TWI640884B - 獲得幹細胞及其資料的方法 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種獲得幹細胞的方法，其係包括：(1)讓一個體(例如人或動物)進行或接受一行為；(2)在該個體進行或接受該行為之後，讓該個體等待一段預定的時間(例如30分鐘到2小時之間)；(3)在該個體等待該段預定的時間之後，從該個體獲得一組織樣本(例如周邊血液樣本)；以及(4)從該組織樣本收集或收穫幹細胞。該行為可包括服用一種草藥或是一種含有褐藻糖膠的物質。步驟(4)所獲得的幹細胞可以用在植牙手術中。
Description
本發明係有關一種獲得細胞及其資料的方法，尤指一種獲得幹細胞及其資料的方法。
隨著幹細胞研究的發展，幹細胞已經被視為是預防醫學的先趨，再加上近年來相關產業也加速成長，突顯人們對於幹細胞在醫療應用上的需求。由於幹細胞負責體內細胞的修復和更新，所以幹細胞具有維持身體器官與組織健康的功能。因此，幹細胞可以視為是維持整體健康的決定性因素，並藉由幹細胞開啟審視健康的新視窗。
本發明之主要目的，在於提供多種方法，其係先培養、活化(或催化)、調動、刺激、生成或增加人或動物體內的幹細胞(如多功能幹細胞)，然後從人或動物的周邊血液中獲得、收集或收獲幹細胞。
本發明之另一目的，係在提供多種獲得幹細胞資料(如某種幹細胞在取自人或動物的組織樣本中每單位體積的數量)的方法。
為達到上述之目的，本發明提供一種獲得幹細胞的方法，其係包括以下步驟：(1)讓一個體(如人或動物)進行或接受一行為；(2)在該個體進行或接受該行為之後，使該個體等待一段預定時間；(3)在該個體等待該段預定時間之後，從該個體取得一組織樣本；以及(4)從該組織樣本收集複數個幹細胞。該行為可包括服用一種草藥或是一種含有褐藻糖膠的物質。該段預定時間可以是介於30分鐘到2小時之間、介於1小時到12小時之間或是介於12小時到36小時之間。該組織樣本可包括該個體的周邊血液。該些幹細胞可包括複數個多功能幹細胞(例如尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(+), CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的 CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的Lgr5(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(-), SSEA4(+)細胞)。上述獲得幹細胞的方法可以還包括，在收集該些幹細胞之後，將該些幹細胞儲存在溫度低於攝氏0度的環境中。該些幹細胞可以被用在植牙手術、整形手術、癌症治療、組織修復治療、膝半月板損傷治療或關節炎治療。
為達到上述之目的，本發明提供一種獲得幹細胞資料的方法，其係包括以下步驟：(1)從一個體(如人或動物)獲得一組織樣本；(2)處理該組織樣本，以獲得一測試樣本；(3)使用一血球計數器(hemocytometer)計算該測試樣本的第一部分中第一群顆粒的數量，進而獲得一第一資料；(4)使用一流式細胞儀(flow cytometer)計算該測試樣本的第二部分中第二群顆粒裡的一種幹細胞的數量，進而獲得一第二資料；以及(5)根據該第一資料和該第二資料，獲得一第三資料。該組織樣本可包括該個體的周邊血液。該第一群顆粒的尺寸和該第二群顆粒的尺寸係大於或實質上等於一門檻尺寸(threshold size)，該門檻尺寸可以是1微米。該第二群顆粒可包括複數個白血球、複數個紅血球、複數個血小板以及/或是複數個粒細胞(granulocyte)。該種幹細胞可包括一種多潛能幹細胞或是一種多功能幹細胞(如尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(+), CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的 CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的Lgr5(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(-), SSEA4(+)細胞)。該第一資料可包括該第一群顆粒在該測試樣本中每單位體積的數量。該第二資料可包括該種幹細胞之數量占該第二群顆粒之數量的百分比。該第三資料可包括該種幹細胞在該組織樣本中每單位體積的數量。
為達到上述之目的，本發明提供一種獲得幹細胞資料的方法，其係包括下列步驟：(1)從一個體(如人或動物)獲得一組織樣本；(2)處理該組織樣本，以獲得一測試樣本；(3)計算該測試樣本的第一部分中第一群顆粒的數量，進而獲得一第一資料；(4)計算該測試樣本的第二部分中第二群顆粒裡的一種幹細胞的數量，進而獲得一第二資料；以及(5)基於該第一資料和該第二資料，獲得一第三資料。該組織樣本可包括該個體的周邊血液。該第一群顆粒的尺寸和該第二群顆粒的尺寸係大於或實質上等於一門檻尺寸，該門檻尺寸可以是1微米。該第二群顆粒可包括複數個白血球、複數個紅血球、複數個血小板以及/或是複數個粒細胞。該種幹細胞可包括一種多潛能幹細胞或是一種多功能幹細胞(如尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(+), CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的 CD349(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的Lgr5(+)細胞、尺寸介於0.1微米至6微米之間的CD9(-), SSEA4(+)細胞)。該第一資料可包括該第一群顆粒在該測試樣本中每單位體積的數量。該第二資料可包括該種幹細胞數量占該第二群顆粒數量的百分比。該第三資料可包括該種幹細胞在該組織樣本中每單位體積的數量。上述獲得幹細胞資料的方法可以還包括，使用一血球計數器進行步驟(3)，以及使用一流式細胞儀進行步驟(4)。
現將經由對說明性實施例、隨附圖式及申請專利範圍之以下詳細描述的評述，使本發明之此等以及其他組件、步驟、特徵、效益及優勢變得明朗。
圖式揭示本發明之說明性實施例。其並未闡述所有實施例。可另外或替代使用其他實施例。為節省空間或更有效地說明，可省略顯而易見或不必要之細節。相反，可實施一些實施例而不揭示所有細節。當相同數字或標號出現在不同圖式中時，其係指相同或類似組件或步驟。
當以下描述連同隨附圖式一起閱讀時，可更充分地理解本發明之態樣，該等隨附圖式之性質應視為說明性而非限制性的。該等圖式未必按比例繪製，而是強調本發明之原理。
以下將先介紹本發明的各種定義與描述，然後再詳細說明本發明的各種實施例。
尺寸
(Z)
的定義
:
在本發明中，所有後續段落提及的尺寸(Z)係用於描述細胞(例如幹細胞或生物細胞)的大小。尺寸(Z)可以(但不限定)被描述為或是定義為：(1)細胞生物學領域或幹細胞領域對於細胞的大小或代表長度的傳統定義、(2)細胞的直徑(特別是當細胞的形狀實質上為球體時)、(3)細胞的長軸長度(特別是當細胞的形狀實質上為橢圓體時)、(4)細胞的寬度(當細胞的形狀近似於正方體時)、(5)細胞的長度(當細胞的形狀近似於長方體時)或是(6)細胞的最大橫斷面或橫向尺寸。藉由光學顯微鏡或電子顯微鏡(例如掃描式電子顯微鏡)獲得的細胞影像或是藉由流式細胞儀(flow cytometer)獲得的資料(例如二維的點、輪廓或是密度圖)係可用於判定或測量尺寸(Z)—不論是直徑、長度、寬度或是最大橫斷面或橫向尺寸。藉由光學顯微鏡或電子顯微鏡獲得的細胞影像可以是細胞的二維剖面圖或立體結構。舉例來說，藉由光學顯微鏡或電子顯微鏡(例如掃描式電子顯微鏡)先獲得一個二維剖面影像，然後通過測量這個二維剖面影像中細胞的最大橫斷面或橫向尺寸就可以獲得細胞的尺寸(Z)。
幹細胞定義
:
幹細胞有許多不同的種類，包括多功能幹細胞(pluripotent stem cell)、多潛能幹細胞(multipotent stem cell)以及先驅幹細胞(progenitor stem cell)。先驅幹細胞也可以稱為專一性幹細胞或單能幹細胞(unipotent stem cell)。SB-1細胞、SB-2細胞、類卵裂球幹細胞(blastomere-like stem cell，簡稱BLSC)以及極小類胚胎幹細胞(very small embryonic-like stem cell，簡稱VSEL)係屬於多功能幹細胞。間質幹細胞(mesenchymal stem cell，簡稱MSC)、多潛能成體先驅細胞(multipotent adult progenitor cell，簡稱MAPC)、骨髓多潛能幹細胞(bone marrow derived multipotent stem cell，簡稱BMSC)以及多潛能成體幹細胞(multipotent adult stem cell，簡稱MASC)係屬於多潛能幹細胞。神經幹細胞(neural stem cell)、視網膜幹細胞 (retina stem cell)、嗅球幹細胞 (olfactory bulbs stem cell)、上皮幹細胞 (epidermal stem cell)、腸道幹細胞 (intestine stem cell)、肌肉幹細胞 (muscle stem cell)、胰臟幹細胞 (pancreatic stem cell)、心臟幹細胞 (heart stem cell)、肝臟幹細胞 (liver stem cell)、腎臟幹細胞 (kidney stem cell)、內皮幹細胞(endothelial stem cell)、脂肪幹細胞(adipocyte or adipose-derived stem cell)、成體骨髓多元性誘導細胞(marrow-isolated adult multilineage inducible (MIAMI) cell)、前間質幹細胞(pre-mesenchymal stem cell，簡稱pre-MSC)、多潛能先驅幹細胞(multipotent progenitor cells，簡稱MPP)、譜系限制先驅幹細胞(lineage-restricted progenitor cell，簡稱LRP)、共同髓原先驅細胞(common myeloid progenitor cell，簡稱CMP)以及共同淋巴球先驅細胞(common lymphocyte progenitor cell，簡稱CLP)係屬於先驅幹細胞。
在後續的段落中，跟隨在細胞(表面)標記後面的符號“+”係表示幹細胞可以表現這種細胞(表面)標記，也就是說流式細胞儀可以藉由某種(特定標記用的)抗體偵測到存在於幹細胞表面的這種細胞(表面)標記。跟隨在細胞(表面)標記後面的符號“-”係表示幹細胞無法表現這種細胞(表面)標記，也就是說這種細胞(表面)標記沒有存在於幹細胞的表面，而且流式細胞儀也無法藉由某種(特定標記用的)抗體偵測到這種細胞(表面)標記。因此，正號“+”對幹細胞而言是指細胞(表面)標記呈現陽性表現(positive expression)，而負號“-”對幹細胞而言則是指細胞(表面)標記呈現陰性表現(negative expression)。
SB-1細胞為含有細胞核的多功能幹細胞，而且可以是CD9(+), CD349(+)細胞或CD349(+)細胞。SB-1細胞(例如CD9(+), CD349(+)細胞和CD349(+)細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於(但不限定)4微米(micrometer)、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。以CD9(+), CD349(+)細胞為例，SB-1細胞可以表現CD9和CD349這兩種細胞(表面)標記，所以SB-1細胞可用CD9(+)和CD349(+)描述其特徵。以CD349(+)細胞為例，SB-1細胞可以表現CD349這種細胞(表面)標記，所以SB-1細胞可用CD349(+)描述其特徵。
SB-2細胞為含有細胞核的多功能幹細胞，而且可以是CD9(-), SSEA4(+)細胞或Lgr5(+)細胞。SB-2細胞(例如CD9(-), SSEA4(+)細胞和Lgr5(+)細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於(但不限定)4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。以CD9(-), SSEA4(+)細胞為例，SB-2細胞可以表現SSEA4這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD9這種細胞(表面)標記，所以SB-2細胞可用CD9(-)和SSEA4(+)描述其特徵。以Lgr5(+)細胞為例，SB-2細胞可以表現Lgr5這種細胞(表面)標記，所以SB-2細胞可用Lgr5(+)描述其特徵。
類卵裂球幹細胞(BLSC)為含有細胞核的多功能幹細胞，並且可以是CD66e(+)細胞。CD66e(+)多功能幹細胞(也就是類卵裂球幹細胞)的尺寸(請參閱尺寸(Z)的定義)係小於或等於(但不限定)4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。類卵裂球幹細胞可以表現CD66e這種細胞(表面)標記，因而可用CD66e(+)描述其特徵。
極小類胚胎幹細胞(VSEL)為含有細胞核的多功能幹細胞，而且可以是CD133(+), CD45(-), Lin(-)細胞或CXCR4(+), CD45(-), Lin(-)細胞。極小類胚胎幹細胞(例如CD133(+), CD45(-), Lin(-)多功能幹細胞和CXCR4(+), CD45(-), Lin(-)多功能幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於(但不限定)4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。以CD133(+), CD45(-), Lin(-)多功能幹細胞為例，極小類胚胎幹細胞可以表現CD133這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD45和Lin這兩種細胞(表面)標記，所以極小類胚胎幹細胞可用CD133(+)、CD45(-)和Lin(-)描述其特徵。以CXCR4(+), CD45(-), Lin(-)多功能幹細胞為例，極小類胚胎幹細胞可以表現CXCR4這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD45和Lin這兩種細胞(表面)標記，所以極小類胚胎幹細胞可用CXCR4(+)、CD45(-)和Lin(-)描述其特徵。另外，極小類胚胎幹細胞略小於紅血球。
間質幹細胞(mesenchymal stem cell，簡稱MSC)為含有細胞核的多潛能幹細胞，而且可以是CD13(+)多潛能幹細胞、CD29(+)多潛能幹細胞、CD44(+)多潛能幹細胞、CD73(+)多潛能幹細胞、CD90(+)多潛能幹細胞或CD105(+)多潛能幹細胞。間質幹細胞可以表現下列一種或多種的細胞(表面)標記：CD13、CD29、CD44、CD73、CD90和CD105。因此，間質幹細胞可以具有下列一種或多種的特徵：CD13(+)、CD29(+)、CD44(+)、CD73(+)、C90(+)和CD105(+)。
間質幹細胞是由不同的群體所組成，因此具有各種的尺寸及形狀。例如，某些間質幹細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)是小於或等於(但不限定)4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。另有某些間質幹細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)則是大於6微米、7微米或10微米。
造血幹細胞(hematopoietic stem cell，簡稱HSC)為含有細胞核的多潛能幹細胞，而且可以是CD34(+), cKit(-), CD38(-), Lin(-)細胞或CD150(+), CD244(-), CD48(-)細胞。造血幹細胞(例如CD34(+), cKit(-), CD38(-), Lin(-)多潛能幹細胞和CD150(+), CD244(-), CD48(-)多潛能幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於(但不限定)4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或介於1微米至4微米之間。以CD34(+), cKit(-), CD38(-), Lin(-)多潛能幹細胞為例，造血幹細胞可以表現CD34這種細胞(表面)標記，但是無法表現cKit、CD38和Lin這三種細胞(表面)標記，所以造血幹細胞可用CD34(+)、cKit(-)、CD38(-)和Lin(-)描述其特徵。以CD150(+), CD244(-), CD48(-)多潛能幹細胞為例，造血幹細胞可以表現CD150這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD244和CD48這兩種細胞(表面)標記，所以造血幹細胞可用CD150(+)、CD244(-)和CD48(-)描述其特徵。
多潛能成體先驅細胞(multipotent adult progenitor cell，簡稱MAPC)為含有細胞核的多潛能幹細胞，而且可以是CD13(+), SSEA1(+)細胞。CD13(+), SSEA1(+)多潛能幹細胞(也就是多潛能成體先驅細胞)可以表現CD13與SSEA1這兩種細胞(表面)標記。因此，多潛能成體先驅細胞可用CD13(+)和SSEA1(+)描述其特徵。多潛能成體先驅細胞(例如CD13(+), SSEA1(+)多潛能幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是(但不限定)大於6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。
骨髓多潛能幹細胞(bone marrow derived multipotent stem cell，簡稱BMSC)為含有細胞核的多潛能幹細胞，而且可以是CD105(+)多潛能幹細胞、CD117(+)多潛能幹細胞或CD13(+), SSEA3(+)多潛能幹細胞。以CD105(+)多潛能幹細胞為例，骨髓多潛能幹細胞可以表現CD105這種細胞(表面)標記，因而可用CD105(+)描述其特徵。以CD117(+)多潛能幹細胞為例，骨髓多潛能幹細胞可以表現CD117這種細胞(表面)標記，因而可用CD117(+)描述其特徵。以CD13(+), SSEA3(+)多潛能幹細胞為例，骨髓多潛能幹細胞可以表現CD13和SSEA3這兩種細胞(表面)標記，因而可用CD13(+)和SSEA3(+)描述其特徵。骨髓多潛能幹細胞(例如CD105(+)多潛能幹細胞、CD117(+)多潛能幹細胞和CD13(+), SSEA3(+)多潛能幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是(但不限定)大於6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。
多潛能成體幹細胞(multipotent adult stem cell，簡稱MASC)為含有細胞核的多潛能幹細胞，而且可以是Oct4(+)多潛能幹細胞、Nanog(+)多潛能幹細胞或RexI(+)多潛能幹細胞。以Oct4(+)多潛能幹細胞為例，多潛能成體幹細胞可以表現Oct4這種細胞(表面)標記，因而可用Oct4 (+)描述其特徵。以Nanog(+)多潛能幹細胞為例，多潛能成體幹細胞可以表現Nanog這種細胞(表面)標記，因而可用Nanog(+)描述其特徵。以RexI(+)多潛能幹細胞為例，多潛能成體幹細胞可以表現RexI這種細胞(表面)標記，因而可用RexI(+)描述其特徵。多潛能成體幹細胞(例如Oct4(+)多潛能幹細胞、Nanog(+)多潛能幹細胞和RexI(+)多潛能幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是(但不限定)大於6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。
成體骨髓多元性誘導(marrow-isolated adult multilineage inducible，簡稱MIAMI)細胞為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CD29(+), CD63(+), CD81(+), CD122(+), CD164(+)先驅幹細胞。成體骨髓多元性誘導細胞可以表現CD29、CD63、CD81、CD122和CD164這五種細胞(表面)標記，因而可用CD29(+)、CD63(+)、CD81(+)、CD122(+)和CD164(+)描述其特徵。成體骨髓多元性誘導細胞(例如CD29(+), CD63(+), CD81(+), CD122(+), CD164(+)先驅幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是(但不限定)大於6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。
前間質幹細胞(pre-mesenchymal stem cell，簡稱pre-MSC)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是SSEA1(+)先驅幹細胞。前間質幹細胞可以表現SSEA1這種細胞(表面)標記，因而可用SSEA1(+)描述其特徵。前間質幹細胞(例如SSEA1(+)先驅幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是(但不限定)大於6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。
多潛能先驅幹細胞(multipotent progenitor cell，簡稱MPP)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CD34(+), cKit(+), CD38(-), Lin(-)細胞或CD150(-), CD244(+), CD48(-)細胞。多潛能先驅幹細胞(例如CD34(+), cKit(+), CD38(-), Lin(-)先驅幹細胞和CD150(-), CD244(+), CD48(-)先驅幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係大於(但不限定)6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。以CD34(+), cKit(+), CD38(-), Lin(-)先驅幹細胞為例，多潛能先驅幹細胞可以表現CD34和cKit這兩種細胞(表面)標記，但是無法表現CD38和Lin這兩種細胞(表面)標記，所以多潛能先驅幹細胞可用CD34(+)、cKit(+)、CD38(-)和Lin(-)描述其特徵。以CD150(-), CD244(+), CD48(-)先驅幹細胞為例，多潛能先驅幹細胞可以表現CD244這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD150和CD48這兩種細胞(表面)標記，所以多潛能先驅幹細胞可用CD150(-)、CD244(+)和CD48(-)描述其特徵。
譜系限制先驅幹細胞(lineage-restricted progenitor cell，簡稱LRP)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CD34(-), cKit(+), CD38(-), Lin(-)細胞或CD150(-), CD244(+), CD48(+)細胞。譜系限制先驅幹細胞(例如CD34(-), cKit(+), CD38(-), Lin(-)先驅幹細胞和CD150(-), CD244(+), CD48(+)先驅幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係大於(但不限定)6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。以CD34(-), cKit(+), CD38(-), Lin(-)先驅幹細胞為例，譜系限制先驅幹細胞可以表現cKit這種細胞(表面)標記，但是無法表現CD34、CD38和Lin這三種細胞(表面)標記，所以譜系限制先驅幹細胞可用CD34(-)、cKit(+)、CD38(-)和Lin(-)描述其特徵。以CD150(-), CD244(+), CD48(+)先驅幹細胞為例，譜系限制先驅幹細胞可以表現CD244和CD48這兩種細胞(表面)標記，但是無法表現CD150這種細胞(表面)標記，所以譜系限制先驅幹細胞可用CD150(-)、CD244(+)和CD48(+)描述其特徵。
共同髓原先驅細胞(common myeloid progenitor cell)或共同淋巴球先驅細胞(common lymphocyte progenitor cell)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CD90(+)細胞。共同髓原先驅細胞或共同淋巴球先驅細胞(例如CD90(+)先驅幹細胞)的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係大於(但不限定)6微米、7微米或10微米，例如介於8微米至15微米之間。共同髓原先驅細胞或共同淋巴球先驅細胞可表現CD90這種細胞(表面)標記，所以可用CD90(+)描述其特徵。
造血先驅細胞(hematopoietic progenitor cell，簡稱HPC)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CD24(+)先驅幹細胞、 CD38(+)先驅幹細胞、CD48(+)先驅幹細胞、CD244(+)先驅幹細胞或CXCR4(+)先驅幹細胞。造血先驅細胞可以表現下列一種或多種的細胞(表面)標記：CD24、CD38、CD48、CD244和CXCR4。因此，造血先驅細胞可以具有下列一種或多種的特徵：CD24(+)、CD38(+)、CD48(+)、CD244(+)和CXCR4(+)。
間質先驅細胞(mesenchymal progenitor cell)為含有細胞核的先驅幹細胞，而且可以是CXCR4(+)先驅幹細胞、SSEA1(+)先驅幹細胞、CD271(+)先驅幹細胞或Stro-1(+)先驅幹細胞。間質先驅細胞可以表現下列一種或多種的細胞(表面)標記：CXCR4、SSEA1、CD271和Stro-1。因此，間質先驅細胞可以具有下列一種或多種的特徵：CXCR4(+)、SSEA1(+)、CD271(+)或Stro-1(+)。
行為或刺激
(X)
的描述：
以下列出許多種行為或刺激(X)的範例。這些項目可以經過事先評估，確認能有效增加一個體(例如人體或非人體(如動物體))體內某一種或特定幾種幹細胞的細胞數量。
行為或刺激(X)包括：
1. 服用藥物，此藥物可以是合成藥物或是含有天然萃取物的藥物；
2. 服用草藥或中藥，此草藥或中藥可以是冬蟲夏草、人參、枸杞、靈芝、牛樟芝以及/或是巴西蘑菇；
3. 服用營養品或膳食補充品(dietary supplement)，例如營養片或營養粉。此營養品或膳食補充品可以包含有下列一種或多種的物質或成分：維他命(如維他命A、維他命B、維他命B群、維他命B12
、維他命D、維他命D3
、維他命E等)、巨量與微量礦物質(如鈣、鈉、鉀、氟、溴、鉻、碘、矽、硒、鈹、鋰、鈷、釩、鎳等)、多醣(polysaccharide)、含岩藻糖之高分子活性醣蛋白(high molecular weight fucose-containing glycoprotein)、海藻(包括綠藻、藍綠藻、褐藻等)、岩藻糖(fucose)、褐藻的主要成分—褐藻糖膠(fucoidan)、小分子褐藻糖膠(oligo fucoidan)、藻類、含有褐藻糖膠的褐藻(例如生長或生產在日本沖繩縣(Okinawa)的褐藻)、日本的水雲(mozuku)、綠藻、藍綠藻(或稱藍藻)、褐藻(包括水雲、昆布(kelp)、裙帶菜(undaria pinnatifida)、羊栖菜(sargassum fusiforme)等)、植化素(phytochemical)(例如異黃酮素(isoflavones)、植物雌激素(phytoestrogen)等)、茄紅素(lycopene)、綠茶素(green tea essence)、表沒食子兒茶素沒食子酸脂(epigallocatechin gallate，簡稱EGCG)、醣質營養素(gluconutrients)(例如半乳糖(Galactose)、木糖(Xylose)、葡萄糖(Glucose)、甘露糖(Mannose)、乙醯葡萄糖胺(N-acetyl glucosamine)、乙醯半乳糖胺(N-acetyl galactosamine)、乙醯神經胺酸(N-acetyl neuraminic acid)等)、魚油、香樁、取自植物、葉子、果實、蔬菜、魚、海藻或藻類的營養素；
