TWI739233B

TWI739233B - 脂質體以及組成物

Info

Publication number: TWI739233B
Application number: TW108144934A
Authority: TW
Inventors: 木下雅崇; 福永丈朗
Original assignee: 日商日星股份有限公司
Priority date: 2018-12-11
Filing date: 2019-12-09
Publication date: 2021-09-11
Also published as: TW202021623A; CN111297804A; JP6724228B2; JP2020094052A

Abstract

本發明提供一種脂質體以及組成物，其中所述脂質體為內包有油脂成分的脂質體，且在含有所述脂質體的組成物中盡可能維持透明性及脂質體粒子尺寸均勻性，並且各脂質體粒子尺寸比較大。一種脂質體，以質量比（A）/（B）=2～8包含（A）氫化處理磷脂質、以及（B）氧化乙烯的平均加成莫耳數為40～95的聚氧乙烯硬化蓖麻油，並且內包有油脂成分。

Description

脂質體以及組成物

本發明是有關於一種內包油脂成分的脂質體（liposome）等。

脂質體是由作為生物膜的主要構成成分的磷脂質等構成的人工膠囊（capsule）。磷脂質為兩親性結構，並形成脂質雙分子層（lipid bilayer）（換句話說，雙分子膜）。在雙分子膜內可吸收進油溶性物質，根據製成方法，在內水相中可吸收進水溶性物質。 [現有技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]日本專利特開2015-174860號公報 [專利文獻2]國際公開第2008/093848號

[發明所要解決的問題] 如上所述，脂質體可在雙分子膜內部吸收進油溶性物質，因此認為有如下可能性：可用於使油脂成分穩定地含有於水性組成物中。另外，近年來，植物性油脂成分的功能受到關注，尤其是在化妝品等外用組成物（尤其是外用水性組成物）中調配植物性油脂成分的需要提高。

另外，在將此種水性組成物用於尤其是化妝品中的情況下，外觀（透明性）多受到重視，尤其重要的是透明性得以持續。其原因在於：消費者有規避經時性變混濁的組成物（尤其是化妝品組成物）的傾向。

另外，各脂質體粒子的尺寸比較大時，可內包的成分的量增加，因此，結果可調配的油脂成分量增加，因而有利。

另外，進而，各脂質體粒子的尺寸越一致（即越均勻），越不易引起脂質體的合併或崩壞，有經時分散穩定性高的傾向。就所述觀點而言，各脂質體粒子的尺寸優選為盡可能均勻。

因此，本發明的目的為提供一種脂質體組成物，其中所述脂質體為內包有油脂成分的脂質體，且在含有所述脂質體的組成物中盡可能維持透明性及脂質體粒子尺寸均勻性，並且各脂質體粒子尺寸比較大。 [解決問題的技術手段]

本發明者等人發現，通過在脂質體的製備中以特定比率使用特定的磷脂質及表面活性劑，而有如下可能性、即可製備維持透明性及脂質體粒子尺寸均勻性、並且各脂質體粒子尺寸比較大的含有脂質體的組成物，並且進一步反覆進行改良，從而完成了本發明。

本發明例如包含以下項中記載的主題。項1. 一種脂質體，以質量比（A）/（B）=2～8包含（A）氫化處理磷脂質、以及（B）氧化乙烯的平均加成莫耳數為40～95的聚氧乙烯硬化蓖麻油，並且內包有油脂成分。項2. 根據項1所述的脂質體，其中油脂成分為選自由米油、大豆油、橄欖油、白池花籽油（meadowfoam oil）、葵花籽油、榛子油（hazelnut oil）、及生育酚（tocopherol）所組成的群組中的至少一種。項3. 根據項1或2所述的脂質體，其中氫化處理磷脂質為氫化卵磷脂。項4. 根據項1至3中任一項所述的脂質體，其中平均粒子徑為65 nm以上。項5. 根據項1至4中任一項所述的脂質體，其中多分散指數（Polydispersity Index，PdI）為0.25以下。項6. 一種組成物，含有根據項1至5中任一項所述的脂質體。項7. 根據項6所述的組成物，其中600 nm波長透過率為70%以上。項8. 根據項6或7所述的組成物，其為外用醫藥品組成物、口腔用組成物、或化妝品組成物。 [發明的效果]

