TWI326687B - Amide prodrug of gemcitabine, compositions and use thereof - Google Patents

Description

1326687 » . • 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於吉西他濱（gemcitabine)之新穎醯胺前藥、 • 其組合物及其用途》 【先前技術】 本發明係關於吉西他濱（gemcitabine)之新賴前藥，盆At 、 /、月ti 經口服用’比母藥以更小之腸胃毒性及更好之生物可用性 穿過腸道而幾乎完好地進入門靜脈血流，且在更低劑量時 ® 就可維持母藥之藥效。 吉西他濱鹽酸鹽（2·，2·-二氟-2'-去氧胞苷鹽酸鹽）為一具 已知抗病毒作用之抗腫瘤藥劑，目前以可治療各種癌症之 凉·乾粉末調配物Gemzar®形式生產並出售。在美國專利第 5,464,826说及美國專利第4,808,614號中描述Gemzar®及 製備過程以及使用方法。目前認可Gemzar®可治療膜腺 癌、乳癌與非小細胞肺癌（NSCLC)，且對印巢癌的治療正 在評估中。另外’ Gemzar®可用於治療HCV且亦可用作免 疫功能調節劑（參見美國專利第6,555,518號）。目前藉由靜 脈經30分鐘注射大約1000至1250毫克/平方公尺之劑量投 藥Gemzar® ’每星期一次，直至七個星期，接著停藥一星 期。 吉西他濱（gemcitabine)之首次代謝使其口服生物可用性 低’限制了其口服用途。參見Shipley LA.等人的"Metabolism and disposition of gemcitabine, and oncolytic deoxycytidine analog，in mice，rats，and dogs"，Drug Metabolism & I07l56.doc 1326687

Disposition, 20 (6) : 849-55, 1992。另外，當經口投藥時’ 吉西他濱可能引起不良劑量限制之腸道損傷，其特徵為在 單獨口服（胃管灌食法）167，333或500毫克/公斤劑量之吉 西他濱之小鼠腸道全長中，黏膜上皮發生中度到顯著之損 耗（萎縮性腸病）。參見H〇rt〇n ND等人的"Toxicity of single-dose oral gemcitabine in mice" (American Association for Cancer Research，Poster Presentation, Orlando，FL，March 27-31，2004)。在先前小鼠研究中’措 由靜脈投藥之同等曝露未導致死亡或腸胃毒性。 在該項技術中熟知吉西他濱前藥及持續釋放調配物之製 備方法。該等前藥與持續釋放調配物之實例可在以下資料 中查到：WO 04/0412303 "Gemcitabine Prodrugs,

Pharmaceutical Compositions and Uses Thereof" ’ Gallop 等 人；WO 98/32762 的”Gemcitabine Derivatives”，Myhren及 Finn 等人；WO 02/09768 "Therapeutic polyesters and polyamides" Uhrich及 Kathryn E·; WO 02/76476 "Prodrugs of anticancer agents based on substituted aromatic acids" Greenwald及 Richard B·等人；WO 02/65988 "Terminally-branched polymeric linkers and polymeric conjugates as prodrug" Choe及 Yun Hwang 等人。 在該項技術中已描述吉西他濱酿胺衍生物在合成吉西他 濱中可用作中間體’例如參見Britton等人之美國專利第 5,420,266號以及<31"丨11心丫等人之美國專利第5,464,826號。吉 西他濱醯胺衍生物亦可用作用於投藥之吉西他濱之前藥部 107156.doc 1326687 分’例如參見Gallop等人的WO 04/041203。 現仍需要允許口服傳遞之吉西他濱之前藥，其能幾乎沒 有降解完好地穿過腸道’且以可接受之安全性及功效傳遞 吉西他濱至患病區。 令人吃驚的為我們已發現優良 '新穎之吉西他濱醯胺衍 生物’其幾乎完好地穿過腸上皮細胞；且其水解為吉西他 續’在肝臟中沒有顯者積聚吉西他濱之主要代謝物去氧二 氟尿苷（dFdU) ’其毒性小於口服吉西他濱，且經口投藥時 可維持適當之功效及安全概況。 【發明内容】 本發明提供式I之化合物：

