TWI494129B - 抗紫外線毒性之肽保護 - Google Patents
抗紫外線毒性之肽保護 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI494129B TWI494129B TW099140066A TW99140066A TWI494129B TW I494129 B TWI494129 B TW I494129B TW 099140066 A TW099140066 A TW 099140066A TW 99140066 A TW99140066 A TW 99140066A TW I494129 B TWI494129 B TW I494129B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- peptide
- skin
- seq
- peptides
- composition
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/12—Aerosols; Foams
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/004—Aftersun preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Birds (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
本發明係關於一種具有生物學及治療活性之短肽。特定言之,本發明係關於一種防護誘變物誘發之細胞/組織毒性之短肽。例如,本發明之肽可防護在暴露UV光之後發生之皮膚中毒性。本發明肽之一功能係阻斷磷酸化作用,及因此活化某些細胞週期調節蛋白質。本發明進一步係關於一種使用本發明肽降低在暴露誘變物(例如UV光)後之細胞/組織毒性程度之方法。
本申請案主張2009年11月19日申請之美國專利臨時申請案第61/262,790號之優先權,該案之全文係以引用的方式併入本文中。
當將角質細胞暴露至諸如紫外線(UV)照射之DNA損傷元素(誘變物)時,會使細胞週期檢查點活化,從而阻礙細胞分裂。在誘變物誘發損傷之後,細胞週期會停滯在G2階段,讓DNA有時間修復。然而,若檢查點過程被中斷或抑制,則發生癌症(例如DNA突變)的頻率會降低。此點已經在活體外及活體內透過在UV照射之前及之後將咖啡因施用至皮膚上而證實(Lu等人,2008,Cancer Res. 68:2523-2529;Heffernan等人,2009,J. Invest. Dermatol. 129:1805-1815)。此現象係根據咖啡因可抑制有絲分裂檢查點途徑,從而使DNA受損之細胞進行有絲分裂,及隨著其DNA不能滿足複製過程而經由細胞凋亡死亡。儘管有DNA突變/受損,但仍可進行細胞週期進程,及藉此出現之凋亡細胞死亡可防止經誘變物誘發之突變在受影響之組織中固著。此製程藉以減少原本可能發展成癌前期病變(諸如癌)之遺傳上改變的細胞數量。
在皮膚護理治療及美容皮膚護理應用中使用此試劑,已經提升咖啡因減少UV光對皮膚之癌變影響的能力。然而,由於缺乏特異性,在皮膚護理產品中使用咖啡因遭到質疑。除了其有益作用外,咖啡因會誘發皮膚中的非所欲作用(例如血管舒張、乾燥等)。基於此等缺點,已尋求其他方法用於預防誘變物在皮膚及相關組織中之損傷作用。
使用短肽發展皮膚護理產品之用途已由於其以天然胺基酸為主之結構、特異性、無毒性及無副作用,而非常受歡迎。此等品質可使肽作為發展用於補充皮膚護理組合物之新穎化學預防試劑之適宜起始點。本文中闡述一種具有化學預防及化學治療特性且可施用於保護皮膚不受太陽光之損傷作用之肽。
本發明之一實施例係關於一種減少細胞週期檢查點激酶的活性之方法。該方法包括使檢查點激酶暴露至長度為五至九個胺基酸殘基且包括SEQ ID NO:13之肽。在此實施例及其他實施例中之細胞週期檢查點激酶可呈活化狀態。可應用於文中所述之此方法及其他方法中的肽之實例包括SEQ ID NO:2、3、5、6、8、或10或由其組成。
可用於文中所述方法的肽之其他實例係彼等具有與SEQ ID NO:13序列直接鄰接的組胺酸殘基者。其他肽可在其羧基末端醯胺化。該醯胺化肽之特定實例係彼等包括SEQ ID NO:2、3、5、6、8、或10或由其組成者。
本揭示方法之檢查點激酶標的可包括檢查點激酶-1(Chk1)或檢查點激酶-2(Chk2)或由其組成。該檢查點激酶可因細胞中之DNA受損而活化。該DNA受損可藉由誘變劑引起。誘變劑之實例係彼等能夠在皮膚中誘發DNA受損者(例如紫外線照射)。所揭示之方法亦可包括使cdc25(細胞分裂週期25)磷酸酶暴露至文中所揭示之肽;cdc25c係可作為本發明標的之cdc25c之實例。
本發明之另一實施例係關於一種處理哺乳動物的皮膚之方法。該方法包括藉由使檢查點激酶暴露至所揭示的肽,而減少皮膚中細胞週期檢查點激酶(例如Chk2)之活性。本發明之另一實施例係關於一種藉由將所揭示之肽施用至皮膚而處理哺乳動物皮膚之方法。
本發明之另一實施例係關於一種長度為五至九個胺基酸殘基及包括SEQ ID NO:13之肽。該肽之實例包括SEQ ID NO:2、3、5、6、8、或10或由其組成。本發明之肽之其他實例具有與SEQ ID NO:13序列直接鄰接之組胺酸殘基。其他的肽係在其羧基末端醯胺化。該醯胺化肽之特定實例係彼等包括SEQ ID NO:2、3、5、6、8、或10或由其組成者。
本發明之另一實施例係關於一種包括本發明的肽及醫藥上可接受載劑之組合物。該組合物可呈噴霧劑、乳液、液體、洗液、乳膏、漿糊、軟膏、粉末或泡沫之形式。
本發明肽(例如彼等於表1及圖1中列出者)可包括L-或D-胺基酸對映異構體,其包含具有一種對應異構形式或兩種形式的組合之殘基。該等肽可如以下非限制性實例中所述而進一步強化或修飾,只要未改變其一級胺基酸序列即可;在此方法中,該等肽係由某些胺基酸序列組成,但可包括某些修飾。該等肽之羧基末端可為酸性(-COOH)或經醯胺化(例如-CONH2
、-CONHR、或-CONR2
)。相較於其游離酸形式而言,羧基末端之醯胺化作用可使本發明肽較不易受蛋白酶降解之影響及可增加其溶解性,藉此增強治療效力。該等肽亦可經脂質化,從而可增強皮膚滲透。連接各肽之胺基酸的一或多個分子鍵可為非肽鍵。該非肽鍵包括(但不限於)醯亞胺基、酯肼、胺基脲及偶氮鍵。
可對本發明肽進行各種修飾,只要保持其一級胺基酸序列即可。某些修飾可用於增加肽之效力,然而其他修飾可有利於肽處理。通常可經過修飾之肽官能基包括羥基、胺基、胍鹽、羧基及醯胺基團。通常,此等基團之非限制性反應包括以下反應:羥基經烷基鹵化物之乙醯基化作用;羧基之酯化作用、醯胺化作用或氫化作用(即還原成醇);胺基(例如肽之一級胺基或賴胺酸殘基之胺基)之脫醯胺作用、醯化作用、烷基化作用、芳基化作用。例如,SEQ ID NO:1-10及/或13可在羧基末端(-CONH2
)醯胺化。
儘管如上所論述,但本發明肽可在一或多個胺基酸殘基位置上具有某些胺基酸變化。例如,一個、兩個或三個殘基可經轉變成保留性殘基或殘基群。胺基酸保留策略係技藝中眾所周知;例如,吾人皆知賴胺酸、苯丙胺酸、異白胺酸、蘇胺酸及榖胺酸鹽可在不大幅影響原來的肽之結構及功能下分別替代組胺酸、酪胺酸、白胺酸、絲胺酸及穀胺醯胺。視需要,本發明肽可比SEQ ID NO:1-10或13之任一者減少一個胺基酸;或減少兩個胺基酸(鄰接或非鄰接)。本發明肽之變體形式應與SEQ ID NO:1-10或13之任一者有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%相同性。本發明肽之變體形式應具有SEQ ID NO:1-10或13之任一者所具有的至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、或95%之活性或功能。
