TWI816026B

TWI816026B - 磷酸二酯酶抑制劑的用途和藥盒

Info

Publication number: TWI816026B
Application number: TW109107559A
Authority: TW
Inventors: 盛澤娟; 永謙吳
Original assignee: 大陸商藥捷安康(南京)科技股份有限公司
Priority date: 2019-03-08
Filing date: 2020-03-06
Publication date: 2023-09-21
Also published as: KR20210136104A; EP3939588A1; CN111658653A; AU2020235187A8; US20220160696A1; EP3939588A4; JP2022533879A; WO2020182076A1; TW202100151A; AU2020235187B8; CA3132895C; SG11202109781QA; AU2020235187A1; JP7404616B2; CA3132895A1; CN111658653B; AU2020235187B2

Abstract

本發明屬於醫藥技術領域，具體涉及通式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物在製備治療心衰竭疾病的藥物中的用途。X₁、X₂、X₃、X₄、R₁、R₂、L、m和環A如說明書中所定義。實驗證明，本發明化合物可以改善心衰竭大鼠的心臟功能，述轉大鼠心衰竭後導致的心肌重建，降低梗塞邊緣區域纖維化，具有治療心衰竭的臨床應用潛力。

Description

磷酸二酯酶抑制劑的用途和藥盒

本發明屬於醫藥技術領域，具體涉及通式(I)所示的磷酸二酯酶9(PDE9)抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體、氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途。

心臟衰竭(Heat Failure，簡稱心衰竭)是一種臨床綜合症，其特徵是由於心臟結構和/或功能異常，引起靜息或負荷時心輸出量減少和/或心內壓力增高，從而導致的病理生理狀態，例如呼吸困難、踝部水腫和疲乏，也可伴有體症，例如頸靜脈壓升高、肺部囉音和末梢水腫等。根據左心室射血分數(LVEF)的測量、利鈉肽水準及心臟功能異常等指標，分為射血分數保留的心衰竭(HFpEF，LVEF>50%)、射血分數中間值的心衰竭(HFmrEF，LVEF在40%-49%)和射血分數降低的心衰竭(HFrEF，LVEF<40%)。根據心衰竭時間過程或嚴重程度等，又分為急性心衰竭、慢性心衰竭、失代償性心衰竭、前心衰竭階段、前臨床心衰竭階段、臨床心衰竭階段、難治性終末期心衰竭階段；紐約心臟協會(NYHA)心功能分級I級、II級、III級、IV級的心衰竭等。心衰竭的發病與異常負荷(高血壓、瓣膜和心肌結構缺陷、心包和心內膜心肌病變、高輸出量狀態、容量負荷過重、肺部疾病)、心肌病變(缺血性心臟病、毒性損傷、免疫介導的和炎症損害、心肌浸潤性病變、內分泌代謝性疾病、遺傳或應激導致心肌病變等）、心律失常（心動過速、心動過緩）有關，而感染、貧血、妊娠、分娩、心律紊亂、肺栓塞、糖尿病、服用抑制心臟的藥物會加重心衰竭。在發達國家，心衰竭的發病率約為成年人群的1-2%，在年齡大於70歲的人群中，升高到10%以上。在年齡55歲時的心衰竭終生風險，男性為33%，女性為28%。

經研究，神經內分泌系統的啟動所導致的心肌重建（如心肌肥厚、心臟擴大、心臟壁變薄等）是引起心衰竭發生和發展的關鍵因素。心肌重建最初可以對心功能產生部分代償，但隨著心肌重建的加劇，心功能逐漸由代償向失代償轉變，導致出現更明顯的症狀和體症。因此如何預防或逆轉心臟重建成為慢性心衰竭的主要治療目標之一。（中華醫學會心血管病學分會心臟衰竭學組，中國醫師協會心臟衰竭專業委員會中華心血管病雜誌編輯委員會. 中國心臟衰竭診斷和治療指南2018 [J] . 中華心血管病雜誌，2018,46( 10 ): 760-789. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3758.2018.10.004）。

目前對於心衰竭的治療，大部分是藉由藥物緩解疾病病症，而無法明顯改善心臟功能，同時現有治療藥物多具有一定的副作用。同時許多現有治療未能改善HFpEF患者的預後，也未降低病死率。而HFpEF型心衰竭占總心衰竭人數的50%左右。

磷酸二酯酶（phosphodiesterass, PDEs）是一類蛋白酶，能選擇性的降解體內重要的第二信使cGMP（cyclic guanosine monophosphate，環磷酸鳥苷）和cAMP（環磷酸腺苷），從而參與代謝、神經傳遞、細胞生長和分化等生理過程。依據基因的序列同源性和對cGMP或cAMP的選擇性，PDEs可分為（PDE1~PDE11）11個成員。其中，PDE9是PDE家族中的重要一員，其廣泛表達於睪丸、大腦、小腸、骨肌、心臟、肺、胸腺和胰臟。隨著近幾年的研究深入，已有多篇文獻報導和臨床資料證明，PDE9抑制劑用於治療由於中樞神經系統紊亂導致的認知損害方面的疾病，比如老年癡呆症和精神分裂症、大腦的神經變性過程疾病。

經文獻調查研究發現，在心肌細胞中，cGMP的升高可啟動蛋白激酶G（PKG），而該蛋白可起到心肌保護的作用，因此該通路是心衰竭治療時的一個重要訊號通路。而PDE9可選擇性水解cGMP，從而降低了PKG的心肌保護作用。同時，心衰竭時PDE9表達量顯著升高，尤其是HFpEF，因此心肌保護能力大大減弱。因此，抑制心衰竭患者中的PDE9可以起到心臟保護。本發明人對PDE9的生物功能進一步的研究，旨在探索其在治療心衰竭領域中的作用。

本發明研究了PDE9抑制劑在心衰竭領域的用途，研究發現，本發明的PDE9抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物對於心衰竭的治療有顯著的作用。因此，本發明的目的是，提供PDE9抑制劑在治療心衰竭方面的新用途。

本發明採用的技術方案如下：通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途， （I）其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，N雜原子可以任選被氧化為； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基、C_1-6 烷基磺醯氨基、C_1-6 烷羰氧基、C_3-6 環烷基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、鹵代C_1-6 烷氧基、未被取代或任選被取代基取代的4-6元雜環基和未被取代或任選被取代基取代的雜芳基的基團取代；上述任選被取代基取代的4-6元雜環基、任選被取代基取代的雜芳基的取代基選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基； L為鍵、-NH-(CH₂ )t-，t為0、1、2或3；環A為3-12元雜環基、芳基、5-10元雜芳基、3-12元環烷基、3-12元環烯基，其中該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ，C原子可任選被氧化為C(O)，N雜原子可以任選被氧化為，該5-10元雜芳基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基未被取代或任選被選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基和C_1-6 烷基磺醯氨基的基團取代； m為0、1、2或3； R₂ 選自氫、C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 、X₄ 分別獨立地為CH，X₃ 為CR₃ 。

在一個實施方案中，X₁ 、X₄ 分別獨立地為CH，X₂ 為N，X₃ 為CR₃ 。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 分別獨立地為CH，X₃ 為CR₃ ，X₄ 為N。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ 。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ；其中， R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氨基、氰基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基、未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代；環A為3-12元雜環基，該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基未被取代或被羥基取代； m為0、1或2； R₂ 選自氫或C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，A為3-12元雜環基，較佳為4-7元雜環基。

在一個實施方案中，A為3-12元雜環基，較佳為7-12元螺雜環基。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、環丙基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、環丙基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基和未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代； L為鍵；環A為、和；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、C_1-4 烷基和C_1-4 烷氧基； m為0、1或2。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氰基、氨基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基的基團取代； L為鍵；環A選自、和； m為0。

通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，其用於治療哺乳動物心衰竭疾病， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，N雜原子可以任選被氧化為； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基、C_1-6 烷基磺醯氨基、C_1-6 烷羰氧基、C_3-6 環烷基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、鹵代C_1-6 烷氧基、未被取代或任選被取代基取代的4-6元雜環基和未被取代或任選被取代基取代的雜芳基的基團取代；上述任選被取代基取代的4-6元雜環基、任選被取代基取代的雜芳基的取代基選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基； L為鍵、-NH-(CH₂ )t-，t為0、1、2或3；環A為3-12元雜環基、芳基、5-10元雜芳基、3-12元環烷基、3-12元環烯基，其中該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ，C原子可任選被氧化為C(O)，N雜原子可以任選被氧化為，該5-10元雜芳基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基未被取代或任選被選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基和C_1-6 烷基磺醯氨基的基團取代； m為0、1、2或3； R₂ 選自氫、C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ 。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，其用於治療哺乳動物心衰竭疾病， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ；其中， R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氨基、氰基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基、未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代；環A為3-12元雜環基，該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基未被取代或被羥基取代； m為0、1或2； R₂ 選自氫或C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，A為3-12元雜環基，較佳為4-7元雜環基。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，其用於治療哺乳動物心衰竭疾病， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、環丙基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、環丙基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基和未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代； L為鍵；環A為、和；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、C_1-4 烷基和C_1-4 烷氧基； m為0、1或2。

在另一實施方式中，通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，其用於治療哺乳動物心衰竭疾病， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氰基、氨基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基的基團取代； L為鍵；環A選自、和； m為0。

治療哺乳動物心衰竭疾病的方法，其包括對患者或受試者施用通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，N雜原子可以任選被氧化為； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基、C_1-6 烷基磺醯氨基、C_1-6 烷羰氧基、C_3-6 環烷基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、鹵代C_1-6 烷氧基、未被取代或任選被取代基取代的4-6元雜環基和未被取代或任選被取代基取代的雜芳基的基團取代；上述任選被取代基取代的4-6元雜環基、任選被取代基取代的雜芳基的取代基選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基； L為鍵、-NH-(CH₂ )t-，t為0、1、2或3；環A為3-12元雜環基、芳基、5-10元雜芳基、3-12元環烷基、3-12元環烯基，其中該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ，C原子可任選被氧化為C(O)，N雜原子可以任選被氧化為，該5-10元雜芳基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基未被取代或任選被選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基和C_1-6 烷基磺醯氨基的基團取代； m為0、1、2或3； R₂ 選自氫、C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ 。

在另一實施方式中，治療哺乳動物心衰竭疾病的方法，其包括對患者或受試者施用通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ；其中， R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氨基、氰基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基、未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代；環A為3-12元雜環基，該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基未被取代或被羥基取代； m為0、1或2； R₂ 選自氫或C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，A為3-12元雜環基，較佳為4-7元雜環基。

在另一實施方式中，治療哺乳動物心衰竭疾病的方法，其包括對患者或受試者施用通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、環丙基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、環丙基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基和未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代； L為鍵；環A為、和；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、C_1-4 烷基和C_1-4 烷氧基； m為0、1或2。

在另一實施方式中，治療哺乳動物心衰竭疾病的方法，其包括對患者或受試者施用通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物， 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氰基、氨基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基的基團取代； L為鍵；環A選自、和； m為0。

一種藥物組合物，其包含（ a ）通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，用於治療哺乳動物心衰竭疾病。

一個藥盒，包含（ a ）通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物和（ b ）使用該化合物及其藥學上可接受的鹽或其異構體或其氘代化合物用於治療哺乳動物心衰竭疾病藥物的說明書。

在涉及藥物組合物和藥盒的實施方案中，通式（ I ）中： 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，N雜原子可以任選被氧化為； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、C_3-6 環烷基、4-6元雜環基、C_1-6 烷羰基、氨基羰基、C_1-6 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、4-6元雜環基羰基和5-6元雜芳基-氧基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基、C_1-6 烷基磺醯氨基、C_1-6 烷羰氧基、C_3-6 環烷基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、鹵代C_1-6 烷氧基、未被取代或任選被取代基取代的4-6元雜環基和未被取代或任選被取代基取代的雜芳基的基團取代；上述任選被取代基取代的4-6元雜環基、任選被取代基取代的雜芳基的取代基選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基； L為鍵、-NH-(CH₂ )t-，t為0、1、2或3；環A為3-12元雜環基、芳基、5-10元雜芳基、3-12元環烷基、3-12元環烯基，其中該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ，C原子可任選被氧化為C(O)，N雜原子可以任選被氧化為，該5-10元雜芳基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基，其中該C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、鹵代C_1-6 烷基、鹵代C_1-6 烷氧基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷基硫基、3-12元環烷基、3-12元環烯基、3-12元雜環基、芳基和5-10元雜芳基未被取代或任選被選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷氧C_1-6 烷氧基、C_1-6 烷基氨基、(C_1-6 烷基)₂ 氨基、C_1-6 烷基羰基氨基和C_1-6 烷基磺醯氨基的基團取代； m為0、1、2或3； R₂ 選自氫、C_1-6 烷基、C_2-8 烯基、C_2-8 炔基、鹵代C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ 。

在另一實施方式中，本發明涉及一種藥物組合物，其包含（ a ）通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物，用於治療哺乳動物心衰竭疾病。

