CN116392416A - 仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明是有关于一种仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途，其中仙人掌发酵物利用酵母菌对仙人掌茎进行发酵步骤而制得。仙人掌发酵物含有丰富的蛋白质、粗多糖、总黄酮及总酚，具保湿、祛红及/或淡化细纹等功效，可做为皮肤外用组成物的有效成分。

Description

仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外 用组成物及其用途

技术领域

本发明是有关于一种仙人掌发酵物，特别是一种仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途。

背景技术

仙人掌是石竹目仙人掌科(Cactaceae)植物的总称。目前已知的仙人掌约2000种，其中多数生长于沙漠或半沙漠等干燥、少雨、日照强的环境。为了避免水分散失、储存大量水分，仙人掌特化出针状叶及肉质茎等器官，且产生许多可有效保留水分及/或保护细胞不受强日照伤害的功能性成分(如：粘液及抗氧化物等)。

大体上，仙人掌的上述功能性成分可通过现有萃取法，例如热水萃取法或有机溶剂萃取法获得。但现有萃取法具有以下缺点，例如仙人掌所含的功能性成分在热水萃取后可能会被高温破坏。其次，仙人掌的肉质茎富含粘液，会降低有机溶剂萃取的效率。再者，以有机溶剂萃取后的萃取物则可能残留有机溶剂，后续应用于护肤产品时对人体可能有不良影响。

此外，仙人掌的上述功能性成分也可通过发酵法获得。举例而言，南美洲的传统饮品仙人掌酒是利用酵母菌对仙人掌果实发酵制得的发酵物，但对于仙人掌其他部位的发酵产物及其功效则少有研究。

发明内容

因此，本发明的一态样是提供一种仙人掌发酵物，其利用酵母菌对含有仙人掌茎的发酵基质进行发酵步骤后制得。仙人掌发酵物含有丰富的蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚，提供适合皮肤的酸碱值，且对皮肤具保湿、祛红及/或淡化细纹等功效。

本发明的又一态样是提供一种具保湿功效的皮肤外用组成物，其以仙人掌发酵物做为有效成分。

本发明的再一态样是提供一种具祛红功效的皮肤外用组成物，其以仙人掌发酵物做为有效成分。

本发明的另一态样是提供一种具淡化细纹功效的皮肤外用组成物，其以仙人掌发酵物做为有效成分。

本发明的又一态样是提供一种仙人掌发酵物用于制备保湿、祛红及淡化细纹的皮肤外用组成物的用途，其以仙人掌发酵物做为有效成分。

根据本发明的上述态样，提出一种仙人掌发酵物。此仙人掌发酵物可包含但不限于1.0mg/mL至5.0mg/mL的蛋白质、5.0mg/mL至15.0mg/mL的粗多糖、1.0mg/mL至5.0mg/mL的总黄酮及/或0.1mg/mL至0.8mg/mL的总酚。仙人掌发酵物的pH值可例如为4.5至6.8，且仙人掌发酵物的粘度可例如为10厘泊(cP)至15cP。仙人掌发酵物可例如为对发酵基质进行发酵步骤而制得。发酵基质可例如为由仙人掌茎及水组成，其中仙人掌茎可例如为扭刺仙人掌(Opuntia streptacantha)的肉质茎。发酵步骤可例如为利用酵母菌于20℃至50℃的温度进行10小时至50小时。酵母菌可例如为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)C-LYE-6，其于2021年03月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，且保藏编号为CGMCC No.22020。

根据本发明的一实施例，发酵基质的仙人掌茎及水的重量体积比(g:mL)可例如为10～25：100～300。根据本发明的一实施例，酵母菌的菌体浓度可例如为10⁵菌落形成单位(colony forming unit，CFU)/mL至10⁸CFU/mL。根据本发明的一实施例，发酵基质的仙人掌茎对酵母菌的重量体积比(g:mL)可例如为2～20：5～10。根据本发明的一实施例，仙人掌发酵物可例如为经发酵步骤及固液分离步骤而制得。根据本发明的一实施例，仙人掌发酵物可例如为经发酵步骤、固液分离步骤及灭菌步骤而制得。

