TWI802179B - 仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明是有關於一種仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途，其中仙人掌醱酵物係利用酵母菌對仙人掌莖進行醱酵步驟而製得。仙人掌醱酵物含有豐富的蛋白質、粗多醣、總黃酮及總酚，具保濕、祛紅及/或淡化細紋等功效，可做為皮膚外用組成物的有效成分。

Description

仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途

本發明是有關於一種仙人掌醱酵物，特別是一種仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途。

仙人掌是石竹目仙人掌科( Cactaceae)植物的總稱。目前已知的仙人掌約2000種，其中多數生長於沙漠或半沙漠等乾燥、少雨、日照強的環境。為了避免水分散失、儲存大量水分，仙人掌特化出針狀葉及肉質莖等器官，且產生許多可有效保留水分及/或保護細胞不受強日照傷害的功能性成分(如：黏液及抗氧化物等)。

大體上，仙人掌的上述功能性成分可透過習知萃取法，例如熱水萃取法或有機溶劑萃取法獲得。但習知萃取法具有以下缺點，例如仙人掌所含的功能性成分在熱水萃取後可能會被高溫破壞。其次，仙人掌的肉質莖富含黏液，會降低有機溶劑萃取的效率。再者，以有機溶劑萃取後的萃取物則可能殘留有機溶劑，後續應用於護膚產品時對人體可能有不良影響。

此外，仙人掌的上述功能性成分亦可透過醱酵法獲得。舉例而言，南美洲的傳統飲品仙人掌酒是利用酵母菌對仙人掌果實醱酵製得之醱酵物，但對於仙人掌其他部位的醱酵產物及其功效則少有研究。

因此，本發明之一態樣是提供一種仙人掌醱酵物，其係利用酵母菌對含有仙人掌莖的醱酵基質進行醱酵步驟後製得。仙人掌醱酵物含有豐富的蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚，提供適合皮膚的酸鹼值，且對皮膚具保濕、祛紅及/或淡化細紋等功效。

本發明之又一態樣是提供一種具保濕功效之皮膚外用組成物，其係以仙人掌醱酵物做為有效成分。

本發明之再一態樣是提供一種具祛紅功效之皮膚外用組成物，其係以仙人掌醱酵物做為有效成分。

本發明之另一態樣是提供一種具淡化細紋功效之皮膚外用組成物，其係以仙人掌醱酵物做為有效成分。

本發明之又一態樣是提供一種仙人掌醱酵物用於製備保濕、祛紅及淡化細紋之皮膚外用組成物的用途，其係以仙人掌醱酵物做為有效成分。

根據本發明之上述態樣，提出一種仙人掌醱酵物。此仙人掌醱酵物可包含但不限於1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的蛋白質、5.0 mg/mL至15.0 mg/mL的粗多醣、1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的總黃酮及/或0.1 mg/mL至0.8 mg/mL的總酚。仙人掌醱酵物的pH值可例如為4.5至6.8，且仙人掌醱酵物的黏度可例如為10 厘泊(cP)至15 cP。仙人掌醱酵物可例如為對醱酵基質進行醱酵步驟而製得。醱酵基質可例如為由仙人掌莖及水組成，其中仙人掌莖可例如為扭刺仙人掌( Opuntia streptacantha)的肉質莖。醱酵步驟可例如為利用酵母菌於20°C至50°C之溫度進行10小時至50小時。酵母菌可例如為釀酒酵母菌( Saccharomyces cerevisiae)，其係寄存於臺灣生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center，BCRC)，且寄存編號為BCRC 21815。

根據本發明之一實施例，醱酵基質之仙人掌莖及水的重量體積比(g：mL)可例如為10~25：100~300。根據本發明之一實施例，酵母菌的菌體濃度可例如為10 ⁵菌落形成單位(colony forming unit，CFU)/mL至10 ⁸CFU/mL。根據本發明之一實施例，醱酵基質之仙人掌莖對酵母菌之重量體積比(g：mL)可例如為2~20：5~10。根據本發明之一實施例，仙人掌醱酵物可例如為經醱酵步驟及固液分離步驟而製得。根據本發明之一實施例，仙人掌醱酵物可例如為經醱酵步驟、固液分離步驟及滅菌步驟而製得。

