TWI424852B - 抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途 - Google Patents

抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途 Download PDF

Info

Publication number
TWI424852B
TWI424852B TW099111628A TW99111628A TWI424852B TW I424852 B TWI424852 B TW I424852B TW 099111628 A TW099111628 A TW 099111628A TW 99111628 A TW99111628 A TW 99111628A TW I424852 B TWI424852 B TW I424852B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
antibody
monoclonal antibody
antibodies
chimeric
heavy
Prior art date
Application number
TW099111628A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201103559A (en
Inventor
De Acosta Del Rio Cristina Maria Mateo
Lopez Ana Maria Vazquez
Requena Alejandro Lopez
Marrero Yuniel Fernandez
Lopez Yosdel Soto
Navarro Victor Brito
Original Assignee
Centro Inmunologia Molecular
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42355373&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TWI424852(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Centro Inmunologia Molecular filed Critical Centro Inmunologia Molecular
Publication of TW201103559A publication Critical patent/TW201103559A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI424852B publication Critical patent/TWI424852B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途
本發明關於可特異辨識且對腦苷硫酸酯類和硫酸化蛋白聚糖類具高親和力之新穎單株抗體(MAb)。本發明亦關於包含本發明之單株抗體或自該等抗體衍生之片段的醫藥組成物。此外，本發明關於包含本發明之單株抗體或彼等之片段的用於診斷心血管疾病之試劑套組。
經過超過30年硏發用於取得老鼠單株抗體之雜交瘤技術(Koehler y Milstein Nature,256：495-497,(1975)後，已證實這些單株抗體在疾病診斷及基礎硏究中極為有用，但僅有20種抗體已登記用於人體療法(Pharma Vitae,Monoclonal Abs Update,6-363,2008)中。此大部分係基於當將該等抗體注射至患者體內時，其在血液中之半衰期短且因該等抗體之老鼠來源而致使人體免疫系統及免疫反應對老鼠效應子之功能的辨識不良(HAMA反應，人類抗老鼠抗體之首字字母縮寫)。數個硏究已顯示投服外來抗體後，患者所產生之免疫反應可能相當強且可在初次治療後實質上排除該治療上有用之抗體。再者，根據Khazaeli,M. B. y col. Journal of Immunotherapy 15：42-52(1994)之報告，給予患者老鼠單株抗體後，接著以無關連之老鼠抗體治療將會因為交叉反應性之HAMA反應而可能無效或甚至有危險。
從上述資料可知，吾人需要取得在人體中較無致免疫性，且其取得較容易且經濟並適合用於製造治療性調製劑和其他用途之治療性抗體。Morrison S. L. y col. Adv Immunol.,44：65-92(1989)。
現已開發數種方法將來自小鼠或大鼠之抗體人化，從而在將這些外來蛋白質注射入人體時減輕針對彼等之異種反應。降低致免疫性之首要嘗試之一為製造“嵌合性抗體”，該嵌合性抗體中老鼠蛋白質之可變區係連接人分子之恆定區，其不僅可達到降低致免疫性，且亦可活化免疫效應子功能(Morrison S. L. y col. PNAS USA,81：6851-6855(1984)。此等嵌合型分子維持原始抗體關於抗原結合之特性，但其恆定區則無致免疫性。
動脈粥狀硬化及其後果對全世界人口有很大的影響，且在已開發國家(Melin,A. y col. Am. J. Pathol.,155：775,1999)及自數年前開始在古巴(OMS,2004,Anuario Estadstico,MINSAP,2007)為發病率及死亡率之主要原因。
動脈粥狀硬化為一種多因素性質之慢性發炎疾病，其對心肌梗塞和腦梗塞之致病、壞疽及失去肢體功能極具影響。Greaves,D. R. y col. Trends Immunol 22：180-181(2001)；Ross,R. y col. Am Heart J 138(5 Pt 2)：S419-20(1999)。
動脈粥狀硬化的主要原因之一為高脂血症。通過動脈壁之低密度脂蛋白(LDL)經由與蛋白聚糖交互作用而被捕捉在動脈內膜之胞外基質中並發生氧化修飾。與動脈內膜之蛋白聚糖結合的脂蛋白易於改變脂質及蛋白質部分(諸如氧化作用及酶催化性水解，此作用使其致動脈粥樣化電位增加)。ApoB-100含有數個區，透過這些區ApoB-100可與蛋白聚糖之葡糖胺聚糖鏈結合(ApoB-100與該蛋白聚糖共同含有數種鹼性胺基酸)(Camejo,G.,E. y col. Atherosclerosis 139：205-22,(1998)；Chang,T. Y. y col. Curr Opin Lipidol 12：289-96(2001)；Camejo,G.,U. y col. Atheroscler Suppl 3：3-9(2002)。
葡糖胺聚糖上之負電密度影響與LDL之交互作用，硫酸化程度影響LDL與蛋白聚糖之交互作用。Sambandam T. y col. Arterioascler Thromb,11：561-568(1991)。
