TWI441640B - 促進營養素被吸收的醫藥組合物及茯苓萃取物 - Google Patents

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Description

促進營養素被吸收的醫藥組合物及茯苓萃取物
本發明係有關一種使用羊毛固醇類化合物來促進營養素被吸收的新用途，尤其有關一種含有羊毛固醇類化合物作為促進營養素被吸收的有效成分的醫藥組合物。
本案申請人於我國發明專利申請案第92113393號(公開號200425900，2004年12月1日公開)揭示了一種用以提昇人體免疫力之醫藥組合物，此組合物含羊毛固醇(lanostane)類化合物作為有效成分。該發明亦提供一種提昇人體免疫力的茯苓萃取物，包含5－60重量%的羊毛固醇類化合物且實質上不含開環羊毛固醇(secolanostane)類化合物。該萃取物係萃取自多孔菌科植物茯苓菌(Porea cocos (Schw)Wolf)之代謝產物或醱酵產物或茯苓菌菌絲。
一般來說，要使人體更健康、有活力，對營養素的吸收是非常重要的。如腸胃道細胞對營養素的吸收狀況良好，這些營養素能被人體細胞利用，就是健康身體的基礎。例如葡萄糖被細胞轉化為高能物質(ATP)，人體細胞利用ATP，可執行組織器官功能，如心臟跳動、神經傳導、骨骼肌的運動。因此促進營養素被吸收的物質或方法，不僅是相關領域研究者、也是所有人所關切的課題。
本發明的一主要目的係提供一種使用羊毛固醇類化合物來促進營養素被吸收的新用途。
本發明的另一目的係將羊毛固醇類化合物作為食品或飲料添加物來促進營養素被吸收。
本發明的還有另一目的係提供一種含有羊毛固醇類化合物作為促進營養素被吸收的有效成分的醫藥組合物。本發明所指的「醫藥組合物」一詞除了其字面意義外，進一步包括營養補充品組合物，該營養補充品組合物除了營養素外還包含作為促進營養素吸收的有效成分的羊毛固醇類化合物。
本發明所提供的一種促進營養素為一哺乳類動物(例如人類)吸收的醫藥組合物，包含一促進營養素吸收有效量作為有效成分的具下列化學式(I)的羊毛固醇或其醫藥容許鹽： 其中R1 為H或CH3 ；R2 為OCOCH3 ，＝O或OH；R3 為H或OH；R4 為－C(＝CH2 )－C(CH3 )2 Ra ，其中Ra 為H或OH，或 －CH＝C(CH3 )－Rb ，其中Rb 為CH3 或CH2 OH；R5 為H或OH；及R6 為CH3 或CH2 OH。
較佳的，該羊毛固醇(I)具有具下列化學式：
較佳的，本發明的組合物其含有0.1－20重量%的羊毛固醇(I)或其醫藥容許鹽。
較佳的，本發明的組合物為口服的。
本發明的又一目的係使用一茯苓萃取物作為該羊毛固醇(I)的來源，該茯苓萃取物包含1－60重量%的具前述式(I)的羊毛固醇且實質上不含開環羊毛固醇。
較佳的，該茯苓萃取物係由包含下列步驟的方法所製備：a)以一水，甲醇，乙醇或它們的混合溶劑萃取茯苓菌的代謝物，茯苓菌的醱酵產物或茯苓菌菌絲；b)濃縮步驟a)萃取所獲得的液體；c)將步驟a)所獲得的濃縮物導入一矽膠管柱；d)以一低極性沖提劑(eluent)沖提該矽膠管柱，及收集所產生的溶離液(eluate)；及e)濃縮步驟d)的溶離液。
較佳的，從步驟e)所獲得的溶離液的濃縮物以矽膠薄層層析法分析具有一層析值(Rf)0.1，其中以紫外光燈及碘作檢側，展開液為二氯甲烷：甲醇＝96：4。
較佳的，步驟a)的萃取所使用的溶劑為95%酒精。
較佳的，步驟a)包含以沸水萃取茯苓菌的代謝物，茯苓菌的醱酵產物或茯苓菌菌絲；加入一鹼至該萃取水溶液至其pH值9－11；分離出該鹼性水溶液；加入一酸至該鹼性水溶液至其pH值4－7，以產生沈澱物；分離出該沈澱物；再以酒精萃取該沈澱物，並分離出萃取液體。