在另一實施方式中，一個藥盒，包含（ a ）通式（ I ）所示的磷酸二酯酶 9 （ PDE9 ）抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物和（ b ）使用該化合物及其藥學上可接受的鹽或其異構體或其氘代化合物用於治療哺乳動物心衰竭疾病藥物的說明書。

在涉及藥物組合物和藥盒的實施方案中，通式（ I ）中： 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ；其中， R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氨基、氰基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_2-6 烯基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基、(C_1-6 烷基)₂ 氨羰基、C_1-4 烷基磺醯基、C_1-4 烷基硫基、氨基羰基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基和呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基、未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代；環A為3-12元雜環基，該3-12元雜環基的雜原子選自O、S、N中的一種或其任意組合，S原子可任選被氧化為S(O)或S(O)₂ ；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、羥基、氰基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基和5-6元雜芳基未被取代或被羥基取代； m為0、1或2； R₂ 選自氫或C_1-6 烷基。

在一個實施方案中，A為3-12元雜環基，較佳為4-7元雜環基。

在涉及藥物組合物和藥盒的實施方案中，通式（ I ）中： 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、環丙基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_1-4 烷氨羰基和氨基羰基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、環丙基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基和未被取代或被C_1-4 烷基取代的4-6元雜環基的基團取代； L為鍵；環A為、和；每個R₁ 分別獨立地選自氫、氘、C_1-4 烷基和C_1-4 烷氧基； m為0、1或2。

在涉及藥物組合物和藥盒的實施方案中，通式（ I ）中： 其中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 分別獨立地選自CR₃ 或N，且X₁ 、X₂ 、X₃ 、X₄ 不同時為CR₃ ； R₃ 在每次出現時獨立地選自氫、氘、氰基、氨基、鹵素、羧基、C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基，其中該C_1-4 烷基、C_1-4 烷氧基、C_2-6 烯基、C_1-4 烷羰基、C_2-6 炔基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、C_1-4 烷氨羰基、C_1-4 烷基硫基、C_1-4 烷基磺醯基、環丙基、氮雜環丁烷基、嗎啉基、呱嗪基未被取代或任選被一至複數獨立選自羥基、氨基、鹵素、C_1-4 烷基、C_1-4 烷基氨基、(C_1-4 烷基)₂ 氨基、環丙基、C_1-4 烷羰氧基的基團取代； L為鍵；環A選自、和； m為0。

在另一種實施方式中，所述的異構體是指立體異構體和互變異構體。

本發明的一個實施方式，通式（ I ）所示的結構 R₂ 為氫時，具有通式（ I’ ）所示的互變異構體 （I）的互變異構體為（I’）。

在本發明的一種實施方式中，通式（ I ）所示的化合物的氘代化合物，其結構上的氫原子可任意被一至複數氘原子所氘代。

在另一實施方式中，所述的哺乳動物是人類和動物類。

在本發明的一種實施方式中，本發明該通式（ I ）的化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物選自表 1 所示結構。 表1

序號	結構	序號	結構
1		2
3		4
5		6
7		8
9		10
11		12
13		14
15		16
17		18
19		20
21		22
23		24
25		26
27		28
29		30
31		32
33		34
35		36
37		38
39		40
41		42
43		44
45		46
47		48
49		50
51		52
53		54
55		56
57		58
59		60
61	123	62
63		64
65		66
67		68
69		70
71		72
73		74
75		76
77		78
79		80
81		82
83		84
85		86
87		88
89		90
91		92
93		94
95		96
97		98
99		100
101		102
103		104
105		106
107		108
109		110
111		112
113		114
115		116
117		118
119		120
121		122
123		124

在本發明的一種實施方式中，本發明該通式（ I ）的化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物選自以下結構： 、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、。

在本發明的一種實施方式中，本發明該通式（ I ）的化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物選自以下結構： 。

該哺乳動物心衰竭，是指該哺乳動物正在經歷或曾經患有心力衰竭，或該哺乳動物為心衰竭的易感型哺乳動物。而該心力衰竭的類型及病因為本發明中說提及的任何一種或幾種。

在本發明的另一種實施方式中，該心衰竭疾病為不同分類依據下的各種心衰竭，包括但不限於左心臟衰竭、右心臟衰竭、全心臟衰竭；急性心衰竭、慢性心衰竭、失代償性心衰竭；收縮性和舒張性心臟衰竭；前心衰竭階段、前臨床心衰竭階段、臨床心衰竭階段、難治性終末期心衰竭階段；紐約心臟協會（NYHA）心功能分級 I級、II級、III級、IV級的心衰竭等；左心室射血分數降低型心衰竭、左心室射血分數中間值心衰竭、左心室射血分數保留型心衰竭。

在本發明的另一種實施方式中，該心衰竭疾病選自但不限於缺血性心臟病導致的心衰竭、毒性損害導致的心衰竭、免疫介導的和炎症損害導致的心衰竭、浸潤性病變導致的心衰竭、代謝紊亂導致的心衰竭、遺傳異常導致的心衰竭、異常負荷導致的心衰竭、心律失常導致的心衰竭。

在本發明的另一種實施方式中，該心衰竭疾病為缺血性心臟病導致的心衰竭。

在本發明的另一種實施方式中，該心衰竭疾病選自收縮性心臟衰竭和舒張性心力衰竭。

所述的收縮性心臟衰竭包括但不限於具備至少一個以下特徵：心肌收縮功能減退；左心室射血分數降低；心室或心臟收縮及/或舒張末期容積增加；檢測顯示有心肌纖維化；心室壁先變厚再變薄（如肥厚型心肌病擴張期）等特徵。

所述的舒張性心臟衰竭包括但不限於具備至少一個以下特徵：心肌舒張功能減退；左心室射血分數降低；左心室射血分數保留；左心室射血分數中間值；心臟品質增加或心臟肥厚；心肌細胞紊亂或無序排列等特徵。

在本發明的另一種實施方式中，通式（I）化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物藉由抑制PDE9活性，提高環磷酸鳥苷酸的水準，起到治療心衰竭的作用效果。

在本發明的另一種實施方式中，通式（I）化合物及其藥學上可接受的鹽、異構體和氘代化合物藉由改善心衰竭患者或受試者的心臟功能，逆轉心衰竭患者或受試者的心肌重建，起到治療心衰竭的作用效果。

在本發明的另一種實施方式中，所述的治療心衰竭疾病的藥物還包括第二種或多種治療劑。

在本發明的另一種實施方式中，該治療心衰竭疾病的藥物可以與藥用載體製成藥學上可接受的任意藥物製劑。本發明所述的藥用載體可以是一種或多種適合於人使用的固體或液體輔料。該藥用載體較佳具有足夠的純度和足夠低的毒性，並且與本發明活性成分具有相容性且不明顯減低活性成分的藥效。例如，藥用載體可以填充劑、黏合劑、崩解劑、潤滑劑、水性溶劑或非水性溶劑等。

本發明所述的藥物製劑，可以製成藥學上可接受的任意劑型，以任何合適的給藥方式，例如藉由口服、腸胃外、透皮、直腸、經鼻、經肺、植入、局部等給藥等方式施用於需要這種治療的患者或受試者。用於口服給藥時，可以製成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、乳劑、混懸劑等。用於腸胃外給藥時，可以製成注射液、注射用無菌粉末、凝膠劑、栓劑等。

在本發明的另一種實施方式中，藥物製劑較佳為單位劑量形式。在該形式中，製劑被細分成含有適當量的活性組分的單位劑量。可以將單位劑量形式包裝成含有離散量的製劑的包裝，諸如包裝的片劑、膠囊劑或在小瓶或安瓿中的粉劑。

藥物的施用劑量取決於各種因素，包括患者的年齡、體重和狀態以及給藥途徑。施用的精確劑量基於治療醫生的判斷確定。用於施用活性化合物的通常劑量可以是例如每天約1mg至大約1000mg，大約5mg至大約1000mg/天。期望的劑量還取決於採用的具體化合物、疾病的嚴重程度、施用途徑、患者的體重和健康狀況以及治療醫生的判斷。或許某些情況下劑量或超過給出的劑量範圍，但有資料支持劑量的選擇即可。

在本發明的另一種實施方式中，所述的藥物藉由口服、腸胃外、透皮、直腸、經鼻、經肺、植入、局部給藥方式施用於需要治療的患者或受試者。

本發明所述的“鹵素”是指氟、氯、溴、碘等，較佳氟、氯。

本發明所述的“鹵代”是指取代基中的任一氫原子可被一個或複數相同或不同的鹵素原子取代。“鹵素”如前文所定義。

本發明所述的“C_1-6 烷基”指含有1-6個碳原子的烴部分去除一個氫原子衍生的直鏈或支鏈的烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、異己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基和1-甲基-2-甲基丙基等。該“C_1-4 烷基”指含有1-4個碳原子的上述實例。

本發明所述的“C_2-8 烯基”指含有碳碳雙鍵的2~8個碳原子的烯烴部分去除一個氫原子衍生的直鏈或支鏈或環狀的烯烴基，如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、1,3-丁二烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基、1-己烯基、1,4-己二烯基。

本發明所述的“C_2-8 炔基”指含有碳碳三鍵的2~8個碳原子的炔烴部分去除一個氫原子衍生的直鏈或支鏈的炔烴基，如乙炔基、丙炔基、2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-甲基-2-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基等。

本發明所述的“C_1-6 烷氧基”是指前文所定義的“C_1-6 烷基”藉由氧原子與母體分子連接的基團，即“C_1-6 烷基-O-”基團，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基和正己氧基等。所述的“C_1-4 烷氧基” 指含有1-4個碳原子的上述實例，即“C_1-4 烷基-O-”基團。

發明所述的“C_1-6 烷基氨基”、“(C_1-6 烷基)₂ 氨基”、“C_1-6 烷基羰基氨基”、“C_1-6 烷基磺醯氨基”、“C_1-6 烷基氨基羰基”、“(C_1-6 烷基)₂ 氨基-羰基”、“C_1-6 烷氧基-羰基”、“C_1-6 烷基磺醯基”、“C_1-6 烷基硫基”、“C_1-6 烷基羰基”、分別指C_1-6 烷基-NH-、(C_1-6 烷基)(C_1-6 烷基)N-、C_1-6 烷基-C(O)-NH-、C_1-6 烷基-S(O)₂ -NH₂ -、C_1-6 烷基-NH-C(O)-、(C_1-6 烷基)(C_1-6 烷基)N-C(O)-、C_1-6 烷基-O-C(O)-、C_1-6 烷基-S(O)₂ -、C_1-6 烷基-S-、C_1-6 烷基-C(O)-；該“C_1-6 烷基”如前文所定義，較佳為“C_1-4 烷基”。

本發明所述的“稠環”是指由兩個或兩個以上環狀結構以並、螺、橋的連接方式所形成的多環系結構。所述的並環是指由兩個或兩個以上環狀結構彼此公用兩個相鄰的環原子(即共用一個鍵)所形成的稠環結構。所述的橋環是指有兩個或兩個以上環裝結構彼此共用兩個非相鄰的環原子所形成的稠環結構。所述的螺環是指由兩個或兩個以上環狀結構彼此共用一個環原子所形成的稠環結構。

本發明所述的“3-12元環烯基”，在不特別指明的情況下，包括可能形成的所有單環、稠環（包括以並、螺、橋的形式稠合）的情形，例如3-8元單環烯、7-11元螺環烯、7-11元並環烯、6-11元橋環烯等。

本發明所述的環烷基包括可能形成的所有單環、稠環（包括以並、螺、橋的形式稠合）的情形；例如“3-12元環烷基”，可以是單環、雙環、或者多環環烷基系統(也稱為稠環系統)。在不特別指明的情況下，單環系統是含3-8個碳原子的環烴基基團。3-8元環烷基實例包括但不限於：環丙烷基、環丁烷基、環戊烷基、環己烷基、環庚烷基、環辛烷基等。稠環環烷基包括並環環烷基、橋環烷基、螺環烷基。並環環烷基可以為6-11元並環環烷基、7-10元並環環烷基，其的代表性例子包括但不限於雙環[3.1.1]庚烷、雙環[2.2.1]庚烷、雙環[2.2.2]辛烷、雙環[3.2.2]壬烷、雙環[3.3.1]壬烷和雙環[4.2.1]壬烷。所述的螺環基可以為7-12元螺環基、7-11元螺環基，其實例包括但不限於：、、、、、。所述的橋環基可以為6-11元橋環基、7-10元橋環基，其實例包括但不限於：、、、、、。

本發明所述的“雜環基”是指3-12元的至少一個環碳原子被選自O、S、N的雜原子替代的非芳香性的環狀基團，較佳1-3個雜原子，同時包括碳原子、氮原子和硫原子可以被氧代。