根据本发明的另一态样，提出一种具保湿功效的皮肤外用组成物，包含仙人掌发酵物做为有效成分。根据本发明的再一态样，提出一种具祛红功效的皮肤外用组成物，包含仙人掌发酵物做为有效成分。根据本发明的又一态样，提出一种具淡化细纹功效的皮肤外用组成物，包含仙人掌发酵物做为有效成分。根据本发明的再一态样，提出一种仙人掌发酵物用于制备保湿、祛红及淡化细纹的皮肤外用组成物的用途，包含仙人掌发酵物做为有效成分。

应用本发明的仙人掌发酵物，其利用酵母菌对含仙人掌茎的发酵基质进行发酵步骤而制得，可包含但不限于丰富的蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚，且对皮肤具保湿、祛红及淡化细纹功效，而可做为皮肤外用组成物的有效成分。

附图说明

为让本发明的上述和其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附附图的详细说明如下：

图1是绘示根据本发明一实施例的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同时间后的经表皮水分散失量的折线图。

图2A至图2G分别是显示根据本发明一实施例的不同受试者的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同天数后或皮肤未涂抹仙人掌发酵物的受试区域照片。

图3是绘示根据本发明一实施例的受试者皮肤未涂抹仙人掌发酵物及涂抹仙人掌发酵物7天及14天后的平均红血丝值的折线图。

图4A至图4G分别是显示根据本发明一实施例的不同受试者的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同天数后或皮肤未涂抹仙人掌发酵物的受试区域照片。

图5是绘示根据本发明一实施例的受试者皮肤未涂抹仙人掌发酵物或涂抹仙人掌发酵物7天及14天后的平均纹理值的折线图。

具体实施方式

本发明所提到的单数形式“一”、“一个”和“所述”包含复数引用，除非上下文另有明确规定。数值范围(如10％～11％的A)若无特定说明都包含上、下限值(即10％≤A≤11％)；数值范围若未界定下限值(如低于0.2％的B，或0.2％以下的B)，则都指其下限值可能为0(即0％≤B≤0.2％)。上述用语是用以说明及理解本发明，而非用以限制本发明。

如前所述，本发明提供一种仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途，其利用酵母菌对含有仙人掌茎的发酵基质进行发酵步骤而获得，其中仙人掌发酵物含有丰富的蛋白质、粗多糖、总黄酮及总酚，对皮肤具保湿、祛红及淡化细纹等功效。

详细而言，上述发酵基质可例如为由仙人掌茎及水所组成。上述仙人掌茎可例如为扭刺仙人掌(Opuntia streptacantha)的肉质茎。在一实施例中，仙人掌茎可例如为新鲜的仙人掌肉质茎经干燥处理及研磨处理后所得的仙人掌茎粉末。上述干燥处理的方法不限，可利用现有方法进行，如：阴干法、热干燥法、冷冻干燥法、真空干燥法及喷雾干燥法等。在一具体例中，干燥方法可例如为在70℃至80℃进行烘干处理。上述研磨处理的方法不限，可例如利用任何现有方法进行，如：机械力研磨、滚筒式研磨及流动气体研磨等。在一实施例中，仙人掌茎粉末的粒径可例如为70目至90目，具体可例如为80目，以利后续操作(如：固液分离)的进行，并提供仙人掌茎粉末与酵母菌的发酵反应较佳的比表面积。

上述酵母菌的菌株不限，可例如为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)C-LYE-6，其于2021年03月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)(地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编号：100101)，且保藏编号为CGMCC No.22020。