較佳的，步驟b)的濃縮物被進一步以一體積比為1：1的95% v/v甲醇水溶液及正己烷的兩相溶劑萃取；分離出甲醇層；及濃縮該甲醇層，所獲得的濃縮物被用作為步驟c)的矽膠管柱的進料。
較佳的，步驟d)的低極性沖提劑為體積比為96.5：3.5的二氯甲烷及甲醇的混合溶劑。
較佳的，該茯苓萃取物包含5－35重量%的羊毛固醇(I)。
較佳的，本發明的組合物進一步包含一營養素，例如葡萄糖、胺基酸、維生素或其組合。
本發明以具式(I)的羊毛固醇或其醫藥容許鹽，或前述茯苓萃取物作為促進營養素吸收的有效成分可應用在下列諸狀況：(1)老年人營養狀況改善，老年人因老化關係其消化系統也隨之衰退，常造成吸收功能也變差，營養狀況因而不足，服用該有效成分顯然有助於營養狀況改善。(2)瘦弱小孩身體改善，小孩在成長過程中有些因體質問題，身體瘦弱無法因營養素增加供應而改善，服用該有效成分顯然有助於身體瘦弱改善。(3)工作壓力大的人或經常熬夜趕工作的人，此類人因壓力引起之身心症而造成胃腸功能受 到影響，吸收不良為病症之ㄧ，進而衍生出疲勞、精神不振之後遺症，故此類人可藉借助服用該有效成分來改善。(4)運動量大之運動員或工作量大之勞工/上班族常需補充營養素，因工作量大或耗體力大的人，相對應的是能量(ATP)消耗量也大，常需補充能量而能量最主要是由葡萄糖而來，因此加速補充葡萄糖有利於能量製造，因此對於尋求佳績之運動員及工作表現勞工/上班族，服用該有效成分是有效補充葡萄糖之方法。(5)手術或癌症病人(接受化療或放射療法)造成身體虛弱，急需要補充營養素(含胺基酸、葡萄糖、維他命)來改善，如搭配服用該有效成分顯然有助於病人快速恢復健康。(6)病毒性腹瀉，小孩在冬春時期，常會發生不同病毒感染引起之感冒症狀及腹瀉(病毒之一，如輪狀病毒)，嚴重者會因腹瀉造成水、電解質及營養素流失而死亡，故已知具有免疫增強功能(殺滅病毒)的本發明的有效成分，再加上其具有營養素吸收能力，會因協同作用引導水分隨營養素吸收(改變滲透壓)而進入人體，因此阻止腹瀉而拯救孩童生命。綜合上述6項應用，本發明的有效成分可以被添加在奶粉、飲料、食品作為營養目的，也可作成醫藥品，如錠劑、膠囊、顆粒劑、液劑、注射劑等形式出現，用於醫療目的。
由現代的生物化學知道人類從飲食中獲得的營養素有非常多的種類，其中能被人體利用吸收而產生能量或細胞 基礎代謝所必須的營養素主要有葡萄糖(glucose)、胺基酸(amino acid)和維他命(vitamin)等類。然而這些營養素並不能自由進出人體的組織或細胞，而是受到嚴密的機轉所調控。此種情形與一般我們服食化學物質(如藥物)被人體吸收情形不同，化學物質則是利用濃度差異性以擴散方式進出人體。但是營養素在細胞間的出入則不同，必須由特定的輸送蛋白質或是細胞膜上的特別的管道(channel)來負責。以下利用人體腸道對葡萄糖吸收來說明。首先，腸腔內的輸送蛋白質與鈉離子結合使輸送蛋白質產生結構上的改變，因而打開葡萄糖結合部份。葡萄糖與鈉離子共同結合輸送蛋白質引起此輸送蛋白質的構型改變，而讓葡萄糖與鈉離子能進入細胞內(面向細胞內)。鈉離子先離開進入細胞內，進而引起葡萄糖與輸送蛋白質的不穩定。最後，葡萄糖也離開而進入細胞內，而脫去葡萄糖與鈉離子兩者的輸送蛋白質也重新回到原來面對腸腔的方向。當細胞內的葡萄糖累積至一定量時，便藉由另一類輸送蛋白質，此類蛋白質是屬於協助擴散性運輸(facilitated diffusion)蛋白質，使葡萄糖利用濃度梯度的方式離開腸細胞進入血管中。
