CN108567820B - 一种用于肿瘤治疗的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于肿瘤治疗的中药组合物及其制备方法，包括以下原料制备而成：苦参、野菊花、金银花、薄荷、茯苓、苍术、肉桂、丁香、黄芪、灵芝、川芎、木香和甘草。本发明所述中药组合物的组方经大小白鼠药效试验证明抗肿瘤效果显著；且药材获取简单，成本相对低廉，具有增强机体免疫功能，抗肿瘤的作用。

Description

一种用于肿瘤治疗的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药及中药制备领域，涉及一种用于肿瘤治疗的中药组合物及其制备方法。

背景技术

肿瘤(tumour)是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物(neogrowth)，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物(neoplasm)。根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类，而癌症即为恶性肿瘤的总称。癌症(cancer)，亦称恶性肿瘤(malignant neoplasm)，为由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。癌症是一大类恶性肿瘤的统称。癌细胞的特点是无限制、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗；癌细胞释放出多种毒素，使人体产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。与之相对的有良性肿瘤，良性肿瘤则容易清除干净，一般不转移、不复发，对器官、组织只有挤压和阻塞作用，但癌症(恶性肿瘤)还可破坏组织、器官的结构和功能，引起坏死出血合并感染，患者最终由于器官功能衰竭而死亡。

目前，恶性肿瘤的治疗主要采用手术治疗，化学治疗或放射线治疗等，其中手术治疗术后恢复困难，化学治疗和放射线治疗等对人体伤害较大。

现在的恶性肿瘤治疗中，抗肿瘤药物市场近年来呈逐年增长的势头，但由于肿瘤病人逐年增加，且多数抗肿瘤药物毒副作用较大，因此发明一种效果明显，且副作用小的抗癌药物具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于肿瘤治疗的中药组合物，本发明所要解决的另一技术问题在于提供一种用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用了以下技术方案实现：本发明所要解决的问题是提供一种用于肿瘤治疗的中药组合物。

本发明的一种用于肿瘤治疗的中药组合物，包括以下重量配比的原料制成：

苦参3％-12％，野菊花5％-15％，金银花2％-12％，薄荷5％-15％，茯苓5％-15％，苍术10％-20％，肉桂0.5％-3％，丁香0.5％-3％，黄芪3％-12％，灵芝5％-15％，川芎10％-20％，木香5％-12％，甘草2％-10％。

进一步的，所述用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：

苦参5％-10％，野菊花5％-10％，金银花3％-8％，薄荷5％-10％，茯苓5％-10％，苍术12％-20％，肉桂0.5％-3％，丁香0.5％-3％，黄芪5％-10％，灵芝5％-10％，川芎11％-15％，木香8％-12％，甘草3％-8％。

进一步的，所述用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：

苦参6％-10％，野菊花6％-9％，金银花3％-6％，薄荷6％-9％，茯苓6％-9％，苍术15％-18％，肉桂1％-3％，丁香0.5％-1.5％，黄芪6％-10％，灵芝6％-10％，川芎12％-15％，木香8％-11％，甘草3％-6％。

进一步的，所述用于肿瘤治疗的中药组合物的剂型为：注射剂、蜜炼丸剂、水合丸剂、胶囊、片剂、滴丸剂、散剂、口服液体药物、凝胶剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。

本申请还提供一种所述的用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照上述之一重量配比称取各中药成分，分别粉碎至粒度至10目-100目过筛后混合均匀；

(2)配制浓度为40％-95％的乙醇溶液备用；采用制备的所述浓度为40％-95％的乙醇溶液将混合均匀后的中药浸润10-48小时，将浸润后的中药混合物分次加入渗漉桶，轻压铺平；

(3)将所述配制的浓度为40％-95％的乙醇溶液加入到步骤(2)中的渗漉桶中，加至超过药材表面1-2cm，浸泡预设时间后，将剩余乙醇进行渗漉，保留药渣备用；所得醇液减压浓缩，干燥得到中药复合粉末A；

(4)将所述药渣加2-10倍药渣量的水，水煎提取0.5-2h，离心过滤，药液减压浓缩干燥得到中药复合粉末B，将所述中药复合粉末A和中药复合粉末B混合均匀得到中药组合物。

进一步的，所述步骤(1)中各种药材粉碎粒度至20-40目；最优选24目；所述步骤(2)和(3)中所配制的乙醇浓度为60％-80％，最优选70％。

优选的，所述步骤(2)中将混合均匀后的中药浸润18-30小时；最优选24小时；所述步骤(3)中浸泡时间为2-48小时，优选18-36小时。

本申请还提供一种用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照所述重量配比称取川芎、苍术、木香、丁香、肉桂、薄荷加适量水提取挥发油后，加环糊精包合，水煎液过滤另器收集作为剩余药液备用；

(2)将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加水煎煮，过滤药液，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液；

