TWM468523U - 酵素型基因晶片偵測試劑組結構 - Google Patents

Description

酵素型基因晶片偵測試劑組結構

本創作係有關於一種酵素型基因晶片偵測試劑組結構，尤指涉及一種以十七種試劑參與基因晶片反應流程，特別係指可於臨床檢驗檢查時，不需進行放大，直接從血液檢測，透過基因晶片就可以檢測血液裡之基因表現之酵素型基因晶片偵測試劑組結構。

對基因過渡表現(Overexpression)之分析已經導致疾病診斷之基本進步與臨床進展。而研究基因過渡表現之技術係包含有北方墨點法(Northern Blot)、反轉錄聚合酶鏈鎖反應(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)及即時定量聚合酶鏈鎖反應(Real-Time PCR)。其中Northern Blot由於操作步驟十分敏瑣，所需檢體量又過多，因此僅限於研究操作上，無法實際應用於臨床診斷。至於RT-PCR及Real-Time PCR由於操作步驟簡便，因此在單一基因檢測之應用上，使用相當廣泛，例如肝炎病毒之檢測及感染症病原菌之鑑定。然而，雖然PCR序列之創作係作為整體最偉大之實驗，但多數PCR技術仍保有特定之共同問題，其主要問題包含有：其一係汙染，過渡靈敏偵察之偽陽性，例如霧式之DNA或先前之樣品殘餘；其二係RT-PCR僅被認為半定量，因為當比較不同之樣品時，難以控制序列放大之效率；以及其三係由於所需引子(Primer)間黏合(Annearling)之干擾，無論RT-PCR或Real-Time PCR都僅廣泛應用於單一基因標的之檢測，當檢測標的為基因群時，則PCR相關之技術則 有操作耗時、費事及高成本等缺點。

隨著近幾年來生物科技之快速發展，生物晶片於臨床醫學診斷或藥效評估上之應用逐漸被重視，本發明之先前研究已開發並且評估一尼龍膜晶片(Membrane Array)方法，能使用於癌症診斷，在血液檢體(Peripheral Blood)中同時查出一多種mRNA標記引物之表達水準。其分子標誌之表達水準由RT-PCR與尼龍膜晶片評估，數據從RT-PCR與尼龍膜晶片取得，且受制於線性迴歸分析，顯示在這兩個方法結果之間之高度相互關係(r=0.979，P<0.0001)。另外，以相關衍生技術之加權化學冷光型基因晶片(Weighted Chemiluminescent Membrane Array,WCHMA)用於肺癌(Lung Cancer)患者之血液檢體分析標的治療藥物(Target Therapeutic Drug)之作用標的K-ras之異常情形，也已被接受刊登於肺癌期刊中。

雖然尼龍膜晶片於分子診斷及藥效評估上之應用已有許多報告提出，然而，由於原始尼龍膜晶片所使用判讀方法上，對於每一基因在特定疾病之重要性皆等值之概念下，造成檢測特異性在達到一定程度之後便不易提升。對此，本發明另外研究開發一基因群檢測結構，雖可大量並快速進行生物檢體檢測分析，惟其檢測過程需先行放大，並無法達到直接從血液檢測透過基因晶片就能偵測血液裡之基因表現，導致在晶片檢測靈敏度及方便性等方面之要求仍嫌不足；故，一般習用者係無法符合使用者於實際使用時之所需。

本創作之主要目的係在於，克服習知技藝所遭遇之上述問題並提供一種可於臨床檢驗檢查時，不需進行放大，直接從血液檢測，透過基因晶片就可以檢測血液裡之基因表現，具有較高之靈敏度及較佳之方便性，能達到一次滿足高靈敏度及便利性需求之酵素型基因晶片偵測試劑組結構。

