TWI701037B - 用以抑制黑色素瘤細胞轉移之中草藥組合物及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

本發明係有關於一種中草藥組合物，其係由包含以下配比的原料所製成：百合1重量份、魚腥草5重量份、白朮2重量份、茯苓2重量份、酸棗仁1重量份、沙參3重量份、沙苑子2重量份、生薑0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大棗0.5重量份、及龍眼肉0.1重量份。本發明並有關於前述之中草藥組合物用於製備抑制黑色素瘤細胞轉移之藥物的用途。本發明亦有關於前述之中草藥組合物的製備方法。

Description

用以抑制黑色素瘤細胞轉移之中草藥組合物及其製備方法
本發明係有關於一種中草藥組合物，其用於製備抑制黑色素瘤細胞轉移之藥物的用途，以及其製備方法。
腫瘤的轉移(tumor metastasis)是一個很複雜的過程，通常參與了數個步驟，首先癌細胞會從腫瘤的原發部位分離(detach)下來，位移(migration)至淋巴或血管，破壞血管基底膜並進入淋巴或血液，此時癌細胞須躲避免疫系統的攻擊才能存活下來，並且吸附於遠處血管內皮，再滲透(extravasation)到新的轉移位置，然後再生長成腫瘤。
黑色素瘤(melanoma)是具有高度轉移活性(highmetastatic)，肺是其主要轉移器官之一，具轉移活性的的黑色素瘤是較危險的皮膚癌，同時也是造成皮膚癌而致死的主因，約佔75%，而且有較不好的癒後，存活率大於5年少於5%。
本發明係有關於一種中草藥組合物，其係由包含以下配比的原料所製成：百合1重量份、魚腥草5重量份、白朮2重量份、茯苓2重量份、酸棗仁1重量份、沙參3重量份、沙苑子2重量份、生薑0.5重量份、蒺藜5重 量份、藿香3重量份、大棗0.5重量份、及龍眼肉0.1重量份。
於一實施例中，該蒺藜係為蒺藜科之台灣蒺藜(Tribulus taiwanense)。
本發明並有關於前述之中草藥組合物用於製備抑制黑色素瘤細胞轉移之藥物的用途，其係以一合理劑量之前述之中草藥組合物施予一有需求之個體，以達到抑制黑色素瘤轉移之功效。
於一實施例中，該黑色素瘤細胞轉移係指移轉至肺部。
於一實施例中，該合理劑量係為該有需求之個體之每公斤體重施以1~5公克之該中草藥組合物。
於一實施例中，該中草藥組合物係透過口服方式給予該有需求之個體。
於一實施例中，該中草藥組合物係連續14天施予該有需求之個體。
本發明亦有關於一種用於抑制黑色素瘤細胞轉移之中草藥組合物的製備方法，該製備方法包括下列步驟：將蒺藜5重量份以及魚腥草5重量份以一有機溶劑浸泡並將其過濾而形成一個濾液；濃縮該濾液而成一萃取液；將百合1重量，白朮2重量份，茯苓2重量份，酸棗仁1重量份，沙參3重量份，沙苑子2重量份，生薑0.5重量份，藿香3重量份，大棗0.5重量份及龍眼肉0.1重量份以水浸泡而得一浸液；將該浸液再濃縮取得一濃縮液；以及將該萃取液及該濃縮液混合後施以高溫高壓並再濃縮以得到該中草藥組合物。
於一實施例中，該有機溶劑係為乙醇；於另一實施例中，該 乙醇之濃度為20%。
於一實施例中，該濾液係將濃度提升7倍而得到該萃取液。
於一實施例中，該浸液係將濃度提升10倍而得到該濃縮液。
圖1、(A)以5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移的肺轉移；(B)以7.5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移的肺轉移。
圖2、(A)以7.5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移；(B)連續14天口服給予本發明之中草藥組合物(1毫克/每公斤體重)對於以7.5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移的抑制效果。
圖3、(A)以5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移；(B)連續14天口服給予本發明之中草藥組合物(1毫克/每公斤體重)對於以5 x 104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量誘導的黑色素瘤轉移的抑制效果。
以下之實施例非為限定用途，僅用以呈現此發明之多種面向。
實施例一、本發明中草藥組合物之製備方法
將台灣蒺藜5公斤以及魚腥草5公斤以20%食用酒精浸泡48小時後，以二氧化矽基柱(Silica based columns)取得過濾液，以高溫濃縮將濃度提升7倍，而成一萃取液。其他包含百合1公斤，白朮2公斤，茯苓2公 斤，酸棗仁1公斤，沙參3公斤，沙苑子2公斤，生薑0.5公斤，藿香3公斤，大棗0.5公斤，及龍眼肉0.1公斤之十種藥材，清洗後用飲用水浸泡24小時，再高溫濃縮10倍以取得濃縮液。將前述萃取液及濃縮液混合後於密閉空間施以高溫高壓(130℃,2大氣壓)3小時，再5倍濃縮。
實施例二、本發明中草藥組合物之抑制黑色素瘤細胞轉移之動物實驗
實驗動物
C57BL/6小鼠購自樂斯科生物科技實驗動物中心，飼養與處理方式係根據美國實驗動物規範(Duide for Care and Use of Laboratory Animals,NIH,1985)。動物引進並經飼育室適應2-3週，進行稱重及臨床診斷，篩選出不具疾病之動物，並從中挑選體重相近(誤差範圍平均值20%)之動物，依體重大小，分成適當重量群，進行隨機分組，各組6隻動物，共4組。各組分佈情形詳見表一。
Figure 108121029-A0305-02-0006-1
誘導肺腫瘤之動物實驗模式
本動物實驗主要將5×104黑色素瘤細胞(B16-F10)從小鼠(C56BL/6；年齡，6~7周)的尾靜脈打入血液中，動物分組為控制組(只有打黑色素瘤細胞未給藥)，以及每天以胃管餵食低、中、高三種不同劑量的本 發明之中草藥組合物(如表一)，共分4組，分別在14天後，評估肺腫瘤的情形，主要是利用斷頸的方式犧牲小鼠，然後將肺移出並浸泡於10%甲醛中，再以肉眼及顯微鏡來評估黑色素瘤群落。依以上分組進行實驗，樣本數每組皆為6隻。
分別使用5×104、7.5×104黑色素瘤細胞/每小鼠植入小鼠體內，14天後，發現7.5×104黑色素瘤細胞/每小鼠的腫瘤細胞量能夠有意義地誘導黑色素瘤的肺轉移(圖1)。
實施例三、本發明中草藥組合物之抑制黑色素瘤細胞轉移之效果
以7.5×104黑色素瘤細胞/每小鼠的施打量來誘導黑色素瘤的肺轉移，並且以口服劑量5公克/每公斤體重之本發明之中草藥組合物施予小鼠，發現小鼠隔天皆死亡。
以7.5×104黑色素瘤細胞/每小鼠的施打量來誘導黑色素瘤的肺轉移，並且以口服劑量1公克/每公斤體重之本發明之中草藥組合物連續14天施予小鼠，可以發現抑制黑色素瘤轉移之效果(圖2)。
以5×104黑色素瘤細胞/每小鼠的施打量來誘導黑色素瘤的肺轉移，並且以口服劑量1公克/每公斤體重之本發明之中草藥組合物連續14天施予小鼠，可以發現抑制黑色素瘤轉移之效果(圖3)。
實施例四、本發明中草藥組合物之抑制黑色素瘤細胞轉移之施用方法以及劑量限制
使用中、高劑量各別口服注入3隻健康小鼠，隔天發現這些小鼠皆死亡(表二)，由此結果顯示本發明之中草藥組合物在較高劑量下可能 是有毒性的。
Figure 108121029-A0101-12-0006-2
為使此發明所屬技術領域中具有通常知識者得以了解製作以及使用這項技藝的方法，此發明已描述並已充分詳細舉例說明，然而，各式各樣的變體，修改或改進應被視為無異於此項發明之精神與範圍。
本發明所屬技術領域中具有通常知識者易於理解並實現本發明之目的，並獲得先前所提到之結果及優點。本發明所使用之細胞，動物以及生產它們的過程和方法乃代表最佳實施例，乃示例性質，而不作為限制本發明的範圍用途。本領域的技術人員與製作或使用此項技藝時所將產生之修改或其他用途皆涵蓋於本發明的精神內，並且由權利範圍所限定。