“3-12元雜環基”，是指單環雜環基、雙環雜環基系統或多環雜環基系統(也稱為稠環系統)，包括飽和、部分飽和的雜環基，但不包括芳環。在不特別指明的情況下，包括可能形成的所有單環、稠環（包括以並、螺、橋的形式稠合）、飽和、部分飽和的情形。

單雜環基可以為3-8元雜環基、3-8元飽和雜環基、3-6元雜環基、4-7元元雜環基、5-7元雜環基、5-6元雜環基、5-6元含氧雜環基、3-8元含氮雜環基、5-6元含氮雜環基、5-6元飽和雜環基等。“3-8”元飽和雜環基，其實例包括但不限於氮雜環丙烷基、氧雜環丙烷基、硫雜環丙烷基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、四氫呋喃基、吡咯烷基、四氫噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1,2-噁唑烷基、1,3-噁唑烷基、1,2-噻唑烷基、1,3-噻唑烷基、四氫-2H-吡喃基、四氫-2H-噻喃基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、1,4-二氧雜環己烷基、1,4-氧硫雜環己烷基；“3-8”元部分飽和雜環基，其實例包括但不限於4,5-二氫異噁唑基、4,5-二氫噁唑基、2,5-二氫噁唑基、2,3-二氫噁唑基、3,4-二氫-2H-吡咯基、2,3-二氫-1H-吡咯基、2,5-二氫-1H-咪唑基、4,5-二氫-1H-咪唑基、4,5-二氫-1H-吡唑基、4,5-二氫-3H-吡唑基、4,5-二氫噻唑基、2,5-二氫噻唑基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、2H-噻喃基、4H-噻喃基、2,3,4,5-四氫吡啶基、1,2-異噁嗪基、1,4-異噁嗪基或6H-1,3-噁嗪基等。稠雜環包括並雜環基、螺雜環基、橋雜環基，可以是飽和的、部分飽和的或不飽和的，但不是芳香性的。稠雜環基是稠合到苯環、5-6元的單環環烷基、5-6元單環環烯基、5-6元單環雜環基或5-6元單環雜芳基的5-6元單環雜環基環。所述的並雜環基可以為6-12元並環基、7-10元並環基、6-10元並環基、6-12元飽和並環基，代表性實例包括但不限於：3-氮雜雙環[3.1.0]己烷基、3,6-二氮雜雙環[3.2.0]庚烷基、3,8-二氮雜雙環[4.2.0]辛烷基、3,7-二氮雜雙環[4.2.0]辛烷基、八氫吡咯並[3,4-c]吡咯基、八氫吡咯並[3,4-b]吡咯基、八氫吡咯並[3,4-b][1,4]噁嗪基、八氫-1H-吡咯並[3,4-c]吡啶基、2,3-二氫苯並呋喃-2-基、2,3-二氫苯並呋喃-3-基、二氫吲哚-1-基、二氫吲哚-2-基、二氫吲哚3-基、2,3-二氫苯並噻吩-2基、八氫-1H-吲哚基、八氫苯並呋喃基。所述的螺雜環基可以為6-12元螺雜環基、7-11元螺雜環基、6-12元飽和螺環基，其實例包括但不限於：、、、、、、、、、、、、、、、、。

所述的橋雜環基可以為6-12元橋雜環基、7-11元橋雜環基、6-12元飽和橋環基，其實例包括但不限於：、、、、、、、、、、、。

本發明該“芳基”，是指含有6-14個碳原子的環狀芳香性基團，包括，苯基、萘、菲等。

本發明所述的雜芳基，包括可能形成的所有單環、稠環、全部芳香、部分芳香的情形。例如“5-10元雜芳基”是指至少一個環碳原子被選自O、S、N的雜原子替代的芳香性的環狀基團，較佳1-3個雜原子，同時包括碳原子、硫原子被氧代的情況，例如碳原子被C(O)替代，硫原子被S(O)、S(O)₂ 替代，氮原子()可被替代。雜芳基包括單雜芳基和稠雜芳基，在不特別指明的情況下，單雜芳基可以為5-7元雜芳基、5-6元雜芳基，其實例包括但不僅限於呋喃基、咪唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、三唑基和三嗪基。在某些實施例中，稠雜芳基是指單環雜芳環稠合到苯基、環烯基、雜芳基、環烷基、雜環基所形成的基團，稠雜芳基可以為8-12元並雜芳基、9-10元並雜芳基，例子包括但不限於苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並噻吩基、苯並噁二唑基、苯並噻二唑基、苯並噻唑基、噌啉基、5,6-二氫喹啉-2-基、5,6-二氫異喹啉-1-基、呋喃並吡啶基、吲唑基、吲哚基、異吲哚基、異喹啉基、萘啶基、嘌呤基、喹啉基、5,6,7,8-四氫喹啉-2-基、5,6,7,8-四氫喹啉基、5,6,7,8-四氫喹啉-4-基、5,6,7,8-四氫異喹啉-1-基、噻吩並吡啶基、4,5,6,7-四氫並[c][1,2,5]噁二唑基和6,7-二氫並[c][1,2,5]噁二唑-4(5H)酮基。

本發明所述的“藥學上可接受的鹽”是指可藥用的酸和鹼的加成鹽或其溶劑化物。這樣的可藥用鹽包括諸如以下的酸的鹽：鹽酸、磷酸、氫溴酸、硫酸、亞硫酸、甲酸、甲苯磺酸、甲磺酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、馬來酸、氫碘酸、鏈烷酸(諸如乙酸、HOOC-(CH₂ )n-COOH(其中n是0～4))等。鹼的鹽：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽等。本領域技術人員知曉多種無毒的可藥用加成鹽。

本發明該“異構體”是指立體異構體和互變異構體。

立體異構體是指當化合物存在不對稱原子時，會產生對映異構體；當化合物存在雙鍵或環狀結構時，會產生順反異構體；所有式(I)化合物的對映異構體、非對映異構體、消旋異構體、順反異構體、幾何異構體、差向異構體及其混合物，均包括在本發明範圍中。

“互變異構體”是指因分子中某一原子在兩個位置迅速移動而產生的官能團異構體，互變異構體是一種特殊的官能團異構體。如含有α-H的羰基化合物的互變異構，具體如、。如其他質子遷移互變異構，具體如酚-酮互變異構、亞硝基-肟互變異構、亞胺-烯胺互變異構。

T、T1、T2分別獨立地為任意符合化合物成鍵規律的基團。

本發明化合物含有內醯胺結構，存在互變異構，當提到本發明化合物時，意味著該化合物的互變異構體也同時提及。本發明合成實施例合成得到任意一種互變異構體的類型，意味著同時得到另一種互變異構構型，其能迅速地相互轉換，且處於動態平衡中。

本發明所述的“C原子”可被C(O)替代；“S原子”可被S(O)、S(O)₂ 替代。

本發明所述的“氘代”指化合物或基團中的一個或複數氫被氘所取代。

本發明所述的“哺乳動物”是指脊椎動物亞門下哺乳綱的一類用肺呼吸空氣的溫血脊椎動物，其藉由乳腺分泌乳汁來給幼體哺乳，其可分為人類和動物類。動物類的哺乳動物的實例包括但不限制於虎、豹、狼、鹿、長頸鹿、貂、猴、猩猩、貘、狐、樹懶、熊、無尾熊、北極熊、象、麝牛、犀牛、海牛、獅子、小熊貓、熊貓、疣豬、羚羊、無尾熊、猞猁、穿山甲、食蟻獸、水獺、海豚、海象、海豹、鯨魚、鴨嘴獸、刺蝟、袋鼠、河馬、鼬、獾、狸、馬、牛、羊、騾、驢、狗、鼠、貓、兔。本發明的優異效果

本發明的PDE9抑制劑化合物，藉由抑制PDE9酶的活性，有效抑制cGMP的降解，升高cGMP水準，進而啟動蛋白激酶G（PKG），從而起到治療心衰竭的作用效果。研究表明，本發明化合物能有效作用於PDE9酶，升高心肌細胞cGMP含量，有效改善動物模型上心臟功能，逆轉心肌重建，起到治療心衰竭的作用效果。

臨床上對於非急性疑似心衰竭患者，主要根據患者臨床病史、表現症狀、體格檢查、心電圖檢測、利鈉肽水準及心臟超音波圖來排除或確診心衰竭，尤其是心臟超音波圖可提供心室容量、心舒張功能、室壁厚度、瓣膜功能和肺動脈高壓的即時資訊，因此被廣泛用於疑似心衰竭患者的檢測。臨床上對於急性心衰竭患者的初步診斷也會應用心臟超音波圖來進一步證實病症。

在動物模型上，動物心衰竭時常表現為活動減少、精神不振、飲食減少、呼吸加快、皮毛疏鬆、發紺、腹水、下肢水腫、肝瘀血腫大等，評價指標為藉由心電圖、心臟超音波圖、心導管檢查、心肌活檢病理分析等手段，測定左心室末期容積（EDV/ESV）、左心室收縮壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室搏出功（SW）、心動搏出量（SV）、自左心室壓力變化速率（±dp/dtmax）、心臟搏出量（CO）、左心室射血分數（LVEF）、左心室品質/容量比值等。常用的模型為壓力超負荷型HF模型、容量超負荷型HF模型、心肌收縮力減弱型HF模型、體外HF模型、基因工程HF模型。其中心肌梗塞所導致的心衰竭模型屬於心肌收縮力減弱心衰竭模型，同時該動物模型與臨床心肌梗塞所致心衰竭患者的相似度較高，且該類患者在心衰竭群體中具有一定的代表性。

以下結合實施例對本發明進行闡述；然而，這些實施例並不意味著以任何的方式限制本發明的範圍。具體實施方式

本文中使用的縮寫，“DMF”是指二甲基甲醯胺； “DIPEA”是指N,N-二異丙基乙胺；“EA”是指乙酸乙酯；“PE”是指石油醚； “THF”是指四氫呋喃；“DCM”是指二氯甲烷； “HATU”是指2-(7-氧化苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；“AD-mix-β”是指含有0.0016 摩爾的(DHQD)2PHAL（氫化奎尼定 1,4-(2,3-二氮雜萘)二醚）、0.4988 摩爾的碳酸鉀粉末、0.4988 摩爾的鐵氰化鉀和0.0007 摩爾的二水合鋨酸鉀混合物；“EDCI”是指 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；“NBS”是指N-溴代琥珀醯亞胺；“AIBN”是指偶氮二異丁腈；“TEA”是指三乙胺。製備例 1 ：中間體 4,6- 二氯 -2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成

步驟1：6-氯-2H -吡啶並[3,4-d ][1,3]惡嗪-2,4(1H )-二酮的合成將5-氨基-2-氯異煙酸(30 g, 0.1738 mol, 1.0 eq)，溶於N ,N -二甲基甲醯胺(300 mL)中，0℃下分批加入N ,N ’-羰基二咪唑(48 g, 0.2955 mol, 1.7 eq)，緩慢升至室溫過夜。LC-MS顯示反應完全，冷卻至室溫，不經處理直接進行下一步。

步驟2：6-氯-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成向上述反應液中加入三乙胺(35.182 g, 0.3478 mol, 2 eq)和氰乙酸乙酯(19.665 g, 0.1738 mol)，150℃反應3h，LC-MS監測反應完全，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，加入水(200mL)，用鹽酸(1 mol/L)調節pH值至1，攪拌15分鐘，抽濾，濾餅用EA洗滌兩次，40℃烘乾得淺磚紅色固體狀產物(25.655 g，產率：66%)。

步驟3：4,6-二氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將6-氯-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(5.0 g, 0.0226 mol, 1 eq)和三氯氧磷(15 mL)加入反應瓶，將反應瓶放入已經加熱至100℃的油浴中，反應約6 min，固體開始慢慢溶解，顏色由淡黃色開始加慢慢加深。TLC檢測反應完全，冷卻至室溫，向瓶中加入適量DCM，倒入冰水(100 mL)中，攪拌10min，抽濾，濾餅用甲基叔丁基醚洗，抽乾，40℃真空乾燥得淡黃色固體狀產品。分五批投料，共投料6-氯-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈25.655g(0.1157mol)得到產品19.486g(產率：70.1%)。製備例 2: 中間體 6- 乙基 -4 氯 -2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈和 2,4- 二氯 -6- 乙基 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成

步驟1：6-乙基-3-(氰基乙醯胺基)-1-吡啶-4-甲酸甲酯的合成將中間體6-乙基-3-氨基-1-吡啶-4-甲酸甲酯(131 g, 727.13 mmol, 1.0 eq)溶於二氯甲烷(1.31 L)，在冰浴條件下加入氰基乙酸(74.22 g, 872.56 mmol, 1.2 eq)，分批加入EDCI(209.07 g, 1090.70 mmol, 1.5 eq)，25℃反應2小時，LC-MS檢測反應完全。向反應液中加入H₂ O(1.5 L)，分液，有機相用H₂ O(2×800 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液濃縮，粗品經甲基叔丁基醚(500 mL)打漿得到產品(165 g，收率：91.78%)。