4. 勵行素食飲食；
5. 食用健康食品或有機食品；
6. 服用另類(非傳統的)藥物；
7. 接受另類療法或另類治療(例如葛森療法(Gerson therapy)、布魯士癌症療法(the Breuss cancer cure)等)；
8. 接受針灸治療；
9. 接受按摩(例如足底按摩)；
10. 做運動(例如走路、慢跑、跳舞、體操、瑜珈、有氧運動、太極拳等)；
11. 睡覺(其目的在於評估睡眠品質)；
12. 冥想；
13. 進行由個人、保健專家或醫生設計的健康改善計畫或疾病治療計畫；
14. 服用某種可以改善體內器官健康狀況的營養品，例如服用可以改善前列腺健康狀況的茄紅素；
15. 進行復健計畫，以治療傷害、治療由手術造成的創傷或是治療疾病；
16. 飲用藥酒(藥酒乃是將一種或數種藥材浸泡在酒裡存放一段時間而製成)，例如飲用人參藥酒(人參藥酒是將人參浸泡在高酒精濃度米酒裡一個月的時間而製成)；
17. 服用政府部門或機構(例如美國食品藥物管理局)核准用於治療特定疾病(例如癌症、皮膚病、腎臟病等)的一種或數種藥物；
18. 接受政府部門核准用於治療特定疾病(例如癌症、皮膚病、腎臟病等)的一種或數種治療方法；
19. 從事或參與宗教活動，例如禱告或拜神等；
20. 接受陽光(或日光)直接照射或間接照射，而接受照射的時間可以是: (1)日出前10分鐘至日出後50分鐘(此時含有大量的紅外線)的早晨時段、(2)上午11點30分(11:30 AM)至下午12點30分(12:30 PM)(此時含有大量的紫外線)的中午時段、或是(3)日落前50分鐘至日落後10分鐘(此時含有大量的紅外線)的下午時段；
21. 照射日光燈或發光二極體(LED)發出的光源，而日光燈或發光二極體(LED)發出的光源可包含可見光的整個光譜(spectrum)、紅外線的整個光譜、紅光的整個光譜、綠光的整個光譜、藍光的整個光譜、紫外線的整個光譜或混合上述一種以上光線的整個光譜；
22. 進行或接受改善身體自癒力的計畫、治療、方法、儀器以及/或是系統，例如病後、傷後或術後用於改善身體自癒力的方法或治療(如高壓氧治療)；
23. 飲用咖啡(例如黑咖啡)；
24. 喝茶(例如綠茶、紅茶或茉莉花茶；
25. 飲用紅酒；
26. 服用褪黑激素(melatonin)；
27. 聆聽音樂，例如莫札特交響曲或貝多芬交響曲；
28. 口服一顆或多顆褐藻補充品，其中每一顆褐藻補充品可以含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠或小分子褐藻糖膠，有關褐藻補充品的敘述可以參考以下第一實驗和第11圖的敘述；
29. 注射含有褐藻糖膠或小分子褐藻糖膠的物質(如營養品或補充品)；
30. 服用或攝取4.5克(或超過3.5克)的沖繩褐藻補充品，此沖繩褐藻補充品包括重量百分比為80%(或是超過70%)的日本水雲粉(有關沖繩褐藻補充品的敘述請參閱以下第一實驗和第11圖的相關敘述)，其中4.5克的沖繩褐藻補充品例如含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是包括重量百分比超過60%的褐藻糖膠，第12圖揭示褐藻糖膠的部分分子結構；
31. 服用荷爾蒙補充品或是注射荷爾蒙；以及
32. 服用營養品、營養產品、營養液、營養飲料、營養補充劑或營養食品，其係含有：(1)各種的胺基酸(例如精胺酸(Arginine)、組胺酸(Histidine)、離胺酸(Lysine)、天門冬胺酸(Aspartic acid)、麩胺酸(Glutamic acid)、絲胺酸(Serine)、羥丁胺酸(或稱蘇胺酸，Threonine)、天門冬醯胺酸(Asparagine)、麩醯胺酸(Glutamine)、半胱胺酸(Cysteine)、硒半胱胺酸(Selenocysteine)、甘胺酸(Glycine)、脯胺酸(Proline)、色胺酸(Tryptophan)、丙胺酸(Alanine)、纈胺酸(Valine)、異白胺酸(Isoleucine)、白胺酸(Leucine)、甲硫胺酸(Methionine)、苯丙胺酸(Phenylalanine)、酪胺酸(Tyrosine)等)、(2)均衡胺基酸(balanced amino acid)、或是(3)九種人體必需胺基酸(也就是，組胺酸、異白胺酸、白胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、羥丁胺酸、色胺酸以及纈胺酸)。例如，(a)含紅豆、綠豆或黑豆發酵物的產品、(b)含一種或數種水果(例如甜菜(sugar beet)、蘋果、番石榴、奇異果、葡萄、鳳梨、火龍果、青木瓜、番茄、酪梨等)發酵物的液態物、飲料或飲品、(c)將一種或數種藥材浸泡在酒裡存放一段時間而製成的藥酒，例如將人參浸泡在高酒精濃度的米酒裡一個月時間而製成的人參藥酒。
另外，進行上述的行為或刺激(X)可以將劑量、強度、持續時間、施行頻率(每一個行為可包括一種以上的細部行為(sub-action)，例如以每次間隔一小時的方式服用一顆藥物共三次)以及/或是施行時間(例如一天的時段(如早晨、中午、下午、傍晚、晚上)、用餐之前、用餐當中、用餐之後、季節(如春天、夏天、秋天、冬天)等)等因素納入考量。舉例來說，當個體(例如人體或非人體)服用藥物或營養品時，可將劑量(例如克數)以及時間(例如早餐前、早餐後、睡前)等因素納入考量。又例如，當個體(例如人體或非人體)照射陽光時，可將一天的時段(例如早晨、中午或下午)、季節(例如春天、夏天、秋天或冬天)以及持續照射時間(例如30分鐘、1小時或2小時)等因素納入考量。
個體
(S)
與組織樣本
(P)
的描述：
個體(S)可以是人體，例如孩童、青少年、成年男子、成年女子或老年人。或者，個體(S)也可以是非人體(或稱非人體生物)，例如寵物(動物)、農場動物、實驗用動物或疾病模式動物(disease-model animal)。以下列出寵物、農場動物、實驗用動物或疾病模式動物的範例：靈長類動物(如猴子或大猩猩)、狗、齧齒動物(如老鼠或豚鼠)、貓、馬、牛、羊、豬、雞、鴨、鵝、鳥、大象、青蛙、魚等。個體(S)的敘述可以用在後續的各個實施例中。在本發明中，個體(S)可以作為參與者或受試者。
含有各種細胞的組織樣本(P)可以從個體(S)的體液(bodily fluid)或固體組織(solid tissue)取出、獲得、得到或取得。個體(S)的體液可以是血液(如周邊血液(peripheral blood))或是骨髓等。當個體(S)為人體時，體液可以是人體的骨髓或是人體的血液(如周邊血液)。周邊血液是指體內循環流動的血液。個體(S)的固體組織可以是神經、肌肉、皮膚、內臟、骨骼、腎臟、肝臟、胰臟、胸腺、脂肪細胞或是脂肪組織等。當組織樣本(P)是從個體(S)的體液取得時，組織樣本(P)可以是體液樣本，例如周邊血液樣本、全血樣本或骨髓樣本。全血可以從個體(S)(如人體)的周邊血液收集取得，然後和抗凝劑混合而成，但是尚未進行其它的處理。當組織樣本(P)是從個體(S)的固體組織取得時，組織樣本(P)可以是固體組織樣本，例如肌肉樣本或脂肪細胞樣本。當個體(S)為人體時，組織樣本(P)可以是人體骨髓樣本或是人體血液樣本(如周邊血液樣本或全血樣本)。
檢測或測量方法
(M0)
：
當取自個體(其可參閱個體(S)的敘述)的組織樣本為血液樣本(如周邊血液樣本或全血樣本)時，檢測或測量方法(M0)可以透過執行分析前的準備程序(Y0)然後再執行分析程序(T0)的方式從血液樣本中獲得有關一種或多種幹細胞(如前所述)的結果或資料。該結果或資料可包括每一種幹細胞的數量。
分析前的準備程序(Y0)可以透過下列兩種方式中的任何一種來處理取自個體的血液樣本。
用於準備程序(Y0)的第一種方式敘述如下。首先，將混合液(cocktail)加到裝有全血(其係從上述個體取得)的試管中，並在均勻混合全血和混合液之後，獲得血液樣本。舉例來說，當混合液為100微升(µL)的RosetteSep®富含人類先驅細胞混合液(RosetteSep® Human Progenitor Enrichment Cocktail)時，試管內則裝有2毫升(mL)的全血。接著，將血液樣本在室溫(如27℃左右)培養一段時間(例如20分鐘左右)。在完成培養後，以第一溶液稀釋血液樣本，然後慢慢地將兩者混合。待完成混合後，獲得稀釋樣本。所述的第一溶液可以是2%胎牛血清(fetal bovine serum，簡稱FBS)/磷酸鹽緩衝液(phosphate-buffered saline，簡稱PBS)。接著，將稀釋樣本慢慢倒入裝有試劑(例如Ficoll-Paque®)的試管中。在倒入的過程中，須避免稀釋樣本與試劑相互混合，以及讓稀釋樣本位在試劑上面。接著，將含有稀釋樣本與試劑的混合物在室溫(如攝氏27℃左右)下以適當的轉速(例如每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如20分鐘)，待離心完成後，可形成四個明顯的分層。這四個明顯的分層由上而下分別是血漿層、富含多種細胞的細胞層、試劑層以及紅血球層。接下來，將血漿層、富含多種細胞的細胞層以及試劑層的上半部放入到另一試管中，然後以適當的轉速(例如每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如20分鐘)，待離心完成後，可獲得離心樣本。接著，移除離心樣本的上清液(supernatant)，並使離心樣本內的多種細胞重新懸浮於第二溶液(例如2% FBS/PBS)中。再來，將適當的緩衝液(如3X紅血球分解液(red-blood-cell (RBC) lysis buffer)加到第二溶液中，並使含有緩衝液的第二溶液在室溫培養一段時間(例如10分鐘)，然後以第三溶液(例如2% FBS/PBS)沖洗第二溶液(此時含有緩衝液)內的多種細胞兩次。待沖洗完成後，使多種細胞重新懸浮於第四溶液(例如含有1%或2%牛血清白蛋白(bovine serum albumin，簡稱BSA)的磷酸鹽緩衝液)中，以獲得含有多種細胞和第四溶液的混合物。在本發明中，讓0.1克的牛血清白蛋白溶解在10毫升的磷酸鹽緩衝液中，可以獲得含有1%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液；讓0.2克的牛血清白蛋白溶解在10毫升的磷酸鹽緩衝液中，可以獲得含有2%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液。接著，將含有適當抗體的試劑加到含有多種細胞和第四溶液的混合物中，進而形成試驗樣本。此試驗樣本可以被用於後續的分析程序(T0)中。
用於準備程序(Y0)的第二種方式敘述如下。首先，將6%羥乙基澱粉(Hetastarch)加入到全血(其係從上述個體取得)中(6%羥乙基澱粉與全血的體積比為1：5)，以獲得血液樣本。6%羥乙基澱粉是一種磷酸鹽緩衝液(PBS)內含有6%的羥乙基澱粉的溶液，其係每100毫升(mL)的磷酸鹽緩衝液含有6克的羥乙基澱粉。接著，讓血液樣本在室溫(如約27°C)靜置或培育一段時間(例如至少30分鐘)。待血液樣本形成上下兩個分層後，在不擾動下分層(其係為紅血球層)的情況下，將上分層(其係為細胞層)以吸取器(pipette)移出並放置到一試管中，然後再將試管內的上分層以適當的轉速(例如每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如15分鐘)，並在離心完成後獲得離心樣本。接下來，將離心樣本的上清液移除，並以適當的鹽溶液(如PBS)沖洗離心樣本的顆粒。然後，使顆粒重新懸浮於一適當溶液(例如含有1%或2%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液)中，以獲得含有顆粒和適當溶液的混合物。最後，將含有適當抗體的試劑加到含有顆粒和適當溶液的混合物中，進而形成試驗樣本。此試驗樣本可以被用於後續的分析程序(T0)中。
在完成準備程序(Y0)之後，以分析程序(T0)分析從準備程序(Y0)第一種或第二種方式獲得的試驗樣本，進而得到血液樣本中有關一種或多種幹細胞的一組結果或資料。該組結果或資料可透過量化、質化或描述等方式呈現。此處所述的一種或多種幹細胞可以包括下列一種或多種幹細胞：至少一種多功能幹細胞(例如SB-1細胞、SB-2細胞、類卵裂球幹細胞、極小類胚胎幹細胞、其它種類的多功能幹細胞以及/或是一群選定的兩種或兩種以上的多功能幹細胞)、至少一種多潛能幹細胞(例如間質幹細胞、其它種類的多潛能幹細胞以及/或是一群選定的兩種或兩種以上的多潛能幹細胞)、造血幹細胞以及至少一種先驅幹細胞。
分析程序(T0)可以透過流式細胞技術(flow cytometry)完成。流式細胞技術可以透過流式細胞儀(flow cytometer，其係為一種分析儀器)執行細胞計數、細胞分類以及生物標記偵測等步驟來分析血液樣本的參數。流式細胞儀可以用來分析血液樣本中特定的細胞(表面)標記是否呈現陽性表現。藉由流式細胞儀，上述有關一種或多種幹細胞的結果或資料可包括幹細胞的種類以及上述一種或多種幹細胞的相關數值(例如數量、百分比以及/或是尺寸大小)。
檢測或測量方法
(M1)
：
檢測或測量方法(M1)可以透過執行純化程序(Y1)然後再執行分析程序(T1)的方式來完成。純化程序(Y1)可以透過下列三種方式中的任何一種方式來處理取自一個體(其係可參閱個體(S)的敘述)的一組織樣本。有關該組織樣本的說明可參閱組織樣本(P)的敘述。例如，當該組織樣本是從上述個體的體液(例如人體血液、周邊血液或是骨髓)取得時，該組織樣本為一體液樣本(例如周邊血液樣本、全血樣本或是骨髓樣本)。當該組織樣本是從上述個體的固體組織(例如肌肉或脂肪細胞)取得時，該組織樣本為一固體組織樣本(例如肌肉樣本或脂肪細胞樣本)。另外，若該組織樣本是從上述個體的固體組織取得，在進行純化程序(Y1)之前，會在該組織樣本中加入膠原蛋白酶(collagenase)，並且讓該組織樣本與膠原蛋白酶在適當的溫度下(此溫度可以是37°C左右、30°C以上、介於35°C 至39 °C之間或是介於30°C至40°C之間)作用至少6或8小時。
在純化程序(Y1)的第一種方式中，請參閱第1圖所示，首先將上述的組織樣本移到含有抗凝血劑(例如二價陽離子螯合劑)的收集袋10裡。此二價陽離子螯合劑(divalent cation chelating agent)可以是乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid，簡稱EDTA)。接著，利用裝在收集袋10底部的過濾器11，讓該組織樣本中的小細胞流出收集袋10而被收集到試管12a裡。可通過過濾器11之小細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或是介於1微米至4微米之間。接下來，利用離心機13將試管12a以適當的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間、介於800 g至1,600 g之間)離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘、15至22分鐘)。待試管12a完成離心後，這些小細胞會被分離出來。最後，將這些小細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些小細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些小細胞和此溶液的試驗樣本14a。試驗樣本14a可用於後續的分析程序(T1)中。
在純化程序(Y1)的第二種方式中，請參閱第2圖所示，若上述的組織樣本是從固體組織取得，則將經過膠原蛋白酶處理的組織樣本(如前所述)放入到試管12b中。接著，利用離心機13以低轉速產生的離心力(例如大約100 g、介於50 g至450 g之間或是介於80 g至250 g之間)將試管12b離心一段時間(例如10分鐘左右、8分鐘以上、12分鐘以上、8至15分鐘、9至20分鐘)，然後再以高轉速產生的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間或是介於800 g至1,600 g之間)將試管12b離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘、15至22分鐘)。待試管12a完成離心後，可從組織樣本中分離出小細胞。這些分離出來的小細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或是介於1微米至4微米之間。最後，將這些小細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些小細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些小細胞和此溶液的試驗樣本14b。試驗樣本14b可用於後續的分析程序(T1)中。
在純化程序(Y1)的第三種方式中，請參閱第3圖所示，若上述的組織樣本是從體液取得，則將該組織樣本以紅血球分解液16培養或作用一段時間(例如10分鐘左右、8分鐘以上、12分鐘以上、8至15分鐘或是9至20分鐘)，以消除組織樣本中所有的紅血球細胞。接著，將含有組織樣本與紅血球分解液16的混合液倒入試管12c中。然後，利用離心機13以低轉速產生的離心力(例如大約100 g、介於50 g至450 g之間或是介於80 g至250 g之間)將試管12c離心一段時間(例如10分鐘左右、8分鐘以上、12分鐘以上、8至15分鐘或是9至20分鐘)，然後再以高轉速產生的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間或是介於800 g至1,600 g之間)將試管12c離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘或是15至22分鐘)。待試管12c完成離心後，可從含有組織樣本與紅血球分解液16的混合液中分離出小細胞。這些分離出來的小細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或是介於1微米至4微米之間。最後，將這些小細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些小細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些小細胞和此溶液的試驗樣本14c。試驗樣本14c可用於後續的分析程序(T1)中。
在利用純化程序(Y1)獲得試驗樣本14a、14b或14c之後，以分析程序(T1)對試驗樣本14a、14b或14c進行分析，進而獲得上述組織樣本中有關一種或多種小尺寸幹細胞的一組結果或資料。該組結果或資料可透過量化、質化或描述等方式呈現。另外，第1圖、第2圖或第3圖所示的分析儀器15a(例如逆轉錄聚合酶連鎖反應(reverse transcription polymerase chain reaction；RT-PCR)儀或是流式細胞儀)可用於進行分析程序(T1)。上述有關一種或多種小尺寸幹細胞的該組結果或資料可以包括小尺寸幹細胞的種類以及上述一種或多種小尺寸幹細胞的相關數值(例如數量、百分比以及/或是尺寸大小)。此處所述的一種或多種小尺寸幹細胞可以包括下列一種或多種幹細胞：至少一種多功能幹細胞(例如SB-1細胞、SB-2細胞、類卵裂球幹細胞、極小類胚胎幹細胞、其它種類的多功能幹細胞以及/或是一群選定的兩種或兩種以上的多功能幹細胞)、至少一種多潛能幹細胞(例如間質幹細胞、其它種類的多潛能幹細胞以及/或是一群選定的兩種或兩種以上的多潛能幹細胞)、造血幹細胞以及至少一種先驅幹細胞。這些小尺寸幹細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)係小於或等於4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或是介於1微米至4微米之間。
分析程序(T1)可以透過以下兩種方式達成：流式細胞技術或是逆轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR)分析法(例如即時逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法(real-time RT-PCR analysis))。流式細胞技術可以透過流式細胞儀(此儀器為一種分析儀器15a)執行細胞計數、細胞分類以及生物標記偵測等步驟來分析一樣本的參數。流式細胞儀15a可以用來分析樣本中特定的細胞(表面)標記是否呈現陽性表現。逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法可以透過(即時)逆轉錄聚合酶連鎖反應儀(此儀器為一種分析儀器15a)來偵測與量化一樣本中幹細胞的基因表現。透過逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法獲得的結果可以得知幹細胞表現的各種基因，而這些基因可以是Oct4、Nanog、Nestin以及甲種胚胎蛋白(alpha-feto protein)。
檢測或測量方法
(M2)
：
檢測或測量方法(M2)可以透過執行純化程序(Y2)然後再執行分析程序(T2)的方式來完成。純化程序(Y2)可以透過下列三種方式中的任何一種方式來處理取自一個體(其係可參閱個體(S)的敘述)的一組織樣本。有關該組織樣本的說明可參閱組織樣本(P)的敘述。例如，當該組織樣本是從上述個體的體液(例如人體血液、周邊血液或是骨髓)取得時，該組織樣本為一體液樣本(例如周邊血液樣本、全血樣本或是骨髓樣本)。當該組織樣本是從上述個體的固體組織(例如肌肉或脂肪細胞)取得時，該組織樣本為一固體組織樣本(例如肌肉樣本或脂肪細胞樣本)。另外，若該組織樣本是從上述個體的固體組織取得，在進行純化程序(Y2)之前，會在該組織樣本中加入膠原蛋白酶，並且讓該組織樣本與膠原蛋白酶在適當的溫度下(此溫度可以是37°C左右、30°C以上、介於35°C至39°C之間或是介於30°C至40°C之間)作用至少6或8小時。
在純化程序(Y2)的第一種方式中，請參閱第4圖所示，首先將上述的組織樣本移到含有抗凝血劑(例如二價陽離子螯合劑)的收集袋或貯存器19裡，以獲得含有組織樣本與抗凝血劑的混合液。上述的二價陽離子螯合劑可以是乙二胺四乙酸(EDTA)。接著，將混合液倒入到試管20a中。然後，利用離心機13將試管20a以適當的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間或是介於800 g至1,600 g之間)離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘或是15至22分鐘)。待試管20a完成離心後，分離出包含大細胞與小細胞在內的所有細胞。這些小細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是小於或等於4微米、5微米或6微米，例如介於0.1微米至6微米之間、介於0.5微米至6微米之間、介於1微米至6微米之間、介於0.1微米至5微米之間、介於0.5微米至5微米之間、介於1微米至5微米之間、介於0.1微米至4微米之間、介於0.5微米至4微米之間或是介於1微米至4微米之間。這些大細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是大於6微米。最後，將上述含有大細胞與小細胞在內的所有細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些細胞及此溶液的試驗樣本21a。試驗樣本21a可用於後續的分析程序(T2)中。
在純化程序(Y2)的第二種方式中，請參閱第5圖所示，若上述的組織樣本是從固體組織取得，則將經過膠原蛋白酶處理的組織樣本(如前所述)放入到試管20b中。接著，利用離心機13以高轉速產生的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間或是介於800 g至1,600 g之間)將試管20b離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘或是15至22分鐘)。待試管20a完成離心後，分離出包含大細胞與小細胞在內的所有細胞。此處有關大細胞與小細胞的敘述，請參閱上述純化程序(Y2)的第一種方式中的相關敘述。最後，將上述含有大細胞與小細胞在內的所有細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些細胞及此溶液的試驗樣本21b。試驗樣本21b可用於後續的分析程序(T2)中。
在純化程序(Y2)的第三種方式中，請參閱第6圖所示，若上述的組織樣本是從體液取得，則將該組織樣本以紅血球分解液22培養或作用一段時間(例如10分鐘左右、8分鐘以上、12分鐘以上、8至15分鐘或是9至20分鐘)，以消除組織樣本中所有的紅血球細胞。接著，將含有組織樣本與紅血球分解液22的混合液倒入試管20c中。然後，利用離心機13以高轉速產生的離心力(例如1,000 g、大於700 g、大於1,300 g、介於500 g至2,500 g之間或是介於800 g至1,600 g之間)將試管20c離心一段時間(例如18分鐘左右、12分鐘以上、16分鐘以上、10至30分鐘或是15至22分鐘)。待試管20c完成離心後，從含有組織樣本與紅血球分解液22的混合液中分離出包含大細胞與小細胞在內的所有細胞。此處有關大細胞與小細胞的敘述，請參閱上述純化程序(Y2)的第一種方式中的相關敘述。最後，將上述含有大細胞與小細胞在內的所有細胞放置到一溶液中(此溶液可以含有PBS與BSA)，並使這些細胞重新懸浮於此溶液中，以獲得含有這些細胞及此溶液的試驗樣本21c。試驗樣本21c可用於後續的分析程序(T2)中。
在利用純化程序(Y2)獲得試驗樣本21a、21b或21c之後，以分析程序(T2)對試驗樣本21a、21b或21c進行分析，進而獲得上述組織樣本中有關一種或多種幹細胞的一組結果或資料。該組結果或資料可透過量化、質化或描述等方式呈現。另外，第4圖、第5圖或第6圖所示的分析儀器15b(例如逆轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR)儀或是流式細胞儀)可用於進行分析程序(T2)。上述有關一種或多種幹細胞的結果或資料可以包括幹細胞的種類以及上述一種或多種幹細胞的相關數值(例如數量、百分比以及/或是尺寸大小)。此處所述的一種或多種幹細胞可以包括一種或多種小尺寸幹細胞(相關內容請參閱分析程序(T1)中的敘述)以及/或是一種或數種大尺寸幹細胞(例如至少一種多潛能幹細胞(如某些種類的間質幹細胞))。這些大尺寸幹細胞的尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是大於6微米。
分析程序(T2)可以透過以下兩種方式達成：流式細胞技術或是逆轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR)分析法(例如即時逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法)。流式細胞技術可以透過流式細胞儀(此儀器為一種分析儀器15b)執行細胞計數、細胞分類以及生物標記偵測等步驟來分析一樣本的參數。流式細胞儀15b可以用來分析樣本中特定的細胞(表面)標記是否呈現陽性表現。逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法可以透過(即時)逆轉錄聚合酶連鎖反應儀(此儀器為一種分析儀器15b)來偵測與量化一樣本中幹細胞的基因表現。透過逆轉錄聚合酶連鎖反應分析法獲得的結果可以得知幹細胞表現的基因，而這些基因可以是Oct4、Nanog、Nestin以及甲種胚胎蛋白。
前面段落所描述或提及的項目、規格、定義、方法、材料、製程、設備、步驟等都可以用在以下所提及的所有實施例中。例如，在以下段落中，「尺寸」一詞的定義可以參考上述有關尺寸(Z)的敘述，「個體」一詞的定義可以參考上述有關個體(S)的敘述，「組織樣本」一詞的定義可以參考上述有關組織樣本(P)的敘述。
實施例：
以下將敘述從一生物(例如人體或動物體)獲取、收集或收獲大量幹細胞的方法。第7A圖為根據本發明之一實施例所繪示的一流程圖，其係提供一種從取自一個體的一組織樣本中獲取、收集或收獲大量幹細胞的方法。所述的幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞。請參閱第7A圖所示，在步驟51中，一個體進行或接受一種或多種的行為或刺激(X)，例如服用或攝取一營養品或膳食補充品(如含有重量百分比超過60%之褐藻糖膠或小分子褐藻糖膠的褐藻補充品或是一顆或多顆在以下第一實驗和第11圖所提及的褐藻糖膠補充品)、服用經過政府部門(如美國食品藥物管理局)核准的一種或多種藥物以及/或是服用一草藥或一中藥。有關此個體(也就是前述的生物)的說明可以參閱個體(S)的敘述。例如，此個體可以是一人類或是一動物(如狗、貓、豬、雞、鴨或牛)。另外，在進行步驟51所述的一種或多種行為或刺激時，可以將劑量、強度、持續時間、施行頻率(例如以每次間隔一小時的方式服用一顆營養品或膳食補充品共三次)以及/或是施行時間(例如一天的時段(如早晨、中午、下午、傍晚、晚上)、用餐之前、用餐當中、用餐之後、季節(如春天、夏天、秋天、冬天)等)等因素納入考量。例如，當個體服用藥物或補充品(如褐藻糖膠補充品)的時候，可將劑量(例如克數)以及施行時間(例如早餐前、早餐後或是睡覺前)等因素納入考量。步驟51所述的一種或多種行為或刺激可以讓個體在進行或接受步驟51所述的一種或多種行為或刺激一段時間之後，增加個體的周邊血液中特定一種或多種幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞)的數量。