為達以上之目的，本創作係一種酵素型基因晶片偵測試劑組結構，包含一基因晶片，其係選定一寡核苷酸片段，並以兩個作為基因晶片反應品質控管依據之管家基因，將此包含多種目標基因之寡核苷酸片段固著於晶片上，形成在該基因晶片上被覆有標定特定序列者；以及一基因晶片反應試劑模組，用以提供該基因晶片進行反應時所需之全部試劑，分為RNA萃取試劑單元、cDNA合成試劑單元、探針標誌試劑單元、雜交反應試劑單元及訊號偵測試劑單元，其中該RNA萃取試劑單元包含蛋白酶試劑、裂解試劑、磁珠試劑、結合試劑、清洗試劑及溶解試劑；該cDNA合成試劑單元包含引子試劑、反轉錄試劑及反轉錄酵素試劑；該探針標誌試劑單元包含標誌試劑；該雜交反應試劑單元包含雜交試劑；以及該訊號偵測試劑單元包含第一清洗試劑、第二清洗試劑、第三清洗試劑、填補試劑、抗體試劑及呈色試劑，共十七種試劑參與反應。

於一較佳實施例中，上述所提之基因晶片係可為尼龍膜或熱塑性複合材料，該熱塑性複合材料並可為聚丙烯(Polypropylene,PP)或聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethyl Methacrylate,PMMA)。

於一較佳實施例中，上述所提之寡核苷酸片段係為人工合成之寡核苷酸溶液，其濃度介於10mM~200mM，序列長度介於40~60鹼基，並與目標基因上所具有之特殊序列呈現互補之關係。

於一較佳實施例中，上述所提之蛋白酶試劑係為蛋白酶K(Protease K)。

於一較佳實施例中，上述所提裂解試劑係由4-羥乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)、氯化鈉(Sodium Chloride)及聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提磁珠試劑係為氧化矽基羥基磁珠。

於一較佳實施例中，上述所提結合試劑係由聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)及氯化鈉所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提清洗試劑係由乙醇(Ethanol)、丙三醇(Glycerin)及醋酸銨(Ammonium Acetate)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提溶解試劑係由三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris-Hydrogen Chloride,Tris-HCl)及乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid,EDTA)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提引子試劑係由寡核苷酸引子(dT primer)及隨機引子(Random primer)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提反轉錄試劑係由三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、氯化鉀(Potassium Chloride,KCl)、氯化鎂(Magnesium Chloride,MgCl)及二硫代蘇糖醇(Dithiothreitol,DTT)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提反轉錄酵素試劑係由反轉錄酵素(Reverse Transcriptase MMLV)及核糖核酸酶抑制劑(Ribonuclease Inhibitor)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提標誌試劑係由隨機引子、Klen Taq聚合酶(Klen Taq Polymerase)、去氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosine Triphosphate,dATP)、去氧胞苷三磷酸(Deoxycytidine Triphosphate,dCTP)、去氧鳥苷三磷酸(Deoxyguanosine Triphosphate,dGTP)、去氧胸苷三磷酸(Deoxythymidine Triphosphate,dTTP)、生物素化去氧三磷酸尿苷(Biotin-dUTP)、Klen Taq緩衝液(Klen Taq Buffer)及丙三醇所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提雜交試劑係由聚乙二醇(Polyethylene Glycol)、十二基硫酸鈉(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)及氯化鈉所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提第一清洗試劑係由十二基硫酸鈉及檸檬酸鈉(Saline Sodium Citrate,SSC)所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提第二清洗試劑係為檸檬酸鈉。

於一較佳實施例中，上述所提第三清洗試劑係由十二基硫酸鈉、聚乙二醇辛基苯基醚、及丙三醇所組成之群組。

於一較佳實施例中，上述所提填補試劑係為阻斷緩衝劑(Blocking Reagent)。

於一較佳實施例中，上述所提抗體試劑係為鹼性磷酸酵素連結抗生物素免疫球蛋白G(Alkaline Phosphatase-conjugated IgG Anti-Biotin)。

於一較佳實施例中，上述所提呈色試劑係為5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸-氯化硝基四氮唑蘭染色液(BCIP/NBT Solution)。