再者，氧化之LDL可經由此等細胞表面上之清除受體而被巨噬細胞內化，造成細胞內膽固醇累積，接著形成泡沫細胞。這些情況代表開始發炎反應之主要步驟，其中涉及單核細胞/巨噬細胞、肥大細胞、樹突細胞、T細胞及NKT。Camejo,G. y col. Atherosclerosis 139(2)：205-22(1998)；Hurt-Camejo,E. y col. Invest Clin 42 Suppl 1：43-73(2001)；Skalen,K.,M. y col. Nature 417：750-754(2002)。實驗證據證明存在巨噬細胞表面上之蛋白聚糖涉及氧化之LDL與此等細胞結合並涉及這些顆粒之內化或納入，而最終會形成泡沫細胞。Halvorsen B. y col. Biochem J. 331：743-752(1998)。
很清楚地，採取較健康之生活型態並使用抗血栓及降脂劑對降低發展心血管疾病之風險有影響，但此等方法仍不足以完全排除這些風險。
如上述，動脈粥狀硬化為一種多重因素之發炎疾病，其中有多種抗原在該疾病之發展中很重要，因此開發用於主動及被動免疫療法的不同策略以取得對此疾病之較大治療作用。
這些策略之一係增加HDL之療法，因為HDL-膽固醇與心血管疾病間之關係相反。CETP為HDL代謝中之關鍵酶且被認為係一種可能之治療標的，因為其活性降低時可增加HDL之濃度。使用疫苗來誘導能結合並抑制CETP之功能的抗體的策略已描述於WO 1997/041227及WO 2006/133196中。然而，最近之硏究顯示使用CETP抑制劑Torcetrapib之第三期臨床試驗失敗已使此策略令人懷疑。Nicholls S. J. y col. Circulation. 9；118：2506-14(2008)；Hermann M. y col. Curr Hypertens Rep,11：76-80(2009)。某些作者描述使用氧化之LDL作為免疫原之疫苗以抑制動脈粥狀硬化斑塊形成。Palinski W. y col. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92：821-25(1995)；Ameli S y col. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 16；1074-79(1996)；Freigang S. y col. Arterioscl. Thromb. Vasc. Biol. 18：1972-82 9(1998)；Zhou X y col. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 21：108-14(2001)；George J. y col. Atherosclerosis 138：147-52(1998)；Fredrikson G. N. y col. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 23：879-84(2003)；US 2008-0070265A1。另一種策略係硏發以氧化之載脂蛋白C-Ⅲ的特殊片段為基礎的預防性及治療性疫苗以誘導能預防或減少動脈粥狀硬化損傷形成的免疫反應(WO 2001/064008,WO 2003/020765,WO 2004/080375及WO 2004/081045)。
另一種記載之疫苗方法係以與醛共軛之肽為基礎(諸如MDA或4-HNE)以誘導可與T細胞之α/β受體交互作用而預防動脈粥狀硬化損傷形成之抗體(WO2001/068119)。
某些作者主張對抗動脈粥狀硬化中之病原以防止發展動脈粥狀硬化斑塊之疫苗的重要性(WO 1998/033510,US 006291437 B1,US 6471965 B1,US006808713 B1)。
另一種提出之延遲或減輕由攝入膳食膽固醇所引起之動脈粥狀硬化的嚴重性的策略係使用對抗固醇的疫苗(US 2002/0018808 A1)。
作為治療工具之被動免疫療法亦可在動脈粥狀硬化中扮演重要角色。已描述經由使用對抗經氧化或改質之Apo B100片段的人抗體以治療或預防動脈粥狀硬化之被動免疫(US 005196324a ,US 2007/0098725 A1,US 2008/0075716 A1)。
此外，以特異於磷醯膽鹼之抗體進行之被動免疫已被提出以作為用於治療或預防動脈粥狀硬化之治療組合(US 2007/0286868 A1,US 2007/0122419 A1)。
另一描述之策略係使用特異結合人M-CSF之抗體或抗原結合片段(US 2007326414 B2)。
使用防止單核細胞黏附血管內皮之單株抗體以防止該細胞侵入內皮及周圍組織為此疾病之另一種治療方法(US 005541296 A)。
已描述使用單株抗體作為糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受體之抑制劑以抑制血小板凝結(WO 1999/052551,US 005976532 A)。
另外，取得對抗C-Ⅲ載脂蛋白之保護性肽抗原決定部位的人單株抗體以供用於被動免疫療法(WO 2004/081046)。
再者，使用靜脈內免疫球蛋白(IVIG)可具有動脈保護效果。Udi N y y col. Autoimmunity reviews 7：445-452(2008)。過去未曾描述過可與腦苷硫酸酯類及硫酸化蛋白聚糖類反應，或辨識巨噬細胞及動脈粥狀硬化損傷之嵌合型單株抗體，且當以低劑量投服時，此等嵌合性抗體能抑制動脈粥狀硬化損傷形成並可誘導對抗該等硫酸化分子之抗體反應。
 本發明之詳細說明：
本發明關於其特性為可辨識腦苷硫酸酯類及硫酸化蛋白聚糖類之單株抗體或自彼等衍生之片段。
本發明之抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類抗體宜為單株抗體。本發明之範圍內亦包括抗體片段，諸如本專利說明書中所提供之抗腦苷硫酸酯且抗硫酸化蛋白聚糖抗體的Fab片段、Fab'、Fab'-SH及F(ab')2。這些抗體片段可藉由習知方法(諸如酶催化性分解)製造，或可藉由重組技術產生。這些抗體片段可為嵌合型或人化。這些片段可用於本說明中所列出之診斷及治療目的。本發明亦包括實質上純質之抗體及片段的較佳體系。
於一特殊之較佳體系中，本發明之抗體特徵為下列重鏈及輕鏈可變區的序列：
重鏈：
HCDR1 RYSVH
HCDR2 MIWGGGSTDYNSALKS
HCDR3 SGVRRGRAQAWFAY
HFR1 QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLS
