CN112089814B - 用于抑制黑色素瘤细胞转移的中草药组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明关于一种中草药组合物，其由包含以下配比的原料所制成：百合1重量份、鱼腥草5重量份、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份、及龙眼肉0.1重量份。本发明并有关于前述的中草药组合物用于制备抑制黑色素瘤细胞转移的药物的用途。本发明也关于前述的中草药组合物的制备方法。

Description

用于抑制黑色素瘤细胞转移的中草药组合物及其制备方法
技术领域
本发明有关于一种中草药组合物，其用于制备抑制黑色素瘤细胞转移的药物的用途，以及其制备方法。
背景技术
肿瘤的转移(tumor metastasis)是一个很复杂的过程，通常参与了数个步骤，首先癌细胞会从肿瘤的原发部位分离(detach)下来，位移(migration)至淋巴或血管，破坏血管基底膜并进入淋巴或血液，此时癌细胞须躲避免疫系统的攻击才能存活下来，并且吸附于远处血管内皮，再渗透(extravasation)到新的转移位置，然后再生长成肿瘤。
黑色素瘤(melanoma)是具有高度转移活性(highmetastatic)，肺是其主要转移器官之一，具转移活性的的黑色素瘤是较危险的皮肤癌，同时也是造成皮肤癌而致死的主因，约占75％，而且有较不好的愈后，存活率大于5年少于5％。
发明内容
本发明有关于一种中草药组合物，其由包含以下配比的原料所制成：百合1重量份、鱼腥草5重量份、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份、及龙眼肉0.1重量份。
在实施例中，该蒺藜系为蒺藜科的中囯台湾蒺藜(Tribulus taiwanense)。
并且，本发明有关于前述的中草药组合物用于制备抑制黑色素瘤细胞转移的药物的用途，其以合理剂量的前述的中草药组合物施予有需求的个体，以达到抑制黑色素瘤转移的功效。
在实施例中，该黑色素瘤细胞转移指移转至肺部。
在实施例中，该合理剂量为该有需求的个体的每公斤体重施以1～5克的该中草药组合物。
在实施例中，透过口服方式将该中草药组合物给予该有需求的个体。
在实施例中，连续14天将该中草药组合物施予该有需求的个体。
本发明亦有关于一种中草药组合物的制备方法，该制备方法包括下列步骤：将蒺藜5重量份以及鱼腥草5重量份以有机溶剂浸泡并将其过滤而形成滤液；浓缩该滤液而成萃取液；将百合1重量、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份及龙眼肉0.1重量份以水浸泡而得浸液；将该浸液再浓缩取得浓缩液；以及将该萃取液及该浓缩液混合后施以高温高压并再浓缩以得到该中草药组合物。
在实施例中，该有机溶剂为乙醇；于另一实施例中，该乙醇的浓度为20％。
在实施例中，将该滤液的浓度提升7倍而得到该萃取液。
在实施例中，将该浸液的浓度提升10倍而得到该浓缩液。
附图说明
图1.(A)以5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移的肺转移；(B)以7.5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移的肺转移。
图2.(A)以7.5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移；(B)连续14天口服给予本发明的中草药组合物(1毫克/每公斤体重)对于以7.5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移的抑制效果。
图3.(A)以5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移；(B)连续14天口服给予本发明的中草药组合物(1毫克/每公斤体重)对于以5x104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量诱导的黑色素瘤转移的抑制效果。
具体实施方式
以下的实施例并非用于限定本发明，仅用于呈现此发明的多个方面。
实施例一、本发明中草药组合物的制备方法
将中囯台湾蒺藜5公斤以及鱼腥草5公斤以20％食用酒精浸泡48小时后，以二氧化硅基柱(Silica based columns)取得过滤液，以高温浓缩将浓度提升7倍，而成萃取液。其他包含百合1公斤、白术2公斤、茯苓2公斤、酸枣仁1公斤、沙参3公斤、沙苑子2公斤、生姜0.5公斤、藿香3公斤、大枣0.5公斤、及龙眼肉0.1公斤的十种药材，清洗后用饮用水浸泡24小时，再高温浓缩10倍以取得浓缩液。将前述萃取液及浓缩液混合后于密闭空间施以高温高压(130℃,2大气压)3小时，再5倍浓缩。
实施例二、本发明中草药组合物的抑制黑色素瘤细胞转移的动物实验
实验动物
C57BL/6小鼠购自乐斯科生物科技实验动物中心，饲养与处理方式为根据美国实验动物规范(Duide for Care and Use of Laboratory Animals,NIH,1985)。动物引进并经饲育室适应2-3周，进行称重及临床诊断，筛选出不具疾病的动物，并从中挑选体重相近(误差范围平均值20％)的动物，依体重大小，分成适当重量群，进行随机分组，各组6只动物，共4组。各组分布情形详见表一。
Figure GDA0003314426650000031
诱导肺肿瘤的动物实验模式
本动物实验主要将5×104黑色素瘤细胞(B16-F10)从小鼠(C56BL/6；年龄，6～7周)的尾静脉打入血液中，动物分组为控制组(只有打黑色素瘤细胞未给药)，以及每天以胃管喂食低、中、高三种不同剂量的本发明的中草药组合物(如表一)，共分4组，分别在14天后，评估肺肿瘤的情形，主要是利用断颈的方式牺牲小鼠，然后将肺移出并浸泡于10％甲醛中，再以肉眼及显微镜来评估黑色素瘤群落。依以上分组进行实验，样本数每组皆为6只。
分别使用5×104、7.5×104黑色素瘤细胞/每小鼠植入小鼠体内，14天后，发现7.5×104黑色素瘤细胞/每小鼠的肿瘤细胞量能够有意义地诱导黑色素瘤的肺转移(图1)。
实施例三、本发明中草药组合物的抑制黑色素瘤细胞转移的效果
以7.5×104黑色素瘤细胞/每小鼠的施打量来诱导黑色素瘤的肺转移，并且以口服剂量5克/每公斤体重的本发明的中草药组合物施予小鼠，发现小鼠隔天皆死亡。
以7.5×104黑色素瘤细胞/每小鼠的施打量来诱导黑色素瘤的肺转移，并且以口服剂量1克/每公斤体重的本发明的中草药组合物连续14天施予小鼠，可以发现抑制黑色素瘤转移的效果(图2)。
以5×104黑色素瘤细胞/每小鼠的施打量来诱导黑色素瘤的肺转移，并且以口服剂量1克/每公斤体重的本发明的中草药组合物连续14天施予小鼠，可以发现抑制黑色素瘤转移的效果(图3)。
实施例四、本发明中草药组合物的抑制黑色素瘤细胞转移的施用方法以及剂量限制
使用中、高剂量分别口服注入3只健康小鼠，隔天发现这些小鼠皆死亡(表二)，由此结果显示本发明的中草药组合物在较高剂量下可能是有毒性的。
Figure GDA0003314426650000041
为使此发明所属技术领域中具有通常知识者得以了解制作以及使用这项技艺的方法，此发明已描述并已充分详细举例说明，然而，各式各样的变体，修改或改进应被视为无异于此项发明的精神与范围。
本发明所属技术领域中具有通常知识者易于理解并实现本发明之目的，并获得先前所提到的结果及优点。本发明所使用的细胞、动物以及生产它们的过程和方法代表最佳实施例，属于示例性质，而不作为限制本发明的范围用途。本领域的技术人员与制作或使用此项技艺时所将产生的修改或其他用途皆涵盖于本发明的精神内，并且由权利范围所限定。