本發明之另一態樣提供新穎醫藥組合物，其包括式〗之化 合物與一種或一種以上醫學上可接受之賦形劑。 本發明亦提供式I之化合物用於在需要兮 而受通等治療之哺乳 動物中治療易感性贅瘤之用途。 本發明提供式I之化合物用於在需要今笙 此山、 、 “要该專治療之哺乳動 物中治療易感性病毒感染之用途。 治療易感性贅瘤或 本發明亦提供式I之化合物用於製造 易感性病毒感染之藥物之用途。 107156.doc 1326687 另外’本發明亦提供製備式i之化合物之方法。 【實施方式】 簡要說明本文使用術語之含義。 術語"哺乳動物”意謂哺乳綱中各種溫血脊椎動物之任一 種’其特徵為毛髮覆蓋於皮膚上且在雌性中具餵養幼仔之 產乳乳膝’最佳為人類。 術語"醫學上可接受之賦形劑"係指醫學上可接受之調配 物載劑、溶液或可增強調配物特性之添加劑。該等賦形劑 必須與調配物其他成份相容且對其接受者無害且為熟習此 項技術者所熟知，例如參見Remingt〇ns pharmaceutical

Sciences，第 19 版，Mack 出版社（Mack Publishing

Company) » 1995 〇 術語"共晶體”意謂兩種或兩種以上分子之物理性結合， 其藉由非共價性交互作用來維持穩定性。該分子複合物之 一種或一種以上組份在晶格中提供穩定構架。在特定實例 中，將客體分子併入晶格中，如無水物或溶劑合物，例如 參見 Almarasson，0.等人之"Crystal Engineering Of the Composition of Pharmaceutical Phases. Do Pharmaceutical Co crystals Represent a New Path to Improved Medicines?",

The Royal Society of Chemistry，1889-1896，2004。較佳共 晶體包括對甲苯磺酸及笨磺酸β 術語"醫學上可接受之共晶體"意謂與調配物之其他成份 相容並對其接受者無害之共晶體。 術語"易感性贅瘤”係指在哺乳動物中組織之異常生長， I07156.doc 1326687 其可藉由式i之化合物的口服投藥來治療。因該前藥可水解 為吉西他濱，故預期投藥前藥將對抵抗各種各樣之腫瘤類 型具廣泛範圍活性，包括實體與非實體腫瘤。較佳情況為 易感性贅瘤包括T-細胞淋巴瘤、軟組織肉瘤、胰腺癌、乳 癌、霍奇金氏淋巴瘤（Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋 巴瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌以及膀胱癌。 本發明之化合物可用於治療病毒感染，尤其HCV。 術語”治療有效劑量"意謂由研究人員、醫師或臨床醫師 找出之可引起組織、系統或哺乳動物產生所要生物或醫學 反應的化合物/組合物劑量。

吉西他濱含有三種可衍生之官能基：3,羥基及5,羥基及 N4-胺基。使用適當保護基阻斷3,羥基及5，羥基之功能且隨 後醢化N4-胺基可製備式I之化合物。在該項技術中熟知且 認可典型保護基，參見Protecting Groups in QrpamV

Synthesis ’ 第二版 ’ Theodora Greene，Peter Wuts 編 (Wiley-Interscience))，1999。N4-胺基之醯化在諸如 N，N_ 二環己基碳化二醯亞胺（DCC)、N-乙基-N，-(3-二甲胺基丙 基）-碳化二醯亞胺（EDC)、1，卜羰基二咪唑（CDI)或其它熟習 有機化學技術者熟知之類似試劑的偶合劑存在下，藉由與 酸性氣化物或酸酐反應或與羧酸反應來達成。或者，不用 保護基亦可製備式I之化合物。在此狀況下，將形成單加入 物、二加合物與三加合物之混合物’且可將所要產物與混 合物相分離。 下列實例進一步說明本發明化合物之合成。所有起始物 107156.doc

劑在此項技術中熟知且得到認可的，且易獲得或 可由本文述之方法製備。例如在美國專利第（爾州號 中揭7Γ。西他濱（2，2·_二氟_2，_去氧胞苦）之製備方法。 實例1 1 (2,2 一氟-2-去氧·办呋喃核糖基η_(2丙基小氧戊 基）胺基°比咬-2-鲷