在一实施例中，在进行发酵步骤前，可选择性先对酵母菌进行前处理，其中前处理可例如于20℃至50℃下，利用液态培养基进行第一液态培养，以使酵母菌活化，从而获得第一培养物。接着，将第一培养物涂布于固态培养基上，以于20℃至50℃下进行固态培养，从而获得单一菌落。然后，将单一菌落接种至液态培养基，并在20℃至50℃进行第二液态培养，以获得600nm下光密度(optical density，OD)为0.5至1.0的菌液，其中此菌液的酵母菌是在对数期，其菌液浓度相当于10⁵菌落形成单位(colony forming unit，CFU)/mL至10⁸CFU/mL。经由前处理，可获得活性佳的酵母菌，且可避免杂菌滋生。补充说明的是，上述液态培养基及固态培养基可例如为现有培养基。在一具体例中，液态培养基为马铃薯葡萄糖培养液(potato dextrose broth，PDB)。在一具体例中，固态培养基为马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar，PDA)。

在一实施例中，发酵步骤可例如于20℃至50℃下进行10小时至50小时。如果发酵步骤的温度是低于20℃，则酵母菌的活性不佳。如果发酵步骤是在高于50℃的温度下进行，则酵母菌可能会失去活性，甚至死亡。如果发酵步骤的时间是少于10小时，则制得的仙人掌发酵物所含的蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚将不足。相反地，如果发酵步骤的时间是多于50小时，则发酵环境将累积过多的酵母菌代谢物而酸化仙人掌发酵物，使得仙人掌发酵物对皮肤产生刺激性，且有杂菌生成的疑虑。在一具体例中，发酵步骤是在30℃下进行约48小时。上述酵母菌的活性是指酵母菌的生长活性及/或产生蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚的活性。如果酵母菌的活性不佳，则制得的仙人掌发酵物的蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚的含量将不足，导致仙人掌发酵物的保湿、祛红及淡化细纹的功效不佳。

发酵基质及酵母菌的比例可视需求调整。在一实施例中，发酵基质的仙人掌茎及水的重量体积比(g:mL)可例如为10～25：100～300，使制得的仙人掌发酵物的粘度维持在较佳的范围。在一具体例中，发酵基质可例如由20g的仙人掌茎粉末及300mL的水所组成。在一实施例中，发酵基质的仙人掌茎对酵母菌的重量体积比(g:mL)可例如为2～20：5～10，然以4：1为较佳。

在一实施例中，可选择性对仙人掌发酵物进行发酵步骤及固液分离步骤。上述固液分离步骤可例如以现有方法进行，如：过滤处理、离心处理及蒸馏处理等，以移除仙人掌发酵物的杂质。在一示例中，以4000rpm至12000rpm的转速进行离心处理达15分钟至30分钟。在一具体例中，离心是以4500rpm的转速进行20分钟。在一实施例中，可选择性对仙人掌发酵物进行发酵步骤、固液分离步骤及/或灭菌步骤。上述灭菌步骤可例如利用现有方法进行，如：压蒸汽处理、干热处理及紫外线处理等。在一具体例中，灭菌步骤是利用高压(1.0kg/cm2至1.5kg/cm²)高温(110℃至130℃)的水蒸气进行10分钟至20分钟。

利用上述方法制得的仙人掌发酵物为浅褐色的半透明液体，其中基于仙人掌发酵物为100重量百分比(wt％)，仙人掌发酵物含有0.9wt％至2.0wt％的可溶性固形物。在一实施例中，仙人掌发酵物可包含但不限于1.0mg/mL至5.0mg/mL的蛋白质、5.0mg/mL至15.0mg/mL的粗多糖、1.0mg/mL至5.0mg/mL的总黄酮及/或0.1mg/mL至0.8mg/mL的总酚。如果仙人掌发酵物的蛋白质、粗多糖、总黄酮及/或总酚的含量是小于上述范围中，则仙人掌发酵物对皮肤的保湿、祛红及淡化细纹功效不佳。然而，如果仙人掌发酵物的蛋白质、总黄酮及/或总酚的含量是大于上述范围，仙人掌发酵物容易引起皮肤过敏。如果仙人掌发酵物的粗多糖的含量是大于上述范围，则仙人掌发酵物易有沉淀物析出、触感粘腻、成膜性强且容易起屑等问题。

