TWI643842B - （３ｓ，３ｓ’）４，４’－二硫二基雙（３－胺基丁烷１－磺酸）與ｌ－離胺酸之新穎結晶相 - Google Patents

Abstract

本發明係關於一種(3S,3S')4,4'-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)(ABSD)與L-離胺酸之新穎結晶相及其尤其在醫藥工業方面之用途，及係關於其之製備方法。本發明亦關於包含至少一種(3S,3S')4,4'-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)(ABSD)與L-離胺酸之結晶相之醫藥組合物及係關於該結晶相及包含該結晶相之組合物之治療或預防用途。

Description

(3S,3S’)4,4’-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)與L-離胺酸之新穎結晶相

本發明係關於一種(3S,3S')4,4'-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)(ABSD)與L-離胺酸之新穎結晶相及其尤其在醫藥工業方面之用途，及係關於其之製備方法。本發明亦關於包含至少一種(3S,3S')4,4'-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)(ABSD)與L-離胺酸之結晶相之醫藥組合物及係關於該結晶相及包含該結晶相之組合物之治療或預防用途。ABSD與L-離胺酸之新穎結晶相係無水且呈現高度熱穩定性及較ABSD三水合物高的水溶解度。

ABSD為選擇性胺肽酶A(APA)抑制劑3-胺基4-巰基丁磺酸之二聚物。已證實ABSD為有效的抗高血壓藥，如由Bodineau等人在Hypertension 2008年51，1318-1325中所述。ABSD及其作為抗高血壓藥之用途揭示於專利申請案WO 2004/007441中。ABSD之結構式為以下：

ABSD最初係如WO 2004/007441中所述以其鈉鹽之雙鹽酸鹽形式單離。未說明該化合物為結晶然清楚地說明其是具高度吸濕性。

如國際專利申請案WO 2012/045849中所述，ABSD亦以其非鹽化形式呈兩性離子單離。發現該兩性離子可形成若干種水合物。其通常係呈單、二及三水合物形式之混合物存在。發現於ABSD兩性離子中之各水合物形式的比係與貯藏條件(溫度、大氣壓及相對濕度(RH))相關。實際上，水合形式之混合物當在約20℃及RH>50%下貯藏時可於小於兩天的時間內向三水合物相演變。該三水合物相似乎是在環境條件下最為穩定的相。

然而，其脫水(更特定言之脫水成二水合物形式)開始在低於30℃之溫度下出現。此部分脫水通常係與膨脹效應相關聯，該膨脹效應會損害使用該活性有效成分(本文中亦稱為API)製造錠劑之可能性。因此，ABSD之兩性離子形式中缺乏熱穩定性、存在水及對相對濕度敏感對於其醫藥調配物可成妨礙。另外，處理及貯藏困難度極有可能會損害ABSD兩性離子形式進一步開發成醫藥組合物之可行API。

雖然治療效力是治療劑之主要關注點，候選藥物之鹽及固態形式(即，晶型及/或非晶型狀態)仍可對其藥理學性質及其開發成可行API具重要性。為了製造適於投與給哺乳動物之包含ABSD之醫藥組合物，需要製得呈具有經得起可靠調配之物理性質之形式的該化合物。因此，本技藝中需要提供ABSD之改良形式，其具有增強的性質，諸如，改良的溶解度或生物可利用性及熱、水分、及/或光穩定性。找到用於進一步開發藥物之API之最適宜形式可縮短開發時間並降低開發成本。

於本發明中，申請人現已發現可驚人地尤其以1：2化學計量(ABSD：L-離胺酸)使ABSD與L-離胺酸接觸獲得具有極受關注性質之特定結晶相。

單離ABSD與L-離胺酸之新穎結晶相。該相係無水且驚人地呈現高度熱穩定性(高達180℃)。該新穎相具有白色及良好過濾性，且相較於ABSD兩性離子形式之彼等呈現室溫下更高的水溶解度及更低的吸濕性。該相為用於醫藥應用之ABSD兩性離子形式的極受關注的替代品。