步驟2：6-乙基-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-乙基-3-(氰基乙醯胺基)-1-吡啶-4-甲酸甲酯(165 g, 667.34 mmol, 1.0 eq)溶於乙醇(1.65 L)中，冰浴條件下分批加入乙醇鈉(136.24 g, 2002.62 mmol, 3.0 eq)，加完25℃反應2小時，LC-MS檢測反應完全。濃縮，加H₂ O(1.5 L)，在冰浴條件下用濃鹽酸調pH值至4以下，析出大量淡黃色固體，抽濾，濾餅乾燥得到產品(138 g，收率：96.09%)。

步驟3：6-乙基-4氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈和2,4-二氯-6-乙基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-乙基-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(605 g, 2.81 mol, 1.0 eq)溶於乙腈(3 L)，冰浴下加入三氯氧膦(1723 g, 11.24 mol, 4.0 eq)，100℃反應2小時。將反應液降溫，濃縮，加入乙腈分散(1 L)，倒入冰水中，用飽和氫氧化鈉溶液調pH值至5-6左右，有大量黃色固體析出，抽濾，烘乾得粗品，粗品用正庚烷/乙酸乙酯(3 L/0.6 L)打漿，抽濾得到6- 乙基-4氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(510 g，收率：78%)。

濾液濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(PE:EA=10:1)得到2,4-二氯-6-乙基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(50 g，收率：7%)。實施例 1 ： 6- 異丙基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈 的合成（化合物 91 ）

步驟3：4,6-二氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將6-氯-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(5.0 g, 0.0226 mol, 1 eq)和三氯氧磷(15 mL)加入反應瓶，將反應瓶放入已經加熱至100℃的油浴中，反應約6 min，固體開始慢慢溶解，顏色由淡黃色開始加慢慢加深。TLC檢測反應完全，冷卻至室溫，向瓶中加入適量DCM，倒入冰水(100 mL)中，攪拌10min，抽濾，濾餅用甲基叔丁基醚洗，抽乾，40℃真空乾燥得淡黃色固體狀產品。分五批投料，共投料6-氯-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈25.655g(0.1157mol)得到產品19.486g(產率：70.1%)。

步驟4：6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體4,6-二氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(2.0 g, 8.33 mmol, 1.0 eq)溶於DMF(10 mL)，加入DIPEA(6.45 g, 50 mmol, 6.0 eq)和4-甲氧基-4-甲基呱啶三氟乙酸鹽(2.2 g, 9.16 mmol, 1.1 eq)，80℃反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水洗(10 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到黃色固體狀產物(2.7 g粗品)。

步驟5：4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-6-(丙-1-烯-2-基)-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(500 mg, 1.5 mmol, 1.0 eq)溶於1,4-二氧六環(5 mL)和H₂ O(1 mL)中，加入三氟(丙-1-烯-2-基)硼酸鉀(668 mg, 4.5 mmol, 3.0 eq)和碳酸銫(1.466 g, 4.5 mmol, 3.0 eq)，氮氣保護下加入[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(110 mg, 0.15 mmol, 0.1 eq)，100℃反應12小時，LC-MS檢測反應完全。加入水(20 mL)，乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(DCM:MeOH=50:1)得到產品(390mg，收率：76.9%)。

步驟6：6-異丙基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物91 將中間體4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-6-(丙-1-烯-2-基)-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(390 mg, 1.15 mmol, 1.0 eq)溶於甲醇(10 mL)，加入Pd/C(100 mg)，氫氣條件下反應12小時，LC-MS檢測反應完全。抽濾，濾液減壓濃縮，粗品用甲基叔丁醚打漿，抽濾，粗品再經製備薄層層析分離(DCM:MeOH=15:1)得到產品(100 mg，收率：25.6%)。¹ HNMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ(ppm):11.82(s,1H),8.61(s,1H),7.38(s,1H),3.60-3.61(m,4H),3.19(s,3H),3.06-3.13 (m, 1H), 1.90-1.93(m,2H),1.75-1.82(d,2H),1.26(s,9H). 分子式：C₁₉ H₂₄ N₄ O₂ 分子量：340.43 LC-MS(Pos，m/z )=341.19[M+H]⁺ .實施例 2 ： 4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -6- 乙烯基 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 70 ）化合物70

將中間體6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(20.1 g, 60.40 mmol, 1.0 eq)溶於1,4-二氧六環(600 mL)和H₂ O(150 mL)，加入三氟(乙烯基)硼酸鉀(12.14 g, 90.6 mmol, 1.5 eq)、碳酸銫(58 g, 181.2 mmol, 3.0 eq)和[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(4.4 g, 6.04 mmol, 1.0 eq)，氮氣保護下100℃反應8小時，LC-MS檢測反應完全。加入水(20 mL)，二氯甲烷(30 mL×3)萃取，有機相用水(10 mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=50:1)純化得到產品(14.63 g，收率：74%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.03 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.89-6.96 (m, 1H), 6.15-6.19 (m, 1H), 5.39-5.42 (m, 1H), 3.61-3.64 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 1.77-1.93 (m, 4H), 1.21 (s, 3H). 分子式： C₁₈ H₂₀ N₄ O₂ 分子量：324.38 LC-MS (Pos, m/z) = 325.16[M+H]⁺ .實施例 3 ： 6-(1- 羥乙基 )-4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 63 ）

步驟1：6-(1,2-二羥基乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-6-乙烯基-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(500 mg, 1.542 mmol, 1.0 eq)溶於叔丁醇(10 mL)和水(10 mL)，加入甲磺醯胺(147 mg, 1.542 mmol, 1.0 eq)和AD-mix-β(6.0 g)，常溫反應12小時，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，二氯甲烷(30 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得到產品(552 mg，收率：100%)。

步驟2：6-甲醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-(1,2-二羥基乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(552 mg, 1.542 mmol, 1.0 eq)溶於四氫呋喃(10 mL)和水(2 mL)，加入高碘酸鈉(650 mg, 3.084 mmol, 2.0 eq)，反應4個小時，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(DCM:MeOH=60:1)得到黃色固體狀產品(160 g，兩步收率：32%)。

步驟3：6-(1-羥乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物63 將中間體6-甲醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(160 mg, 0.49 mmol, 1.0 eq)溶於四氫呋喃(5 mL)，在0℃下滴加甲基氯化鎂(1 mL)，反應1小時，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(DCM:MeOH=40:1)得到產品(108 mg，收率：64%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.93 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.48-5.49 (d, 1H), 4.75-4.81 (m, 1H), 3.56-3.65 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 1.91-1.95 (m, 2H), 1.73-1.79 (m, 2H), 1.38-1.40 (d, 3H), 1.23 (s, 3H). 分子式：C₁₈ H₂₂ N₄ O₃ 分子量：342.40 LC-MS(Pos,m/z )=343.17 [M+H]⁺ .

取0.3925g化合物63用甲醇溶解為濃度為2mg/ml的溶液，採用Shimadzu LC-20AD製備液相進行對映異構體分離，分離條件如下：分別收集6分鐘及12分鐘相應組分得到的化合物。6分鐘相應組分得到的化合物是化合物A，12分鐘相應組分得到化合物B。旋轉蒸發出去溶劑，分別得到化合物A 0.1814g和化合物B 0.1984g。化合物A和B為對映異構體，二者的結構如下，當化合物A為其中一個結構時，化合物B為另外一個：和。實施例 4 ： 6-(2- 羥基丙烷 -2- 基 )-4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 64 ）

步驟1：6-乙醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-(1-羥乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(187 mg, 0.55 mmol, 1.0 eq)溶解在乾燥的二氯甲烷(5 mL)中，降溫至0~5℃，加入戴斯-馬丁氧化劑(463.5 mg, 1.10 mmol, 2.0 eq)，加完自然升至室溫反應2 h，TLC監測反應完全，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(MeOH:DCM=1:100~1:50)純化得到產品(185.8 mg，收率：100%)。

步驟2：6-(2-羥基丙烷-2-基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物64 將中間體6-乙醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(185.8 mg, 0.55 mmol, 1.0 eq)溶於N ,N -二甲基乙醯胺(3 mL)中，降溫至-10~0℃，氮氣保護下滴加3 mol/L甲基氯化鎂四氫呋喃溶液(0.6 mL, 3.0 eq)，加完自然升至室溫攪拌過夜，TCL檢測有大量原料剩餘，補加3 mol/L甲基氯化鎂四氫呋喃溶液(0.6 mL, 3.0 eq)，反應3 h，再補加3 mol/L甲基氯化鎂四氫呋喃溶液(0.6 mL, 3.0 eq)，反應2h。降溫至0~10℃，用乙酸調pH=5~6，濃縮，粗品經矽膠柱層析(MeOH:DCM=1:100~1:70)純化得到產品(63.9 mg，收率：32.8%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.91 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 5.35 (s, 1H), 3.62-3.60 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 1.95-1.92 (m, 2H), 1.80-1.73 (m, 2H), 1.45 (s, 6H), 1.23 (s, 3H). 分子式：C₁₉ H₂₄ N₄ O₃ 分子量：356.43 LC-MS (Pos,m/z ) = 357.25 [M+H]⁺ .實施例 5 ： 6-( 環丙基 ( 羥基 ) 甲基 )-4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 68 ）化合物68

將中間體6-甲醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(500 mg, 1.53 mmol, 1.0 eq)溶解在無水四氫呋喃(20 mL)中，氮氣保護下，降溫至-10℃，滴加1 mol/L環丙基溴化鎂的四氫呋喃溶液(4.6 mL, 4.60 mmol, 3 eq)，加完0℃反應3h，LC-MS檢測有20%原料剩餘，再補加1 mol/L環丙基溴化鎂的四氫呋喃溶液(3 mL, 3 mmol, 2 eq)，反應2~3h。LC-MS檢測還有10%原料，滴加乙酸至pH=5~6左右，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(MeOH:DCM=1:100~1:40)純化得到產品(225.7 mg，收率：40.0%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.93 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 5.42-5.40 (d, 1H), 4.24-4.22 (m, 1H), 3.63-3.60 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.79-1.72 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.23 (s, 1H), 0.42 (m, 4H). 分子式：C₂₀ H₂₄ N₄ O₃ 分子量：368.44 LC-MS(Pos,m/z )=369.40[M+H]⁺ .實施例 6 ： 3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-N - 甲基 -2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 萘啶 -6- 甲醯胺的合成（化合物 69 ）

步驟1：3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸的合成將中間體6-甲醯基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(681 mg, 2.09 mmol, 1.0 eq)溶解在甲酸(5 mL)中，降溫-5~0℃，加入30%雙氧水(1.32 mL, 10.44 mmol, 5 eq)，加完0℃反應12h，再補加30%雙氧水(1.32 mL, 10.44 mmol, 5 eq)，室溫反應2-3h。TLC監測反應完全，將反應液倒入甲基叔丁基醚(50 mL)溶液中，析出淡黃色固體，過濾，濾餅乾燥得到產品(300 mg，收率：42.0%)。

步驟2：3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-N -甲基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-萘啶-6-甲醯胺的合成化合物69 將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(300 mg, 0.88 mmol, 1.0 eq)溶於無水N ,N -二甲基乙醯胺(3 mL)中，加入DIPEA(565.8 mg, 4.38 mmol, 5.0 eq)，加畢，降溫至0℃，加入HATU(499.7 mg, 1.31 mmol, 1.5 eq)，室溫攪拌0.5~1 h，再加入甲胺鹽酸鹽(118.2 mg, 1.75 mmol, 2.0 eq)，室溫反應1 h，析出固體，TLC監測反應完全，加水(50 mL)，攪拌5 min，過濾，濾餅用水淋洗，加入到乙酸乙酯(10 mL)中加熱回流1 h，趁熱過濾，濾餅乾燥得到產品(199 mg，收率：63.8%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.21 (s, 1H), 8.74-8.73 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 3.64-3.62 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 2.84-2.83 (d, 3H), 1.96 (m, 1H), 1.93 (m, 1H), 1.79-1.77 (m, 2H), 1.24 (s, 3H). 分子式：C₁₈ H₂₁ N₅ O₃ 分子量：355.40 LC-MS(Pos,m/z ) = 356.26 [M+H]⁺ .實施例 7 ： N -(2- 氨基乙基 )-3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -6- 甲醯胺（化合物 74 ）鹽酸鹽的合成

步驟1：(2-(3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-甲醯氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)、HATU(333 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)和DIPEA(376 mg, 1.76 mmol, 3.0 eq)溶於DMAC(2 mL)，常溫攪拌30 min，再加入(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(281 mg, 1.76 mmol, 2.0 eq)，常溫反應1 h，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水(10 mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=30:1)純化得到產品(220 mg，收率：78.3%)。