Caco2細胞為一種由人體大腸癌衍生的細胞株，此細胞株最大的特色是能自主性地快速分化成類似人類腸道之具有極性的細胞單層膜(monolayer)。一般培養兩到三星期後，Caco2細胞會分化形成具有高度水解能力的絨毛狀邊緣(brush border)以及細胞間的緊密連結(tight junctions)，成為能阻隔及控制物質通透的細胞單層膜。Caco2細胞的單層膜具有與腸道相似的電阻值，其約300 Ω cm2 左右。除此之外，在Caco2細胞單層膜上也被證實具有各種營養素的輸送蛋白質，包含如胺基酸、葡萄糖及維他命等之運輸蛋白質。因此，Caco2細胞形成之單層膜常被用於研究藥物或營養素穿透腸道細胞之實驗或測試，而其測試結果用以說明人類腸道細胞對於藥物或營養素的吸收作用，也為熟習相關領域者所接受[Hidalgo IJ,al.,Gastroenterology ,1989；96：736－749.；Artursson P.,J Pharm Sci, 1990；79：476－482.]。
由於中國傳統醫學對長得瘦小之小孩，或身體因老化變得衰弱老人，或因生病或因疾病(其中之一如癌症)而開刀，身體變成虛弱之病人，均會採用強壯性中藥來改善或治療身體，使他們變回健康之身體，但是強壯性中藥如何改善身體朝向健康狀態？有可能是經由強壯中藥本身即為營養素之提供者，亦有可能是增強營養素吸收，也有可能是透過上述二種情形來增強人體之營養狀態。如果經由增強營養素吸收機制，則那些有效成分能夠影響運輸蛋白，至今也未有人在此方面提出科學上之證據。故利用上述Caco2細胞吸收營養素之實驗即可證明強壯性中藥萃取物及/或強壯性中藥純化成分具有此種增進營養素吸收。本案發明人在利用Caco2細胞篩選典型強狀性中藥(人參、黃耆)研究時，同時對非典型之強壯性中藥，茯苓也進行研究，結果意外發現茯苓萃取物及其中的羊毛固醇具備了增強營 養素通過Caco2細胞之能力事實。
本發明所揭示之可促進營養素為一哺乳類動物(例如人類)吸收的茯苓萃取物，其製備方法與前述我國發明專利公開號200425900所揭示的方法相同，包括利用傳統萃取法萃取茯苓得到一粗萃取物，再經由層析法，分成極性小之羊毛固醇(lanostane)類部位(以二氯甲烷：甲醇(96：4)為沖提液)和極性大之開環羊毛固醇(secolanostane)類部位(以二氯甲烷：甲醇(90：10或0：100)為沖提液)，其中，利用矽膠薄層層析法，顯示出羊毛固醇(lanostane)類部位之所在位置，即展開溶媒為二氯甲烷－甲醇(96：4)時，層析值(Rf)為0.1；至於開環羊毛固醇(secolanostane)類成分，則層析值小於0.1。用矽膠管柱層析法可進一步分離該羊毛固醇類部位，其中沖提液使用二氯甲烷：甲醇(97：3至95：5)，分離出數種羊毛固醇(lanostane)類化合物。
下面結合實施例對本發明做進一步詳細的描述，但不以此限制本發明。
實施例1
以雲南產茯苓30公斤，磨成粉後，利用120 L酒精(濃度95%)萃取24小時，及過濾分離。再重復前述萃取及固液分離三次。合併濾液，並將之濃縮後得乾燥萃取物265.2克。再利用一兩相萃取劑(己烷：95%甲醇＝1：1)對該乾燥萃取物進行分配萃取。取出甲醇層並加予濃縮後得到乾燥固體246.9克。利用矽膠管柱層析對該乾燥固體進行分 離，該矽膠管柱填充有該乾燥固體重量10－40倍的矽膠，係購自Merck公司，Silica gel 60,70－230 mesh。以二氯甲烷/甲醇混合液作為沖提劑(eluent)，依序以96：4、90：10、0：100比例的混合液進行沖提，溶離液(eluate)以矽膠薄層層析法(Thin Layer Chromatography)(紫外光燈及碘作檢測，展開液為二氯甲烷：甲醇＝96：4)檢測成分，將相同成分合併。
以二氯甲烷－甲醇(96：4)混合液進行矽膠管柱層析，可得到屬PCM部份78克，PCM部份依上述矽膠薄層層析法可明顯看到6個跡點。以二氯甲烷：甲醇(90：10)及(0：100)沖提液層析合併可得到PCW部份168克。