在步驟52中，在個體進行或接受上述的一種或多種的行為或刺激(X)之後，讓個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時。透過步驟51和步驟52，可以增加或擴增活體內的幹細胞數量。接著，在步驟53中，從個體獲得一組織樣本(如周邊血液樣本)。有關組織樣本的說明可參閱組織樣本(P)的敘述。接著，在步驟54中，對組織樣本進行一種幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法，進而從組織樣本大量地獲取、收集到或收獲上述的特定一種或多種的幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞)。例如，透過對組織樣本進行上述的幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法，可以從組織樣本中大量地獲取、收集到或收獲SB-1細胞以及/或是SB-2細胞。
接著，在步驟55中，經由上述幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法而從組織樣本中獲得的一種或多種的幹細胞可以為了以後的用途(PS)(其係敘述在下一段段落中)而被存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如攝氏負30度或攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間(例如1個月以上或一年以上)。此設施可以由一機構(如細胞銀行)所提供。這些被儲存的幹細胞可以在獲取、收集到或收獲這些幹細胞後的一段時間(如一個月、三個月、六個月、一年、兩年、五年或十年)之後因為用途(PS)而被用在上述同一個體或另一個體上。此處所述的另一個體可以是與上述個體相同生物分類的物種，而且可以與上述個體有相同的血型(如A型、B型、C型或AB型)。
這些被儲存的幹細胞可以被用在以下的用途(PS)上，此用途(PS)可以是：幹細胞治療、抗衰老治療或產品、逆轉老化(reverse ageing)治療或產品、創傷治療或產品、臉部整容治療或產品、整形手術、侵入式醫學美容治療、非侵入式醫學美容治療或產品、重建整形外科手術、癌症治療、退化性疾病治療、自體免疫疾病治療、牙齒治療、植牙手術、燒燙傷治療、膝半月板損傷治療、關節炎治療、膝關節炎治療、骨損傷治療、骨折治療、組織修復治療、組織或器官複製、再生性複製( reproductive cloning)、治療性複製(therapeutic cloning)、化妝品、皮膚護理產品、面膜、飼料添加物、營養品、補充品。在一範例中，這些被儲存的幹細胞可以透過一個適當的方法(如注射或塗抹)而被用在上述個體或上述另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。在另一範例中，這些被儲存的幹細胞可以與某些緩衝液(如鹽)混合，然後透過一個適當的方法(如注射或塗抹)將混合緩衝液的幹細胞用在上述個體或上述另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。
在另一實施例中，經由上述幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法而從上述組織樣本中獲得的一種或多種的幹細胞可以不用存放在上述溫度低於攝氏0度的設施中而被用在上述的用途(PS)中。或者，經由上述幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法而從上述組織樣本中獲得的一種或多種的幹細胞可以不用存放在上述溫度低於攝氏0度的設施中，而是透過適當的方法(如注射或塗抹)用在上述個體或另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。此處所述的另一個體可以是與上述個體相同生物分類的物種，而且可以與上述個體有相同的血型(如A型、B型、C型或AB型)。
在另一實施例中，從步驟53獲得的組織樣本可以被存放在一細胞銀行或一冷藏設備(如冰箱或冷凍庫)之溫度低於攝氏0度(例如攝氏負30度或攝氏負80度)的環境中。在組織樣本存放一段時間(如一個月、三個月、六個月、一年、兩年、五年或十年)之後，從冷藏設備取出組織樣本，然後對組織樣本進行一種幹細胞獲取、收集或收獲方法，進而從組織樣本中獲取、收集到或收獲上述的特定一種或多種的幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞)。例如，透過對組織樣本進行上述的幹細胞獲取、收集或收獲方法，可以從組織樣本中獲取、收集到或收獲SB-1細胞以及/或是SB-2細胞。經由上述幹細胞獲取、收集或收獲程序或方法而從組織樣本中獲得的一種或多種的幹細胞可以被用在上述的用途(PS)中或是透過適當的方法(如注射或塗抹)用在上述個體或另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。此處所述的另一個體可以是與上述個體相同生物分類的物種，而且可以與上述個體有相同的血型(如A型、B型、C型或AB型)。
在另一實施例中，從步驟53獲得的組織樣本可以被存放在一細胞銀行或一冷藏設備(如冰箱或冷凍庫)之溫度低於攝氏0度(例如攝氏負30度或攝氏負80度)的環境中。此組織樣本含有上述的特定一種或多種的幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞)，例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞。在組織樣本存放一段時間(如一個月、三個月、六個月、一年、兩年、五年或十年)之後，從冷藏設備取出組織樣本，然後將組織樣本用在上述的用途(PS)中或是透過適當的方法(如注射或塗抹)用在上述個體或另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。此處所述的另一個體可以是與上述個體相同生物分類的物種，而且可以與上述個體有相同的血型(如A型、B型、C型或AB型)。
在另一實施例中，從步驟53獲得的組織樣本可以不用被存放在一細胞銀行或一冷藏設備(如冰箱或冷凍庫)的(非常)低溫環境中一段時間(如一個月、三個月、六個月、一年、兩年、五年或十年)，而是直接用在上述的用途(PS)中或是透過適當的方法(如注射或塗抹)用在上述個體或另一個體的一組織或器官(如皮膚、骨頭、關節、牙齒、肝臟或腎臟)上。此處所述的另一個體可以是與上述個體相同生物分類的物種，而且可以與上述個體有相同的血型(如A型、B型、C型或AB型)。另外，上述的組織樣本含有上述的特定一種或多種的幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞)，例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞。
在另一實施例中，從步驟53獲得的組織樣本可以用來發現或偵測尚未被識別或發現的一種或多種的新種類幹細胞。以下在本實施例的敘述係以組織樣本是從個體的周邊血液獲得作為範例來進行說明。在個體進行或接受步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)之前，個體的周邊血液可以沒有上述一種或多種的新種類幹細胞或是僅有相當稀少(也就是指數量非常的低或是無法偵測)的上述一種或多種的新種類幹細胞，所以無法使用或是非常難以使用一流式細胞儀或是其它測量工具發現上述一種或多種的新種類幹細胞。在個體進行步驟51和步驟52之後，上述一種或多種的新種類幹細胞會在個體的周邊血液內增加、進行活化反應、流動、生成或進行刺激反應。因此，透過一流式細胞儀或是其它測量工具，可以輕易地發現上述一種或多種的新種類幹細胞，相關內容可參閱下面步驟59的敘述。
透過發現或偵測新種類幹細胞的方法，可以發現或偵測到上述一種或多種的新種類幹細胞。第7B圖揭示一種發現或偵測一種或多種新種類幹細胞之方法的流程圖。請參閱第7B圖所示，在依序進行步驟51至步驟53之後，接著進行步驟59。在步驟59中，利用一種可以偵測上述一種或多種的新種類幹細胞的分析方法(如前面所述的檢測或測量方法(M0)、(M1)或(M2))來處理步驟53所獲得的組織樣本(例如周邊血液樣本)。上述的分析方法包括偵測組織樣本中的細胞是否含有細胞核的步驟以及組織樣本中的細胞是否可以表現以及/或是無法表現一種或多種選定的細胞(表面)標記的步驟。
在另一實施例中，利用前面所述的檢測或測量方法(M0)、(M1)或(M2)、第9圖中的步驟61至步驟70、第14A圖至第14C圖中的步驟1至步驟20、之後所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是之後所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)，可以從第7A圖步驟53所獲得的組織樣本中獲得有關上述個體在進行或接受步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後的幹細胞資料(以下稱“資料A”)。資料A可以包括各種幹細胞的數量、各種幹細胞所占的百分比以及/或是一種或多種幹細胞在步驟53所獲得的組織樣本中每毫升的數量(也就是一種或多種幹細胞在步驟53所獲得的組織樣本中每單位體積的數量)。此處所述的一種或多種幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞。例如，資料A可以包括SB-1細胞的數量或百分比、SB-2細胞的數量或百分比、類卵裂球幹細胞的數量或百分比、極小類胚胎幹細胞的數量或百分比、間質幹細胞的數量或百分比、造血幹細胞的數量或百分比、一種或多種的多功能幹細胞、多潛能幹細胞以及/或是先驅幹細胞的數量或百分比、以及/或是一種或多種的多功能幹細胞、多潛能幹細胞和/或先驅幹細胞在步驟53所獲得的組織樣本中每單位體積的數量。資料A可以用於臨床診斷或是用於監測、決定、確認或評估個體的病程階段(disease stage)、治療進展(treatment progress)、健康狀況以及/或是生理情況。
或者，資料A可以用來評估或確認步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)對於治療或治癒患有一種特定疾病之個體的功效(或效用)。在此範例中，可以透過控制步驟51所述之一種或多種的行為或刺激(X)的劑量、強度、持續時間、施行頻率以及/或是施行時間來治療或治癒患有上述特定疾病之個體。上述的特定疾病可以是前列腺癌、肝癌、胃癌、口腔癌、大腸癌、乳癌、肺癌、鼻咽癌、子宮頸癌、皮膚癌、食道癌、膀胱癌、胰臟癌、子宮內膜癌、卵巢癌、膽囊癌、甲狀腺癌、白血病、淋巴癌、非何杰金氏淋巴瘤、黑色素瘤、帕金森氏症(parkinsonism)、阿茲海默病(Alzheimer's disease)、癡呆症(dementia)、糖尿病、過敏性鼻炎、腦瘤、後天免疫缺乏症候群(acquired immunodeficiency syndrome)。在本範例中，也可以獲得有關上述個體在進行或接受步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)之前的幹細胞資料(以下稱“資料B”)。然後，透過比較資料A與資料B，可以確認、決定或評估步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)對於治療或治癒患有上述特定疾病之個體的功效(或效用)。第7C圖根據本範例繪出一種確認、決定或評估步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)對於治癒或治療患有上述特定疾病之個體的功效(或效用)之方法的一流程圖。
請參閱第7C圖所示，在步驟49中，從上述個體取出、獲得、得到或取得一組織樣本(以下稱”第一組織樣本”)。有關第一組組織樣本的說明可參閱前面所述的組織樣本(P)。接著，在步驟50中，以第一檢測或測量方法分析或檢測第一組織樣本，進而獲得與第一組織樣本中一種或多種幹細胞有關的第一幹細胞資料(也就是資料B)。第一幹細胞資料可藉由量化或描述等方式呈現。第一檢測或測量方法可以包括取得和/或測量幹細胞的步驟。有關第一檢測或測量方法的說明可參閱檢測或測量方法(M0)、(M1)或(M2)的敘述、第9圖中步驟61至步驟70的敘述或是第14A圖至第14C圖中步驟1至步驟20的敘述。除了透過第一檢測或測量方法，第一幹細胞資料也可以透過之後所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是之後所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得。
第一幹細胞資料包括數個結果或資料R1
,1
-Ra
,b
，其中a為正整數(例如是2到100中的任何一個數字)，b也是正整數(例如是1或2)。R的第一個下標數字(也就是跟隨在字母R之後的數字—1到a)係代表某一種選定的幹細胞。R的第二個下標數字(也就是跟隨在第一個下標數字之後的數字—1到b)係代表某一種資料型態。
以下將對R的第一個下標數字進行敘述。在R的第一個下標數字為1的時候，結果或資料R1
,1
-R1
,b
可以是與“SB-1細胞”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為2的時候，結果或資料R2
,1
-R2
,b
可以是與“SB-2細胞”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為3的時候，結果或資料R3
,1
-R3
,b
可以是與“類卵裂球幹細胞(BLSC)”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為4的時候，結果或資料R4
,1
-R4
,b
可以是與“極小類胚胎幹細胞(VSEL)”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為5的時候，結果或資料R5
,1
-R5
,b
可以是與“某一種多潛能幹細胞(如間質幹細胞或多潛能成體先驅細胞)”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為6的時候，結果或資料R6
,1
-R6
,b
可以是與“另一種多潛能幹細胞(如造血幹細胞、骨髓多潛能幹細胞或多潛能成體幹細胞)”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為7的時候，結果或資料R7
,1
-R7
,b
可以是與“某一種先驅幹細胞(如前間質幹細胞、多潛能先驅幹細胞、譜系限制先驅幹細胞、共同髓原先驅細胞、共同淋巴球先驅細胞或造血先驅細胞)”有關的結果或資料。在R的第一個下標數字為8的時候，結果或資料R8
,1
-R8
,b
可以是與“另一種先驅幹細胞(如成體骨髓多元性誘導細胞或間質先驅細胞)”有關的結果或資料。
以下將對R的第二個下標數字進行敘述。在R的第二個下標數字為1的時候，結果或資料R1
,1
-Ra
,1
可以是與“幹細胞的數量”有關的結果或資料。在R的第二個下標數字為2的時候，結果或資料R1
,2
-Ra
,2
可以是與“幹細胞的百分比”有關的結果或資料。在R的第二個下標數字為3的時候，結果或資料R1
,3
-Ra
,3
可以是與“幹細胞在一組織樣本(如上述的第一組織樣本)中每單位體積(如每毫升)的數量”有關的結果或資料。
因此，結果或資料R1
,1
係可代表或顯示出SB-1細胞的數量。結果或資料R1
,2
係可代表或顯示出SB-1細胞的百分比。結果或資料R1
,3
係可代表或顯示出SB-1細胞在一組織樣本(如上述的第一組織樣本)中每單位體積(如每毫升)的數量。結果或資料R2
,1
係可代表或顯示出SB-2細胞的數量。結果或資料R2
,2
係可代表或顯示出SB-2細胞的百分比。結果或資料R2
,3
係可代表或顯示出SB-2細胞在一組織樣本(如上述的第一組織樣本)中每單位體積(如每毫升)的數量。其它的結果或資料則以此類推，在此就不加以論述。
請參閱第7C圖所示，在進行完(或完成)步驟49或步驟50之後，依序進行前面所述的步驟51至步驟53，因而從進行或接受步驟51所述之一種或多種行為或刺激(X)之後的個體取出、獲得、得到或取得一組織樣本(以下稱“第二組織樣本”)。有關第二組組織樣本的說明可參閱前面所述的組織樣本(P)。第一與第二組織樣本可以是從個體的同一種組織所獲得的兩個樣本。例如，第一與第二組織樣本可以從個體的周邊血液、骨骼、肌肉、脂肪細胞或是脂肪組織獲得。在一範例中，第一與第二組織樣本都可以是周邊血液樣本。
接著，在步驟56中，以第二檢測或測量方法分析或檢測第二組織樣本，進而獲得與第二組織樣本中一種或多種幹細胞有關的第二幹細胞資料(也就是資料A)。第二幹細胞資料可藉由量化或描述等方式呈現。第二檢測或測量方法可以包括取得和/或測量幹細胞的步驟。有關第二檢測或測量方法的說明可參閱檢測或測量方法(M0)、(M1)或(M2)的敘述、第9圖中步驟61至步驟70的敘述或是第14A圖至第14C圖中步驟1至步驟20的敘述。除了透過第二檢測或測量方法，第二幹細胞資料也可以透過之後所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是之後所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得。
第二幹細胞資料含有與步驟50所提及之第一幹細胞資料相同類型的資訊內容，也就是說第二幹細胞資料含有對應的結果或資料R1
,1
-Ra
,b
，其中有關R的第一個與第二個下標數字係定義於、描述於或是說明於步驟50所提及之第一幹細胞資料的R1
,1
-Ra
,b
中。為了獲得相同類型的資訊內容以及減少實驗誤差，本發明透過相同的方式(例如檢測或測量方法(M0)、(M1)或(M2)、第9圖的步驟61至步驟70或是第14A圖至第14C圖的步驟1至步驟20)或是相同的儀器(例如整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是單一系統、儀器、工具或裝置(TD))來進行獲得第一幹細胞資料與第二幹細胞資料的第一與第二檢測或測量方法。
接著，在步驟57中，根據對第一幹細胞資料與第二幹細胞資料所做的分析(其可包括比較第一幹細胞資料與第二幹細胞資料)，可以確認、決定或評估步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)對於治癒或治療患有上述特定疾病之個體的功效(或效用)。第一幹細胞資料與第二幹細胞資料可以做成一份評估或檢查報告。另外，第7C圖的步驟49、步驟50、步驟51、步驟52、步驟53、步驟56和步驟57也可以用來確認、決定、評估或測試步驟51所述之一種或多種的行為或刺激(如服用或攝取一顆或多顆以下第一實驗和第11圖所提及的褐藻補充品)的效果或功效(或效用)。
請參閱第7C圖所示，在進行完(或完成)步驟56或步驟57之後，如果需要可以進行步驟58，也就是讓相同個體依序進行步驟51、步驟52、步驟53、步驟56和步驟57一次或多次。在步驟58中，每次進行步驟53的時候，都會在進行完(或完成)步驟52之後，從相同個體獲得或得到一組織樣本。在步驟58中，每次以一檢測或測量方法(如步驟56所提及的檢測或測量方法)分析或檢測從相同個體獲得的組織樣本都可以獲得與組織樣本中一種或多種幹細胞有關的幹細胞資料(其說明可參閱步驟50所述的第一幹細胞資料)。在步驟58中，每次將當前的幹細胞資料和前一次的幹細胞資料進行比較(如步驟57所述的比較第一幹細胞資料與第二幹細胞資料)都可以確認、決定或評估步驟51所述的一種或多種的行為或刺激(X)對於治癒或治療患有上述特定疾病之個體的功效(或效用)。步驟58所獲得的每一組幹細胞資料可以含有與步驟50所述之第一幹細胞資料相同類型的資訊內容，也就是說步驟58所獲得的每一組幹細胞資料含有對應的結果或資料R1
,1
-Ra
,b
，其中有關R的第一個與第二個下標數字係定義於、描述於或是說明於步驟50所提及之第一幹細胞資料的R1
,1
-Ra
,b
中。另外，第7C圖的步驟58也可以用來確認、決定、評估或測試步驟51所述之一種或多種的行為或刺激(如服用或攝取一顆或多顆以下第一實驗和第11圖所提及的褐藻補充品)的效果或功效(或效用)。
在接下來的內容中，將以一種增加人體周邊血液幹細胞數量的方法作為範例，敘述第一實驗並顯示相關的實驗結果。第8A圖至第8F圖顯示出三位人類受試者在口服30顆褐藻糖膠補充品之前與之後的幹細胞資料。透過步驟49至步驟53和步驟56至步驟58的這個方法，可以從三位人類受試者獲得第8A圖至第8F圖的幹細胞資料。在第一實驗中，每一位人類受試者在步驟51中係口服30顆褐藻糖膠補充品。每一顆褐藻糖膠補充品的重量為151.3毫克(mg)，並且含有0.1克的褐藻糖膠(其係透過萃取的方式從生長在日本沖繩縣周圍海域的褐藻中獲得)和0.04克的膳食纖維。此褐藻糖膠補充品可以在日本沖繩縣生產。褐藻是海藻的一種。褐藻有各式各樣的種類，例如水雲、昆布、裙帶菜、羊栖菜等。綠藻、藍藻或藍綠藻係生長在靠近海岸的地方或是在淺海裡，而且依賴光合作用生長。紅藻係生長在深海裡，而且倚賴微光進行光合作用。褐藻係生長在介於綠/藍藻和紅藻之間的海洋中，換句話說，褐藻係生長在海洋深度中間的地方。
第11圖顯示用在第一實驗之褐藻糖膠補充品的內容/成分資訊。如第11圖所示，一顆褐藻糖膠補充品含有重量百分比為80%的水雲粉(mozuku powder)、重量百分比為15%的結晶纖維素 (crystalline cellulose)、重量百分比為3%的蔗糖脂肪酸酯(sucrose fatty acid esters)以及重量百分比為2%的精細二氧化矽。水雲粉係萃取自(或是提取自)生長在日本沖繩縣周圍海域中的水雲褐藻(其係為一種海藻)。然後，將水雲粉混合結晶纖維素、蔗糖脂肪酸酯以及精細二氧化矽，就可以獲得這顆褐藻糖膠補充品。在第一實驗中，每一位受試者口服30顆沖繩褐藻糖膠補充品，也就是說每一位受試者服用4.5克(或超過3.5克)的沖繩褐藻補充品，此沖繩褐藻補充品包括重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉。這30顆的沖繩褐藻糖膠補充品(也就是約4.5克左右的沖繩褐藻補充品)含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠。因此，每一位受試者服用3克(或是超過2克)的褐藻糖膠。
在第一實驗中，這三位受試者每一位的體重大約是75公斤。這意味著褐藻糖膠的劑量是每公斤體重約40毫克。或者，褐藻糖膠的劑量也可以是每公斤體重超過20毫克、30毫克、40毫克或是50毫克。第12圖揭示褐藻糖膠的部分分子結構，其係包含多個環形結構，每一個環形結構含有5個碳原子(C)和1個氧原子(O)。另外，此分子結構也包含數個基團(radical)R，其係可以是SO3
或H。SO3
基團在褐藻糖膠中扮演著非常重要的角色。在沖繩褐藻糖膠補充品中，硫(S)在褐藻糖膠分子中的重量百分比大約是12%。對本發明的實施例而言，在這個褐藻糖膠補充品中，硫(S)在褐藻糖膠分子中的重量百分比也可以大於6%、8%或10%。或者，在這個褐藻糖膠補充品中，硫(S)在褐藻糖膠分子中的重量百分比也可以大於12%、16%或20%。
在第一實驗中，這三位受試者是：(1)受試者A：一位近三十歲的女性，其實驗資料顯示在第8A圖和第8B圖；(2)受試者B：一位五十五歲左右的男性，其實驗資料顯示在第8C圖和第8D圖；以及(3)受試者C：一位五十歲出頭的男性，其實驗資料顯示在第8E圖和第8F圖。第8A圖和第8B圖的幹細胞資料顯示受試者A在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前、之後第1.5小時、之後第24小時以及之後第48小時的每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比。第8C圖和第8D圖的幹細胞資料顯示受試者B在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前、之後第1.5小時、之後第24小時以及之後第48小時的每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比。第8E圖和第8F圖的幹細胞資料顯示受試者C在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前、之後第1.5小時、之後第24小時以及之後第48小時的每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比。
用於幹細胞研究的實驗方法、程序和規範(其係包括使用一流式細胞儀)係已敘述於前面的段落中。第9圖的步驟61至步驟70也可以用來獲得每一位受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前、之後第1.5小時、之後第24小時以及之後第48小時的每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比。請參閱第9圖所示，在步驟61中，從一個體(如上述三位人類受試者的任何一位)獲得或收集5毫升的周邊血液，然後將5毫升的周邊血液放進第一試管中，並使其混合二價陽離子螯合劑(例如乙二胺四乙酸)。接著，在步驟62中，將1毫升的6%羥乙基澱粉加到第一試管內的5毫升周邊血液中，以形成一個第一中間樣本。6%羥乙基澱粉是一種磷酸鹽緩衝液內含有6%的羥乙基澱粉的溶液，其係每100毫升的磷酸鹽緩衝液含有6克的羥乙基澱粉。接著，在步驟63中，讓第一中間樣本在室溫(如約27°C)靜置或培育一段時間(例如至少30分鐘)。待第一中間樣本形成上下兩個分層後，在不擾動下分層(其係為紅血球層)的情況下，將上分層(其係為細胞層)以吸取器移出並放置到第二試管中。然後，在步驟64中，將放到第二試管內的上分層以適當的轉速(例如每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如15分鐘)，並在離心完成後，獲得離心樣本。接著，在步驟65中，移除離心樣本的上清液。接下來，在步驟66中，以適當的鹽溶液(如PBS)沖洗離心樣本的顆粒，然後使顆粒重新懸浮於3毫升的第一溶液(例如含有1%或2%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液)中，以獲得3毫升樣本。
接著，在步驟67中，將3毫升樣本分到多個樣本容器(如試管)中。每個樣本容器含有來自3毫升樣本的100微升(microliter)溶液(以下稱“100微升樣本”)。然後，每個樣本容器可以加入特定一種的染色劑(其係可以含有特定一種的抗體或是多種特定的抗體)。加到每個樣本容器裡的染色劑可以是彼此不同的，所以每個樣本容器中的染色劑所含有的一種或多種抗體也可以是彼此不同的。因此，加到這些樣本容器裡的染色劑係彼此含有不同種類的抗體。在每個樣本容器中加入一種特定染色劑的目的在於識別一種特定的細胞(表面)標記、多種選定的細胞(表面)標記或是特定種類的幹細胞。在染色劑裡的每一種抗體可以用來識別一種特定的細胞(表面)標記、一種特定的幹細胞或是多種特定的幹細胞或細胞(表面)標記。這些染色劑裡的每一種抗體係不同於這些染色劑裡的其它種抗體。因此，每一個樣本容器裡含有一個第二中間樣本，而且每一個第二中間樣本都是由經過上述對應之染色劑(其係含有一種或多種特定的抗體)染色的100微升樣本所構成。
接著，在步驟68中，讓這些樣本容器裡的第二中間樣本在室溫(如約27°C)靜置或培育一段時間(例如至少30分鐘)。接著，在步驟69中，將每一個第二中間樣本和大約400微升的第二溶液(如含有1%或2%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液)進行混合，以形成體積為500微升的樣本(以下稱“500微升樣本”)。每一個500微升樣本都是100微升樣本(其係經過相對應的一種染色劑(此染色劑含有一種或多種抗體)染色)和第二溶液的混合物。接著，在步驟70中，利用一流式細胞儀分析這些樣本容器裡的500微升樣本，進而獲得幹細胞資料。在第一實驗中，流式細胞儀會去計數和分析每個500微升樣本裡的其中一百萬個顆粒(其係含有幹細胞、其它的細胞以及來自加入的染色劑或第二溶液的顆粒)。