根據本發明之另一態樣，提出一種具保濕功效之皮膚外用組成物，包含仙人掌醱酵物做為有效成分。根據本發明之再一態樣，提出一種具祛紅功效之皮膚外用組成物，包含仙人掌醱酵物做為有效成分。根據本發明之又一態樣，提出一種具淡化細紋功效之皮膚外用組成物，包含仙人掌醱酵物做為有效成分。根據本發明之再一態樣，提出一種仙人掌醱酵物用於製備保濕、祛紅及淡化細紋之皮膚外用組成物的用途，包含仙人掌醱酵物做為有效成分。

應用本發明的仙人掌醱酵物，其係利用酵母菌對含仙人掌莖之醱酵基質進行醱酵步驟而製得，可包含但不限於豐富的蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚，且對皮膚具保濕、祛紅及淡化細紋功效，而可做為皮膚外用組成物的有效成分。

本發明所提到的單數形式“一”、“一個”和“所述”包含複數引用，除非上下文另有明確規定。數值範圍(如10%～11%的A)若無特定說明皆包含上、下限值(即10%≦A≦11%)；數值範圍若未界定下限值(如低於0.2%的B，或0.2%以下的B)，則皆指其下限值可能為0(即0%≦B≦0.2%)。上述用語是用以說明及理解本發明，而非用以限制本發明。

如前所述，本發明提供一種仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途，其係利用酵母菌對含有仙人掌莖之醱酵基質進行醱酵步驟而獲得，其中仙人掌醱酵物含有豐富的蛋白質、粗多醣、總黃酮及總酚，對皮膚具保濕、祛紅及淡化細紋等功效。

詳細而言，上述醱酵基質可例如為由仙人掌莖及水所組成。上述仙人掌莖可例如為扭刺仙人掌( Opuntia streptacantha)的肉質莖。在一實施例中，仙人掌莖可例如為新鮮的仙人掌肉質莖經乾燥處理及研磨處理後所得之仙人掌莖粉末。上述乾燥處理的方法不限，可利用習知方法進行，如：陰乾法、熱乾燥法、冷凍乾燥法、真空乾燥法及噴霧乾燥法等。在一具體例中，乾燥方法可例如為在70°C至80°C進行烘乾處理。上述研磨處理的方法不限，可例如利用任何習知方法進行，如：機械力研磨、滾筒式研磨及流動氣體研磨等。在一實施例中，仙人掌莖粉末的粒徑可例如為70目至90目，具體可例如為80目，以利後續操作(如：固液分離)之進行，並提供仙人掌莖粉末與酵母菌之醱酵反應較佳的比表面積。

上述酵母菌的菌株不限，可例如為釀酒酵母菌( Saccharomyces cerevisiae)，其係寄存於臺灣財團法人食品工業發展研究所(Food Industry Research and Development Institute，FIRDI)生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center，BCRC，地址：臺灣新竹市食品路331號，郵遞區號：300193)，且寄存編號為BCRC 21815。

在一實施例中，在進行醱酵步驟前，可選擇性先對酵母菌進行前處理，其中前處理可例如於20°C至50°C下，利用液態培養基進行第一液態培養，以使酵母菌活化，從而獲得第一培養物。接著，將第一培養物塗佈於固態培養基上，以於20°C至50°C下進行固態培養，從而獲得單一菌落。然後，將單一菌落接種至液態培養基，並在20°C至50°C進行第二液態培養，以獲得600 nm下光密度(optical density，OD)為0.5至1.0的菌液，其中此菌液的酵母菌是在對數期，其菌液濃度相當於10 ⁵菌落形成單位(colony forming unit，CFU)/mL至10 ⁸CFU/mL。經由前處理，可獲得活性佳的酵母菌，且可避免雜菌滋生。補充說明的是，上述液態培養基及固態培養基可例如為習知培養基。在一具體例中，液態培養基為馬鈴薯葡萄糖培養液(potato dextrose broth，PDB)。在一具體例中，固態培養基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar，PDA)。