當運用時，該基因晶片反應流程如下：於RNA萃取試劑單元中，先將欲處理之檢體與一蛋白酶試劑混合均勻，再與一裂解試劑混合均勻，置於45~67℃反應8~12分鐘後，加入一磁珠試劑混合均勻，再與一結合試劑混合均勻，置於20~30℃反應8~12分鐘後，以磁鐵固定磁珠去除反應溶液，加入一清洗試劑混合均勻，再以磁鐵固定磁珠去除反應溶液，並加入一溶解試劑混合均勻，接著再置於56~84℃反應8~12分鐘後，以磁鐵固定磁珠，收集所得之RNA溶液進入cDNA合成試劑單元。

於cDNA合成試劑單元中，將該RNA溶液置於56~84℃反應8~12分鐘後，加入一引子試劑混合均勻，並置於-0.5~0.5℃反應1.5~2.5分鐘，接著加入一反轉錄試劑混合均勻，再與一反轉錄酵素試劑混合均勻，置於34~50°C反應96~144分鐘後，取得cDNA溶液，並進入探針標誌試劑單元。

於探針標誌試劑單元中，將上述cDNA溶液置於76~114℃反應4~6分鐘後 ，再置於-0.5~0.5℃反應1.5~2.5分鐘，之後加入一標誌試劑混合均勻，置於34~50℃反應192~288分鐘後，取得探針溶液，並進入雜交反應試劑單元。

於雜交反應試劑單元中，將一基因晶片置入一反應盒，加入一雜交試劑混合均勻，置於34~50℃反應8~12分鐘。另將上述探針溶液置於76~114℃反應4~6分鐘後，再置於-0.5~0.5℃反應1.5~2.5分鐘，之後將此探針溶液加入該反應盒中，置於34~50℃反應384~576分鐘後，取得雜交溶液，並進入訊號偵測試劑單元。

於訊號偵測試劑單元中，將上述雜交溶液移除，留下基因晶片於反應盒中，加入一第一清洗試劑，於反應4~6分鐘後移除，重複兩次。繼之，加入一第二清洗試劑，置於34~50℃反應4~6分鐘後移除，重複兩次。接著，加入一填補試劑，反應24~36分鐘後移除，再加入一抗體試劑，反應72~108分鐘後移除，之後加入一第三清洗試劑，反應4~6分鐘後移除，重複兩次。最後加入一呈色試劑，置於34~50℃反應直到訊號產生，之後加入水清洗，直到訊號停止繼續產生，於烘乾後即得到偵測結果，並可根據此結果觀察管家基因之表現情形。

1‧‧‧基因晶片

2‧‧‧基因晶片反應試劑模組

21‧‧‧RNA萃取試劑單元

22‧‧‧cDNA合成試劑單元

23‧‧‧探針標誌試劑單元

24‧‧‧雜交反應試劑單元

25‧‧‧訊號偵測試劑單元

第1圖，係本創作之架構示意圖。

請參閱『第1圖』所示，係本創作之架構示意圖。如圖所示：本創作係一種酵素型基因晶片偵測試劑組結構結構，包含一基因晶片1及一基因晶片反應試劑模組2。

上述基因晶片1係選定一寡核苷酸片段，並以兩個作為基因晶片反應品質控管依據之管家基因(Housekeeping Gene)，將此包含多種目標基因之 寡核苷酸片段固著於晶片上，形成在該基因晶片上被覆有標定特定序列者。其中，該寡核苷酸片段係為人工合成之寡核苷酸溶液，其濃度介於10mM~200mM，序列長度介於40~60鹼基，並與目標基因上所具有之特殊序列呈現互補之關係。