在一实施例中，上述仙人掌发酵物的pH值可例如为4.5至6.8，接近皮肤表面的pH值，故不会破坏皮肤表面的正常菌丛的菌相，也不会刺激皮肤。反之，如果仙人掌发酵物的pH值过高，可能降低皮脂的分泌，从而影响仙人掌发酵物的保湿功效。如果仙人掌发酵物的pH值过低，则可能造成皮肤角质层变薄，使皮肤变得更敏感及/或干燥，从而加重红血丝症状。

在一实施例中，仙人掌发酵物的粘度可例如为10cP至15cP。如果仙人掌发酵物的粘度是小于10cP，表示仙人掌发酵物的粗多糖含量不足，对皮肤的保湿功效不佳。但如果仙人掌发酵物的粘度是大于15cP，表示仙人掌发酵物的粗多糖含量过多，产生上述沉淀物析出、触感粘腻、成膜性强且容易起屑等问题。

经皮肤实验证实，仙人掌发酵物具保湿、祛红及淡化细纹的功效。前述“保湿”功效指减少皮肤的水分流失，可利用经表皮水分散失量评估。前述“祛红”功效是指改善皮肤表面红血丝症状，其中红血丝症状包含皮肤持续性的泛红(例如血红蛋白及/或表皮浮现微血管所致)，且红血丝症状的严重程度可由平均红血丝值量化。具体而言，利用不同波长的光照射皮肤的受试区域所得的影像，可分析血红素(hemoglobin)的吸收光谱，并以受试区域的红血素的浓度平均值定义平均红血丝值(任意单位)，其中平均红血丝值越大，表示受试区域的红血丝症状越严重。

上述“淡化细纹”功效是指改善皮肤粗糙的程度，使皮肤纹理越少、越短及/或越浅，其中皮肤粗糙的程度可由平均纹理值(任意单位)量化。具体而言，利用不同波长的光照射皮肤的受试区域所得的反射光谱，可建构受试区域的皮肤表面形貌(surfacetopography)的立体模型，并以受试区域的皮肤纹理的数量、深浅及/或长度等数据做为参数定义受试区域的皮肤的平均纹理值(任意单位)，其中平均纹理值越大，表示受试区域的皮肤纹理越多、越长及/或越深，即皮肤越粗糙。

其次，经皮肤斑贴实验证实，仙人掌发酵物对皮肤具低致敏性。上述“低致敏性”是指仙人掌发酵物涂抹皮肤经一段时间后，不引起皮肤的红斑、浸润、水肿、丘疹及疱疹等发炎及/或过敏等症状。

由此可知，仙人掌的肉质茎以酵母菌进行发酵步骤后，获得的仙人掌发酵物对皮肤具保湿、祛红及淡化细纹功效，意味着发酵步骤可自仙人掌的肉质茎保留及/或产生皮肤可吸收并利用的成分。值得注意的是，上述制造步骤排除使用有机溶剂，因此没有有机溶剂残留的疑虑。其次，仙人掌发酵物不需经长时间(如：半小时以上)的高温(如：100℃以上)处理，可避免上述皮肤可吸收并利用的成分遭高温破坏。

在一实施例中，仙人掌发酵物可做为具保湿、祛红及/或淡化细纹功效的皮肤外用组成物的有效成分。在一实施例中，上述皮肤外用组成物的剂型可例如为溶液、乳液、乳霜、悬浮液、粉剂、凝胶或浴盐。在一实施例中，上述皮肤外用组成物可例如乳液、化妆水、精华液、隔离霜、洗面奶、面膜或防晒乳，惟本发明不限于此处所举。

以下利用数个实施例以说明本发明的应用，然其并非用以限定本发明，本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作各种的更动与润饰。