將2，，2，_二氟·2,_去氧胞普（10.〇公克，38.0毫莫耳）溶解於 無水°比啶（100毫升）中，且在氮氣下攪拌時冷卻至逐滴 加入三甲基氣理甲垸（24 ()毫升，19〇 〇毫莫耳），維持内部 溫度低於5°C。在〇t繼續搜摔兩小時。在—獨立燒瓶中， 溶解2-丙基戊酸（6.〇公克，41 8毫莫耳）於無水乙猜（1〇〇毫 升）中。經30分鐘以小份加入^·羰基二咪唑（6 8公克，41 8 毫莫耳）且攪拌2小時。在〇。(：下逐滴將該乙腈溶液加入吡啶 ，合液中且使反應至環境溫度。在45〇c下加熱反應隔夜，接 著冷卻至30-35°C，且加入1〇〇毫升無水乙醇且在45艺下加熱 30分鐘。加入50毫升水且在45eC下加熱5小時，接著冷卻至 環境溫度且在真空中濃縮。在乙酸乙酯與水之間分溶粗殘 餘物。用磷酸酸化使pH大約為2且分離有機層。用額外乙酸 乙酿反萃取水層。與有機溶液混合且用飽和重碳酸鈉溶液 以及飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥且在真空中濃 縮。用矽膠層析法（120公克）在具30%至60%梯度之乙酸乙 I07156.doc 1326687 醋之二氣甲烧中溶離以純化。分離作為可壓白髮泡體之所 要產物（11.2公克，77%產率）。 MS (ES) : m/z 390.3 = [M+H] + MS (ES) : m/z 388.3 = [M-H] + 】HNMR (400 MHz，DMSO- d6) S 0.83 (t，6H)，j 15] % (m，6H)，1.46-1.55 (m，2H)，2.60 (dddd，1H，J=14.4, 9.6, 5.6, 5.6 Hz)5(ddd5 1H5 J-12.6, 6.2, 3,6 Hz) . 3,77-3.81 (m, 1H) » φ 3,87 (dt’ 1H’ J=8.4’ 3·0 Hz) ’ mm (m，1H) ’ 5.27 (t，1H， J = 5.6 Hz) > 6.15 (t9 1H, J=7.4 Hz)，6.29 (d5 1H, J=6.4 Hz), 7.31 (d，1H，J=7.2 Hz)，8.23 (d，1H，J=8.0 Hz)，11.03 (s， 1H)。 實例2 l-(2,2-二氟-2-去氧-β-D-呋喃核糖基）_4_(2_丙基_丨氧戊 基）胺基》比啶-2-酮對甲苯磺酸水合共晶體（2 : 1 : 將0.709公克（1.82毫莫耳）實例！之化合物溶解在9毫升甲 φ 醇中。在一單獨燒瓶中，製備0.25莫耳對甲苯磺酸水性儲 備溶液。逐滴加入3.6毫升（0.9毫莫耳）水溶液。加入大約5 毫升水且使混合物在室溫攪拌（大約3〇分鐘）直至沉澱產 生。藉由真空過濾收集沉澱固體且風乾。 共晶體分析： 製備對曱苯磺酸、吉西他濱及實例1之化合物的已知濃度 溶液。分析實例1之對曱苯磺酸共晶體樣品來確定組份組合 物。 對於Ν-(2·丙基·戊醯基）]·2，，2，_二氟_2，_去氧胞嘧啶核苷/ 107 丨 56.doc 1326687 對甲苯續酸/水之比率為2:1:卜測定％對甲苯亞橫酸： 理論值17.8〇/〇對曱苯績酸 實驗值19.1%對曱苯續酸 HPLC ： 柱：Waters Atlantis dC18, 3.〇微米，4 6内徑 χ 15〇毫米 柱溫：50°C ' 紫外線波長：248奈米 1. 移動相

