TWI787857B - 吡唑并[1,5-a]吡啶類化合物及其製備方法和應用 - Google Patents

吡唑并[1,5-a]吡啶類化合物及其製備方法和應用 Download PDF

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Abstract

本發明涉及一種吡唑并[1,5-a]吡啶類化合物及其製備方法和應用，包括所述化合物作為活性成分的藥物組合物或其藥學上可接受的鹽。本發明進一步涉及式(I)化合物在用於治療和預防可用野生型、基因融合型及突變型(包括但不限於V804和G810)RET激酶抑制劑治療的疾病，包括由RET激酶媒介的疾病或病症。

Description

吡唑并[1,5-a]吡啶類化合物及其製備方法和應用
本發明屬於藥物領域，具體涉及吡唑并[1,5-a]吡啶類化合物及其製備方法和應用。
轉染重排(RET)激酶是一種單次跨膜的受體酪氨酸激酶，對腎臟、腸神經系統的發育，神經、內分泌、造血、雄性生殖系統等的穩態維持具有重要作用。RET的結構分為胞外區、跨膜區和胞內激酶區。其配體神經營養因子(GDNF)家族不直接與RET結合，而是先與GDNF家族受體α形成複合物GFL-GFRα，繼而催化RET同源二聚，使RET在胞內區域自磷酸化，繼而招募銜接蛋白和通路蛋白來激活包括MAPK、PI3K、JAK-STAT、PKA和PKC在內的多種信號途徑，從而參與細胞增殖、神經傳導、細胞遷移和細胞分化(Alexander Drilon,Nature Reviews Clinical Oncology,2018,15：151-167)。
編碼RET蛋白的基因位於人類10號染色體長臂，其異常(基因融合、突變等)可引起多種疾病，包括甲狀腺乳頭狀癌(PTC)、甲狀腺髓樣癌(MTC)、先天性巨結腸、肺腺癌，腸易激症候群等。
RET基因的染色體重排可能導致RET基因斷裂，斷裂後RET基因的3'端可以與KIF5B、TRIM33、CCDC6或NCOA4等不同的基因發生融合，形成融合基因，表達的融合蛋白表現為持續激活，驅動腫瘤的發生。據報導，RET基因融合存在於約10-20%的PTC患者中，主要為CCDC6-RET以及NCOA4-RET融合。約1%~2%的肺腺癌患者的體內存在RET融合基因，主要為KIF5B-RET、CCDC6-RET、TRIM33-RET、NCOA4-RET這四種，其中KIF5B-RET最為常見(Rosell R,and Karachaliou N，Lancet Oncol.,2016,17：1623-1625)。
點突變導致的RET基因激活突變可引起多發性內分泌腺瘤2型(MEN2)的發生，表現為甲狀腺、腎上腺髓質和甲狀旁腺內神經內分泌細胞的增生或腫瘤(Mulligan LM,Nat Rev Cancer.,2014,14：173-86)。約60%的MTC患者存在RET突變。
因此，可抑制基因融合或突變RET激酶的化合物對於RET驅動腫瘤的預防和治療是非常有用的。
數個多靶點激酶抑制劑對RET有一定的抑制活性，如卡博替尼(Cabozantinib)、凡德他尼(Vandetanib)、樂伐替尼 (Lenvatini)和普納替尼(Ponatinib)，但均為非特異性的RET抑制劑。此外，由於RET與VEGFR2的激酶結構域存在大量的同源，因此這些化合物除了抑制RET，還對於包括VEGFR2在內的多個靶點都有一定抑制作用，這導致脫靶毒性風險高，難以發揮令人滿意的療效。
目前已有兩個RET靶向藥上市，分別是Loxo Oncology公司的LOXO-292(selpercatinib/LY3527723)以及Blurprint公司的BLU-667(pralsetinib/Gavreto)。這兩個靶向藥對於RET融合或突變陽性的患者表現出理想的療效及安全性，特別是RET融合陽性的非小細胞肺癌(non small cell lung cancer，NSCLC)和RET突變陽性的髓樣甲狀腺癌(medullary thyroid cancer，MTC)。
在使用selpercatinib治療RET融合陽性的NSCLC和RET突變陽性的MTC的過程中部分患者出現耐藥現象，通過迴圈腫瘤DNA(circulating tumor DNA，ctDNA)檢測發現該部分患者RET出現了RET G810R、G810S和G810C的溶劑域前沿突變。在selpercratinib的1期和2期臨床試驗中，一名CCDC6-RET融合陽性NSCLC患者的腫瘤組織和另一名RET融合陽性NSCLC患者的血漿中發現了RET G810的獲得性突變。臨床前研究報告了對selpercatinib獲得性耐藥的CCDC6-RET患者源性異種移植 物模型中存在RET G810R突變。結構模型預測G810的突變將在空間上阻礙selpercatinib的結合，體外檢測證實了抗RET的多激酶抑制劑和選擇性RET抑制劑對G810突變的RET喪失活性(Solomon BJ,Tan L,Lin JJ et al.,J Thorac Oncol.2020 Apr；15(4)：541-549.)。
因此，本領域迫切需要開發高特異性的、高效抑制野生型、融合性及突變型(包括但不限於V804和G810)RET激酶的藥物。
本發明的目的是提供一類新型的具有RET激酶抑制活性和/或具有良好藥效學/藥代動力學性能的化合物及其用途。
本發明的第一方面，提供了一種式I化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥；
Figure 110120472-A0305-02-0005-1
其中， A選自下組：-CN、-COOR1(
Figure 110120472-A0305-02-0006-2
)、-CONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0006-3
)、-NHCOR4(
Figure 110120472-A0305-02-0006-4
)或-NHCONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0006-5
)；B選自下組：R7、-O-(L1)m1-R8、-OCOR9(
Figure 110120472-A0305-02-0006-6
)、-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0006-7
)、-COOR12(
Figure 110120472-A0305-02-0006-8
)、-CONR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0006-9
)、-(L2)m2-R12、-(L2)m2-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0006-10
)；其中，各L1獨立地選自下組：-CRfRg-(
Figure 110120472-A0305-02-0006-11
)、-CO-；各L2獨立地選自下組：-CRfRg(
Figure 110120472-A0305-02-0006-12
)、-CO-；X1和X2各自獨立地為CR或N；其中，R選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、H、鹵素或氰基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；Z選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基； R1、R2、R3和R4各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或5-10元雜芳基；或者R2和R3與其連接的N原子一起構成取代或未取代的3-12元雜環基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R7為取代或未取代的5-10雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R8選自取代或未取代的下組基團：-C1-C6烷基-E、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12螺雙環或5-12元螺雜雙環，E選自下組：-CN、-COOR1(
Figure 110120472-A0305-02-0007-13
)、-OCOR1(
Figure 110120472-A0305-02-0007-14
)、-CONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0007-15
)、-NHCOR4(
Figure 110120472-A0305-02-0007-16
)或-NHCONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0007-17
)；其中，所述取代是指被1、2、3或4個選自下組的基團取代：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基； R9選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0008-18
)、-(L3)m3-(3-8元環雜烷基)、-(L3)m3-(C5-C10芳基)、-(L3)m3-(5-10元雜芳基)，其中，各L3獨立地選自下組：-CRfRg-(
Figure 110120472-A0305-02-0008-19
)、-NRh-(
Figure 110120472-A0305-02-0008-20
)；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C6烷基、-(L2)m2-NQ1Q2(
Figure 110120472-A0305-02-0008-21
)、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；或者，R10和R11與相連的N一起構成3-12元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、取代或未取代的C1-C6烷基，或者Q1和Q2與相連的N構成一個3-10元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；各R12獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團：C1-C6烷基、 氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；Rf和Rg各自獨立地選自下組：H、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、OH、-NH2、C3-C6環烷基；Rh獨立地選自下組：H、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C3-C6環烷基；n為0、1、2；m1為1、2、3、4、5或6；m2為1、2、3、4、5或6；m3為0、1或2；限定條件為，當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0009-22
)、-NHCOR4(
Figure 110120472-A0305-02-0009-23
)、-NHCONR2R3(
Figure 110120472-A0305-02-0009-24
)。
在另一優選例中，R12獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C3烷基、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基。
在另一優選例中，所述的“-(L2)m2-”為-CH2-；其中，L2、m2的定義如上所述。
在另一優選例中，B選自下組：-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0010-25
)或-(L2)m2-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0010-26
)；其中，R10、R11、L2和m2的定義如上所述。
在另一優選例中，B選自下組：-NH-(C1-C8烷基)或-NH-(C3-C8環烷基)。
在另一優選例中，B選自下組：-O-(L1)m1-R8或-OCOR9(
Figure 110120472-A0305-02-0010-27
)，其中，L1、m1、R8和R9的定義如上所述。
在另一優選例中，m1為1、2、3或4。
在另一優選例中，B選自下組：-O-(CH2)m1-R8，其中，m1為1、2、或3；R8的定義如上所述。
在另一優選例中，B選自下組：-COOR12、-CONR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0010-28
)、-(L2)m2-R12，其中，R10、R11、R12、L2和m2的定義如上所述。
在另一優選例中，B選自下組：-O-(L1)m1-R8、-OCOR9(
Figure 110120472-A0305-02-0010-29
)、-NR10R11(
Figure 110120472-A0305-02-0010-30
)；其中，L1、m1、R8、R9、R10和R11的定義如上所述。
在另一優選例中，B為-NR10R11，其中，R10、R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C3烷基、-(CH2)2-NQ1Q2(
Figure 110120472-A0305-02-0011-31
)、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；或者，R10和R11與相連的N一起構成3-12元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；Q1、Q2各自獨立選自：H、C1-C3烷基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑。
在另一優選例中，當n為0時，所述的
Figure 110120472-A0305-02-0011-32
為
Figure 110120472-A0305-02-0011-33
。
在另一優選例中，R7為
Figure 110120472-A0305-02-0011-34
。
在另一優選例中，式I化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥具有式I'所述的結構：
Figure 110120472-A0305-02-0011-35
 其中，A、B、X1、X2和n的定義如上所述。
在另一優選例中，A選自下組：-CN、-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4或-NHCONR2R3；其中，R1、R2和R3各自獨立地選自下組：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或者5-10元雜芳基；R4選自取代或未取代的下組基團：C1-C3烷基、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、C2-C4烯基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；其中，所述取代是指被C1-C3烷基取代。
在另一優選例中，B選自下組：R7、-O-(L1)m1-R8、-NR10R11、-CONR10R11、-(L2)m2-R12、-(L2)m2-NR10R11；限定條件為，當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4、-NHCONR2R3；其中，R1、R2、R3、R4、R7、L1、L2、m1、m2、R8、R10、R11和R12的定義如上所述。
在另一優選例中，-(L1)m1-選自下組：-(CH2)2-、-CO-、-CO-NH-。
在另一優選例中，-(L2)m2-選自下組：-(CH2)2-、-CO-、-O-CO-。
在另一優選例中，R8選自取代或未取代的下組基團：-C1-C6烷基-E、5-12元稠合雜雙環或5-12元螺雜雙環，其中，E選自下組：-CN、-COOR1、-OCOR1、-CONR2R3、-NHCOR4 或-NHCONR2R3；所述雜雙環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子作為環原子，雜雙環中的N原子與L1部分相連；其中，所述取代是指被1、2、3或4個選自下組的基團取代：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基；R1、R2、R3和R4的定義如上所述。
在另一優選例中，R1、R2、R3和R4各自獨立地選自下組：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或者5-10元雜芳基。
在另一優選例中，R8選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0013-36
 。
在另一優選例中，R9選自下組：C1-C3烷氧基、C1-C3鹵烷氧基、C1-C3烷胺基、
Figure 110120472-A0305-02-0014-37
或
Figure 110120472-A0305-02-0014-38
，其中，G為C1-C6烷基。
在另一優選例中，R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C3烷基、-(CH2)2-NQ1Q2、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；或者，R10和R11與相連的N一起構成3-8元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、C1-C3烷基；或者Q1和Q2與相連的N構成一個3-10元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基。
在另一優選例中，B選自下組：R7、-O-(CH2)m-R8、-OCOR9、-NR10R11、-COOR12、-CONR10R11、-CH2R12、-CH2NR10R11；其中，R7選自取代或未取代的下組基團：C5-C10雜芳基；其中，所述取代是指C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R8選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0015-39
 ； R9選自下組：C1-C3烷氧基、C1-C3鹵烷氧基、C1-C3烷胺基、
Figure 110120472-A0305-02-0015-40
或
Figure 110120472-A0305-02-0015-41
，其中，G為C1-C6烷基；R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C3烷基、-(CH2)2-NQ1Q2、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、C1-C3烷基；所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基；R12各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C3烷基、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻 吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基；m為1、2、3；限定條件：當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4、-NHCONR2R3。
在另一優選例中，B為實施例中製備的各具體化合物中的對應基團。
在另一優選例中，A為實施例中製備的各具體化合物中的對應基團。
在另一優選例中，所述化合物具有式II所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0016-42
式中，Rm和Rn各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C3烷基；其中，所述取代是指被1-2個鹵素原子取代；X1和X2各自獨立地為CH或N。
在另一優選例中，Rm和Rn各自獨立地選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
在另一優選例中，所述化合物具有式III所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0017-43
Rm選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
在另一優選例中，Rn選自：H或甲基；Rm選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
在另一優選例中，所述化合物具有式IV所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0017-44
式中，RA和RB各自獨立地選自：H、F、甲基。
在另一優選例中，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥，選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0018-45
Figure 110120472-A0305-02-0019-46
Figure 110120472-A0305-02-0020-47
在另一優選例中，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥，選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0020-48
Figure 110120472-A0305-02-0021-49
 。
在另一優選例中，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥，選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0021-50
 。
在另一優選例中，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥，所述化合物選自下組：
Figure 110120472-A0305-02-0022-51
在另一優選例中，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥，其中，所述的藥學上可接受的鹽為醋酸鹽、己二酸鹽、藻朊酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二甘醇酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十二烷酸鹽。
本發明第二方面，提供一種藥物組合物，其包含第一方面所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥；和藥用載體或稀釋劑。
在另一優選例中，所述藥物組合物還包括第二癌症治療劑。
在另一優選例中，所述的第二癌症治療劑包括放射劑、細胞毒試劑、激酶抑制劑、免疫靶向抑制劑和血管生成抑制劑。
在另一優選例中，所述第二癌症治療劑是選自下組的一種或多種：
PD-1抑制劑(如納武單抗、派姆單抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述藥物的生物類似藥等)、PD-L1抑制劑(如德瓦魯單抗、阿特珠單抗、CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F 520、GR1405、MSB2311或上述藥物的生物類似藥等)、CD20抗體(如利妥昔單抗、奧濱尤妥珠單抗、奧法木單抗、托西莫單抗、替伊莫單抗等)、CD47抗體(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制劑(如色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、蘿拉替尼、奧卡替 尼)、PI3K抑制劑(如艾代拉裡斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制劑(如依魯替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制劑(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、達克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制劑(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多納非尼等)、HDAC抑制劑(如Givinostat、Droxinostat、恩替諾特、達西司特、泰克地那林等)、CDK抑制劑(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制劑(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制劑(如MK-2206、Ipatasertib、Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制劑(如Vistusertib等)、SHP2抑制劑(如RMC-4630、JAB-3068、TNO155等)、IGF-1R抑制劑(如Ceritinib、奧卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其組合。
本發明第三方面，提供一種第一方面所述的化合物或第二方面所述的藥物組合物在製備用於抑制細胞或受試者中的RET激酶活性的藥物中的用途。
在另一優選例中，所述的RET激酶為野生型、基因融合型及突變型。
在另一優選例中，所述的RET激酶為突變型，優選地為M918T、V804M、V804L、G810S和G810R。
在另一優選例中，所述藥物用於治療與RET相關疾病與下述失調：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表達或活性或位準失調。
在另一優選例中，所述疾病選自下組：眼疾疾病、風濕性關節炎、肺纖維化、肝纖維化、腫瘤，所述腫瘤包括：膀胱癌、卵巢癌、腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、結腸癌、肺癌、骨癌、腦癌、神經細胞瘤、直腸癌、結腸癌、家族性腺瘤性息肉性癌、遺傳性非息肉性結直腸癌、食管癌、唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲狀腺髓樣癌、乳頭狀甲狀腺癌、腎癌、腎實質癌、卵巢癌、宮頸癌、子宮體癌、子宮內膜癌、絨毛膜癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒細胞白血病、肝細胞癌、膽囊癌、支氣管癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多發性骨髓瘤。
本發明第四方面，提供了一種治療RET相關疾病的方法，所述方法包括給予被鑒定或診斷為具有RET相關疾病的受試者治療有效量的如第一方面所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，或如第二方面所述的藥物組合物。
本發明第五方面，本發明提供了一種用於抑制細胞或受試者中的RET激酶活性的方法，所述方法包括使所述細胞接觸或向所述受試者施用如上所述的化合物或藥物組合物的步驟。
在另一優選例中，所述細胞為哺乳動物細胞。
在另一優選例中，所述受試者為哺乳動物，優選為人。
本發明第六方面，提供一種式II化合物的製備方法，包括如下步驟：
Figure 110120472-A0305-02-0026-52
(i-1)在惰性溶劑中，鹼性條件下(例如，Cs2CO3等)，化合物3-1和羥基保護試劑(例如，苄基溴)反應，得到化合物3-2；(i-2)在惰性溶劑中，鹼性條件(例如，K3PO4)和催化劑(例如，碘化亞銅和L-脯氨酸)存在下，化合物3-2與胺化合物NHRmRn反應，得到化合物3-3；(i-3)在惰性溶劑中，酸性條件(例如，HBr)下，化合物3-3脫保護，得到化合物3-4； (i-4)在惰性溶劑中，化合物3-4與PhNTf2反應，得到化合物3-5；(i-5)在惰性溶劑中，催化劑存在(例如，鈀催化劑和鹵化亞銅)下，化合物3-5與化合物3-6反應，得到式II化合物；式中，Rm、Rn的定義如上所述。
在另一優選例中，所述式II化合物的製備還包括如下步驟：
Figure 110120472-A0305-02-0027-53
(i')在惰性溶劑(例如DMF)中，鹼性條件下(例如，K2CO3、Na2CO3、Cs2CO3等)，化合物3'-1和化合物3'-2反應，得到化合物3'-3；(ii')在惰性溶劑(如二氧六環)中，在酸性條件(例如，三氟乙酸、HCl)下，化合物3'-3脫胺保護得到化合物3'-4；(iii')在惰性溶劑(如DCM)中，還原劑(例如，NaBH(OAc)3)存在下，化合物3'-4與化合物3'-5進行還原胺化，得到化合物3'-6； (iv')在惰性溶劑(如DMF)中，催化劑作用(例如，鈀催化劑)下，化合物1-6與聯硼頻哪醇酯3'-7反應，得到化合物3-6。
應理解，在本發明範圍內中，本發明的上述各技術特徵和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特徵之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限於篇幅，在此不再一一累述。
本發明人經過廣泛而深入的研究，通過合理設計發現了一類具有較好的RET激酶活性(野生型，基因融合型以及多種突變型RET激酶)，同時對VEGFR2激酶具有較好的選擇性的化合物。此外，所述化合物對RET激酶敏感的細胞均具有優異的抑制活性，並且具有良好藥效學/藥代動力學性能。在此基礎上，完成了本發明。
術語
在本發明中，除非特別指出，所用術語具有本領域技術人員公知的一般含義。
當通過從左向右書寫的常規化學式描述取代基時，該取代基也同樣包括從右向左書寫結構式時所得到的在化學上等同的取代基。舉例而言，-CH2O-等同於-OCH2-。
術語“烷基”本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定的碳原子數的直鏈或支鏈烴基(即，C1-C6是指一個至六個碳原子)。烷基的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、第二丁基、正戊基、正己基及其類似烷基。烷基中的一個或多個位置被取代，尤其是1-4個取代基，可在任何位置上取代。
術語“C1-C6烷氧基”是指具有1至6個碳原子的直鏈或支鏈或環狀烷氧基(如C3-C6環烷氧基)，代表性的例子包括(但並不限於)：甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基和丁氧基等。優選為C1-C3烷氧基。
術語“環烷基”是指包括飽和單環、雙環或多環的環狀烷基，例如C3-C8或C3-C12環烷基。C3-C8環烷基指包括C3、C4、C5、C6、C7、或C8環烷基。環烷基還可包括螺環、橋環、并環等結構的環烷基。本發明的代表性的環烷基包括但不限於：環丙基、環丁基、環戊基、環己基和降莰烷基。應理解，取代或未取代的環烷基，例如支化環烷基(如1-甲基環丙基和2-甲基環丙基)，均包括在“環烷基”的定義中。C5-C12稠合雙環指包括C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12雙環烷基，其包括但不限於：
Figure 110120472-A0305-02-0029-54
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-55
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-56
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-57
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-58
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-59
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-60
、
Figure 110120472-A0305-02-0029-61
等。C5-C12螺雙環指包括C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12雙環烷基，其包括 但不限於：
Figure 110120472-A0305-02-0030-62
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-63
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-64
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-65
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-66
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-67
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-68
、
Figure 110120472-A0305-02-0030-69
等。
術語“環烷氧基”是指環烷基上的H被-O-取代並且以氧為連結鍵的基團，優選C3-C8環烷氧基，包括但不限於環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基等。
術語“環雜烷基”是指具有指定的環頂點(或成員)數且具有一至五個選自N、O和S的雜原子分別取代環骨架中碳原子，且其中，氮和硫原子任選地被氧化，且氮原子任選被季銨化的環烷基環。環雜烷基通常為4-12元環。環雜烷基可為單環、雙環或多環系統。環雜烷基例子包括但並不限於：吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、丁內醯胺基、戊內醯胺基、咪唑烷酮基、乙內醯脲基、二氧雜環戊烷基、鄰苯二甲醯亞胺基、哌啶基、1,4-二氧六環基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉-S-氧化物、硫代嗎啉-S,S-氧化物、哌嗪基、哌喃基、吡啶酮基、3-吡咯啉基、噻喃基、吡喃酮基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、奎寧環及其類似物。
術語“鹵代烷基”指包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個鹵素的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團。鹵代烷基的實例包括但不限於氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。鹵代烷基的實例還 包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個氟原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團的“氟烷基”。
術語“烷胺基”是指-NR1’R2’(
Figure 110120472-A0305-02-0031-70
)，R1’和R2’各自獨立地為H、烷基，優選地烷基為C1-C6烷基，更優選地為C1-C3烷基，且R1’和R2’不同時為H。
術語“烷硫基”是指-SR1’，R1’為烷基，優選地為C1-C6烷基，更優選地為C1-C3烷基。
術語“烯基”表示含一個或多個雙鍵且通常長度為2至20個碳原子(或C2-C8)的直鏈或支鏈的烴基。例如，本發明中，“C2-C6烯基”含有兩個至六個碳原子。烯基包括但不限於例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。
術語“芳基”，單獨或作為較大部分諸如“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳基氧基烷基”的部分，是指具有總計5至15個環成員的單環、二環或三環的環系統(優選6-10元芳環)，其中所述系統中的至少一個環為芳族的且其中所述系統中的每個環含有3至7個環成員。“芳基”可以是取代的或者未取代的。在本發明的某些實施方案中，“芳基”是指芳族環系統，其包括但不限於苯基、聯苯基、茚滿基、1-萘基、2-萘基和四氫萘基。稠合的芳基可在環烷基環或芳族環的合適位置上連接至另一基團。從環系統中畫出的連接線表明鍵可連接至任意合適的環原子。