实施例一、制备仙人掌发酵物

首先，酿酒酵母C-LYE-6(保藏编号为CGMCC No.22020)于37℃在PDB中进行第一液态培养，以获得第一菌液。接着，将第一菌液涂布于PDA上进行培养，以获得单一菌落。然后，将单一菌落接种于PDB中，并于37℃进行第二液态培养，以获得酿酒酵母的第二菌液，其中第二菌液的600nm下光密度为0.5至1.0，相当于含有10⁵CFU/mL至10⁸CFU/mL的酿酒酵母的活菌。补充说明的是，酿酒酵母C-LYE-6的菌落为点状，表面边缘光滑，且颜色呈乳白色而不透明。上述酿酒酵母C-LYE-6以是细胞形式单独存在。

将新鲜的扭刺仙人掌的肉质茎于75℃±5℃烘干后，研磨成80目的仙人掌茎粉末。接着，将20g的仙人掌茎粉末及300mL的水混合成发酵基质后，加入5mL的上述酿酒酵母的第二菌液，再于30℃下进行发酵步骤48小时，从而获得仙人掌发酵物。接下来，以121℃、1.1kg/cm²的水蒸气对仙人掌发酵物进行灭菌达15分钟，再以4500rpm的离心速率进行离心20分钟，确保仙人掌发酵物无致病菌检出，且活菌数小于50CFU/mL，符合化妆品对于生物安全性的规定。

上述仙人掌发酵物为浅褐色的半透明液体。利用现有方法(如：利用旋转粘度测定计及酸碱度计定法)测量上述仙人掌发酵物的粘度及pH值，仙人掌发酵物的粘度为10cP至15cP，且，仙人掌发酵物的pH值为4.5至6.8。其次，基于上述仙人掌发酵物为100wt％，仙人掌发酵物包含1.5wt％的可溶性固形物。再者，仙人掌发酵物含有1.0mg/mL至5.0mg/mL的蛋白质、5.0mg/mL至15.0mg/mL的粗多糖、1.0mg/mL至5.0mg/mL的总黄酮及0.1mg/mL至0.8mg/mL的总酚。值得说明的是，不同株仙人掌具个体差异，因此不同批次的仙人掌发酵物的粘度、pH值和蛋白质、粗多糖、总黄酮及总酚的含量略有不同，但是在上述范围内。

实施例二、评估仙人掌发酵物的保湿功效

首先，在受试者(3人)的左右臂上分别设定3cm×3cm的受试区域及对照区域，并利用市售经表皮水分散失检测仪器(型号：Tewameter TM300；制造商：德国Courage+Khazakaelectronic GmbH公司)检测受试区域及对照区域的每单位时间每单位面积的经表皮水分散失量(trans-epidermal water loss，TEWL，单位为g/小时×m²)。接着，将仙人掌发酵物单次涂抹于受试区域的皮肤上(使用量为2.0±1.0mg/cm²)，但不在对照区域的皮肤进行任何处理。经2小时、4小时及8小时后，再次检测对照区域及受试区域的经表皮水分散失量。

图1是绘示根据本发明一实施例的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同时间后的经表皮水分散失量的折线图，其中横轴表示检测的时间，纵轴表示经表皮水分散失量(单位为g/小时×m²)，且折线101及折线103分别表示受试区域及对照区域。如图1所示，受试区域及对照区域的皮肤未涂抹仙人掌发酵物的经表皮水分散失量在统计上没有显著差异(分别为5.53g/小时×m²及5.3g/m²)，但在涂抹皮肤仙人掌发酵物2小时、4小时及8小时后，受试区域的经表皮水分散失量(折线101)都低于对照区域的经表皮水分散失量(折线103)。皮肤涂抹仙人掌发酵物2小时后，受试区域的经表皮水分散失量为6.60g/小时×m²，且对照区域的经表皮水分散失量为7.03g/小时×m²。皮肤涂抹仙人掌发酵物4小时后，受试区域的经表皮水分散失量为5.23g/小时×m²，且对照区域的经表皮水分散失量为7.00g/小时×m²。皮肤涂抹仙人掌发酵物8小时后，受试区域的经表皮水分散失量为4.30g/小时×m²，且对照区域的经表皮水分散失量为5.33g/小时×m²。由上述结果可知，皮肤涂抹仙人掌发酵物2小时至8小时后，经表皮水分散失量下降，证明仙人掌发酵物对皮肤具保湿的功效。