HFR2 WVRQPPGKGLEWLG
HFR3 RLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAMYYCAR
HFR4 WGQGTLVTVSA
輕鏈：
LCDR1 KASQDVSTAVA
LCDR2 SASYRYT
LCDR3 QQHYSTPWT
LFR1 DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITC
LFR3 GVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYC
LFR4 FGGGTKLELK
此外，本發明之抗體包括在重鏈之人IgGl恆定區及在輕鏈之人CK 。
本發明包含組成物，包括含有本發明之抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類抗體或自彼等衍生之片段的醫藥組成物。如本專利說明書中所使用者，該組成物包含一或多種結合腦苷硫酸酯類及硫酸化蛋白聚糖類之抗體。
這些組成物可進一步包含合適之載體，諸如藥學上可接受之賦形劑(包括本技藝熟知之緩衝溶液或佐劑)。
於另一較佳體系中，本發明關於包含單株抗體之醫藥組成物，該單株抗體之重鏈及輕鏈的可變區序列顯示於下。
重鏈：
HCDR1 RYSVH
HCDR2 MIWGGGSTDYNSALKS
HCDR3 SGVRRGRAQAWFAY
HFR1 QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLS
HFR2 WVRQPPGKGLEWLG
HFR3 RLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAMYYCAR
HFR4 WGQGTLVTVSA
輕鏈：
LCDR1 KASQDVSTAVA
LCDR2 SASYRYT
LCDR3 QQHYSTPWT
LFR1 DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITC
LFR2 WYQQKPGQSPKLLIY
LFR3 GVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYC
LFR4 FGGGTKLELK
於第三種觀點中，本發明關於可用於診斷動脈粥狀硬化損傷之試劑套組，其包括一種本發明之抗體或自彼等衍生之片段。更特別地，該試劑組包含具有上述之重鏈及輕鏈可變區序列的單株抗體。
於另一種觀點中，本發明關於本發明之抗體於治療心血管疾病(尤其是那些顯示出動脈粥狀硬化損傷之跡象者)的用途。
抗體一詞通常係指單株抗體，更特別地，係指老鼠單株抗體或嵌合型抗體。
取得抗體：
一般而言，本發明之抗腦苷硫酸酯且抗硫酸化蛋白聚糖類單株抗體可藉由雜交株方法取得，該雜交株方法首先係由Kohler，等人描述於Nature,256:495(1975)中，其為先以自天然或合成來源取得之糖脂萃取物將老鼠免疫化。將來自免疫化之老鼠的脾臟細胞與雜交株細胞P3.X63Ag8 6.5.3融合，再將其依描述培養在選擇性介質中並藉由ELISA偵測在培養上清液中之免疫球蛋白來選擇所產生之選殖株。
鑑定可產生具有所需之特異性、親和力及/或活性之抗體的雜交株細胞後，可藉由限制性稀釋程序將產製抗體之選殖株分殖並可藉由細胞培養生長之標準方法長成(Goding,Monoclonal Abs：Principles and Practice,pags. 59-103(Academic Press,1986))。適合用於此目的之培養介質包括，例如：D-MEM或RPMI-1640介質。再者，雜交株細胞可在動物體內以腹水腫瘤之形式生長。
藉由習知之用於純化免疫球蛋白之程序(例如：蛋白質A-瓊脂糖凝膠、羥基磷灰石層析法、凝膠電泳法、透析或親和力層析法)從培養介質、腹水或血清中適當地分離出由分殖株分泌之單株抗體。
本發明之抗體亦可藉由遺傳工程技術正確地處理老鼠免疫球蛋白基因來取得。例如：本發明之嵌合型抗體可藉由習知之用於處理基因之技術(諸如增數、選殖、基因定序及分解，以及本技藝中所描述之其他方法，例如：Sambrook et al.,Molecular Cloning；A Laboratory Manual 3rd. edition(2001)Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor,N. Y. Current Protocols in molecular biology(F. M. Ausubel,et al. eds.,(2003))；Ia serie Methods in Enzimology(Academic Press,Inc.)：PCR 2：A practical approach(M. J. MacPherson,B. D. Hames y G. R. Taylor eds.(1995 )),Harlow y Lane,eds.(1988)ABS,Alaboratory manual,y Animal cell culture(R. I. Freshney,ed.(1987))中所描述者)從產製老鼠單株抗體之細胞純化出RNA來取得。
抗體可變區之cDNA合成作用及PCR增數作用(聚合酶鏈反應之縮寫)可從編碼老鼠抗體之RNA開始進行，合成cDNA，藉由PCR將VK及VH可變區增數(此可依照用於本技藝此目的之習知技術完成)。
分別將各重及輕鏈之PCR產物選殖入用於基因定序之載體中。利用任何用於此目的之方法(例如：根據製造者之說明書，使用T7 DNA聚合酶二脫氧基核苷酸方法)為所產生之選殖株定序。
經由將中間產物構造以限制酶分解來取得重VH及輕VK鏈之可變區基因並根據用於建構嵌合型基因之習知技術選殖入個別表現載體中。任何已描述過之可有效表現重組蛋白質(尤其是單株抗體)之載體均可用於這類目的中。
表現嵌合型抗體時可使用NS0細胞，將包含在含有該抗體基因之個別表現載體中的DNA構造物經由電穿孔送入該NS0細胞中。令這些細胞生長在選擇介質中。使用ELISA(酶聯結之免疫吸附分析)經由測量培養上清液來偵測製造免疫球蛋白的選殖株。
選擇具有所需之特異性及功能的抗體：
於某些較佳體系中，本發明之抗體可藉由本技藝中用於此目的之已曾描述的不同技術(例如：使用ELISA)來偵測。
於本發明之某些較佳體系中係分析所產製之抗體的生物活性。於一些較佳體系中係測試本發明抗體之抗原結合活性。
本專業中已知及可用於本專利說明書中之抗原結合分析包括使用，諸如西方點墨、放射免疫分析、ELISA、雙抗體免疫分析(三明治)、免疫沈澱分析、螢光免疫分析及蛋白質A免疫分析之技術的直接或競爭性結合分析，等。抗原結合之說明性分析包含在稍後之實例部分中。