在一實施例中，醱酵步驟可例如於20°C至50°C下進行10小時至50小時。如果醱酵步驟的溫度是低於20°C，則酵母菌的活性不佳。如果醱酵步驟是在高於50°C的溫度下進行，則酵母菌可能會失去活性，甚至死亡。如果醱酵步驟的時間是少於10小時，則製得之仙人掌醱酵物所含之蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚將不足。相反地，如果醱酵步驟的時間是多於50小時，則醱酵環境將累積過多的酵母菌代謝物而酸化仙人掌醱酵物，使得仙人掌醱酵物對皮膚產生刺激性，且有雜菌生成的疑慮。在一具體例中，醱酵步驟是在30°C下進行約48小時。上述酵母菌的活性是指酵母菌的生長活性及/或產生蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚的活性。如果酵母菌的活性不佳，則製得之仙人掌醱酵物的蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚的含量將不足，導致仙人掌醱酵物的保濕、祛紅及淡化細紋的功效不佳。

醱酵基質及酵母菌之比例可視需求調整。在一實施例中，醱酵基質之仙人掌莖及水的重量體積比(g：mL)可例如為10~25：100~300，使製得之仙人掌醱酵物的黏度維持在較佳的範圍。在一具體例中，醱酵基質可例如由20 g的仙人掌莖粉末及300 mL的水所組成。在一實施例中，醱酵基質之仙人掌莖對酵母菌之重量體積比(g：mL)可例如為2~20：5~10，然以4：1為較佳。

在一實施例中，可選擇性對仙人掌醱酵物進行醱酵步驟及固液分離步驟。上述固液分離步驟可例如以習知方法進行，如：過濾處理、離心處理及蒸餾處理等，以移除仙人掌醱酵物的雜質。在一示例中，以4000 rpm至12000 rpm之轉速進行離心處理達15分鐘至30分鐘。在一具體例中，離心是以4500 rpm之轉速進行20分鐘。在一實施例中，可選擇性對仙人掌醱酵物進行醱酵步驟、固液分離步驟及/或滅菌步驟。上述滅菌步驟可例如利用習知方法進行，如：壓蒸汽處理、乾熱處理及紫外線處理等。在一具體例中，滅菌步驟是利用高壓(1.0 kg/cm²至1.5 kg/cm ²)高溫(110°C至130°C)的水蒸氣進行10分鐘至20分鐘。

利用上述方法製得之仙人掌醱酵物為淺褐色的半透明液體，其中基於仙人掌醱酵物為100重量百分比(wt%)，仙人掌醱酵物含有0.9 wt%至2.0 wt%的可溶性固形物。在一實施例中，仙人掌醱酵物可包含但不限於1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的蛋白質、5.0 mg/mL至15.0 mg/mL的粗多醣、1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的總黃酮及/或0.1 mg/mL至0.8 mg/mL的總酚。如果仙人掌醱酵物的蛋白質、粗多醣、總黃酮及/或總酚的含量是小於上述範圍中，則仙人掌醱酵物對皮膚的保濕、祛紅及淡化細紋功效不佳。然而，如果仙人掌醱酵物的蛋白質、總黃酮及/或總酚之含量是大於上述範圍，仙人掌醱酵物容易引起皮膚過敏。如果仙人掌醱酵物的粗多醣之含量是大於上述範圍，則仙人掌醱酵物易有沉澱物析出、觸感黏膩、成膜性強且容易起屑等問題。

在一實施例中，上述仙人掌醱酵物的pH值可例如為4.5至6.8，接近皮膚表面的pH值，故不會破壞皮膚表面的正常菌叢之菌相，也不會刺激皮膚。反之，如果仙人掌醱酵物的pH值過高，可能降低皮脂的分泌，從而影響仙人掌醱酵物的保濕功效。如果仙人掌醱酵物的pH值過低，則可能造成皮膚角質層變薄，使皮膚變得更敏感及/或乾燥，從而加重紅血絲症狀。

在一實施例中，仙人掌醱酵物的黏度可例如為10 cP至15 cP。如果仙人掌醱酵物的黏度是小於10 cP，表示仙人掌醱酵物的粗多醣含量不足，對皮膚的保濕功效不佳。但如果仙人掌醱酵物的黏度是大於15 cP，表示仙人掌醱酵物的粗多醣含量過多，產生上述沉澱物析出、觸感黏膩、成膜性強且容易起屑等問題。

