TWI705974B - Rsv-專一性抗體及其功能性部位 - Google Patents
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Abstract
本發明提供能夠專一性結合RSV之抗體及其功能等效物以及產生其之方式及方法。
Description
本申請案係關於生物技術及醫學領域。
呼吸道融合病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)為屬於副黏液病毒家族之普通感冒病毒。RSV為有毒性、易傳染的且為年齡小於2歲之兒童中下呼吸道疾病之最常見病因。高達98%就讀托兒所之兒童將在單一RSV季中受感染。0.5%與3.2%之間的受RSV感染之兒童需要住院。在美國，每年報導約90,000人入院及4,500人死亡。因RSV所致之主要住院風險因素為早產、慢性肺病、先天性心臟病、免疫力受損及年齡小於6週之在其他方面健康之兒童。除恰當營養及氧氣療法形式之支持護理以外，RSV陽性細支氣管炎需要額外治療。諸如病毒唑(Ribavirin)之抗病毒療法尚未證實為對RSV感染有效。一種單株抗體帕利珠單抗(Palivizumab)(亦稱為Synagis®)經註冊用於預防RSV感染。帕利珠單抗為RSV融合蛋白質之基因工程改造(人類化)單株抗體。儘管帕利珠單抗具有極有效預防性，但提供針對RSV之額外覆蓋之替代性抗體及療法應為有利的。
一個目標為提供抵抗及/或預防RSV感染之方式及方法。另一目標為提供針對RSV之替代性抗體及/或改良抗體或該等抗體之功能等效物，且提供能夠產生針對RSV之抗體或其功能等效物之穩定細胞。
根據描述，能夠專一性結合呼吸道融合病毒之合成、重組或經分離抗體或其功能性部位包含：a. 重鏈可變區CDR1序列，其包含與序列NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)至少70%一致之序列，及b. 重鏈可變區CDR2序列，其包含與序列GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)至少75%一致之序列，及c. 重鏈可變區CDR3序列，其包含與序列ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)至少70%一致之序列，及d. 輕鏈可變區CDR1序列，其包含與序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)至少85%一致之序列，及e. 輕鏈可變區CDR2序列，其包含與序列VASNLET(SEQ ID NO：5)至少70%一致之序列，及f. 輕鏈可變區CDR3序列，其包含與序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)至少70%一致之序列，且其中重鏈中之至少一個胺基酸與SEQ ID NO：7不同且該至少一個胺基酸係選自：
在另一實施例中，抗體或功能性部位包含：a. 重鏈可變區CDR1序列，其包含與NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)有一個胺基酸不同之序列，b. 重鏈可變區CDR2序列，其包含與GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)有一或兩個胺基酸不同之序列，c. 重鏈可變區CDR3序列，其包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)有一或兩個胺基酸不同之序列，d. 輕鏈可變區CDR1序列，其包含與QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)有一個胺基酸不同之序列，e. 輕鏈可變區CDR2序列，其包含與VASNLET(SEQ ID NO：5)有一個胺基酸不同之序列，及/或f. 輕鏈可變區CDR3序列，其包含與QQYDNLP(SEQ ID NO：6)有一個胺基酸不同之序列。
在另一實施例中，抗體或功能性部位包含a. 重鏈可變區CDR1序列，其包含NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)，b. 重鏈可變區CDR2序列，其包含GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)，c. 重鏈可變區CDR3序列，其包含ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)，d. 輕鏈可變區CDR1序列，其包含QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)，e. 輕鏈可變區CDR2序列，其包含VASNLET(SEQ ID NO：5)，及f. 輕鏈可變區CDR3序列，其包含QQYDNLP(SEQ ID NO：6)。
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，重鏈可變區中之至少以下胺基酸與SEQ ID NO：7不同：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以
下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，重鏈可變區CDR1序列包含與NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)有一個胺基酸不同之序列，重鏈可變區CDR2序列包含與GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)有一或兩個胺基酸不同之序列，及/或重鏈可變區CDR3序列包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)有一或兩個胺基酸不同之序列。
在另一實施例中，輕鏈可變區CDR1序列包含與QASQDIVNYLN
(SEQ ID NO：4)有一個胺基酸不同之序列，輕鏈可變區CDR2序列包含與VASNLET(SEQ ID NO：5)有一個胺基酸不同之序列，及/或輕鏈可變區CDR3包含與QQYDNLP(SEQ ID NO：6)有一個胺基酸不同之序列。
在另一實施例中，重鏈可變區CDR1序列包含NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)，重鏈可變區CDR2序列包含GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)，及/或重鏈可變區CDR3序列包含ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)。
在另一實施例中，輕鏈可變區CDR1序列包含QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)，輕鏈可變區CDR2序列包含VASNLET(SEQ ID NO：5)，及/或輕鏈可變區CDR3包含QQYDNLP(SEQ ID NO：6)。