此外，本發明中可鑑定能製造可辨認人類主動脈組織切片中之動脈粥狀硬化斑塊的抗體之選殖株，此可利用本技藝中所描述之習知免疫組織化學技術來完成。
於另一觀點中可測量本發明之抗體誘導老鼠體內抗肝素反應之能力。為此，以本發明之抗體將不同組之動物免疫化並測試這些動物之血清樣本中是否有抗肝素抗體存在。
於另一觀點中可測量本發明抗體之抗動脈粥狀硬化的效果，為此，可使用以力保肪寧(Lipofundin)誘導兔子體內之動脈粥狀硬化損傷的模型(Takcs E,Hrsing J,Fzesi S,Jellinek H. 1986 Arteriosclerosis developing in rabbits after lipofundin administration. Morphol Igazsagugyi Orv Sz. 26：99-105；Noa M & Ms R(1992 )Ateromixol y Iesin aterosclertica en conejos inducida por Iipoundin. Progresos en Ciencias Mdicas,6：14-19)。
醫藥組成物：
於一較佳體系中，本發明提供包含一或多種本發明抗體之醫藥組成物。於一較佳體系中，包含抗體之組成物進一步包含藥學上可接受之賦形劑。
於一觀點中，本發明提供包含一或多種本發明抗體之試劑套組，此外，可包含一種緩衝溶液。於一較佳體系中，該緩衝溶液為藥學上可接受者。於一較佳體系中，包含抗體之組成物亦包括載體分子，其於某些較佳體系中為藥學上可接受者。於一較佳體系中，試劑套組亦包括用於投服或使用該組成物之指示(如：抗體投至個體)。
供保存之包含本發明抗體的醫藥組成物係經由將抗體與具所需純度之載體分子、可選擇之生理學上可接受的賦形劑或安定劑(Remington：The Science and Practice of Pharmacy 20th edition(2000))混合，製備成水溶液(凍乾的)或其他凍乾形式之調製劑。該可接受之載劑、賦形劑或安定劑在所有使用之劑量及濃度下對接受者而言為非毒性。
本發明之單株抗體存在於醫藥組成物中之合併量對所欲目的為有效之量。
用於活體內投服之調製劑必須為無菌。此係經由通過無菌過濾膜過濾來取得。
於一觀點中，本發明顯示如何使用本發明之抗體製備用於失調(諸如心血管疾病)之治療性及/或預防性治療的藥物。
本發明之抗體可用於治療、抑制、延遲動脈粥狀硬化損傷惡化，預防/延遲動脈粥狀硬化損傷開始，改善及/或預防與一或多種抗原分子之表現及/或活性相關之疾病、失調或進程。
根據本發明，這些抗體之治療劑量將在每劑量10微克至10毫克間，宜為每劑量100微克至1毫克間。
本發明之單株抗體係藉由任何合適方式投服，包括腸胃道外、皮下、腹膜內、肺內及鼻內途徑，且若需要局部治療時，可藉由病灶內途徑投服。
於另一觀點中，本發明提供用於診斷失調(諸如心血管疾病)之試劑套組。
下列實例係欲說明本發明而非限制本發明之範圍。
除非另外指明，下列實例中所有使用之限制酶或修飾酶以及試劑和材料係從市面上購得。
實例1.　藉由牛腦腦苷硫酸酯類之嵌合型單株抗體抗-SO3進行辨識
使用ELISA，以50微升/槽之在甲醇中之濃度為4微克/毫升的牛腦腦苷硫酸酯溶液塗覆PolySorp盤(Nunc)並將分析盤培育在37℃下90分鐘以將溶劑蒸發。然後，在室溫下，以200微升/槽之含有1%牛血清白蛋白(SAB)的磷酸鹽緩衝溶液(PBS)將分析盤封閉1小時。稍後，加入50微升/槽在PBS中之不同濃度的嵌合型抗體抗-SO3並在37℃培育1小時。然後，以PBS清洗分析盤，並加入50微升/槽之與鹼性磷酸酶(Sigma)共軛的山羊抗血清抗-人γ鏈。將分析盤在37℃培育1小時後，再次清洗之並加入100微升/槽之在二乙醇胺緩衝劑(pH9.8)中的1毫克/毫升對-硝苯基磷酸酯受質溶液。在室溫培育30鐘後，在ELISA讀計中測量反應產物在405nm之吸收。
使用在嵌合型單株抗體抗-SO3之位置98處重鏈可變區中以S取代R的經改質之嵌合型單株抗體作為陰性對照組。第1圖顯示出不同嵌合型單株抗體對抗腦苷硫酸酯類的反應性。該圖形顯示出即使在低至0.01毫克/毫升之濃度下，該嵌合型單株抗體抗-SO3-仍可辨識腦苷硫酸酯類。相反地，該在98位置處被修改之嵌合型單株抗體並未顯示出任何反應性。
實例2.肝素辨識試驗
接著，評估嵌合型單株抗體抗-SO3-是否認為硫酸化分子較腦苷硫酸酯類更複雜。選擇肝素進行此硏究，肝素係可作為硫酸化葡糖胺聚糖模型的高度硫酸化分子。
根據由Skalen,K. M. y cols(Nature 417：750-754,2002)硏發之用於雙糖鏈蛋白聚糖的ELISA技術來進行抗肝素反應性之分析，但進行些微修正。以濃度為10微克/毫升(100微升/槽)之在Hepes緩衝之生理食鹽水溶液(HBSS)(20mM Hepes，150mM NaCl，pH7.4)中的肝素(史格馬(Sigma))塗覆Maxisorp微量滴定盤(Nunc)並將分析盤在4℃培育一整夜。以HBSS清洗盤三次，然後，以含有1% SAB之HBSS(HBSS-BSA)在室温下將分析盤封閉1小時。以HBSS-吐溫20 0.02%(HBSS-T)清洗盤三次並在室溫下，在1小時內加入在結合緩衝液(10mM Hepes，20mM NaCl，2mM CaCl2 ，2mM MgCl2 ，pH7.4)中之嵌合型單株抗-SO3之系列稀釋液，其起始濃度為40微克/毫升。使用在嵌合型單株抗體抗-SO3之位置98處重鏈可變區中以S取代R的經改質之嵌合型抗體作為陰性對照組。以HBSS-T清洗盤二次，再將分析盤在室溫下與在HBSS-T(含0.1%之SAB)中之與鹼性磷酸酶(Sigma-Aldrich，美國)共軛的山羊抗血清抗-人γ鏈一起培育1小時。進行所需之清洗後，利用溶解在二乙醇胺緩衝劑(pH9.8)中之對-硝苯基磷酸酯受質發展反應。在ELISA讀計(奥地利，Organon Teknica)中定量產物在405nm之吸收。
如第2圖所示，該嵌合型單株抗-SO3-對肝素具高度反應性。相反地，作為同功型對照組之經改質的嵌合型抗體在任何硏究濃度下並未顯示出反應性。
實例3：藉由流式細胞計數辨識J774細胞株
單核細胞和巨噬細胞在發炎過程(諸如動脈粥狀硬化)中很重要(Φ sterud B Bjrklid E. Physiol Rev 83：1069-1112,2003)。這些細胞可合成蛋白聚糖，且，在形成泡沫細胞時，巨噬細胞顯示出在其納入氧化之LDL的方式中有些係涉及細胞膜蛋白聚糖類(Halvorsen B,et al. Biochem J. 331：743--752,1998)。