利用ABSD之其他鹽，諸如單-及二-鈉鹽，或自ABSD與除L-離胺酸外之其他胺基酸之組合，咸無法獲得該等最佳性質。

於一態樣中，本發明提供一種ABSD與L-離胺酸之晶型。

於另一態樣中，本發明係關於一種用於製備ABSD與L-離胺酸之晶型之方法，該方法包括以下步驟：a.以較佳包括約1：1.5至1：2.5之化學計量使ABSD或其鹽或其混合物與L-離胺酸接觸，b.視需要引起結晶相之形成，及/或視需要提高該結晶相之結晶度，c.單離由步驟(a)、視需要可選之步驟(b)所獲得的結晶相。

於另一實施例中，本發明提供一種包含與醫藥上可接受的載劑或稀釋劑組合之本發明晶型之醫藥組合物。

於又一實施例中，本發明提供本發明之晶型，其係用於治療高血壓及相關疾病。

圖1：針對實例1a之懸浮液施行之溫度相對時間熟化循環。

圖2：在溶液中獲得之ABSD.(L-離胺酸)₂之XRPD圖樣(a)及以HEM獲得之ABSD.(L-離胺酸)₂之XRPD圖樣(b)與自結晶結構計算得之ABSD三水合物圖樣(c)及L-離胺酸單水合物圖樣(d)間的比較。

圖3：ABSD.(L-離胺酸)₂之DSC圖樣。該實驗係自-20℃至 180℃(加熱速率=5K/min)進行。

圖4：ABSD之二鈉鹽之XRPD圖樣(a)與自結晶結構計算得之ABSD三水合物圖樣(b)間的比較。

圖5：基於ABSD二鈉鹽自30℃至180℃(加熱速率=5K/Min)進行之TGA-DSC。

圖6：針對ABSD氫鈉鹽施行之溫度相對時間熟化循環。

圖7：ABSD之氫鈉鹽之XRPD圖樣(a)與ABSD二鈉鹽圖樣(b)及自結晶結構計算得之ABSD三水合物圖樣(c)間的比較。

圖8：基於ABSD氫鈉鹽自30℃至180℃(加熱速率=5K/Min)進行之TGA-DSC。

圖9：由緩慢蒸發單離之ABSD之L-半胱胺酸鹽之XRPD圖樣(a)與由過濾單離之ABSD之L-半胱胺酸鹽之XRPD圖樣(b)、自結晶結構計算得之ABSD三水合物圖樣(c)及L-半胱胺酸圖樣(d)間的比較。

圖10：基於ABSD之L-半胱胺酸鹽自30℃至220℃(加熱速率=5K/Min)進行之TGA-DSC。

本發明提供ABSD與L-離胺酸之晶型，其作為一種新穎材料，尤其係呈醫藥上可接受的形式。如本文所用術語「醫藥上可接受的」係指在合理醫療判斷範圍下適於與人類及動物組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應、或其他與合理效益/風險比相稱之問題併發症之彼等化合物、材料、組合物、及/或劑型。

於某些較佳實施例中，該晶型係呈實質上純的形式。本文所用術語「實質上純」意指具有大於約90重量%(包括(例如)約重量91%、約92重量%、約93重量%、約94重量%、約95重量%、約96重量%、約97重量%、約98重量%、約99重量%、及約100重量%)純度之化合物。

本文所用術語「約」意指數值之±1%。

結晶相

結晶相之化學結構更明確言之為<ABSD.(L-離胺酸)₂>。

鑑於ABSD之可行醫藥應用，該結晶相存在受關注的物化特性。特定言之，該相係無水(晶格中不含水分子)且呈現尤其高達180℃之高度熱穩定性。該新穎相具有白色及良好過濾性，且相較於ABSD兩性離子形式之彼等呈現室溫下更高的水溶解度及更低的吸濕性。

該相極受關注及為ABSD兩性離子形式之創新替代品。其應同時地解決ABSD兩性離子之熱穩定性問題及提高活性成分之水溶解度。

特徵分析

可藉由熟習此項技藝者所熟知的各種分析技術來識別及/或表徵本文所述之晶型。該等技術包括(但不限於)x-射線粉末繞射(XRPD)、示差掃描量熱法(DSC)、熱重分析(TGA)、水分吸附等溫線、及/或IR光譜。