SEQ ID NO:1-10及13所具有的活性或功能之實例係化學預防癌症(例如癌瘤、肉瘤、黑色素瘤、皮膚癌);阻止暴露至誘變/致癌劑(例如UV照射)之組織(例如皮膚)發展出癌變前期細胞群體生長;在細胞(例如皮膚細胞、角質細胞、黑素細胞或成纖母細胞)暴露至誘變/致癌劑(例如UV照射)之後阻斷細胞週期阻滯及DNA修復;阻斷cdc25c藉由DNA受損修復途徑之活化,如:經由檢查點激酶(例如檢查點激酶-2[Chk2])之活化;阻斷或減少與暴露至誘變物/致癌原(例如UV照射)相關或由其引起的毒性(諸如皮膚中);阻斷或減少誘變物/致癌原對健康皮膚特徵(例如色調、彈性、含水性、著色、緊實度、光滑度)之負面作用。化學預防(化學防護)係指使用諸如本發明肽之試劑來減少出現瘤形成(例如癌症、癌症前期病變、良性過度生長病變)之風險或延遲其發展或復發。因誘變試劑或任何其他試劑(例如化療、刺激)引起的皮膚毒性可呈紅斑、禿頭症(掉髮)、光敏感(對太陽光的敏感度增加)、回憶反應(例如過去曾經照射處理之位點上化療之作用)、痤瘡樣(粉刺狀)爆發、皮膚壞死、嗜中性外分泌汗腺炎、外分泌腺鱗狀化生、色素沉著過度、指甲變化、黏膜炎、真皮硬化反應、血管損傷、乾燥症、水腫(腫脹)、蕁麻疹、皮膚老化(例如變薄、彈性降低、起皺紋、下垂、色素沉著增加[斑點、日光性著色斑、點狀色素減少症]、毛細血管擴張、血管瘤、紫癜、日光性黑頭粉刺、膠樣粟粒疹、脂漏性角化症)、起皰、皮炎、贅生/真菌生長節結(凸出的結實腫塊)、滲出性噬斑、贅生物或具有膿皰之壞死性潰瘍、傷疤、脂膜炎、潰瘍、疼痛及/或燒傷之形式表現。「減少」、「抑制」、「阻斷」或「防止」在文中係指相較於不施用本發明肽或包含該肽的組合物的情況而言,本發明肽可使該病症之發生率、嚴重度、量值、致病率或相關的症狀減少至少約7.5%、10%、12.5%、15%、17.5%、20%、22.5%、25%、27.5%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、90%、或100%。
雖然本發明肽可在不添加其他序列的情況下產生,但可選擇將本發明序列併入更長的序列中。例如,本發明肽可具有添加至其N-或C-末端或此二者上之額外的胺基酸殘基。其實例可為標記抗原決定部位,諸如Flag,其通常係用於追蹤蛋白質;例如,技藝中已知之標記抗原決定部位包括myc、His、HA(血球凝聚素)。因此,本發明涵蓋由本發明肽組成之肽或包括本發明肽之肽。雖然本發明肽可於更大序列內(即包含於其中)提供,但本發明肽與其他序列之組合不應構成由動物細胞(例如人類細胞)自然表現之任何蛋白質或肽序列。若文中用來闡述由序列「組成」之肽(諸如肽)之語言雖然限定於某些鄰接胺基酸序列,但仍可包括(亦即共軛之)非胺基酸部份基團或其他肽/蛋白質(此等肽/蛋白質會經由非肽鍵與本發明肽共軛)。
本發明之肽可為5、6、7、8、或9個鄰接胺基酸長度及包括SEQ ID NO:13(S-L/I-Y-Q/E-S)或由其組成。該等肽之非限制性實例係SEQ ID NO:2、3及5-10。該等肽之其他非限制性實例係包括SEQ ID NO:13的SEQ ID NO:2、3及5-8之片斷。依據SEQ ID NO:13,本發明之其他肽可為5、6、7、8、或9個鄰接胺基酸長度及包括SEQ ID NO:14(S-I-Y-Q-S)、SEQ ID NO:15(S-L-Y-E-S)、或SEQ ID NO:16(S-I-Y-E-S)或由其組成。本發明之其他肽可包括SEQ ID NO:13,其中組胺酸殘基係與SEQ ID NO:13序列直接鄰接;該肽之實例係SEQ ID NO:2、3、5、6、8及9。包含SEQ ID NO:13之短肽係在結構上完全相關,因為白胺酸與異白胺酸之間(即SEQ ID NO:13之位置2)及穀胺醯胺與榖胺酸鹽之間(即SEQ ID NO:13之位置4)的結構/化學相類似。除白胺酸及異白胺酸外之其他胺基酸可佔在SEQ ID NO:13之位置2,諸如丙胺酸、纈胺酸、甘胺酸、或甲硫胺酸。除穀胺醯胺及榖胺酸鹽外之其他胺基酸可佔在SEQ ID NO:13之位置4,諸如天冬醯胺、天冬胺酸鹽、精胺酸、或賴胺酸。
或者,本發明之肽可為5、6、7、8、或9個鄰接胺基酸長度及包括SEQ ID NO:10(S-L-Y-Q-S)或由其組成。該等肽之非限制性實例係SEQ ID NO:2及7-9。該等肽之其他非限制性實例係包括SEQ ID NO:10之SEQ ID NO:2、7及8之片斷。本發明之其他肽可包括SEQ ID NO:10,其中組胺酸殘基(H)係與SEQ ID NO:10序列直接鄰接;該等肽之實例係SEQ ID NO:2、8及9。
本發明肽之所有實施例皆呈「單離」狀態。例如,「單離」肽係已經完全或部份純化者。在某些情況下,單離肽係較大組合物、緩衝劑系統或試劑混合物之一部份。在其他情況下,單離肽可經純化至均質性。一種組合物所包括之肽可占其中亦包含之所有其他大分子物質之至少約50、80、90、或95%(基於莫耳計)。本發明肽可包括組分之異種組合。本發明肽之混合物亦可用於操作本發明。
本發明肽可與可溶或不可溶載劑分子共軛,以依需要修釋其溶解特性及增加肽在目標組織中之局部濃度。可溶性載劑分子之實例包括聚乙二醇(PEG)與聚乙烯基吡咯啶酮之聚合物;不可溶聚合物之實例包括矽酸鹽、聚苯乙烯及纖維素。肽亦可囊封成微球,以增強其在治療應用期間及之後的穩定性;通常,使用聚酯及PEG微球體囊封並穩定肽。
可根據欲囊封之肽組合物之親水性或疏水性性質使用不同方法製備用於囊封肽之微球體。該等方法的方案實例可發現於Wang等人(J. Control. Release 17:23,1991)及美國專利第4,324,683號,該二者之全文係以引用的方式併入本文中。可進行活體外肽釋放研究,以測定肽併入微球體後的相對可用性。微球體(200 mg)懸浮於2.5 mL磷酸鹽緩衝鹽水(PBS,pH 7.2)中及於環境培養箱振盪器(G-24,New Brunswick Scientific Co.,Edison,N.J.)中在37℃及100 rpm攪動。在特定取樣時間(最初4天內每天及此後每隔一天),緩衝溶液完全移除,並用新鮮PBS取代。使用Bradford方法或通常用於蛋白質分析之其他適宜定量分析法測量PBS之肽含量。
以下程序及參數係提供用於指引目的且係熟悉此項技術者習知。所有揭示之肽可於Advanced ChemTech Apex 396 Multiple Peptide Synthesizer上使用標準Fmoc(9-茀基甲氧基羰基)固相化學法合成。Apex 396裝備有40-孔反應槽用於同時生產0.15 mmol規模多至40種肽。該等肽可使用標準胺基酸製成醯胺化或游離酸序列。樹脂先用N,N-二甲基甲醯胺(DMF)洗及預膨脹。Rink醯胺樹脂之膨脹時間係一小時。使用於DMF中之25%哌啶移除Fmoc保護基歷時25分鐘,之後該哌啶自該樹脂完全洗掉。為控制消旋製程,Fmoc胺基酸單體於1-羥基-苯并三唑(HOBt)或1-羥基-7-氮雜-苯并三唑(HOAt)於0.5 M DMF中之等莫耳溶液中預活化。醯胺偶合法係使用O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)或2-(1H-苯并三唑-1-基-)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HBTU)作為活化劑及2.5-5.0倍莫耳過量的胺基酸在鹼性條件下使用位阻鹼(二異丙基乙基胺)進行。偶合時間係1至1.5小時,繼而進行洗及再偶合以完成雙重或三重偶合,然後脫除保護及繼續加長肽鏈。偶合效率係使用標準Kaiser測試監測。一旦在樹脂上完成肽合成,則如上述移除最終Fmoc基團,該序列保留呈游離鹼形式。
使用95%三氟醋酸(TFA)及水且添加適宜的清除劑來裂解肽與樹脂的對酸不穩定之連接基。在裂解進行約30分鐘至一小時之後,將所釋放之肽立即自裂解槽移除,及轉移至試管中,以用於在減壓下移除TFA。該等肽隨後即準備用於純化,及經由高效液相層析(HPLC)使用逆向C18管柱及質譜法分析。使用LC/MS/MS系統(ABI API2000)確認一級序列及完成製備型純化。
上述一般製程中,該肽可使用熟悉此項技術者所知曉之任何方法產生,諸如彼等於Merrifield(J Am Chem Soc. 85:2149,1963);Carpino等人(J Org Chem. 51:3732,1986);Merrifield等人(Anal Chem. 38:1905,1966);或Kent等人[High Yield Chemical Synthesis Of Biologically Active Peptides On An Automated Peptide Synthesizer Of Novel Design,IN: PEPTIDES 1984(Ragnarsson,ed.)Almqvist and Wiksell Int.,Stockholm(Sweden),pp. 185-188]中揭示者,所有該等案件之全文係以引用的方式併入本文中。該等肽可藉由能夠將胺基酸依序添加至加長肽鏈之機器產生。然而,該等肽亦可使用標準溶液相方法製造,其較適合大規模生產。