在第9圖的步驟70中，透過流式細胞儀測量到的前向散射係數(forward scattering coefficient，簡稱FSC)和側向散射係數(side scattering coefficient，簡稱SSC)，可以將上述提及的每個500微升樣本裡的其中一百萬個顆粒(其係含有幹細胞、其它的細胞以及來自加入的染色劑或第二溶液的顆粒)區分成對應的多個細胞群或顆粒群。第10圖是用在上述流式細胞儀的前向散射係數/側向散射係數圖，並且顯示某個500微升樣本裡的一百萬個顆粒(其係含有幹細胞、其它的細胞以及來自加入的染色劑或第二溶液的顆粒)的多個細胞群或顆粒群。請參閱第10圖所示，橫軸代表範圍從103
到107.2
的前向散射係數，縱軸代表範圍從101
到107.2
的側向散射係數。在本發明中，前向散射係數與一個細胞或顆粒的表面積或尺寸有關或是成比例，側向散射係數與一個細胞或顆粒的粒性(granularity)或內部複雜度有關或是成比例。位在第10圖所示之垂直虛線81右側區域的點狀物可以代表尺寸大於1微米的顆粒或細胞。位在第10圖所示之水平虛線82上方區域的點狀物可以代表側向散射係數大於102
的顆粒或細胞。
第10圖所示的細胞群或顆粒群包括：(1)微顆粒(micro particles)，如區域P1所示；(2)尺寸大於1微米且側向散射係數大於102
的細胞，如區域P3所示；(3)未知的微顆粒，如區域P4所示；(4)染色緩衝溶液(staining buffer)，如區域P5所示；(5)淋巴球(lymphocyte)，如區域P6所示；(6)紅血球，如區域P7所示；(7)粒細胞(granulocyte)，如區域P8所示；以及(8)血小板，如區域P9所示。區域P3包括區域P1、區域P6、區域P7、區域P8和區域P9。感興趣的細胞或顆粒(以下稱“全部細胞或顆粒TS”)是位在區域P3裡，但是沒有位在區域P1、區域P6、區域P7、區域P8和區域P9這些區域裡。全部細胞或顆粒TS包含有一種或多種上述的27種幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)。在本發明中，其它500微升樣本含有與第10圖所提及的細胞群或顆粒群相同的細胞群或顆粒群。
透過流式細胞儀，可以測得(或獲得)每個500微升樣本裡的全部細胞或顆粒TS的數量以及在全部細胞或顆粒TS中選定種類幹細胞的數量。然後，使用上述的資料，可以得到第8A圖至第8F圖所示的“上述27種幹細胞中每一種幹細胞之數量或總數占全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比”。第8A圖至第8F圖所示之每一種幹細胞的百分比可以透過下列的計算方式來獲得：將每一種幹細胞的數量或總數除以對應之全部細胞或顆粒TS的數量或總數，然後將每一個相除的結果乘以100%(其係為了將相除的結果轉換成百分比數字)。在步驟70中，透過上述流式細胞儀獲得的幹細胞資料包括“每一種幹細胞(共有27種幹細胞)之數量或總數占對應之全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比”。
因此，對上述三位人類受試者進行步驟61至步驟70所述的方法，可以獲得第8A圖至第8F圖所示之每位人類受試者在食用或攝取上述褐藻糖膠補充品之前、之後第1.5小時、之後第24小時以及之後第48小時的“每一種幹細胞(共有27種幹細胞)之數量或總數占對應之全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比”。利用獲得的百分比資料，則可獲得每位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前和之後第1.5小時每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比變化(percentage change)、在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前和之後第24小時每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比變化或是在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前和之後第48小時每一種幹細胞(共有27種幹細胞)的百分比變化。這些百分比變化的資料可以用來建立或得到幹細胞在體內培養或培育的最佳收獲(或獲取)時間點(例如在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第24小時)。
請再次參閱第8A圖至第8F圖，將三位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前的資料和三位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第24小時的資料進行比較，得知大部分種類的幹細胞在百分比上顯示出有增加的情況。特別是可以發現下列的幹細胞在百分比上有兩倍或是更多的增加：SB-1細胞、CD44(+)多潛能幹細胞、CD13(+)多潛能幹細胞、CD73(+)多潛能幹細胞、CD90(+)多潛能幹細胞、CD34(+)造血幹細胞、CD48(+)先驅幹細胞、CD244(+)先驅幹細胞、CD140b(+)先驅幹細胞、CD117(+)先驅幹細胞、CD10(+)先驅幹細胞以及CD33(+)先驅幹細胞。上述12種幹細胞在百分比上有兩倍或是更多的增加是透過下列的方式得知：將三位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第24小時有關上述12種幹細胞的“幹細胞之數量或總數占對應之全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比”和三位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前有關上述12種幹細胞的“幹細胞之數量或總數占對應之全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比”進行比較。
根據第8A圖至第8F圖的幹細胞資料顯示，服用上述的褐藻糖膠補充品可以導致、引起或造成某些種類幹細胞的百分比在三位人類受試者食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第24小時的周邊血液中至少有兩倍的增加。此處所述的“兩倍增加”是指「某些特定種類的幹細胞在食用或攝取褐藻糖膠補充品之前的百分比」和「這些特定種類的幹細胞在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第24小時(也可以是其它特定時間，例如第1.5小時、第3小時、第6小時、第9小時、第12小時、第18小時、第30小時或第36小時)的百分比」的比例。另外，第8A圖至第8F圖的幹細胞資料也顯示，其它種類的幹細胞也有1.5倍、3倍或4倍的增加。因此，口服褐藻糖膠(一種褐藻的主要成分)可以是一種使人類或動物的周邊血液增加幹細胞的有效方法。綜上所述，一種行為，例如口服3克(也就是超過2克)的褐藻糖膠(其可來自上述的褐藻糖膠補充品)或是一種或多種的行為或刺激(X)，可以導致、引起、活化或催化人類或動物周邊血液中的幹細胞至少有1.5倍(或以上)、2倍(或以上)、3倍(或以上)或4倍(或以上)的增加。
某些準則(或標準)可以設定用來決定步驟53獲得的組織樣本(其係在進行或接受步驟51的一種或多種的行為或刺激(X)之後取得)是否可以用於收穫、獲得或是收集第7A圖步驟54的幹細胞。例如，請參閱第7A圖所示，當測量結果或資料顯示SB-1細胞之數量或總數占全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比是大於20%、25%或30%、SB-2細胞之數量或總數占全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比是大於20%、25%或30%以及/或是類卵裂球幹細胞之數量或總數占全部細胞或顆粒TS之數量或總數的百分比是大於5%或10%的時候，從步驟53獲得的組織樣本(其係在進行或接受步驟51的一種或多種的行為或刺激(X)之後取得)才可以用來收穫、獲得或是收集幹細胞。或者，請參閱第7A圖所示，當測量結果或資料顯示SB-1細胞、SB-2細胞以及/或是類卵裂球幹細胞至少有1.5倍(或以上)增加、2倍(或以上)增加或是3倍(或以上)增加的時候，從步驟53獲得的組織樣本(其係在進行或接受步驟51的一種或多種的行為或刺激(X)之後取得)才可以用來收穫、獲得或是收集幹細胞。此處所述的x倍(如1.5倍、2倍或3倍)增加係已定義於前面的段落中。
根據第8A圖至第8F圖所示的結果，證實口服褐藻糖膠可以增加人類或動物的周邊血液中幹細胞的數量。因此，用來表示(或指出)口服褐藻糖膠(其係為一種行為或刺激(X))有益於增加人體某些種類幹細胞數量的標誌、記號、陳述或符號就可以被允許貼在或是印在一種產品(如上述的褐藻糖膠補充品)的包裝、容器或是包裝紙上。在另外一個範例中，第8A圖至第8F圖所示的結果也可以用來判斷使用在口服褐藻糖膠補充品這種行為的劑量、強度、持續時間、施行頻率以及/或是施行時間是否有益於增加人體某些種類幹細胞的數量。根據第8A圖至第8F圖所示的結果，每天或是一次服用30顆的褐藻糖膠補充品(這30顆褐藻糖膠補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠)可以用來治療某些疾病或是傷害或是用來維持健康。
一般情況下，第8A圖至第8F圖所述的27種幹細胞在組織中可以認為是靜止或休眠的(quiescent)，但是在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後，可以讓這27種幹細胞移動或調動到周邊血液中，並且活化或分化這27種幹細胞來修補受損傷的組織。因此，褐藻的褐藻糖膠成分可以在幹細胞從一適當位置(如肌肉或骨髓)移動或調動到血流的機制中或是在活化或生成幹細胞的機制中扮演一個關鍵性的角色。換句話說，褐藻的主要成分—褐藻糖膠，可以是幹細胞的一種調動(或移動)器、產生器或是活化(或催化)器。前面敘述的實施例可以用來調動、產生或是活化(或催化)一種或多種的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)。
第13圖所示為一種獲得有關一個體之幹細胞資料的方法。請參閱第13圖所示，在步驟101中，一實驗對象(如前面所述的個體(S))進行或接受一種或多種的行為或刺激(X)。例如，實驗對象(或稱實驗組參與者)可以在步驟101中口服30顆褐藻糖膠補充品(其係可以是第11圖和第12圖所提及的褐藻糖膠補充品)，所以實驗對象在步驟101中服用了3克(也就是超過2克)的褐藻糖膠。或者，實驗對象也可以在步驟101中接受注射一種含有褐藻糖膠或小分子褐藻糖膠的營養品或補充品。接著，在步驟102中，在實驗對象進行或接受步驟101所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後，讓實驗對象等待一段(預定的)時間，例如1.5小時、12小時、24小時、48小時、0.5小時至3小時或是1小時至2小時。接下來，在步驟103中，將實驗對象在一特定時間點的周邊血液取出，並放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一血液樣本(也就是一組織樣本)。所述的特定時間點為該段(預定的)時間結束的時間點。血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升。接著，在步驟104中，對血液樣本進行一測量或分析方法(以下稱“測量方法MT”)，進而獲得實驗對象在所述的特定時間點的幹細胞資料。該幹細胞資料可包括實驗對象在所述的特定時間點的周邊血液中，每單位體積(如每毫升)的每一種幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的多種幹細胞)之數量。在對血液樣本進行步驟104中的測量方法MT之前，血液樣本可以存放在溫度介於1°C至30°C之間(例如介於1°C至10°C之間、介於10°C至20°C之間或是介於20°C至30°C之間)的環境中。從步驟103獲得血液樣本到步驟104對血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以是等於或小於30分鐘、60分鐘、12小時、24小時、48小時、72小時或是1星期，例如是介於10分鐘到30分鐘之間、介於30分鐘到60分鐘之間、介於0.5小時到2小時之間、介於2小時到12小時之間、介於12小時到24小時之間、介於24小時到48小時之間或是介於48小時到72小時之間。
在第13圖步驟104所提及的測量方法MT可以包括第14A圖的步驟1至步驟8、第14B圖的步驟9至步驟14以及第14C圖的步驟15至步驟20。請參閱第14A圖所示，在步驟1中，將含有6%羥乙基澱粉的紅血球凝集劑(erythrocyte aggregation agent)加到裝有一血液樣本(如周邊血液)的一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以形成第一中間樣本。含有6%羥乙基澱粉的紅血球凝集劑可以是HetaSep™溶液。裝有血液樣本的採血管例如可以在第13圖的步驟103中獲得。血液樣本可以透過以下方式獲得：取出一個體(如前面所述的個體(S))的周邊血液，並將取出的周邊血液放到上述的採血管中。在對血液樣本進行步驟1之前，可以將血液樣本存放在溫度介於1°C至30°C之間(例如介於1°C至10°C之間、介於10°C至20°C之間或是介於20°C至30°C之間)的環境中。從獲得血液樣本到對血液樣本進行步驟1的時間間隔可以是等於或小於30分鐘、60分鐘、12小時、24小時、48小時、72小時或是1星期，例如介於10分鐘到30分鐘之間、介於30分鐘到60分鐘之間、介於0.5小時到2小時之間、介於2小時到12小時之間、介於12小時到24小時之間、介於24小時到48小時之間或是介於48小時到72小時之間。血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升。血液樣本與含有6%羥乙基澱粉的紅血球凝集劑的體積比可以是5：1。6%羥乙基澱粉是一種磷酸鹽緩衝液(PBS)內含有6%的羥乙基澱粉的溶液，其係每100毫升(mL)的磷酸鹽緩衝液含有6克的羥乙基澱粉。
接著，在步驟2中，將第一中間樣本放到第一試管(如falcon試管)中，然後讓第一中間樣本在室溫(如27℃左右)培養一段時間(例如30分鐘至90分鐘)。待第一試管中的第一中間樣本形成上下兩個分層後，在不擾動下分層(其係為紅血球層)的情況下，將上分層(其係為細胞層)以吸取器移出並放置到第二試管中。接下來，在步驟3中，將移到第二試管內的上分層以適當的轉速(例如每分鐘1,800轉或是每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如10分鐘至20分鐘)，並在離心完成後獲得第一離心樣本。接著，在步驟4中，將第一離心樣本的上清液移除，並使第一離心樣本裡的顆粒重新懸浮於不含有鈣與鎂的第一含鹽溶液(例如不含有鈣與鎂的杜爾貝科(Dulbecco)磷酸鹽緩衝液)中，以形成第二中間樣本。第一離心樣本裡的顆粒有部分來自於血液樣本。接下來，在步驟5中，將第二中間樣本以適當的轉速(例如每分鐘1,800轉或是每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如10分鐘至20分鐘)，並在離心完成後獲得第二離心樣本。
接著，在步驟6中，將第二離心樣本的上清液移除，並使第二離心樣本裡的顆粒重新懸浮於不含有鈣與鎂的第二含鹽溶液(例如不含有鈣與鎂的杜爾貝科(Dulbecco)磷酸鹽緩衝液)中，以形成第三中間樣本。第二離心樣本裡的顆粒有部分來自於血液樣本。接下來，在步驟7中，將第三中間樣本以適當的轉速(例如每分鐘1,800轉或是每分鐘3,000轉)離心一段時間(例如10分鐘至20分鐘)，並在離心完成後獲得第三離心樣本。接著，在步驟8中，將第三離心樣本的上清液移除，並使第三離心樣本裡的顆粒重新懸浮於第一培養液(例如含有1%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸鹽緩衝液)中，以獲得一個經過處裡的樣本(以下稱“處理過樣本”)。在本發明中，讓0.1克的牛血清白蛋白溶解在10毫升的磷酸鹽緩衝液中，可以獲得含有1%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液。第三離心樣本裡的顆粒有部分來自於血液樣本。處理過樣本的體積可以大於或等於0.8毫升或3毫升，而且也可以小於步驟1所述之血液樣本的體積。第一培養液的體積可以大致等於處理過樣本的體積。
請參閱第14B圖所示，在透過步驟8獲得處理過樣本之後，依序進行步驟9至步驟14。在步驟9中，從處理過樣本中取出一部分(以下稱“第一部分樣本”)，然後將第一部分樣本分到第三試管中。接著，在步驟10中，將染色劑(例如台盼藍(trypan blue))加到裝有第一部分樣本的第三試管中，讓染色劑和第一部分樣本混合，以形成第一測試樣本。第一部分樣本的體積可以是介於5微升(microliter)至50微升之間(例如10微升)，而且可以等於染色劑的體積。接下來，在步驟11中，將部分的第一測試樣本(此部分的體積可以是介於10微升至20微升之間(例如10微升))放入到一個血球計數器(hemocytometer)的一個空室(chamber)中。此血球計數器具有位在上述空室下方的一微小方格圖案(microscopic grid)，如第15圖所示。此微小方格圖案包括4個寬度為1毫米(mm)的正方形(也可以稱為1毫米寬正方形)100a-100d，而且這4個正方形100a-100d中的每一個又再分成16個寬度為0.25毫米的正方形(也可以稱為0.25毫米寬正方形)。另外，一玻璃蓋玻片覆蓋在上述空室的上面。位在玻璃蓋玻片底部表面與上述空室地面之間的空間，其深度為0.1毫米。因此，4個1毫米寬正方形100a-100d中的每一個都代表0.1立方毫米(mm3
)或是10-4
毫升。
請參閱第14B圖所示，在進行完(或完成)步驟11之後，如步驟12所述，將血球計數器放到顯微鏡的載物台(stage)上。此顯微鏡的總放大倍率可以是大於或等於200倍。另外，此顯微鏡可以包括放大倍率大於或等於10倍的接目鏡(ocular lens)以及放大倍率大於或等於20倍的接物鏡(objective lens)。接著，在步驟13中，透過顯微鏡的視野範圍，計數(或計算)位在1毫米寬正方形100a裡其中一個0.25毫米寬正方形內尺寸大於或等於1微米的細胞(也可以稱為≥1微米細胞)，進而獲得≥1微米細胞在1毫米寬正方形100a之上述0.25毫米寬正方形內的數量(或總數)。因此，將≥1微米細胞在1毫米寬正方形100a之上述0.25毫米寬正方形內的數量(或總數)乘以16(其係為1毫米寬正方形100a所具有0.25毫米寬正方形的數量)，可估算出≥1微米細胞在1毫米寬正方形100a裡的數量(或總數)。接下來，在步驟14中，將≥1微米細胞在1毫米寬正方形100a裡的數量(或總數)乘以一個稀釋係數(例如等於或大於1.5、2或3)，然後將相乘的結果除以1毫米寬正方形100a的體積(也就是10-4
毫升)，因而估算出≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量(也就是≥1微米細胞在處理過樣本中每單位體積的數量)。例如，當第一部分樣本用體積和第一部分樣本相同的染色劑稀釋的時候，上述的稀釋係數可以是2。步驟13和步驟14所提及的≥1微米細胞可以包括微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板、白血球(包含淋巴球)以及各種的幹細胞，其中微顆粒可以沒有細胞核或細胞質。
此外，在步驟14中，≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量也可以透過以下的方式來估算：首先將≥1微米細胞在血球計數器之每個1毫米寬正方形裡的平均計數(或數量)乘以上述的稀釋係數，然後將相乘的結果除以血球計數器裡每個1毫米寬正方形的平均體積(也就是10-4
毫升)。在這種情況下，步驟13包括：(1)透過顯微鏡的視野範圍，算出每一個1毫米寬正方形(其係共有4個，也就是1毫米寬正方形100a-100d)中某個0.25毫米寬正方形裡尺寸大於或等於1微米之細胞(也可以稱為≥1微米細胞)的數量，以獲得4個≥1微米細胞的原始數量(或總數)，以及(2)將每一個≥1微米細胞的原始數量(或總數)乘以16(其係為4個1毫米寬正方形100a-100d中，每一個1毫米寬正方形裡所具有0.25毫米寬正方形的數量)，因而估算出(或獲得)≥1微米細胞在每一個1毫米寬正方形(其係共有4個，也就是1毫米寬正方形100a-100d)裡的數量(或總數)。因此，≥1微米細胞在血球計數器之每個1毫米寬正方形裡的平均計數(或數量)可以透過以下方式獲得：將≥1微米細胞在每一個1毫米寬正方形(其係共有4個，也就是1毫米寬正方形100a-100d)裡的數量(或總數)相加起來，然後將相加的結果除以4(其係為血球計數器中1毫米寬正方形的數量，也就是4個1毫米寬正方形100a-100d)。
請參閱第14C圖所示，在透過步驟8獲得處理過樣本之後，依序進行步驟15至步驟20。在步驟15中，從處理過樣本中取出另一部分(以下稱“第二部分樣本”)，然後將第二部分樣本分到多個樣本容器(如試管)中。因此，每個樣本容器中含有L微升的第二部分樣本(L微升的第二部分樣本以下稱為“小部分樣本”)，其中L可以是50到250中的任何一個數字(例如100)。在處理過樣本是均勻且含有大致相同之內容物的情況下，第二部分樣本可以假定含有與步驟9所述之第一部分樣本大致上相同的內容物。第二部分樣本的總體積可以是介於0.5毫升至18微升之間(例如2微升)。樣本容器的數量可以是2個至50個之間。接著，在步驟16中，在每一個樣本容器中加入一種特定的染色劑(其係可以含有一種或多種的抗體)。加到每一個樣本容器中的染色劑可以是彼此不同的，而且可以含有特定一種的抗體或是多種特定的抗體。每一個樣本容器中的染色劑所含有的一種或多種抗體可以是彼此不同的。在每個樣本容器中加入一種或多種染色劑的目的在於識別一種或多種特定的細胞(表面)標記或是一種或多種的幹細胞(每一種幹細胞可以用本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種細胞(表面)標記描述其特徵)。這些染色劑中的每一種抗體可以用來識別一種特定的細胞(表面)標記、一種特定的幹細胞或是多種選定的幹細胞或細胞(表面)標記，而且與這些染色劑中的其它種抗體所識別的幹細胞或細胞(表面)標記有所不同。因此，每一個樣本容器中含有一個第四中間樣本，而且每一個第四中間樣本都是由經過上述對應之染色劑(其係含有一種或多種特定的抗體)染色的小部分樣本所構成。
接著，在步驟17中，將這些樣本容器中的第四中間樣本在室溫(如27℃左右)培養一段時間(例如至少30分鐘)。接下來，在步驟18中，將在這些樣本容器中的每一個第四中間樣本和第二培養液(例如含有1%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸鹽緩衝液)混合，以形成多個第二測試樣本(也可以稱為“流式細胞儀樣本”)。每個第二測試樣本都是小部分樣本(其係經過相對應的一種染色劑(此染色劑含有一種或多種抗體)染色)和第二培養液的混合物。每個第二測試樣本的體積可以是介於250微升至1,250微升之間，例如500微升。用來和每個第四中間樣本混合的第二培養液的體積可以是介於200微升至1,000微升之間(例如400微升)，而且大於對應的小部分樣本的體積。
接著，在步驟19中，利用流式細胞儀分析這些樣本容器中的第二測試樣本，進而獲得多組資料。每一組資料(其係從對應的第二測試樣本中獲得)包含有：尺寸大於或等於1微米之細胞的數量(以下稱“細胞數C1”)、細胞核/細胞質之比為較高的區域中的細胞數量(以下稱“細胞數C2”)以及一種特定的(或選定的)幹細胞在細胞核/細胞質之比為較高的區域中的數量占細胞數C2的百分比(以下稱“幹細胞百分比SP”)。上述的一種特定的(或選定的)幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種幹細胞，或是以本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種細胞(表面)標記(例如CD349(+)、Lgr5(+)或CD66e(+))描述其特徵的幹細胞。在細胞核/細胞質之比為較高的區域中的細胞，其尺寸(關於尺寸的描述可參閱上述尺寸(Z)的定義)可以是大於或等於1微米、1.1微米、1.5微米、2微米、2.1微米或3微米，或是介於1微米至15微米之間(例如介於2微米至6微米之間)。另外，在細胞核/細胞質之比為較高的區域中的細胞，其係具有細胞核以及/或是細胞質，而且含有各種在“幹細胞定義”裡所提及的幹細胞(例如上述的一種特定的(或選定的)幹細胞)，但卻幾乎不含有微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板和白血球(包含淋巴球)。在步驟13、步驟14和步驟19裡所提及之尺寸大於或等於1微米(其為一門檻尺寸(threshold size))的細胞大致上具有相同的性質或特性。步驟19所提及之尺寸大於或等於1微米的細胞可以包括微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板、白血球(其係包含淋巴球)以及在細胞核/細胞質之比為較高的區域中的細胞，其中微顆粒可以沒有細胞核或細胞質。
在上述的每一組資料中，細胞數C1包括：(1)細胞數C2；(2)粒細胞的數量；(3)血小板的數量；(4)紅血球的數量；(5)白血球的數量；以及(6)微顆粒的數量。第16圖是用在上述流式細胞儀的前向散射係數/側向散射係數圖。請參閱第16圖所示，橫軸代表前向散射係數，縱軸代表側向散射係數。在使用流式細胞儀分析每一個第二測試樣本之前，第16圖的前向散射係數/側向散射係數圖可以事先設定在流式細胞儀分析中。第16圖的前向散射係數/側向散射係數圖包含有：(1)血小板的區域P1；(2)微顆粒的區域P2；(3)紅血球與白血球的區域P3；(4)細胞核/細胞質之比為較高的區域，如區域P4所示；以及(5)粒細胞的區域(圖中未示)。在用流式細胞儀分析每一個第二測試樣本之前，可以使用微粒(microbeads)或聚合物顆粒，將流式細胞儀的前向散射係數設定在1微米尺寸所對應的(近似)數值。這個(近似)數值可以用來定義出(或建立出)細胞尺寸大於或等於1微米的特定區域(threshold region)，並透過這個特定區域確定或測定尺寸大於或等於1微米的細胞，因而獲得這個特定區域中的細胞數C1。上述的區域P1至P4和上述的粒細胞的區域都是位在這個特定區域中。在步驟19中，流式細胞儀會不斷地分析每個第二測試樣本，直到(1)對應的細胞數C1達到一個特定數目(其係可以是大於或等於五十萬、八十萬或一百萬)或是(2)對應的細胞數C2達到一個特定數目(其係可以是大於或等於1000、1500、2000、2500、3000或3500)為止。因此，在完成每個第二測試樣本的分析之後，可以獲得與該些第二測試樣本有關的上述多組資料(一個第二測試樣本可以獲得一組資料)。
請參閱第14C圖所示，在進行完(或完成)步驟14和步驟19之後，接著進行第14C圖的步驟20，以獲得幹細胞資料。在步驟20中，根據≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量(其係可以從步驟14獲得)以及上述含有細胞數C1、細胞數C2與幹細胞百分比SP的多組資料(其係可以從步驟19獲得)，可以計算出(或獲得)該幹細胞資料。該幹細胞資料可以包括每一種特定的幹細胞(其係可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的幹細胞)在血液樣本中每毫升的數量(也可以稱為上述每一種特定的幹細胞在血液樣本中每單位體積的數量)。透過以下的計算，可獲得上述每一種特定的幹細胞在血液樣本中每毫升的數量：(1)將細胞核/細胞質之比為較高的區域P4中獲得的細胞數C2除以上述細胞尺寸大於或等於1微米的特定區域中獲得的細胞數C1，然後將相除的結果乘以100%(其係為了將相除的結果轉換成百分比數字)，因而獲得細胞數C2占細胞數C1的百分比(其係是一種與細胞數C1和細胞數C2之間的關係有關的資料)；(2)將細胞數C2占細胞數C1的百分比乘以與一種選定之幹細胞有關的幹細胞百分比SP，然後將相乘的結果乘以100%(其係為了將相乘的結果轉換成百分比數字)，因而獲得該種選定之幹細胞的數量占細胞數C1的百分比(其係是一種與處理過樣本有關以及與該種選定之幹細胞和細胞數C1之間的關係有關的資料)；(3)將該種選定之幹細胞占細胞數C1的百分比乘以≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量(其係從步驟14中獲得)，因而獲得該種選定之幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量(也就是該種選定之幹細胞在處理過樣本中每單位體積的數量)，其係是一種與該種選定之幹細胞和處理過樣本之間的關係有關的資料；(4)將處理過樣本的體積(單位為毫升)除以血液樣本的體積(單位為毫升)，因而獲得一個體積改變係數(或稱樣本準備係數)，其係可以是處理過樣本的體積與血液樣本的體積的比率；以及(5)將該種選定之幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以體積改變係數，因而獲得該種選定之幹細胞在血液樣本中每毫升的數量(也就是該種選定之幹細胞在血液樣本中每單位體積的數量)，其係是一種與該種選定之幹細胞和血液過樣本之間的關係有關的資料，而且可以用來代表該種選定之幹細胞在一個體(如第13圖所述之實驗對象)的周邊血液中每毫升的數量。該種選定之幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種幹細胞，或是以本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種細胞(表面)標記(其可包括CD349(+)、Lgr5(+)或CD66e(+))描述其特徵的幹細胞。為了能更準確地獲得上述的幹細胞資料，與該種選定之幹細胞有關的細胞數C2可以是大於或等於1,000顆細胞、1,500顆細胞、2,000顆細胞或2,500顆細胞。