A. 5/95 乙腈/水 + 0.1% TFA

B. 50/50 乙腈/水 + 0.1% TFA 2. 梯度 時間 溶劑 (分鐘） % A %B 0 100 0 5 0 100 8 0 100 8.01 100 0 11 終止運行 實例3

1-(2,2-二氟-2-去氧-β-D-呋喃核糖基）·4(2丙基_丨·氧戊 基）胺基吡啶-2-酮苯磺酸共晶體（1 : 將550毫克實例1之化合物加至5毫升乙酸乙酷中。加熱混 合物至大約55C。加入1莫耳當量以儲備溶液之苯磺酸。如 需要在超聲下加入額外大約10毫升乙酸乙酷以破碎沉澱。 107156.doc •12- 1326687 使懸浮液冷卻至室溫且用真空過濾分離。風乾所分離之固 體。MP : 171。。 式I之化合物及其溶劑合物可進行口服且通常經口投 藥’故較佳進行口服投藥。 在醫藥技術中以熟知之方式製備醫藥組合物。載劑或賦 形劑可為可用作活性成份之煤劑或介質的固體、半固體或 液體物質》合適之载劑或賦形劑在該項技術中熟知。醫藥 組合物可適於口服、吸入、非經腸或局部使用且可以錠劑、 膠囊、氣霧劑、吸入劑、检劑、溶液、懸浮液或其類似物 之形式投藥於患者。本發明之化合物可用例如惰性稀釋劑 或膠囊或壓縮為錠劑來進行經口投藥。為口服治療投藥之 目的，化合物可併入賦形劑，且以錠劑、口含錠、膠囊、 酒劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑、口嚼鍵及其類似物之 形式使用。較佳該等製劑含有至少1%本發明之化合物亦即 活性成份，但可視特定形式而變，且可適宜地在單位重量 廳θ大約嶋之間。在組合物中化合物之量為所獲得之合 適劑量。本發明之較佳組合物及製劑由熟習該項技術者用 熟知方法來確定。 錠劑、藥丸、膠囊、口含錠及其類似物亦含有—種或一 ==諸如聚維酮，丙基纖维素、微晶.纖 膠點合劑；諸如殿粉 '乳糖、微晶纖維辛㈣ 酸二鈣之賦形劑哎豨避跔.$ n ^ ^ a ^ 以稀釋劑，诸如交聯羧 乙烯吡咯酮、羥某Γ舻讲必知 瓦 乂如小 土乙S夂歲卷鈉 '玉米澱粉 解劑;諸如—硬脂酸、滑石粉或氣化== I07156.doc 1326687 滑劑；諸如膠狀二氧， 夕之&動劑；諸如月桂基硫酸鈉及 t山梨醇酯80之濕潤劑. 了添加諸如蔗糖、阿斯巴甜糖 (aspartame)或糖精之甜 ^ 味劑，或諸如胡椒薄荷、水揚酸曱 酉曰或撥調味劑之調味劑。 hi田早位劑型為膠囊時，其可含有 甘ί類型材料外之諸如聚乙二醇或脂肪酸之液體載劑。 二他早位劑型可含有例如塗層之可調節劑量單位之物理形 式之其他各種材料。較佳劑型為腸衣錠。因此，錠劑或藥 丸可用糖、經丙基甲其嫩祕β 土纖維素、聚甲基丙烯酸酯或其他塗 :劑塗覆。糖漿除本發明之化合物外還含有用作甜味劑之 庶糖及特定防腐劑、染料及著色劑以及調味劑。用 該等各種組合物之材料應為醫藥純度且在所使用之量下無 毒0 一般而言式I之化合物在寬劑量範圍有效。例如，以單個 劑量或分次劑量投藥之每天劑量通常在大約丨5毫克/天至 大約200毫克/天之範圍内，更佳大約為85毫克/天。在一此 實例中，低於上述範圍之下限的劑量可能比足夠量多，而 在其他狀況下’可使用更大劑量而不引起任何有害副作 用’且因此不希望上述劑量範圍以任何形式限制本發明之 範圍》應瞭解實際投藥之化合物之量應由醫師根據包括治 療病症、所選的用藥途徑、現有化合物或施用的化合物、 各個病人的年齡、體重及反應以及病人症狀的嚴重性等有 關情況來確定。 pH化學穩定性檢定 使用半自動HPLC技術來分析pH化學穩定性。在表示整個 I07156.doc 1326687 月腸道pH乾圍（PH I-PH8)之五種緩衝劑中製備剛㈣/灿 式I之化合物樣品〇樣品經載入HPLC自動注射器上且在4〇它 下孵育。樣品以每小時之間隔重複注入HpLC直至24小時， HPLC柱可將式】之化合物與吉西他濱相分離。隨時間用紫 外線偵測器監視式I之化合物之峰面積且與初始峰面積相 比較來判定穩定性。 四小時後在1至8之pH範圍，少於25%實例〗之化合物降解 為吉西他濱。