經皮膚實驗證實，仙人掌醱酵物具保濕、祛紅及淡化細紋的功效。前述「保濕」功效係指減少皮膚的水分流失，可利用經表皮水分散失量評估。前述「祛紅」功效是指改善皮膚表面紅血絲症狀，其中紅血絲症狀包含皮膚持續性的泛紅(例如血紅蛋白及/或表皮浮現微血管所致)，且紅血絲症狀的嚴重程度可由平均紅血絲值量化。具體而言，利用不同波長的光照射皮膚的受試區域所得之影像，可分析血紅素(hemoglobin)的吸收光譜，並以受試區域的紅血素之濃度平均值定義平均紅血絲值(任意單位)，其中平均紅血絲值越大，表示受試區域的紅血絲症狀越嚴重。

上述「淡化細紋」功效是指改善皮膚粗糙的程度，使皮膚紋理越少、越短及/或越淺，其中皮膚粗糙的程度可由平均紋理值(任意單位)量化。具體而言，利用不同波長的光照射皮膚的受試區域所得之反射光譜，可建構受試區域的皮膚表面形貌(surface topography)之立體模型，並以受試區域的皮膚紋理的數量、深淺及/或長度等資料做為參數定義受試區域的皮膚之平均紋理值(任意單位)，其中平均紋理值越大，表示受試區域的皮膚紋理越多、越長及/或越深，即皮膚越粗糙。

其次，經皮膚斑貼實驗證實，仙人掌醱酵物對皮膚具低致敏性。上述「低致敏性」是指仙人掌醱酵物塗抹皮膚經一段時間後，不引起皮膚之紅斑、浸潤、水腫、丘疹及皰疹等發炎及/或過敏等症狀。

由此可知，仙人掌的肉質莖以酵母菌進行醱酵步驟後，獲得之仙人掌醱酵物對皮膚具保濕、祛紅及淡化細紋功效，意味著醱酵步驟可自仙人掌的肉質莖保留及/或產生皮膚可吸收並利用的成分。值得注意的是，上述製造步驟排除使用有機溶劑，因此沒有有機溶劑殘留的疑慮。其次，仙人掌醱酵物不需經長時間(如：半小時以上)的高溫(如：100°C以上)處理，可避免上述皮膚可吸收並利用的成分遭高溫破壞。

在一實施例中，仙人掌醱酵物可做為具保濕、祛紅及/或淡化細紋功效之皮膚外用組成物的有效成分。在一實施例中，上述皮膚外用組成物之劑型可例如為溶液、乳液、乳霜、懸浮液、粉劑、凝膠或浴鹽。在一實施例中，上述皮膚外用組成物可例如乳液、化妝水、精華液、隔離霜、洗面乳、面膜或防曬乳，惟本發明不限於此處所舉。

以下利用數個實施例以說明本發明之應用，然其並非用以限定本發明，本發明技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾。 實施例一、製備仙人掌醱酵物

首先，釀酒酵母菌(寄存編號為BCRC 21815)於37°C在PDB中進行第一液態培養，以獲得第一菌液。接著，將第一菌液塗布於PDA上進行培養，以獲得單一菌落。然後，將單一菌落接種於PDB中，並於37°C進行第二液態培養，以獲得釀酒酵母菌的第二菌液，其中第二菌液的600 nm下光密度為0.5至1.0，相當於含有10 ⁵CFU/mL至10 ⁸CFU/mL的釀酒酵母菌之活菌。

將新鮮的扭刺仙人掌之肉質莖於75°C±5°C烘乾後，研磨成80目的仙人掌莖粉末。接著，將20 g的仙人掌莖粉末及300 mL的水混合成醱酵基質後，加入5 mL的上述釀酒酵母菌之第二菌液，再於30°C下進行醱酵步驟48小時，從而獲得仙人掌醱酵物。接下來，以121°C、1.1 kg/cm ²之水蒸氣對仙人掌醱酵物進行滅菌達15分鐘，再以4500 rpm的離心速率進行離心20分鐘，確保仙人掌醱酵物無致病菌檢出，且活菌數係小於50 CFU/mL，符合化妝品對於生物安全性的規定。