(3)将得到的中药混合药液通过水浴浓缩至清膏，醇沉，加乙醇使含醇量达到50％-80％得到中药混合醇液；

(4)将所述中药混合醇液进行减压浓缩，干燥后，加入挥发油环糊精包合物制得中药组合物。

进一步的，所述步骤(1)中挥发油提取溶剂用量为4-15倍所述药材量的水，提取时间2-12小时；得到的挥发油在40摄氏度以下进行环糊精包合，包合时间1～10小时。

优选的，所述步骤(1)中挥发油提取溶剂用量为4-8倍所述药材量的水，最优选的可以为6倍；所述步骤(1)中进行环糊精包合时间为2-8小时，最优选6小时。

进一步的，所述步骤(2)包括：将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加10～15倍药材量的水煎煮2～5次，每次1-2小时；将煎煮得到的药液进行过滤，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液。

进一步的，所述步骤(3)包括：将得到的中药混合药液通过水浴进行浓缩，浓缩至相对密度为1.06-1.08的清膏，加入乙醇使含醇量达60％，静置12小时以上得到中药混合醇液。

本申请还提供一种所述的用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照所述重量配比称取各中药成分；

(2)配制浓度为40％-80％的乙醇溶液备用；将混合均匀的中药中加入所述配制的乙醇溶液，加热回流提取1-4次，每次1-2小时，将提取液合并，减压回收乙醇后进行浓缩干燥，得到中药组合物。

进一步的，所述步骤(2)中配制浓度为50％-70％的乙醇溶液备用，优选的配置浓度为60％的乙醇溶液。

本发明所选药剂原料：

1、苦参：苦，寒。归心、肺、肾、大肠经。清热燥湿，祛风杀虫。主治湿热泻痢，肠风便血，黄疸，小便不利，水肿，带下，阴痒，皮肤瘙痒等。苦参含有苦参碱、氧化苦参碱、脱氧苦参碱等多种活性抗癌成分，同时还有扩张血管、抗炎、升高白细胞、中枢系统抑制等多种不同作用。苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721，人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖，可使细胞聚集于S期，起到诱导分化的作用，可明显抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附，减轻内皮细胞的通透性，减少肿瘤的转移；具有很好的抗肿瘤作用。在抑制肿瘤生长的同时，能够扩张血管，改善肿瘤脏器的缺血、瘀血情况，还能够改变中枢对疼痛的反应，从而消除引起疼痛的原因，达到止痛的目的。其主要作用机理是：(1)直接杀伤肿瘤细胞；(2)直接作用于靶DNA而抗肿瘤；(3)通过影响细胞周期而抗肿瘤；(4)通过诱导肿瘤细胞凋亡的发生而抗肿瘤。大量的实验研究表明，苦参具有明显的止痛、抗癌、提高免疫力、止血等作用。能明显减轻化疗毒副作用，提高患者生活质量，在化疗当中对骨髓、肝、肾等脏器有良好的保护作用。

2、野菊花：味苦；辛；性平。入肺；肝经。清热解毒；疏风平肝。主治疔疮；痈疽；丹毒；湿疹；皮炎；风热感冒；咽喉肿痛；高血压病。《本草汇言》载：“破血疏肝；解疔散毒。主妇人腹内宿血，解天行火毒丹疔。洗疮疥，又能去风杀虫。”现代医学研究证实，野菊花具有广谱抗菌作用，对多数皮肤真菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和流感病毒均有较强的抑制作用，还具有降压、降脂、预防感冒的作用。

3、金银花：性甘、寒。归肺、胃经。清热解毒，消炎退肿。主治外感风热或温病发热，中暑，热毒血痢，痈肿疔疮，喉痹，多种感染性疾病。具有抗病原微生物作用，抗毒作用，抗炎作用，可明显促进炎性细胞吞噬功能作用，降血脂作用，对肉瘤S180和艾式腹水癌有明显的细胞毒作用。

4、薄荷：味辛，性凉，归肺、肝经。宣散风热，清利头目，利咽透疹，疏肝解郁。主治风热表证，头痛目赤，咽喉肿痛，麻疹不透，风疹瘙痒，肝郁胁痛。《本草新编》：“薄荷，不特善解风邪，尤善解忧郁，用香附以解郁，不若用薄荷解郁之更神。薄荷入肝胆之经，善解半表半里之邪，较柴胡更为轻清。”。薄荷还具有保肝利胆的作用，抗炎抗微生物的作用。

5、茯苓：味甘；淡；性平。入心；脾；肺；肾经。渗湿利水；健脾和胃；宁心安神。主治小便不利；水肿胀满；痰饮咳逆；呕吐；脾虚食少；泄渲；心悸不安；失眠健忘；遗精白浊。《别录》载：“止消渴，好睡，大腹，淋沥，膈中痰水，水肿淋结。开胸腑，调脏气，伐肾邪，长阴，益气力，保神守中。”现代医学研究证实，茯苓对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等均有抑制作用，能杀死钩端螺旋体等细菌，对消化系统、血液系统及中枢神经系统具有一定的保护作用，此外茯苓聚糖含量很高，可抗肿瘤活性。