PCM部份進一步以二氯甲烷：甲醇(96.5：3.5)作為沖提劑進行矽膠管柱層析(同上述矽膠管柱)，進一步分離可得純化之羊毛固醇(lanostane)類成分K1(K1－1及K1－2),K2(K2－1及K2－2),K3,K4,K4a,K4b,K5,K6a及K6b。詳細分離步驟及鑑定分析數據請參見我國發明專利公開號200425900。
上述之K1至K6b化合物，其結構如下：
從PCM部份分離出來羊毛固醇化合物K1至K6b的產量如下表所示。PCM部份含有約15重量%的羊毛固醇化合物K1至K6b。
實施例2
本發明之實施例1所製備的羊毛固醇化合物K1,K2,K3及K4，及該PCM萃取物依下列方法來評估其促進營養素吸收的功效。
人類Caco－2細胞之培養及營養素之吸收測試 於本實施例的羊毛固醇化合物或PCM萃取物促進Caco2細胞對營養物如：葡萄糖、胺基酸、維生素等之吸收測試中，Caco2細胞被種在Polycarbonate Membrane Transwellinserts(No.3414,Corning Incorporated,NY,USA)上，每隔2~3天換一次細胞培養液，待14~21天後， Caco2細胞會形成單層膜。利用Millicell－ERS(Millipore EVOM－6；World Precision Instrument,Sarasota,FL,USA)測其上下兩側形成的電阻值(trans－epithelial electrical resistance,TEER)，當TEER達到300~450 Ω cm2 ，並且Caco2細胞呈現出分化的邊緣絨毛狀(brush border)後，即可用以進行營養物吸收的測試。Caco2單層膜以含不同濃度的待測物的細胞培養液培養兩天，其中血清均為charcoal－dextran處理過的胎牛血清(CD－FBS)。培養兩天後，用PBS洗滌一次，改換以不含特定營養物的緩衝液(如測定葡萄糖吸收時，以不含葡萄糖之緩衝液)培養1小時，接著將該緩衝液更換為含有一預定濃度的該特定營養物及放射線標定的營養物之新鮮緩衝液，以追蹤該營養物分子穿過Caco2單層膜之速率。放射線標定的營養物例如[14 C]－D－葡萄糖或[14 C]－D－2－去氧葡萄糖，[3 H]－L－精胺酸(arginine),[3 H]－L－色胺酸(tryptophan),[3 H]－葉酸(folic acid)。同時測定碳－14或氫－3標定之－D－木醇糖是用以確定Caco－2細胞單層膜之完整性[參考文獻：Artursson,P.,J Pharm Sci ,1990,79：476－482；Ferraris RP,et al.,Am J Physiol ,1993,264：G285－G293.]。
葡萄糖吸收之分析測定 人類Caco－2細胞植於transwell，待分化形成完整的單層膜。測定前，細胞單層膜先以待測物處理兩天，再以不含葡萄糖之緩衝液(組成成分為80 mM NaCl,100 mM mannitol,20 mM Tris－HCl,pH 7.4,3 mM K2 HPO4 ,1 mM CaCl2 ,1 mg/ml BSA)培養1小時後，然後將膜上層之緩衝液更換為含有終濃度為10 mM葡萄糖，其中含有2 μCi/mL之碳－14標定之D－葡萄糖或D－去氧葡萄糖(60 mCi/mmol,American Radiolabeled Chemicals,St.Louis,MO,USA)之新鮮緩衝液，以追蹤葡萄糖分子穿過Caco2單層膜之速率。在特定時間點自下層緩衝液取出10 μL測定其放射強度，其數值經換算為葡萄糖濃度，代表該時間點下層緩衝液葡萄糖分子之濃度。除了測定TEER值外，此實驗同時測定碳14標定之－D－木醇糖是用以確定Caco－2細胞單層膜之完整性；而碳14標定之－L－葡萄糖則用以測定不經葡萄糖運輸蛋白途徑吸收之非專一性背景值。放射強度數值經換算，代表該時間點通過Caco－2細胞單層膜到下層的葡萄糖分子濃度。就各時間點的下層葡萄糖濃度對時間點作圖，並以數值分析方法得出一直線，其斜率代表在該濃度的待測物處理下，葡萄糖分子通過Caco－2細胞單層膜之平均速率。實驗中之控制組(control)是指未以待測物處理所得之數據。以上測定方法主要參考文獻如下：Kimura T.et al.,J .Pharm .Pharmacol .,2001,54,213－219.