術語“雜芳基”指包含1-4個雜原子、5-14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、氮和硫。雜芳基優選5至10元環，更優選為5元或6元，例如吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基等。“雜芳基”可以是取代的或者未取代的，當被取代時，取代基優選為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、氘代烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、烯基、炔基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、胺基、硝基、羥基、巰基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷硫基、氧代基、羧基和羧酸酯基。
術語“雜環”、“雜環基”或“雜環基團”指穩定的3元、4元、5元、或7元單環或二環或7元、8元、9元、10元、11元、12元、13元或14元多環雜環，包括稠環、螺環和/或橋環結構，其為飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的，且其含有碳原子和1個、2個、3個或4個獨立地選自N、O和S的雜原子。該術語還包括雜環與芳環(如苯環)稠合所形成的多環基團。“雜環”可以是取代的或者未取代的。作為環原子的氮和硫雜原子可任選地被氧化。氮原子為取代的或未取代的(即N或NR，其中R為H或如果被定義，則為另一取代基)。雜環可在得到穩定結構的任何雜原子或碳原子處連接至其側基。如果所得化合物是穩定的，則本文所述的雜 環基可在碳或氮原子上被取代。雜環中的氮可任選地被季銨化。優選地，當雜環中S和O原子的總數超過1時，則這些雜原子彼此不相鄰。優選地，雜環中S和O原子的總數不大於1。當使用術語“雜環”時，其意欲包括雜芳基。雜環的實施例包括但不限於吖啶基、氮雜環丁基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并異噁唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、色滿基、色烯基、噌啉基、十氫喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氫呋喃并[2,3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、咪唑并吡啶基、假吲哚基(indolenyl)、二氫吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛紅醯基(isatinoyl)、異苯并呋喃基、異色滿基、異吲唑基、異二氫吲哚基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噻唑并吡啶基、異噁唑基、異噁唑并吡啶基、亞甲基二氧基苯基、嗎啉基、二氮雜萘基、八氫異喹啉基、噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑并吡啶基、噁唑烷基、萘嵌間二氮雜苯基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、喋啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑并 吡啶基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并噁唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎寧環基、四唑基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻唑并吡啶基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫噸基。本發明還包括含有例如上述雜環的稠環和螺環化合物。
術語“螺環”、“稠合環”表示一個環起源於另一個環上的特殊的環狀碳，例如，一個飽和的橋環體系(環B和環B'共用兩個碳原子)稱為“稠合環”，而環B和環B'在兩個飽和的環體系中共用一個碳原子，則稱為“螺環”。“螺環”“稠合環”體系可以在任何環雜原子或者環碳原子上連接到主結構上從而形成穩定化合物。在一些實施例中，稠合環為5-12元的稠合環。
如本文使用，術語“稠合雙環雜環”或“雙環雜環”基團指穩定的5-12元雜環體系，其含有兩個稠環，且由碳原子和1個、2個、3個或4個獨立地選自N、O和S的雜原子構成。在所述兩個稠環中，一個環為C3-C8元烷環，其稠合至第二環。第二環為飽 和的、部分不飽和的或不飽和的C3-C8單環且雙環雜環基團可在得到穩定結構的任何雜原子或碳原子處連接至其側基。如果所得化合物是穩定的，則本文所述的雙環雜環基團可在碳或氮原子上被取代。當雜環基中S和O原子的總數超過1時，則這些雜原子彼此不相鄰。
術語“羥基”指-OH。
在本發明中，上述的烷基、鹵代烷基、烷氧基、環烷基、芳基、雜芳基、環雜烷基、烯基、雜環、雜環基等中各基團可以是取代的或未取代的。
在本發明中，術語“取代”指特定的基團上的一個或多個氫原子被特定的取代基所取代。特定的取代基為在前文中相應描述的取代基，或各實施例中所出現的取代基。除非特別說明，某個取代的基團可以在該基團的任何可取代的位點上具有一個選自特定組的取代基，所述的取代基在各個位置上可以是相同或不同的。本領域技術人員應理解，本發明所預期的取代基的組合是那些穩定的或化學上可實現的組合。典型的取代包括但不限於一個或多個以下基團：如氫、氘、鹵素(例如，單鹵素取代基或多鹵素取代基，後者如三氟甲基或包含Cl3的烷基)、腈基、硝基、氧代(如=O)、三氟甲基、三氟甲氧基、環烷基、烯基、炔基、雜環、芳環、-ORa、-SRa、-S(=O)Re、-S(=O)2Re、-P(=O)2Re、-S(=O)2ORe， -P(=O)2ORe、-NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-71
)、-NRbS(=O)2Re(
Figure 110120472-A0305-02-0036-72
)、-NRbP(=O)2Re(
Figure 110120472-A0305-02-0036-73
)、-S(=O)2NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-74
)、-P(=O)2NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-75
)、-C(=O)ORd(
Figure 110120472-A0305-02-0036-76
)、-C(=O)Ra(
Figure 110120472-A0305-02-0036-77
)、-C(=O)NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-78
)、-OC(=O)Ra(
Figure 110120472-A0305-02-0036-79
)、-OC(=O)NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-80
)、-NRbC(=O)ORe(
Figure 110120472-A0305-02-0036-81
)、-NRdC(=O)NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-82
)、-NRdS(=O)2NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-83
)、-NRdP(=O)2NRbRc(
Figure 110120472-A0305-02-0036-84
)、-NRbC(=O)Ra(
Figure 110120472-A0305-02-0036-85
)、或-NRbP(=O)2Re(
Figure 110120472-A0305-02-0036-86
)，其中，Ra可以獨立表示氫、氘、烷基、環烷基、烯基、炔基、雜環或芳環，Rb、Rc和Rd可以獨立表示氫、氘、烷基、環烷基、雜環或芳環，或者Rb和Rc與N原子一起可以形成雜環；Re可以獨立表示氫、烷基、環烷基、烯基、炔基、雜環或芳環。上述典型的取代基，如烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、雜環或芳環可以任選取代。所述取代基例如(但並不限於)：鹵素、羥基、氰基、羧基(-COOH)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8環烷基、3-12元雜環基、芳基、雜芳基、C1-C8醛 基、C2-C10醯基、C2-C10酯基、胺基、C1-C6烷氧基、C1-C10磺醯基、及C1-C6脲基等。
除非另外說明，假定任何不滿價態的雜原子有足夠的氫原子補充其價態。
當取代基為非末端取代基時，其為相應基團的伸基，例如烷基對應於伸烷基、環烷基對應伸環烷基、雜環基對伸雜環基、烷氧基對應伸烷氧基等。
術語“鹵代”或“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。
術語“氰基”指-CN。
活性成分
如本文所用，術語“本發明的化合物”或“本發明的活性成分”可互換使用，指式I化合物、或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物(如氘代化合物)或前藥。該術語還包括外消旋體、光學異構體。
本發明化合物具有式I所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0037-87
式中，A選自下組：-CN、-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4或-NHCONR2R3；B選自下組：R7、-O-(L1)m1-R8、-OCOR9、-NR10R11、-COOR12、-CO-NR10R11、-(L2)m2-R12、-(L2)m2-NR10R11；其中，各L1獨立地選自下組：-CRfRg-、-CO-、-CO-NH-；各L2獨立地選自下組：-CRfRg-、-CO-、-O-CO-；X1和X2各自獨立地為CR或N；其中，R選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、H、鹵素或氰基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；Z選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R1、R2、R3和R4各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或5-10元雜芳基；或者R2和R3與其連接的N原子一起構成取代或未取代的3-12元雜環基；其中，所述取代是 指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R7為取代或未取代的5-10雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R8選自取代或未取代的下組基團：-C1-C6烷基-E、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12螺雙環或5-12元螺雜雙環，E選自下組：-CN、-COOR1、-OCOR1、-CONR2R3、-NHCOR4或-NHCONR2R3；其中，所述取代是指被1、2、3或4個選自下組的基團取代：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基；R9選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、-NR10R11、-(L3)m3-(3-8元環雜烷基)、-(L3)m3-(C5-C10芳基)、-(L3)m3-(5-10元雜芳基)，其中，各L3獨立地選自下組：-CRfRg-、-NRh-；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基； R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C6烷基、-(L2)m2-NQ1Q2、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、取代或未取代的C1-C6烷基，或者Q1和Q2與相連的N構成一個3-10元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；各R12獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；Rf和Rg各自獨立地選自下組：H、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、OH、NH2、C3-C6環烷基；Rh獨立地選自下組：H、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C3-C6環烷基；n為0、1、2；m1為1、2、3、4、5或6；m2為1、2、3、4、5或6； m3為0、1或2；限定條件為，當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4、-NHCONR2R3。
A、B、Z、X1、X2、n的定義如上所述。
優選地，式I中，B為-NR10R11；其中，R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C3烷基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個(如2、3或4)基團取代：C1-C3烷基、鹵素(優選F)。
優選地，式I化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前藥具有式I'所述的結構：
Figure 110120472-A0305-02-0041-88
 其中，A、B、X1、X2和n的定義如上所述。
優選地，所述化合物具有式II所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0041-89
式中， Rm和Rn各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C3烷基；其中，所述取代是指被1-2個鹵素原子取代；優選地，Rm和Rn各自獨立地選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F；X1和X2各自獨立地為CH或N。
優選地，式I-II中，X2為N。
優選地，式I-II中，X1為N。
優選地，式I-II中，X1和X2為N。
優選地，式I-II中，X1為CH，X2為N。
優選地，Rn選自：H或甲基；Rm選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
優選地，所述化合物具有式III所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0042-90
Rm選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
優選地，所述化合物具有式IV所示的結構
Figure 110120472-A0305-02-0043-91
式中，RA和RB各自獨立地選自：H、F、甲基。
本發明中的化合物可能形成的鹽也是屬於本發明的範圍。除非另有說明，本發明中的化合物被理解為包括其鹽類。在此使用的術語“鹽”，指用無機或有機酸和鹼形成酸式或鹼式的鹽。此外，當本發明中的化合物含一個鹼性片段時，它包括但不限於吡啶或咪唑，含一個酸性片段時，包括但不限於羧酸，可能形成的兩性離子(“內鹽”)包含在術語“鹽”的範圍內。藥學上可接受的(即無毒，生理可接受的)鹽是首選，雖然其他鹽類也有用，例如可以用在製備過程中的分離或純化步驟。本發明的化合物可能形成鹽，例如，化合物I與一定量如等當量的酸或鹼反應，在介質中鹽析出來，或在水溶液中冷凍乾燥得來。
本發明中的化合物含有的鹼性片段，包括但不限於胺或吡啶或咪唑環，可能會和有機或無機酸形成鹽。可以成鹽的典型的酸包括醋酸鹽(如用醋酸或三鹵代醋酸，如三氟乙酸)、己二酸鹽、藻朊酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二甘醇酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙磺酸鹽(如，2-羥基乙磺酸鹽)、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽(如，2-萘磺酸鹽)、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯丙酸鹽(如3-苯丙酸鹽)、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽，水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽(如與硫酸形成的)、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽如對甲苯磺酸鹽、十二烷酸鹽等等。
本發明的某些化合物可能含有的酸性片段，包括但不限於羧酸，可能會和各種有機或無機鹼形成鹽。典型的鹼形成的鹽包括銨鹽、鹼金屬鹽如鈉、鋰、鉀鹽，鹼土金屬鹽如鈣、鎂鹽和有機鹼形成的鹽(如有機胺)，如苄星、二環已基胺、海巴胺(與N,N-二(去氫樅基)乙二胺形成的鹽)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖醯胺、第三丁基胺，以及和胺基酸如精氨酸、賴氨酸等等形成的鹽。鹼性含氮基團可以與鹵化物第四銨鹽，如小分子烷基鹵化物(如甲 基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物及碘化物)，二烷基硫酸鹽(如，硫酸二甲酯、二乙酯，二丁酯和二戊酯)，長鏈鹵化物(如癸基、十二烷基、十四烷基和十四烷基的氯化物、溴化物及碘化物)，芳烷基鹵化物(如苄基和苯基溴化物)等等。
本發明中化合物的前藥及溶劑合物也在涵蓋的範圍之內。此處術語“前藥”是指一種化合物，在治療相關疾病時，經過代謝或化學過程的化學轉化而產生本發明中的化合物、鹽、或溶劑合物。本發明的化合物包括溶劑合物，如水合物。
本發明中的化合物、鹽或溶劑合物，可能存在的互變異構形式(例如醯胺和亞胺醚)。所有這些互變異構體都是本發明的一部分。
所有化合物的立體異構體(例如，那些由於對各種取代可能存在的不對稱碳原子)，包括其對映體形式和非對映形式，都屬於本發明的設想範圍。本發明中的化合物獨立的立體異構體可能不與其他異構體同時存在(例如，作為一個純的或者實質上是純的光學異構體具有特殊的活性)，或者也可能是混合物，如消旋體，或與所有其他立體異構體或其中的一部分形成的混合物。本發明的手性中心有S或R兩種構型，由理論與應用化學國際聯合會(IUPAC)1974年建議定義。外消旋形式可通過物理方法解決，例如分步結晶，或通過衍生為非對映異構體分離結晶，或通過手性柱 層析法分離。單個的光學異構體可通過合適的方法由外消旋體得到，包括但不限於傳統的方法，例如與光學活性酸成鹽後再結晶。
本發明中的化合物，依次通過製備、分離純化獲得的該化合物其重量含量等於或大於90%，例如，等於或大於95%，等於或大於99%(“非常純”的化合物)，在正文描述列出。此處這種“非常純”本發明的化合物也作為本發明的一部分。
本發明的化合物所有的構型異構體都在涵蓋的範圍之內，無論是混合物、純的或非常純的形式。在本發明化合物的定義包含順式(Z)和返式(E)兩種烯烴異構體，以及碳環和雜環的順式和反式異構體。
在整個說明書中，基團和取代基可以被選擇以提供穩定的片段和化合物。
特定官能團和化學術語定義都詳細介紹如下。對本發明來說，化學元素與Periodic Table of the Elements,CAS version,Handbook of Chemistry and Physics,75th Ed.中定義的一致。特定官能團的定義也在其中描述。此外，有機化學的基本原則以及特定官能團和反應性在“Organic Chemistry”,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito：1999，也有說明，其全部內容納入參考文獻之列。
本發明的某些化合物可能存在於特定的幾何或立體異構體形式。本發明涵蓋所有的化合物，包括其順式和反式異構體、R和S對映異構體、非對映體、(D)型異構體、(L)型異構體、外消旋混合物和其它混合物。另外不對稱碳原子可表示取代基，如烷基。所有異構體以及它們的混合物，都包涵在本發明中。
按照本發明，同分異構體的混合物含有異構體的比率可以是多樣的。例如，在只有兩個異構體的混合物可以有以下組合：50：50，60：40，70：30，80：20，90：10，95：5，96：4，97：3，98：2，99：1，或100：0，異構體的所有比率都在本發明範圍之內。本專業內一般技術人員容易理解的類似的比率，及為更複雜的異構體的混合物的比率也在本發明範圍之內。
本發明還包括同位素標記的化合物，等同於原始化合物在此公開。不過實際上對一個或更多的原子被與其原子量或質量序數不同的原子取代通常會出現。可以列為本發明的化合物同位素的例子包括氫，碳，氮，氧，磷，硫，氟和氯同位素，分別如2H、3H、13C、11C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。本發明中的化合物，或對映體，非對映體，異構體，或藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其中含有上述化合物的同位素或其他同位素原子都在本發明的範圍之內。本發明中某些同位素標記化合物，例如3H和14C的放射性同位素也在其中，在藥物和受質的組織分佈實 驗中是有用的。氚，即3H和碳-14，即14C，它們的製備和檢測比較容易。是同位素中的首選。此外，較重同位素取代如氘，即2H，由於其很好的代謝穩定性在某些療法中有優勢，例如在體內增加半衰期或減少用量，因此，在某些情況下可以優先考慮。同位素標記的化合物可以用一般的方法，通過用易得的同位素標記試劑替換為非同位素的試劑，用批露在示例中的方案可以製備。
如果要設計一個本發明的化合物特定的對映體的合成，它可以不對稱合成製備，或用手性輔劑衍生化，將所產生的非對映混合物分離，再除去手性輔劑而得到純的對映體。另外，如果分子中含有一個鹼性官能團，如胺基酸，或酸性官能團，如羧基，可以用合適的光學活性的酸或鹼的與之形成非對映異構體鹽，再通過分離結晶或層析等常規手段分離，然後就得到了純的對映體。
如本文所述，本發明中的化合物可與任何數量取代基或官能團取而擴大其包涵範圍。通常，術語“取代”不論在術語“可選”前面或後面出現，在本發明配方中包括取代基的通式，是指用指定結構取代基，代替氫自由基。當特定結構中的多個在位置被多個特定的取代基取代時，取代基每一個位置可以是相同或不同。本文中所使用的術語“取代”包括所有允許有機化合物取代。從廣義上講，允許的取代基包括非環狀的、環狀的、支鏈的非支鏈的、碳環的和雜環的，芳環的和非芳環的有機化合物。在本發明中，如雜原子氮 可以有氫取代基或任何允許的上文所述的有機化合物來補充其價態。此外，本發明是無意以任何方式限制允許取代有機化合物。本發明認為取代基和可變基團的組合在以穩定化合物形式在疾病的治療上是很好的。此處術語“穩定”是指具有穩定的化合物，在足夠長的時間內檢測足以維持化合物結構的完整性，最好是在足夠長的時間內都在效，本文在此用於上述目的。
本申請所涉及的化合物及其藥學可接受的鹽的代謝產物，以及可以在體內轉變為本申請所涉及的化合物及其藥學可接受的鹽的結構的前藥，也包含在本申請的請求項中。
製備方法
下面更具體地描述本發明式(I)結構化合物的製備方法，但這些具體方法不對本發明構成任何限制。本發明化合物還可以任選將在本說明書中描述的或本領域已知的各種合成方法組合起來而方便的製得，這樣的組合可由本發明所屬領域的技術人員容易的進行。
通常，在製備流程中，各反應通常惰性氣體保護下，適當溶劑中，在室溫到90℃下進行，反應時間通常為2-24小時。
方法一：
Figure 110120472-A0305-02-0050-92
方法一中：Y可以是Cl、Br、I；A、X1、X2、n、Z、L1、m1、R8具有本發明所述的定義。所述方法包括以下步驟：(i)在惰性溶劑(例如DMSO)中，鹼性條件下(例如，K2CO3、Na2CO3、Cs2CO3等)，化合物1-01和化合物1-02反應，得到化合物1-2；(ii)在惰性溶劑中，在酸性條件(例如，三氟乙酸)下，化合物1-2脫胺保護得到化合物1-3；(iii)在惰性溶劑中，還原劑(例如，NaBH(OAc)3)存在下，化合物1-3與化合物1-03進行還原胺化，得到化合物1-4；(iv)在惰性溶劑(例如，DMF)中，催化劑作用(例如，鈀催化劑)下，化合物1-4與錫試劑反應，得到化合物1-5；(v)在惰性溶劑中，催化劑作用(例如，鈀催化劑)下，化合物1-5與化合物1-04反應，得到化合物1-6； (vi)在惰性溶劑(例如，二甲苯)中，在酸性條件(例如，氫氟酸吡啶鹽)下，化合物1-6脫保護，得到化合物1-7；(vii)在惰性溶劑(例如，DMSO)中，鹼性條件下(例如，Cs2CO3)，化合物1-7與化合物Y-(L1)m1-R8反應得到化合物1-8。
以上反應步驟中，反應溶劑、反應溫度、反應時間、催化劑等可以根據具體的反應物進行選擇。
方法二：
Figure 110120472-A0305-02-0051-93
方法二中：A、X1、X2、n、Z、R10、R11具有本發明所述的定義。所述方法包括以下步驟：(i)在惰性溶劑中，鹼性條件下(例如，Cs2CO3等)，化合物2-01和羥基保護試劑(例如，苄基溴)反應，得到化合物2-2；(ii)在惰性溶劑中，鹼性條件(例如，K3PO4)和催化劑(例如，碘化亞銅和L-脯氨酸)作用下，化合物2-2與胺化合物NHR10R11反應，得到化合物2-3； (iii)在惰性溶劑中，酸性條件(例如，HBr)下，化合物2-3脫保護，得到化合物2-4；(iv)在惰性溶劑中，化合物2-4與PhNTf2反應，得到化合物2-5；(v)在惰性溶劑中，催化劑作用(例如，鈀催化劑和鹵化亞銅)下，化合物2-5與化合物1-5反應，得到化合物2-6。
優選地，本發明化合物採用如下方法製備：
Figure 110120472-A0305-02-0052-94
(i-1)在惰性溶劑中，鹼性條件下(例如，Cs2CO3等)，化合物3-1和羥基保護試劑(例如，苄基溴)反應，得到化合物3-2；(i-2)在惰性溶劑中，鹼性條件(例如，K3PO4)和催化劑(例如，碘化亞銅和L-脯氨酸)存在下，化合物3-2與胺化合物NHRmRn反應，得到化合物3-3；(i-3)在惰性溶劑中，酸性條件(例如，HBr)下，化合物3-3脫保護，得到化合物3-4； (i-4)在惰性溶劑中，化合物3-4與PhNTf2反應，得到化合物3-5；(i-5)在惰性溶劑中，催化劑存在(例如，鈀催化劑和鹵化亞銅)下，化合物3-5與化合物3-6反應，得到式II化合物；式中，Rm、Rn的定義如上所述。
優選地，所述式II化合物的製備還包括如下步驟：
Figure 110120472-A0305-02-0053-95
(i')在惰性溶劑(例如DMF)中，鹼性條件下(例如，K2CO3、Na2CO3、Cs2CO3等)，化合物3'-1和化合物3'-2反應，得到化合物3'-3；(ii')在惰性溶劑(如二氧六環)中，在酸性條件(例如，三氟乙酸、HCl)下，化合物3'-3脫胺保護得到化合物3'-4；(iii')在惰性溶劑(如DCM)中，還原劑(例如，NaBH(OAc)3)存在下，化合物3'-4與化合物3'-5進行還原胺化，得到化合物3'-6； (iv')在惰性溶劑(如DMF)中，催化劑作用(例如，鈀催化劑)下，化合物1-6與聯硼頻哪醇酯3'-7反應，得到化合物3-6。
以上反應步驟中，反應溶劑、反應溫度、反應時間、催化劑等可以根據具體的反應物進行選擇。
藥物組合物和施用方法
本發明所述的藥物組合物用於預防和/或治療以下疾病：炎症、癌症、心血管疾病、感染、免疫性疾病、代謝性疾病。
通式(I)所述化合物可以與已知的治療或改進相似病狀的其他藥物聯用。聯合給藥時，原來藥物的給藥方式和劑量可以保持不變，而同時或隨後服用式I的化合物。當式I化合物與其它一種或幾種藥物同時服用時，可以優選使用同時含有一種或幾種已知藥物和式I化合物的藥用組合物。藥物聯用也包括在重疊的時間段服用式I化合物與其它一種或幾種已知藥物。當式I化合物與其它一種或幾種藥物進行藥物聯用時，式I化合物或已知藥物的劑量可能比它們單獨用藥的劑量低。
可以與通式(I)所述化合物進行藥物聯用的藥物或活性成分包括但不局限為：PD-1抑制劑(如納武單抗、派姆單抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述藥物的生物類似藥等)、PD-L1抑制劑(如德瓦魯單抗、阿特珠單抗、 CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F520、GR1405、MSB2311或上述藥物的生物類似藥等)、CD20抗體(如利妥昔單抗、奧濱尤妥珠單抗、奧法木單抗、托西莫單抗、替伊莫單抗等)、CD47抗體(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制劑(如色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、蘿拉替尼、奧卡替尼)、PI3K抑制劑(如艾代拉裡斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制劑(如依魯替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制劑(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、達克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制劑(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多納非尼等)、HDAC抑制劑(如Givinostat、Droxinostat、恩替諾特、達西司特、泰克地那林等)、CDK抑制劑(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制劑(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制劑(如MK-2206、Ipatasertib、Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制劑(如Vistusertib等)、SHP2抑制劑(如RMC-4630、JAB-3068、 TNO155等)、IGF-1R抑制劑(如Ceritinib、奧卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其組合。
本發明藥物組合物的劑型包括(但並不限於)：注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用擦劑、控釋型或緩釋型或奈米製劑。
本發明的藥物組合物包含安全有效量範圍內的本發明化合物或其藥理上可接受的鹽及藥理上可以接受的賦形劑或載體。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明顯改善病情，而不至於產生嚴重的副作用。通常，藥物組合物含有1-2000mg本發明化合物/劑，更佳地，含有10-1000mg本發明化合物/劑。較佳地，所述的“一劑”為一個膠囊或藥片。
“藥學上可以接受的載體”指的是：一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質，它們適合於人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒性。“相容性”在此指的是組合物中各組份能和本發明的化合物以及它們之間相互摻和，而不明顯降低化合物的藥效。藥學上可以接受的載體部分例子有纖維素及其衍生物(如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素鈉、纖維素乙酸酯等)、明膠、滑石、固體潤滑劑(如硬脂酸、硬脂酸鎂)、硫酸鈣、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄欖油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、 乳化劑(如吐溫®)、潤濕劑(如十二烷基硫酸鈉)、著色劑、調味劑、穩定劑、抗氧化劑、防腐劑、無熱原水等。
本發明化合物或藥物組合物的施用方式沒有特別限制，代表性的施用方式包括(但並不限於)：口服、瘤內、直腸、腸胃外(靜脈內、肌肉內或皮下)、和局部給藥。
用於口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種常規惰性賦形劑(或載體)混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或與下述成分混合：(a)填料或增容劑，例如，澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和矽酸；(b)黏合劑，例如，羥甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；(c)保濕劑，例如，甘油；(d)崩解劑，例如，瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯澱粉或木薯澱粉、藻酸、某些複合矽酸鹽、和碳酸鈉；(e)緩溶劑，例如石蠟；(f)吸收加速劑，例如，四級銨化合物；(g)潤濕劑，例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(h)吸附劑，例如，高嶺土；和(i)潤滑劑，例如，滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，或其混合物。膠囊劑、片劑和丸劑中，劑型也可包含緩衝劑。
固體劑型如片劑、糖丸、膠囊劑、丸劑和顆粒劑可採用包衣和殼材製備，如腸衣和其它本領域公知的材料。它們可包含不透明劑，並且，這種組合物中活性化合物或化合物的釋放可以延遲 的方式在消化道內的某一部分中釋放。可採用的包埋組分的實例是聚合物質和蠟類物質。必要時，活性化合物也可與上述賦形劑中的一種或多種形成微膠囊形式。
用於口服給藥的液體劑型包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿或酊劑。除了活性化合物外，液體劑型可包含本領域中常規採用的惰性稀釋劑，如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑，例知，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺以及油，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油或這些物質的混合物等。
除了這些惰性稀釋劑外，組合物也可包含助劑，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香料。
除了活性化合物外，懸浮液可包含懸浮劑，例如，乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯、微晶纖維素、甲醇鋁和瓊脂或這些物質的混合物等。
用於腸胃外注射的組合物可包含生理上可接受的無菌含水或無水溶液、分散液、懸浮液或乳液和用於重新溶解成無菌的可注射溶液或分散液的無菌粉末。適宜的含水和非水載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇及其適宜的混合物。
用於局部給藥的本發明化合物的劑型包括軟膏劑、散劑、貼劑、噴射劑和吸入劑。活性成分在無菌條件下與生理上可接受的 載體及任何防腐劑、緩衝劑，或必要時可能需要的推進劑一起混合。
本發明治療方法可以單獨施用，或者與其它治療手段或者治療藥物聯用。
使用藥物組合物時，是將安全有效量的本發明化合物適用於需要治療的哺乳動物(如人)，其中施用時劑量為藥學上認為的有效給藥劑量，對於60kg體重的人而言，日給藥劑量通常為1~2000mg，優選50~1000mg。當然，具體劑量還應考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫師技能範圍之內的。
本發明還提供了一種藥物組合物的製備方法，包括步驟：將藥學上可接受的載體與本發明所述通式(I)化合物或其晶型、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物進行混合，從而形成藥物組合物。