步驟2：N -(2-氨基乙基)-3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-甲醯胺鹽酸鹽的合成化合物74的鹽酸鹽將中間體(2-(3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-甲醯氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(220 mg, 0.45 mmol, 1.0 eq)溶於甲醇(3 mL)，加入氯化氫乙醇溶液(25%，2 mL)，常溫反應2 h，TLC檢測反應完全。有固體析出，過濾，濾餅乾燥得到產品(150 mg，收率：79 %)。¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.28 (s, 1H), 9.01-9.03 (m, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.91 (s, 3H), 3.55-3.64 (m, 6H), 3.21 (s, 3H), 3.00-3.02 (m, 2H), 1.94-1.97 (d, 2H), 1.73-1.80 (d, 2H), 1.24 (s, 3H). 分子式：C₁₉ H₂₄ N₆ O₃ 分子量：384.44 LC-MS (Pos, m/z) = 385.19[M+H]⁺ .實施例 8 ： 3- 氰基 -N -(2-( 二甲基氨基 ) 乙基 )-4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 萘啶 -6- 甲醯胺的合成（化合物 75 ）化合物75

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)、HATU(333 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)和DIPEA(226 mg, 1.76 mmol, 3.0 eq)溶於DMAC(2 mL)，常溫攪拌30 min，再加入N,N -二甲基乙二胺(103 mg, 1.16 mmol, 2.0 eq)，常溫反應1 h，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水(10 mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=20:1)純化得到產品(86 mg，收率：36 %)。¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.20 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 3.62-3.64 (d, 4H), 3.50-3.51 (d, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.76 (s, 2H), 2.44 (s, 6H), 1.94-1.97 (d, 2H), 1.74-1.81 (m, 2H), 1.25 (s, 3H). 分子式：C₂₁ H₂₈ N₆ O₃ 分子量：412.49 LC-MS (Pos, m/z) = 413.22[M+H]⁺ .實施例 9 ： 3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -N -(2-( 吡咯烷 -1- 基 ) 乙基 )-1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -6- 甲醯胺的合成（化合物 76 ）化合物76

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)、HATU(333 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)和DIPEA(226 mg, 1.76 mmol, 3.0 eq)溶於DMAC(2 mL)，常溫攪拌30 min，再加入2-(吡咯烷-1-基)乙-1-胺(134 mg, 1.16 mmol, 2.0 eq)，常溫反應1 h，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水(10 mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=20:1)純化得到產品(106 mg，收率：41 %)。¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.26 (s, 1H), 9.08-9.11 (m, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 3.63-3.64 (d, 8H), 3.06-3.20 (m, 6H), 1.73-1.98 (m, 9H), 1.25 (s, 3H). 分子式：C₂₃ H₃₀ N₆ O₃ 分子量：438.53 LC-MS (Pos, m/z) = 439.24[M+H]⁺ .實施例 10 ： 3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-N -((1- 甲基呱啶 -4- 基 ) 甲基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -6- 甲醯胺（化合物 77 ）三氟乙酸鹽的合成 化合物77的三氟乙酸鹽

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)溶於無水N,N -二甲基乙醯胺(2 mL)中，加入DIPEA(226.3 mg, 1.75 mmol, 3.0 eq)和HATU(333.1 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)，室溫攪拌0.5~1 h，加入(1-甲基呱啶-4-基)甲胺 (150 mg, 1.17 mmol, 2.0 eq)，室溫反應1 h，LC-MS監測仍有原料剩餘，補加(1-甲基呱啶-4-基)甲胺(150 mg, 1.17 mmol, 2.0 eq)，繼續反應2 h，經製備HPLC純化(0.1%三氟乙酸水溶液：乙腈=70:30)得到產品(68.8 mg，收率：20.7%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.22 (s, 1H), 9.00-8.99 (s, 1H), 8.95-8.94 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 3.63-3.62 (m, 4H), 3.43-3.40 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.95-2.83 (m, 2H), 2.75-2.74 (m, 2H), 1.97-1.94 (m, 2H), 1.85-1.80 (m, 2H), 1.78-1.75 (m, 3H), 1.24 (s, 3H). 分子式：C₂₄ H₃₂ N₆ O₃ 分子量：452.56 LC-MS (Pos,m/z ) = 453.45[M+H]⁺ .實施例 11 ： 3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-N -(1- 甲基氮雜環丁烷 -3- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -6- 甲醯胺（化合物 78 ）三氟乙酸鹽的合成 化合物78的三氟乙酸鹽

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)溶於無水N,N -二甲基乙醯胺(2 mL)中，加入DIPEA(226.3 mg, 1.75 mmol, 3.0 eq)和HATU(333.1 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)，室溫攪拌0.5~1 h，加入1-甲基氮雜環丁烷-3-胺(100.6 mg, 1.17 mmol, 2.0 eq)，室溫反應12 h，粗品經製備HPLC純化(0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=70:30)得到產品(113.13 mg，收率：37.1%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.27 (s, 1H), 9.59-9.53 (s, 2H), 8.68 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 4.90-4.86 (m, 1H), 4.45 (m, 2H), 4.16 (m, 2H), 3.63-3.62 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 2.91 (s, 3H), 1.96-1.93 (m, 2H), 1.79-1.72 (m, 2H), 1.24 (s, 3H). 分子式：C₂₁ H₂₆ N₆ O₃ 分子量：410.48 LC-MS (Pos,m/z ) = 411.40 [M+H]⁺ .實施例 12 ： 3- 氰基 -N -(2,3- 二羥基丙基 )-4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 萘啶 -6- 甲醯胺的合成（化合物 80 ）化合物80

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)溶於無水N,N -二甲基乙醯胺(2 mL)中，加入DIPEA(226.3 mg, 1.75 mmol, 3.0 eq)和HATU(333.1 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)，室溫攪拌0.5~1 h，加入3-氨基丙烷-1,2-二醇(106.4 mg, 1.17 mmol, 2.0 eq)，室溫反應12h，粗品經製備HPLC純化(0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=70:30)，凍乾得到產品(93.79 mg)，將樣品溶於水，用碳酸氫鈉水溶液調pH至8，用正丁醇萃取(20mL×5)，有機相濃縮得產品(47.2 mg，產率：19.4%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 8.42-8.39 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 3.49 (m, 1H), 3.47-3.45 (m, 6H), 3.25-3.23 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 1.91-1.88 (m, 2H), 1.75-1.70 (m, 2H), 1.23 (s, 3H). 分子式：C₂₀ H₂₅ N₅ O₅ 分子量：415.45 LC-MS (Neg,m/z ) = 414.34 [M-H]^- .實施例 13 ： 3- 氰基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-N,N - 二甲基 -2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 萘啶 -6- 甲醯胺的合成（化合物 90 ）化合物90

將中間體3-氰基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-6-羧酸(200 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq)、HATU(333 mg, 0.88 mmol, 1.5 eq)和DIPEA(376 mg, 1.76 mmol, 3.0 eq)溶於DMAC(2 mL)，常溫攪拌30 min，加入二甲胺鹽酸鹽(95 mg, 1.16 mmol, 2.0 eq)，常溫反應1 h，LC-MS檢測反應完全。加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水(10 mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=50:1)純化得到產品(120 mg，收率：55 %)。¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.16 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 3.61-3.63 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 3.03-3.05 (d, 6H), 1.90-1.93 (d, 2H), 1.71-1.78 (m, 2H), 1.22 (s, 3H). 分子式：C₁₉ H₂₃ N₅ O₃ 分子量：369.18 LC-MS (Pos, m/z) = 370.43[M+H]⁺ .實施例 14 ： 4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-6-(2- 甲氧基乙氧基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 81 ）

步驟1：2-(2-甲氧基乙氧基)-5-硝基異煙酸甲酯的合成將原料乙二醇單甲醚(3.5 g, 46.17 mmol, 1.0 eq)溶於四氫呋喃(50 mL)中，降溫至0℃，加入氫化鈉(3.7 g, 92.34 mmol, 2.0 eq)，反應1小時後，加入2-氯-5-硝基異煙酸甲酯(10.0 g, 46.17 mmol, 1.0 eq)。TLC(PE: EA = 5: 1)檢測反應完全，反應液倒入冰水(100 mL)中淬滅，水相用乙酸乙酯(100 mL×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(PE: EA = 5: 1)得淡黃色油狀產物(1.8 g，收率：15%)。

步驟2：5-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基)異煙酸甲酯的合成將中間體2-(2-甲氧基乙氧基)-5-硝基異煙酸甲酯(1.8 g, 7.02 mmol, 1.0 eq)溶於甲醇(10 mL)中，加入10%鈀碳(500 mg)，通入氫氣室溫反應過夜。TLC(PE: EA = 3: 1)檢測反應完全，反應液過濾濃縮，粗品經矽膠柱層析純化(PE: EA = 5: 1)得淡黃色固體狀產物(1.2 g，收率：75%)。

步驟3：5-(2-氰基乙醯氨基)-2-(2-甲氧基乙氧基)異煙酸甲酯的合成將中間體5-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基)異煙酸甲酯(1.2 g, 5.3 mmol, 1.0 eq)和氰基乙酸(901 mg, 10.6 mmol, 2.0 eq)溶於二氯甲烷(20 mL)中，加入EDCI(3.04 g, 15.9 mmol, 3.0 eq)，室溫反應2小時。LC-MS檢測反應完全，反應液倒入冰水(30 mL)中淬滅，水相用二氯甲烷(30 mL × 2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經甲基叔丁基醚打漿後得淡黃色固體狀產物(1.2 g，收率：77%)。

步驟4：4-羥基-6-(2-甲氧基乙氧基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體5-(2-氰基乙醯氨基)-2-(2-甲氧基乙氧基)異煙酸甲酯(1.2 g, 4.09 mmol, 1.0 eq)溶於四氫呋喃(20 mL)中，加入氫化鈉(327 mg, 8.18 mmol, 2.0 eq)，升溫至80℃反應4小時。 LC-MS檢測反應完全，反應液降溫至0℃左右，用2 mol/L鹽酸水溶液調節pH值至2，析出固體，過濾，濾餅50℃常壓乾燥後得黃色固體狀產物(800 mg，收率：75%)。

步驟5：4-氯-6-(2-甲氧基乙氧基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體4-羥基-6-(2-甲氧基乙氧基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(800 mg, 3.06 mmol, 1.0 eq) 溶於三氯氧磷(8 mL)中，升溫至100℃反應一個小時。LC-MS檢測反應完全，反應液倒入冰水(20 mL)中淬滅，水相用二氯甲烷(30 mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經甲基叔丁基醚打漿後得淡黃色固體狀產物(180 mg，收率：21%)。

步驟6：4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物81 將中間體4-氯-6-(2-甲氧基乙氧基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(180 mg, 0.64 mmol, 1.0 eq)溶於N ,N -二甲基甲醯胺(2 mL)中，加入N ,N -二異丙基乙胺(332 mg, 2.58 mmol, 4.0 eq)和4-甲氧基-4-甲基呱啶(110 mg, 0.97 mmol, 1.0 eq)，升至80℃反應兩個小時。LC-MS檢測反應完全，反應液倒入冰水(20 mL)中淬滅，水相用二氯甲烷(30 mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM: MeOH = 15: 1)純化得淡黃色油狀產物(60 mg，收率：25%)。¹ HNMR(400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.78 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 4.37 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.56-3.58 (m, 4H), 3.30 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 1.88-1.91 (m, 2H), 1.75-1.80 (m, 2H), 1.21 (s, 3H). 分子式：C₁₉ H₂₄ N₄ O₄ 分子量：372.43 LC-MS(Pos,m/z )=373.3[M+H]⁺ 實施例 15 ： 4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-6- 甲基 -2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 87 ）化合物87

將中間體6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(1.3 g, 3.91 mmol, 1.0 eq)、碳酸銫(3.8 g, 11.73 mmol, 3.0 eq)和三甲基環三硼氧烷(50%THF溶液，3.9 g, 15.62 mmol, 4.0 eq)溶於1,4-二氧六環(20 mL)，加畢，氮氣置換三次，在加入[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(286 mg, 0.39 mmol, 0.1 eq)，加畢，氮氣置換三次，加熱回流12h，TLC檢測還有原料，再補加三甲基環三硼氧烷(50%THF溶液，3.9g, 15.62 mmol, 4.0 eq)和 [1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(286 mg, 0.39 mmol, 0.1 eq)，繼續回流4h，TLC檢測無原料，降至室溫，加水(50 mL)和二氯甲烷(100 mL)，攪拌5min，析出固體，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(100 mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，母液減壓濃縮，粗品先經矽膠柱層析(MeOH:DCM=1:100~1:50)純化得產品(309.9 mg, 收率：25.4%)。¹ HNMR (400MHz, DMSO-d₆ ) δ(ppm): 11.88 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 3.61-3.59 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.82-1.75 (m, 2H), 1.22 (s, 3H). 分子式：C₁₇ H₂₀ N₄ O₂ 分子量：312.37 LC-MS(Pos，m/z )=313.25[M+H]⁺ .實施例 16 ： 6- 環丙基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 92 ）