本發明提供一種維持透明性及脂質體粒子尺寸均勻性、並且脂質體粒子尺寸比較大的含有脂質體的組成物、及所述組成物中所含的脂質體、以及這些的製造方法等。所述含有脂質體的組成物尤其有利的是作為化妝品組成物來利用。

以下，進一步詳細地說明本發明中所包含的各實施形態。本發明優選地包含：含有脂質體的組成物、及所述組成物中所含的脂質體、以及這些的製造方法等，但並不限定於這些，本發明包含本說明書中所公開且本領域技術人員能夠理解到的全部內容。

本發明中所包含的脂質體包含（A）氫化處理磷脂質、以及（B）氧化乙烯的平均加成莫耳數為40～95的聚氧乙烯硬化蓖麻油，並且內包（C）油脂成分。以下，有時將本發明中所包含的所述脂質體稱為「本發明的脂質體」。再者，雖然並無特別限制，但優選為本發明的脂質體中進而包含（D）膽固醇（cholesterol）。其原因在於：（D）膽固醇通過局部存在於脂質間而強化脂質體膜間的結合，從而提高作為脂質體（vesicle）的穩定性。

作為氫化處理磷脂質的磷脂質，可優選地例示：磷脂醯膽鹼（phosphatidylcholine）、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯酸等甘油磷脂質或鞘磷脂（sphingomyelin）等鞘磷脂質。另外，也可使用卵磷脂（lecithin）（例如，大豆卵磷脂、玉米卵磷脂、棉籽油卵磷脂、蛋黃卵磷脂、蛋清卵磷脂等）。作為卵磷脂，優選為磷脂醯膽鹼含量為60質量%以上的卵磷脂，更優選為65質量%以上、70質量%以上、75質量%以上、80質量%以上、85質量%以上、或90質量%以上的卵磷脂。其原因在於：磷脂醯膽鹼的含量越多，脂質體形成能力越提高，並且越看不到經時性沉澱，穩定性越提高。另外，導入有聚乙二醇或氨基多糖類的磷脂質衍生物、或氫氧化磷脂醯膽鹼、溶血磷脂醯膽鹼等也包含於此處的磷脂質中。

作為氫化處理磷脂質，可優選地列舉對所述磷脂質進行氫化處理而成的磷脂質。其中，例如優選為氫化甘油磷脂質，特別優選為氫化磷脂醯乙醇胺、氫化磷脂醯絲氨酸、氫化磷脂醯肌醇、氫化磷脂醯膽鹼等。另外，也可使用氫化卵磷脂（例如，氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化玉米卵磷脂、氫化棉籽油卵磷脂等）。

再者，氫化處理磷脂質可單獨使用一種或者組合使用兩種以上。

本發明的脂質體中使用的聚氧乙烯硬化蓖麻油的氧化乙烯的平均加成莫耳數為40～95（40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、或95）。優選為45～90左右，更優選為50～80左右，進而優選為55～70左右，進而更優選為55～65左右。聚氧乙烯硬化蓖麻油可單獨使用一種或組合使用兩種以上。

作為油脂成分，尤其可列舉動物性油脂成分及植物性油脂成分。此處的動物性油脂成分不僅包含源自動物的油脂成分，而且還包含即便為合成油脂成分但作為源自動物的油脂成分而已知的成分。同樣地，此處的植物性油脂成分不僅包含源自植物的油脂成分，而且還包含即便為合成油脂成分但作為源自植物的油脂成分而已知的成分。例如，生育酚為大量植物油中所含的成分，因此即便為經合成的生育酚，也包含於此處的植物性油脂成分中。作為油脂成分，特別優選為植物性油脂成分。