本發明還提供了一種治療方法，它包括步驟：給需要治療的對象施用本發明中所述通式(I)化合物，或其晶型、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物，或施用本發明所述的藥物組合物，用於選擇性地抑制RET。
本發明具有以下主要優點：
(1)本發明化合物對RET激酶具有優良的抑制能力，以及對RET激酶具有優良選擇性，對VEGFR2等其他激酶的抑制活性低。
(2)本發明化合物具有更低的毒副作用。
(3)本發明化合物更好的藥效學、藥代動力學性能。
(4)本發明化合物對野生型、基因融合型及突變型(包括但不限於V804和G810)的RET激酶均具有理想的抑制活性。
(5)本發明化合物在吡唑并[1,5-a]吡啶(
Figure 110120472-A0305-02-0060-96
)的6位上為胺基的化合物對G810突變的RET具有較好的抑制活性，尤其是乙基或氟代乙基。
(6)本發明化合物構效關係資料表明，Rm為乙基或氟代乙基(優選CH2CH2F)，Rn為H或甲基(優選為H)時，本發明化合物對V804和G810突變的RET具有較好的抑制活性。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件如Sambrook等人，分子選殖：實驗室手冊(New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的條件，或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數按重量計算。
除非另行定義，文中所使用的所有專業與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用於本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示範之用。
本發明的化合物結構是通過核磁共振(NMR)和液相層析質譜(LC-MS)來確定的。
NMR是使用Bruker AVANCE-400和Bruker AVANCE-500核磁儀檢測的，測定溶劑包含氘代二甲亞碸(DMSO-d6)、氘代丙酮(CD3COCD3)、氘代氯仿(CDCl3)及氘代甲醇(CD3OD)等，內標採用四甲基矽烷(TMS)，化學位移以百萬分之一(ppm)的單位計量。
液相層析質譜(LC-MS)是使用Agilent 1260質譜儀檢測的。HPLC的測定使用Agilent 1100高壓色譜儀(Microsorb 5 micron C18 100 x 3.0mm層析管柱)。
薄層層析矽膠板使用青島GF254矽膠板，TLC採用的是0.15-0.20mm，製備薄層層析採用的是0.4mm-0.5mm。管柱層析一般使用青島矽膠200-300目矽膠作為載體。
本發明實施例中的起始原料都是已知並有市售的，或者可以採用或按照本領域已報導的文獻資料合成的。
除特殊說明外，本發明所有反應均在乾燥的惰性氣體(如氮氣或氬氣)保護下通過連續磁力攪拌進行，反應溫度均為攝氏度。
下列簡寫詞的使用貫穿本發明
THF：四氫呋喃
MeOH：甲醇
HCl：鹽酸
Pd(PPh3)4：四三苯基膦鈀
K2CO3：碳酸鉀
AcOK：醋酸鉀
NaOH：氫氧化鈉
H2O：水
TEA：三乙胺
DIEA：N,N-二異丙基乙胺
DMF：N,N-二甲基甲醯胺
DMA：N,N-二甲基乙醯胺
Py：吡啶
DCE：1,2-二氯乙烷
DMSO：二甲基亞碸
TFA：三氟乙酸
NaBH(AcO)3：三乙醯基硼氫化鈉
Sn2(Bu-n)6：六己基二錫
AlCl3：三氯化鋁
CuI：碘化亞銅
DPPA：疊氮磷酸二苯酯
BuOH：第三丁醇
Cs2CO3：碳酸銫
K3PO4：磷酸鉀
BnBr：苄溴
Pd2(dba)3：三(二亞苄基丙酮)二鈀
X-Phos：2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯
EA：乙酸乙酯
NaHCO3：碳酸氫鈉
DIPEA：N,N-二異丙基乙胺
HBr：溴化氫
實施例
中間體1的合成：
Figure 110120472-A0305-02-0064-97
步驟1：合成3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯
將3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯(6.2g，31.3mmol)溶解在二甲基亞碸(40mL)中，然後加入2,5-二氯吡嗪(6.02g，40.7mmol)和碳酸鉀(21.6g，156.5mmol)，反應液80℃攪拌過夜。反應完全後冷卻至室溫，加入水(50mL)和乙酸乙酯(100mL)，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(PE：EA=3：1)，得到第三丁基3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯7g，產率72.2%。MS m/z(ESI)：311.2[M+H]+。
步驟2：合成3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷三氟乙酸鹽
室溫下，將3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯(5g，16.12mmol)溶解在二氯甲烷(30mL)中，然後加入三氟乙酸(30mL)，該溶液在室溫下反應1小時。監測反應完全，反應液濃縮，加入乙醚(150mL)析出固體，過濾， 得到3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷三氟乙酸鹽4.9g，產率98.5%。MS m/z(ESI)：211.1[M+H]+。
步驟3：合成3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷
將3-(5-氯吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷三氟乙酸鹽(4.9g，15.96mmol)溶解在二氯甲烷(100mL)中，加入三乙醯基硼氫化鈉(17.2g，81.2mmol)和6-甲氧基煙醛(6.66g，48.6mmol)，然後室溫攪拌反應2h，監測反應完全後，加二氯甲烷稀釋，用氯化銨溶液(50mL)淬滅反應，二氯甲烷(50mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷4.3g，產率81.4%。MS m/z(ESI)：332.2[M+H]+。
步驟4：合成6((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷
將3-(5-氯吡嗪-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(4.3g，12.99mmol)溶解在DMF(40mL)中，加入六丁基二錫(9.79g，16.89mmol)和四三苯基膦鈀(1.5g，1.299mmol)，然後在140℃攪拌反應16h，監測反應完全後，用氯化銨溶液(50mL)淬滅反應，乙酸乙酯(30mL*2.)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6((6-甲氧 基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(中間體1)2g。MS m/z(ESI)：588.3[M+H]+。
中間體2的合成：
Figure 110120472-A0305-02-0066-98
步驟1：合成4-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸第三丁基酯
將5-溴-2-氟吡啶(10g，56.8mmol)、碳酸鉀(31g，227.3mmol)和第三丁基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(10.6g，56.8mmol)溶解在DMF(50mL)中，反應液120℃攪拌反應16h，監測反應完全後，加水(50mL)和EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸第三丁基酯15g。MS m/z(ESI)：342.5[M+H]+。
步驟2：合成1-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪
室溫下，將4-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸第三丁基酯(15g，43.99mmol)溶解在二氯甲烷(20mL)中，然後加入鹽酸二氧六環(80mL)，該溶液在室溫下反應1小時，監測反應完全， 反應液濃縮，用碳酸鉀溶液調到pH=9，用乙酸乙酯萃取，有機相水洗，乾燥，濃縮，管柱層析，得到1-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪8.5g。MS m/z(ESI)：242.2[M+H]+。
步驟3：合成1-(5-溴吡啶-2-基)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪
將1-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪(8.5g，35.3mmol)溶解在二氯甲烷(150mL)中，加入三乙醯基硼氫化鈉(22.5g，105.9mmol)和6-甲氧基煙醛(9.7g，70.6mmol)，然後室溫攪拌反應2h，監測反應完全後，加二氯甲烷稀釋，用氯化銨溶液(50mL)淬滅反應，二氯甲烷(50mL*2.)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-(5-溴吡啶-2-基)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪8.3g。MS m/z(ESI)：363.3[M+H]+。
步驟4：合成1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪
將1-(5-溴吡啶-2-基)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪(8.3g，22.93mmol)溶解在DMF(40mL)中，加入聯硼酸頻那醇酯(11.65g，45.86mmol)、醋酸鈀(0.26g，1.15mmol)，三苯基膦(1.2g，4.586mmol)和醋酸鉀(6.74g，68.78mmol)。然後80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，加水稀釋，乙酸乙酯 (30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(中間體2)4.98g。MS m/z(ESI)：411.2[M+H]+。
中間體3的合成：
Figure 110120472-A0305-02-0068-99
步驟1：合成4-溴-6-((第三丁基二甲基矽氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.6g，6.75mmol)和第三丁基二甲基氯矽烷(1.12g，7.43mmol)溶解在四氫呋喃(50mL)中，然後滴加三乙胺(1.87mL)，反應液室溫攪拌2h，加適量水，乙酸乙酯萃取，有機相水洗，乾燥，濃縮，管柱層析，得到4-溴-6-((第三丁基二甲基矽氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.55g。MS m/z(ESI)：352.0[M+H]+。
步驟2：合成6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-溴-6-((第三丁基二甲基矽氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.55g，4.43mmol)、6((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡嗪-2-基)-3，6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(2.6g，4.43mmol)、碘化亞銅(84mg，0.443mmol)和四三苯基膦鈀(512mg，0.443mmol)溶解在二甲苯(40mL)中，反應液室溫攪拌16h。監測反應完全後，用水(10mL)淬滅反應，EA(20mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.57g。MS m/z(ESI)：569.3[M+H]+。
步驟3：合成6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.57g，2.76mmol)溶解在二氯甲烷(40mL)中，然後滴加氟化氫吡啶(0.75mL)，反應液室溫攪拌2h， 用飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至中性，乙酸乙酯萃取，有機相水洗，乾燥，濃縮，管柱層析，得到6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(中間體3)1g。MS m/z(ESI)：455.4[M+H]+。
中間體4的合成：
Figure 110120472-A0305-02-0070-100
步驟：合成6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0mg，4.2mmol)與1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(2.07g，5.04mmol)溶解在二噁烷：水=(3：1，20mL)中，然後分別加入Pd(PPh3)4(0.5g，0.42mmol)與碳酸鈉(1.34g，12.6mmol)，氮氣保護，85℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(PE：EA=1：1)，得到6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(中間體4)0.7g。MS m/z(ESI)：442.2[M+H]+。
中間體5的合成：
Figure 110120472-A0305-02-0071-101
步驟1：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(7.8g，26.17mmol)溶解在四氫呋喃(10mL)中，加入氫氧化鈉溶液(5mol/L，10mL)和乙醇(10mL)，反應液室溫攪拌反應2h，監測反應完全後，濃縮，用稀鹽酸將pH調到3，EA(20mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸6g。MS m/z(ESI)：271.1[M+H]+
步驟2：合成第三丁基(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)胺基甲酸酯
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸(6g，22.2mmol)、疊氮磷酸二苯酯(31g，227.3mmol)溶解在第三丁醇(50mL)中，反應液80℃攪拌反應4h，監測反應完全後，濃縮，得到第三丁基(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)胺基甲酸酯粗品，留到下一步使用。MS m/z(ESI)：342.5[M+H]+。
步驟3：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺
室溫下，將第三丁基(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)胺基甲酸酯(粗品)溶解在二氯甲烷(50mL)中，然後加入三 氟乙酸(50mL)，該溶液在室溫下反應1小時，監測反應完全，反應液濃縮，用碳酸鉀溶液調到pH=9，用乙酸乙酯萃取，有機相水洗，乾燥，濃縮，管柱層析，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(中間體5)3.1g。MS m/z(ESI)：242.3[M+H]+。
實施例1 化合物1的合成
Figure 110120472-A0305-02-0072-102
步驟1：合成4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯
將6-溴-4-羥基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(400mg，1.4mmol)與1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑(351mg，1.7mmol)溶解在二噁烷：水=(3：1，20mL)中，然後分別加入Pd(PPh3)4(145mg，0.14mmol)與碳酸鈉(450mg，4.2mmol)，氮氣保護，85℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(PE：EA=1：1)，得到4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯250mg，產率62%。MS m/z(ESI)：287.4[M+H]+。
步驟2：6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基磺醯氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯
室溫下，將4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(250mg，0.87mmol)與DIEA(224mg，1.74mmol)溶解在DMA(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(343mg，1.0mmol)，氮氣保護，室溫攪拌6小時。反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基磺醯氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯230mg，產率63%。MS m/z(ESI)：419.3[M+H]+。
步驟3：4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯
室溫下將6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基磺醯氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(230mg，0.55mmol)、1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(293mg，0.71mmol)、Pd2(dba)3(50mg，0.055mmol)、X-phos(45mg，0.11mmol)溶解在二噁烷：水=(3：1，20mL)中，然後加入碳酸鈉(291mg，2.75mmol)，氮氣保護，85℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到4(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(化合物1)121mg，產率39.9%。MS m/z(ESI)：553.0[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 9.12(s，1H)，8.41(s，1H)，8.37(s，1H)，8.19(d，1H)，8.09(s，1H)，8.08(d，1H)，7.66-7.68(m，2H)，7.56-7.58(m，1H)，6.68(d，1H)，6.80(d，1H)，3.82-3.87(m，8H)，3.55(s，4H)，3.47(s，2H)，2.49-2.50(s，3H)，0.89(t，3H)。
實施例2：化合物2的合成
Figure 110120472-A0305-02-0074-103
步驟1：6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸
室溫下，6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(1.56g，5.26mmol)溶解在THF/MeOH=(1：1，20mL)中，然後加入NaOH(4M，10mL)，50℃攪拌1h，反應完全，減壓濃縮掉有機溶劑，鹽酸酸化pH=2-3，0℃攪拌0.5h，固體被過濾，水洗， 濃縮，得到6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸1.3g，產率92%，MS m/z(ESI)：268.9[M-H]+。
步驟2：6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯
氮氣保護下，將6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸(400mg，1.48mmol)溶解在20(mL)DCM中，冷卻到0℃，添加草醯氯(282mg，2.22mmol)及1滴DMF，室溫攪拌過夜，反應完全，移除溶劑，直接用於下一步。
步驟3：6-溴-4-甲氧基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
室溫下，將二甲胺四氫呋喃溶液(0.96mL，1.48mmol)與三乙胺(448mg，4.44mmol)溶解在DCM(20mL)中，冷卻到0℃，然後加入6-溴-4-甲氧基H-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯(426mg，1.48mmol)，保溫反應0.5h，反應完全，加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析，得到6-溴-4-甲氧基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺494mg，產率100%。MS m/z(ESI)：297.9[M+H]+。
步驟4：6-溴-4-羥基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
氮氣保護下，室溫將6-溴-4-甲氧基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(494mg，1.6mmol)溶解在DCE(20mL) 中，然後加入AlCl3(665mg，4.98mmol)。50℃攪拌0.5h，反應完全，反應液用稀鹽酸調pH至5-6，DCM萃取，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到6-溴-4-羥基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺341mg，產率91.4%。MS m/z(ESI)：281.9[M+H]+。
步驟5：4-羥基-N,N-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(341mg，1.2mmol)與1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑(123mg，1.44mmol)溶解在二噁烷：水=(10：1，22mL)中，然後分別加入Pd(Ph3)4(123mg，0.12mmol)與碳酸鈉(381mg，3.6mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到4-羥基-N,N-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺409mg，產率100%。MS m/z(ESI)：284.2[M+H]+。
步驟6：3-(二甲基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
室溫下，將4-羥基-N,N-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(400mg，1.4mmol)與 DIEA(310mg，2.8mmol)溶解在DMA(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(600mg，1.68mmol)，氮氣保護，室溫攪拌3小時。反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到3-(二甲基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯300mg，產率85%。MS m/z(ESI)：417.9[M+H]+。
步驟7：4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-N,N-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
室溫下將3-(二甲基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300mg，0.72mmol)，1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(383mg，0.93mmol)，Pd2(dba)3(65mg，0.072mmol)，X-phos(60mg，0.144mmol)，溶解在二噁烷：水=(10：1，20mL)中，然後加入碳酸鈉(381mg，3.6mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-N,N-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(化合物2)188mg，產率50%，MS m/z(ESI)：552.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 9.03(s，1H)，8.34(s，1H)，8.24(d，1H)，8.07(t，1H)，7.66-7.69(m，1H)，7.56-7.59(m，1H)，6.89(d，1H)，6.81(d，1H)，4.14(s，3H)，3.84(s，3H)，3.57(s，4H)，3.48(s，2H)，2.56(s，3H),2.45-2.47(m，3H)，2.41(s，2H)。
實施例3：化合物3的合成
Figure 110120472-A0305-02-0078-104
步驟1：6-溴-N-乙基-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
室溫下，將乙胺四氫呋喃溶液(1mL，1.92mmol)與DIEA(448mg，4.44mmol)溶解在DCM(10mL)中，冷卻到0℃，然後加入6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯(426mg，1.48mmol)，保溫反應0.5h，反應完全，加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析，得到6-溴-N-乙基-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺420mg，產率90%。
步驟2：6-溴-N-乙基-4-羥基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
氮氣保護下，室溫將6-溴-N-乙基-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(420mg，1.4mmol)溶解在DCE 20(mL)中，然後加入AlCl3(567mg，4.25mmol)，50℃攪拌2h，反應完全，反應pH調至5-6，DCM萃取，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(PE：EA=5：1)，得到6-溴-N-乙基-4-羥基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺336mg，產率83%。MS m/z(ESI)：286.1[M+H]+。
步驟3：N-乙基-4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-N-乙基-4-羥基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(336mg，1.1mmol)與1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑(324mg，1.4mmol)溶解在二噁烷：水=(10：1，22mL)中，然後分別加入Pd(PPh3)4(124mg，0.11mmol)與碳酸鈉(385mg，3.3mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到N-乙基-4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺284mg，產率77%。
步驟4：3-(乙基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
室溫下，將N-乙基-4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(284mg，1.40mmol)與DIEA(256mg，2.80mmol)溶解在DMA(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(428mg，1.2mmol)，氮氣保護，室溫攪拌2小時。反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到3-(乙基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯360mg，產率87%，MS m/z(ESI)：416.0[M+H]+。
步驟5：N-乙基-4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
室溫下將3-(乙基胺基甲醯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(200mg，0.4mmol)，1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(256mg，0.62)mmol)，Pd2(dba)3(37mg，0.04mmol)，X-phos(38mg，0.04mmol)，溶解在二噁烷：水=(10：1，20mL)中，然後加入碳酸鈉(212mg，2.0mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到N-乙基-4-(6-(4-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(化合物3)113mg，產率42%。MS m/z(ESI)：552.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 9.02(s，1H)，8.35(s，1H)，8.21(d，1H)，8.14(s，1H)，8.08(m，1H)，7.66-7.69(m，1H)，6.62-7.64(d，1H)，7.54-7.59(m，1H)，7.52(d，1H)，6.80-6.87(m，1H)，3.87(s，3H)，3.85(s，3H)，3.55(s，4H)，3.48(s，2H)，2.86-2.92(m，2H),2.44-2.47(m，4H)，0.79(m，3H)。
實施例4：化合物4的合成
Figure 110120472-A0305-02-0081-105
步驟1：合成N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(600mg，2.49mmol)和三乙胺(0.517mL)溶解在二氯甲烷(15mL)中，然 後冰浴滴加乙醯氯(0.27mL)，該反應液在室溫反應1h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺580mg。MS m/z(ESI)：284.2[M+H]+。
步驟2：合成N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺
將N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺(580mg，2.05mmol)，四三苯基膦鈀(237mg，0.205mmol)，碳酸鈉(652mg，6.15mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(512mg，2.46mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺520mg。MS m/z(ESI)：286.0[M+H]+。
步驟3：合成N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺
將N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺(520mg，1.82mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(850mg，6.39mmol)，該 反應液再室溫下攪拌反應16h，用水(10mL)淬滅反應，EA(20mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺250mg，MS m/z(ESI)：272.5[M+H]+。
步驟4：合成3-乙醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺(250mg，0.92mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(396mg，1.11mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.33mL，1.85mmol)溶解在DMA(20mL)中，該反應室溫攪拌反應16h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-乙醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯300mg。MS m/z(ESI)：404.4[M+H]+。
步驟5：合成N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺
將3-乙醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(150mg，0.372mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷 -2-基)吡啶-2-基)哌嗪(183mg，0.447mmol)、碳酸鈉(197mg，1.86mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(34mg，0.037mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(35.5mg，0.074mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)乙醯胺(化合物4)100mg。MS m/z(ESI)：537.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 9.02(s，1H)，8.91(d，J=1.4Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.23-8.18(m，1H)，8.09(d，J=2.4Hz，1H)，8.05(d，J=0.8Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.68(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.58(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.37(d，J=1.4Hz，1H)，6.89(d，J=8.7Hz，1H)，6.82(dd，J=8.4，0.7Hz，1H)，3.87(s，3H)，3.85(s，3H)，3.57(t，J=5.0Hz，4H)，3.49(s，2H)，2.47(t，J=5.0Hz，4H)，1.66(s，3H).