更詳細地說，第14B圖所提及的細胞數量可以透過計算尺寸大於或等於一給定門檻尺寸(在≥1微米細胞的數量或4個≥1微米細胞的原始數量的範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞的數量來獲得，第14C圖所提及的細胞數C1可以透過計算(或計數)尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞的數量來獲得。該給定門檻尺寸除了可以是本範例所述的1微米之外，也可以是0.5微米、0.8微米、1.5微米、2微米或3微米。在細胞數C1是透過計算尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞的數量而獲得的情形下，用於分析每個第二測試樣本的流式細胞儀可以透過尺寸為該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)的微粒或聚合物顆粒來設定前向散射係數/側向散射係數圖中前向散射係數的(近似)數值，以定義出(或建立出)細胞尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的特定區域(threshold region)，並透過這個特定區域確定或測定尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)的細胞。
根據第13圖、第14A圖、第14B圖和第14C圖所述的方法，本發明可以使用一個整合系統、裝置、儀器或工具(AD)來獲得步驟20所提及的幹細胞資料(其係與第13圖所述之實驗對象的血液樣本有關)。這個整合系統、裝置、儀器或工具(AD)可包括：(1)一個第一裝置、儀器或工具，其可從實驗對象(或個體)獲得或取得血液樣本，如第13圖的步驟103所述；(2)一個第二裝置、儀器或工具(其係可以包括一離心機)，其可處理血液樣本，以獲得或製備出處理過樣本(其係為一測試樣本)，如第14A圖的步驟1至步驟8所述；(3)一個第三裝置、儀器或工具(其係可以包括一血球計數器、一顯微鏡和由一軟體編譯的一處理器/電腦)，其可透過一第一方法從處理過樣本的第一部分獲得一第一資料(例如第14B圖步驟14所獲得的≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量)，該第一方法可以包括使用血球計數器(和顯微鏡)計算處理過樣本的第一部分的顆粒或細胞的數量，如第14B圖的步驟9至步驟14所述；(4)一個第四裝置、儀器或工具(其係可以包括一流式細胞儀和一處理器/電腦)，其可透過一第二方法從處理過樣本的第二部分獲得一第二資料(例如與一種選定的幹細胞有關的幹細胞百分比SP)和一第三資料(例如與該種選定的幹細胞有關的細胞數C2占與該種選定的幹細胞有關的細胞數C1的百分比)，該第二方法可以包括使用流式細胞儀計算處理過樣本的第二部分的顆粒或細胞的數量，如第14C圖的步驟15至步驟20所述；以及(5)一個第五裝置、儀器或工具(例如一電腦或一處理器)，其可：(a)對第二資料和第三資料進行一第一運算或計算(例如將第二資料乘以第三資料(譬如將幹細胞百分比SP乘以細胞數C2占細胞數C1的百分比)，然後將相乘的結果乘以100%)，以獲得與處理過樣本有關的一第四資料(例如該種選定的幹細胞之數量占細胞數C1的百分比)；(b)對第一資料和第四資料進行一第二運算或計算(例如將第一資料乘以第四資料(譬如將≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以該種選定的幹細胞之數量占細胞數C1的百分比))，以獲得與處理過樣本有關的一第五資料(例如該種選定的幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量)；(c)對處理過樣本的體積和血液樣本的體積進行一第三運算或計算(例如將處理過樣本的體積除以血液樣本的體積)，以獲得上述的體積改變(或樣本準備)係數(例如處理過樣本的體積與血液樣本的體積的比率)；以及(d)對第五資料和體積改變(或樣本準備)係數進行一第四運算或計算(例如將第五資料乘以體積改變(或樣本準備)係數(譬如將該種選定的幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以處理過樣本的體積與血液樣本的體積的比率))，以獲得與血液樣本有關的一第六資料(例如該種選定的幹細胞在血液樣本中每毫升的數量)。
另外，亦可將上述的第一、第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具中的任兩個或以上的裝置、儀器或工具合併組成一個可以進行上述任兩個或以上的裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。例如，第一和第二裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第一和第二裝置、儀器或工具之功能的第一整合裝置、儀器或工具或是第一單一裝置、儀器或工具，以及第三、第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第三、第四和第五裝置、儀器或工具之功能的第二整合裝置、儀器或工具或是第二單一裝置、儀器或工具。或者，第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，第二、第三和第四裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第二、第三和第四裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，第三和第四裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第三和第四裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行第四和第五裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。
在本發明中，第三裝置、儀器或工具可以用來獲得尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞在處理過樣本中每單位體積的數量，第四和第五裝置、儀器或工具可以用來獲得該種選定的幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞中的百分比(其係與處理過樣本有關)。將上述獲得之細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以上述獲得之該種選定的幹細胞的百分比，可以獲得該種選定的幹細胞在處理過樣本中每單位體積的數量。將該種選定的幹細胞在處理過樣本中每單位體積的數量乘以上述的體積改變(或樣本準備)係數，可以獲得該種選定的幹細胞在血液樣本中每單位體積的數量。透過將第三裝置、儀器或工具所獲得的細胞數量資料結合第四和第五裝置、儀器或工具所獲得的該種選定的幹細胞的百分比的方式，可以更準確地獲得該種選定的幹細胞在周邊血液中的數量。
根據第13圖、第14A圖、第14B圖和第14C圖所述的方法，本發明可以使用一個單一系統、裝置、儀器或工具(TD)來獲得步驟20所提及的幹細胞資料(其係與第13圖所述之實驗對象的血液樣本有關)。這個單一系統、裝置、儀器或工具(TD)可以提供或執行：(1)一第一功能，其可從實驗對象(或個體)獲得或取得血液樣本，如第13圖的步驟103所述；(2)一第二功能，其可處理血液樣本，以獲得或製備出處理過樣本(其係為一測試樣本)，如第14A圖的步驟1至步驟8所述；(3)一第三功能，其可透過一第一方法(其係可以是第14B圖的步驟9至步驟14所描述的方法)從處理過樣本的第一部分獲得一第一資料(例如第14B圖步驟14所獲得的≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量)；(4)一第四功能，其可透過一第二方法(其係可以是第14C圖的步驟15至步驟20所描述的方法)從處理過樣本的第二部分獲得一第二資料(例如與一種選定的幹細胞有關的幹細胞百分比SP)和一第三資料(例如與該種選定的幹細胞有關的細胞數C2占與該種選定的幹細胞有關的細胞數C1的百分比)；(5)一第五功能，其可對第二資料和第三資料進行一第一運算或計算(例如將第二資料乘以第三資料(譬如將幹細胞百分比SP乘以細胞數C2占細胞數C1的百分比)，然後將相乘的結果乘以100%)，以獲得與處理過樣本有關的一第四資料(例如該種選定的幹細胞之數量占細胞數C1的百分比)；(6)一第六功能，其可對第一資料和第四資料進行一第二運算或計算(例如將第一資料乘以第四資料(譬如將≥1微米細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以該種選定的幹細胞之數量占細胞數C1的百分比))，以獲得與處理過樣本有關的一第五資料(例如該種選定的幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量)；(7)一第七功能，其可對處理過樣本的體積和血液樣本的體積進行一第三運算或計算(例如將處理過樣本的體積除以血液樣本的體積)，以獲得上述的體積改變(或樣本準備)係數(例如處理過樣本的體積與血液樣本的體積的比率)；以及(8)一第八功能，其可對第五資料和體積改變(或樣本準備)係數進行一第四運算或計算(例如將第五資料乘以體積改變(或樣本準備)係數(譬如將該種選定的幹細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以處理過樣本的體積與血液樣本的體積的比率))，以獲得與血液樣本有關的一第六資料(例如該種選定的幹細胞在血液樣本中每毫升的數量)。
由單一系統、裝置、儀器或工具(TD)所提供的第三功能可以用來獲得尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞在處理過樣本中每單位體積的數量。由單一系統、裝置、儀器或工具(TD)所提供的第四和第五功能可以用來獲得該種選定的幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸(在本範例中，該給定門檻尺寸等於1微米)之細胞中的百分比(其係與處理過樣本有關)。將上述獲得之細胞在處理過樣本中每毫升的數量乘以上述獲得之該種選定的幹細胞的百分比，可以獲得該種選定的幹細胞在處理過樣本中每單位體積的數量。將該種選定的幹細胞在處理過樣本中每單位體積的數量乘以上述的體積改變(或樣本準備)係數，可以獲得該種選定的幹細胞在血液樣本中每單位體積的數量。透過將單一系統、裝置、儀器或工具(TD)之第三功能所獲得的細胞數量資料結合單一系統、裝置、儀器或工具(TD)之第四與第五功能所獲得的該種選定的幹細胞的百分比的方式，可以更準確地獲得該種選定的幹細胞在周邊血液中的數量。
在某些應用上，本發明也可以透過一單一系統、裝置、儀器或工具來提供或執行上述的第一至第八功能中任兩個(或以上)的功能可由。例如，這個單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行上述的第三和第四功能、上述的第二、第三和第四功能、上述的第三、第四、第五、第六和第八功能或是上述的第三至第八功能。
第17A圖顯示一位五十五歲左右的男性(其係作為一實驗對象)在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的幹細胞資料。本發明透過對此位男性進行第13圖所述的方法獲得第17A圖所示的幹細胞資料。在這個範例中，此位男性在步驟101中是口服30顆褐藻糖膠補充品，而此褐藻糖膠補充品可以與第11圖和第12圖所提及的褐藻糖膠補充品相同。因此，此位男性在步驟101中係服用3克(也就是大於2克)的褐藻糖膠。在步驟102中，讓此位男性在服用30顆褐藻糖膠補充品之後等待1.5小時。在步驟103中，取出此位男性的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管中，因而獲得一個10毫升血液樣本。接著，透過第14A圖的步驟1至步驟8，將10毫升血液樣本處理成一個3毫升處理過樣本。3毫升處理過樣本會被分成兩部分，一部分(以下稱“第一部分”)用在第14B圖的步驟9至步驟14中，另一部分(以下稱“第二部分”)用在第14C圖的步驟15至步驟19中。在對3毫升處理過樣本的第一部分進行第14B圖的步驟9至步驟14之後，可以獲得≥1微米細胞在3毫升處理過樣本中每毫升的數量，如第17A圖中的第(A)欄所示。在對3毫升處理過樣本的第二部分進行第14C圖的步驟15至步驟19之後，可以獲得與每一種幹細胞(如第17A圖所示，共有5種幹細胞)有關的細胞數C1、細胞數C2和幹細胞百分比SP，其係分別顯示在第17A圖中的第(B)欄、第(C)欄和第(E)欄。透過對3毫升處理過樣本的第二部分進行步驟15至步驟18，可以獲得多個第二測試樣本(或稱“流式細胞儀樣本”)。在本範例中，步驟19中的流式細胞儀會不斷分析每一個第二測試樣本，直到對應的細胞數C1達到一百萬或是對應的細胞數C2達到2500為止。在完成每個第二測試樣本的分析之後，可以獲得與該些第二測試樣本(其係透過對3毫升處理過樣本的第二部分進行步驟15至步驟18而獲得)有關的多組資料(一個第二測試樣本可以獲得一組資料)。
在從步驟14獲得≥1微米細胞在3毫升處理過樣本中每毫升的數量以及從步驟19獲得與上述每一種幹細胞有關的細胞數C1、細胞數C2和幹細胞百分比SP之後，接著在步驟20中獲得有關此位男性在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的幹細胞資料。該幹細胞資料包括每一種幹細胞(如第17A圖所示，共有5種幹細胞)在此位男性食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量。以下將以CD24(+)先驅幹細胞為範例進行說明，請參閱第17A圖所示，CD24(+)先驅幹細胞在此位男性食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量可以透過下列的計算獲得：(1)將第(1)列第(C)欄所示的2,500(其係為細胞核/細胞質之比為較高的區域P4中的細胞數C2)除以第(1)列第(B)欄所示的995,918(其係為細胞尺寸大於或等於1微米的特定區域中的細胞數C1)，然後將相除的結果(也就是0.0025)乘以100%(其係為了將相除的結果轉換成百分比數字)，因而獲得第(1)列第(D)欄所示的0.25%(其係為細胞數C2占細胞數C1的百分比)；(2)將第(1)列第(D)欄所示的0.25%乘以第(1)列第(E)欄所示的46%(其係為CD24(+)先驅幹細胞的數量占細胞數C2的百分比)，然後將相乘的結果(也就是0.00115)乘以100%(其係為了將相乘的結果轉換成百分比數字)，因而獲得第(1)列第(F)欄所示的0.1150%(其係為CD24(+)先驅幹細胞的數量占細胞數C1的百分比)；(3)將第(1)列第(F)欄所示的0.1150%乘以第(1)列第(A)欄所示的1.77E+08(其係為≥1微米細胞在3毫升處理過樣本中每毫升的數量)，因而獲得第(1)列第(G)欄所示的203,550(其係為CD24(+)先驅幹細胞在3毫升處理過樣本中每毫升的數量)；(4)將3毫升(其係為處理過樣本的體積)除以10毫升(其係為血液樣本的體積)，因而獲得0.3這個數值(其係為上述的體積改變(或樣本準備)係數)；以及(5)將第(1)列第(G)欄所示的203,550(其係為CD24(+)先驅幹細胞在3毫升處理過樣本中每毫升的數量)乘以0.3(其係為上述的體積改變(或樣本準備)係數)，因而獲得第(1)列第(H)欄所示的61,065(其係為CD24(+)先驅幹細胞在10毫升血液樣本中每毫升的數量)，其可代表CD24(+)先驅幹細胞在此位男性食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量。另外，用上述的計算方式，也可以從相關的數值計算出其它種幹細胞在此位男性食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量，在此不再詳加敘述。
第17B圖為流式細胞儀的一螢光分布圖，其係顯示出在細胞核/細胞質之比為較高的區域中細胞的螢光光強度分布。在螢光分布圖中的細胞被一條垂直線77分成左右兩部分。在垂直線77右邊的細胞會對CD24表現出陽性反應，所以屬於CD24(+)先驅幹細胞。在垂直線77左邊的細胞則對CD24表現出陰性反應。因此，流式細胞儀可以透過垂直線77識別CD24(+)先驅幹細胞，進而獲得第17A圖中第(1)列第(E)欄所提及的CD24(+)先驅幹細胞的數量。
第18圖描述一種獲得一實驗對象(例如前面所述的個體(S))在四個特定時間點之幹細胞資料的方法，藉以確認實驗對象在進行或接受一種或多種的行為或刺激(X)(其可包括一系列選自行為或刺激(X)的行為)之後的一理想(或最佳)幹細胞收穫時間，所收獲的一種或多種幹細胞係從實驗對象或是與實驗對象相同生物分類之一個體的一組織樣本(其係可以是本發明在“個體(S)以及組織樣本(P)”的描述裡所提及的組織樣本)獲得。請參閱第18圖所示，在步驟21中，將實驗對象在一第一特定時間點的周邊血液取出，並放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第一血液樣本。第一血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升。接著，在步驟22中，對第一血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得實驗對象在第一特定時間點的一第一幹細胞資料。此第一幹細胞資料可包括一種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第一獲取資料。該種特定幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種幹細胞，或是以本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種細胞(表面)標記(例如CD349(+)、Lgr5(+)或CD66e(+))描述其特徵的幹細胞。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第一血液樣本。在對第一血液樣本進行步驟22中的測量方法MT之前，第一血液樣本可以存放在溫度介於1°C至30°C之間(例如介於1°C至10°C之間、介於10°C至20°C之間或是介於20°C至30°C之間)的環境中。從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以是等於或小於30分鐘、60分鐘、12小時、24小時、48小時、72小時或是1星期，例如是介於10分鐘到30分鐘之間、介於30分鐘到60分鐘之間、介於0.5小時到2小時之間、介於2小時到12小時之間、介於12小時到24小時之間、介於24小時到48小時之間或是介於48小時到72小時之間。此外，本實施例也可以透過上述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或上述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得第一幹細胞資料。
在獲得步驟21所述的第一血液樣本之後，接著進行步驟23。在步驟23中，實驗對象進行或接受一種或多種的行為或刺激(X)，其可包括一系列選自行為或刺激(X)的行為。例如，實驗對象可以口服30顆褐藻糖膠補充品(其係可以是前面第一實驗和第11圖所述的褐藻糖膠補充品)，所以實驗對象在步驟23中服用了3克(也就是超過2克)的褐藻糖膠。或者，實驗對象也可以注射一種含有褐藻糖膠或小分子褐藻糖膠的物質或物品(如營養品或補充品)。步驟21所述的第一特定時間點可以在步驟23之前的一時間點。在實驗對象進行或接受一種或多種的行為或刺激(X)之後，將進行含有下列步驟24至步驟26的一第一方法、含有下列步驟27至步驟29的一第二方法以及含有下列步驟30至步驟32的一第三方法。
關於第一方法，在步驟24中，在實驗對象進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後，讓實驗對象等待一第一段時間(也就是一段第一預定時間)，例如1.5小時、30分鐘至3小時、1小時至2小時或是45分鐘至12小時。接著，在步驟25中，取出實驗對象在一第二特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第二血液樣本。第二血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第一血液樣本的體積相同。第二特定時間點為第一段時間結束的時間點。接著，在步驟26中，對第二血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得實驗對象在第二特定時間點的一第二幹細胞資料。此第二幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第二特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第二獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第二血液樣本。在對第二血液樣本進行步驟26中的測量方法MT之前，第二血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟25獲得第二血液樣本到步驟26對第二血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。此外，本實施例也可以透過上述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或上述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得第二幹細胞資料。
關於第二方法，在步驟27中，在實驗對象進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後，讓實驗對象等待一第二段時間(也就是一段第二預定時間)，例如24小時、12小時至36小時或是3小時至36小時。接著，在步驟28中，取出實驗對象在一第三特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第三血液樣本。第三血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第一血液樣本的體積和第二血液樣本的體積相同。第三特定時間點為第二段時間結束的時間點。接著，在步驟29中，對第三血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得實驗對象在第三特定時間點的一第三幹細胞資料。此第三幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第三特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第三獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第三血液樣本。在對第三血液樣本進行步驟29中的測量方法MT之前，第三血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟28獲得第三血液樣本到步驟29對第三血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。此外，本實施例也可以透過上述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或上述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得第三幹細胞資料。
關於第三方法，在步驟30中，在實驗對象進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後，讓實驗對象等待一第三段時間(也就是一段第三預定時間)，例如48小時、36小時至60小時、60小時至84小時或是超過84小時。接著，在步驟31中，取出實驗對象在一第四特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第四血液樣本。第四血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第一血液樣本的體積、第二血液樣本的體積和第三血液樣本的體積相同。第四特定時間點為第三段時間結束的時間點。接著，在步驟32中，對第四血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得實驗對象在第四特定時間點的一第四幹細胞資料。此第四幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第四特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在實驗對象的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第四獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第四血液樣本。在對第四血液樣本進行步驟32中的測量方法MT之前，第四血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟31獲得第四血液樣本到步驟32對第四血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。此外，本實施例也可以透過上述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或上述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD)來獲得第四幹細胞資料。
利用步驟22、26、29和32所獲得的第一至第四幹細胞資料可得到與每單位體積的該種特定幹細胞之數量有關的變化量，其係包括：(1)第二幹細胞資料中該種特定幹細胞在第二特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ1；(2)第三幹細胞資料中該種特定幹細胞在第三特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ2；以及(3)第四幹細胞資料中該種特定幹細胞在第四特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ3。也就是說，對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟26所獲得的第二獲取資料進行一第一分析運算可以獲得變化量Δ1，此第一分析運算包括對第一獲取資料和第二獲取資料進行比較；對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟29所獲得的第三獲取資料進行一第二分析運算可以獲得變化量Δ2，此第二分析運算包括對第一獲取資料和第三獲取資料進行比較；對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟32所獲得的第四獲取資料進行一第三分析運算可以獲得變化量Δ3，此第三分析運算包括對第一獲取資料和第四獲取資料進行比較。