在一個實施例中，能夠與RSV F抗原專一性結合之合成、重組或經分離抗體或其功能性部位包含a. 重鏈可變區CDR1序列，其包含胺基酸序列DYIIN(SEQ ID NO：9)，及b. 重鏈可變區CDR2序列，其包含胺基酸序列GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)，及c. 重鏈可變區CDR3序列，其包含胺基酸序列ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)，及d. 輕鏈可變區CDR1序列，其包含胺基酸序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)，及e. 輕鏈可變區CDR2序列，其包含胺基酸序列VASNLET(SEQ ID NO：5)，及f. 輕鏈可變區CDR3，其包含胺基酸序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)。
在另一實施例中，能夠與RSV F抗原專一性結合之合成、重組或經分離抗體或其功能性部位包含：a. 重鏈可變區CDR1序列，其包含胺基酸序列DYIIN(SEQ ID NO：9)，及b. 重鏈可變區CDR2序列，其包含胺基酸序列GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)，及c. 重鏈可變區CDR3序列，其包含胺基酸序列ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)，及d. 輕鏈可變區CDR1序列，其包含胺基酸序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)，及e. 輕鏈可變區CDR2序列，其包含胺基酸序列VASNLET(SEQ ID NO：5)，及f. 輕鏈可變區CDR3，其包含胺基酸序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)。
在另一實施例中，抗體或功能性部位具有在位置252Y具有Y、在位置254T具有T且在位置256具有E之Fc區，其中該編號對應於Kabat中之EU索引。
在另一實施例中，抑制個體中RSV感染之方法包含向個體投與本文所述之抗體或功能性部位。
在另一實施例中，合成、重組或經分離核酸序列編碼本文所述之抗體或功能性部位。
其他目標及優點將在以下描述中部分闡述，且將部分地自描述顯而易知，或可由實踐習得。該等目標及優點將藉助於在所附申請專利範圍中特定指出之要素及組合來實現及獲得。
應理解，前述一般描述及以下詳細描述僅為例示性及解釋性的且不限制申請專利範圍。
併入本說明書且構成其一部分之附圖說明一個(若干)實施例，且與描述一起用於解釋本文所述之原理。
圖1A及1B為D25重鏈及若干重鏈變異體(J、L及LA)序列之圖示。
圖2為若干優化之變異體(1G7、1F5、2D10)重鏈序列之圖示。
圖3A及3B為優化之變異體1G7之四個其他變異體重鏈序列的圖示。藉由併入生殖系殘基使變異體(1G7-GLM、B12-1、E3-5及E9-2)更改pI。
圖4A及4B展示微量中和分析中D25及若干變異體之活體外活性。
圖5A及5B展示D25及若干變異體提供對RSV A2及RSV B次型攻擊之防禦。
圖6展示用1G7、1F5、D25(在圖中表示為D25wt)治療或未用抗體治療之動物中棉鼠RSV A2攻擊之結果。
圖7A及7B展示1G7防禦RSV A2及RSV B9320兩者。將RSV之肺效價繪製為收集時人類IgG血清濃度之函數。
圖8A及8B展示藉由多種抗體對RSV A2及RSV B9320兩者之中和。
圖9A及9B展示由單株抗體抗性突變體界定之結合1G7之抗原決定基。
圖10展示針對RSV臨床分離株之中和分析之結果。
提供相比於其他抗體具有改良特性之改良RSV專一性抗體或其功能性部位。例如抗體或抗原結合片段、變異體或衍生物之抗體或其功能性部位包括(但不限於)多株、單株、人類、人類化的，或嵌合抗體、單鏈抗體、抗原決定基結合片段，例如Fab、Fab'及F(ab')2、Fd、Fv、
單鏈Fv(scFv)、單鏈抗體、二硫鍵聯Fv(sdFv)、包含VL或VH域之片段、由Fab表現庫產生之片段。ScFv分子為此項技術中已知的且描述於例如美國專利5,892,019中。本發明涵蓋之免疫球蛋白或抗體分子可為免疫球蛋白分子之任何類型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA及IgY)、類別(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)或子類別。
舉例而言，本發明人已成功產生具有優於先前RSV專一性抗體之改良特性之RSV專一性抗體，其包括提高之對RSV A次型及RSV B次型之防禦、改良之中和及較低IC50值。該等抗體對RSV具有尤其高或強之親和力，且因此尤其適用於抵抗及/或至少部分地預防RSV感染及/或RSV感染之副作用。抗體及其功能性部位與RSV專一性結合分子同義且包括任何能夠專一性結合RSV之全長抗體或抗體部位。
在一個實施例中，D25(SEQ ID NO：7)重鏈可變區之至少一個非生殖系殘基改變為生殖系殘基。在另一實施例中，D25殘基重鏈可變區之至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個非生殖系殘基變回生殖系殘基。在另一實施例中，至少一個非生殖系殘基可改變為生殖系殘基且至少一個CDR位置可相對於SEQ ID NO：7經修飾。
一個實施例包括經分離、合成或重組抗體或其功能性部位，其能夠專一性結合呼吸道融合病毒且包含：a)重鏈CDR1序列，其包含與序列NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)至少70%、75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，b)重鏈CDR2序列，其包含與序列GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)至少70%、75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，c)重鏈CDR3序列，其包含與序列ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)至少70%、
75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，d)輕鏈CDR1序列，其包含與序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)至少70%、75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，e)輕鏈CDR2序列，其包含與序列VASNLET(SEQ ID NO：5)至少70%、75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，及f)輕鏈CDR3序列，其包含與序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)至少70%、75%、80%、85%、90%或94%一致之序列，且其中重鏈中之至少一個胺基酸與SEQ ID NO：7不同且該至少一個胺基酸係選自：