實施例5：化合物5的合成
Figure 110120472-A0305-02-0085-106
步驟1：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羰基氯
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸(400mg)溶解在二氯甲烷(10mL)中，再慢慢滴加草醯氯(282mg)，然後加入2滴DMF，反應液在室溫下攪拌反應1h，LCMS監測反應完全後，濃縮，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羰基氯(426mg)。
步驟2：合成6-溴-N-異丙基-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羰基氯(426mg)溶解在二氯甲烷(10mL)中，加入異丙胺(113mg)，然後滴加三乙胺(448mg)，反應液在室溫下攪拌反應1h，LCMS監測反應完全後，加水(10mL)淬滅反應，水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6- 溴-N-異丙基-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(350mg)。MS m/z(ESI)：312.1[M+H]+。
步驟3：合成6-溴-4-羥基-N-異丙基吡咯并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-N-異丙基-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(350mg)溶解在1,2-二氯乙烷(10mL)中，加入三氯化鋁(446mg)，反應液在室溫下攪拌反應16h，LCMS監測反應完全後，加水(20mL)淬滅反應，二氯甲烷萃取，水洗，乾燥濃縮，得到6-溴-4-羥基-N-異丙基吡咯并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(300mg)。MS m/z(ESI)：297.2[M+H]+。
步驟4：合成4-羥基-N-異丙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-羥基-N-異丙基吡咯并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(300mg，1.01mmol)、四三苯基膦鈀(117mg，0.101mmol)，碳酸鈉(321mg，3.03mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(252mg，1.21mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到200mg 4-羥基-N-異丙基-6-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺。MS m/z(ESI)：300.1[M+H]+。
步驟5：合成3-(異丙基甲醯)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-N-異丙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(200mg，0.67mmol)，N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(287mg，0.802mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.24mL，1.34mmol)溶解在DMA(20mL)中，該反應室溫攪拌反應16h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到150mg 3-(異丙基甲醯)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯。MS m/z(ESI)：432.2[M+H]+。
步驟6：合成N-異丙基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將3-(異丙基甲醯)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(150mg，0.348mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(171mg，0.418mmol)、碳酸鈉(185mg，1.74mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(32mg，0.035mmol) 和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(33.2mg，0.070mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-異丙基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(化合物5)40mg。MS m/z(ESI)：566.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 9.00(d，J=1.5Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.22(d，J=2.5Hz，1H)，8.12(s，1H)，8.08(d，J=2.4Hz，1H)，8.07(d，J=0.8Hz，1H)，7.67(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.57(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.53-7.47(m，2H)，6.85(d，J=8.9Hz，1H)，6.81(d，J=8.5Hz，1H)，3.87(s，3H)，3.84(s，3H)，3.63(dq，J=13.5，6.6Hz，1H)，3.54(t，J=5.0Hz，4H)，3.48(s，2H)，2.46(t，J=5.0Hz，4H)，0.86(s，3H)，0.85(s，3H).
實施例6：化合物6的合成
Figure 110120472-A0305-02-0089-107
步驟1：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸(400mg)溶解在二氯甲烷(10mL)中，再慢慢滴加草醯氯(282mg)，然後加入2滴DMF，反應液在室溫下攪拌反應1h，LCMS監測反應完全後，濃縮，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯(430mg)。
步驟2：合成6-溴-4-甲氧基-N-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯(430mg)溶解在二氯甲烷(10mL)中，加入甲胺(59mg)四氫呋喃溶液，然後滴加三乙胺(448mg)，反應液在室溫下攪拌反應1h，LCMS監測反應完全後，加水(10mL)淬滅反應，水洗，乾燥濃縮，管柱 層析，得到6-溴-4-甲氧基-N-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(350mg)。MS m/z(ESI)：284.2[M+H]+。
步驟3：合成6-溴-4-羥基-N-甲基吡唑并吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基-N-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(350mg)溶解在1,2-二氯乙烷(10mL)中，加入三氯化鋁(490mg)，反應液在室溫下攪拌反應16h，LCMS監測反應完全後，加水(20mL)淬滅反應，二氯甲烷萃取，水洗，乾燥濃縮，得到6-溴-4-羥基-N-甲基吡唑并吡啶-3-甲醯胺(300mg)。MS m/z(ESI)：270.7[M+H]+。
步驟4：合成4-羥基-N-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-羥基-N-甲基吡唑并吡啶-3-甲醯胺(300mg，1.12mmol)、四三苯基膦鈀(129mg，0.111mmol)、碳酸鈉(355mg，3.35mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(279mg，1.34mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-羥基-N-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺260mg。MS m/z(ESI)：272.4[M+H]+。
步驟5：合成6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲基氨甲醯)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-N-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(260mg，0.96mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(411mg，1.15mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.34mL，1.92mmol)溶解在DMA(20mL)中，該反應室溫攪拌反應16h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲基氨甲醯)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯200mg。MS m/z(ESI)：404.3[M+H]+。
步驟6：合成4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲基氨甲醯)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(200mg，0.496mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(244mg，0.596mmol)、碳酸鈉(263mg，2.48mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(45mg，0.0496mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(47mg，0.099mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h， 監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(化合物6)60mg。MS m/z(ESI)：538.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.03(d，J=1.5Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.21(d，J=2.5Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.09(s，1H)，8.08(d，J=0.8Hz，1H)，7.68(d，J=8.5Hz，1H)，7.61(d，J=4.8Hz，1H)，7.56(s，1H)，7.53(d，J=1.5Hz，1H)，6.86(d，J=8.9Hz，1H)，6.82(d，J=8.4Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.85(s，3H)，3.56(s，4H)，3.49(s，2H)，2.47(s，4H)，2.39(d，J=4.6Hz，3H).
實施例7：化合物7的合成
Figure 110120472-A0305-02-0092-108
步驟1：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并吡啶-3-羧酸甲酯
將6-溴-4-羥基吡唑并吡啶-3-甲酸(1.8g，7.04mmol)溶解在DMF(25mL)中，加入碳酸銫(4.59g，14.08mmol)，然後加入碘甲烷(0.57mL，9.15mmol)，反應液在室溫下攪拌反應16h，LCMS監測反應完全後，加水(30mL)，乙酸乙酯萃取，水洗，乾燥濃縮，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并吡啶-3-羧酸甲酯(1.8g)。MS m/z(ESI)：285.2[M+H]+。
步驟2：合成4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯
將6-溴-4-甲氧基吡唑并吡啶-3-羧酸甲酯(600mg，2.11mmol)、四三苯基膦鈀(244mg，0.211mmol)、碳酸鈉(672mg，6.34mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(527mg，2.54mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯600mg。MS m/z(ESI)：287.3[M+H]+。
步驟3：合成4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯
將4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯(600mg，2.10mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，加入三氯化鋁(977mg，7.34mmol)，反應液在室溫下攪拌反應16h，LCMS監測反應完全後，加水(20mL)淬滅反應，二氯甲烷萃取，水洗，乾燥濃縮，得到4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯(300mg)。MS m/z(ESI)：273.0[M+H]+。
步驟4：合成6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-((三氟甲基)磺醯)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯
將4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯(300mg，1.1mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(473mg，1.32mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.36mL，2.2mmol)溶解在DMA(20mL)中，該反應室溫攪拌反應16h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-((三氟甲基)磺醯)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯220mg。MS m/z(ESI)：405.5[M+H]+。
步驟5：合成甲基4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯
將6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-((三氟甲基)磺醯)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯(220mg，0.54mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(266mg，0.65mmol)、碳酸鈉(286mg，2.7mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(49.5mg，0.054mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(52mg，0.109mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到甲基4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯(化合物7)320mg。MS m/z(ESI)：539.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.13(d，J=1.5Hz，1H)，8.42(s，1H)，8.36(d，J=0.7Hz，1H)，8.20-8.15(m，1H)，8.09(d，J=0.8Hz，1H)，8.08-8.05(m，1H)，7.69-7.63(m，2H)，7.55(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，6.86(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(dd，J=8.5，0.7Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.83(s，3H)，3.54(t，J=4.9Hz，3H)，3.47(s，2H)，3.37(s，4H)，2.45(d，J=5.0Hz，4H).
實施例8：化合物8的合成
Figure 110120472-A0305-02-0096-109
步驟1：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯氯
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸(0.6g，2.23mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，然後0℃下滴加草醯氯(0.56g，4.46mmol)，該反應液在室溫反應2h，監測反應完全後，直接旋乾反應液投下一步。
步驟2：合成6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將上一步得到的產物6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-醯氯溶解在四氫呋喃(10mL)中，然後在0℃下加入氨水(1mL)，在室溫下攪拌1小時，反應完全後，旋乾大部分反應液，二氯甲烷(30mL*2.)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺0.4g。MS m/z(ESI)：270.1[M+H]+。
步驟3：合成4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(400mg，1.48mmol)、四三苯基膦鈀(170mg，0.148mmol)、碳酸鈉(470mg，4.44mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(462mg，2.22mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺0.2g。MS m/z(ESI)：272.3[M+H]+。
步驟4：合成4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(0.4g,1.47mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(0.7g，2.98mmol)，該反應液再室溫下攪拌反應4h，用水(10mL)淬滅反應，DCM(30mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺0.3g。MS m/z(ESI)：258.3[M+H]+。
步驟5：合成3-胺基甲醯基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(0.2g，0.78mmol)，N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.33g，0.93mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.2g，1.56mmol)溶解在DMA(10mL)中，該反應室溫攪拌反應8h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-胺基甲醯基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.3g。MS m/z(ESI)：390.2[M+H]+。
步驟6：合成4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺
將3-胺基甲醯基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.2g，0.52mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(0.25g，0.62mmol)、碳酸鈉(0.17g，1.56mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(48mg，0.052mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(50mg，0.104mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應過夜，監測 反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醯胺(化合物8)120mg。MS m/z(ESI)：524.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.89(s，1H)，8.35(s，1H)，8.21(d，J=2.1Hz，1H)，8.12(s，1H)，8.04(s，1H)，7.86(s，1H)，7.65(dd，J=30.6，7.0Hz，2H)，7.40(d，J=1.2Hz，1H)，7.10(s，1H)，6.89-6.76(m，2H)，5.72(d，J=4.4Hz，1H)，3.89(d，J=8.8Hz，6H)，3.57(d，J=30.1Hz，5H)，2.50(d，J=10.0Hz，5H).
實施例9：化合物9的合成
Figure 110120472-A0305-02-0099-110
步驟1：合成1-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸(0.55g，2.04mmol)、疊氮磷酸二苯酯(0.84g，3.06mmol)、三乙胺(1.23g，12.24mmol)溶解在甲苯(20mL)中，反應液50℃攪拌反應6h，然後再加入甲胺鹽酸鹽(0.55g，8.16mmol)，混合液回流反應過夜，監測反應完全後，濃縮大部分溶劑，DCM(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲0.4g。MS m/z(ESI)：300.0[M+H]+。
步驟2：合成1-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲
將1-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲(400g，1.33mmol)、四三苯基膦鈀(153mg，0.133mmol)、碳酸鈉(422mg，3.99mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(332mg，1.6mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲0.3g。MS m/z(ESI)：300.1[M+H]+。
步驟3：合成1-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲
將1-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲(0.3g,1.0mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(0.49g，2.0mmol)，該反應液再室溫下攪拌反應4h，用水(10mL)淬滅反應，DCM(30mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲0.2g。MS m/z(ESI)：287.3[M+H]+。
步驟4：合成6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(3-甲基脲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將1-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲(0.2g，0.70mmol)，N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.38g，1.04mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.18g，1.4mmol)溶解在DMA(10mL)中，該反應室溫攪拌反應8h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(3-甲基脲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.25g。MS m/z(ESI)：419.4[M+H]+。
步驟5：合成1-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲
將6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(3-甲基脲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.25g，0.6mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(0.3g，0.72mmol)、碳酸鈉(0.19g，1.8mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(55mg，0.06mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(58mg，0.12mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到1-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-甲基脲(化合物9)100mg。MS m/z(ESI)：553.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.87(s，1H)，8.30(s，1H)，8.24(d，J=2.1Hz，1H)，8.10(s，1H)，8.04(s，1H)，7.86(s，1H)，7.65(dd，J=30.6，7.0Hz，2H)，7.30(d，J=1.2Hz，1H)，7.10(s，1H)，6.89-6.76(m，2H)，5.72(d，J=4.4Hz，1H)，3.86(d，J=8.8Hz，6H)，3.52(d，J=30.1 Hz，5H)，2.49(d，J=10.0Hz，5H)，2.43(d，J=4.5Hz，3H).
實施例10：化合物10的合成
Figure 110120472-A0305-02-0103-111
步驟1：合成N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(0.5g，2.07mmol)和三乙胺(0.42g，4.14mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，然後冰浴滴加環丙甲醯氯(0.26g，2.5mmol)，該反應液在室溫反應1h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，DCM(20mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺450mg。MS m/z(ESI)：310.1[M+H]+。
步驟2：合成N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺
將N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺(0.45g，1.45mmol)，四三苯基膦鈀(167mg，0.145mmol)，碳酸鈉(0.46g，4.35mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(0.36g，1.7mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應16h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺0.35g。MS m/z(ESI)：311.2[M+H]+。
步驟3：合成N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺
將N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺(0.35g，1.1mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(0.54g，2.2mmol)，該反應液再室溫下攪拌反應4h，用水(10mL)淬滅反應，DCM(30mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺0.25g。MS m/z(ESI)：298.2[M+H]+。
步驟4：合成3-(環丙烷甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺(0.25g，0.84mmol)，N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.36g，1.00mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.22g，1.68mmol)溶解在DMA(10mL)中，該反應室溫攪拌反應8h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-(環丙烷甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.22g。MS m/z(ESI)：430.1[M+H]+。
步驟5：合成N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺
將3-(環丙烷甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.22g，0.51mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(0.25g，0.62mmol)、碳酸鈉(0.16g，1.53mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(59mg，0.051mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(49mg，0.11mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應過夜， 監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)環丙烷甲醯胺(化合物10)80mg。MS m/z(ESI)：564.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 9.27(s，1H)，8.90(d，J=1.3Hz，1H)，8.30(s，1H)，8.19(d，J=2.4Hz，1H)，8.10(s，1H)，8.04(s，1H)，7.86(s，1H)，7.68(dd，J=8.5，1.9Hz，1H)，7.56(dd，J=8.8，2.4Hz，1H)，7.34(d，J=1.3Hz，1H)，6.90-6.75(m，2H)，3.86(d，J=11.5Hz，6H)，3.64-3.39(m，6H)，2.48(s，4H)，1.46-1.37(m，1H)，0.57-0.48(m，2H)，0.46-0.36(m，2H).
實施例11：化合物11的合成
Figure 110120472-A0305-02-0106-112
步驟1：合成N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(0.5g，2.07mmol)和三乙胺(0.42g，4.14mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，然後冰浴滴加苯甲醯氯(0.35g，2.5mmol)，該反應液在室溫反應1h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，DCM(20mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺0.5g。MS m/z(ESI)：346.5[M+H]+。
步驟2：合成N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺
將N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺(0.5g，1.45mmol)，四三苯基膦鈀(167mg，0.145mmol)、碳酸鈉(0.46g，4.35mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(0.36g，1.7mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應12h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺0.41g。MS m/z(ESI)：348.1[M+H]+。
步驟3：合成N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺
將N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺(0.42g，1.2mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(0.58g，2.4mmol)，該反應液再室溫下攪拌反應4h，用水(10mL)淬滅反應，DCM(30mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺0.31g。MS m/z(ESI)：334.2[M+H]+。
步驟4：合成3-苯甲醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺(0.31g，0.93mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.40g，1.12mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.24g，1.86mmol)溶解在DMA(10mL)中，該反應室溫攪拌反應8h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-苯甲醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.26g。MS m/z(ESI)：466.0[M+H]+。
步驟5：合成N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺
將3-苯甲醯胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.26g，0.56mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(0.28g，0.67mmol)、碳酸鈉(0.18g，1.68mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(52mg，0.056mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(49mg，0.11mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)苯甲醯胺(化合物11)90mg。MS m/z(ESI)：601.5[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 9.50(s，1H)，8.96(d，J=1.3Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.23(d，J=2.4Hz，1H)，8.07(dd，J=21.0，9.0Hz，3H)，7.70-7.64(m，1H)，7.64-7.57(m，3H)，7.52(t，J=7.4Hz，1H)，7.40(dd，J=10.8，4.6Hz，3H)，6.83(d，J=8.5Hz，1H)，6.64(d，J=8.8Hz， 1H)，3.86(t，J=9.6Hz，6H)，3.54-3.35(m，6H)，2.36(s，4H).
實施例12：化合物12的合成
Figure 110120472-A0305-02-0110-113
步驟1：合成N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺
將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(0.5g，2.07mmol)和三乙胺(0.42g，4.14mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，然後冰浴滴加1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯氯(0.36g，2.5mmol)，該反應液在室溫反應1h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，DCM(20mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺0.52g。MS m/z(ESI)：350.7[M+H]+。
步驟2：合成N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺
將N-(6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺(0.52g，1.48mmol)、四三苯基膦鈀(171mg，0.148mmol)、碳酸鈉(0.47g，4.44mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-吡唑(0.37g，1.78mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應12h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺0.4g。MS m/z(ESI)：352.1[M+H]+。
步驟3：合成N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺
將N-(4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺(0.4g，1.14mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20mL)中，然後再加入三氯化鋁(0.55g，2.28mmol)，該反應液再室溫下攪拌反應4h，用水(10mL)淬滅反應，DCM(30mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3- 基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺0.26g。MS m/z(ESI)：338.2[M+H]+。
步驟4：合成3-(1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-(4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺(0.26g，0.77mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.33g，0.93mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.20g，1.54mmol)溶解在DMA(10mL)中，該反應室溫攪拌反應8h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-(1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.33g。MS m/z(ESI)：470.1[M+H]+。
步驟5：合成N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺
將3-(1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.33g，0.71mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(0.35g，0.84mmol)、碳酸鈉(0.23g，2.13mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(65 mg，0.071mmol)和2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(68mg，0.14mmol)溶解在二氧六環(15mL)和水(5mL)中，該反應80℃攪拌反應過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到N-(4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醯胺(化合物12)100mg。MS m/z(ESI)：605.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 9.36(s，1H)，8.94(d，J=1.3Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.21(d，J=2.4Hz，1H)，8.10(d，J=2.1Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.99(s，1H)，7.75-7.66(m，2H)，7.60(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.43(s，1H)，7.39(d，J=1.2Hz，1H)，6.83(d，J=8.4Hz，1H)，6.62(d，J=8.8Hz，1H)，3.87(d，J=12.9Hz，6H)，3.59(s，3H)，3.43(d，J=46.0Hz，6H)，2.40(s，4H).
實施例13：化合物13的合成
Figure 110120472-A0305-02-0113-114
步驟1：合成6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷
將2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(0.3g，3.03mmol)、碳酸銫(2.96g,9.09mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(1.3g，9.09mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷150mg。MS m/z(ESI)：162.3[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.23mmol)、6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(74mg，0.45mmol)、碳酸銫(0.15g，0.45mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物13)50mg。MS m/z(ESI)：567.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.64(d，J=2.1Hz， 1H)，8.64(d，J=2.1Hz，1H)，8.56(s，1H)，8.56(s，1H)，8.32(d，J=2.5Hz，1H)，8.08(d，J=2.1Hz，1H)，7.76(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.67(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.26(d，J=2.1Hz，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.81(d，J=8.5Hz，1H)，4.59(s，4H)，4.04(t，J=5.3Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.55(dd，J=29.6，24.6Hz，8H)，2.72(t，J=5.2Hz，2H)，2.49-2.39(m，5H)，2.08-1.88(m，2H).
實施例14：化合物14的合成
Figure 110120472-A0305-02-0115-115
步驟1：合成9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷
將3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷(0.3g，1.93mmol)、碳酸銫(1.88g，5.80mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.83g，5.80mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷180mg。MS m/z(ESI)：218.5[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-9-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.23mmol)，9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷(98mg，0.45mmol)，碳酸銫(0.15g，0.45mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-9-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物14)48mg。MS m/z(ESI)：623.3[M+H]+。1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.73(s，1H)，8.58(s，1H)，8.32(d，J=2.4Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.76(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.67(dd，J=8.4，1.8Hz，1H)，7.31(s，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(d，J=8.4Hz，1H)，4.23(d，J=62.7Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.66-3.42(m，13H)，2.47(s，4H)，1.62-1.33(m，11H).
實施例15：化合物15的合成
Figure 110120472-A0305-02-0117-116
步驟1：合成2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷
將2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷(0.2g，2.06mmol)、碳酸銫(2.01g，6.18mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.88g，6.18mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷100mg，MS m/z(ESI)：160.7[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.12g，0.27mmol)，2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷(87mg，0.54mmol)，碳酸銫(0.18g，0.54mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)乙氧 基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物15)90mg。MS m/z(ESI)：565.3[M+H]+。1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.74(s，1H)，8.59(s，1H)，8.32(d，J=2.5Hz，1H)，8.08(d，J=2.1Hz，1H)，7.77(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.67(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.33(s，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.81(d，J=8.5Hz，1H)，4.30(s，2H)，3.84(s，3H)，3.55(dd，J=29.6，24.7Hz，8H)，2.49-2.40(m，5H)，1.99(dt，J=12.5，7.1Hz，1H)，1.84(s，2H)，1.63-1.28(m，6H).
實施例16：化合物16的合成
Figure 110120472-A0305-02-0118-117
步驟1：合成3-(2-氯乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己烷
將3-氮雜雙環[3.1.0]己烷(0.2g，2.41mmol)、碳酸銫(1.56g，4.82mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.75g，4.82mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析， 得到3-(2-氯乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己烷110mg。MS m/z(ESI)：146.6[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.23mmol)、3-(2-氯乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己烷(66mg，0.45mmol)、碳酸銫(0.15g，0.45mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)乙氧基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物16)60mg。MS m/z(ESI)：551.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.68(s，1H)，8.57(s，1H)，8.32(d，J=2.5Hz，1H)，8.08(d，J=2.0Hz，1H)，7.76(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.67(dd，J=8.5，2.3Hz，1H)，7.28(s，1H)，6.92(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(d，J=8.4Hz，1H)，4.15(s，2H)，3.84(s，3H)，3.53(d，J=48.6Hz，7H)，2.91(d，J=97.1Hz，4H)，2.48-2.30(m，5H)，1.34(d， J=10.2Hz，2H)，0.56(s，1H)，0.29(s，1H).