上述基因晶片反應試劑模組2係用以提供該基因晶片1進行反應時所需之全部試劑，分為RNA萃取試劑單元21、cDNA合成試劑單元22、探針標誌試劑單元23、雜交反應試劑單元24及訊號偵測試劑單元25，其中該RNA萃取試劑單元21包含蛋白酶試劑、裂解試劑、磁珠試劑、結合試劑、清洗試劑及溶解試劑；該cDNA合成試劑單元22包含引子試劑、反轉錄試劑及反轉錄酵素試劑；該探針標誌試劑單元23包含標誌試劑；該雜交反應試劑單元24包含雜交試劑；以及該訊號偵測試劑單元25包含第一清洗試劑、第二清洗試劑、第三清洗試劑、填補試劑、抗體試劑及呈色試劑，共十七種試劑參與反應。藉此，構成一全新之酵素型基因晶片偵測試劑組結構結構。

上述基因晶片1係可為尼龍膜(Nylon membrane)或熱塑性複合材料等可讓核苷酸附著於其上之材料，其中該熱塑性複合材料並可為聚丙烯(Polypropylene,PP)或聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethyl Methacrylate,PMMA)。該基因晶片1係將該寡核苷酸溶液以30標準升(nL)以上之量，分布於晶片基質上，並以現有規劃之方式將寡核苷酸片段重複及排列，乾燥後以紫外光照射固化而成。

當運用時，於一較佳實施例中，該基因晶片1反應流程如下：於RNA萃取試劑單元21中，先將欲處理之檢體與一蛋白酶試劑，即6mAU之蛋白酶K(Protease K)混合均勻，再與一由200mM之4-羥乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)、400mM之氯化鈉(Sodium Chloride)及1%之聚乙二醇辛基苯基醚( Triton X-100)組成之裂解試劑混合均勻，置於56℃反應10分鐘後，加入一磁珠試劑，即25mg/ml之氧化矽基羥基磁珠混合均勻，再與一由12.5%之聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)及2M之氯化鈉組成之結合試劑混合均勻，置於25℃反應10分鐘後，以磁鐵固定磁珠去除反應溶液，加入一由70%之乙醇(Ethanol)、1%之丙三醇(Glycerin)及100mM之醋酸銨(Ammonium Acetate)組成之清洗試劑混合均勻，再以磁鐵固定磁珠去除反應溶液，並加入一由20mM之三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris-Hydrogen Chloride,Tris-HCl)及1mM之乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid,EDTA)組成之溶解試劑混合均勻，接著再置於70℃反應10分鐘後，以磁鐵固定磁珠，收集所得之RNA溶液進入cDNA合成試劑單元22。

於cDNA合成試劑單元22中，將該RNA溶液置於70℃反應10分鐘後，加入一由300ng/ul之寡核苷酸引子(dT primer)及100ng/ul之隨機引子(Random primer)組成之引子試劑混合均勻，並置於0℃反應2分鐘，接著加入一由250mM之三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、375mM之氯化鉀(Potassium Chloride,KCl)、15mM之氯化鎂(Magnesium Chloride,MgCl)及100mM之二硫代蘇糖醇(Dithiothreitol,DTT)組成之反轉錄試劑混合均勻，再與一由200unit之反轉錄酵素(Reverse Transcriptase MMLV)及25unit之核糖核酸酶抑制劑(Ribonuclease Inhibitor)組成之反轉錄酵素試劑混合均勻，置於42℃反應120分鐘後，取得cDNA溶液，並進入探針標誌試劑單元23。

於探針標誌試劑單元23中，將上述cDNA溶液置於95℃反應5分鐘後，再置於0℃反應2分鐘，之後加入一由80ng/ml之隨機引子、2U/ul之Klen Taq聚合酶(Klen Taq Polymerase)、1mM之去氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosine Triphosphate,dATP)、1mM之去氧胞苷三磷酸( Deoxycytidine Triphosphate,dCTP)、1mM之去氧鳥苷三磷酸(Deoxyguanosine Triphosphate,dGTP)、0.6mM之去氧胸苷三磷酸(Deoxythymidine Triphosphate,dTTP)、0.4mM之生物素化去氧三磷酸尿苷(Biotin-dUTP)、20%之Klen Taq緩衝液(Klen Taq Buffer)及20%之丙三醇組成之標誌試劑混合均勻，置於42℃反應240分鐘後，取得探針溶液，並進入雜交反應試劑單元24。