6、苍术：性辛、味苦，温。归脾、胃、肝经。功能主治燥湿健脾，祛风散寒，明目。用于脘腹胀满，泄泻水肿，脚气痿躄，风湿痹痛，风寒感冒，夜盲。对心血管系统的影响显示，苍术对蟾蜍心脏有轻度抑制作用，对蟾蜍后肢血管有轻度扩张作用。苍术浸膏小剂量静脉注射，可使家兔血压轻度上升，大剂量则使血压下降。苍术燥湿健脾功效相关的药理作用为调整胃肠运动功能、抗溃疡、保肝、抑菌等。苍术主要有效成分是以β-桉叶醇及茅术醇为代表的挥发油。苍术对血糖的影响，抗缺氧、中枢抑制、抗肿瘤、促进骨骼钙化及对心血管系统的影响等作用，则是其药理作用的现代研究进展。临床研究报道，苍术水煎剂能明显促进肝蛋白的合成，生药及其所含苍术醇、苍术酮、B-桉叶醇对四氯化碳诱发的一级培养鼠肝细胞损害均有显著的预防作用。

7、肉桂：辛、甘，大热，归肾、脾、心、肝经，功效补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经。补元阳，暖脾胃，除积冷，通血脉。《本草正》：桂，善平肝木之阴邪，而不知善助肝胆之阳气，惟其味甘，故最补脾土，凡肝邪克土而无火者，用此极妙。

8、丁香：辛温芳香，归脾、胃、肺、肾经，具有温中降逆、行气止痛之功，为治呕逆之要药。《本草正》：温中快气。治上焦呃逆，除胃寒泻痢，七情五郁。《本草经疏》谓之：“辛温暖脾胃而行滞气……而香气又能走窍除秽浊也。”

9、黄芪：以补虚为主，能补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气血不足、疮疡内陷、脓成不溃或久溃不敛者。黄芪具有很好的托毒生肌的功能，即久不愈合的脓肿化脓生肌。黄芪主要成分为黄芪皂苷、黄芪多糖、氨基丁酸、微量元素(硒、锰、铁、锌、铜)和钙等；现代医学研究表明，黄芪内含而多种抗菌有效成分，而且能增强机体的免疫功能，因此还能用于预防某些传染病的发生。《本草逢原》载：“黄芪能补五脏诸虚，治脉弦自汗，泻阴火，去肺热，无汗则发，有汗则止。”是增进抵抗力和防御疾病的良药。大量的临床研究证实，黄芪具有保护心脏及肾脏、双向调节血糖及血压、抗缺氧、抗自由基氧化、抗衰老、抗肿瘤及增强机体免疫力等功效。

10、灵芝：味甘苦、性平，归肺；心；脾；肾经。益气血；安心神；健脾胃。主治：虚劳；心悸；失眠；头晕；神疲乏力；久咳气喘；冠心病；矽肺；肿瘤。《神农本草经》：“赤芝，味苦平。主胸中结，益心气，补中，增慧智，不忘。现代医学研究发现，灵芝可有效地扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善心肌微循环，增强心肌氧和能量的供给，因此，对心肌缺血具有保护作用，可广泛用于冠心病、心绞痛等的治疗和预防。对高血脂病患者，灵芝可明显降低血胆固醇、脂蛋白和甘油三脂，并能预防动脉粥样硬化斑块的形成。对于粥样硬化斑块已经形成者，则有降低动脉壁胆固醇含量、软化血管、防止进一步损伤的作用。

11、川芎：入肝、脾、三焦三经。功用主治行气开郁，法风燥湿，活血止痛。治风冷头痛旋晕，胁痛腹疼，寒痹筋挛，经闭，难产，产后瘀阻块痛，痈疽疮疡。用于月经不调，经闭痛经，瘕腹痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，头痛，风湿痹痛。《纲目》载：″燥湿，止泻痢，行气开郁。″川芎嗪解除血管平滑肌(主动脉条)痉挛(肾上腺素、氯化钾引起)。是活血化瘀的良药。川芎具有活血行气、祛风止痛之功效实验证实用川芎可减缓大、小鼠及犬的放射性照射与氮芥損伤，因而对肿瘤病人有明显的保护作用，且具有一定的抗癌功效，对白血病癌细胞有抑制作用。川芎的抗癌作用主要体现在降低肿瘤细胞的表面活性，使其不易粘附成团而易于在血流中被单个杀死；改变癌症患者的血液高凝状态，抑制癌细胞转移。

12、木香：辛、苦、温，归脾胃经，具有行气止痛，健脾消食的作用。《本草纲目》：“木香，乃三焦气分之药，能升降诸气；中气不运，皆属于脾，故中焦气滞宜之者，脾胃喜芳香也”；现代药理发现木香对胃肠道有兴奋和抑制的双向调节作用，能加快胃肠蠕动、促进胃排空。木香具有行气止痛、健脾消食之功效，用于治疗胸脘胀痛、泻痢后重、食积不消等；现代医学研究证明，木香具有治疗癌症的作用。