胺基酸吸收之分析測定 胺基酸如精胺酸及色胺酸之吸收，係以Caco2單層膜以含不同濃度的待測物的細胞培養液，培養兩天後，用PBS洗滌一次，改換以不含該胺基酸之緩衝液(測精胺酸的成分為：137 mM NaCl,10 mM Hepes pH 7.4,0.3 mMNaH2 PO4 ,0.3 mM K2 HPO4 ,5.4 mM KCl,2.8 mM CaCl2 .1 mM MgSO4 , 10 mM glucose；而測色胺酸吸收時的緩衝液組成為：137 mM氯化膽鹼(choline chloride),10 mM Hepes pH 7.4,0.6 mM KH2 PO4 ,5.4 mM KCl,2.8 mM CaCl2 ,1 mM MgSO4 ,10 mM葡萄糖)，培養1小時後，利用氫－3標定的胺基酸(L－3 H－amino acid)來觀察Caco2單層膜在不同濃度的待測物作用下對胺基酸的吸收是否有所影響。除了測定TEER值外，此實驗同時測定氫－3標定之－D－木醇糖是用以確定Caco－2細胞單層膜之完整性。放射強度數值經換算，代表該時間點通過Caco－2細胞單層膜到下層的胺基酸分子濃度。就各時間點的下層胺基酸濃度對時間點作圖，並以數值分析方法得出一直線，其斜率代表在該濃度的待測物處理下，胺基酸分子通過Caco－2細胞單層膜之平均速率。實驗中之控制組(control)是指未以待測物處理下所得之數據。以上測定方法主要參考文獻如下：PanM.,et al.,Am J Physiol .Gastrointest Liver Physiol 1995,268：G578－G585.
葉酸吸收之分析測定 將人類Caco－2細胞植於10－cm培養盤，待約二星期之後分化完成後即進行測定。測定前，細胞先以各種濃度的待測物處理兩天，再以不含葉酸之緩衝液(Folate transport incubation buffer (pH6.0)：Hank’s Balanced Salt Solution (HBSS),supplemented with 0.14 g/L CaCl2 ,0.1 g/L MgCl2 ,and 0.1 g/L MgSO4 )培養1小時後，然後更換為含有終濃度為5 μM葉酸，其中含有2 μCi/mL之氫－3標定之葉酸(3,5,7,9－3 H－folic acid,25 mCi/mmol,ARC,St.Louis,MO, USA)之新鮮緩衝液。在特定時間點將細胞以PBS洗過，然後以0.2 mL之0.2 N NaOH使細胞溶解打破，刮下集中離心。取出定量上清細胞液用以測定蛋白質濃度，並取上清細胞液20 μL測定葉酸分子吸收進入並累積於Caco2細胞內之濃度。計算得數值代表該時間點Caco－2細胞中相等蛋白質量的細胞液內所含有之葉酸分子濃度。就各時間點的細胞內之葉酸濃度對時間點作圖，並以數值分析方法得出一直線，其斜率代表在該濃度待測物處理下葉酸分子被吸收進入Caco－2細胞之平均速率。實驗中之控制組(control)是指未以待測物處理下所得之數據。以上測定方法主要參考文獻如下：Dudeja PK.,et al.,Am J Physiol Gastrointest Liver Physi ,2001,281(1)：G54－G60.