作為植物性油脂成分，例如可列舉：米油、大豆油、橄欖油、白池花籽油、葵花籽油、榛子油、及生育酚（優選為α-生育酚，例如包含D-α-生育酚、dl-α-生育酚、醋酸dl-α-生育酚等）等。再者，米油優選為米糠油。作為米糠油，也可使用溶媒（例如，己烷、丙酮等）提取米糠油，優選為對米糠進行榨取（優選為壓榨）而獲得的米糠榨油。另外，其他植物性油脂成分也可適宜選擇使用尤其適宜調配於化妝品中的公知的油。另外，植物性油脂成分可單獨使用一種或者組合使用兩種以上。

（A）氫化處理磷脂質與（B）氧化乙烯的平均加成莫耳數為40～95的聚氧乙烯硬化蓖麻油是以質量比（A）/（B）=2～8被包含。所述質量比範圍的下限例如可為2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、或3.9。另外，所述質量比範圍的上限例如可為7.9、7.8、7.7、7.6、7.5、7.4、7.3、7.2、7.1、7、6.9、6.8、6.7、6.6、6.5、6.4、6.3、6.2、6.1、6、5.9、5.8、5.7、5.6、5.5、5.4、5.3、5.2、5.1、5、4.9、4.8、4.7、4.6、4.5、4.4、4.3、4.2、或4.1。所述質量比範圍例如優選為2.5～6，更優選為3～5。

再者，（A）、（B）、及（D）包含於脂質體中的形態並無特別限制，例如，也包含存在於脂質體的內部所構成的親水區域或疏水區域中的情況、附著於脂質體構成物的最外膜的膜表面而存在情況等，優選為與脂質體的膜構成物質共存的情況（尤其是作為脂質體的膜構成成分而含有於脂質體中的情況）。

本發明的脂質體中所內包的（C）油脂成分的量可適宜設定，例如，以質量比計，（C）：（A）優選為1：1～10左右，更優選為1：2～8左右或1：2.5～6左右，進而優選為1：3～5左右。另外，在包含（D）的情況下，優選為所述（C）及（A）的質量比，以質量比計，（C）：（A+D）更優選為1：1～10左右，進而優選為1：2～8左右或1：2.5～6左右，進而更優選為1：3～5左右或1：4～5左右。

再者，基於脂質雙分子層的數量，脂質體被分類為多層脂質體（multilamellar vesicle，MLV）與單層脂質體兩類。單層脂質體根據其尺寸被進一步分類為小單層脂質體（small unilamellar vesicle，SUV）、大單層脂質體（large unilamellar vesicle，LUV）、巨單層脂質體（giant unilamellar vesicle，GUV）等。作為本發明的脂質體，可適宜地使用這些中的任一種。其中，更優選為多層脂質體（MLV）。若為所述質量比（A）/（B）的範圍內，則有容易形成MLV的傾向。另外，關於本發明的脂質體的大小（粒子尺寸），平均粒子徑（在不具有球狀的粒子形狀的情況下是指平均外徑）優選為例如65 nm以上，更優選為66 nm以上、67 nm以上、68 nm以上、69 nm以上、70 nm以上、71 nm以上、72 nm以上、73 nm以上、74 nm以上、或75 nm以上。所述平均粒子徑的上限並無特別限制。例如，可例示150 nm以下。另外，也可例示140 nm以下、130 nm以下、120 nm以下、110 nm以下、100 nm以下、或90 nm以下左右。在平均粒子徑為所述範圍的情況下，可使充分量的油脂成分保持於脂質體內。在平均粒子徑小於下限的情況下，所保持的油脂成分的量變少，並且容易產生脂質體粒子的凝聚，組成物的穩定性降低。在平均粒子徑超過上限的情況下，脂質體粒子凝聚，進而與尺寸小的粒子相比，經皮吸收性降低。

另外，本發明的脂質體的多分散指數（Polydispersity Index：PdI）優選為0.25以下，更優選為0.24以下、0.23以下、或0.22以下。再者，多分散指數（PDI）為用於評價粒徑分布的寬度的指數，取0至1的範圍的值。越接近0，越可謂分散均勻。分散越均勻，越不易引起脂質體的合併或崩壞，經時分散穩定性越變高。