實施例17：化合物17的合成
Figure 110120472-A0305-02-0120-118
步驟1：第三丁基-3-(5-溴吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-甲酸基酯
將1-Boc-八氫-吡咯并[3,4-b]吡啶(350mg，1.5mmol)、碳酸銫(1.5g，4.6mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(665mg，4.6mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(2-氯乙基)八氫-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯270mg，產率60%。MS m/z(ESI)：289[M+H]+。
步驟2：2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-異吲哚-4-羧酸第三丁酯
將6-(2-氯乙基)八氫-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-羧酸第三丁酯(126mg，0.44mmol)，6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(4mL)當中，加入碳酸銫(214mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應3小時，反應完全。DCM稀釋，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)得到2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-異吲哚-4-羧酸第三丁酯129mg，產率83%。MS m/z(ESI)：707[M+H]+。
步驟3：4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(八氫-6H-吡咯[3,4-b]吡啶-6-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-異吲哚-4-羧酸第三丁酯(126mg，0.178mmol)溶解到DCM(2mL)當中，然後加入鹽酸二氧六環2mL，攪拌反應1小時，反應完全。飽和NaHCO3水溶液淬滅反應，DCM萃取，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1] 庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(八氫-6H-吡咯[3,4-b]吡啶-6-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物17)62mg，產率57%。MS m/z(ESI)：607[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.73(s，1H)，8.67(s，1H)，8.60(s，1H)，8.29(s，1H)，8.09(d，1H)，7.68-7.70(m，1H)，7.62(d，2H)，6.76(d，1H)，4.18(m，1H)，3.82(m，3H)，3.79(s，1H)，3.68(d，2H)，3.61(d，2H)，3.54(s，2H)，3.10-3.13(m，1H)，2.91-2.95(m，3H)，2.69-2.79(m，3H)，2.41-2.47(m，2H)，2.00-2.04(m，2H)，1.57-1.63(m，3H)，1.23-1.34(m，2H)。
實施例18：化合物18的合成
Figure 110120472-A0305-02-0122-119
步驟1：第三丁基5-(2-氯乙基)八氫-1H-吡咯[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯
將八氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(350mg，1.5mmol)、碳酸銫(1.5g，4.6mmol)溶解到DMF(3mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(665mg，4.6mmol)，室溫攪拌 反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)，得到第三丁基5-(2-氯乙基)八氫-1H-吡咯[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯250mg，產率56%。MS m/z(ESI)：289[M+H]+。
步驟2：第三丁基5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯
將第三丁基5-(2-氯乙基)八氫-1H-吡咯[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯(250mg，0.86mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(4mL)當中，加入碳酸銫(214mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應18小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到第三丁基5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-羧酸148mg，產率95%。MS m/z(ESI)：707[M+H]+。
步驟3：4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(八氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將第三丁基5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)八氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯(148mg，0.2mmol)溶解到DCM(3mL)當中，然後加入鹽酸二氧六環6mL，攪拌反應1小時，反應完全。移除溶劑，NaHCO3水溶液稀釋，DCM萃取，水洗，乾燥，濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(八氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物18)35mg，產率27%。MS m/z(ESI)：607[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.74(s，1H)，8.67(s，1H)，8.60(s，1H)，8.29(s，1H)，8.09(d，1H)，7.68-7.70(m，1H)，7.62(d，2H)，6.76(d，1H)，4.23(m，2H)，3.82(m，3H)，3.79(s，1H)，3.68(d，2H)，3.61(d，2H)，3.54(s，2H),3.92-3.00(m，2H)，2.78-2.82(m，1H)，2.70-2.72(m，2H)，2.53-2.55(m，2H)，2.40-2.43(m，2H)，2.16-2.22(m， 1H)，2.03-2.09(m，1H)，1.67-1.76(m，2H)，1.57-1.63(m，2H)，1.44-1.50(m，1H)，1.23(s，2H)。
實施例19：化合物19的合成
Figure 110120472-A0305-02-0125-120
步驟1：第三丁基2-(2-氯乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-2-甲酸基酯
將2,6-二氮雜螺[3.5]壬烷-6-甲酸第三丁酯(300mg，0.55mmol)、碳酸銫(899mg，2.76mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(238mg，1.66mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)，得到第三丁基2-(2-氯乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-羧酸酯250mg，產率100%。MS m/z(ESI)：289[M+H]+。
步驟2：第三丁基2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-羧酸酯
將第三丁基2-(2-氯乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-羧酸酯(126mg，0.44mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(2mL)當中，加入碳酸銫(214mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應18小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得到第三丁基2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-羧酸酯61mg，產率39%。MS m/z(ESI)：706[M+H]+。
步驟3：6-(2-(2,6-二氮螺環[3.5]壬-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將第三丁基2-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,6-二氮螺環[3.5]壬烷-6-羧酸酯(61mg，0.086mmol)溶解到DCM(3mL)當中，然後加入TFA(1mL)，攪拌反應1小時，反應完全。移除溶劑，飽和NaHCO3水 溶液中和，DCM萃取，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到6-(2-(2,6-二氮螺環[3.5]壬-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物19)20mg，產率38%。MS m/z(ESI)：607[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.71(d，1H)，8.66(d，1H)，8.61(s，1H)，8.29(d，1H)，8.09(d，1H)，7.68-7.70(m，1H)，7.57(d，1H)，6.76(d，1H)，4.09(m，2H)，3.82(m，3H)，3.79(s，1H)，3.68(d，2H)，3.61(d，2H)，3.54(s，2H)，3.15(d，2H)，3.00(s，1H)，2.95(d，2H)，2.79-2.85(m，4H)，2.55-2.58(m，1H)，1.67-1.70(t，2H)，1.61(d，1H)，1.51-1.52(m，2H)，1.25-1.27(m，2H)。
實施例20：化合物20的合成
Figure 110120472-A0305-02-0127-185
步驟1：6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮螺環[3.4]辛烷
將2-氧雜-6-氮螺[3.4]辛烷(300mg，0.94mmol)、碳酸銫(925mg，2.84mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(407mg，2.84mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應 完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮螺環[3.4]辛烷100mg，產率18%。MS m/z(ESI)：176[M+H]+。
步驟2：6-(2-(2-氧雜-6-氮螺環[3.4]辛-6-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮螺環[3.4]辛烷(77mg，0.44mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(2mL)當中，加入碳酸銫(214mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應18小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)得到6-(2-(2-氧雜-6-氮螺環[3.4]辛-6-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物20)10mg，產率7.6%。MS m/z(ESI)：594[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.71(d，1H)，8.64(d，1H)，8.58(s，1H)，8.27(d，1H)，8.07(d，1H)，7.66-7.68(m，1H)，7.60(d，1H)，6.74(d，1H)，4.21(t，2H)，3.80(m，3H)，3.77(s，1H)，3.66(d，2H)，3.58-3.61(d，3H)，3.55(s，3H)， 2.80(m，5H)，2.47-2.57(m，5H)，2.01(t，2H)，1.59-1.62(m，1H)。
實施例21：化合物21的合成
Figure 110120472-A0305-02-0129-186
步驟1：第三丁基8-(2-氯乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯
將2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-2-甲酸第三丁酯(350mg，1.45mmol)，碳酸銫(1.5g，4.36mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(624mg,4.36mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)，得到第三丁基8-(2-氯乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯192mg，產率43%。
步驟2：第三丁基8-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯
將第三丁基8-(2-氯乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯(192mg，0.66mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(2mL)當中，加入碳酸銫(214mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應3小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得第三丁基8-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯158mg，產率100%。MS m/z(ESI)：721[M+H]+。
步驟3：6-(2,8-二氮螺[4.5]癸-8-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將第三丁基8-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,8-二氮螺[4.5]癸烷-2-羧酸酯(158mg，0.21mmol)溶解到DCM(6mL)當中，然後加入TFA(2mL)，攪拌反應1小時，反應完全。移除溶劑，飽和NaHCO3水 溶液中和，DCM萃取，水洗，乾燥，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得到6-(2,8-二氮螺[4.5]癸-8-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物21)54mg，產率39%。MS m/z(ESI)：621[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.71(d，1H)，8.64(d，1H)，8.58(s，1H)，8.26(d，1H)，8.07(d，1H)，7.65-7.68(m，1H)，7.59(d，1H)，6.73(d，1H)，4.21(t，2H)，3.80(m，3H)，3.77(s，1H)，3.66(d，2H)，3.61(d，2H)，3.58(s，2H)，3.51(s，2H)，2.98(t，1H)，271-2.73(m，3H)，2.54-2.55(m，1H)，2.39-2.43(m，4H)，1.54-1.60(m，3H)，1..48(m，4H)。
實施例22：化合物22的合成
Figure 110120472-A0305-02-0131-187
步驟1：合成3-(2-氯乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯
將3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯(300.0mg，1.51mmol)、碳酸銫(1.47g，4.51mmol)溶於DMF(3mL)中，加入1-溴-2-氯乙烷(650.0mg，4.51mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-(2-氯乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯170mg，產率43%。MS m/z(ESI)：261.0[M+H]+。
步驟2：合成3-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸乙酯
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(100.0mg，0.22mmol)，3-(2-氯乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸第三丁酯(170.0mg，0.65mmol)，碳酸銫(210.0mg，0.65mmol)溶於DMF(3mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸乙酯130mg，產率87%。MS m/z(ESI)：679.2[M+H]+。
步驟3：合成6-(2-(3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-羧酸乙酯(130.0mg，0.20mmol)溶於二氯甲烷(2mL)中，加入4M HCl/dioxane(5mL)，室溫下攪拌2h，監測反應完全。濃縮反應液，加水，加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至中性或者偏鹼性，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物22)15mg，產率14%。MS m/z(ESI)：579.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.77(d，J=2.1Hz，1H)，8.67(d，J=1.4Hz，1H)，8.62(s，1H)，8.30(d，J=1.4Hz，1H)，8.10(d，J=2.1Hz，1H)，7.70(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.63(d，J=2.1Hz，1H)，6.78(d，J=8.5Hz，1H)，4.32(t，J=5.5Hz，2H)，4.00(s，2H)，3.83(s，3H)，3.69(d，J=5.9Hz，2H)，3.62(d，J=12.3Hz，2H)，3.54(s，2H)， 3.26(d，J=11.3Hz，4H)，3.06(dd，J=12.5，8.4Hz，4H)，2.00(dd，J=19.4，8.0Hz，2H)，1.62(d，J=8.7Hz，1H)，1.35(d，J=8.9Hz，1H).
實施例23：化合物23的合成
Figure 110120472-A0305-02-0134-188
步驟1：合成5-(2-氯乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸第三丁酯
將2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸第三丁酯(200.0mg，0.94mmol)，碳酸銫(0.92g，2.83mmol)溶於DMF(3mL)中，加入1-溴-2-氯乙烷(400.0mg，2.83mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到5-(2-氯乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸第三丁酯155mg，產率60%。MS m/z(ESI)：275.0[M+H]+。
步驟2：合成5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸甲酯
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲 腈(100.0mg，0.22mmol)，5-(2-氯乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸第三丁酯(155.0mg，0.57mmol)，碳酸銫(210.0mg，0.65mmol)溶於DMF(3mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸甲酯123mg，產率81%。MS m/z(ESI)：693.2[M+H]+。
步驟3：合成6-(2-(2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-5-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將5-(2-((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基第三丁基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)乙基)-2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-2-羧酸甲酯(123.0mg，0.18mmol)溶於二氯甲烷(3mL)中，加入TFA(0.1mL)，室溫下攪拌3h，監測反應完全。濃縮反應液，加水，加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至中性或者偏鹼性，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2,5-二氮雜螺[3.4]辛烷-5-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-甲腈(化合物23)80mg，產率76%。MS m/z(ESI)：593.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.80(d，J=32.2Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.59(d，J=5.1Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.14(d，J=23.3Hz，1H)，7.69(s，2H)，6.78(d，J=7.0Hz，1H)，4.26(s，2H)，3.88(s，3H)，3.82(d，J=13.5Hz，3H)，3.75-3.62(m，2H)，3.61(d，J=12.4Hz，2H)，3.53(s，2H)，2.16(d，J=13.5Hz，2H)，1.33(d，J=8.7Hz，1H)，1.25(dd，J=18.1，13.5Hz，8H)，0.84(d，J=7.0Hz，2H).
實施例24：化合物24的合成
Figure 110120472-A0305-02-0136-189
步驟1：合成3-(2-氯乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷
將3-氮雜螺[5.5]十一烷(300mg，1.96mmol)、碳酸銫(1.91g，5.87mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(1.12g,7.83mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-(2-氯乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷192mg。MS m/z(ESI)：216.1[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-(2-氯乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷(192mg，8.9mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(6mL)當中，加入碳酸銫(215.04mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應3小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)，得6-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈35mg。MS m/z(ESI)：634.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 8.74(d，J=1.9Hz，1H)，8.66(d，J=1.4Hz，1H)，8.60(s，1H)，8.28(d，J=1.3Hz，1H)，8.09(d，J=2.1Hz，1H)，7.69(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.62(d，J=2.1Hz，1H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，4.23(t，J=5.4Hz，2H)，3.82(s，4H)，3.82-3.77(m，2H)，3.69(d，J=5.7Hz，2H)，3.62(d，J=12.2Hz，2H)，3.54(s，2H)，2.78-2.68(m，2H)，2.48-2.38(m，4H)，1.42-1.34(m， 10H)，1.321.26(m，4H)，1.24(d，J=7.2Hz，2H)，1.05(t，J=7.0Hz，1H)。
實施例25：化合物25的合成
Figure 110120472-A0305-02-0138-190
步驟1：合成8-(2-氯乙基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷
將1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷(300mg，1.69mmol)、碳酸銫(1.65g，5.07mmol)溶解到DMF(5mL)當中，室溫加入1-溴-2-氯乙烷(968.01mg，6.75mmol)，室溫攪拌反應過夜，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，加水淬滅反應，萃取，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(PE：EA=3：1)，得到8-(2-氯乙基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷150mg。MS m/z(ESI)：204.1[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-8-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將8-(2-氯乙基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷(150mg，0.73mmol)、6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到DMF(6mL)當中，加入碳酸銫 (215.04mg，0.66mmol)，50℃攪拌反應3小時，反應完全。DCM稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=20：1)得6-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物25)45mg。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 8.74(d，J=1.9Hz，1H)，8.66(d，J=1.4Hz，1H)，8.60(s，1H)，8.28(d，J=1.3Hz，1H)，8.09(d，J=2.1Hz，1H)，7.69(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.62(d，J=2.1Hz，1H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，4.23(t，J=5.4Hz，2H)，3.82(s，4H)，3.82-3.77(m，2H)，3.69(d，J=5.7Hz，2H)，3.62(d，J=12.2Hz，2H)，3.54(s，2H)，2.78-2.68(m，2H)，2.48-2.38(m，4H)，1.42-1.34(m，10H)，1.32-1.26(m，4H)，1.24(d，J=7.2Hz，2H)，1.05(t，J=7.0Hz，1H).MS m/z(ESI)：622.1[M+H]+。
實施例26：化合物26的合成
Figure 110120472-A0305-02-0139-191
步驟1：合成3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基4-甲基哌嗪-1-羧酸酯
在0℃條件下，氮氣保護，將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到THF(10mL)當中，加入DIPEA(113.8mg，0.88mmol)，緩慢加入三光氣(65.3mg，0.22mmol)，攪拌反應2小時後，滴加N-甲基哌嗪(66.1mg，0.66mmol)至反應體系中繼續攪拌過夜，反應完。飽和碳酸氫鈉淬滅，EA(2*10mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(20mL)洗，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基4-甲基哌嗪-1-羧酸酯(化合物26)65mg。MS m/z(ESI)：581.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 9.10(d，J=1.9Hz，1H)，8.74(s，1H)，8.66(d，J=1.4Hz，1H)，8.32(d，J=1.3Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.83(d，J=1.9Hz，1H)，7.70(dd，J=8.5，2.3Hz，1H)，6.78(d，J=8.5Hz，1H)，3.83(s，4H)，3.80(s，2H)，3.74-3.43(m，11H)，2.41(d，J=17.1Hz，4H)，2.25(s，3H)。
實施例27：化合物27的合成
Figure 110120472-A0305-02-0141-192
步驟1：合成3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基]吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基嗎啉-4-羧酸酯
在0℃條件下，氮氣保護，將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.22mmol)溶解到THF(10mL)當中，加入DIPEA(113.8mg，0.88mmol)，緩慢加入三光氣(65.3mg，0.22mmol)，攪拌反應2小時後，滴加嗎啉(57.6mg，0.66mmol)至反應體系中繼續攪拌過夜，反應完。飽和碳酸氫鈉淬滅，EA(2*10mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(20mL)洗，減壓濃縮移除溶劑，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)，得3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2基]吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基嗎啉-4-羧酸酯(化合物27)36mg。MS m/z(ESI)：721[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 9.10(d，J=1.9Hz，1H)，8.73(s，1H)，8.65(d，J=1.3Hz，1H)，8.31(d，J=1.3 Hz，1H)，8.09(d，J=1.9Hz，1H)，7.84(d，J=1.9Hz，1H)，7.69(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，3.81(d，J=12.0Hz，5H)，3.74-3.59(m，11H)，3.54(s，2H)，3.46(s，2H)，2.55(d，J=6.7Hz，1H)，1.62(d，J=8.5Hz，1H).MS m/z(ESI)：568.3[M+H]+。
實施例28：化合物28的合成
Figure 110120472-A0305-02-0142-193
步驟1：合成4-甲氧基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將化合物6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，3.96mmol)、吡啶-2-基甲胺(643.4mg，5.95mmol)、CuI(75.4mg，0.396mmol)，L-脯氨酸(91.3mg，0.793mmol)和K3PO4(1.68mg，7.93mmol)，溶解在DMSO(8mL)中，然後切換氮氣保護，該反應液在90℃下攪拌過夜，反應完全後，飽和食鹽水(10mL)洗，濃縮有機相，管柱層析純化(PE：EA=3：1)， 得到4-甲氧基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈300mg。MS m/z(ESI)：280.1[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-甲氧基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g，0.71mmol)溶解在DMF(4mL)中，然後再加入正十二硫醇(0.34mL)，加熱反應至45℃，緩慢加入NaOH水溶液12N(0.13mL)升溫至50℃反應液在氮氣保護下攪拌過夜，反應完全後，加水(10mL)稀釋，50%檸檬酸水溶液調pH至5-6，EA(2*10mL)，合併有機相飽和食鹽水(20mL)洗，濃縮ISCO管柱層析純化(DCM/MeOH=10：1)，得4-羥基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈100mg。MS m/z(ESI)：266.2[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.38mmol)，溶於DMA(10mL)，加入DIPEA(0.13mL，0.76mmol)，緩慢向反應液中加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(161.7mg，0.45mmol)，然後在室溫下攪拌反應2h，LCMS監測反應完全後，用水(10mL)淬滅反應，EA(10 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-氰基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯88mg。MS m/z(ESI)：398.2[M+H]+。
步驟4：合成4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在0℃條件下，氮氣保護將化合物3-氰基-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(88mg，0.22mmol)、6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(195.2mg，0.33mmol)、Pd(Ph3P)4(25.4mg，0.022mmol)和CuI(4.2mg，0.022mmol)，溶解在1,4-二甲苯(10mL)中，反應體系攪拌均勻，緩慢升溫至140℃，繼續攪拌反應過夜，LCMS監測反應完全後，用飽和NaHCO3水溶液(10mL)淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，有機相飽和NaCl水洗，乾燥濃縮，管柱層析純化DCM/MeOH(10：1)得到(4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物28)32mg。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.57(d，J=4.1Hz，1H)，8.53(d，J=1.3Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.29(d，J=1.2 Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.95(d，J=1.8Hz，1H)，7.79(td，J=7.7，1.8Hz，1H)，7.70(dd，J=8.4，2.1Hz，1H)，7.48(t，J=4.6Hz，2H)，7.30(dd，J=6.7，5.0Hz，1H)，6.75(dd，J=16.2，7.3Hz，2H)，5.43-5.40(m，1H)，4.46(d，J=6.0Hz，2H)，3.82(s，4H)，3.79(s，2H)，3.74-3.48(m，7H)，2.55(s，1H)，1.62(d，J=8.4Hz，1H).MS m/z(ESI)：545.3[M+H]+。
實施例29：化合物29的合成
Figure 110120472-A0305-02-0145-194
步驟1：合成6-溴-4-(苄氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-溴-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，0.71mmol)溶解在DMF(4mL)中，然後再加入正十二硫醇(1.5mL)，加熱反應至45℃，緩慢加入NaOH水溶液12N(0.6mL)升溫至50℃反應液在氮氣保護下攪拌過夜，反應完全後，加水(10mL)稀釋，50%檸檬酸水溶液調ph至5-6，EA(2*10mL)，合併有機相飽和食鹽水(20mL)洗，濃縮得到產物6-溴-4-羥基-吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.8g，直接投入下一步反應。將產物溶解在(10mL)DMA溶劑中，加入苄溴(1.2g，0.67mmol)和Cs2CO3(3.28g，10.08mmol)，加熱攪拌過夜，反應完後，飽和食鹽水(30mL)洗，濃縮有機相，ISCO管柱層析純化(PE：EA=1：2)，得6-溴-4-(苄氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.0g。MS m/z(ESI)：328.1[M+H]+。
步驟2：合成4-(苄氧基)-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
預先將乙胺鹽酸鹽(0.92g，9.14mmol)溶於(30mL)DMSO溶劑中，加入K2CO3(0.92g，9.14mmol)，中和體系中的鹽酸，反應攪拌2h後靜置，離心取上層清液。用100mL高壓反應瓶，將化合物6-溴-4-(苄氧基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，3.07mmol)，CuI(16.2mg，0.61mmol)，L-脯氨酸(141.6mg，1.23mmol)和K3PO4(1.3g，6.14mmol)，溶解在乙胺的DMSO(30mL)溶液中，然後切換氮氣保護，密封，該反應液在90℃下攪拌過夜，反應完全後，飽和食鹽水(30mL)洗，濃縮有機相，管柱層析純化(PE：EA=3：1)得到4-(苄氧基)-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.68g。MS m/z(ESI)：293.2[M+H]+。
步驟3：合成6-(乙基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-(苄氧基)-6-((吡啶-2-基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.6g，2.05mmol)溶解在HBr(20mL)中，緩慢升溫至80℃回流反應2h，反應完全後，加水(10mL)稀釋，4N的NaOH水溶液調ph至4-5，EA(2*10mL)，合併有機相飽和食鹽水(20mL)洗，濃縮ISCO管柱層析純化(DCM/MeOH=10：1)，得6-(乙基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.26g。MS m/z(ESI)：203.5[M+H]+。
步驟4：3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將6-(乙基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg，0.79mmol)，溶於DMA(10mL)，加入DIPEA(0.27mL，1.58mmol)，緩慢向反應液中加入PhNTf2(340mg，0.95mmol)，然後在室溫下攪拌反應2h，LCMS監測反應完全後，用水(10mL)淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯270mg。MS m/z(ESI)：335.2[M+H]+。
步驟5：合成6-(乙基胺基)-4-(5-(-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在0℃條件下，氮氣保護將化合物3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(100mg，0.30mmol)、6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(263.6mg，0.45mmol)、Pd(Ph3P)4(34.65mg，0.03mmol)和CuI(5.7mg，0.03mmol)，溶解在1,4-二甲苯(10mL)中，反應體系攪拌均勻，緩慢升溫至140℃，繼續攪拌反應過夜，LCMS監測反應完全後，用飽和NaHCO3水溶液(10mL)淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，有機相飽和NaCl水洗，乾燥濃縮，管柱層析純化DCM/MeOH(10：1)，得到6-(乙基胺基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物29)34mg。MS m/z(ESI)：482.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.52(d，J=1.3Hz，1H)，8.40(s，1H)，8.28(d，J=1.2Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.97(d，J=1.8Hz，1H)，7.69(d，J=8.5Hz，1H)，7.32(d，J=1.9Hz，1H)，6.76(d，J=8.4Hz，1H)，5.95(t，J=5.3Hz，1H)，3.81(s，1H)，3.80(d，J=8.1Hz，1H)，3.74-3.47(m， 2H)，3.13-2.99(m，1H)，1.21(t，J=7.1Hz，1H)。
實施例30：化合物30的合成
Figure 110120472-A0305-02-0149-195
步驟1：合成7-(2-氯乙基)-2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷
將2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷(0.2g，1.57mmol)、碳酸銫(1.54g，4.72mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.68g，4.72mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到7-(2-氯乙基)-2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷150mg。MS m/z(ESI)：190.1[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、7-(2-氯乙基)-2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷(84mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃 取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物30)50mg。MS m/z(ESI)：608.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.83(s，1H)，8.58(s，1H)，8.32(d，J=2.4Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.67(dd，J=8.4，1.8Hz，1H)，7.31(s，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(d，J=8.4Hz，1H)，4.23(d，J=62.7Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.66-3.42(m，13H)，2.27(s，4H)，1.62-1.33(m，7H).