本發明之晶型可尤其地由其X-射線繞射圖樣(包括下表1中所列峰值)、或更明確言之由利用Cu Kα陽極獲得之顯示於圖2a中之其X-射線繞射圖樣來表徵。

熟習此項技藝者當明瞭可獲得具有與所採用的測量條件相關的測量誤差的X-射線繞射圖樣。特定言之，一般已知X-射線繞射圖樣之 強度會隨所採用的測量條件及顆粒形狀或形態以及晶體尺寸分佈而波動。應進一步明瞭相對強度亦可隨實驗條件改變及因此不應將強度之精確順序列入考慮。另外，習知X-射線繞射圖樣之繞射角的測量誤差通常為約±0.02°(單位為2θ)或更小，較佳係約±0.01°。因此，應明瞭本發明之結晶形式不限於提供完全與顯示於圖2a或說明於表1或2中之X-射線繞射圖樣一致的X-射線繞射圖樣之結晶形式。可提供實質上與揭示於圖2a或說明於表1或2中之X-射線繞射圖樣一致的X-射線繞射圖樣之任何結晶形式係屬於本發明之範疇。確定X-射線繞射圖樣實質上同一性之能力係在熟習此項技藝者之權限內。

製法

可由多種方法製備本發明之晶型，包括(例如)自適宜溶劑結晶或再結晶、昇華、自熔體生長、自另一相之固態轉變、自超臨界流體結晶、及噴霧乾燥。用於自溶劑混合物結晶或再結晶晶型之技術包括(例如)蒸發溶劑、降低溶劑混合物之溫度、對分子及/或鹽之過飽和溶劑混合物之種晶、冷凍乾燥溶劑混合物、及添加抗溶劑(反萃溶劑)至溶劑混合物。

藥物之晶體(包括多晶型)、製備方法、及藥物晶體之特徵分析述於Solid-State Chemistry of Drugs，S.R.Byrn、R.R.Pfeiffer、及J.G.Stowell，第2版，SSCI，West Lafayette，Ind.(1999年)中。

就利用溶劑之結晶技術而言，通常係根據一或多個因素諸如化合物之溶解性、結晶技術、溶劑之蒸氣壓、溶劑之黏度及毒性來選擇溶劑。可利用溶劑之組合，例如，可將化合物溶解於第一溶劑中而獲得溶液，接著添加抗溶劑以降低該化合物於該溶液中之溶解性，及獲致晶體之形成。抗溶劑為於其中化合物具有低溶解性之溶劑。

於一具體實施例中，本發明提供一種用於製備ABSD與L-離胺酸之晶型之方法，該方法包括以下步驟：

(a)以較佳包括約1：1.5至1：2.5之化學計量(尤其係約1：2之化學計量)使ABSD或其鹽或其混合物與L-離胺酸接觸，

(b)視需要引起結晶相之形成，及/或視需要藉由一或多個溫度循環，例如(諸如，一種圖1所顯示者)提高固相之結晶度。

(c)單離由步驟(a)(或(b))所獲得的結晶相。

步驟(a)可例如在溶液中進行，特定言之，可將ABSD及L-離胺酸懸浮於水中，或較佳藉由高能研磨(HEM)(特別是藉由濕式(乙醇)HEM)以固態進行。

當步驟(a)係在溶液中進行時，可例如藉由添加抗溶劑(諸如乙醇)來進行步驟(b)。步驟(b)亦可藉由利用所需晶型之晶體對溶液種晶及/或施行一或多個溫度循環來進行。於一實施例中，當步驟(a)係在溶液中進行時，藉由添加抗溶劑(諸如乙醇)來進行步驟(b)，或藉由利用所需晶型之晶體對溶液種晶且接著藉由施行一或多個溫度循環來進行步驟(b)。後一步驟係經設計成可提高結晶度及因而提高過濾性及最終產物之化學純度。

可例如藉由蒸發反應溶劑、藉由過濾或藉由離心來進行步驟(c)。

在本發明方法中可進行本發明方法之各個步驟、各個步驟部分(例如，步驟(b)之第一或第二部分)、及/或步驟之各個組合(例如，步驟(b)及步驟(c)之組合)一次，或可與其他步驟或步驟部分無關地重複若干次。