結果 (1)實施例1的PCM萃取物對促進2－去氧葡萄糖被腸細胞(Caco－2)吸收的影響被示於表一。表一顯示該PCM萃取物在低劑量下(0.0033 μg/cc)具有顯著的促進2－去氧葡萄糖被腸細胞(Caco－2)吸收的功效。
(2)實施例1所製備的羊毛固醇化合物K1,K2,K3及K4對葡萄糖營養素被腸細胞(Caco－2)吸收的影響被示於表二及圖1至3。如表二所顯示羊毛固醇化合物K2,K3及K4在低劑量下(1 μM－0.001 μM)對葡萄糖營養素被腸細胞吸收有促進作用。如圖1至圖3所顯示，K2－K4能促進吸收葡萄糖而且吸收呈線性關係，此種線性關係表示茯苓成分透過影響或增加運輸蛋白而使葡萄糖被吸收能力增加。K1雖無作用但其為K2之前驅物(prodrug)，易於在腸中或血中被轉化成k2而成為有效物質。
(3)實施例1所製備的羊毛固醇化合物K1,K2,K3及K4對胺基酸(精胺酸及色胺酸)營養素被腸細胞(Caco－2)吸收的影響被示於表三及表四，及圖4至10。如表三所示，K1,K2,K3及K4在低劑量下(1 μm－0.001 μM)下對精胺酸 被腸細胞(Caco－2)吸收有促進作用。如表四所示K1,K3及K4低劑量下(1 μm－0.001 μM)下對色胺酸被腸細胞(Caco－2)吸收有促進作用。而有意義的是腸細胞在低劑量羊毛固醇化合物下(1 μm－0.001 μM)下能促進此二種胺基酸的吸收而且吸收是呈線性關係，如圖4至10所示。此線性關係表示這些羊毛固醇化合物透過影響或增加運輸蛋白使此二種胺基酸被吸收能力增加。
(4)實施例1所製備的羊毛固醇化合物K1,K2,K3及K4對維他命葉酸營養素被腸細胞(Caco－2)吸收的影響被示於表五及圖11至14。如表五所示，K1,K2,K3及K4在低劑量下(0.1 μM－0.001 μM)對葉酸被腸細胞(Caco－2)吸收有促進作用。而有意義的是腸細胞在低劑量羊毛固醇化合物下(1 μm－0.001 μM)下能促進葉酸的吸收而且吸收是呈線 性關係，如圖11至14所示。此種線性關係表示這些羊毛固醇化合物是透過影響或增加運輸蛋白而使葉酸吸收能力增加。
實施例3
茯苓藥材100公斤以800公斤水煮沸3小時後，靜置冷卻至50℃，以5N NaOH調節溶液至pH 11，再攪拌溶液3小時。接著以離心機分離液體和固體，固體再以800公 斤水加入，同上述方法，以NaOH調至pH 11、攪拌和離心機分離，去掉固體。合併兩次液體，在50℃將液體真空濃縮至100公斤溶液，再加入3N HCl至pH 6.5，產生沈澱物。分離出該沈澱物，再以40 L H2 O清洗，接著以離心機分離出沈澱物，加入8 L水噴霧乾燥(spray dry)，得到約380 g粉末。再以4 L酒精萃取該粉末三次，合併萃取液並濃縮可得238.9克酒精萃取物，再經過HPLC分離該萃取物，每克該萃取物可得主成分為K2 185.93mg，K3 20.34 mg，K4 15.82 mg及少量成分K1 4.52mg，即萃取物每克約含226.07 mg羊毛固醇(lanostanes)。
實施例4：膠囊製備
依下列組成製備含有實施例1所製得的PCM成份的膠囊：
將PCM與矽鋁酸鈉分別以# 80目(mesh)篩網過篩，馬鈴薯澱粉以# 60目篩網過篩，硬脂酸鎂以# 40目篩網過篩 後，置入混合機攪拌均勻，接著填充入壹號空膠囊，每顆膠囊含有約1.68 mg(0.42 wt%)的有效成份K1－K6。
圖1至圖3分別顯示本發明羊毛固醇化合物K2、K3及K4對葡萄糖被腸細胞(Caco－2)吸收的影響。
圖4至圖7分別顯示本發明羊毛固醇化合物K1、K2、K3及K4對精胺酸被腸細胞(Caco－2)吸收的影響。
圖8至圖10分別顯示本發明羊毛固醇化合物K1、K3及K4對色胺酸被腸細胞(Caco－2)吸收的影響。
圖11至圖14分別顯示本發明羊毛固醇化合物K1、K2、K3及K4對葉酸被腸細胞(Caco－2)吸收的影響。