本發明之其他實施例係關於使用上述肽之方法,諸如用於調配物中或作為治療劑。此等方法可包括使用單肽或多肽組合(即混合物)。
在某些情況下,可將本發明組合物安置於存在於皮膚上、皮膚中或皮膚下之裝置中。該等裝置包括經皮貼劑、植入物及注入物,其釋放該等物質之方式可經由被動或主動釋放機制接觸皮膚或毛囊。該物質可於適宜的媒劑中及在有效濃度下,(例如)依定期間隔(諸如一天一次或兩次)施加至表皮。一或兩次注射至皮膚可提供用於將本發明肽投與至皮膚或任何其他組織之另一路徑。
在本文所述方法中用於遞送肽的組合物可呈噴霧劑、乳液、液體、洗液、乳膏、漿糊、軟膏、粉末、泡沫或其他醫藥上可接受調配物之形式。此外,該等肽可使用較不複雜的調配物遞送,諸如去離子/蒸餾水、PBS或標準醫用生理食鹽溶液。一般而言,醫藥上可接受調配物可包括適用於人類皮膚或黏膜表面上之任何載劑。該等醫藥上可接受載劑可包括乙醇、二甲亞碸、甘油、矽石、氧化鋁、澱粉及等效載劑及稀釋劑。該調配物可視需要具有美容需求,及/或包含其他製劑,諸如類視黃素或能夠作為本發明肽治療作用之佐劑的其他肽。亦可添加抗生素至該調配物中,以抵擋感染,藉此可出現最佳癒合過程。組合物中該肽之濃度可為約0.1 μg/mL至約50 μg/mL或約0.1 μg/mL至約20 μg/mL;然而,所用之最終濃度可根據目標組織之性質、本發明肽之生物活性及為了加強組合物吸收所採用之任何佐劑或技術,而可能超出此等範圍變化。該等測定係一般技術者熟知。例如,用於操作本發明之肽的濃度可為約0.1、1、2、5、10、15、20、25、50、75、100、200、500、或1000 μg/mL。
可將本發明肽及相關的組合物投與人類及動物,其包括所有哺乳動物(例如豬、牛、馬、綿羊、山羊、小鼠、大鼠、貓、狗、雪貂、靈長類)。亦可與典型及/或試驗材料組合施用,諸如組織移植物、組織培養產品、氧氣及敷料劑。一般而言,該組合物可經局部、經口、經皮、全身投與,或藉由熟悉此項技術者已知用於遞送本發明肽至目標組織之其他方法投與。例如,組合物亦可依活體外或離體方式施用至在培養基中生長之細胞或患者移植物。
由於其尺寸小,因此希望該肽本身即具有能夠通過皮膚之通透性;然而,某些技術可用於增強此運動。例如,可添加親脂性(非極性)基團至該肽中,或可將該肽呈親脂性賦形劑遞送至皮膚中,以加強肽接近角質層,移位至較下面之表皮層。可認為以此方式修飾之親脂性具有前藥作用。滲透增強劑(諸如已知溶劑及界面活性劑)可用於賦形劑中,以促進肽吸收。預期可用於增強肽接近目標組織/傷口之特殊技術包括注射療程、離子滲入法、電泳法及超音波。離子滲入裝置係由浸入電解質溶液中之兩個電極組成,且置於皮膚上。當對電極施加電流時,則會在角質層上產生電場以遞送肽。電穿孔法包括施加高電壓電脈衝,以提高通過脂質雙層之滲透性。此點與離子滲入法之不同處在於施加電流之持續時間及強度(離子滲入法使用相當恒定電壓電場)。據信電穿孔法之高電壓電脈衝可引起脂質薄層膜中可逆性形成親水性孔,其可高度增強滲透性。超音波法係施加大於16 kHz的頻率之音波至皮膚,從而引起聲波所通過之組織的壓縮及膨脹。所造成之壓力變化可引起能夠增強肽滲透性之許多過程(例如空洞形成、混合、溫度增加)。
本發明可包括一或多種蛋白酶抑制劑。可針對目標蛋白酶特定選擇能使所選擇生物活性肽降解之蛋白酶抑制劑;該選擇可基於該生物活性肽之長度及/或序列而決定。然而,蛋白酶抑制劑不需要依任何特定方式選擇,例如,包含一或兩種抑制劑之蛋白酶抑制劑混合劑可用於本發明中。就本發明之某些實施例而言,該蛋白酶抑制劑並不能特定抑制病毒。以下類型的蛋白酶抑制劑可併入本發明中:絲胺酸蛋白酶抑制劑、半胱胺酸蛋白酶抑制劑、天冬胺酸鹽蛋白酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、硫醇蛋白酶抑制劑及蘇胺酸蛋白酶抑制劑。
蛋白酶抑制劑係技藝中眾所周知。可併入本發明中之蛋白酶抑制劑之非限制性實例包括乙醯基-胃蛋白酶抑制劑、AEBSF(4-[2-胺基乙基]苯磺醯氟)鹽酸鹽、ALLM(N-乙醯基-Leu-Leu-Met)、ALLN(N-乙醯基-Leu-Leu-Nle-CHO)、抑胺肽酶素(amastatin)(鏈黴菌(Streptomyces sp.))、ε-胺基-正己酸、胺基肽酶N抑制劑、α1
-抗胰凝乳蛋白酶、抗痛素(鹽酸鹽或二鹽酸鹽)、α2-抗血漿素、抗凝血素III、α1-抗胰蛋白酵素、p-APMSF鹽酸鹽、抑肽酶(aprotinin)(例如來自牛肺)、ATBI(11個殘基肽)、苄脒鹽酸鹽、苯丁抑制素(bestatin)、苯丁抑制素甲基酯、鈣蛋白酶抑制素(calpastatin)、鈣蛋白酶抑制劑(calpeptin)、羧肽酶抑制劑、半胱天冬胺酸酶抑制劑、組織蛋白酶(cathepsin)B抑制劑II、組織蛋白酶G抑制劑I、組織蛋白酶抑制劑II、組織蛋白酶抑制劑III、組織蛋白酶抑制劑I、組織蛋白酶K抑制劑I、組織蛋白酶K抑制劑II、組織蛋白酶K抑制劑III、組織蛋白酶L抑制劑I、組織蛋白酶L抑制劑II、組織蛋白酶L抑制劑IV、組織蛋白酶L抑制劑V、組織蛋白酶L抑制劑VI、組織蛋白酶S抑制劑、組織蛋白酶/枯草桿菌蛋白酶抑制劑、抑糜酶素(chymostatin)、胰凝乳蛋白酶抑制劑I、胱抑素(cystatin)、1,5-丹醯基(dansyl)-glu-gly-arg氯甲基酮二鹽酸鹽、3,4-二氯異香豆素、二異丙基氟磷酸鹽、二肽基肽酶II抑制劑、二肽基肽酶IV抑制劑I、二肽基肽酶IV抑制劑II、E-64蛋白酶抑制劑、大腸桿菌素(ecotin)、EDTA二鈉鹽二水合物、EDTA四鈉鹽、EGTA、彈性蛋白酶抑制劑I、彈性蛋白酶抑制劑II、彈性蛋白酶抑制劑III、彈性蛋白酶抑制劑(elastatinal)、6-甲脒基-2-萘基-4-胍基苯甲酸鹽二甲烷磺酸鹽、glu-gly-arg-氯甲基酮、2-胍基乙基巰基琥珀酸、十六烷基磺醯氟、α-碘乙醯胺、激肽原、leuhistin、亮抑酶肽半硫酸鹽、α2
-巨球蛋白、DL-2-巰基甲基-3-胍基乙基硫丙酸、胃蛋白酶抑制劑A、苯基甲基磺醯氟、磷酸阿米酮二鈉鹽、PPack II三氟醋酸鹽、PPack二鹽酸鹽、脯胺醯基肽鏈內切酶抑制劑II、Na-甲苯磺醯基-lys氯甲基酮鹽酸鹽、Na-甲苯磺醯基-phe氯甲基酮、三肽基肽酶II抑制劑、胰蛋白酶抑制劑(來自玉米或大豆)、D-val-phe-lys氯甲基酮二鹽酸鹽、1,3-二-(N-羧基苯甲醯基-L-亮胺醯基-L-亮胺醯基)胺基丙酮、鄰啡啉、烏索酸(例如迷迭香(Rosemary)提取物)、凝血酸(tranexamic acid)(4-[胺基甲基]環己烷-1-羧酸)(臨床上在美國以Cyklokapron售出及在亞洲以Transamin售出)、Fmoc-Lys(Boc)、Fmoc-Arg(Pmc)、苯甲醯基-Arg-硝基替苯胺、苯甲醯基-Arg-萘基醯胺、及α-2-巨球蛋白。
用於本發明中之蛋白酶抑制劑可為肽或蛋白質,諸如酶。該抑制劑之非限制性實例係絲胺酸蛋白酶抑制劑,其包括α-1-抗胰蛋白酶、補體1-抑制劑、抗凝血酶、α-1-抗胰凝乳蛋白酶、血纖維蛋白溶酶原活化劑抑制劑1、及神經絲胺酸蛋白酶抑制劑。
通常可併入皮膚護理製劑中之組分係技藝中眾所周知。除生物活性肽組分外,本發明可包含其他活性劑,諸如菸鹼醯胺、植烷三醇、法尼醇(farnesol)、甜沒藥萜醇(bisabolol)及水楊酸。希望某些另外的活性劑可與生物活性肽組分出現增效作用,或增強該調配物之保存期限。
因為該組合物欲與動物或人類皮膚接觸,因此應選擇適用於施用至角質組織(即穩定、低毒性、低過敏)之其他組分。CTFA Cosmetic Ingredient Handbook,Second Edition(1992)闡述適用於本發明組合物之常用於皮膚護理工業中之許多種非限制性之美容及醫藥成份,該案之全文係以引用的方式併入本文中。此等成份之實例包括:研磨劑、吸收劑、美觀組分,諸如香料、顏料、上色/著色劑、香精油、皮膚感官劑、收斂劑等(例如丁香油、薄荷醇、樟腦、桉樹油、丁香油酚、乳酸薄荷酯、北美金縷梅餾出物)、抗粉刺劑(例如間苯二酚、硫磺、水楊酸、苯甲醯基過氧化物、紅黴素(erythromycin)、鋅)、抗結塊劑、消泡劑、抗微生物劑(例如丁基胺基甲酸碘丙基酯)、抗氧化劑、結合劑、生物添加劑、緩衝劑、膨脹劑、螯合劑、化學添加劑、變性劑、表面止痛劑、聚合物(例如二十碳烯與乙烯基吡咯啶酮之共聚物)、不透明劑、pH調節劑、推進劑、還原劑、螯合劑、皮膚漂白及增亮劑(例如氫醌、麴酸、抗壞血酸[維生素C]、抗壞血基磷酸鎂、抗壞血基葡萄糖胺)、皮膚調理劑(例如保濕劑,其包括混雜性及閉塞性保濕劑)、皮膚舒緩及/或癒合劑(例如泛醯醇及衍生物[例如乙基泛醯醇]、蘆薈、泛酸及其衍生物、尿囊素、沒藥醇、甘草酸二鉀)、增稠劑、微粒材料、結構劑及維生素。許多此等製劑闡述於美國專利第6,492,326號中,該案之全文已以引用的方式併入本文中,尤其有關不同成份之描述。