實施例31：化合物31的合成
Figure 110120472-A0305-02-0150-196
步驟1：合成8-(2-氯乙基)-3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷
將3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷(0.3g，2.65mmol)、碳酸銫(1.72g，5.30mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.76g，5.30mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管 柱層析，得到8-(2-氯乙基)-3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷120mg。MS m/z(ESI)：176.1[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、8-(2-氯乙基)-3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷(78mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物31)60mg。MS m/z(ESI)：594.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.75(d，J=1.8Hz，1H)，8.67(d，J=1.0Hz，1H)，8.61(s，1H)，8.30(s，1H)，8.10(s，1H)，7.70(d，J=6.4Hz，1H)，7.63(d，J=2.0Hz，1H)，6.78(d，J=8.5Hz，1H)，4.23(s，2H)，3.81(d，J=14.3Hz，5H)，3.74-3.49(m，8H)，3.42(d，J=10.0Hz，2H)， 3.19(s，2H)，2.68(s，2H)，2.55(s，1H)，1.88(s，2H)，1.75(d，J=7.1Hz，2H)，1.63(d，J=8.5Hz，1H)。
實施例32：化合物32的合成
Figure 110120472-A0305-02-0152-197
步驟1：合成7-(2-氯乙基)-1,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-酮
將1,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-酮(0.3g，2.12mmol)、碳酸銫(2.09g，6.43mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.91g，6.43mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到7-(2-氯乙基)-1,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-酮150mg。MS m/z(ESI)：203.12[M+H]+。
步驟2：合成4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(2-氧代-1,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g，0.33mmol)、7-(2-氯乙基)-1,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-酮(134mg，0.66mmol)、碳酸銫(0.22g，0.66mmol)溶於DMA(5 mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(2-氧代-1,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈40mg。MS m/z(ESI)：621.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.74(d，J=2.1Hz，1H)，8.67(d，J=1.4Hz，1H)，8.61(s，1H)，8.29(d，J=1.3Hz，1H)，8.21(s，1H)，8.10(d，J=2.1Hz，1H)，7.70(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.62(d，J=2.1Hz，1H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，4.25(t，J=5.6Hz，2H)，3.84-3.75(m，5H)，3.62(dt，J=49.8，10.5Hz，7H)，2.77(t，J=5.4Hz，2H)，2.60(dd，J=33.9，6.2Hz，4H)，2.42(s，2H)，1.67(dd，J=19.3，11.5Hz，4H)，1.47(s，1H)。
實施例33：化合物33的合成
Figure 110120472-A0305-02-0153-198
步驟1：合成2-(2-氯乙基)-6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷
將6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷(0.3g，2.36mmol)、碳酸銫(1.53g，4.72mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2- 氯乙烷(0.68g，4.72mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到2-(2-氯乙基)-6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷120mg。MS m/z(ESI)：190.2[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)，2-(2-氯乙基)-6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷(84mg，0.44mmol)，碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(6-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物33)50mg。MS m/z(ESI)：608.3[M+H]+。1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.83(s，1H)，8.58(s，1H)，8.32(d，J=2.4Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.67(dd，J=8.4，1.8Hz，1H)，7.31(s，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(d，J=8.4Hz，1H)，4.23(d，J=62.7Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.66-3.42(m， 11H)，2.27(s，6H)，1.62-1.33(m，7H)。
實施例34：化合物34的合成
Figure 110120472-A0305-02-0155-199
步驟1：合成2-(2-氯乙基)-5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛烷
將5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛烷(0.3g，2.65mmol)，碳酸銫(1.72g，5.30mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.76g，5.30mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到2-(2-氯乙基)-5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛烷130mg。MS m/z(ESI)：176.5[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、2-(2-氯乙基)-5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛烷(78mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃 取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(5-氧雜-2-氮雜螺[3.4]辛-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物34)50mg。MS m/z(ESI)：594.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.71(d，J=1.9Hz，1H)，8.67(d，J=1.3Hz，1H)，8.61(s，1H)，8.30(d，J=1.2Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.70(d，J=7.1Hz，1H)，7.61(d，J=2.0Hz，1H)，6.78(d，J=8.5Hz，1H)，4.15(s，2H)，3.82(d，J=12.8Hz，5H)，3.74-3.42(m，11H)，3.23(s，2H)，2.94(s，2H)，2.56(s，1H)，2.02(t，J=7.2Hz，2H)，1.86-1.77(m，2H)。
實施例35：化合物35的合成
Figure 110120472-A0305-02-0156-200
步驟1：合成9-(2-氯乙基)-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-1-酮
將2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-1-酮(0.4g，2.17mmol)、碳酸銫(2.12g，6.51mmol)加入到DMF(10mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.94g，6.51mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應 完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到9-(2-氯乙基)-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-1-酮160mg。MS m/z(ESI)：247.3[M+H]+。
步驟2：合成4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(-1-氧代-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g，0.33mmol)、9-(2-氯乙基)-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-1-酮(163mg，0.66mmol)、碳酸銫(0.22g，0.66mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)-6-(2-(-1-氧代-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈40mg。MS m/z(ESI)：649.6[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.77(d，J=2.1Hz，1H)，8.67(d，J=1.4Hz，1H)，8.62(s，1H)，8.29(d，J=1.3Hz，1H)，8.21(s，1H)，8.00(d，J=2.1Hz，1H)，7.70(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.62(d，J=2.1Hz，1H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，4.25(t，J=5.6Hz，2H)，3.84-3.75(m， 5H)，3.62(dt，J=49.8，10.5Hz，7H)，2.77(t，J=5.4Hz，4H)，2.60(dd，J=33.9，6.2Hz，6H)，2.42(s，2H)，1.67(dd，J=19.3，11.5Hz，4H)，1.57(s，1H)。
實施例36：化合物36的合成
Figure 110120472-A0305-02-0158-201
步驟1：合成6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷
將2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(0.3g，3.03mmol)、碳酸銫(2.96g，9.09mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(1.3g，9.09mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷180mg。MS m/z(ESI)：162.3[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、6-(2-氯乙基)-2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷 (74mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物36)60mg。MS m/z(ESI)：580.5[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.66(dd，J=7.0，1.7Hz，2H)，8.59(s，1H)，8.28(d，J=1.3Hz，1H)，8.08(d，J=2.0Hz，1H)，7.68(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.58(d，J=2.1Hz，1H)，6.76(d，J=8.5Hz，1H)，4.59(s，4H)，4.05(t，J=5.2Hz，2H)，3.79(d，J=10.8Hz，5H)，3.71-3.48(m，7H)，3.37(s，5H)，2.73(t，J=4.9Hz，2H).
實施例37：化合物37的合成
Figure 110120472-A0305-02-0159-202
步驟1：合成9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷
將3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷(0.3g，1.93mmol)、碳酸銫(1.88g，5.80mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1- 溴-2-氯乙烷(0.83g，5.80mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷180mg。MS m/z(ESI)：218.5[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-9-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、9-(2-氯乙基)-3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷(97mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL)中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-9-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物37)50mg。MS m/z(ESI)：636.4[M+H]+。1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.73(s，1H)，8.58(s，1H)，8.32(d，J=2.4Hz，1H)，7.76(dd，J=8.8，2.5Hz，1H)，7.67(dd，J=8.4，1.8Hz，1H)，7.31(s，1H)，6.93(d，J=8.9Hz，1H)，6.80(d，J=8.4Hz，1H)，4.23(d，J=62.7 Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.66-3.42(m，13H)，2.47(s，4H)，1.62-1.33(m，11H)。
實施例38：化合物38的合成
Figure 110120472-A0305-02-0161-203
步驟1：合成2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷
將2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷(0.2g，2.06mmol)、碳酸銫(2.01g，6.18mmol)加入到DMF(5mL)中，再加入1-溴-2-氯乙烷(0.88g，6.18mmol)，室溫下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷100mg。MS m/z(ESI)：160.7[M+H]+。
步驟2：合成6-(2-(2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、2-(2-氯乙基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷(71mg，0.44mmol)、碳酸銫(0.15g，0.44mmol)溶於DMA(5mL) 中，50℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-(2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)乙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物38)45mg。MS m/z(ESI)：578.1[M+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.81(s，1H)，8.69-8.60(m，2H)，8.29(d，J=1.2Hz，1H)，8.08(s，1H)，7.67(t，J=5.1Hz，2H)，6.76(d，J=8.5Hz，1H)，5.75(s，1H)，4.44(s，2H)，3.79(d，J=8.8Hz，5H)，3.61(dd，J=28.5，15.9Hz，7H)，2.53(s，2H)，2.02-1.79(m，2H)，1.68-1.21(m，7H)，0.91-0.74(m，2H)。
實施例39：化合物39的合成
Figure 110120472-A0305-02-0162-204
步驟1：合成2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸鹽
將3-羥基-2,2-二甲基丙腈(1.0g，10.1mmol)、三乙胺(1.53g，15.2mmol)加入到DCM(10mL)中，將反應液降溫至0℃，然後再慢慢加入對甲苯磺醯氯(1.92g，10.1mmol)，反應液室溫下攪拌反應2小時，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機 相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸鹽1.5g。
步驟2：合成6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g，0.33mmol)，2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸鹽(170mg，0.66mmol)，碳酸銫(0.22g，0.66mmol)溶於DMF(5mL)中，80℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物39)60mg。MS m/z(ESI)：536.1[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 8.79(d，J=2.1Hz，1H)，8.68(d，J=1.4Hz，1H)，8.62(s，1H)，8.28(d，J=1.4Hz，1H)，8.08(s，1H)，7.68(dd，J=7.4,2.2Hz，2H)，6.75(d，J=8.5Hz，1H)，4.20(s，2H)，3.79(d，J=11.5Hz，5H)，3.71-3.49(m，7H)，2.53(s，1H)，1.44(s，6H)。
實施例40：化合物40的合成
Figure 110120472-A0305-02-0164-205
步驟1：合成3-((甲苯磺醯氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸第三丁酯
將(1R，5S)-3-(羥甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸第三丁酯(0.5g，2.07mmol)，三乙胺(0.32g，3.11mmol)加入到DCM(10mL)中，將反應液降溫至0℃，然後再慢慢加入對甲苯磺醯氯(0.4g，2.07mmol)，反應液室溫下攪拌反應2小時，加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-((甲苯磺醯氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸第三丁酯0.6g。
步驟2：合成第三丁基3-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲 腈(0.15g，0.33mmol)、(1R，5S)-3-((甲苯磺醯氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸第三丁酯(182mg，0.66mmol)、碳酸銫(0.22g，0.66mmol)溶於DMF(8mL)中，80℃下攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到第三丁基3-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯110mg。MS m/z(ESI)：678.4[M+H]+。
步驟3：合成6-(((8-氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)甲氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將第三丁基3-(((3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(0.11g，0.16mmol)溶於DCM(5mL)中，然後降溫至0℃，將二氧六環鹽酸液(2mL，4mol/L)加入其中，室溫反應2小時，監測反應完全。旋乾反應液，再加入少量水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到6-((8-氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)甲氧基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈40 mg,MS m/z(ESI)：578.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.77(d，J=2.0Hz，1H)，8.65(d，J=1.2Hz，1H)，8.59(s，1H)，8.27(d，J=1.1Hz，1H)，8.08(d，J=2.1Hz，1H)，7.68(dd，J=8.5，2.4Hz，1H)，7.59(d，J=2.0Hz，1H)，6.75(d，J=8.5Hz，1H)，4.06(d，J=7.9Hz，2H)，3.79(d，J=11.4Hz，5H)，3.71-3.48(m，7H)，3.44(s，4H)，2.22(dd，J=15.8，7.9Hz，1H)，2.03-1.89(m，2H)，1.69(s，3H)，1.56(dd，J=24.8，11.3Hz，3H).
實施例41：化合物41的合成
Figure 110120472-A0305-02-0166-206
步驟1：合成3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基異丙基胺基甲酸酯
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.22mmol)、三乙胺(0.067g，0.66mmol)溶於DCM(5mL)中，混合液降溫至0℃，然後再加入異氰酸異丙酯(0.057g， 0.66mmol)，反應1小時，加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基異丙基胺基甲酸酯(化合物41)45mg。MS m/z(ESI)：540.7[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 9.04(d，J=1.8Hz，1H)，8.71(s，1H)，8.66(d，J=1.1Hz，1H)，8.31(d，J=1.2Hz，1H)，8.10(d，J=1.9Hz，1H)，7.99(d，J=7.7Hz，1H)，7.75-7.65(m，2H)，6.76(d，J=8.5Hz，1H)，3.81(d，J=12.0Hz，5H)，3.74-3.50(m，7H)，2.55(d，J=7.0Hz，1H)，1.62(d，J=8.5Hz，1H)，1.16(d，J=6.6Hz，6H).
實施例42：化合物42的合成
Figure 110120472-A0305-02-0167-207
步驟1：合成3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基乙基胺基甲酸酯
將6-羥基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲 腈(0.1g，0.22mmol)、三乙胺(0.067g，0.66mmol)溶於DCM(5mL)中，混合液降溫至0℃，然後再加入異氰酸乙酯(0.047g，0.66mmol)，反應1小時，加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析，得到3-氰基-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-6-基乙基胺基甲酸酯(化合物42)35mg。MS m/z(ESI)：526.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ 9.05(d，J=1.9Hz，1H)，8.72(s，1H)，8.66(d，J=1.2Hz，1H)，8.31(d，J=1.2Hz，1H)，8.13-8.01(m，2H)，7.76-7.65(m，2H)，6.77(d，J=8.5Hz，1H)，3.81(d，J=12.3Hz，5H)，3.72-3.49(m，7H)，3.14(dt，J=12.9，6.5Hz，2H)，2.98(dd，J=7.1，5.7Hz，1H)，2.55(d，J=7.4Hz，1H)，1.12(t，J=7.2Hz，3H)。
實施例47 化合物47的合成
Figure 110120472-A0305-02-0168-208
步驟1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(40mg，0.21mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，碳酸鉀(1.9g，14mmol)溶解到無水DMSO(15mL)中，氮氣保護，加入甲胺鹽酸鹽(940mg，14mmol)。100℃反應10小時，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL*2)萃取和水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經分液、萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg)。MS m/z(ESI)：309.1[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-(甲基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg，0.48mmol)溶解到DCM(3mL)當中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：189.1[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基-6-(甲基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-(甲基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg，0.8mmol)，DIEA(307mg，2.4mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(286mg，0.8mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-(甲基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(180mg)。MS m/z(ESI)：321.3[M+H]+。
步驟4：合成4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-(甲基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.15g，0.46mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(0.20g，0.46mmol)，Pd2(dba)3(46mg，0.05mmol)，x-phos(24mg，0.05mmol)溶解到Dioxane/H2O=20mL/4mL中，氮氣置換三次，100℃反應6h，反應完全，冷卻、濃縮、DCM萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物47)60mg。MS m/z(ESI)： 467.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.28(s,1H),8.13(d,J=1.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.92(d,J=2.7Hz,1H),7.79(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.67(d,J=9.8Hz,1H),7.05(d,J=1.8Hz,1H),6.76(t,J=8.1Hz,2H),5.92(t,J=5.4Hz,1H),3.85(d,J=3.4Hz,4H),3.76-3.62(m,5H),3.50(s,4H),1.03(t,J=7.4Hz,3H).
實施例48 化合物48的合成
Figure 110120472-A0305-02-0171-209
步驟1：合成6-溴-4-(6-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸鹽(1.0g，2.7mmol)溶解在1,4-二氧六環(15mL)和水(2mL)中，再加入6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(1.1g，2.7mmol)、Pd(dppf)2Cl2(0.22g，0.27mmol)、KOAc(0.8g，8.1mmol)，氮氣置換。然後室溫下攪拌反應16h， 監測反應完全後，加水稀釋，乙酸乙酯(30mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，管柱層析得到0.7g 6-溴-4-(6-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物48)，產率54%。MS m/z(ESI)：517.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 9.31(d,J=1.6Hz,1H),8.69(s,1H),8.45-8.34(m,1H),8.04(d,J=2.0Hz,1H),7.82(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.64(t,J=1.9Hz,2H),6.76(dd,J=18.0,8.6Hz,2H),3.80(s,4H),3.72(d,J=11.8Hz,2H),3.66(d,J=5.4Hz,2H),3.51(d,J=20.6Hz,5H).
實施例49 化合物49的合成
Figure 110120472-A0305-02-0172-210
步驟1：合成6-((2-氟乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫氮氣保護下，將6-溴-4-(6-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(600mg，1.2mmol)，碘化亞銅(22mg，0.12mmol)，L-脯氨酸(14mg，0.12mmol)，碳酸鉀(1.6g，12mmol) 溶解到無水DMSO(15mL)中，加入2-氟乙胺鹽酸鹽(1.2g，12mmol)。100℃反應10h，反應完全，冷卻到室溫，加水(30mL)稀釋，EA(50mL*2)萃取，攪拌過濾，分液、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((2-氟乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物49)50mg。MS m/z(ESI)：499.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.40(s,1H),8.34(d,J=2.4Hz,1H),8.09(t,J=3.2Hz,2H),7.77(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.68(d,J=7.6Hz,1H),7.11(d,J=1.8Hz,1H),6.77(t,J=7.7Hz,2H),6.25(t,J=5.8Hz,1H),5.74(s,1H),4.68(t,J=4.7Hz,1H),4.56(t,J=4.7Hz,1H),3.81(s,3H),3.78-3.62(m,4H),3.50(dd,J=25.0,11.4Hz,6H).
實施例50 化合物50的合成
Figure 110120472-A0305-02-0173-211
步驟1：合成6-(((2,2-二氟乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-(6-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲 基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(600mg，1.2mmol)，碘化亞銅(22mg，0.12mmol)，L-脯氨酸(14mg，0.12mmol)，碳酸鉀(1.6g，12mmol)溶解到無水DMSO(15mL)中，氮氣保護，加入2-氟乙胺鹽酸鹽(1.2g，12mmol)。100℃反應10小時，反應完全，冷卻到室溫，加水(30mL)稀釋，EA(50mL*2)萃取，攪拌過濾、分液、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(((2,2-二氟乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物50)80mg。MS m/z(ESI)：517.3[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.43(s,1H),8.37-8.32(m,1H),8.24(d,J=1.9Hz,1H),8.07(s,1H),7.78(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.68(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.14(d,J=2.0Hz,1H),6.77(dd,J=10.8,8.8Hz,2H),6.32(t,J=6.4Hz,1H),3.81(s,3H),3.76-3.47(m,10H),2.53(s,1H),1.58(d,J=8.4Hz,1H),1.22(s,1H).
實施例51 化合物51的合成
Figure 110120472-A0305-02-0174-212
步驟1：合成6-(((2-羥乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-(6-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(600mg，1.2mmol)，碘化亞銅(22mg，0.12mmol)，L-脯氨酸(14mg，0.12mmol)，碳酸鉀(500mg，3.6mmol)溶解到無水DMSO(15mL)中，氮氣保護，加入2-羥基乙胺(220mg，3.6mmol)。100℃反應10小時，反應完全，冷卻到室溫，加水(30mL)稀釋，EA(50mL*2)萃取，攪拌過濾，分液，乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(((2-羥乙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物51)40mg。MS m/z(ESI)：497.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.39(s,1H),8.33(d,J=2.4Hz,1H),8.07(s,1H),8.00(d,J=1.8Hz,1H),7.77(dd,J=8.8,2.3Hz,1H),7.68(d,J=7.9Hz,1H),7.12(d,J=1.9Hz,1H),6.77(t,J=8.0Hz,2H),5.96(t,J=5.6Hz,1H),4.78(t,J=5.3Hz,1H),3.81(s,3H),3.61(ddd,J=41.1,32.8,17.3Hz,9H),3.14(q,J=5.6Hz,2H),1.58(s,1H).
實施例52 化合物52的合成
Figure 110120472-A0305-02-0176-213
步驟1：合成6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙酸甲酯
室溫下，將6-氯煙酸甲酯(2.0g，11.65mmol)，4-氟-1H-吡唑(770mg，8.96mmol)，碳酸鉀(3.7g，34.95mmol)溶解到無水DMF(30mL)當中，氮氣保護，80℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，加水(250mL)，攪拌0.5h，過濾，濾餅經水多次洗滌，烘乾得6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙酸甲酯1.9g，產率95%。MS m/z(ESI)：222.1[M+H]+。
步驟2：合成(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲醇
室溫下，將6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙酸甲酯(1.8g，8.0mmol)溶解到無水THF(50mL)當中，氮氣保護，冷卻到0℃，加入鋁鋰氫(300mg，8.0mmol)，0℃反應15分鐘，反應完全，甲醇(1mL)淬滅反應，EA(50mL)，水(50mL)稀釋反應，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、得到(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲醇1.44g，產率91%。MS m/z(ESI)：194.1[M+H]+。
步驟3：合成6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙醛
室溫下，將(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲醇(1.1g，5.6mmol)溶解到無水DCM(40mL)當中，冷卻到0℃，加入Dess-Martin(2.8g，6.74mmol)，室溫反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析得到6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙醛0.8g，產率74%。MS m/z(ESI)：191.1[M+H]+。
步驟4：合成3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷
室溫下，將6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙醛(0.8g，4.1mmol)，3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(815mg，3.2mmol)，1滴醋酸，溶解到DCE(40mL)當中，冷卻到0℃，反應半小時，加入醋酸硼氫化鈉(2.0g，9.6mmol)，室溫反應2h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析得到3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷310mg，產率21%。MS m/z(ESI)：429.1[M+H]+。
步驟5：合成6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷
室溫下，將3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(306mg，0.7mmol)，聯硼酸頻哪醇酯(533mg，2.1mmol)，Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(57mg，0.07mol),KOAc(206mg，2.1mol)，溶解到Dioxane(10mL)當中，90℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析得到6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷160mg，產率46%。MS m/z(ESI)：477.1[M+H]+。
步驟6：合成6-(乙基胺基)-4-(6-(6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯(102mg，0.3mmol)，6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(160mg，0.33mmol)，Pd2(dba)3(27mg，0.03mmol)，X-phos(28mg，0.06mmol)溶解到Dioxane/H2O=10mL/1mL中，氮氣置換三次，90℃反應過夜，反應完全，冷卻、濃縮、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(乙基胺 基)-4-(6-(6-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物52)51mg，產率：33%。MS m/z(ESI)：535.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.67(s,1H),8.41(d,2H),8.34(s,1H),7.80-8.00(m,4H),7.77-7.79(d 1H),7.04(s,1H),6.78(d,2H),5.93(m,1H),3.73-3.77(m,4H),3.64(s,2H),3.56-3.59(m,2H),3.06-3.09(m,2H),2.56-2.58(m,1H),1.61-1.63(d,1H),1.21-1.24(m,4H)。
實施例53 化合物53的合成
Figure 110120472-A0305-02-0179-214
步驟1：合成6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.6g，1.7mmol)，碘化亞銅(32mg，0.17mmol)，L-脯氨酸(39mg，0.34mmol)，磷酸鉀(1.1g，5.1mmol)溶解 到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護下加入環丙基甲基胺(0.36g，5.1mmol)。120℃反應5h，反應完全後，冷卻到室溫，加入水(10mL)淬滅反應，經EA(30mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.3g。MS m/z(ESI)：349.1[M+H]+。
步驟2：合成6-((環丙基甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g，0.57mmol)溶解到DCM(6mL)當中，然後降溫至0℃，加入TFA(2mL)，繼續反應半小時，反應完全後直接旋乾用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：228.9[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基-6-((環丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將6-((環丙基甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g，0.66mmol)，DIEA(0.26g，1.96mmol)溶解到DMF(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.35g，1.0mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全後，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、 管柱層析(PE：EA=7：1)得到3-氰基-6-((環丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.12g，MS m/z(ESI)：361.1[M+H]+。
步驟4：合成6-((環丙基甲基)胺基)-4-(5-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-((環丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.12g，0.33mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(0.19g，0.33mmol)，Pd(PPh3)4(38mg，0.033mmol)，碘化亞銅(6.2mg，0.033mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換後130℃反應3h，反應完全後，冷卻，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((環丙基甲基)胺基)-4-(5-(6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物53)50mg，MS m/z(ESI)：508.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.52(d,J=1.4Hz,1H),8.40(s,1H),8.28(d,J=1.4Hz,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J=1.9Hz,1H),7.69(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.39(d, J=1.9Hz,1H),6.76(d,J=8.5Hz,1H),6.09(t,J=5.4Hz,1H),3.84-3.75(m,5H),3.61(dd,J=41.9,29.6Hz,6H),3.43(qd,J=7.0,5.1Hz,1H),2.96-2.89(m,2H),2.58-2.51(m,1H),1.04(t,J=7.0Hz,1H),0.52(dd,J=8.0,1.6Hz,2H),0.26(dd,J=4.8,1.3Hz,2H).
實施例54 化合物54的合成
Figure 110120472-A0305-02-0182-215
步驟1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.4g，1.1mmol)，碘化亞銅(22mg，0.11mmol)，L-脯氨酸(26mg，0.22mmol)，磷酸鉀(0.49g，2.2mmol)溶解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護下加入4-氨甲基四氫吡喃(0.26g,2.2mmol)。120℃反應5h，反應完全後，冷卻到室溫，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(30mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧 基)-6-((((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.2g，MS m/z(ESI)：392.3[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-((((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)胺基]吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g，0.51mmol)溶解到DCM(6mL)當中，然後降溫至0℃，加入TFA(2mL)，繼續反應半小時，反應完全後直接旋乾用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：272.9[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
室溫下，將4-羥基-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.1g，0.37mmol)，DIEA(0.15g，1.1mmol)溶解到DMF(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.20g，0.56mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全後，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=7：1)得到3-氰基-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.1g，MS m/z(ESI)：405.3[M+H]+。
步驟4：合成4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(((-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.1g，0.25mmol)，6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(0.15g，0.25mmol)，Pd(PPh3)4(29mg，0.025mmol)，碘化亞銅(4.8mg，0.025mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換後130℃反應3h，反應完全後，冷卻，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-((((-2H-吡喃-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物54)30mg，MS m/z(ESI)：551.2[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.39(s,1H),8.33(d,J=2.3Hz,1H),8.06(s,1H),7.97(d,J=1.7Hz,1H),7.79(dd,J=7.6,3.8Hz,1H),7.67(d,J=8.1Hz,1H),7.08(d,J=1.8Hz,1H),6.77(t,J=8.0Hz,2H),6.05(t,J=5.7Hz,1H),3.86(dd,J=11.3,2.8Hz,2H),3.81(d,J=3.9Hz,4H),3.74-3.63(m,4H),3.50(s,4H),2.96(t,J=6.2Hz,2H),1.90-1.79(m,1H),1.70(d,J=12.4Hz,2H),1.58(d,J= 7.9Hz,1H),1.04(t,J=7.0Hz,2H),0.83(ddd,J=10.9,7.5,2.8Hz,2H).