所述平均粒子徑及PdI為利用動態光散射法測定的值。例如可使用基於動態光散射的粒度分布計進行測定。

另外，本發明的脂質體優選為pH值為6～7.5左右。通過為此種pH值範圍的脂質體，經時分散穩定性進一步變高，因而優選。此種pH值範圍的脂質體例如可通過如下方式製備：將脂質體製備中使用的組成物的pH值預先調整為所述pH值範圍。pH值的調整可使用pH值調整劑。作為pH值調整劑，例如可列舉氫氧化鈉、氫氧化鉀等。

本發明也包含含有本發明的脂質體的脂質體組成物。所述脂質體組成物優選為水性組成物。另外，所述組成物優選為作為例如外用醫藥品組成物、口腔用組成物、及化妝品組成物來使用。

本發明的脂質體及含有所述脂質體的組成物（脂質體組成物）例如可通過如下方式製備：對含有脂質體的原料及水的組成物進行攪拌，並視需要進而進行高壓處理。

作為脂質體的原料，可直接優選地應用所述內容。例如，可製備將所述（A）成分、（B）成分、及（C）成分、進而視需要的（D）成分或其他成分（例如，多元醇，優選為丙二醇）等與水混合而獲得的組成物來使用。關於各成分的使用量等各種條件，也可直接優選地應用針對脂質體的原料進行敘述的以上內容。另外，也優選為將所述組成物的pH值預先調整為6～7.5左右。如上所述，pH值的調整可使用pH值調整劑（例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀等）。

攪拌處理可優選地使用脂質體製備領域中所使用的公知的攪拌處理。例如，可使用均質混合器，以轉數3000 rpm～10000 rpm、優選為4000 rpm～6000 rpm左右攪拌2分鐘～10分鐘左右。通過所述攪拌處理，通常可製備脂質體。

另外，高壓處理可優選地使用脂質體製備領域中所使用的公知的高壓處理。例如，可列舉使用濕式微粒化裝置對完成攪拌的組成物進行高壓處理的方法。作為此種濕式微粒化裝置，可例示星爆迷你（STARBURSTmini）（杉野機械（Sugino machine）公司）。作為高壓處理，例如可列舉在100 MPa～400 MPa（優選為150 MPa～300 MPa）下進行處理。通過高壓處理，通常可減小脂質體的粒子尺寸，且使各粒子尺寸更均勻。

再者，如此獲得的脂質體懸浮液可直接作為含有本發明的脂質體的脂質體組成物來使用。

在無損本發明的效果的範圍內，本發明的脂質體及脂質體組成物中也可含有所述成分以外的成分。例如可列舉：油性成分、脂質、水溶性物質、生理活性物質等。可特別優選地使用外用醫藥品或化妝品中使用的公知的成分。例如，可列舉：殺菌劑（尤其是，異丙基甲基苯酚等酚系殺菌劑）；抗壞血酸等抗氧化劑；乳酸、檸檬酸等有機酸；氫氧化鉀、氫氧化鈉等鹼性化合物；磷脂醯甘油、磷脂醯乙醇胺等脂質；殼聚糖（chitosan）、岩藻多糖（fucoidan）、透明質酸（hyaluronic acid）等天然高分子；聚乙二醇、羧基乙烯基聚合物等合成高分子；海藻糖（trehalose）、乳果糖（lactulose）、麥芽糖醇（maltitol）等糖質；丙三醇（glycerine）等多元醇等。

再者，這些本發明的脂質體及脂質體組成物中使用的各成分均為公知的成分，例如可購入市售品來使用。

另外，本發明的脂質體組成物優選為600 nm波長透過率為70%以上，更優選為71%以上、72%以上、或73%以上。所述透過率是使用分光光度計（例如，UV-2600：島津（SHIMAZU）公司）來測定的、600 nm波長（通常為在測定濁度時使用的波長）下的透過率（%）。透過率越高，越可謂透明。

雖然並無特別限制，但作為本發明的特別優選的脂質體組成物的一形態，可列舉含有丙二醇、氫化卵磷脂、米油、氧化乙烯的平均加成莫耳數為55～65的聚氧乙烯硬化蓖麻油、以及膽固醇的形態。再者，這些中，丙二醇以外的成分構成脂質體。