本發明之組合物可包含微粒材料,諸如金屬氧化物。此等微粒可經塗佈或未經塗佈、帶電價或未帶電價。用於製備本發明微粒材料之非限制性實例包括氯氧化鉍、氧化鐵、雲母、經硫酸鋇及TiO2
處理之雲母、矽石、尼龍、聚乙烯、滑石、苯乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯酸共聚物、絹雲母、氧化鋁、矽酮樹脂、硫酸鋇、碳酸鈣、醋酸纖維素、二氧化鈦、聚甲基丙烯酸甲酯及其混合物。無機微粒材料,諸如TiO2
、ZnO(氧化鋅)或ZrO2
係自許多商品來源獲得。微粒材料可依0.01重量%至2重量%,或0.05重量%至1.5重量%,或0.1重量%至1重量%(所有測量值皆為近似值)的濃度存在於組合物中。
本發明組合物可包含選自保濕劑、濕潤劑或皮膚調理劑之調理劑。可使用各種此等材料及其含量分別占該組合物之約0.01重量%至20重量%,或約0.1重量%至10重量%,或約0.5重量%至7重量%(所有測量值皆為近似值)。此等材料包括(但不限於)胍;尿素;乙醇酸及乙醇酸鹽(例如銨及四級烷基銨鹽);水楊酸;乳酸及乳酸鹽(例如銨及四級烷基銨鹽);呈其各種形式之蘆薈(例如蘆薈凝膠);多羥基醇,諸如山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤糖醇、甘油、己三醇、丁三醇、丙二醇、丁二醇及己二醇;聚乙二醇;糖類(例如蜜二糖)及澱粉;糖及澱粉衍生物(例如烷基化葡萄糖、果糖、葡糖胺);玻尿酸;乳醯胺單乙醇胺;乙醯胺單乙醇胺;泛醯醇;尿囊素;礦脂;及其混合物。
本發明之組合物可包含結構劑,其可用於製備水包油乳液。在不受任何理論的限制下,據信該結構劑有助於對組合物提供流變特性,可促進該組合物之穩定性。例如,結構劑有助於形成液體結晶凝膠網絡結構。該結構劑亦具有乳化劑或界面活性劑之功能。本發明包含占該組合物重量約0.1重量%至20重量%,約0.1重量%至10重量%,或約0.5重量%至9重量%之一或多種結構劑(所有測量值皆為近似值)。
可併入本發明中之結構劑係選自硬脂酸、棕櫚酸、硬脂基醇、鯨蠟基醇、山萮基醇、平均具有約1至約5個環氧乙烷單元之硬脂基醇之聚乙二醇醚、平均具有約1至約5個環氧乙烷單元之鯨蠟基醇之聚乙二醇醚、及其混合物。可用於本發明中之其他結構劑係選自硬脂基醇、鯨蠟基醇、山萮基醇、平均具有約2個環氧乙烷單元之硬脂基醇之聚乙二醇醚(steareth-2)、平均具有約2個環氧乙烷單元之鯨蠟基醇之聚乙二醇醚、及其混合物。
本發明肽之其他特徵、生產模式及用途係闡述於(例如)美國專利第6,974,799號及第5,492,894號中。該等專利之全文係以引用的方式併入本文中。
本發明亦係關於一種藉由投與文中所述之肽來抑制或預防哺乳動物組織中贅生性生長之方法。雖然無任何特定作用機制,但所揭示肽之抗贅生性活性係與抑制細胞週期檢查點激酶(諸如檢查點激酶-2(Chk2))活性之能力相關。抑制Chk蛋白質(其係在細胞受到DNA損傷之後活化)可防止細胞進入細胞週期阻滯期,以免在此期間發生DNA修復。雖然DNA修復可將序列還原成其初始狀態(即未突變),但通常不足以造成大的遺傳性刺激。此後,修復過程時常可能促成致癌過程(例如致癌基因之活化、腫瘤抑制物或看家基因之失活)之遺傳變化恒定(永恆不變)。基於通過抑制Chk蛋白質活性而阻斷或減少細胞週期阻滯期,讓細胞可繼續進行有絲分裂階段,其間由於分裂過程中某些DNA損傷事件(例如DNA雙鏈斷裂)的瓦解作用,會導致細胞凋亡。DNA損傷亦可稱為遺傳毒性應激壓力。因此,細胞凋亡可清除運送有害遺傳變化之細胞;若細胞週期阻滯可進行完全活化,藉此讓DNA「修復」,則該等細胞有潛力存活及充當贅生性發展之前驅物。在此方式中,由於DNA損傷劑之作用,本發明可用於減少組織中突變之積聚。
藉由本發明肽阻止、抑制或治療之贅生性生長可為良性、癌變前期或癌變(即惡性)。基於此原因,可認為所揭示肽具有化學預防、化學防護、抗癌、抗贅生、抗致癌物或化療活性。就預防或抑制組織中贅生性生長或病變而言,可將一或多種肽投與原本沒有表現明顯(肉眼可見)瘤形成跡象之組織中。例如,該等肽可在誘變傷害出現之前(例如在傷害前1、2、3、4、8、12、16、20、24、48、72、96、或120小時內)(例如在日照之前局部施加至皮膚),或在受到誘變傷害之後不久(例如在傷害後1、2、3、4、8、12、16、20、24、48、72、96、或120小時內)(例如在日照之後局部施加至皮膚)投與至建康組織。在皮膚護理方面,可將該等肽作為防曬劑或曬後製劑施用。該等肽亦可用於預防或抑制組織中突變增加,無論該組織是否完全健康或包含少量良性及/或癌變前期病變。該用途可預防或抑制良性或癌症前期病變轉變成癌症/惡性病變(即預防或抑制腫瘤發生),及可因此治療良性或癌變前期病變。在另一態樣中,本發明可用於預防或抑制皮膚或其他組織之增生。
在出現時即被本發明預防或抑制,或治療之良性及/或癌變前期贅生性皮膚病變之實例係皮膚纖維瘤、表皮囊腫、血管瘤、葡萄酒色痣、淋巴管瘤、化膿性肉芽腫、蜘蛛痣(蛛狀痣)、瘢痕瘤、角化棘皮瘤、脂肪瘤、痣、發育不良痣、角化皮脂漏、皮垂、皮脂腺增生、牛皮癬及光化性角化病(日光性角化病)。在出現時即被本發明預防及抑制或治療之皮膚中的惡性皮膚病變/腫瘤(即皮膚癌)之實例係基底細胞癌(例如結節型基底細胞癌、囊性基底細胞癌、瘢痕性基底細胞癌、浸潤性基底細胞癌、小結節型基底細胞癌、表皮基底細胞癌、有色基底細胞癌、侵蝕性潰瘍[Jacobi ulcer]、Pinkus之纖維上皮瘤、息肉狀基底細胞癌、孔狀基底細胞癌、異常基底細胞癌)、鱗狀細胞癌(例如腺樣鱗狀細胞癌[假腺管型鱗狀細胞癌]、透明細胞鱗狀細胞癌、紡錘細胞鱗狀細胞癌、印指環狀細胞鱗狀細胞癌、基底細胞樣鱗狀細胞癌、疣狀癌、角化棘皮瘤)、黑色素瘤(例如惡性小痣黑色素瘤、表皮淺散佈型黑色素瘤、肢端黑色素瘤、黏膜黑色素瘤、結節型黑色素瘤、息肉狀黑色素瘤、促纖維素增生性黑色素瘤、無色素性黑色素瘤、軟組織性黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤)、隆突型皮膚纖維肉瘤、梅克爾(Merkel)細胞癌、卡波西氏(Kaposi's)肉瘤、角化棘皮瘤、紡錘細胞腫瘤、皮脂腺癌、微囊性附屬器癌、非典型纖維黃色瘤、肌肉瘤及血管肉瘤。
因此,本發明預防、抑制或治療皮膚中贅生物之發展或進展,其中該受影響細胞(即產生贅生物之細胞類型)係上皮細胞、間葉細胞、角質細胞、成纖維細胞、黑素細胞、皮膚幹細胞或皮膚祖細胞。本發明之目標皮膚組織係表皮,其包括基底層、棘層、顆粒層、透明層及角質層;真皮,其包括乳突層及網狀層;及皮下組織,其包括脂肪組織、結締組織、神經組織及血管。前面提到的所有組織、層及細胞類型皆為本發明之目標。
在出現時即被本發明預防或抑制,或治療之良性及/或癌變前期贅生性病變或生長分佈之其他實例係增生、發育不良及組織變形。藉由本發明所預防、抑制或治療之癌症性贅生性病變之其他實例係肺癌、骨癌、胰腺癌、胃癌、頭或頸癌、子宮癌、卵巢癌、婦科癌、直腸癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病淋巴瘤(Hodgkin's Disease)、食道癌、小腸癌、結腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)贅生物、初級CNS淋巴瘤、脊椎軸腫瘤、腦癌、垂體腺瘤、血管瘤、神經膠質瘤或胚細胞瘤。
本發明可作為皮膚之美容品或應用於皮膚之美容治療。因此,本發明具有保持正常、健康皮膚特徵之作用,諸如色調、彈性、含水性、著色、穩定及光滑。所有此等品質會隨皮膚中受損細胞量的增加而下降,該等受損細胞係源自皮膚中誘變物之作用及/或突變的累積。因此,本發明具有預防、抑制或治療皮膚老化的作用;其中一項實例為光老化,其中皮膚老化係部份受到UV照射暴露的程度之影響。例如,本發明所指之光老化之作用係起皺紋、色斑及/或色素沉著過度、皮膚粗糙或皮革狀、下垂/鬆垂、變黃、乾燥及各種贅生物。