於雜交反應試劑單元24中，將該基因晶片1置入一反應盒，加入一由10%之聚乙二醇(Polyethylene Glycol)、10%之十二基硫酸鈉(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)及2M之氯化鈉組成之雜交試劑混合均勻，置於42℃反應10分鐘，另將上述探針溶液置於95℃反應5分鐘後，再置於0℃反應2分鐘，之後將此探針溶液加入該反應盒中，置於42℃反應480分鐘後，取得雜交溶液，並進入訊號偵測試劑單元25。

於訊號偵測試劑單元25中，將上述雜交溶液移除，留下基因晶片1於反應盒中，加入一由0.5%之十二基硫酸鈉及0.05X之檸檬酸鈉(Saline Sodium Citrate,SSC)組成之第一清洗試劑，於反應5分鐘後移除，重複兩次。繼之，加入一2X之檸檬酸鈉作為第二清洗試劑，置於42℃反應5分鐘後移除，重複兩次。接著，加入一1.5%之阻斷緩衝劑(Blocking Reagent)作為填補試劑，反應30分鐘後移除，再加入一0.7ug/ml之鹼性磷酸酵素連結抗生物素免疫球蛋白G(Alkaline Phosphatase-conjugated IgG Anti-Biotin)作為抗體試劑，反應90分鐘後移除，之後加入一由1%之十二基硫酸鈉、1%之聚乙二醇辛基苯基醚、及1%之丙三醇組成之第三清洗試劑，反應5分鐘後移除，重複兩次。最後加入一1X之5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸-氯化硝基四氮唑蘭染色液(BCIP/NBT Solurion)作為呈色試劑，置於42℃反應直到訊號產生，之後加入水清洗，直到訊號停止繼續產生，於烘乾後即得到偵測結果，並可根 據此結果觀察管家基因之表現情形。

藉此，透過本創作提出之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，可於臨床檢驗檢查時，不需進行放大，直接從血液檢測，透過基因晶片就可以檢測血液裡之基因表現，相較傳統技術，具有較高之靈敏度及較佳之方便性，達到一次滿足高靈敏度及便利性之需求。

綜上所述，本創作係一種酵素型基因晶片偵測試劑組結構，可有效改善習用之種種缺點，可於臨床檢驗檢查時，不需進行放大，直接從血液檢測，透過基因晶片就可以檢測血液裡之基因表現，相較傳統技術，具有較高之靈敏度及較佳之方便性，能達到一次滿足高靈敏度及便利性之需求，進而使本創作之產生能更進步、更實用、更符合使用者之所須，確已符合新型專利申請之要件，爰依法提出專利申請。

惟以上所述者，僅為本創作之較佳實施例而已，當不能以此限定本創作實施之範圍；故，凡依本創作申請專利範圍及新型說明書內容所作之簡單的等效變化與修飾，皆應仍屬本創作專利涵蓋之範圍內。

1‧‧‧基因晶片

2‧‧‧基因晶片反應試劑模組

21‧‧‧RNA萃取試劑單元

22‧‧‧cDNA合成試劑單元

23‧‧‧探針標誌試劑單元

24‧‧‧雜交反應試劑單元

25‧‧‧訊號偵測試劑單元

Claims (20)