上述仙人掌醱酵物為淺褐色的半透明液體。利用習知方法(如：利用旋轉黏度測定計及酸鹼度計定法)測量上述仙人掌醱酵物的黏度及pH值，仙人掌醱酵物的黏度為10 cP至15 cP，且，仙人掌醱酵物的pH值為4.5至6.8。其次，基於上述仙人掌醱酵物為100 wt%，仙人掌醱酵物包含1.5 wt%的可溶性固形物。再者，仙人掌醱酵物含有1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的蛋白質、5.0 mg/mL至15.0 mg/mL的粗多醣、1.0 mg/mL至5.0 mg/mL的總黃酮及0.1 mg/mL至0.8 mg/mL的總酚。值得說明的是，不同株仙人掌具個體差異，因此不同批次的仙人掌醱酵物之黏度、pH值和蛋白質、粗多醣、總黃酮及總酚之含量略有不同，但是在上述範圍內。 實施例二、評估仙人掌醱酵物的保濕功效

首先，在受試者(3人)的左右臂上分別設定3 cm×3 cm的受試區域及對照區域，並利用市售經表皮水分散失檢測儀器(型號：Tewameter TM300；製造商：德國Courage + Khazaka electronic GmbH公司)檢測受試區域及對照區域之每單位時間每單位面積的經表皮水分散失量(trans-epidermal water loss，TEWL，單位為g/小時×m ²)。接著，將仙人掌醱酵物單次塗抹於受試區域的皮膚上(使用量為2.0±1.0 mg/cm ²)，但不在對照區域的皮膚進行任何處理。經2小時、4小時及8小時後，再次檢測對照區域及受試區域的經表皮水分散失量。

圖1是繪示根據本發明一實施例之皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同時間後之經表皮水分散失量的折線圖，其中橫軸表示檢測的時間，縱軸表示經表皮水分散失量(單位為g/小時×m ²)，且折線101及折線103分別表示受試區域及對照區域。如圖1所示，受試區域及對照區域的皮膚未塗抹仙人掌醱酵物之經表皮水分散失量在統計上沒有顯著差異(分別為5.53 g/小時×m ²及5.3 g/m ²)，但在塗抹皮膚仙人掌醱酵物2小時、4小時及8小時後，受試區域的經表皮水分散失量(折線101)皆低於對照區域的經表皮水分散失量(折線103)。皮膚塗抹仙人掌醱酵物2小時後，受試區域的經表皮水分散失量為6.60 g/小時×m ²，且對照區域的經表皮水分散失量為7.03 g/小時×m ²。皮膚塗抹仙人掌醱酵物4小時後，受試區域的經表皮水分散失量為5.23 g/小時×m ²，且對照區域的經表皮水分散失量為7.00 g/小時×m ²。皮膚塗抹仙人掌醱酵物8小時後，受試區域的經表皮水分散失量為4.30 g/小時×m ²，且對照區域的經表皮水分散失量為5.33 g/小時×m ²。由上述結果可知，皮膚塗抹仙人掌醱酵物2小時至8小時後，經表皮水分散失量下降，證明仙人掌醱酵物對皮膚具保濕的功效。

特別說明的是，經表皮水分散失量受到天氣、溫濕度及人體活動等影響，因此相同區域的皮膚之每日經表皮水分散失量的變異程度較大，但由上述結果可知，相較於仙人掌醱酵物未塗抹皮膚的對照區域，仙人掌醱酵物塗抹皮膚後的受試區域之經表皮水分散失量較低，即可證明仙人掌醱酵物對皮膚具保濕的功效。 實施例三、評估仙人掌醱酵物的祛紅功效

在受試者具有紅血絲症狀的患部皮膚上設定受試區域(3 cm × 3 cm)，並利用市售皮膚光學檢測儀器(品名：智慧3D肌膚檢測儀Antera 3D；製造商：都柏林愛爾蘭Miravex)對受試區域的皮膚表面進行影像分析，以獲得平均紅血絲值。接著，將仙人掌醱酵物單次塗抹於受試區域的皮膚上(使用量為2.0±1.0 mg/cm ²)，經7天及14天後，再次檢測受試區域之皮膚的平均紅血絲值。