13、甘草：补气固表，温中，调和药物偏性，不伤正气。味甘；性平。归心；肺；脾；胃经。补脾益气；清热解毒；祛痰止咳；缓急止痛；调和诸药。主治脾胃虚弱；倦怠乏力；心悸气短；咳嗽痰多；脘腹四脚挛急疼痛；痈肿疮毒；缓解药物毒性。《本草纲目》载：“诸药中甘草为君。治七十二种乳石毒，解一千二百般草本毒，调和从药有功。”现代医学研究证实，甘草有较强的解毒作用，还有抗溃疡、抗炎症、镇痉镇咳、降血压、降血脂、抗癌作用，广泛用于治疗咽喉炎、喉炎、气管炎、支气管炎、哮喘、咳嗽、咳血等疾病，此外还具有抗胃溃疡、抗胃炎作用。

本发明的有益效果还在于：

本发明中以苦参大苦大寒，清热燥湿重用为君。苦参大苦大寒，其退热泄降，荡涤湿火之效，能杀湿热所生之毒。且苦参含有苦参碱、氧化苦参碱、脱氧苦参碱等多种活性抗癌成分，同时还有扩张血管、抗炎、升高白细胞、中枢系统抑制等多种不同作用。苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721，人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖，可使细胞聚集于S期，起到诱导分化的作用，可明显抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附，减轻内皮细胞的通透性，减少肿瘤的转移；具有很好的抗肿瘤作用。在抑制肿瘤生长的同时，能够扩张血管，改善肿瘤脏器的缺血、瘀血情况，还能够改变中枢对疼痛的反应，从而消除引起疼痛的原因，达到止痛的目的。以野菊花、金银花、薄荷疏风清热，以清肺卫之热毒；茯苓、苍术健脾祛湿，以祛脾胃之湿滞。共奏清热燥湿解毒之效以为臣。其中薄荷宣散风热，清利头目，利咽透疹，疏肝解郁，兼具保肝利胆的作用，抗炎抗微生物的作用。金银花清热解毒，消炎退肿；具有抗病原微生物作用，抗毒作用，抗炎作用，可明显促进炎性细胞吞噬功能作用，降血脂作用，对肉瘤S180和艾式腹水癌有明显的细胞毒作用。茯苓味甘；淡；性平。入心；脾；肺；肾经。“止消渴，好睡，大腹，淋沥，膈中痰水，水肿淋结。开胸腑，调脏气，伐肾邪，长阴，益气力，保神守中。”且现代医学证明茯苓的茯苓聚糖含量很高，可抗肿瘤活性；茯苓对消化系统、血液系统及中枢神经系统具有一定的保护作用。苍术主要有效成分是以β-桉叶醇及茅术醇为代表的挥发油。苍术对血糖的影响，抗缺氧、中枢抑制、抗肿瘤、促进骨骼钙化及对心血管系统的影响等作用。则苦参为君，与野菊花、金银花、薄荷；茯苓、苍术配伍功效更佳。湿热一去，则阳亦衰微矣。故大队苦寒之中，少佐丁香、肉桂补火助阳以为反佐，防湿去阳微而功亏一篑，且少火亦可生气，可保人之元阳不熄。黄芪、灵芝益气扶正，固本培元。温阳与益气共用，可防止诸药苦寒太过，伤人脾胃。且传统医学认为灵芝主治：虚劳；心悸；失眠；头晕；神疲乏力；久咳气喘；冠心病；矽肺；肿瘤；并能够对心肌缺血具有保护作用。现代医学研究表明，黄芪内含而多种抗菌有效成分，而且能增强机体的免疫功能，黄芪具有保护心脏及肾脏、双向调节血糖及血压、抗缺氧、抗自由基氧化、抗衰老、抗肿瘤及增强机体免疫力等功效。川芎具有行气开郁，法风燥湿，活血止痛之功效并能够降低癌细胞表面活性。临床研究报道，川芎的抗癌作用主要体现在降低肿瘤细胞的表面活性，使其不易粘附成团而易于在血流中被单个杀死；改变癌症患者的血液高凝状态，抑制癌细胞转移。而木香具有行气止痛之用，且在《神农本草经》中记载：主邪气，辟毒疫，强志，主淋露。《本草经集注》中亦有记载：疗毒肿，消恶气。木香配合川芎具有显著的抗肿瘤的功效，可抗肿瘤活性，降低癌细胞表面活性等。甘草用于调和诸药，补气固表，温中，调和药物偏性，不伤正气；且现代医学研究证实，甘草有较强的解毒作用，还有抗溃疡、抗炎症、镇痉镇咳、降血压、降血脂、抗癌作用。

癌症多以热毒壅盛，气滞血瘀，气血两亏为主要证候，故本申请的中药组合物以解毒，健脾，清热为主加之茯苓、苍术、川芎、黄芪，苦参等的抗肿瘤作用，辅以理气化瘀，补益气血为组方大法而组方；本申请中以苦参大苦大寒，清热燥湿重用为君。苦参大苦大寒，其退热泄降，荡涤湿火之效，能杀湿热所生之毒，较之芩、连力量益烈。臣以野菊花、金银花、薄荷疏风清热，以清肺卫之热毒；茯苓、苍术健脾祛湿，以祛脾胃之湿滞。共奏清热燥湿解毒之效以为臣。湿热一去，则阳亦衰微矣。故大队苦寒之中，少佐丁香、肉桂补火助阳以为反佐，防湿去阳微而功亏一篑，且少火亦可生气，可保人之元阳不熄。黄芪、灵芝益气扶正，固本培元。温阳与益气共用，可防止诸药苦寒太过，伤人脾胃。川芎、木香活血行气，通达气血，使气行血畅，壅滞之湿热毒邪自可随气血而去。故共用为佐。甘草甘平缓急，调和诸药以为使。