Claims (11)

  1. 一種中草藥組合物，其係由包含以下配比的原料所製成：百合1重量份、魚腥草5重量份、白朮2重量份、茯苓2重量份、酸棗仁1重量份、沙參3重量份、沙苑子2重量份、生薑0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大棗0.5重量份、及龍眼肉0.1重量份。
  2. 如申請專利範圍第1項之中草藥組合物，其中該蒺藜係為蒺藜科之台灣蒺藜(Tribulus taiwanense)。
  3. 一種如申請專利範圍第1項之中草藥組合物用於製備抑制黑色素瘤細胞轉移之藥物的用途，其係以一合理劑量施予一有需求之個體，以達到抑制黑色素瘤轉移之功效。
  4. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該黑色素瘤細胞轉移係指移轉至肺部。
  5. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該中草藥組合物係透過口服方式給予該有需求之個體。
  6. 如申請專利範圍第3項之用途，其中該中草藥組合物係連續14天施予該有需求之個體。
  7. 一種用於抑制黑色素瘤細胞轉移之中草藥組合物的製備方法，該製備方法包括下列步驟：將蒺藜5重量份以及魚腥草5重量份以一有機溶劑浸泡並將其過濾而形成一個濾液； 濃縮該濾液而成一萃取液；將百合1重量，白朮2重量份，茯苓2重量份，酸棗仁1重量份，沙參3重量份，沙苑子2重量份，生薑0.5重量份，藿香3重量份，大棗0.5重量份及龍眼肉0.1重量份以水浸泡而得一浸液；將該浸液再濃縮取得一濃縮液；以及將該萃取液及該濃縮液混合後施以高溫高壓並再濃縮以得到該中草藥組合物。
  8. 如申請專利範圍第7項之製備方法，其中該有機溶劑係為乙醇。
  9. 如申請專利範圍第8項之製備方法，其中該乙醇之濃度為20%。
  10. 如申請專利範圍第7項之製備方法，其中該濾液係將濃度提升7倍而得到該萃取液。
  11. 如申請專利範圍第7項之製備方法，其中該浸液係將濃度提升10倍而得到該濃縮液。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103599292A (zh) * 2013-11-26 2014-02-26 李强 一种归芍六君丸的制备方法及应用
CN106511915A (zh) * 2017-01-16 2017-03-22 江苏省中医院 一种复方中药组合物在抑制皮肤黑色素瘤肺转移药物中的应用

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