圖2A至圖2G是分別顯示根據本發明一實施例之不同受試者的皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同天數後或皮膚未塗抹仙人掌醱酵物的受試區域照片，其中圓圈201、圓圈203、圓圈205、圓圈207、圓圈209、圓圈211及圓圈213代表實際測量區域。

圖2A及圖2B分別為受試者1皮膚在塗抹仙人掌醱酵物14天後(圖2A)及未塗抹仙人掌醱酵物(圖2B)的受試區域照片，其中圖2A之圓圈201內皮膚的平均紅血絲值為1.216，且圖2B之圓圈203內皮膚的平均紅血絲值為1.367。圖2C及圖2D分別為受試者2皮膚在塗抹仙人掌醱酵物14天後(圖2C)及未塗抹仙人掌醱酵物(圖2D)的受試區域的照片，其中圖2C之圓圈205內皮膚的平均紅血絲值為1.105，且圖2D之圓圈207內皮膚的平均紅血絲值為1.275。圖2E至圖2G分別為受試者3皮膚在塗抹仙人掌醱酵物7天(圖2E)、塗抹仙人掌醱酵物14天(圖2F)及未塗抹仙人掌醱酵物(圖2G)的受試區域的照片，其中圖2E之圓圈209內皮膚的平均紅血絲值為1.165，圖2F之圓圈211內皮膚的平均紅血絲值為1.012，且圖2G之圓圈213內皮膚的平均紅血絲值為1.253。

圖3是繪示根據本發明一實施例之受試者皮膚未塗抹仙人掌醱酵物及塗抹仙人掌醱酵物7天及14天後的平均紅血絲值之折線圖，其中橫軸由左至右分別表示皮膚未塗抹、塗抹後7天及14天，且縱軸表示平均紅血絲值。如圖3所示，皮膚塗抹仙人掌醱酵物14天後，受試區域之平均紅血絲值顯著下降14.4%(統計方法：成對樣本t檢定，paired tTest，p＜0.05)，證實仙人掌醱酵物可有效改善紅血絲症狀。換言之，仙人掌醱酵物具祛紅的功效。 實施例四、評估仙人掌醱酵物的淡化細紋功效

在受試者具有細紋的患部皮膚上設定受試區域(3 cm × 3 cm)，並以上述市售皮膚光學檢測儀器檢測受試區域中患部皮膚之平均紋理值。接著，將仙人掌醱酵物單次塗抹於受試區域的皮膚上(使用量為2.0±1.0 mg/cm²)，經7天及14天後，再次檢測此受試區域之皮膚的平均紋理值。

圖4A至圖4G是分別顯示根據本發明一實施例之不同受試者的皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同天數後或皮膚未塗抹仙人掌醱酵物的受試區域照片，其中圓圈401、圓圈403、圓圈405、圓圈407、圓圈409、圓圈411及圓圈413代表實際測量區域。

圖4A及圖4B分別為受試者4的皮膚在仙人掌醱酵物塗抹14天(圖4A)後及皮膚未塗抹仙人掌醱酵物(圖4B)的受試區域照片，其中圖4A之圓圈401內皮膚的平均紋理值為1.930，且圖4B之圓圈403內皮膚的平均紋理值為2.194。圖4C及圖4D分別為受試者5的皮膚在仙人掌醱酵物塗抹14天(圖4C)後及皮膚未塗抹仙人掌醱酵物(圖4D)的受試區域照片，其中圖4C之圓圈405內皮膚的平均紋理值為1.025，且圖4D之圓圈407內皮膚的平均紋理值為1.859。圖4E至圖4G分別為受試者6的皮膚在仙人掌醱酵物塗抹7天(圖4E)、14天(圖4F)後及皮膚未塗抹仙人掌醱酵物(圖4G)的受試區域照片，其中圖4E之圓圈409內皮膚的平均紋理值為3.614，圖4F之圓圈411內皮膚的平均紋理值為3.556，且圖4G之圓圈413內皮膚的平均紋理值為3.843。由此可知，仙人掌醱酵物塗抹皮膚7天及14天後，可淡化皮膚的細紋。