在药物的选用方面，不用峻厉之品，而以药性平和的药物，且组方构成简单，安全，易用。本中药组合物有扶正固本、活血化瘀、清热解毒、软坚散结之功效，吸收效果好，无临床不良反应，能够提高人体自身免疫力，活血化淤散结，能有效抑制肿瘤生长，避免西药的耐药，防止肿瘤的复发与转移，且成本低廉、制取工艺简便易行。本发明采用不同药性的中药材，进行了科学配伍，药性相适相辅，能达到理想的治疗效果，且安全，能减轻病患痛苦。

本发明所述中药组合物的组方经大小白鼠药效试验证明抗肿瘤效果显著；且药材获取简单，成本相对低廉，具有增强机体免疫功能，抗肿瘤的作用。

本发明采用的制备方法简单，药物提取效果好，利用提取物制成中药组合物的方法简单，方便。

具体实施方式

实施例1

一种用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：苦参8％，野菊花9％，金银花4％，薄荷6％，茯苓6％，苍术17％，肉桂2％，丁香1％，黄芪8％，灵芝10％，川芎13％，木香9％，甘草7％。

该用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法包括：按照上述重量配比称取各中药成分，分别粉碎至粒度至20目过筛后混合均匀；配制浓度为70％的乙醇溶液备用；采用制备的所述浓度为70％的乙醇溶液将混合均匀后的中药浸润至少24h，将浸润后的中药混合物分次加入渗漉桶，轻压铺平；将所述配制的浓度为70％的乙醇溶液加入到渗漉桶中，加至超过药材表面1-2cm，浸泡18-30小时后，将剩余乙醇进行渗漉，保留药渣备用；所得醇液减压浓缩，干燥得浸泡到中药复合粉末A；将所述药渣加2-10倍药渣量的水，水煎提取0.5-2h，离心过滤，药液减压浓缩干燥得到中药复合粉末B，将所述中药复合粉末A和中药复合粉末B混合均匀得到中药组合物。

实施例2

一种用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：苦参7％，野菊花7％，金银花6％，薄荷8％，茯苓8％，苍术15％，肉桂2％，丁香1.5％，黄芪7％，灵芝8％，川芎15％，木香10％，甘草5.5％。

该用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法包括：按照所述重量配比称取川芎、苍术、木香、丁香、肉桂、薄荷加适量挥发油提取溶剂提取挥发油，挥发油提取溶剂用量为6倍所述药材量的水，提取时间2-12小时；提取挥发油后，在40摄氏度以下进行环糊精包合，包合时间6小时；水煎液过滤另器收集作为剩余药液备用；将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加10～15倍药材量的水煎煮2～5次，每次1-2小时；将煎煮得到的药液进行过滤，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液；将得到的中药混合药液通过水浴进行浓缩，浓缩至相对密度为1.06-1.08的清膏，加入乙醇使含醇量达60％，静置12小时以上得到中药混合醇液；将所述中药混合醇液进行减压浓缩，干燥后，加入挥发油环糊精包合物制得中药组合物。

实施例3

一种用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：苦参8％，野菊花7％，金银花5％，薄荷6％，茯苓9％，苍术18％，肉桂1.5％，丁香0.5％，黄芪6％，灵芝9％，川芎16％，木香9％，甘草5％。

该用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法包括：按照所述重量配比称取各中药成分。

配制浓度为60％的乙醇溶液备用；将混合均匀的中药中加入6倍量所述配制的乙醇溶液，加热回流提取2次(加热至微沸腾进行回流提取)，每次1-2小时，将2次提取液合并，减压回收乙醇后进行浓缩干燥，得到中药组合物。

实施例4

一种用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：苦参6％，野菊花9％，金银花8％，薄荷5％，茯苓9％，苍术19％，肉桂1％，丁香1％，黄芪6％，灵芝15％，川芎11％，木香9％，甘草10％。

该用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法包括：按照上述重量配比称取各中药成分，分别粉碎至粒度至30目过筛后混合均匀；配制浓度为650％的乙醇溶液备用；采用制备的所述浓度为65％的乙醇溶液将混合均匀后的中药浸润36h，将浸润后的中药混合物分次加入渗漉桶，轻压铺平；将所述配制的浓度为65％的乙醇溶液加入到渗漉桶中，加至超过药材表面1-2cm，浸泡18小时后，将剩余乙醇进行渗漉，保留药渣备用；所得醇液减压浓缩，干燥得浸泡到中药复合粉末A；将所述药渣加5倍药渣量的水，水煎提取1-2h，离心过滤，药液减压浓缩干燥得到中药复合粉末B，将所述中药复合粉末A和中药复合粉末B混合均匀得到中药组合物。