實施例55 化合物55的合成
Figure 110120472-A0305-02-0185-216
步驟1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.6g，1.7mmol)，碘化亞銅(32mg，0.17mmol)，L-脯氨酸(39mg，0.34mmol)，磷酸鉀(1.1g，5.1mmol)溶解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護下加入四氫吡咯(0.36g，5.1mmol)。120℃反應5h，反應完全後，冷卻到室溫，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(30mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.35g，MS m/z(ESI)：349.5[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.25g，0.72mmol)溶解到DCM(6mL)當中，然後降溫至0℃，加入TFA(2mL)，繼續反應0.5h，反應完全後直接旋乾用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：229.2[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g，0.87mmol)，DIEA(0.34g，2.62mmol)溶解到DMF(5mL)中，然後加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(0.46g，1.3mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全後，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=7：1)得到3-氰基6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.25g，MS m/z(ESI)：361.5[M+H]+。
步驟4：合成4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.2g，0.55mmol)，6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(0.32g，0.55mmol)，Pd(PPh3)4(63mg，0.055mmol)，碘化亞銅(10mg，0.055mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換後130℃反應3h，反應完全後，冷卻，加入水(10mL)淬滅反應，然後EA(20mL*2)萃取，有機相乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物55)60mg，MS m/z(ESI)：507.5[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.44-8.33(m,2H),8.01(dd,J=18.8,1.9Hz,2H),7.80(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),7.08(d,J=2.0Hz,1H),6.74(t,J=8.4Hz,2H),3.78(d,J=2.8Hz,3H),3.74-3.37(m,9H),3.28(s,4H),1.95(t,J=6.5Hz,4H),1.55(d,J=8.3Hz,1H).
實施例56 化合物56的合成
Figure 110120472-A0305-02-0188-217
步驟1：4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，2.8mmol)，碘化亞銅(78mg，0.4mmol)，L-脯氨酸(64mg，0.55mmol)，碳酸鉀(1.1g，7.9mmol)溶解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護，加入三氟乙胺(2.7g，28mmol)。120℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，加EA(50mL)及水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(180mg)，產率18%。MS m/z(ESI)：377.1[M+H]+。
步驟2：4-羥基-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg，0.39mmol)溶解到 甲醇(10mL)當中，加入10%鈀炭(70mg)，氫氣置換三次，50℃反應過夜，反應完全，過濾、濃縮，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：257.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
室溫下，將4-羥基-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(102mg，0.39mmol)，DIEA(0.2mL，1.17mmol)溶解到DMF(5mL)，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(142mg，0.39mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=5：1)得到3-氰基-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(130mg)，產率85%。MS m/z(ESI)：389.1[M+H]+。
步驟4：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(130mg，0.33mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(206mg，0.35mmol)，Pd(PPh3)4(38mg，0.033mmol)，碘化亞銅(6mg，0.033mmol)溶解到二甲苯(10mL)中， 氮氣置換三次，130℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物56)22mg，產率：11%。MS m/z(ESI)：535.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.44(s,1H),8.34(d,2H),8.06(s,1H),7.77(d,1H),7.66(d,1H),7.14(s,1H),6.74-6.78(m,2H),6.56-6.59(m,1H),4.05-4.14(m,2H),4.57(d,2H),3.49-3.80(m,9H),1.56(d,2H)。
實施例57 化合物57的合成
Figure 110120472-A0305-02-0190-218
步驟1：4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(丙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(40mg，0.21mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，碳酸鉀(966mg，7.0mmol)溶 解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護，加入正丙胺(827mg，14mmol)。120℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，加EA(50mL)和水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(丙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg)，產率36%。MS m/z(ESI)：337.1[M+H]+。
步驟2：4-羥基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(丙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg，0.5mmol)溶解到DCM(1mL)當中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：217.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(109mg，0.5mmol)，DIEA(193mg，1.5mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(178mg，0.55mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶 -4-基三氟甲磺酸(170mg)，產率96%。MS m/z(ESI)：349.1[M+H]+。
步驟4：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(170mg，0.48mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(281mg，0.48mmol)，Pd(PPh3)4(55mg，0.048mmol)，碘化亞銅(9mg，0.048mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物57)35mg，產率：14%。MS m/z(ESI)：494.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.32(d,1H),8.06(s,1H),7.92(s,1H),7.77(d,1H),7.66(d,1H),7.04(s,1H),6.74-6.78(m,2H),5.95(m,1H),3.80(s,3H),3.50-3.74(m,9H),2.97-3.02(m,2H),1.55-1.63(m,3H),0.93-0.98(m,3H)。
實施例58 化合物58的合成
Figure 110120472-A0305-02-0193-219
步驟1：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(26mg，0.14mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，磷酸鉀(600mg，2.8mmol)溶解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護，加入N1,N1,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(430mg，4.2mmol)，90℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=20：1)得到6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(240mg)，產率45%。MS m/z(ESI)：380.2[M+H]+。
步驟2：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(240mg，0.63mmol)溶解到DCM(2mL)當中，0℃加入三氟乙酸(3mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：260.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
將6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(164mg，0.63mmol)，DIEA(244mg，1.89mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(338mg，0.94mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(120mg)，產率33%。MS m/z(ESI)：391.1[M+H]+。
步驟4：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(70mg，0.18mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜二 環[3.1.1]庚烷(115mg，0.19mmol)，Pd(PPh3)4(20mg，0.018mmol)，碘化亞銅(3.4mg，0.018mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物58)19mg，產率：19%。MS m/z(ESI)：539.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.64(s,1H),8.47(s,1H),8.28(s,1H),8.18(s,1H),8.05(s,1H),7.68(d,1H),7.58(d,1H),7.04(s,1H),6.73(d,2H),3.35-3.81(m,15H),2.96(s,3H),2.56(s,2H),2.29(m,3H)。
實施例59 化合物59的合成
Figure 110120472-A0305-02-0195-220
步驟1：2-((3-氰基-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺
室溫氮氣保護下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg，1.12mmol)，碘化亞銅(20mg，0.1mmol)，L-脯氨酸(25mg，0.21mmol)，磷酸鉀(480mg，2.2mmol)溶解到無水DMSO(10mL)當中，加入2-胺基-N,N-二甲基乙醯胺(344mg，3.3mmol)，120℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL)，水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(DCM：MeOH=20：1)得2-((3-氰基-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺(280mg)，產率66%。MS m/z(ESI)：378[M+H]+。
步驟2：2-((3-氰基-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺
室溫下，將2-((3-氰基-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺(280mg，0.73mmol)溶解到DCM(10mL)當中，0℃加入三氟乙酸3mL，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：259.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((2-(二甲胺基)-2-氧乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯
室溫下，將2-((3-氰基-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺(190mg，0.73mmol)，DIEA(285mg， 2.2mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(395mg，1.1mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=1：1)得到3-氰基-6-((2-(二甲胺基)-2-氧乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(74mg)，產率25%。MS m/z(ESI)：391.1[M+H]+。
步驟4：2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺
室溫下，將3-氰基-6-((2-(二甲胺基)-2-氧乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(74mg，0.18mmol)，6-(6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-吡)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(121mg，0.2mmol)，Pd(PPh3)4(22mg，0.018mmol)，碘化亞銅(3.6mg，0.018mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應5h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到2-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)胺基)-N,N-二甲基乙醯胺(化合物59)20mg，產率：19%。MS m/z(ESI)：538.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.41(s,1H),8.34(s,1H),8.12(s,1H),8.08(s,1H),7.79(d,1H),7.67(d,1H),7.34(s,1H),6.75-6.82(m,3H),3.80(s,3H),3.63-3.97(m,8H),3.06(s,3H),2.87(s,3H),1.89(s,2H),1.23(s,3H)。
實施例60 化合物60的合成
Figure 110120472-A0305-02-0198-221
步驟1：6-((環己基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg，1.12mmol)，碘化亞銅(20mg，0.1mmol)，L-脯氨酸(25mg，0.21mmol)，磷酸鉀(480mg，2.2mmol)溶解到無水DMSO(5mL)當中，氮氣保護，加入環己基甲胺(379mg，3.3mmol)，120℃反應3h，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL)，水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=5：1)得6-((環己基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg)，產率36%。MS m/z(ESI)：391.2[M+H]+。
步驟2：6-((環己基甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-((環己基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(215mg，0.54mmol)溶解到DCM(5mL)當中，0℃加入三氟乙酸1mL，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：259.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((環己基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯
室溫下，將6-((環己基甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg，0.54mmol)，DIEA(212mg，1.6mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(250mg，0.7mmol)，室溫攪拌反應1h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=1：1)得到3-氰基-6-((環己基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(132mg)，產率59%。MS m/z(ESI)：402.1[M+H]+。
步驟4：6-((環己基甲基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-((環己基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(132mg，0.32mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(187mg，0.32mmol)，Pd(PPh3)4(37mg，0.032mmol)，碘化亞銅(9mg，0.048mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((環己基甲基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物60)10mg，產率：5.5%。MS m/z(ESI)：549.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.32(d,1H),8.06(s,1H),7.90(s,1H),7.77(d,1H),7.66(d,1H),7.07(s,1H),6.75-6.78(t,2H),,3.81(s,3H),3.63-3.72(m,4H),3.49-3.52(m,3H),2.88-2.91(t,2H),1.58-1.84(m,7H),0.96-1.24(m,6H),。
實施例61 化合物61的合成
Figure 110120472-A0305-02-0201-222
步驟1：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，3.5mmol)，N1,N1,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(2.16g，21.1mmol)，K3PO4(3.74g，17.6mmol)，Pd2(dba)3(915mg，1.04mmol)，Xantphos(500mg，1.0mmol)，溶解到Dioxane 20mL中，氮氣置換三次，100℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg)，產率：17%。MS m/z(ESI)：303.1[M+H]+。
步驟2：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg，0.56mmol)溶解到DCM(5 mL)當中，0℃加入4M HCl/Dioxane 3mL，反應0.5h。反應完全，濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：259.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
室溫下，將6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(94mg，0.36mmol)，DIEA(212mg，0.72mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(250mg，0.46mmol)，室溫攪拌反應1h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=1：1)得到3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(107mg)，產率75%。MS m/z(ESI)：392.1[M+H]+。
步驟4：6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(107mg，0.27mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(187mg，0.32mmol)，Pd(PPh3)4(31mg，0.027mmol)，碘化亞銅(8mg，0.042mmol)溶解到二甲苯(10mL)中， 氮氣置換三次，130℃反應3h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物61)11mg，產率：7.5%。MS m/z(ESI)：537.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.64(s,1H),8.47(s,1H),8.28(s,1H),8.18(s,1H),8.05(s,1H),7.58(s,1H),7.04(s,1H),6.73(d,2H),3.35-3.81(m,15H),2.96(s,3H),2.56(s,2H),2.29(m,3H)。
實施例62 化合物62的合成
Figure 110120472-A0305-02-0203-223
步驟1：6-(乙基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g，2.8mmol)，碘化亞銅(53mg，0.28mmol)，L-脯氨酸(48mg，0.42mmol)，碳酸鉀(3.8g，28mmol)溶解 到無水DMSO(15mL)當中，氮氣保護，加入乙胺鹽酸鹽(2.28g，28mmol)。100℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，EA(100mL)及水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(乙基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(470mg)，產率52%。MS m/z(ESI)：323.1[M+H]+。
步驟2：6-(乙基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-(乙基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.28g，7mmol)溶解到DCM(10mL)當中，0℃加入三氟乙酸(10mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：203.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯
室溫下，將6-(乙基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.43g，7mmol)，DIEA(2.7g，21mmol)溶解到DMF(10mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(2.5g，7mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基三氟甲磺酸酯(1.74g)，產率76%。MS m/z(ESI)：335.1[M+H]+。
步驟4：6-(乙基胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-(乙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.9g，2.69mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(1.47g，3.5mmol)，Pd2(dba)3(246mg，0.269mmol)，x-phos(256mg，0.053mmol)溶解到Dioxane/H2O=20mL/4mL中，氮氣置換三次，100℃反應16h，反應完全，冷卻、濃縮除、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(乙基胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物62)1.0g，乙醚重新打漿純化得400mg，產率：31%。MS m/z(ESI)：481.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.32(d,1H),8.06(s,1H),7.92(s,1H),7.77(d,1H),7.66(d,1H),7.04(s,1H),6.74-6.78(m,2H),5.95(m,1H),3.80(s,3H),3.50-3.74(m,9H),1.55-1.63(m,3H),0.93-0.98(m,3H)。
實施例63 化合物63的合成
Figure 110120472-A0305-02-0206-224
步驟1：6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(40mg，0.21mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，碳酸鉀(966mg，7.0mmol)溶解到無水DMSO(10mL)當中，氮氣保護，加入1-胺基-2-甲基丙烷-2-醇(623mg，7mmol)。100℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL)、水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(240mg)，產率47%。MS m/z(ESI)：367.1[M+H]+。
步驟2：4-羥基-6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(240mg，0.65mmol)溶解到DCM(2mL)當中，0℃加入三氟乙酸(2mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：247.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
室溫下，將4-羥基-6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(161mg，0.6mmol)，DIEA(234mg，1.8mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(321mg，0.9mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(80mg)，產率32%。MS m/z(ESI)：379.1[M+H]+。
步驟4：6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(80mg，0.2mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1] 庚烷(136mg，0.23mmol)，Pd(PPh3)4(24mg，0.02mmol)，碘化亞銅(4mg，0.02mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應4h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-((2-羥基-2-甲基丙基)胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物63)13mg，產率：11%。MS m/z(ESI)：524.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.37(s,1H),8.33(s,1H),8.06(s,1H),8.02(s,1H),7.75-7.77(m,1H),7.67(d,1H),7.24(s,1H),6.75(t,2H),5.81(t,1H),4.54(s,1H),3.81(s,1H),3.65-3.72(m,4H),3.48-3.52(m,4H),2.97(d,2H),1.58(s,1H),1.18(s,6H)。
實施例64 化合物64的合成
Figure 110120472-A0305-02-0208-225
步驟1：4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg，1.12mmol)，碘化亞銅(20mg，0.1mmol)，L-脯氨酸(25mg，0.21mmol)，磷酸鉀(480mg，2.2mmol)溶解到無水DMSO(5mL)當中，氮氣保護，加入(1-甲基哌啶-4-基)甲醯胺(422mg，3.3mmol)，120℃反應3h，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL)、水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg)，產率44%。MS m/z(ESI)：406.1[M+H]+。
步驟2：4-羥基-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.49mmol)溶解到DCM(2mL)當中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：271.1[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯
室溫下，將4-羥基-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(140mg，0.49mmol)，DIEA(190mg， 1.47mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(262mg，0.73mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=1：1)得到3-氰基-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(90mg)，產率44%。MS m/z(ESI)：418.1[M+H]+。
步驟4：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲磺酸酯(90mg，0.21mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(126mg，0.21mmol)，Pd(PPh3)4(24mg，0.021mmol)，碘化亞銅(9mg，0.048mmol)溶解到二甲苯(10mL)中，氮氣置換三次，130℃反應4h，反應完全，冷卻、濃縮除去二甲苯、稀釋、萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物64)6mg，產率：5%。MS m/z(ESI)：563.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.32(d,1H),8.06(s,1H),7.90(s,1H),7.77(d,1H),7.66(d,1H),7.07(s,1H),6.75-6.78(t,2H),,3.81(s,3H),3.63-3.72(m,4H),3.49-3.52(m,3H),2.67(s,3H),1.58-1.84(m,7H),0.96-1.24(m,6H)。
實施例65 化合物65的合成
Figure 110120472-A0305-02-0211-226
步驟1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg，1.12mmol)，磷酸鉀(475mg，2.24mmol)，L-proline(25.8mg，0.22mmol)溶解在DMSO(5mL)中，加入(四氫呋喃-3-基)甲胺(0.35mL，3.36mmol)，CuI(21.3mg，0.11mmol)，氮氣保護，然後升溫至120℃，回流5h，監測反應完全，冷卻，加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈230mg，產率54.3%，MS m/z(ESI)：379.0[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(230mg，0.61mmol)溶解在二氯甲烷(4mL)中，冰浴下向體系中加入三氟乙酸(1mL)，室溫攪拌30min，監測反應完全。濃縮反應液得到粗品產物，直接投下一步。
步驟3：合成3-氰基-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(259mg，0.72mmol)以及上一步得到的粗品溶解在DMAc(5mL)中，加入DIPEA(0.4mL，2.42mmol)，室溫攪拌2h，監測反應完全。加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到3-氰基-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸110mg，產率46.6%，MS m/z(ESI)：390.9[M+H]+。
步驟4：合成4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(110mg，0.28mmol)，6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(166mg，0.28mmol)，碘化亞銅(5.39mg，0.03mmol)，四三苯基膦鈀(32.66mg，0.03mmol)溶解在二甲苯(10mL)中，N2保護，然後升溫至135℃，回流4h，監測反應完全，冷卻，加入適量的水，二氯甲烷萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-(((四氫呋喃-3-基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物65)20mg，產率13.2%。MS m/z(ESI)：537.1[M+H]+。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ 8.54(s,1H),8.39(d,J=2.4Hz,1H),8.33(d,J=1.9Hz,1H),8.05(d,J=1.7Hz,1H),7.83(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.50(d,J=2.0Hz,1H),6.77(dd,J=8.6,4.9Hz,2H),6.08(s,1H),3.89-3.36(m,16H),3.22-3.14(m,3H),1.80(m,1H),1.67(m,2H),1.22(s,2H).
實施例66 化合物66的合成
Figure 110120472-A0305-02-0213-227
步驟1：合成4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡嗪-2-基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(220mg，0.6mmol)，6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡嗪-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(370mg，0.64mmol)，碘化亞銅(11mg，0.06mmol)，四三苯基膦鈀(70mg，0.06mmol)溶解在二甲苯(10mL)中，N2保護，然後升溫至135℃，回流3h，監測反應完全，冷卻，加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到4-(5-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡嗪-2-基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物66)0.12g。MS m/z(ESI)：524.5[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 8.65(d,J=1.4Hz,1H),8.54(s,1H),8.35(d,J=2.0Hz,1H),8.28(d,J=1.4Hz,1H),8.08(d,J=1.6Hz,1H),7.77(d,J=2.0Hz,1H),7.68(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),6.76(d,J=8.5Hz,1H),3.86-3.74(m,9H),3.69(d,J=5.1Hz,2H),3.61(d,J=12.6Hz,2H),3.53(s,2H),3.24-3.16(m,4H),2.54(d,J=5.9Hz,2H).
實施例67 化合物67的合成
Figure 110120472-A0305-02-0215-228
步驟1：合成6-(異丁胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(40mg，0.21mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，碳酸鉀(580mg，4.2mmol)溶解到無水DMSO(10mL)中，氮氣保護，加入異丁胺(310mg，4.2mmol)。120℃反應6小時，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL*2)萃取，水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經分液、萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(異丁胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg)。MS m/z(ESI)：351.1[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-(異丁胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-(異丁胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.56mmol)溶解到DCM(3mL) 當中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：231.2[M+H]+。
步驟3：合成3-氰基-6-(異丁基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將4-羥基-6-(異丁胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.87mmol)，DIEA(336mg，2.6mmol)溶解到DMF(5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(310mg，0.87mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到3-氰基-6-(異丁基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(180mg)。MS m/z(ESI)：363.3[M+H]+。
步驟4：合成6-(異丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將3-氰基-6-(異丁基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.3g，0.83mmol),6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(0.35g，0.83mmol)，Pd2(dba)3(73mg，0.08mmol)，X-phos(40mg，0.08mmol)溶解到 Dioxane/H2O=20mL/4mL中，氮氣置換三次，100℃反應6h，反應完全，冷卻、濃縮、DCM萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(異丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物67)80mg，MS m/z(ESI)：509.4[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.34(d,J=2.4Hz,1H),8.06(d,J=1.9Hz,1H),7.92(d,J=1.8Hz,1H),7.77(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.67(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.10(d,J=1.9Hz,1H),6.76(t,J=8.5Hz,2H),5.98(s,1H),3.81(s,3H),3.69(dd,J=27.6,8.8Hz,5H),3.51(d,J=12.3Hz,4H),2.92-2.81(m,2H),1.93-1.83(m,1H),1.58(d,J=8.4Hz,1H),0.97(d,J=6.6Hz,6H).
實施例68 化合物68的合成
Figure 110120472-A0305-02-0217-229
步驟1：合成6-(丁基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.4mmol)，碘化亞銅(40mg，0.21mmol)，L-脯氨酸(32mg，0.28mmol)，碳酸鉀(580mg，4.2mmol)溶解到無水DMSO(10mL)當中，氮氣保護，加入正丁胺(310mg，4.2mmol)。120℃反應6小時，反應完全，冷卻到室溫，EA(50mL*2)萃取，水(50mL)稀釋，攪拌過濾，經分液，萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(丁基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190mg)。MS m/z(ESI)：351.1[M+H]+。
步驟2：合成6-(丁基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-(丁基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190mg，0.5mmol)溶解到DCM(3mL)當中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，產物直接用於下一步，不需要進一步純化。MS m/z(ESI)：231.2[M+H]+。
步驟3：合成6-(丁基胺基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將6-(丁基胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.87mmol)，DIEA(336mg，2.6mmol)溶解到DMF (5mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(310mg，0.87mmol)，室溫攪拌反應0.5h，反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、管柱層析(PE：EA=3：1)得到6-(丁基胺基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(180mg)。MS m/z(ESI)：363.3[M+H]+。
步驟4：合成6-(丁基胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室溫下，將6-(丁基胺基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.3g，0.83mmol)，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜二環[3.1.1]庚烷(0.35g，0.83mmol)，Pd2(dba)3(73mg，0.08mmol)，X-phos(40mg，0.08mmol)溶解到Dioxane/H2O=20mL/4mL中，氮氣置換三次，100℃反應6h，反應完全，冷卻、濃縮、DCM萃取、乾燥、過濾濃縮，管柱層析(DCM：MeOH=10：1)得到6-(丁基胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物68)90mg，MS m/z(ESI)：509.4[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.38(s,1H),8.33(d, J=2.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.92(d,J=1.7Hz,1H),7.77(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.67(d,J=9.8Hz,1H),7.05(d,J=1.8Hz,1H),6.76(t,J=8.1Hz,2H),5.92(t,J=5.4Hz,1H),3.81(d,J=3.4Hz,4H),3.76-3.62(m,5H),3.50(s,4H),3.03(dd,J=12.5,6.8Hz,2H),1.58(d,J=7.3Hz,2H),1.45-1.38(m,2H),0.93(t,J=7.4Hz,3H).
實施例69 化合物69的合成
Figure 110120472-A0305-02-0220-230
步驟1：合成6-(異丙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將化合物6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.4g，1.12mmol)，CuI(53.3mg，0.28mmol)，L-proline(51.8mg，0.45mmol)和K3PO4(475.5mg，2.24mmol)，溶解在DMSO(10mL)溶液中，加入異丙胺(198.6mg，3.36mmol)，然後切換氮氣保護，密封，該反應液在90℃下攪拌過夜，反應完全後，30mL飽和食鹽水洗滌，濃縮有機相，管柱層析純化(PE：EA=3：1)得到0.15g 6-(異丙胺基)-4-((4-甲氧基苄 基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，MS m/z(ESI)：337[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-(異丙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.29g，0.86mmol)溶解在DMC/CF3CO2H(3mL/1mL)中，室溫攪拌反應完全後，加水(10mL)稀釋，滴加4N NaOH水溶液將溶液pH調至4-5，用EA(2*10mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(20mL)洗滌，濃縮有機相，ISCO純化(DCM/MeOH=0~10%)，得6-(異丙基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.26g。MS m/z(ESI)：217[M+H]+。
步驟3：3-氰基-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將6-(異丙胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(185.76mg，0.86mmol)，溶於DMA(10mL)，加入DIPEA(0.6mL，3.44mmol)，緩慢向反應液中加入PhNTf2(460.53mg，1.29mmol)，然後在室溫下攪拌反應2h，LC-MS監測反應完全後，用10mL水淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(20mL)洗滌，濃縮有機相，經管柱層析得到3-氰基-6-(異 丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯260mg。MS m/z(ESI)：349[M+H]+。
步驟4：合成6-(異丙基胺基)-4-(6-((6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在0℃氮氣保護條件下，將化合物3-氰基-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.26g，0.75mmol)，(1R,5S)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-三丁基錫烷基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷(480.52mg，0.82mmol)，Pd(PPh3)4(86.63mg，0.075mmol)和CuI(14.28mg，0.075mmol)，溶解在1,4-二甲苯(10mL)中，反應體系攪拌均勻，緩慢升溫至140℃，繼續攪拌反應過夜，LC-MS監測反應完全後，用10mL飽和NaHCO3水溶液淬滅反應，EA(10mL*3)萃取，有機相飽和NaCl溶液洗滌，乾燥後濃縮，經管柱層析純化(DCM/MeOH=0~10%)得到6-(異丙基胺基)-4-(6-((6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物69)42mg。MS m/z(ESI)：495[M+H]+。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ 8.39(s,1H),8.34(d,J=2.3Hz,1H),8.08(s,1H),7.97(d,J=1.8Hz,1H),7.77 (dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.69(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.03(d,J=1.9Hz,1H),6.77(dd,J=8.5,5.9Hz,2H),5.81(d,J=8.0Hz,1H),4.36(t,J=5.1Hz,1H),3.77-3.63(m,4H),3.62-3.47(m,5H),1.18(d,J=6.3Hz,6H).