圖5是繪示根據本發明一實施例之受試者皮膚未塗抹仙人掌醱酵物或塗抹仙人掌醱酵物7天及14天後的平均紋理值之折線圖，其中橫軸由左至右分別表示皮膚未塗抹、塗抹7天及14天後，且縱軸表示平均紋理值。如圖5所示，仙人掌醱酵物塗抹皮膚14天後，受試區域之平均紋理值下降17.5%，證明仙人掌醱酵物於皮膚可淡化細紋。 實施例五、評估仙人掌醱酵物的低致敏性

在皮膚上進行密封式貼片試驗(closed patch test)，評估仙人掌醱酵物的低致敏性。選擇適合的受試者30人，其中受試者年齡是在18歲至60歲間隨機選擇。首先，利用無刺激性的膠帶於每位受試者的背部固定2個斑試器達24小時，使斑試器之鰭狀室(fin-chamber)中的濾紙片貼附於受試者的背部皮膚上，期間不移除斑試器，也避免斑試器碰到水。以濾紙片含有0.20 mL至0.25 mL的仙人掌醱酵物做為實驗組，以濾紙片含有0.20 mL至0.25 mL的蒸餾水做為控制組。經24小時後，取下斑試器，並分別於0.5小時、24小時及48小時後觀察斑試器下的皮膚(以下稱為受試區域)及受試區域周圍的皮膚是否出現紅斑、浸潤、水腫、丘疹及/或皰疹等症狀。

將結果記錄於表1中，其中圖號「-」表示皮膚為陰性，即皮膚沒有出現紅斑、浸潤、水腫、丘疹及/或皰疹等症狀，「±」表示可疑反應，即受試區域的皮膚出現輕微的紅斑，「+」表示弱陽性反應(亦稱為紅斑反應)，即受試區域的皮膚出現紅斑、浸潤、水腫及/或丘疹，「++」表示強陽性反應(亦稱為皰疹反應)，即受試區域的皮膚出現紅斑、浸潤、水腫、丘疹、皰疹，且受試區域周圍的皮膚也出現上述皰疹反應的症狀，「+++」表示皮膚出現極強陽性反應(亦稱為融合性皰疹反應)，即受試區域的皮膚出現明顯紅斑、嚴重浸潤、水腫、融合性皰疹，且受試區域周圍的皮膚也出現上述融合性皰疹反應(n=30)。 表1

樣品 名稱	反應 程度	受試者人數	反應程度為「+」、 「++」及「+++」的人數
0.5小時後	24小時後	48小時後
控 制 組	-	30	30	30	0
±	-	-	-
+	-	-	-
++	-	-	-
+++	-	-	-
實 驗 組	-	30	30	30	0
±	-	-	-
+	-	-	-
++	-	-	-
+++	-	-	-

如表1所示，在取下斑試器後0.5小時、24小時或48小時後，受試者在受試區域及其周圍的皮膚皆呈陰性，表示無紅斑、浸潤、水腫、丘疹、皰疹及融合性皰疹等反應，顯示仙人掌醱酵物對皮膚具低致敏性。

綜言之，上述特定品種及特定部位的仙人掌、特定菌株的酵母菌、特定的混合比例、特定的製程或特定的評估方法僅用於例示說明本發明的仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途。然而，本發明所屬技術領域中具有通常知識者應可理解，在不脫離本發明的精神及範圍內，其他品種及其他部位的仙人掌、其他菌株的酵母菌、其他混合比例以及其他的製程或其他的評估方法亦可用於仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途，並不限於上述。舉例而言，在不影響仙人掌醱酵物之保濕、祛紅及淡化細紋功效之前提下，亦可使用其他品種或其他部位的仙人掌、其他的酵母菌菌株或其他混合比例，以獲得仙人掌醱酵物。

由上述實施例可知，本發明仙人掌醱酵物、含此之具保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物及其用途，其優點在使用酵母菌對仙人掌肉質莖進行醱酵步驟，不僅可保留及/或產生皮膚可吸收且對皮膚有益的成分，且仙人掌醱酵物對皮膚具保濕、祛紅及淡化細紋功效，而可應用於皮膚外用組成物。