步驟1：2-氯-5-硝基異煙酸乙酯的合成將2-氯-5-硝基異煙酸(20.0 g, 98.74 mmol, 1.0 eq)溶於原甲酸三乙酯(43.9 g, 296.20 mmol, 3.0 eq)，120℃反應3h，TLC檢測無原料，減壓濃縮，得到黃色油狀液體，加石油醚(150 mL)，攪拌12h，過濾，濾餅室溫烘乾得到產品(11.0 g，收率：51.6%)。

步驟2：2-環丙基-5-硝基異煙酸乙酯的合成將2-氯-5-硝基異煙酸乙酯(11.0 g, 47.70 mmol, 1.0 eq)、環丙基硼酸(10.2g, 119.25 mmol, 2.5 eq)和磷酸鉀(35.4 g, 166.95 mmol, 3.5 eq)溶於水(27.5 mL)和甲苯(275 mL)的混合溶劑中，氮氣保護下加三苯基膦(2.5 g, 9.54 mmol, 0.2 eq)和醋酸鈀(1.1 g, 4.77 mmol, 0.1 eq)，氮氣置換三次，回流反應24h，TLC檢測反應完全，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(EA:PE=1:30)純化得到產品(6.18 g，收率：55%)。

步驟3：5-氨基-2-環丙基異煙酸乙酯的合成將中間體2-環丙基-5-硝基異煙酸乙酯(6.18 g, 26.16 mmol, 1.0 eq)溶於無水乙醇(60 mL)，加入鐵粉(5.86 g, 104.64 mmol, 4.0 eq)，升溫至回流，滴加乙酸(9.4 g, 156.96 mmol, 6.0 eq)，回流反應3h，TLC檢測反應完全，向反應液中加入乙酸乙酯(100 mL)，趁熱過濾，濾餅用乙酸乙酯淋洗，濾液減壓濃縮，加水(50 mL)和乙酸乙酯(100 mL)，冰水浴降溫，加碳酸氫鈉固體調pH值至8左右，分液，水相用乙酸乙酯(50 mL×3)萃取，有機相合併，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到產品(4.77 g，收率：90%)。

步驟4：5-(2-氰基乙醯胺基)-2-環丙基異煙酸乙酯的合成將中間體5-氨基-2-環丙基異煙酸乙酯(4.77 g, 23.13 mmol, 1.0 eq)溶於二氯甲烷(60 mL)，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(8.7 g, 46.25 mmol, 2.0 eq)和氰基乙酸(3 g, 34.69 mmol, 1.5 eq)，室溫攪拌16 h。TLC監測無原料，加二氯甲烷(40 mL)，用水(50 mL×2)洗滌，有機相用飽和碳酸鈉水溶液(50 mL)洗滌，無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到產品(5.6 g，收率：100%)，按理論量投入下一步。

步驟4：6-環丙基-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體5-(2-氰基乙醯胺基)-2-環丙基異煙酸乙酯(5.6 g, 20.51mmol, 1.0 eq)溶於無水乙醇(100 mL)，攪拌10min，加乙醇鈉(4.7 g, 69.39 mmol, 3.0 eq)，室溫攪拌1h。TLC檢測有原料剩餘，補加乙醇鈉(4.7 g, 69.39 mmol, 3.0 eq)，室溫攪拌2h。TLC檢測無原料，減壓濃縮，加水(200 mL)，用甲基叔丁基醚(100 mL×2)萃取，水相冰水降溫，用濃鹽酸調pH值至1~2，析出固體，過濾，濾餅用水淋洗，濾餅烘乾得到產品(3.95 g，收率：84.84%)。

步驟5：2,4-二氯-6-環丙基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-環丙基-4-羥基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(1 g, 4.4 mmol, 1.0 eq)溶於無水乙腈(15 mL)，加三氯氧磷(1.35 g, 8.8 mmol, 2.0 eq)，升溫至80℃反應1h。TLC檢測剩餘大部分原料，補加三氯氧磷(1.35 g, 8.8 mmol, 2.0 eq)，加熱至90℃，LC-MS檢測反應完全，降至室溫，減壓濃縮，加乙腈(10 mL)，冰水降溫，用氫氧化鈉溶液調pH值至8~9，析出黃色固體，過濾，濾餅用水淋洗得到產品(1.5 g粗品)，按理論量投入下一步。

步驟6：4-氯-6-環丙基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體2,4-二氯-6-環丙基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(1.16 g粗品，4.40 mmol, 1.0 eq)溶於三氟乙酸(10 mL)和水(2.5 mL)的混合溶劑中，加熱至60℃反應18h，降溫0℃，加水(20 mL)，用氫氧化鈉固體調pH值至8~9，析出黃色固體，過濾，濾餅用水淋洗，烘乾，加乙酸乙酯(10 mL)，加熱至60℃攪拌1h，趁熱過濾，濾餅烘乾得到產品(660 mg，兩步收率：61%)。

步驟7：2-氯-6-環丙基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物92 將中間體4-氯-6-環丙基-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(200 mg, 0.81 mmol, 1.0 eq)溶於N ,N -二甲基乙醯胺(2 mL)，加DIPEA(420.5 mg, 3.26 mmol, 4.0 eq)和4-甲氧基-4-甲基呱啶鹽酸鹽(188.8 mg, 1.14 mmol, 1.4 eq)，升溫至80℃反應1h，TLC檢測無原料，將反應液降至室溫，倒入冰水(20 mL)中，用乙酸乙酯(50 mL×3)萃取，有機相合併，用水(50 mL×2)洗滌，無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，粗品用甲基叔丁基醚(5 mL)打漿1h，抽濾，濾餅烘乾得到產品(182 mg，收率：66%)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.85 (s, 1H), 8.51 (d, 1H), 7.45 (s, 1H), 3.61-3.60 (d, 4H), 3.19 (s, 3H), 2.27-2.21 (m, 1H), 1.93-1.90 (m, 2H), 1.84-1.80 (m, 2H), 1.22 (s, 3H), 0.95 (m, 2H), 0.85 (m, 2H). 分子式：C₁₉ H₂₂ N₄ O₂ 分子量：338.17 LC-MS(Pos,m/z )=339.13 [M+H]⁺ .實施例 17 ： 6- 乙基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-2- 氧代 -1,2- 二氫 -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈 的合成（化合物 102 ）

步驟1： 6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物84 將中間體4,6-二氯-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(2.0 g, 8.33 mmol, 1.0 eq)溶於DMF(10 mL)，加入DIPEA(6.45 g, 50 mmol, 6.0 eq)和4-甲氧基-4-甲基呱啶三氟乙酸鹽(2.2 g, 9.16 mmol, 1.1 eq)，80℃反應2小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(10 mL)，二氯甲烷(10 mL×3)萃取，有機相用水洗(10 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到黃色固體狀產物(2.7 g粗品)。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 12.11 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 3.61-3.59 (m, 4H), 3.18 (s, 3H),1.91-1.88 (m, 2H), 1.81-1.76 (m, 2H), 1.21 (s, 3H). 分子式：C₁₆ H₁₇ N₄ O₂ Cl 分子量：332.79 LC-MS (Pos,m/z ) = 333.7[M+H]⁺

步驟2：4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-6-乙烯基-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成將中間體6-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(2.7 g粗品，8.11 mmol, 1.0 eq)溶於1,4-二氧六環(20mL)和H₂ O(5 mL)，加入乙烯基三氟硼酸鉀(1.63 g, 12.17 mmol, 1.5 eq)、碳酸銫(3.965 g, 12.17 mmol, 1.5 eq)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(297 mg, 0.41 mmol, 0.05 eq)，氮氣保護下100℃反應8小時。LC-MS檢測反應完全，加入水(20 mL)，二氯甲烷(30 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(DCM:MeOH=70:1)純化得到黃色固體狀產品(1.15 g，收率：43%)。

步驟3：6-乙基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物102 將中間體4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-2-氧代-6-乙烯基-1,2-二氫-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(150 mg, 0.46 mmol, 1.0 eq)溶於甲醇(5 mL)，加入Pd/C(100 mg)，氫氣置換三次，氫氣氛圍下反應1小時，LC-MS檢測反應完全。抽濾，濾液減壓濃縮得到產品(120 mg，收率：80%)。¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ(ppm): 11.89 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 3.60-3.62 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 2.79-2.84 (m, 2H), 1.89-1.93(m, 2H), 1.75-1.82 (m, 2H), 1.22-1.27 (m, 6H). 分子式：C₁₈ H₂₂ N₄ O₂ 分子量：326.40 LC-MS(Pos,m/z )=327.26[M+H]⁺ .實施例 18 ： 6- 乙醯基 -2- 羥基 -4-(4- 甲氧基 -4- 甲基呱啶 -1- 基 )-1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 114 的互變異構體）

步驟1：6-(1-溴乙基)-2,4-二氯-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成在1 L單口瓶中加入四氯化碳(600.00 mL)，2,4-二氯-6-乙基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(30.00 g, 119.00 mmol, 1 eq)， NBS(42.36 g, 238.00 mmol, 2 eq)和AIBN(15.00 g)。90℃反應2小時。LC-MS顯示反應完全。將反應液降溫至10-15℃，抽濾，濾液濃縮至乾，用PE和EA重結晶得到產品6-(1-溴乙基)-2,4-二氯-1,7-二氮雜萘-3-甲腈35 g。

步驟2：6-(1-溴乙基)-2-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成在1 L單口瓶中，加入乙醇(400.00 mL)，6-(1-溴乙基)-2,4-二氯-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(20.00 g, 60.40 mmol, 1eq)，4-甲氧基-4-甲基呱啶鹽酸鹽(11.00 g, 66.44 mmol, 1.1 eq)和三乙胺(13.45 g, 132.88 mmol, 2.2 eq)。90℃反應2小時。LC-MS顯示反應完全，將反應液降溫至室溫，減壓濃縮至乾，加入400 mL水攪拌1小時，抽濾，濾餅用乙醇重結晶，得到產品6-(1-溴乙基)-2-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈20 g。

步驟3：2-羥基-6-(1-羥乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成在250 mL單口瓶中加入乙酸(60.00 mL)，水(30.00 mL)，6-(1-溴乙基)-2-氯-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(15.00 g)，100℃反應6小時，LC-MS顯示反應完全。降溫至室溫，反應液減壓濃縮至乾。加入100 mL水，調pH=7-8，乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液減壓濃縮至乾得到粗品。粗品先用EA熱打漿，再用乙醇重結晶，得到產品2-羥基-6-(1-羥乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈6 g。

步驟4：6-乙醯基-2-羥基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物114的互變異構體在250 mL單口瓶中，加入DCM(90.00 mL)，2-羥基-6-(1-羥乙基)-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(4.50 g, 13.15 mmol, 1 eq)，戴斯-馬丁氧化劑(6.14 g, 1.1 eq, 14.47 mmol)，室溫攪拌2小時。LC-MS顯示反應完全，加入60 mL水，30 mL飽和硫代硫酸鈉溶液，攪拌1小時，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液減壓濃縮至乾，得粗品，經柱層析純化，得到產品6-乙醯基-2-羥基-4-(4-甲氧基-4-甲基呱啶-1-基)-1,7-二氮雜萘-3-甲腈0.7 g。¹ HNMR (400MHz, DMSO) δ(ppm): 12.33(s, 1H), 8.70(s, 1H), 8.19(s, 1H), 3.62-3.64(d, 4H), 3.20(s, 3H), 2.63(s, 3H), 1.92-1.96(m, 2H), 1.76-1.78(m, 2H), 1.24(s, 3H). 分子式：C₁₈ H₂₀ N₄ O₃ ，分子量：340.38，LC-MS(Pos,m/z )=341.21 [M+H⁺ ].實施例 19 ： 6- 乙基 -2- 羥基 -4- （ 4- （甲氧基 -d ₃ ） -4- 甲基呱啶 -1- 基） -1,7- 二氮雜萘 -3- 甲腈的合成（化合物 115 的互變異構體）

步驟1： 4-羥基-4-甲基呱啶-1-羧酸叔丁酯的合成將原料4-氧代呱啶-1-羧酸叔丁酯(5.0 g, 25 mmol, 1.0 eq)溶於四氫呋喃(25 mL)，氮氣保護0℃下加入甲基氯化鎂試劑(9 mL, 27 mmol, 1.1 eq)。反應2小時後TLC檢測反應完全，加入稀鹽酸調節pH=4，再加入水(30 mL)，乙酸乙酯(30 mL×3)萃取，有機相乾燥，過濾，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析(PE:EA=5:1)純化得產品(5.2 g，收率：96%)。