本發明之標的組織係皮膚及皮膚之相關黏膜組織。皮膚之相關黏膜組織係組織結構類似皮膚之任何組織,其包含上皮細胞,及係與皮膚直接連接。該等組織之實例係口腔、鼻咽、耳、肛門及泌尿生殖器表面,以及眼睛之眼瞼結膜。本發明之其他標的組織係彼等衍生自外胚層、中胚層及內胚層者,或包括上皮細胞、間葉細胞(例如成纖維細胞)、肌肉細胞、或神經細胞(例如神經元)。本發明之其他標的器官、器官系統及組織係(例如)循環系統(例如心臟、血液、血管)、消化系統(例如唾腺、食道、胃、肝、膽囊、胰腺、小腸及大腸、直腸)、內分泌系統(例如下視丘腦、腦垂體、松果體、甲狀腺、副甲狀腺、腎上腺)、外皮系統(例如皮膚、毛髮、指甲)、淋巴系統(例如淋巴結及淋巴管)、免疫系統(例如扁桃體、腺樣物、胸腺、脾)、肌肉系統(例如心肌、平滑肌、骨骼肌)、神經系統(例如腦、脊髓、周邊神經、神經)、生殖系統(例如卵巢、輸卵管、子宮、陰道、乳腺、睪丸、輸精管、貯精囊、前列腺、陰莖)、呼吸系統(例如咽、喉、氣管、支氣管、肺、橫膈膜)、骨骼系統(例如骨、軟骨、韌帶、腱)、及排泄系統(例如腎、輸尿管、膀胱、尿道)。
如用於實施本發明,所揭示之肽可用於減少因暴露於內生或異位(環境)來源的誘變物所產生的突變累積於組織中而限制贅瘤形成(例如增生)之發生。該誘變物暴露時間可為急性或慢性。一般而言,本發明適合阻斷由於暴露異位誘變物/致癌原而產生之突變累積。文中所論述之異位誘變物(亦即源自動物外部周圍環境者)之實例係紫外線(UV)照射(即UV光)(UV-A、UV-B、UV-C)、電離照射(例如X-射線、γ射線、α粒子)、鹼基類似物(例如5-溴尿嘧啶)、脫胺劑(例如亞硝酸[亞硝酸鹽])、硝基胺、嵌入劑(例如溴化乙錠(ethidium bromide)、原黃素(proflavine)、道諾黴素(daunomycin)、小紅莓(doxorubicin)[亞德里亞黴素(adriamycin)]、沙利竇邁(thalidomide)、放線菌素D(dactinomycin)、黃麴毒素(aflatoxin)、吖啶)、烷基化試劑(例如乙基亞硝基脲)、溴、熱、疊氮化鈉、補骨脂素、苯、苯并芘、砷、石棉、鎘、鉻、環氧乙烷、鎳、氡、氯乙烯、鉛及病毒。內生誘變物之實例係5-甲基胞嘧啶、反應性氧物質(例如一氧化氮、過氧化物)及轉位子。本發明亦關於阻斷因施加某些刺激物而引起的突變積聚於組織中。例如,刺激物可刺激慢性發炎病症,其可導致不同組織中形成癌。
在本發明實施中其他化學預防及/或抗癌劑可與所揭示之肽一起投藥。該投藥可包括所揭示肽及另一化學預防劑一起在同一組合物中,或涉及該肽及該劑在治療/預防療程期間不同時間點施用之方案。使用所揭示之肽及另一化學預防劑二者可產生增效化學預防活性。可與本發明聯合使用之化學預防劑及/或抗癌劑之實例係植物化學物質、咖啡因、咖啡酸、染料木黃酮(genistein)、白藜蘆醇(resveratrol)、二烯丙基硫化物、S-烯丙基半胱胺酸、蒜素、番茄紅素、辣椒素、薑黃素、6-薑酚、鞣花酸、烏索酸、水飛薊素、茴香腦、兒茶酚、大黃素、萊菔硫烷(sulforaphane)、丁香酚、異丁香酚、β-胡蘿蔔素、歐蓮素(oleandarin)、多酚、吲哚(例如二吲哚基甲烷、吲哚-3-甲醇)、異硫氰酸鹽(例如苯乙基異硫氰酸鹽)、非類固醇抗炎劑(NSAIDS)(例如塞來考昔(celecoxib)、布洛芬(ibuprofen)、奇諾力(sulindac)、阿司匹林(aspirin))、PPAR-γ激動劑(例如匹格列酮(pioglitazone)、羅西格列酮(rosiglitazone))、瑞喹莫德(resiquimod)、咪喹莫特(imiquimod)、類視黃素(例如全反式視黃酸、9-順式-或13-順式-視黃酸、4-羥基視黃醯胺)、貝沙羅汀(bexarotene)、塔拉羅汀(tararotene)、硒、大豆異黃酮、斯達汀類(statins)(例如阿托伐斯達汀(atorvastatin))、含硫抗氧化劑及維生素D類似物(例如維生素D2、維生素D3)。
在癌症細胞中使用某些化療劑或其他製劑(例如γ-輻射)而造成DNA損傷之一目標係誘導癌症細胞經歷細胞凋亡,藉此引起腫瘤衰退。然而,因DNA損傷而誘發出之細胞週期阻滯效應可能減少此所希望之結果。因此,本發明之另一態樣係與DNA損傷製劑組合使用所揭示之肽,以治療癌症(例如皮膚癌)或任何其他類型的贅生物。此方法之根據係如下所論述,所揭示肽敏化DNA損傷細胞造成細胞凋亡之能力(亦即,刺激細胞使其經歷細胞凋亡,而非使癌症細胞存活之細胞週期阻滯)。可用於操作本發明之DNA損傷製劑係(例如)烷基化試劑、順鉑(cisplatin)、碳鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、氮芥(mechlorethamine)、環磷醯胺、苯丁酸氮芥、氮芥(nitrogen mustard)、氮芥(mechlorethamine)、異環磷醯胺、美法侖(melphalan)、亞硝基脲、鏈脲黴素(streptozocin)、卡莫司汀(carmustine)(BCNU)、羅莫司丁(lomustine)、烷基磺酸酯、白消安(busulfan)、苯達莫司汀(bendamustine)、三嗪類、達卡巴嗪(dacarbazine)(DTIC)、替莫唑胺(temozolomide)、次乙亞胺、噻替派(thiotepa)、六甲嘧胺(altretamine)、六甲基三聚氰胺、抗代謝物、6-巰基嘌呤、達卡巴嗪(dacarbazine)、氟達拉濱(fludarabine)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他濱(capecitabine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、吉西他濱(gemcitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、培美曲塞(pemetrexed)、阿糖胞苷(arabinosylcytosine)、地西他濱(decitabine)、抗腫瘤抗生素、蒽環類抗生素、道諾黴素(daunorubicin)、亞德裡亞黴素(doxorubicin)(例如)、表柔比星(epirubicin)、伊達比星(idarubicin)、放射菌素-D、博來黴素(bleomycin)、絲裂黴素(mitomycin)-C、新製癌菌素(neocarzinostatin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、拓撲異構酶抑制劑、拓撲異構酶I抑制劑、拓撲替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、拓撲異構酶II抑制劑、依託泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、植物鹼、紫杉烷、紫杉醇、紫杉萜、埃坡黴素(epothilone)、伊沙匹隆(ixabepilone)、長春花生物鹼、長春鹼、長春新鹼、長春瑞濱(vinorelbine)、雌莫司汀(estramustine)、照射、γ射線、X-射線及UV照射。可將其中一或多種製劑與所揭示之肽組合施用至病變,或者,可使用一種方案,其中該肽及DNA損傷製劑係在治療療程之不同時間點施加。
本發明之一態樣係抑制檢查點激酶(Chk)活性。例如,本發明係關於抑制哺乳動物細胞(諸如皮膚細胞)中已被DNA損傷活化之Chk2。該DNA損傷及/或Chk活性可(例如)在細胞中經由暴露至UV照射或存在於環境中之任何其他誘變物誘導。經UV光誘導之DNA損傷一般包括環丁烷嘧啶二聚物及6-4嘧啶-嘧啶酮產物。在不受任何特定理論或機制的限制下,Chk係受到所揭示肽阻斷或向下調節/向下調控其抑制激酶活性趨向cdc25(細胞分裂週期25)磷酸酶(諸如cdc25c)之能力所抑制。在正常的細胞條件(很少或無DNA損傷)下,cdc25c引發級聯信號,從而導致有絲分裂,但在DNA損傷條件下,經活化之Chk會抑制cdc25c。因此,阻斷Chk活性會增加cdc25c發出有絲分裂信號的機率,甚至在通常(即當Chk未受抑制時)會向下調節cdc25c之DNA損傷條件下。假定DNA-損傷與正常有絲分裂過程不相容,則可進入有絲分裂之DNA-受損細胞隨後係經由細胞凋亡而清除。因此,本發明之一態樣係關於經由細胞凋亡誘導清除DNA-受損細胞。本發明之另一態樣係關於抑制通常因應DNA-損傷而產生之細胞週期阻滯。