例如，在步驟(b)中，可進行該溫度循環一次，或者，可重複該溫度循環若干次，較佳5至15次，特別是10次。連續地重複步驟(b)尤其容許提高相之結晶度。

由本發明方法獲得之晶型係本發明之另一標的。

醫藥用途

本發明之ABSD與L-離胺酸之晶型(更特定言之<ABSD.(L-離胺酸)₂>)、或由本發明方法獲得之晶型可用於用於預防或治療高血壓及/或相關疾病之方法中，該方法包括投與治療有效量的該晶型。

於另一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含較佳與醫藥上可接受的載劑或稀釋劑組合之本發明晶型、或由本發明方法獲得之晶型。

於另一態樣中，本發明提供本發明之晶型、或由本發明方法獲得之晶型、或本發明之醫藥組合物，其係用於治療(特別是人類藥物)中。

於另一態樣中，本發明提供本發明之晶型、或由本發明方法獲得之晶型、或本發明之醫藥組合物，其係用於治療高血壓及/或相關疾病。

於另一態樣中，本發明提供一種以本發明之晶型、或由本發明方法獲得之晶型、或本發明之醫藥組合物於製造適於治療高血壓及/或相關疾病之藥物上之用途。

於另一態樣中，本發明提供一種治療罹患高血壓及/或相關疾病之個體之方法，該方法包括投與治療有效量之本發明晶型、或由本發明方法獲得之晶型、或本發明之醫藥組合物。

本發明提供用於預防或治療高血壓及直接或間接與高血壓相關之疾病之方法。

根據本發明，個體可為人類或動物。

於較佳實施例中，間接或直接與高血壓相關之疾病選自由以下組成之群：心臟病、末梢及腦血管系統、腦、眼睛及腎臟。特定言之，疾病包括原發性及續發性動脈高血壓、發作、心肌缺血、心臟衰竭、腎衰竭、心肌梗塞、末梢性血管疾病、糖尿病性蛋白尿、X症候群及青光眼。疾病亦可包括更特定言之高血壓性糖尿病患者中之腎 病、視網膜病變及神經病變。

特定言之，疾病包括原發性及續發性高血壓、中風、心肌缺血、心臟衰竭及腎衰竭、心肌梗塞、末梢性血管疾病、蛋白尿、糖尿病、代謝症候群及青光眼。

醫藥組合物可經口或非經口投與，例如，透過非經腸式、靜脈內、皮膚、舌下、鼻、直腸途徑或透過氣霧劑遞送至肺。

較佳地，本發明之組合物係經口投與。

本發明之醫藥組合物包括調配物，諸如顆粒劑、粉劑、錠劑、膠囊、糖漿、乳液及懸浮液、以及用於非口服給藥之劑型(例如注射劑、噴霧或栓劑)。

該等醫藥形式可藉由已知的傳統技術製得。本發明之醫藥組合物可藉由將本發明之晶型與生理上可接受的支撐體、賦形劑、黏結劑、稀釋劑等等混合製得。

本發明之醫藥組合物有利地包含一或多種醫藥上可接受的支撐體或載體。更佳地，該組合物欲用於口服，該醫藥上可接受的支撐體或載體因而適用於口服。作為實例，可提及可與醫藥用途相容且為熟習此項技藝者所熟知的鹽水、生理、等滲、緩衝溶液等等。

提供實例作為非限制性說明。

實例

實例1：製備本發明之晶型

a-在溶液中製備

首先，將2.71×10^-3mol ABSD兩性離子(無水)溶解於水中。接著，分開地將5.42×10^-3mol L-離胺酸溶解於水中。將這兩種水溶液混合且接著添加過量乙醇(作為抗溶劑)以沉澱出結晶相。對該懸浮液施行在10個20與50℃之間的熟化循環以提高固相之結晶度。該等熟化循環呈現於圖1中。藉由過濾或離心單離晶型。

b-藉由利用高能研磨(HEM)之製備

將2.71×10-³mol ABSD兩性離子(無水)與5.42×10^-3mol L-離胺酸間之物理混合物遞送至行星式研磨機中之濕式HEM(或液體輔助碾磨)。80mL的瑪瑙罐係與同一材料的9個球(10mm)併用。行星式支撐之旋轉速度設定在400rpm而衛星之旋轉速度設定在-400rpm(逆向模式)。