实施例5

一种用于肿瘤治疗的中药组合物包括以下重量配比的原料制成：苦参9％，野菊花8％，金银花3％，薄荷9％，茯苓8％，苍术16.5％，肉桂1％，丁香1％，黄芪9％，灵芝9％，川芎13.5％，木香10％，甘草3％。

该用于肿瘤治疗的中药组合物的制备方法包括：按照所述重量配比称取川芎、苍术、木香、丁香、肉桂、薄荷加适量挥发油提取溶剂提取挥发油，挥发油提取溶剂用量为4倍所述药材量的水，提取时间2-12小时；提取挥发油后，在40摄氏度以下进行环糊精包合，包合时间5小时；水煎液过滤另器收集作为剩余药液备用；将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加10～15倍药材量的水煎煮2～5次，每次1-2小时；将煎煮得到的药液进行过滤，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液；将得到的中药混合药液通过水浴进行浓缩，浓缩至相对密度为1.06-1.08的清膏，加入乙醇使含醇量达60％，静置12小时以上得到中药混合醇液；将所述中药混合醇液进行减压浓缩，干燥后，加入挥发油环糊精包合物制得中药组合物。

药效试验：

为了验证本发明在肿瘤治疗中的效果，采用实施例1和实施例2方法制得的中药组合物用于以下药效试验。

本发明的用于肿瘤治疗的中药组合物成人临床推荐剂量为生药量7.6g生药/60kg/d，换算成裸小鼠等效用量为1.4g/kg/d。试验中采用2.8、1.4、0.7g/kg/d三个剂量组(分别相当于人临床用量的2倍、等倍、1/2倍)。

本发明的用于肿瘤治疗的中药组合物对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠模型的抑制作用。

本发明的用于肿瘤治疗的中药组合物2个实施例(简称中药组合物1号，中药组合物2号)所得样品各剂量组肿瘤体积在给药后与模型对照组比较均有所下降，在给药8天后肿瘤体积与模型对照组比较下降明显(P<0.01,P<0.05)。与模型对照组比较，中药组合物1号的高剂量组和中药组合物2号的中剂量组的相对肿瘤增值率在28-70之间。2个样品各剂量组瘤块重量与模型对照组比较下降明显(P<0.01)。综合本次试验数据后发现：2号样品中剂量组肿瘤体积在给药4-20天5个检测时间点与模型对照组比较均有差异，其相对肿瘤增值率在给药8天后在40以下，该给药组瘤块重量最小。

1试验材料

1.1受试药物中药组合物1号，中药组合物2号；用法用量：口服，原临床推荐剂量为每日生药量7.6g。

1.2阳性对照药复方环磷酰胺片，生产单位：通化茂祥制药有限公司。适应症：恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、淋巴细胞白血病、神母细胞瘤、卵巢癌、乳癌以及各种肉瘤及肺癌等。批号：160702，生产日期：2016.07.25，有效期至：2018.06。成分：复方制剂，组份为环磷酰胺(50mg)和人参茎叶总皂苷(50mg)。性状：肠溶衣片，除去包衣后显黄褐色或灰褐色。规格：每片含环磷酰胺50mg，人参茎叶总皂苷50mg，12片/板，2板/盒。用法用量：口服，成人一次1片，一日3～4次。储存条件：遮光，密封，30℃以下保存。

1.3试验动物

1.4肿瘤细胞株

1.5试验试剂

试剂名称	批号	生产厂家	用途
				PBS磷酸缓冲液	1789842	美国Gibco	冲洗细胞
DMEM高糖培养基	8116489	美国Gibco	培养细胞
				胎牛血清	1390781	美国Gibco	培养细胞
双抗	J130061	Hyclore	培养细胞
				0.25％胰酶	1616025	美国Gibco	细胞消化、传代

1.6试验仪器

1.7试验主要耗材

名称	规格
		塑料培养瓶	225cm<sup>2</sup>
移液枪枪头	黄色(200ul)、蓝色(1000ul)
		离心管	1ml、5ml

2试验方法

2.1剂量设计

2.1.1用于肿瘤治疗的中药组合物：成人临床推荐剂量为7.6g生药/60kg/d，试验中按人与动物体表面积换算，小鼠用量为人用量的11倍，小鼠的给药剂量为(7.6/60)×11＝1.4g生药/kg/d，送检药液浓度配成2g生药/ml，小鼠的给药剂量换为体积为(1.4/2)*1＝0.7ml/kg/d，故三种提取物大、中、小剂量为1.4ml/kg/d、0.7ml/kg/d、0.35ml/kg/d(分别相当于人临床用量的2倍、等倍及1/2倍)。

2.1.2复方环磷酰胺片：成人临床推荐剂量175mg/60kg/d，试验中按人与动物体表面积换算，小鼠用量按人用量的11倍计算，小鼠的给药剂量为(175/60)×11＝32mg/kg/d。

2.2人肺腺癌细胞株(A549)的培养细胞株培养在完全培养基中(DMEM培养液+10％胎牛血清，pH7.2)，置于37℃5％CO₂恒温培养箱内，每天更换培养液，细胞培养至80％-90％融合率，0.25％胰蛋白酶消化，离心后传代，待细胞培养至一定数量，用PBS稀释成肿瘤细胞悬液接种于试验动物体内。