Claims (19)

  1. 一種使用選自具下列群組的化學式的羊毛固醇於製備用於促進營養素為一哺乳類動物吸收的藥物的用途，其中該營養素為胺基酸、維生素或其組合， 所組成的群組。
  2. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物含有0.1-20重量%的羊毛固醇或其醫藥容許鹽。
  3. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物為口服的。
  4. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該哺乳類動物為人類。
  5. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該羊毛固醇係由茯苓以層析法分離得到的。
  6. 如申請專利範圍第5項的用途，其中該羊毛固醇係由包含下列步驟的方法所製備：a)以一水，甲醇，乙醇或它們的混合溶劑萃取茯苓菌的代謝物，茯苓菌的醱酵產物或茯苓菌菌絲；b)濃縮步驟a)萃取所獲得的液體； c)將步驟a)所獲得的濃縮物導入一矽膠管柱；d)以一低極性沖提劑(eluent)沖提該矽膠管柱，及收集所產生的溶離液(eluate)；及e)濃縮步驟d)的溶離液。
  7. 如申請專利範圍第6項的用途，其中從步驟e)所獲得的溶離液的濃縮物以矽膠薄層層析法分析具有一層析值(Rf)0.1，其中以紫外光燈及碘作檢側，展開液為二氯甲烷：甲醇=96：4。
  8. 如申請專利範圍第6項的用途，其中步驟a)的萃取所使用的溶劑為95%酒精。
  9. 如申請專利範圍第6項的用途，其中步驟a)包含以沸水萃取茯苓菌的代謝物，茯苓菌的醱酵產物或茯苓菌菌絲；加入一鹼至該萃取水溶液至其pH值9-11；分離出該鹼性水溶液；加入一酸至該鹼性水溶液至其pH值4-6，以產生沈澱物；分離出該沈澱物；再以酒精萃取該沈澱物，並分離出萃取液體。
  10. 如申請專利範圍第8或9項的用途，其中步驟b)的濃縮物被進一步以一體積比為1：1的95% v/v甲醇水溶液及正己烷的兩相溶劑萃取；分離出甲醇層；及濃縮該甲醇層，所獲得的濃縮物被用作為步驟c)的矽膠管柱的進 料。
  11. 如申請專利範圍第6項的用途，其中步驟d)的低極性沖提劑為體積比為96.5：3.5的二氯甲烷及甲醇的混合溶劑。
  12. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物與一營養素合併使用。
  13. 如申請專利範圍第12項的用途，其中該營養素為胺基酸、維生素或其組合。
  14. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於老年人營養狀況改善。
  15. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於瘦弱小孩身體改善。
  16. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於促進營養素被工作壓力大的人或經常熬夜趕工作的人所吸收。
  17. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於促進營養素被運動量大之運動員或工作量大的人所吸收。
  18. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於手術後的病人或接受化療後的癌症病人。
  19. 如申請專利範圍第1項的用途，其中該藥物被用於患有病毒性腹瀉的病人。
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