所述情況下，作為各成分相對於脂質體組成物的含有比例，丙二醇為10質量%～15質量%左右，氫化卵磷脂為2質量%～5質量%左右，米油為0.5質量%～4質量%（優選為0.8質量%～2質量%）左右，氧化乙烯的平均加成莫耳數為55～65的聚氧乙烯硬化蓖麻油為0.5質量%～5質量%左右，膽固醇為0.1質量%～1.5質量%（優選為0.2質量%～1質量%）左右，特別優選為（a）氫化卵磷脂、及（b）氧化乙烯的平均加成莫耳數為55～65的聚氧乙烯硬化蓖麻油的質量比（a）/（b）為2～8。

再者，在本說明書中，所謂「包含」，也包含「本質上由……所組成」與「由……所組成」（The term "comprising" includes "consisting essentially of" and "consisting of" .）。另外，本發明包含所有的本說明書中所說明的構成要件的任意組合。

另外，針對所述本發明的各實施形態而說明的各種特性（性質、結構、功能等）在特別指定本發明中所包含的主題時，可任意組合。即，本發明中包括所有的由本說明書中所記載的能夠組合的各特性的所有組合所組成的主題。 [實施例]

以下，更具體地對本發明進行說明，但本發明並不限定於下述例子。

按照表1、表2、及表3所示的組成來製備脂質體懸浮液。再者，表中的各成分的值表示質量%。另外，各表中，「PG」表示丙二醇，「卵磷脂」表示氫化卵磷脂（hydrogenated lecithin，磷脂醯膽鹼含量70質量%），米糠油表示米油（聖布朗（Sunbran）米油（壓榨米糠油）：三和油脂股份有限公司），「HCO-60」表示氧化乙烯的平均加成莫耳數為60的聚氧乙烯硬化蓖麻油，「麥金思（Mekkins）M」表示對羥基苯甲酸甲酯。

更詳細而言，所述製備是按照各表記載的組成，使氫化卵磷脂（hydrogenated lecithin）、米油（聖布朗（Sunbran）米油（壓榨米糠油）：三和油脂股份有限公司）、氧化乙烯的平均加成莫耳數為60的聚氧乙烯硬化蓖麻油、膽固醇、及對羥基苯甲酸甲酯溶解（80℃加熱）於丙二醇中，向其中添加加熱至80℃的水（溶解有氫氧化鉀），將pH值調整為約7，以5000 rpm攪拌5分鐘，進而進行200 MPa的高壓處理，由此，製備各實施例及比較例的脂質體懸浮液。再者，所述攪拌處理是使用均質混合器（均質混合器馬克II（Homomixer MARK II）：普裏密庫斯（PRIMIX）公司）進行。所述高壓處理是使用濕式微粒化裝置（星爆迷你（STARBURSTmini）：杉野機械（Sugino machine）公司）進行。

另外，針對獲得的各脂質體懸浮液，使用基於動態光散射的粒度分布計（奈米粒度電位儀（Zetasizer nano）：馬爾文（Malvern））測定所含的脂質體的平均粒子徑以及多分散指數（PdI）。具體而言，用蒸餾水將各脂質體懸浮液稀釋100倍，將所述稀釋液放入比色管（cuvette）中並設置於所述粒度分布計，進行測定。另外，進而針對各脂質體懸浮液，使用分光光度計UV-2600（島津（SHIMAZU）公司）測定600 nm波長（通常為測定濁度時使用的波長）下的透過率（%）。

進而，在獲得的各脂質體懸浮液中，使用穿透式電子顯微鏡（HT-7700：日立高新技術（Hitachi high-technologies））並利用負染色法觀察是否實際形成有脂質體結構。

基於所述平均粒子徑、多分散指數（PdI）、透過率（%）、及穿透式電子顯微鏡觀察的結果，評價表1、表2、及表3的脂質體懸浮液。評價是以如下評價基準進行。各測定結果及評價結果也一併示於各表中。

