК ох ревно МИ Н НК То Во кон в ОК. Б Й ЦЕ ЕЕ п ВКФ ТУ ОВ Ім з ма Н СЕ т, он ех А ШІ 1 й Ой Зрвя х, КУМ НН то сов БЕК: : со ВХ КК ММ Кей КВ о вх ВН НИВУ: : НЯ НН АК ВН ВВ і ШИ: Ши мо с ОН: ШЕ НК ОБО З Ах ВСУ ода Бі ВУ МАК о Аа Кх М ро : ЗК Ки и Ки АН: їж т Му В ШТ КОН 1 Не щи и ПВ КИ МОМ ФВ ИВХ ! сїЕ о миши Кекс ЖК ХО ПУ Си ква і НИЗ о що Ач МО КО ООН НЕ їх Я фут нку єн трюк М я дах кн ВОВК я Я 1 Не БІО ях ух ул: М. си т і Ше ТИ АЙ лу г кв 00 В Го ВТК оо шу ЕН пк спек ОКХ Н РОЖООЩЕ фу о ун Хо де КВ У КН ВВ , «до ОА ОО ОО У и ВК ТИВ В хокею На МИ М ВАС Н фя-- ШЕ ОКО ВН УСІ : Н КО КВ В В КВН В : ПОВЗ ЕТ и ПО У ОМАН: : ї КК КН У МК КК Во кВ п 1 Н ХМ А М Ко СИ КИ МАН ТМ С МИ м Ж МОНО т 1 і 8 5 о ОН Ко ПО ОЗНА, Бо АД :
: г. «о щюв щюЗ жо НКЮ м а: : як У : : ут Зо пек ПІЦУ МК Кі собо : Я Полеща зеленого дистя на рослину (ом) Е Наш «Фіг. я
РЕ па ов птн ІК рим ов За пеннтнннтнннннняя Ні ша Сех соти, пиття іш оо КМ ФК тя КО ОО у Не БА ЗВ МК подути ще ОЦ жук ' ІБ але ВО; фено СЕУ В Я Я ЕКО УК: сем денняя ще ИН і і Бр. Во ОО ой кіл ннонн я ОБ ЗЛИчКи -оі р Її я Е ВЕ ПКТ - ЗИ жа Я Еш а гл КВК ЗУ ОКО ВИ й я ше В: НЯ т ння ЕКО 5 дис дл НИ ЗК ОВ Ж: їж 9 ї. ох у ее о ВВ Де Но ВОНИ : Ії жо ОХ се Ок В о ОО КОНЯ ОН не і ї Кр. ПЕ суки МК Б М ПЕКИ ОН Яи Ба: 15 зо СЕ СУ е и кох кан вв у: с ТЗ : іх Я ООН КИХ ЕК ЗЕ Кія ЗЯЗНиХ К ей Ки КЕ Не НЕК МК ТКУ Н ша У с КЕР НЕ п Ж: 1-28 зв ЯН в НН, НЕК. КЕ ТЕ ОВ БУ Ме ! НЯ ЖЕК: ТИЖ ТАЗ ТА КЗ Я ГТ КК Ех Я КЕН хх ти ЯН: ща З ПЕН МАО ЯКА я ТВ Ех ІД КИ 2
1.5 зова Ві ЕК ПТО МИТІ ТВ; С Ж МЕН і ІЗ; З й За Ж о ТИ и, ТІЇ НЕ жо щи ЕН КЕ ік я ї НЯ ее ! 1-5 о Я КОРЕЯ ЗВ зр НН ши рр Ма: може ! б я с і Е ши с се. З Мр ПВ Те: ЕК! Й ча: й БОННІ УНИНЕЕ ще ре Яку Ал ПЕК ие т: і й ХХ 3335 ДЖ НЕ З: о НЯ Зх 0 фИШІ ве і Зв: ЗККААКОКЯ й п ! ання й ХВ ха я ЕК у ПІТИ ІІ ЗЕ Н зм у З їй Яд Жя пах Н плен деяка Гена ЗЕ я я ЗБ па і чялчнчу СОТ 45 48 УДК А, Н сення кннекід «Ей 55 ВВВВя отни (нисхідний пюриле хевеєе ви ре вин ядою хі іх пок нг, 35 питне ' Не пуття Га денний ро 5 І: 4 сеюжтяжяжюяя вва т НІ, вовни їх Аг си авмванй ! Б ак щі. низькиу до сіння І 5 ЗО хх їй дестун во пеня ОК ДЕ Ук ВалелЖн: ши КО З ник пн ЗьЬка пеня Ох З пе щеня хв пиві ї а зов овен дах косу НВ ї Ко їк КОН как со й БЕ СНИ І ї ро ТК: УтОМ КОН я ОК пн знай : р 7 БАК Мав їх й "КК і І ок» 8 ОО Ка М З ЯМ «КІМН ЗІ : НИЗ 253 ОО и Та ЗВО От: ! РОБ ЩО ВК ОО я ля СОМ ЗУ ех ї КО Ух наорто Хономо Кей ЗР хво НК К ї ж, Бе х чн ки жн Су ай ! с Му. поднкчнннннннн еко Ки "8 З ! ЖК щи вк, ок КАК В а Е ра Бо Ж ОКА. ши ис В : Н 5 5 Ох пи Й : т. за А: скани І мм с : Н х МК ме трунух ве яна ОК пі ВВ я ї іо З. нс. я КИ ПЛ о Е І 5Е зо ще що т пера» ех ЗТ рттттеия і Н х Косвони но щі ках ке за ШК ОЗ ях і лен Б мете рош Де» скчикікнння Е ЛО зе --К-хЯ ОК ї щі В : їЕ хв маса ко. ТТ й КЗ ОС "ХК о Н НЯ о КЕ НИ: бок п. 5 Я ТО с ТК В ЕЕ о бе» й сік вп «5 пе ТЕМУ НЯ ОО ки Ще ку шк шк я й Н 2, Ма Ж ЕК Кор о г КО ШК СЗМНН і м 8 Ма ще дек ши ЩО і рих Б сей Й не БО Уевдннин БО С і м ак Не Ії п і за МКККким ЕН о ОО і Н 43 КЕ не З Н І 53 8 шо СОМННК Я С Доба пі з а а нн і птн В ол я х й Ок : лтичнля «І му Зо ! пежкжжжкнх жі сна пизеохві : дич верхні Е шо Е" пнях : хх ТОКяВ З ан она хо ява КІ х ВМ овАВНх я? пня : її й ОО -- - і 5 ОК а есе т ІФ Н дм а КАК ДМК і ре 485. Кок Яра г й . звкух : ІВ Ж МО ек Ще с жЕит : їж одне НО ЗР У КТЬВ ЗК об Ж ту 15 вв КВ КК ко се ке ОК МЕ В й п. ш. я в ЩЕ Ще їх В ЗХ т по дк піккнин Кк о АННУ. ВЕ 5 Н ід Та ВВ а З с ее ШІ З а Мерія ощ с ЕВ і Соя гу о НН що все: ШИН НОЯ ТАКЕ Ко СА ЗВ Ме ХУ я ше СЯ ї : й заснвся ХЕеОих Аве и, КО В ще у Зк Н : ав де сх вх З «ЖОВ МК ох і ще ж КЕ Н Я я БЩня по Б - М с ! Н З ДЕ ТУ У О рек Ех ДОВНеЯ о: ТУР усК ПН Н : З Я Во ЗО КА с 0: : Н ; Ук реооовох КВ СХ УК СОУ ПКУ ОК КИ ОО Н оо Бо КЕ о п. кеВ с і ! НЕ ш- 1 - ро ко : Н ї5 хи Мох МО т Та с Ох сх ВУХ ЕК ЗВ Н Н 58 М КК, ІК. ОО Я КУ же ЗК Ку СК ОХ У Ку Н : ОВ У ОК мБя КО КК я ке Ж пе і Н й рН «ТТ КЕ т Ти СТУ до У Зо к ОН тА Н Ба дошк що о ! : 5 : С п КОТОВА ОН с: ЗИ . СУК по я КЕ ка і Меняня АКА ий ! скік 5 КЗ хх То шиї Н днями Нові я у ПИ гі і 0000000 РюЖЖжнна вне що вл пінні ч ноти пнстхв г межею з ще плн ! жиє Н «КЕ Ян Кк З х пнтнтнтяннюдяиннк підт нннклюляя Щ пепднтклтникня Й пдктчинн реч Е ОО Уде о Гоа о й ши де 0 ОН іде зе шк їх п ще ООН совка пекти НУ З ОО Ах гак ОА с щі і. о се оо СК йо ОО ! ї ек УЗА ЗИ ПАХ У ХО ОННИ ХК. : ! п. о ие СО ее ТЕ А АХУКХ є ' ся і 5 ТО ЗА мив ВМ: СЮ С НИ и у Н
: я. . . й КК еВА Н Н ях Н Су шов . вам ОС ж п ев Ку с 5 З НЕ Кок КК С З о, с І її Е її . 0 КК Ук вилав о ТА МУ, о м ПИЛКУ о УЗ ж Н ре НИ ох ЗК УК пеки Др нея Зо УПАК Е о Ки Уа ІК ПАК Зк й с и: о: | - ЕЕ За ОУН ох Я со, и -
ї . йо ви «де ОХ нед БОБ Н 1 ! сх с о х ОО суне не СО і ЕЕ «віх ла хх Ту СУ ОВО ЖЖ м ю ОЕ «КМУ ; Н Ех З зе 6. я Б ща Ве: о с о - й їжа МОЙ МВ що ОКА що МКеех : їш ХМ т «КХ КОХ ох ОДН о с ВЕУ о ЕЕ рес жех ях ОО еко с т НУ У СИ Я нику СО БХ ПУЕ ОБ МОЖЕ ЗБ є - НЕ та ак З о : 724 Шах дах З я й В о . : нн: хх КВ ока с : Н ТАК ЗУ я т я ЕК ЗО МеВ : : я БО ОМ я х; ЖК ЗКУ МОЛ У ще ! ї А, а ї Є УКХ чх ук КО г. ши Ж М я оЕОХ : Вр ЯЕЗНИ СА секти ШНМ ЕЕ о. й Ка Но ДНУ ОКО ша ЕК ОЖЖ Я с 1 х їх ХМ ТЕО еннтия ТУ ОКО З : ! В 454 вах а ща: щ ! : х ок ВВ а АК КК ОН КУ НИК 322 т УЗИ Я :- Е | ОВ КА их ОО ККУ ех Н г й : р: УК Я Х Н Е ЗУ СИХ ЗУ Н потен «ав Й КА С Е юю юю юю юю ж ююююю ЗБАВ Й й і я дення ни й й І с т піннннчяння й Щ й пнянянаяня : Що й зв отиту чут ' роя Щ для ЩІ дл ЩІ епкучиннння шо я пд : 5 вжи ту з Вон» Ї ї ЩО фен ШЕ. До ЗК се Й " ех ЗШ ТИ МЕС Сея що : она ща Сх ТО МИХ У щ ; ши В є Ви ОДН о ВК Н УЮ удо п м ж "ОО. Мох УЗИ Ч 7 КУА н ТУ са УС В МОХУ ВЖЕ й 1 ' они Б Я АКТИ ЗЕ мя з СЕ : о шк Мо Я ОКО меня КУ мн ке 1 : п ж? поляжлжатя дом. ДН СОЯ еще Ж, ав Н с : Ж нм о ЗИ МАК ди ха о. ВХ ня пт. ух Б ОКУ Ж. ше НЯ «кдд дея КН МУ Уа ва Вддве -к т і в що плн ВК ОО Й «ехо Вон : ї в Ка чн паллкннк ВІ ОМ пет моя з ї з Де КО пи р р еВ п ща ТУ : ОО с я ЕХ, сі м тт . я родах Н ! Ме и У а а а ож - вза сів ОО п о. с