對變化量Δ1、Δ2和Δ3中的每兩個變化量進行比較(例如對變化量Δ1和變化量Δ2進行比較)，可以獲知或找出與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量，進而確定、找出或得到適合用在實驗對象之該種特定幹細胞的最佳收穫時間(例如第一段時間、第二段時間或第三段時間)以及/或是最佳收穫時間點(例如第二至第四特定時間點的其中一個)。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ1的時候，最佳收穫時間為第一段時間，最佳收穫時間點為第二特定時間點。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ2的時候，最佳收穫時間為第二段時間，最佳收穫時間點為第三特定時間點。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ3的時候，最佳收穫時間為第三段時間，最佳收穫時間點為第四特定時間點。因此，欲從某一個體(其係可以是實驗對象或是與實驗對象相同生物分類的一個體)取得該種特定幹細胞的時候，可以在該個體進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)後的最佳收穫時間點從該個體取得一組織樣本(其係可以是本發明在“個體(S)以及組織樣本(P)”的描述裡所提及的組織樣本)，然後再從取得的組織樣本中取得該種特定幹細胞。另外，在實驗對象進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)(藉以在體內培養或培育該種特定幹細胞)之後，第18圖所述的方法(其係包括步驟21至步驟32)可以用來監測該種特定幹細胞在實驗對象的周邊血液中的增加數量。
此外，本發明也可以分別對複數個相同生物分類的實驗對象進行第18圖所述的方法，進而獲得與每一個實驗對象有關的第一至第四幹細胞資料(詳細說明可參閱第18圖所述的第一至第四幹細胞資料)。利用從這些實驗對象獲得的第一至第四幹細胞資料可得到與每單位體積的該種特定幹細胞之數量有關的變化量，其係包括：(1)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第二特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第二幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第一幹細胞資料)的變化量Δ1；(2)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第三特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第三幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第一幹細胞資料)的變化量Δ2；以及(3)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第四特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第四幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第一幹細胞資料)的變化量Δ3。
對從這些實驗對象獲得且與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3的分布中的每兩個變化量分布進行比較(例如對與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布和與SB-1細胞有關的變化量Δ2的分布進行比較)，可以得知或找出與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布，進而確定、找出或得到適合用在這些實驗對象之該種特定幹細胞的最佳收穫時間(例如第一段時間、第二段時間或第三段時間)以及/或是最佳收穫時間點(例如第二至第四特定時間點的其中一個)。
當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1的分布的時候，最佳收穫時間為第一段時間，最佳收穫時間點為第二特定時間點。當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ2的分布的時候，最佳收穫時間為第二段時間，最佳收穫時間點為第三特定時間點。當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ3的分布的時候，最佳收穫時間為第三段時間，最佳收穫時間點為第四特定時間點。因此，欲從某一個體(其係可以是與這些實驗對象相同生物分類的一個體或是這些實驗對象的其中一個)取得該種特定幹細胞的時候，可以在該個體進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)後的最佳收穫時間點從該個體取得一組織樣本(其係可以是本發明在“個體(S)以及組織樣本(P)”的描述裡所提及的組織樣本)，然後再從取得的組織樣本中取得該種特定幹細胞。
第19圖描述一種獲得一對照者(例如前面所述的個體(S))在四個特定時間點之幹細胞資料的方法。利用此方法所獲得的幹細胞資料可以用來與第18圖所述之實驗對象所獲得的幹細胞資料(也就是利用第18圖所述的方法而獲得的幹細胞資料)進行比較，藉以確認與實驗對象在兩個不同時間點(其係為實驗對象在進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)之後的兩個不同時間點)有關的兩組幹細胞資料之間的變化是來自步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)。除了對照者沒有進行或者接受實驗對象在第18圖步驟23所進行或接受的一種或多種的行為或刺激(X)之外，第19圖所述之用於對照者的方法係與第18圖所述之用於實驗對象的方法相同。從第19圖所述之用於對照者的方法所獲得的幹細胞資料，可以作為評估第18圖所述之變化量(其係與“從第18圖所述之用於實驗對象的方法所獲得的幹細胞資料”有關)的標準。
請參閱第19圖所示，在步驟33中，將對照者(或稱對照組參與者)在一第五特定時間點的周邊血液取出，並放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第五血液樣本。第五血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第18圖步驟21所述之第一血液樣本的體積相同。第五特定時間點為開始進行第19圖所述之用於對照者的方法的時間點。接著，在步驟34中，對第五血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得對照者在第五特定時間點的一第五幹細胞資料。此第五幹細胞資料可包括一種特定幹細胞在第五特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第五獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第五血液樣本。敘述在第19圖的該種特定幹細胞可以與敘述在第18圖的該種特定幹細胞相同。在對第五血液樣本進行步驟34中的測量方法MT之前，第五血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟33獲得第五血液樣本到步驟34對第五血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。在取得步驟33所述的第五血液樣本之後，將會進行含有下列步驟35至步驟37的一第四方法、含有下列步驟38至步驟40的一第五方法以及含有下列步驟41至步驟43的一第六方法。
關於第四方法，在步驟35中，在取得步驟33所述的第五血液樣本之後，讓對照者等待一第四段時間(也就是一段第四預定時間)，例如1.5小時、30分鐘至3小時、1小時至2小時或是45分鐘至12小時。在時間長度上，第四段時間可以等於第18圖步驟24所述之第一段時間。接著，在步驟36中，取出對照者在一第六特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第六血液樣本。第六血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第五血液樣本的體積相同。第六特定時間點為第四段時間結束的時間點。接著，在步驟37中，對第六血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得對照者在第六特定時間點的一第六幹細胞資料。此第六幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第六特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第六獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第六血液樣本。在對第六血液樣本進行步驟37中的測量方法MT之前，第六血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟36獲得第六血液樣本到步驟37對第六血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。
關於第五方法，在步驟38中，在取得步驟33所述的第五血液樣本之後，讓對照者等待一第五段時間(也就是一段第五預定時間)，例如24小時、12小時至36小時或是3小時至36小時。在時間長度上，第五段時間可以等於第18圖步驟27所述之第二段時間。接著，在步驟39中，取出對照者在一第七特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第七血液樣本。第七血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第五血液樣本的體積和第六血液樣本的體積相同。第七特定時間點為第五段時間結束的時間點。接著，在步驟40中，對第七血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得對照者在第七特定時間點的一第七幹細胞資料。此第七幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第七特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第七獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第七血液樣本。在對第七血液樣本進行步驟40中的測量方法MT之前，第七血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟39獲得第七血液樣本到步驟40對第七血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。
關於第六方法，在步驟41中，在取得步驟33所述的第五血液樣本之後，讓對照者等待一第六段時間(也就是一段第六預定時間)，例如48小時、36小時至60小時、60小時至84小時或是超過84小時。在時間長度上，第六段時間可以等於第18圖步驟30所述之第三段時間。接著，在步驟42中，取出對照者在一第八特定時間點的周邊血液，並將取出的周邊血液放到一採血管(例如乙二胺四乙酸(EDTA)試管)中，以獲得一第八血液樣本。第八血液樣本的體積可以是大於或等於5毫升或10毫升，而且也可以與第五血液樣本的體積、第六血液樣本的體積和第七血液樣本的體積相同。第八特定時間點為第六段時間結束的時間點。接著，在步驟43中，對第八血液樣本進行前面所述的測量方法MT，進而獲得對照者在第八特定時間點的一第八幹細胞資料。此第八幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在第八特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量，也就是與該種特定幹細胞在對照者的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量有關的一第八獲取資料。第14A圖至第14C圖所述的方法可以用來處理和估算第八血液樣本。在對第八血液樣本進行步驟43中的測量方法MT之前，第八血液樣本可以存放在一受控制的環境中，此環境的溫度與用來存放進行步驟22之測量方法MT前的第一血液樣本的溫度相同。從步驟42獲得第八血液樣本到步驟43對第八血液樣本進行測量方法MT的時間間隔可以等於從步驟21獲得第一血液樣本到步驟22對第一血液樣本進行測量方法MT的時間間隔。
利用步驟22、26、29和32所獲得的第一至第四幹細胞資料以及步驟34、37、40和43所獲得的第五至第八幹細胞資料可得到與該種特定幹細胞的數量有關的變化量，其係包括：(1)第二幹細胞資料中該種特定幹細胞在第二特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ1；(2)第三幹細胞資料中該種特定幹細胞在第三特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ2；(3)第四幹細胞資料中該種特定幹細胞在第四特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量相對於第一幹細胞資料中該種特定幹細胞在第一特定時間點之實驗對象的周邊血液中每單位體積的數量的變化量Δ3；(4)第六幹細胞資料中該種特定幹細胞在第六特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量相對於第五幹細胞資料中該種特定幹細胞在第五特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量的變化量δ1；(5)第七幹細胞資料中該種特定幹細胞在第七特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量相對於第五幹細胞資料中該種特定幹細胞在第五特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量的變化量δ2；以及(6) 第八幹細胞資料中該種特定幹細胞在第八特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量相對於第五幹細胞資料中該種特定幹細胞在第五特定時間點之對照者的周邊血液中每單位體積的數量的變化量δ3。
對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟26所獲得的第二獲取資料進行一第一分析運算可以獲得變化量Δ1，此第一分析運算包括對第一獲取資料和第二獲取資料進行比較。對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟29所獲得的第三獲取資料進行一第二分析運算可以獲得變化量Δ2，此第二分析運算包括對第一獲取資料和第三獲取資料進行比較。對步驟22所獲得的第一獲取資料和步驟32所獲得的第四獲取資料進行一第三分析運算可以獲得變化量Δ3，此第三分析運算包括對第一獲取資料和第四獲取資料進行比較。對步驟34所獲得的第五獲取資料和步驟37所獲得的第六獲取資料進行一第四分析運算可以獲得變化量δ1，此第四分析運算包括對第五獲取資料和第六獲取資料進行比較。對步驟34所獲得的第五獲取資料和步驟40所獲得的第七獲取資料進行一第五分析運算可以獲得變化量δ2，此第五分析運算包括對第五獲取資料和第七獲取資料進行比較。對步驟34所獲得的第五獲取資料和步驟43所獲得的第八獲取資料進行一第六分析運算可以獲得變化量δ3，此第六分析運算包括對第五獲取資料和第八獲取資料進行比較。
對變化量Δ1、Δ2和Δ3中的每兩個變化量進行比較，可以獲知或找出與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量，然後將變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量和變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量進行比較，以判斷變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是否由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起。如果變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量(在統計上)明顯優於變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量，則可以確認(或確定)變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起的。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ1的時候，變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量為變化量δ1。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ2的時候，變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量為變化量δ2。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ3的時候，變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量為變化量δ3。因此，透過上述的方法，可以獲得適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ1，而且變化量Δ1(在統計上)明顯優於變化量δ1的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間為步驟24所述的第一段時間。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ2，而且變化量Δ2(在統計上)明顯優於變化量δ2的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間為步驟27所述的第二段時間。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ3，而且變化量Δ3(在統計上)明顯優於變化量δ3的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間為步驟30所述的第三段時間。另外，透過上述的方法，也可以獲得適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間點。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ1，而且變化量Δ1(在統計上)明顯優於變化量δ1的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間點為步驟25所述的第二特定時間點。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ2，而且變化量Δ2(在統計上)明顯優於變化量δ2的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間點為步驟28所述的第三特定時間點。當變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是變化量Δ3，而且變化量Δ3(在統計上)明顯優於變化量δ3的時候，適合用在該種特定幹細胞的最佳收穫時間點為步驟31所述的第四特定時間點。如果變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量(在統計上)沒有明顯優於變化量δ1、δ2和δ3中對應的變化量，則無法確認(或確定)變化量Δ1、Δ2和Δ3中的最大變化量是由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起的。
因此，欲從某一個體(其係可以是實驗對象或是與實驗對象相同生物分類的一個體)取得該種特定幹細胞的時候，可以在該個體進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)後的最佳收穫時間點從該個體取得一組織樣本(其係可以是本發明在“個體(S)以及組織樣本(P)”的描述裡所提及的組織樣本)，然後再從取得的組織樣本中取得該種特定幹細胞。
此外，本發明也可以分別對複數個相同生物分類的對照者進行第19圖所述的方法，進而獲得與每一個對照者有關的第五至第八幹細胞資料(詳細說明可參閱第19圖所述的第五至第八幹細胞資料)，以及分別對複數個相同生物分類的實驗對象進行第18圖所述的方法，進而獲得與每一個實驗對象有關的第一至第四幹細胞資料(詳細說明可參閱第18圖所述的第一至第四幹細胞資料)。利用從這些實驗對象獲得的第一至第四幹細胞資料以及從這些對照者獲得的第五至第八幹細胞資料可得到與該種特定幹細胞的數量有關的變化量，其係包括：(1)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第二特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第二幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第一幹細胞資料)的變化量Δ1；(2)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第三特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第三幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係在第一幹細胞資料中)的變化量Δ2；(3)關於每一位實驗對象的該種特定幹細胞在第四特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第四幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第一特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第一幹細胞資料)的變化量Δ3；(4)關於每一位對照者的該種特定幹細胞在第六特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第六幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第五特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第五幹細胞資料)的變化量δ1；(5)關於每一位對照者的該種特定幹細胞在第七特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第七幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第五特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係在第五幹細胞資料中)的變化量δ2；以及(6)關於每一位對照者的該種特定幹細胞在第八特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第八幹細胞資料)相對於該種特定幹細胞在第五特定時間點的周邊血液中每單位體積的數量(其係屬於第五幹細胞資料)的變化量δ3。
對從這些實驗對象獲得且與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3的分布中的每兩個變化量分布進行比較(例如對與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布和與SB-1細胞有關的變化量Δ2的分布進行比較)，可以得知或找出與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布。然後，將與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布和與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中對應的變化量分布進行比較(例如當與SB-1細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布的時候，將與SB-1細胞有關的變化量δ1的分布和與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布進行比較)，以判斷與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布(例如與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布)是否由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起。如果與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布(例如與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布)在統計上明顯優於與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中對應的變化量分布(例如與SB-1細胞有關的變化量δ1的分布)，則可以確認(或確定)與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布(例如與SB-1細胞有關的變化量Δ1的分布)是由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起的。在與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3的分布中，如果變化量Δ1的分布是最具統計意義的變化量分布，則在與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中，與其對應的變化量分布為與該種特定幹細胞有關的變化量δ1的分布。在與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3的分布中，如果變化量Δ2的分布是最具統計意義的變化量分布，則在與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中，與其對應的變化量分布為與該種特定幹細胞有關的變化量δ2的分布。在與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1、Δ2和Δ3的分布中，如果變化量Δ3的分布是最具統計意義的變化量分布，則在與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中，與其對應的變化量分布為與該種特定幹細胞有關的變化量δ3的分布。如果與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布在統計上沒有明顯優於與該種特定幹細胞有關的變化量δ1、δ2和δ3的分布中對應的變化量分布，則無法確認(或確定)與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是由步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)所引起的。因此，透過上述的方法，可以獲得適合用在這些實驗對象的該種特定幹細胞的最佳收穫時間和最佳收穫時間點。當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1的分布，而且與該種特定幹細胞有關的變化量Δ1的分布在統計上明顯優於與該種特定幹細胞有關的變化量δ1的分布的時候，適合用在這些實驗對象的該種特定幹細胞的最佳收穫時間和最佳收穫時間點分別是步驟24所述的第一段時間和步驟25所述的第二特定時間點。當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ2的分布，而且與該種特定幹細胞有關的變化量Δ2的分布在統計上明顯優於與該種特定幹細胞有關的變化量δ2的分布的時候，適合用在這些實驗對象的該種特定幹細胞的最佳收穫時間和最佳收穫時間點分別是步驟27所述的第二段時間和步驟28所述的第三特定時間點。當與該種特定幹細胞有關的變化量分布中最具統計意義的變化量分布是與該種特定幹細胞有關的變化量Δ3的分布，而且與該種特定幹細胞有關的變化量Δ3的分布在統計上明顯優於與該種特定幹細胞有關的變化量δ3的分布的時候，適合用在這些實驗對象的該種特定幹細胞的最佳收穫時間和最佳收穫時間點分別是步驟30所述的第三段時間和步驟31所述的第四特定時間點。因此，欲從某一個體(其係可以是與這些實驗對象相同生物分類的一個體或是這些實驗對象的其中一個)取得該種特定幹細胞的時候，可以在該個體進行或接受步驟23所述的一種或多種的行為或刺激(X)後的最佳收穫時間點從該個體取得一組織樣本(其係可以是本發明在“個體(S)以及組織樣本(P)”的描述裡所提及的組織樣本)，然後再從取得的組織樣本中取得該種特定幹細胞。