本發明標的之Chk酶實例係Chk1及Chk2,其二者皆係技藝中已知。真核生物中均保留此等絲胺酸/蘇胺酸激酶之結構及功能,其在人類中的激酶使人類cdc25c磷酸酶在絲胺酸-216(或等效絲胺酸殘基,其取決於Chk-目標序列是否係在cdc25c變體[例如剪接變體]內)上磷酸化。使用本發明肽抑制Chk1-及/或Chk2-所介導之cdc25c(例如在絲胺酸-216位置或等效絲胺酸殘基上)之磷酸化作用之方法係本發明之一部份。本發明之目標可為Chk蛋白質,因為其天然存在於活體細胞中。
經活化之Chk酶(諸如其因應DNA損傷而出現)可藉由上游因子(例如ATM[經毛細血管擴張共濟失調-突變之蛋白質]、ATR[ATM-RAD3-相關的蛋白質]),在DNA-損傷-感測路徑中磷酸化或經由自體磷酸化作用而活化。相較於Chk之活化形式,Chk之未活化形式具有很少或沒有激酶活性。例如,活化之Chk酶可使cdc25c磷酸化。可活化此酶之Chk2磷酸化作用位點實例係蘇胺酸-26、絲胺酸-50、蘇胺酸-68、蘇胺酸-383及/或蘇胺酸-387殘基位置(或其Chk2變體[例如剪接變體]內之等效位置)。可活化此酶之Chk1磷酸化作用位點實例係絲胺酸-286、絲胺酸-301、絲胺酸-317及/或絲胺酸-345殘基位置(或其Chk1變體[例如剪接變體]內之等效位置)。
經人類中CHEK2基因編碼之Chk2具有如圖3中所示之胺基酸序列(SEQ ID NO:17)。人類Chk2在技藝中亦係稱為「CHK2檢查點同系物(S. pombe)」、CDS1、及Rad53。SEQ ID NO:17僅供參考之目的,因為人類Chk2及其他哺乳動物Chk2蛋白質序列係已知者。例如,美國國家生物技術資訊中心(NCBI)網站(或GenBank)揭示寄存編號為AAH04207、BAB17231、NP_009125、NP_001005735、NP_665861、O96017、AAS58460、AAD48504、AAC83693、EAW59757、EAW59756、EAW59754、CAX11959、CAX11958、CAX11957、CAX14028、CAX14027、CAX14026、CAH73823、CAH73875、AAV41895及BAF83443之人類Chk2胺基酸序列,所有該等案件之全文係以引用的方式併入本文中。就操作本發明之目的而言,Chk2包括與SEQ ID NO:17至少約50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%相同的胺基酸序列或由其組成。
由人類中CHEK1基因編碼之Chk1具有如圖4中所示之胺基酸序列(SEQ ID NO:18)。人類Chk1在相關技藝中亦稱為「CHK1檢查點同系物(S. pombe)」。SEQ ID NO:18僅供參考目的,因為人類Chk1及其他哺乳動物Chk1蛋白質序列係已知者。例如,NCBI網站(或GenBank)揭示寄存編號為AAC51736、AAW02681、AAH04202、BAF85238、BAA84577、CAB70558、O14757、AAM58752、AAM78553、CAD10662、AAH17575、AAE84492、CAZ65679、AAB88852、ABM83833、ABM87141、AAE67465、AAE67917、AAX36253、BAI45672、NP_001107594及NP_001265之人類Chk1胺基酸序列,所有該等案件之全文係以引用的方式併入本文中。就操作本發明之目的而言,Chk1包括與SEQ ID NO:18至少約50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%相同的胺基酸序列或由其組成。
cdc25c(細胞分裂週期25C),係一種酪胺酸磷酸酶,係由人類中CDC25C基因編碼且具有如圖5中所示之胺基酸序列(SEQ ID NO:19)。人類cdc25c在相關技藝中亦稱為「M-相誘導物磷酸酶3」及「細胞分裂週期25同系物C(S. pombe)」。SEQ ID NO:19僅供參考之目的,因為人類cdc25c及其他哺乳動物cdc25c蛋白質序列係已知者。例如,NCBI網站(或GenBank)揭示寄存編號為AAR32098、P30307、NP_001781、AAX36531、EAW62145、EAW62149、AAX29802、AAX29802、ABP29523、EAW62148、BAG63273、AAA75741、AAE74714、AAH19089及AAA35666之人類cdc25c胺基酸序列。就操作本發明之目的而言,cdc25c包括與SEQ ID NO:19至少約50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%相同之胺基酸序列或由其組成。
雖然本發明之一態樣係關於阻斷經活化之Chk2對抗cdc25c之向下調節的活性,但其同樣地係關於阻斷Chk2對抗其一或多種其他蛋白質目標之活性。例如,其他Chk2蛋白質目標係E2F-1、p53、cdc25a、BRCA-1、PML、Che-1、Hdmx、Trf2、FoxM1、pRB或mdm2。此外,例如,本發明係關於阻斷Chk1不僅對抗cdc25c,而且對抗p53、cdc25a、cdc25b、Rad51、聚-A-結合蛋白質、aurora-B、卷毛樣激酶-1、wee-1或BLM之向下調節的活性。
所包括之以下實例係闡述本發明之某些實施例。
進行研究以證實短肽可用於預防或減少皮膚中由於暴露至誘變物或刺激物而引起之毒性。基於先前已知咖啡因對DNA損傷修復途徑之抑制作用及此抑制作用在表皮中之抗癌作用,分析某些相關的肽在類似的抑制DNA損傷修復途徑上之能力。因此,測試肽阻斷DNA損傷修復途徑之Chk2(檢查點激酶2)-cdc25c(細胞分裂週期25同系物C蛋白質)支線之能力。
被DNA損傷感知蛋白質活化之Chk2藉由磷酸化作用而誘導細胞週期阻滯,及藉此抑制cdc25c,其係涉及向上調節週期素依賴性激酶活性之磷酸酶,藉此引起有絲分裂。此等蛋白質在DNA損傷修復途徑中之相互作用及其與以下所論述的試劑之相互作用係概述於以下反應圖中:
所發展之肽係使用以下方法抑制cdc25c之Chk2失活作用。所有的肽均使用標準Fmoc化學,於Advanced ChemTech(Louisville,KY) Apex 396 Multiple Peptide Synthesizer上合成。在裂解之後,使用逆相C-18管柱,經由HPLC純化肽,及隨後藉由質譜分析法分析。使用LC/MS/MS系統(ABI API2000)確認一級序列,及完成製備性純化。此特定實例中所用的所有肽(SEQ ID NO:2-6及8-10)均已於羧基末端醯胺化(-CONH2
)。
SEQ ID NO:2-6及8-10對於cdc25c的Chk2磷酸化作用之抑制性活性係根據製造商說明書,使用購自Calbiochem/EMD Biosciences(San Diego,CA)之K-LISATM
檢查點活性套組測量。此等測試之經活化人類Chk2酶係獲自Sigma(St. Louis,MO)。一般的激酶抑制劑,星形孢菌素(10 μM最終濃度)係用作抑制Chk2活性之正對照組。個別測試之肽(SEQ ID NO:2-6,8-10)係與Chk2,在50 μg/mL的最終濃度下培養。簡言之,K-LISATM
分析法利用一種能夠使第三個絲胺酸經Chk2磷酸化(亦可經Chk1蛋白質磷酸化)之生物素基化肽受質(KKKVSRSGLYRSPSMPENLNRPR,SEQ ID NO:12)。此受質可作為cdc25c之替代物,因為SEQ ID NO:12包含用於經Chk2之絲胺酸磷酸化之目標序列。
該具有或不具有添加製劑(星形孢菌素或SEQ ID NO:2-6,8-10中之一)之含Chk2的生物素基化受質肽及樣品係在ATP的存在下,於經抗生物鏈菌素塗佈之96孔板之孔中培養。培養可使受質被Chk2磷酸化,及以單一步驟捕捉到受質。繼培養之後,使用抗磷酸絲胺酸初級抗體、與辣根過氧物酶(HRP)共軛之二級抗體及用於顯色之TMB(四甲基聯苯胺)受質(該初級及二級抗體,及TMB係於K-LISATM
套組中提供)檢測磷酸化之受質。藉由添加該套組中所提供之停止反應液來提高分析敏感度。讀取各孔在雙重波長450/540 nm處之吸收率,而測定相對Chk2活性。
SEQ ID NO:2、3、5、6、8及10均可抑制Chk2對抗受質肽(圖2)之活性。例如,SEQ ID NO:10使Chk2磷酸化作用活性減少約48%,其接近由星形孢菌素表現之抑制活性(約69%)。SEQ ID NO:5、6及8具有類似的抑制Chk2之能力。總體而言,此等數據顯示,某些肽可降低Chk2趨向其受質(即cdc25c)之活性,其進一步顯示,降低細胞週期阻滯程度之能力可在活體內細胞接觸到DNA-損傷製劑時開始。