2.3细胞体外活性检测及肿瘤细胞悬浮液的制备在无菌条件下取生长良好的A549肿瘤细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，离心后，混悬细胞，采用台盼蓝染色法，使用全自动细胞计数仪检测细胞活性并计数。用PBS稀释成2×10⁷个细胞/ml浓度的肿瘤细胞悬浮液。

2.4接种A549肿瘤细胞制备人肺癌移植瘤模型取体重为18±2g的裸小鼠，雌雄各半，在实验动物中心适应性饲养7日。在无菌条件下，将裸鼠用75％乙醇皮肤消毒后，在裸鼠右腋皮下接种人肺腺癌A549细胞悬液0.2ml，接种后将裸鼠送回笼具，定期观察小鼠的精神、饮食及排便等情况。接种1周左右，可见接种部位皮下长出米粒大小的硬结，为移植瘤模型建成。

2.5分组及给药接种肿瘤细胞2周后，挑选瘤块、体重均匀的裸小鼠，随机分为8组，分别为模型对照组、环磷酰胺阳性对照组、中药组合物1号高、中、低三个剂量组、中药组合物2号高、中、低三个剂量组，每组7只，分组当天开始给药，每日一次，给药量为0.2ml/10g，口服给药，连续给药3周。

2.6观察指标给药当天测定裸鼠的体重、肿瘤体积，隔3日测定一次，三周后称重处死裸小鼠，取出肿瘤组织称重，计算每组平均瘤重、肿瘤生长抑制率、肿瘤体积、相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率。

计算方法：

肿瘤体积(tumor volume,TV)的计算公式为：V＝1/2×a×b²。其中a、b分别表示长宽高。

相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)的计算公式为：RTV＝Vt/V₀。其中V₀为分笼给药时(即d₀)测量所得肿瘤体积，V_t为每一次测量时的肿瘤体积。

相对肿瘤增殖率T/C(％)(抗肿瘤活性的评价指标)的计算公式为：T/C％＝TRTV/CRTV×100％。(TRTV：治疗组RTV；CRTV：阴性对照组RTV)。

2.7统计学处理实验数据经Excel表建库整理后，用SPSS13.0统计软件包进行分析，计量资料以X±s表示，两组间比较用t检验，多组间比较用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

3试验结果

3.1 A549肿瘤细胞计数(接种时细胞浓度)将细胞离心后，用PBS混悬，取10ul细胞悬液稀释一倍后加20ul台盼蓝染色剂，吹打均匀后加入细胞计数板内，插入全自动细胞计数仪内进行检测。总细胞数：2.14×10⁷/ml；活细胞数：1.5×10⁷/ml；死细胞数：6.42×10⁶/ml；细胞存活率：95.04％。

3.2对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠模型肿瘤体积生长情况的影响

表1中药组合物对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠模型肿瘤体积生长情况的影响(

n＝7)

Table 1 Effect of Ai Kang tablets on tumor volume in BALB/c nude miceinfected with human lung adenocarcinoma cancer cell(A549)(

n＝7)mm³

注：与模型对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01；

从结果可以看出中药组合物2种工艺样品在给药2天后起肿瘤体积与模型对照组比较均有所下降。2个样品在给药8-20天后肿瘤体积与模型对照组比较明显下降(P<0.01,P<0.05)，其中2号药品中剂量组肿瘤体积在给药4-20天5个检测时间点与模型对照组比较均有差异(P<0.01)，从数值上看差异也最为显著。

3.3对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠相对肿瘤增值体积(RTV)及相对肿瘤增值率的影响

表2中药组合物对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠相对肿瘤增值体积(RTV)及相对肿瘤增值率(T/C％)的影响(

n＝7)

Table 2 Effect of Ai Kang tablets on the relative tumor volume andthe relative proliferationrate in BALB/c nude mice infected with human lungadenocarcinoma cancer cell(A549)(

n＝7)

注：与模型对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01；

结果显示：艾康2号中剂量组的相对肿瘤增值体积在给药期间与模型对照组比较有差异(P<0.05)，其余各用药组与模型组无差异。与模型对照组比较，艾康1号高剂量组、艾康2号中剂量组的相对肿瘤增值率在28-70之间，其余用药组的相对肿瘤增值率在50-90之间。

3.4对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠相对肿瘤重量的影响

表3中药组合物对人肺腺癌细胞株(A549)裸小鼠模型肿瘤重量的影响(

n＝7)

Table 3 Effect of Ai Kang tablets on tumor weight in BALB/c nude miceinfected with human lung adenocarcinoma cancer cell(A549)(

n＝7)(g)

注：与模型对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01；

中药组合物各剂量组瘤块重量与模型对照组比较均有差异(P<0.01)，艾康2号中剂量组肿瘤块重量最小。

4结论

中药组合物对人肺腺癌细胞株(A549)裸鼠的肿瘤增长有一定的抑制作用。2种提取工艺制得的样品均可明显降低裸鼠肿瘤体积、相对肿瘤增值体积、肿瘤增值率、肿瘤重量。整体药效从高到低排序为：2号样品〉1号样品〉复方环磷酰胺片。