在接下來的內容中，將以一種獲得各個人體每毫升周邊血液之幹細胞數量的方法作為範例，敘述第二實驗並顯示相關的幹細胞資料。在第二實驗中，挑選五位人類受試者作為第二實驗中的實驗組，並讓這五位人類受試者進行第18圖所述的方法。另外，還挑選一位人類受試者(以下稱“受試者CP”)作為第二實驗中的對照組，並讓受試者CP進行第19圖所述的方法。實驗組中的這五位人類受試者是：(1)受試者E1：一位五十五歲左右的男性，其幹細胞資料顯示在第20A圖和第20B圖；(2)受試者E2：一位四十歲出頭的男性，其幹細胞資料顯示在第20C圖和第20D圖；(3)受試者E3：一位五十五歲左右的男性，其幹細胞資料顯示在第20E圖和第20F圖；(4)受試者E4：一位三十五歲左右的男性，其幹細胞資料顯示在第20G圖和第20H圖；以及(5)受試者E5：一位二十五歲左右的女性，其幹細胞資料顯示在第20I圖和第20J圖。受試者CP是一位二十五歲左右的女性，其幹細胞資料顯示在第20K圖和第20L圖。
受試者E1-E4中的每一位都會進行第18圖步驟21至步驟32所述的方法，藉以獲得每一位受試者在四個特定時間點的幹細胞資料。受試者E5則進行第18圖所述的步驟21至步驟29，因而獲得受試者E5在三個特定時間點的幹細胞資料。在每一位實驗對象(也就是受試者E1-E5)所進行的方法中，受試者E1-E5中的每一位都會在第18圖的步驟23中口服30顆褐藻糖膠補充品(可與第11圖和第12圖所述的褐藻糖膠補充品相同)。也就是說，受試者E1-E5中的每一位都會在第18圖的步驟23中服用3克(也就是超過2克)的褐藻糖膠。另外，這五位受試者E1-E5每一位的體重大約是65公斤。這意味著褐藻糖膠的劑量是每公斤體重約46毫克。或者，褐藻糖膠的劑量也可以是每公斤體重超過20毫克、30毫克、40毫克或是50毫克。
第20A圖和第20B圖顯示受試者E1在四個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。第20C圖和第20D圖顯示受試者E2在四個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。第20E圖和第20F圖顯示受試者E3在四個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。第20G圖和第20H圖顯示受試者E4在四個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。上述用在這四位受試者E1-E4的四個特定時間點分別是：(1)一第一時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品前的一個時間點，也就是第18圖步驟21所述的第一特定時間點；(2)一第二時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第1.5小時，也就是第18圖步驟24所述的第一段時間結束的時間點；(3)一第三時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第24小時，也就是第18圖步驟27所述的第二段時間結束的時間點；以及(4)一第四時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第48小時，也就是第18圖步驟30所述的第三段時間結束的時間點。
第20I圖和第20J圖顯示受試者E5在三個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。用在受試者E5的三個特定時間點分別是：(1)一第一時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品前的一個時間點，也就是第18圖步驟21所述的第一特定時間點；(2)一第二時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第1.5小時，也就是第18圖步驟24所述的第一段時間結束的時間點；以及(3)一第三時間點，其係為食用或攝取褐藻糖膠補充品之後的第24小時，也就是第18圖步驟27所述的第二段時間結束的時間點。
另外，受試者CP是進行第19圖步驟33至步驟43所述的方法來獲得受試者CP在四個特定時間點的幹細胞資料。過程中，受試者CP沒有服用任何的褐藻糖膠補充品。第20K圖和第20L圖顯示受試者CP在四個特定時間點之每一種幹細胞(共有23種幹細胞)在周邊血液中每毫升的數量。用在受試者CP的四個特定時間點分別是：(1)一第五時間點，其係為從受試者CP取得一個血液樣本的時間點(也就是第19圖步驟33所述的第五特定時間點)；(2)一第六時間點，其係為第五時間點之後的第1.5小時(也就是第19圖步驟35所述的第四段時間結束的第六特定時間點)；(3)一第七時間點，其係為第五時間點之後的第24小時(也就是第19圖步驟38所述的第五段時間結束的第七特定時間點)；以及(4)一第八時間點，其係為第五時間點之後的第48小時(也就是第19圖步驟41所述的第六段時間結束的第八特定時間點)。
根據第20A圖至第20L圖的幹細胞資料顯示，對某些特定種類的幹細胞(如下面所列舉的幹細胞)而言，最佳的收穫時間點是在體內培育幹細胞之後的第1.5小時或是在食用(或攝取)褐藻糖膠補充品之後的第1.5小時。在受試者E1-E5食用(或攝取)褐藻糖膠補充品之後的第1.5小時取得的周邊血液中，每毫升的數量有2倍以上增加的幹細胞列舉如下：SB-1細胞、SB-2細胞、類卵裂球幹細胞、SSEA4(+)多功能幹細胞、CD13(+)多潛能幹細胞、CD90(+)多潛能幹細胞、CD105(+)多潛能幹細胞、CD34(+)造血幹細胞、CD150(+)造血幹細胞、CD24(+)先驅幹細胞、SSEA1(+)先驅幹細胞、CD45(+)先驅幹細胞、CD33(+)先驅幹細胞、CD10(+)先驅幹細胞以及CXCR1(+)幹細胞。
另外，根據第20A圖至第20L圖的幹細胞資料顯示，服用褐藻糖膠補充品(如第一實驗和第11圖所述的褐藻糖膠補充品)可以導致、引起或造成某些種類的幹細胞在人或動物食用(或攝取)褐藻糖膠補充品之後第24小時的周邊血液中每毫升的數量至少有兩倍的增加。此處所述的“兩倍增加”是指「某種幹細胞在一個體(如人體或動物體)食用或攝取褐藻糖膠補充品前的周邊血液中每毫升的數量」和「該種幹細胞在該個體食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量」的比例。除此之外，第20A圖至第20L圖的幹細胞資料也顯示，某些種類的幹細胞在受試者E1、E2、E3、E4或E5食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的周邊血液中每毫升的數量有1.5倍、3倍或4倍的增加。因此，口服褐藻糖膠(一種褐藻的主要成分)可以是一種使人類或動物的周邊血液增加幹細胞的有效方法。綜上所述，一種行為，例如口服3克(也就是超過2克)的褐藻糖膠(其可來自上述的褐藻糖膠補充品)或是一種或多種的行為或刺激(X)，可以導致、引起、活化或催化人類或動物周邊血液中的幹細胞至少有1.5倍(或以上)、2倍(或以上)、3倍(或以上)或4倍(或以上)的增加。
歸納起來，本發明提供了許多種方法，分別簡述如下。
一種從一第一個體(例如一人體或一動物體)收穫(或獲取)和儲存幹細胞的方法，其係包括下列步驟：(1)讓該第一個體進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為係經過事先評估，確認能有效增加該第一個體體內的一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)的數量；(2)在該第一個體進行或接受該行為之後，讓該第一個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(3)在該第一個體等待該段(預定的)時間之後，從該第一個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)；(4)從該組織樣本收獲、收集或取得該種或該些種選定的幹細胞；以及(5)將該種或該些種選定的幹細胞存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間(例如1個月以上或一年以上)，其中該設施是由一機構(如細胞銀行)所提供。在一範例中，在存放(或儲存)該種或該些種選定的幹細胞之後，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在該第一個體上。在另一範例中，在存放(或儲存)該種或該些種選定的幹細胞之後，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在一第二個體(例如另一人體或另一動物體)上。
一種儲存一第一個體(例如一人體或一動物體)之幹細胞的方法，其係包括下列步驟：(1)讓該第一個體進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為係經過事先評估，確認能有效增加該第一個體體內的一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)的數量；(2)在該第一個體進行或接受該行為之後，讓該第一個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(3)在該第一個體等待該段(預定的)時間之後，從該第一個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)；以及(4)將含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間(例如1個月以上或一年以上)，其中該設施是由一機構(如細胞銀行)所提供。在一範例中，在存放(或儲存)含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本之後，含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在該第一個體上。在另一範例中，在存放(或儲存)含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本之後，含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在一第二個體(例如另一人體或另一動物體)上。
一種從一第一個體(例如一人體或一動物體)收穫或獲取幹細胞的方法，其係包括下列步驟：(1)讓該第一個體進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為係經過事先評估，確認能有效增加該第一個體體內的一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)的數量；(2)在該第一個體進行或接受該行為之後，讓該第一個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(3)在該第一個體等待該段(預定的)時間之後，從該第一個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)；以及(4)從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞。在一範例中，在從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞之後(在這之後沒有或是略過下列步驟：將該種或該些種選定的幹細胞存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間，例如1個月以上或一年以上)，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在該第一個體上。在另一範例中，在從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞之後(在這之後沒有或是略過下列步驟：將該種或該些種選定的幹細胞存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間，例如1個月以上或一年以上)，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在一第二個體(例如另一人體或另一動物體)上。
一種儲存一第一個體(例如一人體或一動物體)之幹細胞的方法，其係包括下列步驟：(1)讓該第一個體進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為係經過事先評估，確認能有效增加該第一個體體內的一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)的數量；(2)在該第一個體進行或接受該行為之後，讓該第一個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；以及(3)在該第一個體等待該段(預定的)時間之後，從該第一個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)，其中該組織樣本含有該種或該些種選定的幹細胞。在一範例中，在從該第一個體取得含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本之後(在這之後沒有或是略過下列步驟：將含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間，例如1個月以上或一年以上)，含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在該第一個體上。在另一範例中，在從該第一個體取得含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本之後(在這之後沒有或是略過下列步驟：將含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間，例如1個月以上或一年以上)，含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在一第二個體(例如另一人體或另一動物體)上。
一種從一第一個體(例如一人體或一動物體)儲存和收穫(或獲取)幹細胞的方法，其係包括下列步驟：(1)讓該第一個體進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為係經過事先評估，確認能有效增加該第一個體體內的一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)的數量；(2)在該第一個體進行或接受該行為之後，讓該第一個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(3)在該第一個體等待該段(預定的)時間之後，從該第一個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)，其中該組織樣本含有該種或該些種選定的幹細胞；(4)將含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本存放(或儲存)在溫度低於攝氏0度(例如低於攝氏負30度或低於攝氏負80度)的一設施(如冰箱)中一段時間(例如1個月以上或一年以上)，其中該設施是由一機構(如細胞銀行)所提供；以及(5)在存放(或儲存)含有該種或該些種選定的幹細胞的該組織樣本之後，從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞。在一範例中，在從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞之後，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在該第一個體上。在另一範例中，在從該組織樣本收獲或取得該種或該些種選定的幹細胞之後，該種或該些種選定的幹細胞可以透過一個適當的方法(例如注射或塗抹)而被用在一第二個體(例如另一人體或另一動物體)上。
一種發現新種類幹細胞(為一種尚未被發現的幹細胞)的方法，其係包括下列步驟：(1)讓一個體(例如一人體或一動物體)進行或接受一行為，例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠，該行為可以經過事先評估，確認能有效增加體內一種或多種幹細胞的數量；(2)在該個體進行或接受該行為之後，讓該個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(3)在該個體等待該段(預定的)時間之後，從該個體取得一組織樣本(例如該人體或該動物體的周邊血液)；以及(4)利用一種用於偵測新種類幹細胞的分析方法來處理該組織樣本，其中該種分析方法包括偵測該組織樣本中的細胞是否含有細胞核的步驟以及該組織樣本中的細胞是否可以表現以及/或是無法表現一種或多種選定的細胞(表面)標記的步驟，該種分析方法包括使用一流式細胞儀。
一種評估一行為(例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠)對於治療患有一疾病(如癌症、帕金森氏症或阿茲海默病)之一個體(例如一人體或一動物體)的效果的方法，其係包括下列步驟：(1)從該個體獲得一第一組織樣本(例如周邊血液樣本)；(2)利用一分析或測量方法(例如前面所述的測量方法MT)或是一裝置、儀器或設備(例如前面所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是前面所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD))從該第一組織樣本中獲得與一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)之資訊有關的一第一幹細胞資料；(3)在獲得該第一組織樣本或是該第一幹細胞資料之後，讓該個體進行或接受該行為；(4)在該個體進行或接受該行為之後，讓該個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(5)在該個體等待該段(預定的)時間之後，從該個體獲得一第二組織樣本(例如周邊血液樣本)；(6)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第二組織樣本中獲得與該種或該些種選定的幹細胞之資訊有關的一第二幹細胞資料；以及(7)對該第一幹細胞資料和該第二幹細胞資料進行一分析，其中該分析可以包括將該第一幹細胞資料和該第二幹細胞資料進行比較。該種或該些種選定的幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞。該第一幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第一組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第一組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第二幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第二組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第二組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第一幹細胞資料可以更包括與該第一組織樣本有關的一第一百分比，該第一百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於一門檻尺寸的一區域中的百分比。該第二幹細胞資料可以更包括與該第二組織樣本有關的一第二百分比，該第二百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於該門檻尺寸的一區域中的百分比。該門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。
一種評估一行為(例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠)對於治療患有一疾病(如癌症、帕金森氏症或阿茲海默病)之一個體(例如一人體或一動物體)的效果的方法，其係包括下列步驟：(1)從該個體獲得一第一組織樣本(例如周邊血液樣本)；(2)利用一分析或測量方法(例如前面所述的測量方法MT)或是一裝置、儀器或設備(例如前面所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是前面所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD))從該第一組織樣本中獲得與一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)有關的一第一幹細胞資料；(3)在獲得該第一組織樣本或是該第一幹細胞資料之後，讓該個體進行或接受該行為；(4)在該個體進行或接受該行為之後，讓該個體等待一段第一(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(5)在該個體等待該段第一(預定的)時間之後，從該個體獲得一第二組織樣本(例如周邊血液樣本)；(6)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第二組織樣本中獲得與該種或該些種選定的幹細胞有關的一第二幹細胞資料；(7)對該第二幹細胞資料和該第一幹細胞資料進行一第一分析，其中該第一分析可包括將該第二幹細胞資料和該第一幹細胞資料進行比較；(8)在獲得該第二組織樣本或是該第二幹細胞資料之後，讓該個體再次進行或接受該行為；(9)在該個體再次進行或接受該行為之後，讓該個體等待一段第二(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(10)在該個體等待該段第二(預定的)時間之後，從該個體獲得一第三組織樣本(例如周邊血液樣本)；(11)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第三組織樣本中獲得與該種或該些種選定的幹細胞有關的一第三幹細胞資料；以及(12)對該第三幹細胞資料和該第一或第二幹細胞資料進行一第二分析，其中該第二分析可包括將該第三幹細胞資料和該第一或第二幹細胞資料進行比較。該種或該些種選定的幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞。該第一幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第一組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第一組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第二幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第二組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第二組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第三幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第三組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第三組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第一幹細胞資料可以更包括與該第一組織樣本有關的一第一百分比，該第一百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於一門檻尺寸的一區域中的百分比。該第二幹細胞資料可以更包括與該第二組織樣本有關的一第二百分比，該第二百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於該門檻尺寸的一區域中的百分比。該第三幹細胞資料可以更包括與該第三組織樣本有關的一第三百分比，該第三百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於該門檻尺寸的一區域中的百分比。該門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。
一種評估或測試一種或多種的上述行為或刺激(X)(例如服用4.5克(或超過3.5克)的一沖繩褐藻補充品，該沖繩褐藻補充品含有重量百分比為80%(或是超過70%)的水雲粉，其中該4.5克的該沖繩褐藻補充品含有3克(或是超過2克)的褐藻糖膠或是含有重量百分比超過60%的褐藻糖膠)效果或效用的方法，其係包括下列步驟：(1)從一個體(例如一人體或一動物體)獲得一第一組織樣本(例如周邊血液樣本)；(2)利用一分析或測量方法(例如前面所述的測量方法MT)或是一裝置、儀器或設備(例如前面所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是前面所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD))從該第一組織樣本中獲得與一種或多種選定的幹細胞(例如SB-1細胞以及/或是SB-2細胞)之資訊有關的一第一幹細胞資料；(3)在獲得該第一組織樣本或是該第一幹細胞資料之後，讓該個體進行或接受該種或該些種的上述行為或刺激(X)；(4)在該個體進行或接受該種或該些種的上述行為或刺激(X)之後，讓該個體等待一段(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(5)在該個體等待該段(預定的)時間之後，從該個體獲得一第二組織樣本(例如周邊血液樣本)；(6)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第二組織樣本中獲得與該種或該些種選定的幹細胞有關的一第二幹細胞資料；以及(7)對該第一幹細胞資料和該第二幹細胞資料進行一分析，其中該分析可包括將該第一幹細胞資料和該第二幹細胞資料進行比較。該種或該些種選定的幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種幹細胞。該第一幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第一組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第一組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第二幹細胞資料可包括該種或該些種選定的幹細胞在該第二組織樣本中每單位體積(例如每毫升)的數量，也就是在該第二組織樣本中該種或該些種選定的幹細胞每單位體積(例如每毫升)的數量。該第一幹細胞資料可以更包括與該第一組織樣本有關的一第一百分比，該第一百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於一門檻尺寸的一區域中的百分比。該第二幹細胞資料可以更包括與該第二組織樣本有關的一第二百分比，該第二百分比為該種或該些種選定的幹細胞的數量在顆粒尺寸大於或等於該門檻尺寸的一區域中的百分比。該門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。