實施例70 化合物70的合成
Figure 110120472-A0305-02-0223-231
步驟1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.8g，5.04mmol)，磷酸鉀(2.13g，10.08mmol)，L-proline(60mg，0.50mmol)溶解在DMSO(18mL)中，加入嗎啉(1.32mL，15.12mmol)，CuI(96mg，0.50mmol)，氮氣保護，然後升溫至120℃，回流5h，監測反應完全，冷卻，加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈270mg，產率14.7%。MS m/z(ESI)：365.0[M+H]+。
步驟2：合成4-羥基-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(270mg，0.74mmol)溶解在二氯甲烷(4mL)中，冰浴下，加入三氟乙酸(1mL)，室溫攪拌30min，監測反應完全。濃縮反應液得到粗品產物，直接投下一步。
步驟3：合成3-氰基-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
將N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(316mg，0.88mmol)以及上一步得到的粗品溶解在DMAc(5mL)中，加入DIPEA(0.49mL，0.95mmol)，室溫攪拌2h，監測反應完全。加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到3-氰基-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯210mg，產率75.7%。MS m/z(ESI)：376.9[M+H]+。
步驟4：合成4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
將3-氰基-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(110mg，0.29mmol)，6-(((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷 (188mg，0.32mmol)，碘化亞銅(5.57mg，0.03mmol)，四三苯基膦鈀(34mg，0.03mmol)溶解在二甲苯(10mL)中，N2保護，然後升溫至135℃，回流5h，監測反應完全，冷卻，加入適量的水，二氯甲烷萃取，有機相乾燥濃縮，管柱層析分離得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚基-3-基)吡啶-3-基)-6-嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物70)45mg，產率29.5%。MS m/z(ESI)：523.1[M+H]+。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ 8.54(s,1H),8.39(d,J=2.4Hz,1H),8.33(d,J=1.9Hz,1H),8.05(d,J=1.7Hz,1H),7.83(dd,J=8.8,2.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.50(d,J=2.0Hz,1H),6.77(dd,J=8.6,4.9Hz,2H),3.89-3.36(m,18H),3.22-3.14(m,3H),1.22(s,2H)
理化性質測試：
(a)溶解度測試
實驗方法如下：
1.樣本製備
取5μL以DMSO配置的20mM化合物儲備液，加入至495μL磷酸鹽緩衝液(pH=7.4)(終濃度為200μM)，混勻後於25℃震盪孵育器1000rpm震盪1.5h(n=2)。待完全溶解後，將樣品溶液過濾。取各濾液2μL，加入98μL含內標(甲苯磺丁脲200nM)的乙腈水溶液(v/v=1/1)，混勻1min，於LC-MS/MS進樣分 析。
2.外標一點法
標準溶液配置：取2μL以DMSO配置的20mM化合物儲備液，加入至198μL乙腈(終濃度為200μM)，(n=2)。混勻後於25℃震盪孵育器1000rpm震盪10min(n=2)待完全溶解後，取各濾液2μL，加入198μL含內標的乙腈水溶液(v/v=1/1)，混勻1min，於LC-MS/MS進樣分析。
通過檢測已知濃度的標準溶液峰面積和樣品溶液峰面積，計算樣品溶液濃度。
Figure 110120472-A0305-02-0226-232
3.標準曲線法
標準溶液配置：取2μL以DMSO配置的20mM化合物儲備液，加入至198μL乙腈(終濃度為200μM)，(n=2)。混勻後於25℃震盪孵育器1000rpm震盪10min(n=2)待完全溶解後，取各濾液4μL，加入196μL含內標的乙腈水溶液(v/v=1/1)，即濃度為4000nM，再以含內標乙腈水溶液(v/v=1/1)依次稀釋為濃度分別為2000、500、100、20、4和2nM標準溶液，於LC-MS/MS進樣分析。
各化合物的溶解度由標準曲線法或外標一點法得出。
生物活性測試例1：
(a)體外篩選實驗-HTRF方法檢測化合物對RET的抑制活性
實驗方法如下：
1. 1x激酶緩衝液的配製：5x酶緩衝液與蒸餾水以1：4混勻，終濃度是5mM氯化鎂；1mM二硫蘇糖醇。
2. 用100%二甲基亞碸將測試化合物(5mM儲液)稀釋5倍至1mM，在384孔稀釋板中以1：3進行等比稀釋10個濃度。
3. 使用Echo 550移液系統將0.2μL梯度稀釋的化合物加到384孔板中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
4. 用1x激酶緩衝液配製2x RET(0.1ng/μl)。
5. 在384孔板加入5μL的2x RET，1000g離心30s，室溫孵育10min。
6. 用1x激酶緩衝液配製2x酪氨酸激酶-生物素標記的受質(2μM)和腺嘌呤核苷三磷酸(20μM)混合液。
7. 加入5μL酪氨酸激酶-生物素標記的受質和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以啟動反應。1000g離心30s，封板，室溫孵育30min。
8. 用均相時間分辨螢光技術檢測緩衝液配製2x Sa-XL 665(注：一種試劑)(125μM)和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液。
9. 每空加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液，1000g離心30s，室溫孵育1h。
10. Envision 2104酶標儀615nm和665nm讀板，計算比率(665/615nm)。
11.抑制率計算如下：
Figure 110120472-A0305-02-0228-233
式中，
R0是溶媒空白組的酶標儀板平均比率
R1是測試化合物酶標儀板比率
R2是100%抑制RET酶活性的酶標儀板平均比率
通過將化合物濃度的抑制率值和對數擬合到非線性回歸(劑量反應-可變斜率)中，用GraphPad 6.0軟體計算IC50。
(b)體外篩選實驗-HTRF方法檢測化合物抑制VEGFR2活性測試
實驗方法如下：
1.1x激酶緩衝液配製：5x酶緩衝液與蒸餾水以1：4混勻，終濃度是5mM氯化鎂；1mM二硫蘇糖醇；1mM氯化錳。
2.用100%二甲基亞碸將測試化合物(5mM儲液)稀釋5倍至1mM，在384孔稀釋板中以1：3進行等比稀釋10個濃度。
3.使用Echo 550移液系統將0.2μL梯度稀釋的化合物加到384孔細胞培養板(Corning，3570)中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
4.用1x激酶緩衝液配製2x VEGFR2(0.02ng/μL)。
5.在384孔板加入5μL的2x VEGFR2，1000g離心30s，室溫孵育10min。
6.用1x激酶緩衝液配製2x酪氨酸激酶-生物素標記的受質(2μM)和ATP(8μM)混合液。
7.加入5μL酪氨酸激酶-生物素標記的受質和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以啟動反應。1000g離心30s，封板，室溫孵育40min。
8.用均相時間分辨螢光技術檢測緩衝液配製2x Sa-XL 665(125μM)和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液。
9.每孔加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液，1000g離心30s，室溫孵育1h。
10.Envision 2104酶標儀615nm和665nm讀板，計算 比率(665/615nm)。
11.抑制率計算如下：
Figure 110120472-A0305-02-0230-234
式中，
R0是溶媒空白組的酶標儀板平均比率
R1是測試化合物酶標儀板比率
R2是100%抑制RET酶活性的酶標儀板平均比率
12.通過將化合物濃度的抑制率值和對數擬合到非線性回歸(劑量反應-可變斜率)中，用GraphPad 6.0計算IC50。
(c)體外篩選實驗-CellTiter-Glo發光法檢測化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET/Ba/F3-CCDC6-RET細胞活力測試
實驗步驟：
1.利用Neon®轉染系統方法將包含人源KIF5B-RET/CCDC6-RET cDNA的哺乳動物細胞表達載體導入Ba/F3細胞，經嘌呤黴素篩選過後存活的克隆進行細胞生長抑制功能實驗和蛋白免疫印跡法驗證RET穩定高表達的細胞系。
2.細胞培養於RPMI 1640培養液、10%胎牛血清、1%青黴素-鏈黴素、2μg/mL嘌呤黴素的培養基中，置於37℃、5%二氧化碳細胞培養箱中培養。
3.用100%二甲基亞碸將測試化合物(5mM儲液)稀釋2.5倍至2mM，在384孔稀釋板中以1：3進行等比稀釋10個濃度。
4.使用Echo 550移液系統將0.2μL梯度稀釋的化合物加到384孔細胞培養板(Corning，3570)中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
5.每孔加入40μL含800個Ba/F3-KIF5B-RET/Ba/F3-CCDC6-RET細胞懸液，於5%二氧化碳細胞培養箱培養72h。
6.按每孔20μL Cell Titer-Glo試劑加入細胞培養板，震盪混勻2min以裂解細胞，然後室溫孵育30min，用Envision 2104酶標儀讀取螢光信號值。
7.資料由XLFit 5.0按4參數公式：
Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))擬合計算IC50值。
(d)體外篩選實驗-HTRF方法檢測化合物對RET V804M/RET V804L/RET G810R/RET G810S的抑制活性
實驗方法如下：
1. 1x激酶緩衝液的配製：5x酶緩衝液與蒸餾水以1：4混 勻，終濃度是5mM氯化鎂；1mM二硫蘇糖醇。
2. 用100%二甲基亞碸將測試化合物(5mM儲液)稀釋5倍至1mM，在384孔稀釋板中以1：3進行等比稀釋10個濃度。
3. 使用Echo 550移液系統將0.2μL梯度稀釋的化合物加到384孔板中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
4. 用1x激酶緩衝液配製2x RET V804M/RET V804L/RET G810R/RET G810S(0.1ng/μl)。
5. 在384孔板加入5μL的2x RET V804M/RET V804L/RET G810R/RET G810S，1000g離心30s，室溫孵育10min。
6. 用1x激酶緩衝液配製2x酪氨酸激酶-生物素標記的受質(2μM)和腺嘌呤核苷三磷酸(20μM)混合液。
7. 加入5μL酪氨酸激酶-生物素標記的受質和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以啟動反應。1000g離心30s，封板，室溫孵育40min。
8. 用均相時間分辨螢光技術檢測緩衝液配製4x Sa-XL 665(注：一種試劑)(125μM)。
9. 每空加入5μL Sa-XL 665和5μL酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液，1000g離心30s，室溫孵育1h。
10. Envision 2104酶標儀615nm和665nm讀板，計算比率(665/615nm)。
11. 抑制率計算如下：
Figure 110120472-A0305-02-0233-235
式中，
R0是溶媒空白組的酶標儀板平均比率
R1是測試化合物酶標儀板比率
R2是100%抑制RET酶活性的酶標儀板平均比率
通過將化合物濃度的抑制率值和對數擬合到非線性回歸(劑 量反應-可變斜率)中，用GraphPad 6.0軟體計算IC50。
化合物活性匯總如下表1
Figure 110120472-A0305-02-0233-236
Figure 110120472-A0305-02-0234-237
Figure 110120472-A0305-02-0235-238
結果表明：本專利所設計的化合物均具有較好的RET激酶活性，部分化合物(如化合物29、47、48、49、50、56、57、62、63、66、67、68、69、70)對RET激酶的兩個突變株G810S和G810R也表現出來了良好的抑制活性；同時對VEGFR2激酶具有較好的選擇性。另外，化合物29和52對RET基因融合型CCDC6-RET和KIF5B-RET，RET激酶突變株RET V804M，RET V804L和RET M918T的半數抑制活性(IC50)均小於5nM。此外，所述化合物均具有較好的RET激酶以及RET敏感的細胞抑制活性。
(e)體外篩選實驗-CellTiter-Glo發光法檢測化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET-G810S/G810R突變細胞增殖活性測試
實驗步驟：
1. 收穫處於對數生長期的Ba/F3-KIF5B-RET-G810S/G810R突變細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。
2. 調整細胞濃度；分別添加90μL細胞懸液至96孔板中。
3. 將96孔板中的細胞置於37℃、5% CO2、95%濕度條件下培養過夜。
4. 配製10倍藥物溶液，Ba/F3 KIF5B-RET-G810S檢測最高濃度為2000nM，9個濃度，3.16倍稀釋，在接種有細胞的96孔板中每孔加入10μL藥物溶液，每個藥物濃度設置三個複孔。
5. 將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5% CO2、95%濕度條件下繼續培養72小時，之後進行CTG分析。
6. a)融化CTG試劑並平衡細胞板至室溫30分鐘；b)每孔加入等體積的CTG溶液；c)在定軌搖床上震動5分鐘使細胞裂解；d)將細胞板放置於室溫20分鐘以穩定冷光信號；e)讀取冷光值。
7. 使用GraphPad Prism 7.0軟體分析資料，利用非線性S曲線回歸來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值。細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum細胞對照-Lum培養液對照)×100%。
實驗結果：
化合物細胞活性結果匯總見下表2：
Figure 110120472-A0305-02-0237-239
由表2可以看出，與現有化合物LOXO-292相比，本發明化合物對RET突變細胞表現出更好的抑制活性。
(f)體內篩選實驗-檢測化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET-G810R細胞皮下同種移植腫瘤BALB/c裸鼠的藥效學測試
實驗步驟：
1. Ba/F3-KIF5B-RET-G810R細胞株採用1640培養基(Biological Industries)+10%胎牛血清(BI)+1%雙抗(Penicillin Streptomycin solution，Coring，USA)，37℃ 5%CO2培養，一周2-3次傳代處理。當細胞飽和度為80%~90%時，收取細胞，計數，接種。
2. 當處於對數生長期的細胞達到實驗所需數量時，收集細胞，1000rpm離心5min去上清，用培養基重懸細胞，使用細胞計數儀計數，根據計數結果將原溶液稀釋成活細胞濃度1*10^7個/mL的細胞懸液，細胞活率為96.6%，P10代。
3. 將稀釋後的細胞懸液和基質膠按照1：1比例稀釋。混勻後放置於冰上，用1mL無菌胰島素注射器吸取混懸液，每只小鼠右腋皮下接種細胞懸液0.2mL。即每只小鼠接種Ba/F3-KIF5B-RET-G810R細胞1*10^6個。
4. 接種完成後，逐日觀察腫瘤生長狀態，腫瘤平均體積達到約91.58mm3時將小鼠按腫瘤體積隨機分為7組，每組6只。1個溶劑對照組，6個供試藥物實驗組。
5. 小鼠每天一到五次經口給予各受試化合物，以週一到週五給藥，週末停藥的形式給藥兩周。
6. 每天檢測動物的健康狀況及死亡情況，例常檢查包括動 物的腫瘤生長情況，活動能力，飲食，體重，眼睛，毛髮和其他異常行為，每週三次(週一、週三和週五)測量腫瘤體積及體重。腫瘤體積通過遊標卡尺測量，公式為TV=0.5×a×b2，其中a是腫瘤的長徑，b是腫瘤的短徑。
實驗結果：
在Ba/F3-KIF5B-RET-G810R細胞皮下同種移植腫瘤BALB/c裸鼠模型中，化合物49、化合物62在單次給藥劑量小於50mg/kg的條件下表現出非常顯著的腫瘤抑制作用(TGI均大於60%)。在為期14天的治療結束時，以TGI為指標，化合物49、化合物62的抑瘤效果明顯優於上市RET抑制劑BLU-667及LOXO-292。給藥期間，各組實驗動物活動和進食等一般狀態均良好，無明顯體重下降及不良反應。
注：TGI的計算公式：TGI(%)=[1-(T12-T0)/(V12-V0)]×100(T12-處理組給藥結束(第12天)時平均瘤體積；T0-處理組開始給藥時(第0天)平均瘤體積)；V12-溶劑對照組治療結束時(第12天)平均瘤體積；V0-溶劑對照組開始治療時(第0天)平均瘤體積)
(g)體內篩選實驗-檢測化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET-G810S的NVSG異體移植模型中的藥效學測試
1. 復蘇Ba/F3 KIF5B-RET-G810S細胞，體外培養，獲得1X10E8細胞。
2. 54只6-8周雄性NVSG經1周適應性飼養，稱重。
3. 將稀釋後的細胞懸液和基質膠按照1：1比例稀釋。混勻後放置於冰上，用1mL無菌胰島素注射器吸取混懸液，每只小鼠皮下接種細胞懸液0.1mL，每只小鼠接種Ba/F3-KIF5B-RET-G810R細胞2*10^6個。
4. 接種後，每天觀察，定時觸診，每週1次測量腫瘤體積及體重，當平均腫瘤體積達到約80-120mm3，依據腫瘤體積和體重隨機分為6組，每組6只。分組後隨即開始給藥。給藥開始日期視為第0天。
5. 小鼠每日一到五次經口給予各受試化合物，給藥共14天。
6. 每個工作日檢測動物的健康狀況及死亡情況，例常檢查包括動物的腫瘤生長情況，活動能力，飲食，體重，眼睛，毛髮和其他異常行為。
7. 接種後至分組前，當腫瘤可見時，每週一次測量實驗動物腫瘤體積，接種分組後，實驗中的動物腫瘤體積每週測量一次。腫瘤體積通過遊標卡尺測量，公式為TV=π/6×a×b2，其中a是腫瘤的長徑，b是腫瘤的短徑。
實驗結果：
在Ba/F3 KIF5B-RET-G810S的NVSG異體移植模型中，化合物49、化合物62在單次給藥劑量小於50mg/kg的條件下表現出非常顯著的腫瘤抑制作用(TGI均大於60%)。在為期14天的治療結束時，以TGI為指標，化合物49、化合物62的抑瘤效果明顯優於上市RET抑制劑BLU-667及LOXO-292。給藥期間，各組實驗動物活動和進食等一般狀態均良好，無明顯體重下降及不良反應。
注：TGI(%)=((mean(C)-mean(C0))-(mean(T)-mean(T0)))/(mean(C)-mean(C0))*100%(T-給藥組腫瘤體積；T0-給藥組初始腫瘤體積；C-對照組腫瘤體積；C0-對照組初始腫瘤體積)。
討論
1、從上述生物活性資料可以看出：與已知活性的化合物(LOXO-292)相比，本發明化合物在吡唑并[1,5-a]吡啶(
Figure 110120472-A0305-02-0241-240
)的6位上為胺基的化合物對G810突變的RET具有優異的抑制活性，尤其是6位為烷胺基或氟代烷胺基的化合物。
2、當6位為烷胺基或氟代烷胺基時，對比碳原子個數不同化合物47/57/62/67/68/69，可知烷基為直鏈且碳數為1到3時對G810突變的RET抑制活性較好，尤其是乙基時抑制活性最強。
3、當6位為乙胺基類時，對比未取代和被一個或多個氟原子取代的化合物49/50/56/62的突變型抑制活性，可知乙基被一個氟原子取代的化合物49對G810突變的RET抑制活性更好。
在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發明的上述講授內容之後，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附申請專利範圍所限定的範圍。
Figure 110120472-A0101-11-0001-1
無。

Claims (15)

  1. 一種式I化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，
    Figure 110120472-A0305-02-0243-241
     其中，A選自下組：-CN、COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4或-NHCONR2R3；B選自下組：R7、-O-(L1)m1-R8、-OCOR9、-NR10R11、-COOR12、-CONR10R11、-(L2)m2-R12、-(L2)m2-NR10R11；其中，-(L1)m1-為-(CH2)2-；各L2獨立地選自下組：-CRfRg、-CO-、-O-CO-；X1和X2各自獨立地為CR或N；其中，R選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、H、鹵素或氰基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；Z選自C1-C6烷氧基；R1、R2、R3和R4各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或5-10元雜芳基；或者R2和R3與其連接的N原子一起構成取代或未取代的3-12 元雜環基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R7為取代或未取代的5-10雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R8選自取代或未取代的下組基團：C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12螺雙環或5-12元螺雜雙環；R9選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、-NR10R11、-(L3)m3-(3-8元環雜烷基)、-(L3)m3-(C5-C10芳基)、-(L3)m3-(5-10元雜芳基)，其中，各L3獨立地選自下組：-CRfRg-、-NRh-；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、鹵素、氰基、羥基、胺基；R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C6烷基、-(L2)m2-NQ1Q2、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；或者，R10和R11與相連的N一起構成3-12元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、取代或未取代的C1-C6烷基，或者Q1和Q2與相連的N構成一個3-10元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，所述取代是指被選自下組的一個 或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；各R12獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；Rf和Rg各自獨立地選自下組：H、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、OH、NH2、C3-C6環烷基；Rh獨立地選自下組：H、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C3-C6環烷基；n為0或1；m2為1、2、3、4、5或6；m3為0、1或2；限定條件為，當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4、-NHCONR2R3。
  2. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，A選自下組：-CN、-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4或-NHCONR2R3；其中，R1、R2和R3各自獨立地選自下組：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元環雜烷基、C2-C6烯基、C5-C10芳基或者5-10元雜芳基；R4選自取代或未取代的下組基團：C1-C3烷基、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、C2-C4烯基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；其中， 所述取代是指被C1-C3烷基取代。
  3. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，B選自下組：R7、-O-(L1)m1-R8、-NR10R11、-CONR10R11、-(L2)m2-R12、-(L2)m2-NR10R11；限定條件為，當B為R7時，A選自下組：-COOR1、-CONR2R3、-NHCOR4、-NHCONR2R3；其中，R1、R2、R3、R4、R7、L1、L2、m1、m2、R8、R10、R11和R12的定義如請求項1所述。
  4. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，R8選自取代或未取代的下組基團：5-12元稠合雜雙環或5-12元螺雜雙環，所述雜雙環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子作為環原子，雜雙環中的N原子與L1部分相連；其中，所述取代是指被1、2、3或4個選自下組的基團取代：H、氧代(=O)、鹵素、氰基、羥基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷胺基、C1-C6烷硫基。
  5. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，R10和R11各自獨立選自取代或未取代下組基團：H、C1-C3烷基、-(CH2)2-NQ1Q2、C3-C6環烷基、3-6元環雜烷基、苯基、吡唑、吡啶、呋喃、噻吩、噁唑、異噁唑、三氮唑；或者，R10和R11與相連的N一起構成3-8元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3 個N原子和0、1或2個O或S原子；其中，Q1、Q2各自獨立選自：H、C1-C3烷基；或者Q1和Q2與相連的N構成一個3-10元的取代或未取代的雜環，所述雜環含有1-3個N原子和0、1或2個O或S原子，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代C1-C3烷基、氰基、鹵素、羥基。
  6. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述化合物具有式II所示的結構
    Figure 110120472-A0305-02-0247-242
     式中，Rm和Rn各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：H、C1-C3烷基；其中，所述取代是指被1-2個鹵素原子取代；X1和X2各自獨立地為CH或N。
  7. 如請求項6所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，Rm和Rn各自獨立地選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
  8. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述化合物具有式III所示的結構
    Figure 110120472-A0305-02-0248-243
     Rm選自：H、甲基、乙基、正丙基、-CH2F、-CHF2、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CHFCH3、-CHFCH2F、-CH2CH2CH2F或-CH2CHFCH2F。
  9. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述化合物具有式IV所示的結構
    Figure 110120472-A0305-02-0248-244
     式中，RA和RB各自獨立地選自：H、F、甲基。
  10. 如請求項1至9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述的藥學上可接受的鹽為醋酸鹽、己二酸鹽、藻朊酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二甘醇酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸 鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十二烷酸鹽。
  11. 一種化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述化合物選自下組：
    Figure 110120472-A0305-02-0249-245
    Figure 110120472-A0305-02-0250-246
    Figure 110120472-A0305-02-0251-247
  12. 如請求項11所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，其中，所述的藥學上可接受的鹽為醋酸鹽、己二酸鹽、藻朊酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二甘醇酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十二烷酸鹽。
  13. 一種藥物組合物，其包含如請求項1所述的化合物或其 藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物；和藥用載體或稀釋劑。
  14. 一種如請求項1至10中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物、如請求項11至12中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物或同位素化合物，或如請求項13所述的藥物組合物在製備用於抑制細胞或受試者中的RET激酶活性的藥物中的用途。
  15. 如請求項14所述的用途，其中，所述藥物用於治療與RET相關疾病與下述失調：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表達或活性或位準失調。
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