為測定抗-SO3-嵌合型抗體是否可辨識巨噬細胞，吾人使用老鼠巨噬細胞株J774進行流式細胞計數實驗，該細胞係培養在補充有8%去活化之胎牛血清(SFT；吉布可(Gibco))、2mM L-麩醯胺、100 U/毫升青黴素、100微克/毫升鏈黴素之DMEM-F12(吉布可BRL；蘇格蘭，巴斯利)中。將細胞(每管0.5X106 )與20微升/管之去活化的兔子血清在37℃培育10分鐘，以封閉Fc-γ受體。接著，加入抗-SO3-嵌合型單株抗體及同功型對照組之經改質的嵌合型抗體(此二者均經生物素化，在含有1%牛血清白蛋白(密蘇里州聖路易斯，史格馬(Sigma)公司)及0.01%疊氮化鈉之PBS中，濃度為10微克/毫升)在冰浴中培育30分鐘。清洗細胞後，將其與稀釋200倍之鏈抗生物素蛋白-螢光異硫代氰酸酯複合物(賓州西葛洛夫，傑克森(Jackson)免疫硏究實驗室)在冰浴中培育30分鐘。清洗細胞後，將其再懸浮於含有1%疊氮化鈉之PBS中並在流式細胞儀(加州聖荷西貝克頓-狄金遜(Becton-Dickinson))上分析。
如第3圖所示，作為同功型對照組之嵌合型抗體並未辨識出細胞株J774。相反地，該抗-SO3-嵌合型抗體可辨識93.7%之細胞。
實例4.人類主動脈中之動脈粥狀硬化斑塊之辨識
在人類主動脈片段(其係在福馬林中固定並包埋在石蠟中)上進行嵌合型抗體抗-SO3-辨識之免疫組織化學測定。使用固定在矽烷化玻片上之4微米組織切片並在68℃培育12小時。將組織切片在二甲苯中脫去石蠟，並在逐漸降低濃度之乙醇中水化。然後，將其在蒸餾水中清洗5分鐘並在PBS中清洗。使用設定在100℃之溫度下的恆溫浴將抗原去除遮蔽。將盤浸沒在維持在恆溫浴之檸檬酸緩衝劑(pH6.0)中30分鐘，然後利用微波爐烤箱在檸檬酸緩衝劑(pH6.8)中沸騰10分鐘。令切片冷卻20分鐘，然後以蒸餾水和PBS清洗之。在室溫下，以3%H2 O2 溶液抑制內生性過氧化酶10分鐘，以PBS清洗之，在室溫下加入濃度為50微克/毫升之經生物素化的嵌合型抗體抗-SO3-及同功型對照組抗體30分鐘。稍後，以PBS清洗玻片並同時在相同溫度下加入鏈抗生物素蛋白-過氧化酶複合物(Anacrom Diagnostics)。最後，將組織切片與在1毫升基質緩衝劑中之3,3'-二胺基聯苯胺(DAB)的新鮮混合物溶液一起培育3至5分鐘。對比項係以邁耶蘇木(Mayer's hematoxylin)進行，將樣本在逐漸增加濃度之醇中脫水，在二甲苯中淨化，最後固定在永久介質盤Eukitt(Kinder有限公司)中。利用白光顯微鏡進行評估(萊卡)。
第4圖顯示抗-SO3-嵌合型抗體如何與存在主動脈中之動脈粥狀硬化損傷樣本强烈反應。其中可觀察到與載脂巨噬細胞或泡沫細胞之反應度及與損傷脂質核心之反應度(反應度以深棕色顯示)。該圖顯示作為同功型對照組之抗體如何未辨識出人類主動脈切片。
實例5：藉由抗-SO3-嵌合型抗體誘導老鼠體內抗肝素反應之能力
使用10隻BALB/c雌鼠；令其經由皮下途徑接受50微克在200微升中之抗-SO3-嵌合型抗體。每14天進行免疫化作用以完成全部共4個劑量。投服抗-SO3-嵌合型抗體，不加佐劑或載體蛋白。在第0天及49天(第4個劑量後7天)採取血清樣本。
利用實例2中所描述之ELISA技術，使用經塗覆肝素(10微克/毫升，100微升/槽)之Maxisorp盤測量經免疫化之動物血清中是否存有抗-肝素抗體。將老鼠血清在結合緩衝劑中稀釋100倍以供測試，100微升/槽。使用與鹼性磷酸酶(Jackson)共軛之山羊抗老鼠IgG及IgM抗血清作為二級抗體。
第5圖顯示出以在第0天及49天採取之老鼠血清進行之檢定的結果。任何動物之免疫前血清(第0天)中均未偵測到存有抗肝素抗體。相反地，以抗-SO3-嵌合型抗體將老鼠免疫化後可偵測到存有這些血清抗體。此結果指出該抗-SO3-嵌合型抗體不僅可強力辦認肝素，且具有令人驚訝之誘導對抗此分子的反應之能力(疫苗效果)。
實例6：抗-SO3-嵌合型抗體之抗動脈粥狀硬化作用
為了評估該抗-SO3-嵌合型抗體是否能在活體內產生生物作用，吾人使用先前描述之以力保肪寧誘導兔子體內之動脈粥狀硬化損傷的模型(Takcs E and cols. Morphol Igazsggyi Orv Sz,26：99-105,1998,Noa M & R. More Progress in Medical Sciences,6：14-19,1992)。
使用15隻紐西蘭兔子，將其分成3組，每組5隻。第1組不接受治療(陰性對照組)。第2組每日經由靜脈內途徑接受2毫升/公斤之力保肪寧20%(Braun)，共8天。在7天內經由皮下途徑給予第3組3個劑量之100微克在PBS中之抗-SO3-嵌合型抗體，最後一次免疫化當天開始每日投服力保肪寧，其投服計劃與第2組動物中所使用者相同。接受最後一個力保肪寧劑量後一天將所有兔子麻醉後殺死並在同一天殺死第1組陰性對照組動物。自動物取得主動脈，進行病理硏究以決定是否出現肉眼可見及顯微鏡可見之動脈粥狀硬化損傷。
來自未接受治療之第1組兔子的主動脈顯示出無肉眼可見之損傷。在所有來自第2組兔子(其接受8天之2毫升/公斤的力保肪寧)之主動脈中可觀察到肉眼可見之損傷。在先前接受3個劑量之抗-SO3-嵌合型抗體，再投予力保肪寧的兔子之主動脈中未觀察到肉眼可見之損傷。
為了硏究顯微鏡可見之損傷，將主動脈片段固定在福馬林中並包埋在石蠟中。使用固定在矽烷化玻片上之4微米組織切片並以蘇木紫-伊紅染色。利用白光顯微鏡(萊卡)進行評估。
如第6圖所示，當評估未接受治療之兔子的主動脈組織切片時，其均顯示出正常之動脈構造，並無改變。觀察來自接受力保肪寧之組別的所有兔子的主動脈切片之特有損傷時可觀察到：出現內膜增厚、胞外物質沈積在肌肉、彈性及膠原蛋白纖維間，及組織結構變形。相反地，來自接受3個劑量之抗-SO3-嵌合型抗體，再投服力保肪寧之三隻兔子的樣本並未觀察到顯微鏡可見之損傷。來自其餘二隻兔子之樣本中可觀察到動脈壁之某些區域中的某些不連接增厚中包含組織變化，且纖維間有胞外物質沈積。其中並無內膜增厚。
<110>　分子免疫學中心
<120>　ANTICUERPOS QUE RECONOCEN SULFATIDOS Y PROTEOGLIGANOS SULFATADOS Y SU USO.
<130>　Anticuerpo anti sulfatidos
<160>　14
<170>　PatentIn第3.5版
<210>　1
<211>　5
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　1
<210>　2
<211>　16
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　2
<210>　3
<211>　14
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　DNA重組技術