「重鏈可變區中至少一個胺基酸與SEQ ID NO：7不同」意謂抗體或功能性部位必須包含至少一個與SEQ ID NO：7不同之胺基酸，但在一些實施例中，其可包含一個以上與SEQ ID NO：7不同之胺基酸。在一些實施例中，其包括表2中概述之取代，表2中列出位置之缺失或替代性胺基酸，或表2中未列出位置之差異(包括缺失、取代或添加)。表2中之位置編號係相對於SEQ ID NO：7提供且該位置編號最終可不與基於所關注之抗體或功能性部位中胺基酸連續編號之位置編號相同。實際上，位置編號係基於與SEQ ID NO：7之比對而指定。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括重鏈及/或輕鏈，其中重鏈可變區與SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：15至少90%一致且其中輕鏈可變區與SEQ ID NO：8至少90%一致。在另一實施例中，重鏈可變區與SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：15至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致。在另一實施例中，輕鏈可變區與SEQ ID NO：8至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區CDR1序列，該重鏈可變區CDR1序列包含與NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)有一個胺基酸不同之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區CDR2序列，該重鏈可變區CDR2序列包含與GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)有一或兩個胺基酸不同之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區CDR3序列，該重鏈可變區CDR3序列包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)有一或兩個胺基酸不同之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含輕鏈可變區CDR1序列，該輕鏈可變區CDR1序列包含與QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)有一個胺基酸不同之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含輕鏈可變區CDR2序列，該輕鏈可變區CDR2序列包含與VASNLET(SEQ ID NO：5)有一個胺基酸不同之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含輕鏈可變區CDR3，該輕鏈可變區CDR3包含與QQYDNLP(SEQ ID NO：6)有一個胺基酸不同之序列。
在另一實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區CDR1序列、重鏈可變區CDR2序列、重鏈可變區CDR3序列、輕鏈可變區CDR1序列、輕鏈可變區CDR2序列及/或輕鏈可變區CDR3序列，該重鏈可變區CDR1序列包含與NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)有一個胺基酸不同之序列，該重鏈可變區CDR2序列包含與GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)有一或兩個胺基酸不同之序列，該重鏈可變區CDR3序列包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)有一或兩個胺基酸不同之序列，該輕鏈可變區CDR1序列包含與QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)有一個胺基酸不同之序列，該輕鏈可變區CDR2序列包含與VASNLET(SEQ ID NO：5)有一個胺基酸不同之序列，該輕鏈可變區CDR3序列包含與QQYDNLP(SEQ ID NO：6)有一個胺基酸不同之序列。
在一些實施例中，抗體或功能性部位包含至少一個或多達所有與SEQ ID NO：7(重鏈)及/或SEQ ID NO：8(輕鏈)一致之CDR。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)之重鏈可變區CDR1序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)之重鏈可變區CDR2序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)之重鏈可變區CDR3序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)之重鏈可變區CDR1序列、包含GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG
(SEQ ID NO：10)之重鏈可變區CDR2序列及/或包含ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)之重鏈可變區CDR3序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包括包含QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列、包含VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列及/或包含QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3。