с. . о пок й ПОЗИ с УК, ом Н : ВУХ ЗХ ша. о - ї Н З рт днини ТхЗ КАМЮ УК Око и : в ї : БО лу ков 5. ог Бен - св : зх у. ТА НУ яке КОМА ВОК ЗК Я ши а п 1 я я і Н КТ Дос - ККУ и КОКО МЕНЯ ху о Н в - МУК СОВИ Ех МК Н : ї те рН Кия ЗК й т В Шо і ї т 0: ноя ЕХ, о Ма д---3 Н Я не ш а о дей 55. вія . їх й ОВ КК ХХ Я Зо Кох пи, АЙ | Н і зва МО ук ща а. я : - ча о еко БИ ох Тня Й о УС МАЯ. Не х В з 7 щі ОКО Ко МВ Н щ я ОЕСС Н плчунтняучнннтнння зе й | Е плн тн й пенннчненнятннняя Й о Фі. Шо зок піших с дттнннн іти Й діжуеннннннні : ВК : й іо вве ОБ годе Й : пок я зі БЕЗ згуєх І Н Я поТК ух АК дух Кей І ДИ, і ще - СО ЗО тУХ що Ба ОБУ У Н ! ВЯЮ фін щем пд ОВ те " - о і кі Є --- КВ а ж пиюзж Н Н ча пл МКУ Кт спальня вл а мк ЩО ЗК не Я Б ЕТ і : ко Пен ех пак ДЕ ЗоНКУ -« а ОЕ не Н ь ДИ ОО КЯ нед КК й Є в. Н Я ЕК дос М ке вах шегок і ет ща У ОТ КК МА т Її "я п о: я ЗОН. Аа В ! : УКВ . я ее о у Ве 1 В дав ій 0. Ще о. 5 - : Н вд 7 я ж В ООН ХВ. й ' : Банки я с ой М п Б і Зх пи М о 5 Я о п ке СУК КУ ІОВ ЛЕ ОЕМ м. ще Е. : т ВЕДЕ ЛУК т щу них КА у до кн : г й Ен т Б са ї не. ай в «ЛО не ЗДАНІ КІ Н Н ле ще шо х- ОХ ВО й ж : шк ЩЕ ЩЕ ож хо ПК т и ен. а ТуЙ пфАфенмтня ща - дво. ТК йо ЗБ ШОН Я янв зе . В ши : а та др кА м НИ а ВЕ ший о і ШО ше В в й г: З а В і ї й ше во УХНЕ МИ. пек Ве Б Н «ва 4? ня Деше о ван : й рей СС полжея і Кз 80 Ок ще ве Й і їй А с, Ще ! - ; с - ще і Що ще хо З Що ж Ку пишна | І Що хі ї ІЧ т Фіг, Я шо кож шо
: Ниві спідження 22006 і 2007 мецричві дослідження СЮ і два Чи дослідження СХ 7 рем ШИ ги ту «я і ва Н | Ох 7 пу , ї ши 9 іде ПАМ бен ве сх; В: ГОВУ Еуе двя ж ОК аж о ХО ЖЕ ЖКх. ПТО ПАХВИ УВО Н НУ 55 ке го ВУ ОО НЕ ЗИ денне у о в. НУ НО СТУОЯ оо ИН дя у Се ' КЕ шк а ІК ЗЕ ва и ще с ОВ Заря МК хе я У а Н КВ совву Ки В о КЕ о ех УКОЛ С й у Ко ЗВО хі Е їв БІ хе пов КВ ее і» З фл ких сн ЩЕ Е шо. ОК З Ми ОК МУК ще хх ї КЗ ре ня и ІВ ЕК А стін ВАНН о ИНА нен Не : Е ; пт «я ШЕ НК бодУя З Ох Я : 15 ро тА ПР ТЯГ монет ХА я ГУ ще дош ПОКЗО На МА з ЗК щих ри ОЗ Гн я ск ко ОКО ях, ТУ СХ КЕ я 1- фМпужжнтстрвтнни зо ОВ ошею К СУМ, СКК ' і і я ? ПО ох. ХВ оо ВК с Н ! С нн пока в опор Я і ріс шу хе ой хо КК порефккнння ВЕС ле і зв кто. ве п ЗУ СОКУ сени і 2 Ще 0 я в а х вд з пот, ША ИН Е Е 1 22 45 я Ки 450 8 , М анепірнця пз, ) «о влю 2595 і Ши І пів ВВ ОПБОУ НИ» окт ж кю ж ють ють ю ть кю с. й
Фіг. 29 Я А пухущежисо п шк і ПО Ко о і лен, Ме В ока ПТК лома Не ЗОМ зни Мне КО Ода Н НУ у, у -- Я. дІКИК п КОЙ ЕЕ Е з што пеню: ПУ ой Н хи 53 КК с, ож ана ов У ЕК ВИН Е їмо ВЕ ЗМУ. - о Ся ник Я КЕ 5 ши . о. Я х вамай Пи Н
1. Її пюляєюмо с С МОВИВ АК УК шою 5. : 1 ГЯ ша : х Кава Оу мА; 5 че НЕ М Не В 5 я Нео; Я М НН З ВИ лох вів ТИ я й ! і ж в Колор шо см ван. : ПК я оно КНУ КОДИ : ов се й !
їм . ПАУКТЕ М КО КИМ х ех ся : І ПО МОВ хоК КО УеОНенв 5 ! ЕЕ ко шо Зх Ох С ЗК УННЯ ДОК 7 : ПК і п. ПОН вия Е С вія З ДОК Ощ ХОЗВВЕ» ВЕНУ ЗК МО МУ м : ї- До вд МИКЖШИМИЕ ЗК З п о : Не | ЩО пвх ох с. її Ш 1пе 6 Ме с КК Я ЕХ ЗУ З хе пе о Ох ОККО ВЕ : х ТВ ОЗ же За стр я Й я до зон ВИ Кит ВЕЕК с. Н і ча ДА А олчАцХ по Й ОВ Н ле ї ЗУ --- МОХ : їв є че ши СУ де ценання ві щ що ШК вВИЗНВа (мМ) і нини нудна налнионния ! ще сооччнтятняниї Чиг, 30 От почне х Нвз г зи ї ножа поні ї зький достум води висоКа (і ст Е Нюх : в дис висоКа «ідьність! і ЖЖ ЛОстУН ЗИ Кота Тл Во ре достуч нодновиеока щі ість меш ЗУЮ флалалячу Кс Ж Ех с ГБО жри пні ри ни ЛУ ВЕК 1 ДМ тут що МО зр онти ЗК ВИН У 15 ЧИН У и ОВ ! ще ще 5 Н Фо хе кт ХА В СИ ОЙ о Н Х що А о У 1х ЕТ В КО за ких КОЖ ря ООН ЯН и й зом ху ТОВ що ЕН ЗВ т рих 15 Мав СОБО соехи ТУ й пе кити В М охо Я І Я --х Гак ннн клени, х ре ке» нео ов ! х за Бак» ВО ТИ смт КПУ, Х Ха ек ЗЕ КУ ОВО прут ї С про ВВЕ С я ті 57 ж КАК БЕК 5 Мо Я ЗХ Гоа . ЗШ Ки ТК дхун їх ПА оо дах інн хро ЯКО. КК ТІ 5 ж МОМ их о ее що: ШО ТБ ж» ОО Х з я Фе» кн АК КОВКИ 1Е о. ТД і о щодо кос у 5 15 з З КУ З УлОС ' й Моба пів мов о ТА ее ЗАКО о В осіли них піс ВИНІ В їх а я Дікдон дл КН , (оба міка появи на поверх: . 12 ж ж 53 ! вх появи на поверкні ПУ дов ля тяви НВ Збідвии МИ .004 Доба після появи на зверх К, х ях "З пит М теж кт юю Щі маш Й ій кві вшена доступність води при в нот мжннння поверхні ! гу : ОХ ТИ пи й. замість паднов пагін мильна ЗасВОКУЗАУ їз зі ! вожаність ВО і паля іст5'іадн а ході й зливання й ся М
Фіг. З їж : і в І ПК Я: і В СО ОКХ ХО Й ЗОВ ще аа ОО А і КОХ АЖ ИН ето доні с У ле ВЕ ПОЇ Кг КО й їх ще ом Ко КВ ре Не БОКИ ва Щи В ЕК, їх ТО КВК ЗД аг С АМЮВВ НКУ Кос: Ж : й х о пут и КК УКВ, ДЕС ЕК рох ОХ КК Сх ШИ їй и МНВК КУН ско В ії щ 150 ни пок ков м в Пи М В КЕ ХВ й В хх ОО шт ВЕ ОН НН ТАМ і І ЕД хо ЗВ НКУ «ККУ ут КО ЗОВ Б: ЖИ х ш ОВ А ЗУ шля «А «ТЕМИ Мун Н їй «в Б о ОКО МИ АК пики ПОД МК і їх КО ОН М и УК р Е ИЩК МЛН о А ЗАМ ї щ КО У пек кпк нтик ння тюжнь Ак еКі Оки Я «Кент у оон М, От Н : 7 ЛИХ У о ово ДИ: НИ їй и оіи жк ж же ях СКК хе т. тлу ох Я І 1 нич В НН 5 Н ОО пн КВК Ще З ПОВНУ їв сени МаМє ЗЕ ЯН ни ле. ви ОА пу МА КІ ТУ: ти РІ том Ку А и НА ОВ ту Н БЕ дек В ВИК а. о ИН с В: КН РОВо КУН КИ о Є оо В се НО и бу С ЖИ ОА ПО МИХ МЖК АЙ Н р- й ПОВИ ОВ ха ек НН ЗАВ В і : НЕ пдв по : ТО. фунт ух КВ В Дт КВУ чен т ВВ С З Н : й ВЕ Й Ж КМ г с : сен о ВВ і У БО ДН о Ко ИН о КОС М : К ям г з ! і Б тм та 153 т85 У 185. : НІ нуу мрпічніуниц Є х Н : САМО: дення ім) Н
Фіг. 3 й кожи пен в ї і Н ту : Н ! ох но Н З Н Н Н Н Н да долями мен ОФОДДТ ТК кни нею ОВ М оф тоже ; щі ех ВОВНИ ПД Не: яко ке З Ве і їх ЗОНА ЗА У. пі а ха ЗІ Н і й УНК - КК сх СЗЯН ЗК ОО ! з 35 КЕ, ЗВ в, ТІ. - їх Іво оС Кн Н Їх" да МА я ВК ПОС ки Б Н Кк Во КК НК ЕК и у МВ Н ка нини нак с В зх НН хе Нех З Й У ОА : "мя Ох СЕ ВІ Н Тсчях ПИ т НК ВД ОМ ВИ Н їж по: Су ВК я В і ОО на Безе дю ХК М о ПО ВН і НУ са; ТИВ ТК в а УК с М Н «3 й От ВОІВ них. ОН Н ен ри вві сю ЗК й ІК Ка С с В еВ ! т Їж 3 Кк ВО я А о ОК Н НІ Комо БУ ЕКС акти В СОТОК ЯЙ КК ВК Н РО фен ну ЗНУ Мене дн дк ХК КУВНККНИ ОМ НО Н Н факти ПАК В М же ОВ вх Н НЯ Г-З КОХ ОК х У УК: НН МАО Н НОЯ Гсй МОМ ин ВЖЕ, «(ОН 0 Ми В І