<400>　3
<210>　4
<211>　11
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　DNA重組技術
<400>　4
<210>　5
<211>　7
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　5
<210>　6
<211>　9
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　6
<210>　7
<211>　30
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　7
<210>　8
<211>　14
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　8
<210>　9
<211>　32
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　9
<210>　10
<211>　11
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　10
<210>　11
<211>　23
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　11
<210>　12
<211>　15
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　12
<210>　13
<211>　32
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　13
<210>　14
<211>　10
<212>　PRT
<213>　未知
<220>
<223>　藉由DNA重組技術
<400>　14
 第1圖.藉由抗-SO3-嵌合型單株抗體辨識腦苷硫酸酯類
將不同濃度之抗-SO3-嵌合型單株抗體及同功型對照組嵌合型單株抗體加至塗覆以腦苷硫酸酯(其係在甲醇中，濃度為4微克/毫升)的ELISA盤中。以與鹼性磷酸酶共軛之山羊抗-人γ鏈抗血清偵測反應性。在ELISA讀計中定量產物在405nm之吸收。(*p<0.05，曼－惠特尼U試驗法(Mann-Whitney U test))。
第2圖.藉由抗-SO3-嵌合型單株抗體辨識肝素
將不同濃度之抗-SO3-嵌合型單株抗體及同功型對照組嵌合型單株抗體加至塗覆以肝素(其係在HBSS中，濃度為10微克/毫升)的ELISA盤中。以與鹼性磷酸酶共軛之山羊抗-人γ鏈抗血清偵測反應性。在ELISA讀計中定量產物在405nm之吸收。(*p<0.05，曼－惠特尼U試驗法)。
第3圖.藉由抗-SO3-嵌合型單株抗體辨識J774細胞株
將細胞與10微克/毫升之生物素化的抗體一起培育。以與FITC共軛之山羊抗-人IgG抗血清進行反應並藉由流式細胞計數分析。
第4圖.藉由抗-SO3-嵌合型單株抗體辨識人類動脈粥狀硬化斑塊
將固定在福馬林中並包埋在石蠟中之人類主動脈片段(4微米)與生物素化之抗-SO3-嵌合型單株抗體及同功型對照組抗體一起培育。以鏈抗生物素蛋白-過氧化酶複合物進行反應。藉由抗-SO3-單株抗體辨識之抗原決定部位係以深棕色表示，而細胞核以蘇木紫進行對比染色。(400X)。
第5圖.以抗-SO3-嵌合型單株抗體免疫化所誘導之抗肝素的抗體反應
在以抗-SO3-嵌合型單株抗體進行免疫計劃之第0天及49天自BALB/c小鼠取得血清樣本並藉ELISA分析。各符號為以老鼠血清取得之數值。pI及hI：分別為免疫前及高度免疫(*p<0.05，曼-惠特尼U試驗法)
第6圖.　在兔子力保肪寧模型中抗-SO3-嵌合型單株抗體於動脈粥狀硬化損傷之發展中的治療效果。
觀察代表不同硏究組之兔子胸主動脈的組織切片。(A)第1組，未接受治療之動物，其顯示出動脈之正常構造，沒有變化。(B)第2組，以力保肪寧治療之動物，其中可觀察到動脈內膜增厚，胞外物質沈積在肌肉、彈性及膠原蛋白纖維間，及組織結構變形。(C和D)第3組，以抗-SO3-嵌合型單株抗體免疫化且稍後接受力保肪寧之動物；未觀察到明顯之組織傷害或內膜增厚。以蘇木紫-伊紅染色180X。

Claims (8)

  1. 一種特異結合腦苷硫酸酯類及硫酸化蛋白聚糖類之單株抗體，其中重鏈及輕鏈之可變區的互補決定區(CDRs)之序列顯示如下：重鏈HCDR1 RYSVH HCDR2 MIWGGGSTDYNSALKS HCDR3 SGVRRGRAQAWFAY輕鏈LCDR1 KASQDVSTAVA LCDR2 SASYRYT LCDR3 QQHYSTPWT；且其中重鏈及輕鏈之可變區內的框構區之序列顯示如下：重鏈HFR1 QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLS HFR2 WVRQPPGKGLEWLG HFR3 RLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAMYYCAR HFR4 WGQGTLVTVSA輕鏈LFR1 DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITC LFR2 WYQQKPGQSPKLLIY LFR3 GVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYC LFR4 FGGGTKLELK。
  2. 如申請專利範圍第1項之單株抗體，其中恆定區之序列在重鏈為人IgG1且在輕鏈為Ck。
  3. 一種醫藥組成物，其包含如申請專利範圍第1或2 項之單株抗體。
  4. 如申請專利範圍第3項之醫藥組成物，其進一步包含藥學上可接受之賦形劑。
  5. 如申請專利範圍第4項之醫藥組成物，其進一步包含佐劑。
  6. 一種用於診斷動脈粥狀硬化損傷之試劑套組，其包含如申請專利範圍第1或2項之單株抗體。
  7. 如申請專利範圍第1或2項之單株抗體，用於製造用於治療動脈粥狀硬化之藥物。
  8. 一種如申請專利範圍第1或2項之單株抗體作為特異性(idiotypic)疫苗的用途。
TW099111628A 2009-05-04 2010-04-14 抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途 TWI424852B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CU20090071A CU23736A1 (es) 2009-05-04 2009-05-04 Anticuerpos que reconocen sulfatidos y proteoglicanos sulfatados y su uso