研磨之持續時間設定為1200分鐘，在60個研磨15分鐘接著停止5分鐘的循環中崩散。

實例2：本發明晶型之特徵分析

a-X-射線繞射圖樣

圖2顯示在溶液中獲得的<ABSD.(L-離胺酸)₂>之XRPD圖樣(a)及依實例1藉由HEM獲得的<ABSD.(L-離胺酸)₂>之XRPD圖樣(b)與ABSD三水合物圖樣(c)及L-離胺酸單水合物圖樣(d)間的比較。目測比較該等圖樣，清楚地顯示在溶液中以及藉由HEM單離得一新穎相，下表2提供與圖2a之光譜對應的XPRD峰之列表。

b-示差掃描量熱法

藉由DSC分析所單離的相(所謂的「ABSD L-離胺酸鹽」)(圖3)。此分析未展現高達180℃之任何熱現象。該結果顯示本發明之<ABSD.(L-離胺酸)₂>晶型之良好熱穩定性。該等結果進一步證實該晶型係無水的。

c-卡爾費歇爾滴定(Karl Fischer titration)

卡爾費歇爾滴定係可測定試樣中微量水之經典滴定法。卡爾費歇爾滴定已藉由測得試樣中水含量為0.06%(即，極少量的吸附水)證實DSC分析。

ABSD L-離胺酸鹽因而係無水固態，且呈現遠高於ABSD兩性離子形式之熱穩定性。

d-元素分析

以下元素：硫、氧、碳及氫之元素分析證實該相之化學計量為：ABSD.(L-離胺酸)₂。

實例3：比較例

a-ABSD之二鈉鹽

如下進行ABSD之二鈉鹽之結晶：將2.71×10^-3mol ABSD兩性離子(無水)添加至5.42×10^-3mol NaOH且將該混合物溶解於2mL水中。接著，藉由添加大過量(30mL)抗溶劑(乙醇)強迫結晶。於過濾後，藉由XRPD分析固體。所獲得的光譜 呈現於圖4中。此XRPD圖樣證實已結晶出新穎相。其應為ABSD之二鈉鹽。對該鹽進行TGA-DSC分析(結合質譜分析)以觀測其熱行為，及測定其水含量。對應之光譜呈現於圖5中。據此分析，該相係在30至40℃間損失水。

該相不是兩性離子形式之受關注的替代品，此乃因其展現相同類型之熱穩定性問題。

b-ABSD之氫鈉鹽

如下進行ABSD之氫鈉鹽之結晶之：將2.71×10^-3mol ABSD兩性離子(無水)添加至2.71×10^-3mol NaOH(接著僅中和ABSD之單一磺酸作用)及將該混合物溶解於少量水(3ml)中。接著，藉由逐滴添加大過量(30ml)抗溶劑(乙醇)強迫結晶。施行熟化循環以提高固體之結晶度(圖6)。於過濾後，藉由XRPD分析固體(圖7)。如藉由該XRPD圖樣所證實，已結晶出新穎項，及應為ABSD之氫鈉鹽。

對該相進行TGA-DSC分析(結合質譜分析)(圖8)。

該分析顯示在約35℃之水損失。

類似於二鈉鹽，該相似乎不是兩性離子形式之受關注的替代品。

c-L-半胱胺酸鹽

如下進行L-半胱胺酸鹽之結晶：將2.71×10^-3mol ABSD兩性離子(無水)添加至5.42×10^-3mol L-半胱胺酸。將該物理混合物呈懸浮液形式放入10mL水中。於攪拌24小時後，過濾該懸浮液及藉由XRPD分析固體(圖9)。讓母液緩慢地蒸發及自該蒸發產生之固相亦藉由XRPD進行分析(圖9)。如藉由該等XRPD圖樣所證實，在ABSD與L-半胱胺酸之間結晶出新穎相。