在另一實施例中，抗體或功能性部位包括包含NYIIN(SEQ ID NO：1)或DYIIN(SEQ ID NO：9)之重鏈可變區CDR1序列、包含GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)或GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)之重鏈可變區CDR2序列、包含ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)之重鏈可變區CDR3序列、包含QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列、包含VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列及/或包含QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含構架區與選自SEQ ID NO：12-21之序列95%一致之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含構架區與選自SEQ ID NO：12-21之序列一致之序列。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表3中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表3中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表4中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表4中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表5中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表5中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表6中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表6中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表7中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表7中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表8中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表8中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表9中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表9中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表10中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表10中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表11中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表11中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位在重鏈可變區中包含至少以下與SEQ ID NO：7不同之胺基酸：
在另一實施例中，表12中提供之差異為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在一個實施例中，表12中提供之差異不為與SEQ ID NO：7僅有之差異。在另一實施例中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8。
在一個實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈可變區序列，該重鏈可變區序列包含與SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20或SEQ ID NO：21至少70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致之序列。在另一實施例中，抗體或功能性部位包含重鏈序列可變區，該重鏈序列可變區包含與SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20或SEQ ID NO：21之構架(亦即，非CDR)序列至少70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致之序列。
在另一實施例中，抗體或功能性部位包含輕鏈可變區序列，該輕鏈可變區序列包含與序列DIQMTQSPSSLSAAVGDRVTITCQASQDIVNYLNWYQQKPGKAPKLLIYVASNLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDVATYYCQQYDNLPLTFGGGTKVEIKRTV(SEQ ID NO：8)至少70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致之序列。
在其他實施例中，應用保守胺基酸取代。保守胺基酸取代涉及用另一具有總體上類似特性(大小、疏水性等)之胺基酸取代一個胺基酸，以便整體功能很可能不受嚴重影響。
在一個實施例中，抗體或功能性部位可包含至少一個相對於SEQ ID NO：7中存在之CDR的CDR突變。在一個實施例中，抗體或功能性部位可包含表13之改變中之至少一者。在另一實施例中，抗體或功能
性部位可包含表13之改變中之一者、兩者或全部三者。
另一實施例包括經分離、合成或重組抗體或其功能性部位，其能夠與RSV F抗原專一性結合且包括包含胺基酸序列DYIIN(SEQ ID NO：9)之重鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)之重鏈可變區CDR2序列、包含胺基酸序列ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)之重鏈可變區CDR3序列、包含胺基酸序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列及包含胺基酸序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3。
另一實施例包括經分離、合成或重組抗體或其功能性部位，其能夠與RSV F抗原專一性結合且包括包含胺基酸序列NYIIN(SEQ ID NO：1)之重鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)之重鏈可變區CDR2序列、包含胺基酸序列ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)之重鏈可變區CDR3序列、包含胺基酸序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列及包含胺基酸序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3。