9 г. ЗИЖИХ Ко. М, ВХ КУ ОВ СУКИ; СЕ Н Но Не КК ДУ НН В, пи: ще В Н Не рі а. ІЕЕ Є ВК, и ще ВХ А ВК. ДАМ Ме ЗУ ! цу іе НИ кВА З НИМ о и сова ЗК ОТЖЕ Н ій ДЕ ТЕ ИН о с В 0 МИ Н НЯ Н ГЕО: Ж ОМ З КИ В ОМ УВИ Н НИ КО п нс в оо НУ НН НН НН ЕХ ві Ши ох о с а І ИН НАМ ШИ 8-5 ТВ ре вол МО Ек ан нн они вн НИ Н БУХ Ух ОК кН ОЙ шен ЧІ. мя Ше Н НКУ Н Ше КЕ пох БТ і і : : шк 0 АК 7 лі Бех зі Н ; НУ НО с ВЕ ОА КУКИ ОХ ОК і : ур дк ооорєечюттттвжеюкятк сект ККУ АМКУ ннмннитттнтт тт уж В Акті Ж нпетчннк кю ! : ;
: . мух щ ще дк Я лк ва Н : Ж «о аю т ВО 5 жк ща НМ 50. Я Віомаса Де зинання гля і нн и
Фіг. 33 уанкнтантюттніьижи центів ті юні очене чані тіні ті ечінінію жінк тоні юті нс же проносні тт тю я я пут тт д Ж їж і яв 1 їх і б 858 ЕТ КТ рН ТИ РИ ше НН о В В ВИН ри р СКМ ПО КА Он онов С, еще 4 іх і Ве : Ве ВИ СІВ Й пд ьо шо тель р РОК сви у м ки ВО іх ще ПУ: Ки ПОТ ДІ КО Ки. а зав їх РОД 4 дохекимонь щи МОХ ОК оочкелкнАА НКВ дядя ро ж фену р Ак НВ ЕМ Й с НАУ фот у, АК А Не 1 : Ло ШЕ ВЕ КВ ат її ш в КК В о т: ДНК В НУ за КИ ша и ее ее МеКИ ке СК ДТ ко: . - м КО им ЖЕ ХХ Н КЕ З б КО ОО ОО і ; ВОЗ Ж ння мм М дк щ МЩЕЕВЬ. КК ОВО їх Горова т УВА КУ» КМ В м сел її НИ я СА В ї Н Кз 35 Кл Не Б.Я ЗА ЗАКО о у с ОВК ГА Н ї "У м ОТ Й Ки ВВ Й т т З ККУ я ННЯ ОН т : ж КЕ. БІТ Б та ЯВИ св ПокнК Кв КОХ Н Н З е г ЩО м о ЖК НЯ Оу М лк К . ВВ О кб МК ьо МО и и т й ТО де. Ми Ше У КВН в: В ОО В ВІН ши: НН о: МН с ВОНО і 54 35 Ж Кс кед ов ово ас а о ХУ де ее оо: її ПОВ хм зи дО «СВ ща їх ; нн о о о в ЗЕ И ОСУВЖ МС с у ВНХ 15305 по ; ення т, я КОХ ОМНН Замки ЗО КМУ В Ку В т нд : - Ко и ЗОНИ ЖЖ. 8 АВ и КОМ ЩО КЕ М о оо он М і ще 8 Ве ОККО» кн» ним сли Кв уник Н ж ОККО ІТ «ВВ Н па А В КЕ прп ОХ ВЕ НМ Я д й ІКАО КК дн ук ек жк кв. ху ооо скдкджнн : ш Н М ооерух р 4 є зд ЕХЮ ОЗНХЮ СВОЮ ЗВО. ЗЖЖ ЖУКЮО аю аю М ВОЮ В. - з Н : су І що МАК ск) і А ся й ит. 34
АААААМАКАМААНАКАКАААНАЛААНАААААЛААА АААААХАААААААКААААААНА А НАМАААААААААААААААНААНЯЯ - ня ннпяяннннну ще цу їмо на МО оч МІК оо, ом М о ку туги о. А п МВВ й У ВИН В ІВ Ак щв ОБО я КУ Соя По КО. ЦО ВК ок ов ее» т о КИ НЕМ ст УВО м я і «ХЕ МЕН КОВО дян ех АК ОО У З що зай НН о КК и (У п коди Я ЗО е КМ в ВИХ СЕ іх с ке КО КВ Кох Р «Я КОВО Ох оо ОМВО. ех: ЗВАНИЙ а РЕ шив ик ися я и о НК ТМ пи пкпкх и Овен Ко Ко й ше в: і 85 ЗК ву Б ОК КК ХУ Кен с: Бе А Й ї- мова «др гук ж МЮ КЕ а С В ОЙ ї ж М Яке УЗ нн «сени В їх ЗВ ОКУ. ОКО ЕН С А МОМ БВ МКК Ж ХО ОСВЖ Вони ОКО ах ВО» вх ТИ ОС нини КУ и о я в у х- КОМ Е ВН пк ден УВС ВАН ОО, ВК ОВ З ЗМ З ати ПеЖКУ нні В БІ я. БУ ем. В УК ЗУ хі і -ча ОМ се пово ОВУ вне, г щ ЕК ОК ВВ поеваиєтьья СО: що ще і ї й Ка УМХ о о Й т- "ОМ де В дення х СЕКТИ хи ОН ние: З ОЄ Б см Мо Дн в ОН ау ен ЗХ. ОЙ ПКУ Ума ЛИЖМЖУХ У Р о Овни ПО ММ Ж ПКТЕ КВ ННЯ МНН чи в С СХ КОМ МИС и. Ех КЕ КВК п В ем и ШМ ї їх ма кон нини я ДЮ. им лох кв З ВО С доня от ШЕ 5 коор в НК те Я . .ш ОК певну ВВ т те З НВ ЗМК В Є ДЕ У З ДОА юрняся х р Ек иа МО о. сх ОВ і дво ВИ ОБНН се СВ оо си ро о Й чн ВВ н хом ОХ вх сх ; Н чи Діта МТ ЖЖ ДА о ши ший Бай й палетні ьо нь пед сАдчА тя ктнннт чо х ч
Чит. 5 в : я пе Б ою щем ЗО еожехо й і «є ее ДЕ сок ВШ в о а оо, ВО В х п. З А Пи Не о Мей поем Км и Я ПМК о НН т 5 ЗУ УМ суних Код Ки КК яки СТ КОНЯ я А те ЗК ОН КМ З У Ку на НИ ПО КК ОО ов а Е ОК БУХ а КК ОО асом їх ї р ПОМ пок КК. "х Ж - ОККО Ва ши ВО ост ЗВ Я ; КУ КК ся ОВК т КК М КО кино ВА Й я КОХ, їОТОХУБКО шк АК ХК нн ВХ щ і, ОБ кас» Во ТУ КН 0 МУКУ щ Її а а ве сі па УА ами я Бк ОС Коко оо А вн : СЕК дек св км шо ШЕ г «Ж Во оо ВВ Боже Я Й с я їх ро Не п "ВВ сосни ки ЄВ ши ши сх кое. ро ее У шов ПДК оо ДИНИ з о З м ЄОСТЕОАМ о КА Я С зу а МО ре ОКУ. С МИ С НИ г НК ОВ перенея т чення підмога вс Й їх я ше шу ши ОХ СОН п Б: ИН КВ чен х жи і Ун нн СО ООЕ що. З КМ ши «ОМ щу ЗО НО ровом в СК ення В р сив век Ж Х о ше с я вве ОХ Ж Ех Зо ох ЗВИК ННЯ В ОСМККИ ОКУ ДОА АВК УК і их Й усу ох ВКА ОК ІКОНИ Уа ШИ і но ге пиво У ЗБ УКХ іх А ВЯКВ КК КО і -М СОНЙ ка СК хода ХХ ке : Н шохетеек о ш МК і поши ші ши ше МД В нти ся - ко Е 8 Сливнішизцення біс: зо звання Інвнілнещення бібмася де лісля ми я Дек ЗЯ ВигОЗННЯ сет ля Кк даю нище Фіг, 36 ппнтчнн ння нчннтчнянячннння Я щі : 000 б реве» ян ще хх дід си що п в на ва и ав. ЗохоВаДАИ пк ї ке вар ви В Мк зх А с ни з БУК ДАЕ КК З ЗЙ ВВ ВХ ДЕК хх ХВ Н
РО. В ІВ їх МКК Ки ОКО КУ свй ' ТУ а о в КВ с ВО о Н Поу ОВО В няя З ве внновнов й Зо ї- ОК: В МКК Я Кв ТЕкгх ооо ооо КИ Ма со : Ще щі ше ща ко ЗВ хх ОБУ. ОМ Я, Що МНН РО фо Б ай ас З а СЕ Я у осн Же ЕТ ВО А це во с ОХ о Ох і ПЕ р. Б КН Мо хокей дж ие ОК : Ж ві І НН ще 000 5 ШИ : Пт о В ОК. ВО КК ! х т: о нен ем ан ще З : ях од м щЯЙ ОКОМ оо с Ка ВИ ННЯ Н іш ПО В МОВИ ОО т ОК З ! Ко іш КО С в Й ПК УФУ ще УМО ї щ Ме СКАЖИ у УВК УК МАая З а ув жду ПО Ними В. Я іш ШЕ с о: ЗИ п В Я . ше 00 Пе КК НК Н
НУ . а з ЗВ МОМ юю ЗЕ ХЕ ' БА ОО Зк хе Ки Ка Я КОХ ОБУ ИЙ УКВ ' Ще мо мий ДК Но х р, ККУ ХО ще Я Н КОМ нав ни КК З і її КЕ АК, о и М ЗМК Опт Н Не УМО ІТ Ж КК: о г и ке Сх мн І » дю ши я М НН НУ а М: ЗвасмннИ Ко Ту ПТК б піти ! НУ: ЗК ох ДАН Ко он п ОВО ті них ОЗ ох Х; Ки й ВК ВИ одні і Ж аю 3 г ще 00000 Б НН НИ» ТОК КК пох КИ БАК УЖ Н : НА ОНИ ЗвАЧН ВО Ух С їх ОО ОХ щу шо ше ще :УХ ВЕК НК А УКХ ВОК АНУ ОН КС р о ; це з: КНУ син о БО «М М : змо п ос оса кар оо ВИК Н «вва КОЛІ ПОК я ВХ у ВВ Н ! ши 5 БАН ШЕ і Є Манн Я й Що ян КАНВА ля ! варни Би Я звідхнихення бнумасн деНел ут ! кити тич що і т й п і ТЕЖ ВТ КК КТ Кто тю юю ють ' й пи дЕПТНМя прут
Фр. 37 те по кенте тт Ат т АААТААК ААААААНАНААААААААНАНАААНААААААНАААНАЛ А ААААНАНАНККАНАКНААНАНАКА НААН ААААААНАКАНКАКААЧАКААНААМАМАААЧАМАКАКАКАМ Н : - Н Гн ї Н 1 м не Н ою о ж ВИ ОС НЕ В МОМ КД і и зон и З АННИ ОК я, ши М и М о Н ха ОО В В Ж оскіль пон В В В ие КАХ й года ,Ь УК ай оку аск А КМ і КОВО ОВ во в В і НЕО ХУ хх ОККО КЕ В З ВИК У і Бо Кв В ве ОК в « ШО оо ВО ВВ ХК ВО ря фл ше сна а 5. НИВУ УВК ВИ м. а т ВАК З вх нка В па а сни ее ННЯ х ща УМО ПОН во у ня Кметь шо. ОХ ХХ. ТК ХМК ТОК А в КОМ. ТПВ. За Тк СТОК, їх НКУ Тож КиМУ ОВУ У СЕБЕ: У че ТУ С іі Н р Ко УКХ От ни Ме Нв кю фе ие оо се, Я ПИ х п ККУ КАХ УМХ ШИЮ 17 ке ОО з ї