步驟2：4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶-1-羧酸叔丁酯的合成在100 mL單口瓶中，氮氣置換，加入4-羥基-4-甲基呱啶-1-羧酸叔丁酯(2.70 g, 12.55 mmol, 1 eq)，THF(27.00 mL)，分批加入氫化鈉(60%, 0.76 g, 1.5 eq)，室溫反應0.5小時。滴加CD₃ I(4.00 g, 27.62 mmol, 2.2 eq)，加完後30℃反應過夜。TLC顯示反應完全。將反應液減壓濃縮至乾，加入100 mL EA，分液，有機相水洗後，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液減壓濃縮至乾，得到產品4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶-1-羧酸叔丁酯（4.3g）。

步驟3：4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶鹽酸鹽的合成在500 mL單口瓶中氮氣置換，加入4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶-1-羧酸叔丁酯(4.30 g)，加入氯化氫乙醇(8.60 mL)和乙醇(8.60 mL)。30℃反應2小時。TLC顯示反應完全，將反應液減壓濃縮至乾，加入30 mL EA攪拌0.5小時，抽濾，得到產品4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶鹽酸鹽1.20 g。

步驟4：6-乙基-2-羥基-4-（4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶-1-基）-1,7-二氮雜萘-3-甲腈的合成化合物115的互變異構體在100 mL單口瓶中加入4-氯-6-乙基-2-羥基-1,7-二氮雜萘-3-甲腈(1.50 g, 6.47 mmol, 1 eq)，4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶鹽酸鹽(1.20 g, 7.12 mmol 1.1 eq)，乙醇(15.00 mL)，TEA(1.44 g, 14.23 mmol, 2.2 eq)，90℃反應1小時，LC-MS顯示反應完全。降溫，反應液減壓濃縮至乾。加入50 mL水，攪拌0.5小時，抽濾，得到粗品。粗品經乙醇重結晶，得到產品6-乙基-2-羥基-4-（4-（甲氧基-d ₃ ）-4-甲基呱啶-1-基）-1,7-二氮雜萘-3-甲腈（2.03）。¹ HNMR (400MHz, DMSO) δ(ppm): 11.91(s, 1H), 8.58(s, 1H), 7.40(s, 1H), 3.60-3.61(d, 4H), 2.78-2.84(q, 2H), 1.89-1.92(m, 2H), 1.77-1.82(m, 2H), 1.26(s, 6H). 分子式：C₁₈ H₁₉ D₃ N₄ O₂ ，分子量：329.42，LC-MS(Pos,m/z )=330.21 [M+H⁺ ].

根據下述實驗例，可以更好地理解本發明。然而，本領域的技術人員容易理解，實驗例所描述的內容僅用於說明本發明，而不應當也不會限制權利要求書中所詳細描述的本發明。實驗例一： PDE9 酶學評價方法

測試物：本發明化合物，由本發明相應的實施例所製備。

一、實驗材料及儀器 PDE9A2酶 (BPS, Cat. No. 60090) 384孔板 (Perkin Elmer, Cat. No. 6007279)

二、試驗步驟準備化合物：用DMSO將化合物配製成10mM化合物儲存液長期儲存，以DMSO 100倍稀釋得到100μM化合物工作母液，再以DMSO將化合物工作母液3倍稀釋，共得到8-10個濃度梯度的化合物稀釋母液（100×）。加藥孵育：使用極微量液體移液系統Echo移取化合物稀釋母液至384孔板中；每個化合物孔加入200nL化合物稀釋母液以及10μL PDE9A2酶液，1000rpm離心1min後，室溫孵育15min。隨後加入10μL底物混合液，1000rpm離心1min後，室溫振盪孵育30min。最後，加入終止液終止反應體系，室溫振盪孵育60min。最大讀值孔（Max）中，以溶劑代替化合物；最小讀值孔（Min）中，以溶劑代替化合物以及酶液。檢測：使用酶標儀檢測480nm/535nm處螢光讀值（F）。計算：抑制率按照如下公式計算，使用GraphPad Prism5.0擬合IC₅₀ ：

三、試驗結果如下表2所示：表2

測試物	PDE9A2 IC₅₀ （nM）
化合物63	4
化合物64	38
化合物68	3
化合物69	11
化合物70	24
化合物74	14
化合物75	69
化合物76	61
化合物77	52
化合物78	85
化合物80	25
化合物81	31
化合物84	38
化合物87	9
化合物90	20
化合物91	50
化合物92	25
化合物102	15
化合物114	48
化合物115	19
化合物A	61
化合物B	3

由表2可知，本發明化合物具有非常好的PDE9酶學抑制活性，具有潛在的臨床應用價值。實驗例二 本發明化合物對瞬轉 HEK293T 細胞 cGMP 含量影響的測試

測試物：本發明中的化合物102，其結構參見本文表1中序號102化合物的結構。

縮略詞：

FBS	胎牛血清
ANF	心房利鈉因數，心鈉素
B₀	最大結合
cGMP	3,5-環磷酸鳥苷
ELISA	酶聯免疫吸附試驗
NPR1	Natriuretic peptide receptor 1，利鈉肽蛋白受體1
NSB	非特異性結合
PDE9	Phosphodiesterase 9，磷酸二酯酶9
WB	Western Blotting，免疫印跡法
TA	總活力
GAPDH	甘油醛-3-磷酸脫氫酶

材料及儀器實驗儀器及耗材

名稱	來源
cGMP ELISA 試劑盒（Cyclic GMP ELISA Kit）	Cayman
PolyFect轉染試劑（PolyFect Transfection Reagent）	QIAGEN
心鈉素（Atrial natriuretic factor（1-28））（大鼠）	TOCRIS
DYKDDDK（Flag） (Rabbit）	CST
GAPDH (Rabbit）	CST
曝光儀	Tanon
多功能酶標儀	PerkinElmer

質粒

名稱	種屬	來源
NPR1	人源	金斯瑞
PDE9	人源	金斯瑞

細胞株細胞名：人胚腎細胞HEK293T

試驗方法： 1. 細胞鋪板和轉染 1.1 細胞鋪板 HEK293T細胞鋪於6孔板中，2×10⁶ 細胞/孔，培養6 h，使細胞貼壁。 1.2 轉染更換各孔培養基為1.5 mL DMEM全培養基；轉染孔：向每100 µL不含FBS的DMEM饑餓培養基，加入0.333 µg的NPR1和0.333 µg的PDE9質粒吹打，再加入20 µL PolyFect轉染試劑吹打混勻，靜置10 min後，加入600 µL DMEM全培養基吹打、混勻，吸取700 µL緩慢滴加入孔中，培養18 h。各轉染孔的方法同上。不轉染孔：不轉染的孔加入等體積的DMEM全培養基（700 µLDMEM全培養基）。 2. 給藥刺激取化合物在DMSO中的50 mM母液，用全培養基稀釋為3 mM、1 mM、333 µM、111 µM、37 µM、和12 µM的梯度濃度的一系列化合物溶液（100×工作液）。將轉染過的培養板中的培養基換為1 mL DMEM全培養基後，每孔加入10 µL不同濃度的上述100×工作液溶液得到終濃度為30 μM、10 μM、3.33 μM、1.11 μM、0.37 μM和0.12 μM的梯度濃度的一系列化合物溶液，置於培養箱中孵育30min後，每孔加入3 µL 326 µM的ANF，使其終濃度為1 µM，再與藥物共孵育30 min。 3. cGMP含量檢測(參照cGMP ELISA 試劑盒說明書操作) 1.1 細胞收集各孔吸取培養基，用PBS洗一次細胞，加入250 µL的0.5 M高氯酸，用細胞刮刀收集細胞，轉移至1.5 mL離心管中。渦旋混勻後在4℃、6000 g離心20 min。取上清200 µL用4 M的KOH調節pH至中性。另取一個非轉染孔和一個轉染孔細胞，加入含蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的RIPA裂解液，收集細胞，用於轉染驗證的WB試驗。 1.2 cGMP含量測定配製30-0.23 pmol/mL濃度範圍（2倍梯度稀釋）的cGMP標準品後，按下表加樣，4℃孵育18 h。

試劑名稱樣品名稱	ELISA 緩衝液	標準品/樣品	Tracer	Antiserum
NSB	100 µL	—	50 µL	—
B₀	50 µL	—	50 µL	50 µL
標準品/樣品	—	50 µL	50 µL	50 µL

充分洗板5次後，各孔加入200 µL的Ellman’s Reagent，封板、避光震盪、顯色60 min後，檢測在412nm處的吸光度值。 1.3 cGMP含量測定首先，扣除非特異性結合（各孔讀值減去NSB孔讀值），然後計算B/B₀ ，即樣品或標準品的結合與最大結合的比值，按照如下公式進行轉換，然後將得到的logit（B/B0）與lg（化合物濃度）進行線性回歸，得到標準曲線。將樣品的B/B₀ 值轉換為logit（B/B0）值，根據標準曲線計算出樣品中cGMP的含量。 2. 利用蛋白免疫印跡法（WB）對轉染的驗證使用蛋白免疫印跡法方法檢測質粒Flag標籤蛋白的表達，表達則表示轉染成功。試驗結果如圖1所示。

在圖1中，左上角圖示為藉由蛋白免疫印跡法對轉染進行驗證。符號N表示未轉染的HEK293T細胞；以及T表示hNPR和hPDE9A共轉染的HEK293T細胞。

如圖1所示，在共轉染人源NPR1和PDE9的HEK293T構建細胞內，ANF可顯著誘導胞內cGMP的表達，本發明化合物在細胞水準上藉由抑制PDE9，可顯著提高ANF介導的cGMP水準，在治療心衰竭方面具有較好的應用潛力。實驗例三 本發明化合物對 RNCM 中 cGMP 含量影響的測試

縮略詞：

ANF	心房利鈉因數，心鈉素
cGMP	3,5-環磷酸鳥苷
ELISA	酶聯免疫吸附試驗
RNCM	新生大鼠原代心肌細胞

試劑耗材： 1. 實驗儀器及試劑

名稱	來源
cGMP ELISA 試劑盒（Cyclic GMP ELISA Kit）	Cayman
心鈉素（Atrial natriuretic factor（1-28））（大鼠）	TOCRIS
多功能酶標儀	PerkinElmer
明膠	阿拉丁
諾考達唑	Sigma
L-谷氨醯胺	阿拉丁
低糖DMEM	BI
M199培養基	BI
胎牛血清	Gibco
馬血清	Gibco
雙抗	BI
II型膠原酶	Worthington
恆溫震盪儀	常州朗越

2. SD新生大鼠原代心肌細胞的製備 2.1 試劑準備 2.1.1 1%明膠溶液 1%明膠用於培養乳鼠原代心肌細胞時包被培養皿。稱取1 g明膠，溶解於100 mL去離子水中，使用時稀釋至0.2%濃度後使用； 2.1.2 有絲分裂抑制劑取10 mM諾考達唑DMSO母液，用DMSO稀釋為1 mM，得到20000×溶液，使用時用培養基稀釋至終濃度為1×； 2.1.3 L-谷氨醯胺取L-谷氨醯胺2.92 g，溶解於100 mL去離子水中，得到200 mM溶液； 2.1.4 乳鼠原代心肌細胞培養液取低糖DMEM培養基150 mL，M199培養基50 mL，Gibco胎牛血清10 mL，馬血清20 mL，L-谷氨醯胺2 mL，雙抗2.34 mL，配置完成後過濾； 2.1.5 10×ADS緩衝液稱取NaCl 6.8 g，Na₂ HPO₄ ·2H₂ O 120 mg，KCl 400 mg，MgSO₄ ·7H₂ O 197 mg，Glucose 1 g，Hepes 4.8 g，加入90 mL去離子水溶解，調節pH至7.4，然後定容至100 mL備用，使用時稀釋為1×。 2.2 乳鼠原代心肌細胞的培養及提取 2.2.1 取SD大鼠的新生乳鼠（2-5天）心臟，置於預冷的1×ADS緩衝液中； 2.2.2 先剪去心房，再剝離心臟外的血管組織，最後輕輕將心室切開後剪幾下； 2.2.3 取1.5 ml EP管加入900 μL 1× ADS 緩衝液，然後將3-5個乳鼠心室加入EP管中，再加入10 μL100× II型膠原酶； 2.2.4 恆溫震盪儀37℃、1100rpm消化15 min，取消化液後加入1 mL心肌細胞培養液； 2.2.5 中和後1500 g離心5 min，棄上清加入2 mL心肌細胞培養液； 2.2.6 再次重複震盪消化、離心兩次，得到6 mL的原代心肌細胞懸液（共消化三次）； 2.2.7 將6 mL原代心肌細胞懸液轉移至50 mL離心管中，再加入細胞培養液混勻，平均每10個乳鼠心臟有10 mL細胞培養液； 2.2.8 將10 mL原代心肌細胞懸液加入到培養皿中，放細胞培養箱中正常培養； 2.2.9 45 min後小心取細胞培養液加入到新培養皿中，正常培養； 2.2.10 45 min後小心取細胞培養液，1500 g離心5 min得到原代心肌細胞； 2.2.11 用0.2%明膠包被培養板，置培養箱中最少放置30 min； 2.2.12 重懸後用台盼藍染色法計數，6孔板中每孔加入1×10⁶ 個細胞，並按1：20000加入有絲分裂抑制劑諾考達唑； 2.2.13 鋪板於用0.2%明膠包被30 min後的培養板，培養3 h後再換成正常心肌細胞培養液； 2.2.14 第二天觀察細胞可發現原代心肌細胞呈現有節律的跳動，備用於後續檢測。