＜平均粒子徑＞ ◎：75 nm～90 nm ○：65 nm～100 nm △：100 nm～150 nm ×：小於65 nm或超過150 nm

＜多分散指數（PdI）＞ ◎：0.22以下 ○：0.25以下 ×：超過0.25

＜透過率（%）＞ ◎：73%以上 ○：70%以上 ×：小於70%

＜脂質體的形成＞ ◎：觀察到多層脂質體（MLV）的形成。 ○：觀察到單層脂質體的形成。 ×：未觀察到脂質體的形成。

＜綜合評價＞ ◎：平均粒子徑、多分散指數（PdI）、透過率（%）的評價全部為◎或○，且脂質體形成多層脂質體（MLV）。 ○：平均粒子徑、多分散指數（PdI）、透過率（%）的評價全部為◎或○，且脂質體形成單層脂質體。 ×：平均粒子徑、多分散指數（PdI）、透過率（%）、脂質體的形成的評價的任一評價中有×。

[表1]

[表2]

[表3]

根據所述結果，僅在表中的（卵磷脂/HCO-60）質量比處於2～8的範圍的實施例1～實施例8中，平均粒子徑為65 nm以上，多分散指數（PdI）為0.25以下，且600 nm波長透過率為70%以上。另外，在實施例1、實施例2、實施例6、實施例7、及實施例8中形成了多層脂質體（MLV），而在實施例3、實施例4、及實施例5中形成了單層脂質體。

進而，按照表4所示的組成，利用與表1～表3的組成物同樣的方法製備各脂質體懸浮液。再者，所述表中的各成分的值表示質量%。另外，所述表中，「PG」表示丙二醇，「卵磷脂70」表示氫化卵磷脂（hydrogenated lecithin，磷脂醯膽鹼含量70質量%），「卵磷脂90」表示氫化卵磷脂（hydrogenated lecithin，磷脂醯膽鹼含量90質量%），「米糠油」表示米油（聖布朗（Sunbran）米油（壓榨米糠油）：三和油脂股份有限公司），「大豆油」表示（大豆油YM：日清奧利友（nisshin-oillio）），「橄欖油」表示（日光（NIKKOL）橄欖油：日光化學），「白池花籽油」表示（卡羅純白池花（CROPURE MEADOWFOAM）：日本禾大（Croda Japan）），「葵花籽油」表示（日光（NIKKOL）葵花籽油：日光化學），「榛子油」表示（日光（NIKKOL）榛子油：日光化學），「HCO-40」、「HCO-50」、「HCO-60」、或「HCO-80」表示氧化乙烯的平均加成莫耳數分別為40、50、60、或80的聚氧乙烯硬化蓖麻油，「麥金思（Mekkins）M」表示對羥基苯甲酸甲酯。這些脂質體懸浮液與實施例1～實施例8同樣，平均粒子徑為65 nm以上，多分散指數（PdI）為0.25以下，並且600 nm波長透過率為70%以上。 [表4]

以下示出本發明的組成物的配方例。再者，各配方例的調配量（%）表示質量%。再者，作為以下的各配方中所使用的「內包油脂成分的脂質體」，可優選地使用所述任一實施例的脂質體懸浮液。

配方例1：化妝水（lotion） [表5]

配方例2：乳霜（cream） [表6]

配方例3：漱口水 [表7]

配方例4：牙膏 [表8]

無。

Claims

一種脂質體，以質量比(A)/(B)=2~8包含(A)氫化處理磷脂質、以及(B)氧化乙烯的平均加成莫耳數為40~95的聚氧乙烯硬化蓖麻油，內包有油脂成分，並且平均粒子徑為65nm以上且90nm以下。
如申請專利範圍第1項所述的脂質體，其中所述油脂成分為選自由米油、大豆油、橄欖油、白池花籽油、葵花籽油、榛子油、及生育酚所組成的群組中的至少一種。
如申請專利範圍第1項或第2項所述的脂質體，其中所述氫化處理磷脂質為氫化卵磷脂。
如申請專利範圍第1項或第2項所述的脂質體，其中多分散指數(PdI)為0.25以下。
一種組成物，含有如申請專利範圍第1項至第4項中任一項所述的脂質體。
如申請專利範圍第5項所述的組成物，其中600nm波長透過率為70%以上。
如申請專利範圍第5項或第6項所述的組成物，其為外用醫藥品組成物、口腔用組成物、或化妝品組成物。