Н й. ЕОМ он в Йо сою У КО Од а СОННИКУ. М УК о СВ И ол я т и о В у ке ВХ і ПІК В Ви ж У: и В х ОС ОВ он Ов В я роя ! ПО А тя ех і ОК М В и ОК оС ВО ИН і ЗО диск В в КН ВВ т НВ У ОО В ПВ Я «ІХ і нах БОНН нн с: З ЗНО ке и КК Ай НКУ мої г Ме МКК УДО й Єв - ЗУ ВНУ і Б. Ол В а НИ Ел ше ВКА ХУ ож Ті СЯ ОД МИ СА ШАНИ о РОЛИ і ВХ. Едмонтон КК МВ и ндннле утиліт АН ОХ екляя чия і і За я за 15 ща 25 36 ЗА ща 45 5 і Си лночннвя вомаєв деочисля патрца а а аа а п ж лрач
Фіг. 37 Дт їв Е
Кк. М я ї їж М м : Я сн» й й Н хх жо рамі: Кекси нн вікні вих Ії ш Кок: он Шок 027 суток ех до щі : БУ СК о НД НН и і З Зм : сек, МОМ З МИ КК АЗК: КО ї хе С ЕКО ТЕ У - дО В и КВ і: В ко Анну, МО М и С що КК Ва ПІ ОК Пл КК ВК НЯ ї Ш Б аа нн В М ру и У Н Я г С НВ Мо КОД: Сх ха ню 7 пак Ж ОО по НК В МУК ва А, ВЕ КК і! до ДВ А В рот нн Я Н Бо - У В со нео о ВВ ОА ТО Б ша У ОВ ни м ї Оу ВЕК пу. - о А МКУ А І. З Ба СК 0 НО Ме двое НТ БОБОВІ гетто «ЦЕ нн нн нн шк їду ДМ МН Мглннн т МА мя вки о ше и Ше ОС НН а НЕ щх ща ж НЕ ИН с НН і Е З моз. шо нн нн нн они хо Н 8 ш М УНН ООН х Пд М ЛУКИ. МК Н що Кс: ХК ее Що ПУЕ Жахи Ох ХМ. ВІВ ї Я я жк ше а і й т не КОКО ут МО тую ПОВ Н Ви Зв ово: Й - НВО » ТО КЕ ї і СОН у: КОХ пі дл. ше АК М : 1 і І НЯ с вик і. ! р с ЖК Од У ДИ ї СН З са вик ан ОМ ЗО УВІМК МЕ й ї ц й й й : що 84 80 во а 75 МО і і Відноснвй ваієт воли ву середу малившннізевна (БАС а оц ОН ПО
Фіг. 39 нн а м п В п В В В В В ! ся нн ж КЯ с ' я Ж аю і ча ди сх В ся і І - ко оо тих он нм: на а усно інд Н с ОО о МО МИ В ВНІ і зх МК о ОН Еш ях я ЗЩКЯ гу ЩО ХК: НН. зе ОВК и НА НН У В Кк Мох в я Тисни КК она лк кох Еш ЗА й о, Е-зея ок Оу ПУ со ІК ши НН о НАЙ 1 їсте МУВОИ оо КВ РОЇ ВОДУ фенольні МО ні ян ше і» Е пани У Мк ха : Х ї палкий. КК з а й рН ДВ, й іш ОКО ЕОМ и ВКА АН НН НН ОХ І Ще КК, ЗТ ди гл есе МНК І й ТЕКУ 0: ОБО Ви НН і «од БО ОО МО І шк, ЖЖ З КК фе КОН В ЗНА ОВ Ше ик ОСИ М х ше со се ке «НИ шк п А и ШОК я нн в В В ро нн із о КК КИ А ЗА КН и - Я я ОК ява Ух Бо. З г жор ОМ В ж 5 г Кк ша Б Е СОУ в Кк и Я ш чхю о те Мох ДК ее ще Ли М Ко шо ОМ М КОКО в З З МТА ке ва УК ОК ОО ОЗ ш Ве Ки Я ПО КІВ КУ т» БО КЕ Ок ОЦ МАЕ. із зі СКОБУ мя ОХ... й : ; АК ВК В В ОО У 1 Я КК у К З з 1.70 156 хв о ща да дя; і сум фі МІУ, н сег і егву ек ги р Відносна шниднєть суврівня внств З зниження З Авова) і і й : З У с нпнкнтнюннюттнюнтитнкть поточне чюючен ен юте ее ок юююченчю ж тіж че ж т ятетч тя жтжтжт т яті лик нніндндндедейдатн дня лляна кві
Фіг. 40 и : пн нт яння тент тен нтвеенноя, : 1 і 1 м ма Н : ФО гчененорстт мрддевов іш 9 тут рова УДО вч і ЗОНУ ВАМ ух Що НЯ. М ї ТА од кое ПЕКХ пами Ах БЕ ЗЕ Я Ж зві 13 она в МБ ДА: нн ВО оо А о ЕВ СЕН ОВ : и ТО КЕ КО А у позжвшвя ВК: М : р Н "вки МОУ Ку ОО ке я ха и о У : Ж дея і 00 ККУ их Кк ЕД нш 8 ПММ у кВ, В : НЕ НЕО р КК, - ща тео КО Н Кз ра ТОВ КВ пи яті ЕН КО, : ГО УК Мн ех сон Нк МЕ ВХ КІ ких ВЕУ хх пок Н 15 ко що зм. (ВИ ЕЕ Ко ПК У: о ван ШЕ 1 ДУ ідо и и в поши с ОД ШЕ НЯ ТКУ Ки ке вовй оо ок о МОВ Н Не їни с МО ки ко КК . ТЕКИ НЕ ЗНАННЯ Я 1: ж: Ве Вся УВК іа ПЕК. ЗИ ПКУ ги : Ох, з Ге ШЕ он що що п 7 ЛАМВХ: т Н На У МЕ снення Я ОО ЗНННННЙ ! с Ноя УЛюЛЮ км осо МІД ТУ п п ВВ : Но рн КК а в НН. Е 1-х ЗА Тон КОЗУ ПЛОВ Ми де У Я що Н 1ЧУ Яра док А ПИ НИМИ я : ід Е он МК вовна нс м сн сни дай ! 5 Н ІКОНИ КК пкуккатсвй і
Н і. В о НИ пики ПАК Н НН 1. но В НН п кВ ВНУ і і 55 - ВО В У НИК ЗЕМ Н НИК Мер УК КО КО КАХ В ЕК пу в В Н У ї Я УК М ВО В у ХОМ им о К а КИ У Н яки і Шо о в ок вовкво ШІ ' ча 3 А В ОО ОН
Н . Ка ' І що а 0 ко а 258 шій ' Відвосний яміст одн при шероеднжняу називанкЕ Зеров КО ' ! іх ; і Ї завше ріг. Я СИ ! МУЄ що оно Н чи суки і МОН о сс косо ОН "Яру Мо о УК ОЗННЯ о НН Н ЗД ЗВИК нн М ОН ИН М І шко Коник ев в в нене г ї Оу п ЕНН Кі: Во о я і х во 0 Б БО хх УНН СН Бо СІ КН ї т Флінн Кн У ОВУ МО КО Н и Її ТКА ПИ я тя А УК и як г че Я ат. Ви УК вия г т «ТЕМА ХО Н й Кк МТК щ а ЕВ о ЗВО БК зт ж УВО г в ОД Й ЗА. шин ху пок к: жд УКВ І СН Її що З Мф КК он Кан м ВИ КИ КОКО і я Е Й ВОК УМО ЗОЗ пт ГЕН МОНЕ: різ З Е сті ОВК с. КЕ ОВ ОА А і В їх МК с ЕВ ан оо АХ НК ко в ще Я Н ЕХ Зк Бех М дак коре "В со ВВ Н ЕХ рещоя ОО З КНУ А лк: кла ВО ЗО Ко я Н Ко ПК М В у ст й КК ТИХ ! Ва бе З БМ ИМЯ и ЗАНШУ те Зо і Н «Ж КО З ОЕИ, Ки М ІМ, ВОЮ Н СВО КАМ ев кн с : « ЕН а В ЕН ПОКИ : т ПО КО НВ БАН НК ВО Н 5 БЕ НН І ря плов а т АКАД КК В ОВ і х ША СЕК Ов ВИ МУ ОС КО Н 7 МК не УК В ОК З ї о жМНеВ в МО. щ ї ЖК н.е ХВ І І во я оон ния пон не Ух Нв і і ке м ПК Охов Н ОО : і оон и І НН ОА ! БАХ УОЗ с УК темноти ТУ полной Н дан КВК нет МКК : ї чу і ій Н З І "НК 3 ре З Ки «Ж «бу -Й З 23 і ; діва пава іл удо Н і ІмМага ТОВ ОЛЯ и НН УМ Н Н По
Фіг. 43
Н Н Не їм во Н що і Н вух, кхагужии Зк у вл же тую Кв жують ред уми т юю ож і уКООКУМО В Вон я оМЕ У ШИ сах і
М о. ДИМ и ух з ХО 1 КОКО А МИХ ММ соди М В ОКА Н КО КО КАК НН о Н Он НА Ко ня В ша Н У ДОМІ я У ЗМ о ех УК: З пох ВИХ ПІ АЖ Ко Н Н МКК; ою УК ОМ: о Ка АК МАМ Н ії - ВО с У МОВЕЬ. о У и в ЗО і її КА о ВК КО кл Ку ! НЕ: ХОМ о В БАКУ ОН в и ВМ Н рож КВ ДН Но о тн хе У Н ро ЗО я, МК Єх ше Ом Я МК Я РО СВК же Оу и В о ки З, Н рому В В ніс в От ВХ я ТЕ ОО Куда ЗОВ ке ЯМХ Не; Ко Я ол ММ: МО; ! і Б ОО 0 с ОН МВ ВОУ і і ОЖ ОО НМ ТО ІКОН них ТУ і 1 В ПК СТВ С ВИМИ А я МАХ Рош ших МИХ СИ а С і РО ООЖдчТХе Ше Ж о, о ВОВКИ Ко о В -Ообе БОБ Н Й МУ У їх хі, Мр и ДН ОД МКЯ, і рови ШИ ОХ Зо КФДНООВХ ЗЕ о АКА Н Ро Ве вве В КК и Н СМ ОБИА т У о А в кВ в я ИН НАВ: Н з и ЖЖ : НК и ЕМ Н Сн ІД а НН В У В КАН А ОО Бе ф у В ОВ В в Н і ' «7. Я ТЕ ук Кос 2 МУ і ех ї Н : ВН а КЕ КК : сій и і : НН о ЕВ ТО о АВ і Ге Кн В ЕК В Кока нон в Н КК в А СКК ОНВКК у ун одои ВКО нн Н : НЕ а КО КА В Н І Н Си КВ и НН ФВ Я Н : ї ТТ А КК А ДМ ди Б Н ї В Кп В УМОВ Фо ЖК ЗИ ІЗ
КАМ. ОО МЕМ ДК, ОО За жд На ХНН а ОБУ, МІК 1 жу и От, ЖИТІ, ПО ОХ: 5 У о З оо о НН Не: Не : «353 ю ЗЖй "В Оз -8 - В З 5 і М і Зх: м. тр гуУгіЖс гачки Битмара стейел опісля пВегхНЯ Пся З Е и