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201103559A TW201103559A (en) 2011-02-01
TWI424852B true TWI424852B (zh) 2014-02-01

Family

ID=42355373

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW099111628A TWI424852B (zh) 2009-05-04 2010-04-14 抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途

Country Status (21)

Country Link
US (1) US8470322B2 (zh)
EP (1) EP2428521B1 (zh)
JP (1) JP5354823B2 (zh)
KR (1) KR101374263B1 (zh)
CN (1) CN102414222B (zh)
AR (1) AR076495A1 (zh)
AU (1) AU2010244859B2 (zh)
BR (1) BRPI1013991B1 (zh)
CA (1) CA2758994C (zh)
CL (1) CL2010000413A1 (zh)
CU (1) CU23736A1 (zh)
ES (1) ES2656849T3 (zh)
HK (1) HK1168362A1 (zh)
MX (1) MX2011011665A (zh)
MY (1) MY158954A (zh)
PE (1) PE20100808A1 (zh)
RU (1) RU2502744C2 (zh)
SG (1) SG175849A1 (zh)
TW (1) TWI424852B (zh)
WO (1) WO2010127642A1 (zh)
ZA (1) ZA201108832B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040253233A1 (en) * 2001-04-06 2004-12-16 Del Rio Cristina Mateo De Acosta Ganglioside-associated recombinant antibodies and the use thereof in the diagnosis and treatment of tumors

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5770198A (en) 1988-05-18 1998-06-23 The Research Foundation Of The State Of New York Platelet-specific chimeric 7E3 immunoglobulin
US5196324A (en) 1989-12-15 1993-03-23 Eli Lilly And Company Monoclonal antibodies reactive with a human atheroma associated antigen
US20020018808A1 (en) 1990-12-10 2002-02-14 Alving Carl R. Vaccines against sterols
US5541296A (en) 1991-08-30 1996-07-30 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University Monocyte adhesion protein and monoclonal antibody thereto
US6471965B1 (en) 1994-07-27 2002-10-29 Bio-Virus Research Incorporated Vaccine containing whole killed herpes viruses to prevent development of atherosclerotic plaque
JP4315257B2 (ja) * 1995-11-13 2009-08-19 生化学工業株式会社 新規コンドロイチン硫酸プロテオグリカン、そのコア蛋白質、それをコードするｄｎａおよびそれに対する抗体
ES2262179T3 (es) 1996-05-01 2006-11-16 Avant Immunotherapeutics, Inc. Vacuna basada en un plasmido para el tratamiento de la aterosclerosis.
WO1998006408A1 (en) 1996-08-14 1998-02-19 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods and compositions for preventing or retarding the development of atherosclerotic lesions
US6183752B1 (en) 1997-02-05 2001-02-06 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Restenosis/atherosclerosis diagnosis, prophylaxis and therapy
WO1999052551A1 (en) 1998-04-15 1999-10-21 King's College London Therapy of atherosclerosis
US6808713B1 (en) 1998-12-28 2004-10-26 Aventis Pasteur Limited Chlamydia antigens and corresponding DNA fragments and uses thereof
US20030100508A1 (en) * 1999-02-24 2003-05-29 Maryline Simon Carbohydrate epitope mimic compounds and uses thereof
MXPA02008616A (es) 2000-03-03 2003-02-24 Smithkline Beecham Biolog Vacuna para el tratamiento de la arterosclerosis.