本文所揭示及主張之所有組合物及方法不需過度試驗即可根據本揭示案進行。雖然本發明之組合物及方法已以某些實施例之形式闡述,但熟悉此項技術者應明瞭,可在不偏離本發明之概念、主旨及範疇下對該等組合物及/或方法及文中所述之步驟或方法步驟中之順序做出改變。更特定言之,應瞭解某些試劑化學及生理學上皆相關之試劑可替代文中所述之試劑,但仍可達到相同或相似的結果。熟悉此項技術者所明瞭之所有該等類似的替代及改變仍在本發明之範疇內。
本申請案所指出之所有專利及公開案均以引用的方式併入本文中。
<110> 美商赫里克斯生物醫療公司
<120> 抗紫外線毒性之肽保護
<130> 11181.0043.00PC00
<140> 099140066
<141> 2010-11-19
<150> 61/262,790
<151> 2009-11-19
<160> 19
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
<210> 2
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
<210> 3
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
<210> 4
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
<210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
<210> 6
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 6
<210> 7
<211> 7
<212> PRT
<213> 智人
<400> 7
<210> 8
<211> 7
<212> PRT
<213> 智人
<400> 8
<210> 9
<211> 6
<212> PRT
<213> 智人
<400> 9
<210> 10
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<400> 10
<210> 11
<211> 529
<212> PRT
<213> 智人
<400> 11
<210> 12
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 激酶受質
<400> 12
<210> 13
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<221> SITE
<222> (2)..(2)
<223> Leu或Ile
<220>
<221> SITE
<222> (4)..(4)
<223> Gln或Glu
<400> 13
<210> 14
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<400> 14
<210> 15
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<400> 15
<210> 16
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<400> 16
<210> 17
<211> 543
<212> PRT
<213> 智人
<400> 17
<210> 18
<211> 476
<212> PRT
<213> 智人
<400> 18
<210> 19
<211> 473
<212> PRT
<213> 智人
<400> 19
圖1顯示某些通常彼此結合的本發明肽(SEQ ID NOs:1-10)及SEQ ID NO:11(人類酪胺酸酶)之胺基酸序列。在某些肽(SEQ ID NOs:1-7)中,下面劃綫的殘基構成SEQ ID NO:11之保留性胺基酸取代物。
圖2顯示星形孢菌素或某些本發明肽對檢查點激酶2(Chk2)活性之抑制。對照組Chk2活性係用第一個長條表示。圖中所示肽(SEQ ID NOs:2-6及8-10)係於羧基末端醯胺化(-CONH2
)。
圖3顯示人類Chk2(SEQ ID NO:17)之胺基酸序列。此序列係與美國國家生物技術資訊中心(NCBI)網站(或GenBank)中以寄存編號AAH04207所揭示的相同。
圖4顯示人類Chk1(SEQ ID NO:18)之胺基酸序列。此序列係與NCBI網站(或GenBank)以寄存編號AAC51736所揭示的相同。
圖5顯示人類cdc25c(SEQ ID NO:19)之胺基酸序列。此序列係與NCBI網站(或GenBank)以寄存編號AAR32098所揭示的相同。
(無元件符號說明)
Claims (16)
- 一種肽之用途,其係製備用於降低活化細胞週期檢查點激酶活性之藥物,其中該肽之序列係SEQ ID NO:2、3、5、6、8或10,且其中該肽係游離酸或在羧基端醯胺化。
- 如請求項1之用途,其中該檢查點激酶係檢查點激酶-2(Chk2)。
- 一種肽之用途,其係製備用於治療哺乳動物皮膚以減少紫外線暴露有關之毒性之藥物,其中該肽之序列係SEQ ID NO:2、3、5、6、8或10,且其中該肽係游離酸或在羧基端醯胺化。
- 一種肽,其係由SEQ ID NO:3、5、6、8或10所示序列組成。
- 如請求項4之肽,其中該肽係SEQ ID NO:10。
- 如請求項4或5之肽,其係用作藥物。
- 如請求項6之肽,其係用作治療暴露於UV光之皮膚損傷或保持健康皮膚之藥物。
- 一種組合物,其包含如請求項4或5之肽及醫藥上可接受載劑。
- 如請求項8之組合物,其中該組合物係呈噴霧劑、乳液、液體、洗液(lotion)、乳膏、糊、軟膏、粉末或泡沫之形式。
- 如請求項8或9之組合物,其係用於皮膚護理。
- 如請求項8或9之組合物,其係用於保持健康皮膚特徵。
- 如請求項11之組合物,其中該健康皮膚特徵係選自由色調、彈性、含水性、著色、穩定及光滑所組成之群組。
- 如請求項8或9之組合物,其係用於治療光老化之作用。
- 如請求項13之組合物,其中該光老化之作用係選自由起皺紋、色斑及/或色素沉著過度、皮膚粗糙或皮革狀、下垂或鬆垂、變黃、乾燥及皮膚贅生物所組成之群組。
- 一種如請求項4或5之肽之用途,其係用於製備化妝品。
- 一種如請求項4或5之肽之用途,其係製備用於治療暴露於UV光之皮膚損傷或保持健康皮膚之藥物。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US26279009P | 2009-11-19 | 2009-11-19 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW201138851A TW201138851A (en) | 2011-11-16 |
TWI494129B true TWI494129B (zh) | 2015-08-01 |
Family
ID=44060329
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW099140066A TWI494129B (zh) | 2009-11-19 | 2010-11-19 | 抗紫外線毒性之肽保護 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8597902B2 (zh) |
EP (1) | EP2512498B1 (zh) |
KR (1) | KR101764171B1 (zh) |
CN (1) | CN102791281B (zh) |
CA (1) | CA2779863C (zh) |
ES (1) | ES2551697T3 (zh) |
HK (1) | HK1170419A1 (zh) |
PL (1) | PL2512498T3 (zh) |
RU (1) | RU2565535C2 (zh) |
SM (1) | SMT201500305B (zh) |
TW (1) | TWI494129B (zh) |
WO (1) | WO2011063090A2 (zh) |