藥物動力學檢定 小鼠藥物動力學 在經口投藥選擇為含有大約1〇毫克/公斤吉西他濱劑量 之雄性C D -1小鼠中分析吉西他濱及式j之化合物的藥物動 力學概況。在投藥0.08、〇.25、。5、卜2及6小時後處死該 等指定動物（n=3/時間點/化合物），將全身血樣本收集在含 有四氫尿苷（血液中最終濃度為〇5毫莫耳）且經EDTA處理 過的試管中，其中四氫尿苷可抑制吉西他濱的進一步代 謝。另外3隻動物在0.08小時處死以收集肝門靜脈血液。用 離心分離血漿且在分析前冷凍。血漿中吉西他濱與前藥之 濃度可用LC/MS/MS分析來測定。使用WinN〇nHn軟體 (Pharsight Corp.，M〇untain View，cA)計算藥物動力學參 數。將各則藥之藥物動力學參數與在類似研究中經口投藥 吉西他濱鹽酸鹽所測得之參數進行比較。 當對CD-1小鼠經口投藥時，在活體内實w i之卩合物大量 水解以釋放吉西他濱 與直接經口投藥吉西他濱鹽酸鹽相 107156.doc 1326687 比較，當投藥實例1之化合物時，CD—丨小鼠中血漿的吉西他 濱曝露量增加。在口服用藥〇.〇8小時後，肝門靜脈血漿中 實例1之化合物之相對高濃度驗證完整前藥之吸收。 猴藥物動力學檢定 在交又設計中，在經口服及靜脈投藥後的獼猴 (cynomolgus monkey)中分析吉西他濱及式χ之化合物的藥 物動力學概況。投藥經選擇含有大約1〇毫克/公斤吉西他濱 之劑量的化合物。將血液樣本在指定時間間隔收集於含有 四氫尿苷（血液中最終濃度為〇·5毫莫耳）且經edta處理過 的試管中，直至48小時。在口服用藥期間，用雷尼替丁 (ranitidine)(靜脈注射，5毫克/公斤）預處理動物。離心分離 血漿且在分析前冷凍。血漿中吉西他濱及式〗之化合物之濃 度可用LC/MS/MS分析來測定。用WinN〇nlin軟體（pharsight Coirp·’ Mountain view，CA)測定藥物動力學參數。 當對獼猴靜脈注射投藥時，在活體内實例丨之化合物大量 水解以釋放吉西他濱。與直接經口投藥吉西他濱鹽酸鹽相 比較’當投藥實例i之化合物時，獼猴中吉西他濱之經口曝 露量增加大約5倍。 水解檢定 小腸組織勻漿檢定 為測定式I之化合物在腸中對酶促水解的穩定性，用cd i J鼠格魯犬（beagle d()g)、難及人之上部分小腸來製 備小腸上皮細胞的粗組織勻毁。小鼠與犬組織勻聚用新鮮 收集組織製傷’而摇及人之組織句聚用先前冷束組織製 107156.doc 16 備。細胞自腸區段輕輕刮下、收集且使用〜⑽⑽叩]〇_85) 將其在50毫莫耳乙酸緩衝液中進行組織勻漿。蛋白質濃度 用標準分光光度技術測定。使用前製備之組織句漿保存在 -70〇C。 藉由在乙酸鹽、pH7.5中孵育式I之化合物（100微莫耳）及 小腸組織勻漿（SIH)(總蛋白質之2 5_5毫克/毫升）長達6小時 來測定在SIH中式I化合物之水解速率。帛乙腈終止反應 後，藉由LC/MS分析來測定經由水解所釋放之吉西他濱的 濃度。在篩選實驗歷時30分鐘時計算水解速率，且水解速 率係由在式I化合物特徵研究中水解對時間曲線之線性部 分的斜度來計算得到的》 在小腸組織勻漿檢定中實例丨之化合物顯示緩慢之水解 速率。在犬與人組織勻漿中水解最緩慢，在6小時孵育中低 於3 %總化合物轉化為吉西他濱。 肝S9水解檢定 用肝水解檢定來測定由肝酶對式I之化合物的水解。用 CD-1小鼠、米格魯犬、獼猴及人之肝來製備肝組織勻漿。 用剪刀將肝組織剪成小塊，接著用卩〇卜忖〇11(卩丁1〇_85)在 毫莫耳乙酸緩衝液中組織勻衆1分鐘。在9,〇〇〇 χ g、下 超速離心10分鐘製備後腺粒體（S9)部分。小鼠、犬及猴之 肝S9部分用新鮮收集組織製備，而人肝§9用先前冷凍組織 製備。離心後，收集上澄液並用標準分光光度技術測定蛋 白質濃度。使用前製備之S9部分保存於_70〇c。 在磷酸鹽緩衝生理食鹽水、ΡΗ8·0下孵育化合物（1〇微莫 107156.doc 丄wt)⑽7 耳）及S9(總蛋白質之2毫克/毫升）長達6小時來測定在肝S9 中式I之化合物之水解速率。用乙猜終止反應後，用lc/ms 分析來測定經由水解所釋放之吉西他濱的濃度。在筛選實 驗歷時3〇分鐘時計算水解速率，且水解速率係由在式！化合 物之特徵研究中水解對時間曲線之線性部分的斜度來計算 得到的。 在所述所有種類肝S9中實例丨之化合物發生水解。在狼及 鳙人組織勻漿中水解最快，6小時孵育使大約35%之總化合物 轉化為吉西他濱。 毒理學檢定 - 4天小鼠篩檢 - 當給雌性CD-a小鼠每天投藥4天後，評估經口投與式 化口物所產生之毒性，在4天小鼠試驗中將式j化合物腸胃 毒性概況與以前經口投與8毫克/公斤吉西他濱時之胃腸毒 性結果相比較。 • 對5至8週齡之雌性CD-1小鼠經口管飼法投藥式〗之化合 物。選擇劑量為大約8毫克/公斤莫耳當量之吉西他濱。使 用10毫升/公克之劑量體積且每天用藥，連續四天。第四次 投藥後大約5至8小時進行屍體剖驗。 砰估臨床徵象、臨床化學、宏觀病理以及局部組織病理 (回腸、空腸及肝）。與注射等劑量吉西他濱鹽酸鹽相比較， 觀察到對小鼠〉主射實例丨之化合物後腸萎縮病變或腸病之 嚴重性顯著下降。 14天小鼠試驗 107156.doc -18· 1326687 進行14天小鼠試驗以評估在對小鼠經π管飼法投藥14天 後式I之化合物是否產生副作用並測们次或14次投藥後式^ 之化合物及其代謝物#西他濱鹽酸鹽以及去氧二氣尿苦之 血漿濃度。 將式I之化合物經口管飼法投與9至12週齡之雄、雌性 CD-1小鼠。選擇-系列劑量以用來敎最大耐受劑量及劑 量限制毒性”毫升/公斤之劑量體積且每天投藥一 次。 評估臨床徵象、體重、食物消耗、血液學、臨床化學、 式I之化合物及其代謝物吉西他濱鹽酸鹽以及去氧二氟尿 普之血漿濃度及病理（包括大體病理、器官重量及組織病 理）。 以莫耳當量計，實例！之化合物比吉西他濱鹽酸鹽與腸病 較少相關冑，而使得全身大約兩倍地曝露於吉西他濱鹽酸 鹽。