SE0000855D0 (sv) 2000-03-15 2000-03-15 Karolinska Innovations Ab Antigenic composition useful as a vaccine against atherosclerosis
GB0121171D0 (en) 2001-08-31 2001-10-24 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
US20030105003A1 (en) 2001-04-05 2003-06-05 Jan Nilsson Peptide-based immunization therapy for treatment of atherosclerosis and development of peptide-based assay for determination of immune responses against oxidized low density lipoprotein
SE0302312D0 (sv) 2002-10-04 2003-08-27 Forskarpatent I Syd Ab Peptide-based passive immunization therapy for treatment of atherosclerosis
GB0305790D0 (en) 2003-03-13 2003-04-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel Composition
GB0305793D0 (en) 2003-03-13 2003-04-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB0305794D0 (en) 2003-03-13 2003-04-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
WO2004091520A2 (en) 2003-04-11 2004-10-28 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treating atherosclerosis
AR045563A1 (es) 2003-09-10 2005-11-02 Warner Lambert Co Anticuerpos dirigidos a m-csf
SE0302422D0 (sv) 2003-09-11 2003-09-11 Forskarpatent I Syd Ab Peptide-based immunization therapy for treatment of atherosclerosis
SI1797893T1 (sl) 2004-04-15 2010-08-31 Athera Biotechnologies Ab Protitelesa proti fosforilholinskim konjugatom
US20060276400A1 (en) 2005-06-06 2006-12-07 Hedy Adari Modulation of cholesteryl ester transfer protein (CETP) activity
FR2906533B1 (fr) * 2006-09-28 2013-02-22 Pf Medicament Procede de generation d'anticorps actifs contre un antigene de resistance,anticorps obtenus par ledit procede et leurs utilisations

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040253233A1 (en) * 2001-04-06 2004-12-16 Del Rio Cristina Mateo De Acosta Ganglioside-associated recombinant antibodies and the use thereof in the diagnosis and treatment of tumors

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A.M. Vázquez et al., "Generation of a Murine Monoclonal Antibody Specific for N-Glycolylneuraminic Acid-Containing Gangliosides That Also Recognizes Sulfated Glycolipids", Hybridoma, Vol. 14, No. 6, pp. 551~556, 1995 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2428521B1 (en) 2018-01-03
CA2758994C (en) 2015-07-21
ES2656849T3 (es) 2018-02-28
CU23736A1 (es) 2011-11-15
CN102414222B (zh) 2014-07-16
KR20120016055A (ko) 2012-02-22
HK1168362A1 (zh) 2012-12-28
US20120121605A1 (en) 2012-05-17
WO2010127642A9 (es) 2011-03-24
EP2428521A1 (en) 2012-03-14
AU2010244859A1 (en) 2011-12-08
AR076495A1 (es) 2011-06-15
MX2011011665A (es) 2012-06-01
MY158954A (en) 2016-11-30
RU2011149252A (ru) 2013-06-10
CN102414222A (zh) 2012-04-11
ZA201108832B (en) 2012-08-29
BRPI1013991A2 (pt) 2016-04-05
CA2758994A1 (en) 2010-11-11
SG175849A1 (en) 2011-12-29
TW201103559A (en) 2011-02-01
JP2012526056A (ja) 2012-10-25
AU2010244859B2 (en) 2014-05-29
JP5354823B2 (ja) 2013-11-27
RU2502744C2 (ru) 2013-12-27
WO2010127642A1 (es) 2010-11-11
KR101374263B1 (ko) 2014-03-13
US8470322B2 (en) 2013-06-25
BRPI1013991B1 (pt) 2021-08-31
CL2010000413A1 (es) 2011-02-25
PE20100808A1 (es) 2011-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5989299B2 (ja) リゾホスファチジン酸結合のための組成物と方法
CN110267985B (zh) 用于治疗眼科疾病的特异性针对过度磷酸化τ蛋白的抗体
US20130195874A1 (en) Anti-adrenomedullin (adm) antibody or anti-adm antibody fragment or anti-adm non-ig scaffold for reducing the risk of mortality in a patient having a chronic or acute disease or acute condition
EP2594587A1 (en) Anti-Adrenomedullin (ADM) antibody or anti-ADM antibody fragment or anti-ADM non-Ig scaffold for reducing the risk of mortality in a patient having a chronic or acute disease or acute condition
KR20080059449A (ko) 치료용 약제
WO2013072512A1 (en) Anti-adrenomedullin (adm) antibody or anti-adm antibody fragment or an anti-adm non-ig scaffold for use in therapy
CN109922826A (zh) 焦谷氨酸淀粉样蛋白-β的抗体及其用途
JP2012519190A (ja) 誤って折り畳まれたプリオンタンパク質に特異的な抗体およびエピトープ
CN103687871B (zh) 诊断和治疗多发性硬化症的方式和方法
TWI299666B (en) Peptide-based passive immunization therapy for treatment of atherosclerosis
CA2969635A1 (en) Method for the treatment of idiopathic pulmonary fibrosis
RU2654584C2 (ru) Новые антитела к фосфорилхолину
US9273125B2 (en) Human monoclonal antibody having fat-reducing effect
JP2022513481A (ja) 抗アルファ－シヌクレイン抗体およびその使用
TWI424852B (zh) 抗腦苷硫酸酯類且抗硫酸化蛋白聚糖類之抗體類及彼等之用途
US11529426B2 (en) Methods and compositions for targeting tissue lesions
EP2794660A2 (en) Antibodies for the treatment and diagnosis of affective and anxiety disorders
TW201938585A (zh) 阿茲海默氏症之新abeta變體、測定、方法及治療
NZ624875B2 (en) Anti-adrenomedullin (adm) antibody or anti-adm antibody fragment or an anti-adm non-ig scaffold for use in therapy
JP2011190202A (ja) サポシンａ特異的抗体及びその作成方法