藉由過濾所獲得固體之結晶度似乎比緩慢蒸發後所獲得者差。 該相似乎不溶於諸如：水、酮、醇、二甲亞碸(DMSO)或氯仿之許多溶劑。

對該相進行TGA-DSC分析，結合質譜分析(MS)(圖10)。該分析顯示在約74℃之水損失、以及在約175℃之熔融降解。

由於其不良溶解性(遠低於ABSD兩性離子之溶解性)，含於許多溶劑中之該新穎相不是兩性離子形式之受關注的替代品。

d-其他胺基酸

在溶液中結晶

於該等實驗中，依照化學計量(ABSD：胺基酸)：1：1或1：2將選自L-色胺酸、L-絲胺酸、D-絲胺酸、L-胱胺酸、D-離胺酸、DL-離胺酸及L-精胺酸之胺基酸分子直接添加至ABSD。接著於環境溫度下攪拌該等物理混合物或自水溶液再結晶。利用L-色胺酸、L-絲胺酸、D-絲胺酸、L-胱胺酸或D-離胺酸未獲得新穎結晶相。利用DL-離胺酸(外消旋離胺酸)，會存在新穎化合物，但其展現高吸濕性以至潮解，此會妨礙任何進一步使用。利用L-精胺酸，無論結晶製程為何均獲得凝膠。L-精胺酸明顯與ABSD相互作用，此乃因該混合物於水中之溶解性似乎優於單純ABSD之水溶解性，表明新穎化學實體形成。然而，僅可獲得L-精胺酸鹽之凝膠形式(引起諸如過濾性及乾燥之重要問題)。

HEM

對ABSD分子與選自L-色胺酸、L-絲胺酸及D-絲胺酸、L-胱胺酸、L-纈胺酸、L-精胺酸及L-甘胺酸之胺基酸間之物理混合物(1：1或1：2化學計量)進行乾式或濕式(水或乙醇)研磨。於該等實驗中未單離出最初結晶相。

總言之，L-纈胺酸、L-甘胺酸、L-色胺酸、絲胺酸(L或D)、D-離胺酸及L-胱胺酸不容許形成與ABSD之結晶相。未單離DL-離胺酸鹽 之晶型。未單離L-精胺酸鹽之晶型。

Claims (15)

1. 一種(3S,3S')4,4'-二硫二基雙(3-胺基丁烷-1-磺酸)(ABSD)與L-離胺酸之晶型，其中該晶型之化學計量為<ABSD.(L-離胺酸)₂>，且其中該晶型之X-射線繞射圖樣包含以下峰：

   

   其中該X-射線繞射圖樣係利用Cu Kα陽極獲得。
2. 一種用於製備如請求項1所定義之晶形的方法，該方法包括以下步驟：a. 使ABSD或其鹽或其混合物與L-離胺酸接觸，b. 引起結晶相之形成，及/或提高該結晶相之結晶度，c. 單離在步驟(b)(或(a))中所獲得的結晶相。
3. 如請求項2之方法，其中步驟(a)中ABSD：L-離胺酸化學計量約為1：2。
4. 如請求項2或3之方法，其中步驟(a)係在溶液中進行。
5. 如請求項4之方法，其中ABSD及L-離胺酸係懸浮於水中。
6. 如請求項2或3之方法，其中步驟(a)係以固態方式進行。
7. 如請求項6之方法，其中步驟(a)係藉由高能研磨進行。
8. 如請求項4之方法，其中步驟(b)係藉由添加抗溶劑來進行。
9. 如請求項8之方法，其中該抗溶劑係乙醇。
10. 如請求項2或3之方法，其中步驟(b)中結晶度之提高係藉由溫度循環來進行。
11. 如請求項10之方法，其中該溫度循環係重複若干次。
12. 如請求項11之方法，其中該溫度循環係重複5至15次。
13. 如請求項12之方法，其中該溫度循環係重複10次。
14. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之晶型，與醫藥上可接受的載劑或稀釋劑。
15. 一種如請求項1之晶型或如請求項14之醫藥組合物之用途，其係用於製備用於治療高血壓及/或相關疾病之藥劑。