試驗方法： 1. 含化合物的培養板的準備取化合物在DMSO中的50 mM母液，先用DMSO稀釋為30 mM、 10 mM、3.3 mM、1.1 mM和0.37 mM的一系列梯度濃度化合物溶液，再用培養基稀釋為3 mM、1 mM、333 µM、111 µM和37 µM的一系列梯度濃度化合物溶液（100×工作液）。 2. 實驗步驟按上述方法，提取SD新生大鼠原代心肌細胞（RNCM），鋪於6孔板中。待RNCM貼壁伸展並搏動後，饑餓24h。給藥前更換為新鮮全培養基，1 mL/孔，每孔加入不同濃度化合物100×工作液10 µL得到終濃度為30 μM、10 μM、3.33 μM、1.11 μM和0.37 μM的梯度濃度的一系列化合物溶液。給藥孵育30min後，加入ANF，使終濃度為1 µM，繼續共孵育30 min後，收集各孔細胞。 3. cGMP含量檢測(參照cGMP ELISA 試劑盒說明書操作) 3.1 細胞收集各孔吸取培養基，用PBS洗一次細胞，加入250 µL的0.5 M高氯酸，用細胞刮刀收集細胞，轉移至1.5 mL離心管中。渦旋混勻後在4℃ 6000 g離心20 min。取上清200 µL用4 M的KOH調節pH至中性。另取一個非轉染孔和一個轉染孔細胞，加入含蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的RIPA裂解液，收集細胞，用於轉染驗證的WB試驗。 3.2 cGMP含量測定配製30-0.23 pmol/mL濃度範圍（2倍梯度稀釋）的cGMP標品後，按下表加樣，4 ℃孵育18 h。

充分洗板5次後，各孔加入200 µL的Ellman’s Reagent，封板避光震盪顯色60 min後，檢測412nm處吸光度值。 3.3 cGMP含量測定首先扣除非特異性結合（各孔讀值減去NSB孔讀值），然後計算B/B0，即樣品或標準品的結合與最大結合的比值，按照如下公式進行轉換，然後將得到的logit（B/B0）與lg（化合物濃度）進行線性回歸，得到標準曲線。將樣品的B/B₀ 值轉換為logit（B/B₀ ）值，根據標準曲線計算出樣品中cGMP的含量。

測試結果如圖2所示：如圖2所示，ANF可顯著誘導新生大鼠原代心肌細胞內cGMP的表達，本發明化合物在大鼠原代心肌細胞內藉由抑制PDE9，提高cGMP水準。這說明本發明化合物具有升高心肌cGMP的能力，在治療心衰竭方面具有較好的臨床應用潛力。實驗例四 ：冠狀動脈結紮誘導的大鼠心衰竭模型

本文中，使用的縮寫，“bid”是指每天給藥兩次；“LVEF”是指左心室射血分數；“EDV”是指左心室舒張末期容積；“ESV”是指左心室收縮末期容積；“DMSO”是指二甲基亞碸；“MC”是指甲基纖維素；“p.o”是指口服給藥；“mpk”是指毫克/千克；“SD”是指斯普拉格-杜勒鼠。“S.E.M”是指標準誤差。“PEG400”是指聚乙二醇400；“captisol”是磺丁基倍他環糊精鈉。“FS”是左室短軸縮短率；“HR”是心率。儀器小動物呼吸機 Powerlab 8/35訊號收集處理系統； Millar 導管 Vevo小動物超音波成像系統分析天平；測試藥物 化合物102，給藥劑量30mg/kg，給藥溶媒5%DMSO+10%PEG400+85% (20%Captisol+0.5%MC in water)實驗動物 Sprague Dawley 大鼠 (SD大鼠)，雄性，造模時體重220g左右。實驗方法

手術前腹腔注射戊巴比妥鈉注射液麻醉動物，腹腔注射阿托品祛痰。大鼠麻醉後仰位固定，呼吸機輔助呼吸，在第三和第四肋骨間開胸，使用5-0帶線縫合針結紮冠狀動脈左前降支。結紮完成後關閉胸腔，縫合皮膚，放入保溫毯恢復。假手術組(Sham組)也進行相同手術操作，只是不進行絲線結紮操作。術後肌肉注射美洛昔康止痛以及腹腔注射硫酸慶大黴素注射液抗感染，腹腔注射利多卡因，預防室顫。動物術後恢復一週後，將模型大鼠分為模型組和治療藥物組（化合物102組），分別灌胃給藥溶媒和化合物102，每天兩次，連續四週。實驗期間，觀察動物生活狀態，對異常狀況進行記錄以評估化合物安全性；給藥28天，末次藥後第二天，腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉動物，進行心臟超音波圖檢測和血流動力學檢測，評價化合物對心臟收縮功能及心室容量的影響。結束後進行終點處理，取心臟進行取材收集，以便後續進行cGMP及蛋白表達的相關研究。

動物術後恢復一週後，使用異氟烷麻醉大鼠，Vevo小動物超音波成像系統檢查模型大鼠左心室功能，以LVEF%降低30%即為模型成功。除假手術組外，根據LVEF%和體重隨機分為2組，每組動物數及給藥方式如下表：

組號	分組	動物數	給藥劑量	給藥方式	給藥時間
1	假手術組（Sham）	10	-	p.o bid	造模後一週開始，持續四週
2	模型組（Model）	12	-	p.o bid	造模後一週開始，持續四週
3	化合物102組	12	30 mpk	p.o bid	造模後一週開始，持續四週

實驗終點大鼠處死後取梗塞心臟組織用4%甲醛固定，經脫水、石蠟包埋、切片，使用天狼猩紅染色顯微鏡下觀察膠原沉積狀況，使用徠卡aperio數位切片掃描系統進行掃描分析。檢測指標

主要評價指標為LVEF%(左室射血分數)、FS（左室短軸縮短率）、ESV（左心室收縮末期容積）、EDV（左心室舒張末期容積）、心率（HR）。實驗終點統計心肌梗塞邊緣區（Pro-infarction zone）天狼猩紅比例來評價膠原沉積狀況。資料統計

資料使用Mean±S.E.M表示，Graphpad Prism 5.0進行統計作圖。用T-檢驗進行統計學分析。P>0.05表示差異有統計學意義。研究結果

大鼠30mpk，bid，連續給藥28天後大鼠狀態良好，與假手術組相比未見體重異常，提示化合物安全性較佳。

從圖3至圖4可以看出，模型組大鼠的LVEF和FS分別為36.0±1.86%和18.3±1.03%，顯著低於假手術組的72.2±1.40%和43.0±1.29%，統計學差異顯著（P>0.001）。從圖5至圖6可以看出，與假手術組大鼠相比，模型組大鼠心臟EDV和ESV均明顯升高，有顯著的統計學差異（P>0.001）。因此模型組左心室收縮功能顯著降低，心肌重建變化顯著，提示模型造模成功。化合物102對心衰竭大鼠LVEF及FS的降低有改善作用，且與模型組比較具有顯著性統計學差異（P>0.001）。同時，化合物102對心衰竭造成的心臟EDV和ESV增大有顯著改善作用（P>0.05，P>0.01）。因此化合物可顯著改善心衰竭大鼠的收縮功能及心肌重建。

從圖7可以看出，與假手術組大鼠相比，模型組及化合物給藥組未觀察到心率的變化。表3化合物對心衰竭大鼠心肌纖維化的影響（Mean±S.E.M）

組別	劑量	數量	梗塞邊緣區膠原沉積百分比（ % ）
假手術	-	10	0.121±0.017
模型組	-	12	28.9±1.35^***
化合物102	30mpk	12	21.5±1.23^###

***P>0.001 vs 假手術，###P>0.001 vs 模型組，t-檢驗

與圖8和表3可知，假手術組膠原沉積百分比為0.121±0.017%，而模型組大鼠左心室心肌梗塞邊緣區的膠原沉積百分比為28.9±1.35%，顯著高於假手術組，統計學差異極顯著（P>0.001）。由此可知，模型組心肌梗塞後引起梗塞區域及邊緣區的膠原沉積從而發生心肌纖維化（Cardiac fibrosis）。與模型組比較，化合物102可以顯著降低梗塞邊緣區膠原沉積（P>0.001），有效改善心衰竭模型導致的心肌纖維化。

結論：綜上所述，化合物102可以改善心衰竭大鼠的心臟功能，逆轉大鼠心衰竭後導致的心肌重建，降低梗塞邊緣區域纖維化，具有優秀的治療心衰竭的臨床應用潛力。

ANF:心房利鈉因數，心鈉素 cGMP:3,5-環磷酸鳥苷 EDV:左心室舒張末期容積 ESV:左心室收縮末期容積 FS:左室短軸縮短率 GAPDH:甘油醛-3-磷酸脫氫酶 HR:心率 LVEF:左心室射血分數 mpk:毫克/千克 NPR1:利鈉肽蛋白受體1 PDE9:磷酸二酯酶9

圖1化合物102對人PDE9A2和利鈉肽蛋白受體1（NPR1）雙轉染的HEK293T細胞內cGMP含量的上調作用圖2化合物102對心鈉素刺激的新生大鼠原代心肌細胞中cGMP的影響圖3化合物對心衰竭大鼠左心室射血分數的影響圖4化合物對心衰竭大鼠短軸縮短率的影響圖5化合物對心衰竭大鼠左心室收縮容積的影響圖6化合物對心衰竭大鼠左心室舒張容積的影響圖7化合物對心衰竭大鼠HR的影響圖8各組大鼠心臟梗塞邊緣區纖維化染色

LVEF:左心室射血分數

mpk:毫克/千克

Claims

一種通式(I)所示的磷酸二酯酶9(PDE9)抑制劑化合物、及其藥學上可接受的鹽和氘代化合物在製備治療哺乳動物心衰竭疾病的藥物中的用途，
其中，X₁、X₄為CH，X₂為N，X₃為CR₃；R₃在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷羰基，其中該C_1-6烷基未被取代或任選被一至複數羥基取代；L為鍵；環A為
；每個R₁分別獨立地選自氫、氘、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基；m為1、2或3；R₂為氫。
如請求項1所述的用途，其中通式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽和氘代化合物選自以下結構：
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，所述的治療心衰竭疾病的藥物還包括第二種或多種治療劑。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，該治療心衰竭疾病的藥物可以與藥用載體製成藥學上可接受的任意藥物製劑。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，所述的藥物藉由口服、腸胃外、透皮、直腸、經鼻、經肺、植入、局部給藥方式施用於需要治療的患者或受試者。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，該心衰竭疾病為不同分類依據下的各種心衰竭，包括左心臟衰竭、右心臟衰竭、全心臟衰竭；急性心衰竭、慢性心衰竭、失代償性心衰竭；收縮性和舒張性心臟衰竭；前心衰竭階段、前臨床心衰竭階段、臨床心衰竭階段、難治性終末期心衰竭階段；紐約心臟協會(NYHA)心功能分級I級、II級、III級、IV級的心衰竭；左心室射血分數降低型心衰竭、左心室射血分數中間值心衰竭、左心室射血分數保留型心衰竭。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，該心衰竭疾病選自缺血性心臟病導致的心衰竭、毒性損害導致的心衰竭、免疫介導的和炎症損害導致的心衰竭、浸潤性病變導致的心衰竭、代謝紊亂導致的心衰竭、遺傳異常導致的心衰竭、異常負荷導致的心衰竭、心律失常導致的心衰竭。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，該心衰竭疾病選自收縮性心臟衰竭和舒張性心臟衰竭。
如請求項1所述的用途，所述的哺乳動物是人類。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，通式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽和氘代化合物藉由抑制PDE9活性，提高環磷酸鳥苷酸的水準，起到治療心衰竭的作用效果。
如請求項1或請求項2所述的用途，其中，通式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽和氘代化合物藉由改善心衰竭患者或受試者的心臟功能，逆轉心衰竭患者或受試者的心肌重建，起到治療心衰竭的作用效果。
一個藥盒，包含(a)通式(I)所示的磷酸二酯酶9(PDE9)抑制劑化合物及其藥學上可接受的鹽和氘代化合物和(b)使用該化合物或其藥學上可接受的鹽或其異構體或其氘代化合物用於治療哺乳動物心衰竭疾病的說明書：
其中，X₁、X₄為CH，X₂為N，X₃為CR₃；R₃在每次出現時獨立地選自氫、氘、羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷羰基，其中該C_1-6烷基未被取代或任選被一至複數羥基取代；L為鍵；環A為
；每個R₁分別獨立地選自氫、氘、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基； m為1、2或3；R₂為氫。