特别说明的是，经表皮水分散失量受到天气、温湿度及人体活动等影响，因此相同区域的皮肤的每日经表皮水分散失量的变异程度较大，但由上述结果可知，相较于仙人掌发酵物未涂抹皮肤的对照区域，仙人掌发酵物涂抹皮肤后的受试区域的经表皮水分散失量较低，即可证明仙人掌发酵物对皮肤具保湿的功效。

实施例三、评估仙人掌发酵物的祛红功效

在受试者具有红血丝症状的患部皮肤上设定受试区域(3cm×3cm)，并利用市售皮肤光学检测仪器(品名：智慧3D肌肤检测仪Antera 3D；制造商：都柏林爱尔兰Miravex)对受试区域的皮肤表面进行影像分析，以获得平均红血丝值。接着，将仙人掌发酵物单次涂抹于受试区域的皮肤上(使用量为2.0±1.0mg/cm²)，经7天及14天后，再次检测受试区域的皮肤的平均红血丝值。

图2A至图2G是分别显示根据本发明一实施例的不同受试者的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同天数后或皮肤未涂抹仙人掌发酵物的受试区域照片，其中圆圈201、圆圈203、圆圈205、圆圈207、圆圈209、圆圈211及圆圈213代表实际测量区域。

图2A及图2B分别为受试者1皮肤在涂抹仙人掌发酵物14天后(图2A)及未涂抹仙人掌发酵物(图2B)的受试区域照片，其中图2A的圆圈201内皮肤的平均红血丝值为1.216，且图2B的圆圈203内皮肤的平均红血丝值为1.367。图2C及图2D分别为受试者2皮肤在涂抹仙人掌发酵物14天后(图2C)及未涂抹仙人掌发酵物(图2D)的受试区域的照片，其中图2C的圆圈205内皮肤的平均红血丝值为1.105，且图2D的圆圈207内皮肤的平均红血丝值为1.275。图2E至图2G分别为受试者3皮肤在涂抹仙人掌发酵物7天(图2E)、涂抹仙人掌发酵物14天(图2F)及未涂抹仙人掌发酵物(图2G)的受试区域的照片，其中图2E的圆圈209内皮肤的平均红血丝值为1.165，图2F的圆圈211内皮肤的平均红血丝值为1.012，且图2G的圆圈213内皮肤的平均红血丝值为1.253。

图3是绘示根据本发明一实施例的受试者皮肤未涂抹仙人掌发酵物及涂抹仙人掌发酵物7天及14天后的平均红血丝值的折线图，其中横轴由左至右分别表示皮肤未涂抹、涂抹后7天及14天，且纵轴表示平均红血丝值。如图3所示，皮肤涂抹仙人掌发酵物14天后，受试区域的平均红血丝值显著下降14.4％(统计方法：成对样本t检定，paired t Test，p<0.05)，证实仙人掌发酵物可有效改善红血丝症状。换言之，仙人掌发酵物具祛红的功效。

实施例四、评估仙人掌发酵物的淡化细纹功效

在受试者具有细纹的患部皮肤上设定受试区域(3cm×3cm)，并以上述市售皮肤光学检测仪器检测受试区域中患部皮肤的平均纹理值。接着，将仙人掌发酵物单次涂抹于受试区域的皮肤上(使用量为2.0±1.0mg/cm2)，经7天及14天后，再次检测此受试区域的皮肤的平均纹理值。