Фіг. 43 аз ме : МУ і Ж зво я Н вдо і ПМС я УМОВ ие Ве УЛОВУ Н ОО ЗИСК В о ВС ТЕХ Я фе ТПВ ОКУ ОО ВХ а Се ГИ ж М СКЕСУВХ ОО ВН У Н Пот ХМК с МК. т АУМуТКВ Н в ера - ВИНИ В СКК: МУ те ло Ї о КК АК МН КТК УреВ «УА МД Ше ок в В Кс. Бе и гол т МУ В и ЗМ АВ тя Рош ЖЖ, с ОН о В и ВК ОК в ВИШНІ МО ОжИи у дЯ И ВЕ ОВ в: ВИНИ що с. по КІ ВВ КОКО о В КК Що - ни в А и В ОВ ВО ях ШИ ВН НК В КВ В В НН -- Н и КК Кс Кк Годо а «ЗХ СО МОЯ чу: 0 ПЕН МН ей Но ВО Роже тов МЕ га о ско Й ОК ром і пня ек Кай и ОК ЗК о и А Х Рожок СК Ух ЕВ Кд ЗП Я ДО ОВ шику ема и и у ВИ "Ух ПАК и рН Р х ІЗ Я ОКА еВ ВВ ЕЙ ук і В М - МОМ и Ак СОКУ ОВС У ОО ЗХ сш ВОМ НК в КУ ВВ ОО Су НО У шу В ВВ ї ДУ ОВ НК Ж СХ КК жи МОМ В и МН Я ХО СВ и ГП МУ ВУ п ОВ М М ана Не В Кк А зве В пан с ВН КК КОН Й Ко кош НН о. ше УНН ії ЖЖ СБ ки ОТ ТК В кан КО ЦО ВЕУ о КИ У оон хе ня б ї мк 17 я КМ Ко в АН Що : НЕО НК В Не Е ДК Мена р ев о В ЗИ ! і МИ нн «ТЕКИ КУ М ССО ТЕ кл ЕВ 7 МИ М Поу си ЕК с ММК ОСИ ту : ДАХ лаалилечААААААААААА АКА КАК КАК МАМА АКА ВА КАналялА КВ за Я їх й «ЗВ -8й Я - чо -5 - «й й На чар стей пісна ніна г ху ХЕ ФК ПОНВ МВВ Оу п ПК 1 4 Фіг, а
ГУ тт тин х ! : : УЗ і 1 м о ' ї КУ и в я зв: ; тик уюсук о му ОКО сут ки мклжк жуюккж укх ку у у сте ВО І і ; ПОЖОФЖУ у ; де ДІЙ У о Н : В во. КК ВО о Й ЩЕ сів ПІК. ха і і і деку КВ УК і У М КВ і , КО, ТИМИ ие МКК КУ Кк с ЗИ я З ШК, Вс : В ОК І АВ ЮК Я КО ОЙ КО Н Ди ОО Я ВВ их С кол В ОМ НШИНИ Сл А ДК со КК ОА Ух ЗОМ ЗУЄ З Е Бо, не хо; у о Й ще МК ВА Кс С "ВО ХУ Н в о м п Те ТУЯ ПОХКХ УК Си хе ї Н лиш ли пря БУ КК МОДИ. У ЕВ МК ї
: ї. : КК КВ Ан яв Дт Кк у Н х ПиМИЧНА НК КВ КМ ли З АСМА І ЕТ ї пижх, лЕККК КВ В і в А УВК вер х Ка а НН о ВЕН В и: ДИ Н а М КК АХ ВИ А КК КИ А ; т ї х Ме САН ТО В НК люд ум ти ї МО Ах УЗ Сай века НА КК си Ні с Яд їх М 1 и КА ОМ Ви сама нос МОЖ о не КИ : ВЕК о я да па - -« НКИ - З ДЕКАН ФК «М я ОН В ОС п р МУ КК Я о ока УА й є р в ВН ї7- о КК НЯ МК АХ - т ухва ПИВО нору ких М у Ки ЗОН ЕКУ екв ке Я лю т І КВ а в У СТИК В МИТ и Ве Ом еку і: ВО ЦВК: Но о Х йо хан у и НН. МИ М ЗАЙ -- її У ТО дикими Си ох Хом пдом КО он ТК ОК - МОЯ и у и у ЗВАНИЙ СБ що 0 КОМИ. АК и в «ЕМ, птн хи Ж Ех А ТО У С. Кк нь шій -б МО ями лялля для, АКА ОН ох ПУХ ЯИ вх я У шо ЖИМ й УКОК НН В пеки я АКА дл Н ОБУ ЗОй МИ І МИНА и і КМ і Ук КО ТО ЮТи г. п у у В З Ве НО: а ИН ОНИ . ВЕК й пло У пні ПИ Б се и Ки В нених
КЕ. ЯКО СК КЕ кю КАС, прю той дово СОВИ ил А КК І КИМ х. Шо сх я КО В ВИ пкт яю о зе Н ох Б: ни В С НН и . о. МО КЕ А Ки КИ МК по Ка З : ку КУ. ОС оо КЕ повне с хх і Ко : Ж КВ ВН кВ 5 ВЕ о І Бо АЖ гани М щи ЕК: ВАК ; ДкнллААК т КК ВК АНА Кн ПОН с о А УА КУЮ Хе пакт кутееКнн КК КК ові ше «ща -ї о о - -5 -3 - Що б ухувеп ірисів унів лк Н Буюзаса стебел після мигння сг і суті ТТ тт кжтенх Н соя екю пт хз кж квт ТАЛА Л Ля т еле піно Аді оті Ж кт Кік !
фіг. 45 Н ; Н Н Ід її но і Її Н : Н Н Ух Ко дк оди муж пкт Ух ко жаосо кю Сак х В В ВЖК КОВО пли ОО ї і : В не ОО фе ВХ В й: і ї по ин ПКМУ Й ОК КК ши ' Н Н ме ПОВ В х ж ШОН СЕК ОДН ЗЕ оо о ОО З ТВ г рот В Пк І и ККУ су оС Б Н Медиеняя о ке ОН СКК ЯКО В КЗ КИ СВО їх : ЇХ як ОБ "Кая їх ЗНО х уз КСВ Бе І У Же ; «З КН ХМ ЖЕК я ПЕВУЖУОМКУ СКК. ОТЛЕЖОж Е зи ЕК. М Бах З КО З о ков ще ТЕ СА Н шо ІЕЖНМН. ВЕУ - З ЖУК КК: Б й Є и ї «ЩО РО. по «КЕН ТОК пу ВХ у ВВА НН ї ОО ОО УшкХ - ММ: ДВ ШПУК ї Гея іон на ння оо Зоо и Ди : ТЕХ У ДВК КК ме о ММ Ї Ро Ж свати о а Ко Я вх х ВТ о ку, І НН о ВИ Й ША МОЙ їОш ен Ко о З Коня ВН Ї її. МО ик Ка с ХО ше В ВН ва ПИ ооо ух я Ше: КО ЕМО нн Анд ін Мо жілектн у В в ни ВАВ ! ро ОБОЄ ТИ КТК А тн о: ЗИ М З Бо с У свт ВН МОУ ВК. НОВ ! КОМОД, с КВН ЗИ МН о: Од и Н : ОКО Бе ів Доа ВАВ ВЕУ МУ Ох Н КОЖ Ор ДУМ ав Ж. Ку ВОЮ А ЗК Н : Мт хх ІКих тн и ВО ікс КО Он в ВААС 1 Н що КО ПОВИ М. МА Ям В НН ВК Я Н ОВО А Ву зоай ВЕ КО 0 В, їх МКОВудик МЕК ЩЖ 5 То о ОА Во нту у Н Н ВЕС моВМ ПИ МО УМ ух МИ ХМ схо МНК ВВ ї : хе СКУ. - би 7 НИВИ А ОН го ЖК м о ї 5 о ОН НС В Ко В НИХ ПОКИ г ВК Бе : їмо БЕ М ОА ХА КАН З ! А 3 Ки ККУ ША АК У хе БАНК Ж у : : З КК ДВ С т МХОИХ од и М МК ВК г І ОЖ фе с ЗТ ОКО З, ОКО Н
КО.ш ЕК, шо Ж СІМКИ КВ С Я ве; ККУ Н РВЕ сх ЗОМ я ЗАМ с НН Я : Н : ЖК 7 ММ НК СЕ ВХ, ОО Би ; : Н ПИЖЙИ У Ме Сп Ц "ХО КУА. шосе ЕХ : : Н «ЕД . ЗУ "Кар МК КО т ЗО, : г Н ля я ан КРИК о ВА НИХ Е ! ! ЩО. й СН ХК О ов ВАН ШИ МНН Н А Но: ИН о В «ВХ нн Кв В і З - Як 32 у ва Я -0 «20 З і і кі й У : бізмаеа сувеи поля вииЗНвя НМ) Н р в в В а о а а С м ЯЖ «ріг. 6 я тт тот есе осот тесесттест т ; і ця оо і ї Хе. МНЕ с МН о о АК Ка ; Н МО Пі и А ВК Н : - Ж Ки ва ХХ о : : зе во МИ ПО В КАХ З Н рою енер ення КТ : ОЗОН 6 о о ВХ : Н «КЛФЖИ с и у ВН ПЕК : Н ви Ме НН НН о о БОЮ КО ВК С М ЛюМОМ КО ас Ж НК В В ВХ ВО Н їж М о в ва о вна І НЯ мі о ХО ВВ Кт Ти ОО ІК Н «У ОЕ ЗА; тм У дра р НК НИХ Н ї ПАХ х що ХУ не еко ов Мая о о ВХ УПЮ Н РО 08 фен ве ек і 7 з Я и М АВК ПИ и и М МД НИ: Н зх ж ООН у ОО ОКУ КК ПОМ я ! ЇМ й ЕУКО о Я п о в в я і ЖОВ м КО ик ВХ МУК В о Кос У ВИ і КК сх ВН ПК « ПВ С Воно з, : ГК ге в КО и їх ОМ Ки Ж ОК ОН М ї НУ Ще 5. и ок оо НЕ Не «МУ ОН КК ОК Н 7 зва ОВО ВН ун : І р ЕВ и ОН ! ж щи Й Й.М Дш 1 БУ ЕК ня, ПК ЕК В Н і т ОМ ОВ МО і ї ї ПО І и КК ОО МИ 3 і і ОМА о МК Во кеВ М Я І ЧЕ Мч З ; КОХ ув КОЖ ПК ЯКА а а а що та 756 ща Відносний чіт водя пр середнесму ховлеважн зерна БАХ уончтанннютннтпантннн нення ттенкеннннтнннткннетунтаннеттаннчтантеченакеннссконесосооввпвоососсо
Фі.47 о ОО КК : що плчжтасчннк щ на чАкінкннннн Н Н ' Ко ав ОВ о о ТТ вислав у МВВ ї : КОХ ПЕК КВ ЯК ГО пе ОО ОХ, БЕЗ З : Му Вест ва ПК ВН: : яю СОЛХОВВ КК ВИ Ен ОНИ НА КК хо і : їм ї Во У З СОКУ вх В и ї
Н Е. ОХ си ОМ в У З ЩІ тю ЖД о я Н : ШЕ о і В не Ку т о М УК хвд НН хо УА і п 8: фену КОМ ОО ее дк : З ун: ! Не Ол Во, МК о он ВИ Пс: ВОВНИ Н ни фо ОО 0 ВВ. КЗ годі рей і в М НИ ЗБ НА М МУ два і ле ОВКки Ка В ИН ТЕ ПО а У В : її ну их В В ПВ НД НН Н нс ЕКО ОМ З: сова ОВ ІН
238. «пс В Б КОД ск КВК ляти дае нт Ки ; НЯ ро ОА о М: ЗОНИ ОН "ПОМ Н Н с АВ ох 07 МКК ! що 1 - КК М М А НВ Коко ВН ії З. ТВ ЗАВ АК НЯ о о !