另一實施例包括經分離、合成或重組抗體或其功能性部位，其能夠與RSV F抗原專一性結合且包括包含胺基酸序列NYIIN(SEQ ID NO：1)之重鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列
GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)之重鏈可變區CDR2序列、包含胺基酸序列ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)之重鏈可變區CDR3序列、包含胺基酸序列QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)之輕鏈可變區CDR1序列、包含胺基酸序列VASNLET(SEQ ID NO：5)之輕鏈可變區CDR2序列及包含胺基酸序列QQYDNLP(SEQ ID NO：6)之輕鏈可變區CDR3。
在另一實施例中，經分離、合成或重組抗體或其功能性部位包括包含重鏈CDR1、CDR2及CDR3之重鏈可變區及包含輕鏈CDR1、CDR2及CDR3之輕鏈，其中重鏈CDR中之至少一者、兩者或全部三者係選自表14中之A欄，剩餘重鏈CDR(若存在)係選自B欄，且輕鏈CDR包含C欄。因此，在一個實施例中，輕鏈CDR提供於表14之C欄且重鏈CDR可自A欄與B欄混合與匹配，只要重鏈具有CDR1、CDR2及CDR3之各者中之一者即可。
多個替代性CDR實施例不必含有在以上章節I.A中所述之非生殖系至生殖系之突變中之任一者，但彼等突變中之任一者或全部可視情況存在。
在一個實施例中，抗體或功能性部位可包含來自表14之替代性重鏈CDR中之至少一者且可具有至少一個其他CDR修飾。特定言之，在另一實施例中，抗體或功能性部位可包含重鏈CDR1序列、重鏈CDR2序列、重鏈CDR3序列、輕鏈CDR1序列、輕鏈CDR2序列及/或輕鏈CDR3序列，該重鏈CDR1序列包含與NYIIN(SEQ ID NO：1)有一個胺基酸不
同之序列，該重鏈CDR2序列包含與GIIPVLGTVHYAPKFQG(SEQ ID NO：2)有一或兩個胺基酸不同之序列，該重鏈CDR3序列包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)有一或兩個胺基酸不同之序列，該輕鏈CDR1序列包含與QASQDIVNYLN(SEQ ID NO：4)有一個胺基酸不同之序列，該輕鏈CDR2序列包含與VASNLET(SEQ ID NO：5)有一個胺基酸不同之序列，該輕鏈CDR3序列包含與QQYDNLP(SEQ ID NO：6)有一個胺基酸不同之序列，其中以下中之至少一者發生，即重鏈CDR1為DYIIN(SEQ ID NO：9)，重鏈CDR2為GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)或重鏈CDR3為ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)。
在一個實施例中，可對本文所述之抗體或功能性部位進行其他修飾以增加其半衰期。在一個實施例中，可對抗體或功能性部位進行諸如缺失、添加或取代突變之突變以增加其半衰期。在一個實施例中，Fc區可突變為包括以下取代M252Y、S254T及T256E中之一者、兩者或全部三者，其中該編號對應於Kabat中之EU索引。在一個實施例中，Fc區可突變為包括以下取代M252Y、S254T及T256E中之全部，其中該編號對應於Kabat中之EU索引。Dall'Acqua等人，Properties of Human IgG1s Engineered for Enhanced Binding to the Neonatal Fc Receptor(FcRn),J Biol Chem 281(33)：23514-23524(2006)。具有全部三個取代之實施例表示為YTE變異體。換言之，在一個實施例中，抗體或功能性部位之Fc區在位置252Y具有Y、在位置254T具有T且在位置256具有E，其中該編號對應於Kabat中之EU索引。
在某一實施例中，抗體或功能性部位在HEp-2細胞經RSV及抗體或功能性部位感染之活體外中和分析中之IC50值小於10ng/ml。在另
一實施例中，針對RSV次型A及/或RSV次型B之IC50為9ng/ml、8ng/ml、7ng/ml、6ng/ml、5ng/ml、4ng/ml、3ng/ml或2ng/ml或2ng/ml以下。在一個實施例中，在實例中所描述之活體外中和分析中，視情況對於RSV A2及/或RSV B9320量測IC50。
在一個實施例中，抗體及其功能性部位在中和RSV次型A病毒株中有效。在一個實施例中，抗體及其功能性部位在中和RSV次型B病毒株中有效。在另一實施例中，抗體及其功能性部位在中和RSV次型A及B病毒株中均有效。
如本文所用，術語抗體或其功能性部位以最廣泛意義使用。其可為人造的，諸如由習知融合瘤技術、重組技術及/或其功能性片段產生之單株抗體(mAb)。其可包括完整免疫球蛋白分子，例如多株抗體、單株抗體(mAb)、單專一性抗體、雙專一性抗體、多專一性抗體、人類抗體、人類化抗體、動物抗體(例如駱駝抗體)、嵌合抗體以及其部分、片段、區、肽及衍生物(由任何已知技術，諸如(但不限於)酶裂解、肽合成或重組技術提供)，諸如能夠結合抗原或抗原決定基的不含輕鏈之免疫球蛋白、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、抗體片段、雙功能抗體、Fd、CDR區或抗體之任何部分或肽序列。在一個實施例中，功能性部位為單鏈抗體、單鏈可變片段(scFv)、Fab片段或F(ab')2片段。
抗體或功能性部位在其能夠與分子專一性反應之情況下被稱為「能夠結合」該分子，藉此將分子與抗體結合。抗體片段或部分可不具有完整抗體之Fc片段，自循環較快清除，且可具有與完整抗體相比較少之非專一性組織結合。抗體實例可使用此項技術中熟知之方法由完整抗體產生，例如用諸如番木瓜蛋白酶(以產生Fab片段)或胃蛋白酶(以產生F(ab')2片段)之酶進行蛋白水解裂解。抗體之部分可藉由以上方法中之任一者製造，或可藉由表現重組分子之一部分來製造。舉例而言，可將重組抗體之CDR區分離且次選殖至適當表現載體中。
在一個實施例中，抗體或功能性部位為人類抗體。將人類抗體用於人類治療可減小因人類個體體內針對非人類序列之免疫反應所致的副作用之機率。在一個實施例中，抗體或功能性部位為人類化的。在另一實施例中，抗體或功能性部位為嵌合抗體。以此方式，所關注之序列，諸如所關注之結合位點，可包括於抗體或功能性部位中。
在一個實施例中，抗體可具有IgG、IgA、IgM或IgE同型。在一個實施例中，抗體為IgG。
本發明實施例進一步提供編碼描述於以上章節I.A或I.B之抗體或功能性部位中之任一者的經分離、合成或重組核酸序列。此類核酸例如自能夠產生抗體或功能性部位之B細胞分離。此類核酸編碼本文列出之重鏈及輕鏈序列。或者，此類核酸編碼分別包含本文列出之重鏈及輕鏈CDR的重鏈及輕鏈序列。在一些實施例中，核酸將編碼本文所述抗體之功能性部位。歸因於核酸編碼之簡併，多種核酸將編碼相同胺基酸且其全部涵蓋於本文中。