7天犬試驗 為給米格魯犬投藥7天後評估式匕化合物之毒性概況且 為在1次或7次用藥後測定式！之化合物及其代謝物吉西他 濱鹽酸鹽及去氧二氟尿苦之血漿濃度，進行7天犬試驗。 藉由式I之化合物之膠囊對6至48月齡之雄、雖性米格魯 犬經口投藥。選擇-劑量範圍來測定最大耐受劑量及劑量 限制毒性。使用丨毫升/公斤之劑量體積且每天投藥一次。 评估臨床徵象、體重 '食物消耗、體溫、血液學（包括凝 血）' 臨床化學、驗尿 '式！之化合物及其代謝物吉西他濱鹽 I07l56.doc 1326687 酸鹽以及去氧二氟尿苷之血漿濃度及病理（包括大體病 理、器官重量及組織病理）。血液毒性及其它包括Gi毒性之 毒性與先前所述非經腸之吉西他濱產生的毒性相一致。因 此’任一該等毒性對經口投藥途徑並非特有的。 活體内檢定 在標準組織培養條件下HCT-116結腸腫瘤細胞在活體外 生長，對其進行收集，洗滌且將5 X 1〇6細胞（在Mairige^ 之1 · 1懸浮液，Collaborative Biomedical Products, Inc)皮 • 下注射在雌性裸鼠（Charles River，CD 1 nu/nu，24-27公克， 在植入後24小時内用450 rad照射）之背面（rear fUnk)。在治 療之前使腫瘤生長至大約100立方毫米。媒劑控制：在各個 試驗中，按指定次數以經口管飼法給小鼠投與各種劑量含 量之式I之化合物或吉西他濱鹽酸鹽（1〇毫升/公斤體積）。將 化合物每天投藥一次，共Μ天；每兩天一次，共七次丨或 者每三天一次，共四次。將式j之化合物在ρΗ 6 〇、ι〇〇毫莫 φ 耳磷酸鈉緩衝劑中調配以進行每天用藥，且將式I之化合物 在1°/〇羥甲基纖維素鈉、〇 5%月桂基硫酸鈉、〇 〇5%消泡劑 15 0及0.085%聚乙烯吡咯酮中調配以供每兩天以及每三天 用藥。在生理鹽水中製備吉西他濱鹽酸鹽以用於口服用 藥。測徑規測量法測定腫瘤尺寸且用公式lxw2x〇 536估計 腫瘤體積（立方毫米），其中1係較大之垂直直徑，从為較小之 垂直直#。隨著治療開#，每週獲#兩次所有資料（腫瘤量 測及動物重篁）且使用基於腫瘤量測系統之計算機分析該 等資料。 107156.doc 1326687 西他濱 西他濱 生總毒 由實例1化合物觀測到之抗腫瘤功效與等劑量吉 鹽酸鹽所獲得之功效相當。然而’與接受等劑量吉 鹽酸鹽之動物相比’用實例1之化合物治療對動物產 性更小。