1. 一種酵素型基因晶片偵測試劑組結構，係包括：一基因晶片，其係選定一寡核苷酸片段，並以兩個作為基因晶片反應品質控管依據之管家基因，將此包含多種目標基因之寡核苷酸片段固著於晶片上，形成在該基因晶片上被覆有標定特定序列者；以及一基因晶片反應試劑模組，用以提供該基因晶片進行反應時所需之全部試劑，分為RNA萃取試劑單元、cDNA合成試劑單元、探針標誌試劑單元、雜交反應試劑單元及訊號偵測試劑單元，其中該RNA萃取試劑單元包含蛋白酶試劑、裂解試劑、磁珠試劑、結合試劑、清洗試劑及溶解試劑；該cDNA合成試劑單元包含引子試劑、反轉錄試劑及反轉錄酵素試劑；該探針標誌試劑單元包含標誌試劑；該雜交反應試劑單元包含雜交試劑，並具有一反應盒，提供該基因晶片置入於其中；以及該訊號偵測試劑單元包含第一清洗試劑、第二清洗試劑、第三清洗試劑、填補試劑、抗體試劑及呈色試劑，共十七種試劑參與反應。
2. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該基因晶片係可為尼龍膜或熱塑性複合材料，該熱塑性複合材料並可為聚丙烯(Polypropylene,PP)或聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethyl Methacrylate,PMMA)。
3. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該寡核苷酸片段係為人工合成之寡核苷酸溶液，其濃度介於10mM~200mM，序列長度介於40~60鹼基，並與目標基因上所具有之特殊序列呈現互補之關係。
4. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中， 該蛋白酶試劑係為蛋白酶K(Protease K)。
5. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該裂解試劑係由4-羥乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)、氯化鈉(Sodium Chloride)及聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)所組成之群組。
6. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該磁珠試劑係為氧化矽基羥基磁珠。
7. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該結合試劑係由聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)及氯化鈉所組成之群組。
8. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該清洗試劑係由乙醇(Ethanol)、丙三醇(Glycerin)及醋酸銨(Ammonium Acetate)所組成之群組。
9. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該溶解試劑係由三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris-Hydrogen Chloride,Tris-HCl)及乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid,EDTA)所組成之群組。
10. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該引子試劑係由寡核苷酸引子(dT primer)及隨機引子(Random primer)所組成之群組。
11. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該反轉錄試劑係由三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、氯化鉀(Potassium Chloride,KCl)、氯化鎂(Magnesium Chloride,MgCl)及二硫代蘇糖醇(Dithiothreitol,DTT)所組成之群組。
12. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該反轉錄酵素試劑係由反轉錄酵素(Reverse Transcriptase MMLV)及核糖核酸酶抑制劑(Ribonuclease Inhibitor)所組成之群組。
13. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該標誌試劑係由隨機引子、Klen Taq聚合酶(Klen Taq Polymerase)、去氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosine Triphosphate,dATP)、去氧胞苷三磷酸(Deoxycytidine Triphosphate,dCTP)、去氧鳥苷三磷酸(Deoxyguanosine Triphosphate,dGTP)、去氧胸苷三磷酸(Deoxythymidine Triphosphate,dTTP)、生物素化去氧三磷酸尿苷(Biotin-dUTP)、Klen Taq緩衝液(Klen Taq Buffer)及丙三醇所組成之群組。
14. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該雜交試劑係由聚乙二醇(Polyethylene Glycol)、十二基硫酸鈉(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)及氯化鈉所組成之群組。
15. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該第一清洗試劑係由十二基硫酸鈉及檸檬酸鈉(Saline Sodium Citrate,SSC)所組成之群組。
16. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該第二清洗試劑係為檸檬酸鈉。
17. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該第三清洗試劑係由十二基硫酸鈉、聚乙二醇辛基苯基醚、及丙三醇所組成之群組。
18. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該填補試劑係為阻斷緩衝劑(Blocking Reagent)。
19. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中， 該抗體試劑係為鹼性磷酸酵素連結抗生物素免疫球蛋白G(Alkaline Phosphatase-conjugated IgG Anti-Biotin)。
20. 依申請專利範圍第1項所述之酵素型基因晶片偵測試劑組結構，其中，該呈色試劑係為5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸-氯化硝基四氮唑蘭染色液(BCIP/NBT Solution)。