НЯ . М 7 ЖК о У паодла "Й ОБУ Н ЕЕ В. ОК СХ КО ВК ЗВ АТ: у ВК. Н Ще ГОЛ 00 шов ї 183 ди КИ М ММ ДУ УК. лк КВ Н Н 0 дк и ЖИ ДЖ Жов Н Ж УК ми М м. Ж: КУЗЯ 09 НО Н ї СУ А А НАННЯ пи о НО Н ; зуУв нн в КК ет тех у КВ : Н ЗНО жу п Ки Ж ЗИ Ж ВХ пит. ПОВ Н
: о. В ЖИ а и ЩО; ж: НН ШЕ : : З - же ПДВ кА пах: ІН : Ноя ие а ЗНУ З ЗИ : з КІ з де а: ї за Й ад 754 ва жо УК КАН Н КАТЯ З еууиу глум, баах 4 о ге : Я ВАР РІ Я при середньому валиванні зерна прі Я їз- Я ЧнНг. 48 Б НН п нн яння ння нянні еві нат Н Н ї є Н Ме це о ома : НИ : 1 3455 уурежтртяя скевесстечкн Й й і ШК МЖУ Оня у ко в в с осв За ре КМ: и З С ВМО тео ВИЄ ЩО І: ж НН НН а ШІ КОЖ 38 Ка пк В КК кон НН їх ТИХ КК КО о Ми у М о Кор е Бу ! НІ пойу .х ОМВК У ее М ще жещее и ВО й А і ж з ОВ о Ме У су ВД В ЗВ пр Я і ОЕМ о Не КВ мо тю мо а ши МИМО В Не в о, Вест деко нн о Ой Кіт. м я Н Н Я хх В НК «ет. УК Я УНК УК І КОЖ но Ва о рн ВВ ро ВМ. им МО А: ВОК» со : і Не У ОК і Ми у ЕН іЖ зе Б ІК бе А ж ИЙ Е й ух ом сов ВаВро МУКУ т ВВ ВАК КЕ пкт коти КК УК ЯК мк тора Н Кох ХМ о Жй КО. ще ВК ОВК ОКОМ а Ва З МН рої Ж нав ТО Я : В Куда таки» ув КВ ст ої РКО Де бій ос оо ЗК ДА В ух Н с З НН В КЕ КК БО М НЕ ОК ляду КО В КЛ Я нн ДО ря МАС -ї ХПЖКя пот Ж ОК А ВХ Ко ОК ШК ШИ З се У Мне нини и в В вес вовна В
Ук . Во ОО УУ ЛТЕУ «ОКХ и У НН М НЯ Шу - м ОК ко а Ах Й а й ЕКС їх Ще У: КВ що Сх ще ооо ву І рова ен ни ПОС ОА ХУ кун ВИ «в З Ток ПЗ. СО ву В ТМ ІЗ Й у ШО Не ВН ВМ Мои ї Н ОН ОУКОКККУ КО КИ о с ії СА КУПУ УМХ 00 ви ВО ОТ
Ж В. Бланк нт дплжитючуй ее Я ОО оо о ОВ й зу а 4 - 5 у ; і НК за мая 3.5 їж 2 р за 5 48 за 5, Н ямі х Н ! га коренем (гм буду тубі Н Н клав е мом пе Ваня І : Н нин чЧяг. юю
І пеенктнкннннннннння ! Н Н ЗК для і Ге у т, тм ук ідавов пуху ему і і ; КК М о ВАТ ЯМИ ще Н ; Нео ше ик ОХ ПЕ МО ПТ ! КТ ладів ОХ КК и і і В ин ОІВ А КОХ ех М ДА ЯН ! КС ВО пк НВ Б ТО ВАТ Ву ск ї їовва весь В доме сном В Н Ух пак о НН стек. 0 ПИВО ій я ' ак ери поль ЯКО В. МНН 0 дом СУМ шк ин ан х БЕ екс че Сх що ШЕ у щю - шин пн в п п СЕ Б оз о юс. МЕ Ей НИ ож Кещк и и НН а УК: і Н А о я ти с о ВК и ОЇ шин ш НН МВ А ж в а в о и Коя кА и зе Ме у НЯ і ОМ В За я овко ММЖи їж Н ва М НН Ко В ШИ їм оди. ЗМ МКК ПО ОК Води В ! Ноні ОКО хе ИН еВ СЕ по хо Зв НЕ ЩО їх Н о : АЮ ОХ ЗК ВИ «В па Е Н їж Н Іти | пп АК ХК І Не : ЕТО Би ух "Х о оо В ОЗ ІН Н КОЗИ ог ВО В по і зі ут нтнннні у он В, І : го. ТУТ В КК ВВ Я Н РТМ КО о ОН ОН І Н ї нин НН ооо ШК ВК НЕ ОБО Н і ни є НИК МКК ВЕУ ! шо ОТ ИСУВМК соом с В КТК СНИ ЗО ЗСШ ся Б со пом Ку са око ОК З САШМКХх Н і зе Мн В с дн дні У пня ще і : за Б БІУ | | щі : к на 2: із щі і СИ і і : їк Ш шо Н у сет хе зу ізо хеМ г. і : яма ході пе ОдДУ НаЛИВаНЧЯ ЗНА. їпем) Н зкттетотсе того рен чінн кН тонні чт тіжя тях ши ле пдджкцАнииа ника жууютьюьктююьнння Й и і з чт он
800. демо ут нн в с ЕТО мне ок Ко В Боян о о Ж В Б Ву С Ж г пли У ОКХ ХМ ви Ж ; в ше ОПЕК: ши УЖ о 5 Кс тк АК КОХ М о НІ ВБІ) екумннін с Не с В КК ОМ : Кн Я У кає Кит Ви с: Ва кВ ВН ха щу ткдіиле ВК і й ви Б р ЛВ педа ВН ОО ПІДКОВУ Кия І 0 БЖ Мох Н Кок нн у Те ОД о Ж нн и шН - Я оо АНЯ ДО В В Й кт, Я Х й В ше зов щу КК ОЕ НЮХ ов як Ей СК дій Н Кх КЕ о ВК тя, ОК НН МК о 2 я ВОВК ОВ код ен о о В НК НУ А КО М В СХ БОР М ро ов я ГО о М ох сов м НК і Ол нн ВКМ РОМЕО фено Ко ОА КУ Зоо ВИКО їж Зло. ООН У и и п ов зас 5 ЩІ Ей пе НАХ х У па НН ОН: А ен КЕ КК Кк Й Ж а НКУ ОТО ОО ВО М. НИ пввви РО ут УКВ ПЕК В у Ве по В раю еере ЕК Я в В Я і о о НН ж ФМ і ТОЖ» хи ТВ СУК Оси и і ЗЕМ М ОХ КК КИ і «іа 2 ПНО ЕВ ! зх КМ мок Місток м ВВ ЕКО Як пови в п В : К Є 7 З і з 25 35 За 3 38 ях ЗЯ І Н і'віввід цацця й реву по Не су і ав Нвя хвокасв ВК Ни ВУ Н кт жилок жа жАЖЖЖА МАМ ЖАЖ АЖ ЛВ ЖАЛЬ ЖАЛА ЖАКА ЖАЛА ЖАЛЬ УКХ КАЛ ТЕ я я ке я еиеях пестетестесосоєете ленсттентлтнт сл клея сили і вух с те КІ г. Зі п : укедеттяжж ть тини нти ЦААЦКАЄ Книжки ники Н У З і ; їй !