I07156.doc -21 ·

Claims (1)

13.26687 第094145118號專利申請案 .中文申請專利範圍替換本(99年2月） +、申請專利範圍： 1. 一種下式之化合物：

2. —種化合物，其係如請求項丨之化合物與笨磺酸之共晶 體。 ’、 3.如請求項2之化合物，其係卜即·二氟去氧1如夫咕 核糖基）-4-(2-丙基-丨·氧戊基）胺基吡啶·2鲷苯磺酸址曰曰 體（1:1)。 一曰 4. 一種化合物，其係如請求項丨之化合物與對甲笨磺酸之丑 晶體。 、 ^ 5. 如請求項4之化合物，其係二氟_2_去氧j_D-呋喃 核糖基）-4-(2-丙基-1-氧戊基）胺基嘧啶_2_酮對甲笨磺酸 水合共晶體（2:1:1)。 ’ 6· 一種用於治療易感性贅瘤之醫藥組合物，其包括如請求 項1至5中任一項之化合物及醫藥學上可接受之賦形劑。 7. 如s青求項6之醫藥組合物，其中該組合物係腸衣錠。 8. 如請求項6或7之醫藥組合物，其中該易感性贅瘤係選自 由T-細胞淋巴瘤、軟組織肉瘤 '胰腺癌、乳癌、霍奇金氏 淋巴瘤（Hodgkin’s lymphoma) '非霍奇金氏淋巴瘤、非小 細胞肺癌、卵巢癌及膀胱癌組成之群。 9. 一種如請求項1至5中任一項之化合物之用途，係用於製 造用於治療易感性贅瘤之藥物。 107156-990205.doc 1326687 10.如請求項9之用途，其中該易感性贅瘤係T-細胞淋巴瘤、 軟組織肉瘤、胰腺癌、乳癌、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇 金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌或膀胱癌。 11 ·如請求項1至5中任一項之化合物，其係作為藥品。 107156-990205.doc