ZA (1) | ZA201203397B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI698249B (zh) * | 2018-12-27 | 2020-07-11 | 三凡生技研發股份有限公司 | 短鏈胜肽組合物於保護眼睛抗光害之應用 |
CN112535733A (zh) * | 2020-12-04 | 2021-03-23 | 中南大学湘雅三医院 | tRFs在UV辐射致皮肤急性损伤的产品中的应用 |
CN113683662B (zh) * | 2021-03-05 | 2022-11-04 | 四川大学 | 一种防护紫外皮肤损伤的多肽 |
CN114569702B (zh) * | 2022-03-07 | 2022-10-18 | 上海揽微赛尔生物科技有限公司 | 含有抗衰老活性肽与干细胞的药物组合物 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5962417A (en) * | 1996-03-28 | 1999-10-05 | Trustees Of Boston University | Methods of modulating melanin synthesis |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006015385A2 (en) | 2004-08-06 | 2006-02-09 | Sopherion Therapeutics, Inc. | Anti-angiogenic peptides and methods of use thereof |
EP2514766A3 (en) * | 2007-03-29 | 2013-06-05 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Antibodies, methods and kits for diagnosing and treating melanoma |
-
2010
- 2010-11-18 PL PL10832158T patent/PL2512498T3/pl unknown
- 2010-11-18 WO PCT/US2010/057177 patent/WO2011063090A2/en active Application Filing
- 2010-11-18 US US13/508,564 patent/US8597902B2/en active Active
- 2010-11-18 RU RU2012125260/10A patent/RU2565535C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-11-18 CA CA2779863A patent/CA2779863C/en active Active
- 2010-11-18 ES ES10832158.9T patent/ES2551697T3/es active Active
- 2010-11-18 CN CN201080052918.0A patent/CN102791281B/zh active Active
- 2010-11-18 KR KR1020127014031A patent/KR101764171B1/ko active IP Right Grant
- 2010-11-18 EP EP10832158.9A patent/EP2512498B1/en active Active
- 2010-11-19 TW TW099140066A patent/TWI494129B/zh active
-
2012
- 2012-05-09 ZA ZA2012/03397A patent/ZA201203397B/en unknown
- 2012-11-07 HK HK12111216.1A patent/HK1170419A1/zh unknown
-
2015
- 2015-12-09 SM SM201500305T patent/SMT201500305B/it unknown
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5962417A (en) * | 1996-03-28 | 1999-10-05 | Trustees Of Boston University | Methods of modulating melanin synthesis |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ZA201203397B (en) | 2013-08-28 |
ES2551697T3 (es) | 2015-11-23 |
CN102791281B (zh) | 2014-12-17 |
US20120225023A1 (en) | 2012-09-06 |
EP2512498A4 (en) | 2013-06-05 |
SMT201500305B (it) | 2016-01-08 |
US8597902B2 (en) | 2013-12-03 |
PL2512498T3 (pl) | 2016-03-31 |
HK1170419A1 (zh) | 2013-03-01 |
WO2011063090A3 (en) | 2011-08-18 |
CA2779863C (en) | 2020-07-21 |
KR20120116926A (ko) | 2012-10-23 |
CN102791281A (zh) | 2012-11-21 |
RU2565535C2 (ru) | 2015-10-20 |
WO2011063090A2 (en) | 2011-05-26 |
TW201138851A (en) | 2011-11-16 |
EP2512498A2 (en) | 2012-10-24 |
EP2512498B1 (en) | 2015-09-16 |
RU2012125260A (ru) | 2013-12-27 |
KR101764171B1 (ko) | 2017-08-02 |
CA2779863A1 (en) | 2011-05-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101855235B (zh) | 保护性皮肤护理四肽 | |
KR20150002825A (ko) | 피부 및/또는 점막의 치료 및/또는 관리용 화합물 및 미용적 또는 약학적 조성물에서의 이의 용도 | |
TW201333045A (zh) | 用來抑制經活化受體之胜肽及其於化妝或醫藥組成物中之用途 | |
KR20210097729A (ko) | 피부 병태를 개선하기 위한 폴리펩타이드 및 방법 | |
TWI494129B (zh) | 抗紫外線毒性之肽保護 | |
WO2017009485A1 (en) | Topical compositions | |
CN114729015B (zh) | 具有抗衰老效果的多肽及其用途 | |
KR101151397B1 (ko) | 피부재생용 기능성화장료조성물 | |
WO2022094437A1 (en) | Polypeptides having anti-inflammatory effects and uses thereof | |
US20220396600A1 (en) | Peptides with cell damage protection activity and liposomial formulations | |
JP2024075684A (ja) | 皮膚症状を改善するためのポリペプチドおよび方法 | |
EP4244234A1 (en) | Polypeptides and methods for improving skin conditions | |
Mulekar et al. | Koebnerization of donor site in unilateral vitiligo patients, treated successfully by autologous, noncultured melanocyte‐keratinocyte (MK) cell transplantation |