дв. ЩА Н Н ВЕ со ПОЛОМКИ я Н нев гУ ЗВ оп А ЛЕМ УК КК о ЗІ Н Н Н ТАМ й ТЕТУ В ПКЕЕ ВМИ ВК ВН Н і Й КОВО. Я ОПО ОК ОК она Н і 7343 ВОВК ке дік ям В КАВА КОЖ Ї і косо УПАК ПО ЗХ однини Н ке хо и Не ОО і ЯК 0 ою ОК В Ух : і З о щі ПК БО МА. З Н З ту БУ ВО о и Н за В. мя ДУ Ко мо Кл Б в о КЕН Не ВН що ід ще сен вени и І ії: В в в МОМ се. ОО: г не Б п т х ЛІКИ еТКрне., ТООХ ре зва ПО З ти: НЕО: пк МВВ ТОЩО З8Я феох алое ххх снеків жнинн су сн Я КЛ и ВК я Кн и « УЖ - ВК ОВИ сте КК п вх ІК КК УМО КУ, й Ше У їх ГУ пок с КОН НИ ХМ ОМ ХЕ УВУ і ОБ ЗаО Ке В . В Й се ОБ нести В рин ноехван ; В ВК о ов КН ії - Куди Ки с що ОМ Я я Ж ;
к.е о НН, а око с ВИННИХ ї яка ПМ. ЗЛ се жк ВИК КИЙ МО МО с ТОМО ТЕМ рало а УМО МА що Ко рання 1 і АК КК о НИ оо АММ сен іх ! | І Ве ШИ ВВ Зх, Я ЗЗН Пе Я п ЕЕ КУ В і і . оо КМ пт ВЕК. і ві СМ плен КА САМІ ОМ Ще З ї фея ок 4 А Кон в КОХ - і Кв М Ме Ух мови 3 ІК Ох Тож ТС КЕ і І Н ПА ВК Я : Й и МУ В і і Е.О СС - Ж ВОМ 5 Е Її в ОН НН ок о ШЕ и МНН ОК КОМ І і х х Я Н в зх ' БІ че з ме не ве ЗК ноу тих те вані нимиах реак СУС а хаді перу ваше ня зерна ів Мт тіні ттутуют тіж т тв жітті тато тот тт ть . денне поставою нт дондднндоссностн ж
Фіг. 3 ї пап АННННь КАНАТ ТК ТЕТ ТЕ Кондор дінітедтеня І Е Н раз ет | ї ек Й підняття. й ит някнянлюнляняня я ешек сне й ї з ОтЖМ МТВ
Н т. ох МО СЛМУ ПСО і КАК них Й Не В ек по шва Щі і М НЕ Не ДЕ І й : . ВК НИ ЗУ УЯ пд САНЯ В пушю ЖИ І їх 1 БА са ТЛ ОХ Си Й З й у в МОЮ ся Я мг. 7 о СВ етя ке он їй Жи- з ї в У З . Ще ОК ТТ КО коза ОК ДШЯ : ий о ЗНаВИ учи ШОУ КК ж мо «В: я 1 я ПЕ Ки м питне ОККО до В. й ї . ів ще ОНИ Я. ше. -- о І ще С ОК я вх и ПАК ЗУ Код о яке ше Ат ними: З й КБ ШНЕК топа В Хо Му у АН ЗК сх. ен й. т
Р.О НЕВОКУ ГЕН: ДМ Мах ЗХ пе у, ше й НЕ ОБУ ох Же ше ние с. НУ ВИТ іх етно ОНИ: КЕН ха РК Ї оп НВ ЩО НО ща ООН шо Н я ї НЕОН ВОК у Ух Ух пилу Ще ЗВ що і па ее у Уа що пом З . : вне ВК ОХ ВВ: ВОВК я В ОХ ї : ОХ КОКОН ТК ЦВК ОВ отит й . Н ! о ОВ о НН МА: к ща Мах
ЕЕ. и ЩО. ВО м зе елвиноя КН От : і ПЛОВ Ж: Моск ОЕМ ще о КК ; НЕО дн В ДЕ нку ТК МОКкя Шо р о ; Н на УЗ Ше и й Декор п яке ке ВК неви соя Н Н БОНН ЦЯ ОК Мих КИМ Я ОВК М І ся В ВН НЕ: В ЕКО зрек шо. п. ш с ве ОО ЗКУ УКХ УК КК Ще ко о й СКК Уа с Вис КОХ ШК вх яко КМ дя КК Н Я Я ех ВУ ой кон есе ших ! че є ЖЕ ЯК, т ах ХК тоні С і Є 25 15 ИН ЗБ ЯМІЙ хо Ч як | 5 Я г і Ї ВАНН рдчнннннняндюнннях Співвиненення і й. та пентнняненнккх, нення біомаси жені а 7 я нання ї с--й
Фіг. 53 пчжлт пл пжн АРТ АРСР СТОР Іів тегом ндіте релніенее мед чіеннннннчн регент жк Й Щ пен й пехтевючнннгччячен - Те нини - Й А Котов: УКХ 001: Б: ОН ОК то КОН ПО он Кк у Кая КВК с Мови Й у ВН УА ї ЗК її о: ВО ун НОВ же ша Же КЕ Мк тя дк конс ХОМ Ме : КУ з МБ--5 ХВО СВБ їх от КОН ОВ Ай ОО і ОА МеВ ОЙ ч Ти ОКО У сект нан ї ! . . в пох ол жк УЖЕ АЖОМ: З Я рехеавь ОО Є м м КОХ ОЗ ЩИ ди ВК ОК ОА ЗУ: тт Жов ОМ З Б ОВОНЙ ПОД тих КОКО З с ще Ж ж за ВИ рон ОК ДЕ Гео Е : ої М уд В Кос ооо Лк Ук МЕ Н Б НИ депо ке ТО пекенн ш ее ОКО ження ЯК со ОВ З 7 : -5 . 7 я бу й Ме щі і - БУТ я УК Ж - и хо КБ САМО. «ЖЕК. Щі : Ка : п - 5 ах Соки ох ще хх т то га т ОД : і пк за у С УЖ ДК Я щК т. Не ХУ «бненчнновя Ж ВЕУ ях У ух ЗУ пе СЕОНЕООВЬ МУ о о п каш ве те 5 ШЕ я . Ж щі рон У З Я о Сх ни ВК б: ; їх во «Є хх по Жов со З по . ГЕ Кун о ОК, ВОК Кк ново не Ви. ІВ фія Кс СЕ ЗОВ Че СОТ Ук Ах уки к Коен ЕК І З ТІ оо з: ХУООД ОЙ 7 БК Ов я ий - їх М ся КС ЗВ М: ств пошу кВ я р Ба. о ВУ З За Я: но Мо дн ой Е.М шо З ШИ ОВя Диня ОЗ. ВИЙ и вісоний ТЯ Гв | їі ї . дин ше МИИМИИ УЖ: т В те 7 її Оля СЯ ТВ уки сх ен лк в х / Її б о с Й живо ПАТ ВК ОДААКК. о СК ше і фе у Ус сковнх: Пукиту ПУ ДАНЕ і Ск ОК ВИ З Ши ще ок КО с ' 1- тд НИК УК Ка ОН дик 0 КС ку ВННАЕОИ ки : ше «Й Мода. ОКХ Же ВК З КАВА й й. Е п т за ОДН ос оре ОУН М і Е с ще КЗ бонкї Ул Ж В ; : х ВЕ ОА ДК БУ ОКУ МК Н 10 Ко «АК: Жов Ух "У !
Н ї. як ? ДН МОЖ: 5 я і ге 25 5 М С се : Ж до Удпетанннн зевідесниеенях Кс й я 7 бенжюнквеюкнюнсяннх десчненя ваг ще НЯ ЦВК с ВиННЯ І друїу Кий
Фф. 5 нн плтен ! м А ії5 ВО і ККЗ ооо вон і СН шт В МН ВВ що : Би ОА Се ВІКУ УКХ не Кв Н Я НУ Друк ТИ: Оу ЗИ БК ОБ оо ВВ о на ЩА Е х их ОО АВКи УКХ А о ВК М Е ИННЙ ОН ОО Мт кос ! і яд с и в ВУ В а в ШЯ свенини ши а 5 ще ГЕай МО СОМ ситу ХВ одн ВАХ не нний і УА ЕКО ВН ЗЗя. й КО пон КК а ЯН. З В В Н р Я ' неси Ши ше и Я і шо з сн НВ: и: НЕ еВ ШЕ іх сво КН СУ МК г». ОВ БАН КЕ ОС ВЕ ення оВО 5 Е киш КН пас НН: ов їі жш пон вк тт В ОК АК ОН о сонавннй о а ШЕ Би Ще КЕ С Во НМ о ме С ВОНИ ов а Ух - ОО В М З Ти ли лнаненяКя ІМ зві -- ОА, Же ОБ: яма ще р де КН о. м КИ . і ДОК он ж пн ВВ ситне дм в Оле і еВ юри З ХИТ я у і дв ще ОККО Ву МІН А І І ОО ДАН Й нт с КК ля ЕК ЗК Н з МО, Ки В «Мис в ВМО М. ВЕ Н ї Кох ОВ мо М АВ ОВ В а і ООН МК Ме о ТОК М в КН : Ох я но ко нео ВО М і Н ОНИ Со он кох ТВ Кон дя ля А Бо ШИ і о в о Ве НК "нддамутт т осус ВВ В і Ме нин ЗК Б Ше й а ШИ ВЕ МКК удар чАНАН т НИ ФІ НИМ СО ЗО М М й КН На М ОВО І З ще щ п : 5 т та і екв х Щ і СМ в ході пернзу наливання з і й щі шо паду налишанив зевввіммі і о ке доднлндлдададнкикнчнона кими кхнодо линии ле лока до долини ке лолнкнтконннкьне сс де шк
Фир. 55 їв За ; у, ши шин Гена з. і К БА / | , - ТУ
Ь. ї ВХ 24 і уро ; і у ї ї х дя і Ї і 2 Я 3 і ж е-омедттнялня ЇЙ обер ів. і " ги іч чн; зу К ; зх з Г, х КУ 2 Й, ж й ЕН м ;
вк. Я ше щей й І в. : о Б в 1 ЯВІГ. А - реа Кох Й ря ін ! Шо зе БТ8 й пе З х. їх во Її х хх х х хх в М в ме їх М,
м. : М ж ; : я З 8 У БЕХ їі СИ
Чнг. зов
Вихіхі біомаса. акт пе тддвентя т Ге МВУ пою ра РАМ х і у 1-5 12900 3 ї-в і я а - КІ К. зба Я о Я КЕ Кз ра ; ОВ й я х Йой е х дукккес вода - р и ау, ай й ЗО ей Ка С Же ЗИ ою о. КЕ ре сих Ка дет шт же в. смт Й НІ ч х У вві що що 5 т Аве фі. 56 ЗВРІМА БРІВ ТОЮ проти Гл аАНі У Н зиктов тек здімали МК. СУДИНИ У Не кс; жк пу Й УКди и т, Мк Кільце кхаме МОйСУЮ. дути, шко кер сном в упр дий о хорінь сізона лит, покорі я, ЯКІВ; о МЯЖ. зедаки тахе ЗНИК ХВ о рухуд МНИХ ОЕТВХ корінь ЗОрХЮХ дерачнк МНЖНХ СеУАЯК уртину ОО сте са уст КТК" НТ Верхівка НИ я Йо част тіихбаз ху акта ' з ще 1д л астНчнй що стеба бла С яка що Й я їх : КЕ дз і. ше Кк і. й в З : я «зоре не БК. т х в . В НЕ су СПІВ... КІ і Ко що В ща : ЕК "ве з Й Ба ЩЕ піхва»
(о . с. п. н З Шовщиже зв: п0.кчннтатя тент теж тютюн пня Я зятя Японія но пенннннніннннніннтннннни . пн ВВ ни Фіг, 27А
КВРІМФО ОВ МЛ ТД КЮ протя Ге Ж Кале Р лиспючизтухц і т фірм суми Ір МИ» суди пирію СИНЄ КН слі. срок, УФуке оса МОДОДИ зий ЛА й зиуми СВИЇКЦМ. дисукіМ вже ооснне ВАрЖО 000 Я ЯН о ухудко ІБР жд вирхме ПО МНКЕКНХ ЯКО. 0 верхня ЖИ оду НО коріце кати» іл Ужрея ниж. пдизльих «тиви вк сухе ну й верхи і; їй 1 уередна. ша Й Не Мо заеяну см схджа о ВОРКЕ едкуюих ЯОРХНКЕ й й АТХ нку . 5 штзие ш уд ча В Зв ДВО ве хітин мех іт тя рн петеснетниннння с ї г Яке ЯКУ Ії т шо. с: ВН о Ем - Бзх жо КА - Р: МЕ кв. х ІЗ Бо КИЕВ Я ОО їй їх во МОВ ох з БЕ СА. ВО, Вк «ж оо Вже, ВОВК о ШОВ... Кр сек, жан а а а а ді шеЖК Фр, 7 УМ КК Віа кл ут ха М ЗВРЕМА (ОКРІМ ук ТОЮ прото г хоча ЖУЄ і Кіл Епясвяв духа | УКиЖядиІ хна СеЗрАХ кіт пазухи сум Й й в сувцой дсткїв, ХНН КЕ ЗЛЯЄТЕ слух; Вер» ЯК ЕК дар ди о хооівь тей Жерхнх СМКУЮЮЬ хисукіВ МЖК, о зупхих о Бий дих як рЕрхна хоарінкссуедих хори 3 СЕВОННХ дужив Ладена. пастний стеблх ЯМ стбидчитико. коржі уашжння ЗАрхіких : вк я ї «й ї о . : їж ж Я їх НЕ 5 а ООН ко шини схову хКИЖ. ЦЯНВО Я горю Й АБ : ше ші ше ва : їі ШК 5: й й: Та ух ЧУ он нн панни ниж вики си латки я Ві веЗся шОМм тро дв Фіг З