以上所述仅为本发明的优选实施例，对本发明具有说明性，而非限制性，本领域技术人员应理解，在本发明权利要求所限定的范围内可对其进行适应性的改变，但均应落入本发明的保护范围之内。

Claims (12)

1.一种用于肺部肿瘤治疗的中药组合物，其特征在于：所述用于肺部肿瘤治疗的中药组合物由以下重量配比的原料制成：

苦参3%-12%，野菊花5%-15%，金银花2%-12%，薄荷5%-15%，茯苓5%-15%，苍术10%-20%，肉桂0.5%-3%，丁香0.5%-3%，黄芪3%-12%，灵芝5%-15%，川芎10%-20%，木香5%-12%，甘草2%-10%。

2.根据权利要求1所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物，其特征在于：所述用于肺部肿瘤治疗的中药组合物由以下重量配比的原料制成：

苦参5%-10%，野菊花5%-10%，金银花3%-8%，薄荷5%-10%，茯苓5%-10%，苍术12%-20%，肉桂0.5%-3%，丁香0.5%-3%，黄芪5%-10%，灵芝5%-10%，川芎11%-15%，木香8%-12%，甘草3%-8%。

3.根据权利要求1所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物，其特征在于，所述用于肺部肿瘤治疗的中药组合物由以下重量配比的原料制成：

苦参6%-10%，野菊花6%-9%，金银花3%-6%，薄荷6%-9%，茯苓6%-9%，苍术15%-18%，肉桂1%-3%，丁香0.5%-1.5%，黄芪6%-10%，灵芝6%-10%，川芎12%-15%，木香8%-11%，甘草3%-6%。

4.根据权利要求1-3任一项所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物，其特征在于，所述用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的剂型为：注射剂、蜜炼丸剂、水合丸剂、胶囊、片剂、滴丸剂、散剂、口服液体药物、凝胶剂、浸膏剂或膜剂。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

步骤（1） 按照所述重量配比称取各中药成分，分别粉碎至粒度至10目-100目过筛后混合均匀；

步骤（2）配制浓度为40%-95%的乙醇溶液备用；采用制备的所述浓度为40%-95%的乙醇溶液将混合均匀后的中药浸润10-48小时，将浸润后的中药混合物分次加入渗漉桶，轻压铺平；

步骤（3）将所述配制的浓度为40%-95%的乙醇溶液加入到步骤（2）中的渗漉桶中，加至超过药材表面1-2cm，浸泡预设时间后，将剩余乙醇进行渗漉，保留药渣备用；所得醇液减压浓缩，干燥得到中药复合粉末A；

步骤（4）将所述药渣加2-10倍药渣量的水，水煎提取0.5-2h，离心过滤，药液减压浓缩干燥得到中药复合粉末B，将所述中药复合粉末A和中药复合粉末B混合均匀得到中药组合物。

6.根据权利要求5所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中各种药材粉碎粒度至20-40目；所述步骤（2）和（3）中所配制的乙醇浓度为60%-80%。

7.根据权利要求6所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中将混合均匀后的中药浸润18-30小时；所述步骤（3）中浸泡时间为2-48小时。

8.根据权利要求1-3中任一项所述的一种用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

步骤（1）按照所述重量配比称取川芎、苍术、木香、丁香、肉桂、薄荷加适量水提取挥发油后，加环糊精包合，水煎液过滤另器收集作为剩余药液备用；

步骤（2）将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加水煎煮，过滤药液，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液；

步骤（3）将得到的中药混合药液通过水浴浓缩至清膏，醇沉，加乙醇使含醇量达到50%-80%得到中药混合醇液；

步骤（4）将所述中药混合醇液进行减压浓缩，干燥后，加入挥发油环糊精包合物制得中药组合物。

9.根据权利要求8所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中挥发油提取溶剂用量为4-15倍所述药材量的水，提取时间2-12小时；得到的挥发油在40摄氏度以下进行环糊精包合，包合时间1~10小时。

10.根据权利要求8所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）包括：将挥发油提取后得到的药渣与按所述重量配比称取的茯苓，黄芪，野菊花，灵芝，金银花，苦参，甘草加10~15倍药材量的水煎煮2~5次，每次1-2小时；将煎煮得到的药液进行过滤，将过滤后的药液与提取挥发油后得到的剩余药液合并得到中药混合药液。

11.根据权利要求8所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）包括：将得到的中药混合药液通过水浴进行浓缩，浓缩至相对密度为1.06-1.08的清膏，加入乙醇使含醇量达60%，静置12小时以上得到中药混合醇液。

12.根据权利要求1-3中任一项所述的用于肺部肿瘤治疗的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

步骤（1）按照所述重量配比称取各中药成分；

步骤（2）配制浓度为40%-80%的乙醇溶液备用；将混合均匀的中药中加入所述配制的乙醇溶液，加热回流提取1-4次，每次1-2小时，将提取液合并，减压回收乙醇后进行浓缩干燥，得到中药组合物。