在一個實施例中，抗體或功能性部位可用於治療方法或用作藥物。該方法可用於抵抗或至少部分地預防RSV感染或用於抵抗或至少部分地預防RSV感染之不良反應。該方法亦包含向有需要之個體投與治療有效量之本文所述之抗體或功能性部位。在一個實施例中，有需要之個體為人類患者。
在一個實施例中，為抵抗RSV，抗體或功能性部位可在RSV感染發生之前，換言之作為預防劑向個體投與。或者，抗體或功能性部位可在個體已經RSV感染時投與。該抗體或功能性部位可向具有提高之RSV感染風險之個體，諸如早產兒童，患有慢性肺病、先天性心臟病
及/或免疫力受損之個體，年齡小於6週之兒童投與。早產兒童包括處於其生命第一年之嬰兒以及處於其生命第二年之兒童與仍處於RSV感染風險中之較大兒童。老年人亦具有提高之RSV感染風險且因此可基於風險成為投藥目標。抗體或功能性部位亦可向先前具有RSV感染之個體投與。
對於治療應用，抗體或功能性部位通常與醫藥學上可接受之載劑、佐劑、稀釋劑及/或賦形劑組合。在一個實施例中，抗體或功能性部位與注射用水組合。在另一實施例中，其製備於含組胺酸、甘胺酸及氯之無菌、無防腐劑液體溶液中。在另一實施例中，適合載劑之實例例如包含匙孔螺血氰蛋白(KLH)、血清白蛋白(例如BSA或RSA)及卵白蛋白。在另一實施例中，該適合載劑包含類似例如鹽水之溶液。在其他實施例中，抗體或功能性部位係以凍乾形式提供且在投與之前與注射用水混合。
在另一實施例中，可投與編碼抗體或功能性部位之核酸。投與此類核酸之後，抗體或功能性部位係由宿主之機構產生。產生之抗體或功能性部位能夠預防及/或抵抗RSV感染及/或RSV感染之副作用。
編碼抗體之功能性部位之核酸係指至少30個鹼基對長、至少50個鹼基對長或至少100個鹼基對長之核酸，其包含至少一個作為編碼抗體之核酸的表現特徵(按種類，不一定按量)。在一個實施例中，編碼抗體之功能性部位之核酸至少編碼包含本文所述抗體之兩個或視情況三個CDR的胺基酸序列。
亦提供能夠產生抗體或功能性部位之經分離抗體產生細胞。本文所述之抗體或功能性部位可自分泌抗體之融合瘤或自已用編碼抗體或功能性部位之基因轉化或轉染的以重組方式產生之細胞製造。
一個實施例包括藉由在表現核酸以產生抗體之條件下培養宿主細胞隨後回收抗體來產生抗體或功能性部位之方法。多種細胞株可用於表現抗體或功能性部位，其包括(但不限於)哺乳動物細胞株。在一個實施例中，細胞株可為人類的。在另一實施例中，可使用細菌或昆蟲細胞株。在一個實施例中，細胞株包括中國倉鼠卵巢(CHO)細胞、CHO細胞變異體(例如DG44)、293細胞及NSO細胞。在另一實施例中，細胞株包括VERY、BHK、Hela、COS、MDCK、293F、293T、3T3、W138、BT483、Hs578T、HTB2、BT2O及T47D、CRL7O3O以及HsS78Bst細胞。
重組表現利用含有編碼抗體或功能性部位之多核苷酸的表現載體之構造。一旦已獲得多核苷酸，則產生抗體之載體可藉由此項技術中所熟知之重組DNA技術產生。表現載體可包括適合之轉錄及轉譯控制信號。此可使用活體外重組DNA技術、合成技術及活體內基因重組來完成。在一個實施例中，可複製載體包含編碼可操作地連接於異源啟動子之抗體或功能性部位的核酸序列。
如美國專利第5,807,715號中所述，可採用多種宿主表現載體系統以表現抗體或功能性部位。舉例而言，與載體(諸如來自人類巨細胞病毒之主要中間早期基因啟動子元件)結合之哺乳動物細胞(諸如中國倉鼠卵巢細胞(CHO))為抗體之有效表現系統(Foecking等人，Gene,45：101(1986)；及Cockett等人，Bio/Technology,8：2(1990))。此外，可選擇調節插入序列之表現或以所要特定方式修飾且加工基因產物的宿主細胞品系。此類對蛋白質產物之修飾(例如糖基化)及加工(例如裂解)對於蛋白質功能可為重要的。不同宿主細胞具有用於蛋白質及基因產物之轉譯後加工及修飾之特徵及特定機制。可選擇適合細胞株或宿主系統以確保本發明蛋白質之恰當修飾及加工。為此目的，可使用具有用於適當加工初級轉錄物、基因產物之糖基化及磷酸化之細胞機構的
真核宿主細胞。
在細菌系統中，可視所表現之抗體或功能性部位之預期用途而選擇多種表現載體。舉例而言，當為產生包含抗體或功能性部位之醫藥組合物而欲產生大量此類抗體或功能性部位時，引導易於純化之高水準融合蛋白質產物之表現的載體可為所要的。此類載體包括(但不限於)大腸桿菌(E.coli)表現載體pUR278(Ruther等人，EMBO,12：1791(1983))，其中編碼序列可在具有lac Z編碼區之框架中單獨地接合至載體以便產生融合蛋白質；pIN載體(Inouye & Inouye,1985,Nucleic Acids Res.13：3101-3109(1985)；VanHeeke & Schuster,1989,J.Biol.Chem.,24：5503-5509(1989))；及其類似載體。pGEX載體亦可用於用麩胱甘肽-S-轉移酶(GST)將外來多肽表現為融合蛋白質。一般而言，此類融合蛋白質為可溶的且可藉由吸附及結合至麩胱甘肽瓊脂糖親和性基質隨後在游離麩胱甘肽存在下溶離而容易地自裂解細胞純化。pGEX載體經設計將凝血酶及/或因子Xa蛋白酶裂解位點引入表現之多肽中，以使選殖之靶向基因產物可自GST部分釋放。
在昆蟲系統中，使用苜蓿銀紋夜蛾(Autographa californica)核多角體病毒(AcNPV)作為載體以表現外來基因。病毒生長於草地黏蟲(Spodoptera frugiperda)細胞中。可單獨地將蛋白質編碼序列選殖至病毒之非必需區(例如多角體蛋白基因)中且置於AcNPV啟動子(例如多角體蛋白啟動子)之控制下。
在哺乳動物宿主細胞中，可採用多種基於病毒之表現系統。在使用腺病毒作為表現載體之情況下，所關注之編碼序列可接合於腺病毒轉錄/轉譯控制複合物，例如晚期啟動子及三聯前導序列。隨後可藉由活體外或活體內重組將此嵌合基因插入腺病毒基因組中。插入病毒基因組(例如區E1或E3)之非必需區中將產生可存活且能夠在感染之宿主中表現抗體或功能性部位之重組病毒(例如參見Logan & Shenk,Proc.
Natl.Acad.Sci.USA,81：355-359(1984))。亦可需要特定起始信號用於所插入之編碼抗體或功能性部位之序列的有效轉譯。此等信號包括ATG起始密碼子及相鄰序列。另外，起始密碼子一般應在框架中，其中所要編碼序列之閱讀框架確保整個插入物之轉譯。此等外源性轉譯控制信號及起始密碼子可具有天然來源與合成來源之多種來源。可藉由包括適合轉錄強化子元件、轉錄終止子等來提高表現效率(參見例如Bittner等人，Methods in Enzymol.,153：51-544(1987))。
穩定表現可用於重組蛋白質之長期、高產量產生。舉例而言，可產生穩定表現蛋白質分子之細胞株。可用包含表現控制元件(例如，啟動子、強化子、轉錄終止子、聚腺苷酸化位點等)之經適當工程改造之載體及可選標記基因來轉化宿主細胞。引入外來DNA之後，可使細胞在增殖培養基中生長1-2天，接著換為選擇性培養基。重組質體中之可選標記物賦予選擇以抗性，且允許將質體穩定整合至其染色體中之細胞生長且形成可繼而選殖且擴增成細胞株之焦點。編碼抗體或功能性部位之質體可用於將基因/cDNA引入任何適於在培養中產生之細胞株中。