图4A至图4G是分别显示根据本发明一实施例的不同受试者的皮肤涂抹仙人掌发酵物不同天数后或皮肤未涂抹仙人掌发酵物的受试区域照片，其中圆圈401、圆圈403、圆圈405、圆圈407、圆圈409、圆圈411及圆圈413代表实际测量区域。

图4A及图4B分别为受试者4的皮肤在仙人掌发酵物涂抹14天(图4A)后及皮肤未涂抹仙人掌发酵物(图4B)的受试区域照片，其中图4A的圆圈401内皮肤的平均纹理值为1.930，且图4B的圆圈403内皮肤的平均纹理值为2.194。图4C及图4D分别为受试者5的皮肤在仙人掌发酵物涂抹14天(图4C)后及皮肤未涂抹仙人掌发酵物(图4D)的受试区域照片，其中图4C的圆圈405内皮肤的平均纹理值为1.025，且图4D的圆圈407内皮肤的平均纹理值为1.859。图4E至图4G分别为受试者6的皮肤在仙人掌发酵物涂抹7天(图4E)、14天(图4F)后及皮肤未涂抹仙人掌发酵物(图4G)的受试区域照片，其中图4E的圆圈409内皮肤的平均纹理值为3.614，图4F的圆圈411内皮肤的平均纹理值为3.556，且图4G的圆圈413内皮肤的平均纹理值为3.843。由此可知，仙人掌发酵物涂抹皮肤7天及14天后，可淡化皮肤的细纹。

图5是绘示根据本发明一实施例的受试者皮肤未涂抹仙人掌发酵物或涂抹仙人掌发酵物7天及14天后的平均纹理值的折线图，其中横轴由左至右分别表示皮肤未涂抹、涂抹7天及14天后，且纵轴表示平均纹理值。如图5所示，仙人掌发酵物涂抹皮肤14天后，受试区域的平均纹理值下降17.5％，证明仙人掌发酵物于皮肤可淡化细纹。

实施例五、评估仙人掌发酵物的低致敏性

在皮肤上进行密封式贴片试验(closed patch test)，评估仙人掌发酵物的低致敏性。选择适合的受试者30人，其中受试者年龄是在18岁至60岁间随机选择。首先，利用无刺激性的胶带于每位受试者的背部固定2个斑试器达24小时，使斑试器的鳍状室(fin-chamber)中的滤纸片贴附于受试者的背部皮肤上，期间不移除斑试器，也避免斑试器碰到水。以滤纸片含有0.20mL至0.25mL的仙人掌发酵物做为实验组，以滤纸片含有0.20mL至0.25mL的蒸馏水做为控制组。经24小时后，取下斑试器，并分别于0.5小时、24小时及48小时后观察斑试器下的皮肤(以下称为受试区域)及受试区域周围的皮肤是否出现红斑、浸润、水肿、丘疹及/或疱疹等症状。

将结果记录于表1中，其中图号“-”表示皮肤为阴性，即皮肤没有出现红斑、浸润、水肿、丘疹及/或疱疹等症状，“±”表示可疑反应，即受试区域的皮肤出现轻微的红斑，“+”表示弱阳性反应(也称为红斑反应)，即受试区域的皮肤出现红斑、浸润、水肿及/或丘疹，“++”表示强阳性反应(也称为疱疹反应)，即受试区域的皮肤出现红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹，且受试区域周围的皮肤也出现上述疱疹反应的症状，“+++”表示皮肤出现极强阳性反应(也称为融合性疱疹反应)，即受试区域的皮肤出现明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹，且受试区域周围的皮肤也出现上述融合性疱疹反应(n＝30)。

表1

如表1所示，在取下斑试器后0.5小时、24小时或48小时后，受试者在受试区域及其周围的皮肤都呈阴性，表示无红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹及融合性疱疹等反应，显示仙人掌发酵物对皮肤具低致敏性。