ЗОРІМІ ОБР їх НКЮ щини гхваалиро МО і ашецюмх хм зали» сторнЯ КА о. дж пази ФЕРУ схо. МОЖУ зн хінь КТарЯЙ ашстяін Кіль Кійею ЗйвенН зкстука, верхи. ду СЮ о дня орівь пер зпушя ОКСАНКА 00 ЯЕрХНА ВКА ор 005 ци 0 ЯК ЕУИННХ г МОМ дитя ЗНЖИХ ЗКОМЛЬНХ сота свй 8 ТИЛ СРБИНЕ о зкдухіх застціа Воренех БООСРАЧНЯ 0 ехстяна ИНА ВИМ пла ких Й У 1 ід ехетТинх чину якй ше: ШИ НІ) ОО В о сов о В Бо ТО й 51 Її; щи ї і ко Я НВ - тала х ж Що її М п їй же о і її "В г Кя ві та К: ж І ншчш с: що НК же й В БЖ во М їЕ І ВЕ:
з Я. и «Б. й. Та ни В Н з Фиг, 570
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US41390210P | 2010-11-15 | 2010-11-15 | |
| PCT/AU2011/001478 WO2012065219A1 (en) | 2010-11-15 | 2011-11-15 | Drought tolerant plants |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA113503C2 true UA113503C2 (uk) | 2017-02-10 |
Family
ID=46083419
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201307591A UA113503C2 (uk) | 2010-11-15 | 2011-11-15 | Стійка до засухи рослина |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20130333066A1 (uk) |
| EP (2) | EP2640182B1 (uk) |
| CN (2) | CN103429072A (uk) |
| AU (1) | AU2011331908B2 (uk) |
| BR (1) | BR112013012025A2 (uk) |
| CA (1) | CA2817758C (uk) |
| EA (1) | EA034044B1 (uk) |
| ES (1) | ES2692857T3 (uk) |
| HU (1) | HUE040165T2 (uk) |
| MX (1) | MX352184B (uk) |
| PL (1) | PL2640182T3 (uk) |
| TR (1) | TR201815884T4 (uk) |
| UA (1) | UA113503C2 (uk) |
| WO (1) | WO2012065219A1 (uk) |
| ZA (1) | ZA201303689B (uk) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AR088897A1 (es) | 2011-11-16 | 2014-07-16 | State Of Queensland Acting Through The Dept Of Agriculture Fisheries And Forestry | Plantas tolerantes a sequia |
| CN107988236B (zh) * | 2017-12-13 | 2021-02-09 | 南京农业大学 | 水稻生长素运输蛋白基因OsPIN9的基因工程应用 |
| CN112430604B (zh) * | 2020-12-11 | 2022-11-01 | 河南农业大学 | 基因OsPIN10b的基因工程应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU724041B2 (en) * | 1995-10-12 | 2000-09-07 | Cornell Research Foundation Inc. | Production of water stress or salt stress tolerant transgenic cereal plants |
| WO2000068389A2 (en) * | 1999-05-07 | 2000-11-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Auxin transport proteins |
| WO2003008540A2 (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-30 | Syngenta Participations Ag | Abiotic stress responsive polynucleotides and polypeptides |
| AU2003286088A1 (en) * | 2002-11-29 | 2004-06-23 | The University Of Hong Kong | Genetically modified plants expressing proteinase inhibitors, sapina2a or sapin2b, and methods of use thereof for the inhibition of trypsin-and chymotrypsin-like activities |
| CN1813060A (zh) * | 2003-04-15 | 2006-08-02 | 巴斯福植物科学有限公司 | 对环境胁迫具有提高的耐性的植物细胞和植物 |
| CN100362104C (zh) * | 2004-12-21 | 2008-01-16 | 华中农业大学 | 利用水稻转录因子基因OsNACx提高植物抗旱耐盐能力 |
| EP1910546A2 (en) * | 2005-07-19 | 2008-04-16 | BASF Plant Science GmbH | Yield increase in plants overexpressing the mtp genes |
| US8362325B2 (en) * | 2007-10-03 | 2013-01-29 | Ceres, Inc. | Nucleotide sequences and corresponding polypeptides conferring modulated plant characteristics |
-
2011
- 2011-11-15 CN CN201180062760XA patent/CN103429072A/zh active Pending
- 2011-11-15 HU HUE11841328A patent/HUE040165T2/hu unknown
- 2011-11-15 EP EP11841328.5A patent/EP2640182B1/en not_active Not-in-force
- 2011-11-15 US US13/885,357 patent/US20130333066A1/en not_active Abandoned
- 2011-11-15 CA CA2817758A patent/CA2817758C/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-11-15 WO PCT/AU2011/001478 patent/WO2012065219A1/en active Application Filing
- 2011-11-15 UA UAA201307591A patent/UA113503C2/uk unknown
- 2011-11-15 TR TR2018/15884T patent/TR201815884T4/tr unknown
- 2011-11-15 PL PL11841328T patent/PL2640182T3/pl unknown
- 2011-11-15 MX MX2013005485A patent/MX352184B/es active IP Right Grant
- 2011-11-15 CN CN201810294705.7A patent/CN108624618A/zh active Pending
- 2011-11-15 AU AU2011331908A patent/AU2011331908B2/en not_active Ceased
- 2011-11-15 EP EP18180109.3A patent/EP3434099A1/en not_active Withdrawn
- 2011-11-15 EA EA201390724A patent/EA034044B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2011-11-15 BR BR112013012025A patent/BR112013012025A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2011-11-15 ES ES11841328.5T patent/ES2692857T3/es active Active
-
2013
- 2013-05-21 ZA ZA2013/03689A patent/ZA201303689B/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2011331908B2 (en) | 2015-05-07 |
| TR201815884T4 (tr) | 2018-11-21 |
| CA2817758A1 (en) | 2012-04-24 |
| CN108624618A (zh) | 2018-10-09 |
| EP2640182A1 (en) | 2013-09-25 |
| AU2011331908A1 (en) | 2013-04-18 |
| EA201390724A1 (ru) | 2014-05-30 |
| BR112013012025A2 (pt) | 2019-10-01 |
| ZA201303689B (en) | 2014-07-30 |
| EP2640182B1 (en) | 2018-07-25 |
| ES2692857T3 (es) | 2018-12-05 |
| EP3434099A1 (en) | 2019-01-30 |
| EP2640182A4 (en) | 2014-05-07 |
| CA2817758C (en) | 2019-01-29 |
| HUE040165T2 (hu) | 2019-02-28 |
| CN103429072A (zh) | 2013-12-04 |
| PL2640182T3 (pl) | 2019-02-28 |
| MX352184B (es) | 2017-11-09 |
| WO2012065219A1 (en) | 2012-05-24 |
| MX2013005485A (es) | 2013-09-26 |
| US20130333066A1 (en) | 2013-12-12 |
| EA034044B1 (ru) | 2019-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Souza et al. | Grafting as a strategy to increase flowering of cassava | |
| Ezin et al. | Flooding tolerance of tomato genotypes during vegetative and reproductive stages | |
| AU2012202642B2 (en) | Watermelon pollenizer SP-6 | |
| JP6121998B2 (ja) | Ａｃｃアーゼ阻害性除草剤に対して抵抗性のイネを生成するための方法および組成物 | |
| CN100355897C (zh) | 通过转基因聚合betA、NHX1、PPase基因提高玉米、小麦耐盐耐旱性的方法 | |
| UA118334C2 (uk) | Спосіб отримання генетично модифікованої рослини, яка ефективніше використовує воду | |
| Hall | Breeding cowpea for future climates | |
| KR20100052451A (ko) | 개선된 고추 식물 | |
| CN106967728A (zh) | 一种南瓜抗逆基因CmNAC1及其应用 | |
| CN105018501A (zh) | 拟南芥AtACS2基因在棉花抗旱和早熟方面的应用 | |
| CN113073111B (zh) | 一种提高番茄对土传性病害青枯病抗性的方法 | |
| ES2709891T3 (es) | Tomate con vida útil mejorada | |
| UA113503C2 (uk) | Стійка до засухи рослина | |
| CN104388448B (zh) | 一种玉米磷脂酶A2基因ZmsPLA2-1及其应用 | |
| CN109988815A (zh) | 一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法 | |
| CN105349551A (zh) | 一种玉米mZmDEP基因和其表达抑制结构在玉米抗逆育种中的应用 | |
| CN104073512B (zh) | 一种调控植物内源乙烯含量的方法 | |
| CN109880830A (zh) | 桃多肽激素合成基因PpRGF1及其应用 | |
| CN102296084B (zh) | 生长素输出载体pin1家族基因在玉米、高粱育种中的应用 | |
| CN107889742A (zh) | 利用玉米异源多倍体培育耐盐玉米品种的方法 | |
| CN104945493A (zh) | 一种影响植物生育期的大豆蛋白GmIDD及其编码基因与应用 | |
| KR20210052771A (ko) | 수발아 저항성을 증진시키는 벼 유래 OsPHS5 유전자 및 이의 용도 | |
| CN117603993B (zh) | 烟草NtDUF868-E5基因在烟草抗旱中的应用 | |
| US20200260737A1 (en) | Resistance to heterodera carotae and methods for use | |
| CN117511998A (zh) | 一种提高作物对干旱胁迫耐受能力的方法及其相关基因 |