可使用多種選擇系統，分別可在tk-、hgprt-或aprT-細胞中採用包括(但不限於)單純疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等人，Cell,11：223(1977))、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(Szybalska & Szybalski,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,48：202(1992))及腺嘌呤磷酸核糖轉移酶(Lowy等人，Cell,22：8-17(1980))基因。此外，抗代謝物抗性可用作以下基因之選擇基礎：dhfr，其賦予甲胺喋呤以抗性(Wigler等人，Natl.Acad.Sci.USA,77：357(1980)；O'Hare等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,78：1527(1981))；gpt，其賦予黴酚酸以抗性(Mulligan & Berg,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,78：2072(1981))；neo，其賦予胺基醣苷G-418以抗性(Wu及Wu,Biotherapy 3：87-95(1991)；Tolstoshev,Ann.Rev.Pharmacol
Toxicol.32：573-596(1993)；Mulligan,Science 260：926-932(1993)；及Morgan及Anderson,Ann.Rev.Biochem.62：191-217(1993)；May,TIB TECH 11(5)：155-2 15(1993))；及hygro，其賦予潮黴素以抗性(Santerre等人，Gene,30：147(1984))。重組DNA技術中通常已知之方法可常規地應用於選擇所要重組純系，且此類方法描述於例如Ausubel等人(編)，Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons,NY(1993)；Kriegler,Gene Transfer and Expression,A Laboratory Manual,Stockton Press,NY(1990)；及第12章及第13章，Dracopoli等人(編)，Current Protocols in Human Genetics,John Wiley & Sons,NY(1994)；Colberre-Garapin等人，1981,J.Mol.Biol.,150：1中。
一旦抗體或功能性部位已藉由重組表現產生，則其可藉由此項技術中已知用於純化免疫球蛋白分子之任何方法純化，例如藉由層析(例如，離子交換、親和力(尤其藉由對專一性抗原蛋白A或蛋白G之親和力)及篩分管柱層析法)、離心、差異溶解度或藉由任何其他用於純化蛋白質之標準技術。另外，本發明之蛋白質或其片段可如本文所述或以此項技術中已知之其他方式融合至異源多肽序列以促進純化。
在一些實施例中，產生穩定至少六個月之RSV專一性抗體產生細胞。在另一實施例中，RSV專一性抗體產生細胞穩定至少九週、至少三個月或至少六個月。在另一實施例中，製造抗體及功能性部位之替代性方法為此項技術中所熟知且描述於至少美國專利第8,562,996號中。
現將詳細參考本發明之例示性實施例，其實例圖示於附圖中。只要有可能，則將貫穿圖式使用相同參考數字來指代相同或相似部分。熟習此項技術者自考慮本文所揭示之說明書及實踐將顯而易知其他實施例。實施例進一步解釋於以下實例中。此等實例不限制申請專利範圍之範疇，而僅用於說明某些實施例。希望僅將本說明書及實例視為
例示性的，而以下申請專利範圍指定真實範疇及精神。
將各自含有提高抗體效能之所要突變的1G7免疫球蛋白可變輕鏈(VL)及可變重鏈(VH)之DNA片段插入含有κ輕鏈恆定區及CH1-鉸鏈-CH2-CH3 IgG1重鏈恆定區之人類IgG1表現載體中。為表現1G7抗體，使用293FectinTM試劑(Invitrogen,Carlsbad,CA)用含1G7之載體短暫轉染人胚腎293-F細胞。在37℃、120rpm下以5% CO2及80%濕度使細胞生長。在第二天藉由添加相等體積培養基來饋入培養基且在轉染後10天收集培養基。無菌過濾上清液以移除細胞及碎片。使用蛋白A管柱(Hi-trap蛋白A管柱，Sigma)純化IgG且在4℃下用PBS透析溶離蛋白質隔夜。藉由在NanoDrop(Thermo Scientific)中進行蛋白質定量測定IgG濃度。
採取相同方法產生其他抗體。
如下進行微量中和分析：簡言之，以15微升/孔之體積將MAb之2倍連續稀釋液引入384孔微量滴定盤中HEp-2細胞培養基中。接著，將15μL RSV A2或RSV B 9320病毒稀釋於HEp-2細胞培養基中達至80溶菌斑形成單位/孔至150溶菌斑形成單位/孔範圍內之濃度，且添加至各孔，包括僅含HEp-2細胞培養基之對照孔，且在37℃下以5% CO2將盤培育1.5小時。以2.5×105個細胞/毫升以30μL將HEp-2細胞添加至各孔且將盤在37℃下以5% CO2培育。培育RSV A2 3天或培育RSV B9320 4天之後，移除培養基且添加30μL冰冷之80%丙酮/20% PBS以固定細胞。
使用結合辣根過氧化酶之靶向RSV F之C位點(1331H)的抗RSV F MAb，藉由酶聯免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay，
ELISA)量測病毒複製(Beeler及van Wyke Coelingh,J Virol.63(7)：2941-2950(1989))。在PBS中以1：6,000稀釋1331H MAb且將30μl添加至各孔。在37℃下培育兩小時之後，用PBS-T將盤洗滌三次。將30μL TMB過氧化酶添加至各孔且於室溫下在暗處將盤培育15分鐘。藉由向各孔添加15μL 2N H2SO4來終止反應。藉由使用微量盤讀取器監測450nm下之吸光度來量測受質轉換。在Graphpad Prism中使用非線性擬合算法，使用log(抑制劑)相較於反應(斜率可變)之曲線擬合來計算IC50值，且IC50值表示使在450nm下量測之吸光度減少50%所需之MAb濃度。
結果提供於圖4中，其顯示1G7、1F5、2D10及D25各自在微量中和中抑制RSV A2及RSV B9320複製。1G7最有效，隨後為1F5、2D10，接著為D25。
藉由以圖中所指定之多個劑量水準進行肌肉內注射給予動物0.1ml抗體。二十四小時後，使用異氟烷腔室麻醉動物且藉由鼻內滴入1×106pfu/動物之RSV品系A2使動物感染。四天後，藉由二氧化碳窒息處死動物；其肺以手術方式移除、平分且冷凍於液氮中或立即加工。藉由在處死時進行心臟穿刺來獲得血液樣本。
為評定MAb投與對棉鼠肺中RSV複製之作用，對各劑量組測定棉鼠肺勻漿中之RSV病毒效價。出於彼目的，所收集之肺個別地在室溫下用TeenALysing Matrix管使用Fast Prep 24組織勻漿器在10份(重量/體積)Hanks平衡鹽溶液加蔗糖磷酸鹽中勻漿化20秒。在4℃下以930×g離心所得懸浮液10min，且收集清液層且儲存於-80℃下直至分析。在培養基中以1：10及1：100稀釋肺勻漿樣本，且在接種之前24小時，將50μL未經稀釋之肺勻漿或經稀釋之肺勻漿樣本添加至已以2.5×105個細