雖然本發明已以數個特定實施例揭露如上，但可對前述揭露內容進行各種潤飾、各種更動及替換，而且應可理解的是，在不脫離本發明之精神和範圍內，某些情況將採用本發明實施例之某些特徵但不對應使用其他特徵。因此，本發明的精神和權利要求範圍不應限於以上例示實施例所述。

101,103:折線

201,203,205,207,209,211,213,401,403,405,407,409,411,413:圓圈

為讓本發明之上述和其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之詳細說明如下： [圖1]是繪示根據本發明一實施例之皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同時間後的經表皮水分散失量的折線圖。 [圖2A]至[圖2G]分別是顯示根據本發明一實施例之不同受試者的皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同天數後或皮膚未塗抹仙人掌醱酵物的受試區域照片。 [圖3]是繪示根據本發明一實施例之受試者皮膚未塗抹仙人掌醱酵物及塗抹仙人掌醱酵物7天及14天後的平均紅血絲值之折線圖。 [圖4A]至[圖4G]分別是顯示根據本發明一實施例之不同受試者的皮膚塗抹仙人掌醱酵物不同天數後或皮膚未塗抹仙人掌醱酵物的受試區域照片。 [圖5]是繪示根據本發明一實施例之受試者皮膚未塗抹仙人掌醱酵物或塗抹仙人掌醱酵物7天及14天後的平均紋理值之折線圖。

無

Claims (10)

1. 一種仙人掌醱酵物，包含1.0mg/mL至5.0mg/mL的蛋白質、5.0mg/mL至15.0mg/mL的粗多醣、1.0mg/mL至5.0mg/mL的總黃酮及/或0.1mg/mL至0.8mg/mL的總酚，該仙人掌醱酵物的pH值為4.5至6.8，該仙人掌醱酵物的一黏度為10厘泊(cP)至15cP，該仙人掌醱酵物係對一醱酵基質進行一醱酵步驟而製得，該醱酵基質係由仙人掌莖及水所組成，該仙人掌莖係扭刺仙人掌(Opuntia streptacantha)的一肉質莖，該醱酵步驟係利用酵母菌於25℃之一溫度進行40小時，該酵母菌是釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)且寄存於臺灣生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center，BCRC)，寄存編號為BCRC 21815，且該仙人掌醱酵物具有保濕及/或袪紅的功效。
2. 如請求項1所述之仙人掌醱酵物，其中該醱酵基質之該仙人掌莖及該水的一重量體積比(g：mL)為10~25：100~300。
3. 如請求項1所述之仙人掌醱酵物，其中該酵母菌的一菌體濃度為10⁵菌落形成單位(colony forming unit，CFU)/mL至10⁸CFU/mL。
4. 如請求項1所述之仙人掌醱酵物，其中該醱酵基質之該仙人掌莖對該酵母菌之一重量體積比(g：mL)為2~20：5~10。
5. 如請求項1所述之仙人掌醱酵物，其中該仙人掌醱酵物係經該醱酵步驟及一固液分離步驟而製得。
6. 如請求項5所述之仙人掌醱酵物，其中該仙人掌醱酵物係經該醱酵步驟、該固液分離步驟及一滅菌步驟而製得。
7. 一種具保濕功效之皮膚外用組成物，其中該皮膚外用組成物之一有效成分係由如請求項1至請求項6任一項所述之一仙人掌醱酵物所組成。
8. 一種具祛紅功效之皮膚外用組成物，其中該皮膚外用組成物之一有效成分係由如請求項1至請求項6任一項所述之一仙人掌醱酵物所組成。
9. 如請求項8所述之具祛紅功效之皮膚外用組成物，其中該仙人掌醱酵物具有淡化細紋的功效。
10. 一種仙人掌醱酵物用於製備保濕、祛紅及淡化細紋功效之皮膚外用組成物的用途，其中該皮膚外用組 成物之一有效成分係由如請求項1至請求項6任一項所述之一仙人掌醱酵物所組成。

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