Claims (9)

1.一种抑制黑色素瘤细胞转移的中草药组合物，其由以下配比的原料：百合1重量份、鱼腥草5重量份、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份、及龙眼肉0.1重量份所制成。
2.根据权利要求1所述的中草药组合物，其中所述蒺藜为蒺藜科的中囯台湾蒺藜(Tribulus taiwanense)。
3.一种中草药组合物用于制备抑制黑色素瘤细胞转移的药物的用途，其中所述中草药组合物由以下配比的原料：百合1重量份、鱼腥草5重量份、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、蒺藜5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份、及龙眼肉0.1重量份所制成。
4.根据权利要求3所述的用途，其中所述黑色素瘤细胞转移指移转至肺部。
5.一种中草药组合物的制备方法，所述制备方法包括下列步骤：
将蒺藜5重量份以及鱼腥草5重量份以有机溶剂浸泡并将其过滤而形成滤液；
浓缩所述滤液而成萃取液；
将百合1重量份、白术2重量份、茯苓2重量份、酸枣仁1重量份、沙参3重量份、沙苑子2重量份、生姜0.5重量份、藿香3重量份、大枣0.5重量份及龙眼肉0.1重量份以水浸泡而得浸液；
将所述浸液再浓缩取得浓缩液；以及
将所述萃取液及所述浓缩液混合后施以高温高压并再浓缩以得到所述中草药组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其中所述有机溶剂为乙醇。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其中所述乙醇的浓度为20%。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其中将所述滤液的浓度提升7倍而得到所述萃取液。
9.根据权利要求5所述的制备方法，其中将所述浸液的浓度提升10倍而得到所述浓缩液。
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"中医综合疗法治疗皮肤癌多向转移1例";闫明;《中国民间疗法》;20081231(第5期);第37-38页 *

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