综言之，上述特定品种及特定部位的仙人掌、特定菌株的酵母菌、特定的混合比例、特定的工艺或特定的评估方法仅用于例示说明本发明的仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途。然而，本领域技术人员应可理解，在不脱离本发明的精神及范围内，其他品种及其他部位的仙人掌、其他菌株的酵母菌、其他混合比例以及其他的工艺或其他的评估方法也可用于仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途，并不限于上述。举例而言，在不影响仙人掌发酵物的保湿、祛红及淡化细纹功效的前提下，也可使用其他品种或其他部位的仙人掌、其他的酵母菌菌株或其他混合比例，以获得仙人掌发酵物。

由上述实施例可知，本发明仙人掌发酵物、含此的具保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物及其用途，其优点在使用酵母菌对仙人掌肉质茎进行发酵步骤，不仅可保留及/或产生皮肤可吸收且对皮肤有益的成分，且仙人掌发酵物对皮肤具保湿、祛红及淡化细纹功效，而可应用于皮肤外用组成物。

虽然本发明已以数个特定实施例揭露如上，但可对前述揭露内容进行各种润饰、各种更动及替换，而且应可理解的是，在不脱离本发明的精神和范围内，某些情况将采用本发明实施例的某些特征但不对应使用其他特征。因此，本发明的精神和权利要求书不应限于以上例示实施例所述。

【符号说明】

101,103:折线

201,203,205,207,209,211,213,401,403,405,407,409,411,413:圆圈。

【生物材料寄存】

酿酒酵母C-LYE-6是于2021年03月16日寄存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，且寄存编号为CGMCC No.22020。

Claims (10)

1.一种仙人掌发酵物，其特征在于，包含1.0mg/mL至5.0mg/mL的蛋白质、5.0mg/mL至15.0mg/mL的粗多糖、1.0mg/mL至5.0mg/mL的总黄酮及/或0.1mg/mL至0.8mg/mL的总酚，该仙人掌发酵物的pH值为4.5至6.8，该仙人掌发酵物的粘度为10厘泊(cP)至15cP，该仙人掌发酵物对发酵基质进行发酵步骤而制得，该发酵基质由仙人掌茎及水所组成，该仙人掌茎为扭刺仙人掌(Opuntia streptacantha)的肉质茎，该发酵步骤为利用酵母菌于20℃至50℃的温度进行10小时至50小时，且该酵母菌是于2021年03月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，且保藏编号为CGMCC No.22020的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)C-LYE-6。

2.根据权利要求1所述的仙人掌发酵物，其特征在于，其中该发酵基质的该仙人掌茎及该水的重量体积比(g:mL)为10～25：100～300。

3.根据权利要求1所述的仙人掌发酵物，其特征在于，其中该酵母菌的菌体浓度为10⁵CFU/mL至10⁸CFU/mL。

4.根据权利要求1所述的仙人掌发酵物，其特征在于，其中该发酵基质的该仙人掌茎对该酵母菌的重量体积比(g:mL)为2～20：5～10。

5.根据权利要求1所述的仙人掌发酵物，其特征在于，其中该仙人掌发酵物经该发酵步骤及固液分离步骤而制得。

6.根据权利要求5所述的仙人掌发酵物，其特征在于，其中该仙人掌发酵物经该发酵步骤、该固液分离步骤及灭菌步骤而制得。

7.一种具保湿功效的皮肤外用组成物，其特征在于，包含根据权利要求1至权利要求6任一项所述的仙人掌发酵物做为有效成分。

8.一种具祛红功效的皮肤外用组成物，其特征在于，包含根据权利要求1至权利要求6任一项所述的仙人掌发酵物做为有效成分。

9.一种具淡化细纹功效的皮肤外用组成物，其特征在于，包含根据权利要求1至权利要求6任一项所述的仙人掌发酵物做为有效成分。

10.一种仙人掌发酵物用于制备保湿、祛红及淡化细纹功效的皮肤外用组成物的用途，其特征在于，其中该皮肤外用组成物包含根据权利要求1至权利要求6任一项所述的仙人掌发酵物做为有效成分。

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