胞/孔之細胞密度接種在24孔盤中之HEp-2細胞之孔中，一式兩份。在37℃下以5% CO2培育1小時之後，用含有0.8%甲基纖維素之培養基替換接種體且在37℃下以5% CO2培育細胞。五天後移除覆層，且細胞經固定且經山羊抗RSV多株抗體隨後經次級抗山羊HRP抗體免疫染色。藉由與AEC試劑反應觀測溶菌斑。在顯微鏡下使用10×物鏡量化溶菌斑。此分析之偵測極限為200pfu/g組織。出於統計分析之目的，以100pfu/g(偵測下限之二分之一)表示病毒效價低於偵測極限(<200pfu/g)之樣本。結果提供於圖5中，其顯示J、L及LA變異體在防禦RSV A攻擊中均比D25有效，但L及LA變異體在防禦RSV B次型攻擊中較不有效(其中L針對一個B品系之表現優於另一個)。基於此資料，選擇J作為起始點用於進一步優化。
使用上文在此實例之部分(A)中所述之模型來比較1G7、1F5及D25防禦RSV攻擊之能力。以2mg/kg、1mg/kg、0.5mg/kg及0.25mg/kg對動物給藥。結果展示於圖6中。資料展示，1G7在防禦RSV攻擊中之表現優於1F5，但其均能夠將病毒效價降低至偵測極限。1G7及1F5之表現均優於D25。
使用與以上章節(A)中所描述者相同之棉鼠模型。如圖7中所報導，各動物接受0.1ml抗體，存在之抗體濃度變化。1G7在針對RSV A2及RSV B9320之RSV肺效價下展示劑量反應關係。
使用與以上章節(A)中所描述者相同之棉鼠模型。
使用ELISA方法於肺收穫當日測定人類IgG在棉鼠血清樣本中之濃度。在此分析中，藉由結合至微量滴定盤之山羊抗人類抗體捕捉人類抗體。在4℃下以30μL體積將山羊抗人類IgG(H+L)抗體(0.5μg/mL
於1×PBS中)塗佈至Nunc Maxisorp 384孔微量滴定盤上隔夜。洗滌培養盤，隨後在室溫下用60μL PBS+3%熱不活化山羊血清之溶液阻斷1小時。移除阻斷緩衝液且應用樣本如下：將在分析緩衝液中稀釋之標準人類抗體之兩倍連續稀釋液用於500ng/ml至0.488ng/ml濃度範圍之標準曲線。使用4參數曲線擬合來擬合標準曲線。
結果提供於圖8中，其展示本文所述之變異體在中和RSV A2與RSV B9320中具有與D25相比較低之IC50。此亦表明，針對A2或B9320病毒之活性無損失，其中在E9-2及B12-1下看到活性提高，且在1G7 GLM及E3-5下針對B9320病毒之活性僅有很小損失。
藉由在250ng/ml 1G7-YTE存在下繼代三次來分離RSV A及RSV B病毒突變體。1G7-YTE為具有在以上章節I.C中上述之YTE突變之1G7抗體。末次繼代之後，測定RSV F蛋白質之序列。突變對應於先前在RSV F與親代D25抗體之共晶結構中界定之區域。所有抗性突變體均含有在RSV F蛋白質區中在胺基酸200-213之間的F1區中之改變。位置294之繼發突變顯示不提高抗性且不比在區200-213中具有單一突變之彼等者更有抗性。N208S突變背景之F2區中之繼發突變導致抗性提高。結果提供於圖9中。
在HEp2細胞感染之前藉由用抗體之連續稀釋液預培育擴增之臨床分離株病毒來進行中和分析。細胞感染量測為細胞表面上F蛋白表現之函數。藉由中和曲線之非線性擬合計算IC50值。如實例2(活體外微量中和分析)中量測病毒複製。
結果提供於圖10中。在中和HEp2細胞中RSV之A分離株或B分離株中，1G7及1F5之IC50均低於D25。
本文中所引用之全部參考文獻(包括專利、專利申請案、論文、教科書及類似文獻)及其中所引用之參考文獻均在其尚未引用之程度上，據此出於所有目的以全文引用之方式併入本文中。
應認為前述書面說明書足以使熟習此項技術者能夠實踐該等實施例。以上描述及實例詳述某些實施例且描述本發明人涵蓋之最佳模式。然而，應瞭解，無論前文可在本文中如何詳細地呈現，實施例可以多種方式實踐且申請專利範圍包括其任何等效物。
<110> 美商麥迪紐有限責任公司
<120> RSV-專一性抗體及其功能性部位
<150> 61/927,819
<151> 2014-01-15
<160> 21
<170> PatentIn vcrsion 3.5
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Claims (5)
- 一種抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段專一性結合呼吸道融合病毒(RSV)且在中和RSV次型(subtype)A及B株中均有效且包含：與SEQ ID NO：15至少98%一致之重鏈可變區及與SEQ ID NO：8相同之輕鏈可變區，其中該重鏈可變區CDR1序列包含DYIIN(SEQ ID NO：9)，該重鏈可變區CDR2序列包含GIIPVLGTVHYGPKFQG(SEQ ID NO：10)，且該重鏈可變區CDR3序列包含與ETALVVSTTYLPHYFDN(SEQ ID NO：3)或ETALVVSTTYRPHYFDN(SEQ ID NO：11)相同，或有一或二個胺基酸不同之序列，且其中該重鏈可變區進一步包含與SEQ ID NO：7不同之下列胺基酸：
- 如請求項1之抗體或其抗原結合片段，其包含與SEQ ID NO：15至少99%一致之重鏈可變區。
- 如請求項1之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含人類IgG1同型且包含在位置252具有Y、在位置254具有T且在位置256具有E之Fc區，其中該編號對應於Kabat中之EU索引。
- 如請求項1之抗體或其抗原結合片段，其中該抗原結合片段為單鏈抗體、單鏈可變片段(scFv)、Fab片段或F(ab')2片段。
- 一種如請求項1至4中任一項之抗體或其抗原結合片段的用途，其係用於製備預防或治療RSV感染的藥物。
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| AU2008268362A1 (en) * | 2007-06-26 | 2008-12-31 | Medimmune, Llc | Methods of treating RSV infections and related conditions |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Kwakkenbos MJ et al., "Generation of stable monoclonal antibody–producing B cell receptor–positive human memory B cells by genetic programming", Nature medicine, vol.16, p.123-128, 2009/12/20 * |
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