一種監測一個體(例如前面所述的人體或是前面所述的非人體)周邊血液中一種選定幹細胞(例如SB-1細胞或SB-2細胞)數量的方法，其可用來監測該個體進行或接受一種或多種的上述行為或刺激(X)後該種選定幹細胞增加的數量，該個體可透過該種或該些種的上述行為或刺激(X)在體內培養或培育該種選定幹細胞，該種方法包括下列步驟：(1)從該個體獲得一第一組織樣本(例如周邊血液樣本)；(2)利用一分析或測量方法(例如前面所述的測量方法MT)或是一裝置、儀器或設備(例如前面所述的整合系統、裝置、儀器或工具(AD)或是前面所述的單一系統、儀器、工具或裝置(TD))從該第一組織樣本中獲得與每單位體積(例如每毫升)的該種選定幹細胞數量有關的一第一資料；(3)在獲得該第一組織樣本之後，讓該個體進行或接受該種或該些種的上述行為或刺激(X)；(4)在該個體進行或接受該種或該些種的上述行為或刺激(X)之後，讓該個體等待一段第一(預定的)時間，例如15分鐘至60分鐘、20分鐘至100分鐘、30分鐘至2小時、0.5小時至3小時、1小時至12小時、12小時至36小時或是36小時至50小時；(5)在該個體等待該段第一(預定的)時間之後，從該個體獲得一第二組織樣本(例如周邊血液樣本)；(6)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第二組織樣本中獲得與每單位體積(例如每毫升)的該種選定幹細胞數量有關的一第二資料；(7)對該第一資料和該第二資料進行一第一分析，以獲得與每單位體積(例如每毫升)的該種選定幹細胞數量有關的一第一變化量，其中該第一分析可包括將該第一資料和該第二資料進行比較；(8)在該個體進行或接受該種或該些種的上述行為或刺激(X)之後，讓該個體等待一段第二(預定的)時間，例如12小時至36小時或是36小時至60小時，該段第二(預定的)時間與該段第一(預定的)時間不同；(9)在該個體等待該段第二(預定的)時間之後，從該個體獲得一第三組織樣本(例如周邊血液樣本)；(10)利用該分析或測量方法或是該裝置、儀器或設備從該第三組織樣本中獲得與每單位體積(例如每毫升)的該種選定幹細胞數量有關的一第三資料；以及(11)對該第一資料和該第三資料進行一第二分析，以獲得與每單位體積(例如每毫升)的該種選定幹細胞數量有關的一第二變化量，其中該第二分析可包括將該第一資料和該第三資料進行比較。該第一、第二和第三組織樣本可以由該個體的周邊血液獲得。該種選定幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種幹細胞或是以本發明在“幹細胞定義”裡所提及的一種或多種細胞(表面)標記(例如CD349(+)、Lgr5(+)或CD66e(+))描述其特徵的幹細胞。
一種獲得一組織樣本(例如一周邊血液)之一幹細胞資料(例如每單位體積的幹細胞數量)的方法，其係包括下列步驟：(1)從一個體(例如一人體或一動物體)獲得該組織樣本(其體積可以是10毫升)；(2)處理該組織樣本，以獲得或製備出一測試樣本(其體積可以是3毫升)；(3)利用一第一方法從該測試樣本的一第一部分中獲得一第一資料(例如每單位體積(如每毫升)內一第一群特定顆粒(其係包含細胞)的數量)，該第一方法包括使用一血球計數器(hemocytometer)計算該第一部分中的顆粒數量；(4)利用一第二方法從該測試樣本的一第二部分中獲得一第二資料(例如一種特定幹細胞之數量占一第二群特定顆粒(其係包含細胞)之數量的百分比)與一第三資料(例如該第二群特定顆粒之數量占一第三群特定顆粒(其係包含細胞)之數量的百分比)，該第二方法包括使用一流式細胞儀(flow cytometer)計算該第二部分中的顆粒數量，其中在該測試樣本是均勻且含有大致相同之內容物的情況下，該第二部分假定含有與該第一部分大致上相同的內容物，該第一群特定顆粒與該第三群特定顆粒大致上具有相同的性質或特性，該第一群特定顆粒的尺寸和該第三群特定顆粒的尺寸係大於或等於一給定門檻尺寸(例如0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米)；(5)對該第二資料和該第三資料進行一第一運算或計算(例如將該第二資料乘以該第三資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第四資料(例如該種特定幹細胞之數量占該第三群特定顆粒之數量的百分比)；(6)對該第一資料和該第四資料進行一第二運算或計算(例如將該第一資料乘以該第四資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第五資料(例如該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)；以及(7)對該第五資料和一體積改變(或樣本準備)係數進行一第三運算或計算(例如將該第五資料乘以該體積改變(或樣本準備)係數)，以獲得與該組織樣本(如該周邊血液)有關的一第六資料(例如該種特定幹細胞在該組織樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)。該種獲得該組織樣本之幹細胞資料的方法還可以包括下列步驟：對該測試樣本的體積和該組織樣本的體積進行一第四運算或計算(例如將該測試樣本的體積除以該組織樣本的體積)，以獲得該體積改變(或樣本準備)係數。
該幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在該個體的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量。該第三群特定顆粒包括該第二群特定顆粒以及其它群的顆粒和/或細胞(其可包括微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板、白血球(包含淋巴球))。該第二群特定顆粒包括該種特定幹細胞，但是幾乎不含有微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板和白血球(包含淋巴球)。(該第一群特定顆粒和該第三群特定顆粒的)該給定門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。在該第二群特定顆粒中，顆粒的尺寸可以是大於或實質上等於1微米、1.1微米、1.5微米、2微米、2.1微米或3微米。在該第一群特定顆粒、該第二群特定顆粒和該第三群特定顆粒中，每一群特定顆粒可以是或可以包括一群細胞。該種特定幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種多功能幹細胞、任何一種多潛能幹細胞或任何一種先驅幹細胞。該組織樣本可以是一血液、一周邊血液或是其它組織。該個體可以是一人類或是一動物。步驟(2)中所述的處理該組織樣本包括下列步驟：將一紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合，並在將該紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合之後，使來自該組織樣本的顆粒重新懸浮於一溶液或培養液中。該溶液或培養液可以是一不含有鈣與鎂的含鹽溶液或是一含有牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液。根據該組織樣本製備成該測試樣本的方式，可計算出或是獲得該體積改變(或樣本準備)係數。例如，將10毫升的該組織樣本處理成3毫升的該測試樣本，則該體積改變(或樣本準備)係數為3/10(其係為該測試樣本之體積與該組織樣本之體積的比率)。
概括地說，血球計數器(連同顯微鏡)是用來獲得尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)在該測試樣本(其係由該組織樣本(例如周邊血液)經過處理而成)中每單位體積(如每毫升)的數量，而流式細胞儀則是用來獲得該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)中所佔的百分比(其係與該測試樣本有關)。將上述獲得的尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒在該測試樣本中每單位體積的數量乘以上述獲得的該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒中所佔的百分比，可以獲得該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量。將該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積的數量乘以該體積改變(或樣本準備)係數，可以獲得該種特定幹細胞在該組織樣本(如上述的周邊血液)中每單位體積(如每毫升)的數量。因此，結合上述的細胞計數資料(也就是上述利用血球計數器獲得的資料)和上述的該種特定幹細胞的百分比(也就是上述利用流式細胞儀測量出來的資料)，可以更準確地獲得該種特定幹細胞在周邊血液中的數量。
本發明係揭露一整合系統、裝置、儀器或工具，其可用來獲得與一個體(例如一人體)的一組織樣本(例如一周邊血液)有關的一幹細胞資料(例如每單位體積的幹細胞數量)。該整合系統、裝置、儀器或工具包括：(1)一第一裝置、儀器或工具，其係用來從該個體獲得或取得該組織樣本(其體積可以是10毫升)；(2)一第二裝置、儀器或工具(其可包括一離心機)，其係用來處理該組織樣本，以獲得或製備出一測試樣本(其體積可以是3毫升)；(3)一第三裝置、儀器或工具(其可包括一血球計數器、一顯微鏡以及一含有一軟體的處理器或電腦)，其係用來從該測試樣本的一第一部分獲得一第一資料(例如每單位體積(如每毫升)內一第一群特定顆粒的數量)；(4)一第四裝置、儀器或工具(其可包括一流式細胞儀和一處理器或電腦)，其係用來從該測試樣本的一第二部分獲得一第二資料(例如一種特定幹細胞之數量占一第二群特定顆粒之數量的百分比)和一第三資料(例如該第二群特定顆粒之數量占一第三群特定顆粒之數量的百分比)，其中在該測試樣本是均勻且含有大致相同之內容物的情況下，該第一部分假定含有與該第二部分大致上相同的內容物，另外該第一群特定顆粒與該第三群特定顆粒大致上具有相同的性質或特性，該第一群特定顆粒的尺寸和該第三群特定顆粒的尺寸係大於或等於一給定門檻尺寸；以及(5)一第五裝置、儀器或工具(例如一電腦或處理器)，其係用來進行下列的運算或計算：(a)對該第二資料和該第三資料進行一第一運算或計算(例如將該第二資料乘以該第三資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第四資料(例如該種特定幹細胞之數量占該第三群特定顆粒之數量的百分比)；(b)對該第一資料和該第四資料進行一第二運算或計算(例如將該第一資料乘以該第四資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第五資料(例如該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)；以及(c)對該第五資料和一體積改變(或樣本準備)係數進行一第三運算或計算(例如將該第五資料乘以該體積改變(或樣本準備)係數)，以獲得與該組織樣本有關的一第六資料(例如該種特定幹細胞在該組織樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)。該第五裝置、儀器或工具也可以用來進行下列的運算或計算：對該測試樣本的體積和該組織樣本的體積進行一第四運算或計算(例如將該測試樣本的體積除以該組織樣本的體積)，以獲得該體積改變(或樣本準備)係數。另外，也可以將該第一、第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具中的任兩個或以上的裝置、儀器或工具合併組成一個可以進行所述之任兩個或以上的裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。例如，該第一和第二裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第一和第二裝置、儀器或工具之功能的第一整合裝置、儀器或工具或是第一單一裝置、儀器或工具，而該第三、第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第三、第四和第五裝置、儀器或工具之功能的第二整合裝置、儀器或工具或是第二單一裝置、儀器或工具。或者，該第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第二、第三、第四和第五裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，該第二、第三和第四裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第二、第三和第四裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，該第三和第四裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第三和第四裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。或者，該第四和第五裝置、儀器或工具可以合併組成一個可以進行該第四和第五裝置、儀器或工具之功能的整合裝置、儀器或工具或是單一裝置、儀器或工具。該幹細胞資料可包括該種特定幹細胞在該個體的周邊血液中每單位體積(如每毫升)的數量。該第三群特定顆粒包括該第二群特定顆粒以及其它群的顆粒和/或細胞(其可包括微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板、白血球(包含淋巴球))。該第二群特定顆粒包括該種特定幹細胞，但是幾乎不含有微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板和白血球(包含淋巴球)。(該第一群特定顆粒和該第三群特定顆粒的)該給定門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。在該第二群特定顆粒中，顆粒的尺寸可以是大於或實質上等於1微米、1.1微米、1.5微米、2微米、2.1微米或3微米。在該第一群特定顆粒、該第二群特定顆粒和該第三群特定顆粒中，每一群特定顆粒可以是或可以包括一群細胞。該種特定幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種多功能幹細胞、任何一種多潛能幹細胞或任何一種先驅幹細胞。該組織樣本可以是一周邊血液樣本。該個體可以是一人類或是一動物。在該第二裝置、儀器或工具處理該組織樣本的時候，可包括下列步驟：將一紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合，並在將該紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合之後，使來自該組織樣本的顆粒重新懸浮於一溶液或培養液中。該溶液或培養液可以是一不含有鈣與鎂的含鹽溶液或是一含有牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液。根據該組織樣本製備成該測試樣本的方式，可以計算出或是獲得該體積改變(或樣本準備)係數。例如，將10毫升的該組織樣本處理成3毫升的該測試樣本，則該體積改變(或樣本準備)係數為3/10(其係為該測試樣本之體積與該組織樣本之體積的比率)。
概括地說，該第三裝置、儀器或工具是用來獲得尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)在該測試樣本(其係由該組織樣本(例如周邊血液)經過處理而成)中每單位體積(如每毫升)的數量，而該第四和第五裝置、儀器或工具則是用來獲得該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)中所佔的百分比(其係與該測試樣本有關)。將上述獲得的尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒在該測試樣本中每單位體積的數量乘以上述獲得的該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒中所佔的百分比，可以獲得該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量。將該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積的數量乘以該體積改變(或樣本準備)係數，可以獲得該種特定幹細胞在該組織樣本(如上述的周邊血液)中每單位體積(如每毫升)的數量。因此，結合上述的細胞計數資料(其係由該第三裝置、儀器或工具提供)和上述的該種特定幹細胞的百分比(其係由該第四與第五裝置、儀器或工具提供)，可以更準確地獲得該種特定幹細胞在周邊血液中的數量。
本發明還揭露一單一系統、裝置、儀器或工具，其可提供或執行下列八種功能中任兩個(或以上)的功能：(1)一第一功能，其係用來從一個體獲得或取得一組織樣本(其體積可以是10毫升)；(2)一第二功能，其係用來處理該組織樣本，以獲得或製備出一測試樣本(其體積可以是3毫升)；(3)一第三功能，其係用來從該測試樣本的一第一部分獲得一第一資料(例如每單位體積(如每毫升)內一第一群特定顆粒的數量)；(4)一第四功能，其係用來從該測試樣本的一第二部分獲得一第二資料(例如一種特定幹細胞之數量占一第二群特定顆粒之數量的百分比)和一第三資料(例如該第二群特定顆粒之數量占一第三群特定顆粒之數量的百分比)，其中在該測試樣本是均勻且含有大致相同之內容物的情況下，該第一部分假定含有與該第二部分大致上相同的內容物，另外該第一群特定顆粒與該第三群特定顆粒大致上具有相同的性質或特性，該第一群特定顆粒的尺寸和該第三群特定顆粒的尺寸係大於或等於一給定門檻尺寸；(5)一第五功能，其係用來對該第二資料和該第三資料進行一第一運算或計算(例如將該第二資料乘以該第三資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第四資料(例如該種特定幹細胞之數量占該第三群特定顆粒之數量的百分比)；(6)一第六功能，其係用來對該第一資料和該第四資料進行一第二運算或計算(例如將該第一資料乘以該第四資料)，以獲得與該測試樣本有關的一第五資料(例如該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)；(7)一第七功能，其係用來對該測試樣本的體積和該組織樣本的體積進行一第三運算或計算(例如將該測試樣本的體積除以該組織樣本的體積)，以獲得一體積改變(或樣本準備)係數；以及(8)一第八功能，其係用來對該第五資料和該體積改變(或樣本準備)係數進行一第四運算或計算(例如將該第五資料乘以該體積改變(或樣本準備)係數)，以獲得與該組織樣本有關的一第六資料(例如該種特定幹細胞在該組織樣本中每單位體積(如每毫升)的數量)。該種特定幹細胞在該組織樣本中每單位體積的數量可以是該種特定幹細胞在該個體的周邊血液中每單位體積的數量。該第三群特定顆粒包括該第二群特定顆粒以及其它群的顆粒和/或細胞(其可包括微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板、白血球(包含淋巴球))。該第二群特定顆粒包括該種特定幹細胞，但是幾乎不含有微顆粒、粒細胞、紅血球、血小板和白血球(包含淋巴球)。(該第一群特定顆粒和該第三群特定顆粒的)該給定門檻尺寸可以是0.5微米、0.8微米、1微米、1.5微米、2微米或3微米。在該第二群特定顆粒中，顆粒的尺寸可以是大於或實質上等於1微米、1.1微米、1.5微米、2微米、2.1微米或3微米。在該第一群特定顆粒、該第二群特定顆粒和該第三群特定顆粒中，每一群特定顆粒可以是或可以包括一群細胞。該種特定幹細胞可以是本發明在“幹細胞定義”裡所提及的任何一種多功能幹細胞、任何一種多潛能幹細胞或任何一種先驅幹細胞。該組織樣本可以是一周邊血液樣本。該個體可以是一人類或是一動物。對於該第二功能而言，處理該組織樣本可包括下列步驟：將一紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合，並在將該紅血球凝集劑和該組織樣本進行混合之後，使來自該組織樣本的顆粒重新懸浮於一溶液或培養液中。該溶液或培養液可以是一不含有鈣與鎂的含鹽溶液或是一含有牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液。根據該組織樣本製備成該測試樣本的方式，可以計算出或是獲得該體積改變(或樣本準備)係數。例如，將10毫升的該組織樣本處理成3毫升的該測試樣本，則該體積改變(或樣本準備)係數為3/10(其係為該測試樣本之體積與該組織樣本之體積的比率)。
在一範例中，該單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行該第三和第四功能。在另一範例中，該單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行該第二、第三和第四功能。在另一範例中，該單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行該第三、第四、第五、第六和第八功能。在另一範例中，該單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行該第三至第八功能。在另一範例中，該單一系統、裝置、儀器或工具可以提供或執行該第一至第八功能。
概括地說，該單一系統、裝置、儀器或工具所提供的該第三功能是用來獲得尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)在該測試樣本(其係由該組織樣本(例如周邊血液)經過處理而成)中每單位體積(如每毫升)的數量，而該單一系統、裝置、儀器或工具所提供的該第四和第五功能則是用來獲得該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒(其係包括細胞)中所佔的百分比(其係與該測試樣本有關)。將上述獲得的尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒在該測試樣本中每單位體積的數量乘以上述獲得的該種特定幹細胞在尺寸大於或等於該給定門檻尺寸的顆粒中所佔的百分比，可以獲得該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積(如每毫升)的數量。將該種特定幹細胞在該測試樣本中每單位體積的數量乘以該體積改變(或樣本準備)係數，可以獲得該種特定幹細胞在該組織樣本(如上述的周邊血液)中每單位體積(如每毫升)的數量。因此，結合上述的細胞計數資料(其係由該單一系統、裝置、儀器或工具的該第三功能提供)和上述的該種特定幹細胞的百分比(其係由該單一系統、裝置、儀器或工具的該第四與第五功能提供)，可以更準確地獲得該種特定幹細胞在周邊血液中的數量。
以上所述係藉由實施例說明本發明之特點，其目的在使熟習該技術者能暸解本發明之內容並據以實施，而非限定本發明之專利範圍，故，凡其他未脫離本發明所揭示之精神所完成之等效修飾或修改，仍應包含在以下所述之申請專利範圍中。
10‧‧‧收集袋
11‧‧‧過濾器
12a‧‧‧試管
12b‧‧‧試管
12c‧‧‧試管
13‧‧‧離心機
14a‧‧‧試驗樣本
14b‧‧‧試驗樣本
14c‧‧‧試驗樣本
15a‧‧‧分析儀器
15b‧‧‧分析儀器
16‧‧‧紅血球分解液
19‧‧‧貯存器
20a‧‧‧試管
20b‧‧‧試管
20c‧‧‧試管
21a‧‧‧試驗樣本
21b‧‧‧試驗樣本
21c‧‧‧試驗樣本
22‧‧‧紅血球分解液
1-20‧‧‧步驟
21-43‧‧‧步驟
49-59‧‧‧步驟
61-70‧‧‧步驟
77‧‧‧垂直線
81‧‧‧垂直虛線
82‧‧‧水平虛線
100a‧‧‧1毫米的正方形
100b‧‧‧1毫米的正方形
100c‧‧‧1毫米的正方形
100d‧‧‧1毫米的正方形
101-104‧‧‧步驟
第1圖為純化程序的流程示意圖。
第2圖為純化程序的流程示意圖。
第3圖為純化程序的流程示意圖。
第4圖為純化程序的流程示意圖。
第5圖為純化程序的流程示意圖。
第6圖為純化程序的流程示意圖。
第7A圖為根據本發明之一實施例所繪示一種從一個體的一組織樣本中獲得、收集或收獲大量幹細胞之方法的流程圖。
第7B圖為根據本發明之一實施例所繪示一種發現或偵測一種或多種新種類幹細胞之方法的流程圖。
第7C圖為根據本發明之一實施例所繪示一種確認、決定或評估一種或多種行為或刺激對於治癒或治療患有一種特定疾病之一個體的效用之方法的流程圖。
第8A圖至第8F圖為三位人類受試者在口服30顆褐藻糖膠補充品之前與之後的幹細胞資料。
第9圖為根據本發明之一實施例所繪示一種獲得人體幹細胞資料之方法的流程圖。
第10圖繪示用於流式細胞儀的前向散射係數/側向散射係數圖。
第11圖為一褐藻糖膠補充品的內容/成分資訊。
第12圖為褐藻糖膠的部分分子結構。
第13圖為根據本發明之一實施例所繪示一種獲得個體幹細胞資料之方法的流程圖。
第14A圖至第14C圖為根據本發明之一實施例所繪示一種用於獲得幹細胞資料之測量或分析方法的流程圖。
第15圖繪示一血球計數器的一微小方格圖案(microscopic grid)。
第16圖繪示用於流式細胞儀的前向散射係數/側向散射係數圖。
第17A圖為一位人類受試者在食用或攝取褐藻糖膠補充品之後第1.5小時的幹細胞資料。
第17B圖為一流式細胞儀的一螢光分布圖，其係顯示出在細胞核/細胞質之比為較高的區域中細胞的螢光光強度分布。
第18圖為根據本發明之一實施例所繪示一種獲得一實驗組參與者在四個特定時間點的幹細胞資料之方法的流程圖。
第19圖為根據本發明之一實施例所繪示一種獲得一對照組參與者在四個特定時間點的幹細胞資料之方法的流程圖。
第20A圖至第20J圖為五位人類受試者在口服30顆褐藻糖膠補充品之前與之後的幹細胞資料。
第20K圖與第20L圖為一位人類受試者在沒有口服30顆褐藻糖膠補充品之前與之後的幹細胞資料。
雖然在圖式中已描繪某些實施例，但熟習此項技術者應瞭解，所描繪之實施例為說明性的，且可在本發明之範疇內構想並實施彼等所示實施例之變化以及本文所述之其他實施例。
Claims (14)
- 一種獲得幹細胞資料的方法，其係包括下列步驟：處理從一個體取得之一周邊血液樣本成一測試樣本；利用一血球計數器計算該測試樣本的第一部分中的一第一群尺寸大於或等於1.0微米的細胞的數量，進而獲得一第一數據；利用一流式細胞儀計算該測試樣本的第二部分中的一第二群尺寸大於或等於1.0微米的細胞裡的一種類型的幹細胞的數量，進而獲得一第二數據，其中該種類型的幹細胞是多功能、Lgr5(+)、且其尺寸係介於1微米至6微米之間；以及根據該第一數據和該第二數據，獲得一第三數據。
- 如請求項1所述之方法，其中該第二群細胞包括白血球、紅血球、血小板以及/或是粒細胞。
- 如請求項1所述之方法，更包括利用一流式細胞儀計算該第二群細胞中的尺寸介於1微米至6微米之間的CD349(+)與CD9(+)幹細胞的數量。
- 如請求項1所述之方法，其中該第二數據包括該種類型的幹細胞之數量占該第二群細胞之數量的百分比。
- 如請求項1所述之方法，其中該第三數據包括該種類型的幹細胞在該周邊血液樣本中每單位體積的數量。
- 如請求項5所述之方法，其中獲得該周邊血液樣本中每單位體積的該種類型的幹細胞的計數包括：使用所述血球計數器在該測試樣本的該第一部分計數每毫升細胞中尺寸大於或等於1.0微米的細胞之數量以獲得該測試樣本的細胞計數；使用流式細胞儀對所述第二群細胞進行計數，以獲得細胞計數C1；使用流式細胞儀對前向散射係數/側向散射係數的圖中之具有高核/血漿比率的一區域中的所述第二群細胞進行計數，以獲得細胞計數C2；獲得該C2中的該種類型的幹細胞的計數的百分比，以獲得百分比SP；獲得該C2在該C1中的百分比；將該C2在該C1中的百分比乘以SP以及100%，以獲得C1中的該種類型的幹細胞的百分比；將該C1中的該種類型的幹細胞的百分比乘以該測試樣本的細胞計數，以獲得該測試樣本中每單位體積的該種類型的幹細胞的計數；將該測試樣本的體積除以該周邊血液樣本的體積以獲得體積比值，並將該體積比值乘以該測試樣本中該種類型的幹細胞的每單位體積的計數，以獲得該周邊血液樣本中每單位體積的該種類型的幹細胞的計數。
- 一種獲得幹細胞的方法，其係包括下列步驟：讓一個體進行或接受一行為；在該個體進行或接受該行為之後，使該個體等待一段預定時間；以及從該個體取得之一周邊血液樣本收集複數個幹細胞，其中所述周邊血液樣本是在該個體等待該段預定時間之後被取得，其中每個幹細胞是多功能、Lgr5(+)、且其尺寸係介於1微米至6微米之間。
- 如請求項7所述之方法，其中該行為包括服用一種草藥或一種含有褐藻糖膠的物質。
- 如請求項7所述之方法，其中該段預定時間係介於30分鐘到2小時之間。
- 如請求項7所述之方法，更包括利用一流式細胞儀計算該第二群細胞中的尺寸係介於1微米至6微米之間的CD349(+)與CD9(+)幹細胞的數量。
- 如請求項7所述之方法，其中該複數個幹細胞係用於植牙手術中。
- 如請求項7所述之方法，其中在從所述周邊血液樣品收集該複數個幹細胞之後，更包括將該複數個幹細胞在低於攝氏零度的溫度下，儲存超過1年之時間。
- 如請求項7所述之方法，其中在所述收集步驟之後，更包括將該複數個幹細胞與緩衝液混合。
- 如請求項13所述之方法，其中在所述緩衝液是含鹽緩衝液。
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